Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Характер изменений эндогенных регуляторных пептидов в легком

! П 0 % з г

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ СИДЕРАЦИИ

САЖТ-ПЕТЕРБУРГСКШ ГОСУДАРСТВЕННЫМ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ВРАЧЕЙ

На правах рукописи

{¿ЕЖОВА Марина Евгеньевна

ХАРАКТЕР ИЗМЕНЕНИИ ЭНДОГЕННЫХ РЕГУЛЯГОИШХ ПЕПТЩОВ В ЛЕГКОЙ

14.00.16. - патологическая физиология

Автореферат даеергзции на соискание ученей стетони кандидата люлогическиг наук

СаЕкт-Пэторбург - 1992

Работа выполнена в Санкт-Петербургском государственном институте усовершенствования врачей.

Наутаыэ руководители - член-корреспондент РАШ, профессор С.А.СЙМБЙРНЕВ

доктор медицинских наук, про|ессор Н.А.ШЯКОВ

Офищшшаш дйВйЁаИы: доктор медицинских Наук, профессор В. В. ДАВЫДОВ

доктор биологических нар< В.А.ГОНЧАРОВА

Ведущее учреждение - Военно-Мэдищшская Академия

Заддта дассартащш состоится "_" ____ 1992 года

в *_" часов на заседании Сшцкадазированного Совета по присуждению ученой ствпэвн кандидата наук (икфр Д-074.16.02) в Санкт-Петербургском государственном инстатутэ усовершенствования вра-чэа.'

Адрес: 193015, Саякт-Петарогрг, ул. Салтыкова-Щедрина, 41

С диссертацией можно'ознакомиться в фундаментальной библиотека ГВДУВа.,

Автореферат разослан- "_" _ 1932 года

Ученый секретарь Специализированного Совета доктор мэдцщшских ьзук, профессор

л.И. ¡¡ВТА2В

ч. : J í

Tt¡3 Л "j ШССвОтл,,-.-! ?

СЫЦАЯ ХАРЛКГЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность теш. Легочная патология занимает одно из пэр-т. мест в обкей заболеваемости человека. Летальность при нэкото-?ых видах патология, в частности, при легочных осло&нениях, разбивающихся на фонэ перитонита или панкреатита, составляет 70-94S гри перитоните (Нуега Ï.M., 1936) и 33-45$ при панкреатите (Ваз-•an G.S. et al., 1987). Причиной столь высокой летальности явля-тся недостаточное знание всех зъеньев развитая патологического ропесса и как следствие - отсутствие Еф&зктивнкх лечебных средств. Это обстоятельство является поводом к проявлению интереса к этофлзполсгачэскЕм аспектам пульмонологии, :с поиска« н к обос-овакш новых катодов диагностики и печатая. В последние года собов место заняли исследования молекул средней: молекулярной accu и их олигспзптидяой Сракции, как вакзых показателей, токсе-ш (Малахова МЛ., 1990; Оболенский C.B., 1991; Шутаев А.И., 991 ). В олигспептздаой фракция идентифицируются рагуляторные епткды, язлящаеся чрезвычайно активными биорегуляторами (Ашма-ин W.ü., 1988; Becker К,i., 1985). Известно, что в нэйроэндо-ркнных клетках легкого образуется, но меньшей мэре, 10 регуля-орных пептидов (РП), ранее обнаруженных в телудочЕО-кишзчном рахте (Barnes P.J., 1988; Said S.I., 1989).Среди них тзкиэ, как эзоактЕвный иятестинзяъный пептид, нейротензяя, веаестзо П, со-зтостатин и др. Данные вещества являются регуляторами тонуса гхатэльшх путей и легочного кровобраценкя (Palner J.B., 1987).

Чрезвычайно важным является исследование нейроэндокринной гстчмк легкого при различных видах патологии. Изучение легочных • хложнений на фоне патологии внелегочьой локализации, в частнос-

Еелудочно-киаечксго тракта, еще вазяо и тем, что легкие и ¡лудочно-кикечкый тракт развиваются из одного зародьшэвого лис-сз и имеют взаимное влияние. По данным литературы сведения о ¡гуляторннх пептадах при легочных повреждениях незначительны, иако, доказана их роль в нарушении микропиркуляцки, в сокраше-н гладкой мускулатуры днхатэльшх путей, в гиперсекрециа слизи других пателогических ситуациях (Barnes P.J., 1986; Douglas S., 1990; Yaffisncto Y-, 1988). Тем не канзе.на сагодняший день т четких представлений об изменении концентрации рэгулягорных птидсв а крови на только при различных видах патологии, но и в

норме. Мало неучен вклад б этот процесс факторов, влияниях на уровни РП.

Указанные соображения предопределяют необходимость углублен ноге изучения нэйроэндокрянной системы легкого, особенностей изменения эндогенных регуляторных пептидов в норме и при патологических состояниях, а гак» комплексного исследования системы фак торов, определявших содержание этих биологически активных вещест: в легком.

Работз выполнялась в рамках задания ГШ СССР 23.02. '"Пульмонология" .

Цель исследования состояла в изучения характера и факторов влияющих на изменения веществ пептидной природы, в том числе регуляторных пеютдов в сосудистом русле легких в норка и нг фоне экспериментальных моделей воспаления.

