Автореферат и диссертация по медицине (14.00.15) на тему:Гистологические и молекулярно-биологические особенности патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки после неоадъювантной терапии
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.15
Автореферат диссертации по медицине на тему Гистологические и молекулярно-биологические особенности патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки после неоадъювантной терапии
На правах рукописи
Швец Наталья Александровна
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ И МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПАТОМОРФОЗА ПЛОСКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ШЕЙКИ МАТКИ ПОСЛЕ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ТЕРАПИИ
14.00.15 - патологическая анатомия
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
003450934
Москва, 2008
003450934
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждени высшего профессионального образования «Московски государственный медико-стоматологический университет» (ректор Заслуженный врач РФ, доктор медицинских наук, профессо О.О.Янушевич) Федерального агентства по здравоохранению социальному развитию Российской Федерации
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор
ЗАИРАТЬЯНЦ Олег Вадимович
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор
ВОЛОЩУК Ирина Николаевна
доктор медицинских наук профессор
РЯБОШТАНОВА Елена Ивановна
Ведущее учреяедение: Государственное учреждение Научно исследовательский институт морфологии человека Российско академии медицинских наук
Защита состоится » /¿Л ¿й^/ 2008 г. в часов н
заседании диссертационного совета Д 208.041.02 при ГОУ ВП «Московский государственный медико-стоматологически университет» Росздрава. Адрес: 127473, г. Москва, ул. Делегатск; д.20/1.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВП МГМСУ Росздрава по адресу 125206, г. Москва, ул. Вучетича, д. 10а.
Автореферат разослан
Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, професс
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования. Несмотря на существование в настоящее время четкой концепции о фоновых процессах, предраке и раке шейки матки (РШМ), а также надежного и доступного контроля (колыюскопия и цитологический метод), РШМ до настоящего времени остается актуальной проблемой онкогинекологии (Прилепская В.Н., 1999; Чиссов В.И., 2005; Franco E.L., 2001).
По данным Международного агентства по изучению рака, в 2002 г. в мире было зарегистрировано 470.600 новых случаев РШМ и более 200.000 смертей (Харитонова Т.В., 2004; Петрова Г.В., 2005). В общей структуре заболеваемости органов репродуктивной системы женщин в России РШМ занимает 3-е место после рака молочной железы и тела матки (в 2002 г. 12.285 новых случаев и 6.288 смертей). Стандартизированный показатель заболеваемости РШМ в 2002 г. составил 11,6, а смертности - 5,1 на 100.000 женщин (Туляндин С.А., 2004). До 90-х годов в России отмечали постепенное снижение заболеваемости РШМ, что было связано с регулярным проведением профилактических осмотров женского населения. Но с начала 90-х годов скрининг РШМ, направленный на активное выявление фоновых и предраковых процессов и обеспечивающий заметное снижение уровня заболеваемости инвазивными формами РШМ, практически бездействует по целому ряду социальных и экономических причин (Кулаков В.Т. и соавт., 2000). Это привело к увеличению заболеваемости женщин в возрасте до 40 лет (особенно до 29 лет, на 2,1% ежегодно) и существенному росту удельного веса больных с III-
IV стадиями РШМ: в 1990 г. - 34,2%, в 2003 г. - 39,7% (Харитонова Т.В., 2004).
Основными методами лечения РШМ являются хирургический, лучевой, химиотерапевтический и их сочетания (Лактионов К.П., 2001; Горбунова В.В., 2005). Неуклонный рост заболеваемости РШМ и увеличение числа больных с его распространенными стадиями диктуют необходимость разработки новых и совершенствования уже существующих методов лечения (Прилепская В.Н., 1999). Оценка эффективности и разработка новых методов терапии основываются как на углублении знаний о биологии злокачественных опухолей, так и на изучении их терапевтического патоморфоза - реакции ткани опухоли на повреждение, связанного с проведением того или иного метода лечения. Степень выраженности патоморфоза опухоли является важнейшим прогностическим фактором, позволяющим формировать индивидуальные схемы лечения (Лушников Е.Ф., 1977, 1993). В настоящее время осуществляется поиск гистологических и молекулярно-биологических особенностей опухолей, определяющих степень их терапевтического патоморфоза (Галил-Оглы Г.А. и соавт., 2004; Вепс1а 1.А., 1996; АН Ш., 2000; БоШ^аг 18., 2007).
Однако результаты исследований противоречивы и достоверные критерии прогноза терапевтического патоморфоза РШМ отсутствуют. Особенно малоизучен вопрос о взаимосвязи экспрессии онкобелков и степени терапевтического патоморфоза опухоли (Невзорова Д.В., 2003; Сергеева Н.С. и соавт., 2005; Дубовецкая О.Б. и соавт., 2005).
Таким образом, существует необходимость исследования гистологических и молекулярно-биологических особенностей
плоскоклеточного РШМ, определяющих степень его патоморфоза после неоадъювантной (предоперационной) лучевой, химио- и химиолучевой терапии. На основании вышеизложенного определены цель и задачи настоящего исследования.
Цель исследования Повысить качество лечения плоскоклеточного рака шейки матки путем выявления гистологических и молекулярно-биологических особенностей опухоли, определяющих степень ее патоморфоза у больных, получавших неоадъювантную лучевую, химио- и химиолучевую терапию.
Задачи исследования
1. Изучить гистологические особенности плоскоклеточного рака шейки матки до и после проведения неоадъювантной лучевой, химио-и химиолучевой терапии.
2. Исследовать особенности экспрессии опухолевыми клетками плоскоклеточного рака шейки матки онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN с помощью иммуногистохимического метода.
3. Определить степень выраженности терапевтического патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки после неоадъювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии.
4. Провести сопоставление гистологических и молекулярно-биологических особенностей плоскоклеточного рака шейки матки со степенью выраженности терапевтического патоморфоза опухоли после неоадъювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии.
Научная новизна полученных результатов
Впервые проведено комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с выявлением экспрессии 4-х онкобелков (р53, р16, СОХ-2 и РТЕИ) особенностей патоморфоза плоскоклеточного РШМ после неоадьювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии. Результаты исследования раскрывают новые биологические свойства плоскоклеточного РШМ и причины различного ответа таких опухолей на лечебные воздействия.
Доказано, что степень выраженности терапевтического патоморфоза РШМ не зависит от стадии заболевания и гистологических особенностей опухоли.
Впервые изучена экспрессия онкобелка РТЕЫ в динамике при лечении РШМ. Обнаружено, что онкобелки р53, р16, СОХ-2 и РТЕЫ экспрессируют большинство опухолей, уровень их экспрессии не зависит от степени дифференцировки новообразований, обратно пропорционален (р53) или не связан (р16, СОХ-2, РТЕ1Ч) со степенью выраженности терапевтического патоморфоза. Повышение их экспрессии после неоадьювантной терапии, независимо от степени патоморфоза, выявляется при продолженном росте опухоли.
Практическая значимость полученных результатов
Доказано, что при морфологической диагностике РШМ важно учитывать не только степень выраженности терапевтического патоморфоза, но и стадию, степень дифференцировки и другие гистологические особенности новообразования, которые являются независимыми признаками, а также необходимо исследовать экспрессию онкобелка р53, р16, СОХ-2 и РТЕК
Продемонстрировано, что высокий уровень экспрессии онкобелка р53 является показателями резистентности РШМ к терапии. Повышение экспрессии онкобелков р53, р 16, СОХ-2 и PTEN после неоадьювантной терапии, независимо от степени выраженности терапевтического патоморфоза, может служить неблагоприятным прогностическим признаком и должно быть учтено при выборе индивидуальных схем лечения больных.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Степень выраженности терапевтического патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки не зависит от стадии заболевания, степени дифференцировки и других гистологических особенностей опухоли.
2. Онкобелки р53, р16, СОХ-2 и PTEN экспрессируют большинство опухолей независимо от степени их дифференцировки, обратно пропорционально (р53) или вне связи (р16, СОХ-2, PTEN) со степенью выраженности их терапевтического патоморфоза. Повышение их экспрессии после неоадьювантной терапии, независимо от степени патоморфоза, выявляется при продолженном росте опухоли и может служить неблагоприятным прогностическим фактором.
Внедрение результатов исследования
Результаты исследования используются в практической работе патологоанатомического отделения ГКБ № 33 им. проф. А.А.Остроумова и в педагогическом процессе на кафедре патологической анатомии ГОУ ВПО МГМСУ Росздрава.
Апробация работы
Результаты исследования доложены и обсуждены на: II Съезде Российского общества патологоанатомов (Москва, 2006); Всероссийской конференции с международным участием "Современные проблемы клинической цитоморфологии" (Санкт-Петербург, 2007); научной конференции кафедры патологической анатомии ГОУ ВПО МГМСУ Росздрава (07.06.2008 г.).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, из них 1 - в журнале " Вестник последипломного медицинского образования", включенном в "Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени доктора и кандидата наук".
Объем и структура работы
Диссертация изложена на 179 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 257 источников (92 - отечественных и 165 - зарубежных), иллюстрирована 50 рисунками, 11 таблицами, 25 диаграммами.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования
Гистологические и молекулярно-биологические особенности инвазивного плоскоклеточного РШМ и степень выраженности его терапевтического патоморфоза изучены у 80 больных в возрасте 22-
75 лет (средний возраст - 45,4±12,8 лет), проходивших в 2000-07 гг. лечение в ФГУ "Российский научный центр рентгенорадиологии" Росмедтехнологий (директор - академик РАМН, проф. В.П.Харченко).
У 54% больных РШМ развился на фоне длительно существовавшей эрозии шейки матки, у 15% - была выявлена папилломавирусная инфекция высокого онкогенного риска.
Неоадъювантную лучевую терапию (1-2 этапа дистанционной и внутриполостной гамма-терапии) получали 15% пациенток, химиотерапию (1-2 курса поли- и монохимиотерапи) - 53,8% и химиолучевую терапию (1-2 курса) - 31,2% (Табл. 1).
Таблица 1. Виды неоадъювантной терапии у больных с РШМ
Стадия заболевания Вид терапии
химиотерапия лучевая терапия химиолучевая терапия Итого
IB 7 (63,6%) 3 (27,3%) 1 (9,1%) 11 (13,8%)
IIA 6 (75,0%) 1 (12,5%) 1 (12,5%) 8 (10,0%)
IIB 12 (42,8%) 5 (17,8%) 10 (37,0%) 27 (33,8%)
IIIA 1 (50,0%) - 1 (50,0%) 2 (2,5%)
HIB 15(53,6%) 3 (10,7%) 10 (35,7%) 28 (35,0%)
IV 2 (66,7%) - 1 (33,3%) 3 (3,8%)
Всего 43 (53,8%) 12(15,0%) 25 (31,2%) 80 (100%)
После неоадъювантной терапии в 72-х случаях (90%) была проведена расширенная экстирпация матки. У 7-и больных операции не производились (поздняя стадия заболевания, тяжелое соматическое состояние, возраст, отказа больной от операции). Этим пациенткам проводилась только химиолучевая или сочетанная лучевая терапия. В 1-м случае операция не производилась из-за полного регресса опухоли после сочетанной лучевой терапии.
