Характеристика клеток с цитотоксической активностью и гематологических показателей у детей с лимфоаденопатией

Ведь, Вера Владимировна

Диссертации по медицине → Аллергология и иммулология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Характеристика клеток с цитотоксической активностью и гематологических показателей у детей с лимфоаденопатией

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Ведь, Вера Владимировна Москва 2008 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.36

Автореферат диссертации по медицине на тему Характеристика клеток с цитотоксической активностью и гематологических показателей у детей с лимфоаденопатией

003453905

На правах рукописи

Ведь Вера Владимировна

ХАРАКТЕРИСТИКА КЛЕТОК С ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У ДЕТЕЙ С ЛИМФОАДЕНОПАТИЕЙ

14.00.36 - Аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 !

Москва-2008

003453905

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Сотникова Н.Ю.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Тупицын H.H.

ГУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН; доктор медицинских наук, профессор Козлов И.Г.

ГОУ ВПО РГМУ Росздрава

Ведущее учреждение:

ФНКЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии Росздрава

Защита диссертации состоится «_»_2008 г.

в_часов на заседании диссертационного совета Д.208.072.05

при Российском государственном медицинском университете по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, дом 1.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке университета по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, дом 1. Автореферат разослан «_»_2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

Кузнецова Т.Е.

Актуальность работы

Лимфоаденопатия (ЛАП) представляет системное увеличение лимфатических узлов, не связанное с воспалением [Румянцев А.Г. и др., 1998], являющееся результатом пролиферации, метастазирования, воздействия факторов экзогенного и эндогенного характера [Баранов A.A. и др., 1998]. Больные с ЛАП составляют 40% всех пациентов детских онкогематологов в связи с необходимостью исключения онкогематологического заболевания [Чернов В.М. и др., 1992]. Однако причиной увеличения ЛУ в большинстве случаев являются процессы, не связанные с гемобластозами: чаще всего это общепедиатрические, инфекционные, иммунные и другие состояния [Румянцев А.Г. и др., 1998].

В работах отечественных и зарубежных ученых показано, что инфекционный синдром играет ведущую роль в развитии ЛАП, при этом особое значение имеют вирусы герпетической группы [Краснов В.В.,2003; Уразова О.И., 2004; Shizuma Т., 2005]. Клинически герпес-вирусная инфекция чаще всего проявляется лимфоаденопатией, субфебрилитетом и лейкемоидной реакцией [Стюф И.Ю. и др. 2007; Учайкин В.Ф., 2001]. Наиболее изучена лейкемоидная реакция при острой VEB-инфекции, проявляющаяся в абсолютном лимфоцитозе и наличии атипичных лимфоцитов [Воробьев А.И., 1985; Hoffbrand A.V., et al., 1993]. Менее изучена реакция со стороны крови при других герпетических (в том числе микст) инфекциях. Остальные параметры крови также изучены в меньшей степени.

Наличие дефектов в звеньях иммунной противовирусной защиты определяет особенности течения заболевания, прогноз и качество жизни конкретного человека [Шульженко А.Е., 2005]. Герпетическая инфекция сочетается с изменениями популяционного состава лимфоцитов, показателей гуморального и клеточного звена [Александровский A.B. и др., 2000]. Особую роль в защите организма против вирусной инфекции играют цитотоксические Т-клетки [Ярилин A.A., 1999]. Однако количество проведенных в данной области исследований при лимфоаденопатии крайне незначительно, особенно в

отношении детей раннего возраста, и находится в настоящее время на стадии накопления данных [Пичугина J1.B., 2006]. Иммунные нарушения часто ассоциируются с гематологическими нарушениями [Караулов A.B., 2002], однако при ЛАП взаимосвязи между иммунологическими и гематологическими параметрами остаются практически неизученными.

В патогенезе инфекционных заболеваний важную роль играют нарушения апоптоза, основной физиологической функцией которого является защита от патогенов [Самуилов В.Д., 2001]. В связи с этим, особую актуальность приобретает изучение характера цитотоксического ответа и апоптоза иммунокомпетентных клеток у детей с ЛАП на фоне инфекции. Анализ взаимосвязей между гематологическими показателями и характером цитотоксического Т-кпеточного иммунного ответа поможет уточнить патогенез ЛАП и разработать новые методы ранней диагностики и прогнозирования нарушений функции иммунной системы у детей с ЛАП. Цель работы

Установить особенности состояния клеток с цитотоксической активностью у детей с лимфоаденопатией с учетом возраста, инфекционного фона и гематологических параметров, на основании чего разработать новые способы прогнозирования нарушений функции иммунной системы у данной группы больных.

Задачи исследования

1. Установить возрастные особенности распространенности ЛАП и

инфекционного фона у детей с лимфоаденопатией.

2. Дать характеристику состояния цитотоксических Т-клеток у детей с

лимфоаденопатией.

3. Установить особенности ранних и поздних этапов апоптоза

лимфоцитов у детей с лимфоаденопатией.

4. Дать характеристику лейкемоидной реакции и выявить взаимосвязи

между гематологическими показателями, характером Т-клеточного

иммунного ответа и параметрами апоптоза у детей с лимфоаденопатией.

5. Разработать новые способы ранней диагностики нарушений функции иммунной системы у детей с лимфоаденопатией. Научная новизна исследования

Установлено, что формирование лимфоаденопатии сопровождается высокой частотой вирусных ассоциаций во все возрастные периоды и выявлением маркеров активной ВЭБ-инфекции у детей младше 6 лет.

Впервые установлено, что иммунные механизмы участвуют в патогенезе ЛАП, проявляясь у детей с ЛАП нарушением баланса наивных и коммитированных ЦТЛ, а также увеличением количества различных популяций лимфоцитов с ТС Я у8 типа.

Установлено, что развитие ЛАП у детей 3-14 лет ассоциируется с нарушением апоптоза, что проявляется в увеличении уровня клеток на ранних этапах и снижении уровня клеток на поздних необратимых его этапах.

Впервые установлено, что ЛАП у детей ассоциируется со снижением апоптоз-индуцирующей способности лимфоцитов, а также угнетением готовности лимфоцитов к апоптозу у детей младше 6 лет и повышением готовности ЦТЛ к апоптозу у детей старше 6 лет.

Установлено, что развитие ЛАП сопровождается лейкемоидной реакцией со стороны трех ростков кроветворения: красного, белого и тромбоцитарного. Ведущим гематологическим проявлением у детей с ЛАП 3-14 лет является наличие атипичных лимфоцитов.

Показано, что при формировании ЛАП изменяются количество, характер и сила корреляционных взаимосвязей между иммунологическими, а также иммунологическими и гематологическими параметрами.

Впервые установлено, что нарушение соотношения наивных С04511А+ и коммитированных С0451Ю+ лимфоцитов у детей с ЛАП позволяет прогнозировать частую и длительную заболеваемость. Практическая значимость работы

Разработан прогностический критерий развития длительной и частой заболеваемости у детей, основанный на определении соотношения наивных С045ЯА+ и коммитированных СЭ451Ю+ лимфоцитов в периферической крови у детей с ЛАП (Патент №2317549 от 20.02.2008). Реализация результатов работы

Результаты диссертационной работы внедрены в практику отделения детской гематологии ОГУЗ «Ивановская областная клиническая больница» Департамента здравоохранения Ивановской области, а также в практику педиатрического и пульмонологического отделений ГУЗ «Областная детская клиническая больница» Департамента здравоохранения Ивановской области. Апробация работы

Диссертация прошла апробацию на объединенной научной конференции ФГУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Г'ородкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» 4 апреля 2008 года. Материалы диссертации доложены и обсуждены на Республиканской конференции «Иммунология репродукции» (Иваново, 2005), на X Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2006), на 2-ой Республиканской конференции «Иммунология репродукции: теоретические и клинические аспекты» (Сочи, 2007).

Основные положения, выносимые на защиту

Формирование лимфоаденопатии у детей ассоциируется с иммунными и гематологическими нарушениями, которые зависят от возраста и инфекционного фона. Лимфоаденопатия у детей сопровождается нарушением количества, дифференцировки и апоптоза клеток с цитотоксической активностью. Гематологические нарушения характеризуются развитием лейкемоидной реакции со стороны всех трех ростков кроветворения. Между иммунологическими и гематологическими параметрами выявляются

корреляционные взаимосвязи, которые у детей с ЛАП характеризуются, меньшей силой, увеличением числа и изменением характера.

Нарушение соотношения наивных (С045ЯА+) и коммитированных (С0451Ю+) лимфоцитов может использоваться для прогнозирования частой и длительной заболеваемости у детей с лимфоаденопатией. Структура и объем диссертации

Материалы диссертации изложены на 164 страницах машинописного текста. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследования», 4 глав собственного исследования, главы «Обсуждение результатов», выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 241 источник. Работа иллюстрирована рисунками и таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Работа выполнена на базе ФГУ «Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова Росмедтехнологий» (директор - Засл. деятель науки РФ, д.м.н., проф. Л.В. Посисеева). На базе ОГУЗ «Ивановская областная клиническая больница» Департамента здравоохранения Ивановской области (главный врач - к.м.н. И.Е.Волков) было проведено комплексное (клиническое, функциональное, лабораторное) обследование 89 детей. Формирование клинических групп было основано на наличии или отсутствии у детей ЛАП. В группу с ЛАП включались дети при наличии у них одного и более увеличенных ЛУ и исключались дети с наличием у них первичной опухолевой ЛАП и специфического поражения ЛУ. Дети основной и контрольной групп были разделены на три подгруппы в зависимости от возраста: младшая — 3-6, средняя -7-11 и старшая - 12-14 лет.

Материалом для гематологического исследования служила периферическая капиллярная кровь из пальца обследуемого. Детям обследуемых групп был выполнен развернутый анализ крови, в состав которого входило стандартное определение показателей, характеризующих красный, белый и тромбоцитарный ростки кроветворения.

Иммунологическое обследование детей проводилось на базе лаборатории клинической иммунологии (завлаб. — д.м.н., проф. Н.Ю. Сотникова) на 3-й день поступления больного в отделение детской гематологии Ивановской областной клинической больницы. Материалом для исследования служила периферическая венозная кровь. У всех детей определяли содержание клеток с цитотоксической активностью, параметры их дифференцировки и апоптоза.

Определение содержания антител к инфекционным агентам проводили в сыворотке периферической венозной крови методом ИФА на микропланшетном ридере Multiscan EX Labsystems (Финляндия) с использованием коммерческих систем ЗАО «Вектор-Бест». Определяли уровень IgM и IgG AT к HSV, CMV, IgG-NA, IgG-EA и IgM AT к VEB, содержание IgM и IgG AT к Chlamydia trachomatis, Toxoplasma gondii, а также IgG + IgM AT к Toxocara canis.

Выделение иммунокомпетентных клеток из периферической крови осуществляли традиционным методом скоростного центрифугирования при 1500 об/мин в градиенте плотности фиколл-урографина (d-1,114) (Upsala, Sweden).

Поверхностный фенотип клеток периферической крови детей и параметры аннексинового теста определяли с помощью моноклональных антител (МАТ) методом двухцветной проточной цитофлюориметрии на приборе FACScan (Becton Dickinson, USA). В качестве флюорохромных меток использовали флюоресцеин изотиоционат (FITC) и фикоэритрин (РЕ). Фирма-производитель и клон используемых в исследовании МАТ указаны в таблице 1. Аннексиновый тест. Для определения количества клеток, вступивших в апоптоз, проводили тест с одновременным окрашиванием клеток Annexin V и пропидиумом иодидом (PI). Для этого к 50 мкл суспензии клеток добавляли 5 мкл Annexin V, коньюгированного с FITC, и 10 мкл PI, коньюгированного с РЕ, инкубировали 15 мин в темноте, затем добавляли 200 мкл стабилизирующего буфера (CALTAG Laboratories, США), и не более, чем в течение 30 мин. анализировали на проточном цитометре.