Основные задачи:

I. Иссладовать ссдэркаше и изменение олигопетаидных (^акций крови в сосудистом русле малого круга наркотизированных яивог.шз. и на азотированных легких собак. ¿. Изучить характер изменений содержания регуляторных пептидов в сосудистом русле лэгких на фоне вторичных поражений органа при перитоните и панкреатите. 3. Оценить роль неся&^Зической протэазной и антипротеаз-но« активности илазтш крови на фенэ моделей острого воспаления, как возможного фактора, опрзделякцаго изменения регуляторных пептидов.

Научная новизна. Использование явализа артериозенозной разницы соде^аяпя регуляторных пептидов помогло ебнэрувзтъ цихлпч-ность процессов потребления я выдзлешм регупят рннх пептидов в сосудистом русле легких, сохраняются при денервацЕи органа (изолированное легкое) и на Яояе патологии. Установлено различие в характере изменения эндогенньз регуллторнкх пептидов на фонэ перитонита и панкреатита. Оценены возможные фактора регуляции •.тювнег: этих вэсеста в сосудистом русле легких б норгга я на фене перитонита и панкреатита.

Практическая зуачжюстъ раоото^ Иредлсхены экспериментальные модел.1 для исследования регуллт-оршх пеятпдоз а калом круге кровоэбрас&кпя. Еолучекные результата ксследсвйкся могут ;:?йтк

ркмэненне в диагностике ж терапии лзгочяых патологий, а таже нть использованными в учебном процессе, связанным с медацинскп-и и биологическими спзциальносгэ.я.

Основные положения, выносимые на заидту. В сосудистом рус-5 легких происходит интенсивный обмен РП, который включает в :бя как освобождение (выброс), так и пог^озение (рззруиение) гого класса веществ. По отяоЕеплю к общему количеству Ш эти >лебаяия составляют от 30 до 99%.

Процесс поглощения и разрушения носит щслпчный характер к в нормэ, так и прй денерващш легких. Эта закономерность так-характерна для вторичшх легочных повревдений на фоне острого спалевия.

В целом характер изменения РП соответствует закономерностям, ааруяэнннм для олигопептидаой фракции. В то жэ время каждый из зледуемых РП (вазоакгивкый интэставальный пешвд, кэйротензин, цесгво П, соматостатин) икеег свои особенности изменения в ус-2иях наркоза, денервации органа и на фоне воспаления.

Апробация работы. Материалы исследования были доложены на [фсренции ''физиология и патология органов дыхания" (Куйбышев, в), на международном симпозиуме "Легочное кровообращение" ста, 1989), на Убедительном Конгрессе Всемирного Общества сфизиологов (Москва, 1991).

Реализация работы. Научные разработки по теме диссертации цреш в работу отдала экспериментальной пульмонологии йнсти-э усовериенгвсвзния врачай г.С.-Петербурга, в учебный процесс • 5дры общей клинической патологии ГИДУВа.

По материалам диссертации имеется 9 публикаций, отражающих гльтата исследований характера изменений эндогенных регулятор-пептидов в легком.

Объем и структура диссертации. Дисертацкя излокена на 120 яйцах основного текста машинописи и состоит из введения, 4 , обсуадения результатов, выводов, указателя литературы, чающего 193 источника, в том числе 61 отечественный и 132 трзнннх. Работа иллюстрирована 16 рисунками и 30 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы д методы исследования. Основу рзботы составили

данные экспериментальных найладешй, шлученнке нг лабораторных животных. Характеристика экспериментального материала отражена в табл.1.

Таблица I.

Характеристика экспериментального материала

Колгчество

НаименовзЕзэ исследований

опытов определении

I. Эксперименты на напкотжжров ангкх животных

1.1. Отработка моделей нернтошта и панкреатита 40

1.2. Отработка кетодзка катетерЕзаигн сосудов 15

1.3. Изученаэ показателей внешнего дыхания а газоосыена в нор;,'.э и при патологии X 130 6£0

1.4. Оценка степени легочных повреждений ГрВВЕЫЭТрЕЧЭСКШ методом X 75

1.5. Исследование Оиотыческгх изменений в норке а на фоне воспаления 350 216о

2. Исследования регулятерных» 1егггндов на изолвровашш: легких 13 ' 576

Всего: 423 3509

х) Прщ дена иссладозгшяа, учтенные в других разделах

Ыатеряад охватывает результат опытов на 405 селах нелинейных крысах обоего иола массой 200-250 г а 18 изодгроБанных легких собак ссоаго пола массой 10-20 кг. В экспериментах использовалась только здоровые гквотше. ИЗвазившэ маилпулящи на крысах производили под внутриЗршанаым гексеналсвьм наркозом в дозе О, си-О, СИ г/"кг масса. Эксперименты на соськаз проводили под вну-тркЕсаныи гвхоеншавш наркогом {1% раствор) с премедккацаэй

ПрейЭДОЛОЫ (Б ИГ/КГ М8ССЫ).

ПерФзгааи иэслгроБаншк легкгх (О) аутологичной кровьв про-ьодали но штодяхе, эпгсанноЗ С.А.Садзирцеаи а соаз?. (1963) в

течение 45 мин. Пробы крови забирали до начала операции (исходные данные), затем через 3 икн.от начала перфузии, а далее с интервалом в 15 мин.