Морфологически изучали биопсии шейки матки и/или материал раздельного диагностического выскабливания цервикального канала, взятые перед началом лечения, и операционный материал после проведения неоадьювантной терапии и радикального хирургического вмешательства (в каждом наблюдении исследовали до 45 образцов ткани). У 8 неоперированных больных вместо операционного материала изучали повторные биоптаты шейки матки.
Гистологическое исследование. Гистологические срезы окрашивали гематоксилин и эозином. Определяли степень дифференцировки опухоли по критериям ВОЗ (высокая, умеренная, низкая); особенности границ роста и структуры, глубину инвазии; наличие опухолевых эмболов в сосудах, выраженность лимфоплазмоцитарной инфильтрации, число митозов и степень выраженности терапевтического патоморфоза по общепринятым морфологическим критериям (Лушников Е.Ф., 1977, 1993):
I - изменения на молекулярном и субклеточном уровне, в тканях, окружающих опухолевые комплексы, изменения не выражены;
II - повреждение, в основном, паренхиматозных элементов опухоли: дистрофические и некробиотические изменения клеток опухоли, нарушения деления клеток с появлением гигантских форм. В строме опухоли сосудистые изменения, активация клеток соединительной ткани;
III - нарушение типичной структуры опухоли в результате массовой гибели опухолевых клеток: поля некроза, выраженные сосудистые расстройства, разрастание соединительной ткани. Сохраняются устойчивые к терапии популяции опухолевых клеток без
грубых повреждений, которые в дальнейшем могут приводить к рецидиву опухоли. Большое количество " лучевых гигантов". В окружающих тканях атрофические и дистрофические изменения. Вариант терапевтического патоморфоза 3-й степени при плоскоклеточном раке - гиперороговение клеток, образование роговых кист;
IV - замещение некротизированной опухолевой ткани соединительной тканью, импрегнация ее солями извести, кистообразование. В окружающих тканях: атрофические, дистрофические и склеротические изменения.
Иммуноморфологическое исследование. Определяли экспрессию 4-х онкобелков: р53, р16, СОХ-2 и PTEN. Демаскировку антигенов производили нагреванием до 95°С в растворе буфера Target Retrival Solution (рН 9,0) и инкубацией 20 мин в ретривере (Dako, Дания). Эндогенную пероксидазу блокировали 3% раствором перекиси водорода. Реакцию с первичными антителами проводили при комнатной температуре (20-30 мин). Использовали первичные моноклональные антитела к р53 (клон D0-7, код N1581, готовые к употреблению), PTEN (клон 6Н2.1, код М3627, разведение 1:100), СОХ-2 (клон СХ-294, код М3617, разведение 1:100). Для визуализации применяли проявочную систему EnVision+ (DakoCytomation, Дания). Для выявления онкобелка pl6INK4a (код К5340) использовали набор CINtec™pl6 ^ (DAKO, Дания). Результаты иммуногистохимических реакций оценивали морфометрически полуколичественным методом по 3-х балльной системе (1 балл - слабая, 2 балла - умеренная и 3 - выраженная
реакция). Количество клеток, в которых наблюдалась реакция, подсчитывали в произвольно взятых 20 полях зрения при большом увеличении микроскопа(х400).
Статистический анализ полученных данных выполняли с использованием программы Statistica 6.0. Количественные показатели представляли в виде средних и стандартных квадратичных отклонений, качественные признаки группировали в таблицы сопряжённости. Распределение показателя в группах проверяли на нормальность с помощью теста Шапиро-Уилка, затем проверяли гипотезу о равенстве дисперсий с помощью теста Левена. Для проверки статистических гипотез относительно ассоциации двух качественных признаков использовали критерии хи-квадрат Пирсона, хи-квадрат с поправкой Йетса и двусторонний точный критерий Фишера. Для оценки меры линейной связи между парами показателей использовали коэффициент ранговой корреляции Спирмена. При проверке гипотез статистически значимыми считали результаты при достигнутом уровне значимости р<0,05.
Результаты собственных исследований и их обсуждение Результаты исследования показали преобладание РШМ IIB и HIB стадий (по 35%), к IB стадии отнесено 13,8%, IIA - 10%, IV - 3,7% и IIIA - 2,5% опухолей. Большая часть новообразований была умереннодифференцированной (61,3%), высоко- и низкодифферен-цированный рак составил, соответственно, 25 и 13,7%. 51,3% опухолей отличался смешанной, 27,5% - экзофитной и 21,2% -эндофитной формой роста. При эндофитной и смешанной формах роста достоверно преобладали умереннодифференцированные
опухоли (70,6 и 68,3%), а при экзофитной - 40,9% составил высокодифференцированный рак.
Терапевтический патоморфоз РШМ 1-Й степени был выявлен в 50% наблюдений, III - в 28,7% и IV - в 21,3%. Он был статистически достоверно (р=0,00261, рис. 1) более выражен после химиолучевой терапии (44% опухолей с патоморфозом IV степени и 28% - с I-1I) и минимальным после химиотерапии (6,9% наблюдений с патоморфозом IV степени и 69,8% - с I-II).
1-11 степень
III степень
IV степень
■ химиотерапия □ лучевая терапия ЕШхимиолучевая терапия
Рис. 1. Зависимость степени выраженности терапевтического патоморфоза от типа проводимой терапии (р=0,00261).
Степень терапевтического патоморфоза РШМ не зависела от стадии заболевания (р=0,83680), степени дифференцировки (р=0,55893) и формы роста опухоли (р=0,65961). Достоверной зависимости степени дифференцировки или формы роста опухоли от стадии заболевания также выявлено не было (р=0,40560), во всех группах преобладал умереннодифференцированный рак (50-70,6%). Характер (четкость) границ и особенности строения опухоли (с формированием солидных полей, или узких тяжей, или отдельных комплексов) также не влияли на степень выраженности ее патоморфоза. Однако в сроки
от 4-х мес до 3 лет после лечения безрецидивное течение РШМ было свойственно опухолям с четкими границами (71,4%, р=0,00839) и представленным солидными полями (93,3%, р=0,00362).
Глубина инвазии опухоли была до 0,5 см в 19,4%, от 0,5 до 1 см -в 16,1%, более 1см - в 35,5%, прорастание всей толщи шейки матки выявлено в 29% случаев. Она не зависела от степени дифференцировки новообразования и не влияла на степень терапевтического патоморфоза (р=0,86058). Последний факт подтверждается тем, что в сроки от 4-х мес до 3 лет после лечения, неблагоприятное течение заболевания отмечалось в равной степени при любой глубине инвазии.
Опухолевые эмболы в сосудах были выявлены в 88,9% наблюдений, из них множественные - в 52,8%. Их наличие также не влияло на степень выраженности терапевтического патоморфоза, но, по-видимому, может быть одним из прогностических критериев. Так, опухолевые эмболы не обнаруживались у 80,0% больных с благоприятным течением заболевания и выявлялись у 66,7% с рецидивами и метастазами РШМ (р=0,01564).
Степень митотической активности не коррелировала со степенью выраженности патоморфоза РШМ (р=0,73570). В ряде случаев после проведенной терапии отмечалось даже усиление митотической активности клеток опухоли, что у отдельных пациенток сочеталось с метастатическим поражением лимфатических узлов или развитием рецидивов. Этот факт можно объяснить тем, что после терапии сохраняется пул наиболее активных опухолевых клеток с высокими пролиферативными и низкими адгезивными свойствами.
Выраженность лимфоплазмоцитарной инфильтрации в строме плоскоклеточного РШМ также не коррелировала со степенью терапевтического патоморфоза (р=0,52161).
Таким образом, изученные гистологические особенности плоскоклеточного РШМ достоверно не влияют на степень выраженности его терапевтического патоморфоза после неоадъювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии.
Экспрессию онкобелка-антионкогена р53, продукта одного из генов-супрессоров опухолевого роста, изучали в 20 наблюдениях с РШМ IB- IIIB стадии. До лечения экспрессия р53 была положительной в 15 наблюдениях (75%), из них высокой - в 11 (55%) и слабой - в 4-х (20%). Выявлена лишь тенденция более выраженной экспрессии р53 при высокодифференцированном раке
(р—0,06561). Но уровень экспрессии р53 был обратно пропорционален степени терапевтического патоморфоза (р=0,031766, рис. 2).
■ 42,5
33,4
В ■
44,4
40 -
20 -
13,1
8,3
0
!-И степень
III степень
IV степень
■ высокая экспрессия Ш низкая экспрессия
Рис. 2. Зависимость (в %) между уровнем экспрессии р53 и степенью выраженности терапевтического патоморфоза РШМ (п=15, р=0,03166).
В 58,3% случаев с высокой экспрессией р53 наблюдался патоморфоз 1-Й, а в 44,4% с низкой - IV степени. После проведенной терапии экспрессия р53 в 55% наблюдений повышалась. Эти опухоли отличались I-II степенью терапевтического патоморфоза, ростом митотической активности и продолженным ростом опухоли.
Экспрессию онкобелка-антионкогена р16, продукта одного из генов-супрессоров опухолевого роста, изучали в 21 наблюдении с РШМ IB-IIIB стадии. До лечения экспрессия р16 выявлялась в 20 случаях (95,2%), из них была выраженной в 17 (80,9%), низкой - в 3-х (14,3%). Уровень экспрессии р16 не коррелировал со степенью дифференцировки опухоли (р=0,78162), но был пропорционален степени выраженности терапевтического патоморфоза, хотя из-за малого числа наблюдений (4 опухоли) с низкой степенью или отсутствием экспрессии этого онкобелка, показатель был статистически малодостоверен (р=0,08152, рис. 3).
70 % 60 50 40 30 20 10 0
55
50
16,6
33,4
I
43 щшт
1 1
I-II степень
I степень
IV степень
I высокая экспрессия
1 низкая экспрессия
Рис. 3. Зависимость (в %) между уровнем экспрессии р16 и степенью выраженности терапевтического патоморфоза РШМ (п=20, р=0,08152).
В 50% опухолей с высокой экспрессией р16 наблюдался терапевтический патоморфоз Ш-1У, а в 55% с низкой - 1-П степени.
После проведенной терапии экспрессия р16 обнаруживалась только в 13 наблюдениях (66,7%). В 28,5% случаев после лечения отмечалось усиление его экспрессии (независимо от степени патоморфоза), причем на фоне снижения общего количества экспрессирующих клеток выраженность накопления р16 в оставшихся клетках нарастала, при этом клинически был характерен продолженный рост опухоли.
Таким образом, независимо от степени патоморфоза, даже мелкие комплексы опухолевых клеток с выраженной экспрессией онкобелка р16 могут стать источником рецидива РШМ. Полученные данные согласуются с выводами С.С^иецог и Т.БПуа (2006), которые считают, что р16 является более точным маркером неблагоприятного прогноза, чем р53.
Экспрессию СОХ-2 (циклоксигеназы-2, ингибитора апоптоза) изучали в 13 наблюдениях с РШМ 1В- ШВ стадии. До лечения экспрессия СОХ-2 выявлялась во всех случаях и была высокой в 9 наблюдениях (69,2%). Она не коррелировала со степенью дифференцировки опухоли (р=0,32012). Уровень экспрессии СОХ-2 был обратно пропорционален степени выраженности терапевтического патоморфоза, однако этот показатель был статистически недостоверен из-за малого числа наблюдений (2 опухоли) с низкой степенью экспрессии этого маркера (р=0,11073, рис. 4). В 66,9% случаев с высокой экспрессией СОХ-2 наблюдался патоморфоз 1-И, а в 50% с низкой - IV степени.
