Автореферат и диссертация по медицине (14.00.06) на тему:Характеристики клеточного и гуморального иммунитета у больных дилатационной кардиомиопатией

' НШ4 КАРДИОЛОГУИ Ж1. А.Л.;ШСНККОБА ВСЕРОССИЙСКОГО КАРДИОЛОГИЧЕСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА ш

На правах рукописи

БАХОВ НИКОЛАЙ ИВАНОВИЧ

ХАРАКТЕРИСТИКИ КЛЕТОЧНОГО К ШОРМЬНОГО ИЖУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ДЙЛАТАШСЕНОЙ КАРД/ЮЖОПАТИЕЙ

14.00.05 - кардиология 14.00.36 - ш/лукология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МоскЕа 1992

Работа выполнена е НИИ кардиологии им.А.Л.МяскикоЕа БКНП А1ЛН

Научные руководит елд: доктор медицинских наук, профессор В.Е.Титов доктор медицинских наук, член-корреспондент А1.Ш СССР, правее сор | Н.1л.Му%арля?лов"|

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук Роберт Антонович Григоряны доктор медицинских наук, член-корреспондент АЕН РСФСР, заслуженный деятель наук РСФСР, профессор

Нелли Георгиевна Арпимович

Ведущее учреждение - Российский государственный медицинский университет ЫЗ РСФСР

Защита диссертации состоится "..." ............ 1992 г.

е 13.30 час. на заседании специализированного совета К.001.22.01 по присуждению ученой степени кандидата наук е НИИ кардиологии им.А.ЛЛясникоЕа ЕКШ АГЖ (121552,Москва, 3-я Черепковская ул., дом 15А ).

С диссертацией монно ознакомиться в библиотеке БКНЦ АМН Автореферат разослан "..." ............... 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета кгндидат медицинских наук

Т.Ю.ШЕаб

■•■-¡j j

• 'i ■ . :;;.,,, j онцая характеристика работы

Актуальность.проблемы. В .настоящее Ерем е литературе имеется большое количество работ, свидетельствующих, что кардиомиопатии распространены ео всех регионах мира и что частота их неуклонно возрастает (Е.Г.Дя.0лсон,1982; Л.М.ЩеЕьеЕ,1985; Н.М.Мухарлямов, . 1985,1990\ Я.7аг/э ¿-/.^,1978,1980 ;5.Р.¿bug А/¿» et.1990 ). Наиболее, распространенная и клинически'тяжелая форла.кардаомиопатий - дила-тационная кардиомиопатия (ДКМП). ДКМП.быстро приводит к инвалидности, прогноз заболевания обычно плохой; 33% больных погибает е течении дЕух лет после установления диагноза "(Дж.Ф.Гудеин,1982). Это заболевание поражает лвдей разных возрастных групп, может поражать даже грудных детей, но особенно часто - мужчин е наиболее трудоспособном Еозрасте 30-50 лет (Н.М.Мухарлямов,1985,1990; Л.М.ЩеЕьев, 1985;//Г &t>odwin. ¿ï.cif. ,1973¿¿.а.? ,1978; S.Î.Ccugh-ii.ai, 1990). Этиология ДКМП неизвестна. Патогенез его изучен недостаточно {F.Smiék ¿¿.a-if. , 1989\//.E.ßa.wfes et¿<1989 1989).. Диагностика .заболевания затруднительна и, как правило, ДКМП определяют на поздних стадиях заболевания, когда у больных ухе отмечают признаки сердечной недостаточности, кардиомегалия, сникение сократительной способности миокарда, нарушения ритма, тромбозы или тромбоэмболии. Велик .процент-ошибочных диагнозов. Больным ДКМП часто ошибочно ставят диагноз порока сердца, ишемической.болезни или миокардита (Н.М.МухарлямоЕ,1990; y.Q.Lo et.aé. ,1989). Специфическое лечение'ДКШ отсутствует. Оно симптоматическое и сводится к уменьшению признаков сердечной недостаточности, к борьбе с нарушениями ритма и с другими ослоанениями (Н.М.ИухарлямоЕ,В.Ю.Мареев, 1985). Сердечная недостаточность при ДКМП устойчива и отличается рефрактерностью к. традиционной лекарственной терапии (Дк.Ф.ГудЕин, 1982; Н.М.Мухарлямов и Б. Ю.Мареев, 1985 ;/?.£. HoÛs et.af ,ШЭ). Все это делает актуальным изучение проблем этиопатогенеза ДКМП. ~

Цель работы. Цель настоящего исследования - .выявить характерное для ДКМП иммунодефицитное. состояние организма."71ля этого у больных ДКШ оценивали характеристики, клеточного и гуморального иммунитета в надежде найти характерные для этого.заболевания иммунологические нарушения. В. качестве рабочей гипотезы разштия ДКМП была принята вирусно-иммунологическая концепция ДКМП, согласно которой вирусный миокардит, ЕСледстЕие неадекватного иммунного ответа на вирусную инфекцию трансформируется е ДКШ (Л.З.Александрова с со-авт, 1985; Ю.И.Ноеикое, 1988; i>. Ç)a& ei.а/. ,Ï969,1976,1980; M.ß. "

Е.З.веМ Д970; Т.Ша^и, С4. ,1975

^¿екопШЪ; ТМ¿а-мез ,1983; . ¿6. сс£. Д984; Н.Э..

бо^&г «¿. '.. ,1989). Поэтому у. больных ДКМП исследовали клеточные и гуморальные эффекторные механизмы иммунного от-гета, имеющие непосредственное.отношение к защите и выздоровлению организма от вирусной инфекции.

Задачи исследования.

1. Провести количественные исследования и оценку активности естественных (натуральных) цатотоксических лимфоцитоЕ. (НК-клеток), и клеток, способных осуществлять антителозависимый, не' требующий присутствия комплемента, лизис клеток-мшеней (К-клеток).

2. Изучить спонтанную и индуцированную способность В-лвдфоци-тов кроЕи синтезировать иммуноглобулины разных классов.

3. Исследовать спонтанную и индуцированную активность специфических и неспецифических Т-клеток-супрессоров в реакциях клеточного и гуморального иммунного ответа.

4. Провести оценку пролиферативной способности лимфоцитов. .

5. ИсследоЕать активность цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) с аутоагрессией по отношению к другим клеткам организма, а также клонов ЦТЛ,. способных лизировать клетки-мишени, сенсибилизированные к основному белку миелина.

6. Провести оценку сывороточных компонентов гуморального им-. мунитета.. .

7. Изучить функциональную активность нейтрофильных гранулоциго тое в реакциях комплемент- и антителозависимой клеточной цитотоксич-ности, спонтанной и индуцируемой генерации активированных форм кислорода, функционирование миелопероксидазной системы нейтрофилов и взаимодействие их с клетками эндотелия сосудов человека.

Научная новизна. Настоящая работа - попытка оценить роль нарушений клеточного и гуморального иммунитета и функций нейтрофильных гранулоцитов в патогенезе ДКМП.

