Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Генетические особенности формирования иммунитета к основным вакцинальным антигенам у детей первого года жизни г. Кемерово

На правахрукописи

ГОРДЕЕВА ЛЮДМИЛА АЛЕКСАНДРОВНА

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ ИММУНИТЕТА К ОСНОВНЫМ ВАКЦИНАЛЬНЫМ АНТИГЕНАМ У ДЕТЕЙ ПЕРВОГО ГОДА ЖИЗНИ г. КЕМЕРОВО

14.00.36. - аллергология и иммунология

Автореферат

диссер!ации на соискание лчлиой степени кандидата биологических наук

Новосибирск 2004

Работа выполнена в Институте экологии человека СО РАН и ГОУ ВПО КемГМА Минздрава России.

Научный руководитель: доктор медицинских наукЛ профессор

А.Н. Глушков

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

A.И. Аутеншлюс кандидат медицинских наук

B.Ф. Прокофьев

Ведущая организация: НИИ иммунологии и физиологии УрО РАН (г. Екатеринбург).

Защига состоится «_»_2004 г. в_час. на заседании

диссертационного совета Д.001.01.01 при Институте клинической иммунологии СО РАМН (630091, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института клинической иммунологии СО РАМН.

Автореферат разослан У/ » ^^■еу/и^"_2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета к.б.н.

О.Т. Кудаева

<FcfM

¿005-4

■-1— 3

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. В настоящее время существуют единичные и противоречивые исследования взаимосвязи HLA с характером гуморального иммунного ответа на дифтерийный анатоксин, ограниченные, в основном, изучением HLA I класса (Прилуцкий А.С. и др., 1994). Данные разных авторов в отношении взаимосвязи генов HLA с характером антителообразования на АГ коревой вакцины далеко не всегда совпадают (Прилуцкий А.С. и др., 1994; Poland GA и др., 1997-2003). Кроме того, до сих пор не ясно, оказывает ли влияние пол ребенка на формирование гуморального иммунного ответа к вакцине. *

В отдельных сообщениях указывается, что не только наследуемые HLA, но и ненаследуемые HLA родителей вовлечены в развитие иммунного ответа у детей. Более того, установлено влияние ненаследуемых родительских HLA DR на разнообразные иммунные реакции у их потомства (van der Horst-Bruinsma I.E., Hazes J.M.W., Schreuder G.M.Th.., и др., 1998; van Rood J.J., Claas F.H.J., 2000). Уместно предположить, что ненаследуемые родительские HLA оказывают влияние и на эффективность вакцинации против дифтерии и кори.

Несомненный интерес вызывают нарушения иммунных взаимодействий между матерью и плодом. Они проявляются не только в репродуктивных ошибках (Choudhury S.R., Knapp LA, 2000), но и могут отражаться на яостнатальком становления иммунитета (Борисова A.M., Серова Л.Д., Сибирякова Л.Г., 1992; Kamenov В., Dimitrijevic H., Tasic G., Pljaskic S., 1999; Shabaldin A.V., Glushkov A.N., 1999). Это позволяет предположить, что нарушения иммунных механизмов в системе мать-плод могут приводить к дисбалансу в трансплацентарной передачи материнских противокоревых антител (AT) к плоду, что, в свою очередь, будет опосредованно влиять на формирование иммунитета до и после вакцинации. Проведение такого рода исследований может заблаговременно определять тактику вакцинации ребенка.

Несмотря на очевидную актуальность и практическую значимость,

вышеперечисленные вопросы в доступной нам литературе освещены

недостаточно, что и послужило предпосылкой для проведения настоящего

исследования. __________

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА

¿ГВРЙУ

Цель работы. Исследовать влияние Н1А БЯ ребенка и его родителей, а также иммунных взаимодействий в системе мать-плод на развитие поствакцинального гуморального иммунитета у детей в раннем постнатальном периоде.

Основные задачи исследования:

1. Изучить ассоциации НЬЛ Б Я фенотипа ребенка и родителей с эффективностью вакцинации против дифтерии в раннем детском возрасте.

2. Исследовать ассоциации НЬЛ БЯ фенотипа ребенка и родителей, а также трансплацентарных материнских антител с эффективностью вакцинации против кори в раннем детском возрасте.

3. Оценить возможное влияние ненаследуемых родительских НЬЛ БЯ на эффективность вакцинации против дифтерии и кори у детей раннего возраста.

4. Исследовать влияние иммунных взаимодействий в системе мать-плод на эффективность вакцинации против кори у детей раннего возраста.

Научная новизна. Впервые обосновано положение о том, что на характер антителообразования после вакцинации АКДС и ЖКВ оказывают влияние не только собственные НЬЛ БЯ ребенка, но и пенаследусмые родительские НЬЛ БЯ. Применен такой показатель как "динамика" сероконверсии на вакцину в определенные периоды развития ребенка. Обнаружены возможные пути трансформации нарушения иммунных

а п п п г-У-

взаимодействий в системе мать-плод на о ми ование п отивоко *евого гуморального иммунитета у потомства.

Практическая значимость. Разработана система поэтапного прогнозирования эффективности вакцинации АКДС и ЖКВ детей в раннем посткатальном периоде, включающая: НЬЛ БК-типирсвйпие родителей, исследование иммунных взаимодействий матери и плода во время беременности, НЬЛ БЯ-тшгарование ребенка. Иммуногенетический контроль за состоянием гуморального иммунитета после иммунизации АКДС и ЖКВ в определенные периоды жизни у детей раннего возраста позволяет не только оценить фактическую защищенность к дифтерии и кори, но и выявить группу, повышенного риска заболеваемости, а также разработать индивидуальные схемы вакцинации и обеспечить ее эффективность. По материалам диссертации опубликованы методические рекомендации, предназначенные для врачей

лечебно-профилактических учреждений (педиатров, неонатологов, акушер гинекологов) и специалистов в области генетики, утвержденные Департаментом охраны здоровья населения Администрации Кемеровской области 17. 12. 2003 г. Основные результаты исследования внедрены в практику МУЗ Детской городской клинической больницы №5 г. Кемерово. Положения, выносимые на защиту:

1. ЫЬЛ БЯ ребенка и родителей ассоциированы с характером антителообразования на вакцинные антигены (АГ) дифтерии и кори у детей раннего возраста.

2. На формирование поствакцинального противокоревого гуморального иммунитета оказывает влияние пол ребенка и противокоревые материнские ЛТ, переданные трансплацентарно.

3. Характер антителообразования после вакцинации АКДС и ЖКВ у детей раннего возраста ассоциирован с разными ненаследуемыми родительскими ЫЬЛ БЯ.