50
22,2 Н|
11,1
— о . —1
-1---!
I-II степень III степень IV степень
■ высокая экспрессия И низкая экспрессия
Рис. 4. Зависимость (в %) между уровнем экспрессии СОХ-2 и степенью выраженности терапевтического патоморфоза РШМ (п=13, р=0,11073).
После проведенной терапии экспрессия СОХ-2 сохранялась во всех 13 наблюдениях, причем в 3-х повышалась и в 3-х -понижалась (по 23%). Во всех случаях с высокой экспрессией СОХ-2 после лечения, независимо от степени патоморфоза, выявлялись участки продолженного роста опухоли.
Онкобелок-антионкоген PTEN (phosphate and tensin homologue deleted on chromosome ten) - продукт одного из генов-супрессоров опухолевого роста, который предлагают использовать для определения прогноза выживаемости больных. Экспрессия PTEN при лечении плоскоклеточного РШМ ранее не исследовалась.
Экспрессию PTEN изучали в 13 наблюдениях РШМ IB-IIIB стадии. До лечения экспрессия PTEN выявлялась в 11 случаях (84,6%), из них была выраженной в 9 (69,2%) и умеренной - в 2-х (15,4%). Она не коррелировала со степенью дифференцировки опухоли (р=0,32556) и была обратно пропорциональна степени выраженности терапевтического патоморфоза, однако из-за
%
80 60 40 20 Н
66,9
отсутствия наблюдений с низкой степенью экспрессии этого белка этот показатель был статистически недостоверен (р=0,57659, рис. 5).
1-11 степень
III степень
IV степень
■ высокая экспрессия Е1 умеренная экспрессия
Рис. 5. Зависимость (в %) между уровнем экспрессии РТЕЫ и степенью выраженности терапевтического патоморфоза РШМ (п=11, р=0,57659).
После проведенной терапии экспрессия РТЕК снизилась у 1-й больной (9,2%), повысилась - у 5 (45,4%) и сохранилась на том же уровне у остальных 5 (45,4%). В одном из 2-х наблюдений, в которых до начала лечения экспрессия PTEN отсутствовала, она появилась после проведенной терапии и, как и в других случаях с высокой экспрессией РТЕЫ, независимо от степени патоморфоза, сопровождалась продолженным ростом опухоли.
Таким образом, иммуногистохимическое исследование выявило высокий уровень экспрессии онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN (69,2-95,2%) до лечения, независимо от степени дифференцировки опухоли, обратную (р53) и прямую (р16) зависимость со степенью выраженности терапевтического патоморфоза, а при повышении их
экспрессии после лечения - неблагоприятный результат неоадьювантной терапии.
Выводы
1. Терапевтический патоморфоз плоскоклеточного рака шейки матки более выражен после химиолучевой, менее - после лучевой и, особенно, химиотерапии (соответственно, 44, 25 и 6,9% опухолей с патоморфозом IV степени).
2. Степень выраженности терапевтического патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки не зависит от стадии заболевания и гистологических особенностей опухоли: степени дифференцировки, формы роста, характера границ, вариантов строения, глубины инвазии, наличия опухолевых эмболов в сосудах и степени лимфомакрофагальной инфильтрации.
3. Онкобелок р53 экспрессируют большинство опухолей (75%), уровень его экспрессии не зависит от степени их дифференцировки и обратно пропорционален степени выраженности терапевтического патоморфоза.
4. Экспрессия онкобелков р16, СОХ-2 и РТЕЫ выявляется в большинстве опухолей (95,2, 69,2 и 84,6%), не зависит от степени их дифференцировки и достоверно не связана со степенью выраженности терапевтического патоморфоза.
5. Повышение экспрессии онкобелков р53, р16, СОХ-2 и РТЕЫ после неоадьювантной терапии (в 23-55% случаев), независимо от степени выраженности терапевтического патоморфоза, выявляется при продолженном росте опухоли и может служить неблагоприятным прогностическим фактором.
Практические рекомендации
1. При морфологической диагностике плоскоклеточного рака шейки матки с целью определения послеоперационного прогноза заболевания следует учитывать не только степень выраженности терапевтического патоморфоза, но и стадию, степень дифференцировки и другие гистологические особенности новообразования.
2. Для оптимизации диагностики и лечения больных плоскоклеточным раком шейки матки, особенно при проведении неоадъювантной терапии, необходимо исследовать экспрессию онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN.
3. Высокий уровень экспрессии клетками опухоли онкобелка р53 -показатель резистентности плоскоклеточного рака шейки матки к неоадъювантной терапии. Повышение экспрессии онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN после неоадыовантной терапии, независимо от степени выраженности терапевтического патоморфоза требует тщательного наблюдения за больными.
Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Швец H.A., Зайратьянц О.В. Иммуноморфологические критерии прогноза лучевой терапии разных гистологических типов рака шейки матки. /Сборник научных работ конференции "Естествознание и гуманизм" (под редакцией H.H. Ильинских). -Томск, 2005. - Т.2.- №5.- С.83-84.
2. Швец H.A., Зайратьянц O.B. Иммуноморфология лучевого патоморфоза и прогноз лучевой терапии рака шейки матки. /Труды II Съезда Российского общества патологоанатомов. - Москва, 2006. - Т.2. - С.74-76.
3. Чазова Н.Л., Берщанская A.M., Мельникова Н.В., Швец H.A. Экспрессия онкобелка р16пчк4д как фактор прогноза эффективности лучевой, химио- и сочетанной терапии рака шейки матки. /Сборник трудов Всероссийской конференции с международным участием "Современные проблемы клинической цитоморфологии", посвященной памяти O.K. Хмельницкого. - Санкт-Петербург, МАЛО, 2007.- С.128.
4. Чазова Н.Л., Швец H.A., Берщанская А.М., Мельникова Н.В. Исследование онкобелка pl6INK4A в плоскоклеточном раке шейки матки. / Научные труды VIII Международного конгресса "Здоровье и образование в XXI веке; концепции болезней цивилизации. -Москва, РУДН, 2007. - С.675-676.
5. Чазова Н.Л., Швец H.A., Берщанская A.M., Мельникова Н.В. Прогностическая ценность экспрессии онкобелка р53 в плоскоклеточном раке шейки матки. / Научные труды VIII Международного конгресса " Здоровье и образование в XXI веке; концепции болезней цивилизации". - Москва, РУДН, 2007. -С.676-677.
6. Швец H.A., Чазова Н.Л., Берщанская А.М. Значение гистологических критериев в прогнозе плоскоклеточного рака шейки матки. / Вестник последипломного медицинского образования. -2008.- №2.- С.48-54.
Оглавление диссертации Швец, Наталья Александровна :: 2008 :: Москва
Введение.
Глава 1, Обзор литературы.
1.1. Этиология рака шейки матки.
1.2. Методы лечения рака шейки матки.
1.3. Клинико-морфологические критерии патоморфоза опухоли и прогноза заболевания.
1.4. Иммуногистохимические критерии патоморфоза опухоли и прогноза заболевания.
1.4.1. Значение р53 в канцерогенезе. Его роль в регуляцирадиочувствительности опухолевых клеток и прогнозе эффективности терапии рака шейки матки.
1.4.2. Значение экспрессии СОХ-2 (PTGS).
1.4.3. Значение экспрессии pl6INK4A.
1.4.4. Значение экспрессии PTEN.
Глава 2. Материалы и методы исследования больных.
2.1. Материал исследования.
2.2. Гистологическое исследование.
2.3.Иммуноморфологическое исследование
2.4.Статистическая обработка.
Глава 3 Результаты собственных исследований.
3.1. Влияние клинико-морфологических факторов на патоморфоз опухоли
3.2. Результаты гистологического исследования.
3.3. Результаты иммуногистохимического исследования.
3.3.1. Анализ уровня экспрессии р53.
3.3.2. Анализ уровня экспрессии р16 INK4A.
3.3.3. Анализ уровня экспрессии СОХ-2.
3.3.4. Анализ уровня экспрессии PTEN.
Введение диссертации по теме "Патологическая анатомия", Швец, Наталья Александровна, автореферат
Несмотря на существование в настоящее время четкой концепции о фоновых процессах, предраке и раке шейки матки (РШМ), а также надежного и доступного тестового контроля (цитологический метод исследования и кольпоскопия), P1LIM до настоящего времени остается актуальной проблемой в онкогинекологии (88, 135).
По данным международного агентства по изучению рака (МАИР), в 2002 году в мире было зарегистрировано 470600 новых случаев РШМ и более 200000 смертей. Большинство случаев (81%) приходится на развивающиеся страны (Латинская Америка, Карибский бассейн, Восточная и Южная Африка), где РШМ является наиболее частой причиной смерти от рака (74, 85).
В общей структуре заболеваемости органов репродуктивной системы женщин в России РШМ занимает 3 место после рака молочной железы и рака тела матки. В 2002 году в России зарегистрировано 12285 новых случаев РШМ и 6288 смертей. Стандартизированный показатель заболеваемости РШМ на 2002г. составил 11,6 , а смертности - 5,1 на 100000 женщин (76). Отмечается значительная вариабельность показателей заболеваемости в различных регионах нашей страны - от 11,2 до 18%, причем наибольшие показатели заболеваемости зарегистрированы на дальнем Востоке и в Сибири (85). Такая вариабельность показателей может быть связана со многими факторами: социально-экономическими условиями, национальными традициями, образовательным уровнем населения, степенью развития системы здравоохранения, проведением программ скрининга и др. (77).
До 90-х годов в России отмечено постепенное снижение заболеваемости РШМ, что было связано с регулярным проведением профилактических осмотров женского населения с обязательным взятием мазков для цитологического исследования. Но с начала 90-х годов скрининг РШМ, направленный на активное выявление фоновых и предраковых процессов и обеспечивающий заметное снижение уровня заболеваемости инвазивными формами РШМ, практически бездействует по целому ряду социальных и экономических причин. Так, в 1996 г. в России, по официальным данным, в смотровых кабинетах было выявлено 8,4% злокачественных новообразований шейки матки (в 1985- 11,8%, в 1990 - 9,7%) (49).
Это обусловило новые тенденции в структуре заболеваемости РШМ. В настоящее время четко прослеживается увеличение заболеваемости в группе женщин до 40 лет, особенно заметное повышение — до 29 лет (ежегодно на 2,1%). Кроме того, отмечается существенный рост показателей запущенности. Удельный вес больных III-IV стадией в 1990г. составил 34,2%, в 1992г. — 37,1%, в 1995г. - 38,8%, в 2003г. - 39,7%. В некоторых регионах России отмечено заметное превышение этих показателей (85).