Вторичные повреждения легких изучали при кэлоесм перитоните и остром панкреатите. Перитонит у крыс вызывали путем введения в бршную полость через аньекционнус иглу каловой взвеси из расчета I мл на 100 г массы. Использовали 5? калоьуи взвесь, пропущенную через I слой марли. Модель острого панкреатита у крыс воспроизводили по методу, описанному В.А.Малхасяя и П.С.Слмазоряя (1Э72). Забор проб крови у наркотизированных ивтактных етзотзых и еиеот-ныг с моделированнам острым воспалением осуществляли путем катетеризации бркяной аортц и пргзого предсердия. Для перитонита были установлены интервалы 3,6, 18 часов от начала воспроизведения процесса, для панкреатита - I, 2 и 3 сутки.

В исходном состоянии к на этапах проведения экспериментов у гавотшх регистрировались {изиологические и биохимические показатели. Частота, форма и амплитуда дыхательных даккений регистр*,фовались с использованием специального датчика, фиксированного вокруг грудной клеткни подключенного к "Mlrgograp}i-3<i". Электрический сигнал с датчика преобразовывался термодалвтором ТЭД-1 (ЛОМО). Определение газового состава и кислотно-основного состояния крови производили на газовом анализаторе "Микроаструп" BMS-2 ("Radiometer", Дания). Определение гемоглобина осуществляли на анализаторе DSM Hemoxineter ("Radioaster". Дания). Количество хидкости в ткани легкого у наркотизированных етвотных расчитывали по массе сухого бескровного легкого (Сериков В.Б., 1989).

Общий пул молекул средней молекулярной касса (ЫСМ) определяли по методу М.Я.Малаховой с соаЕТ.(1937) осгвдением плазмы крови и эритроцитов, разведенных физиологическим раствором до исходного объема кроги, 15% трихлоруксусной кислотой и спектро-фзтсметрированием супернаганта на Specord OV VIS (ГДР) при длинах бслн от 238 до 300 ем. Количество олигопепгндной фракции (ОН) оценивали методом определения белка в сугорнатантз (Ьозгу О.Н., 1351 >.

Регу.литерные пептиды в плазме артериальной и венозной крови исследовали радиогыунолсгичэскЕМ мргодом (Yalow R.S., 1979) с по-чещъя тест-насорсв IKCSTAR Corporation (Ci£A). Изучали содержание зазсактишсго интестияальпого пептида (ВИП), аейротонзягз (КГ),

вещества П (ВП ) и соматостатша (С-Т ).

По завершении экспериментов регистрировали по группам количество погибших, крцс, для определения летальности.

Патоморфологическую картину изменений в ткани легкого изучали по общепринятой методике, с окраской срезов гематоксилин-эозином.

Статиетичес^ю обработку полученных резу ътатов производили на персональном компьютере IBM PC 1640 DD "Amstrad" (ФРГ) с чс-пользованием методов парамбтричэского (Стыодента-Фишера) м нэпа-раметрического (Ван-дер-Вардена) анализа.

Результата собственных исследований.

Исследование содержания МСМ и Oil в венозной : артериальной крови интактных наркотизированных животных показали, что суммарные концентрации этих веществ ьа эритроцитах практически r 2 ра-.т за превышают соответствующе показатели в плазме крови (МСМ ар-

териальной крови в 2,0 раза, венозной - 1,7 раза; ОП артериальной крови в 2,3 раза, венозной - 2,0 рзза). Различия ке между суммарными коецентрациями МСМ и ОД венозной и артериальной кровй как в плазме, так и на эритроцитах, не являются достоверными.

Для выяснения возможной роли легкого в изменении уровней МСМ и ОП была проанализирована артериовенозная разница концентраций (АВР). Подобный анализ результатов дал возможность подразделить экспериментальные данные на дно группы: с положительной и отрицательной Ш*. Получение данные средних АВР, известней объем циркулируют ft крови (СОД) (16 мд/кг массы животного) и минутный объем сердечкого выброса (МОК ) позволили нам перерасчитэть общее количество МСМ и ОП, циркулирующих в крови, а также величины условного потребления и выделения легкими этих веществ. Расчет производили с использованием коэф^миепта распределения объемов крови между артериальным и венозном отделами сосудистого русла. Ус-редненно зто соотношение составляет 1:1,3. При анализе расчетных показателей потребления и выделения легкими ОП установили усиление этих прсч-^ ~ов ш отновеш» к обаему пулу кем (до ïû% от общего количества, циркулирщеп в кроая оп, по сравнению с 4-11% ыя МСЫ).

S таблице 2 аредстазл-гны данные содержания РП, полученные у

наркотизированных интактных животных. Мы нй наблюдали какого-либо значимого различия по средним величинам концентраций ВИП и СТ в плазме венозной и артериальной крови. Ковдентращет же HI и BII отличались. Содержание НТ в плазме артериальной крови было выше, чем в венозной . Отличие уровня ВП в плазме венозной и артериальной крови составило около.33%,

Аналогично анализу результатов по содеря^анпию ЫСМ и ОП данные по концентрациям РП были разделены на две группы с положите-льтзльной и отрицательной АВР (тгбл.2).