Таблица 1. Панель МАТ, использованных в исследовании

№ п/п МАТ Клон Фирма-производитель Флюорохромная метка

1. CD8 ICO-31 КЛОНОСПЕКТР, Москва FITC, PE

2. CD95, Fas ICO-160 КЛОНОСПЕКТР, Москва FITC

3. CD45 ICO-46 КЛОНОСПЕКТР, Москва FITC

4. CD14 ICO-174 КЛОНОСПЕКТР, Москва PE

5. CD45RA ICO-166 КЛОНОСПЕКТР, Москва FITC

6. CD45RO UCHL-1 Becton Dickinson, USA PE

7. TCRy/51 11F2 Becton Dickinson, USA PE

8. CD95L, FasL AIf-2.1 CALTAG Laboratories, USA PE

9. Recombinant Annexin V - CALTAG Laboratories, USA FITC

10. Propidium Iodid - CALTAG Laboratories, USA PE

11. Мышиные IgGl - Becton Dickinson FIFC

12. Мышиные IgG2a - Becton Dickinson PE

Статистическая обработка данных проводилась с расчетом среднего арифметического и ошибки среднего арифметического с использованием программы Microsoft Excel Version: 7.0 из комплекта Microsoft Office 2000. Достоверность различий сравниваемых показателей определялась по t-критерию Стьюдента. Корреляционные связи между иммунологическими, а также гематологическими и иммунологическими параметрами определяли методом множественного регрессионного анализа. Результаты работы и их обсуждение

У детей 3-14 лет была диагностирована как локализованная, так и генерализованная формы ЛАП, но генерализованная ЛАП достоверно чаще выявлялась у детей младшего возраста по сравнению с таковой у детей старшего возраста (р<0,05), что, по-видимому, объясняется незрелостью иммунной системы у детей раннего возраста, проявляющейся в склонности к генерализации инфекции [Демихов В.Г., 2002]. У подавляющего большинства больных выявлялись множественные ЛУ 5 и 6 степени увеличения (до 3,0 см), с вовлечением в патологический процесс одновременно до 8 групп ЛУ, но в младшем возрасте по сравнению с детьми более старшего возраста достоверно

чаще выявлялось одновременное увеличение 5 групп ЛУ (р<0,05). Одинаково часто, независимо от возраста, у детей с ЛАП выявлялись подчелюстные, передне-шейные, задне-шейные и аксиллярные ЛУ, а у детей младшего возраста, кроме вышеперечисленных, еще и паховые ЛУ (р<0,01). Полученные результаты согласуются с литературными данными о состоянии ЛУ при герпес-вирусных инфекциях [Баранов A.A. и др., 1998]. На момент госпитализации у детей с ЛАП отмечались субфебрильная температура, гиперемия зева, гипертрофия миндалин, затруднение носового дыхания, гепатомегалия. Состояние средней тяжести, интоксикация, аденоиды и спленомегалия достоверно чаще диагностировались в младшей возрастной группе (р<0,05, р<0,01, р<0,001, р<0,05 соответственно). Дети с ЛАП всех трех возрастных групп были сопоставимы по анамнестическим данным, а также по наличию острой и хронической сопутствующей патологии. Значительная часть детей с ЛАП 3-14 лет относилась к группе ЧБД.

Исследование инфекционного фона выявило крайне низкое содержание AT класса IgM ко всем исследуемым инфекциям, как у детей с ЛАП 3-14 лет, так и у детей контрольной группы соответствующего возраста (р>0,05 во всех случаях), за исключением более частого выявления IgM-VCA AT к VEB у детей с ЛАП в возрасте 3-6 лет (р<0,05). Это предполагает наличие активной вирусной инфекции у детей с ЛАП в раннем возрасте и согласуется с клиническими и литературными данными [Иванова В.В. и др., 2001]. Частота выявляемое™ IgG AT к HSV, CMV, IgG-NA AT к VEB была достаточно высокой во всех исследуемых группах (р>0,05 во всех случаях), что согласуется с данными литературы о высокой распространенности герпес-вирусных инфекций [Шульженко А.Е., 2005]. Следует отметить, что у детей с ЛАП 3-14 лет достоверно чаще, чем в контрольной группе, одновременно выявлялись маркеры трех инфекций (р<0,01). Вирусные ассоциации, включающие все 3 вида герпетической инфекции, выявлялись достоверно чаще у детей с ЛАП 3-]4 лет, чем у здоровых детей (р<0,05). Имеются литературные данные о наличии герпетической микст-инфекции у детей с ЛАП, но они крайне малочисленны

[Корсакова И.И. и др., 2004; Sawanobori M.,et al., 1997]. Данный факт может свидетельствовать о возможной реактивации герпес-вирусов в связи с недавно перенесенной острой инфекцией. Это согласуется с данными других исследователей [Краснова Е.А. и др., 2004] и подтверждается анамнестическими данными: у подавляющего большинства детей с ЛАП 3-14 лет за период от 2 недель до 2 месяцев перед госпитализацией была диагностирована ОРВИ.

Нами не было выявлено достоверных различий в частоте встречаемости маркеров бактериальной инфекции у обследованных детей (р>0,05 во всех случаях). По-видимому, в генезе формирования ЛАП именно вирусная инфекция играет определяющую роль. Это согласуется с литературными данными о ведущей роли ЛАП в клинике герпес-вирусных заболеваний [Ратманова Г.А. и др., 2002; Sanchez Echaniz J. et al., 1996; Shizuma Т., 2005].

Клетки с цитотоксической активностью играют ведущую роль в противовирусном иммунитете [Серебряная Н.Б. и др., 2007], однако данные по цитотоксическому ответу у детей с ЛАП немногочисленны. Нами было предпринято определение популяций Т-лимфоцитов с цитотоксической активностью (CD8, CD8y5, TyS), экспрессии маркеров Fas, Fas-L, CD45RO, CD45RA на поверхности лимфоцитов периферической крови и CD8+ клеток, а также определения особенностей апоптоза лимфоцитов. Данные приведены в таблице №2.

Полученные результаты показали, что у детей с ЛАП старше 6 лет было достоверно выше, чем у здоровых детей, количество CD8+ лимфоцитов (р<0,05, р<0,001 соответственно), а у детей с ЛАП младше 6 лет отмечалась тенденция к их увеличению (р>0,05). Данные по содержанию CD8+ Т-клеток при герпетической инфекции противоречивы и свидетельствуют как об увеличении количества CD8+ Т-клеток [Малышева О.А. и др., 2001; Silins S.I., et al., 1997], так и об уменьшении их количества и функциональной активности [Краснов В.В., 2003; Пичугина Л.В., 2006]. Некоторые авторы отмечают отсутствие количественных изменений в содержании CD8+ лимфоцитов при вирусной

инфекции [Марданлы С.Г. и др., 2005], но при этом они наблюдали снижение специфической Т-клеточной цитотоксичности. Вероятно, сочетанная герпес-вирусная инфекция является причинно-значимым фактором повышения количества CD8+ ЦТЛ в периферической крови детей с ЛАП старше 6 лет. Отсутствие достоверного повышения уровня ЦТЛ в крови детей с ЛАП младше 6 лет может объясняться дефицитом клеточного иммунитета в связи с незрелостью иммунной системы [Кузьменко Л.Г. и др., 1999], а также тем, что для накопления достаточного количества клонов специфических ЦТЛ требуется определенное время, поэтому их уровень при острой инфекции достигает своего максимума к началу периода выздоровления [A.A. Ярилин, 1999]. При инфекциях продолжительная поликлональная стимуляция может приводить к ослаблению функции ЦТЛ, истощению и иммуносупрессии [Андросова М.В. и др., 2007], то есть иммунологической недостаточности, которая может обуславливать высокую частоту ОРВИ у детей с ЛАП. Можно предположить, что в патогенезе ЛАП у детей старше 6 лет ведущую роль играет хроническая, персистирующая или рецидивирующая вирусная инфекция, а у детей младше 6 лет - преимущественно острая вирусная инфекция.

CD8+ лимфоциты, специфичные в отношении вирусных инфекций, делятся на наивные, клетки памяти и эффекторные ЦТЛ, которые характеризуются различной экспрессией изотипов CD45 [Chen G., et al., 2001]. На поверхности наивных Т-клеток экспрессируется изоформа CD45RA, а на зрелых эффекторных клетках и клетках памяти - CD45RO [A.A. Ярилин, 1999]. У детей с ЛАП 3-14 лет было достоверно выше, чем у здоровых детей, количество коммитированных ЦТЛ с фенотипом CD8+CD45RO+. У детей старшей возрастной группы, помимо этого, было выше, чем в контрольной группе, и количество наивных ЦТЛ с фенотипом CD8+CD45RA+. У детей средней возрастной группы дополнительно был выше уровень наивных и коммитированных лимфоцитов. Мы предполагаем, что в младшей и старшей возрастных группах отсутствие повышения уровня коммитированных

лимфоцитов в крови может быть связано со снижением количества CD4+ клеток, которое, по литературным данным, наблюдается при острой [Родионова О .В. и др.; 2000,- Краснов В.В., 2003], хронической [Редькин Ю.В. и др., 2006; Laurence J. et al., 1993] и михт-инфекции [Корсакова И.И. и др., 2004]. Однако по современным данным реэкспрессия CD45RA может наблюдаться и в популяции эффекторных клеток и клеток памяти [Rufer N. et al., 2003; Dunne P.J. et al., 2005]. В связи с этим повышение у детей с ЛАП старшего возраста количества ЦТЛ с фенотипом CD8+CD45RA+ можно объяснить повышением содержания вирус-специфичных клеток памяти и, вероятно, эффекторов с промежуточными функциональными свойствами. Нами установлено, что при соотношении CD45RA+/CD45RO+ лимфоцитов равном или большем 2,5 можно прогнозировать частые ОРВИ у детей с ЛАП с точностью 82,6% (Патент №2317549 от 20.02.2008).

Специфический противоинфекционный ответ требует определенного времени, в то время как цитотоксическая реакция у5+ Т-клеток является ранним фактором защиты [Carding S.R., et al., 2002]. Нами было показано, что уровень у8+ Т-клеток в крови у детей с ЛАП был повышен только в возрасте 3-6 лет (р<0,05), что может быть обусловлено повышенной частотой острой вирусной инфекции у детей в этом возрасте. Высокий уровень у5+ Т-клеток в крови у детей с ЛАП младшего возраста, кроме того, может объяснять отсутствие повышения у них уровня CD8+ ЦТЛ, поскольку Ту5+ клетки продуцируют цитокины IL-10 и TGFj3 с ингибирующим действием [Carding S.R., et al., 2002]. Увеличение количества лимфоцитов с TCR у5 типа у детей с ЛАП согласуется с литературными данными, подтверждающими роль клеток с TCRyS типа в противовирусном ответе [Hou S., et al., 1992; Carding S.R., et al., 2002].

Недавно была обнаружена популяция CD8+ Т-клеток, экспрессирующих TCR yô типа [Shao L., et al, 2005]. Этот пул лимфоцитов активируется неклассическими HLA молекулами 1 класса CD Id в сочетании с костимуляторными молекулами, принадлежащими к семейству карциноэмбриональных антигенов. В настоящее время считается доказанным,

что CD8y5+ клетки обладают регуляторными функциями, поддерживают иммунологическую толерантность, участвуют в подавлении чрезмерного иммунного ответа на его заключительных стадиях [Maloy K.J., et al., 2001].

Проведенные нами исследования показали, что у детей с ЛАП 3-11 лет в отличие от здоровых детей отмечалась тенденция к повышению уровня CD8y8+ лимфоцитов в крови, которая становилась достоверной в старшей возрастной группе (р<0,01). Мы можем предположить, что у детей с ЛАП этого возраста экспансия CD8y5+ клеток, которая наблюдалась на фоне одновременного повышения уровня CD8+ ЦТЛ, максимально выраженного в возрасте 12-14 лет, может быть адаптивной реакцией для того, чтобы ограничить иммунный ответ и избежать развития тяжелых воспалительных и аутоиммунных процессов.

