Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Фармакологическая коррекция образования антиидиосимпатических антител, взаимодействующих с рецепторами серотонина

■ВСЕРОССИЙСКИЙ НОЧНЫЙ ЦЕНТР ПО БЕЗОПАСНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

"" 5 ОД

(1 A/iP isoj На правах рукописи

УДК 615.212.7.015.6:612.017.1

РОГОЖИНА Анна Тихоновна

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ ОБРАЗОВАНИЯ АНГШШОГИШЧЕСНИХ АНТИТЕЛ, взАшдаютвэтхщ с РЕЦЕПТОРАМИ СЕРОТОНИНА

(14.00.25 - фармакология)

Автореферат диссертации на соискание ученой стелена • кандидата биолопиеских наук

Старая Купавна - 1996

)

Работа выполнена во Всероссийском научном центре по безопасности биологически активных веществ

Научний руководитель: - кандидат биологических наук, ; р.г. азизов

Официальные оппоненты: - доктор медицинских наук, . профессор И.Е. Ковалев; кандидат биологических наук, С.Е. Меткалова

Ведущая организация: - Московская Медицинская Академия •» ' им. И.М. Сеченова

' - '- Завдта диссертации состоится " " 1995г в . часов

на заседании специализированного совета Д 098.01.02 Всероссийского научного центра по безопасности биологически активных ве- • деств по адресу: пос. Старая Купавна, ул. Кирова, д. 23. _

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан " " 1995г.

Ученый секретарь ■специализированного совета,

кандидат'биологических наук Т.Н. Робакадзе

Актуальность проблены. В настоящее время установлено, что аутоиммунные поражения ткани мозга сопутствуют ряду наиболее распространениях нервно-психических . заболеваний и, возможно, имеют решающее значение в их патогенезе. Наличие высоких титров "зити мозговых" аутоантител в крови • обнаружено при шизофрении (Семенов С.Ф., Семенова К.А., 1986; Gánguil R. et al, 1987; Muller N. et al., 1987), миастении (Itndstrom I.K. et al., 1976), рассеянном склерозе (Ткаченко E.B., 1990; Pirtillo f. et al.,

1987), эпилепсии (Полетаев А.Б. и др., 1985; SolImana н. et al.,

1988), аутизме Wodd R.D., Ciaranello R.D., 1985), 60Л93НИ Паркинсона (Зайченко А.Г. и др., 1981) и др.

В настоящее время проводятся интенсивные исследования роли иммунных реакций в патогенезе нервно-психических заболеваний. Следует также отметить, что при ряде психических заболеваний человека имеет место нарушение обмена серотонина: маниакально-депрессивных психозах (Сорреп А.', 1973), аутизме (Anderaon O.K. et al., 1990), эпилепсии (Мелдру М.Б.. 1982), болезни АльцгеЯме- • ра (Whitford о.м., 1986), болезни Паркинсона . (Horäykiewioz О, 1972) и др. Поэтому, не исключено, что синтез антител к'серото-,нину и его рецепторам может иметь патогенетическое значение при указанных выше заболеваниях.

В связи с этим, представляется целесообразным использование • иммуномодулирующих средств для коррекции нарушенной функции ^иммунной системы.

На сегодняшний день эффективность иммуномодулирувдей терапии нервно-психических заболеваний невелика. Это объясняется, во-первых, слабой изученностью механизме» патогенеза этих заболеваний.

и, во-вторых, недостатком лекарственных средств с необходимым уровнем и спектром активности.

Поэтому, создание экспериментальных моделей аутоиммунных заболеваний является важным звеном для изучения патогенеза соответствующих заболеваний и для получения новых эффективных средств ' их терапии.