Выл проведен расчет величин потребления и выделения' РП легкими. Исходя из средних величия АВР и величин объемов крови венозного и артериального сосудистого русла, установили, что в норме у наркотизированных животных в малом круге кровообращения еке-минугко могло меняться в ту или иную строну 30-5QZ общего- количества пептидов циркулирующих в крови (табл.3).

Нами был проведен корреляционный анализ концентраций FH и способностью легкого к их утилизации или высвобождению. Линейной зависимости ыеаду уровнем РП в венозной крови и значениями АВР установлено не было ( для ВИЛ г=-0,12; для НТ г=-0,56; для СТ г=-0,29; для ВП г=0,28).

Таблица 2

Содержание РП (пг/.чл) в сосудистом русле легких ■в норке у наркотизированных крыс (М+ш), п=24

Показатели ВИП кг- ВП СТ

Концентрация пептида артерия 20,2+1,9 28,9т2,9 136,4+13,8 9,1+0,8

зена 21,4+1,8 19,7+1,8 177,5+17,5 8,1+0,9

Огшщательная АВР 6,9+2,4 8,5+3,5 85,4+22,1 4,0+0,8

п,% ' 54 17 65 12*

Полокательнзя ■ А2Р 7,6+2,8 1.1,8+2,2 34,0+14,3 3,5+0,9

V* О • Л, О 46 83 45 53*

*) в 35S наблюдений АВР=0

таблица з.

Расчетные показатели суммарного количества РП, 1Д1ркулхрукск. в крови (пг), готрабяааае а ваделгнае £й лагстгг (nr/:,as)

Показатели в;ш НГ Ы1 СТ

Сугъгаоное количество пептида, гйркулируюпего в крови Потреблекге пептида легкими 334 на 379 I3S 2553 1360 Г

Выделение пептида дегзаки 122 16У 544 56

S потребления от суммарного количества (?5Е-1) 33 36 54 47

5 выделения от сукиного количества j 27 50 21 41

Анализ дагш показывает, что в мало;.: круге кровообращения кдэт цдошчаий процесс с индглэккек и дотргбяаввеы И1 я некзззо-тннм пейсмекором ргтмз.

На ЕзкешЕге ссдёргакпя РП. в крови назбольпее влияние сказывает центральная нервная сустеьз !ШО *i Еэлудочно-кипечшгй тракт (SKTJ, цо8то!,0 ныл изучена всзюгкая рель' легкого в данном процессе на фойе разоСгзеая органа с щс и ЮТ на кл. Работ?, била выполнена соемосткс с К.Е.СоловьеЕоЯ (1990).

Обработка экспериментальных дз;шкz по &2Р' ¡мкцэнтрзжП РП Елпвчзла i себя определение относительно?. казомпрвцзй кмдого показателя ио отнкзекоз к исходной с пезледушаг аналкго:; зтйх велгин. Учатывая то обстоят?л>стзо, что в процессе пер;узта ИЛ протекает дзз противоположных процесса - пкегобощек;;? и потребление РП, относительные результаты групшревалл по 3 дяшгхак: в первую группу величии воип; лрезкзаюакз 1,0 ;выделение

пептида?, во втеру» - веягтенк, но отл^чакдиеся от «сходной, в трьты.- - веягазы кзнгсе 1,0 (потребление пс-ГдТ/дэ ). Во ьтсру» группу входи п.. к те пзказатояя, которр? ко предал! содее, чек в 3 раза плр?врость кетода. Такса подход зснсагн на статус ш-чосхсм сраилш Рьн-дер-Взэдзка для подолгого рода изменений. В; ccfî случаях было вачЕлеко знатителт^сй екзенне уровня СГ ело

- Il -

3,65) з ncB'Jx?S7.8 уровня KT (50 1,43). Содержание ВП з 72S наб-nsneinri имело тенденция к увеличена) (5,54), в 28% наблюдения -- (0,46). СхсдньП грсцесс нсблздаля при изменении уров-

ня : в 60? ~1учз>*з - позкшеЕге ( 1,33 ), з з 40% - снигеыга

.Жализ получеккых еезультгтоз дает нам возможность предпо-ic-"îb. -тс легкие скзгавгвт значительнее злпянге на пезгоязке

:?а, ;ывяуяп:уете в хсови б сизиолсгичесхих условиях. Зто tr-rr'-iCvcaeTCH zois-y.œ, стгзкаютя произсск потрзблеьз'.я р гндз-

зтцх земств. ¿ ™о , "процент потребления или ш-:еле:-"л "СМ не гсевхггет ICS, з отнесении их пептгдвсЗ $рагася ггг'-'.глег'.т "зтззеп^пглаиия эта процессов (до 40$). «сслвгсзанпд /рсЕШ'Л РП показали дальнейзиЯ рост процента потребления и гнде-пезпд: 30-5CS у Езрхотизтрозггкых лгвозшх s до 70-ICCS на яд.

В ряде — *ст больнее внимание /делится биологически.-,! p;r;-."-.м, в чйстксзтл, сколс-чсссзкм ритмам. Скслочассвнз колебания ycr2K:s.-°Hä для согер?.гнкя белнз. активности фэрмен-

:сз, существует ртггезез в фунздгоопрсБЗнги ЦНС и ХХГ (Spoic-cßt ¿.Я., EsiaeBï H.i., 1928). Б прсвэдепшх экспериментах процесс г-сберэ крови у груш нгркетизирсваянух гивотньтс г из перфугпся-::сгс- гезтурз XZ зрс>?гхссм в течение 40-со ;ан. Видаю, mcsho

что колеевнт.ч бгггльгах уровней \'C?,í, f,rî и PU стра-■•zz? н~ гслькэ усредненные сколочзссв^е рятга изкэветая содэрза-?ля этих гет.естз. но я частично paiera легкого.