Основными методами лечения РШМ является хирургический, комбинированный и лучевой (20,51). С начала 70 гг. интенсивно изучаются возможности внедрения в клиническую практику химиотерапевтического лечения и его сочетания с лучевой терапией и хирургическим лечением. При проведении специального лечения РШМ необходима объективная оценка влияния лечебных агентов на структуру опухолевой ткани. Поэтому в онкологической практике часто возникает вопрос о патоморфозе опухоли — реакции ткани опухоли на повреждение, связанном с проведением того или иного метода лечения. По мнению Красильникова С.Э., результаты патоморфоза необходимо сопоставлять с клинической картиной течения заболевания для оценки эффективности лечения опухоли. Неуклонный рост заболеваемости среди женщин молодого возраста, а также заметное увеличение числа больных с распространенными стадиями заболевания диктуют необходимость разработки новых и совершенствование уже существующих методов лечения РШМ (23,28).
Актуальными являются работы, посвященные поиску прогностических факторов, позволяющих формировать индивидуальные схемы лечения. Одним из таких факторов является выраженность патоморфоза опухоли (55,56). В настоящее время осуществляется поиск гистологических и молекулярно-биологических особенностей опухолей, определяющих степень их терапевтического патоморфоза (17,94,103,223).
Однако результаты исследований противоречивы и достоверные критерии прогноза терапевтического патоморфоза РШМ отсутствуют. Особенно малоизучен вопрос о взаимосвязи экспрессии онкобелков и степени терапевтического патоморфоза опухоли (66,82).
Таким образом, существует необходимость исследования гистологических и молекулярно-биологических особенностей плоскоклеточного РШМ, определяющих степень его патоморфоза после неоадъювантной (предоперационной) лучевой, химио- и химиолучевой терапии. На основании вышеизложенного определены цель и задачи настоящего исследования.
Цель исследования:
Повысить качество лечения плоскоклеточного рака шейки матки путем выявления гистологических и молекулярно-биологических особенностей опухоли, определяющих степень ее патоморфоза у больных, получавших неоадъювантную лучевую, химио- и химиолучевую терапию.
Задачи исследования:
1. Изучить гистологические особенности плоскоклеточного рака шейки матки до и после проведения неоадъювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии.
2. Исследовать особенности экспрессии опухолевыми клетками плоскоклеточного рака шейки матки онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN с помощью иммуногистохимического метода.
3. Определить степень выраженности терапевтического патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки после неоадъювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии.
4. Провести сопоставление гистологических и молекулярно-биологических особенностей плоскоклеточного рака шейки матки со степенью выраженности терапевтического патоморфоза опухоли после неоадъювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии.
Научная новизна:
Впервые проведено комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с выявлением экспрессии 4-х онкобелков (р53, р16, СОХ-2 и PTEN) особенностей патоморфоза плоскоклеточного РШМ после неоадьювантной лучевой, химио- и химиолучевой терапии. Результаты исследования раскрывают новые биологические свойства плоскоклеточного РШМ и причины различного ответа таких опухолей на лечебные воздействия.
Доказано, что степень выраженности терапевтического патоморфоза РШМ не зависит от стадии заболевания и гистологических особенностей опухоли.
Впервые изучена экспрессия онкобелка PTEN в динамике при лечении РШМ. Обнаружено, что онкобелки р53, р16, СОХ-2 и PTEN экспрессируют большинство опухолей, уровень их экспрессии не зависит от степени дифференцировки новообразований, обратно пропорционален (р53) или не связан (р16, СОХ-2, PTEN) со степенью выраженности терапевтического патоморфоза. Повышение их экспрессии после неоадьювантной терапии, независимо от степени патоморфоза, выявляется при продолженном росте опухоли.
Практическая значимость:
Доказано, что при морфологической диагностике РШМ важно учитывать не только степень выраженности терапевтического патоморфоза, но и стадию, степень дифференцировки и другие гистологические особенности новообразования, которые являются независимыми признаками, а также необходимо исследовать экспрессию онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN.
Продемонстрировано, что высокий уровень экспрессии онкобелка р53 является показателем резистентности РШМ к терапии. Повышение экспрессии онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN после неоадьювантной терапии, независимо от степени выраженности терапевтического патоморфоза, может служить неблагоприятным прогностическим признаком и должно быть учтено при выборе индивидуальных схем лечения больных.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Степень выраженности терапевтического патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки не зависит от стадии заболевания, степени дифференцировки и других гистологических особенностей опухоли.
2. Онкобелки р53, р16, СОХ-2 и PTEN экспрессируют большинство опухолей независимо от степени их дифференцировки, обратно пропорционально (р53) или вне связи (р16, СОХ-2, PTEN) со степенью выраженности их терапевтического патоморфоза. Повышение их экспрессии после неоадьювантной терапии, независимо от степени патоморфоза, выявляется при продолженном росте опухоли и может служить неблагоприятным прогностическим фактором.
Внедрение результатов в практику:
Результаты исследования используются в практической работе патологоанатомического отделения ГКБ № 33 им. проф. А.А.Остроумова и в педагогическом процессе на кафедре патологической анатомии ГОУ ВПО МГМСУ Росздрава.
Апробация работы:
Результаты исследования доложены и обсуждены на: II Съезде Российского общества патологоанатомов (Москва, 2006); Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы клинической цитоморфологии» (Санкт-Петербург, 2007); научной конференции кафедры патологической анатомии ГОУ ВПО МГМСУ Росздрава (07.06.2008 г.).
Публикации:
По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ, из них 1 — в журнале «Вестник последипломного медицинского образования», включенном в «Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени доктора и кандидата наук».
Структура и объем диссертации:
Диссертация изложена на 163 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 257 источников (92 — отечественных и 165 — зарубежных), иллюстрирована 47 рисунками, 11 таблицами, 26 диаграммами.
Заключение диссертационного исследования на тему "Гистологические и молекулярно-биологические особенности патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки после неоадъювантной терапии"
Выводы
1. Терапевтический патоморфоз плоскоклеточного рака шейки матки более выражен после химиолучевой, менее — после лучевой и, особенно, химиотерапии (соответственно, 44, 25 и 6,9% опухолей с патоморфозом IV степени).
2. Степень выраженности терапевтического патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки не зависит от стадии заболевания и гистологических особенностей опухоли: степени дифференцировки, формы роста, характера границ, вариантов строения, глубины инвазии, наличия опухолевых эмболов в сосудах и степени лимфомакрофагальной инфильтрации.
3. Онкобелок р53 экспрессируют большинство опухолей (75%), уровень его экспрессии не зависит от степени их дифференцировки и обратно пропорционален степени выраженности терапевтического патоморфоза.
4. Экспрессия онкобелков р16, СОХ-2 и PTEN выявляется в большинстве опухолей (95,2, 69,2 и 84,6%), не зависит от степени их дифференцировки и достоверно не связана со степенью выраженности терапевтического патоморфоза.
5. Повышение экспрессии онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN после неоадьювантной терапии (в 23-55% случаев), независимо от степени выраженности терапевтического патоморфоза, выявляется при продолженном росте опухоли и может служить неблагоприятным прогностическим фактором.
Практические рекомендации
1. При морфологической диагностике плоскоклеточного рака шейки матки с целью определения послеоперационного прогноза заболевания следует учитывать не только степень выраженности терапевтического патоморфоза, но и стадию, степень дифференцировки и другие гистологические особенности новообразования.
2. Для оптимизации диагностики и лечения больных плоскоклеточным раком шейки матки, особенно при проведении неоадьювантной терапии, необходимо исследовать экспрессию онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN.
3. Высокий уровень экспрессии клетками опухоли онкобелка р53 — показатель резистентности плоскоклеточного рака шейки матки к неоадьювантной терапии. Повышение экспрессии онкобелков р53, р16, СОХ-2 и PTEN после неоадьювантной терапии, независимо от степени выраженности терапевтического патоморфоза требует тщательного наблюдения за больными.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Швец, Наталья Александровна
1. Абелев Г.И. Механизмы дифференцировки и опухолевый рост. // Биохимия. 2000. - Т. 65, № 1.-С. 127-138.
2. Абраменко И.В., Фильченков А.А. Прогностическое значение апоптотического и пролиферативного индексов при солидных новообразованиях. //Онкология. 2002. - Т. 4. - № 3. С. 165-170.
3. Анастасьева В.Г. Бактериальный вагиноз. Новосибирск, 1998. -122с.
4. Атлас патологии опухолей человека. /Под ред. Пальцева М.А., Аничкова Н.М. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 424 с: ил.
5. Батороев Ю.К. Значение оценки митотической активности опухолей. // Современные технологии в онкологии: материалы VI Всероссийского съезда онкологов. Том 2. М., 2005. - с.264.
6. Бахидзе Е.В., Косников А.Г., Максимов С.Я. Патогенетическая неоднородность рака шейки матки. //Вопр. онколог. 1996. - Т. 42. - № 5. - С. 45-51.
7. Бебнева Т.Н., Прилепская В.Н. Папилломавирусная инфекция и патология шейки матки. //Гинекология. 2001. - 3. - № 3. - С. 77-81.
8. Белохвостов А.С., Румянцев А.Г. Онкомаркеры. Молекулярно-генетические, иммунохимические, биохимические анализы. - Пособие для врачей. -М.: Макс Пресс, 2003.- 78с.
9. Берштейн JI.M. Гинекологический рак в середине 90-х годов: взгляд эндокринолога //Материалы Российского симпозиума с международным участием «Скрининг и новые подходы к лечению начального гинекологического рака». Новгород, 1994 г. СПб, 1994 - С.5.
10. Бохман Я.В. Руководство по онкогинекологии. Л.: Медицина, 1989.-464с.
11. Бохман Я.В., Лютра У.К. Рак шейки матки. Кишинев: Штиница, 1991.-215 с.
12. Введение в молекулярную медицину./ Под ред. Пальцева М.А.- М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. 496с.: ил.
13. Валбомерс Я.М.М., Мелкерт П.У.Дж., Ван ден Брюль А.Дж. и др. //Молекулярная клиническая диагностика: Методы /Под ред. С.Херрингтона, Дж.Макги: Пер. с англ. М., 1999. - С.474-495.
14. Вишневская Е.Е. Рак шейки матки. — Минск, 1987. — с.236.
15. Владимировская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста //Гемотол. трансфузиол. 1997. - № 42. - С. 4-9.
16. Волгарева Г.М., Завалишина Л.Э., Франк Г.А., Андреева Ю.Ю., Петров А.Н., Киселев Ф.Л. Спитковский Д.Д. Экспрессия белкового маркера р16ШК4А в раке шейки матки. //Архив патологии. 2002. - № 1. - С. 22-24.
17. Гамалеева Т.О. Роль папилломавирусной инфекции в патологии шейки матки (цито-гистологическое исследование): Авторефф. дисс. . канд. мед. наук. Ростов-на Дону. - 2000. - с.22.
18. Глухова Ю.К. Сравнительная цитологическая и гистологическая диагностика новообразований шейки матки (плоидометрическое исследование). //Автореф. . .канд.мед.наук. М., РМАПО. - 2005. - 23с.
19. Горбунова В.В., Болтенко А.И., Шевченко Л.Н. Оптимизация лучевой терапии в программах химиолучевого лечения первичного рака шейки матки и рецидивов. — Материалы Всероссийского научного форума «Радиология 2005», М. «МЕДИ Экспо», 2005. - с.95-99.
