Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Фармакотерапевтическая эффективность растительного средства "Фитоуросепт" при экспериментальной нефропатии

На правах рукописи

Башкуева Юлия Львовна

ФАРМАКОТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «ФИТОУРОСЕПТ» ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ НЕФРОПАТИИ

14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Улан-Удэ 2005 г.

Работа выполнена в Бурятском государственном университете МО РФ

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Шантанова Лариса Николаевна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук Ажунова Татьяна Александровна кандидат медицинских наук Матыпов Дамби Леонидович

Ведущая организация:

Иркутский государственный медицинский университет

Защита состоится 21 февраля 2005 года в 10 часов на заседании диссертационного совета К 003.028.01 при Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН по адресу: 670047, г.Улан-Удэ, ул. Сахья-новой, б.

С диссертацией можно ознакомиться в центральной научной библиотеке Бурятского научного центра СО РАН.

Автореферат разослан января 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат биологических наук

Актуальность темы. Актуальность повышения эффективности фармакотерапии заболеваний почек определяется их широкой распространенностью и наблюдающейся тенденцией к росту. По статистическим данным в России за 1995 година 100 тыс. взрослого населения приходилось 5351,7 больных с заболеваниями мочевыделительной системы, а за 2000 г. -8794,5 (Здоровье населения ..., 1995; 2000). В общей структуре нефрологи-ческой патологии наибольший удельный вес занимают заболевания инфекционной этиологии, из которых наиболее значимыми являются циститы и пиелонефриты (Тареева, 2000). Так, пиелонефрит по частоте возникновения занимает второе место после респираторных заболеваний (Пы-тель, 1997; Лопаткин, 1999), а циститы ежегодно выявляются у 15-20 тыс. из 1 млн человек (Лоран, 1999).

Основным методом лечения инфекционных заболеваний мочевыво-дящих путей является адекватная антибактериальная терапия. В настоящее время для лечения циститов и пиелонефритов используют достаточно большое количество антибактериальных препаратов, из которых наиболее эффективными являются цефалоспорины третьего и четвертого поколений, ингибитор-защищенные пенициллины, современные аминогликози-ды, фторхинолоны (Лопаткин, Деревянко, 1997). Вместе с этим, несмотря на высокую эффективность базисной антибактериальной терапии, при ее курсовом применении отмечается развитие ряда негативных побочных явлений: гастро- и гепатотоксических реакций, нарушений иммунного статуса организма б виде аллергических реакции или иммунодепрессив-ных состояний и др. Среди побочных эффектов антибактериальной терапии наиболее значимой является нефротоксичность многих антибактериальных препаратов, усугубляющая течение основного инфекционного процесса. Кроме того, при длительной антибактериальной терапии у пациентов развивается устойчивость патогенной микрофлоры к антибактериальным препаратам (Остапчук, 1991; Ушкалова и соавт., 2002). В этой связи актуальной проблемой остается разработка эффективных не оказывающих побочного действия уросептических средств, обладающих одновременной и нефропротекторной активностью.

Одним из рациональных подходов к решению этой проблемы является применение препаратов растительного происхождения, имеющих ряд преимуществ перед химиопрепаратами: поливалентность действия, низкая токсичность, отсутствие негативных побочных эффектов при длительном приеме. Назначение фитотерапии целесообразно для лечения не осложненных инфекций органов мочевыделительного тракта, а также в период ремиссии с целью профилактики рецидивов заболевания.

Нами разработано новое уросептическое средство на основе широко применяемых в нефроурологической практике растений, условно назван-

ное «фитоуросепт». «Фитоуросепт» представляет собой сухой экстракт из следующих видов растительного сырья; побегов толокнянки обыкновенной (Arctostaphylos uva uisi L.), листа брусники обыкновенной (Vaccinium vitis idaea L.), травы горца птичьего (Polygonum aviculare L.), цветков календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), листа крапивы двудомной (Urtica dioica L.)-

Указанная композиция ингредиентов, входящих в состав фитоуросеп-та, составлена с учетом сложных патогенетических механизмов нефропа-тий различной этиологии. В частности, при выборе оптимального варианта рекомендуемой композиции сбора были учтены основные причины развития нарушений функциональной состоятельности почек, приводящих к развитию гиперазотемии, олиго- и анурии, нарушению электролитного и кислотно-основного баланса и др. В связи с этим, на основании данных литературы и собственных исследований, в состав испытуемого средства были включены растения, обладающие антимикробными (толокнянка, брусника, календула), противовоспалительными (календула, крапива, горец, толокнянка), иммуномодулирующими (горец, крапива, календула), гипоазотемическими (горец, толокнянка, брусника), мочегонными (толокнянка, брусника), мембраностабилизирующими (толокнянка, горец, крапива), антиоксидантными (календула, толокнянка, горец) свойствами.

Фитуросепт содержит биологически активные вещества, относящиеся к различным классам химических соединений: апигенин, лютеолин, квер-цитин, рутин, гиперозид, мирицетин, фенолкарбоновые кислоты: хлороге-новая, галловая; фенологликозид: арбутин (Югдурова и соавт., 2003, Югдурова, 2004). Основным действующим началом фитоуросепта является полифенольный комплекс. Стандартизация фитоэкстракта осуществляется по сумме флавоноидов и фенологликозидов в пересчете на рутин и арбутин (Югдурова и соавт., 2004 а; Югдурова и соавт., 2004, б).

Цель исследования. Целью настоящей работы, явилось определение фармакологической активности и фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта при повреждениях почек различной, этиологии, а также выявление возможных механизмов его нефропротекторного действия.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:

- определить основные фармакологические свойства фитоуросепта;

- оценить фармакотерапевтическую эффективность фитоуросепта при нефропатиях инфекционной, ишемической и токсической этиологии;

- выявить особенности механизма нефропротекторного действия фи-тоуросепта.

Научная новизна. Работа представляет собой экспериментальное исследование фармакологической активности и фармакотерапевтической

эффективности нового средства растительного происхождения «фитоуро-септа», обладающего уросептической и нефропротекторной активностью. Установлено, что фитоуросепт обладает широким спектром фармакологической активности: антибактериальной, противовоспалительной, иммуно-модулирующей, мочегонной, гипоазотемической; стимулирует процессы регенерации, обладает спазмолитическим, гипокоагуляционным, сосудо-укрепляющим, мембраностабилизирующим действием, повышает неспецифическую резистентность организма; стимулирует энергетический обмен клеток; оказывает антирадикальное действие, повышает активность ангиоксидантной защиты организма.

Испытуемое средство проявляет синергизм с полусинтетическими пе-пициллинами, аминогликозидами и цефалоспоринами по отношению к уропатогенным бактериям.

Показано, что курсовое введение фитоуросепта в экспериментально-терапевтической дозе, составляющей 50 мг/кг, на фоне нефропатий инфекционной, ишемической и токсической этиологии оказывает выраженное фармакотерапевтическое действие, способствуя нормализации функционального состояния почек животных на более ранних сроках патологического процесса

Установлено, что одним из основных аспектов уросептического и нефропротекторного действия испытуемого фитоэкстракта является активация макрофагального звена иммунитета, а также наличие базисной мсмбраностабилизирующей активности, реализация которой связана с ан-Тиоксидантным действием комплекса фенольных соединений, обусловленного, как непосредственным радикалперехватывающим действием, так и опосредованным, связанным с повышением активности системы антиок-сидантной защиты организма.