3 нелят изучения изменения Fiî s мадоч кругэ крсЕссбразезкд О-Н? острого воспаления чэ.делирнвз пи перитонит и острый пьяк-:.а?тпт, приводящее к втеричнцм лзгочнзд повреждениям. Выло от:/э-•еко, ггг уровень леталк-.остл кз фене перитонита ссст2еял "375 :-: .3-ти часа:? развитая пропзеез, а пра. панкреатите достигала мак: дальнего значения но вторые сутки (40® Яри orvorpe лагкпх ъ? негрпггии ягезткых ну фоке обе>е жделеЗ- ргбдэдаяи множественные -■v.r.: кроесез.~йния и о.'—тр^е гены чтел^ктаяа легочнсЗ тчшл. При sH^.ni'.se содержания золы в ткаяя легкого устзновйлп, что фгн» иернгскатэ процент содсрясккя гяясос-а в ткана уьелачл-е 3-х ччсов, дзетам« к 18-ти часам 83й (в коятрслъясЗ -pvrrro у а i. onpsiser не себя енгсшяе то, что через 6 чееоз ov процесса гчецгнг- ссдер?.£ния воды стагзотся практкчеекг до

- т -

контрольного значения (75,7%), что шжно объяснить активизацией функция лимфатической дренажной системы. На фоне развития панкреатита процент содержания вода в ткани легкого в первые сутки увеличивался до 79%, достигая во вторые и третьи сутки 83Ж и 82% соответственно.

Показатели внешнего дыхания (Щ; Твцд<; твд/ Твцд_)

на фоне перитонита претерпевали достоверные изменения к 18-ти* часам. К этому сроку частота дыхания достигала своего максимального значения, что было обусловлено выраженным сокращением дыхательного цикла. У тавотных с панкреатитом эти показатели изменялись достоверно на всех сроках наблюдения. Отмечено выраженное тахипноэ с максималънвм значением ЧЦ на вторые сутки. В этом временном интервале аарегестрировэво наиболее яркое изменение всех показателей.

Морфологические исследования ткани легкого отракавт общность патологических изменений лёгочной ткани как при перитоните, так и при пашфеатите: обильная инфильтрация форменными элементами крови, утолщение' межальвеолярных пространств, выраженный отек слизистой бронхов и альвеол. Однако, на фоне перитонита более заметен отек слизистой бронхов, а при панкреатите отмечены микроателэктазы.

Цри изучении показателей газообмена на фоне перитонита и панкреатита регистрировали нарушения газообменной функции легких. При перитоните уже через 3 часа развития процесса и далее через 6 часов в артериальной крови наблюдали достоверный дыхательный алкалоз - 7,495+0,009 (по сравнению с контролем 7,461+0,009); гшо-капнию достоверную на всех сроках (до 22,47+0,84 мм рт.ст.; контроль - 30,15+0,98 мм рт.ст.) при отсутствии гшоксемии Ра02 -104,44+1,28 мм рт.ст. Через 3 часа от начала развития процьсса отмечена гемоконцентрация. При панкреатите в артериальной крови наблюдали дыхательный елкалоз, достоверный в перше и вторые сутки процесса (7,516+0,010), незначительную гиперкапнию (32,41+0,67 мм рт.ст.) и гшероксш) (125,69+2,48 мм рт.ст.), обусловленную вероятно, гипврвенталяцией. На вторые сутки панкреатита отмечена достоверная гемодклвдия. Таким образом, анализ показателей внешнего дыхания, состояния легочной ткаки (содержание кидкосте в легком и патсморфологические изменения )и газообменной функции

10псих подтверждает наличие умеренных вторичных легочных поврэ-щений на фоне острых воспалений.

Исследования содержания МСМ и ОН при остром воспалении ползали, что пр.. перитоните концентрация ШЧ в плазме артериаль-:ой крови имеет тенденцию к повышении, на эритроцитах достоверно гавкиается через 6 часов воспаления. При панкреатите содержанке ICW достоверно снижалось в плазме артериальной крови на всех сро-ах наблюдения, а на эритроцитах имела тенденции к поешзнюо с оксимальнкм значением на вторые сутки процесса - 50,8+1,6 усл. д.(контроль - аз,3+1,2 усл.ед.). Интенсивность процессов потрз-ления и выделен®» МСМ в сосудистом русле легких как при перито-ите, так и при панкреатите не отличается от норш (7 - 12%).