4. Нарушения иммунных взаимодействий в системе мать-плод отражаются на качестве иммунного ответа к АГ коревой вакцины у детей в раннем возрасте.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы докладывались на областной научной конференции "Молодые ученые Кузбассу. Взгляд в XXI век" (Кемерово, 2001); межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 50-летию трудовой деятельности профессора кафедры педиатрии ГОУ ВПО КемГМА, заслуженного врача России Л.М. Казаковой 18 мая 2003 г; ежегодной научной сессии 16.04.2004, проводимой Отделом иммунологии рака Кем НЦ СО РАН.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ. Структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, изложения собственных экспериментальных данных и обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Работа изложена на 144 страницах, иллюстрирована 28 таблицами и 15 рисунками. Библиографический указатель включает 183 источника, из них 78 работ отечественных и 105 - иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведено обследование 83 детей и их родителей, проживающих в г. Кемерово. Изученную группу детей составили 46 мальчиков и 37 девочек.

Исследования формирования противодифтерийного и противокоревого гуморального иммунитета у детей проведены в возрасте 9 и 14 месяцев жизни. Дети были иммунизированы вакцинами АКДС и ЖКВ отечественного производства в декретированные сроки. Первоначальное исследование показало неоднородность гуморального иммунного ответа на вакцинацию против дифтерии и кори у обследуемых детей.

Обследование родителей (исследование иммунных взаимодействий в системе мать-плод и HLA DR типирование) проходило в период беременности женщин.

Напряженность иммунитета к дифтерии и кори определяли в РПГА. AT к дифтерийному анатоксину (антитоксины) исследовали с помощью диагностикума эритроцитарного дифтерийного антигенного жидкого АО "Биомед" им. И.И. Мечникова. Титр противокоревых AT определяли с помощью диагностикума эритроцитарного коревого АГ сухого (КЭД-90) НИИЭМ им. Пастера г. Санкт-Петербург.

HLA DR типирование детей и их родителей выполняли с помощью лимфоцитотоксического теста (Ю. М. Зарецкая, 1983). Панель для типирования, полученная из НИИ гематологии и переливания крови г. Санкт-Петербург, включала 36 антисывороток против 7 АГ локуса HLA DR. He идентифицированные HLA DR были отнесены к группе Blank.

При изучении иммунных взаимодействий в системе мать-плод использовали двунаправленный микро вариант смешанной культуры лимфоцитов (СКЛ) супругов и определение блокирующей активности женской сыворотки (БАС) в СКЛ супругов (Ю. М. Зарецкая, 1983). При исследовании иммунных взаимодействий в системе мать-плод на основании результатов индекса стимуляции реакции СКЛ и БАС в СКЛ семейных пар выделили четыре иммунорепродуктивные группы супружеских пар.

Динамику количества AT с 9 по 14 месяц жизни оценивали путем вычитания количества AT в 9 месяцев из такового в 14 месяцев у каждого ребенка.

Статистическую^ обработку полученных результатов проводили с помощью ППП "Statistika for WINDOWS 5.0". Использовали методы непараметрической (U-критерий Манна-Уитни, критерий х2 с поправкой Йетса на непрерывность вариации, коэффициент корреляции рангов, предложенный К. Спирменом) и параметрической статистики. <

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние генетических и фенотипических факторов на эффективность вакцинации против дифтерии у детей раннего возраста

Уровень AT" к дифтерийному анатоксину достоверно увеличивался у детей вне зависимости от половой принадлежности с 9 по 14 месяц жизни (0,21+0,03 и 0,53+0,06 МЕ/мл, соответственно; р=0,000).

Ассоциации отдельных HLA DR с количеством AT к дифтерийному анатоксину представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Ассоциации HLA DR с характером антителообразования на дифтерийный компонент АКДС у детей разного пола в отдельные возрастные периоды

HLA" мальчики девочки

9 мес 14 нее динамика 9 мес 14 мес динамика

DR1 0 0 0 0-, 0 0

DR2 - - - - L 0 0

DR3 0 0 0 0 + 0

DR4 0 0 0 + 0 -

DR5 0 0 0 0 - -

DR6 + + 0 0 • -

DR7 - - - 0 0 0

Blank о. 0 0 0 0 0

Примечание: а) «+» - статистически значимая ассоциация АГ с выраженной сероконверсией (р<0,05); «-» - статистически значимая ассоциация АГ со слабой сероконверсией (р<0,05); «0»- отсутствие статистически значимых ассоциаций; б) здесь и далее в таблицах использовали и-критерий Манна-Уитни.

Выявлена ассоциация ША БШ с низкой концентрацией антитоксинов у мальчиков в 9 (^=2,28; №=0,21) и 14 месяцев (ИК=2,14; ЕР=0,21), а также с

мало выраженным приростом количества AT к дифтерийному анатоксину в этот период. У девочек аналогичные ассоциации наблюдались только в 9 месяцев ^=2,22; EF=0,09).

ШЛ DR3, DR4, DR5 не имели ассоциаций с выработкой AT на дифтерийный анатоксин у мальчиков, а у девочек положительные ассоциации выявлены с ШЛ DR3 (RR=O,55; PF=0,69) и DR4 (RR=0,18; PF=4,48) в 14 и 9 месяцев соответственно, и отрицательные ассоциации ШЛ DR5 в 14 месяцев и с динамикой сероконверсии.

В то время как ШЛ DR6 был положительно ассоциирован с количеством ЛТ в 9 ^=0,51; PF=0,90) и 14 месяцев ^=0,41; EF=1,39), а также с его приростом только у мальчиков, но не у девочек (RR=3,73; EF=0,13).

Интересно отметить, что у девочек ШЛ DR4 в 9 месяцев (RR=0,18; PF=4,48) был ассоциирован с выраженным антителообразованием. К 14 месяцам таковая ассоциация уже не прослеживалась, а в результате ассоциация с динамикой образования ЛТ оказалась отрицательной (RR=2,91; EF=0,22).

Таблица 2.

Взаимосвязь НЬА БЯ фенотипа с выработкой АТ на дифтерийный

компонент АКДС-вакцины у детей разного пола.