20. Григорян О.Р., Ужегова Ж.А., Андреева Е.Н. Роль эндогенных половых стероидов в генезе предраковых заболеваний и рака шейки матки приэндокринопатиях. //Проблемы эндокринологии. 2007. - Т. 53. - № 2. - С. 1519.
21. Гудцкова Т.Н. Клинико-морфологические параллели при изучении лечебного патоморфоза плоскоклеточного рака шейки матки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ростов-н/Д., - 1999. - с.23.
22. Двойрин В.В. Статистическая оценка эффекта лечения онкологических больных // Вопросы онкологии. 1982. - Т. 28.-№ 12.-С. 29-37.
23. Демидова Л.В., Бойко А.В., Телеус Т.А., Дунаева Е.А. Перспективы лучевой терапии местно-распространенного рака шейки матки. Материалы Всероссийского научного форума «Радиология 2005», М.: «МЕДИ Экспо», 2005. - С. 110-112.
24. Ермакова Н.А. Роль химиотерапии на различных этапах лечения рака шейки матки. //Практ. Онкология. 2002. - Т. 3. - № 3. — С. 27-29.
25. Жолкивер К.И. Значение величины фракции дозы и фактора времени в лучевой терапии. //Мед. радиол. 1986. - № 3. - С. 2-9.
26. Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы: клин, лекции. /Под ред. Прилепской В.Н. М.: Медпресс, 1999. - 427с.
27. Избранные лекции по клинической онкологии под ред. акад. РАМН В.И. Чиссова, С.И. Дарьяловой. 2000. - М.:Медицина - 736с.
28. Иевлева Е.С., Щербицкая И.Я., Маршутина Н.В., Пугачев К.К. Иммуногистохимическое изучение антигена плоского эпителия и возможность его использования в качестве маркера плоскоклеточного рака. //Бюл. эксп. биол. и мед. 1995. - № 2. - С. 209-211.
29. Исакова JI.M. Цитологическая и морфологическая характеристика паиилломавирусной инфекции человека при патологии шейки матки. //Архив патологии. 1991 № 1. С. 75-78.
30. Канаев С.В., Туркевич В.Г., Авакумова В.В. Результаты сочетанной лучевой терапии рака шейки матки. //Материалы научной конференции «Актуальные вопросы медицинской радиологи». Тез. докл. -СПб., 1998.-С.271.
31. Киселев Ф.Л. Вирус-ассоциированные опухоли человека: рак шейки матки и вирусы папиллом //Биохимия. 2000. - Т. 65. - № 1. - С.79-91.
32. Киселев В.И. Этиологическая роль вируса папилломы человека в развитии рака шейки матки: генетические и патогенетические механизмы. //Венеролог. 2005. - № 7. - С. 19-21.
33. Коган Е.А., Угрюмов Д.А., Жак Г. Морфологические и молекулярно-гинетические особенности процессов кератинизации и апоптоза в плоскоклеточных раках легких. //Арх. патол. 2000. - № 3. - С. 16-20.
34. Коломиец JI.A., Уразова JI.H. Генитальная папилломавирусная инфекция и рак шейки матки. — Томск: Изд-во HTJI. 2002. — 100 е.: ил.
35. Кольман Я., Рём К.-Г., Наглядная биохимия: пер. с нем. — М.:Мир, 2000. 469 е., ил
36. Кононов А.В. Местный иммунитет и регенерация слизистых оболочек при хроническом воспалении. Омск, 1993. — 320 с.
37. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза. //Биохимия. 2000. - Т. 65. - № 1.-С. 5-21.
38. Копнин Б.П. Опухолевые супрессоры и мутаторные гены. //Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина РАМН, Москва. -2002.
39. Копнин Б.П. Механизмы действия онкогеннов и опухолевых супрессоров. //Материалы VII Российской Онкологической Конференции, г.Москва, 25-27 ноября 2003г.- 217 с.
40. Коршунов А.Г., Сычева Р.В., Голанов А.В. Иммуногистохимическое изучение апоптоза в глиобластомах больших полушарий головного мозга. //Архив Патологии. 1998 Т. 60 .- № 3. - С. 2327.
41. Косников А.Г., Чепик О.Ф., Максимов С.Я. Морфологические критерии, влияющие на прогноз плоскоклеточного рака шейки матки. //Вопросы онкологии. 1998. - Т. 44. - № 2. - С. 167-169.
42. Краевский Н.А., Смольянников А.В., Саркисов Д.С. (ред.). Патолого-анатомическая диагностика опухолей человека. М., «Медицина», 1993.-Т.1.-560 с.
43. Красильников С.Э. Патоморфологическое обоснование неоадьювантной химио-, лучевой терапии в сочетании с индуктором интерфероногенеза в комплексном лечении рака шейки матки. — Дис-я на соиск. учен. степ, д-ра мед. наук. 2004.- 264 с.
44. Краснопольский В.И. (ред.) Патология влагалища и шейки матки. — М., «Медицина», 1997. 271с.
45. Крикунова Л.И. Лучевая терапия рака шейки матки. //Практ. онкол. 2002. - Т. 3.-№ 3 - С. 194-199.
46. Кузнецов В.В., Лебедев А.И., Морхов К.Ю., Нечушкина В.М. Пятилетние результаты комбинированного и комплексного лечения рака шейки матки. Материалы Всероссийского научного форума «Радиология 2005». М.: «МЕДИ Экспо» - 2005. - С.219-220.
47. Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Кондриков Н.И., Роговская С.И. Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы: клин, лекции. М.: Медпресс, 2000. - 427с.
48. Кулинич Т.М. Исследование пролиферативной активности интернализируемых пептидов, содержащих фрагменты ингибиторов циклиновых киназ pl6INK4A и р21 CIP/KIP. диссертация на соиск. учен, степ. канд. мед. наук. — 2006 - 187 с.
49. Лактионов К.П. Современные подходы к лечению рака шейки матки. //Мед. помощь. 2001. - № 6. - С. 12-16.
50. Лихтенштейн А.В., Шапот B.C. Опухолевый рост: ткани, клетки, молекулы. //Пат. физиология и экспериментальная терапия. 1998. - № 3.- С. 25-44.
51. Лукьянова Н.Ю., Кулик Г.И., Чехун В.Ф. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей. //Вопр. онкологии. 2000. -Т. 46.-№2. -С. 121-128.
52. Лушников Е.Ф. Лучевой патоморфоз опухолей человека. М.: Медицина, 1977. - 328с., ил.
53. Лушников Е.Ф., Абросимов А.Ю. Гибель клетки (апоптоз). М. -2001.- 190с. . '
54. Мазуренко Н.Н. Роль вирусов папиллом в канцерогенезе шейки матки. //Современная онкология. 2003. — Т. 5. - № 1. - С. 7-10.
55. Мазурик В.К., Мороз Б.Б. Проблемы радиобиологии и белок р53 //Радиационная биология. Радиоэкология.- 2001.- Т. 41.-№ 5.-С. 548-572.
56. Максимов С .Я., Гусейнов К.Д., Косников А.Г., Антонеева И.И., Хаджимба А.С., Нахушев З.Х. Факторы риска возникновения злокачественных новообразований органов репродуктивной системы женщин. //Вопросы онкологии. 2003. - Т. 49. - № 4. - С. 496-498.
57. Мардынский Ю.С., Крикунова Л.И., Киселева М.В., Сидоркина Л.С. Результаты сочетанной лучевой терапии рака шейки матки на аппарате «SELESTRON» с использованием источников 137Cs средней активности. //Рос. онкол. журн. 1999. - № 5. - С. 4-7.
58. Мацко Д.Е., Шелихова К.В. Современные методы в практической онкоморфологии. //Практическая онкология. 2007. - Т. 8. - № 4. - С. 182-187.
59. Международная классификация онкологических болезней. МКБ-10. Второе издание./Под ред. К.Перси, В.В. Холтен, К.Мур. - ВОЗ. Женева, 1995.-114с.
60. Насонов E.JI. Селективные ингибиторы циклооксигеназы -2. Новые перспективы лечения заболеваний человека. //Теапевт. Архив.- 1996. -Т. 70. -№5.-С. 8-14.
61. Насонов E.JI. Ингибиторы циклооксигеназы-2. Современная концепция (лекция). //Теапевт. Архив. 1998. - Т. 71. - № 11.- С.54-57.
62. Насонов E.JI. Специфические ингибиторы циклооксигеназы-2, решенные и нерешенные проблемы. //Клинич. фармакология и терапия. 2000. -Т. 9.-№ 1.-С. 57-64.
63. Невзорова Д.В. Клиническая оценка прогностического значения пролиферативной активности и уровня экспрессии белка р53 опухолевых клеток при радиотерапии рака тела и шейки матки. автореф. на соиск. учен, степ. канд. мед. наук. - 2003.- 48с.
64. Новик В.И. Эпидемиология рака шейки матки. Факторы риска, скрининг.//Практическаяонкология.-2002.-Т.3,№ 3.-С. 156-165.
65. Павлов А.С., Костромина К.Н. Рак шейки матки. М.: Медицина, 1983.-С.169.
66. Патология влагалища и шейки матки. /Под ред. В.И. Краснопольского. М.: Медицина, 1997. - 272с.
67. Патрушев Л.И. Экспрессия генов. //М.: Наука, 2000; С. 696-670.
68. Погосян Н.Р., Жорданиа К.И. Особенности течения рака тела матки у женщин репродуктивного возраста. //Современная онкология. М. -2002. Т. 4. - № 2. - С. 54-56.
69. Петрова Г.В., Старинский В.В. Выявление злокачественных новообразований при проведении профилактических осмотров в России в 2002г.//Современные технологии в онкологии: материалы VI Всероссийского съезда онкологов. Том 2. М., - 2005. - С. 194-195.
70. Петровичев Н.Н., Яворский В.В., Аргун В.М., Пирогова Н.А. Прогностическое значение гистологических признаков при плоскоклеточном раке кожи туловища и конечностей. //Арх. патол. 1987. — Вып.1. - С. 37-41.
71. Практическая онкология: избранные лекции. Под редакцией С.А.Туляндина и В.М.Моисеенко. Санкт-Петербург: Центр ТОММ. - 2004. -784с.
72. Прилепская В.Н., Костава М.Н., Назарова Н.М. //Акушерство и гинекология 1997. - 1992. - № 8-12. - С. 53-56.
73. Роговская С.И. Апоптоз при патологии шейки матки, ассоциированной с вирусом папилломы человека //Гинекология. 2000.- Т. 2-№ З.-С. 17-23.
74. Рудакова Е.Б., Кононов А.В., Возникевич И.Г. Пролиферативная активность эпителия шейки матки при инфекциях, передаваемых половым путем. //Акушерство и гинекология. 1995. - № 1.-С. 48-50.
75. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека.: Издание 2-е, дополненное и переработанное. /Под ред. С.В. Петрова и Н.Т. Райхлина. Казань, - 2000. - 288с.
76. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека.: Издание 3-е, дополненное и переработанное. /Под ред. С.В. Петрова и Н.Т. Райхлина. Казан «Титул», - 2004. - 456 с.
77. Сергеева М.Г., Варфоломеева А.Т., «Каскад арахидоновой кислоты», М., Народное образование, 2006, 256 с.
