Автореферат и диссертация по медицине (14.00.03) на тему:Генетические аспекты атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа

.О и ь

Ь - " "

На правах рукописи

БЫСТРОВА Анна Андреевна

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АТЕРОГЕННЫХ ДИСЛИПИДЕМИЙ У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА

14.00.03 - эндокринология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

□□348 1 юе

Санкт-Петербург 2009

003481186

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П.Павяова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук

профессор Красилъникова Елена Ивановна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук

профессор Гаспарян Элина Грантовна

доктор медицинских наук

профессор Баранов Виталий Леонидович

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия имени И.И.Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертации состоится « ¿0 » 2009 года в н часов на

заседании диссертационного совета Д 208.089.01 при Государственном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования «Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Государственного образовательного учреждения дополнительного профессионального образования «Сашст-Петербургская медицинская академия последипломного образования Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (195196, Санкт-Петербург, Заневский пр., д. 1/82).

Автореферат разослан «

года.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор

А.МЛила

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Сахарный диабет является широко распространенным заболеванием, представляющим серьезную медицинскую и социальную проблему (Дедов И.И., Шестакова М.В., 2009; Zimmet Р. et al., 2001). По данным Международной Федерации Диабета в мире насчитывается около 250 миллионов больных диабетом (International Diabetes Federation, 2006). Предполагается, что фактическая распространенность заболевания в 3-4 раза превышает официально зарегистрированную (Новикова Ю.В., Рунихин А.Ю., 2007; Дедов И.И., Шестакова М.В., 2008). При сохранении темпов роста заболеваемости к 2025 году количество больных сахарным диабетом может достигнуть 300 миллионов человек (King Н. et al., 1998), а к 2030 году - более 360 миллионов человек (Wild S. et al., 2004). Необходимо отметить, что 90% больных диабетом составляют пациенты с сахарным диабетом 2 типа (Чазова И.Е., Мычка В.Б., 2004).

Основной причиной ранней инвапидизации и смертности больных сахарным диабетом 2 типа являются сердечно-сосудистые заболевания, связанные с атеросклеротическим поражением коронарных артерий, сосудов головного мозга и нижних конечностей (Turner R. et al., 1998; Gmndy S. et al., 1999; Morrish N. et al., 2001). Среди факторов сердечнососудистого риска, определяющих высокую частоту макрососудистых осложнений у больных сахарным диабетом 2 типа, ведущее значение придается развитию атерогенных изменений липидного спектра крови (Chahil Т., Ginsberg Н., 2006; Reasner С., 200S), основу которых составляют нарушения метаболизма богатых триглицеридами липопротеинов (Taskinen М., 2003; Krauss R., 2004).

Дислипидемия у больных сахарным диабетом 2 типа характеризуется повышением уровня триглицеридов, снижением концентрации холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП) и увеличением содержания мелких плотных частиц липопротеинов низкой плотности

Л

(АсИеЬ М. е1 а1., 2006; Лус1еп Ь. е! а1., 2007). Известно, что липидные составляющие липопротеиновых частиц определяются, главным образом, воздействием факторов внешней среды, в то время как структурные и функциональные особенности аполипопротеинов находятся под контролем генетических факторов (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1999).

Важная роль в регуляции метаболизма богатых триглицеридами липопротеинов и ЛПВП принадлежит генам, входящим в состав генного кластера аполипопротеинов А1/СЗ/А4/А5 (Нашоп Б, е1 а!., 2006). Взаимосвязь полиморфных вариантов генов данного кластера с нарушениями липидного метаболизма является предметом исследований на протяжении последних двух десятилетий (КагаШапаз1з Б., 1985; Аошгега! В. й а1., 1999; Огоепепс1ук М. а1., 2001). Большинство работ посвящено изучению генов аполипопротеинов А1, СЗ и А4. Наименее изучен недавно открытый ген аполипопротеина А5, участвующий в регуляции метаболизма тригли-церид-содержащих частиц (РеппассЫо Ь. е1 а1., 2001). Имеются данные о взаимосвязи 819\¥ и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5 с увеличением риска развития гипертриглицеридемии (РеппассЫо Ь. et а1., 2002; Неппетап Р. е1 а1., 2007). Влияние данного гена на липидный метаболизм у больных сахарным диабетом 2 типа мало изучено. Имеются единичные работы, результаты которых противоречивы (Богйпе1згег В. с! а1., 2007; Огатеге Б. ^ а1., 2008). В то время как оценка взаимосвязи полиморфизмов гена аполипопротеина А5 с развитием атерогенных изменений липидного спектра крови у больных сахарным диабетом 2 типа представляется особенно важной, учитывая, что именно у этой категории пациентов нарушение метаболизма богатых триглицеридами липопротеинов составляет основу развития дислипидемии.