НЬА уровень уровень уровень

9 места спггистичес 14 месяцев статисгичес динамика статистичес

фенотип (М±т) кой (М±т) кой (Ма±т) кой

значимости значимости значимости

мальчики

Батяб* 4 0,62± 0,36 Ц.,,-13,0, р=0,017 1,05±0,74 и.^18,0, р=0,028 0,43± 0,41 р=0,762

оятяб' 42 0,18±0,04 0,41± 0,06 0,23± 0,05

В1апк* 3 0,02± 0,01 р=0,071 0,06± 0,04 и.^-18,5; р=0,038 0,04±0,02 р=0,295

Ши В1апк" 43 0,21± 0,05 0,47±0,07 0Д6±0,05

Ш130Я7* 4 0,06±0.03 р=0,650 0,09± 0,04 и.,.-27,0; р=0,024 0,03± 0,02 и...-23,0, р=0,021

ОЯЗОЯГ 42 0,21± 0,05 0,48± 0,07 0,27±0,05

девочки

оятя^ 3 0,08± 0,00 р=0,118 0,11± 0,04 и.^11,0; р=0,036 0,03±0,03 и..»=9,0, р=0,021

34 0,24± 0,06 0,66±0,13 0,42±0,11

2 0,67± 0,59 и„-13,0; р=0,049 1,40±0,49 и.^-11,5; р-0,047 0,73± 0,50 р=0,052

ОЯЗОИ4- 35 0Д0± 0,06 0,58±0,13 0,3810,10

ОМОШ* 2 0,63± 0,32 р=0,042 0,78± 0,47 р-0,360 0,15± 0,06 и^-15,0, р=0,046

35 0,20± 0,06 0,62*0,13 0,40*0,11

Примечание: здесь и далее в таблицах «+»- наличие НЬА БЯ фенотипа у детей;

«-»- его отсутствие,

Кроме того, установлено, что выработка ЛТ на дифтерийный вакцинный АГ зависит от того, как комбинируются Ы1Л БЯ в фенотипе. Сильная и слабая выработка антитоксинов у мальчиков и девочек ассоциирована с разными ЫЬЛ БЯ фенотипами (таблица 2).

Так выраженная сероконверсия у мальчиков во всех возрастных периодах была положительно связана с фенотипом БЯ1БЯ6 (ЯЯ=0,76, РР=0,32). Отрицательная ассоциация с выработкой ЛТ у мальчиков имела место при фенотипах БЯ3БЯ7 (ЯЯ=3,67; ЕР=0,14) и БЯ5БЯ7 (ЯЯ=5,27; ЕР=0,16).

У девочек выраженный гуморальный иммунный ответ в 9 и в 14 месяцев был положительно ассоциирован с фенотипами: БЯ3БЯ4 (ЯЯ=0,91; РР=0,10); БЯ3БЯ5 (ЯЯ=5,54; ЕР=0,13). Отрицательные ассоциации с выработкой ЛТ в 14 месяцев и динамикой у девочек имели место при фенотипе БЯ1БЯ4 (ЯЯ=9,89; ЕР=0,12).

Полученные данные позволяют заключить, что сочетание отдельных ЫЕЛ БЯ в фенотипе в некоторых случаях приводит к изменению взаимосвязи с гуморальным иммунным ответом, характерным для каждого из них (см. таблицу 1).

Следует особо отметить фенотип БЯ3БЯ5 у девочек, который как уже было отмечено, ассоциирован положительно с выработкой антитоксинов в 9 (ЯЯ=5,54; ЕР=0,13) и 14 месяцев. В та же время динамика сероконверсии оказалась отрицательно ассоциирована с этим фенотипом (ЯЯ=6,61; ЕР=0,10). По-видимому, в динамике иммунного ответа довлеющим является "отрицательное" влияние БЯ5 на выработку ЛТ к дифтерийному анатоксину.

Возможно, половые различия в ассоциациях ЫЬЛ БЯ фенотипов с характером антителообразования на дифтерийный анатоксин свидетельствуют о наличии взаимодействий ЫЬЛ генов с другими генетическими локусами в пределах Х-хромосомы.

Следует отметить также, что, анализ эффективности вакцинации против дифтерии показал следующее: несмотря на неоднородность гуморального ответа обследуемых детей на вакцинацию, на настоящий момент времени никто из них не болел дифтерией.

Влияние генетических и фенотипических факторов на эффективность вакцинации против кори у детей раннего возраста

Известно, что в возрасте 9 месяцев (до вакцинации ЖКВ) противокоревой гуморальный иммунитет определяется уровнем материнских AT, циркулирующих в сыворотке крови ребенка. Наше исследование показало, что индивидуальные значения обратных титров AT в этом возрасте варьируют от 0 до 40 у детей обоего пола. При этом средние показатели у мальчиков и девочек не имеют значимых различий (4,13+0,76 и 3,38±0,88 соответственно; р=0,517).

После вакцинации ЖКВ в 14 месяцев жизни средние показатели обратных титров AT достоверно увеличились: у мальчиков - более чем в 2 раза (10,87+1,61); у девочек - почти в 6 раз (18,78+2,61) по сравнению с исходным уровнем. Достоверные половые различия выявлены как для средних значений обратных титров AT в 14 месяцев (10,8711,61 против 18,78+2,61; р=0,013), так и для средних значений динамики титра AT с 9 по 14 месяц жизни (6,74+1,62 против 15,40+3,18; р=0,011).

Данные Green M.S. и др. (1994) также указывают на то, что выработка AT на ЖКВ подвержена влиянию пола, и это необходимо учитывать при вакцинации ЖКВ.

Результаты генетических исследований противокоревого гуморального иммунитета у мальчиков и девочек представлены в таблице 3.

Выраженный титр противокоревых поствакцинальных AT у мальчиков в возрасте 14 месяцев наблюдался при экспрессии HLA DR5 (RR=0,54; PF=0,68), в отличие от мальчиков с отсутствием этого АГ. Между тем низкая выработка AT на АГ ЖКВ в 14 месяцев у мальчиков была ассоциирована с DR7 (RR=2,67; PF=0,23) и DRBlank(RR=0,56; PF=0,67).

У девочек выраженный гуморальный иммунный ответ в 14 месяцев наблюдался при наличии HLA DR2 (RR=0,84; PF=0,17), в отличие от девочек с отсутствием этого АГ. Низкая выработка AT на АГ ЖКВ отмечалась у девочек, экспрессирующих HLA DR7 (RR=5,67; EF=0,37).

Таблица 3.

Ассоциации НЬА БЯ с выработкой АТ после вакцинации ЖКВ у детей

раннего возраста.

мальчики девочки

НЬА п обратные татры АТ (№ш) уровень статистической значимости п обратные ткгры АТ (М±т) уровень статистической значимости

ОИГ 16 12,19±3,85 р=0,853 11 29,09*8,44 р-0,367

ми- ' 30 10,59*1,78 25 27,27*3,06

ом* 12 10,41±6,58 р-0,202 11 30,91*10,46 и„.„=71,5,

34 10,93±1,59 25 16.67*2,85 р=0,046

БЮ* 14 10,00*2,91 р=0,650 18 15,00*5,16 р=0,260

РЯЗ' 32 11,02±1,83 19 20,00*3,45

5 7,00*3,74 р=0,734 9 17,22*8,17 р=0,683

ОЯ4' 41 11,09*1,69 28 19,00*3,13

0115* 16 16,88*5,61 и„.„-105,0; 6 11.67*6,54 р=0,483

30 9,60*1,53 р=0,044 31 19,41*3,11

0116*- 7 10,71*5,17 р=0,830 4 15,00*9,57 р=0,751

0116" 39 10,88*1,69 33 19,00*3,04

М17* 7 7,14*1,49 10 10,50*7,80 и. .=77,0,

ОКГ 39 11,17*1,73 р=0,049 27 20,07*3,13 р=0,047

В1апк* 15 7,33*2,06 и.,.=114,5, 5 14,00*6,78 р=0,845

В1апк~ 31 11,55*1,87 р=0,048 32 19,13*3,08

Нами установлено, что выработка АТ на АГ ЖКВ зависит от сочетания отдельных аллелей НЬА БЯ в фенотипе (таблица 4).