Цель и задачи исследования Основное направление данной работы заключалось в изучении возможности использования иммуномодулято-ров для коррекции патологических состояний нервной системы, свя- • занных с аутоиммунными реакциями. В связи с этим, в цель работы . входило создание экспериментальной модели, характеризующейся образованием антиидиотипических антител к антисеротониновым антителам, взаимодействующих с рецепторами серотонина. • • Достижение поставленных целей потребовало решения следующих задач:

1. разработать метод синтеза коныогированных антигенов серотонина с белком для получения антисеротониновых антител; изучить и отра-

- ботатъ условия получения этих антител (динамика образования," сда-цифачность);

2. отработать условия получения антиидиотипических внтител к анти-. серотониновнм антителам;

3. изучить способность антиидиотипических антител взаимодействовать с рецепторами серотонина на "»омбоцитах и изолированной подвздошной кишке морских свинок;

• 4. разработать метод определения антиидиотипических антител в сы-: воротках хивотных;

5. изучить влияние антиидиотипических антител на ориентировочно-

двигательные реакции животных;

6. изучить влияние иммуномодуляторов циклофосфана и тимоптина на ■ образование антиидаотшшческих. антител и поведение животных;

Научная новизна работы Впервые на основе идиотип-антиЩщо-типического взаимодействия-получены антитела, реагирующие с рецепторами серотонина.

Установлено, что образование антиидиотнпических антител, взаимодействующих с рецепторами серотонина, сопровокдается подавлением двигательной активности животных.

Показана возможность коррекции нарушенной двигательной активности с помощью иммуномодуляторов циклофосфана игшоптина, подавляющих синтез антиидиотипических антител, взаимодействующих с рецепторами серотонина.

Практическая значимость работы Полученная модель образования антиидаотипических антител, взаимодействующих с рецепторами серотонина, может использоваться' для отбора фармакологических; средств коррекции аутоиммунных реакций.

' Апробация работы Основные результаты работы были долояейы на конф. мол. ученых ВНЦ БАВ, Купавна (1992,1993,1994);' на Все-рртной конференции "Актуальные проблемы создания новых- лекарственных средств", (1992); на заседании отдела фармакологии ВЩ БАВ, (1995). '

Публикации По теме диссертации' опубликовано 6 научных работ.

Объем и структура диссертации Диссертационная работа изложена на 133 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования,'результатов собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, вы-

• . . 6 :

водов и списка литературы. В список литература включены 208 ис-точщпгав (68 отечественных и 140 зарубеишх).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ I. Материала и метода исследования

Эксперименты проводили на нелинейных кроликах-самцах массой 2-2.5 кг и мышах-самцах, гибридах первого поколения (CBAX057BL). Животных иммунизировали соответствующим антигеном подкожно в несколько точек дозой I мг/кг (по белку) для кроликов и 100 мкг/кг для-мышей с полным адьювантом Фрейнда при первой иммунизации и неполным адьювантом фрейнда при второй иммунизации. Все последующие ре иммунизации проводили в Зизиол. растворе. Первые иммунизации повторяли в течение месяца с недельным интервалом,' а затем с интервалом, равным 30 дней.

Синтез ' коныогата серотонин-белок осуществляли по методу . Ревкаг В. (1973) с небольшими модификациями.' Для определения 'количества молекул серотошша, связавшихся с молекулой белкового' носителя, использовали радаоизотопный метод с [3Н ] - серотонином и спектрофотометричвский метод по молярным коэффициентам экстинк-ции в ультрафиолетовой области.

Определение содержания антител к серотонину проводили непрямым иммуноферментным анализом (ИФА), где в качестве первого слоя .использовали серотонкн, коныагированный с желатином. ' Относительную специфичность антисеротониновых антител определяли конкурентным ИФА. Для этого синтензировали коныогаты структурных аналогов

еротонина триптофана я тирамина о желатином реакцией азосочета- ' ия (Peskàr в., 1973) н конызгаты серотонина, дофвиина в гистами-а с желатином глутарэльдегидным методом (Gaffard П., 1984).

Для определения антиядаотипических антител к внтисеротонйно-т антителам (АиА к АТсерот) использовали конкурентный ЩА: I ) с нтисеротониновнми антителами, сорбированными на твердой фазе; 2) '. антигеном (серотонин-желатин), сорбированным на твердой фазе.

Связывание АиА к АТсерот с саротонияовыми рецепторами тром-оцитов определяли ИФА с использованием серотонина в качестве энкурента.

Физиологическую активность АиА к АТсерот изучали в экспери-. 5HT9 по сокращению изолированной подвздошной кишки морской евин-I (Блаттнер Р. и др., 1963).

Ориентировочно-двигательные реакции (ОДР) животных оценивали тесте "открытое поле" (Hall O.S., 1934).

Результаты всех исследований обрабатывали статистически ö пользованием t-критерия Стьвдента. - .

2. Основные результата исследования '

2.1. Индукция антителообразования к серотониновым рецепторам

Разработка экспериментальных моделей различных патология ищется основой для доклинического выявления эффективных средств фапии. Учитывая то, что в патогенезе ряда заболевашй опреде->нную роль играет образование аутоантител к рецепторам, была еде-

• . , 8

лдна попытка индуцировать иммунореактивность к рецепторам серотонина. у экспериментальных животных.

Поскольку выделение серогониновых рецепторов представляет определенные трудности, в основу подхода для получения антител к этим ' рецепторам нами был положен принцип «Terne N.K. (1974). АиА к АГсер, в соответствие с этой теорией, могут рассматриваться как "внутренний образ" антигена - в нашем случае, серотонина, и, следовательно, должны реагировать со специфическими рецепторами к се-ротонину.

Первым этапом на пути получения антиидиотипических антител

к антисеротониновым антителам (АиА к АТсер) является индукция ?

высокоспецйфочшх "первых" антител к нейромедиатору серотонину.

ДЛя этого были синтезированы коньюгаты серотонина с Bsa и желатином по методу Peekar в.

HOj^N—-»CHg - СНг - NHg БЕДОК - СО - Ш = H L ]i у

- Полученный нами конызгат содержал '6-8 молекул серотонина на одну молекулу носителя и обладал достаточной иммуногенностью. -Посла, трех иммунизация в сыворотках кроликов появлялись антитела к серотонину в высоких титрах..

» * ? 1

. Для определения специфичности полученных антисеротониновых антител были синтезированы коньюгаты структурных аналогов серо- т?яина - дофамина, гистамина, тирамина, триптофана с желатином разным»! способами ковалентного связывания: через ароматическое кольцо - реакцией азосочетання, через аминогруппу - глутаральде-

гидам методом. Определение велось конкурентны* ИФА.

На рис I представлены кривые конкуренции полученных антисе-ротониновых антител и синтезированных коньюгатов за коньюгирован-ный серотонин, прикрепленный к подложке. • • '■ -

Антисеротониновне антитела бши сгоцифгшы только к серото-нину, конызгированному с альбумином и желатином реакцией азосоче-четания (константа 50* ингибировашш составила 5Ч0-7 М н 5ЧО"6 Н, соответственно), но не к серотонину, связанному с желатином . глутаральдегадным методом. Следовательно, полученные антитела специфичны к части молекулы серотонина, противоположной месту его связывания с носителем.

Таким образом, при иммунизации кроликов коньпгированннм серо тонином были получены сыворотки с внсокоспецифичннми антителами к серотонину. Общую Х^-фракцию таких сывороток использовали в дальнейшей работе для получения АиА к АТсер.

Через семь месяцев после начала иммунизации 1е-фракцией, содержащей антитела к серотонину и регулярных циклов рекмнуниза- - . ций,' в сыворотках кроликов обнаружит появление АйА к АТсер. "

Для доказательства способности АиА к АТсер взаимодействовать (с! рецепторами серотонина использовали два метода.

Первый метод заключался в определении их специфического связывания с мембранами тромбоцитов, нэсущими, как известно, серо-тониновые рецепторы.

Определение проводилось непрямым ИФА с цельными тромооцитар-ными клетками, прикрепленными к подложке 96-луночных шшшетов. Было показано, что сыворотки, содержащие АиА к АГсер, обладали наибольшей связывавдей способностью с поверхностью тромбоцитов

вяяюго -гэрототша, сорбированного нв подложке и*: В£ рВД-серот (I); жел-рОД-серо'г (2); ВБА (э); жел-рФД-тирамии (4); жел-рФД-трштофан (6); жел-гл-сорот (6) жел-гл-дофемин <7); «вл-гл-гасгамин (8); кел-гл (?) жел-рад (10). Антисеротониновые сыворотки о разведе-1 нии 1:100. По оси срдинат - В/В,- - &4дг 0 конкуренте Е4Э2 без конкурента.

по сравнению о сыворотками неим^ннзированннх животных и сыворотками, содержащими антитела к серотонину.

Кроме того, в условиях данного эксперимента исследовали способность серотонина конкурировать с АиА к АТсерот за активный центр рецептора. Было установлено, что серотонин, взятий в избытке, ингибирует данную реакцию на 10056 (рис 3).

Другой метод для доказательства взаимодействия АиА к АТсер с рецепторами серотонина заключался в определении их способности имитировать действие лиганда. Поскольку одним из основных свойств серотонина является сокращение гладких мышц, была использована • изолированная подвздошная кишка морской свинки для определения • способности АиА к АТсер вызывать гладкомыиечные сокращения, при . взаимодействии с рецепторами серотонина.

Было показано сокращение кишки под влиянием 1в-фракций, содержащих АиА к АТсер (зависимость амплитуда сохрацэшя от количества добавленных антител показана на рис 2). 1§-фракции' сывороток неиммунизированннх животных и животных, содержащих антитола к серотонину, не обладали подобным действием. Гало-' " перядол - блокатор сэротовшошх и дофашшошх рецепторов, в концентрации 100 нМ/л, полность» подавляет эффект АкА к АТсер. Так как подвздовшая кишка практически не реагирует на агонистн дофаминовых рецепторов, г,южно считать, что аффект АиА к АТсер. опосредован стимуляцией серотониновых рецепторов.

Полученные результаты свидетельствуют о наличии в сыворотках кроликов, иммунизированных антителами к серотонину, АиА. к АТсер, специфически взаимодействующих с рецепторами серотонина.

Для выбора удобного и чувствительного метода выявления АиА к

Поглощение при 492 ям

Антитела к серотонину

Коньюгиро-ввнный се-ротонин

связывание с серотоиином

связывание без серото-нина

Физиол. раствор

Рис 3. Ингибирование серотонином реакции связывания АиА к АТсерот с тромбоцитами.

,По оси абсцисс - антиген, используемый при иммунизации кивотннх; по оси ординат - поглощение при 492 нм (ИФА). Разведение сывороток 1:10.

Рис 2. Зависимость сокращения подвздошное кишки морской свинки от количества добавленных антител. По оси абсцисс - количество добавленных антител в мг; по оси ординат - сокращение кишки под действием АиА к Атсорот - щ ; антител к серотонину - S3 ; интакт-шх тавотных - gg в процентах к сокращению, производимому ГО-5 М серотонина. ' -

АТсер, проводили сравнение конкурентного ИФА, в котором антисеро-тониновые антитела прикрепляются к подложке, а находящиеся в растворе АиА к АТсер и серотонш конкурируют меадг собой.за связывание с антисеротониновыми антителами, и конкурентного И8А, в кото-

'14

РО« к подложке прикрепляется коныогарованный серотонин, а находя-циеса в растворе АиА к АТсер тормозят связывание антисеротонино-вых антител с прикрепленным серотошном. Установлено, что оба этих метода могут быть использованы для выявления АиА к АТсер в неочищенных ^-фракциях сывороток.

2.2. Аутоантитела к рецепторам серотонина и поведение

Эксперименты по изучению влияния антител к рецепторам на поведение животных проводили на мышах, гибридах первого поколения 'СВАхС57вь. Животных разбивали на 4 'группы: I группе - контрольная, которой вместо антигена вводили ' физиол. раствор; • .

•2 -группа - .включает животных, у которых индуцировано образование антител к серотонину при введении коныогированного серотонина;

3 груша - контрольная, содержащая антитела к. интактшх животных;

4 группа - включает' животных, у которых индуцировано образование АиА к АТсер, реагирующее с серотошшовыми рецепторами.

В течение всего эксперимента у мышей определяли ориентиро-вочцо-двигательше реакции в тесте "открытое поле".

. В первые 4 мес эксперимента выявлено снижение двигательной активности во всех грушах животных по отношению к группе неимму-низированных мшей вне зависимости от типа антигена, что свидетельствует о неспецге£ическом влиянии иммунизации на двигательную активность.

Однако,-через ? мес после начала иммунизации у группы мы-

шва, содвркащэй АиА к АТсер, наблюдалось дальнейаее снижение двигательной активности (в 2.2-3.2 раза по сравнению с группой неим-' мунизированных животных), в то время как у других групп животных этот показатель сравнялся с контролем, несмотря на наличие в гр. Ш 2 антител к серотонину.

Таблица I.

Активность мышей в тесте "открытое поле" через семь месяцев после начала иммунизации.

Антиген Количество Количество ■ Количество пересечений стоек дефекаций

фнз. раств. 27,4 - 5,8 4,3 - 1,6

коныэгиро-ванный се-

Экспери- Р°тошш мент I

интакт-ных животных

антитела к' серотонину

23,1 - 4,2 3,2 ± 1,2

п=100

1,3 ± 0,5 1,6 ± 0,6

26,9 ± 3,6 Г,4 - 0,7 1,4 ± 1,4

12,6 - 3,3* 1,2 - 0,8 1,4 0,5

физ. раств.

коныогиро-ванный се-Экспери- ротонин мент 2

п=иоо 18 интакт-00 них животных

16,9 * 3,3 0,2 ± 0,1 1,4 - 0,3

15,2 ± 4,2 0,5 ± 0,3 . 1.0 1 0,1

9,7 ± 2,4 . 0,2 ± 0,1 1,2 ± 0,4

антитела к серотонину 6,2 ± 1,2**. 0,1 + о.х 1.5 ± 0,3

фи. раств. 39,7 ± 5,4 3,8 + 0,8 ■ 2.1 ±0,4

Эксперимент 3 п=120 коныогиро-вэнный се-ротонин интакт-ных животных 34,0 ± 3,4 30,6 ± 3,3 2,6 •2,4 + + 0,5 0,5 1.9 1,3 ±0,4 - 0,3

антитела к серотонину 16,4 ± 3,1*** 0.7 + 0.3*** 1,4 ± 0,4

Здесь и далее статистически достоверное отклонение по сравнению с контролем: {*) - Pt < 0.05, (*») - pt < 0.01, (»»*) - pt < 0.001 ;

n - количество животных.

(!•=> баж\ гшзявнп судас-гь. Faux изменений друпи показателей ОДР.

Таким обрааои, быле показано, 'что появление в крови мышей АиА к АТсер, взаимодействующих с рецепторами сэротошша, ведэт к снижению двигательной активности, тогда.как наличие антител л ое-ротонину не влияет на их ОДР.

На основании полученных результатов можно дрел;г:о.-1ог .ть, ;;то циркулирукщэ в крови животных антитела, действуя как шгшсты, взаимодействуют с рецепторами свротошша, вызывая эффект, который наблюдается при повышенной концентрации серотонина в мозге - снижение двигательной активности (¿prison М.Н., Ferster О.В.,

1961; Costall В., Naibor R.I., 1976; Ceraon S.e., Baldessarlnl R.I., 1980; Wanderwölf G.H.et al., 1989).

Необходимо отметить, что вызванные иммунизацией антителами к серотонину изменения "в двигательной активности сохраняются в течение 2.5 месяцев, а при последующих реиммунизациях возможно продление эффекта.

2.3. Фармакологическая коррекция образования АиА к

АТсер, взаимодействующих с рецепторами серотонина

Для изучения возможности фармакологической коррекции образования аутоантител использовали мышей, у которых' индуцирован' синтез АиА к АТсер, взаимодействующих с рецепторами серотонина. Были использованы иммунотропные препараты с разной направленностью и механизмами действия на иммунную систему: цитостатик циклофосфан и модулятор активности Т-клеток - тимопткн.

2.3.1. Влияние циклофосфанв иа синтез АиА к АТсер

и поведение животных »

Циклофосфан относится к влкилируодим соединениям, механизм действия которых заключается в присоединении алкилируицих групп к ДНК и остановке деления клетки.

Циклофосфан в дозе 25 мг/кг веса тела вводили мышам 5 раз ' . через день. Известно, что в этой дозе циклофосфан действует как на В- (Буркин A.A., Лосев A.C., 1976), так и на Т.-юлетки (smith H.R. et al., 1992). ; ' •

. Через 7 дней после последней инъекции циклофосфана у мышей, ишунизированных антителами к серотонину, наблюдалось снижение титра АиА к АТсер (рнс 4).

. Так же у этой группы мышей происходило статистически значимое восстановление сниженной двигательной активности до уровня нормы (табл 2).

% торможения

60

60 .

40

'30 •

20 гяИ 1

10 ш

Ш\ 1

Оизиол.

1

- без препарата Г 1 - с препаратом

жьюгир. интакт- Антитела раствор серотонин ных мышеЯ к серотонину

Рис 4. Влияние циклофосфана на синтез АиА к АТтор. :Ео оск абсцисс - антигены, используете 1.рк .адгзции; по оси ординат - % торможения.

№ было выявлено подобного влияния циклофосфаив на контрольные группы животных.

Таким образом, снижение титров антител к серотоннновым рецепторам под влиянием циклофэсфана ведет к восстановлению нарушенной двигательной активности.

Таблица 2.

Влияние шпиюфосфана на горизонтальную двигательную активность мышей (тест "открытое поле"), иьнунизированных различными антигенами.

Антиген

Чзсло пересечений за 2 мин

Эксперимент-N I п » 100

Эксперимент н 2 п - 120

Физ. раствор

9,4 ± 4,7

+ 13.25 * 5,6

38,7 * 5,6 40,0 * 8,4

6,6 - 1,5

Коньюгироввн-

ный серотонин + 5 4-19

32,9 - 3,2 23,0 4 4,9

1в интактных животных

+

10,8 \ 5.2 7,2 ¿' 2,6

22,0 ± 3,8 19,3 ± 3,2

Антителе к - 3,0 * 0,6 13,9 - 3,2

серотонину , , .

+ 11,2 ± 3.7 . 30,3 ± 4,3

Примечание: - двигательная активность мышей без препарата ' • "+" - двигательная активность мышей с .препаратом.

2.3.2. Влияние тимоптина на синтез АЯА.к АТсер и поведение животных

Тимоптин представляет собой комплекс кислых пептидов с весом от 1000 до 15 ООО ДГ и изоэлектрической точкой 3.5-4.5, держащий 1% ^-тимозина. Показано, что тимоптин повышает'исхо сниженное содержание Т-лимфоцитов, нормализует индекс (Тилп ТсуПр ) и улучшает процессы диЗОДервнцировкр. иммунокомпетентн клеток (Беляков И.М.. и др., 1992). ■

Тимоптин вводила животным в' дозе 400 мкг/кг веса тела 5 через день. Через V дней после последней инъекции препарата е людалось снижение содержания АиА к АТсер в груше животных, мунизированннх антителами к серотонину (рис 5). В этой ке гр> тимоптин восстанавливал сниженную двигательную активность' пр тически до нормы (см. табл. 3). Тимоптин ш окагчьал подобног влияния, на животных контрольных груш.

Предполагается, что снижение содержания ала к АТсер. н лишаемое после воздействия тимоптином на животных, обусловлю его влиянием на ранние стадии 'Г-клеточного согревания, ведущю

нормализации нарушенного фенотшшческого состава Т-клеток.

Таким образом, снижение концентрации АиА в крови под влиянием тимоптяна приводят к нормализации нарушенной двигательной активности.

% торможения

60 -I 60 -40 -30 -20 -10 -

- без препарата - с препаратом

1

1

■

Я

I

1

Физиол. Конъюгиро- интакт- Антитела

раствор ванный ных живот- к

серотонин . ных серотонину

Рис Б Влияние тимопгина на синтез АиА к АТсер.

По оси абсцисс - антигены, используемые при иммунизации; по оси ординат - * торможения.

Таблица 3

Влияние гаюптнна на горизонтальную двигательную активность швей (тест "открытое поле"), вмунизированншс различными антигенами.

Антиген Число пересечений за 2 мин

• Эксперимент к I . п = 100 Эксперимент N 2 п - 120

Фаз. раствор + 9,4 - 4,7 3,2 ± 0,5 38,7 - 5,6 34,0± 4,4

Конъюгнрован- - 6,6 ± 1.5 32,9 * 3,2

ный серотодан + 4,0 * 1,1 19,4 * 1,9 **

1« интактных - 10,8 ± 5,2 22,0 - 3,8 .

животных + 11,8 ± 6,0 28,6 - 2,1

Антитела к - 3,0 ± 0.5 13,9 ± 3,2

серотонину + • 13,« ± 3,1 26,0 ± 2,2 **

Примечание: "-" ^ двигательная активность мышей без препарата;

"+" - двигательная активность мышей с препаратом;

В ребультате проведенных экспериментов был разработан метод, позволяющей индуцировать у экспериментальных животных образование, антител, специфичных к рецепторам серотонина. Появление в сыворотке таких антител ведет к изменению физиологического статуса у атих животных. Показана принципиальная возможность коррекции

указанного состояния с помощью иммуномодулирушях препаратов разнонаправленного действия.

ВЫВОДЫ.

1. Показано, что иммунизация животных антисеротониновыми антителами приводит к образованию антиидиотипических антител, взаимодействующих с рецепторами серотонина.

2. Образование антиидиотипических антител, взаимодействующих с рецепторами серотонина, приводит к снижению двигательной активности животных.

3. Появление в крови антител к серотонину не ведет к изменению двигательной активности животных.

4. Фармакологическая коррекция синтеза антиидиотипических антител, взаимодействующее с рецепторами серотонина, с помощью имму-номодулирующих препаратов циклофосфана и тнмоптина приводит к восстановлению до нормы нарушенной двигательной активности.

5. Разработанная модель может быть использована для отбора фармакологических средств коррекции аутоиммунных реакций.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

[. Рогожина А.Т. Исследование иммуноглобулинов сывороток крови животных и человека, связывающих серотонин. - Тез. докл. конф. мол. ученых ВВД БАВ, Купавна, 1992, с. 16. 5. Азизов Р.Г..Рогожина А.Т. Моделирование аутоентителообразо-вания к рецепторам серотонина. - Тез. докл. Всес. конф.

"Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств", Купавна, 1992.

3. Рогожина А.Т. Влияние антител к серотонину на поведение животных. - Гез. докл. конф. мол. ученых ВЩ БАВ, Купавна,

1993, с. 38.

4. Рогожина А.Т. Фармакологическая коррекция психофизиологически реакций, вызванных образованием аутоантител к рецепторам серотошша. - Тез. докл. конф. мол. ученых ВЩ БАВ, Купавна,

1994, с. 23. '

5. Буров D.B., Азизов .Р.Г., Давидова Л.Е., Рогожина А.Т., Меркулова Г.И. Исследование ориентировочно-двигательной реакции крыс при иммунизации коныогированными антигенами. -Вал. ВЩ БАВ, 1994, N 2 .

6. Treskov Y.G., Azizov R.G., Shelkoplyas E.Y., Rogoehina А.Т. Possible predictions of psychotropic) eifeot in patients with neurosis. - 7th. International Catecholamine Symp., Amsterdam, Abstract 664, 1Э92.