Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Фармакологическая активность адамантилзамещенных аминокислот

/7

На правах рукописи

003474544

НИКИТЧЕНКО

Елена Анатольевна

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ АДАМАНТИЛЗАМЕЩЕИНЫХ АМИНОКИСЛОТ (экспериментальное исследование)

14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Пятигорск

2009

003474544

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ярославская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Федоров Владимир Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Тюренков Иван Николаевич кандидат фармацевтических наук Арльт Аркадий Вальтерович

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертации состоится ¿'¿'/г'/лМсР 2009 г. в__ часов на

заседании диссертационного совета Д 208.069.01 при ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 357533, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Автореферат разослан <с/У» 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор фармацевтических наук, профессор

Е.В. Компанцева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время одним из основных подходов к решению задачи поиска химических соединений, обладающих выраженной биологической активностью, является синтез структур, содержащих фармако-форные группы. Этот подход позволяет прогнозировать фармакологические свойства веществ еще на стадии планирования их синтеза (Балакин К.В., 2005).

Фармакофорными фрагментами, представляющими большой интерес для исследования, являются аминокислотные остатки. Аминокислоты и их производные широко применяются в медицине благодаря своей биологической активности (Агабабян А.Г. и др., 2009; Павлов В.А. и др., 2002). Используют их и для модификации уже существующих лекарственных препаратов с целью снизить токсичность и повысить биодоступность данных средств (Ханжил В.В., 2003).

Адамантильный радикал также является фармакофорным фрагментом, который содержат в своем составе некоторые зарекомендовавшие себя лекарственные препараты. Примером таковых являются мидантан, глудантан, адапро-мин, мемантин, ремантадин и другие. Адамантильный фрагмент имеет жесткое, пространственно определенное строение и способен адсорбироваться на клеточных мембранах (Багрий Е.И., 1989). При его введении в структуру соединений увеличивается способность последних проникать через клеточные мембраны и накапливаться в определенных органах и тканях. Однако на разных примерах было показано, что в результате введения адамантильного фрагмента в структуру вещества изменяется не только его липофильность. При этом также наблюдается пролонгирование фармакологических эффектов соединений (Морозов И.С. и др., 2001), повышается их устойчивость к метаболическим превращениям в органшме и изменяется характер взаимодействия соединений с рецепторами мембран (Дуракова Л.И., 1980; Литвинов В.П.,2002; Харкевич Д.А. и др., 1983). А, следовательно, введение адамантильного фрагмента в молекулу может приводить к появлению новых видов биологической активности.

Сочетание обеих описанных выше фармакофорных групп в одном веществе интересно для доклинического исследования, так как это соединение потенциально может обладать выраженной фармакологической активностью при хорошей проницаемости через биологические мембраны. Таковыми соединениями являются изучаемые в данной диссертационной работе пять адамантилзаме-щенных аминокислот. Для проведения доклинических испытаний они были отобраны методом компьютерного скрининга, критерием которого являлся выбор веществ с лучшей мембранопроникаемостью. Адамантилзамещенные аминокислоты были получены с помощью современных и эффективных методов органического синтеза в Ярославском государственном техническом университете под руководством профессора, доктора химических наук Т.А. Обуховой (Пат. 2183620 РФ, 2002).

Цель работы. Исследование параметров острой токсичности й адаптоген-ных, иммунологических, противопаркинсонических, противовоспалительных, противоболевых и жаропонижающих свойств пяти адамантшпзамещенных аминокислот.

Задачи исследования:

1. Определить LD50 пяти адамангилзамещенных аминокислот при внутри-желудочном и внутрибрюшинном введении мышам по методике Тейтнера-Миллера и оценить их влияние на поведение крыс в условиях модели «открытое поле».

2. Исследовать антигипоксическую, акгопротекторную и стресспротектив-ную активность адамангилзамещенных аминокислот соответственно на моделях нормобарической нормокапнической гипоксической гипоксии на крысах, модели принудительного плавания крыс с грузом и модели иммобилизации крыс на спине, а также изучить влияние соединений на переносимость действия токсических ядов на модели острого токсического гепатита у крыс.

3. Проанализировать влияние адамантилзамещенных аминокислот на состояние системы неспецифического клеточного и гуморального иммунитета in vitro и in vivo.

4. Оценить выраженность противопаркинсонического действия адамантил-замещенных аминокислот на моделях галоперидоловой каталепсии у крыс и амфетаминовой стереотипии у мышей, изучить выраженность холинолитиче-ского действия соединений по их способности влиять на лакримацию у крыс.

5. Проанализировать противовоспалительную, противоболевую, жаропонижающую активность адамантилзамещенных аминокислот на моделях острой экссудативной реакции у мышей, формалинового отека у крыс, химического болевого раздражения у мышей, модели дрожжевой лихорадки у крыс, а также оценить выраженность гастротоксичности соединений на модели ульцероген-ного действия у крыс.

6. Исследовать механизмы противоболевой и противовоспалительной активности адамантилзамещенных аминокислот методом фармакологического анализа посредством оценки синергизма их действия с циклодолом и диклофе-наком натрия и антагонизма с налоксоном.

7. Изучить влияние адамантилзамещенных аминокислот на содержание адреналина, норадреналина, серотонина, гистамина и 11-оксикортикостероидов в плазме крови интактных крыс и данные биохимические параметры в плазме крови и экссудате у крыс при патологии воспалительного процесса.

Научная новизна работы. Впервые определены ЬО50 пяти адамантилзамещенных аминокислот при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении и оценено их влияние на поведенческие реакции животных. Установлено, что все соединения являются малоопасными веществами и практически не оказывают действия на поведение крыс при внутрижелудочном введении.

Изучены адаптогенная, противопаркинсоническая, противовоспалительная, противоболевая, жаропонижающая активность соединений и их влияние на параметры неспецифического клеточного и гуморального иммунитета. Установлено, что наиболее выраженными фармакологическими свойствами изучаемых соединений являются противовоспалительные и противоболевые.

В ходе исследования механизмов противоболевой активности адамантилзамещенных аминокислот установлено, что они не оказывают действия на опиат-

ные рецепторы и проявляют синергизм анальгетической активности с препаратами-анализаторами циклодолом и диклофенаком натрия.

Изучено влияние адамантилзамещенных аминокислот на содержание адреналина, норадреналина, серотонина, гистамина, 11-оксикортикостероидов в плазме крови интактных животных и в плазме крови и экссудате у крыс при экспериментальной патологии воспалительного процесса. Установлено, что соединения не оказывают существенного влияния на перечисленные выше показатели в плазме крови интактных особей. В условиях же воспалительного процесса они нормализуют уровень катехоламинов, серотонина, гистамина в плазме крови и содержание адреналина в экссудате у крыс.

Научно-практическая значимость работы. Исследование фармакологической активности адамантилзамещенных аминокислот показало, что они обладают противовоспалительным, противоболевым, жаропонижающим, противо-паркинсоническим, антигипоксическим, актопротекторным действием и повышают фагоцитарную активность нейтрофилов in vitro и ферментативную активность сывороточного лизоцима in vitro и in vivo. Наиболее выражено соединения проявляют противовоспалительные и противоболевые свойства: все они обнаруживают значимое противовоспалительное и анальгетическое действие при маловыраженном или отсутствующем ульцерогенном эффекте. Поэтому адамантилзамещенные аминокислоты перспективны для дальнейших исследований в первую очередь как потенциальные нестероидные противовоспалительные препараты. При этом особо стоит отметить соединение А5 (соответствие шифров структуре соединений представлено в таблице 1) как одно из наиболее активных с точки зрения противовоспалительного и противоболевого действия и одновременно единственное соединение, в отличие от остальных исследуемых адамантилзамещенных аминокислот, проявляющее жаропонижающую активность.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. LD50 адамантилзамещенных аминокислот при внутрижелудочном введении составляет от 460 мг/кг до 1810 мг/кг, при внутрибрюшинном - от 304 мг/кг до 680 мг/кг.

2. Адамантилзамещенные аминокислоты проявляют стресспротективную активность. Соединения А2, А4 и А5 обладают актопротекторным действием, а А5 - еще и антигипоксическим.

3. Соединение А2 обнаруживает иммуностимулирующие свойства in vivo, увеличивая процент фагоцитоза и активность сывороточного лизоцима.

4. Адамантилзамещенные аминокислоты обладают противопаркинсониче-ской активностью, снижая выраженность ригидности, каталепсии и стереотипности поведения у животных.

5. Адамантилзамещенные аминокислоты проявляют выраженную противовоспалительную и противоболевую активность при маловыраженном или отсутствующем ульцерогенном действии.

Внедрение результатов исследования. Данные результатов исследования внедрены в виде информационного письма, материалы которого используются при проведении практических занятий и изложении лекционного курса по фармакологии в ЯГМА (акт внедрения от 20 февраля 2009г.).

Апробация работы. Материалы и положения диссертации доложены на научных конференциях Ярославской государственной медицинской академии, 2004, 2005, 2006гг.; VII Международной научно-практической конференции. «Здоровье и образование в XXI веке», г. Москва, 2006 г.; XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в фармации», г. Казань, 2007 г.; VIII Международном конгрессе "Здоровье и образование в XXI веке: концепции болезней цивилизации", г. Москва, 2007г.

Публикации. По материалам диссертации опубликована 21 печатная работа, 2 из которых в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 126 страницах компьютерного набора и включает следующие разделы: введение, обзор лите-

ратуры, описание материалов и методов, 3 главы с изложением результатов собственных исследований, заключение, выводы, список литературы; проиллюстрирована 34 таблицами и 28 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование проводили на 671 белой беспородной крысе-самце массой 180-200 г. и 897 белых беспородных мышах-самцах массой 18-20 грамм.

Исследовано 5 новых адамантилзамещенных аминокислот (АЗАК), синтезированных в Ярославском государственном техническом университете под руководством профессора, доктора химических наук Т.А. Обуховой. В работе соединения условно обозначены шифрами А1, А2, АЗ, А4 и А5. Соответствие шифров структуре опытных субстанций приведено в таблице 1. Таблица 1 - Соответствие шифров структуре адамантилзамещенных

аминокислот

Условное обозначение Структура соединения

Al адамантилзамещенное производное метионина

А2 адамантилзамещенное производное триптофана

АЗ адамантилзамещенное производное валина

А4 адамантилзамещенное производное пролила

А5 адамантилзамещенное производное глицина

АЗАК в зависимости от требований методик проводимых экспериментов вводились в дозе 20 мг/кг: однократно внутрижелудочно (модели острой экссу-дативной реакции и химического болевого раздражения у мышей, модели формалинового отека, ульцерогенного действия и острого токсического гепатита у крыс); однократно внутрибрюшинно (модели по исследованию адаптогенной и противопаркинсонической активности, модель дрожжевой лихорадки у крыс); внутрижелудочно в течение двух недель (эксперименты по исследованию иммунологического действия in vivo). Доза соединений, равная 20 мг/кг, была выбрана на основании результатов определения их LD50 с учетом литературных данных (Вальдман Е.А. и др., 1997; Пужалин А.Н., 2005). Дозы препаратов сравнения - диклофенака натрия, метамизола натрия, леводопы и циклодола -

рассчитывались согласно коэффициентам, предложенным проф. Т.А. Гусько-вой: 5,9 для крыс, 11,8 для мышей (Гуськова Т. А., 1990).

Первоначально для АЗАК по методике Тейтнера-Миллера определяли LD50 при внутрижелудочном и внутрибрюшинном способе введения. С целью изучить влияние соединений на поведение животных при их внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении применялся метод «открытого поля».

Адаптогенную активность АЗАК оценивали на моделях нормобаричсской нормокапнической гипоксической гипоксии, предельных мышечных нагрузок и 24-часового иммобилизационного стресса. Показателями служили продолжительность плавания крыс с грузом, равным 10% от массы тела, и жизни крыс при гипоксии (мин), массовые коэффициенты тимуса и надпочечника, степень изъязвления слизистой желудка крыс в условиях иммобилизационного стресса. Способность соединений влиять на переносимость действия токсических ядов изучалась на модели острого токсического гепатита. Она оценивалась по проценту смертности крыс в группе в течение 2 недель наблюдения.

Иммунологическая активность АЗАК изучалась по их способности влиять на фагоцитарную активность нейтрофилов и на активность лизоцима как in vitro, так и in vivo. Оценку фагоцитарной активности нейтрофилов осуществляли микрометодом. Исследование ферментативной активности лизоцима проводилось нефелометрическим методом по В.Г. Дорофейчук.

Противопаркинсоническая активность АЗАК изучалась по методике галопе-ридоловой каталепсии у крыс и амфетаминовой стереотипии у мышей. Оценивались длительность каталепсии (с); промежуток времени, спустя который после введения галоперидола у крыс наблюдается каталепсия (мин); выраженность симптома «горбатости» (см); интенсивность стереотипии (баллы).

Влияние соединений на холинергическую иннервацию изучали на модели стимуляции лакримации, вызываемой подкожным введением ацетилхолина, по изменению интенсивности слезотечения (мг) у крыс по сравнению с контролем.

Противовоспалительную активность АЗАК исследовали на моделях острой экссудативной реакции у мышей и формалинового отека у крыс по их способ-

ности снижать выраженность экссудации по сравнению с контролем (%). Противоболевое действие соединений изучали на модели химического болевого раздражения у мышей по их влиянию на специфическую болевую реакцию -корчи - у животных. Жаропонижающую активность АЗАК определяли по методике дрожжевой лихорадки у крыс по их способности снижать ректальную температуру животных. Ульцерогенное действие исследовалось на крысах, лишенных пищи за 16 часов до опыта, при однократном внутрижелудочном введении соединений в дозе 0,2 1Л}50 и оценивалось по 4-х балльной шкале по степени поражения слизистой желудка: больший балл свидетельствовал о более выраженном повреждении слизистой желудка.

Возможный нейромедиаторный механизм анальгетического действия АЗАК исследовался на модели химического болевого раздражения у мышей на фоне введения животным веществ-анализаторов: налоксона (1 мг/кг) и циклодола (0,15 мг/кг). Для того чтобы косвенно проанализировать влияние соединений на активность циклоокигеназ (ЦОГ), был проведен эксперимент по изучению синергизма противоболевого действия исследуемых субстанций с действием дик-лофенака натрия на модели химического болевого раздражения.

В плазме крови и экссудате у крыс с экспериментальным воспалительным процессом спектрофлгоорометрическим методом определяли концентрации (мкг/мл) адреналина (АД), норадреналина (НА), 11-оксикортикоидов (11-ОКС), гистамина (ГТ) и серотонина (СТ).

С лабораторными животными работали в соответствии с действующими "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" и "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных".

Все вычисления производились на персональном компьютере в программе «Биостатистика». Количество определений каждого показателя в разных опытах составляло от 6 до 23. Результаты экспериментов были статистически обработаны с помощью методов параметрической статистики - критерия Стьюдента для межгрупповых сравнений, критериев Тьюки и Даннета для множественных

сравнений. Из непараметрических критериев в работе использовался ^-квадрат. Различия считали достоверными при Р<0,05 (Гланц С., 1999).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

На первом этапе работы для АЗАК были определены И>50 при их внутри-желудочном и внутрибрюшинном введении, оценено их влияние на поведенческие реакции крыс. Установлено, что по ГОСТу 12.1.007-76 все соединения относятся к третьему классу опасности, то есть являются малоопасными соединениями, так как их ЬБ50 при внутрижелудочном введении входят в интервал от 151 до 5000 мг/кг: значения 1Х)50 при внутрижелудочном введении для А1, А2, АЗ, А4 и А5 соответственно равны 1490 мг/кг, 1870 мг/кг, 460 мг/кг, 1810 мг/кг и 1790 мг/кг. При внутрибрюшинном введении значения 1Л350 для них составляют соответственно 345 мг/кг, 304 мг/кг, 410 мг/кг, 375мг/кги 680 мг/кг.

Изучение действия соединений на поведенческие реакции животных показало, что А1, А2 АЗ и А5 не оказывали влияния на выраженность безусловного ориентировочного рефлекса и вегетативную деятельность крыс при внутрижелудочном введении. При внутрибрюшинном введении А1, А2 и А4 проявляли достоверное депримирующее действие, снижая выраженность безусловного ориентировочного рефлекса, при этом АЗАК А1 угнетала еще и вегетативную деятельность животных.

Данные, полученные при проведении экспериментов по определению 1Л)5о соединений и их влияния на поведение крыс по методике «открытое поле», предположительно свидетельствуют о том, что биодоступность А1, А2, А4 и А5 при внутрибрюшинном введении больше, чем при внутрижелудочном.

На втором этапе работы проводились скрининговые эксперименты на предмет изучения адаптогенной, иммунологической, противопаркинсонической и противовоспалительной активности АЗАК.

Исследование адаптогенного действия включало в себя оценку антигипок-сического, актопротекторного и стресспротективного эффектов соединений, а также изучение их способности влиять на устойчивость животных к действию токсических ядов. Из всех АЗАК достоверной антигипоксической активностью

обладала только А5, на фоне которой продолжительность жизни крыс в условиях нормобарической нормокагснической гипоксии увеличивалась на 26%. Акто-протекторное действие обнаружили А2, А4 и А5. При их введении продолжительность переносимости мышечных нагрузок возрастала в 1,4, 1,8 и 3,0 раза соответственно (Р<0,05) (рисунок 1).

имл 30

10

10 5 в

* - достоверно относительно контрольной группы, Р<0,05 Рисунок 1 - Влияние адамантилзамещенных аминокислот на продолжительность плавания крыс с грузом

Стрес спротекти вно е действие АЗАК исследовали на модели суточной иммобилизации крыс на спине. На фоне введения всех соединений была отмечена достоверная нормализация значения массовых коэффициентов надпочечников на 39%-64%. И только АЗАК АЗ препятствовала развитию стресс-шдуцированной гипотрофии вилочковой железы на 25% (Р<0,05).

Экспериментальная работа по оценке способности соединений влиять на устойчивость животных к действию токсических ядов показала, что АЗ, А4 и А5 достоверно снижали выраженность повреждающего действия тетрахлорметана соответственно на 33,3%, 16,7% и 33,3%.

Таким образом, результаты изучения адаптогенной активности соединений показали, что антигиноксическим действием обладала АЗАК А5. Наиболее выраженную актопротекторную активность также проявляла А5, а стресспротек-тивную - АЗ. При этом АЗ, А4 и А5 обнаружили способность повышать устойчивость крыс к токсическому действию тетрахлорметана на модели острого токсического гепатита.

Следующим направлением фармакологического скрининга было исследование способности соединений влиять на неспецифический клеточный и гуморальный иммунитет. О действии АЗАК на компоненты неспецифического кле-

точного иммунитета судили по изменению фагоцитарной активности нейтро-филов. На фоне введения А1-А4 было отмечено повышение функциональной активности фагоцитов in vitro за счет увеличения фагоцитарного индекса (ФИ): они достоверно увеличивали его в течение первого часа опыта в 2,7-4,0 раза, Подобного действия соединений в отношении ФИ в экспериментах in vivo зафиксировано не было, но при введении А2 было отмечено достоверное повышение процента фагоцитоза (ПФ) - на 23,3%. Ферментативную активность сывороточного лизоцима in vitro за счет прямого действия на его функционирование повышали A3 и А4 на 8,3% и 56,0% соответственно (Р<0,05). Увеличение же уровня концентрации фермента in vivo в результате его активации или большего синтеза гранулоцитами, макрофагами и моноцитами достоверно наблюдалось только при введении А2 - в 2,2 раза (Йегер Л., 1990; Покровский В.И. и др., 1998).

Результаты исследования иммунологической активности АЗАК свидетельствуют о том, что, хотя А1-А4 в экспериментах in vitro оказывали положительное влияние на фагоцитарную активность нейтрофилов, а A3 и А4 усиливали еще и ферментативную активность лизоцима, in vivo только на фоне А2 наблюдалось повышение значения показателя ПФ и возрастала ферментативная активность лизоцима.

Антипаркинсоническое действие соединений изучали на двух экспериментальных моделях паркинсонического синдрома (ПС), воспроизводящих акине-тико-ригидную и дрожательную его формы. В качестве модели, отражающей акинетико-ригидную форму ПС, использовалась методика каталепсии у крыс, вызванной галоперидолом. Препарат сравнения леводопа оказывал выраженный антипаркинсонический эффект, на протяжении всего времени наблюдения снижая продолжительность каталепсии. Среди АЗАК антикаталептогенное действие проявляли Al, А2, A3 и А4: их активность была сопоставима с эффективностью леводопы. Из них наиболее выражено продолжительность каталепсии снижали А2 и A3. Приведенный ниже график (рисунок 2) отражает активность леводопы и одного из перечисленных выше соединения А2.

и

| ■ ■ контроль_— — .чсводрпа - ~ • А2

Рисунок 2 - Продолжительность каталепсии у крыс, возникающей на фоне введения гало пер идола, в контрольной группе и группах животных, которым вводили леводопу и соединение А2

При проведении данного эксперимента было обнаружено, что препараты сравнения леводопа и циклодол значительно отсрочивали время, спустя которое после введения гало пер идол а наступала каталепсия - в 3,3 и 3,7 раза соответственно (Р<0,05), Соединения А1, А2, А4 и А5 достоверно отдаляли начало проявления данного симптома в 1,3-2,7 раза (рисунок 3).

Ко «г р<>,] I, Лсипдопч Киклодол А1 А 2 АЗ А4 А5

* - достоверно относительно контрольной )руипы, Р<0,05 л - достоверно относительно леводопы, Р<0,05 #- достоверно относительно циклодола, Р<0,05 Рисунок 3 - Влияние адамантилзамещенных аминокислот на время, спустя которое после введения гало пер идола развивается каталепсия

Нейротоксическос действие галоперидола проявлялось не только наличием каталепсии, но и развитием у крыс мышечной ригидности, о которой судили по выраженности симптома «горбатости». АI, А2 н А4 снижали степень его проявления, при этом наибольшую эффективность, превосходящую действие препаратов сравнения, обнаружила АЗАК А4 (рисунок 4). Активность А!, А2, АЗ и А4 на модели галоперидоловой каталепсии свидетельствует о наличии центрального дофаминомиметического механизма их противопаркинсонического действия.

Кот-роль Цикл иди л А1 А2 АЗ А4

* - достоверно относительно контрольной группы, Р<0,05 л - достоверно относительно леводопы, Р<0,05 #- досговерно относительно циклодола, Р<0,05 Рисунок 4 - Влияние адамантилзамещеншх аминокислот на выраженность

ригидности тела крыс

В качестве модели, позволяющей оценить влияние соединений на дрожательную форму ПС, использовалась методика потенцирования эффектов амфетамина. Из снижающих выраженность стереотипии АЗАК А1, А2, АЗ и А4 максимальную активность проявляли А1 и АЗ, чья эффективность была сопоставима с эффективностью препарата сравнения циклодола. Приведенный ниже график (рисунок 5) отражает действие соединения А1.

■ контроль * " - А1 — — ЦНКЛОДО.Г1

Рисунок 5 - Выраженность амфетаминовой стереотипии у контрольных животных и животных, которым вводили циклодол и соединение А1

Также изучалось влияние АЗАК на холинергическую иннервацию, нарушения которой вовлечены в патогенез ПС. Установлено, что холивднегативным эффектом обладали А1-А4, достоверно снижавшие выраженность лакримации у крыс, вызванной подкожным введением ацегалхолиш, на 42%-70%. Поэтому можно предположить, что еще одним механизмом антипаркинсонической активности этих соединений является их центральное холинолитическое действие.

1Ё

Таким образом, результаты проведенных экспериментов обнаружили наличие противопаркинсонической активности у четырех АЗАК - А1, А2, АЗ и А4, предположительно обусловленной их центральным дофаминомиметическим и холинолитич есюш действием.

При исследовании соединений в качестве потенциальных НПВС оценивались основные терапевтические характеристики веществ данной труппы: противовоспалительная, анальгетнческая и жаропонижающая активность, а также наличие побочного ульцерогенного действия.

Результаты экспериментов по определению противовоспалительного действия АЗАК на модели уксуснокислого перитонита у мышей свидетельствуют о том, что в опытах все они обладали достоверной антиэкссудативной активностью, выраженность которой составляла от 33% до 70% (рисунок 6). Изучение влияния соединений на острое экссудативное воспаление в условиях модели формалинового отека лапы у крыс подтвердило их выраженные антиэкссуда-тивные свойства.

* - достоверно относительно контрольной группы, Р<0,05

Рисунок б - Влияние адамантилзамещенных аминокислот на среднюю массу

экссудата у мышей

Изучение противоболевого действия АЗАК показало, что все они достоверно уменьшали проявления болевой реакции у животных - среднее количество корчей - на 59%-73% (рисунок 7).

Антипиретическая активность, сопоставимая с эффективностью препарата сравнения метамизола натрия, достоверно снижавшего лихорадочную реакцию крыс на 0,88°С в течение первого часа и на ],25°С в течение второго часа после введения суспензии пекарских дрожжей, наблюдалась только при введении со-

единения А5: оно уменьшало ректальную температуру крыс на 1,28°С в течение первого и на 1,71 °С в течение второго часа эксперимента (Р<0,05).

ОД, 60

40

30

20

10 О

* - достоверно относительно контрольной группы, Р<0,05

Рисунок 7 - Влияние а дам аншлзаме щенных аминокислот на среднее количество корчей у мышей

Проведенная работа по исследованию ульцерогенного действия АЗАК обнаружила, что у животных, которым вводили А1 и А2, изъязвленность слизистой желудка не отличалась от значения в контрольной группе и составляла 0 баллов. Для соединений АЗ, А4 и А5 она была равна 0,25,0,17 и 0,09 баллов соответственно. Эти показатели значительно ниже баллов препаратов сравнения: 2,0 для диклофенака натрия и 3,0 дяя индометашна.

Таким образом, исследование соединений в качестве потенциальных НПВС показало, что все они обладают выраженной противовоспалительной и противоболевой активностью на фоне маловыраженного или отсутствующего ульцерогенного действия. Поэтому' противовоспалительное и противоболевое действие АЗАК является наиболее перспективным видом активности для дальнейшего изучения.

На третьем этапе исследования оценивалось влияние соединений на опиат-ные и холинергические рецепторы, активность ЦОГ и гормонально-медиаторный обмен ннтактных крыс и крыс с патологией воспалительного процесса как возможные механизмы их противовоспалительного и анаяьгети-ческого действия.

Влияние АЗАК на опиатные рецепторы изучалось при введении животным препарата-анализатора валоксона на модели химического болев-™ -"здраже-

ния у мышей. Проведенная работа показала, что соединения на опиатные рецепторы действия не оказывали.

Анализ влияния АЗАК на холинергическую иннервацию проводился при введении препарата-анализатор а циклодола. На его фоне наблюдалось нарастание эффективности всех соединений, причем при совместном введении циклодола с А2 и АЗ был обнаружен эффект суммации (рисунок 8). Следовательно, холинолитический механизм является одним из возможных механизмов аналь-гетической активности данных АЗАК.

контроль цикл а дел циклодол

* - достоверно относительно контрольной группы, Р<0,05

# - достоверно относительно циклодола, Р<0,05

Рисунок 8 - Влияние адамантилзамешенных аминокислот А2 и АЗ на количество корчей у мышей на фоне введения им циклодола и без него

Об угнетающем влиянии АЗАК на ЦОГ как одном из механизмов их противоболевого и противовоспалительного действия судили по характеру их взаимодействия с ингибитором этого фермента - диклофенаком натрия. В качестве объекта было выбрано одно из обладающих наиболее выраженной анальгетиче-ской активностью соединение А5, Моделью служили уксуснокислые корчи, моделируемые у мышей, которым вводили диклофенак (100%), диклофенак и А5 в дозах соотношением 75%:25%, 50%:50%, 25%:75% и А5 (100%).

Обнаружено, что на фоне совместного введения диклофенака и А5 наблюдался эффект суммации, что позволило сделать предположение о наличии ин-гибирующего влияния данного соединения на активность ЦОГ, Вероятно, угнетением активности ЦОГ объясняется и его жаропонижающее действие.

Учитывая, что в патогенезе боли и воспаления участвует большое количество биологически активных веществ, для исследования механизма действия потенциальных противоболевых и противовоспалительных средств интерес пред-

ставляет изучение их влияния на некоторые из них, в частности на АД, НА, ГТ и СТ, у интактных крыс и крыс с воспалительным процессом.

Проведенная работа показала, что АЗАК практически не оказывали влияния на гормонально-медиаторный баланс интактных крыс. В условиях уксуснокислого перитонита наблюдалась закономерная реакция симпато-адреналовой системы (САС) при экстренных воздействиях на организм: концентрации АД и НА в плазме крови достоверно повышались соответственно в 3,2 и 1,7 раза. Из АЗАК нормализующее влияние на содержание АД проявляла А1: она достоверно снижала его концентрацию на 28,57% {рисунок 9). А2, АЗ, А4, А5 и препарат сравнения диклофенак натрия оказывали благоприятное влияние на чрезмерную активность симпатического отдела САС: при их введении концентрации НА достоверно не отличались от концентрации у интактных крыс. При этом обнаружено, что в экссудате животных на фоне А1-А4, как и диклофенака натрия, наблюдалось достоверное снижение концентрации АД на 7,14%-22,03% относительно контроля, уровень АД для которого составлял 0,059 мкг/кг.

мкг/мл 1

Ц|ГТЯ1Г711ЫС V I|><> :. Дик/щ ^ сНи К А I V

В Адреналин □ Норадреналин

* - достоверно относительно интактного контроля, Р<О,05

# - достоверно относительно контроля с моделью воспаления, Р<0,05

Рисунок 9 - Влияние адамантилзамещенных аминокислот на концентрацию адреналина и норадреналина в плазме крови животных с моделью уксуснокислого перитонита

Содержание ГТ в плазме крови крыс при уксуснокислом перитоните достоверно увеличивалось в 1,9 раз (рисунок 10). Уровень еще одного алгогена СТ повышался в 3 раза (Р<0,05). При введении АЗАК, как и препарата сравнения диклофенака натрия, было отмечено достоверное снижение содержания ГТ относительно контроля. А2, АЗ и А5 нормализовали также и концентрацию СТ: на их фоне она не отличалась от таковой в интактной группе.

М К Г/МП

о ¿о

(J, J в 0,1« 0,09

* - достоверно относительно интактного контроля, Р<0,05

# - достоверно относительно контроля с моделью воспаления, Р<0,05

Рисунок 10 - Влияние адамантилзамещенных аминокислот на концентрацию гистамина и серотонина в плазме крови животных с моделью уксуснокислого перитонита

Данные, полученные на третьем этапе исследования, показали, что предположительно механизм противоболевой и противовоспалительной активности АЗАК объясняется их холинолитическим действием, ингибированием активности ЦОГ и нормализующим влиянием на уровень катехоламинов, ГТ и СТ в плазме крови и экссудате животных с экспериментальной патологией воспалительного процесса.

Результаты проведенной работы свидетельствуют о том, что все исследованные АЗАК обладают выраженной противовоспалительной и противоболевой активностью, у четырех соединений А1-А4 обнаружена противопаркинсониче-ская активность, у АЗАК А2 выявлена иммуностимулирующая активность in vivo. При этом все соединения оказывают умеренное стресспротективное действие, а А5 проявляет еще и жаропонижающий, актопротекторный и антиги-похсический эффекты.

ВЫВОДЫ

1. Согласно установленным LD5a по ГОСТу 12.1.007-76 все адамантипзаме-щенные аминокислоты являются малоопасными веществами.

2. Все соединений проявляют стресспротективную активность. А2, А4 и А5 обладают актопротекторный действием. А5 обнаруживает антигипоксическую активность.

3. Все адамантилзамещенные аминокислоты усиливают фагоцитарную активность нейтрофшюв in vitro, увеличивая фагоцитарный индекс; in vivo только

соединение А2 обнаруживает иммуностимулирующие свойства, повышая процент фагоцитоза на 23,3% и активность сывороточного лизоцима в 2,2 раза.

4. Соединения AI, А2, A3 и A4 обладают противопаркинсонической активностью, снижая выраженность ригидности (А1-А4), каталепсии (Al, А2 и A4) и стереотипности поведения у животных (AI, А2, A3 и A4).

5. Все соединения проявляют выраженную противовоспалительную и противоболевую активность при маловыраженном или отсутствующем ульцеро-генном действии. Жаропонижающим действием обладает А5.

6. Возможным механизмом противоболевой активности адамантилзамещен-ных аминокислот являются их холинолитическое действие и способность угнетать активность циклооксигеназы. Предположительный механизм противовоспалительной и жаропонижающей активности соединений также заключается в ингибировании данного фермента.

7. Адамантилзамещенные аминокислоты нормализуют уровень адреналина (AI), норадреналина (А1-А4), гистамина (А1-А5), серотонина (А2, A3 и А5) в плазме крови при воспалительном процессе и снижают концентрацию адреналина (AI-A4) в экссудате у крыс.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Исследование противовоспалительного, противоболевого и ульцерогенного действия производных М-4-(адамантил)бензоиламинокислоты // Вестник РУДН. - 2007. - № 6. - С. 288-291 (соавт.: Федоров В.Н., Красников C.B., Обухова Т. А.).

2. Никитченко, Е.А. Изучение фармакологических свойств производных ада-мантилбензоиламинокислоты // Фармация. - 2007. - № 8. - С. 37-38 (соавт.: Федоров В.Н., Красников C.B., Обухова Т. А.).

3. Биологическая активность производных адамантана и сульфаниламида // Сборник научных работ студентов и молодых ученых ЯГМА. - Ярославль, 2004. - С. 74.

4. Оценка противовоспалительного действия производных адамантана и сульфаниламида // Сборник научных работ студентов и молодых ученых ЯГМА. - Ярославль, 2005. - С. 84-85.

5. Поиск препаратов с антигипоксической и актопротекторной активностью // Тезисы докладов XII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2005. - С. 689 (соавт.: Душина М.Е., Кочнева Н.В., Малафеева Е.Н. и др.).

6. Исследование иммунологического действия производных адамантана // Материалы VI Международной научно-практической конференции «Здоровье человека в XXI веке». - М., 2005. - С. 362.

7. Pharmakological research of numerous derivatives of adamantine II Materials of 2-nd Russian-chinese international scientific conference on pharmacology «Fundamental pharmacology and pharmacy - clinical practice». - Пермь, 2006. - С. 123-124 (Krasnikov S.V., Obuchova T.A., Fedorov V.N.).

8. Methodology of search for drug preparations, increasing the nonspecific body resistance // Materials of 2-nd Russian-chinese international scientific conference on pharmacology «Fundamental pharmacology and pharmacy - clinical practice». -Пермь, 2006. - С. 166-167 (Fedorov V.N., Sidorov A.V., Punegova N.V., Kochneva N.V.).

9. Исследование антипаркинсонической активности некоторых производных адамантана и сульфаниламида // Сборник научных работ студентов и молодых ученых ЯГМА. - Ярославль, 2006. - С. 116-117.

Ю.Оценка фармакологической активности производных адамантана и сульфаниламида // «Человек и его здоровье - 2006». - Санкт-Петербург, 2006. - С. 265-267.

11.Антипаркинсоническал активность некоторых производных адамантана и сульфаниламида // Материалы VII Международной научно-практической конференции «Здоровье человека в XXI веке». - М., 2006. - С. 368.

12.Синтез аминокислотных производных 4-(1-адамантил)бензойной кислоты и их биологическая активность // Тез. докл. IX Научной школы-конференции по органической химии. - М., 2006. - С. 294 (соавт.: Ремизова И.В., Красников C.B., Обухова Т.А.).

13.Производные адамантана как потенциальные нестероидные противовоспалительные средства // Тезисы докладов XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в фармации». - Казань, 2007 -С. 261-262.

14.Влияние производных М-4-(1-адаматил)бензоиламинокислоты на температуру тела крыс // «Человек и его здоровье - 2007». - Санкт-Петербург, 2007. -С. 152-153.

15.Исследование антигипоксической, актопротекторной и стресспротективной активности производных М-4-(1-адамантил)бензоил аминокислоты // Материалы П1 съезда фармакологов России «Фармакология - практическому здравоохранению». - Санкт-Петербург, 2007. - С. 1876 - 1877 (соавт.: Красников C.B.).

16.Методология поиска лекарственных средств, повышающих неспецифическую резистентность организма // Материалы Ш съезда фармакологов России «Фармакология - практическому здравоохранению». - Санкт-Петербург, 2005. - С. 1980 - 1982 (соавт.: Федоров В.Н., Пунегова Н.В., Кочнева Н.В., Куница З.А.).

17.Сравнительный анализ противовоспалительной активности производных N-4-(адамантил)бензоиламинокислоты и производных изопропилциклогексил-карбамида // Сборник материалов научно-практической конференции с международным участием, посвященной 25-летию фармацевтического факультета Ярославской государственной медицинской академии. — Ярославль, 2007.-С. 253-255.

18.Противовоспалительное, противоболевое и ульцерогенное действие производных Ы-4-(адамантил)бензоиламинокислоты // Материалы VIII Международного конгресса "Здоровье и образование в XXI веке: концепции болезней цивилизации". - М., 2007. - С. 458-459.

19.Противовоспалительная активность некоторых производных адамантана // Тезисы докладов XV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2007. - С. 675-676 (соавт.: Красников C.B.).

20.0ценка выраженности ульцерогенного действия производных N-4-(l-адамантил)бензоиламинокислоты // Сборник научных работ студентов и молодых ученых ЯГМА. - Ярославль, 2008. - С. 149-150.

21.Исследование механизма анальгетического действия производных N-4-(l-адамантил)бензоиламинокислоты [Электронный ресурс] // Материалы докладов XV Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов»; секция «Фундаментальная медицина». - М.: Издательство МГУ; СП МЫСЛЬ, 2008. - С. 21-22.

Автор выражает благодарность за поддержку и помощь, оказанную в работе, сотрудникам ЯГТУ: профессору, доктору химических наук Обуховой Т.А. и

кандидату химических наук Красникову C.B.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ АДАМАНТИЛЗАМЕЩЕННЫХ АМИНОКИСЛОТ

НИКИТЧЕНКО ЕЛЕНА АНАТОЛЬЕВНА

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Подписано в печать 22.06.09. Бумага белая. Печ. л. 1. Печать ризограф Заказ 700 Тираж 100. Отпечатано в типографии Ярославского государственного технического университета г. Ярославль, ул. Советская, 14 а, тел. 30-56-63.

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

В настоящее время одни^ из основных подходов к решению задачи поиска химических соединений, обладающих выраженной биологической активностью, является синтез структур, содержащих фармакофорные группы. Этот подход позволяет прогнозировать фармакологические свойства веществ еще на стадии планирования их синтеза [7].

Фармакофорными фрагментами, представляющими большой интерес для исследования, являются аминокислотные остатки. Аминокислоты и их производные широко применяются в медицине благодаря своей биологической активности [53, 71, 92]. Используют их и для модификации уже существующих лекарственных препаратов с целью снизить токсичность и повысить биодоступность данных средств [105].

Адамантильный радикал также является фармакофорным фрагментом, который содержат в своем составе некоторые зарекомендовавшие себя лекарственные препараты. Примером таковых являются мидантан, глудантан, адапромин, мемантин, ремантадин и другие. Адамантильный фрагмент имеет жесткое, пространственно определенное строение и способен адсорбироваться на клеточных мембранах [6]. При его введении в структуру соединений увеличивается способность последних проникать через клеточные мембраны и накапливаться в определенных органах и тканях. Однако на разных примерах было показано, что в результате введения адамантильного фрагмента в структуру вещества изменяется не только его липофильность. При этом также наблюдается пролонгирование фармакологических эффектов соединений [58], повышается их устойчивость к метаболическим превращениям в организме и изменяется характер взаимодействия соединений с рецепторами мембран [10, 51, 106]. А, следовательно, введение адамантильного фрагмента в молекулу может приводить к появлению новых видов биологической активности.

Сочетание обеих описанных выше фармакофорных групп в одном веществе интересно для доклинического исследования, так как это соединение потенциально может обладать выраженной фармакологической активностью при хорошей проницаемости через биологические мембраны. Таковыми соединениями являются изучаемые в данной диссертационной работе пять адамантилзамещенных аминокислот. Для проведения доклинических испытаний они были отобраны методом компьютерного скрининга, критерием которого являлся выбор веществ с лучшей мембранопроникаемостью. Адаман-тилзамещенные аминокислоты были получены с помощью современных и эффективных методов органического синтеза в Ярославском государственном техническом университете под руководством профессора, доктора химических наук Т.А. Обуховой [73, 152].

Диссертационная работа выполнена в соответствии с грантом Губернатора Ярославской области в сфере науки и техники (постановление № 528 от 23.07.04) и грантом по программе «У.М.Н.И.К.-07» (государственный контракт № 5450р/7947 от 17 декабря 2007 года).

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Исследование параметров острой токсичности и адаптогенных, иммунологических, противопаркинсонических, противовоспалительных, противоболевых и жаропонижающих свойств пяти адамантилзамещенных аминокислот. л

ЗАДА ЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Определить LD5o пяти адамантилзамещенных аминокислот при внут-рижелудочном и внутрибрюшинном введении мышам по методике Тейтнера-Миллера и оценить их влияние на поведение крыс в условиях модели «открытое поле».

2. Исследовать антигипоксическую, актопротекторную и стресспротек-тивную активность адамантилзамещенных аминокислот соответственно на моделях нормобарической нормокапнической гипоксической гипоксии на крысах, модели принудительного плавания крыс с грузом и модели иммобилизации крыс на спине, а также изучить влияние соединений на переносимость действия токсических ядов на модели острого токсического гепатита у крыс. ^

3. Проанализировать влияние адамантилзамещенных аминокислот на состояние системы неспецифического клеточного и гуморального иммунитета in vitro и in vivo.

4. Оценить выраженность противопаркинсонического действия адамантилзамещенных аминокислот на моделях галоперидоловой каталепсии у крыс и амфетаминовой стереотипии у мышей, изучить выраженность холи-нолитического действия соединений по их способности влиять на лакрима-цию у крыс.

5. Проанализировать противовоспалительную, противоболевую, жаропонижающую активность адамантилзамещенных аминокислот на моделях острой экссудативной реакции у мышей, формалинового отека у крыс, химического болевого раздражения у мышей, модели дрожжевой лихорадки у крыс, а также оценить выраженность гастротоксичности соединений на модели ульцерогенного действия у крыс.

6. Исследовать механизмы противоболевой и противовоспалительной активности адамантилзамещенных аминокислот методом фармакологического анализа посредством оценки синергизма их действия с циклодолом и дик-лофенаком натрия и антагонизма с налоксоном.

7. Изучить влияние адамантилзамещенных аминокислот на содержание адреналина, норадреналина, серотонина, гистамина и 11-оксикортикостероидов в плазме крови интактных крыс и данные биохимические параметры в плазме крови и экссудате у крыс при патологии воспалительного процесса.

НА УЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые определены LD50 пяти адамантилзамещенных аминокислот при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введений и оценено их влияние на поведенческие реакции животных. Установлено, что все соединения являются малоопасными веществами и практически не оказывают действия на поведение крыс при внутрижелудочном введении.

Изучены адаптогенная, противопаркинсоническая, противовоспалительная, противоболевая, жаропонижающая активность адамантилзамещенных аминокислот и их влияние на параметры неспецифического клеточного и гуморального иммунитета. Установлено, что наиболее выраженными фармакологическими свойствами изучаемых соединений являются противовоспалительные и противоболевые.

В ходе исследования механизмов противоболевой активности адамантилзамещенных аминокислот установлено, что они не оказывают действия на опиатные рецепторы и проявляют синергизм анальгетической активности с препаратами-анализаторами циклодолом и диклофенаком натрия.

Изучено влияние адамантилзамещенных аминокислот на содержание адреналина, норадреналина, серотонина, гистамина, 11-оксикортикостероидов в плазме крови интактных животных и в плазме крови и экссудате у крыс при экспериментальной патологии воспалительного процесса. Установлено, что соединения не оказывают существенного влияния на перечисленные выше показатели в плазме крови интактных особей. В условиях же воспалительного процесса они нормализуют уровень катехоламинов, серотонина, гистамина в плазме крови и содержание адреналина в экссудате у крыс.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Исследование фармакологической активности адамантилзамещенных аминокислот показало, что они обладают противовоспалительным, противоболевым, жаропонижающим, противопаркинсоническим, антигипоксиче-ским, актопротекторным действием и повышают фагоцитарную активность нейтрофилов in vitro и ферментативную активность сывороточного лизоцима in vitro и in vivo. Наиболее выражено соединения проявляют противовоспалительные и противоболевые свойства: все они обнаруживают значимое противовоспалительное и анальгетическое действие-при маловыраженном или отсутствующем ульцерогенном эффекте. Поэтому адамантилзамещенные аминокислоты перспективны для дальнейших исследований в первую очередь как потенциальные нестероидные противовоспалительные препараты. При этом особо стоит отметить соединение А5 (соответствие шифров структуре соединений представлено в таблице 2.1) как одно из наиболее активных с точки зрения противовоспалительного и противоболевого действия и одновременно единственное соединение, в. отличие от остальных исследуемых адамантилзамещенных аминокислот проявляющее жаропонижающую активность.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Материалы и положения диссертации доложены на научных конференциях Ярославской государственной медицинской академии, 2004, 2005, 2006гг.; VII Международной научно-практической конференции. «Здоровье и образование в XXI веке», г. Москва, 2006 г.; XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в фармации», г. Казань, 2007 г.; VIII Международном конгрессе "Здоровье и образование в XXI веке: концепции болезней цивилизации", г. Москва, 2007г. ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликована 21 печатная работа, 2 из которых в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ л

ВЫВОДЫ

1. Согласно установленным LD50 по ГОСТу 12.1.007-76 все адамантилза-мещенные аминокислоты являются малоопасными веществами.

2. Все соединения проявляют стресспротективную активность. А2, А4 и А5 обладают актопротекторным действием. А5 обнаруживает антигипокси-ческую активность.

3. Все адамантилзамещенные аминокислоты усиливают фагоцитарную активность нейтрофилов in vitro, увеличивая фагоцитарный индекс; in vivo только соединение А2 обнаруживает иммуностимулирующие свойства, полвышая процент фагоцитоза на 23,3% и активность сывороточного лизоцима в 2,2 раза.

4. Соединения Al, А2, A3 и А4 обладают противопаркинсонической активностью, снижая выраженность ригидности (А1-А4), каталепсии (Al, А2 и• А4) и стереотипности поведения.у животных (Al, А2, A3 и А4).

5. Все соединения проявляют выраженную противовоспалительную и противоболевую активность при маловыраженном или отсутствующем уль-церогенном действии. Жаропонижающим действием обладает А5.

6. Возможным механизмом противоболевой активности адамантилзамелщенных аминокислот являются их холинолитическое действие и способность угнетать активность циклооксигеназы. Предположительный механизм противовоспалительной и жаропонижающей активности соединений также заключается в ингибировании данного фермента.

7. Адамантилзамещенные аминокислоты нормализуют уровень адреналина (А1), норадреналина (А1-А4), гистамина (А1-А5), серотонина (А2, A3 и А5) в плазме крови при воспалительном процессе и снижают концентрацию адреналина (А1-А4) в экссудате у крыс.