Таблица 4.

Ассоциации НЬА БЯ фенотипа с выработкой АТ на АГ ЖКВ у детей

раннего возраста.

Фенотип п ■V Обратные тигры АТ (М*ш) уровень статистической значимости

мальчики

оятю* 5 18,00*6,48 и„=20,5; р=0,041

оятя5' 41 10,00*1,64

01*20Я5* 3 30,00*17,79 и„„=23,0; р=0,047

0К20Я5" 43 9,59*1,28

01ШЖГ 4 5,00*1.44 и^-25,0; р-0,048

оязояг 42 11.42*1,76

девочки

3 1,66*1,17 и„-18,0; р=0,028

ОМОЯТ 34 20.29*3.13

ОЮТ!«* 2 0,00*0.00 и„-11,5, р-0,049

БЯЗОИ' 35 19.85*3.05

01шш* 4 1.25*0,98 и^.-23,0, р=0,031

шшкт 33 20,91*3,19

Примечание: в таблице приведены только фенотипы, для которых получены достоверные отличия.

Выраженный титр противокоревых поствакцинальных ЛТ у мальчиков в 14 месяцев жизни связан с фенотипами БЯ1БЯ5 (ЯЯ=0,81; ЕБ=-0,02; ЕР=0,21) и БЯ2БЯ5 (ЯЯ=0,69; ЕБ=-0,02; ЕР=0,44). Достоверная отрицательная ассоциация с титром ЛТ была отмечена только для фенотипа БЯ3БЯ7 (ЯЯ=3,09; ЕР=0,09; ЕР=-0,75).

У девочек в 14 месяцев жизни мы не обнаружили достоверной связи отдельных ШЛ БЯ фенотипов с выраженным гуморальным иммунным ответом на коревой вакцинный АГ. Низкая выработка ЛТ к АГ ЖКВ у них была связана с фенотипами БЯ2БЯ7 (ЯЯ=8,80; ЕБ=0,15; ЕР=-1,04), DR3DR5 (ЯЯ=5,91; ЕБ=0,09; ЕР=-0,91) и БЯ3БЯ7 (ЯЯ=12,10; ЕБ=0,20; EP=-1,15) в отличие от девочек, где выше перечисленные фенотипы отсутствовали. В ходе исследования выявлено, что при сочетании в фенотипе отдельные ШЛ БЯ могут изменять влияние каждого из них на выработку ЛТ к АГ ЖКВ, причем влияние некоторых ШЛ БЯ может преобладать над действием других.

Рис.1. Зависимость образования собственных противокоревых АТ ребенка

после вакцинации ЖКВ от исходного уровня материнских ЛТ в сыворотке крови ребенка.

Обнаружено, что материнские противокоревые ЛТ, циркулирующие в сыворотке крови у детей в 9 месяцев жизни влияют на интенсивность выработки собственных ЛТ к ЖКВ в 14 месяцев. Между динамикой обратного титра ЛТ с 9 по 14 месяц жизни и обратным титром ЛТ в 9 месяцев существует отрицательная корреляция (г,=-0,35; р=0,001; рис. 1). В результате

Ч" -5 5 15 25 35 45

Исходный уровень АТ в 9 мес (обратные титры)

исследования выявлено: чем выше исходный уровень материнских АТ, тем менее выражена динамика их образования у ребенка после вакцинации ЖКВ и наоборот. Нам не удалось обнаружить взаимосвязи между титрами АТ в 9 и 14 месяцев. Это подтверждает правильность и целесообразность использования такого показателя как "динамика" гуморального иммунного ответа в определенные периоды развития ребенка, будь то противокоревой или иной иммунитет. По-видимому, низкая выработка АТ у детей с 9 по 14 месяц жизни связана со слабым выведением циркулирующих в крови детей материнских противокоревых АТ, переданных через плаценту.

Материнские ША БЯ играют существенную роль в формировании противокоревого гуморального иммунитета у детей раннего возраста.

У мальчиков только материнский ША БЯ5 (фенотип БЯЗОЯб (ЯЯ=0,20; ЕБ=-0,000; РБ=4,00)) имел достоверную положительную связь с титром АТ к ЖКВ в 14 месяцев (18,07+6,83 против 9,68+1,49; р=0,050; ЯЯ=0,92; ЕБ=-0,02; РБ=0,08) и с динамикой титра АТ с 9 по 14 месяц (13,07+6,16 против 5,69+1,58 при отсутствии БЯ5; р=0,048; ЯЯ=0,61; ЕБ=-0,17; РБ=0,54). Очевидно, наследование ША БЯ5 у мальчиков именно от матерей связано с выраженным антител ообразованием на АГ ЖКВ.

У девочек ассоциации с выработкой АТ выявлены только с материнским ША БЯ7 (фенотипы БЯ5БЯ7 (ЯЯ=15,89; ЕБ=0,26; РБ=-1,26) и БЯ7В1апк (ЯЯ=12,42; ЕБ=0,23; РБ=-1,19)), при этом характер ассоциации ША БЯ7 изменялся во времени. Так в 9 месяцев ША БЯ7 матери был положительно ассоциирован с высоким содержанием АТ (6,82+1,13 против 3,25+1,01 при отсутствии БЯ7; р=0,031). Однако к 14 месяцу характер ассоциации БЯ7 изменился на противоположный и стал отрицательным, что отразилось в показателях динамики обратного титра АТ (4,09+7,74 против 16,43+3,53; р=0,007; ЯЯ= 11,00; ЕБ=0,45; РР=-1,67). Возможно, ША БЯ7 положительно взаимосвязан с активной выработкой противокоревых АТ у женщин. Это приводит к длительной персистенции материнских противокоревых АТ у плода и новорожденного ребенка (выявлена положительная ассоциация в 9 месяцев). Но именно высокое содержание материнских АТ в сыворотке крови ребенка является причиной слабого иммунного ответа на ЖКВ к 14 месяцам (отрицательная ассоциация с изменением АТ в этот временной интервал).

Кроме того, анализ эффективности вакцинации ЖКВ показал, что на данный момент времени 12,0 % детей переболели корью, при этом данные дети были серонегативными после вакцинации в 14 месяцев жизни и большинство из них являлись носителями HLA DR7.

Влияние ненаследуемых родительских HLA DR на эффективность вакцинации против дифтерии и кори у детей раннею возраста.

Ненаследуемые материнские (ННМ) и ненаследуемые отцовские (ННО) HLA DR были определены как присутствующие в фенотипе матерей и отцов и отсутствующие в фенотипе ребенка (Van der I.E, Horst-Bruinsma и др., 1998). Для этого оценивали частоту встречаемости ННО и ННМ HLA DR в группах детей с разным уровнем антителообразования в указанные сроки. Защитным против дифтерии считали концентрацию AT > 0,019 МЕ/мл, а защитным против кори -титр AT > 1:10.

Вся выборка была разделена на группы по двум признакам: с одной стороны, по выраженности концентрации AT на дифтерийный и коревой вакцинные АГ в 9, 14 месяцев и в динамике сероконверсии с 9 по 14 месяц, с другой стороны - по наличию или отсутствию ненаследуемых HLA DR в генотипе отца и матери.

Исследовав всю выборку (83 ребенка и их родителей), установили, что некоторые ННО, но не ННМ HLA DR оказывали влияние только на динамику сероконверсии к дифтерийному компоненту АКДС. Удельный вес ННО HLA DR1 был выше среди детей со слабой динамикой AT (<0,019 МЕ/мл) по сравнению с детьми со значительным приростом AT (£0,019 МЕ/мл) (показатели соответственно 28,6% и 8,3%; х2=4,26; р=0,033; RR=4,07; EF=0,54; PF=-1,63).

Между тем нами не обнаружена взаимосвязь ННМ HLA DR с характером гуморального иммунного ответа на дифтерийный анатоксин у детей в возрасте 9,14 месяцев жизни, а также с динамикой антителообразования.

Нами также не выявлена взаимосвязь ННО ША БЯ и ННМ Н1А БЯ с характером антителообразования на АГ ЖКВ у 83 детей в возрасте 9, 14 месяцев жизни, а также с динамикой выработки АТ с 9 по 14 месяц жизни.

Далее изучали влияние ненаследуемых родительских ША БЯ на формирование сероконверсии к дифтерийному и коревому вакцинным АГ у детей, экспрессирующих и неэкспрессирующих соответственно Н1А БЯ3 и ША БЯ5 и ША БЯ7, поскольку для этих ША БЯ были выявлены ассоциации с иммунным ответом на дифтерийный анатоксин и на АГ коревой вакцины.

Выше установили, что ША БЯ3 у обследуемых детей был ассоциирован с выраженной выработкой АТ на дифтерийный анатоксин. Исследование взаимосвязи ННО и ННМ ША БЯ с разными концентрациями антитоксинов у детей ША БЯ3+ и ША БЯ3" в возрасте 9,14 месяцев жизни и в динамике сероконверсии показало, что только ННО ША БЯ1 был связан с выработкой АТ к дифтерии.

У 32 детей ША БЯ3+ при слабой выработке АТ (< 0,019 МЕ/мл) ННО ША БЯ1 встречался значительно чаще, чем у детей с выраженным антительным ответом (>0,019 МЕ/мл): в 9 месяцев жизни, 66,6% против 11,6%, соответственно, (х2=5,74; р=0,016; ЯЯ=12,08; ЕБ=0,51; РБ=-1,93) и в 14 месяцев 66,6% против 17,6%, соответственно. Такая же тенденция имела место и для динамики антителообразования, хотя в обоих случаях различия не достигали статистической достоверности.

ч

У 51 ребенка ША БЯ3* наблюдалась противоположная тенденция. Так, у детей ША БЯ3' с низкой выработкой противодифтерийных АТ (< 0,019 МЕ/мл) с 9 по 14 месяц ННО ША БЯ1 встречался статистически значимо чаще, чем у детей с выраженным антителообразованием (>0,019) (24,0% против 3,9%, соответственно; х*=4,37; р=0,044; ЯЯ=5,66; ЕБ=0,20; РБ=-1,02).

Нами было установлено, что наличие у детей у детей ША БЯ7 взаимосвязано со слабым иммунным ответом на коревой вакцинный АГ. В нашем исследовании явное количественное несоответствие групп детей с защитным и ниже защитного уровня противокоревых АТ не позволило оценить влияние ненаследуемых родительских ША БЯ на иммунитет у детей ША БЯ7+. Однако, в группе детей БЯ7' (п=66) было выявлено следующее.

Оказалось, что взаимосвязь ННО и ННМ ИЬЛ БЯ с характером антителообразования к коревому вакцинному АГ у детей БЯ7" отсутствовала.

ИЬЛ БЯ5+ у мальчиков ассоциирован с выраженным иммунным ответом на ЖКВ. У детей БЯ5+ из всех ННО и ННМ ИЬЛ БЯ только с ННМ ИЬЛ БЯ2 была обнаружена взаимосвязь с выработкой ЛТ к АГ ЖКВ. Основные статистические различия наблюдались в возрасте 14 месяцев жизни. Так ННМ ИЬЛ БЯ2 чаще присутствовал у детей БЯ5+ с низкой выработкой ЛТ к АГ ЖКВ в сравнении с детьми БЯ5+ с выраженным иммунным ответом (55,5% против 15,4%; %2 =3,96; р=0,046; ЯЯ=5,62; ЕЬ=0,45; РЬ=-1,51). Между тем, влияние ненаследуемых родительских ИЬЛ БЯ на становление противокоревого иммунитета у детей ИЬЛ БЯ5' не выявлено.

Полученные данные позволяют предположить, что ИЬЛ БЯ1 может быть сцеплен с генами, кодируемыми в других иммунных локусах и ассоциированными с низким гуморальным иммунным ответом на дифтерию. Не исключено, что у отцов имеет место влияние генов У-хромосомы, продуктами которых являются ферменты, участвующие в процессе кроссинговера в области ИЬЛ. Как следствие повышенного кроссинговера в этих локусах, сцепленный с ИЬЛ БЯ1 ген слабого иммунного ответа часто наследуется плодом.

Эффект влияния ННМ ИЬЛ БЯ2 на низкую выработку ЛТ к коревому вакцинному АГ можно объяснить тем, что, вероятно, ИЬЛ БЯ2 у матери связан со слабым антителообразованием к кори. Данное предположение не противоречит результатам исследования Н.Д. Ющук с коллегами (1998 г.). Эти исследователи указывают на то, что среди повторно заболевших корью лиц была увеличена частота встречаемости в фенотипе ИЬЛ БЯ2, при этом корь протекала тяжело и с развитием осложнений.

Влияние иммунных взаимодействий в системе мать-плод на эффективность вакцинации против кори у детей раннего возраста.

В ходе проведенного исследования обнаружено влияние иммунных взаимодействий между матерью и плодом на характер формирования

противокоревого гуморального иммунитета имеет выраженные половые различия.

В 14 месяцев жизни слабо выраженная выработка противокоревых поствакцинальных ЛТ у мальчиков имела место, если присутствовали нарушения как иммунного распознавания, так и иммуносупрессии (СКЛ-БАС-) в сравнении с отсутствием таковых нарушений (СКЛ+БАС+) (3,33+1,42 против 13,96±3,80; р=0,022; здесь и в динамике использован и-критерий Манна-Уитни). Динамика сероконверсии была также отрицательной (-0,4110,96 против 9,37+3,84; р=0,003).

У девочек отмечено следующее: титр противокоревых поствакцинальных ЛТ был менее выражен в случае, если имели место нарушения иммунного распознавания, в то время как фактор супрессии существенно не влиял на формирование противокоревого иммунного ответа (СКЛ-БАС+).

Возможным объяснением обнаруженной ситуации является связь с так называемыми АГ У-хромосомы. Данные АГ экспрессированы уже на стадии эмбриона и оказывают существенное сенсибилизирующее влияние на иммунную систему матери, требующей выраженной супрессии иммунного отторжения плода. В дальнейшем эти нарушения супрессорной активности могут, по-видимому, трансформироваться на иммунной компетентности ребенка. - „

Полученные результаты указывают на наличие взаимосвязи между иммунными нарушениями в системе мать-плод и характером антителообразования к ЖКВ. Однако, механизм ее реализации остается не понятным. Возможной причиной, влияющей на поствакцинальный иммунитет, могут быть трансплацентарные ЛТ, передача которых во время беременности иммуноопосредована. Возможно, иммунные механизмы в системе мать-плод посредством избирательной передачи ЛТ против кори к плоду влияют на интенсивность образования собственных ЛТ с 9 по 14 месяц после вакцинации ЖКВ.

Оказалось, что у девочек существует отрицательная корреляция между трансплацентарными ЛТ и динамикой поствакцинальной сероконверсии в

группе без иммунных нарушений (СКЛ+БАС+) в системе мать-плод (г5=-0,78; р=0,000). Это доказывает значимость иммунных взаимодействий в системе мать-плод на трансплацентарное ограничение гуморального иммунного ответа к ЖКВ. Для мальчиков выявлена положительная корреляция обратного титра трансплацентарных АТ с обратным титром собственных АТ в 14 месяцев жизни, но не динамикой. Причем, высокие уровни значимости характерны для двух групп: СКЛ+БАС+ (г=0,45; р=0,028) и СКЛ-БАС- (г,=0,72; р=0,008). Эти данные указывают на принципиально другой механизм влияния иммунных взаимодействий в системе мать-плод на формирование противокоревого поствакцинального гуморального иммунитета. Так как высокий титр АТ был и трансплацентарный и поствакцинальный, то, возможно, это связано с определенными детерминантами Н1А БЯ, которые были у матерей и селективно переданы плоду.

Исследование характера антителообразования на ЖКВ у детей разных иммунорепродуктивных групп и распределения НЬА БЯ показало, что выработка АТ на ЖКВ у мальчиков СКЛ+БАС+ достоверно выше, чем у мальчиков группы СКЛ-БАС-, так же как частота встречаемости НЬА БЯ5+ (45,8% против 8,3%; р<0,05; использован точный метод Фишера). У девочек подобные ассоциации с НЬА БЯ отсутствовали.

Анализируя полученные данные, можно предположить наличие трех возможных механизмов влияния иммунных взаимодействий в системе мать-плод на формирование противокоревого иммунитета. Первый механизм, по-видимому, связан с низкой иммунокомпетентностью плода, которая в постнатальном периоде проявляется в виде низкой сероконверсии на ЖКВ. Вторым механизмом может быть селективная передача материнских противокоревых АТ к плоду, на которую оказывает влияние супрессорный потенциал матери во время беременности. Третий* механизм обусловлен влиянием определенных аллелей Н1А БЯ и на иммунные взаимодействия в системе мать-плод, и на образование трансплацентарных АТ, и на формирование собственного инфекционного гуморального иммунитета у ребенка.

19

ВЫВОДЫ

1. После вакцинации АКДС высокие концентрации ЛТ на дифтерийный анатоксин у мальчиков ассоциированы с ИЬЛ БЯ6 и фенотипом БЯ1БЯ6, а у девочек - с БЯ3 и БЯ4 и фенотипами БЯ3БЯ4; БЯ3БЯ5; БЯ3БЯ7. Низкие концентрации ЛТ у мальчиков ассоциированы с ИЬЛ БЯ2 и БЯ7, и фенотипами БЯ3БЯ7 и БЯ5БЯ7, а у девочек - с БЯ5 и БЯ6, и фенотипом БЯ1БЯ4. Половые различия в ассоциациях ИЬЛ БЯ фенотипов с характером антителообразования на дифтерийный анатоксин свидетельствуют о наличии взаимодействий ИЬЛ генов с другими генетическими локусами в пределах Х-хромосомы.

2. После вакцинации ЖКВ наиболее высокие титры ЛТ у мальчиков ассоциированы с ИЬЛ БЯ5 (фенотип БЯ1БЯ5 и БЯ2БЯ5), а у девочек - с ИЬЛ БЯ2. Низкие титры противокоревых поствакцинальных ЛТ у мальчиков и девочек связаны с одним и тем же АГ - БЯ7 и фенотипом БЯ3БЯ7. Титр противокоревых ЛТ в 9 месяцев влияет на результаты вакцинации детей ЖКВ: чем меньше исходный уровень ЛТ, тем более эффективна вакцинация.

3. Выработка ЛТ на АГ дифтерийного анатоксина и ЖКВ достоверно увеличивается у детей с 9 по 14 месяц жизни вне зависимости от половой принадлежности. Пол ребенка оказывает влияние только на выработку ЛТ после вакцинации против кори: девочки сильнее реагируют на введение ЖКВ, чем мальчики.

4. Ненаследуемые родительские ИЬЛ БЯ оказывают влияние на формирование иммунного ответа к кори и дифтерии у детей раннего возраста. Низкая выработка ЛТ к дифтерийному компоненту АКДС в возрасте 9 и 14 месяцев у детей взаимосвязана с ненаследуемым отцовским ИЬЛ БЯ1. У детей ИЬЛ БЯ5 слабая выработка ЛТ на ЖКВ в возрасте 14 месяцев ассоциирована с ненаследуемым материнским ИЬЛ БЯ2.

5. Иммунные взаимодействия в системе мать-плод оказывают влияние на эффективность вакцинации против кори: наименьшие титры противокоревых поствакцинальных ЛТ у мальчиков ассоциированы с нарушениями иммунного распознавания ЫЬЛ отца (плода) иммунокомпетентными клетками матери и с отсутствием блокирующего эффекта материнской сыворотки крови во время беременности, у девочек - только с нарушениями иммунного распознавания ЫЬЛ отца (плода) иммунокомпетентными клетками матери.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Вакцины нового поколения // Мать и Дитя в Кузбассе.-2001.-№5-6 (6-7). -С.24 - 27 (соавт. А.В. Шабалдин).

2. Генетические механизмы иммунного ответа на антигены вакцин у здоровых детей и детей с микроэлементозами раннего возраста // Сб. трудов обл. науч. конференции «Молодые ученые Кузбассу. Взгляд в XXI век».- Кемерово, 2001.- С.107 - 112 (соавт. О.В. Богданова, А.В. Шабалдин).

3. Иммунный ответ на дифтерийный компонент АКДС-вакцины у детей раннего возраста: влияние генетических и половых факторов // Иммунология. - Деп. ГЩ1Б от 20.12.02., - №Д-27254 (соавт. А.В. Шабалдин, АН. Глушков, Е.М. Семенова).

4. Взаимосвязь генетических и половых факторов с иммунным ответом на живую коревую вакцину у детей раннего возраста // Иммунология. - Деп. ЩНБ. от 20.12.02., - №Д-27245 (соавт. А.В. Шабалдин, А.Н. Глушков, Е.М. Семенова).

5. Роль материнских Ы1Л DR в формировании противокоревого иммунитета у детей раннего возраста // Иммунология. - Деп. ЩНБ. от 2811 03., ЛЬД-27421 (соавт. А.В. Шабаллин, АН. Глушков. Е.М. Семенова).

6. Влияние иммунных взаимодействий в системе мать-плод на формирование противокоревого иммунитета в раннем онтогенезе // Мать и Дитя в Кузбассе. - 2003. - № 3. С. 19 - 23 (соавт. А.В. шабэлдин, А Н. Глушков, Е.М. Семенова, Л.М. Казакова).

7. Иммуногенетические методы в прогнозировании иммунопатологии раннего онтогенеза (методические рекомендации) // Медицина в Кузбассе. - 2004. - №3. - 28 с. (соавт. А.В. Шабалдин, А.Н. Глушков, Л.М. Казакова, ТА Симонова, Н.К. Жилинская, М.Л. Филипенко).

№188 8 8

РНБ Русский фонд

2005-4 15459

Отпечатано редакционно-издательским отделом Кемеровской государственной медицинский «иктемии

650029, Кемерово, Подписано в печать 06.10.2004

тДа^7(ТЙ73Ш6, ''ШВ; Гарн^рат-аймс. Тираж 100 экз.

т v _ ' ««'«З' Усл. печ. листов -1

epd@kemsma.ru J—ieí—

Отпечатано с готового оригинал-макета Лицензия ЛР №21244 от 22.09.97

Актуальность проблемы

Основной мерой в борьбе со многими инфекционными болезнями у детей являются профилактические прививки, радикально воздействующие на эпидемический процесс (Брагинская В.П., Соколова А.Ф., 1990). Первый год жизни ребенка - это период активной иммунизации против различных инфекций, причем, спектр предлагаемых обязательных вакцин расширяется из года в год (Таточенко В.К., Озерецковский H.A., 1998; Медуницын Н.В., 1999; Магазов Р.Ш., 2000; Учайкин В.Ф., Шамшева О.В. 2000; Шарапова О.В., Корсунский A.A., 2003; Учайкин В.Ф., 2003). Даже при соблюдении всех предусмотренных правил проведения массовой иммунизации иногда имеют место отклонения от общепризнанных закономерностей вакцинных реакций. Причины этого, как правило, не устанавливаются и чаще всего списываются на качество вакцин (Максимова Н.М., Маркина С.С., Богатырева Э.Я. и др., 1995; Запорожец Т.С., Луника И.Г, Гребенькова JI.K. и др., 1999; Медуницын Н.В., 2001).

Эпидемиологические исследования в разных регионах Российской Федерации показали, что около 15% детей остаются серонегативными, несмотря на иммунизацию высокоэффективными вакцинными препаратами (Харит С.Н., Лакоткина Е.А., Черняева Т.В., 1995; Сковородин А.Н., Федьдблюм И.В., и др„ 1998; Магазов Р.Ш., Минин Г.Д., и др., 1999; Медуницын Н.В., 2000; Таточенко В.К., 2000). В то же время существует такая нозология, как иммунопарез на определенный АГ (антигенную детерминанту) (Йегер Л., 1990; Стефани Д.В., Вельтищев Ю.Е., 1996). С позиции генов иммунного ответа (HLA) возможны как гипер-, так и гипосенсибилизация на вакцинный АГ (Петров Р.В., Хаитов P.M. 1988), при этом ведущая роль отводится HLAII класса (HLA D, DR) (Абрамов В.Ю.,1993).

На настоящий момент существуют единичные исследования взаимосвязи HLA с характером иммунного ответа на дифтерийный анатоксин, ограниченные, в основном, изучением HLA I класса (Прилуцкий A.C., Сохин A.A., Майлян Э.А. и др., 1994). Данные отдельных исследователей в отношении взаимосвязи генов HLA с силой гуморального иммунного ответа на АГ коревой вакцины далеко не всегда совпадают. Кроме того, до сих пор не ясно, оказывает ли влияние пол ребенка на формирование гуморального иммунного ответа к вакцине.

В отдельных сообщениях указывается, что не только наследуемые HLA, но и ненаследуемые HLA родителей вовлечены в развитие иммунного ответа у детей. Более того, установлено влияние ненаследуемых родительских HLA DR на разнообразные иммунные реакции у их потомства (van der Horst-Bruinsma I.E., Hazes J.M.W., Schreuder G.M.Th., и др., 1998; van Rood J.J., Claas F.H.J., 2000; Mulder A., Kardol M.J., Kamp J., и др., 2001). Уместно предположить, что ненаследуемые родительские HLA оказывают влияние и на эффективность вакцинации против дифтерии и кори.

Существует целый спектр иммунных взаимодействий между организмами матери и плода. Материнские AT, переданные трансплацентарно и циркулирующие в сыворотке крови ребенка, оказывают влияние на формирование поствакцинального гуморального иммунитета (Crowe J.E.Jr., 2001). Определение продолжительности существования материнского гуморального иммунитета имеет важное практическое значение, так как позволяет выявить оптимальные сроки иммунизации с тем, чтобы устранить нейтрализацию введенного АГ материнскими антителами, и добиться выработки активного иммунитета у ребенка.

Несомненный интерес вызывают нарушения иммунных взаимодействий между матерью и плодом. Они проявляются не только в репродуктивных ошибках (Choudhury S.R., Knapp L.A., 2000), но и могут отражаться на постнатальном становлении иммунитета (Борисова A.M., Серова Л.Д., Сибирякова Л.Г., 1992; Kamenov В., Dimitrijevic Н., Tasic G., Pljaskic S., 1999; Shabaldin A.V., Glushkov A.N., 1999). Это позволяет предположить, что нарушения иммунных механизмов в системе мать-плод могут приводить к дисбалансу в трансплацентарной передачи материнских противокоревых AT к плоду, что, в свою очередь, будет опосредованно влиять на формирование противокоревого иммунитета до и после вакцинации. Проведение такого рода исследований может заблаговременно определять тактику вакцинации ребенка.

Несмотря на очевидную актуальность и практическую значимость, вышеперечисленные вопросы в доступной нам литературе освещены недостаточно, что и послужило предпосылкой для проведения настоящего исследования.

Цель работы

Исследовать влияние HLA DR фенотипа и иммунных взаимодействий в системе мать-плод на развитие поствакцинального гуморального иммунитета у детей в раннем постнатальном периоде.

Задачи исследования

1. Изучить ассоциации HLA DR фенотипа ребенка и родителей с эффективностью вакцинации против дифтерии в раннем детском возрасте.

2. Исследовать ассоциации HLA DR фенотипа ребенка и родителей, а также трансплацентарных материнских антител с эффективностью вакцинации против кори в раннем детском возрасте.

3. Оценить возможное влияние ненаследуемых родительских HLA DR на эффективность вакцинации против дифтерии и кори у детей раннего возраста.

4. Исследовать влияние иммунных взаимодействий в системе мать-плод на эффективность вакцинации против кори у детей раннего возраста.

Научная новизна

Впервые обосновано положение о том, что на характер сероконверсии после вакцинации АКДС и ЖКВ оказывают влияние не только собственные НЬА РЯ ребенка, но и ненаследуемые родительские НЬА ЭЯ. Применен такой показатель как "динамика" антителообразования на вакцину в определенные периоды развития ребенка. Обнаружены возможные пути трансформации нарушения иммунных взаимодействий в системе мать-плод на формирование противокоревого гуморального иммунитета у потомства.

Практическая значимость Разработана система поэтапного прогнозирования эффективности вакцинации АКДС и ЖКВ детей в раннем постнатальном периоде, включающая: НЬА ЭЯ-типирование родителей, исследование иммунных взаимодействий матери и плода во время беременности, НЬА БЯ-типирование ребенка. Иммуногенетический контроль за состоянием сероконверсии после иммунизации АКДС и ЖКВ в определенные периоды жизни у детей раннего возраста позволяет не только оценить фактическую защищенность к дифтерии и кори, но и выявить группу повышенного риска заболеваемости, а также разработать индивидуальные схемы вакцинации и обеспечить ее эффективность.По материалам диссертации опубликованы методические рекомендации, предназначенные для врачей лечебно-профилактических учреждений (педиатров, неонатологов, акушер-гинекологов) и специалистов в области генетики, утвержденные Департаментом охраны здоровья населения Администрации Кемеровской области 17. 12. 2003 г. Основные результаты исследования внедрены в практику МУЗ Детской городской клинической больницы №5 г. Кемерово.

Положения, выносимые на защиту:

1. НЬА БЯ ребенка и родителей ассоциированы с характером антителообразования на вакцинные АГ дифтерии и кори у детей раннего возраста.

2. На формирование поствакцинального противокоревого гуморального иммунитета оказывает влияние пол ребенка и противокоревые материнские АТ, переданные трансплацентарно.

3. Характер антителообразования после вакцинации АКДС и ЖКВ у детей раннего возраста ассоциирован с разными ненаследуемыми родительскими НЬА БЯ.

4. Нарушения иммунных взаимодействий в системе мать-плод отражаются на качестве антителообразования к АГ коревой вакцины у детей в раннем возрасте.

119 ВЫВОДЫ

1. После вакцинации АКДС высокие концентрации АТ на дифтерийный анатоксин у мальчиков ассоциированы с НЬА БЯ6 и фенотипом ШШЖб, а у девочек - с ОЯЗ и БЯ4 и фенотипами БЯЗОЯ4; ЭЯЗОЯ5; ОЯЗОЯ7. Низкие концентрации АТ у мальчиков ассоциированы с НЬА ОЯ2 и ЭЯ7, и фенотипами БЯЗОЯ7 и ОЯ5ЭЯ7, а у девочек - с БЯ5 и ОЯ6, и фенотипом ОЯШЯ4. Половые различия в ассоциациях НЬА ОЯ фенотипов с характером антителообразования на дифтерийный анатоксин свидетельствуют о наличии взаимодействий НЬА генов с другими генетическими локусами в пределах Х-хромосомы.

2. После вакцинации ЖКВ наиболее высокие титры АТ у мальчиков ассоциированы с НЬА ОЯ5 (фенотип ОЯШЯ5 и 01*20115), а у девочек - с НЬА ОЯ2. Низкие титры противокоревых поствакцинальных АТ у мальчиков и девочек связаны с одним и тем же АГ - БЯ7 и фенотипом ОЯЗОЯ7. Титр противокоревых АТ в 9 месяцев влияет на результаты вакцинации детей ЖКВ: чем меньше исходный уровень АТ, тем более эффективна вакцинация.

3. Выработка АТ на АГ дифтерийного анатоксина и ЖКВ достоверно увеличивается у детей с 9 по 14 месяц жизни вне зависимости от половой принадлежности. Пол ребенка оказывает влияние только на выработку АТ после вакцинации против кори: девочки сильнее реагируют на введение ЖКВ, чем мальчики.

4. Ненаследуемые родительские НЬА ОЯ оказывают влияние на формирование иммунного ответа к кори и дифтерии у детей раннего возраста. Низкая выработка АТ к дифтерийному компоненту АКДС в возрасте 9 и 14 месяцев у детей взаимосвязана с ненаследуемым отцовским НЬА ОЯ1. У детей НЬА БЯ5 слабая выработка АТ на ЖКВ в возрасте 14 месяцев ассоциирована с ненаследуемым материнским НЬАБЯ2.

5. Иммунные взаимодействия в системе мать-плод оказывают влияние на эффективность вакцинации против кори: наименьшие титры противокоревых поствакцинальных АТ у мальчиков ассоциированы с нарушениями иммунного распознавания НЬА отца (плода) иммунокомпетентными клетками матери и с отсутствием блокирующего эффекта материнской сыворотки крови во время беременности, у девочек - только с нарушениями иммунного распознавания НЬА отца (плода) иммунокомпетентными клетками матери.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

С помощью комплекса иммуногенетических анализов, включающего НЬА БЯ типирование, СКЛ и БАС, при непрерывном динамическом обследовании родителей и их детей можно прогнозировать эффективность вакцинации против дифтерии и кори (таблица 25,26, 27 и 28).

Мы рекомендуем каждой семейной паре еще до зачатия исследовать НЬА БЯ фенотип и СКЛ супругов. Установление НЬА фенотипа в семейной паре может заблаговременно определять тактику вакцинации ребенка. В дальнейшем вопрос о возможной серонегативности к АГ вакцин рекомендуется поднимать в группе детей, рожденных от родителей с выраженными нарушениями иммунных взаимодействий в системе мать-плод (СКЛ-БАС-) (таблица 25).