В патогенезе инфекционных заболеваний важную роль играют нарушения апоптоза [Strater J., et al., 2004; Dunne P.J., et al., 2002]. Проведенные нами исследования позволили уточнить основные параметры Fas-зависимого апоптоза лимфоцитов у детей с ЛАП. У всех детей с ЛАП, независимо от возраста, наблюдалось более низкое, чем у здоровых детей, содержание лимфоцитов, экспрессирующих FasL (р<0,05 во всех случаях), а у детей младшего возраста дополнительно - снижение числа лимфоцитов экспрессирующих Fas (р<0,01). У детей с ЛАП старше 6 лет в популяции ЦТЛ достоверно повышалось содержание клеток, экспрессирующих Fas (р<0,001, р<0,05 соответственно), и отмечалась тенденция к их повышению у детей младше 6 лет (р>0,05). Учитывая, что FasL, экспрессирующийся на мембране киллеров, обуславливает индукцию апоптоза клеток-мишеней, экспрессирующих рецептор Fas [Ярилин А.А., 1999], можно сделать вывод, что у детей с ЛАП индукция апоптоза и следующая за ней реализация апоптоза лимфоцитов должна быть нарушена во всех возрастных группах, и особенно в младшей возрастной группе. Это может быть связано со способностью вирусов герпетической группы блокировать апоптоз [Strater J., et al., 2004]. В то же время в популяции CD8+ лимфоцитов экспрессия FasL не отличалась от таковой у детей контрольной группы, в связи с чем можно предположить, что

апоптоз-индуцирующая функция ЦТЛ у детей с ЛАП остается не нарушенной. У детей с ЛАП старше 6 лет наблюдалось увеличение количества ЦТЛ, экспрессирующих Fas молекулу, что позволяет предполагать их повышенную готовность к апоптозу.

Изучение параметров аннексинового теста показало, что у детей с ЛАП 314 лет в периферической крови во все возрастные периоды отмечалось увеличение количества лимфоцитов на ранних этапах апоптоза с фенотипом Ann+Pi- (р<0,05, р<0,001, р<0,001 соответственно) при одновременном снижении уровня клеток, находящихся на поздних его этапах, с фенотипом Ann+Pi+ (р<0,05 во всех случаях); в возрасте 12-14 лет, кроме этого, у детей с ЛАП возрастало число лимфоцитов, вступивших в апоптоз (Апп+) (р<0,001). Таблица 2. Сравнительная характеристика содержания клеток с цитотоксической активностью, Fas и FasL позитивных лимфоцитов и

параметров апоптоза у детей с ЛАП в возрасте 3-14 лет

Показатель, % 3-6 лет п=24 7-11 лет п=15 12-14 лет п=20

CD45RA+ 62,70+3,25 62,27±3,54** 66,9413,43

CD45RO+ 26,85±1,50 25,08±2,29* 27,7011,41

CD8+ 21,37±1,20 20,03±1,23* 22,6111,30***

CD8+CD45RA+ 10,97+0,95 10,63±1,02 10,9410,99*

CD8+CD45RO+ 9,1210,68* 9,32±1,20*** 9,26+0,68***

CD8y8+ 3,18+0,43 2,27+0,59 3,93+0,65**

Ту5+ 11,19+1,04* 12,2911,52 10,6011,40

CD95+ 16,5311,14** 16,9011,22 17,19+1,35

CD95L+ 9,14+0,82* 7,7710,81* 7,3310,72*

CD8+CD95+ 6,89±0,70 6,99+0,80*** 7,0810,89*

CD8+CD95L+ 3,51+0,38 3,9010,52 4,3810,83

Апп+ 15,2210,83 18,5311,29 16,5111,24***

Ann+Pi- 12,38±0,75* 16,4711,36*** 13,6110,99***

Ann+Pi+ 2,84+0,33* 2,06+0,13* 2,9110,36*

*-р<0,05; **-р<0,01; ***-р<0,001 - дано в сравнении с показателями

контрольной группы.

Большинство исследователей указывает на развитие синдрома мононуклеоза при многих инфекциях, в первую очередь, герпес-вирусных

[Уразова О.И., и др., 2004; Нис1па11 БХ)., й а1., 2003; Р1ЫБЬег в., е! а!., 1981]. При изучении гематологических параметров у детей контрольной группы отклонений в развернутом анализе крови вьивлено не было. У детей с ЛАП были констатированы варианты отклонений гематологических показателей [Павлова М.П., 1998; КостЕ.А., 1975], приведенные в табл. №3.

Таблица 3. Варианты отклонений гематологических показателей от нормальных величин у детей с ЛАП

Показатель Данные развернутого анализа крови

Ускоренная СОЭ СОЭ>15мм/час

Анемия Нв <120,0 г/л, Эр<3,5х1012/л

Ретикулоцитоз Ретикулоциты > 12°/оо

Тромбоцитоз Тромбоциты>320,0х 107л

Тромбоцитопения Тромбоциты< 180,0x109/л

Лейкоцитоз Лейкоциты >9,5x10%

Лейкопения Лейкоциты <4,5хЮ9/л

Нейтрофилез абсолютный Нейтрофилы >6,8х109/л

Нейтропения абсолютная Нейтрофилы <2,25х10ч/л

Нейтропения глубокая Нейтрофилы <1,0х109л

Моноцитоз абсолютный Моноциты >0,95 х 10у/л

Моноцитопения абсолютная Моноциты <0,09х10у/л

Эозинофилия абсолютная Эозинофилы >0,48x109/л

Эозинопения абсолютная Эозинофилы <0,045 х10"7л

Лимфоцитоз абсолютный ЛЦ >3,6х10ч/л у детей в возрасте > 8 лет ЛЦ >6,0х109/л у детей в возрасте < 8 лет

Лимфопения абсолютная Лимфоциты <0,81 хЮ^/л

Наличие атипичных лимфоцитов Атипичные лимфоциты>5,0%

Наличие плазматических клеток Плазматические клетки >1,0%

Исследование периферической крови детей с ЛАП показало, что частота выявления лейкоцитоза была максимальной у детей с ЛАП в возрасте 3-6 лет по

сравнению с детьми контрольной группы (41,7%; р<0,01). Данные различных авторов свидетельствуют о том, что острая стадия инфекционного мононуклеоза сопровождается лейкоцитозом [Баранов A.A., и др., 1998; Краснов В.В., 2003]. Абсолютный лимфоцитоз выявлялся с одинаковой частотой у детей с ЛАП всех возрастных групп (25%, 20%, 25%, соответственно). Мы связываем этот факт с тем, что при герпетической инфекции отмечается повышение продукции IL-2, ключевого медиатора, осуществляющего контроль и регуляцию пролиферации и дифференцировки лимфоцитов [Симбирцев A.C., 1998]. Наряду с этим, атипичные лимфоциты вьивлялись в большом количестве у всех 100% детей с ЛАП 3-14 лет. Атипичные лимфоциты по иммунофенотипу относятся к активированным цитотоксическим эффекторам (CD8+HLADR+), которые осуществляют киллерную функцию по отношению к вирус-инфицированным клеткам [Волкова М.А., 2001]. Клональная экспансия CD8+ лимфоцитов при инфекционном мононуклеозе доказана методом PCR [Сидорова Ю.В., 2004]. Кроме того, у детей с ЛАП 3-14 лет увеличение количества атипичных лимфоцитов в крови согласуется с увеличением числа коммитированных ЦТЛ с фенотипом CD8+CD45RO+ [Ярилин A.A., 1999]. Поскольку большое количество атипичных лимфоцитов выявляется у 100% больных с ЛАП, независимо от возраста (р<0,001 во всех случаях)., мы полагаем, что атипичный лимфоцитоз характерен не только для острой, но и для персистирующей формы инфекции, в том числе микст-инфекции, что подтверждают некоторые литературные данные [Sanchez Echaniz J., et al., 1996].

Кроме того, рядом авторов сообщается, что при герпес-вирусных инфекциях может наблюдаться лимфопения [Долгих Т.И., и др., 2007]. К формированию клинически значимых лимфопенических состояний, часто регистрируемых у больных герпетической инфекцией, приводит регуляция численности ЦТЛ посредством индукции апоптоза вирусами группы герпеса [Серебряная Н.Б., и др., 2007]. Лимфопения у детей с ЛАП в нашем исследовании не зарегистрирована. Однако, отсутствие лимфоцитоза (а также и

лейкоцитоза) мы констатировали у большинства больных с ЛАП 3-14 лет, что согласуется с данными ряда авторов о том, что количество лейкоцитов при инфекционном мононуклеозе может быть нормальным или даже пониженным [Баранов А.А., и др., 1998; Краснов В.В., 2003]. Это может быть обусловлено индукцией выработки IL-10 вирусами герпетической группы, способного подавлять рост и дифференцировку Т-лимфоцитов [Fickenscher H.,et al., 2002; Ohga S., et al., 2004]. Кроме того, в период реконвалесценции уровень IL-2 снижается, а уровень IL-10 остается повышенным [Куртасова Л.М., и др., 2007]. Одинаково часто у детей с ЛАП 3-14 лет обнаруживалось в крови небольшое количество плазматических клеток на разных стадиях созревания с преобладанием иммунобластов, что согласуется с данными литературы о наличии этих клеток при вирусных инфекциях [Луговская С.А., и др., 2004].

У детей с ЛАП, независимо от возраста, достоверно чаще, чем в контрольных группах, выявлялась абсолютная нейтропения (р<0,01, р<0,01, р<0,001 соответственно). Глубокая нейтропения (<1,0х109/л) достоверно чаще диагностировалась в младшей (р<0,05) и старшей (р<0,05) возрастных группах. Это можно объяснить наличием острой VEB-инфекции у детей с ЛАП в младшем возрасте и максимальным количеством больных с наличием хронической микст-инфекции в старшем возрасте. Нейтрофилез у детей с ЛАП 3-14 лет нами обнаружен не был. Литературные данные также свидетельствуют об угнетении нейтрофильного гранулоцитарного ростка периферической крови при герпетических инфекциях [Козинец Г.И., и др., 2001; Brkic S., et al., 1998].

У всех детей с ЛАП 3-14 лет достоверно чаще, чем у здоровых детей, выявлялась эозинофилия (р<0,01, р<0,05, р<0,05 соответственно), а моноцитоз лишь у детей с ЛАП 3-6 лет (р<0,05), что согласуется с литературными данными об участии этих клеток в иммунном ответе при герпес-вирусных инфекциях [Учайкин В.Ф., 2001; Воробьев А.И., 2002].

При исследовании эритроидного ростка умеренно выраженная анемия отмечалась у детей с ЛАП младшего возраста достоверно чаще, чем у здоровых детей (р<0,01), а ускоренная СОЭ в возрасте 7-11 лет (р<0,05). Наряду с этим, у

у подавляющего большинства детей с ЛАП всех возрастных групп выявлялся ретикулоцитоз (р<0,001 во всех случаях). По данным литературы, анемия, сопровождающая вирусные и бактериальные инфекции, может относиться к анемии хронических болезней и наблюдается у пациентов с острой или хронической активацией иммунной системы [Weiss G., et al., 2005]. Повышение ретикулоцитов у детей с ЛАП 3-14 лет можно объяснить активацией эритропоэза в костном мозге вследствие повышенной выработки эритропоэтина почками и печенью в условиях гипоксии, а также внутриклеточным гемолизом поврежденных и "стареющих" эритроцитов вследствие активации макрофагального фагоцитоза под влиянием TNFa. [Воробьева C.B. и др., 2007; Г.И. Козинец Г.И. и др., 2001].

У подавляющего большинства детей с ЛАП 3-14 лет достоверно чаще по сравнению с параметрами контрольной группы выявлялся тромбоцитоз (р<0,001 во всех случаях). Полученные нами данные согласуются с данными ряда авторов [М. Вуд, 2001; М.А. Волкова, 2001; Г.И. Козинец, 2001], которые указывают на развитие реактивного тромбоцитша при любой острой или хронической инфекции. Известно, что эритропоэтин стимулирует рост и дифференцировку не только эритроидных предшественников в костном мозге, но и мегакариоцитов с последующим увеличением количества тромбоцитов [Воробьева C.B., и др., 2007]. Увеличение уровня тромбоцитов может быть обусловлено и цитокиновой регуляцией, так как у больных с инфекциями отмечено увеличение продукции мультифункциональных цитокинов, вызывающих пролиферацию ранних предшественников гемопоэза: IL-1, IL-3, IL-6, IL-11, IL-12, а также GM-CSF [Мелкова К.Н., и др., 2006; Волкова, М.А., 2001], одним из наиболее важных эффектов которых с клинической точки зрения является стимулирующее влияние на тромбоцитопоэз [Dinarello С.А., 1996; Eder M., et al., 1997]. Эти же цитокины, а также IL-9 усиливают и эритропоэз [Мелкова К.Н., и др., 2006].