78. Харитонова Т.В. Возможности лекарственной терапии рака шейки матки. //Клиническая онкология. 2004. - Т.7. - №. 3. - С. 135141.
79. Харитонова Т.В. Рак шейки матки: актуальность проблемы, принципы лечения. //Совр. Онкология. 2004. - Т. 6 - №. 2 - С. 51-54.
80. Холин В.В., Бартова В.Ф. Значения объема опухоли в исходе лучевого лечения рака различных локализаций. //Мед. Радиол. 1988. -№4.-С. 25-27.
81. Чазова Н.Л., Швец Н.А., Берщанская A.M., Мельникова Н.В. исследование онкобелка pl6INK4A в плоскоклеточном раке шейки
82. Чиссов В.И., Давыдов М.И., Старинский В.В., Ковалев Б.Н. Богатырев В.Н. и др Методология и организация скрининга рака шейки матки. //Современные технологии в онкологии: материалы VI Всероссийского съезда онкологов. — Том 1. — М., .2005. - С. 216.
83. Фильченков А.А., Стойко Р.С. Апоптоз и рак. — Киев: Морион, 1999. - 184с.
84. Финковская А.В. Исследование ассоциаций мутаций в анти<знкогене PTEN с доброкачественными и злокачественными заболеваниями тела матки и яичников. — дис. на соискание учен. степ, канд. мед. наук. — 2005. — 138 с.
85. Урманчеева А.Ф., Мерабишвили В.М., Сальков С.А. и др. Эпидемиология и диагностика рака шейки матки. //Акуш. и гин. 2001. - T.XLX. - Вып. 1. - С. 80-86.
86. Яковлева И.А., Черный А.П. Морфология и вопросы гистогенеза рака шейки матки. //Архив патол. 1985. - № 3. - С. 19-27.
87. Acharki A., Sahraoui S., Benider A., Tawfig N., Jouhadi H., Bouras N., Samlali R., Kahlain A. Cancer of the uterine cevix in young women. A retrospective study of337 cases. //Bull. Cancer. 1997. - Vol. 84. - № 4. - P. 1231-39.
88. Ali I.U. Gatekeeper for endometrium: the PTEN tumor suppressor gene. //J. Natl. Cancer Inst. 2000. - Vol. 92. - № 11. - P. 861-863.
89. Amant F„ de la Rey M., et al. PTEN mutations in uterine sarcomas. //Gynecol Oncol 2002. Vol.85. -№1. -P. 165-169.
90. Anai S., Goodison S., Shiverick K., Iczkowski K., Tanaka M.5 Rosser С.J. Combination of PTEN gene therapy and radiation inhibits the growth of human prostate cancer xenografts. //Hum Gene Ther. 2006. - Vol. 17. - № 10. - P. 97584.
91. Anttila Т., Saikku P., Koskela. et al. Serotypes of Chlamydia trachomatis and risk for development of cervical squamous cell carcinoma. //JAMA/ 2001. - Vol. 285. -№1. -P. 47-51.
92. Ball K.L., Lain S., Fahraeus R., Smythe C., Lane D.P. cell-cycle arrest inhibitor of Cdk4 activity by small peptides based on the carboxy-terminal domain of p21wafi //CurrentBiology. 1996. - Vol. 7. -P. 71-80.
93. Benda J.A. Histopathologic prognostic factors in early stage cervical carcinoma // J. Natl. Cancer Inst. Monogr. 1996. - №21. - P.27-34.
94. Bernard Kwabi-Addo, Dipak Gin, et al. Haploinsufficiency of the PTEN tumor suppressor gene promotes prostate cancer progression. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol. 98. - № 20. - P. 11563-11568.
95. Bernhard E.J., Muschel R.J, Bakanauskas V.J. et al. Reducing the radiation-induced G2 delay causes HeLa cells to undergo apoptosis instead of mitotic death. //Int. J. Radiat. Biol. 1996. - Vol. 69. - P. 575-584.
96. Bosch F.X., Manos M.M., Munoz M. et al. Prevalence of Human papillomavirus in cervical cancer a worldwide oerspective. //J. Nat. Cancer. -1995.-Vol. 87.-P. 796-802.
97. Bosch F.X., Lorinez A., Munoz M. et al. The causal relation between human papillomavirus and cervical cancer. //J. Clin. Pathol. 2002. - Vol. 55. - P. 244-265.
98. Bowen I.D. Apoptosis or programmed cell death? //Cell Biol. Int. -1993. Vol. 17. - № 4. - P. 365-380.
99. Burck K., Liu E., Larrick J. //Oncogenes. Berlin, 1988. - P. 374.
100. Busch M 2nd., Duhmke E., Kuhn W.,Teichmann A. Definitive radiation therapy in the treatment of carcinoma of the uterine cervix. Treatment results and prognostic factors. //Strahlenther Oncol. 1991. - Vol. 167. - № 11. - P. 628-37.
101. Bussaglia E, del Rio E, et al. PTEN mutations in endometrial carcinomas: a molecular and clinicopathologic analysis of 38 cases. //Hum. Pathol. -2000. Vol. 31. - №3. - P. 312-317.
102. Castle P.E., Wacholder S., Lorincz A.T. et al. A prospective study of high-grade cervical neoplasia risk among human papillomavirus-infected women. //J. Natl. Cancer Inst. 2002. -Vol .94.-№ 18. -P.1406-1414.
103. Chang J., Ormerod M., Powles T.J. et al. Apoptosis and proliferation as predictors of chemotherapy response in patients with breast carcinoma. //Cancer. -2000. Vol. 89. - № 11. - P. 2145-2152.
104. Chappuis P.O., Kapusta 1., Begin L.R. et al. Germinal BRSA1/2 mutations and p27Kipl protein levels independently outcome after breast cancer. //J. Clin. Oncol. 2000. - Vol. 18. - P. 4045-4052.
105. Clarke A.R., Purdie C.A. Harrison D.J. et al. Thymocyte apoptosis induced by p53-dependent and independent pathways. //Nature. 1993. - Vol. 362. — P 849-851.
106. Colin D.E., Basil J.B. Absence of PTEN repeat tract mutation in endometrial cancers with microsatellite instability. //Gynecol. Oncol. 2000. - Vol. 79. - № 1. - P. 101-106.
107. Dai Y., Zhang X., Peng Y., Wang Z. The expression of cyclooxygenase-2, VEGF and PGs in CIN and cervical carcinoma. //Gynecol. Oncol. 2005. - Vol. 97. - № 1. - P. 96-103.
108. Datta S.R., Dudek H., Tao X. Akt phosphorylation of BAD couples survival signals to the cell-intrinsic death machinery. //Cell. 1997. — Vol. 91. - № 2. -P. 231-241.
109. Dewey W.C., Ling C.C., Meyn R.E. Radiation-induced apoptosis: relevance to radiotherapy. //Ibid. 1995. - Vol. 33. - P. 781-796.
110. Dongli Zhao. Serum CYFRA 21-1 in cervical cancer patients treated with radiation therapy. //J. Cancer Research and Clin. Oncol. Vol. 126. - № 6. - P. 332-336.
111. Downes C.P., Bermet D. Antagonism of PI 3-kinase-dependent signalling pathways by the tumour suppressor protein, PTEN. //Biochemical Society Transactions. 2001. - Vol. 29. part 6. - P. 246-250.
112. Dressier L.G. Control, standatds, and histogram interpretation in DNA flow cytometiy. //Bioligy. 1990. - Vol. 33. - P .157.
113. Ebisawa K., Shinozuka Т., Kawai K. Retrospective analysis of relationship between progression and regression of dysplasia and existence of HPV DNA by in situ hybridization. //Nippon Sanka Fujinka Gakkai Zasshi. 1994. - Vol. 46. - № 10. - P. 1041-1048.
114. Esteller M, Catasus L, Matias-Guiu X. hMLHl promoter hypermethylation is an early event in human endometrial tumorigenesis. //Am JPathol. 1999.-Vol. 155.-P. 1767-1772.
115. Ezhevsky S.A., Ho A., Becker M. Differential Regulation of Retinoblastom a Tumor suppressor Protein by G1 Cyclin-Dependent Kinase Complexes In Vivo. //Molekular and cellular biology. 2001. - Vol. 21. - № 14. — P. 4773-4784.
116. Finan R.R., Tamim H., Almawi W.Y. Identification of Chlamydia trachomatis DNA in human papillomavirus (HPV) positive women withnormal and abnormal cytology. //Arch. Gynecol. Obstet. 2002. -Vol. 266. - № 33. - P.l68-171.
117. Fisher D.E. Apoptosis in cancer therapy: crossing the threshold. //Cell. -1994.-№78.-P. 539-542.
118. Fischer N. Chlamydia trachomatis infection in cervical intraepithelial neoplasia and invasive carcinoma. //Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2002. -Vol. 23. - № 3. - P. 247-250.
119. Fogel S., Riou G. The early HPV16 proteins can regulate mRNA levels of cell cycle genes in human cervical carcinoma cells by p53-independent mechanisms. //Virology.-1998. Vol. 244. - № 1. - P. 142-146.
120. Fosslien E. Molecular pathology of cyclooxygenase-2 in neoplasia. //Ann Clin Lab Sci. 2000. - Vol. 30. - № 1. - P. 3-21.
121. Fosslien E. Biochemistry of cyclooxygenase (COX)-2 inhibitors and molecular pathology of COX-2 in neoplasia. //Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. -2000. Vol. 37.-№5.-P. 431-502.
122. Franco E.L., Duarte-Franco E., Ferenczy A. Cervical cancer. -Epidemiology, prevention and the role of human papillomavirus infection. //CMAJ. 2001. - Vol. 164. - № 7. - P. 1017-102.
123. Fujii H., Matsumoto T. Genetics of synchronous uterine and ovarian endometrioid carcinoma: combined analyses of loss of heterozygosity, PTEN mutation and microsatellite instability. //Hum. Pathol. 2002. - Vol. 33. - № 4. - P. 421-428.
124. Gavin P. Robertson, Frank B. Fumari, et al. In vitro loss of heterozygosity targets the PTEN/MMAC1 gene in melanoma. //Cancer Res. 1998. -Vol. 95.-№ 16.-P. 9418-9423.
125. Gonzalez-Sanchez J.L., Martinez-Chequer J.C., Hernandez-Celaya M.E. et al. Randomized placebo-controlled evaluation of intramuscular interferon beta treatment of recurrent human papillomavirus. //Obstet. Gynecol. 2001. - Vol. 97. - № 4. - P. 621-624.
126. Goswami R., Singh D., et al. Membrane lipid regulation of the tumor suppressor phosphatase PTEN. //Neurochem. 2002. - Vol. 81. - № 1. - P. 98-99.
127. Gram I.T., Macaluso M., Churchill J., Stalsberg H. Trichomonas vaginalis and human papillomavirus infection and the incidence of cervical intraepithelial neoplasia grade III. //Cancer Causes Control. -1992. Voll. 3. -№ 3. - P. 231-236.
128. Guan R.J., Fu Y., Holt P.R., Pardee A.B. Association of K-ras mutations with pi6 methylation in human colon cancer. //Gastroenterology. 1999. - Vol. 11.-№5.-P. 1063-71.
129. Guijon F., Paraskevas M., Rand F. et al. Vaginal microbial flora as a cofactor in the pathogenesis of uterine cervical intraepithelial neoplasia. //Int. J. Gynaecol. Obstet. 1992. - Vol.37. - №3. - P.185-91.
130. Haupt Y., Maya R., Kazaz A., et al. Mdm2 promotes the rapid degradation of p53. //Natura. 1997. - № 38. - P. 296-299.
131. Haverkos H.W., Soon G., Steckley S.L, Pickworth W. Cigarette smoking and cervical cancer. P. Part I. - P. a meta-analysis. //Biomed. Pharmacother. - 2003. - Vol. 57. - № 2. - P. 67-77.
132. Helga B. Salvesen, Nicola MacDonald, et al. Methylation of hMLHl in a population-based series of endometrial carcinomas. //Clin. Cancer Res. 2000. -Vol. 6.-P. 3607-3613.
133. Hengstermann A., Linares L.K., Ciechanover A. et al. Complete switch from Mdm2 to human papillomavirus E6-mediated degradation of p53 in cervical cancer cells. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol. 98. - № 3. p. 1218-1223.
134. Hemminki K., Li X., Mutanen P. Familial risks in invasive and in situ cervical cancer by histological type. //Eur. J. Cancer Prev. 2001. -Vol. 10 .- № 1 .- P. 83-89.
135. Hideaki Kato, Shunsuke Kato, et al. Functional evaluation of p53 and PTEN gene mutations in gliomas. //Clin. Cancer Res. 2000. - Vol. 6. - P. 39373943.
136. Hildesheim A., Wang S.S. Host and viral genetics and risk of cervical cancer. //Virus Res. 2002. - Vol. 89. - № 2. - P. 229-240.
137. Hollstein M., Sidransky D., Vogelstein B, et al. p53 mutation in human cancers. //Science. 1991. - № 253. - P. 49-53.
138. Hopkins M.P. and Morley G.W. The prognosis and management of cervical cancer associated with pregnancy //Opstet. Gynecol. 1992. - Vol.80. -P.9-13.
139. Holtz D., Ramondetta L.M., Burke TW., Palazzo J.P., Dunton С J., Atkinson E.N., Broaddus R.R. PTEN expression in tamoxifen-associated endometrial cancers. //Anticancer Res. 2002. - Vol. 22. - № 5. - P. 2945-8.
140. Huang J., Kontos C.D. PTEN modulates vascular endothelial growth factor-mediated signaling and angiogenic effects. 111. Biol. Chem. — 2002. — Vol. 277. -№ 13.-P. 10760-10766.
141. Hulka B.S. Epidemiologic analysis of breast and gynecologic cancers. //Prog. Clin. Biol. Res. 1997. - Vol. 396. - P. 1231-1237.
142. Hunter R.D. Dose rate correction in LDR intracavitary therapy: Brachytherapy from Radium to Optimization. — The Netherlands. 1994. - P. 55-59.
143. Ikenberg H., Teufel G., Schmitt B. et al. Human papillomavirus DNA in distant metastases of cervical cancer. //Gynecol. Oncol. 1993. -Vol. 38. - № 1. - P. 56-60.
144. Iqbal Unnisa Ali, Lynn M. Schriml, Michael Dean. Mutational spectra of PTEN/MMAC1 gene: a tumor suppressor with lipid phosphatase activity. //J. of the National Cancer Institute. 1999. - Vol. 91. - № 22. - P. 1922-1932.
145. Kamura Т., Tsukamoto N., Tsuruchi N. et al. Multivariate analysis of the histopathologic prognostic factors of cervical cancer in patients undergoing radical hysterectomy. //Cancer. 1992.-Vol.69.-P. 181-186.
146. Kastan M.B., Onyekwere O., Sidransky D. et al. Participation of p53 protein in the cellular response to the DNA damage. //Camcer Res. -1991. № 51. -P. 6304-6311.
147. Kastain M.B., Bartek J. Celle-cycle checkpoints and cancer. //Nature. -2004. Vol. 432. - P. 316-323.
148. Kedzia H., Gozdzicka Jozefiak A., Kedzia W., Poreba E. The value of the presence of HPV 16 in pelvic lymph nodes of cervical cancer patients. //Eur. J. Gynaecol. Oncol. 1995. - Vol.16. - №3. - P. 199-202.
149. Kessis T.D., Slebos R.J., Nelson W.G. et al. Human papillomavirus 16 E6 expression disrupts the p53-mediated cellular response to DNA damage. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - Vol. 90. - № 9. - P. 3988-3992.
150. Klassen S., McFadden A., Bickis M. G., Torlakovic E., Chibbar R. Reduced PTEN expression predicts relapse in patients with breast carcinoma treated by tamoxifen. //Modern Pathology. 2005 - Vol. 18. - P.250-259.
151. Kleine K., Rau K., Schwoeorer D., Pfleiderer A. Prognosis of adenocarcinoma of the cervix uteri: a comparative study. — Departament of Obstetrics and Gynecology II, University of Freiburg, Federal Republic of Germany.- 1997.
152. Konopka В., Paszko Z., et al. Assessment of the quality and frequency of mutations occurrence in PTEN gene in endometrial carcinomas and hyperplasias. //Cancer Lett.-2002.-Vol. 178.-№ l.-P. 43-51.
153. Kovach J.S., Hartmann A., Blaszyk H. et al. Mutation detection by highly sensitive methods indicates that p53 gene mutations in breast cancer can have-important prognostic. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93. - P. 10931096.
154. Lacey J.V. Jr., Frisch M., Brinton L.A. et al. Associations between smoking and adenocarcinomas and squamous cell carcinomas of the uterine cervix (United States). //Cancer Causes Control. 2001. - Vol. 12.- № 2. P. 153-161.
155. Lane D.P., Crawford L.V. T antigen is bound to a host protein in SV40-transformed cells //Nature. 1979. - Vol. 278. - № 57. - P. 261-263.
156. Lane D.P., Benchimol S. p53: Oncogene or anti-oncogene? //Genes Dev. 1990.-№4. -P. 1-8.
157. Lassus P., Ferlin M., Piette J., Hibner U. Anti-apoptotic activity of wild-type p53. //EMBO. 1996. - Vol. 15. - № 17. - P. 4566-4573.
158. Lee J.M., Abrahamson J, Kandel R.} Donehower L. Susceptibility to radiation-carcinogenesis and accumulation of chromosomal breakage in p53 deficient mice. //Oncogene. 1994. - № 9. - P. 3731-3736.
159. Lehtinen M., Koskela P., Jellum E. et al. Herpes simplex virus and risk of cervical cancer. P. a longitudinal, nested case-control study in the nordic countries. //Am. J. Epidemiol. - 2002. - Vol. 156. - № 8. - P. 687892.
160. Leslie Nick R., Downes Peter C. PTEN: The down side of PI 3-kinase signalling. //Cellular Signalling. 2002. - Vol. 14. - № 1. - P. 311-317.
161. Levine AJ. The tumor suppressor genes. //Annu Rev. Biochem. 1993. - Vol. 62.-P. 623-651.
162. Liang X.H., Mungal S., ayscue A. et al. Bcl-2 protooncogene expression in cervical carcinoma cell lines, containing inactive . //J. Cell. Biochem. -1995.-Vol. 57.-P. 509-521.
163. Lim W.T., Zhang W.H., Miller C.R., Watters J.W., Gao F., Viswanathan A., Govindan R., McLeod H.L. PTEN and phosphorylated АКТ expression and prognosis in early- and late-stage non-small cell lung cancer.//Oncol Rep. 2007. - Vol.17. - № 4. - P. 853-7.
164. Liu X., Li P., Zhang S.T., You H., Jia J.D., Yu Z.L. COX-2 mRNA expression in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and effect by NSAID. //Dis Esophagus.-2008.-Vol. 21.-№ l.-P. 9-14.
165. Lo K.W., Cheung Т.Н., Chung TK. et al. Clinical and prognostic significance of human papillomavirus in a Chinese population of cervical cancers. //Gynecol. Obstet. Invest. 2001. -Vol. 51. - № 3. - P. 202-207.
166. Lowe S.W., Ruley H.E., Jacks Т., Housman D.E. p53-dependent apoptosis modulates the cytotoxicity of anticancer agents //Cell. 1993. - № 74. - P. 957-967.
167. Lowe S.W., Cepero E. et ai. Intrisic tmour supression. //Nature. 2004. -Vol. 432.-P. 307-315.
168. Maehama Т., Dixon J.E. The tumor suppressor, PTEN/MMAC1, dephosphorylates the lipid second messenger, phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate. //J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273. - №22. - P. 13375-13378.
169. Markowska J. The role of chlamydia trachomatis infection in CIN and cervical cancer development. //Ginekol Pol. 2002. -Vol. 73. - № 5. -P. 472-476.
170. Masahito Tamura, Jianguro Gu, et al. PTEN gene and integrin signaling in cancer. //J. of the Cancer Institute. 1999. - Vol. 91. - № 21. - P. 1820-1828.
171. Masumoto N., Fujii Т., Ishikawa M. et al. PI6 overexpression and human papillomavirus infection in small cell carcinoma of the uterine cervix. //Hum. Pathol. 2003. - Vol. 34. - № 8. - P. 778-783.
172. Meyn R.E., Stephens L.C., Ang K.K: et al. Heterogeneity in the development of apoptosis in irradiated murine tumours of different histologies. //Int. J. Radiat. Biol. 1993. - Vol. 64. - №5. - P.583-591.
173. Midgeley C.A., Fisher C.J., Bartek J. et al. Analysis of p53 expression in human tumours: An antibody raised against human p53 expressed in Escherichia coli. //J. Cell. Sci.- 1992. -№ 101. P. 183-189.
174. Moild R.F. Historical introduction. //8 International Brachytherapy Conference. Nice 1995. - P. XL VII-LIIL.
175. Moodley M, Moodley J., Chetty R., Herrington C.S. The role ofsteroid contraceptive hormones in the pathogenesis of invasive cervical cancer. P. a review. //Int. J. Gynecol. Cancer. - 2003. - Vol. 13. - № 2 -P. 103-110.
176. Muschel R.J, Soto D.E., McKenna W.G. et al. Radiosensitization and apoptosis. //Oncogene. 1998. - Vol. 17. - P. 3359-3363.
177. Mutter G.L., Lin M.C., et al. Altered PTEN expression as a diagnostic marker for the earliest endometrial precancers. //J. Natl. Cancer Inst. 2000. - Vol. 92. -№ 11.-P. 924-930.
178. Mutter G.L. PTEN, a Protean Tumor Suppressor. //American Journal of Pathology. 2001. - Vol. 158. - № 6. - P. 1895-1898.
179. Nagai Y., Maehama Т., Asato Т., Kanazawa K. Detection of human papillomavirus DNA in primary and metastatic lesions of carcinoma of the cervix in women from Okinawa, Japan. //Am. J. Clin. Oncol. 2001. -Vol. 24. - № 2. - P. 160-166.
180. Nzeako U.C., Guicciardi M.E., Yoon J.H., Bronk S.F., Gores G.J. COX-2 inhibits Fas-mediated apoptosis in cholangiocarcinoma cells. //Hepatology. — 2002. Vol. 35. - №» 3. - P. 552-9.
181. Ohno S, Ohno Y, Suzuki N, Soma G, Inoue M. Cyclooxygenase-2 expression correlates with apoptosis and angiogenesis in endometrial cancer tissue. //Anticancer Res. -2007. Vol. 27. - № 6A. - P. 3765-70.
182. Omer E.E., Naeem H.A., АН M.H. et a.l Vaginal and cervical abnormalities associated with trichomonal infection. //East. Afr. Med. J. 1991. - Vol. 68. - № 6. - P. 455-460.
183. Paavonen J., Karunakaran K.P., Noguchi Y. Et al. Serum antibody response to the heat shock protein 60 of Chlamydia trachomatis in women with developing cervical cancer. //Am. J. Obstet. Gynecol.2003.Vol. 189. № 5. -P. 1287-1292.
184. Park J.S., Chee Y.H., Namkoong S.E. et al. Human papillomavirus detection in cervical carcinoma tissues and paraaortic lymph nodes by the polymerase chain reaction. //Gynecol. Oncol. 1994. - Vol. 53 . - № 3. -P. 344-351.
185. Parkin D.M., Pisani P., Ferlay J. Global Cancer Statistics. //Cancer J.Clin. 1990. - Vol. 49. - № 1. - P. 33-64.
186. Pazdur R., Coia B.R., Hoskins W.S., Wagman L.D. (eds.) Cancer management: a multidisciplinary approach. //PRR, Huntington. 1996. -№ 4. - P. 1123-24.
187. Pereira H., Silva S., Juliao R., Garcia P., Perpetua F, Prognostic markers for colorectal cancer: expression of P53 and BCL2. //World. J. Surg. 1997. - Vol. 21.-№2.-P. 210-213.
188. Pfeiler G, Horn F, Lattrich C, Klappenberger S, Ortmann О, Treeck O. Apoptotic effects of signal transduction inhibitors on human tumor cells with different PTEN expression. //Oncol. Rep. 2007. - Vol. 18. - № 5 - P. 1305-9.
189. Pinto A.P., Tulio S., Cruz O.R. Hpv cofactors in cervical carcinogenesis. //Rev. Assoc. Med. Bras. 2002. - Vol. 48. - №1. - P.73-78.
190. Prakash M., Kapembwa M.S., Gotch F.,Patterson S. Oral contraceptive use induces upregulation of the CCR5 chemokine receptor on CD4(4-) T cells in the cervical epithelium of healthy women. //J. Reprod. Immunol. 2002. - Vol. 54. - № 1-2. - P. 117-131. '
191. Reesink-Peters N., Helder M.N., Wisman G.B. et al. Detection of telomerase, its components, and human papillomavirus in , cervical scrapings as a tool for triage in women with cervical dysplasia. //J. Clin. Pathol. 2003. - Vol. 56. - № 1. - P. 31-35.
192. Riou G., Favre M., Jeannel D. et al. Association between poor prognosis in early-stage invasive cervical carcinomas and non-detection of HPVDNA. //Lancet. 1990. - Vol. 335. - № 8. - P.I 171-1174.
193. Risinger J.I., Hayes A.K., et al. PTEN/MMAC1 mutations in endometrial cancers. //Cancer Res. 1997. - Vol. 57. - №21. - P. 4736-4738.
194. Rose P.G. Locally advanced cervical carcinoma: the role of chemoradiation. //Semin. Oncol. 1994.
195. Rutledge F.N., Mitchell M.F., Munsell M., Bass S., McGuffee V., Atkinson E.N. Youth is a prognostic factor in carcinoma of the cervix: a matched analysis. //Gynecol. Oncol. 1992. - Vol. 44. - № 2. - P. 123130.
196. Saldivar J.S., Lopez D., Feldman R.A., Tharappel-Jacob R., de la Rosa A., Terreros D., Baldwin W.S. COX-2 overexpression as a biomarker of early cervical carcinogenesis: a pilot study. //Gynecol. Oncol. -2007. Vol. 107. -Suppl.l. - S. 155-62.
197. Sarraf C.E., Bowen I.D. Kinetic studies on a murine sarcoma and an analysis of apoptosis. //Br. J. Cancer. 1986. - Vol. 54. - № 6. - P. 989-998.
198. Sawaya G.F., Harper C., Balistreri E. et al. Cervical neoplasia risk in women provided hormonal contraception without a Pap smear. //Contraception. 2001. - Vol. 63. - № 2. - P .57-60.
199. Sayed el-Ahl S.A., el-Wakil H.S., Kamel N.M., Mahmoud M.S. A preliminary study on the relationship between Trichomonas vaginalis and cervical cancer in Egyptian women. //J. Egypt. Soc. Parasitol. 2002. -Vol. 32.-№ l.-P. 167-178.
200. Scheffner M., Werness В .A., Huibregtse J.M. Levine A. J., Howley P.M. The E6 oncoprotein encoded by human papillomavirus types 16 and 18 promotes the degradation of p53. //Cell. 1990. - Vol. 63. - № 6. - P. 1129-1136.
201. Schiffman M.H. Epidemiology of cervical human papillomavirus infection. //Cuit. Top. Microbiol. Immunol. 1994. - Vol. 18. - P. 55-81.
202. Schneider A., Durst M., Kaufmann A.M. HPV infection and cervical carcinoma epidemiology,, detection and immunology. //Zentralbl.
203. Gynakol. 2001. - Vol. 123. - № 4. - P. 179-185.
204. Sheng H., Shao J., Morrow J.D., Beauchamp R.D., DuBois R.N. Modulation of apoptosis and Bcl-2 expression by prostaglandin E2 in human colon cancer cells. //Cancer Res. 1998. - Vol. 58. - № 2. - P. 362-6.
205. Sheng X., Koul D., et al. Promoter analysis of tumor suppressor gene PTEN identification of minimum promoter region. //Biochem. Biophys. Res. Commim. 2002. - Vol. 292. - № 2. - P. 422-426.
206. Sierra-Torres C.H., Au W.W., Arrastia CD. et al. Polymorphisms for chemical metabolizing genes and risk for cervical neoplasia. //Environ. Mol. Mutagen. 2003. - Vol. 41. - № 1. - P. 69-76.
207. Smith J.S., Herrero R., Bosetti С et al. Heipes simplex virus-2 as a human papillomavirus cofactor in the etiology of invasive cervical cancer. //J. Natl. Cancer. Inst. 2002. - Vol. 94. - № 21. - P. 1604-1613.
208. Smith J.S., Green J., Berrington de Gonzalez A. et al. Cervical cancer and use of hormonal contraceptives. P. a systematic review. //Lancet. -2003. - Vol. 361. - № 936. - P.I 159-1167.
209. Soumaoro L.T., Uetake H., Takagi Y., Iida S., Higuchi Т., Yasuno M., Enomoto M., Sugihara K. Coexpression of VEGF-C and Cox-2 in human colorectal cancer and its association with lymph node metastasis. //Dis Colon Rectum. 2006. -Vol. 49.-№3.-P. 392-8.
210. Sood A.K., Sorosky J.I., Mayr n. et al. Radiotherapeutic management of cervical cancer complicating pregnancy: a case-control studi // Gynec. Oncol. — 1997. Vol.63. - P.294-298.
211. Tannock I.F., Lee C. Evidence against apoptosis as a major mechanism for reproductive cell death following treatment of cell lines with anti-cancer drugs. //Br. J. Cancer.-2001.-Vol. 84. № 1. - P. 100-105.
212. Thomaidou D., Mione M.C., Cavanagh J.F., Parnavelas J.G. Apoptosis and its relation to the cell cycle in the developing cerebral cortex. //J. Neurosci. - -1997.-Vol. 17.-P. 1075-1085.
213. Thomas M., Pirn D., Banks L. The role of the E6-p53 interaction in the molecular pathogenesis of HPV. //Oncogene. 1999. - Vol. 18. - № 53. p.7690-7700.
214. Thomas D.B., Ray R.M., Qin Q. et al. Risk factors for progression of squamous cell cervical carcinoma in-situ to invasive cervical cancer. -P. results of a multinational study. // Cancer Causes Control. 2002. -Vol. 13. -№ 7. -P. 683-690.
215. Tsang N.M., Nagasawa H., Li C., Little J.B. Abrogation of p53 function by transfection of HPV 16 E6 gene enhances the resistance of human diploid fibroblasts to ionizing radiation. //Oncogene. 1995. - Vol. 10. - № 12. - P. 24032408.
216. Veronese S., Mauri F.A., Caffo O. et al. Bax immunohistochemical expression in breast carcinoma: a studi with long term follow-up. //Int. J. Cancer. -1998.-Vol. 79.-P. 13-18.
217. Vries A., Flores E.R., Miranda B. et al. Targeted point mutations of p53 lead to dominant-negative inhibition of wild-type p53 function. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - Vol. 99. - № 5. - P. 2948-2953.
218. Wada M., Bartram C.R., Nakamura H. et al. Analysis of p53 mutations in a large series of lymphoid hematologic malignancies of childhood. //Blood. -1993. Vol. 82. - № 10. - P. 3163-3169.
219. Waggoner S.E., Wang X. Effect of nicotine on proliferation of normal, malignant, and human papillomavirus-transformed human cervical cells. //Oncol. 1994. - Vol. 55. - № 1. - P. 91-95.
220. Wallin K.L., Wiklund F., Luostarinen T. et al. A population-based prospective study of Chlamydia trachomatis infection and cervical carcinoma. //Int. J. Cancer. 2002. - Vol. 101. - № 4. - P. 371-374.
221. Wang H., Douglas W., et al. DNA mismatch repair deficiency accelerates endometrial tumorigenesis in PTEN heterozygous mice. //Am. J. Pathol. -2002.-Vol. 160. № 4. - P. 1481-1486.
222. Wishart M.J., Dixon J.E. PTEN and myotubularin phosphatases: from 3-phosphoinositide dephosphorylation to disease. Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten. //Trends. Cell. Biol. 2002. - Vol. 12. - № 12. - P. 579-585.
223. Yuen P. W., Man M., Lam K. Y., Kwong Y. L. Clinicopathological significance of pi6 gene expression in the surgical treatment of head and neck squamous cell carcinomas. //J. Clin. Pathol. -2002. Vol. 55. - № 1. - P. 58-60.
224. Zaino R., Wards S., Frumenhoffer E. Histopathologic predictors of behavior of squamous carcinoma. //Lab. Invest. 1989. - Vol. 60. - P. 108A.g try
225. Zhang W. Relative risk analysis of the development of cervical noncancer lesion and cervical carcinoma associated with HPV infection. //Chung. Hua. Liu. Hsing Ping. Hsueh Tsa. Chili. 1993. - Vol. 14. - № 5. - P. 00-303.
226. Zheng W., Baker H.E., Mutter G.L. Involution of PTEN-null endometrial glands with progestin therapy. //Gynecol Oncol. -2004. Vol. 92. - № 3. -P. 1008-13.
227. Zhou C, Bae-Jump V.L., Whang Y.E., Gehrig P.A., Boggess J.F. The PTEN tumor suppressor inhibits telomerase activity in endometrial cancer cells by decreasing hTERT mRNA levels. //Gynecol Oncol. 2006. - Vol. 101. - № 2. - P. 305-10.