Практическое значение. Проведенные экспериментальные исследования фармакологической активности, фармакотерапевтической эффективности и безопасности фитоуросепта явились основой для разрешения примения его в клинической практике в качестве биологически активной добавки к пище «Чай «Байкальский-6». Также оформлен и представлен в ФК МЗ РФ отчет по его доклиническим испытаниям в качестве лекарственного препарата в форме таблеток, предназначенного для лечения и профилактики заболеваний органов мочевыделительного тракта инфекционной этиологии

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:

научно-практической конференции «Биологически активные добавки в профилактической и клинической медицине» (Улан-Удэ, 2003);

региональной научной конференции "Экологическая патология: вопросы биохимии, фармакологии, клиники" (Чита, 2004);

всероссийской конференции «Развитие традиционной медицины в России» (Улан-Удэ, 2004);

Республиканской научно-практической конференции, посвященной 70-летию Республиканской больницы им. А.Н.Семашко;

IV симпозиуме по фенольным соединениям (Москва, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ.

Работа выполнена на кафедре фармакологии и традиционной медицины медицинского факультета Бурятского государственного университета МО РФ в соответствии с программой «Создание информационного банка данных по тибетской медицине и разработка новых лекарственных препаратов» (№ гос. регистрации 01.9.400031.83), утвержденной 06.12.95 г.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Фитоуросепт в экспериментально-терапевтических дозах (25, 50, 100 мг/кг) обладает мочегонной, гипоазотемической, противовоспалительной, антибактериальной активностью; стимулирует процессы регенерации; оказывает иммуномодулирующее, спазмолитическое, гипокоагуляцион-ное, сосудоукрепляющее, мембраностабилизирующее действие, повышает неспецифическую резистентность организма; стимулирует энергетический обмен клеток; оказывает антирадикальное действие, повышает активность системы антиоксидантной защиты организма.

2. Фитоуросепт проявляет синергизм с полусинтетическими пеницил-линами, аминогликозидами и цефалоспорипами по отношению к уропато-генным бактериям.

3. Курсовое введение фитоуросепта в дозе 50 мг/кг оказывает выраженный фармакотерапевтическое действие при поражениях почек бактериальной, ишемической и токсической этиологии, нормализуя функциональное состояние почек животных на более ранних сроках патологического процесса.

4. Фармакотерапевтическая эффективность фитоуросепта обусловлена как ренальными фармакологическими эффектами, так и экстраренальными видами неспецифической фармакологической активностью: иммуномоду-лирующей, мембраностабилизирующей, антирадикальной, а также способностью повышать активность системы антиоксидантной защиты и стимулировать процессы синтеза белка и энергетического обмена.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, двух глав собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка использованной

литературы, включающего 235 источников: 176 отечественных и 59 зарубежных авторов.

Работа изложена на 130 страницах компьютерного текста, иллюстрирована таблицами, рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальная работа выполнена на лабораторных животных: крысах линии Вистар массой 160 - 200 г, мышах линий СВА и Fj массой 18 - 20 г. Животные находились в стандартных условиях содержания в виварии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН на обычном рационе (Приказ МЗ СССР №1179 от 10.10.83 г.). Эксперименты осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР №755 от 12.08.77 г.). Эвтаназию животных осуществляли методом мгновенной декапитации под легким эфирным наркозом.

Кроме этого, в экспериментах были использованы штаммы условно-патогенных бактерий, культуры тканей: суспензия эритроцитов, культура полиморфноядерных лейкоцитов, суспензия липосом, препараты тонкого кишечника; модельные биохимические тест-системы.

Суспензию эритроцитов готовили из свежей эритроцитарной массы донорской крови путем трехкратного отмывания в физиологическом растворе в соотношении 1 : 10 и центрифугирования при 1500 об/мин в течение 10 мин (Ковалев и соавт., 1986)..

Популяцию полиморфноядерных лейкоцитов получали из перитоне-алыюй жидкости мышей, которым за 3-е суток до этого внутрибрюшинно вводили 5 мл 2 % стерильного раствора крахмала (Грачева, 1984).

Суспензию липосом получали из свежего куриного яичного желтка путем суспендирования с фосфатным буфером (рН 7,4) в соотношении 1 : 10 на магнитной мешалке в течение 15 мин (Лопухин и соавт., 1983).

В модельных биохимических тест-системах в качестве субстратов использовали: глутатион окисленный, глутатион восстановленный, фосфое-нолпируваг, шидроксибутил, аденозинди- и трифосфаты, ß-никотинамидадениндинуклеотид восстановленный и никотинамидаде-ниндинуклеотид фосфат фирмы «Sigma».

Острый пиелонефрит воспроизводили путем наложения лигатуры на левый мочеточник на 24 часа, после чего в хвостовую вену за 1 час до снятия лигатуры вводили 1 мл суспензии Escherichia coli с титром 5 * 108 микробных гел в 1 мл (Лисица, Рудзит, 1983).

Двустороннюю ишемию почек воспроизводили путем выделения почек белых крыс из жировой капсулы и окклюзии сосудистых пучков обеих почек на 60 мин (Шепотиновский и соавт., 1989). Операцию проводили

под барбамиловым наркозом (80 мг/кг внутрибрюшинно). По истечении 60 мин зажимы с почечных ножек снимали, и рану ушивали послойно наглухо в асептических условиях.

Тетрахлорметановый некронефроз у белых крыс вызывали подкожным введением 50 % масляного раствора четыреххлористого углерода (СС14) из расчета 0,4 мл/100 г массы, 4- х кратно, 1 раз в день (Левшин, 1973).

С целью оценки функционального состояния почек животных определяли: диурез по общепринятому методу без нагрузки и с 2,5 % водной нагрузкой (Берхин, Иванов, 1972); концентрацию катионов натрия и калия в моче - методом пламенной фотометрии; депурационную функцию почек оценивали по содержанию мочевины и креатинина в сыворотке крови и моче - унифицированными методами использованием наборов реактивов Био-Ла-Тест "Лахема"; содержание белка в моче - реакцией с сульфосали-циловой кислотой (Меньшиков и соавт., 1987); оценку скорости клубочко-вой фильтрации - по клиренсу эндогенного креатинина (Капитаненко, Дочкин, 1985).

Функциональное состояние печени животных оценивали по активности аминотрансфераз и щелочной фосфатазы в сыворотке крови (Меньшиков и соавт., 1987); содержанию гликогена, в печени (Seifter, 1953).

Оценку антибактериальной активности осуществляли, методом двукратных серийных разведений в жидкой среде (Першин, 1971). В качестве тест-бактерий использовали Escherichia coli 408, Staphylpcoccus aureus 209Р, Proteus vulgaris H 50, Streptococcus faecalis, Pseudompnas aeruginosa. Микробная нагрузка составляла 250000 клеток в 1 мл.

Для оценки синергидного с антибиотиками действия использовали метод диффузии в агар с применением стандартных дисков (Лабинская, 1972). Для этого использовали диски фабричного производства с ампициллином, гентамицином и цефазолином. В качестве тест-бактерий использовали штаммы Escherichia coli 408 и Staphylococcus aureus 209P.

Оценку антиэкссудативной активности проводили на моделях острого асептического воспаления задней конечности, индуцированного введением формалина (Стрельников, 1960), декстрана (Лещинский, 1976), гистамина гидрохлорида. Острый перитонит воспроизводили путем внутрибрюшин-ного введения нитрата серебра (Александров и соавт., 1986), при этом определяли объем экссудата и количество дегранулированных тучных клеток в брыжейке. Оценку влияния фитоуросепта на образование фиброзно-грануляционной ткани осуществляли по методу Тринус Ф. и соавт. (1975); на процессы альтерации и регенерации - по методу Menkin (Ойвин, Ше-

тель, 1961), на сосудистую проницаемость - с использованием метода меченых сосудов (Горизонтова и соавт., 1975).

Изучение спазмолитической активности проводили на изолированном отрезке топкой кишки белых крыс с использованием серотонина (10"4 М) и карбахолина (I0"6 М) (Furchgott, 1967).

При определении иммуномодулирующей активности оценку влияния на клеточное звено иммунитета осуществляли по реакции гиперчувствительности замедленного типа (Петров и соавт., 1987) и фагоцитарной активности полиморфноядерных лейкоцитов (Фрейдлин, 1976); гуморального звена - по количеству антителообразующих клеток, определяемых методом локального гемолиза (Cunningham, 1965)

Оценку мембраностабилизирующей активности осуществляли по степени гемолиза эритроцитов, вызываемого реактивом Фентона (Ковалев и соавт., 1986).

Антиоксидантные свойства оценивали по степени ингибирования, генерации супероксидного анион-радикала (Nichikimi et al., 1972) и образования продуктов перекисного окисления липидов: диеновых конъюгатов (Гаврилов, Мишкорудная, 1983), ТБК-активных продуктов в сыворотке крови ((Темирбулатов, Селезнев, 1981), в гомогенате коркового слоя почек (Стальная, Гаришвили, 1977) Для оценки влияния на состояние системы антиоксидантной защиты определяли активность каталазы крови (Коро-люк и соавт., 1986), глутатионпероксидазы (Flon, 1988), глутатион-редуктазы (Cotariu et al., 1992).

Определение уровня Fe"^ - индуцированной хемилюминесценции проводили на «Хемилюминометре PXL - 01» (Россия) по общепринятому методу (Клебанов и соавт., 1988; Сергеев и соавт, 1991)

Для оценки неспецифической активности использовали общепринятый метод иммобилизации белых крыс на спине'в течение 24 часов с оценкой выраженности «триады Селье», для чего определяли массу надпочечников и гимуса, количество деструкций в слизистой оболочке желудка.

Изучение влияния на процессы синтеза белка проводили с использованием модели односторонней нефрэктомии. В гомогенате почек определяли содержание общего белка по методу Лоури (Lowry, 1951), концентрацию РНК и ДНК - по методу Трудолюбивой М.Г. (1977)

Влияние фитоуросепта на коагуляционные свойства крови'оценивали но скорости образования фибринового сгустка крови на тромбоэЛастогра-фе «Тромб-2» (Россия)

Определение острой токсичности DL50 осуществляли по методу Уил-коксона (Требования..., 2000).

Полученные в ходе экспериментов данные статистически обработаны общепринятыми методами для малой выборки с определением средней

величины (М) и средней арифметической ошибки (m) Достоверность результатов (Р) оценивалась с применением критерия Уилкоксона-Манна-Уитни (Сергиенко, Бондарева, 2000). Различие считали достоверным при вероятности 95 % (Р < 0,05)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование специфической фармакологической активности фито-уросепта включало определение влияния испытуемого экстракта на функциональное состояние почек, оценку противовоспалительной и антибактериальной активности; а также определение синергидное действие с антибиотиками

В серии предварительных экспериментов было установлено, что острая токсичность (DL50) фитоуросепта при его внутрибркринном введении белым крысам составляла 550 мг/кг, что позволяет отнести испытуемый фитоэкстракт к группе малотоксичных веществ.

При исследовании влияния фитоуросепта на функциональное состояние почек белых крыс установлено, что при однократном, его,введении белым крысам в дозах 25, 50, 100 мг/кг наиболее выраженный диуретический эффект отмечался при использовании дозы 50 мг/кг, в этом случае диурез повышался в среднем на 25 % по сравнению с данными живртных контрольной группы. При многократном введении его диуретическая активность повышалась. Наряду с этим, при введении, фитоуросепта в дрзе 50 мг/кг отмечалось снижение концентрации креатинина в сыворотке крови на 19 %, а также повышение скорости клубочковой фильтрации на 50 % по сравнению с аналогичными показателями крыс контрольной группы.

Установлено, что фитоуросепт в, высоких концентрациях обладает выраженной антибактериальной активностью по отношению к штаммам бактерий, наиболее часто вызывающим инфекционные заболевания органов мочевыделительного факта. Наиболее выраженное антибактериальное действие испытуемый фитоэкстракт оказывает по отношению к штаммам Eschenchia coli, Staphylococcus aureus, и Streptococcus, faecalis Так, по отношению к указанным штаммам фитруросепт в концентрации 1,25 мг/мл проявляет бактерицидное действие, а в более низких, концентрациях - бак-териостатическое. Несколько менее выраженное антибактериальное действие фитоуросепт оказывает по отношению к Pspudomonas aerugenosae и Proteus vulgaris.

При определении синергидного действия фитоуросепта с антибиотиками установлено, что его сочетанное использование с ампициллином и гентамицином угнетает рост Е coli в среднем на 20 % по сравнению с контрольными дисками. Более выраженное синергидное с антибиотиками действие фитоуросепта отмечено по отношению к Staphylococcus aureus.

Так, при сочетанном применении фитоуросепта с ампициллином антибактериальная активность последнего повышалась в среднем на 43 % по сравнению соответствующим контролем, а с цефазолином - на 20 %.

Установлено, что фитоуросепт обладает выраженной противовоспалительной активностью, оказывая положительное влияние на все стадии воспалительного процесса. Так, его курсовое введение в дозе 50 мг/кг на фоне острого асептического воспаления сопровождалось уменьшением выраженности альтерации тканей и ускорением процесса регенерации, о чем свидетельствует уменьшение площади кожно-мышечного дефекта на 2 и 25 сутки соответственно на 37 и 45 % по сравнению с аналогичными показателями крыс контрольной группы. Наряду с этим фитоуросепт в указанной дозе оказывает умеренное антиэкссудативное действие, уменьшая степень отека конечности при асептическом воспалении, вызванном введением формалина, декстрана и гистамина соответственно на 14; 15 и 28 % по сравнению с аналогичными показателями животных контрольных групп.

Курсовое введение фитоуросепта в дозе 50 мг/кг при остром перитоните сопровождалось уменьшением объема внутрибрюшинного экссудата (на 17 %) и снижением дегрануляции тучных клеток в брыжейке (на 30 %) но сравнению с контролем. Выявлено также наличие сосудоукрепляющего действия, о чем свидетельствует уменьшение выраженности импрегнации черной туши в брыжейку крыс при воспалительном процессе.

Таким образом, в результате исследования специфической фармакологической активности установлено, что фитоуросепт стимулирует функциональную активность почек, обладает антибактериальной и противовоспалительной активностью, а также проявляет синергидное действие с антибиотиками.

Исследование фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта проведено с использованием моделей почечной недостаточности инфекционной, ишемической и токсической этиологии.

Введение водного раствора фитоуросепта осуществляли по соответствующим схемам внутрижелудочно 1 раз в день в дозе 50 мг/кг. В качестве препарата сравнения использовали отвар толокнянки в объеме 10 мл/кг или деалкоголизированный раствор леспенефрила в объеме 1,5 мл/кг.

Результаты исследования фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта на фоне нефропатии бактериальной этиологии представлены в таблицах 1-3.

Установлено, что временное лигирование левого мочеточника и гематогенное инфицирование животных культурой Escherichia coli сопровождалось развитием острого воспалительно-инфекционного процесса, клиническая картина которого соответствует пиелонефриту с выраженным

снижением функциональной состоятельности почек: олигурией, гиперазотемией, протеинурией (табл. 1).