Корреляционный анализ выявил взаимосвязи между иммунологическими и гематологическими параметрами у здоровых детей и детей с ЛАП. У детей

контрольной группы между иммунологическими и гематологическими параметрами наибольшее число корреляционных связей отмечалось в возрасте 3-6 лет, минимальное - в возрасте 7-11 лет. Все связи в разные возрастные периоды не повторяли друг друга. С уровнем у5 клеток гематологические показатели у здоровых детей коррелировали лишь в возрасте 3-6 лет. У здоровых детей гематологические параметры коррелировали с показателями аннексинового теста в младшем и старшем возрасте, причем количество таких связей было больше в возрасте 12-14 лет. У детей с ЛАП количество связей было меньше, чем в контрольной группе, лишь в возрасте 3-6 лет, а начиная с 7 лет при лимфоаденопатии количество связей было больше, чем у детей контрольной группы. При этом у детей с ЛАП в возрасте 3-6 лет взаимосвязи между гематологическими показателями и уровнем у5 клеток исчезали, но появлялись у детей с ЛАП в 7-11 и 12-14 лет. У детей с ЛАП взаимосвязи между гематологическими параметрами и показателями аннексинового теста наблюдались у детей младшего и старшего возраста, но отсутствовали в возрасте 7-11 лет, причем наибольшее число таких связей отмечалось у детей с ЛАП в возрасте 3-6 лет. У детей с ЛАП отмечалась одна общая связь между скоростью оседания эритроцитов и уровнем СЭ95+ лимфоцитов в возрасте 7-11 и 12-14 лет. Таким образом, при лимфоаденопатии наблюдался иной характер, количество и сила корреляционных связей между иммунологическими и гематологическими параметрами по сравнению с таковыми у здоровых детей.

Проведенные нами исследования установили патогенетическую значимость иммунологических и гематологических изменений в формировании ЛАП. Суммируя полученные результаты, можно сделать вывод, что иммунные факторы играют важную роль в формировании ЛАП и проявляются дисбалансом процессов дифференцировки и апоптоза клеток с цитотоксической активностью, которые зависят от возраста и инфекционного фона. Гематологические нарушения характеризуются лейкемоидной реакцией периферической крови со стороны всех трех ростков кроветворения. Между гематологическими и иммунологическими параметрами выявлены

корреляционные взаимосвязи, которые у детей с ЛАП характеризуются меньшей силой, увеличением числа и изменением характера. С увеличением возраста изменения иммунологических параметров становятся более выраженными, что, по-видимому, отражает созревание иммунной системы. Иммунологические параметры, в частности нарушение соотношения наивных С045ЯА+ и коммутированных СЭ45ЯО+ лимфоцитов, можно использовать для прогнозирования длительной и частой заболеваемости детей.

Выводы

1 Формирование лимфоаденопатии у детей ассоциируется с иммунными и гематологическими нарушениями, которые зависят от возраста и характера инфекционного фона. При лимфоаденопатии у детей 3-14 лет отмечается формирование вирусных ассоциаций, у детей младше 6 лет чаще выявляются маркеры активной ВЭБ инфекции и генерализованная ЛАП.

2 Формирование лимфоаденопатии у детей 3-14 лет ассоциируется с повышением уровня коммитированных ЦТЛ (С08+С0451Ю+), старше 6 лет - с повышением уровня СБ8+ лимфоцитов, в возрасте 7-11 лет - с увеличением количества наивных и коммитированных лимфоцитов, у детей с ЛАП в возрасте 12-14 лег - с повышением содержания наивных ЦТЛ (С08+С04511А+).

3 Развитие лимфоаденопатии у детей в возрасте 3-6 лет сопровождается увеличением в периферической крови уровня Ту5+ клеток, а у детей в возрасте 12-14 лет- СБ8у6+ клеток.

4 Лимфоаденопатия у детей 3-14 лет характеризуется нарушениями апоптоза периферических лимфоцитов, что проявляется повышением уровня клеток, находящихся на обратимых стадиях апогггоза, снижением количества клеток, находящихся на поздних его стадиях, и количества СБ95Ь+ клеток. Только у детей младшего возраста отмечается снижение готовности лимфоцитов к апоптозу, у детей старше 6 лет - повышение готовности ЦТЛ к апоптозу, у детей старшего возраста - повышение уровня апоптирующих лифоцитов.

5 Ведущим гематологическим проявлением лимфоаденопатии у детей 3-14 лет является наличие атипичных лимфоцитов; кроме этого, лимфоаденопатия у детей 3-14 лет сопровождается увеличением количества плазматических клеток, абсолютной эозинофилией и нейтропенией, ретикулоцитозом, тромбоцитозом, а у детей младше 6 лет дополнительно лейкоцитозом и абсолютным моноцитозом.

6 Между гематологическими и иммунологическими параметрами выявлены корреляционные взаимосвязи, которые у детей с лимфоаденопатией характеризуются меньшей силой, увеличением числа и изменением характера.

7 Нарушение соотношения наивных клеток с фенотипом С045ЯА+ и коммутированных лимфоцитов с фенотипом С045Я0+ является прогностическим критерием развития частой и длительной заболеваемости у детей.

Практические рекомендации

Рекомендуется детям с лимфоаденопатией определять в анализе периферической крови показатели, характеризующие все ростки кроветворения.

Детям с лимфоаденопатией рекомендуется проводить иммунологическое исследование с определением уровня в крови различных популяций клеток с цитотоксической активностью (СЭ8+, Ту5+, С08у5+ ), коммитированных ЦТЛ, параметров аннексинового теста и содержания СЭ95Ь+ лимфоцитов.

У детей с лимфоаденопатией рекомендуется определять содержание наивных С045ИА+ и коммитированных СЭ451Ю+ лимфоцитов. Соотношение С045ЯА+/С045Я0+ равное или большее 2,5 позволяет прогнозировать длительную и частую заболеваемость у детей с точностью 82,6%.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Ведь В.В., Сотникова Н.Ю., Левенец АЛ., Козлова О.Б. Особенности инфекционного статуса и картины крови у детей с лимфаденопатией// Ж. Фундаментальные исследования.- 2004.-№1.-с.42-43.

2. Ведь В.В., Сотникова Н.Ю., Левенец А.Я., Козлова О.Б. Характеристика инфекционного фона и гематологических изменений у детей с лимфоаденопатией// Клиническая лабораторная диагностика.- 2004.- №9,-с.41

3. Ведь В.В., Левенец А.Я.Маркеры инфекции и гематологические параметры у детей с лимфоаденопатией. // Russian Journal of Immunology.-2005.-V. 9, Suppl.2.- P.219.

4. Ведь B.B., Левенец АЛ.,Сотникова Н.Ю., Вторушина В.В. Серологические маркеры некоторых инфекций и изменение гематологических параметров у детей с лимфоаденопатией. // Новости «Вектор-Бест»,- 2005.-№1.- с.З.

5. Ведь В.В., Сотникова Н.Ю., Левенец АЛ. Частота выявления маркеров вирусно-бактериальной инфекции у детей с лимфоаденопатией// «Перинатальные инфекции: лечить или нет?»: Сб. научных трудов./Под ред. Проф. И.О. Буштыревой - Ростов-на-Дону, 2006. - С.37-38.

6. Ведь В.В., Вторушина В.В., Сотникова Н.Ю. Особенности апоптоза периферических лимфоцитов у детей с лимфоаденопатией на фоне герпетической инфекции // Медицинская иммунология.- 2006. - Том 8. -№ 2-3. - С.252-253.

7. Ведь В.В., Сотникова Н.Ю. Характеристика клеток с цитотоксической активностью у детей с лимфоаденопатией // Russian Journal of Immunology.- 2007.-V. 9, Suppl.4.- P.l 10

8. Ведь B.B., Сотникова Н.Ю. Характеристика клеток с цитотоксической активностью у детей с лимфоаденопатией // Вестник новых медицинских технологий. - 2007. - Том XIV. - №4. - С.80-82

Подписано в печать 07.11.2008. Формат 60x84 1/16. Бумага писчая. Усл. печ. л. 1,4. Уч.-изд. л.1,55. Тираж 100 экз. Заказ 1533

ГОУ ВПО Ивановский государственный химико-технологический университет

Отпечатано на полиграфическом оборудовании кафедры экономики и финансов ГОУ ВПО «ИГХТУ» 153000, г. Иваново, пр. Ф. Энгельса, 7

Оглавление диссертации Ведь, Вера Владимировна :: 2008 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Понятие о лимфоаденопатии. Классификация. Методы диагностики.

1.2. Иммунные нарушения при лимфоаденопатии.

1.3. Гематологические нарушения при лимфоаденопатии.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Общая клиническая характеристика исследуемых групп.

2.2. Иммунологические методы исследования.

2.3. Гематологические методы исследования.

ГЛАВА 3. ЧАСТОТА ВЫЯВЛЯЕМОСТИ АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ИНФЕКЦИЙ ПРИ ЛИМФОАДЕНОПАТИИ.

ГЛАВА 4. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЕТЕЙ С ЛИМФОАДЕНОПАТИЕЙ.

4.1. Параметры цитотоксического ответа у детей с лимфоаденопатией

4.2. Характеристика основных параметров Fas-зависимого апоптоза у детей с лимфоаденопатией.

4.3. Характеристика основных параметров аннексинового теста у детей с лимфоаденопатией.

ГЛАВА 5. ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ДЕТЕЙ С ЛИМФОАДЕНОПАТИЕЙ.

ГЛАВА 6. ХАРАКТЕРИСТИКА ВЗАИМОСВЯЗЕЙ МЕЖДУ ИММУНОЛОГИЧЕСКИМИ ПАРАМЕТРАМИ И ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИМИ ПОКАЗАТЕЛЯМИ У ДЕТЕЙ С ЛИМФОАДЕНОПАТИЕЙ.

6.1. Корреляционные связи между иммунологическими параметрами у здоровых детей и детей с лимфоаденопатией.

6.2. Корреляционные связи между иммунологическими и гематологическими показателями у здоровых детей и детей с лимфоаденопатией.

ГЛАВА 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Ведь, Вера Владимировна, автореферат

Актуальность темы исследования.

Лимфоаденопатия (ЛАП) представляет системное увеличение лимфатических узлов, не связанное с воспалением [75], являющееся результатом пролиферации, метастазирования, воздействия факторов экзогенного и эндогенного характера [9]. Частота выявления данной патологии не имеет тенденции к снижению [87]. Больные с ЛАП составляют 40% всех пациентов детских онкогематологов в связи с необходимостью исключения онкогематологического заболевания [49]. Однако причиной увеличения ЛУ в большинстве случаев являются процессы, не связанные с гемобластозами: чаще всего это общепедиатрические, инфекционные, иммунные и другие состояния [75].

В работах отечественных и зарубежных ученых показано, что инфекционный синдром играет ведущую роль в развитии ЛАП, при этом особое значение имеют вирусы герпетической группы [9, 38, 46, 75, 86, 90, 91, 207, 239, 241]. Клинически герпес-вирусная инфекция чаще всего проявляется лимфоаденопатией, субфебрилитетом и лейкемоидной реакцией [33, 86, 91]. Наиболее изучена лейкемоидная реакция при острой Эпштейн-Барр — вирусной инфекции, проявляющаяся в абсолютном лимфоцитозе и наличии атипичных лимфоцитов [72, 155]. Менее изучена реакция со стороны крови при других герпетических (в том числе микст) инфекциях. Остальные параметры крови также изучены в меньшей степени.

Наличие дефектов в звеньях иммунной противовирусной защиты определяет особенности течения заболевания, прогноз и качество жизни конкретного человека [97]. Герпетическая инфекция сочетается с изменениями популяционного состава лимфоцитов, показателей гуморального и клеточного звена, нарушением цитокиновой регуляции [1, 34, 56, 86]. Особую роль в защите организма против герпетической инфекции играют цитотоксические Тклетки. [98]. Однако количество проведенных в данной области исследований при лимфоаденопатии крайне незначительно, особенно в отношении детей раннего возраста, и находится в настоящее время на стадии накопления данных [58]. Иммунные нарушения часто ассоциируются с гематологическими нарушениям [33], однако при ЛАП взаимосвязи между иммунологическими и гематологическими параметрами остаются практически неизученными.