Содержание ОП фракции общего пула МСМ на фойе перитонита остоверно повышается в плазме и на эритроцитах артериальной крои уже через Э часа воспаления, достигав максимальных значений б-ти часам: плазма - 15,8+0,9 мкг/л, эритроциты - 32,7+3,2 кг/л (контроль - 6,5+0,5 мкг/л и I3,7jI,I ют/л соответственно), ри панкреатите концентрация ОП достоверно возрастала в плазме ар-зриальнсй крови Только вз третьи сутки процесса 9,7+0,9 мхг/л, на зритрсцйтЗ-i Яойыйеййв содержания ОП наблюдал! на всах сро-5Х (до 1505»). Интенсивность процессов потребления и выделения 1 в малом круге кровообращения на фоне острых воспалений всз-зстает до 60% в отличие от норш (до. 402). Таким образом, на фо-; вторичных легочны*" повреждений установлено сохранепиэ цгаслич-зсти процессов потребления к выделения, а также интенсификация гих процессов з отношении ОП фракции.

Биохимические исследования показали, что вторичные легочные звреждения, возникающие на фоне острого воспаления, сопрововдг-'ся изменениями концентрации некоторых РП в плазме крови в малом цте кровсобрацения (табл.4). Обращает на себя внимание тс,что пт перитоните на фоне достоверного повыпения содержания ВИЛ в козиой крови ¡250i), з артериальной крови этот показзтоль не няется. При панкреатите наслюдели достоверное повышение кон-ктрации пептида в первые двое суток как в генозной, таи г зрте-:злгкой к реви <160% и 225% соответственна). Уровень Iff на фоне рптонит* достоверно возрастал и в венозной, и з артериальной сья ¡25'Л и 155?).; при панкреатите при достоверном повышении

содержания КЗ венозной крови на всей сроках наблкденкя (до 1901), в артериальной крови концентрация лепгсда не менялись. Содержание Ш в венозной крови при перитоните достоверно снижалось через Е часа от момента воспроизведения процесса (742), в дальнейшем достигая контрольных значений к 18-ти часам. В артериальной кроЕИ концентрация пептида имела тенденцию к росту и достигала достоверного повышения к 18-тп часам перитонита (1455Б). При панкреатите наблюдали скажете уровня ВП б венозной крови на третьи сутки процесса (50%), а в артериальной крсв:: достоверного изменения концентрацией отмечено нэ было. Достоверные изменения содеркания СТ е венозной и артериальной крови при перитоните отмечены черзз 6 часов воспаления (180 и 345% соответственно). При панкреатите и в венозной, к в артериальной крови концентрация пептида достоверно повышалась на всех сроках наблюдения о максимумом на вторые сутки процзсса (600 и 580$ соответственно).

Для оценки процессов происходяпих с РП в сосудистом русле легкого были использованы данше средних значений АЗР концентраций, изучавши пептидов, а также показатели гемодинамики (0UK и МОК), гематокрита, получешне в назей лаборатории на идентичных экспериментальных моделях (Конычев А.В., 1986; Михайлов А.Б., 1933). Подобный подход позволил на« оценить обсие закономерности процессов потребления и выделения РП в сосудистом русле легких и определить различия, характерные для отдельных пептидов.

Отмечено, что на фоне острых воспалений цикличность процессов, происходящих в малом круге в отношении пептидных веществ, сохраняется к в отношении РП. Интенсивность процессов поглощения и выделения возрастает в среднем до 90%. Выявлены отличи?, этих процессов для конкретных пептидов на фс-не различых моделей. Так, для ВИЗ характерен рост потребления на фоне перитонита с одновременным сшпэнием выделения в сосудистом русле легких. При панкреатите, напротив, выделение ВИЛ легких® превышает его потребление. В отношении ИГ отмечено преобладание потребления на фоне обеих экспериментальных моделей. Для BE к СТ установлено уменьг~ниэ потребления и рост выделения пептида как на фоне перитонита, та:-: и панкреатита, однако на третьи сутки панкреатита обнаружен высокий уровень потребления СТ в сосудистом русле легких.

На процессы, происходящие с РП в легких могу" оказывать вли-

Таблица 4

Содержание рогуляторных пептидов а малом круге кровообращения на фона острого воспаления (пг/мл), М+т

Локадп- ВИЛ Нейротензин Вецестпо II Соматостатин

■гелк : ; : ; " "

Вена Артерия Вена Артерия Вен в Артерял Бена Артерия

йо.чтроль 21,4+ 1,8 20,2+1,3 19,7+1,6 28,9+2,9 177,5+17,5 136,4+13, 8 6,1+0,9 0,8 перитонит (П-12)

xx xx xx к

3 часа 63,1+12,1 28,0+4,9 49,4+3,Ь 40,4+1,8 131,5+12,9 132,1+16,3 6,4+О,Ь 7,1+1,3

"" X " XX ■ XX " ~ XX

6 часов 30,3+4,9 20,3+1,и 47,2+3,3 45,4+4,0 160,0+25,5 146,0+19,2 14,9+ 3,9 30,9+ 8,3

X"/ ~ X ~ XX

18 часов 23,2,8 21,7+2,9 44,9+2,1 40,7+2,6 171,0+23,2 196,6+30,4 7,4+ 1,9 9,3+ 2,1

Пошраатит -

УХ XX XX XX XX

1 сутки 34,7+ 5,1 38,8+5,7 38,2+3,3 35,6+3,В 144,6+25,9 129,5+25,2 17,4+ 2,7 32,0+ 8,6

2 сутки 34,4+47,0+8,9 33,5+ОД 23,1+6.7 158,6+23,7 116.8+17,3 48,0+29™ 52,2+14,4

3 сутки 29,1+ 6.1 29,9+6,1 35,6+3$; 36,6+3,7 99,0+20,5 130,0+22,4 35,2+ 9*6 25,2+3*5

х - р»¡.0,05 хх - р^0,01 ххх - р<0,001 по сравнение с контролем

яше многие фактора, как то; интенсивность образования пептидов из белков иУшы пэптвдов-предпественников; выделение ИЗ из найро-секреторных клеток; наличие продуктов гидролиза РП; состояние транспортных единиц для- РП, уровня альбуминов, способных связывать РП в плазме крови; активности специфических и несдецифичес-ких протааз.

Результаты, подученные в экспериментах, направленных на выяснение роли не специфической ггротеазнсй и ангшгротеазнсй активности, показали, что на фоне перитонита происходят повышение активности трипсина (ТР) через 3 часа процесса, а затем к 18-тк часам дстоверное снижение как в венозной, гак и артериальной: крови (до 30%). Изменение активности ингибитора ТР - Орантитршсина (а^-АТ) имеет1 сходный характер, но в отличиэ от ТР изменение активности достоверно лишь через 3 часа перитонита (325%). При панкреатите изменения активности ТР и о-г-АТ достоверны как в венозной, так и в артериальной кроЕИ на всех сроках наблюдения, однако, если активность ТР была максимальной во вторые сутки воспаления (146Ж), а затем снижалась до 45$, то активность а--АТ повышалась на всех сроках развития патологии (до 3803). Необходимо отметить тот факт, что-на третьи сутки панкреатита на фоне снижения активности ТР, по артериальной крови отмечена груша данных превышавдих средние значения в 2 раза. Как правило, высоким значениям активности ТР в артериальной крови на этом сроке соответ-ствавали наиболее ярко выраженные нарушения показателей газообмена и внешнего дыхания. Анализ АРВ показал, что для данной системы также характерен "цикличный процесс изменения активност:: в малом круге кровообращения.

Прямей зависимости шкду изменением содержания конкретных регуляторных пептидов в плазме крови и изменением активности ТР и а^-АТ установлено не было. Вероятно, не специфические протеазн могут участвовать в процессе освобождения РП из комплекса пептид - транспортный балок, но в процессе деградации РП в сосудистом русле легких, вероятно, большее значение имеют специфически тканевые таптидазы ели пептидазы зидотелия легочных сосудов.

Однако, сопоставление данных изменения содержания 0П и акг чинности ТР и а^-АТ, показало, что при перитоните .прослеживается зависимость мекду активностью ТР и ат-АТ, тогда как при пан-

кр°агите установлена зависимость мзкду содержанием ОП в плазме крови и активность» а^-АТ. Вероятно, можно гоюрить об обратной связи в регуляции протеолиза.

Полученные результаты, в конечном итоге, можно ж нужно интерпретировать з контексте с физиологической активность» и направленностью действия РП. .

Рост потребления ВИЛ легким на фоне перитонита с одновременным снижением выделения пептида в сосудистое русло, а при панкреатите, напротив, выделение ВИП, превышающее потребление, особенно во вторые сутки процесса, можэт иметь слэдувдее объяснение. ВИП, продуцируемый в вейрозддодринннх клетках (НЗК>, как ЭСТ, так и лэгкпх, является вазо- я брояходшгататором, Кроме того, он считается одним из важных протекторов воспаления, поскольку способен опосредованно иягибировзть дэгрануляцст тучных клеток и снижать агрегацию тромбоцитов <Barnes P.J..198T; Said s.l., 1589}. Достаточно быстрое развитие перитоннта и следующие зэ этил нарушения дакроцяркуляции и газообмена в легком, вероятно, приводят к истощению вш, депонированного в НЭК легких. Рост потребления ВИН, высвобождающегося из разрушенных НЗК ЯКТ, в сосудистом русле легких обусловлен еэ< Зходамостью компенсировать икекцке место нарушения. При панкреатите, как более длительном, пролонгированном патологическом процессе, преобладание выделения пептида можно рассматривать с нескольких сторон. С а дней стороны, это иокэт быть пассивной диффузией ВИЛ из поврежденных НЭК легкого. С другой cioposu, подобный процесс может быть обусловлен ростом в артериальной крови активности TP, являвшегося активатором агрегации тромбоцитов, и таким обрчзш, выделение ВШ заправлено на поддержание газеос-тгза.

Пзйротензин обнзрузея в НЭК легкого, расположенных периброн-геально, з очань малых количествах. Наиболее известной функцией ГГ является способность к деграиуляция тучных клеток, а также вымазывается мнение, что св участвует в поддержании тонуса бронхов .Barries P.J., 193*?). Вероятно, что, именно, эти функции реализуйся при потреблении ггзпгада, продуцируемого в ЖТ в больяих ко-ачеетаах, чс-ы он представлен з легких

Уменкп&ниэ потреблзния к рост выделения ВП в сосудистом т>у-is легких га фона ос*рьа: воспалений согласуется с его фязиологи-с-ско.1 Лушодмй бронхо- и Бззсконстрнктора (Lundberg J.и., et al.