Таблица1

Влияние фитоуросепта на функциональное состояние почек и интенсивность процессов ПОЛ при колибациллярном пиелонефрите у белых крыс

Покаиггели Группы животных

Ишактная Контрольная Фигоуросепт Отвар шлокнянки

7 сутки ' '

i: Диурез, Мл/100 г/ч " 0,45±0,03 0,2710,01 ■ 0,3510,02* 0,35+0,03*

■Na* в моче, miAm 0,5610,09 0^6+0,09 0,4110,02 • 0,4110,03

К"1 в моче, мг/мл 2,1±0.35 1,9+0,12 1,910,09 1,9+0,09

Мочевпнл, мм оль/л 4.6±0,32 7,7±0,55 5,1+0,46* 5,3+0,38*

Креатинпн, мкмоль/л 48.3+3,66 90,0+8,25 63,515,80* • 70.6+6,25

Белок в моче, i/л 0.610.04 1,3+0,09 0,910,06 ' l,ilÖ,06

МДА. мкмоль/мл l,Jt-0,09 2,1±0,16 1,7*0,098* 1,910.09

ДК.ед ОН 1,2±0,15 3,8±0,28 3,2±0,24 3,2 ±0.12

Кагалам, икал/л 4.5 ± 0,35 2,7 ±0,18 3,5 ± 0,26* , 3.0 ±0.25

14 сутки

Диуре), ил/1001 0,3210,02 0,21+0,02 0,31+0,02* 0,30+0,03*

Мочевина, ммоль/л 4,6±0,32 6,2+0,55 5,110.26 5,2+0,38

Креачинин, мкмоль/л 48.3±3,66 68,2±5,70 49,3+2,80* 52,613,25*

Белок в моче, i/n 0.610,05 1,710,15 1,110,06 1,310,08

МДА, мкмоль/мл 1,1+0.09 3,5+0,14 2,5+0,18* 3.0 ±0.31

ДК. ед ОП 1.2(0.15 4,1 ±0,3 8 3,2+0,34* 3.5 ±0,25

Кагалаза, мкаг/л 4.1+0,33 2,5 + 0,23 3,4 ±0,26* 3,0 ±0,23

21 сутки

Диуреч мл/1001 0,3210,02 0,29+0,01 0,34+0,03 0,35+0,03

Мочевина, ммоль/л 4,6+0.32 5,110,32 4,9+0.32 4,910,38

Креагинии, мкмоль/л 48,313,66 51,9±2,12 46,912,11 50.8+2,82

Белок в моче, г/л 0,6±0,04 0,9+0,07 0,5±0,05 0,5+0,06

МДА, мкмоль/мл 1,1+0,09 2,1-10,13 1,1+0,15* 1,3 ±0,01

ДК. ед ОП 1.2+0.15 2,1±0,17 1,4+0,09* 1,4 ±0,01*

Кагалаза, мка|/л 4,1 ±0,33 3,2 + 0.32 3,9 ±0,34 3,4 ± 0,25

Курсовое введение фитоуросепта в дозе 50 мг/кг оказывало выраженное нефропротекторное действие, о чем свидетельствует нормализация функциональной активности почек на более ранних сроках патологического процесса. Так, достоверное повышение диуретической функции почек отмечалось уже на 7 сутки, а на 14 сутки исследования уровень диуреза у крыс опытной группы соответствовал уровню физиологической нормы. Аналогично этому к 14 суткам нормализовалась и депурационная функция, на что указывает уровень концентрации азотистых метаболитов в сы-

воротке крови крыс опытной группы. Установлено также, что под влиянием испытуемого экстракта происходит уменьшение выраженности протеи-нурии, содержание белка в моче животных опытной группы было ниже такового у крыс контрольной группы во все сроки исследования. Установлено, что развитие инфекционно-воспалительного процесса в почках сопровождается значительной активацией процессов перекисного окисления липидов о чем свидетельствует увеличение концентрации продуктов ПОЛ и снижение активности ферментов антиокислительной зашиты (табл. I). На фоне введения фитоуросепта отмечалось уменьшение концентрации МДА и ДК в сыворотке крови животных опытной группы во все сроки исследования. Наряду с этим отмечалось повышение активности каталазы крови животных этой группы.

Таблицу 2

Влияние фитоуросепта на количество микробных тел Е.соН в почках и моче белых крыс при колибациллярном пиелонефрите

Группы животных Количество Е.соН в 1см ткани Количество Е.соПвмл'.' мочи

Левая почка Правая почка

11,1 i. 1 . - 7 сутки

1. Контрольная + Н-

2. Фиюуросепт +++'' ..... +++ ++ ■

3. Отвар толокнянки " 1 ++++' ' , '' +++ ++

14 сутки

1. Контрольная ++++ 1- н +++

2. Фиюуросепт ++ + +

3. Отвар толокнянки +++ ++ +

21 сутки

1. Контрольная ++ I- ++

2. Фито>росспт - - -

3. Опир 10Л0КНЯ11КИ + - -

Примечание: ++++ - рост колоний И0\ ++<• - МО4. ++• МО', + - МО2; - -роста tier.

Данные, приведенные в таблице 2, свидетельствуют, что развитие острой нефропатии у животных обусловлено инфицированием паренхимы обеих почек Escherichia coli. Курсовое введение фитоуросепта в экспериментально-терапевтической дозе на 14 сутки эксперимента способствовало уменьшению выраженности инфицирования: число бактерий в 1 см2 левой почки составило МО' микробных тел, в правой - МО2 против 1 • 105 в кон-

троле, причем в 2 случаях высева Е. coli кишечной палочки не наблюдалось как в левой так и в правой почках. На 21 сутки эксперимента при бак-посеве из левой почки крыс контрольной группы в 3 случаях отмечался рост колоний кишечной палочки, в правой почке угнетение роста бактерий было более выраженным. У крыс опытной группы, получавших фитоуро-септ, к этому сроку исследований лишь в одном случае отмечался рост бактерий, при этом в правой почке роста числа микробных тел не отмечалось ни в одном случае. Из этой же таблицы видно, что под влиянием испытуемого средства уменьшается степень бактериурии во все сроки исследования При этом на 21 сутки у крыс опытной группы выделения бактерий с мочой не наблюдалось. Установлено, что фармакотерапевтичская эффективность фитоуросепта при остром пиелонефрите превосходила таковую у препарата сравнения.

Результаты исследования фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта при постишемической нефропатии свидетельствуют, что его превентивно-курсовое введение в дозе 50 мг/кг оказывает нефропроте-торное действие уже на I сутки после иШемии почек, о чем свидетельствует уменьшение выраженности синдрома гиперазотемии, достоверное повышение диуреза и СКФ по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы (табл. 3, 4). На 3 сутки также отмечался более низкий, по сравнению с крнтролем, уровень нарушений функций почек животных. На 7 сутки эксперимента у крыс, получавших испытуемый фитоэкстракт, концентрация креатинина, диурез и СКФ достигали значений физиологической нормы при повышенных значениях этих показателей у животных контрольной группы.

Таблица 3

Влияние фитоуросепта на депурационную функцию почек белых крыс при пости-шемической нефропатии

Группы животных Креатинин в Креатинин » моче.