Изучение активности, и.функциональных возможностей. НК-.и К-клеток.выявило сопряженность функционирования этих клеточных систем с тяжестью течения ДКМП, принципиальную шадаздс возможность оценки стадий развития и прогноза заболеваний. Выявлена депрессия киллерной функции НК- и К-клеток у. больных ДКМП с быстропрогрессирующей форло! заболевания и в терминальных стадиях болезни.

Исследована способность В-лимфоцитоЕ больных ДКМП к спонтанном'1

-5Т

и индуцированному синтезу иммуноглобулинов классов И, & и А. Показано, что спонтанный и индуцированный синтез иммуноглобулинов 6 и, особенно, Ы у' больных ДКМП был значительно выше, чек

у здоровых лиц и больных ИБС. Особенности синтеза иммуноглобулинов .

у больных ДКМП й ИБС свидетельствовали о разном характере ре нарушений кооперативных взаимоотношений медцу макрофагами, Т- и В-лимфоцитами, точнее, о разном характере каскада формирования эср-фекторных В-лимфоцитов при ДКМП и ИБС. . .

Показано, что пролиферативная актяЕность лимфоцитов у больных ДКМП была резко снижена по сравнению со здоровыми лицами и больными ИБС. . - ....

При изучении спонтанной и индуцированной активности Т-клеток-супресеороЕ было выявлено нарушение супрессорной активности лимфоцитов' крови больных ДЮШ и ИБС по сравнению с донорами и в реакциях клеточного и гуморального иммунного ответа. Показано нарушение специфической супрессорной активности лимфоцитов больных ДКМП в реакциях клеточного и гуморального иммунного отЕета на ОВД. Установлено нарушение толерантности к этому аутоантигену. Показано уменьшение функционального потенциала Т-клеток-супрессоров в отяет на ОШ (основному белку миелина). ........

Более чем у 50% больных ДКМП была Еыявлена сенсибилизация к ОШ, отмечено наличие ЦТЛ, сенсибилизированных к этому аутоантигену, что мокет свидетельствовать о нарушении толерантности к ОШ и о воспалительных процессах продуктивного характера с нарушением миелина в афферентной нервной системе сердца. Клинически это может выражаться в нарушении ритма и/или проводимости.

. Изменения в гуморальных эффекторных системах иммунного ответа свидетельствуют о возможном наличии у многих больных ДКМП аутоиммунного процесса.

Исследования цитотоксического действия нейтрофилов больных ДКМП свидетельствуют о нарушении их цитолитической функции по механизмам комплемент- и антителозаЕНСимой клеточнойодатотоксичносги. В работе обосновывается мысль, что эти нарушения могут быть причиной неадекватного ответа организма.на вирусную инфекцию.

Результаты изучения спонтанной и индуцированной генерации ак-тиЕироЕанных фор/, кислорода нейтрофильными гранулопитами и функционирования их миелопероксидазнэй системы свидетельствуют о нарушении механизмов, Контролирующих процесс генерации радикалов кисло-, рода у нейтрофилов-больных ДКМП.. Эти нарушения могут иметь сущесг-

венное значение для морфогистологических изменений миокарда, т.к. нейтрофилы с помощью оксидазной и миелопероксвдазной систем способны участвовать в процессах тканевого обмена, в быстрой инактивации и элиминации биологически активных субстанций, продуктов их промежуточного обмена, мезклеточных медиаторных факторов. Эта нарушения могут вести к накоплению в тканях организма продуктов пе-рекисного окисления лапидоз, к нарушению ритма и/или проводимости.

. Показано' нарушение взаимодействия нейтродинов больных ДКШ с клетками эндотелия сосудов человека, препятствующее формированию полноценно функционирующего пула тканевых нейтрофилов, что ведет к разобщению функциональной кооперации ыезду тканевыми нейтрофила-ш и макрофагами (гистиоцитами шокарда), и создаются условия для накопления в тканях "зрелых" 1фупных 1а-макрофагов с киллерныш и суцрессорнныи фенотипами. Функционирование в тканях таких макрофагов ведет к генерации факторов депрессии шокарда (ФДУ), обладающих выраженной способностью подавлять сократительную способность кардиошоцитов. Этот механизм, наряду с нарушениями ритма, предложен для объяснения частых случаев гибели больных ДКМП от внезапной ной остановки сердца.

В работе обосновывается тезис о нарушении у больных ДКШ ней-рогуморальной реакции фагоцитирующих клеток (нейтрофилов), об изменении их функционального состояния и экспрессии поверхностных адгезивных рецепторшх молекул не только ответственных за взаимодействие с эндотелием, но и с компонентами соединительной ткани органов - с коллагенами, эластином, фибронектином и.т.д., что не позволяет нейтрофилам, даже мигрировавшим через эндотелий, адекватно реагировать на изменения в экстрагазальноы пространстве.

Практическая значалооть. Данные*, представленные в настоящей работе, позволили ответить на ряд вопросов, связанных с характером картины морфогпстодогических изменений шокарда при развитии ДКМП, которые ранее не поддавались объяснению. Предложена схема патогенеза ДКМП. Результаты работы указывают на ванную роль нарушений регуляции клеток-фагоцитов в патогенезе ДШШ. Поставлен вопрос об исследовании функционального профиля клеток-фагоцзтов в ответ на нейросекреторную стимуляцию и о корреляции их функций с нейрогор-моналъныы статусом больных ДКШ при электроэнцефалографкческом исследовании больных на цредыея депрессии вегетативных лдая подкорковых ядер ЦНС.

Нарушение функции фагоцитоз л сзязь этого феномена со стрессом назодпт на шсдь о зозмоааостз их функциональной коррекции с целью заиедлигь течение ДШП, продлить состояние реаиссаи и, возмогло , даае разработать методы фармакологпческойо лечения этого заболевания, поскольку клетки-фагоциты "охотно гохсшмают помощь" ШатаскиЗ A.H.,1989). Известно не мало стимуляторов фагоцитоза, пэепаратоз резко узеличизаицш: резистентность органика к стрессам, к вирусным, бактериальным и грибковым инфекциям. û последнее зрегая предложены препараты, которые не только стшлуллруит клетки мопо-цпт-макрофагальной природы, ко избирательно влияют на конкретные функции полишрфиодцершх лейкоцитоз и да*» на конкретные механизмы, обеспечивающие отдельные функции нейтрофилоз, что делает зоз-нолсшг^ функциональнуа коррекцию клеток-фагоцитов. Поэтому в работе обосновывается настоятельная необходимость проведения исследований по коррекции функций пеЗтрофндов и манрофагез :-:а модельных спсте-С мах К<1П, так как' больные ДКУП практически не поддаются лечению по" современные схемам медикоментозпсй терапии.

Вне доение з. тактику. Разработанные 2 ходе проведения работы . методы определения ^нкцзоиальной активности и йункцпоналкхых зоз-ыонкостей идаунокошетентннх кдеток-эфф-екторов внедрены в ин-те кардиологии им.А.Л.Ыясникоза ВКЩ АШ СССР.

Публикации. По теме диссертации опубликозано 8 : работ.

Апообадия работы, проз едена на мекаабораторной конференции ВКЩ Ш СССР, 190/ г. .'"

Материалы . доложены па конференции молодых ученых (ШНЦ Aiffl СССР, 1986 г.).