Цель исследования: проанализировать полиморфизмы генов аполипопротеинов А5, А1 и СЗ и показатели липидного спектра крови у больных сахарным диабетом 2 типа для выявления генетических факторов, ассоциированных с развитием атерогенных дислипидемий.

Задачи исследования:

1. Оценить распространенность и структуру атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа.

2. Изучить распределение генотипов и встречаемость аллелей и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5, С-75А и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина А1 и БэИ полиморфизма гена аполипопротеина СЗ у больных сахарным диабетом 2 типа и сопоставить с частотой исследуемых аллелей и генотипов в популяции.

3. Сопоставить клинические и лабораторные показатели у больных сахарным диабетом 2 типа с различными генотипами гена аполипопротеина А5.

4. Сравнить клинические данные и показатели липидного спектра крови у больных сахарным диабетом 2 типа с различными сочетаниями генотипов полиморфных вариантов генов аполипопротеинов А5, А1 и СЗ.

Научная новизна работы

Проведенное исследование показало, что у больных сахарным диабетом 2 типа распределение частот аллелей и генотипов 819\У и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5, 0-75А и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина А1 и Бей полиморфизма гена аполипопротеина СЗ не отличается от распределения исследуемых аллелей и генотипов в популяции.

В результате исследования выявлено наличие взаимосвязи между полиморфными вариантами генов аполипопротеинов А5 и А1 и изменениями показателей липидного спектра крови у больных сахарным диабетом 2 типа.

Установлено, что одни и те же генетические факторы предрасполагают к развитию различных вариантов атерогенных дислипидемий у мужчин и женщин с сахарным диабетом 2 типа.

Выявлено, что носительство генотипов, содержащих редкие аллели 819\У полиморфизма гена аполипопротеина А5 и 0-75А полиморфизма гена аполипопротеина А1 в гомозиготном или в гетерозиготном

состоянии, у мужчин с сахарным диабетом 2 типа ассоциируется с наличием гипертриглицеридемии, а у женщин с сахарным диабетом 2 типа - с гипертриглицеридемией и низкими значениями холестерина липопротеи-нов высокой плотности.

Практическая значимость работы

В результате проведенного исследования более чем у половины больных сахарным диабетом 2 типа выявлено наличие атерогенных вариантов дислипидемий, связанных с высоким риском развития сердечнососудистых заболеваний.

Установлено, что определение 819\У полиморфизма гена аполи-попротеина А5 и 0-75А полиморфизма гена аполипопротеина А1 у больных сахарным диабетом 2 типа позволяет выявить неблагоприятные сочетания генотипов (8\У,\>/У//0А,АА), которые ассоциируются с развитием у этих пациентов атерогенных дислипидемий. Показано, что при наличии одинаковых сочетаний генотипов полиморфных вариантов генов аполи-попротеинов А5 и А1 у мужчин с сахарным диабетом 2 типа развивается гипертриглицеридемия, а у женщин - гипертриглицеридемия в сочетании с низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности.

Полученные данные молекулярно-генетического обследования больных сахарным диабетом 2 типа могут быть использованы для выявления пациентов, относящихся к группе риска развития атерогенных дислипидемий, с целью проведения у них своевременных профилактических и лечебных мероприятий.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. У больных сахарным диабетом 2 типа гипертриглицеридемия и сочетание гипертриглицеридемии с низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности занимают ведущее место в структуре атерогенных дислипидемий, наличие которых связано с увеличением частоты сердечно-сосудистых заболеваний.

2. Распределение генотипов и встречаемость аллелей 819\У и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5, 0-75А и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина А1, БбИ полиморфизма гена

аполипопротеина СЗ у больных сахарным диабетом 2 типа и в популяции не различаются. 3. Носительство генотипов, содержащих редкие аллели 819¥/ полиморфизма гена аполипопротеина А5 и С-75А полиморфизма гена аполи-попротеина А1, ассоциируется с гипертриглицеридемией у мужчин с сахарным диабетом 2 типа и с гипертриглицеридемией и низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности у женщин с сахарным диабетом 2 типа.

Личный вклад автора: автором осуществлялся набор пациентов в исследование, проводилось клиническое обследование больных, моле-кулярно-генетическое исследование, выполнялась статистическая обработка и анализ полученных данных.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на совместном заседании проблемной комиссии «Заболевания сердечно-сосудистой системы, крови и эндокринных органов» и кафедры факультетской терапии СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова (02.2009; 09.2009), на заседании проблемной комиссии «Внутренние болезни и другие терапевтические специальности» СПбМАПО (2009), на Европейском конгрессе по генетике человека (Барселона, 2008), на XX Международном конгрессе по генетике (Берлин, 2008), на 45-м ежегодном конгрессе Европейской Ассоциации по изучению диабета (Вена, 2009).