крови, мкмоль/л ммоль/л

1 2 3

1 сутки

1 Итактная 97,3 ± 7,08 П,3± 1.11

2 Ложнооперироваиная 95,6 ±2,45 9,9 ±0,71

3 Контрольная (ишемия) 230,9 ± 8,36 3,5 ± 0,40

4 Опытная 194,1 ± 8,36" 4,7 ±0,18*

(ишемия+ фиюуросеЬг)

3 сутки

1 Иптакшая 11 97,3± 7,08 11,3 ± 1.11

2 Ложнооперировашмя 95,6 ±2,45 9.9 ±0,71

I 2 3

3 Кон ¡рольная (ишемия) 189,2118,30 4,1 ±0,60

4. Опытная (ишсмия+ фитоуросепт) 114,1±9,73* 6,7 ±0,50*

7 сутки

1. Иитактная 97,3 ± 7,08 11,3 ± 1,11

2. Ложиооперированная 95,6 ±2,45 9,9 ±0,71

3. Кошролыш (ишемия) 109,8 ±15,71 8,6 ±0,33

4. Опытная (ишемия+ фи 1 оуросеп 1) 101,7 ± 14,28 10,1 ±0,85

Таблищ4

Влияние фитоуросепта на водовыделительную функцию почек и скорость клубоч-ковой фильтрации у белых крыс при постишемической нефропатии

Показатели Группы животных

Интактная Контрольная (ишемия) Опьггная (ишсмия+ фитоуросепт)

1 сугки

Диурез мл/100 г/ч 0.37Н 0,037 0,15±0,027 0,23±0,02*

СКФ, мкл/100г/ч 713,9±98,32 38,12+6,64 93,87±17,80*

3 сутки

Диурез мл/100 г/ч 0,39+0,03 0,26±0,007 0,33+0,023»

СКФ, мкл/100г/ч 713,9±98,32 1 93,30±12,36 324,55±43,25*

7 сугки

Диурез мл/100 г/ч 0,43±0,03 0,35±0,01 0,40±0,037

СКФ, мкл/ЮОг/ч 823,84±78,05 528,64x64,30 729,12+67,45*

Наряду с этим установлено, что курсовое введение фитоуросепта оказывало ингибирующее действие на процессы ПОЛ, индукция которого наблюдалась при ишемическом повреждении почек (табл. 5). В частности, на это указывает достоверное снижение концентрации продуктов ПОЛ в сыворотке крови и гомогенате коркового слоя почек, а также повышение активности каталазы крови на 1 и 3 сутки наблюдения, а также нормализация уровня указанных соединений на 7 сутки опыта. При этом фармако-терапевтическая эффективность испытуемого средства была аналогичной таковой у препарата сравнения-леспенефрила.

Таблица 5

Влияние фитоуросепта на процессы ПОЛ при постшемической нефропатии

Показатели Группы животных

Ингактная Л/оперир. Контрольная (ишемия) Опытная (ишемия+ фи-тоуросснг)

1 сутки

ДК. сд ОП 1.4±0,05 2,5 ± 0,38 4,5+0,38 3,1+0.12*

МДА в сыворотке, мкмоль/мл 2.1±0,17 2,6 ±0,05 3,9±0,16 2,8+0,07*

МДА в почках, нмоль/г 10,7+1,31 11,1 ± 1,03 18.5+0,90 14,3+1,01*

Каталаза, м кат/л ( 0,41 ±0,03 0,36 ±0,03 0,21 ±0,01 0,33 ± 0,02*

1 3 сутки

ДК, ед ОП 1.3+0,06 2,1 ±0,18 4,6+0,56 2,4+0,09*

МДА вхыворогке; МКмй/ш/мЛ . 1 2Л±0,17 '<•, / 2,6 ±0,05 с 4,0±0,05 3,4±0,32*

МДД в ирчках, ймоль/г псани 10,7±1.31 11,2 ±1,24 ' 12,3+1,10 11,1-Ь0,73

Каталаза. мкат/л 0,41 ±0,03 0,44 ± 0,03 0,24 ±0,01 0,38 ±0,03*

) 7 су| ки

ДК, ед. 011 • 1.3+0,06 1,5 ±0,09 2,6±0,18 1.6+0,09*

МДА в сыворотке, мкмоль/мл 2.1 ЬО. 17 2.6 ±0,05 3,7±0,32 2,4±0.08*

МДА и ночках, нмоль/пкани 10,7±1,31 11,2 ±0,94 " >> |П 12,5^ 1,12 10,8±0.61

Каталки, мкаг/л 0,41 ±0,03 0,36 ±0,03 0,32 + 0,03 0,40 + 0,02*

В таблицах 6, 7, 8 представлены результаты исследования фармакоте-рапевтической эффективности фитоуросепта при сочетанном повреждении печени и почек белых крыс, индуцированного введением тетрахлормета-на.

Установлено,, курсовое (в течение 10 дней) введение фитоуросепта в дозе 50 мг/кг на фоне гепаторенального синдрома оказывало как нефро-, так и гспатопротекторное действие, способствуя восстановлению функциональной состоятельности указанных органов на более ранних сроках патологического процесса. В частности, введение испытуемого фитосред-ства сопровождалось уменьшением выраженности гиперазотемии, на что указывает увеличение экскреции азотистых метаболитов у крыс опытной группы во все сроки исследования (табл. 6). Также на фоне введения фитоуросепта отмечалось повышение диуретической функции и СКФ, с нормализацией исследованных функциональных показателей почек к 21 суткам опыта.

Наряду р этим, под влиянием испытуемого средства отмечалось повышение функциональной активности печени, о чем свидетельствует уменыненне выраженности синдромов цитолиза и холестаза, развивающихся под влиянием токсического действия ССЬ4 (табл. 7). Так, у крыс опытной группы во все исследованные сроки отмечался более низкий уровень активности аминотрансфераз и щелочной фосфатазы по сравнению с аналогичными показателями крыс контрольной руппы. Кроме этого фи-тоуросепт стимулировал синтетическую активность печени, в частности, гликогенсинтезирующую функцию, о чем свидетельствует достоверное повышение концентрации гликогена в печени крыс опытной группы.

Установлено также, что введение фитоуросепта на фоне гепаторе-нального синдрома оказывает выраженное антиоксидантное действие, снижая концентрацию продуктов ПОЛ (табл. 8): на 7 и 14 сутки опыта содержание ДК и МДА в сыворотке крови крыс опытной группы было достоверно ниже аналогичных показателей у животных контрольной группы, а на 21 сутки отмечалось снижение концентрации указанных соединений до значений физиологической нормы.

Полученные данные о снижении концентрации продуктов переоксидации липидов и активности каталазы крови под влиянием фитоуросепта позволяют предположить, что одним из важнейших аспектов его фармако-терапевтической эффективности при нефропатиях различной этиологии является наличие антиокислительной активности, что было подтверждено в дополнительной серии исследований, посвященной изучению его неспецифической фармакологической активности

В частности, об этом свидетельствуют полученные данные о способности испытуемого средства существенно снижать скорость генерации супероксидного анион-радикала (02) в модельной системе: уровень перехвата свободных радикалов фитоуросептом составил в среднем 90 %. Принимая во внимание, что 02 является пусковым звеном свободнорадикаль-пых реакций, можно полагать, что фенольные соединения, входящие в

состав фитоэкстракта, обладая антирадикальной активностью по отношению к О2 предотвращают их развитие уже на начальной стадии процесса.

Установлено также, что под влиянием фитоуросепта повышается активность ферментов антиоксидантной защиты: глутатионредуктазы (ГР) и глутатионпероксидазы (ГП) (табл. 9), что обеспечивает увеличение концентрации восстановленного глутатиона, являющегося одним из важнейших эндогенных антиокислителей. Принтом отмечается дозозависимый эффект: с увеличением концентрации испытуемого средства его эффективность повышается до определенных значений, при дальнейшем повышении концентрации - снижается. Более выраженное активирующее влияние фитоуросепт в концентрации 50 мкг/мл оказывает в отношении глута-тиопероксидазы, увеличивая ее активность на 31 % по сравнению с контролем.

Наряду с этим, выявлено также стимулирующее влияние фитоуросеп-та на энергетический обме,н клеток (табл. 9), о чем свидетельствуют полученные нами данные о том, что испытуемый фитоэкстракт в концентрациях, соответствующих экспериментально-терапевтическим, оказывает значительное стимулирующее влияние на активность одного из ключевых ферментов энергетического обмена - пируваткиназы (ПК), ускоряя ферментативную реакцию в среднем на 30 % по сравнению с контролем.

Таблица 9

Влияние фитоуросепта на скорость ферментативных реакций

Условия опыта Концентрация, мкг/мл Скорость реакции, мкмоль/мг мин

ГР ГП ПК

Контроль - 13,4 ±0,17 3,5 ± 0,03 3,8 ± 0,30

Фитоуросепт 5.0 13.4 ± 1,05 3,5 ± 0,32 4.5 ± 0,35*

-«- 10,0 13.5 ±0,38 3,6 ±0,12 5,0 ±0,38*

-«- 50,0 15,1 ±0,09* 4,1 ±0,29* 5.1 ±0,30*

-«- 100,0 14,7 ±0,39* 4,6 ± 0,39* 2,7 ± 0,24*

- «- 1000.0 14.5 ±0,40* 2.0 ±0,15* 1.5 ±0.09*

Подтверждением антирадикального механизма послужили данные об ингибирующем влиянии фитоуросепта на кинетику индуцированной хемилюминесценции, что выражалось в уменьшение амплитуды "быстрой вспышки" в среднем в 2 раза и замедлении скорости нарастания "медленной вспышки" в среднем на 33 % по сравнению с контролем.

Исследование влияния испытуемого полиэкстракта на перекисный гемолиз эритроцитов, вызванный введением реагента Фентона, показало,

что и фитоуросепт в концентрации, соответствующей условно-терапевтической дозе оказывал выраженное мембраностабилизйрующей действие, уменьшая степень перекисного гемолиза эритроцитов в среднем в 3 раза по сравнению с контролем

Установлено, что фитоуросепт в экспериментально-терапевтической дозе (50 мг/кг) оказывает иммуномодулирующее действие как на интакт-ных животных, так и, находящихся в иммунодепрессивном состоянии. При ЛОМ показано, что введение испытуемого средства интактным животным сопровождается активацией клеточного и макрофагального звена иммунной системы, тогда как его курсовое введение на фоне азатиприновой им-муносупрессии оказывает стимулирующее влияние, как на клеточный, так и гуморальный иммунный ответ организма В частности, введение фито-уросепта интактным мышам в концентрациях, соответствующих экспериментально-терапевтическим дозам, обусловливает увеличение индекса реакции гиперчувствительности замедленного типа в 1,4 раза, а фагоцитарной активности полиморфноядерных лейкоцитов - на 27 % по сравнению с аналогичными показателями интактных животных. При курсовом введении испытуемого средства на фоне азатиоприновой иммуносупрес-сии отмечается стимуляция клеточноопосредованной и гуморальной иммунной реакции, что выражалось в увеличении индекса реакции гиперчувствительности замедленного типа в 2,8 раза, а также количества антитело-образующих клеток как в абсолютных, так и в относительных значениях в среднем в 1,6 раз относительно контроля.

Для подтверждения наличия неспецифическою действия фитоуросеп-та были проведены опыты по определению антистрессорной активности. Показано, что его введение в экспериментально-терапевтической дозе на фоне иммобилизационного стресса уменьшало выраженность «триады Селье», препятствуя развитию катаболических изменений во внутренних органах белых крыс, что свидетельствует о способности испытуемого фи-гоэкстракта повышать неспецифическую резистентность организма. Так, у животных опытной группы отмечалось уменьшение выраженности инволюции тимуса и в меньшей степени - гипертрофии надпочечников. Наиболее четко антистрессорное действие фитоуросепта проявилось в его способности задерживать развитие деструктивных поражений в слизистой оболочке желудка на стадии возникновения точечных кровоизлияний, препятствуя развитию более крупных деструкций в виде эрозий и полосо-видных язв.

Установлено также, что испытуемое средство стимулирует процессы синтеза белка, так его курсовое введение животным в дозе 50 мг/кг на фоне односторонней нефрэктомии сопровождалось увеличением массы оставшейся почки, обусловленное повышением в ней концентрации нуклеи-

новых кислот и общего белка, что свидетельствует о стимуляции синтетических процессов и развитии компенсаторной гипертрофии оставшеюся органа Фитоуросепт в экспериментально-терапевтической дозе оказывает спазмолитическое и гипокоагуляционное действие, что также вносит определенный вклад в реализацию его нефропротеторной активности.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, полученные в работе данные свидетельствуют, что фитоуросепт обладает широким спектром фармакологической активности. Испытуемое средство оказывает антибактериальное, противовоспалительное, иммуномодулирующее, мочегонное, гипоазотемическое, спазмолитическое, гипокоагуляционное, сосудоукрепляющее, антистрессорное, мем-браностабилйзирующее, антиоксидантное действие. Испытуемое средство проявляет синергизм с полусинтетическими пенициллинами, аминоглико-зидами и цефалоспоринами по отношению к уропатогенным бактериям

Исследование фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта показало, что его курсовое введение в экспериментально-терапевтической дозе на фоне колибациллярного пиелонефрита сопровождается уменьшением инфицированности органов мочевыделительной системы, что обеспечивает сохранность функциональной состоятельности почек лабораторных животных. При нефропатиях ишемической и токсической этиологии испытуемое средство оказывало выраженное нефропротекторное действие, характеризующееся нормализацией функционального состояния почек на более ранних сроках патологического процесса. В частности, на фоне введения испытуемого фитоэкстракта повышалась депурационная, диуретическая, салуретическая функции почек и СКФ, снижалась протеинурия.

Полученные в работе данные свидетельствуют, что в реализации неф-ропротекторной активности растительного средства участвуют как базисные ренальные факторы, так и экстраренальные фармакологические эффекты, такие как противовоспалительный, иммуномодулирующий, спазмолитический, гипокоагуляционный, а также его способность повышать неспецифическую резистентность организма.

Установлено, что наиболее важным аспектом механизма нефропро-текторного действия фитоуросепта является наличие базисной мембрано-стабилизирующей активности, реализация которой связана с антиокси-дантным действием комплекса фенольных соединений, а также активацией энергетического обмена клеток. В свою очередь, механизм антиоксидант-ной активности фитоуросепта обусловлен как непосредственным радикал-перехватывающим действием биофлавоноидных соединений, так и опо-

средованным, связанным с активацией системы антиоксидантной защиты организма.

Полученные данные о выраженной уросептической активности фито-уросепта позволяют рекомендовать его для применения в комплексной фармакотерапии заболеваний почек инфекционной этиологии, с целью повышения эффективности базисной химиотерапии, а также для профилактики рецидивов заболевания.

ВЫВОДЫ

1. Фитоуросепт обладает широким спектром фармакологической активности: антибактериальной, противовоспалительной, иммуномодули-рующей; стимулирует функциональную активность почек; стимулирует процессы регенерации; повышает неспецифическую резистентность организма; стимулирует энергетический обмен клеток; оказывает антирадикальное действие, повышает активность антиоксидантной защиты организма;

2. фитоуросепт проявляет синергизм с полусинтетическими пени-циллинами, аминогликозидами и цефалоспоринами по отношению к уро-патогенным бактериям;

3. курсовое введение фитоуросепта на фоне повреждений почек инфекционной, ишемической и токсической этиологии сопровождается нормализацией морфофункционального состояния почек на более ранних сроках патологического процесса;

4. механизмы нефропротекторного действия фитоуросепта обеспечиваются наличием базисной мембраносгабилизирующей активности, реализация которой связана с ингибированием процессов свободнорадикаль-ного окисления, повышением активности системы антиоксидантной защиты и энергетического обмена клеток.

ВНЕДРЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ В ПРАКТИКУ,

1. Фитоуросепт в виде растительного сбора разрешен к применению в виде биологически активной добавки к пище «Чай «Байкальский-6» (№

2. Нормативная документация в виде отчетов по доклиническим испытаниям фитоуросепта, технических условий и регламентов на получение сухого экстракта, направлены в Фармакологический комитет РФ для рассмотрения вопроса о промышленном выпуске указанного средства на

предприятиях химико-фармацевтической промышленности и разрешения применения его в клинической практике.

3. Материалы диссертационной работы используются в процессе преподавания курсов фармакологии, клинической фармакологии, фитотерапии и традиционной медицины на кафедрах медицинского факультета Бурятского государственного университета МО РФ.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Шантанова Л.Н., Мондодоев А.Г., Башкуева Ю.Л., Югдурова Е.Д., Николаева Г.Г. Противовоспалительная активность средства растительного происхождения //Вестник БГУ. Серия 11. Медицина. -2004. - Вып. 4. -С.64-71.

2. Башкуева Ю Л., Хобракова В.Б., Шантанова Л.Н., Мондодоев А.Г. Иммуномодулирующие свойства сухого экстракта //Забайкальский медицинский вестник. -2004. -№4. -С.37-40.

3. Башкуева Ю.Л., Шантанова Л.Н., Мондодоев А.Г., Гончикова С.Ч., Николаева Г.Г., Бардаханова О.А., Ербахаева А.А. Разработка и антибактериальные свойства нового уросептического средства // Забайкальский медицинский вестник. -2004. -№4. -С.15-18.

4. Югдурова Е.Д, Николаева Г.Г., Маркарян А.А., Даргаева Т.Д., На-гаслаева Л.А., Башкуева Ю.Л., Мондодоев А.Г. Стандартизация сухого экстракта «Байкальский-6» //VI Симпозиум по фенольным соединениям. -М, 2004.-С. 110.

5. Югдурова Е.Д., Николаева Г.Г., Даргаева Т.Д., Николаев С.М., Башкуева Ю.Л., Маркарян А.А. Разработка способа получения сухого экстракт/Сибирский медицинский журн. -2004. -№5. -С.52-54.

6. Башкуева Ю.Л., Эрдынеев Ю.Б., Бутуханова И.С., Бураева Л.Б. Влияние растительного средства на систему свертывания крови //Развитие традиционной медицины в России. -Улан-Удэ, 2004. -С.47-48.

7. Башкуева Ю.Л., Гончикова С.Ч., Мондодоев А.Г, Шантанова Л.Л. Антибактериальные свойства нового уросептического средства //Там же. -C.80-8I.

8. Башкуева Ю.Л., Шантанова Л.Н., Мондодоев А.Г, Маркарян А.А., Даргаева Т.Д. Механизмы антибактериальной активности «фитоуросепта» //Там же.-С.82-84.

9. Башкуева Ю.Л., Эрдынеев Ю.Б., Бутуханова И.С., Бураева Л.Б, Мэрдыгеева А.К., Максаров B.C. Влияние растительного средства на систему свертывания крови //Там же. - С.91 -92.

Подписано в печать 18.01.2005. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Объем 1,3 печ. л. Тираж 100.3аказ № 5.

Отпечатано в типографии Изд-ва БНЦ СО РАН 670047 г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6.

' г

1

■ с

* * t

•л f v

п map m

s y

Актуальность темы. Актуальность повышения эффективности фармакотерапии заболеваний почек определяется их широкой распространенностью и наблюдающейся тенденцией к росту. По статистическим данным в России за 1995 год на 100 тыс. взрослого населения приходилось 5351,7 больных с заболеваниями мочевыделительной системы, а за 2000 г. - 8794,5 (Здоровье населения ., 1995; 2000). В общей структуре нефрологической патологии наибольший удельный вес занимают заболевания инфекционной этиологии, из которых наиболее значимыми являются циститы и пиелонефриты (Та-реева, 2000). Так, пиелонефрит по частоте возникновения занимает второе место после респираторных заболеваний (Пытель, 1997; Лопаткин, 1999), а циститы ежегодно выявляются у 15-20 тыс. из 1 млн. человек (Лоран, 1999).

Основным методом лечения инфекционных заболеваний мочевыводя-щих путей является адекватная антибактериальная терапия. В настоящее время для лечения циститов и пиелонефритов используют достаточно большое количество антибактериальных препаратов, из которых наиболее эффективными являются цефалоспорины третьего и четвертого поколений, ингибитор-защищенные пенициллины, современные аминогликозиды, фторхинолоны (Лопаткин, Деревянко, 1997). Вместе с этим, несмотря на высокую эффективность базисной антибактериальной терапии, при ее курсовом применении отмечается развитие ряда негативных побочных явлений: гастро- и гепатотокси-ческих реакций, нарушений иммунного статуса организма в виде аллергических реакции или иммунодепрессивных состояний и др. Среди побочных эффектов антибактериальной терапии наиболее значимой является нефроток-сичность многих антибактериальных препаратов, усугубляющая течение основного инфекционного процесса. Кроме того, при длительной антибактериальной терапии у пациентов развивается устойчивость патогенной микрофлоры к антибактериальным препаратам (Остапчук, 1991; Ушкалова и соавт., 2002). В этой связи актуальной проблемой остается разработка эффективных не оказывающих побочного действия уросептических средств, обладающих одновременной и нефропрртекторной активностью.

Одним из рациональных подходов к решению этой проблемы является применение препаратов растительного происхождения, имеющих ряд преимуществ перед химиопрепаратами: поливалентность действия, низкая токсичность, отсутствие негативных побочных эффектов при длительном приеме. Назначение фитотерапии целесообразно для лечения не осложненных инфекций органов мочевыделительного тракта, а также в период ремиссии с целью профилактики рецидивов заболевания.

Нами разработано новое уросептическое средство на основе широко применяемых в нефроуродогической практике растений, условно названное «фитоуросепт». «Фитоуросепт» представляет собой сухой экстракт из следующих видов растительного сырья: побегов толокнянки обыкновенной (Агс-tostaphylos uva ursi L.), листа брусники обыкновенной (Vaccinium vitis idaea L.), травы горца птичьего (Polygonum aviculare L.), цветков календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), листа крапивы двудомной (Urtica dioica L.).

Указанная композиция ингредиентов, входящих в состав фитоуросепта, составлена с учетом сложных патогенетических механизмов нефропатий различной этиологии. В частности, при выборе оптимального варианта рекомендуемой композиции сбора* были учтены основные причины развития нарушений функциональной состоятельности почек, приводящих к развитию гиперазотемии, олиго- и анурии, нарушению электролитного и кислотно-основного баланса и др. В связи с этим, на основании данных литературы и собственных исследований, в состав испытуемого средства были включены растения, обладающие антимикробными (толокнянка, брусника, календула), противовоспалительными (календула, крапива, горец, толокнянка), иммуномодулирующи-ми (горец, крапива, календула), гипоазотемическими (горец, толокнянка, брусника), мочегонными (толокнянка, брусника), мембраностабилизирующи-ми (толокнянка, горец, крапива), антиоксидантными (календула, толокнянка, горец) свойствами.

Фитуросепт содержит биологически активные вещества, относящиеся к различным классам химических соединений: апигенин, лютеолин, кверци-тин, рутин, гиперозид, мирицетин, фенолкарбоновые кислоты: хлорогеновая, галловая; фенологликозид: арбутин (Югдурова и соавт., 2003; Югдурова, 2004). Основным действующим началом фитоуросепта является полифеноль-ный комплекс. Стандартизация фитоэкстракта осуществляется по сумме фла-воноидов и фенологликозидов в пересчете на рутин и арбутин (Югдурова и соавт., 2004 а; Югдурова и соавт., 2004 б).

Цель исследования. Целью настоящей работы явилось определение фармакологической активности и фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта при повреждениях почек различной этиологии, а также выявление возможных механизмов его нефропротекторного действия.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:

- определить основные фармакологические свойства фитоуросепта;

- оценить фармакотерапевтическую эффективность фитоуросепта при нефропатиях инфекционной, ишемической и токсической этиологии;

- выявить особенности механизма нефропротекторного действия фитоуросепта.

Научная новизна. Работа представляет собой экспериментальное исследование фармакологической активности и фармакотерапевтической эффективности нового средства растительного происхождения «фитоуросепта», обладающего уросептической и нефропротекторной активностью. Установлено, что фитоуросепт обладает широким спектром фармакологической активности: антибактериальной, противовоспалительной, иммуномодулирую-щей, мочегонной, гипоазотемической; стимулирует процессы регенерации; обладает спазмолитическим, гипокоагуляционным, сосудоукрепляющим, мембраностабилизирующим действием, повышает неспецифическую резистентность организма; стимулирует энергетический обмен клеток; оказывает антирадикальное действие, повышает активность антиоксидантной защиты организма.

Испытуемое средство проявляет синергизм с полусинтетическими пе-нициллинами, аминогликозидами и цефалоспоринами по отношению к уропатогенным бактериям.

Показано, что курсовое введение фитоуросепта в экспериментально-терапевтической дозе, составляющей 50 мг/кг, на фоне нефропатий инфекционной, ишемической и токсической этиологии оказывает выраженное фарма-котерапевтическое действие, способствуя нормализации функционального состояния почек животных на более ранних сроках патологического процесса.

Установлено, что одним из основных аспектов уросептического и нефропротекторного действия испытуемого фитоэкстракта является активация макрофагального звена иммунитета, а также наличие базисной мембра-ностабилизирующей активности, реализация которой связана с антиокси-дантным действием комплекса фенольных соединений, обусловленного, как непосредственным радикалперехватывающим действием, так и опосредованным, связанным с повышением активности системы антиоксидантной защиты организма.

Практическая значимость. Материалы исследований фармакологической активности, фармакотерапевтической эффективности и безопасности фитоуросепта включены в отчет по его доклиническому изучению и явились основой для разрешения применил его в клинической практике в качестве биологически активной добавки к пище «Чай «Байкальский-6» (регистрационное удостоверение № 005463.Р.643.06.2003).

Материалы диссертационной работы используются в процессе преподавания курсов фармакологии, клинической фармакологии, фитотерапии и традиционной медицины на кафедрах медицинского факультета Бурятского государственного университета МО РФ.

Работа выполнена на кафедре фармакологии и традиционной медицины медицинского факультета Бурятского государственного университета МО

РФ в соответствии с программой «Создание информационного банка данных по тибетской медицине и разработка новых лекарственных препаратов» (№ гос. регистрации 01.9.400031.83), утвержденной 06.12.95 г.

ВЫВОДЫ

1. Фитоуросепт обладает широким спектром фармакологической активности: антибактериальной, противовоспалительной, иммуномодулирующей; стимулирует функциональную активность почек; стимулирует процессы регенерации; повышает неспецифическую резистентность организма; стимулирует энергетический обмен клеток; оказывает антирадикальное действие, повышает активность антиоксидантной защиты организма;

2. Фитоуросепт проявляет; синергизм с полусинтетическими пенициллинами, аминогликозидами и цефалоспоринами по отношению к уропатогенным бактериям;

3. Курсовое введение фитоуросепта на фоне повреждений почек инфекционной, ишемической и токсической этиологии сопровождается нормализацией функционального состояния почек на более ранних сроках патологического процесса;

4. Механизмы нефропротекторного действия фитоуросепта обеспечиваются наличием базисной мембраностабилизирующей активности, реализация которой связана с ингибированием процессов свободнорадикального окисления, повышением активности системы антиоксидантной защиты и энергетического обмена клеток.

ВНЕДРЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ В ПРАКТИКУ

1. Фитоуросепт в виде растительного сбора разрешен к применению в виде биологически активной добавки к пище «Чай «Байкальский-6» (№ 005463.3.643.06.2003).

2. Нормативная документация в виде отчетов по доклиническим испытаниям фитоуросепта, технических условий и регламентов на получение сухого экстракта, направлены в Фармакологический комитет РФ для рассмотрения вопроса о промышленном выпуске указанного средства на предприятиях химико-фармацевтической промышленности и разрешения применения его в клинической практике.

3. Материалы диссертационной работы используются в процессе преподавания курсов фармакологии, клинической фармакологии, фитотерапии и традиционной медицины на кафедрах медицинского факультета Бурятского государственного университета МО РФ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, полученные в работе данные свидетельствуют, что фитоуросепт обладает широким спектром фармакологической активности. Испытуемое средство оказывает антибактериальное, противовоспалительное, иммуномодулирующее, мочегонное, гипоазотемическое, спазмолитическое, гипокоагуляционное, сосудоукрепляющее, антистрессорное, мембра-ностабилизирующее, антиоксидантное действие. Испытуемое средство проявляет синергизм с полусинтетическими пенициллинами, аминогликозида-ми и цефалоспоринами по отношению к уропатогенным бактериям.

Исследование фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта показало, что его курсовое введение в экспериментально-терапевтической дозе на фоне колибациллярного пиелонефрита сопровождается уменьшением инфицированности органов мочевыделительной системы, что обеспечивает сохранность функциональной состоятельности почек лабораторных животных. При нефропатиях ишемической и токсической этиологии испытуемое средство оказывало выраженное нефропротекторное действие, характеризующееся нормализацией функционального состояния почек на более ранних сроках патологического процесса. В частности, на фоне введения испытуемого фитоэкстракта повышалась депурационная, диуретическая, салуретическая функции почек и СКФ, снижалась протеинурия.

Полученные в работе данные свидетельствуют, что в реализации неф-ропротекторной активности растительного средства участвуют как базисные ренальные факторы, так и экстраренальные фармакологические эффекты, такие как противовоспалительный, иммуномодулирующий, спазмолитический, гипокоагуляционный, а также его способность повышать неспецифическую резистентность организма.

Установлено, что наиболее важным аспектом механизма нефропро-текторного действия фитоуросепта является наличие базисной мембраноста-билизирующей активности, реализация которой связана с антиоксидантным действием комплекса фенольных соединений, а также активацией энергетического обмена клеток. В свою очередь, механизм антиоксидантной активности фитоуросепта обусловлен как непосредственным радикалперехватываю-щим действием биофлавоноидных соединений, так и опосредованным, связанным с активацией системы антиоксидантной защиты организма.

Полученные данные о выраженной уросептической активности фитоуросепта, синергизме с антибиотиками, а также его нефропротекторного действия аргументируют целесообразность его внедрения в клиническую практику для применения в комплексной фармакотерапии заболеваний почек инфекционной этиологии с целью повышения эффективности базисной химиотерапии за счет снижения доз антибиотиков, а также для профилактики рецидивов заболевания.