Объем заботы. Диссертационная работа изложена на ■iiO страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения, заключения и зызодоз. Работа иллюстрирована ZZ таблицами и рисунка',ш. Список литературы зклшает'гГсебя 31 Ь ис-точникоз, из них - SS~ отечественных.

ЫАТЕРШЫ И 1.ЕТ0ДЫ ИССЩЦОВАНИЯ

Иммунологические исследования были проведены у больных ДК£1 (98 человек; 78 ыунчин н 20 ¿сещнн), больных iioC (64 человека; 49 мужчин и 15 ленщип) и группы здорозых лиц. Диагноз ДК.Ш устанавливали на основании клинических данных и инструхлентальных методов

исследования и он соответствовал критериям, предложенные ВОЗ. В 20 случаях он был дополнен данными эндомнокарддальной биопсии, а в 16 - подтверзден данными секционного материала. Диагноз ИБС бал верифицирован с помощью клинических данных и инструментальными методами исследования.- Для определения нормальщх градаций применяемых тестов в условиях лаборатории было обследовано по разлпчпш тестам от 10 до 120 практически здоровых лиц в возрасте от" 20 до 46 лет.

Определение концентрации шгокулшзутсщих иммунных комплексов (цИК). Для определения концентрации цЖ в сыворотке крови была применена модификация метода /¿'^¿Йь с соаэт.(1977), который основан иа преципитации иммунных комплексов в полнмеризующем буфере с последующим измерением светорассеяния исследуемых образцов на лазерном нефелометре.

Определение ковденгоапдп иммуноглобулинов А/. 6'и А, компопен-тов системы комплемента. С-г)оактнвного белка. Их концентрации в сыворотках крови определяли методом лазерной нефелометрии с применением коммерческих моноспецпфпческих аазшсызороток, стандартных и контрольных сывороток.

Определение концентрации иммуноглобулинов В в сыворотке кэовя осуществляли методом двойного антитело зависимого радооиммуыологи-ческого анализа (РИА) с использованием коммерческих; наборов.

Выделение лимфоцитов и гэанулоцитоз из венозной коовп осуществляли методом Бейюма (1968 г.). йглсоцнты ввделядп в условиях, о.беспечпвакщлх стерильность.

Определение Е-тюзеткообзазунапх клеток (Е-РОК) осуществляли в реакции Е-ро зеткообра зования с эритроцитами барана по методу .

с соавт.(1977). Количество М-чозеткооб-оазукших клеток .(М-РОК). определяли детекцией лимфощм'ов, связавшихся с эритроцитам;: мышей ллшш до методу /^«¿¿»¿ЗС с соат.(1979). Количество аутологических тюзеткообгазгшшгх клеток (А-РОК) определяли по числу лимфоцитов, образующих "розетки" с аутологичюмг эритроцитами по методу ¿?а.гаи.х с соазт. (1979г.).

Фенотиюрование лимфоцитов моноклоналъаыми антителами методом комплемент-зависимой штотоксичности. Количество Т- и В-лямфоцатов, Т-хеллеров, Т-супрессоров н НК-клеток определяли методом комплемент -зависимой цито токсично с тл с использованием монокло'налъных антител В»<1А фирмы " Уп^^«-^" (ФРГ). 3 качестве источника компле-

мента использовали свекую сызоротку крови кролика.'

Определение юттотоксической активности и штотоксического потенциала НК-клеток. Цитотоксическую активность НК-клеток осуществляли с помощью стандартного шкроцнто токсического теста по выходу изотопа хроыа-51 из меченных клеток-мишеней, в качестве которых были использованы клетки эритрошгелолейкемоцдной линии К-552 Цитотоксический потенциал НК-клеток оценивали по разности мезду значениями уровней цитотоксической активности стимулированных интерфероном клеток-эффекторов и уровнями спонтанной щгто токсичное?:; лимфоцитов того ке самого больного или донора по отношению к тем Ее сагаш клеткам-мишеням.

Определение щгтотоксической активности н потенциала К-клеток. Тест антитело зависимой клеточной пито токсичности лшлозоцдтов (АЗКЦ). Цнтотоксическую активность К-клеток опред&лялн по методу $.игба.п1а.к (1976 г.). В качестве клеток-мишеней были использованы меченные хромом-51 резус-подо;:ит елыше эритроциты человекаШ(<1) группы ■ крови, сенспбилнзпровашше антн-/?/) (Д)-антито.тш.с1. Шхтотоксический потенциал К-клеток определяли такзё'как и НК-кдоток."

Определение синтеза иммуноглобулинов в культуре лимфоцитов. Суспензию лимфоцитов в полной культуральной среде инкубировали 7 суток ири 37°С во влажной атмосфере с 5% С02 и после центрифугирования в надосадочлой ждкостп ко;-цо:-:г_;оц:к п:.:луноглобул::-нов Н, & и А с помощью ыоноспецлслгческпх и стандартных антисызоро-ток на лазерном нефелометре с разреаащей способностью до 10 нг/мл (Л.З.Александрова с соавт.,1987). Для определения индуцированной активности В-лимфоцитов в опытные образца суспензии кулътивируеиых лимфоцитов вносили разные концентрации митогена лаконоса (Ж) или основного белка миелина'из мозга быка.

Оценка ¡гоолжсеэативной активности ллм&эшхтов. Уценивали степен. аглютииации лимфоцитов, индуцированных митогенамн или ОЩ. Для количественной оценки аглютпнацни был цршленеи метод лазерной нефелометрии (М.М.Вядро, С .Г.Осипов,1984).

Определение спонтанной и ншшшгюв&шой активности Т-клеток-сутгаессотзов. Для определения функциональной активности Т-клоток-супрессоров была применены методы, разработанные Т. соавт., 1982 г. и Л.З.Алексацдровай с соавт.,1987 г.

Опенка активности цитотокспчёских Т-лшёоцзтов (1Ш1). сенсл-бзлпзиэованных к ОВЛ. Оценивали по методу Иг^апСак (1976) как и в тесте АЗКЦ. разница заключается в том, что мечен-

ные эритроциты были сенсибилизированы не аятатеяаш, а. антигеном

^

-ю- .

Теот аатителозазисжлой клеточной цдтотоксдчцоотп цейтэойилов (тест АЗКЦ-На). Этот тест ставился точно также, как и тест йЗКЦ-Лм. Отличия была только в условиях селсл&иизащп эритроцитов к антирезусшщ антителам (десятикратная по сравнению с тестой АЗКЦ-Лй) и в стимуляторах использованных для активации эййектор-ных клеток. В качестве стимуляторов нейт^офзлов были использованы - опсониззрованный зимозан (ОпЗ), пул сэенах сывороток от здоровых лпц, активированный зныозаноы (САЗ) , основной белок миелина-(ОШ), йорболшгрнстатацетат (®ЛА) н конкапавалдн А'(Кон А).

Тест комдлейент-зависдшй цптотокоичности нейтоойилов (КЗЩ). Тест КЗВД бил поставлен по методу /¡.£.6ге*в.£ с соавт.,1980 г.,но в качестве клеток-шшеней бшш использованы меченные изотопом хроиа-51 лейкоциты пациентов ш доноров. Источнокогд актнэпроган-ного комплемента был пул сывороток крови.здоровых лпц, актявцро-вацньШ фактором яда кобры.

Тест спонтанного н кндуддаованного восстановления югапосше-го тет-зазолия (теот С-НСТ и И-НСТ). Для оценки генерации нентро-ёнлаш супероксддных анкон-радикалов (0£) была применена простая и хорошо воспроизводимая модафхщапдя теста НСТ. Ннтроспннй тетра-золлй восстанавливался до формазана, который экстраггровалл в горячен пиридине и его концентрацию в экстракте измеряли на спектрофотометре по поглощению црп дл:ше волны 585 ни. Стшлуляторы нейтро&хлоз и их концентраты были те же, что и в тосте АЗКЦ-Нй.

Определение активности млелопегюксиднзной систе;лы кейтаойиоа Ее оценивали по дццуцироЕанкой &1А и галогеном лякгческой способности кейтрофилов по отношению к клеткам-мышиной лдыфошой линии Ы210 согласно методу 'Я.Л.Сёа.хк, 9. ,1981 г. Стиыуллрувдая

система содержала (10 нг/ш.) л дош лода (0,1 Ш).'

Определение ддтотокслческой активности нейттзосаилов ктювз к клеткам эндотелия сосудов человека к способности нейтдосдилов аы-щеплять эндотелиэциты из клеточного^монослоя (дхтачыепт-тесг). Цзтотоксичность п дитачыент нейтрокплов по отношению к клеткаа ~ эндотелия сосудов человека в культуре мопослоя определяли по методу у.Н. с соавт. ,1981 г. Кдеткл эндотелия были получены методом с соавт. ,1972 г. Для- стяцуляцин нейтройилоЕ были применены те ке-препараты п в тех г.е концентрациях, что и в тесте АЗКЦ-Нф. ■■

РЕЗУЛЫАТЫ И ОБСУЗДЕНИЕ •

Опенка Ёункцпональной активности лзздоздпш%"клеток, ойлядя-кшх цптолнтзческиг-л потенциалом у больных ДКМП. Средние значения цитотокспческой активности (ЦА) и цатотокснческих потенциалов (Щ) НК- и К-клеток у больных ДКШ и ИБС статистически не раатлчались (табл.1). Однако у больных ДКМП с быстропрогрессирущей формой течения: заболевшей п/клл с тяжелыми проявлениями боле зил (ДКМП^,) эти значения были существенно отличны от значений у больных с относительно благоприятной формой течения болезни или, возможно, находящихся на более ранних стадиях заболевшая (ДКШ^). Гетерогенность больных ДШП по значениям теста НК-алеточной активности наглядно представлена графиком процентного распределения (спектром) \ЦА и ЦП НК-клеток (рис.1). Ка спектре ЦА. НК-клеток'больных ДКМП монно отметить три пика значений. Спектры Щ НК-клеток боль-пых ДШП и ИБС отличались от спектров доноров сдвигом влево. Сами:*! большой сдвиг влево был у больных ДКШ, причем 50$ больных

ДКШ„ имели отрицательные значения Щ.

1 ~ Таблица I-

Зиачення цитотоксических активностей (ДА) н цитотокснческих •• потенциалов (ЦЗ) НК- ц К-клеток у больнш: Д&Ш, ИБС и у группы здоровых лиц ( II + м)$.

Обследованные гэуппы лзщ НК-клетки ЦА НК-клетки Ш К-клеткк ЦА К-клетки ■ ЦП

I. Доноры 58,6+2,4$ п=36 10,8+0,95? п=22 46,6+1,3$ п=28 8,3+1.1$ .:: П=16 "

2. ИБС 46,2+5,3/1 п=37 4,9+1,8? п=22 43,8+5,1$ п=26 3,7+1.4$ • " П=16

3. ДКМП обшая группа 46,5+7,2$ ¿=69 1,7+1,4$ н=28 42,1+6,7$ п=38 .1,4+1.2$ • п=1б

4. ДЮЩр 26,0+3,2/д п=38 -0,7+1,1$ п=16 ' - '

5. ДКШб . 61,1+6,0$ п=31 2,4+1,2$ п=16

^1-2,1-3,1-4,1-5 0,05 - одна звездочка ^1-2,1-3,1-4,1-5 3/ 0.05 - две звездочки

Гетерогенность болышх ДКШ была отмечена и по значениям ДА К-клеток (рис.2). На спектре ЦА К-клеток у больных ДКШ такае мог-§8 отметить три шпеа активности, а ка спектре ЦП - снижение функци-

-1-2-

ональных возыогвостей К-клеток. Характер спектров ЦА и ЦП ЫК- и К-клеток и данные клиники могут свидетельствовать о совместном и сходном функционировании этих клеток у больных ДКМП, о сопряженности значений цитотоксичности и функциональных возможностей (или о степени функциональной напряженности). НК- и К-клеток со стадиями и прогнозом заболевания.

1 1 X

I |

г \ | ^ 1 ^

1 1

1 1 ^ !

У. /

Л.

'Ь.

9,

20/. ЫС Ш. 8о/.

О чу. г/. К'/. 2о/-

Рис.1. Спектоы цитотокснческих активностей (ЦА.) и цдтотоксичес-ких потенциалов '¿ЦП) НК-клеток у доноров ("а"), больных ИБС ("б"), больных даШ (общая группа)("в"), оольных ДК1кЕ1(т)С"х,,,> и больных ДКйШ(б)("д"). По горизонтальной оси - цитотоксичность в процентах. Для значений ЦА. интервал' - 10%, а для'4щ - 2%. По вертикальной осп - цроцент лиц, имеюцих ЦА. в пределах данного интервала значении.

Изучение активности цнтотокснческих Т-лимфоцатов (ЦТЛ) крови, сенсибилизированных к ОШ показало, чт£>;у25# больных ДШ1 имели повышенный уровень активности этих клеток,- депрессию активности, остальные показали нормальный уровень ЦА. Увеличение ЦА таких лимфоцитов в реакциях ни витро монет св:щетельствовать о сенсибилизации этих больных к ОШ. Но и депрессия монет свидетельствовать о сенсибилизации к этому антигену, так как у многих больных ДНМП был отмечен увеличенный уровень спонтанной активности Т-клеток-супрес-соров в реакциях клеточного иыыуннсшша ответа ( £.3.Александрова с соавт.,1987 г.

2

ЦА

Ш.

-13Т-Г ЦП

W.

ы

о

20/.

О

20/.

5ис.2. Спектры ЦА и Ш K-клеток у группы здоровых лиц ("а"), . больных ДКШ ("б"') и больных ИБС ("в"). По горизонтальной оси -ндтотокспчность з процентах. Для ДА интервал значении - 10%, а для ЦП - 2/0, По вертикальной оси - процент лиц, имеющих ЦА в пределах данного интервала значений.

Здоровые лица не имели аутоагрессивных клонов ЦТ! к собственным клеточным элементам крови. У некоторых больных ДКШ было отгле-чено наличие таких ЦТД (ЦТЛ-2) и ЦТЛ активных по отношению к алдо-ге;Ешн клеткам (ЦТЛ-I). Показано, что HTJI-I и ЦТл-2 могут появиться -в ходе каскада образования эффекторных Т-клеток е ответ на вирусную инфекцию (5.Д.Брондз,1987). Их лоявлсчше у больных ДКШ может иметь не только теоретический (с точки зре:ия вцрусно-пглыуно-логической концепции), но и практический интерес а связи с операциями по пересадки некоторым больным ДКШ донорского сердца. Появляется необходимость проверка у реципиента наличие ЦТЯ-1 с ЦА по отношению к клеточ^шм элементам донора.

Количественные клеточные характеристики ншунной системы у больных ДКЖ. У больных ДК.Ш по сравнению с донорами и больными ИБС было отмечено некоторое снп^еиие количества лейкоцитов в крови Однако, провести строгий анализ этого феноглена словно, так как больные ДКШ часто страдают от инфекций с сопутствующим,лейкоцитозом Общее количество, лимфоцитов кроЕИ у больных ДКШ было токе снижено, причем количество Т-лиифоцитоз бшго несколько сникено, а 3-лшлфопдтод повышено по сравнению с донорами и больными ИБС. Соотношения ыезду раэлячныш субпопуляцпяш Т-клеток у больных ДКШ, ИБС и здоровых лиц практически не отличались, за исключением НК-клетох, количество которых было снижено по сравнению с донорамз и больныш ИБС. Ты не менее, нарушения клеточного и гуморального

пшунного ответа у болышх ДКдП нельзя объяснить э?лш лз;.зеленля-ыл, так как ош не столь веллкл, а процентные соотношения в лды-фоцдных субпопулацзях у больных ДЬйШ, ИБС я доноров практически не разллчаллсь. Показано увеличение количества А-РОК у многих больных ДБМП, что монет свидетельствовать о наличии у этих больных аутозшукных растройств.

Оценка поолнссеэатявной активности лимфоцитов крови у больных ДШП. У больных ДКШ проллферативная активность в ответ на ыито-гены и 0Б1.1 резко уменьшена по сравпегшв с больлнш ИБС н со здоровыми лзщаш. У~1/3 больных ДКМП индекс проллферативной активности лимфоцитов е ответа на ФГА был инвертировал я имел отрицательные значения, а на ОШ отрицательные значения явдекса ниелл более 50^ пациентов с ДКШ. Снижение пролифератнвной активности лимфоцитов больных ДКШ долнсно отр&гаться на интенсивности л гибкое тд каскадных процессов формирования Ешуно-компетентных клетэк в ответ на антигенную стимуляцию. Зти данные ставят воцрос о нарушении синтеза лктерлейкинов I з 2 л экспрессии рецепторов к этш лзЕлфокинаы на лзщфоцитах больных ДКШ.

Оценка способности лкмеощгтод периферической крови болышх ДКуШ к спонтанному н дядуптаоваиному- синтезу иммуноглобулинов. Способность В-лдыфоцятов больных ДЕШ к спонтанному и индуцированному ыитогепом лаконоса (Мл) синтезу шлыуноглобулинов С (ИГ-С) и, особенно, ИГ-М была значительно выше, чей у доноров л больных 1'1БС (рис.3). Стимуляция лимфоцитов больных ДКШ 0В1 (но не ЫЯ) приводила к депрессии синтеза ИГ разных классов, особенно ИГ-С. Анализ данных по способности 3-лимфоцитов к спонтанное п индуцированному МЛ и антигену ОШ синтезу ИГ разных классов может свидетельствовать в разной характере крушений кооперативных взаимоотношений макрофагов с Т- 'п В-лдмфовдтаыи, точнее о разном характере нарушений каскада формирования эффекторных В-лпмфоцлтов у больных ДКШ и ИБС. Особенности синтеза ИГ у больных ДКШ можно • объяснить либо нарушением функции суцрессорных и/илл контрсупрес-сорных Т-лицфоцитов, либо увеличением уровня активности факторов дафференцлровкд З-лиыфоцзтов - - е ^) (штерлейкниа 4) йри лзленешш экспрессии на этих клетках рецепторов к этим ллыфокинам т.к. образование эффекторных В-клеток за счет пролиферации клонов 3-ллыфоцитов у болышх ДМ1 частично заблокировано.

нг/*л

5000

д

2000

1500

4000

5DO

О

Рис.3. Значения спонтанного и индуцированного митогеном дако-'поса (Ж) синтеза йГ-G, И и А ип витро лимфоцитами больных ДАЛ, • ИБС и здоровыми лицами. По вертикальной осп - концентрации иилу-ноглобулннов, сшгаезп-оовааных 10£лш$оцаташ в нг/ыл.

(Jp) - до стимуляции ivUi. (/_/). - после стимуляции uul.

Оценка супоессо'оиой активности лимфоцитов больных ЛлШ в -реакциях клеточного и гуморального иммунного ответа. Здоровые лица имели определенный уровень супрессорной активности лимфоцитов, причем супрессорная активность лимфоцитов, индуцированная Кон А и ОБД, у них не алела существенных различай. При ДйШ активность клеточной супрессии, оцениваемой в реакциях клеточной агглютинации была самая низкая среди оцениваемых групп лиц. Около 50$ больных ДКМП тлели снияеншй уровень супрессии лимфоцитов, индуцируемых . ОБМ, что может свидетельствовать о нарушении механизмов супрессии в реакциях клеточного иммунного ответа на этот антиген. Уровень спонтанной супрессорной активности лимфоцитов а реакциях кле точно: агдютипации при ДК«Ы был повышен по сравнению с больными ИБС и донорами. Активация Т-супрессороз Кон А и OEM зела к незначительном; увеличению супрессорной активности этнх клеток у-больных Дй.Ш по сравнению с больными ИБС и донорами, но при стимуляции ОГА и ОВД клеток-респоцдероз было выявлено снижение активности Т-супрессоро у больных Дй/Щ, что свидетельствовало о сникепии функционального потенциала Т-клеток-супрессороз в реакциях клеточного иыцунаого ответа.

Активность клеток-суцрессоров, индуцированных Кон А в реакциях гуморального иммунного ответа при стимуляции синтеза ИГ у кле-

ж-респондеров _м бвяа по отноше-_

ш ко всем трем изучаемым классам ИГ-оэ практически^ званных больных ДШ и в меньшей степей, у больных ССпо m с допори. При стимуляции клеток-респовдеров ОЕД было в^ле-.ш с донорами ^ J ш супоессорной активности

о достоверное сншаение у больных длш. ^juj^ . „

^ „ „ д ,, пнМ «только по отношению к сна-

пмйопитов, индуцированных Кон А к иы, тольли uu их

^ S-G а «сть клеток-супрессоров, ^

клеток-респо^еров Ш а»»

S ^РНОГ—по^ 0_ К ро вное- ;

Ой егюнташшй уровень синтеза и селективна, д прессу

гул действии 0E.-I дает основание предполагать налоге в орган,з^е

йГ^ процессов ?

.энной точке зрения уровень анти^елГк ^^^^/^Гсо^

процесс демнелинизацли

ак^ности лимфоцитов в реакциях ^

иммунитета на ОШ жшя свидетельствовать о нарушен толерапТ-

ности к этому антигену. .. ,„„„„„„,_.,

^гупоточнпу доказателен wrvf^ro •

л ^ -тгъ-ггт у ^пл-ьных ДКШ по сравнению с донорами в

статуса у больных ДМЦ. / больных дми лс_реакТ5Еного

крови были увеличены уровни цЛд. А L

белка (СРВ), компонентов комплемента и

тинного пути его активации. Но повышение в кро.л эт^ Ъ^о-гуморального нммун^ета было характерно и даа бол^н^ЛБС Т^ 4и»внь СРБ у больных ДШ был шше. чем у больных ИБС, свддетел>-ст^я что проце^е^каневой дестр№ при ДШ часто менее ян-теш^ш чем ^и ИБС. Концентрации ИМ! и В в сыворотке кровищу больных » были значитаиьно вше, чем у больных ИБС, а ^^ ние компонентов «мента у болъшх ДШ иротекало на ^ увеличенной активности «-ингибитора, что косвенно ^ет ук^ь на вовлечение в патогенез этого заболевания систал ^^ госта кининов. йибринолиза. Увеличение уровня ИГ-Б может шеть . S^eLe^ патогенеза ЛШ. -хут -своб=

филов итгшых клеток вазоактивные субстанция, к ко^р«кард ММ более чувствителен, чем ^оклрд здоров^ц.1^ обладают свойством

¡ладают

вазоактивншли «^¿¡твами, способны к «ядов ^^ ^

нию разных фрагментов его компонентов. Некоторые из тов 'способствовать в рех^

активации комплемента

ита депонированными в миокард ИМГи/шш при

кардиотропкоЗ инфекции могут поврездать клетки миокарда, нервные волокна сердца (у.Т.й'и, с соавт. ,1983), обусловливая нарушения ритма а проводимости, и предшествовать сенсибилизации организма скрытыми антигенами шелина - ОШ и лшофидниоц. Повышенный уровень nJIK и иммуноглобулинов при наличии в циркуляции больных ДлШ специфических и гетерологических антител к антигенным детерминантам клеток миокарда- (*'.Уатака-уа. о соавт.,1986,1987) ыо£ет приводить к активации АЗКЦ по отношению к миоцитай, опосредованной К-клехха-ш, нейтрофилами и ыононуклеаркыми фагоцитами, и, кроме того, к • активации клеток-фагоцитов по механизму "сорванного фагоцитоза" (А.Н.Наяыскяа,1989). Ааткокардиальные антитела при активации -комплемента способны и сами по себе индуцировать повреждения клеток ииоварда. • ••'•'•

Нарушения йуцкщи нейтройшоз у больных ЛКуШ

Комплемент-зависимая- цитотокспчиость ae&rjo&raoB (К5Щ). При исполь'збгашш в качестве клеток-эффекторов нсйтройнлы от хорошо обследованных доноров и больных Дл.Шт, а в качестве клеток-мпше-ней, меченные изотопом хром-51 лейкоцзтк крови от других доноров и болышх ДКЖТ, было показано, что мшаеаесые лейкоциты от трех доноров с герпетической инфекцией дали выраженный ответ в реакции КЗЦН к нейтрофнлам-эффекторам от здоровых лдц, но нейтрофплн от ' болышх ДКлПт оказались не зффеэтнвкн к этил ыншекйм. Не зйфеккЕ

ДКШ^. Мишенезне лейкоцита от больных ДгШт, где в качестве эффег торных клеток балл использованы нейтрофилы от здоровых лиц, тоае дали иоло:з1тельнув реакцию К31Щ, но значительно более низкую, че;. от доноров с герпетической инфекцией, стп исследования сввдегель-.ствуют о нарушении у больных Д2С.Ш реакщш КЗЦН , одного из актив-нейшлх механизмов згшщты организма от вирусной днйекцйн."

Антитело зависшая клеточная цнтотзкспчность нейт'оойилоэ (АЗКЦ-НЁ) у больных ДКШ. Данные по АЗКЦ-Нф также свидетельствовали о сшеконэи функциональных возможностей нептрофилоз многих больных. ДКШ, о повышенном уровне их спонтанной цитотоксичности", что юяег. указывать на наличие у некоторых больных ДКШ в циркуляции уне стацулцрованякх клеток, об пэыекешга их функционально? го состояния. Реакций ASKii-Ho: цода играть сущестгеннузо роль при сенсибилизации кшщзгов антзтелаш ИГ-б.Ы , разрушая клетки шо-карда. ...

Оце:1ка спонтанного л иагтаюозгишого узовпя гелеул'дцл суле-,-скслдллх ашюн-иацккалоэ иааг»5ыяаад больных ДК..-К. Исследовала спонтанного н нхэдуас^ованного геста госстаноздсппд зптэослизго тетразолл* (С-НС!' и Л-КСТ.соогветствелно) цейтрофллацн больных Д5Ш, ЛБС л здоровы:: лиц свидетельствовали о ларуыенш механизмов, х<онтролирузддх процесс голерацлл активированных йоры кислорода у ацогэх больны:-: Д1Ш. Тест С-лСГ отраве? степень £ул;:цнонадьного раздражения лелтро^лдол в условиях организма. ияроклЗ разброс значений теста С-НСТ у лейгройллэв больных дЕШ по сраанеашз с донорами л болкаил ЛБС (>ло,4) ш^ег указывать на наличие у чае г.: Зольных в щ:ркуУ!лц::;: у;:се с?;плуллроаап;:ы:: ¿сделок, на нзленеице фугицлолааьлого состояния этих клеток в условиях лл влво, а такзе на наличие у некоторых сольных Д1Ш в цлркзглящс! нелтройллов с депрессией фоновой гокеращш радикалов кислорода,- обусловленной, ле;ол?.:о, нарушением линонснгелазлого гг/т.г обмене. арахцдоковсл

• кислоты в клетках (к'..Скеипу с соалт. . Л-ЛС? тест характеризует функционально взшо^юстн окс;щазлол слетеда пейтрофцдэв. По сравле.иш с доноргил-1 л болышил ИБС лейтрофллы больных ДК.1Л

• показывал:: онзЕешшо значенла теста Л-ЕСТ (рлс.5).' .

Рис.4. лрлзые процентного эаеюедеаезла значений С-НСТ теста У нейтрофилов йольнкх Д&Ш, ИБС л группы здоровых лиц. Ло горизонтальной осл - значения оптической плотности ХОи). По ве-зкссалькоЯ оси - процент ллц, ццещиз: значения" СП е пределах данного лнтеова-ла значений. Интервал значений ОЛ - 0,02.

Дошры - (—"), больные ИБС - (--), больные ДКШ - (•••)."

Оценка активности ынелопе-зокснщазнон системы нейт гебслдзг к зо-зл у больных ДКЛП. Быстрый л высокий уровень лизиса иыилных лзм£о-блаотаины:: клеток Ъ 1210 ннентрофлла;лл доноров, стнцуллровашшх ША в присутствии ионов иода, свидетельствует о высоких функциональных Бд5УО*0ОССЯХ системы «Ш-З^-ЛОД у здоровых лиц (рНС.о). щроклЗ разброс значений спонтанной л лзду^уованЕой ША. + галоген цлтоток-

нид Зоо/.

100/. 400/.

о

-50/.

А

7) о пори.

Л

в-

ътп

иве.

лРлс.5. Значения иццексоЕ шэдуцированной активности (ИИА) ок-сэдазной системы неитэсксплов больных ДК.Е1, ИБС л группы здоровых лиц, полученных из И-НСТ теста. В качестве стимуляторов нейттэосси-лов были использованы ША,САЗ,0иЗ,0Ш. КМ выоа.-.алл в процентах, преЕшаэднйспонтаншй уровень их активности {вертикальная ось). " ша Нез), саз - (ио; ОпЗ - (□), ОШ - снг.

НА 90/.

70/. 50/. 30/

Ш/. О

•

*

•

•

%

•

•

. т*»в»в. » 1

т

о

'а... 2

?ис. 6. Значения цитэтокснческоЗ акт;:

ности шелопероксидазкой

системы нейтзойплоз кэоан (система ¿ШО-Н^0. -иод) здоровых лиц (I) и больных ДКГ.П (П)_ш витро по отношении к л:шйобласт:шм клеткам Ы210 мышей линии ДВА. Спонтанный уровень активности ("а"), индуцированный ША + о::д - ("б"). По оси ординат - цитотохсячкостз в процентах.

сичности нейтрофплов больных ДШП к клеткам Ь 1210 "прг снижении ^икцзональных возможностей системы ШО-Н.О, -галоген (под) этих клеток по сравнению с дозорами свидетельствовали о нарушении мехакиамт регуляции выхода ШЮ' из азурофпяьных. гранул иеЗтроёнлоэ больных ДК1 ¿ин о приобретенном дефиците фущщт аПО. Продукта' "респираторного взрыва" нейтрофплоз, запускаемого н результата активации оксидазн и: плазматической меибранз и системы Щ0-Пг04-галоген' Составляют кислород-зависимые механизмы. биощздйого действия нейтрофплов. Бти продук-

ты могут взаимодействовать с кошоненташс поверхностн разных клеток п микроорганизмами (Шафран Ы.Г.,1981; ВаЛсг ,1885), участвовать в тканевом обмене органов п в инактивации биологически ак-тнв:шх субстанций С /?гехип</ет Д974;А.Е.иаяисккЗ,1889). Кроме того, НПО регулирует уровни генерации активированных корм кислорода (,1980), и при дефиците ЖО нейтройплоз в тканях увеличивается время действия радикалов кислорода, что шеет зыач значение для деструкции тканей, а частности шокарда, влияния ш тканевой метаболизм и появления продуктов перекнсиого окисления липцдов (ПОЛ).

Цнтотоксичность и функция, дитачаеита ххейт-юйххлоз больны;-: ДКЖ1 к клеткам • эндотелия сосудов человека. Клетки эндотелия сосудов человека юдвераены цатолитической атаке активированными ней-трофилахли, но уровень щхтотоксичности у нестнмулированных нойтро-филоз доноров был незначителен - 2-4%.(табл.2). Уровень дитач-мента клеток эндотелия в культуре люнослоя, вызванный нестнмулнро-ваныши нейтрофилами допоров был тахг» не внсок - 2-6$ (табл.3), но он резко увеличивается при стимуляции клеток, что свидетельствовало о налички высокого потенциала функции дитачмента нейтрофи-лоз у здоровых лиц до отношению к клеткам эндотелия сосудов (^3) Значения цитотокснчлости и дитачмента нейтрофилов больных.ИБС по отношению к клеткам эндотелия но сравнению с донорами шелл ишро-кий размах распределения (табл.2 и 3). Такая гетерогенность, воз-модно, обьсняется тем, что больные ИБС были обследозаххы на разных стадиях заболевания. Показало, что при изъязвлении атеросклероти-ческой бляшки у больных атеросклерозом холестерол крови резко изменяет агрегацию и дитачмеит нейтройплоз по отношению к клеткахл эндотелия в монослос ( На.тп7ег5с^т1^ с созет. ,1981). £ти авторы показали корреляцию агрегации нейтрофилов и дитачмента к клеткам эндотелия со стадияхлн атеросклеро за. Значения спонтанной и индуцированной цитотокснчности нейтрофхйюз крови больных ДШ к эцдо-телноцитам такгсе имели широкий размах распределения (табл.2). В целим , степень цатотоксичиости стимулировахшых нейтрофилов у боль-., | ньос ДКйШ была нике, чегл у доноров и у больных ИБС. Больные ДШП с ниашш уровнем спонтанной цитотоксичности подразделялись на дае .группы. В одной группе больных уровень цитотоксической активации достаточно высок, т.е. цитотоксическнй потеш&ал нейтрофилов у них был сохранен, а в другой - стимулированные нейтрофплн.показывали- нсэна^шельньй а-'деше инвертированный прирост цитотоксичнос-

Таблица 2.

Значения ццтотокспчностп нейт ю<7илоа крови здоровых лиц, больных &Ш, ИБС по отношению к клеткам эндотелия сосудов человека в культуре лонослоя в условие: спонтанного и индуцированного (СйЗ,Ота,ША,0Ш) теста ин вптро.ш + m)/¿

Обследованные группы лиц Спонтанная цитотоксич-• ность Индуцированная' цнтотоксичность САЗ - ОиЗ 2,LI' ОЩ

Доноры п=Й 3,2+0,3£ 13,8+С, 3/j 20,1+0,45! 12Д+0,4°з 4,2+0,650

Щ5Ш п=24 7,1+0,855 8,7+1,155 12,8+1,255 Э,3+1,Ip 6,4+1,Qf3

ИБС п=14 .6,2+0,95» . I2,3+I,25i 16,9+1,II,5+1,052 9,2+0,95Í

для всех, значений Р / 0,01 »

■ Таблица 3. •

Значения дотачиваю» неЗтрофпдов крови больных Д&й1, ИБС и группы здоровых лиц по отношению к icneTicai.i эздотедпз сосудов человека' в культюе аэнослоя в условиях спонтанного и нцдуциаонанного {САЗ.ОпЗ.йЛА.ОШ) теста ин вптю. .

Обследованн Спонтанный „ пые группы дитачмент -мдуц-.ро^ах-^ни ди.ачиенх ■ САЗ ОпЗ Шк ош • •

Дэнотзы п=12 ' 4,1+0,8/» 84,6+0,95» 72,8+1,0% 58,2+0,053 6,1+1,0/»

Д1Ш п=24 17,6+2,2/5 25,1+3,4/í 30,5+3,2^ 23,0+3,2£ I3,4+3,8;í

ИБС п=14 - 10,5+2,3/5 . 44,3+3,0/» 38,2+3,1/« 31,0+3,3/1 12,5+3,45» -

Для всех значений Р- ¿_ 0,01

тя. Гетерогенность значений йункцнп днтачыента нейтройилоз больных ДВШ по отноненню к клеткам эндотелия в цопослое плела еще более выраженный характер, чем цптонокснчпость (табл.3). В целой уровень дитачмента, обусловленный стнфглЬхроэашшун нейтрофилаш у. больных ДКЫП был низе, чем у больных ИБС я .у .-доноров. У. некоторых больных ДК.Ш был выявлен высокий спонтш&ый уровень дитачме* та.и сннгенныЗ ответ на стимуляторы, что. может .указывать на .нарушения взаимодействия нейтройилоэ с рулетка;,с: эндотелия сосудов. 7 больных ДгШ^ ответ нейтрофилоэ на САЗ, ОиЗ.ША.был низе, а размах распределения значешхй спонтанного дитачмента был более.широк, чем у больных Д&И^. .Но -характер распределения значений ди-тачмента-а -ответ на-стшулящсз 0HJ <$на- пэактнческл-тот.-зо сгннЗ •