Реализация результатов исследования. Результаты исследования внедрены в лечебный и учебный процессы кафедры факультетской терапии СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова и Федерального государственного учреждения «Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В.А.Алмазова Федерального агентства высокотехнологической медицинской помощи».

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах печатного текста, состоит из введения, пяти глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа содержит 36 таблиц, 19 рисунков. Библиографический указатель включает 288 источников, из которых 16 отечественных и 272 зарубежных авторов.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Всего обследовано 275 больных сахарным диабетом 2 типа (78 мужчин и 197 женщин) в возрасте от 40 до 69 лет. Набор пациентов в исследование проводился с 2005 по 2007 гг. на базе кафедры факультетской терапии СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова. В исследование не включали больных, имеющих наследственные формы дислипидемий, острые соматические и инфекционные заболевания, сердечную недостаточность III-IV функционального класса, артериальную гипертензию 3 степени, тяжелые хронические осложнения сахарного диабета.

Средний возраст больных на момент обследования составил 57,0±0,44 лет, средний возраст на момент выявления сахарного диабета составил 49,4±0,56 лет. Отягощенный семейный анамнез по сахарному диабету выявлен у 121 пациента (44,0%), по сердечно-сосудистым заболеваниям - у 166 больных (60,4%). Среди обследованных больных 243 пациента (88,4%) страдали гипертонической болезнью, 128 больных (46,5%) имели ишемическую болезнь сердца, 30 пациентов (10,9%) имели указания в анамнезе на перенесенный инфаркт миокарда. У 251 пациента (91,3%) выявлен абдоминальный тип ожирения.

Параметры углеводного обмена оценивались у 80 больных сахарным диабетом 2 типа (23 мужчин и 57 женщин), не получавших ранее и на момент обследования лекарственных препаратов для лечения диабета. Уровень глюкозы определялся в венозной крови глюкозооксидазным методом реактивами фирмы Beckman (США) на приборе Synchron CX9ALX (Beckman, США). Уровень гликированного гемоглобина определялся им-мунохимическим методом реактивами Beckman Coulter (США) на приборе Synchron CX9ALX (Beckman, США). Исследование инсулина и С-пептида в сыворотке крови проводилось методом радиоиммунного анализа реактивами фирмы «Immunotech» (Чешская республика) и «Labodia»

(Швейцария) на у-счетчике «Гамма12» (Россия). Индекс инсулинорези-стентности рассчитывался по формуле: HOMA-IR = инсулин крови натощак (мкМЕ/мл) х глюкоза крови натощак (ммоль/л)/22,5 (Matthews D. et al., 1985).

Показатели липидного спектра крови оценивались у 225 больных сахарным диабетом 2 типа (64 мужчин и 161 женщины), не получавших ранее и на момент обследования гиполипидемическую терапию. Концентрации общего холестерина (ХС) и триглицеридов (ТГ) определялись в сыворотке крови ферментным методом реактивами "Vital" (Россия) на анализаторе Synchron CX4PRO (Beckman, США). Концентрация холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП) определялась в сыворотке крови ферментным методом реактивами фирмы "Cormay" (Германия) на приборе "Livia" (Cormay, Германия). Использовались контрольные материалы фирмы Bio-Rad (США). Расчет концентрации холестерина липопротеинов очень низкой плотности (ХС ЛПОНП) проводился по формуле: ХС ЛПОНП = ТГ/2,18 (Климов А.Н., Ганелина И.Е., 1975). Расчет концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП) проводился по формуле: ХС ЛПНП = ХС - (ХС ЛПВП + ХС ЛПОНП) (Friedewald W. et al., 1972). Коэффициент атерогенности (КА) рассчитывался по формуле: КА= ХС - ХС ЛПВП/ХС ЛПВП (Климов А.Н., Ганелина И.Е., 1975). Для определения структуры дислипидемий использовались значения 90% отрезных точек распределения уровней общего ХС и ТГ и значения 10% отрезных точек распределения концентрации ХС ЛПВП в соответствии с полом и возрастом больных (Климов А.Н., 1989).

Молекулярно-генетическое исследование проводилось в «Лаборатории молекулярной диагностики с расширенной группой молекулярной кардиологии» Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» под руководством доктора медицинских наук В. И. Ларионовой. Определение S19W и Т-1131С полимор-

физмов гена аполипопротеина А5 (Talmud P. et al., 2002), G-75A и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина Al (Heng С. et al., 2001) и SstI полиморфизма гена аполипопротеина СЗ (Rodrigo Е. et al., 2002) проводилось с использованием метода полимеразной цепной реакции с последующим рестрикционным анализом и оценкой полученных результатов в ультрафиолетовом свете. Для проведения сравнительного анализа распределения частот аллелей и генотипов исследуемых генов у больных сахарным диабетом 2 типа и в популяции использовались данные о распространенности аллелей и генотипов S19W и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5, G-75A и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина Al и SstI полиморфизма гена аполипопротеина СЗ у лиц белой расы, представленные в литературных источниках (Wang X.i et al., 1996; Kam-boh M. et al., 1996; Russo G. et al., 2001 ; Talmud P. et al., 2002).

Статистический анализ полученных данных проводился при помощи программы SPSS 12.0 (русская версия) для Windows. Для оценки достоверности различий исследуемых параметров между группами применялся непараметрический критерий Манна-Уитни. Для оценки различий распределения частоты признака использовался метод у\, точный тест Фишера, относительный риск (OR). Статистически достоверным считали различия при значениях р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Распространенность и структура атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа. Анализ распространенности и структуры атерогенных дислипидемий проведен у 225 больных сахарным диабетом 2 типа (64 мужчин и 161 женщины), не получавших ранее и на момент обследования гиполипидемическую терапию. В результате проведенного исследования у 115 больных сахарным диабетом 2 типа (51,1%) выявлено наличие дислипидемии, 110 пациентов (48,9%) имели нормоли-пидемию. Достоверных различий по распространенности дислипидемии между группами мужчин и женщин, между пациентами разных возрас-

тных групп, а также между пациентами с различными значениями глики-рованного гемоглобина выявлено не было.

При анализе структуры атерогенных дислипидемий у половины больных (50,4%) выявлена гипертриглицерндемия (ГТГ), у четверти пациентов - ГТГ в сочетании с низкими значениями холестерина липопротеи-нов высокой плотности (ХС ЛПВП). Значительно реже встречались другие варианты атерогенных дислипидемий (табл. 1). Гиперхолестеринемия и ГТГ в сочетании с гиперхолестеринемией и низкими значениями ХС ЛПВП были выявлены только в группе женщин.

Таблица 1

Структура атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа

Дислипидемии Всего (п=115) Мужчины (п=39) Женщины (п=76)

Гипертриглицерндемия 58(50,4% 19(48,7%) 39(51,3%)

ГТГ и низкие значения ХС ЛПВП 30(26,1%) 12(30,8%) 18(23,7%)

ГТГ и гиперхолестеринемия 11(9,6%) 6(15,4%) 5(6,6 %)

Низкие значения ХС ЛПВП 10(8,7%) 2(5,1%) 8(10,5%)

Гиперхолестеринемия 4(3,5%) - 4(5,3%)

ГТГ, ГХС и низкие значения ХС ЛПВП 2(1,7%) - 2(2,6%)

Примечания: ГТГ - гипертриглицерндемия, ГХС - гиперхолестеринемия, ХС ЛПВП - холестерин липопротеинов высокой плотности.

При анализе распространенности дислипидемий в различных возрастных группах больных сахарным диабетом 2 типа было установлено, что у пациентов в возрасте от 40 до 49 лет частота ГТГ была выше, чем в старших возрастных группах, тогда как изолированное снижение ХС ЛПВП в этой возрастной группе не встречалось. Гипертриглицерндемия в сочетании с ГХС и низкими значениями ХС ЛПВП была выявлена только

в группе больных от 50 до 59 лет. Достоверных различий по распространенности дислипидемий между пациентами разных возрастных групп выявлено не было.

Было проведено исследование клинических и лабораторных показателей у больных сахарным диабетом 2 типа с наиболее часто встречающимися вариантами атерогенных дислипидемий (гипертриглицеридемией и ГТГ в сочетании с низкими значениями ХС ЛПВП), пациенты с нормо-липидемией составили группу сравнения. При оценке клинических данных было установлено, что у пациентов с дислипидемией сахарный диабет был выявлен в более раннем возрасте по сравнению с больными, имеющими нормолипидемию (табл.2).

Таблица 2

Клиническая характеристика больных сахарным диабетом 2 типа

с нормолипидемией и с дислипидемией

Показатели Нормолипидемия (п=110) Дислипидемия (п=88)

Возраст на момент обследования, лет 57,4±0,64 55,8±0,87

Возраст при выявлении СД, лет 51,3±0,79 46,9±1,05*

Семейный анамнез СД 53(48,2%) 41(46,6%)

Семейный анамнез ССЗ 70(63,6%) 48(54,5%)

Гипертоническая болезнь 90(81,8%) 84(95,5%)*

Ишемическая болезнь сердца 43(39,1%) 42(47,7%)

Инфаркт миокарда в анамнезе 3(2,7%) 13(14,8%)*

Ожирение/избыточная масса тела 96(87,3%) 82(93,2%)

Примечания: СД - сахарный диабет, ССЗ - сердечно-сосудистые заболевания, * - р<0,01 при сравнении между группами.

Частота гипертонической болезни была достоверно выше у пациентов с дислипидемией, чем в группе больных, имеющих нормолипиде-

мию. Указания в анамнезе на перенесенный инфаркт миокарда также достоверно чаще встречались в группе больных, имеющих дислипидемию, чем в группе пациентов с нормолипидемией. По другим анализируемым параметрам значимых различий между группами выявлено не было. Показатели углеводного метаболизма и характер сопутствующей терапии у больных с дислипидемией и с нормолипидемией значимо не различались.

Полиморфизмы генов аполипопротеинов А5, А1 и СЗ у больных сахарным диабетом 2 типа. Молекулярно-генетическое исследование выполнено у 275 больных сахарным диабетом 2 типа (78 мужчин и 197 женщин). Проведен анализ полиморфных вариантов генов, входящих в состав генного кластера аполипопротеинов А1/СЗ/А4/А5. У всех больных исследованы 819\У и Т-1131С полиморфизмы гена аполипопротеина Л5, (3-75Л и С83Т полиморфизмы гена аполипопротеина А1 и Бз!! полиморфизм гена аполипопротеина СЗ.

Полиморфизмы гена аполипопротеина А5. При анализе распределения частот аллелей и генотипов 819\У и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5 (апоА5) было установлено, что распространенность доминантных и редких аллелей исследуемых полиморфизмов у больных сахарным диабетом 2 типа и в популяции значимо не различалась (рис.1). Различий в распределении генотипов также не было выявлено.

Частота

О Больные сахарным диабетом 2 типа ЕВ Популяция

Рис.1. Встречаемость аллелей 519\У и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5 у больных сахарным диабетом 2 типа и в популяции

Анализ распределения генотипов и встречаемости аллелей S19W и Т-1131С полиморфизмов гена апоА5 с учетом пола пациентов показал, что носители генотипов WW и СС встречались только в группе мужчин. Значимых различий по распределению аллелей и генотипов между группами мужчин и женщин выявлено не было.

Было проведено исследование клинико-лабораторных показателей у больных сахарным диабетом 2 типа с различными генотипами S19W и Т-1131С полиморфизмов гена аполипопротеина А5. Сравнительный анализ клинических данных и показателей углеводного метаболизма не выявил значимых различий между группами. При оценке показателей липидного спектра крови было установлено, что в группе женщин носители 19W алле-ля гена апоА5 имели достоверно более высокие значения ТГ (3,1±0,53 ммоль/л и 2,2±0,12 ммоль/л, р<0,05), ХС ЛПОНП (1,4±0,24 ммоль/л и 1,0±0,06 ммоль/л, р<0,05) и КА (4,3±0,36 и 3,6±0,13, р<0,05) по сравненшо с пациентами, имеющими нормальный генотип (SS). Кроме того, выявлена тенденция к более низким значениям ХС ЛПВП у женщин с генотипом SW (р=0,056). В группе мужчин такта закономерностей выявлено не было.

Таким образом, проведенное исследование показало, что носительст-во 19W агшеля гена аполипопротеина А5 ассоциируется с атерогенными изменениями липидного спектра крови у женщин с сахарным диабетом 2 типа.

Был проведен сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов S19W и Т-1131С полиморфизмов гена апоА5 у больных сахарным диабетом 2 типа с наиболее часто встречающимися вариантами атеро-генных дислипидемий (гипертриглицеридемией и ГТГ в сочетании с низкими значениями ХС ЛПВП) и у пациентов с нормолипидемией. В результате исследования было установлено, что носители генотипов, содержащих 19W аллель гена апоА5, достоверно чаще встречались в группе пациентов с гипертриглицеридемией, чем в группе больных, имеющих нормолипидемию (20,7% и 5,5%, соответственно, р<0,01).

Сравнительный анализ с учетом пола пациентов показал, что частота генотипов, содержащих 19W аллель гена апоА5, была достоверно выше в

группе мужчин с гипертриглицеридемией, чем в группе мужчин, имеющих нормолипидемию (31,6% и 4,0%, соответственно, р<0,05). В группе женщин данных закономерностей выявлено не было.

При оценке распределения частот аллелей и генотипов Б19\У полиморфизма гена апоА5 у больных сахарным диабетом 2 типа, имеющих ГТГ и низкие значения ХС ЛПВП, и у пациентов с нормолипидемией было установлено, что носители генотипов, содержащих аллель, достоверно чаще встречались в группе пациентов с дислипидемией, чем в группе больных, имеющих нормолипидемию (23,3% и 5,5%, соответственно, р<0,01).

Сравнительный анализ распределения генотипов с учетом пола пациентов показал, что частота генотипов, содержащих 19\¥ аллель гена апоА5, была достоверно выше в группе женщин с ГТГ и низкими значениями ХС ЛПВП, чем в группе женщин, имеющих нормолипидемию (33,3% и 5,9%, соответственно, р<0,01). В группе мужчин данных закономерностей выявлено не было.

При анализе Т-1131С полиморфизма гена апоА5 взаимосвязи с показателями липидного спектра крови и различий в распределении генотипов между пациентами с дислипидемией и с нормолипидемией выявлено не было.

Таким образом, в результате проведенного исследования установлено, что носительство 19\¥ аллеля гена аполипопротеина А5 ассоциируется с наличием гипертриглицеридемии у мужчин с сахарным диабетом 2 типа и с наличием ГТГ и низкими значениями ХС ЛПВП у женщин с сахарным диабетом 2 типа.

Анализ ген-генных взаимодействий полиморфных вариантов генов аполипопротеинов А5, А1 и СЗ у больных сахарным диабетом 2 типа. Помимо оценки влияния отдельных полиморфизмов в последние годы все большее внимание уделяется роли межгенных взаимодействий в определении индивидуальных особенностей липидного спектра крови и в формировании предрасположенности к развитию атерогенных дислипи-демий. Для проведения анализа межгенных взаимодействий у больных

сахарным диабетом 2 типа были исследованы С-75А и С83Т полиморфизмы гена аполипопротеина А1 (апоА1) и БбЙ полиморфизм гена аполипопротеина СЗ (апоСЗ). Распространенность доминантных и редких аллелей исследуемых полиморфизмов генов апоА1 и апоСЗ у больных сахарным диабетом 2 типа и в популяции значимо не различалась (рис. 2). Достоверных различий в распределении генотипов также выявлено не было.

Частота

□ Больные сахарным диабетом 2 типа И Популяция]

Рис. 2. Встречаемость аллелей в-75А и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина А1 и БэИ полиморфизма гена аполипопротеина СЗ у больных сахарным диабетом 2 типа и в популяции

Был проведен сравнительный анализ клинико-лабораторных показателей у больных сахарным диабетом 2 типа с различными сочетаниями генотипов полиморфных вариантов генов аполипопротеинов А5, А1 и СЗ. При сопоставлении клинических данных значимых различий между группами выявлено не было. Сравнительный анализ параметров липидного спектра крови показал, что в группе женщин пациенты с сочетанием генотипов Б\\70А генов апоА5 и апоА1 имели достоверно более высокие значения ТГ (3,2±0,59 ммоль/л и 2,0±0,12 ммоль/л, р<0,05), ХС ЛПОНП (1,5±0,27 ммоль/л и 0,9±0,05 ммоль/л, р<0,05) иКА (4,4±0,40 и 3,5±0,13, р<0,05) по сравнению с пациентами, имеющими сочетание генотипов

SS/GG. При сопоставлении показателей липидного спектра крови больных сахарным диабетом 2 типа с другими комбинациями генотипов S19Wh Т-1131С полиморфизмов гена апоА5, G-75A и С83Т полиморфизмов гена anoAl и SstI полиморфизма гена апоСЗ значимых различий между группами выявлено не было.

Проведен анализ распределения комбинаций генотипов S19W и Т-1131С полиморфизмов гена апоА5, G-75A и С83Т полиморфизмов гена anoAl и SstI полиморфизма гена апоСЗ у больных сахарным диабетом 2 типа с наиболее распространенными вариантами атерогенных дислипидемий (гипертриглицеридемией и ГТГ в сочетании с низкими значениями ХС ЛПВП) и у пациентов с нормолипидемией. В результате исследования было установлено, что сочетания генотипов, содержащих редкие аллели S19W полиморфизма гена апоА5 и G-75A полиморфизма гена anoAl в гомозиготном и в гетерозиготном состоянии (SW/GA, SW/AA, WW/AA), достоверно чаще встречались в группе больных с гипертриглицеридемией, чем в группе пациентов, имеющих нормолипидемшо (19,0% и 5,5%, соответственно, OR=2,079; 95% ДИ 1,361-3,176, р<0,05). Частота выявления комбинаций генотипов, содержащих 19W и -75А аллели генов аполипо-протеинов А5 и А1, у больных сахарным диабетом 2 типа, имеющих ГТГ и низкие значения ХС ЛПВП, была также достоверно выше по сравнению с пациентами, имеющими нормолипидемию (23,3% и 5,5%, соответственно, OR=2,973; 95% ДИ 1,592-5,552, р<0,01).

Отдельно проанализировано распределение сочетаний генотипов S19W полиморфизма гена апоА5 и G-75A полиморфизма гена anoAl у больных сахарным диабетом 2 типа с дислипидемией и с нормолипидемией в группах мужчин и женщин. В результате исследования было установлено, что комбинации генотипов, содержащих редкие аллели исследуемых генов в гомозиготном и в гетерозиготном состоянии, достоверно чаще встречались в группе мужчин с гипертриглицеридемией, чем в группе мужчин, имеющих нормолипидемию (31,6% и 4,0%, соответственно, QR=2,440; 95% ДИ 1,433-4,153, р<0,05). В группе женщин частота выяв-

ления сочетаний генотипов, содержащих 19\У и -75А аллели генов аполи-попротеинов А5 и А1, была достоверно выше у пациентов с ГТГ и низкими значениями ХС ЛПВП по сравнению с пациентами, имеющими нормолипидемию (33,3% и 5,9%, соответственно, (Ж=4,182; 95% ДИ 1,9668,894, р<0,01).

Проведенное исследование показало, что носительство генотипов, содержащих редкие аллели 819\У полиморфизма гена апоА5 и 0-75А полиморфизма гена апоА1 в гомозиготном и в гетерозиготном состоянии, ассоциируется с наличием гипертриглицеридемии у мужчин и с наличием ГТГ и низкими значениями ХС ЛПВП у женщин с сахарным диабетом 2 типа.

Сравнительный анализ распределения других комбинаций генотипов и Т-1131С полиморфизмов гена апоА5, й-75А и С83Т полиморфизмов гена апоА1 и 8511 полиморфизма гена апоСЗ у больных сахарным диабетом 2 типа с дислипидемией и с нормолипидемией не выявил значимых различий между группами.

Таким образом, в результате проведенного исследования выявлены генетические факторы, ассоциированные с развитием атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа. Установлено, что носительство сочетаний генотипов, содержащих редкие аллели 819\У полиморфизма гена аполипопротеина А5 и в-75А полиморфизма гена апо-липопротеина А1, ассоциируется с гипертриглицеридемией у мужчин и с гипертриглицеридемией и низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности у женщин с сахарным диабетом 2 типа.

ВЫВОДЫ

1. Гипертриглицеридемия и сочетание гипертриглицеридемии с низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности являются наиболее часто встречающимися вариантами атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа.

2. У пациентов с сахарным диабетом 2 типа распределение частот аллелей и генотипов 819\¥иТ-1131С полиморфизмов гена аполипопро-

теина А5, 0-75 А и С83Т полиморфизмов гена аполипопротеина А1 и Бэй полиморфизма гена аполипопротеина СЗ не отличается от распределения частот исследуемых аллелей и генотипов в популяции.

3. У больных сахарным диабетом 2 типа носительство 19\У аллеля гена аполипопротеина А5 ассоциируется с наличием гипертриглицериде-мии у мужчин и гипертриглицеридемии в сочетании с низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности у женщин.

4. У женщин с сахарным диабетом 2 типа носительство сочетаний генотипов, содержащих редкие аллели 819\У полиморфизма гена аполипопротеина А5 и 0-75А полиморфизма гена аполипопротеина А1, ассоциируется с наличием гипертриглицеридемии и низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности. Носительство указанных сочетаний генотипов у мужчин с сахарным диабетом 2 типа ассоциируется с наличием гипертриглицеридемии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Учитывая широкую распространенность атерогенных дислипидемий у больных сахарным диабетом 2 типа необходимо уделять особое внимание выявлению факторов, предрасполагающих к их развитию.

2. В схему клинико-лабораторного обследования больных сахарным диабетом 2 типа рекомендуется включение молекулярно-генетических методов, позволяющих определить 819\У полиморфизм гена аполипопротеина А5 и 0-75А полиморфизм гена аполипопротеина А1.

3. При выявлении носительства редких аллелей 519\У полиморфизма гена аполипопротеина А5 и 0-75А полиморфизма гена аполипопротеина А1 у больных сахарным диабетом 2 типа показано проведение профилактических и лечебных мероприятий с целью предупреждения развития дислипидемий.

4. Необходимо учитывать, что носительство 19\У и -750 аллелей генов аполипопротеинов А5 и А1 у мужчин с сахарным диабетом 2 типа предрасполагает к развитию гипертриглицеридемии, а у женщин-

к гипертриглицеридемии в сочетании с низкими значениями холестерина липопротеинов высокой плотности, что требует дифференцированного подхода при выборе лечебной тактики.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Быстрова А.А. Диабетическая нейропатия / Е.И. Красильникова, Е.В. Шляхто, Т.Л. Каронова, А.А. Быстрова, O.K. Хмельницкий, Е.А.Шапкова, И.И. Захарьян, И.А. Рюмина // Ученые записки Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова. - 2005. - Т.ХИ, №4. - С.60-68.

2. Быстрова А.А. Атерогенные дислипидемии и распределение генотипов и частот аллелей генов аполипопротеинов А5 и СЗ у больных сахарным диабетом 2 типа / А.А. Быстрова, А.Н. Войтович, М.А. Богданова // Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины: сборник тезисов к научно-практической конференции молодых ученых. - Санкт-Петербург, 2007. - С.89-90.

3. Быстрова А.А. Современные принципы коррекции метаболического синдрома / Е.И. Красильникова, А.А. Быстрова, В.Л. Степанова, И.А. Рюмина, И.И. Захарьян, Т.Л. Каронова // Эфферентная терапия. -2007. -Т.13, №1. - С.30-32.

4. Bystrova А.А. Polymorphic genetic markers and atherogenic dyslipidemia in patients with metabolic syndrome / A.N. Voitovich, A.A. Bystrova, A.P. Hmyrova, B.I. Smirnov, P.A. Sinitsyn, M.Y. Shcherbakova, E.I. Kra-silnikova, V.I. Larionova // XX International Congress of Genetics. Abstract Book. - 2008. - P. 165.

5. Bystrova А.А. APOA5 gene S19W polymorphism and atherogenic dyslipidemia in patients with type 2 diabetes / A.N. Voitovich, A.A. Bystrova, V.L. Stepanova, B.I. Smirnov, O.A. Berkovich, E.V. Shli-akhto, V.I. Larionova // European Journal of Human Genetics. - 2008. -Vol. 16 (Suppl.2). - P. 293.

6. Быстрова A.A. Применение производных бигуанидов на ранних этапах развития синдрома инсулинорезистентности / A.A. Быстрова, В.В. Агеева, И.Л. Рюмина, Е.И. Красильникова, Е.В. Шляхто // Ученые записки Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова. - 2008. - T.XV, №2. - С.35-36.

7. Быстрова A.A. Полиморфизм гена аполипопротеина А5 и показатели липидного спектра крови у больных сахарным диабетом тип 2 / A.A. Быстрова, А.Н. Войтович, Е.И. Красильникова, В.И. Ларионова // Балтийский журнал современной эндокринологии. - 2008. - №1 (приложение). - С.11.

8. Быстрова A.A. Гипертриглицеридемия и S19W полиморфизм гена аполипопротеина А5 у больных сахарным диабетом тип 2 / A.A. Быстрова, А.Н. Войтович, Е.И. Красильникова, В.И. Ларионова // Артериальная гипертензия. - 2008. - Т.14, №1 (Приложение №1). - С.121.

9. Bystrova A.A. Apolipoprotein А1/СЗ/А5 gene Cluster variants and sérum lipids levels in patients with type 2 diabetes mellitus / A.A. Bystrova, A.N. Voitovich, E.I. Krasilnikova, E.V. Shlyakhto, V.l. Larionova // European Journal of Human Genetics. - 2009. - Vol. 17 (Suppl.2). - P. 382.

10. Bystrova A.A. Genetic déterminants of atherogenic dyslipidaemia in patients with type 2 diabetes mellitus / A.A. Bystrova, A.N. Voitovich, E.I. Krasilnikova, V.l. Larionova // Diabetologia. - 2009. - Vol. 52 (Suppl.l). - P. S491.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В ТЕКСТЕ

апо -аполипопротеин

ДИ - доверительный интервал

ГТГ - гипертриглицеридемия

ГХС - гиперхолестеринемия

КА - коэффициент атерогенности

ЛПВП - липопротеины высокой плотности

ТГ - триглицериды

ХС - холестерин

ХС ЛПВП - холестерин липопротеинов высокой плотности

ХС лпнп - холестерин липопротеинов низкой плотности

ХС лпонп - холестерин липопротеинов очень низкой плотности

Лицензия ИД № 00597 от 15.12.99 г. Подписано в печать 17.10.09. Усл. печ. л. 1,5 Формат 60x84 1/8. Печать офсетная. Тираж 100 экз. Заказ № 987/09 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого 6-8 Издательство СП6ГМУ