1985). Вероятно, лэпсов пытается вывести в кровоток вецества усугубляющие повреждение. Помимо этого, известно, что для острых воспалений на фоне укеньсеям ОЦК характерны вазодилататорше изменения в больном круге, приводяда к гибели части гивотных от гипотоееи, таган образом, BII ыогит вносить cbcí; вклад в шддержа-жаше тонуса сосудов большого круга кровообращения.

Соыагостагин является моемым эндогенны»! ингибитором многих биологически активных вецоств, ухудшает газообмзн б легком (Kael-Зе й. et al, 1982; Palmer J.B., 1987), поэтому снижение потребления его в малом круге кровообращения л резкое увеличение выделения на фоне обеих моделей воспаления мове? бить объяснимо, однако, Еа третьи сутки панкреатита установлен высокий уровень потребления. Вероятно, активация тканевых Феркзнтов на фоне панкреатн-та ведет к метаболическому дисбалансу в сосудистой системе легких, т.о. потребление СТ имеет, своего рода, протекторное значение. Рост выделения СТ при панкреатите может быть связан с нарастанием актизкостЕ трипсина в артериальной крови и необходимостью улучЕЭния газообменной функции.легких. С этой точки зрения, можно говорить об изменениях уровня СТ как о реакции, направленной на подцерзанве гоиеостаза.

вывода

1. В опытах на наркотизированных животных в норме, на фоне воспаления, а также на изолированном легком, перфорируемом ауто-логичной кровьв, установлена цикличность потребления и выделения РП в сосудистом русле малого круга кровообращения. Сохранение цикличности в изолированном декервированнои легком подтверздаэт зн-догснность процессов и участке в регуляции автономной пептид&рги-ческой системы легкого.

2. В сосудистом русле изолированных деиервированных легких в условиях физиологическсго реггма перфузии при разобценип органа с ВДС и ЖКТ, элиминация ис крови соыатостатнна и высвобождение в кровь найротензина отличаются от процессов, зарегестрированных на целостном организме, что не характерно для ВИЛ и ВП.

3. Как в норме, так е на фоне острого воспаления интенсивность обмена олигопептидов (потребление и высвобождение з кровь) в сосудистом русле легких составляет максимально 40S от обцвго количества, циркулирующих в крови ОП. Для идентифицированных РП

это? уровень составляет 50% в корме и до 992 прт' патологии.

4.. Установленный факт высокого уровня потребления ЗИП на фоне перитонита и выделение на фоне пакрэатата, подтверздазт универсальность этого пептида, как потенциального и наиболее мощного протектора воспаления.

5. Несмотря на общие закономерности поражения легких при перитоните и панкреатите я идентичность изменений, характерных для ВП и КГ, выявлены особенности процессов потребления и выделения ВИЛ л CT, что в определенной степени мояе? быть связано с различиями в регуляции протеслиза, а такяе неоднородный условиями взаимодействия ГП с мембранными структура?®.

е. В процессе всспзлзвия, не различных его стадиях имеет квоте изменения иротаазноЯ и антипратеагно! активности плазмы как артериальной, гак я венозной крови с незначительными различиями между ними. С учетом динамики изменения ОП и РП можно полагать, что потаю прстеолиза на эти изменения "леют определенное злпя-нко процессы взаимодействия пептидов с эвдотежемсосудов ^легких., СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕШ ДЕССЙ£РТАЦИН

1. Neuripsptides and Lung, (with Beljaicov {I.A., Soiovjova I.E. et al.)//Int.Symp."PjInraary Circulation", Prague, 1989.-РИ2.

2. Вероятное участие легких в поддевании уровня рзгуляторных пептидов; соавт1. Коровин Н-.Ф., Ямпольская л. И. и др. )//Конф."Актуальные вопроса патологии дыхания", Куйбнкев, i939.-g.88-6s. •

3. Регуляторные пептиды в лэл<ом (соавт.Беляков H.A., Коровин к.ф. и др. )//!V Бсэсоюзя.съезд пагсфиз., Кишинев, 1У89.-С.1С8633

4. Нейропептидн при острых, легочных, повоездениях на фонэ острого панкреатита ^соэзт.Р^опйхаяов В.А., Абдурахиков С.М. а др.)// Всесошн.съезд шлодах хирург., Ташкент, 1991.-с.57.

5. Changes of Regulatory Peptides In Lung Tessela (with. BeljaKov Ч.А., Solovjova I.E.)//Consi.Corgr.Int.Pat^ophys.Soc., Ыозеох,

1991 . -P. 141.

6.гРегулятор1ше пептиды в легком (соавт. Бзляноз H.A., Соловьева 1Д.Б.)//Успехи физтая.наук.-1992.-N.2.-С.

7. Характер изменения содержания регулйторшх. пептидов з сосудистом русле легких (Беляков ¡i.A., Соловьева й.Е.)//Физиол.нуснал км.и.М.Сеченова.-Г992.-М.З.-О.

3. Регулятррная активность легких (созвт.Ожбярцев С.А., Малахова л.Я. к др.)//Труды Kayчн.Совета PAJffi.-I992.-0.

J. Обоснование применения пептидных препаратов (бронхслич, цуль--гадн. кадиоэга), соавт .Беляков H.A., Конычев д. в. и до. )//!&!д.

Cösсм I r/i' Койро'г-сГ.ТетГГЛЩа Зак.^еа,гло. -с~сдлеж!.

Погппсзно ¿¿3,С3.9?г»