Автореферат и диссертация по медицине (14.00.39) на тему:Функциональное состояние нейрофилов у больных системной красной волчанкой и системными васкулитами

»»Г1:** . f.

П 5 9 2

Министерство здравоохранения Роооийоко^ Федерации Ярославский медицинский институт

IIa нравех рукописи КРЫЛОВ Владимир Леонидович

УДК 616.155.34:615-016.2

ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ СОСТОЯНИЕ НБЙТРОШОВ У БОЛЬНЫХ

СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ И СИСТЕМНЫМИ ВАСКУЛИТАМИ

«

14.00.39 - ревматология

14.00.36 - аллергология, иммунология

Автореферат ■ дносертадии на ошоканио ученой отеьега кандидата медициною« наук

Ярославль

1Э92

Работа выполнена в Ярославском медицинском институте

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор В.Л.Романов

Научный консультант: доктор ыедицилокгос наук, профессор Н.П.Шилкина

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор В.Я.Бобылов доктор медицинских наук» профессор А.Н.!^аянский

Видуцее учреждение: Второй Московский ордена Ленина государственный медицинокий институт им. Н.И.Пирогова.

Защита оостоитоя * 26 * мая_1992 г.

в____ часов на заоедании опзцкали ?<фованного Совета

Д.034.о2.01 при Ярославоком медицинском институте (150000, г.Ярославль, ул.Революционная, 5).

С диосертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан *23 " АЩкглЯ 1992 г.

ученый секретарь одециага гированного совета кандидат медицинских неук, дсцент А.А. Зотов

: J - 3 -

j АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

-г.со.¿«^стоящее время изучение патогенеза заболеваний отяосит-" ™*(ЯТс™щ)коритетным направлениям в ревматологии (В.Л.Наоонова, U. Г. Астапенко, 1989).

Вопросы гетерогенности ревматических заболеваний с наделением оубтипов по гллшко-иммушшм характеристикам обсуждались на 1У Всесоюзном съезде ревматологов (1991 год). По совремегошм представлениям, эти болезни относят к аутоиммунным процессам, которые квалифицируются как органонеспецифичеокпе, то есть о иммунным ответом на многие аутоантигены разных органов и тканей, соцроводпдпздеся иммунным дефицитом и иммуно-комплексным поражением сосудистого русла (В.В.Серов, Б.Л.Насонов, 1985; О.В.Зай-ратьянц, 1991; O.Hughea . , Ii.A.Khamaahta , 1990).,,

Циркулирующие ишуннне комплексы (ЦИК) после фиксации в тканях или стенках кровеносных сосудов обусловливает развитие органных и сосудистых поражений (Н.Е.Ярыгян и соавт., I960; Ю.К.Сыкулев и ооавт., Т988). К одной из систем, обеспечивавшие аффективное удаление иммунных комплексов из организма, относится система полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПЯЛ) - нейтрофильных гранулоцитов (Д.С. Archibald ot q1 ., 1983; А.Н.Маяпский, Д.Н.Маянский, 1989). В то же время, роль нейтрофилов не ограничивается только способностью совместно о макрофагами разрушать ищунные комплексы (КО и осуществлять микробицидные функции. Так отмечена их способность принимать непосредственное участио в повреждении тканей и кровеносных сосудов кислородными радикалами и протеолитическими ферментами ( Y.Hachimoto etal ., 1982; В.Wallert et al 1968).

Однако сведения о состоянии функциональной активности не2-трофилышх гранулоцитов и, в частности, их системы кислсродза-виоимого метаболизма при системной красной волчанке (СКВ) и енотеиных васкулитах (СЗ), немногочисленны и противоречивы.

Сообщается» что уровень продукции кислородных радикалов у больных СКВ и СВ либо ниже, чем в норме (И.А.Могирева и соавт., 1985)« либо повышен по сравнению с соответствующими показателями здоровых ЛИЦ ( M.S.hhee et al . , 1983).'

Между тем, исследования по перекисному окислению липидов клеточных мембран, изучение синтеза таких медиаторов воспале-

кия как простагландины и лейкотриены позволила сформировать представление о регуляции воспалительной реакции активными формами кислорода, генерируемыми ПЯЛ (А.Н.Иаянокий, Д.Н.Маянский, 1989).

Таким образом, функция счстеш киолородзависимого метаболита нейтрофильпых гранулоцитов в связанная с ней совокупность физиологических и патологических явления предотавляет собой малоизученный аспект патогенеза СКВ о СВ. Необходимость исследований я этом нацпавленни обусловлена как клиническими (поиск вовше тнформатавных средств диагностики и прогнозирования), так я теоретическими (анализ механизмов тканевого и сосудистого повредивши клетками-эффекторами) интересами.

Цель работы. Оценка функции системы киолородзависимого метаболизма нейтрофилэв и ее значение в патогенезе СКВ и некоторых форм СВ (облдтерирупциЗ тромбангиит, узелковый периартершт, неспецифический аортоартериит) г определение характера клшшчес- . кой информации, получаемой при исоледозакии кислородзавиоимых реакций и поглотительной способности нейтрофлльных гранулоцитов цри вышеназванных заболеваниях.

Еадачи исследования:

1. Изучить механизмы активации системы киолородзависимого метаболизма нейтрофилышх гранулоцитов у больных СКВ, облитори-руицьм тромбангиитом (ОТ), узелковым сарвартериитом (УП), не- " специфическим аортоартериитом (НАД) через различные рецепторные звенья ПЯЛ (о - и лектинопосредованнсе взаимодействие). .

2. Определить значение кислородзавиоимых реакций ПЯЛ в развитии сосудиотнх и органных поражений при СКВ и СВ.

3. Выявить взаимосвязь между характером изменения функции ' системы кислород зависимого метаболизма нейтрофилов со отепенью активности и тяжестью течения патологического процесса цри указанных ревматических заболеваниях.

4. Оценить диагностические возможности метода люминол-зависимой хемшшминесценщга в комплексном клшшко-иммукологичео-кэм обследовании больных СКВ и СВ.

5. Сопоотавигь изменения кислородзависимых реакций ШЛ о их поглотительной активное ты.

раучная новизна исследования заклинается в том, что в работе впервые проведено исследование систэмы кислородзависямого мо-таболизма нейтрофилов методом люминолзависимой хешшзминесценции у бальных некоторыми формами системных васкулитов (облитерирухший зромбантиит, узелковый периартершт, неслецийический еортоарте-риит). Установлены особенности механизмов активации системы кислородзависимого метаболизма нейтрофилов при СКВ и различных формах СВ через разные рецепторные звенья (1г с - и лактило-посредованная рецепция). Выявлена достоверная зависимость изменений функции системы кислородзависимого метаболизма нейтрофкль-ншс лейкоцитов от степени активности и характера течения водча-ночного процесса. Установлено стимулирующее влияние ЦИК на кис-лородзависимые реакции нейтрофилов у больных СКВ и СВ. Проведено сопоставление между интенсивность*] кислородзависимых реакций ПЯЛ и их фагоцитарной активнсстьв.

Практическая значимость работы. Полученные данные, раскрывая значение нейтрофилов в патогенезе СКВ и некоторых форм СВ, позволят усовершенствовать диагностику указанных заболеваний. Метод лшинолзависимой хемшшлинесценции (ХЛ) в составе цельной крови может быть использован, наряду с другими клинико-иммуноло-гическими тестами, для комплексной оценки степени актаьности патологического процесса в ходе клинического наблюдения за больными СКВ и СВ. Возможно, полученные результаты позволят обосновать поиск новых подходов к лечении СКВ и СВ.

Основные положения. выносимые на защиту:

I. Спонтанная генерация нейтрофилами активных фор,л кислорода при СКВ, ОТ, УП, НАЛ более интенсивна, чем у здоровых лиц.

•2. Повышение функции системы кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов при СКВ и СВ отмечено п^п их сти- ■ муляции как через й , так и лектикопосредованные рецепторные звенья.

3. Уровень сывороточных ЦИК при СКВ и СВ выше, чем в норме, Установлена прямая зависимость между уровнем ЦИК и интенсивность!) кислородзависимых реакций непрофильных лейкоцитов.

4. Фагоцитарная активность нейтрофилов у больных СКВ и СВ угнетена. При СКВ фагоцитарная активность ПЯЛ наиболее снижена при умеренной и выраженной активности волчаночного процесса.

Апробепия работы. Основные положения диссертации доложены на конференции молодых ученых Ярославского медицинского института (1990), П Международном симпозиуме имоднологов (Цхалтубо, 1990), 1У Всесоюзном съезде ревматологов (Мешок, 1991), межкафедральной конференции кафедр микробиологии, факультетской терапия, пропедевтики внутренних болезней Ярославского медицинского института (1991).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 12 В страницах машинописного тзкста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и гетодов исследования, результатов исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего £2> отечественных и 49 иностранных источников. Диссертация иллюстрирована /5* таблицами и ¡0 рисунками.

Гатеоиал п методы исследования. Под наблюдением находился 121 больной, из них 71 пациент с СКВ, 50 больных различными формами СВ (ОТ - 21, УП - 16, НАА - 13). Еозрастпой интервал составлял от 16 до 61 года. Длительность заболевания от I месяца до 30 лет. При постановке диагноза СКВ, определении стэпеки активности и варианта течения заболевания были использованы критерии, разработанные В.А.Насоновой и соавторами (1989), а также рекомендации, изложенные в материалах американской ассоциации ревматологов (АРА, 1982). Диагноз СВ основывался на анемнесшчеоких данные, клинической симптоматике заболевания, результатах лабораторных исследований, биопсии мышц, кохи, слизистых оболочек, ангиографического и ультразвукового исследований сосудов. Основные данные по клинической структуре обследованного контингента представлены в таблице I.

В качестве .группы сравнения обследованы 30 практически здоровых людей.

Всем больным проводилось комплексное обследование, включающее клинические, биохимические, инструментальные и иммунологические методы.

Дм оценки функции системы кислород зависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов использовали метод лшинолзависимой

Таблица I

Клиническая характеристика больных СХЗ и некоторыми формами СВ

Признак

СКВ

ОТ

УП

Чиоло боль-

Число

Число

Число

% боль- % боль- % боль— %

Общеэ число больных 71 100,0 21 100,0 16 100,0 13 100,0

Активность заболе-

вания:

I (минимальная) 29 40,8 12 57,1 16 100,0 II 84,6

П (умеренная) 30 42,3 9 42,9 2 15,4

Ш (выраженная) 12 16,9

Характер течения:

остров 22 31

подострое 33 46,5 3 14,3

хроничеокое 16 22,5 18 85,7 16 100,0 13 100,0

Основные клиничеокие

синдромы:

сосудистый 31 43,7 21 100,0 16 100,0 13 100,0

кожный 33 46,5 12 57,1 14 87,5

суставной 48 67,6 3 18,8

почечный 33 46,5 4 19,0 4 25

коронарный 56 78,9 6 28,6 2 12,5 I 7,7

легочный 14 19,7 I 6,3

Поражение перифери-

ческой и центральной 29,6

нервной системы 21 II 52,4 10 62,5

Поражение желудочно- 5 23,8

кишечного тракта

Синокнротидный .

Синдром бифуркации аорты

Синдром легочной гипертензии

2 15,4 I 7,7 I 7,7

хемилюмикесценции (ХЛ) и спонтанный тест восстановления китро-синего -гетра золия (HCT-Tecv).

XI ПЯЛ изучали в составе цельной крови (А.Л.Невмятуллин и соавт., 1985; T.Kato et al ., 1981). при этой исходили из того, что основная активность ХЛ цельной крови обусловлена реакцией нейтрофилов С В.Descшара-Lut cha et al., 1982; T.Tono-вка et ai ., IS83). Венозную кровь разводили 1:100 раствором Хеьк-са без фенолового краоного. После темновой адаптации в сцинтил-ляцконных флаконах смешивали разведенную 1фовь о люминолом, флаконы инкубироваяи при температуре 37°С в течение 15 минут, затеи измеряли показатели спонтанной ХЛ. Индуцированную ХЛ регистрировали после предварительного внесения в опытные флаконы стимуляторов: взвесь убитых клеток staphylococcus epidermidie (штамм 178 М) - лектинопосредованная стимуляция, взвесь убитых бактериальных клеток staphylococcus aureus (штамм 141), обработанных ig с человека - Tg с -зависимая стимуляция. Оба стимулятора разработаны на кафедре микробиологии Нижегородского медицинского института. Измерения индуцированной ХЛ проводили чероз 15-шнутные интервалы в течение часа, после чего оценивали »^неспособность клеток путем проведения рестимуляции. Измерения спонтанной и индуцированной ХЛ регистрировали на жидкостно-оцшпилляционном счетчике "Еета-I" (1Ш0 "Медаппаратура", Киев). Анализ индуцированной ХЛ проводили по пиковым показателям о вычетом значений спонтанной ХЛ. Результаты выражали количеством импульсов в минуту.

НСТ-тест определяли по методике А.А.Домина (IS76).

Оценку фагоцитарной активности проводили мшфометодои (А.К.Зарецкая и ооавт., 1975).

Уровень ДИК в сыворотке крови исследовали в тесте преципитации с додиэтиленгликслем (В.Гажова л согвт., 1978). Размеры ЦИК определяли по методике П.В.Стручкова (1985).

Содержание иммуноглобулинов основных классов (А, о , М) в сыворотке крови проводилось методом'радиальной иммунодиффузии в агаре ( G.Manclni et al . , 1965).

Статистическая обработка результатов цроводалась с использованием следувдих статистических показателей: среднее арифлв» ' тичеокое значение (11). среднее квадратическое отклонение ( в" ),

средняя ошибка средней величины (и ), показатель достоверности различий средних (р) с ислользозактем критериев Стьюдента. Для выявления и измерения связи между признаками применяли метод корреляционного анализа с вычислением коэффициента корреляции

( Г ).

. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЗДЕШЕ

При анализе полученных данных выявлено, что показатели спонтанного ШТ-теста, отражающие уровень продукции нейтрофила-ми супероксидного аниона, у Зольных СКВ достоверно преаыиали соответствуйте показатели лиц группы сравнения (р / 0,05, таблица 2). При этом, значения спонтанного ЖТ-теста у больных о умеренно выраженной активностью патологического процесса достоверно превышали показатели пациентов с выраженной активностью заболевания (р ¿ 0,05, таблица 2).

У больных СВ било отмечено достоверное повышенно продукции нейтрофилами супероксидного аниона по сравнении со здоровыми лицами. Однако не отмечено различий показателей спонтанного 1ЮТ-тестя у больных ОТ, УП, НАА между собой (таблица 3).

При анализе значений спонтанной ХП, отражающей суммарную фоновую продукцию ПЯЛ свободнорадикальных форм кислорода и перекиси водорода, было установлено, что у больных СКВ спонтанная продукция нейтрофвлами кислородных метаболитов и перекиси водорода значительно превышала соответствующие значения лиц группы сравнения (р / 0,001, таблица 2). Выявлено достоверное различие в показателях спонтанной ХЛ ПЯЛ у пациентов СКВ в зависимости от степени активности патологического цроцесса. Наиболее высокий уровень спонтанной ХЛ был отмечен j больных о умеренной активностью волчаночного процесса, менее вн-ражешгай при минимальной, а наиболее :шзкий зарешстрирован у пациентов с выраженной активностью заболевания (таблица 2).

Установлена прямая достоверная корреляционная связь межд^ показателями опонтанной ХЛ нейтрофалов у больных СКВ и значениями спонтанного НСТ-теста ( г = о,69; р L 0,05). Отмечена также прямая корреляционная зависимость между показателями спонтанной ХЛ ПЯЛ у пациентов СКВ и уровнем сывороточных ЦИК ( г = 0,78; р i 0,001).

Таблица 2

Показатели функциональной активности яейтрофялсв у больных СК" (М * ® )

Группы обследованных

НСТ %

Показатели ХЛ в имп/иин

Фагоцитоз

СИ

Ж

л-1Ш

то1

1« С-ИХЛ с

_ю&

Фаг.индекс. %

Фог.число

I. Больные СКВ суммарно

П. Больные с минимальной активностью (А1)

Ш. Больные с умеренной активностью (АЛ)

17. Больные о выраженой активностью (АШ)

У. Группа сравнения .

15,8*0.86 п =27

15,7*1,5 п=9

17,8*1,38 а =12

12,8*1,2 п =6

7,9*0.6

п =20

8,6*1,2 а =71

6,5*0.9 п =29

10,1*1,4 п =30

4,1*0.7 а =12

1,4*0.2 п =30

-гг0,001 <0,001 <0,001 <0,001 >0,05 <0,05

<0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,05 <0,05

5,7*0,8 п =67

6,6*1,1

а =25

4,7*0.9 а =30

2,4*0.4 1,9*0.2

а=з6

Достоверность различия Р 1-У р П-У р В-У , р Ш-7 р П-Щ р Ш-1У

Примечание:

опосредованная индуцированная хемилшинесценция вэпнея индуцированная хемилюминесценция.

<0,001 <0,001 <0,01 >0,05 >0,05 >0,05

Ч^б8

7Й14

5,5*0,9 а =12

3,8*1,2 в =7

4,4*0.4

а =20

>0,05 <0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05

43,4*1.2 Ь=60

46,6*1.9

я =19

40,5*1.5 а =30

39,5*2,3 а =11

77,8*2.3 в =20

<0,001 <0,001 <0,С01 <0,001 <0,05 >0,05

а- число обследованных; СХЛ - спонтанная хемилиминеспенция: л-ИХЛ -щосредованная индуцированная хемилшкнесценция; О-ИХЛ о _ оп<

4,1*0.1 а =60

4,2*0.2 а =19

4,1*0,2 п=зй

3,7*0,3 а =ц

5,7*0.3 а =20

<0,001 <0,001 <0,001 <0,001 >0,05 >0,05

лектин-опосредо-

8

бе

о

и о a s Of

§

• о

и « а] Ф

■9i «

"ь

А

M

м %

О,

Еч

S

S

о

•о о

се ся со со •с» <о «о он он он о см

U ""й " -U11 ti »

«и -я « а -я

со чг -ч1 m

00 «ÎO

+1 II ^-я fi" « с СО ÍTV й f

8 « t> 0

со -=!•_ Un -о

МП нн _

47 и f, »

со _ •о

СО н

£С

я

CJ &

Ô

88885S

оооооо VVy/V*л

•О -О

-s -с -с -п

Щ Ю t f

00 CV}_ -со -о

suffis*

-в -я «я -я

С- Ю со н

8838Ö3

оооооо VyVA VA

Ю'ЛЮЮЮЙ

оооооо оооооо л л л л л л

МП

80Н10ЮЮ

ооооо

sil If Sit

О ÍÍCJ £=Г <■> «

део

s

о й к

si

S с

¡> to С4- c\i ■н МО «<0 -о

HOJ ИНН он QCO

• Я ■ • Я «я -я

00 со со H

оооооо VV n/ЛЛЛ

СП IN СП

н со ui -о -о -о -о

нн нн нн ON

■ " +!,11 +5<11 "У, -Я -Я -я

чэ со г-

QOHininin оооооо

оооооо V V V V л л

888888 оооооо

V V V л л л

«

1 a

и

н.

м «<я §ll о S il ••S сц

гш

§8.8 ääs

<u к

5§ 1

t> KO О E*

и ьо о им

Я I«

CI Ml 4M

и

онйнаса ш

í§d¿¿HHa M

о <3

В) O<P1CUO1O<O< о*

о 0>

н а

о 3

а ©

У больных СЕ было отмечено повышение спонтанной продукции ПЯЛ кислородных метаболитов по сравнению о соответстЕупци-; ми значениями здоровых лиц (таблица 3). Установлено, что у пациентов с ОТ показатели спонтанной XJI достоверно превышали соответствующие значения больных с НАА (р -с 0,05, таблица 3). Выявлена прямая корреляционная сзязь между значениями спонтанной XJI нейтрофилов и показателями спонтанного НСТ-теста у пациентов с ОТ и УП ( г = о,59, г = 0,71 соответственно, р-с 0,05). У бо.гьных НАД не отмечено связи между указанными показателями ( г = о,4, р > 0,05). Вероятно при НАА спонтанная ХЛ обусловлена не столько продукцией супероксидного аниона, сколько другими кислородными,радгкалагм (гидроксильный радикал, син-гллеишй кислород) и пероксвдом водорода. По всей вероятности, в формировании спонтанной ХЛ ПЯЛ у больных НАА наряду о кислородными метаболитами принимают участие продукты окисления ара-хидоновой кислоты. У. больных ОТ и УП отмечена прямая корреляционная связь между показателями спонтанной ХЛ и уровнем сывороточных ЦИК коэффициенты корреляции соответственно равнялись 0,64 и 0,5 (р<0,05). У пациентов НАА таковой связи отмечено не било ( г = 0,38, р > 0,05).

Таким образом, учитывая высокую спонтанную продукцию ней-трофалами кислородных' метаболитов у больных СКВ и СВ, можно констатировать, что при указанных заболеваниях ИК вызывают стимуляцию системы кислородзависимого метаболизма ПЯЛ. Вероятно, повышение продукции нейтрофильными гранулоцитами кислородных метаболитов гри СКВ и СВ направлено на элиминацию ИК из организма и является компенсаторной реакцией. С другой стороны, учитывая данные литературы, следует отметить то, что при СКВ и СВ в значительной степени снижена функция антиоксидактных факторов, которые нейтрализуют продуцируемые ПЯЛ высокореактогенные метаболиты кислорода и лизосомальные ферменты. Так, у больных СКВ и ' СВ выявлено пониженное содержание таких антиоксидантов как супер-окоидцисмутаза, каталаза, глутатионпороксидаза, -токоферрол (В.Г.Акимов, 1987; С.М.Носков и соавт., 1988;-B.Waiiaert , 1988). В таких условиях при гиперпродукции ПЯЛ кислородных радикалов, возможно, создаются условия для токсического действия метаболитов кислорода на сосудистую стенку и окружавдне ткани (Л.Н.Ярхова, 1986; c.A.Boxer et al •» К повреждению

сосудистой стенки при СКВ и СВ предрасполагают и нарушения ан-гиопротекторной функции эндотелиальных клеток ( о.Е.К1паЫо И.Е.ВавГога , 1987).

При анализе показателей индуцированной ХЛ, которая отражает функциональный резерв ПЯЛ к выработке свободнорадикалышх форм гаслорода, установлено следующее. У больных СКВ при минимальной и умеренной активнооти патологического процесса показатели индуцированной лектинопосредованной ХЛ достоверно превышали соответствующие значения лиц группы сравнения (р -£ 0,001, р< 0,01 соответственно, таблица 2). У пациентов о выраженной активностью заболевания показатели ХЛ, индуцированной через лек-тинзависимые рецепторы, были ниже соответствупцих значений больных с миндальной активностью СКВ (р < 0,05) и достоверно не различались от показателей здоровых лиц (р > 0,05, таблица 2).

Обоснованным кажется предположение, что при умеренном повышении уровня ЦИК у больных с минимальной активностью волчаноч-ного процесса нейтрофилыше гранулоциты при их стимуляции через лектинопосредованные рецепторы способны усилить свою функциональную активность, что выражается в увеличении ими выработки кислородных радикалов. При этом повышение функции сиотемы кио-лородзависимого метаболизма можно рассматривать в качестве компенсаторной реакции, направленной на'элиминацию ИК. При нарастании активности патологического процесса цри СКВ, вероятно, происходит истощение функциональных резервов ПЯЛ, что выражается в понижении индуцированной продукции кислородных метаболитов при умеренной и выраженной активности волчаночного процесса. ' ' Анализируя показатели о _ опосредованной ХД у больных СКВ установлено, что наиболее выраженная продукции кислородных радикалов при стимуляции нейтрофилов через р0 -•рецепторы к • о наблюдалась у больных с минимальной активноет т патологического процесса, достоверно превышая показатели лиц группы сравнения (р< 0,05, таблица 2). У больных с умеренной активностью заболевания достоверного повышения значений индуцированной о - опосредованной ХЛ отмечено не было (р> 0,05). Среди пациентов с выраженной активностью волчаночного процеоса 0 - опосредованная активность ПЯЛ имела тенденцию к снижению по оравнению о контрольными показателями.

- 14 -

Приведенные результаты свидетельствуют о той, что у больно* СКВ при минимальной активности патологического процесса при умеренном уровне сквороточ:аа ЦИК экспрессия нейтрофильных рецепторов к ig с мо: :т Сыть усилет соответствующим стимулом. При нарастании активности патологического процесса экспрессия указанных рецепторов уменьшается. Дефект Ро -рецейции нейтро-фшов при СКВ. возможно, связан о блокадой 7с -рецепторов иммунными комплексами или аггрегированными ig о .Не исключена возможность и генетического дефекта указанных рецепторов при СКВ ( Wail Der Woude et al ., 1984).

При исследовании И, индуцированной через лектинзависимые рецепторы у больных СВ, установлено, что у пациентов с ОТ, УП, КАА показатели индуцированной лектинопосредованной ХЛ превышали соответствующие значения лиц группы сравнения, но достоверно не различались между собой (таблица 3). Приведенные результаты свидетельствуют о том, что резервные возможности нейтрофильных ь Гранулоцитов у большие различными формами СВ к выработке кислородных ргдикалов при стицуляцн'1 через лектинзависимые рецепторы в значительной степени сохранены.

При применении стимулятора, действующего на Рс -рецепторное звено к ig с ПЯЛ, у большое СВ было отмечено, что показатели ig с -опосредованной индуцированной ХЛ достоверно не различались от соответствующих значений лиц группы сравнения, как и между собой (таблица 3).

Таким образом, согласно нашим исследованиям, при СКВ и различных формах СВ установлено, что нейтрофильные гракулоциты при их стимуляции через лектинопооредованнне рецепторы обладают достаточно высоким резервом к выработке кислородных радикалов и перекиси водорода, что свидетельствует о сохранении функционального потенциала ПЯЛ при минимальной активности патологического процесса при указанных заболеваниях. При более тяжелом течении болеsim этот потенциал истощается. Индуцированная активность ПЯЛ при стимуляции через Ig с -рецепторное звено была наиболее высокой также при минимальной активности патологического процесса, а при ее нарастании резко снижалась.

В развитии генерализованных сосудистых поражений при СКВ и СВ важное значение отводится ЦИК, благодаря их способности запускать каскадные клеточные реакции при фиксации на сосудистых

стенках (Н.П.Шилкина в соавт., 1985; Ю.К.Сьиулов и соавт.,1988).

В нашем исследовании установлено, что у больных СКВ при минимальной и умеренной активности патологического процесса уровень сывороточных ЦИК достоверно превышал соответствующий показатель лиц группы сравнения (р < 0,001, таблица 4).

Таблица 4

Показатели содержания иммуноглобулинов,и уровня ЦИК в сыворотках крови больных СКВ (М -т}

Группы

обследованных

I. Больные СКВ суммарно

Активность:

П. А1 - минимальная

Ш. АЛ - умеренная

IV.АШ - выраженная

V. Группа сравнения

Достоверность различия:

р 1-У

т> П-У р Ш-У р 1У-У р 1ЫП р Ш-1У

родврждцие и^ю^Рбулирор.г/л

А & М ед.экст.

1,85*0.096 17,5*0,44 1,27*0,08 64,8*3.7 п =46 а =46 п «=4ь п =51

1,93*0.18

п =19

1,88*0.13

п =20

1,55*0,15 п =7

1,78*0.08 а «30

>0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05

18,25*0,7 а =19

17,01*0,68 а =20

17,17*1,13 а =7

17,54*0,31 а =30

>0,05 >0 05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05

1,22*0.11 а =19

1,27*0.13 а =20

1,4*0,28 в =7

0,92*0,02 асЗО

<0,001 <0,01 <0,01 <0,01 >0,05 >0,05

62,7*4.1

в =20

77,2*5.6 а =23

34,5*7,5 п =8

33,7*1.8 в =20

<0,001 <0,001 <0,001 >0,05 <0,05 <0,001

Заслуживает внимания то, что были установлены достоверные различия между содержанием ЩК у больных с разной степенью активности волчаночного процесса. Так наиболее высокие показатели ЦИК зарегистрированы у больных о умеренной активностью СКВ, менее высокий уровень ИХ отмечен у больных о минимальной, а наиболее нлзким он оказался у пациентов о выраженной активностью волчаночного процесса (таблица 4). Цри этом отмечено, что у больных СКВ регистрировались ИК оредних и мелких размеров.

При анализе концентраций сывороточных ЦИК у больных СВ было установлено, что при ОТ, УП, НАА содержание ЦИК было достоверно

повышенным, чей у обследованных лиц группы сравнения (таблица 5). Достоверных различий в содержании ЦИК между укаганндаи формами СВ отмечено не было (р> 0,05, таблица 5). Необходимо отметить, что в сывороткш крови больных ОТ, УП, НАЛ определялись ПК преимущественно промежуточных (средних) размеров.

Таблица 5 вня ЦИК

Показатели содержания

в сыворотках крови больных СВ

Группы

обследованных

Содержание иммуноглобулинов, _г/л _

Концентрация ЦИК, ед.экст.

6

М

I. Больные ОТ

П. Больные УП

Ш. Больные НАЛ

ЗУ.Группа сравнения

Достоверность различия:

р 1-1У р П-1У р Ш-1У

1,48*0,09 16,82*0,79 1,24*0.08

3»

24"

=16'

п=зб

<0,05 >0^05 >0,05

В

Ж

1,56*0.19 17,0 ¿0,88 1,29*0,17

п=Й

п=14

1,82*0.21 17,15*0.73 1,35*0,27

п=1б

Ж

1,78*0.08 17,54±0.31 0,92*0.02

п=з6

>0,05 >0,05 >0,05

1=36

<0,001 <0,01 <0,01

52,2*4.6 п=1б

59,9*8,6 п=15

54,1*9.6 а =10

33,7*1.8 п=20

<0,001 <0,01 < 0,01

" Причины повышенного содержания ЦИК цри СКВ и СВ дискутируются. С одной стороны гиперреактивность В-системы иммунитета при указанных заболеваниях приводит к повышению синтеза иммуноглобулинов и формированию ИК. С другой - системы ответственные за элиминацию ИК (система мононуклеарных фагоцитов, нейтрофилы, СР- система эритроцитов) при СКВ и СБ не обеспечивают должного уровдо их метаболизацик. Несмотря на то, что состав ЦИК при СКВ и различных формах СВ свидетельствует о возможном участии различных типов ИК в развитии укаглнных заболеваний, есть все основания предполагать, что формирование ИК преимущественно промежуточных размеров, опособных длительное время порепетировать в организме и активировать комплемент при данных нозологичеоких формах, является одним из значимых механизмов, приводящих к развитию сосудистых поражения (Д.В.Преображенский, С.П.Еуйлов,1986).

- Г7 -

Цри исследовании содержания сывороточных иммуноглобулинов основных классов А, в, и было выявлено, что количественные показатели Ig М у больных СКВ, ОТ, УП. НАЛ превышали соответст-вушие аначекия обследованных лиц группы сравнения (табл. 4, 5). Установлено также, что у пациентов ОТ оодержание сыворотсякых is А было сниженным по оравненип с показателями здоровых лиц.

Исследование поглотительной способности нейтрофилов, широко распространенное в клинической практике, также является отражением функционального состояния ПЯЛ. Цри оценке фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных СКВ и СВ, основанной на определении их поглотительной способности, получены следующие результаты.

У больных СКВ отмечено угнетение поглотительной активности нейтрофилов, при этом показатели фагоцитарного индекса и числа ПЯЛ были доотоверно свгяены по сравнению с соответствующими значениями лиц группы сравнения (таблица 2). Вш> установлено, что у пациентов о минимальной активностью волчаночного процеооа показатели фагоцитарного индекса доотоверно превышали соответствующие з1гачения больных-о умеренной я выраженной активностью заболевания (р< 0,05, таблица 2).

При анализе фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов у больных СВ было выявлено, что'у пациентов о' ОТ, УН, НАЛ показатели фагоцитарного числа и индекса были достоверно снижены ло сравнению о соответствующими показателями здоровых лиц (таблица 3). Цри этом, наиболее низкие значения фагоцитарной активности ПЯЛ отмечены у больных ОТ.

Снижение показателей фагоцитоза при СКВ и СВ, по всей вероятности, можно объяснить недостаточной опсонизирующей активностью сывороток цри указанных заболеваниях. Так поглотительная способность ШЛ в значительной степени определяется ле столько свойствами самих ПЯЛ, сколько опсони зиругщей активностью сывороточных факторов, а именно, функцией производных комплемента (П.П.Барейкене и соавт., I969jB.li.Alexander , 1985). Можно предположить, что в условиях гипокомплементемии, отмеченной у больных СКВ и СВ (Г.П.МатвеЙков и соавт., 1982; Е.Н.Семенкова, 1938) дефицит Сд и С§ компонентов комплемента приводит к сниже-жешш фагоцитарной активности ПЯЛ. С другой стороны, возможно,

что установленная наш высокая спонтанная генерация ПЯЛ кислородных метаболитов у пациентов с СКВ и СВ при истощении функции антиоксидднтных факторов предрасполагает к аутолизису нейтрофи-лов (Л.Н.Ярхова и со"вт., 1986; В.Н.Галанкин и соавт., 1988). Цри этом нарушения фагоцитарной активности у больных СКВ, ОТ, УП, НАЛ носят однонаправленный характер и, по всей видимости, опосредуются сходными механизмами.

ВЫВОДЫ

1. При СКВ и некоторых формах СВ (ОТ, УП, НАЛ) установлены повышенные показатели спонтанного НСТ-теста и спонтанной ХЛ, отражанцке продукцию нейтрофильными гр?^улоцитами свободноради-кальных форм кислорода. Выявлено значительное угнетение поглотительной активности нейтрофилов.

2. Уровень спонтанной продукции кислородных радикалов у пациентов с СКВ изменяется в зависимости от степени активности патологического процесса. Наиболее высокая продукция кислородных метаболитов отмечена у больных с минимальной и умеренной активностью заболевания, с.шжаяоь г.ри выраженной активности волчаноч-ного процесса.

3. Установлено достовегное усиление функции системы кислород зависимого метаболизма полкморфно-ядерных. лейкоцитов при их стимуляции через лектинзависимые рецепторы у больных СВ и пациентов о СКВ при минимальной и умеренной активности патологического процесса.

4. Выявлено достоверное повышение продукции кислородных радикалов нейтрофиламя у больных СКВ при стимуляции клеток через Рс -рецепторы к 1е с только при минимальной активности заболевания.

5. В сыворотке крови пациентов о СКВ и СЗ определена повышенная концентрация ЦИК. При СКВ, ОТ, УП установлена прямая корреляционная связь между содержанием ЦИК и спонтанной цродук-цией нейтрофилами кислородных радикалов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

I. Рекомендуется включение методов спонтанной и индуцированной ХЛ нейтрофилов в:комплекс диагностических исследований, проводимых больным СКВ в СВ в клинической практике. .

- 19 -

2. При оценке степени активности патологического процесса у больных СКВ наряду с другими клинико-лабораторкыми исследованиями обосновано применение методов оценки функции системы кио-лородзависимого метаболизма пейтрофилов. ,

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Характеристика популяций и субпопуляций иммунокомпетент-ных клеток при системной красной волчанке и системных васкули-тах// Актуальные вопросы диагностики, лечения и диспансеризации больных ревматическими заболеваниями. - Ярославль, 1988. - С. I08-III (в соавт. о А.В.Цветковым).

2. Характеристика показателей гуморального и клеточного иммунитета у больных системныш васкулитами и системной красной волчанкой// Тешсы докладов IX межинотатутской научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях". - Челябинск, 1988.-С. 135 (в соавт. о А.В.Цветковым).

3. фугхциональная активность полиморфно-ядерных лейкоцитов цри системной красной волчанке по данным теста хемилиминесцен-ции// Тезисы докладов XX республиканской научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях. - Челябинск, 1990. -

С. 77 (в соавт. с А.Ю.Дульчевским, А.Г.Бородиным).

4. Клинико-имцунологические критерии оценки эффективности иммунореабилитации больных васкулитами при ревматических заболеваниях// Тезисы -II международного симпозиума "Реабилитация иммунной системы". - Цхалтубо, 1990. - С. 130 (в соавт. с В.А.Романовым, Н.П.Шилкиной, А.С.Полтыревым, А.В.Цветковым, А.Г.Бородиным) .

5. Функциональная активность полиморфшьядерюг- лейкоцитов при системной красной волчанке и узелковом периартериите// Ревматология. - 1991.- Я I. - С.5-8 (в соавт. с Н.П.Шилкиной, В.А. Романовым, а.С.Полтыревым, А.Л.Невмятуллиным, А.Г.Бородины:/;).

6. Свободные радикалы кислорода и их влияние на медиаторы воспаления у больных системной щ>асной волчанкой// Ревматология. -1991. - Л Т. - С. 15-18 (в соавт. о А.С.Полтыревым, А.В.Арши-новым. М.Е.Можейко, А.Г.Бородиным).