в у.первой и у второй групп больных ДКЫП. .Б.связи с этим представляют интерес данные о нарушении иммунного ответа на ОБ! у многих больных, об обнаружении .сенсибилизации к этому аутоантигену я процессов воспалительной демиелиназации в организме таких боль-ных.(Л.3,'Александрова с соавт.,1987). ОШ - один.из внутренних, антшзенов миелина и сенсибилизация к нему наводит на мысль, что морфошстологические нарушения в нервной системе, в том числе.и в.нервной системе сердца, имеют непосредственное отношение к патогенезу дамп. Возможно, именно эти изменения е нервной системе обусловливают нарушения иммунного ответа у больных ДКМП, то есть у больных ДКМП изменения в нервной системе ведут к нарушению ней-рогуморальной регуляции иммунокомпетентных клеток, .в частности нейтрофилов, причем ухе на ранней стадии этого заболевания.

ВЫВОДЫ

.....I. Исследование цитотоксической активности и потенциалов. НК-

и К-клеток выявило сопряженность тяжести течения ДНШ.с. функционированием этих клеточных эффекторных систем, возможность оценки стадий развития и прогноза • заболевания. Выявлена депрессия киллерной активности ЕК- и К-клеток у больных ДЩГЛП с тяжелыми, проявлениями заболевания .и/или быстропрогрессирующёй форлой болез-.ни. Между количестве»/. НК-клеток в крови больных ДКМП и их функциональной активностью нет строгой корреляции, и депрессия функции НК-клеток у больных ДКМП не может быть объяснена только лишь некоторым снижением количества этих клеток.

2. Уровень спонтанного синтеза иммуноглобулинов 0 и, особенно,-Ну больных ДКМП, выше, чем у здоровых лиц и больных ИБС. Способность В-лимфощтов к индуцированному митоге-ном лаконоса синтезу иммуноглобулинов в и М у больных ДВМП значительно Еыше, чем у доноров и больных ДКШ...

3..-У больных ДКШ резко снижена пролиферативная активность, лимфоцитов крови в ответ на антш?ены-и митогены. .. .... ... .

. 4. При ДКШ снижен« активность и функциональный потенциал т-хлеток-гсупрессоров как в реакциях клеточного, так и гуморального иммунного ответа, что коррелирует с тяжестью и формой течения . .. заболевания.

5. При ДШП выявлено наличие аутоагрессиЕных

клонов шт от оксических Т-лимфоцитов, сенсибилизированных,к осное-кому белку миелина; нарушены механизм супрессии в реакциях кле-

точного иммунного ответа на этот антиген, • нарушены механизмы супрессии гуморального иммунного отиета на осноеной белок миелина селективно к синтезу иммуноглобулинов класса С, что при еысоксм спонтанном уровне синтеза иммуноглобулинов этого класса дает основание для вывода - в организме больных ДКШ идут процессы аутоиммунной воспалительной демиелинизации.. .....

6. Изменения в гуморальных эффекторных системах иммунного ответа свидетельствуют" о наличии в организме многих больных ДКМП аутоиммунных растройств и процессов тканевой деструкции.

. 7. У /адмкст/ц больных ДЮШ ЕыяЕлено нарушение механизмов комплемент- и антителозависимой цитотоксичности нейтрофилов, защищаю- . щих организм от Еирусной инфекции и кислород-зависимых механизмов биоцидного. действия . . тканевых .эффекторных клеток.

8. Установлено нарушение ЕзанмодейотЕИЯ нейтрофилов крови больных ДЮЛ1 с.клетками эндотелия сосудов челоЕека, способное препятствовать формированию полноценно функционирующего пула тканевых нейтрофилов вести к разобщению функциональной кооперации с макрофагами ткани, к транзитной альтерации стенок микрососудоЕ и к точечно-очаговому выходу клеточных и плазматических компонентов нро-еи е экстрагазальные пространства тканей организма.

9. Все значения иммунологических показателей, полученные у обеледоЕанных ' больных ДКМП, отличались высокой степенью гетерогенности.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ......

. I.Методы, разработанные е настоящей работе могут быть рекомендованы к Енедрению в клиническую практику для характеристики стадий.развития ДКМП и прогноза заболевания. . .

2. У больных ДКМП с тяаелымя проявлениями заболевания, которым намечена пересадка сердца, рекомендовано проверять наличие ци-тотоксической активности по отношений к клеточным элементам донора. . .. .

3. Рекомендовано у больных ДКМП изучение функциональной активности клеток-фагоцитов е ответ на нейрогуморальную (нейропеп-тидную) стимуляцию и ее корреляции с нейросекреторным статусом больных при обязательном электроэнцефалографическом (ЭЭГ) ииследо-вании . больных на предмет депрессии функции клеток вегетативных ядер ЦНС.

Публикации по материалам диссертации:

1. Определение содержания иммунных комплексов в сыгоротке крови'методом лазерной нефелометрии }} Лаб.дело.-1981 - Ш -

С,ЗчЗ-350 . .(соаЕТ. С.Г.Осипов, Б.Н.Титов, Ю.Д.Лёйкйн).

2. Опредёление иммуноглобулинов методом лазерной нефелометрии с помощью моноспецифических антисывороток И Лаб. дело.-1984-Л12- С.740-743. (соаЕТ. В.И.РуднеЕ, С.Г.Осипое, Б.Н.Титое). '

3. .Дилатационная кардаомиопатия. Анализ Еирусно-иммунологи-ческой теории }) Тер.архиЕ.-1985.-Т.-№4- С.136-140.(соавт. 1.3. Александрова, С.Г.Осипов, В.Г.НаумоЕ и др.);' ' .. .

4. АнтдтелозаЕисимая и естественная клеточная циготоксичность у больных дилатационной кардиомиопатией.//Гер.архиЕ.Ы986- НО-. С.62-67. Ссоавт. Л.3.Александрова, С.Г.Осипов, В.Г.Наумов и др.).

5. Опенка супрессии Т- и В-лдмфоцитоЕ челоЕека методом.лазерной нефелометрии. /У.Лаб.дело.-1987.-Ш- С.46-49. (соавт. С.Г.Оси-пое, Т.И.БогандоЕ, Л.3.Александрова, и др.).

.6. Клеточный иммунный ответ на основной белок миелина у.больных дилатационной кардиокиопатией.// Тер.архиЕ.-1987.-М2- С.51--57.(соавт.Л.3.Александрова, В.Н.Титов, В.Б.ГерЕазиеЕа й др.)."

'7. Роль нейтрофилоЕ в регуляции метаболизма тканей.^// Лаб. дело.- 1988С.3-12.(соаЕТ.Л.З.Александрова,В.Н.Титое).