В патогенезе инфекционных заболеваний важную роль играют нарушения апоптоза, основной физиологической функцией которого является защита от патогенов [78]. В связи с этим, особую актуальность приобретает изучение характера цитотоксического ответа и апоптоза иммупокомпетентных клеток у детей с ЛАП на фоне инфекции. Анализ взаимосвязей между гематологическими показателями и характером цитотоксического Т-клеточного иммунного ответа поможет уточнить патогенез ЛАП и разработать новые методы ранней диагностики и прогнозирования нарушений функции иммунной системы у детей с ЛАП.

Цель работы:

Установить особенности состояния клеток с цитотоксической активностью и характера лейкемоидной реакции у детей с лимфоадепопатией с учетом возраста и инфекционного фона, на основании чего разработать новые способы прогнозирования нарушений функции иммунной системы у данной группы больных.

Задачи:

1. Установить частоту встречаемости локализованной и генерализованной формы лимфоаденопатии и особенности инфекционного фона у детей разных возрастных групп.

2. Дать характеристику состояния цитотоксических Т-клеток у детей с лимфоаденопатией разных возрастных групп.

3. Установить особенности ранних и поздних этапов апоптоза лимфоцитов у детей с лимфоаденопатией разных возрастных групп.

4. Дать характеристику лейкемоидной реакции и выявить взаимосвязи между гематологическими и иммунологическими параметрами у детей с лимфоаденопатией разных возрастных групп.

5. Разработать новые способы ранней диагностики нарушений функции иммунной системы у детей с лимфоаденопатией.

Научная новизна исследования.

Впервые установлено, что нарушение соотношения наивных CD45RA+ и коммитированных CD45RO+ лимфоцитов у детей с ЛАП позволяет прогнозировать частую и длительную заболеваемость.

Практическая значимость работы.

Разработан прогностический критерии развития длительной и частой заболеваемости у детей, основанный на определении соотношения наивных CD45RA+ и коммитированных CD45RO+ лимфоцитов в периферической крови у детей с ЛАП (Патент №2317549 от 20.02.2008).

Основные положения, выносимые на защиту.

Формирование лимфоаденопатии у детей ассоциируется с иммунными и гематологическими нарушениями, которые зависят от возраста и инфекционного фона. Лимфоаденопатия у детей сопровождается нарушением количества, дифференцировки и апоптоза клеток с цитотоксической активностью. Гематологические нарушения характеризуются развитием лейкемондной реакции со стороны всех трех ростков кроветворения. Между иммунологическими и гематологическими параметрами выявляются корреляционные взаимосвязи, которые у детей с ЛАП характеризуются меньшей силой, увеличением числа и изменением характера.

Нарушение соотношения наивных (CD45RA+) и коммитированных (CD45RO+) лимфоцитов может использоваться для прогнозирования частой и длительной заболеваемости у детей с лимфоаденопатией.

Реализация результатов работы.

Апробация работы.

Диссертация прошла апробацию на объединенной научной конференции ФГУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» 4 апреля 2008 года. Материалы диссертации доложены и обсуждены на Республиканской конференции «Иммунология репродукции» (Иваново, 2005), на X Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2006), на 2-ой Республиканской конференции «Иммунология репродукции: теоретические и клинические аспекты» (Сочи, 2007).

Публикации: по теме диссертации опубликовано 8 печатных работ. Структура и объем диссертации.

Заключение диссертационного исследования на тему "Характеристика клеток с цитотоксической активностью и гематологических показателей у детей с лимфоаденопатией"

выводы.

2 Формирование лимфоаденопатии у детей 3-14 лет ассоциируется с повышением уровня коммитированных ЦТЛ (CD8+CD45RO+), старше 6 лет - с повышением уровня CD8+ лимфоцитов, в возрасте 7-11 лет — с увеличением количества наивных и коммитированных лимфоцитов, у детей с ЛАП в возрасте 12-14 лет — с повышением содержания наивных ЦТЛ (CD8+CD45RA+).

3 Развитие лимфоаденопатии у детей в возрасте 3-6 лет сопровождается увеличением в периферической крови уровня Ту5+ клеток, а у детей в возрасте 12-14 лет - CD8y5+ клеток.

4 Лимфоаденопатия у детей 3-14 лет характеризуется нарушениями апоптоза периферических лимфоцитов, что проявляется повышением уровня клеток, находящихся на обратимых стадиях апоптоза, снижением количества клеток, находящихся на поздних его стадиях, и количества CD95L+ клеток. Только у детей младшего возраста отмечается снижение готовности лимфоцитов к апоптозу, у детей старше 6 лет - повышение готовности ЦТЛ к апоптозу, у детей старшего возраста — повышение уровня апоптирующих лифоцитов.

5 Ведущим гематологическим проявлением лимфоаденопатии у детей 3-14 лет является наличие атипичных лимфоцитов; кроме этого, лимфоаденопатия у детей 3-14 лет сопровождается увеличением количества плазматических клеток, абсолютной эозинофилией и нейтропенней, ретикулоцитозом, тромбоцитозом, а у детей младше 6 лет дополнительно лейкоцитозом и абсолютным моноцитозом.

7 Нарушение соотношения наивных клеток с фенотипом CD45RA+ и коммитированных лимфоцитов с фенотипом CD45RO+ является прогностическим критерием развития частой и длительной заболеваемости у детей.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

Детям с лимфоаденопатией рекомендуется проводить иммунологическое исследование с определением уровня в крови различных популяций клеток с цитотоксической активностью (CD8+, Ту8+, CD8y5+), коммитированных ЦТЛ, параметров аннексинового теста и содержания CD95L+ лимфоцитов.

У детей с лимфоаденопатией рекомендуется определять содержание наивных CD45RA+ и коммитированных CD45RO+ лимфоцитов. Соотношение CD45RA+/CD45RO+ равное или большее 2,5 позволяет прогнозировать длительную и частую заболеваемость у детей с точностью 82,6%.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Ведь, Вера Владимировна

1. Александровский А.В., Кудашов Н.И. Роль изменений клеточного и гуморального звеньев иммунитета в развитии герпес-вирусной инфекции //Проблемы беременности. 2000. - №4. - С. 60-61.

2. Андреев И., Вапцаров И., Михов X., Ангелов А. Дифференциальная диагностика важнейших симптомов детских болезней. Пловдив: Изд. им. X. Данова. - 1962. - С. 182-197.

3. Андросова М.В., Годков М.А. Свойства и клиническая значимость субклассов IgG //Лабораторная диагностика. 2007. - №1. - С.12-17.

4. Анемии у детей: диагностика и лечение (практическое пособие для врачей) /Под ред. А.Г.Румянцева, Ю.Н.Токарева. М.: МАКС Пресс. - 2000. - 175с.

5. Анохин В.А., Хасанова Г.Р. Проблемы и новые направления в диагностике инфекционных заболеваний у детей //Рос. педиатр, журнал. 2000. - №4. -С.32-38.

6. Атауллаханов Р.И., Гинцбург А.Л. Иммунитет и инфекции: динамичное противостояние живых систем //Педиатрия. 2005. - №4. - С.46-61.

7. Ахмедова М.Д., Рахимов З.А., Ханходжаева А.А. Скрининг, клиника токсоплазмоза и эффективность лазеротерапии в комплексном его лечении //Эпидемиология и инфекционные болезни. 2004. - №5. - С.46-49.

8. Баранов А.А., Шиляев P.P., Чемоданов В.В., Рывкин А.И., Побединская Н.С., Безматерпых Н.А. Болезни детей раннего возраста. Москва-Иваново: ИГМА. - 1998. - 306с.

9. Баранова И.П., Чернышева Г.А., Лесииа О.Н., Дербина З.П. Клипико-лабораторные особенности токсокароза у детей //Педиатрия. 2002. - №4. -С.46-48.

10. Башмакова М.А., Бочкарев Е.Г., Говорун В.М., Парфенова Т.М., Савичева A.M. Хламидиоз. М.: Медицина. - 2000. - 68с.

11. Владимирская Е.Б. Механизмы апоптотической смерти клеток //Гематология и трансфузиология. 2002. - Т.47. - №2 - С.35-40.

12. Воробьева С.В., Чернявская Т.З., Пушкарева С.Г., Фролов Г.П., Мелкова К.Н. Рекомбинантные эритропоэтины в лечении анемии онкологических больных //Онкогематология. 2007. - №3. - С.76-80.

13. Вуд М., Банн П. Секреты гематологии и онкологии (перевод с англ). М.: Издательство Бином. - 2001. - 560с.

14. Вылков И.Н. Патология лимфатических узлов. София: Медицина и физкультура. - 1980. - 247с.

15. Гранитов В.М. Хламидиозы. //Учебное пособие для ВУЗов. М.: Медицинская книга. - 2000. - 15с.

16. Дворецкая С.А., Симакова Т.И., Видманова Е.Э. Детские инфекции на рубеже 21 века: настоящее и будущее //Мат. конф. С-Петербург. 1999. -С.34-35.

17. Демихов В.Г. Дифференциальная диагностика лимфаденопатий у детей //Пособие для врачей-гематологов и педиаторов. Рязань: МАКС Пресс. -2002. - 40с.

18. Демихов В.Г., Калинина Е.М. Дифференциальная диагностика лимфаденопатий у детей в условиях поликлиники //Российский педиатрический журнал. 2001. - №3. - С.43-45.

19. Демихов В.Г., Морщакова Е.Ф., Исакова О.В., Камушкина О.П. Титры IgG и IgM-антител к Chlamydia trahomatis у часто болеющих детей //Педиатрия. 2001. - №4. - С.90-92.

20. Демихов В.Г., Морщакова Е.Ф., Павлов А.Д. Роль гепсидина в патогенезе анемии хронических болезней //Гематология и трансфузиология. 2006. -№5. - С.31-34.

21. Джавец Э., Мельник Дж. Л., Эйдельберг Э.А. Руководство по медицинской микробиологии. Т.2. - М.: Медицина. - 1982. - С. 183-201

22. Долгих Т.И., Запарий Н.С. Лимфаденопатии инфекционного генеза: оптимизация диагностики и лечения на основе оценки иммунореактивности и интерферонового статуса при моно- и микст-инфекции //Иммунология инфекций. 2007. - Т.9. - №2-3. - С.221-222.

23. Евсюкова И.И. Королева Л.И., Савичева A.M., Фоменко Б.А. Особенности клинического состояния и персистенция Chlamudia trachomatis у детей, перенесших внутриутробную хламидийную инфекцию //Рос. Вестн. перинатол. -2000. -№1. С. 14-17.

24. Евсюкова И.И. Хламидийная инфекция у новорожденных//Педиатрия. -1997. -№3.-С.77-80.

25. Ершов Ф.И., Наровлянский А.Н. Мезенцева М.В. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях //Цитокины и воспаление. 2004.-Т.З. -№1. - С.3-8.

26. Иванова В.В., Родионова О.В., Букина А.А., Аксёнов О.А., Железникова Г.Ф. Инфекционный мононуклеоз; клиника, новые подходы к диагностике и лечению //Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2001. - Т.46.- №1. С.43-48.

27. Иммунологическая загадка беременности /Под ред. Н.Ю. Сотниковой. -Иваново: Издательство МИК.- 2005. 276с.

28. Инфекционные болезни (учебник для медицинских вузов)/Под ред. Ю.В. Лобзина. Санкт-Петербург.: СпецЛит. - 2001. - 543с.

29. Кассирский И.А., Алексеев Г.А. Клиническая гематология. М.: Медицина.- 1970. 800с.

30. Климашевская С.В., Гладышева М.В., Пузырев В.Ф., Уланова Т.И., Древцова И.Н., Волкова Т.Н., Обрядина А.П. Иммуноферментная диагностика герпесвирусной инфекции новые возможности. - Н-Новгород: Диагностические системы. - 2005. - 5с.

31. Клиническая иммунология и аллергология (учебное пособие) /Под. ред.

32. A.В. Караулова. М.: Медицинское информационное агентство. - 2002. -651с.

33. Клиническая онкогематология /Под ред. М.А. Волковой. М.: Медицина. -2001. - 576с.

34. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Богомильский М.Р., Пчеленок С.В. Топическая цитокинотерапия в оториноларингологии.- М.: Иммунохелп. -2007. 39с.

35. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Хорева М.В., Соколова Е.В. Система цитокинов, комплемента и современные методы иммунного анализа. М: РГМУ.-2001.- 158с.

36. Козинец Г.И., Высоцкий В.В., Погорелов В.М., Еровиченков А.А., Малов

37. B.А. Кровь и инфекция. М.: Триада - фарм. - 2001. - 456с.

38. Корсакова И.И., Пашанина Т.П., Елизаров В.В. Основные параметры иммунного статуса у лиц с герпетической и цитомегаловирусной инфекциями //Эпидемиология и инфекционные болезни. №3. - 2004.1. C.32-34.

39. Краснов В.В. Инфекционный мононуклеоз. Клиника, диагностика, современные принципы лечения. СПб.-Нижний Новгород: НГМА. - 2003. -44с.

40. Краснова Е.А., Васюнин А.В., Никифорова Н.А., Поздняков А.С. Ранняя диагностика инфекционного мононуклеоза у детей //Российский педиатрический журнал. 2004. - №5. - С.57-59.

41. Кузьменко JI.Г., Пушко Л.В., Арион В.Я. Иммунный статус здоровых детей //Вестник Российского университета дружбы народов. Серия «Медицина». 1999. - №2. - С. 17-21.

42. Куртасова Л.М., Голованова А.Е. Изменения иммунологических показателей и цитокинового профиля в динамике инфекционного мононуклеоза, вызванного вирусом Эпштейпа-Барр у детей //Медицинская Иммунология. 2007. - Т.9. - № 4-5. - С.541-545.

43. Луговская С.А., Почтарь М.Е. Гематологический атлас. М.: Триада. -2004. - с.340.

44. Лысенко А.Я., Константинова Т.Н., Авдюхина Т.И. Токсокароз //Учебное пособие. М.: РМАПО. - 1999. - 40с.

45. Малкова Е.М., Гавалов С.М., Гришаева О.Н. Хламидийная инфекция у новорожденных детей. Кольцово: Вектор-Бест. - 2002. - 48с.

46. Малышева О.А., Ширинский B.C., Кожевников B.C., Старостина Н.М. Состояние вегетативной нервной и иммунной систем у инфицированных вирусом простого герпеса //Эпидемиология и инфекционные болезни. -2001. №3. - С.37-40.

47. Марданлы С.Г., Кирпичникова Г.И., Неверов В.А. Герпетическая инфекция (простой герпес). Этиология, эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, лечение. Электрогорск: Эколаб. - 2005. - 48с.

48. Марданлы С.Г., Кирпичникова Г.И., Неверов В.А. Цитомегаловирусная инфекция. Этиология, эпидемиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика, профилактика. Электрогорск: Эколаб. - 2005. - 32с.

49. Масчан А.А. Эритропоэтин современная альтернатива гемотрансфузиям //Современная онкология. - 2006. - Экстравыпуск. - С.7-10.

50. Медицинские аспекты влияния малых доз радиации на организм детей и подростков. Сб. научн. трудов РАМН. Обнинск-Москва: РАМН. - 1992. -146с.

51. Мелкова К.Н., Пушкарева С.Г., Горбунова Н.В., Фролов Г.П. Цитокины в широкой клинической практике: чем уже, тем лучше //Эффективная фармакотерапия в онкологии, гематологии и радиологии. 2006. - №2. -С.6-12.

52. Миронова В.Г., Плахута Т.Г., Сосков Г.И. Дифференциальный диагноз лейкемоидной реакции у детей //Клиническая лабораторная диагностика. -2000. №1. - С.48-49.

53. Морозова В.Т. Цитологическое исследование лимфатических узлов //Клиническая лабораторная диагностика. 1997. - №11. - С.25-32.

54. Павлова М.П. Руководство по гематологическим болезням у детей. -Минск: Вышэйшая школа. 1988. - 271с.

55. Пархоменко В.П., Виноградов А.Ф. Инфекционный мононуклеоз у детей //Российский медицинский журнал. 2005. - №2. - С.56 - 58.

56. Педиатрия /Под ред. Н.Н.Володина (перевод с англ). М.: ГЭОТАР. - 1996. - 301с.

57. Пинегин Б.В., Хаитов P.M. Иммунодиагностика заболеваний, связанных с нарушением иммунитета //Гематология и трансфузиология. 1997. - №2. -С.40-43.

58. Пичугина Л.В. Изменение фенотипа лимфоцитов при некоторых патологиях. Москва: ВСМ. - 2006. - 36с.

59. Пичугина Л.В. Особенности системы IFNy у пациента с высоким рецидивированием простого герпеса //Цитокины и воспаление. 2005. -Т.4. - №3. - С.28-30.

60. Погодин O.K. Хламидийная инфекция в акушерстве, гинекологии и перинатологии. Петрозаводск: ПетрГУ. - 1997. — 168с.

61. Погорелов В.М., Козинец Г.И. Ковалева Л.Г. Лабораторно-клиническая диагностика анемий. М.: МИА. - 2004. - 173с.

62. Позпяк А.Л., Лобзин Ю.В., Сидорчук С.Н., Рысев А.В., Нуралова И.В., Михайлов Н.В. Хламидийные поражения дыхательных путей //Эпидемиология и инфекционные болезни. 2002. - №5. - С.46-53.

63. Покровская Н.Н., Портянко Н.М. Морфологические варианты лимфоаденопатий неясной этиологии у детей из зон, загрязненных радионуклидами (Пособие для врачей). М.: НИИ детской онкологии РАМН. - 1995. - 15с.

64. Поляков В.Е., Лысенко А.Я., Константинова Т.Н., Авдюхипа Т.И. Токсокароз у детей и подростков //Эпидемиология и инфекционные болезни. 2004. - №6. - С.43-46.

65. Попович A.M., Егорова В.Н. Интерлейкин-2: Опыт клинического применения. С-Петербург: Новая Альтернативная Полиграфия. - 2006. -40с.

66. Ратманова Г. А., Рывкин А.И., Шиляев P.P., Фадеева ОЛО. Лимфаденопатии у детей. Иваново: ИГМА. - 2002. - 132с.

67. Рахманова А.Г., Неверов В.А., Пригожина В.К. Инфекционные болезни (Руководство для врачей общей практики). СПб: Питер. - 2001. - 576с.

68. Редькин Ю.В., Одокиенко А.Ю. Основные иммунологические нарушения при рецидивирующей и атипичной герпетической инфекции //Микробиология. 2006. - №1. - С.39-43.

69. Родионова О.В., Аксенов О.А., Букин А.А. Инфекционный мононуклеоз: клиника, новые подходы к диагностике и терапии у детей (Пособие для врачей). СПб., - 2000. - 20с.

70. Ронин B.C., Старобинец Г.М. Руководство к практическим занятиям по методам клинических лабораторных исследований. М.: Медицина. - 1989.- 320с.

71. Руководство по гематологии /Под ред. А.И. Воробьева М.: Ньюдиамед. -2003.-Т 2.-280с.

72. Руководство по гематологии /Под ред. А.И. Воробьева. М.: Ньюдиамед. -2002.-Т.1.-280с.

73. Руководство по ультразвуковой диагностике /Под ред. П.Е.С. Пальмера (перевод с англ.). М.: Медицина. - 2000. - 334с.

74. Румянцев А.Г., Чернов В.М., Делягин В.М. Синдром увеличенных лимфатических узлов как педиатрическая проблема//Лечащий врач. 1998.- №3. С.49-52.

75. Рыбкин А.И., Русова Т.В., Ратманова Г.А. Лимфаденопатия у детей (клиника, диагностика, дифференциальный диагноз, наблюдение). -Иваново: ИвГМА. 2007. - 72с.

76. Самодова О.В., Вальков А.Ю., Титова Л.В. Клиника токсоплазмоза у детей //Эпидемиология и инфекционные болезни. 2002. - №4. - С.46-47.

77. Самуилов В.Д. Биохимия программируемой клеточной смерти (апоптоза) у животных //Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т.7. - №10. -С.18-25.

78. Серебряная Н.Б., Егорова В.Н. Новые подходы к терапии герпесвирусной инфекции (Пособие для врачей). С-Петербург: Новая Альтернативная Полиграфия. - 2007. - 28с.

79. Сидорова Ю.В. Т-клеточная клональность в диагностике лимфопролиферативных заболеваний //Автореферат дис. . канд. мед. наук. М. - 2004. - 24с.

80. Симбирцев А.С. Интерлейкин-2 и рецепторный комплекс интерлейкина-2 в регуляции иммунитета//Иммунология. 1998. - №8. - С.3-8.

81. Симбирцев А.С. Цитокины классификация и биологические функции //Цитокины и воспаление. - 2004. - Т.З. - №2. - С.16-22.

82. Соринсон С.Н. Инфекционные болезни в поликлинической практике (Руководство для врачей). СПб.: Гиппократ. - 1993. - 320с.

83. Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В., Лукина Н.С. Оценка инфекционного статуса женщин с самопроизвольным прерыванием беременности //Новости «Вектор-Бест». 2005. - №1(35). - С.9-11.

84. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования /Под ред. Е.А. Кост. М.: Медицина. - 1975. - 384с.

85. Стюф И.Ю., Бычкова Е.В., Накатис Я.А., Фабричников С.В. Влияние вируса герпеса 6-го тина на течение неспецифических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей //TERRA MEDICA. Лабораторная диагностика. 2007. - №2(14). - С. 16-21.

86. Тарасова И.С. Клинико-гематологическая характеристика детей при различных дозовых радиационных нагрузках //Автореф. дис. . канд. мед. наук. М. - 1997. - 25с.

87. Токсоплазмоз (памятка врачу). Новосибирск: Вектор-Бест. - 2005. - 8с.

88. Тумольская Н.И. Токсокароз: современный подход //Лечащий врач. — 1998. №3. - С.9-12.

89. Уразова О.И., Новицкий В.В., Помогаева А.П. Клинико-гематологические и цитогенетические проявления инфекционного мононуклеоза у детей //Эпидемиология и инфекционные болезни. 2004. - №3. - С.34-40.

90. Учайкин В.Ф. Руководство по инфекционным болезням у детей. М: Гэотар медицина. - 2001. - с.262-274.

91. Фильченков А.А. Каспазы: регуляторы апоптоза и других биологических функций //Биохимия. 2003. - Т.68. - №.4. - С.453-466.

92. Фильченков А.А., Степанов Ю.М., Липкин В.М., Кушлинский Н.Е. Участие системы Fas/Fas-лиганд в регуляции гомеостаза и функционировании клеток иммунной системы //Аллергология и иммунология. 2002. - Т.З. - №1. - С.24-35.

93. Хаитов В.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. М.: Медицина. - 2000. - 432с.

94. Чередеев А.Н., Горлина U.K., Козлов И.Г. CD-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий //Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - №6. - С.25-31.

95. Шабалов Н.П. Проблема классификации внутриутробных инфекций //Педиатрия. 2000. - №1. - С.87-91.

96. Шульженко А.Е. Герпетические инфекции человека. Перспектива диагностики и противовирусной терапии //Цитокины и воспаление. 2005. - Т.4. - №3. - С.76-81.

97. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М.: Медицина. - 1999. - 608с.

98. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии //Иммунология. 1997. - №3. - С.7-12.

99. Allhiscr J.N. McKnight T.A., Shank J.C. Lymphadenopathy in a family practice //J. Fam. Pract. 1981. - Vol. 12. - P.27-32.

100. Balfour H.H., Holman C.J., Hokanson K.M., et al. A prospective clinical study of Epstein-Barr virus and host interactions during acute infectious mononucleosis //J. Infect Dis. 2005. - Vol. 192(9). - P. 1503-1504. (№ 8)

101. Barber G.N. Host defense, viruses and apoptosis //Cell Death Differ. 2001. -Vol. 8(2).-P.l 13-126. (65)

102. Bauer S., Groh V., Wu J. Steinle A, Phillips JH, Lanier LL, Spies T. Activation of NK cells and T cells by NKG2D, a receptor for stress-inducible MICA //Science. 1999. - Vol.285. - P.727-729.

103. Belles C., Kuhl A., Nosheny R., Carding S. R. Plasma membrane expression of heat-shock protein 60 in vivo in response to infection //Infect. Immun. 1999. -Vol.67.-P.4191-4200.

104. Bitmansour A.D., Waldrop S.L., Pitcher C.J., Khatamzas E., Kern F., Maino V.C., et al. Clonotypic structure of the human CD4+ memory T cell response to cytomegalovirus //J. Immunol. 2001. - Vol. 167(3). - P. 1151 -1163. (70)

105. Boismenu R., Havran W.L. Intraepithelial y8 T cells exposed by functional genomics//Genome Biology. 2001. - Vol.2(l l):reviews 1031.1-1031.4

106. Boismenu R., Havran W.L. Modulation of epithelial cell growth by intraepithelial y5 T cells //Science. 1994. - Vol. 266. - P.1253-1255.

107. Brigden M.L., Au S., Thompson S., Brigden S., Doyel P., Tsaparas Y. Infectious mononucleosis in an outpatient population: diagnostic utility of 2 automated hematology analyzers and the sensitivity and specificity of

108. Hoagland's criteria in heterophile-positive patients //Arch. Pathol Lab. Med. -1999.-Vol. 123(10). -P.875-881. (№5)

109. Brlcic S., Aleksic-Dordevic M., Belie A., Jovanovic J., Bogdanovic M. Agranulocytosis as a complication of acute infectious mononucleosis //Med. Pregl. 1998. - Vol. 51(7-8). - P.355-358. (№ 14)

110. Butcher B.A., Denkers E.Y. Mechanism of entry determines the ability of Toxoplasma gondii to inhibit macrophage proinflammatory cytokine production //Infect. Immun. 2002. - Vol. 70(9). - P.5216-5224. (62)

111. Cangiarella J., Symmans W.F., Shapiro R.L., et al. Aspiration biopsyf and the clinical management of patients with malignant melanoma and palpable regional limph nodes //Cancer. 2000. - Vol. 90. - P. 162-166.

112. Carding S.R., Allan W., McMickle A., Doherty P.C. Activation of cytokine genes in T cells during primary and secondary murine influenza pneumonia //J. Exp. Med. 1993. - Vol. 177. - P.475-482.

113. Carding S.R., Egan P.J. y5 T cells: functional plasticity and heterogeneity //Nature Reviews, Immunology. 2002. - Vol.2. - P.336-345.

114. Carding S.R., Egan P.J. The importance of y5 T cells in the resolution of pathogen-induced inflammatory inmune responses //Immunol. Rev. 2000. -Vol. 173. -P.98-108.

115. Carney W.P., Rubin R.H., Hoffman R.A., Hansen W.P., Healey K., Hirsch M.S. Analysis of T lymphocyte subsets in cytomegalovirus mononucleosis //J. Immunol. 1981. - Vol.126. - P.2114-2116.

116. Catalina M.D., Sullivan J.L., Brody R.M., Luzuriaga K. Phenotypic and functional heterogeneity of EBV epitope-specific CD8+ T cells //J. Immunol. -2002. Vol. 168(8).-P.4184-4191. (51)

117. Chu Z.L., McKinsey T.A., Liu L., J.J. Gentry, M.H. Malim, and D.W. Ballard. Suppression of tumor necrosis factorinduced cell death by inhibitor of apoptosis C-IAP2 is under NF-kB control //Proc. Natl. Acad. Sci. 1997. - Vol.94. -P. 10057-10062.

118. Cohen P.L., Eisenberg R.A. Lpr and gld: single gene models of systemic autoimmunity and lymphoproliferative disease //Ann. Rev. Immunol. 1991. -Vol. 9. - P.243-269.

119. Dalton Jane E., Pearson Jayne, Scott Phillip, Carding S.R. The Interaction of y5 T Cells with Activated Macrophages Is a Property of the Vyl Subset //J. Immunol. 2003. - Vol.171. - P.6488-6494.

120. De Waele M., Thielemans C., Van Camp B.K. Characterization of immunoregulatory T cells in VEB-induced infectious mononucleosis by monoclonal antibodies //N. Engl. J. Med. 1981. - Vol. 304. - P.460-462.

121. Dinarello C.A. Biologic basis for interleukin-1 :n disease //Blood. 1996. -Vol.87.-P.2095-2147.

122. Duncombe A.S., Amos R.J, Metcalfe P., Pearson T.S. Intravenous immunoglobulin therapy in thrombocytopenic infectious mononucleosis //Clin. Lab. Haematol. 1989. - Vol.11(1). - P.l 1-15. (№ 9)

123. Ebihara Т., Sakai N., Koyama S. CD8+ T cell subsets of cytotoxic T lymphocytes induced by Epstein-Barr virus infection in infectious mononucleosis //Tohoku J. Exp. Med. 1990. - Vol. 162(3). - P.213-24. (№6)

124. Eder M., Geissler G., Ganser A. IL-3 in clinic. //Stem Cells. 1997. - Vol.15. -P.327-333.

125. Egan P. Carding S.R. Downmodulation of the inflammatory response to bacterial infection by уб T cells cytotoxic for activated macrophages. //J. Exp. Med. 2000. - Vol.191. - P.2145-2158.

126. Ekert P.G., Silke J., Vaux D.L. Caspase inhibitors //Cell Death Differ. 1999. -Vol.6.-P.1081-1086.

127. Enssle K.H., Fleischer В. Absence of Epstein-Barr virus-specific, HLA class 11-restricted CD4+ cytotoxic T lymphocytes in infectious mononucleosis //Clin. Exp. Immunol. 1990. - Vol.79(3). - P.409-415. (73)

128. Evci C., Akalin H., Heper Y., Yilmaz E., Bakir Ozbey S., Mistik R., et al. Retrospective evaluation of patients who were diagnosed as infectious mononucleosis between 1984-2005 //Mikrobiyol Bui. 2007. - Vol.41 (1). - P.95-100. (№ 16)

129. Fahrer A.M., Konigshofer Y., Kerr E.M., Ghandour G, Mack DH, Davis MM, Chien Y. Attributes of y5 intraepithelial lymphocytes as suggested by their transcriptional profile //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol.98. - P. 1026110266.

130. Faint J.M., Annels N.E., Curnow S.J., Shields P., Pilling D., Hislop A.D., et al. Memory T cells constitute a subset of the human CD8+CD45RA+ pool with distinct phenotypic and migratory characteristics //J. Immunol. 2001. -Vol. 167(1).-P.212-220. (33)

131. Ferrer R. Lymphadenopathy: differential diagnosis and evaluation //Am Fam Physician. 1998. - Vol.58. - P.l313-1320.

132. Fickenscher H., Hur S., Kopers H., Knappe A., Wittmann S., Sticht H. The interleukin-10 family of cytokines //Trends Immunol. 2002. - Vol. 23(2). -P.89-95.

133. Fijten G.H., Blijham G.H. Unexplained lymphadenopathy in family practice //J. Fam. Pract. 1988. - Vol.27. - P.373-376.

134. Fishwild D.M., Benike C.J., Engleman E.G. Activation of HLA-restricted EBV-specific cytotoxic T cells does not require CD4+ (helper) T cells or exogenous cytokines //J. Immunol. 1988. - Vol.140(6). - P.1994-1998. (70)

135. Fleisher G., Paradies J. Atypical lymphocytosis in children //Ann. Emerg. Med. -1981. Vol. 10(8). - P.424-426. (№ 18)

136. Fleisher G.R., Paradise J.E., Lennette E.T. Leukocyte response in childhood infectious mononucleosis. Caused by Epstein-Barr virus //Am. J. Dis. Child. -1981. Vol.135(8). - P.699-702. (№ 19a)

137. Girardi M., Oppenheim D.E., Steele C.R., Lewis JM, Glusac E, Filler R, Hobby P, Sutton B, Tigelaar RE, Hayday AC. Regulation of cutaneous malignancy by y8 T Cells //Science. 2001. - Vol. 294. - P.605-609.

138. Grotto I., Mimouni D., Huerta M., Mimouni M. , Cohen D., Robin G., et al. Clinical and laboratory presentation of EBV positive infectious mononucleosis in young adults //Epidemiol. Infect. 2003. - Vol. 131(1). - P.683-689. (№ 22)

139. Hanninen A., Harrison L.C. yST cells as mediators of mucosal tolerance: the autoimmuine diabetes model //Immunol.rev. 2000. - Vol.173. - P. 109-119.

140. Henry P.H., Longo D.L. Enlargement of the lymph nodes and spleen. Harrison's Principles of Internal Medicine, ednl4. Edited by Fauci AS, Braunwald E., Isselbacher K.J., et al. New York: McGraw-Hill. - 1998. - P.345-347.

141. Hodge T.W., Sasso D.R., McDougal J.S. Humans with OKT4-epitope deficiency have a single nucleotide base change in the CD4 gene, resulting in substitution of TRP240 for ARG240 //Hum. Immunol. 1991. - Vol.30(2). - P.99-104.

142. Hoffbrand A.V., Pettit J.E. Sandoz Atlas. Klinische Hamatologie. Basel: WOLFE. - 1993. -292p.

143. Hou S., Katz J., Doherty P.C., Carding S.R. Extent of y5 T-cell involvement in the pneumonia caused by Sendai virus //Cell. Immunol. 1992. - Vol.143. -P.183-193.

144. Hudnall S.D., Patel J., Schwab H., Martinez J. Comparative immunophenotypic features of EBV-positive and EBV-negative atypical lymphocytosis //Cytopmetry В Clin Cytom. 2003. - Vol.55(l). - P.22-28. (№1)

145. Ince M.N., Harnisch В., Xu Z., et al. Increased expression of the natural killer cell inhibitory receptor CD85j/ILT2 on antigen-specific effector CD8 T cells and its impact on CDS T-cell function //Immunology. 2004. - Vol.112(4). - P.531-542. (76)

146. Jacobs J.L., Libby D.M., Winters R.A., Gelmont D.M., Fried E.D., Hartman B.J., et al. A cluster of Pneumocystis carinii pneumonia in adults without predisposing illnesses //N. Engl. J. Med. 1991. - Vol.324. - P.246-250.

147. Jurado R.L. Iron, infections, and anemia of inflammation //Clin. Infect. Dis. -1997.-Vol. 25. P.888-895.

148. Kautmann S.H.E. y/5 and other unconventional T lymphocytes: What do they see and what do they do? //Proc. Natl. Acad. Sci. 1996. - Vol.93. - P.2272-2279.

149. Kim J.Y., Ahn M.H., Jun H.S., Jung J.W., Ryu J.S., Min D.Y. Toxoplasma gondii inhibits apoptosis in infected cells by caspase inactivation and NF-kappaB activation //Yonsei Med. J. 2006. - Vol.47(6). - P.862-869. (59)

150. Krabbe S., Hesse J., Uldall P. Primary Epstein-Barr virus infection in early childhood //Arch. Dis. Child. 1981. - Vol.56(l). - P.49-52. ( № 19)

151. Lambert C., Genin C. CD3 bright lymphocyte population reveal gammadelta T cells //Cytometry В Clin. Cytom. 2004. - Vol.61 (1). - P.45-53.

152. Laurence J. T-Cell Subsets in Health, Infectious Disease, and Idiopathic CD4hT Lymphocytopenia//Annals of Internal Medicine. 1993. - Vol.119(1). - P.55-62.

153. Lima M., Teixeira Mdos A., Queiros M.L., Santos A.H., Goncalves C., et al. Immunophenotype and TCR-Vbeta repertoire of peripheral blood T-cells in acute infectious mononucleosis //Blood Cells Mol. Dis. 2003. - Vol.30(1). -P.l-12. (№4)

154. Lindemann A., Mertelsmann R. Interleukin-3 and its receptor. In: R. Kurzrock, Talpaz M., editors. Cytokines: interleukins and their receptors. Norwell M.A., Kluwer Academic Publishers. 1995. - Cancer Treat Res. - Vol.80. - P. 107-142.

155. Locksley R.M., Killeen N., Lenardo M.J. The TNF and TNF receptor superfamilies: integrating mammalian biology //Cell. 2001. - Vol.104. - P.487-501.

156. Luft В J., Kansas G., Engelman E.G., Remington J.S. Functional and quantitative alterations in T lymphocyte subpopulations in acute toxoplasmosis //J. Infect. Dis. 1984. - Vol.150. - P.761-767.

157. Luo X.M., Zhou F.Y., Zhou Y.L., Wang X.X., Qiu L.N. Role of the В lymphocytes in children with infectious mononucleosis caused by Epstein-Barr Virus //Zhonghua Er Ke Za Zhi. 2004. - Vol.42(9). - P.701-704. (№ 2)

158. Malmgaard L. Induction and regulation of IFNs during viral infections //J. Interferon Cytokine Res. 2004. - Vol.24(8). - P.439-454. (66)

159. Maloy K.J., Powrie F. Regulatory T cells in the control of immune pathology //Nature Publishing Group. 2001. - Vol.2.(9). - P.816-822.

160. Martin S.J., O'Brien G.A., Nishioka W.K., McGahon A.J., Mahboubi A., Saido T.C., Green D.R. Proteolysis of fordin (non-erythroid spectrum) during apoptosis //J. Biol. Chem. 1995. - Vol.270. - P.6425-6428.

161. Mishra В., Mohan В., Ratho R.K. Heterophile antibody positive infectious mononucleosis //Indian J. Peiatr. 2004. - Vol.71 (1). - P. 15-18. (№ 17)

162. Miyahara M., Shimamoto Y., Yamada H., Shibata K., Matsyzaki M., Ono K. Cytomegalovirus-associated myelodysplasia and thrombocytopenia in an immunocompetent adult//Ann. Hematol. 1997. - Vol.74(2). - P.99-101. (№ 26)

163. Mogensen Т.Н., Melchjorsen J., Malmgaard L., Casola A., Paludan S.R. Suppression of proinflammatory cytokine expression by herpes simplex virus type 1 //J. Virol. 2004. - Vol.78(11). - P.5883-5890. (68)

164. Mule J.J., Marcus S.G., Yang J.C., et al. Clinical applications of IL-6 in cancer therapy //Res. Immunol. 1992. - Vol.143. - P.777-779.

165. Murray J.С., Bernini J.С., Bijou H.L., Rossmann S.N., Mahoney D.H., Morad A.B. Infantile eytomegalovirus-assoeiated autoimmune hemolytic anemia //J. Pediatr. Hematol. Oncol. -2001. Vol.23(5). - P.318-320. (74a)

166. Nagaeva O. The role of the decidual y8T lymphocytes in the immunobiology of human normal pregnancy //Departament of Clinical Immunology, Umea University: Umea. 2002. - 85p.

167. Na'jera O., Gonza'lez C., Toledo G., Lo'pez L., Ortiz R Flow Cytometry Study of Lymphocyte Subsets in Malnourished and We 11-Nourished Children with Bacterial Infections //Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 2004. -Vol.11(3).-P.577-580.

168. Noguchi M., Aruga S., Kato A., Oshimi K. Cytomegalovirus mononucleosis with severe thrombocytopenia //Rinsho Ketsueki. 2000. - Vol.41 (11). - P.l 1711177. (27)

169. Nomura K., Matsumoto Y., Kotoura Y., Shimizu D., Kamitsuji Y., Horiike S., et al. Thrombocytopenia due to cytomegalovirus infection in an immunocompetent adult//Hematology. 2005. - Vol.l0(5). - P.405-406. (№ 26a)

170. Ohga S., Nomura A., Takada H. Dominant expression of interleukin-10 and trasforming growth factor-beta genes in activated T-cells of chronic active Epstein-Barr vims infection //J. Med. Virol. 2004. - Vol.74 (3). - P.449-458.

171. Qui H., Sun Y., He L. Study on the expression of Fas ligand on the surfaces of human cytotrophoblasts in normal pregnancy //J. Tongji. Med. Univ. 2000. -Vol.20 (2). -P.166-168.

172. Reichert Т., De Bruyere M., Deneys V., Totterman Т., Lydyard P., Yuksel F., et al. Lymphocyt subset reference ranges in adult Caucasians //Clin. Immunol lmmunopathol. 1991. - Vol.60. - P. 190-208.

173. Reinherz E.L., O'Brien С., Rosenthal P., Schlossman S.F. The cellular basis for viral-induced immunodeficiency: analysis by monoclonal antibodies //J. Immunol. 1980. - Vol.125. - P.1269-1273.

174. Roy N., Deveraux Q.L., Takashashi R., Salvesen G.S., Reed J.C. The c-IAP-1 and c-IAP-2 proteins are direct inhibitors of specific caspases //EMBO J. 1997. -Vol.16. -P.6914-6925.

175. Rufer N., Zippelius A., Batard P., Pittet M.J., Kurth L, Corthesy P., et al. Ex vivo characterization of human CD8+ T subsets with distinct replicative history and partial effector functions //Blood. 2003. - Vol. 102(5). - P. 1779-1787. (82)

176. Salloum E., Lundberg W.B. Hemolytic anemia with positive direct antiglobulin test secondary to spontaneous cytomegalovirus infection in healthy adults //Acta Haematol. 1994. - Vol.92(l). - P.39-41. (№ 12)

177. Sanchez Echaniz J., Mintegui Raso S., Benito Fernandez J., Corral Carrancejo .T.M. Mononucleosis syndromes with serology doubly positive to Epstein-Barr virus and cytomegalovirus //An. Esp. Pediatr. 1996. - Vol.45(3). - P.242-144. (56)

178. Sandberg J.K., Fast N.M., Nixon D.F. Functional heterogeneity of cytokines and cytolytic effector molecules in human CD8+ T lymphocytes //J. Immunol. -2001. Vol.167(1). - P.l81-187. (85)

179. Schilling R.F. Anemia of chronic disease: a misnomer (editorial) //Ann. Intern. Med. 1991.-Vol.115.-P.572-573.

180. Shao L., Jacobs A.R., Johnson V.V., Mayer L. Activation of CD8+ Regulatory T Cells by Human Placental Trophoblasts //J. Immunol. 2005. - Vol.174.- P.539-7547.

181. Shapira S., Speirs K., Gerstein A., Caamano J., Hunter C.A. Suppression of NF-карраВ activation by infection with Toxoplasma gondii //J. Infect. Dis. 2002. -Vol.185. -P.66-72. (61)

182. Shires J., Theodoridis E., Hayday A.C. Biological insights into TCRy8+ and TCRa(3+ intraepithelial lymphocytes provided by serial analysis of gene expression (SAGE) //Immunity. 2001. - Vol.15. - P.419-434.

183. Shizuma T. A case of infectious mononucleosis complicated with severe jaundice //Kansenshogaku Zasshi. 2005. - Vol.79(2). - P. 149-152. (№ 15)

184. Silber M. Richards J.D., Jacobs P. Life-threatening haemolytic anaemia and infectious mononucleosis. A case report. //S. Afr. Med. J. 1985. - Vol.67(5). -P. 183-185. (№ 13)

185. Silins S.L., Cross S.M., Elliott S.L., Pye S.J., Burrows S.R., Burrows J.M., et al. Development of Epstein-Barr virus-specific memory T cell receptor clonotypes in acute infectious mononucleosis //J. Exp. Med. 1996. - Vol.184(5). - P. 18151824. (72)

186. Silins S.L., Cross S.M., Krauer K.G., et al. A functional link for major TCR expansions in healthy adults caused by persistent Epstein-Barr virus infection //J. Clin. Invest. 1998. - Vol.102(8). - P.1551-1558. (78)

187. Simon H.B. Evaluation of lymphadenopathy. Primary Care Medicine: Office Evaluation and Management of the Adult Patient, edn. 3. Edited by Goroll A.H., May L. A., Mulley J.B. Jr. Philadelphia: Lippincott. - 1995. - P.54-58.

188. Singh R., Kumar A., Creery W.D., et al. Dysregulated expression of IFNy and 1L10 and impaired IFNy -mediated responses at defferent disease stage in patients with genital herpes simplex virus-2 infection //Clin. Exp. Immunol. -2003,-Vol.133.-P.97-107.

189. Smith A.L., Hayday A.C. An сф T-cell-independent immunoprotective response towards gut coccidia is supported by y5 cells //Immunology. 2000. - Vol.101. -P.325-332.

190. Smith J.W., Longo D.L., Alvord W.G., et al. The effects of treatment with interleukin-1 alpha on platelet recovery after high-dose carboplatin //N. Engl. J. Med. 1993. - Vol.328. - P.756-761.

191. Srinivasula S., Ahmad M., Fernandes-Alnemri Т., Alnemri E. Autoactivation of procaspase-9 by apaf-1-mediated oligomerization //Mol. Cell. 1998. - Vol.1. -P.949-957.

192. Strater J., Moller P. TRAIL and viral infection //Vitam. Horm. 2004. - Vol.67. -P.257-274. (63)

193. Suda Т., Hashimoto H., Tanaka M., et al. Membrane Fas ligand kills human peripheral blood T lymphocytes1, and soluble Fas ligand blocks the killing //J. Exp. Med. 1997. - Vol.186. - P.2045-2050.

194. Sumimoto S., Kasajima Y., Hamamoto Т., Miyanomae Т., Iwai Y., Mayumi M, et al. Agranulocytosis following infectious mononucleosis //Eur. J. Pediatr. -1990. Vol. 149(10). - P.691-694. (№ 13a)

195. Suzuki Т., Hiromatsu K., Ando Y. Okamoto Т., Tomoda Y, Yoshikai Y. Regulatory role of y8 T cells in uterine intraepithelial lymphocytes in maternal antifetal immune response //J. Immunol. 1995. - Vol.154. - P.4476-4484.

196. Takahashi Т., Tanaka M., Inazawa J., et al. Human Fas ligand: gene structure, chromosomal location and species specificity //Int. Immunol. 1994. - Vol.6. -P.1567-1574.

197. Tomiyama H., Matsuda Т., Takiguchi M. Differentiation of human CD8(+) T cells from a memory to memory/effector phenotype //J. Immynol. 2002. -Vol.168(11). - P.5538-5550. (81)

198. Weiss G., Goodnough L.T. Anemia of chronic disease //N. Engl. J. Med. 2005. -Vol.352.-P.1011-1023.

199. Williamson H.A. Lymphadenopathy in a family practice: a descriptive study of 249 cases //J. Fam. Pract. 1985. - Vol.20. - P.449-452.

200. Wolter K.G., Hsu Y.T., Smit C.L., A. Nechushtan, X.G. Xi, and R.J. Youle. Movement of bax from the cytosol to mitochondria during apoptosis //J. Cell. Biol. 1997. - Vol.139. - P.1281-1292.

201. Wright J.G. Severe thrombocytopenia secondary to asymptomatic cytomegalovirus infection in an immunocompetent host //J. Clin. Pathol. 1992. - Vol.45(l 1). - P.1037-1038. (28)

202. Yokota S., Yokosawa N., Kubota Т., et al. Herpes Simplex Virus Type 1 suppresses the interferon signaling pathway by inhibiting phosphorilation of STATs and Janus kinases during an early infection stage //Virology. 2001. -Vol.286. - P.l 19-124.

203. Zhang J., Cado D., Chen A., et al. Fas-mediated apoptosis and activation-induced T-cell proliferation are de-fective in mice lacking FADD/Mortl //Nature. 1998. - Vol.392. - P.296-300.

204. Zu Y., Li C.R., Ma Z.X., Li D.F., Fu X.L. Roles of CD8+ CD28- T regulatory cells in acute infectious mononucleosis in children //Zhonghua Er Ke Za Zhi. -2007. Vol.45(3). - P.208-211. (№ 3)

Автореферат диссертации по медицине на тему Характеристика клеток с цитотоксической активностью и гематологических показателей у детей с лимфоаденопатией

Оглавление диссертации Ведь, Вера Владимировна :: 2008 :: Москва

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Ведь, Вера Владимировна, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Ведь, Вера Владимировна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций