Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза

Сухинина, Татьяна Сергеевна

Диссертации по медицине → Кардиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.05) на тему:Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Сухинина, Татьяна Сергеевна Москва 2011 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.01.05

Автореферат диссертации по медицине на тему Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза

На правах рукописи

Сухинина Татьяна Сергеевна

системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза

14.01.05 Кардиология 03.02.07 Генетика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 2 МАЙ 2011

МОСКВА 2011

4845184

Работа выполнена в отделе неотложной кардиологии Института клинической кардиологии им. А.Л. Мясникова ФГУ «Российский кардиологический научно-производственный

комплекс» МЗ и СР РФ.

Научные руководители:

Доктор медицинских наук, профессор

Руда Михаил Яковлевич

Доктор биологических наук, профессор

Фаворова Ольга Олеговна

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор

Сулимов Виталий Андреевич

Доктор медицинских наук, профессор

Постнов Антон Ювенальевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО РГМУ им.Н И. Пирогова МЗ и СР РФ

Защита диссертации состоится « 26 » мая_2011 г. в 13.30 на заседании

диссертационного совета Д 208.073.04 по присуждению ученой степени кандидата наук в ФГУ «Российский кардиологический научно-производственный комплекс» МЗ и СР РФ (Москва, 121552, 3-я Черепковская ул., д. 15а).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «РКНПК» МЗ и СР РФ.

Автореферат разослан «;

Л 2011,

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук

Т.Ю. Полевая

Список сокращений

АКШ - аорто-коронарное шунтирование АПФ - ангиотензин превращающий фермент

АРА - антагонисты рецепторов ангиотензина II

ДИ - доверительный интервал

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИМ - инфаркт миокарда

HMönST - ИМ без подъема сегмента ST

HMnST - ИМ с подъемом сегмента ST

ЛПВП - липопротеиды высокой плотности

ЛПНП - липопротеиды низкой плотности

НК - недостаточность кровообращения

ОКС - острый коронарный синдром

ОНП -однонуклеотидный полиморфизм

ОШ - отношение шансов

ПЦР - полимеразная цепная реакция

ПЦР- ПДРФ - анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов продуктов ПЦР

ПЦР-SSP - ПЦР с использованием набора аллелеспецифических праймеров п.н. - пары нуклеотидов

ТБКА - транслюминальная баллонная коронарная ангиопластика

ЧПЭС - чреспищеводная электростимуляция

ЭКГ - электрокардиограмма (графия)

ЭХОКГ - эхокардиография

CCR5 — СС-5 хемокиновый рецептор

CRP - С-реактивный белок

IL-6 - интерлейкин 6

LTA - лимфотоксин а

TGFB1 - трасформирующий ростовой фактор ß 1 TNF - фактор некроза опухоли

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

По данным ВОЗ сердечно-сосудистые заболевания, главным образо инфаркт миокарда (ИМ), занимают первое место среди причин смерти во все мире, в том числе и в России [2002 Heart and Stroke Statistical Update], И заметно ухудшает качество и продолжительность жизни. Первичн профилактика ИМ является важной задачей здравоохранения. Около 50 больных, перенесших ИМ, не имеют предшествующего коронарного анамнез Выявление групп с высокой вероятностью развития ИМ позволит актив наблюдать этих лиц и, возможно, проводить профилактическое лечение.

ИМ является мультифакториальным заболеванием. Его развит происходит под влиянием различных факторов, определяющихся к воздействием внешней среды, так и наследственной предрасположенность При этом многие факторы риска ИМ, как генетические, так и средовы оказывают взаимное влияние друг на друга. Такие общеизвестные фактор риска ИМ, как артериальная гипертония, гиперхолестеринемия, сахарнь диабет, во многом генетически обусловлены. Сам факт ИМ у ближайш родственников больного является независимым предиктором это заболевания. В 1992г Cambien с соавт. продемонстрировали, что I/ полиморфизм гена ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) связан риском развития ИМ [Cambien и совт., 1992]. В дальнейшем были проведен сотни исследований по изучению этого и других полиморфизмов одного ге для уточнения их связи с ишемической болезнью сердца (ИБС) и И Единственный ген, который бы определял риск развития заболевания, так и был найден. В настоящее время сложилось четкое представление, ч генетической основой ИБС и ИМ как полигенных заболеваний являет совместный вклад ряда взаимодействующих или независимо действующ! генов, в связи с чем предпочтительным становится комплексный анализ вкла различных генов в развитие ИМ. В исследованиях, где не проводится полнь геномный поиск и число выбранных генов-кандидатов не велико, как правил

рассматриваются генетические маркеры, белковые продукты которых относятся к определенной системе организма или звену патогенеза заболевания (свертывающая система, метаболизм липидов и др.).

В основе развития острого коронарного синдрома (ОКС) и ИМ лежит концепция нестабильности атеросклеротической бляшки [Libby и соавт., 2001]. Исследования в этой области показали, что процесс дестабилизации атеросклеротической бляшки напоминает классическую воспалительную реакцию, в которой непосредственное участие принимают эндотелиальные клетки, макрофаги, Т-лимфоциты, нейтрофилы и гладкомышечные клетки. Мы посчитали важным оценить влияние генов, белковые продукты которых участвуют в воспалительной реакции, на риск возникновения и прогноз ИМ. Выбор полиморфных участков исследуемых генов определялся их функциональной значимостью.

Цель исследования:

Цель исследования - анализ связи полиморфизмов генов, относящихся к системе воспаления, а именно, генов С-реактивного белка (CRP), интерлейкина-6 (IL-6), лимфотоксина альфа (LTA), фактора некроза опухоли (TNF), трансформирующего ростового фактора ßl (TGFB1) и хемокинового рецептора СС-5 (CCR5), с риском возникновения ИМ и прогнозом его течения.

Задачи исследования:

1. Провести сравнительный анализ распределения аллельных вариантов генов, белковые продукты которых вовлечены в реакцию воспаления, а именно, аллелей и генотипов однонуклеотидных полиморфизмов (ОНП) С1444Т гена CRP, G(—174)С гена IL-6, A252G гена LTA, A(-308)G гена TNF, A(-509)G гена TGFB1 и инсерционно-делеционного полиморфизма w/d гена CCR5, у больных с ИМ и в контрольной группе.

2. Провести комплексный анализ совместного влияния носительства аллелей и генотипов исследованных полиморфных участков генов на риск развития ИМ.

3. Провести анализ связи вариантов полиморфизма С1444Т гена CRP уровнем CRP у больных ИМ.

4. Оценить связь носительства аллелей и генотипов исследованны полиморфных участков генов с исходами заболевания больных ИМ по данны двухлетнего наблюдения.

Научная новизна работы

Впервые исследовано влияние полиморфизмов С1444Т гена CR G(-174)C гена IL-6, A252G гена LT А, A(-308)G гена TNF, A(-509)G ге TGFB1, w/d гена CCR5 на риск развития ИМ и прогноз течения заболевания данным двухлетнего наблюдения. Впервые в отечественной практике проведе комплексный анализ связи носительства аллелей и генотипов гено относящихся к системе воспаления, а именно, генов CRP, IL-6, LTA, TN TGFB1 и CCR5, с риском развития ИМ. Впервые для больных ИМ, русских этнической принадлежности, выявлена связь риска развития ИМ с генотипо Т/Т полиморфного участка С1444Т гена CRP, аллелем w и генотипом w/ полиморфизма w/d гена CCR5 и аллелем А и генотипом А/А полиморфиз A252G LTA. С помощью программного обеспечения APSampler выявлены д сочетания, носительство которых ассоциировано с риском развития ИМ сочетание генотипа w/w гена CCR5 с аллелем (-509)Т гена TGFB1 и сочетай аллелей А252 гена LTA и (~509)Т гена TGFB1, а также ряд сочетани носительство которых является благоприятным фактором с точки зрен оценки риска развития этого заболевания.

Проведен анализ связи носительства аллельных вариантов полиморфиз С1444Т гена CRP с уровнем CRP у больных ИМ, русских по этническ принадлежности. Выявлена ассоциация генотипа Т/Т с более высоким уровне CRP. Эти данные, в сочетании с наблюдавшейся нами ассоциаци носительства аллеля Т данного полиморфизма с неблагоприятным прогнозом больных ИМ, согласуются с современным представлением, что высок уровень CRP в крови у больных ИМ является плохим прогностически признаком.

Выявлено прогностическое значение анализа полиморфизма С1444Т гена CRP и полиморфизма A252G гена LT А у больных ИМ, русских по этнической принадлежности.

Практическая значимость работы

Носительство генотипов Т/Т ОНП С1444Т гена CRP, w/w полиморфизма w/d гена CCR5 и А/А ОНП A252G LTA, а также носительство сочетаний генотипа w/w гена CCR5 и аллеля (-509)Т гена TGFB1; аллеля 252А гена LT А и аллеля (~509)Т гена TGFB1 повышает риск развития ИМ и может быть учтено при выборе кандидатов на проведение первичной профилактики ИМ у русских по этнической принадлежности.

Определение генотипа полиморфизма С1444Т гена CRP в комплексе с уровнем CRP и другими клиническими данными могут быть использованы для стратификации риска ИМ у больных ИБС русских по этнической принадлежности и определения прогноза заболевания у больных ИМ русских по этнической принадлежности.

Положения, выносимые на защиту:

1.При попарном анализе частот аллелей и генотипов полиморфного участка С1444Т гена CRP выявлена ассоциация Т/Т генотипа с риском развития ИМ. Выявлена связь генотипа Т/Т с более высоким уровнем CRP у больных ИМ в первые сутки.

2.При попарном анализе частот аллелей и генотипов полиморфного участка A252G гена LTA выявлена связь А/А генотипа с риском развития ИМ.

3.При попарном сравнении для мужчин и женщин по отдельности частот аллелей и генотипов гена CCR5 у больных ИМ и в контрольной группе носительство аллеля w оказалось ассоциированным с риском развития ИМ только в подгруппе мужчин, что может быть отражать существование полового диморфизма в генетической предрасположенности к ИМ.

4.Комплексный анализ с помощью алгоритма APSampIer подтвердил описанные выше данные об ассоциации с ИМ носительства одиночных аллелей/генотипов генов CRP и LT А. Кроме того, была выявлена ассоциация

генотипа w/w инсерционно-делеционного полиморфизма w/d гена CCR5 риском развития ИМ при сравнении общей группы больных ИМ и групп контроля, а не только подгрупп мужчин (как это было получено при попарно сравнении). Комплексный анализ выявил два сочетания аллелей и генотип ассоциированных с риском развития ИМ: 1) носительство генотипа w/w ген CCR5 плюс носительство аллеля (-509)Т гена TGFB1, 2) совместно носительство аллелей А252 гена LT А и того же, что и в первом сочетани аллеля (-509)Т гена TGFB1 и ряд протективных сочетаний.

5.Выявлена более высокая частота аллеля Т и частота носительства алле Т ОНП С1444Т гена CRP, а также более высокая частота аллеля А ОНП А252 гена LTA в группе, перенесших ИМ, у которых на протяжении 2ух л наблюдались сердечно-сосудистые осложнения. Таким образом, аллели Т ге CRP и А гена LTA можно рассматривать как фактор риска неблагоприятно прогноза для больных ИМ.

Апробация диссертации проведена 31 марта 2011 года межотделенческой конференции ФГУ РКНПК Минздравсоцразвития Р Диссертация рекомендована к защите.

Публикации: по теме диссертации опубликовано 4 печатных работы: статьи, 1 тезисы. Материалы диссертации доложены на конференци «Перспективы кардиологии России в XXI веке», Москва, июнь 2009.

Структура и объем диссертации: Диссертация состоит из введени обзора литературы, описания материалов и методов, изложения результат исследования, обсуждения результатов, выводов и практических рекомендаци Работа изложена на 95 страницах машинописного текста, содержит 5 рисунк и 21 таблицу. Указатель литературы включает 197 работ отечественных зарубежных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Клиническая характеристика больных

В исследование включено 264 больных ИМ русских по этнической принадлежности (52.3 + 10.3 лет), из них 185 мужчин (50.1 +10.6 лет) и 79 женщин (55.2+10.1 лет). Контрольную группу составили 174 русских по этнической принадлежности без сердечно-сосудистых и других тяжелых сопутствующих заболеваний в анамнезе (60.5 + 14 лет), из них 96 мужчин (57.3+13.9 лет), 78 женщины (63.1+14 лет). Среди больных ИМ у 221 человек диагностирован ИМ с подъемом сегмента ST (HMnST), у 43 человек - ИМ без подъема сегмента ST (ИМбпБТ).

Для постановки диагноза ИМ использовали общепринятые диагностические критерии (ESC/ACCF/AHA/WHF expert consensus document universal definition of myocardial infarction, 2007).

В контрольную группу включались лица, не имеющие коронарного анамнеза и перенесенного инсульта, у ближайших родственников которых в возрасте моложе 55 лет у мужчин и 65 лет у женщин не было ИМ, стенокардии, инсульта, окклюзирующего поражения периферических или сонных артерий.

Критериями исключения для больных и лиц, включенных в контрольную группу, являлись тяжелые заболевания, влияющие на прогноз: анемия, тиреотоксикоз, почечная недостаточность (повышение креатинина крови больше, чем в два раза от существующей нормы), печеночная недостаточность (уровень аланиновой аминотрансферазы в крови в три раза больше нормы), онкологические заболевания и др.; инфекционно-воспалительные заболевания в период обострения; аутоиммунные заболевания; длительное лечение кортикостероидами; тяжелые хирургические операции в течение двух месяцев перед ИМ или перед включением (для контрольной группы); проведение баллонной ангиопластики (ТБКА) или аорто-коронарного шунтирования (АКШ) в течение шести месяцев перед ИМ.

Больные с ИМ и лица контрольной группы были сопоставимы по таки характеристикам как частота факторов риска ИБС (курение, артериальна гипертония, гиперлипидемия). Лица контрольной группы были старш больных ИМ. В группе больных ИМ было относительно больше мужчин чаще встречались больные сахарным диабетом, чем в контрольной групп (таблица 1).

Таблица 1. Клинико-демографическая характеристика больных ИМ и ли контрольной группы.____

Показатель ИМ (п=264) Контроль (п=174) Р

Мужчины, % 70 55 0,04

Средний возраст, лет 52,3 ± 10,3 60.5 ±14 0,0001

Индекс массы тела, кг/м2 26,8 ±8,4 25,7 ± 6,9 р>0,05

Артериальная гипертония, % 65,8 55,2 р>0,05

Сахарный диабет, % 20,1 5,2 0,01

Курение, % 55,2 48,3 р>0,05

Общий холестерин, ммоль/л 6,0±1,4 5,8 ±0,4 р>0,05

Триглицериды, ммоль/л 2,0 ±0,4 1,9 ±0,2 р>0,05

Большинству больных с ИМпБТ проводилась реперфузионная терапи (тромболитическая терапия 73,3%, первичная ТБКА 9,1%, «спасительная ТБКА 8,6%). У 7,7% имелись признаки спонтанной реперфузи соответствующей коронарной артерии. 9,9% больных реперфузионная терапи не проводилась в связи с поздними сроками поступления. Больные с ИМпБТ ИМбпБТ при отсутствии противопоказаний получали терапию дезагрегантам антикоагулянтами, статинами, ингибиторами АПФ или антагонистам рецепторов ангиотензина II (АРА). Часть из них получала лечен спиронолактоном, петлевыми диуретиками, нитратами, антиаритмическим препаратами. В связи с сопутствующей артериальной гипертонией некоторы пациенты лечились тиазидными диуретиками или антагонистами кальци Часть лиц контрольной группы получала лечение по поводу артериально гипертонии, аспирин и статины с целью первичной профилактики ИБС.

Через два года после перенесенного ИМ проводился осмотр больных или телефонный контакт для определения состояния больного и оценки конечных точек. Конечными точками считали смерть от кардиальных причин, повторный ИМ, повторную госпитализацию в связи с нестабильной стенокардией или недостаточностью кровообращения (НК), проведение операции АКШ или ТБКА.

Методы исследования

В блоке интенсивной терапии всем больным в первый день проводили полное клиническое обследование, включающее сбор анамнеза, регистрацию электрокардиограммы (ЭКГ), проведение двухмерной эхокардиографии (ЭХОКГ), рентгенографического исследования органов грудной клетки, лабораторных анализов - общего анализа крови и мочи, анализа крови на маркеры повреждения миокарда, биохимического анализа крови с определением липидного спектра (общий холестерин,. холестерин липопротеидов низкой плотности (ЛПНП), холестерин липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), триглицериды) и уровня CRP, получение крови для последующего генетического исследования. Части больных по показаниям была выполнена коронароангиография. В течение госпитализации многим больным проводились нагрузочные тесты (тредмил-тест, добутамин или ЧПЭС-стресс-ЭХОКГ). Всем больным проводилось суточное мониторирование ЭКГ. Лица контрольной группы проходили обследование, включающее сбор анамнеза, ЭКГ в 12 отведениях, нагрузочный тест, общий и биохимический анализы крови, забор крови для последующего генетического исследования.

Определение концентрации CRP проводили иммуноферментным методом с использованием набора фирмы "Cytoimmune Sciences" исходно (на момент госпитализации). За норму принимали концентрацию CRP<3,0 мг/л.

Генетический анализ

Выделение геномной ДНК из периферической крови осуществляли использованием экстракции смесью фенол-хлороформ с помощь модифицированного метода Sambrook и соавт. [Sambrook и соавт., 1989].

Геномное типирование проводили методами, основанными на ПЦР Применяли метод анализа полиморфизма длины рестрикционных фрагменто продуктов ПЦР (ПЦР-ПДРФ), где олигонуклеотидная замена входит в соста сайта узнавания специфической рестриктазы, и генотипы определяют п наличию или отсутствию фрагментов рестрикции; и метод ПЦР использованием аллелеспецифических праймеров (ПЦР-SSP), где генотип определяют по наличию или отсутствию продукта амплификации в случа праймера, специфического для определенного аллеля. Наличи инсерции/делеции (I/D) определяли по размеру продуктов ПЦР. ПЦ проводили в амплификаторе МС16 (АО "ДНК Технология", Россия) или Geniu (Techne, Великобритания).

Геномное типирование полиморфных участков исследуемых гено проводили по методике, описанной в следующих работах: A(-308)G гена TN [Не и соав., 1995]; A252G гена LTA [Roth и соав., 1994]; A(-509)G ген TGFB1 [Судомоина и соав., 2010]; w/d гена CCR5 [Sandford и соав., 1997 G(-174)A гена IL-6 [DeMichele и соав., 2003]; С1444Т гена CRP [Шахнович соав., 2010].

Статистический анализ

Анализ отклонения наблюдаемых частот генотипов от равновесия Харди Вайнберга проводили с помощью алгоритма максимизации математическог ожидания (expectation maximization - ЕМ) с использованием свободн распространяемой программы Haploview 3.3

(http://www.broad.mit.edu/mpg/haploview/). Сравнение частот аллелей, часто носительства аллелей и генотипов в сравниваемых группах проводили помощью точного двустороннего критерия Фишера с использованием онлайн версии программы GraphPad Inst

(http://www.graphpad.com/quickcalcs/index.cfm). Силу выявленных ассоциаций оценивали в значениях отношения шансов (ОШ) и его 95%-го доверительного интервала (ДИ) также с использованием программы GraphPad Instat.

Для проведения комплексного анализа, выявления значимой связи с ИМ носительства сочетания аллелей/генотипов («генетических ансамблей»), содержащих п аллелей и/или генотипов (где п>1), применяли оригинальное программное обеспечение APSampler, использующее метод Монте-Карло Марковскими цепями и Байесовскую непараметрическую статистику [Favorov и соавт.]. Алгоритм APSampler, разработанный Фаворовым и соавт., показал высокую эффективность для анализа генетической предрасположенности к полигенным заболеваниям в ряде исследований [Фаворова и соавт., 2006 и др.]. Этот метод позволяет одновременно выявлять несколько генетических факторов риска (аллелей/генотипов и их сочетаний), наиболее значимо связанных с исследуемым заболеванием согласно непараметрическому критерию Манна-Уитни-Вилкоксона. APSampler проводит также валидацию результатов работы алгоритма на основе традиционного статистического подхода, для чего в программный комплекс включена программа, которая оценивает значимость ассоциаций каждого найденного основным алгоритмом сочетания аллелей/генотипов с признаком по значениям точного критерия Фишера, ОШ и его 95%-го ДИ. При этом применяли односторонний точный критерий, т.к. программа APSampler вместе с сочетанием аллелей указывает также и знак наблюдаемой ассоциации.

Значимьм считали различие сравниваемых частот при значении р<0.05. Для сравнения концентраций CRP в различных группах больных ИМ использовали непараметрический тест Манна-Уитни.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Попарное сравнение частот аллелей и генотипов полиморфных участков отдельных генов системы воспаления у больных ИМ и в

группе контроля

Для каждого из исследуемых полиморфных участков, а именно С1444 гена CRP, A252G гена LTA, w/d гена CCR5, A(-308)G гена TNF, G(-174)C ген IL-6, A(-509)G гена TG FBI генов мы проводили сравнение частот аллелей i генотипов выбранных полиморфных участков у больных ИМ и в групп контроля. Далее такое сравнение мы будем для краткости именовать попарным Распределение частот аллелей и генотипов каждого из рассматриваемы полиморфных участков для больных ИМ и индивидов контрольной групп соответствует равновесию Харди-Вайнберга.

Мы выявили связь генотипа Т/Т полиморфного участка С1444Т гена CR с риском развития ИМ (/7=0.006, 0111=3.0, 95%ДИ: 1.3-6.5). Носительств аллеля С1444 (сумма генотипов С/С и С/Т), напротив, обладало протективны действием для риска развития ИМ (р=0.006, 0111=0.3, 95% ДИ:0.15-0.74 (таблица 2).

При делении больных ИМ и лиц контрольной группы по полу значимы различий в вариантах генотипа и частоте носительства аллеле полиморфизма С1444Т гена CRP выявлено не было.

Мы провели также анализ ассоциации полиморфизма С1444Т концентрацией CRP в крови у пациентов с ИМ при поступлении в стациона Была выявлена значимая связь генотипа Т/Т с более высоким уровнем С (рисунок 1).

Таблица 2. Распределение аллелей и генотипов полиморфного участка С1444Т гена CRP у больных ИМ и в контрольной группе.

Аллели и Больные с Группа Значение р ош

генотипы ИМ контроля при (95% ДИ)

участка С-1444Т п=257 п=174 сравнении для значимых

гена CRP* частот отличии

Аллели, п (%)

С 358 (69.7%) 262(75.3%) >0,05

Т 156 (30.3%) 86(24.7%) >0,05

Аллели, п (%) носителей

С 225(87.5%) 166 (95.4%) 0.006 0.30 (0.15-0.74)

т 124(48.2%) 78(44.8%) >0,05

Генотипы, п (%) носителей

С/С 133(51.8%) 96(55.2%) >0,05

С/Т 92(35.8%) 70(40.2%) >0,05

Т/Т 32(12.4%) 8 (4.6%) 0.006 3.0 (1.3-6.5)

*3десь и далее жирным шрифтом выделены аллели или генотипы, для которых наблюдали значимые различия между сравниваемыми группами

Рисунок 1. Сравнение концентраций CRP в сыворотке крови больных ИМ -носителей различных генотипов CRP С1444Т - в первые сутки заболевания.

25 20 15 10 5 0

тэт...

i.....| и ,1h

Р Медиана (р-0,05 при сравнении групп по критерию Манна-Уитни) ■ Среднее значение

□ Максимальное значение

Генотип Генотип С/С Т/Т

По данным литературы, генотип Т/Т (или аллель Т) также ассоциирован с более высокой концентрацией CRP в крови у европеоидов - здоровых и

больных ИБС [Brüll и соавт., 2003; Kathiresan и соавт. 2006 и др.]. Однако такой ассоциации не было обнаружено у здоровых японцев [Kikuchi и соавт. 2007]. Эти данные, вероятно, свидетельствуют об этнических различиях функциональной значимости полиморфизма С1444Т гена CRP и не позволяю без экспериментальной проверки, переносить результаты, полученные дл; одной популяции, на другие популяции.

До сих пор не прекращаются дискуссии о роли CRP в развитии ИМ. части работ показано, что CRP активно участвует в воспалительных реакциях приводящих к дестабилизации атеросклеротической бляшки [Pasceri и соавт. 2000; Verma и соавт., 2002 и др.]. Другие исследователи оспаривают ведущу роль CRP в развитии и прогрессировании ИБС [Clapp и соавт., 2005, Ridker i соавт., 1997 и др.]. По их мнению, CRP - всего лишь неспецифический марке) воспаления или «пассивный свидетель». Результаты тех исследований, которых обнаружена ассоциация генотипа CRP с ИМ, в том числе наше работы, свидетельствуют в пользу представления об активной роли CRP развитии ИМ.

Частоты аллелей и генотипов полиморфного участка A252G гена LTA больных с ИМ и в контроле приведены в таблице 3. Частота аллеля А был значимо выше у больных ИМ в сравнении с группой контроля (/>=0.04 ОШ=1.4, 95%ДИ: 1.0-2.0). Генотип А/А полиморфизма A252G значимо связан риском развития ИМ (р=0.034, ОШ=1.6, 95%ДИ: 1.0-2.5).

При делении больных ИМ и лиц контрольной группы по полу значимы различий в вариантах генотипа и частоте носительства аллелей участк A252G гена LTA выявлено не было.

Таблица 3. Распределение аллелей и генотипов полиморфного участка А2520 гена ЬТА у больных ИМ и в контрольной группе.

Аллели и генотипы участка A252GreHa LTA ИМ п=197 Контроль п=136 Значение р при сравнении частот ОШ (95% ДИ) для значимых отличий

Аллели, п (%)

А 302 (76.6%) 189(69.5%) 0.040 1.4 (1.0-2.0)

G 92 (23.4%) 83(30.5%) 0.040 0.69 (0.49-0.98)

Аллели, п (%) носителей

А 186(94.4%) 125 (91.9%) >0,05

G 81(30.3%) 72(52.9%) 0.034 0.62 (0.40-0.96)

Генотипы, п (%) носителей

А/А 116(58.9%) 64(47.1%) 0.034 1.6 (1.0-2.5)

A/G 70(35.5%) 61(44.9%) >0,05

G/G 11(5.6%) 11 (8.1%) >0,05

Наши данные согласуются с результатами, полученными для западноевропейской популяции Koch и соавт. В исследовании, проведенном этими учеными, было показано протективное действие гомозиготного генотипа G/G на риск развития инфаркта миокарда [Koch и соавт., 2007].

В исследованиях, проведенных Ozaki и соавт. для японской популяции, получены противоположные нашим данным результаты. Генотип G/G полиморфизма A252G гена LT А ассоциирован с риском развития ИМ [Ozaki и соавт., 2004]. Противоречивые данные разных исследований могут объясняться не только этническими различиями и размерами выборки, но и разным возрастным и половым составом сравниваемых групп.

Попарное сравнение частот аллелей и частот носительства аллелей и генотипов инсерционно-делеционного полиморфизма w/d гена CCR5 в группе больных ИМ и в контроле не выявило значимых различий.

Однако, при делении групп больных ИМ и лиц контрольной группы по полу у мужчин наблюдалось значимое различие в частоте встречаемости

аллелей (таблица 4). Частота аллеля \у была выше в подгруппе мужчин, больных ИМ (р=0.035, 0111=2.1, 95%ДИ:1.1-4.0), а частота встречаемости аллеля (1 достоверно выше у мужчин в контрольной группе (р=0.035, 0111=0.48, 95%ДИ:0.25-0.90). Между подгруппами женщин, больных ИМ, и в контроле значимых различий в частоте встречаемости, носительстве аллелей и вариантах генотипов выявлено не было. Это может отражать половой диморфизм в распределении генотипов гена ССЯ5 у больных ИМ и здоровых. Подобные результаты были получены в исследовании, проведенном на итальянской популяции [ВаНв^ен и соавт., 2008]. Аллель был ассоциирован с риском развития ИМ у мужчин, а аллель (1 оказывал протективное действие.

Таблица 4. Распределение аллелей и генотипов полиморфного участка \у/с! гена ССЯ5 у мужчин больных ИМ и в контрольной группе.

Аллели и ИМ Контроль Значение р ОШ

генотипы п=147 (мужчины) при (95% ДИ)

участка (мужчины) п=69 сравнении для значимых

гена ССЯ5 частот отличии

Аллели, п (%)

272 118(85.5%) 0.035 2.1

(92.5%) (1.1-4.0)

(1 22 (7.4%) 20(14.5%) 0.035 0.48

(0.25-0.90)

Аллели, п (% 1 носителей

146(99.3%) 67(97.1%) >0,05

(1 21(14.3%) 18(26.1%) >0,05

Генотипы, п ( %) носителей

126(85.7%) 51(73.9%) >0,05

\У/(1 20(13.6%) 16(23.2%) >0,05

(1/(1 1(0.7%) 2 (2.9%) >0,05

Протективная роль аллеля (1 может быть обусловлена слабой воспалительной реакцией у ее носителей. ССЯ5 - р-хемокиновый рецептор, вовлеченный в миграцию лимфоцитов, моноцитов в воспалительной зоне [МитггпсН и соавт., 1997]. Аллель с1 кодирует неактивный укороченный рецептор, ослабляющий миграцию воспалительных клеток в

атеросклеротическую бляшку, что снижает вероятность развития нестабильной бляшки.

Попарное сравнение частот аллелей, частот носительства аллелей и генотипов полиморфизма С(-509)Т гена TGFB1, полиморфизма A(-308)G гена TNF и полиморфизма G(-174)C гена IL-6 в общей группе больных ИМ и здоровых, а также в подгруппах мужчин и женщин, не выявило достоверных различий.

Комплексный анализ ассоциации полиморфизмов исследованных генов системы воспаления с ИМ

Комплексный анализ влияния носительства сочетаний аллелей/генотипов всех исследованных полиморфных участков, а именно С1444Т гена CRP, A252G гена LT А, w/d гена CCR5, A(-308)G гена TNF, G(-174)C гена IL-б и A(-509)G гена TGFB1 на риск развития ИМ проведен с помощью алгоритма APSampler. Выявлена значимая ассоциация с ИМ носительства сочетаний * аллелей/генотипов всех шести исследованных генов (таблица 5).

Комплексный анализ подтвердил описанные выше данные об ассоциации с ИМ носительства одиночных аллелей/генотипов генов CRP и LTA. Кроме того, наблюдали значимое различие в частоте носительства аллеля d гена CCR5 (р=0.029, 0111=0.57, 95%ДИ:0.33-0.98) и генотипа w/w (р=0.029, ОШ=1.7, 95%ДИ: 1.0-3.0) в общей группе больных ИМ и в контроле, а не только в подгруппах мужчин (как это было получено при попарном сравнении). Генотип w/w был связан с риском развития ИМ, тогда как носительство аллеля d было негативно ассоциировано с ИМ.

Анализ с помощью алгоритма APSampler выявил также сочетания из двух, трех или четырех аллелей/генотипов исследованных генов, частота носительства которых значимо отличается у больных ИМ по сравнению с контрольной группой. Ассоциация с ИМ для сочетания выражена сильнее, чем для входящих в него отдельных аллелей, ассоциированных с ИМ поодиночке (таблица 5).

Таблица 5. Комплексный анализ влияния носительства сочетаний аллелей/генотипов, исследуемых нами генов системы воспаления, на риск развития ИМ с помощью алгоритма АР5атр1ег._

Аллели/генотипы в составе сочетания Носители (%) / неносители (%) сочетания Величина р ОШ* 95% ДИ

СХ444Т СДР <1/лу ССИ5 А252в ЬТА Т-509С ( ГGFB/ М74С 11-6 А-ЗОвв Больные ИМ Контрольная группа

носительство одиночных аллелей/генотипов

С - — — — — 177(89%)/22(11%) 124(95%) / 6(5%) 0.029 0.39 0.16-0.94

Т/Т - — — — — 22(11%)/177(89%) 6(5%) / 124(95%) 0.029 2.6 1.0-6.3

— <1 — _ _ — 32(16%)/164(84%) 35(25%) /103(75%) 0.029 0.57 0.33-0.98

— \vl\v — — — — 164(84%)/32(16%) 103(75%)/35(25%) 0.029 1.7 1.0-3.0

— — в — — — 81(41%)/118(59%) 70(51%)/68(49%) 0.044 0.67 0.43-1.0

носительство сочетания из двух аллелей/генотипов

— (1 в — — — 11(6%)/185(94%) 20(15%)/115(85%) 0.0045 0.34 0.16-0.74

С <1 — — — — 27(15%)/ 159(85%) 29(27%) / 77(73%) 0.0063 0.45 0.25-0.81

— (1 — С — — 27(14%)/169(86%) 32(25%)/98(75%) 0.010 0.49 0.28-0.86

— (1 — _ С — 23(12%)/172(88%) 28(22%)/101(78%) 0.013 0.48 0.26-0.88

— «7\У — т — — 113(58%) / 83(42%) 58(45%)/72(55%) 0.014 1.7 1.1-2.6

С - в — — — 66(35%) /123(65%) 52 (48%)/ 56(52%) 0.017 0.58 0.36-0.94

с — — — — в 173(87%)/25(13%) 103 (95%) / 5(5%) 0.017 0.34 0.13-0.88

— (1 — _ — в 32(16%)/164(84%) 34(26%) / 95(74%) 0.020 0.55 0.32-0.94

— — А т — — 130(65%)/69(35%) 72(55%) / 60(45%) 0.032 1.6 1.0-2.5

носительство сочетания из трех аллелей

— (1 в — с — 7(4%) /188(96%) 18(14%)/109(86%) 0.00060 0.23 0.090-0.56

С 11 — с — — 22(12%)/164(88%) 28(26%) / 78(74%) 0.0015 0.37 0.20-0.69

С а в — — — 8(4%) / 178(96%) 16(15%)/90(85%) 0.0016 0.25 0.10-0.61

— (1 — с с — 18(9%)/177(91%) 26(21%)/97(79%) 0.0026 0.38 0.20-0.73

— а в — — в 11(6%) / 185(94%) 20(16%)/109(84%) 0.0030 0.32 0.15-0.70

— д в с — — 9(5%)/187(95%) 18(13%)/122(87%) 0.0030 0.30 0.13-0.69

носительство сочетания из четырех аллелей

С | а | - | С | С | - | 15(8%)/171(92%) | 22(22%) / 78(78%) | 0.00099 | 0.31 | 0.15-0.63

*Жирным шрифтом выделены значения ОШ больше 1 (сочетания, ассоциированные с предрасположенностью к ИМ)

Среди выявленных сочетаний только два: 1) носительство генотипа у//у/ гена ССЯ5 плюс носительство аллеля (-509)Т гена ТСРВ1 (р = 0.014, ОШ=1.7, 95%ДИ:1.1-2.6) и 2) совместное носительство аллелей А252 гена НА и того же, что и в первом сочетании, аллеля (-509)Т гена ТОР В] (р = 0.032, 0111=1.6, 95%ДИ: 1.0-2.5) - являются факторами риска развития ИМ.

Большая часть выявленных сочетаний чаще встречается в контрольной группе, то есть является протективной по отношению к риску развития ИМ (имеют ОШ<1).

Таблица 6. Выявленные ассоциации аллелей и генотипов полиморфных участков исследованных генов и их сочетаний с риском ИМ (сводные

результаты).

Полиморфизм(ы), ген(ы) частоты аллелей носительство аллелей и генотипов стандартный анализ для отдельного гена комплексный анализ программой АРБатркг

ОШ (95% ДИ), значение р

С-1444Т СЯР Т/Т 3.0(1.3-6.5) 0,006 2.6(1.0-6.3) 0,029

А252й ЬТА А 1.4(1.0-2.0) 0,040

А/А 1.6(1.0-2.5) 0,034 1.6(1.0-2.5) 0,022

\у/с! ССЯ5 \УЛУ 1.7(1.0-3.0) 0,029

\у* 2.1 (1.1-4.0) 0,035

\у/<1 ССК5 + Т(-509 С)ТвРВ1 луЛУ + Т 1.7(1.1-2.6) 0,014

А252)в ЬТА + Т(-509С)ГСРВ/ А + Т 1.6(1.0-2.5) 0,032

* - при сравнении мужчин с ИМ с мужчинами из контрольной группы

Таким образом, результаты комплексного анализа с помощью алгоритма АРЗашр!ег подтверждают результаты, которые были получены при попарном сравнении аллелей/генотипов отдельных генов и значительно расширяют их,

свидетельствуя о вовлечении всех исследованных генов воспаления в формирование генетической восприимчивости к ИМ. При этом показано, что в качестве факторов риска ИМ выступают генотип Т/Т ОНП С1444Т гена CRP, аллель А и генотип А/А ОНП A252G гена LTA, аллель w и генотип w/w инсерционно-делеционного полиморфизма w/d гена CCR и аллель Т ОНП С(-509)Т гена TGFB1 (таблица 6).

Полиморфизмы генов системы воспаления и прогноз для больных ИМ

Средний период наблюдения за больными составил 703 ±27 дней. Всего наблюдалось 211 человек, из них у 61 (28,9)% больного наблюдались конечные точки. Летальность составила 7,6% (16 человек). У 11 (5,2%) развились повторные ИМ. Обострение ИБС (нестабильная стенокардия) и сердечная декомпенсация (НК), потребовавшие госпитализации, отмечалось у 14 (6,6%) больных. Реваскуляризации подверглись 20 (9,5%) больных (10| (4,75%) - проведена ТБКА и 10 (4,75%) - проведена операция АКШ (рисунок| 2).

Рисунок 2. Наблюдаемые неблагоприятные события (сердечно-сосудистые осложнения) у больных ИМ.

i Больные без сердечнососудистых событий

■ Летальность

□ Повторные ИМ

□ Госпитализация по поводу нестабильной стенокардии или НК

■ Реваскуляризация

По результатам двухлетнего наблюдения при попарном сравнении частот аллелей и генотипов полиморфного участка С1444Т гена СКР была выявлена ассоциация аллеля Т (р=0.036, 0111=1.6, 95%ДИ: 1.05-2.6) и носительства

аллеля Т (сумма генотипов С/Т и Т/Т) (р=0.046, 0111=1.9, 95%ДИ: 1.05-3.6) с развитием сердечно-сосудистых осложнений у больных ИМ. Таким образом, носительство аллеля Т может рассматриваться как фактор риска неблагоприятного прогноза для больных ИМ (таблица 7).

Таблица 7. Распределение аллелей и генотипов полиморфного участка С1444Т гена CRP у больных ИМ с сердечно-сосудистыми осложнениями и без._

Аллели и Больные с Больные без Значение р ОШ

генотипы сердечно- сердечно- при (95% ДИ)

участка сосудистыми сосудистых сравнении для значимых

С1444Т осложнениями осложнении частот отличии

гена CRP после ИМ п=60 после ИМ п=145

Аллели, п (%)

С 72 (60,0%) 206(71,0%) 0,036 0,61 (0,39-0,95)

т 48 (40,0%) 84(29,0%) 0,036 1,6 (1,05-2,6)

Аллели, п (%) носителей

С 49(81,7%) 127 (87,6%) >0,05

т 37(61,7%) 66(45,5%) 0,046 1,9 (1,05-3,6)

Генотипы, п (%) носителей

С/С 23(38,3%) 79(54,5%) 0,046 0,52 (0,28-0,96)

С/Т 26(43,3%) 48(33,1%) >0,05

т/т 11(18,3%) 18 (12,4%) >0,05

Мы провели анализ развития неблагоприятных событий по методу Каплана-Мейера в зависимости от носительства аллеля Т полиморфного участка С1444Т гена С/У (рисунок 3).

Рисунок 3. Кривые развития неблагоприятных событий в зависимости от носительства аллеля Т полиморфного участка С1444Т гена CRP (Kaplan-Meier).

0,7

» 2 т

0.9

1,0

Носит»л« «дп«ля Т (ТЛ+СГТ) Носит» ли гмюшм ОС

5 Ю 15 20 25

Лр<щелжмт*лыюсть наблюдмвм, мкяцы

По данным двухлетнего наблюдения аллель А полиморфизма А252С гена ЬТ ассоциирован с риском развития сердечно-сосудистых осложнений у больны ИМ 0=0,034, 0111=1,96, 95%ДИ: 1,07-3,06). Частота носительства аллеля А генотипа А/А были выше в группе больных с сердечно-сосудистым осложнениями после ИМ, а частота носительства аллеля в и генотипа в/ выше в группе больных без сердечно-сосудистых осложнений после ИМ. Пр проведении анализа с помощью точного двустороннего критерия Фишер данные различия не достигали уровня значимости, что, возможно, обусловлен малыми размерами выборок (таблица 8).

Таблица 8. Распределение аллелей и генотипов полиморфного участка А252й гена ¿7/4 у больных ИМ с сердечно-сосудистыми осложнениями и без.

Аллели и Больные с Больные без Значение ОШ

генотипы сердечно- сердечно- р при (95% ДИ)

участка сосудистыми сосудистых сравнении для значимых

A252G осложнениями осложнении частот отличий

гена LT А после ИМ после ИМ

п=112 п=49

Аллели, п (%)

А 82(83,7%) 162 (72,3%) 0,034 1,96

(1,07-3,06)

G 16(16,3%) 62 (27,7%) 0,034 0,51

(0,28-0,93)

Аллели, п (%) носителей

А 49 (100%) 103(92,0%) >0,05

G 16(32,7%) 53(47,3%) >0,05

Генотипы, п (%) носителей

А/А 33(67,35%) 59(52,7%) >0,05

A/G 16(32,65%) 44(39,3%) >0,05

G/G 0 (0%) 9(8,0%) >0,05

Ассоциации полиморфизмов w/d гена CCR5, A(-308)G гена TNF, G(-174)C гена IL-б, С(-509)Т гена TGFB1 с двухлетним прогнозом у больных ИМ выявлено не было. Учитывая обнаруженный нами половой диморфизм ассоциации гена CCR5 с ИМ, анализ распределения аллелей и генотипов полиморфизма w/d этого гена у больных с сердечно-сосудистыми осложнениями и без таковых после ИМ проводили отдельно для мужчин и женщин. Однако, ассоциации с развитием сердечно-сосудистых осложнений у больных ИМ после разделения по полу также не наблюдалось.

Таким образом, мы выявили ассоциацию носительства аллеля Т полиморфизма С1444Т гена CRP и аллеля А полиморфизма A252G гена LT А с неблагоприятным прогнозом у больных ИМ.

Выводы

1. Носительство генотипов Т/Т полиморфного участка С1444Т гена CRP, А/А полиморфного участка A252G гена LTA и w/w гена CCR5, а также двух сочетаний: а) генотипа w/w CCR5 и аллеля (-509)Т гена TGFB1 и б) аллелей А252 гена LTA и (—509)Т гена TGFB1 является факторами риска ИМ.

2. Носительство большинства выявленных с помощью алгоритма APSampler сочетаний аллелей исследуемых генов негативно ассоциировано с ИМ. Во всех случаях аллели полиморфных участков генов CRP, LTA, CCR5 и TGFB1, входящие в протективные сочетания, являются альтернативными к аллелям риска. Наиболее значимым протективным фактором (р = 0.0006, ОШ = 0.23) является сочетание из трех аллелей - аллеля d гена CCR5, аллеля 252G гена LTA и аллеля (-174)С гена 1L-6.

3. При попарном сравнении частот аллелей и генотипов гена CCR5 больных ИМ и в контрольной группе для мужчин и женщин по отдельности носительство аллеля w оказалось ассоциированным с риском развития ИМ только в подгруппе мужчин, причем уровень значимости в этом случае оказался выше, чем без разделения по полам. Эти результаты могут отражать существование полового диморфизма генетической предрасположенности к ИМ.

4. Носительство генотипа Т/Т полиморфного участка С1444Т гена CR связано с более высокой концентрацией С-реактивного белка в кров больных ИМ.

5. Выявлена более высокая частота аллеля Т и частота носительств аллеля Т полиморфного участка С1444Т гена CRP, а также боле высокая частота аллеля А полиморфизма A252G гена LTA у больны ИМ с сердечно-сосудистыми осложнениями за двухлетний период

наблюдения по сравнению с больными без осложнений. Таким образом, носительство аллелей Т гена CRP и А гена LT Л можно рассматривать как фактор неблагоприятного прогноза для больных ИМ.

Практические рекомендации

1. У здоровых лиц, русских по этнической принадлежности, с целью прогнозирования риска ИМ в комплексе с классическими факторами предрасположенности к развитию заболевания рекомендуется провести геномное типирование полиморфных участков С1444Т гена CRP, A252G гена LT A, w/d гена CCR5 и A(-509)G гена TGFB1.

2. У больных ИМ, русских по этнической принадлежности, с целью прогнозирования риска неблагоприятных исходов целесообразно геномное типирование полиморфных участков С1444Т гена CRP и A252G гена LT А.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1.Фаворова О.О., Шахнович P.M., Руда M.Ü., Судомоина М.А., Сухинина Т.С., Барсова P.M., Титов Б.В. Генные ансамбли: вклад в предрасположенность к инфаркту миокарда. Тезисы и доклад на конференции «Перспективы кардиологии России в XXI веке». 2009, стр. 25.

2. P.M. Шахнович, Т.С. Сухинина, P.M. Барсова, М.А. Судомоина, И.Н. Рыбалкин, Е.К. Шрейдер, Т.Н. Власик, О.О. Фаворова, М.Я. Руда. Полиморфизм С1444Т гена CRP и концентрация С-реактивного белка в сыворотке крови при инфаркте миокарда. Кардиология. 2010, 8, стр. 4-12.

3. М. А. Судомоина, Т. С. Сухинина, Р. М. Барсова, А. В. Фаворов, Р. М. Шахнович, Б. В. Титов, Н. А. Матвеева, И. Н. Рыбалкин, Т. Н. Власик,

М. F. Ochs, M. Я. Руда, О. О. Фаворова. Комплексный анализ ассоциаци полиморфизма генов воспаления с инфарктом миокарда. Молекулярна биология. 2010, 44, стр. 463-471.

4.Т.С. Сухинина, P.M. Шахнович, P.M. Барсова, H.A. Матвеева, Б.В Титов, C.B. Матосова, О.О.Фаворова, М.Я. Руда. Прогностическая роль гено системы воспаления у больных инфарктом миокарда. Кардиология. 2011, N стр.

Отпечатано в типографии ООО «Гипрософт» г. Москва, 2-ой Автозаводский пр-д, д. ЗА Тираж 100 экз.

Оглавление диссертации Сухинина, Татьяна Сергеевна :: 2011 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 .Генетические факторы предрасположенности к сердечно-сосудистым заболева-. ниям и ИМ.

1.2. Подходы, используемые для выявления генетической предрасположенности.

1.2.1 .Полный геномный поиск.

1.2.2. Подход «ген-кандидат.

1.3. Этиология и патогенез ИМ.

1.4. С-реактивный белок и его ген (CRP).

1.5. Интерлейкин-6 (IL-6) и его ген.

1.6. Фактор некроза опухоли альфа (TNF) и его ген.

1.7. Лимфотоксин альфа (LTA) и его ген.

1.8. Трансформирующий фактор роста ß (TGFß) и его ген.

1.9. СС-5 хемокиновый рецептор (CCR5) и его ген.

Введение диссертации по теме "Кардиология", Сухинина, Татьяна Сергеевна, автореферат

По данным ВОЗ сердечно-сосудистые заболевания, главным образом инфаркт миокарда (ИМ), занимают первое место среди причин смерти во всем мире, в том числе и в России [1]. ИМ заметно ухудшает качество и продолжительность жизни. Первичная профилактика ИМ является важной задачей здравоохранения. 50% больных, перенесших ИМ, не имеют предшествующего коронарного анамнеза. Выявление групп с высокой вероятностью развития ИМ позволит активно наблюдать этих лиц и, возможно, проводить профилактическое лечение.

ИМ является мультифакториальным заболеванием. Развитие ИМ происходит под влиянием многих факторов, определяющихся как воздействием внешней среды, так и наследственной предрасположенностью. При этом многие факторы риска ИМ, как генетические, так и средовые, оказывают взаимное влияние друг на друга. Такие общеизвестные факторы риска ИМ, как артериальная гипертония, гиперхолестеринемия, сахарный диабет во многом генетически обусловлены. Сам факт ИМ у ближайших родственников больного является независимым предиктором этого заболевания. В 1992г Cambien с соавт. продемонстрировали, что I/D полиморфизм гена ангиотензин превращающего фермента (АПФ), связан с риском развития ИМ [2]. В дальнейшем были проведены сотни исследований по изучению этого и других полиморфизмов одного гена для уточнения их связи с ишемической болезнью сердца (ИБС) и ИМ. Единственный ген, который бы определял риск развития заболевания, так и не был найден. В настоящее время сложилось четкое представление, что генетической основой ИБС и ИМ как полигенных заболеваний является совместный вклад ряда взаимодействующих или независимо действующих генов, в связи с чем предпочтительным становится комплексный анализ вклада различных генов в развитие ИМ. В исследованиях, где не проводится полный геномный поиск и число выбранных геновкандидатов не велико, как правило, рассматриваются генетические маркеры, белковые продукты которых относятся к определенной системе организма или звену патогенеза заболевания (свертывающая система, метаболизм липидов и ДР-)

В основе развития острого коронарного синдрома (ОКС) и ИМ лежит процесс дестабилизации атеросклеротической бляшки, который можно отнести к классической воспалительной реакции, в которой непосредственное участие принимают эндотелиальные клетки, макрофаги, Т-лимфоциты, нейтрофилы и гладкомышечные клетки. [3,4]. Мы посчитали важным оценить влияние генов, белковые продукты которых участвуют в воспалительной реакции, на риск возникновения и прогноз ИМ. Выбор полиморфных участков исследуемых генов определялся их функциональной значимостью.

Цель исследования

Цель исследования - анализ связи полиморфизмов генов, относящихся к системе воспаления, а именно, генов С-реактивного белка {CRP), интерлейкина-6 (IL-6), лимфотоксина альфа (LTA), фактора некроза опухоли (TNF), трансформирующего ростового фактора ßl (TGFB1) и хемокинового рецептора СС-5 (CCR5), с риском возникновения ИМ и прогнозом его течения.

Задачи исследования

1'. Провести сравнительный 1:анализ распределения аллельных вариантов генов, белковые продукты которых вовлечены в реакцию воспаления, а именно аллелей и генотипов однонуклеотидных полиморфизмов (ОНП) С1444Т гена CRP, G(-174)C гена IL-6, A252G гена LTA, A(-308)G гена TNF, A(-509)G гена TGFB1 и инсерционно-делеционного полиморфизма w/d гена CCR5, у больных с ИМ и в контрольной группе.

3. Провести анализ связи вариантов полиморфизма С1444Т гена CRP с уровнем CRP у больных ИМ.

4. Оценить связь носительства аллелей и генотипов исследованных полиморфных участков генов с исходами заболевания больных ИМ по данным двухлетнего наблюдения.

Научная новизна работы

Впервые исследовано влияние полиморфизмов С1444Т гена CRP, G(-174)C гена IL-6, A252G гена LTA, A(~308)G гена TNF, A(-509)G гена TGFB1, w/d гена CCR5- на риск развития ИМ и прогноз течения заболевания по данным двухлетнего наблюдения. Впервые в отечественной практике проведен комплексный анализ связи носительства аллелей и генотипов* генов, относящихся к системе воспаления, а именно, генов CRP, IL-6, LTA, TNF, TGFB1 и. CCR5, с риском развития ИМ. Впервые для больных ИМ, русских по этнической принадлежности, выявлена связь риска развития ИМ- с генотипом Т/Т полиморфного участка G1444T гена CRP, аллелем w и генотипом w/w полиморфизма w/d гена CCR5 и аллелем А и генотипом А/А полиморфизма A252G LTÄ. С помощью программного обеспечения APSampler выявлены два сочетания, носительство которых ассоциировано с риском, развития* ИМ -сочетание генотипа- w/w гена CCR5 с аллелем (—509)Т гена TGFB1 и сочетание аллелей А252 гена- LTA и (-509)Т гена TGFB1, а также ряд сочетаний, носительство которых является благоприятным фактором с точки зрения оценки риска развития этого заболевания.

Проведен анализ связи носительства аллельных вариантов полиморфизма С1444Т гена CRP с уровнем CRP у больных ИМ, русских по этнической принадлежности. Выявлена ассоциация генотипа Т/Т с более высоким уровнем

CRP. Эти данные, в сочетании с наблюдавшейся нами ассоциацией носительства аллеля Т данного полиморфизма с неблагоприятным прогнозом у больных ИМ, согласуются с современным представлением, что высокий уровень CRP в крови у больных ИМ является плохим прогностическим признаком.

Выявлено прогностическое значение полиморфизма С1444Т гена CRP и полиморфизма A252G гена LTA у больных ИМ, русских по этнической принадлежности.

Практическая значимость

Носительство генотипов Т/Т ОНП С1444Т гена CRP, w/w инсерционно-делеционного полиморфизма w/d гена CCR5 и А/А ОНП A252G LT А, а также носительство сочетаний генотипа w/w гена CCR5 и аллеля (—509)Т гена TGFB1; аллеля 252А гена LTA и аллеля (-509)Т гена повышает риск развития ИМ и может быть учтено при выборе кандидатов на проведение первичной профилактики ИМ у русских по этнической принадлежности.

Определение генотипа полиморфизма С1444Т гена CRP в комплексе с уровнем CRP и другими клиническими данными могут быть использованы для стратификации риска ИМ у больных ИБС, русских по этнической принадлежности, и определения прогноза заболевания у больных ИМ, русских по'этнической принадлежности.

Заключение диссертационного исследования на тему "Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза"

Выводы

1. Носительство генотипов Т/Т полиморфного участка С1444Т гена CRP, А/А полиморфного участка A252G гена LTA и w/w гена CCR5, а также двух сочетаний: а) генотипа w/w CCR5 и аллеля (-509)Т гена TGFB1 и б) аллелей А252 гена LTA и (-509)Т гена TGFB1 является факторами риска ИМ.

3. При попарном сравнении частот аллелей и генотипов гена CCR5 у больных ИМ и в контрольной группе для мужчин и женщин по. отдельности носительство аллеля w оказалось ассоциированным с риском развития ИМ только в подгруппе мужчин, причем уровень значимости в этом случае оказался выше, чем без разделения по полам. Эти результаты могут отражать существование полового диморфизма в генетической предрасположенности к ИМ.

4. Носительство генотипа Т/Т полиморфного участка С1444Т гена CRP связано с более высокой концентрацией С-реактивного белка в крови больных ИМ.

5. Выявлена более высокая частота аллеля Т и частота носительства аллеля Т полиморфного участка С1444Т гена CRP, а также более высокая частота аллеля А полиморфизма A252G гена LTA у больных ИМ с сердечно-сосудистыми осложнениями за двухлетний период наблюдения по сравнению с больными без осложнений. Таким образом, носительство аллелей Т гена CRP и А гена LT А можно рассматривать как фактор неблагоприятнбго прогноза для больных ИМ.

Практические рекомендации

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Сухинина, Татьяна Сергеевна

1. 2002 Heart and Stroke Statistical Update. American Heart Association 2002.

2. Cambien F, Poirier O, Lecerf L et al. Deletion polymorfhism in the gene for angiotensin-converting enzyme is a potent risk factor for myocardial infarction. Nature. 1992;359:641-644.

3. Libby P, Theroux P. Pathophysiology of coronary artery disease. Circulation. 2005; 111: 3481-3488.

4. Libbly P. Current concepts of the pathogenesis of the acute coronary syndrome. Circulation. 2001;104:365-372.

5. Goldstein JL, BrownMS. The LDL receptor defect in familial hypercholesterolemia. Implications for pathogenesis and therapy. Med Clin North Am. 1982;66:335-362.

6. Seidman CE, Seidman JG. Hypertrophic cardiomyopathy. In: Scriver CR, BeaudetAL, Sly WS et al, eds. The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease. 8th ed. New York: McGraw-Hill;'2001:5433-5450.

7. Lombardi R, Betocchi S. Aetiology and pathogenesis of hypertrophic cardiomyopathy. Acta Paediatr Suppl. 2002;91:10-14.

8. Lifiton RP, Gharavi AG, Geller DS. Molecular mechanisms of human hypertension. Cell. 2001;104:545-556.

9. Luft FC. Mendelian forms of human hypertension and mechanisms of disease. Clinical Medicine & Research. 2003;1:291-300.

10. Lemmens R, Abboud S, Robberecht W, Vanhees L, Pandolfo M, Thijs V, Goris A. Variant on 9p21 strongly associates with coronary heart disease, but lacks association with common stroke. Eur J Hum Genet. 2009 Mar 25. Epub ahead of print. <>

11. Samani NJ, Erdmann J, Hall AS et al WTCCC and the Cardiogenics Consortium. Genomewide association analysis of coronary artery disease. N Engl J Med. 2007;357:443-53. Epub 2007 Jul 18.

12. McPherson R, Pertsemlidis A, Kavaslar N et al. A common allele on chromosome 9 associated with coronary heart disease. Science (Wash DC) 2007;316:1488-1491.

13. Helgadottir A, Thorleifsson G, Manolescu A et al. A common variant on chromosome 9p21 affects the risk of myocardial infarction. Science. 2007; 8;316(5830): 1491-3. Epub 2007 May 3.

14. Samani NJ. Large scale association analysis of novel genetic loci for coronary artery disease. Arteriosclerosis, thrombosis and vascular biology. 2009;29:774-780.

15. Wang Q. Molecular genetics of coronary artery disease. Curr Opin Cardiol. 2005;20:182-188.

16. O'Donnell CJ, Cupples LA, D'Agostino RB et al. Genome-wide association study for subclinical atherosclerosis in major arterial territories in the NHLBI's. Framingham Heart Study. BMC Med.Genet. 2007;8 Suppl 1:S4.

17. Ashley EA, Butte AJ, Wheeler-MT et al. Clinical assessment incorporating a. personal genome. Lancet 2010;375(9725): 1525-35.

18. Tobin MD, Braund PS, Burton PR et al. Genotypes and haplotypes predisposing to myocardial infarction: a multilocus case-control study. Eur Heart J 2004;25:459-467.

19. Yamada Y, Izawa H, Ichichara S et al. Prediction of the risk of myocardial infarction from polymorphisms in candidate genes. N Engl J Med. 2002;347:1916-1923.

20. Ozaki, К.; Ohnishi, Y.; Iida, A. et,al. Functional SNPs in the lymphotoxin-alpha gene that are associated with susceptibility to myocardial infarction. Nature Genet. 2002;32:650-654, Note: Erratum: Nature Genet. 2003;33: 107 only.

21. Anand SS, Xie C, Paré G et al. Genetic Variants Associated With Myocardial Infarction Risk Factors in Over 8000 Individuals From Five Ethnic Groups. The INTERHEART Genetics Study Circ Cardiovasc Genet. 2009;2:16-25.

22. Archacki SR, Angheloiu G, Tian XL et al. Identification of new genes differentially expressed in coronary artery disease by expression profiling. Physiol Genomics. 2003;15(.l):65-74.

23. Данковцева E.H., Затейщиков Д.А., Чудакова Д.А и соавторы. Ассоциация генов факторов гемостаза с ранним развитием ишемической болезни сердца и манифестацией инфаркта миокарда в молодом возрасте. Кардиология. 2005;45:17-24.

24. Чистяков* Д.А., Кобалава Ж.Д., Терещенко С.Н. Полиморфизм гена сосудистого рецептора ангиотензина II при сердечно-сосудистых заболеваниях. Терапевтический архив. 2000;76:30.

25. Шевцов С.П., Кучинский А.П., Дзеранова Н.Я и соавторы. Анализ полиморфизмов1 аполипопротеиновых генов ароВ и ароСЗ у пациентов с инфарктом миокарда. Молекулярная генетика, микробиология и> вирусология, 1994;(3):33-6.

26. Voevoda MI, Ustinov SN, Yudin NS et al. Association of the CCR2 chemokine receptor gene polymorphism with myocardial infarction. Dokl Biol Sci. 2002;385:367-70.

27. Сергеева Т.В., Чистяков Д.А., Кобалава Ж.Д., Моисеев B.C. Полиморфизм генов каталазы и глутатионпероксидазы и макроангиопатия у пациентов с инсулиннезависимым диабетом и гипертензией. Генетика, 2001 ;3 7(3):418-21.

28. Сироткина О.В., Заботина A.M., Беркович О. А. и соавторы. ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ВАРИАНТЫ АДФ-РЕЦЕПТОРА ТРОМБОЦИТОВ P2Y12, АССОЦИИРОВАННЫЕ С ИЗМЕНЕНИЕМ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ТРОМБОЦИТОВ И РАЗВИТИЕМ СЕРДЕЧНОСОСУДИСТЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ. Генетика. 2009;45:247-253.

29. Чудакова Д.А., Минушкина Л.О., Затейщиков Д.А. Изучение полиморфизма маркера G(-455)A гена FGb с ИБС. Генетика. 2004;40:1406.

30. Кузьмина А.А., Латфулин И.А. Гаплотипы HLA у молодых пациентов с инфарктом миокарда. Терапевтические архивы, 1998;70(8):33-7.

31. Пчелина C.H., Сироткина O.B., Шейдина A.M и соавторы. Генетические факторы риска развития инфаркта миокарда у мужчин молодого возраста, проживающих в северо-западном регионе России. Кардиология. 2007;47:29-34.

32. Малыгина Н.А., Костомарова И.В., Мелентьев А.С. Связь I/D-полиморфизма гена ангиотензин превращающего фермента с наследственной предрасположенностью кинфаркту миокарда. Клиническая медицина. 2002;8:25.

33. Шагисултанова Е.И., Мустафина О.Е., Туктарова И".А., Хуснутдинова Е.И. Полиморфизм Hindlll гена липопротеиновой липазы и риск инфаркта миокарда. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология, 2001;(3): 18-22.

34. Шейдина A.M., Пчелина С.Н., Демидова Д.М и соавторы. Анализ частот аллелей четырех однонуклеотидных полиморфизмов в 5'-нетранслируемой1 81области гена АВСА1 у молодых мужчин с инфарктом миокарда. Кардиология, 2004;44(8):40-5.

35. Попова Л.В., Николаев К.Ю., Николаева A.A., Воронина Е.Г. Особенности клинического течения инфаркта1 миокарда при полиморфизмах гена эндотелиальной NO-синтазы. Клиническая медицина. 2008;86:32-35.

36. Чудакова Д.А., Минушкина JI.O., Затейщиков Д.А., Носиков В.В. Ассоциация полиморфного маркера А1/А2 гена ITGB3 с сердечнососудистыми заболеваниями и инфарктом миокарда. Генетика. 2004;40:1402-1405.

37. Шахнович P.M., Ноева Е.А., Руда М.Я. IfD полиморфизм гена ангиотензин-превращающего фермента* (АПФ) у больных с различными формами ИБС. Всероссийская конференция "Достижения молекулярной медицины и генетики в кардиологии" 1999. Тезисы докладов.

38. Терещенко С.Н., Демидова И.В., Кобалава' Ж.Д. Полиморфизм гена АПФ, структурно-функциональное состояние левого желудочка у больных постинфарктной ■ сердечной недостаточностью и эффекты ингибитора АПФ периндоприла. Терапевтический архив. 2002;4:56.

39. Беркович O.A., Баженова Е.А., Волкова Е.А и соавторы. I/D-полиморфизм гена ангиотензин превращающего фермента у мужчин с инфарктом миокарда в молодом возрасте. Российский физиологический журнал им. Сеченова, 2001;87:642-648.

40. Чистяков Д.А., Демуров Л.М., Кондратьев Я.Ю. Полиморфизм гена ангиотензин превращающего фермента при артериальной гипертонии и сердечно- сосудистых заболеваниях в московской популяции. Молекулярная биология. 1998\ Т. 32. № 3. С. 410.

41. Гукова С.П., Фомичева Е.В., Ковалев Ю.П. Роль структурного полиморфизма ангиотензин превращающего фермента в развитии инфаркта миокарда. Клиническая медицина, 1997;75(9):36-9.

42. Мустафина О.Е., Шагисултанова Е.И., Туктарова И.А., Хуснутдинова Е.К. Полиморфизм гена аполипопротеина Е и риск инфаркта миокарда. Молекулярная биология, 2002;36(6):978-84

43. Tereshchenko IP, Petrkova J, Mrazek F et al. The macrophage migration inhibitory factor (MIF) gene polymorphism in Czech and Russian patients with myocardial infarction. Clin Chim Acta. 2009;402(l-2): 199-202. Epub 2009 Jan 9.

44. Fuster, V, Moreno, PR, Fayad, ZA, et al. Atherothrombosis and high-risk plaque: part I: evolving concepts. J Am Coll Cardiol 2005;46:937.

45. Falk, E, Shah, PK, Fuster, V. Coronary plaque disruption. Circulation 1995; 92:657.

46. Ambrose, JA, Tannenbaum, MA, Alexopoulos, D, et al. Angiographic progression of coronary artery disease in the development of myocardial infarction. J Am Coll Cardiol 1988;12:56.

47. Little, WC, Constantinescu, M, Applegate, RJ, et al. Can coronary angiography predict the siteof a subsequent myocardial infarction in patients with mild to moderate coronary artery disease? Circulation 1988;78:1157.

48. Giroud, D, Li, JM, Urban, P, et al. Relation of the site of acute myocardial infarction to the most severe coronary arterial stenosis at prior angiography. Am J Cardiol 1992;69:729.к

49. Glaser, R, Selzer, F, Faxon, DP, et al. Clinical progression of incidental, asymptomatic lesions discovered during culprit vessel coronary intervention. Circulation 2005; 111:143.

50. Waxman S., Ishibashi F, Muller J.E. Detection and Treatment of Vulnerable Plaques and Vulnerable Patients . Circulation. 2006; 114:2390-2411

51. Панченко Е.П., Добровольский А.Б. Тромбозы в кардиологии. Механизмы развития и возможности терапии. Москва, 1999.

52. Virmani R, Kolodgie FD, Burke АР, Farb A, Schwartz SM. Lessons from sudden coronary death: a comprehensive morphological classification scheme for atherosclerotic lesions. Arterioscler Thromb Vase Biol. 2000;20:1262-1275.

53. Farb A, Burke AP, Tang AL, Liang TY, Mannan P, Smialek J, Virmani R. Coronary plaque erosion without rupture into a lipid core: a frequent cause of coronary thrombosis in sudden coronary death. Circulation. 1996;93:1354-1363.

54. Hansson GK. Inflammation, atherosclerosis, and coronary artery disease. N Engl J Med. 2005;352:1685-1695.

55. Duff GW, Libby P, Ordovas JM, Reilly PR The future of living well to 100. Am J Clin Nutr. 2006;83:488S-490S.

56. Peiser L, Mukhopadhyay S, Gordon S. Scavenger receptors in innate immunity. Curr Opin Immunol 2002;14:123-128.62 . Janeway CA Jr, Medzhitov R. Innate immune recognition. Annu Rev Immunol 2002;20:197-216.

57. Libby P. Molecular basic of the acute coronary syndrome. Circulation 1995; 91:2844-2850.

58. Pinderski LJ, Fischbein MP, Subbanagounder G, et al. Overexpression of interleukin-10 by activated T lymphocytes inhibits atherosclerosis in LDL receptor

59. Caligiuri G, Rudling M, Ollivier V, et al. Interleukin-10 deficiency increases atherosclerosis, thrombosis, and low-density lipoproteins in apolipoprotein E knockout mice. Mol Med 2003;9:10-17.

60. Robertson AKL, Rudling M, Zhou X, Gorelik L, Flavell RA, Hansson GK. Disruption of TGF-beta signaling in T cells accelerates atherosclerosis. J Clin Invest 2003;112:1342-1350.

61. Карпов Ю.А. Воспаление и атеросклероз: состояние проблемы и нерешенные вопросы. Сердце 2003;2(4): 190-192.

62. Floyd-Smith, G. A.; Whitehead, A. S.; Colten, Н. R.; Francke, U. Human С-reactive protein gene (CRP) is located on the proximal long arm of chromosome 1. Cytogenet. Cell Genet. 1985;40: 630 only.

63. Floyd-Smith, G. A.; Whitehead, A. S.; Colten, H. R.; Francke, U. : The human C-reactive protein gene (CRP) and serum amyloid P component gene (APCS) are* located on the proximal long arm of chromosome 1-. Immunogenetics 1986;24:171-176.

64. Walsh, M.-T.; Divane, A.; Whitehead, A. S. : Fine mapping of the human pentraxin gene region on chromosome lq23. Immunogenetics 1996;44: 62-69.

65. Goldman, N. D.; Liu, Т.; Lei, K.-J. : Structural analysis of the locus containing the human C-reactive protein gene and its related pseudogene. J. Biol. Chem. 1987;262:7001-7005.

66. Kushner I, Rzewnicki D, Samols'D. What does minor elevation of C-reactive protein signify? Am. J. Med 2006; 119:166,e 17-28.

67. Pearson Т., Mensah G., Meinertz T. et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease application to clinica and public health practice. A statement

68. Kuller LH, Tracy RP, Shaten J, Meilahn EN. Relation of C-reactive protein and coronary heart disease in the MRFIT nested case-control study. Multiple Risk Factor Intervention Trial. Am J Epidemiol. 1996;144(6):537-47.

69. Pai JK, Pischon T, Ma J et al. Inflammatory markers and the risk of coronary heart disease in men and women. N Engl J Med. 2004 Dec 16;351(25):2599-610.

70. Blake GJ, Ridker PM. Inflammatory bio-markers and cardiovascular risk prediction. J Intern Med. 2002;252(4):283-94. Review.

71. Volanakis J.E. Human C-reactive protein: expression, structure and function. Mol. Immunol 2001;38:189-97.

72. Majello B, Arcone R, Toniatti C, Ciliberto G. Constitutive and IL-6-induced nuclear factors that interact with the human C-reactive protein promoter. EMBO J. 1990;9(2):457-65.

73. Zwaka, TP, Hombach, V, Torzewski, J. C-reactive protein-mediated low density lipoprotein uptake by macrophages: implications for atherosclerosis. Circulation 2001;103:1194.

74. Verma, S, Wang, CH, Li, SH, et al. A self-fulfilling prophecy: C-reactive protein attenuates nitric oxide production and inhibits angiogenesis. Circulation 2002;106:913.

75. Pasceri, V, Willerson, JT, Yeh, ET. Direct proinflammatory effect of C-reactive protein on human endothelial cells. Circulation 2000; 102:2165.

76. Pasceri, V, Chang, J, Willerson, JT," Yeh, ET. Modulation of C-reactive proteinmediated monocyte chemoattractant protein-1 induction in human endothelial cells by anti-atherosclerosis drugs. Circulation 2001; 103:2531.

77. Zacho, J, Tybjaerg-Hansen, A, Jensen, JS, et al. Genetically elevated'C-reactive protein and ischemic vascular disease. N Engl J Med 2008;359:1897.

78. Clapp, BR, Hirschfield, GM, Stony, C, et al. Inflammation and endothelial function: direct vascular effects of human C-reactive protein on nitric oxide bioavailability. Circulation 2005;111:1530.

79. Paffen, E, Vos, HL, Bertina, RM. C-reactive protein does not directly induce tissue factor in human monocytes. Arterioscler Thromb Vase Biol 2004; 24:975.

80. Taylor, KE, Giddings, JC, van den, Berg CW. C-reactive protein-induced in vitro endothelial cell activation is an artefact caused by azide and lipopolysaccharide. Arterioscler Thromb Vase Biol 2005;25:1225.

81. Pepys, MB, Hawkins, PN, Kahan, MC, et al. Proinflammatory effects of bacterial recombinant human C-reactive protein are caused by contamination with bacterial products, not by C-reactive protein itself. Circ Res 2005;97:e97.

82. Ridker, PM, Cushman, M, Stampfer, MJ, et al. Inflammation, aspirin, and the risk of cardiovascular disease in<apparently healthy men. N Engl J Med 1997; 336:973.

83. Ridker, PM, Glynn, RJ, Hennekens, CH. C-reactive protein-adds to the predictive value of total and HDL cholesterol in determining risk offirst myocardial infarction. Circulation 1998;97:2007.

84. Cannon C, Morrow D, Jesse R et al. National Academy of clinical biochemistry laboratory medicine practice guidelines: clinical characteristics and utilization of biochemical markers in acute coronary syndromes. Circulation 2007;115: e356-e375.

85. Brull D J, Serrano N, Zito F et.al. Human CRP gene polymorphism influences CRP levels: implications for the prediction and pathogenesis of coronary heart disease. Arterioscler Thromb Vase Biol 2003;23:2063-2069.

86. Kathiresan S., MD; Larson M., Vasan R. et al. Contribution of clinical correlation and 13 C-reactive protein, gene polymorphisms to interindividual variability in serum C-reactive protein level: Circulation. 2006; 113:1415-1423.

87. Hage F., Szalai A. C-reactive protein gene polymorphisms, G-reactive protein blood levels, and cardiovascular disease risk. J Am Coll Cardiol 2007;50:1115-1122.

88. Lange LA, Carlson CS, Hindorff LA, et al. Association of polymorphismsin the CRP gene with; circulation C-reactive protein levels and cardiovascular events. JAMA 2006;296:2703-11. /

89. Crawford DC, Sanders CL, Qin X, et al. Genetic variation is associated with C-reactive protein levels in the third National Health and Nutrition Examination Survey. Circulation 2006;114:2458-2465. >

90. Van Snick J. Interleukin-6: an overview. Annu Rev Immunol. 1990;8:253-278.

91. Papanicolaou DA, Wilder RL, Manolagas SC, Chrousos GP. The pathophysiologic roles of interleukin-6 in human disease. Ann Intern Med. 1998;128:127-137.

92. Koenig W; Khuseyinova N. Biomarkers of Atherosclerotic Plaque Instability and Rupture. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2007;27:15.

93. Seino Y, Ikeda U, Ikeda M et al. Interleukin 6 gene transcripts are expressed in human atherosclerotic lesions. Cytokine. 1994; 6: 87-91.

94. Rus HG, Vlaicu R, Niculescu F. Interleukin-6 and interleukin-8 protein and gene expression in human arterial atherosclerotic wall. Atherosclerosis. 1996; 127: 263271.

95. Maier W, Altwegg LA, Corti R et al. Inflammatory markers at the site of ruptured plaque in acute myocardial, infarction: locally increased interleukin-6 and serum amyloid A but decreased C-reactive protein. Circulation. 2005; 111: 13551361

96. Lindmark E, Diderholm E, Wallentin L, Siegbahn A. Relationship between interleukin 6 and mortality in. patients with unstable coronary artery disease: effects of an early invasive or noninvasive strategy. J Am Med Assoc. 2001;286:2107-2113.

97. Ridker PM, Rifai N, Stampfer MJ, Hennekens CH. Plasma-concentration of interleukin-6 and'the risk of future myocardial^infarction among apparently healthy men. Circulation. 2000;101:1767-1772.

98. Pradhan AD, Manson JE, Rossouw JE , et al. Inflammatory biomarkers, hormone replacement therapy, and incident coronary heart disease: prospective analysis from the Women's Health Initiative observational study. J Am Med Assoc. 2002;288:980-987.

99. Ferguson-Smith, A. C.; Chen, Y.-F.; Newman, M. S. et al. Regional localization of the interferon beta-2/B-cell stimulatory factor 2/hepatocyte stimulating factor gene to human5chromosome 7pl5-p21. Genomics 1988;2:203-208.

100. Chen, Y.; Ferguson-Smith, A. C.; Newman, M. S. et al* Regional localization'of the human beta 2-interferon gene. Am. J. Hum. Genet. 1987;41: A161.

101. Bowcock, A. M.; Kidd, J. R.; Lathrop, G. M. et al. The human 'interferon-beta-2/hepatocyte stimulating factor/interleukin-6' gene: DNA polymorphism studies and localization to chromosome 7p21. Genomics 1988;3:8-16.

102. Akira S, Isshiki H, Nakajima T et al. Regulation of expression of the interleukin 6 gene: structure and function of the transcription factor NF-IL6. Ciba Found Symp. 1992;167:47-62; discussion 62-7. Review.

103. Kristiansen OP, Nols0e RL, Larsen L et al. Association of a functional 17beta-estradiol sensitive IL6-174G/C promoter polymorphism with early-onset type 1 diabetes in females. Hum Mol Genet. 2003;12(10): 1101-10.

104. Lalouschek W, Schillinger M, Hsieh K et al. Polymorphisms of the inflammatory system and risk of ischemic cerebrovascular events. Clin Chem Lab Med. 2006;44(8):918-23.

105. Sie MP, Sayed-Tabatabaei FA,,Oei HH et al. Interleukin 6 -174 g/c promoter polymorphism and risk of coronary heart disease: results from the rotterdam study

106. Humphries SE, Luong LA, Ogg MS et al. The interleukin-6 -1740G promoter polymorphism is associated with risk of coronary artery disease and systolic blood pressure in healthy men. Eur Heart J. 2001;22:2243-2252.

107. Georges JL, Loukaci V, Poirier O et al. Interleukin-6 gene polymorphisms and susceptibility to myocardial infarction: the ECTIM study. Etude Cas-Temoin de F Infarctus du Myocarde. J Mol Med. 2001;79(5-6):300-5.

108. Chiappelli M, Tampieri C, Tumini E et al. Interleukin-6 gene polymorphism is an age-dependent risk factor for myocardial infarction in men. Int J Immunogenet. 2005;32(6):349-53.

109. Antonicelli R, Olivieri F, Bonafe M et al. The interleukin-6 -174 G>C promoter polymorphism is associated with a higher risk of death after an acute coronary syndrome in male elderly patients. Int J Cardiol 2005;103(3):266-71.

110. Manginas A, Tsiavou A, Chaidaroglou A et al. Inflammatory cytokine gene variants in coronary artery disease patient in Greece. Coron Artery Dis. 2008;19(8):575-82.

111. Basso F; Gordon D.O. Lowe;' Rumley A et al. Interleukin-6 -174G>C Polymorphism and Risk of Coronary Heart Disease in West of Scotland Coronary Prevention Study (WOSCOPS) Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2002;22:599.

112. Lieb W, Pavlik R, Erdmann J et al. No association of interleukin-6 gene polymorphism (-174 G\C) with myocardial infarction or traditional cardiovascular risk factors. Int J Cardiol. 2004;97(2):205-12.

113. Azzawi M, Hasleton P. Tumour necrosis factor alpha and the cardiovascular system: its role in cardiac allograft rejection and heart disease. Cardiovasc Res 1999;43:850-9.

114. Kleemann R, Zadelaar S, Kooistra T. Cytokines and atherosclerosis: a comprehensive review of studies in mice. Cardiovascular Research 2008; 79(3):360-376.

115. Andreotti F, Porto I, Crea F, Maseri A. Inflammatory gene polymorphisms and ischaemic heart disease: review of population association studies. Heart 2002;87:107-112 doi:10.1136/heart.87.2.107

116. Pennica, D.; Nedwin, G. E.; Hayflick, J. S. et al. Human tumour necrosis factor: precursor structure, expression and homology to lymphotoxin. Nature 1984;312: 724729.

117. Verstrepen L, Bekaert T, Chau TL et al. TLR-4, IL-1R and TNF-R signaling to NF-kappaB: variations on a common theme. Cell Mol Life Sci. 2008;65(19):2964-2978. Review. > t .

118. Vila-del Sol V, Punzón C, Fresno M. IFN-gamma-induced TNF-alpha expression is regulated by interferon regulatory factors 1 and 8 in mouse macrophages. J Immunol. 2008; 181(7):4461-4470.

119. Knight JC, Kwiatkowski D. Inherited variability of tumor necrosis factor production and susceptibility to infectious disease. Proc Assoc Am Physicians. 1999; 111(4):290-298. Review.

120. Bernard V, Pillois X, Dubus I et al. The -308 G\A tumor necrosis factor-alpha gene dimorphism: a risk factor for unstable angina. Clin Chem Lab Med. 2003;41(4):511-6.

121. Herrmann SM, Ricard S, Nicaud V et al. Polymorphisms of the tumour necrosis factor-alpha gene, coronary heart disease and obesity. Eur J Clin Invest. 1998;28(l):59-66.

122. Padovani JC, Pazin-Filho A, Simoes MV, et al. Gene polymorphisms in the TNF locus and the risk of myocardial infarction. Thromb Res 2000;100:263-269.

123. Appoloni O, Duront E,Vandercruys M et al; Association between the TNF-2 allele and a better survival; in cardiogenic shock. Chest 2004; 125:198011982.

124. Roch W, Tiroch K, von Beckerath N et al. Tumor necrosis factor-alpha, lymphotoxin-alpha, and interleukin-10 gene polymorphisms; and restenosis after coronary artery stenting. Cytokine. 2003.21 ;24(4): 161 -171.

125. Schreyer, S. A., Vick, С. M. and LeBoeuf, R. C. Loss of lymphotoxin-a but not tumor necrosis factor reduces atherosclerosis in: mice; Ji Biol;. Chem: 2002;277:12364-12368.

126. Ozaki, K., Inoue, K., Sato, H. et al. Functional^^ variationin LGALS2 confers risk of myocardial infarction and regulates lymphotoxin-a secretion in vitro. Nature 2004; 429: 72-75.

127. Jongeneel, C. V.; Briant, L.; Udalova, I. A. et al. Extensive genetic polymorphism in the human tumor necrosis factor region and relation to extended HLA haplotypes. Proc. Nat. Acad. Sci. 1991;88:9717-9721.

128. Mizuno H, Sato H, SakataY et al. Impact of atherosclerosis-related gene polymorphisms on mortality and recurrent events after myocardial* infarction. Atherosclerosis. 2006;185:400-5. Epub 2005 Jul 28.

129. Yamada A, Ichihara S, Murase Y et al. Lack of association of polymorphisms of the lymphotoxin alpha gene with myocardial infarction in Japanese. J Mol Med. 2004 Jul;82(7):477-83. Epub 2004 Jun 3.

130. Koch W, Hoppmann P, Michou E et al. Association of variants in the BAT1-NFKBIL1-LTA genomic region with protection against myocardial infarction in Europeans. Hum Mol Genet .2007 Aug 1; 16(15):1821-7. Epub 2007 May 21.

131. Clarke R, Xu P, Bennett D et al. Lymphotoxin-alpha gene and risk of myocardial infarction in 6,928 cases and 2,712 controls in the ISIS-case-control study. PLoS Genet.2006;2(7):el07.

132. Sedlacek K, Neureuther K, Mueller JC et al. Lymphotoxin-alpha and galectin-2 SNPs are not associated with myocardial infarction in two different German populations. Mol Med 2007;85:997-1004. Epub 2007 May 12.

133. Asselbergs FW, Pai JK, Rexrode KM et al. Effects of lymphotoxin-alpha gene and galectin-2 gene polymorphisms on inflammatory biomarkers, cellular adhesion molecules and risk coronary heart disease. Clin Sci (Lond) 2007; 112:291-8.

134. Blobe GC, Schiemann WP, Lodish.HF. Role of transforming growth factor beta in human disease. N Engl J Med2000;342:1350-7.

135. Bujak M, Frangogiannis NG. The role of TGF-0 signaling in myocardial infarction and cardiac remodeling. Cardiovasc Res 2007;74(2):184-195.

136. Annes JP, Mungers JS, Rifkin DB. Making sense of latent TGFbeta activation. J Cell Sci 2003;116:217-224.

137. Ignotz RA, Massague J. Transforming growth factor-beta stimulates the expression of fibronectin and collagen and their incorporation into the extracellular matrix. J Biol Chem 1986;261:4337-4345.

138. Werner F, Jain MK, Feinberg MW et al. Transforming growth factor-beta 1 inhibition of macrophage activation is mediated via Smad3. J Biol Chem 2000;275:36653-36658.

139. Ikeuchi M, Tsutsui H, Shiomi T et al. Inhibition of TGF-beta signaling exacerbates early cardiac dysfunction but prevents late remodeling after infarction. Cardiovasc Res 2004;64:526-535.

140. Okada H, Takemura G, Kosai K et al. Postinfarction gene therapy against transforming growth factor-beta signal modulates infarct tissue dynamics and attenuated left ventricular remodeling and heart failure. Circulation 2005; 111:24302437.

141. Liao R. Yin and Yang of myocardial'transforming growth factor-betal: timing is everything. Circulation 2005; 111:2416-2417.

142. Grainger DJ, Kemp PR, Liu AC, Lawn RM, Metcalfe JC. Activation, of transforming growth factor-13 is inhibited in transgenic apolipoprotein(a) mice. Nature 1994;370:460-462.

143. Schiller M., Javelaud D., Mauviel A. TGF-beta-induced SMAD signaling and gene regulation: consequences for extracellular matrix remodeling and wound healing. J Dermatol Sci 2004;35:83-92.

144. Cambien F, Ricard S, Troesch A, et al. Polymorphisms of the transforming growth factor-beta 1 gene in relation to myocardial'infarction and blood pressure. The étude cas-temoin de l'infarctus du myocarde (ECTIM) study. Hypertension 1996;28:881-7

145. Yokota M, Ichihara S, Lin TL, et al. Association of a T29-C polymorphism of the transforming growth factor-betal gene with genetic susceptibility to myocardial infarction in Japanese. Circulation 2000;101:2783-7.

146. Crobu F, Palumbo L, Franco E et al. Role of TGF-beta 1 haplotypes in the occurrence of myocardial infarction in young Italian patients. BMS Med Genet 2008;29:9-13.

147. Sie MP, Uitterlinden AG, Bos MJ et al. TGF-beta 1 polymorphisms and risk of myocardial infarction and stroke: the Rotterdam Study. Stroke 2006;37(11):2667-71. Epub 2006 Oct 5.

148. Oppermann M. Chemokine receptor CCR5: insights into structure, function, and regulation. Cell Signal. 2004; 16(11): 1201-1210.

149. Samson M., Soularue P., Vassart G., Parmentier M. Genomics 1996;36:522-526.

150. Luster AD. Chemokines—chemotactic cytokines that mediate inflammation. N Engl J Med. 1998;338:436-444.

151. Premack BA, Schall TJ. Chemokine receptors: gateways to inflammation and infection. Nat Med 1996;2:1174-1

152. Potteaux S; Combadiere C; Esposito B et al. Role of.Bone Marrow-Derived CC-Chemokine Receptor 5 in the Development of Atherosclerosis of Low-Density Lipoprotein Receptor Knockout Mice. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2006;26:1858

153. Kuziel WA, Dawson TS, Quinones M et al. CCR5 deficiency not protective in the early stages of atherogenesis in ApoE knockout mice. Atherosclerosis 2003;167:25-32.

154. Szalai S, Duba J, Prohaszka Z et al. Involvement of polymorphisms in the chemokine system in the susceptibility for coronary artery disease (CAD). Atherosclerosis 2001;158:233-239.

155. Pai JK, Kraft P, Cannuscio CC et al. Polymorphisms in the CC-chemokine receptor -2 (CCR2) and -5 (CCR5) genes and risk of coronary heart disease among US women. Atherosclerosis 2006;186:132-139.

156. Balistreri CR, Candore C, Caruso M et al. Role of polymorphisms of CC-chemokine receptor-5 gene in acute myocardial infarction and biological implications for longevity. Haematologica. 2008 ;93 (4):63 7-63 8.

157. Gonzalez P, Alvarez R, Batalla A et al. Genetic variation at the chemokine receptors CCR5/CCR2 in myocardial infarction. Genes Immunity 2001; 2:191-195.

158. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning, Ed. Nolan, C. Cold Spring Harbor, N.Y.: Cold Spring Harbor Lab. Press. 1989.

159. He B., Navikas V., Lundah, J. et al. Tumor necrosis factor alpha-308 alleles in multiple sclerosis and optic neuritis. J Neuroimmunol, 1995;63:143-147.

160. Roth MP, Nogueira L, Coppin H. et al. Tumor necrosis factor polymorphism in multiple sclerosis: no additional association independent of HLA. J Neuroimmunol. 1994;51:93-99.

161. Sandford A.J., Pare P.D. Direct PCR of small genomic DNA fragments from serum. Biotechniques. 1997;23:890-892.

162. DeMichele A, Martin A.-M., Mick R. et al. Interleukin-6 174G3C polymorphism is associated with improved outcome in high-risk breast cancer. Cancer research. 2003;63:8051-8056.

163. Favorov A.V., Andreewski T.V., Sudomoina M.A. et al. A Markov chain Monte Carlo technique for identification of combinations of allelic variants underlying complex diseases in humans. Genetics.2005; 171:2113—2121

164. H.M. Чихладзе, Х.Ф. Самедова, M.A. Судомоина и соавторы Сравнительный генетический анализ различных форм низкореццновой артериальной гипертонии. Молекулярная биология.2008:42, 588-598.

165. М.Г. Парфенов, Б.В. Титов, М.А. Судомоина, М.Ю и соавторы Комплексный анализ генетической предрасположенности к ишемическому инсульту у русских. Молекулярная биология. 2009;43,937-945.

166. Ridker P.M. Clinical application of C-reactive protein for cardiovascular disease detection and prevention. Circulation. 2003;107:363-369.

167. Gehring NH, Frede U, Neu-Yilik G et. al Increased efficiency of mRJSTA 3' end formation: a new genetic mechanism contributing to hereditary thrombophilia, Nat Genet. 2001;28:389-392.

168. Kikuchi M, Hishida A, Ishikawa К et al. Associations between serum C-reactive protein (CRP) levels and polymorphisms of CRP, interleukin IB, and tumor necrosis factor genes among Japanese health checkup examinees. Asian Рас J Cancer Prev 2007;8:87-92

169. Barbaux, S, Tregouet DA, Nicaud V et al. Polymorphisms in 33 inflammatory genes and risk of myocardial, infarction—a system genetics approach. J .yj0j, Med.2007;85:1271-1280.

170. Licastro F, Chiapelli'M, Caldarera CM et al. Acute myocardial infarction andiproinflammatory gene variants. Ann N Y Acad Sci. 2007; 1119:227-242.

171. Bis JC, Heckbert SR, Smith NL et al. Variation in inflammation-related genes and risk of incident nonfatal myocardial infarction or ischemic stroke Atherosclerosis. 2008; 198:166-173.

172. Malarstig A, Wallentin L, Siegbahn A. Genetic variation in the mterleukin-6 gene in relation to risk and outcomes in acute coronary syndrome. Tromb Res 2007;119(4):467-473. Epub 2006 jun 16.

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.05) на тему:Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза

Автореферат диссертации по медицине на тему Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза

Оглавление диссертации Сухинина, Татьяна Сергеевна :: 2011 :: Москва

Введение диссертации по теме "Кардиология", Сухинина, Татьяна Сергеевна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Гены системы воспаления как факторы риска инфаркта миокарда и маркеры его прогноза"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Сухинина, Татьяна Сергеевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций