Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких

Колосова, Анна Евгеньевна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Колосова, Анна Евгеньевна Томск 2011 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.03

Автореферат диссертации по медицине на тему Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких

48466Ьи

На правах рукописи

Колосова Анна Евгеньевна

ФАКТОРЫ СУПРЕССИИ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ

14.03.03 - патологическая физиология 03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 9 МАЙ 2011

Томск-2011

4846660

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН, заслуженный деятель науки РФ

доктор медицинских наук, профессор

Новицкий

Вячеслав Викторович

Уразова Ольга Ивановна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

Агафонов

Владимир Иванович

Кологривова Елена Николаевна

Ведущая организация: ФГУ «Новосибирский научно-исследовательский институт туберкулеза» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (630051, Россия, г. Новосибирск, ул. Репина, 2)

Защита состоится « 1 » и^-пн^^ 2011 г. в часов на заседании

диссертационного совета Д 208.096.01 ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России по адресу: 634050, г. Томск, Московский тракт, 2 Г)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России

Автореферат разослан 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета И.В. Петрова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время отмечается выраженная тенденция к росту числа распространенных деструктивных форм туберкулезной инфекции, характеризующихся тяжелым течением, склонностью к формированию лекарственной резистентности к основным противотуберкулезным препаратам (ПТП) и высоким процентом летальных исходов [Филинюк О.В., 2011; Jeon D.S. et al., 2011; Wells C.D., 2010]. Развитие и прогрессирующее течение туберкулеза во многом связывают с дефектом антигенспецифического иммунного ответа [Orme I.M., 2011; Jacobsen M. et al., 2010; Гунтупова Л.Д. и соавт., 2007; Кноринг Б.Е. и соавт., 1993].

В последние годы при исследовании иммунопатогенеза инфекционных заболеваний, в том числе туберкулезной инфекции, особое внимание уделяется регуляторным Т-клеткам, обладающим супрессорной активностью и тем самым способствующим снижению интенсивности антигенспецифического иммунного ответа, направленного на элиминацию патогенов различной природы [Koval'chuk L.V. et al., 2010; Chen X. et al., 2007; Guyot-Revol V. et al., 2006; Сахно Л.В. и соавт., 2004]. Предполагается, что опосредованное регуляторными Т-клетками угнетение пролиферации и дифференцировки Thl-лимфоцитов лежит в основе формирования туберкулиновой анергии у больных туберкулезом легких [Wergeland I. et al., 2011; Но P. et al., 2010; Geffner L. et al., 2009; Сахно JI.B. и соавт., 2004; Салина Т.Ю., Худзик Л.Б., 2001]. Сведения о роли регуляторных Т-лимфоцитов в патогенезе различных заболеваний немногочисленны. Регуляторные Т-клетки отличаются многообразием их типов, однако конкретные механизмы, с помощью которых они реализуют свои иммуносупрессорные эффекты, по-прежнему, остаются неустановленными. Между тем известно, что Т-лимфоциты с иммунофенотипом CD4+CD25+, содержащие внутриклеточный маркер Foxp3+ (Treg-клетки), отличаются от Thl-, Th2-, Thl7-, Th-акгивированных клеток по спектру продуцируемых цитокинов и способны супрессировать функции всех перечисленных клонов Т-хелперов, а также обеспечивать доминантную иммунологическую толерантность к собственным антигенам [Хаитов P.M. и соавт., 2011; Хайдуков C.B., Зурочка А.В., 2011 ; Lee D.C. et а)., 2010].

Конверсия, индукция Treg-клеток и реализация ими супрессорных свойств опосредуются главным образом иммунорегуляторными цитокинами - интерлейкином (IL)-2, IL-4, IL-10, трансформирующим фактором роста (TGF) р. Допускается возможность прямого действия Treg-лимфоцитов на клетки-мишени посредством конкурентного ингибирования костимулирующих молекул группы В7 (CD80, CD86) с

участием негативного активатора CTLA-4 (CD152) [Hiinig Т. et al., 2010; Wu У.Е. et al., 2010; Sharma P.K. et al., 2009; Roberts Т. et al., 2007; Sharabi A. et al., 2006; Toure N.O. et al., 2005].

В последнее время рассматривается вопрос о роли а2-ткроглобулина (а2-МГ) в качестве универсального модулятора действия цитокинов. Как известно, многие цитокины имеют рецепторы на поверхности клеток, через которые реализуются их регуляторные потенции, однако существенная часть цитокинов образует комплексы с а2-МГ и поступает в клетки через рецепторы данного белка. а2-МГ рассматривается также как акцептор избытка циркулирующих цитокинов и, наряду с этим, как фактор, управляющий пролиферацией иммунокомпетентных клеток. В частности продемонстрирована регулирующая (посредством фиксации TGF-P) роль а2-МГ в отношении перехода хронической воспалительной реакции в острую при аутоиммунных заболеваниях [Lindner I. et al., 2010; Зорин Н.А. и соавт., 2006; Герасимов А.М. и соавт., 2003; Мазуров В.И. и соавт., 2002; Lauer D. et al., 2002].

Подводя итог, следует отметить, что понимание роли иммуносупрессорных механизмов, в том числе регуляторных Т-клеток и реализуемых ими потенций в развитии иммунопатологических реакций при туберкулезной инфекции позволит не только вскрыть новые фундаментальные механизмы иммунопатогенеза, но и разработать новые подходы к иммунокоррекции и профилактике иммуноопосредованных осложнений при туберкулезе.

Цель исследования: определить факторы супрессии антигенспецифического иммунного ответа при туберкулезе легких.

Задачи исследования:

1. Оценить реакцию Манту у больных инфильтративным, диссеминированным и фиброзно-кавернозным туберкулезом легких в связи с чувствительностью Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам.

2. Установить особенности субпопуляционного состава регуляторных Т-клеток и секреции in vitro цитокинов с противовоспалительной и иммуносупрессорной активностью (IL-4, IL-10, TGF-fi) у больных инфильтративным, диссеминированным и фиброзно-кавернозным туберкулезом легких в зависимости от характера реакции Манту и устойчивости возбудителя к основным противотуберкулезным препаратам.

3. На основе результатов оценки субпопуляционного состава регуляторных Т-клеток, концентрации а2-макроглобулина в крови, базальной и антигениндуцированной цитокинопродукции (IL-2, IL-4, IL-10, TGF-p) и пролиферации лимфоцитов in vitro

определить патогенетические факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение факторов супрессии антигенспецифического иммунного ответа при различных клинических формах впервые выявленного распространенного деструктивного туберкулеза легких в зависимости от реакции на внутрикожное введение туберкулина (проба Манту) и чувствительности Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам до начала специфической химиотерапии. Продемонстрировано, что туберкулиновая анергия сопряжена с лекарственной резистентностью Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам. Показано, что увеличение количества РохрЗ-позитивных CD4+CD25+ и CD4+CD25" регуляторных Т-клеток с супрессорной активностью при туберкулезе легких у больных с положительной и отрицательной реакцией Манту ассоциируется со снижением числа CD4+CD25+Foxp3" Т-лимфоцитов в крови и гиперсекрецией цитокинов с противовоспалительной и иммуносупрессорной активностью (IL-4, IL-10, TGF-ß). Установлено, что увеличение содержания CD4+CD25+Foxp3+ (Treg) и CD4+CD25"Foxp3+ регуляторных Т-клеток в крови и продукции IL-10 и TGF-ß наиболее выражено при лекарственно-резистентном фиброзно-кавернозном туберкулезе легких. Получены новые данные, свидетельствующие о том, что иммуносупрессия при туберкулезе легких опосредована повышением содержания Foxp3+ регуляторных Т-клеток (CD4+CD25tFoxp3+ Treg) и а2-макроглобулина в крови, гиперпродукцией IL-4, IL-10 и TGF-ß на фоне дефицита секреции IL-2 in vitro, ассоциированного с лимфоцитопенией и подавлением пролиферативной реакции лимфоцитов в ответ на стимуляцию антигеном. При этом ведущую роль в цитокинопосредованной иммуносупрессия при инфильтративном туберкулезе легких играет гиперсекреция IL-10, при диссеминированном - IL-4 и TGF-ß, в то время как при фиброзно-кавернозном туберкулезе легких отмечается сочетанное повышение базальной и BCG-индуцированной продукции IL-10 и TGF-ß in vitro.

инактивации выявленных факторов иммуносупрессии. Полученные данные могут быть положены в основу разработки новых подходов к прогнозированию клинического течения туберкулеза легких, что наиболее значимо у пациентов с туберкулиновой анергией и множественной лекарственной резистентностью (особенно в случае фиброзно-кавернозной формы заболевания).

Основные положения и выводы диссертации используются в учебном процессе на лечебном и педиатрическом факультетах ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России на кафедрах патофизиологии (в тематических разделах «Патофизиология клетки», «Патофизиология иммунитета») и фтизиатрии и пульмонологии (в тематическом разделе «Иммунитет и аллергия при туберкулезе»).

Исследования проведены при финансовой поддержке Федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2012 годы» (ГК №02.512.11.2112 «Молекулярно-генетические основы управления адаптационной реактивностью системы крови человека при инфекции» (руководитель - академик РАМН В.В. Новицкий); ГК №16.512.11.2046 «Разработка комплекса молекулярно-генетических маркеров дизрегуляции иммунного ответа на Mycobacterium tuberculosis для оптимизации диагностики и коррекции вторичной иммунологической недостаточности при туберкулезе легких»).

Положения, выносимые на защиту:

1. Туберкулиновая анергия, опосредованная активацией факторов супрессии антигенспецифического иммунного ответа, у больных диссеминированным и фиброзно-кавернозным туберкулезом легких связана с лекарственной резистентностью к основным противотуберкулезным препаратам.

2. Увеличение количества РохрЗ-позитивных CD4+CD25f и CD4+CD25" регуляторных Т-клеток при туберкулезе легких у больных с положительной и отрицательной реакцией Манту сопряжено со снижением числа CD4+CD25+Foxp3" Т-лимфощггов в крови и гиперсекрецией цитокинов с противовоспалительной и иммуносупрессорной активностью - IL-10 при инфильтративной (лекарственно-чувствительной), IL-4 и TGF-P при диссеминированной (лекарственно-резистентной) и IL-10, TGF-P при фиброзно-кавернозной (лекарственно-резистентной) формах заболевания.

3. Иммуносупрессия при туберкулезе легких обусловлена повышением содержания Foxp3+регуляторных Т-клеток (Treg), а2-макроглобулина в крови на фоне дефицита

продукции IL-2, ассоциированного с лимфоцитопенией, гипоэргической реакцией пролиферации лимфоцитов на стимуляцию антигеном и гиперсекрецией 1L-4, IL-10, TGF-ß in vitro. Данные изменения более значимы у больных с отрицательной, чем с положительной пробой Манту.

Реализация и апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на конференциях молодых учёных «Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2009» (Санкт-Петербург, 2009) и «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2010), Internationaler congress and fachmesse (Hannover, 2008), VIII Международной Российско-германской научно-практической конференции «Инновации в медицине. Социально значимые инфекции» (Новосибирск, 2009), II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов» (Новосибирск, 2010), XI конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2010), а также на научно-образовательных семинарах «Патофизиология системы крови и иммунитета» при Центре компетенции rio проблеме инфекционных болезней им. И.И. Мечникова и Р. Коха ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (Томск, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ, из них 7 в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.

Объём и структура работы. Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырёх глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 4 рисунками и 15 таблицами. Библиографический указатель включает 265 источников, из которых 120 отечественных и 145 зарубежных авторов.

Личное участие автора. Анализ литературных данных по теме диссертации, планирование исследования, постановка цели и задач исследования, пробоподготовка и консервация супернатантов культуральных суспензий клеток, иммуноферментный анализ, оценка пролиферативной активности лимфоцитов, определение концентрации а2-макроглобулина в сыворотке крови, статистический анализ результатов, написание диссертации выполнены лично автором.

ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В основу данной работы положены результаты обследования 140 впервые выявленных больных (105 мужчин и 35 женщин в возрасте от 18 до 55 лет) с

распространенными деструктивными формами туберкулеза легких (ТЛ): 75 (53 мужчины и 22 женщины) с инфильтративным ТЛ (ИТЛ), 41 (33 мужчины и 8 женщин) с диссеминированным ТЛ (ДТЛ), 24 (19 мужчин и 5 женщин) с фиброзно-кавернозным ТЛ (ФКТЛ). Пациенты находились на стационарном лечении в Томской областной клинической туберкулезной больнице (гл. врач - к.м.н. Г.В. Янова) во фтизиотерапевтическом отделении №1 (и.о. зав. отд. - Е.П. Степанова).

Клинический осмотр пациентов, сбор анамнеза, физикальные методы обследования больных и постановку диагноза осуществляли врачи-фтизиатры Томской областной туберкулёзной клинической больницы: к.м.н. Филинюк О.В., к.м.н. Некрасов Е.В., к.м.н. Петрова Л.Е., Степанова Е.П., Мельникова Т.Н., Янов A.A., Щегерцов Д.А.

Диагноз устанавливался на основании клинической картины заболевания, данных рентгенологического исследования легких, результатов микроскопического и бактериологического исследования мокроты.

Всем обследованным проводилось внутрикожное введение туберкулина (проба Манту) в объеме 0,1 мл раствора, содержащего 2 туберкулиновых единицы (ТЕ). Результат пробы Манту оценивали через 72 ч путем измерения размера инфильтрата (папулы) в миллиметрах (мм). При отсутствии инфильтрата при учете реакции на пробу Манту измеряли и регистрировали гиперемию. Результат пробы Манту считали: отрицательным при полном отсутствии инфильтрата (папулы) или гиперемии, или при наличии уколочной реакции (0-1 мм); сомнительным при инфильтрате размером 2-4 мм или только гиперемии любого размера без инфильтрата; положительным при наличии инфильтрата диаметром 5 мм и более. Гиперергическими у взрослых считались реакции с диаметром инфильтрата 21 мм и более, а также везикуло-некротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

В основу деления больных с различными клиническими формами легочного туберкулеза на группы были положены два принципа: лекарственная чувствительность возбудителя к основным противотуберкулезным препаратам (ПТП) и различная реакция на внутрикожное введение туберкулина. Согласно первому принципу больные были распределены на две группы: первую группу больных, выделяющих микобактерии туберкулеза (МБТ), чувствительные к основным ПТП, составили 43 пациента с ИТЛ, 24 с ДТЛ и 11 с ФКТЛ; во вторую группу были включены больные, выделяющие МБТ, устойчивые к препаратам основного ряда (изониазиду, рифампицину, стрептомицину, этамбутолу): 32 пациента с ИТЛ, 17 с ДТЛ и 13 с ФКТЛ.

В соответствии со вторым принципом все больные были разделены на группы с

положительной (положительной и гиперергической) и с отрицательной (отрицательной и сомнительной) реакцией на туберкулин.

Лекарственную чувствительность М. tuberculosis определяли традиционным методом абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена. Исследования проводились в бактериологических лабораториях Томской областной туберкулезной клинической больницы и Томского областного противотуберкулезного диспансера.

Критериями исключения больных ТЛ из исследования служили возраст менее 18 или более 55 лет, проведение вакцинации или ревакцинации BCG (в течение менее 3 лет до момента начала исследования) и другими вакцинами, недавно (менее 3 месяцев назад) перенесенная инфекция, острые и хронические (в стадии обострения) сопутствующие инфекционные и соматические заболевания, аллергические состояния.

Контрольную группу составили 28 здоровых доноров с сопоставимыми характеристиками по полу и возрасту.

Материалом для исследования служила венозная кровь, взятая из локтевой вены утром натощак в количестве 10 мл. Исследование иммунологических показателей у больных ТЛ проводили однократно, до начала специфической противотуберкулезной химиотерапии.

Выделение мононуклеарных лейкоцитов из цельной крови осуществляли методом градиентного центрифугирования. Клетки культивировали по методу Е.Д. Гольдберга и соавт. [1992]. Для индукции секреторной функции мононуклеарных лейкоцитов в клеточные культуры вносили вакцинный штамм BCG (Bacillus Calmette-Guérin) (ФГУП «НПО Микроген», Россия) в дозе 50 мкг/мл, для индукции пролиферации лимфоцитов -туберкулин (PPD, 50 ТЕ). Определение содержания интерлейкинов (IL) -2, -4, -10 и трансформирующего фактора роста (TGF) ß в супернатантах культуральных суспензий проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа согласно инструкциям, прилагаемым производителями тест-систем (ЗАО «Вектор-Бест», Россия; ООО «Цитокин», Россия; ООО «Протеиновый контур», Россия; «Biosourse», Бельгия). Результаты выражали в пг/мл. Для определения концентрации а2-макроглобулина (а2-МГ) в сыворотке крови использовали твердофазный иммуноферментный «сэндвичевый» метод (ELISA), анализ проводили согласно инструкции предлагаемой фирмой IMMUNDIAGNOSTIK AG (Германия). Субпопуляции CD4+CD25+Foxp3+, CD4+CD25" Foxp3+, CD4+CD25tFoxp3" регуляторных Т-клеток определяли методом проточной лазерной трехцветной цитометрии с использованием моноклональных антител, меченных флуоресцентными метками. Процедуру окрашивания поверхностных (CD4,

CD25) и внутриклеточного (Foxp3) маркеров проводили согласно протоколу фирмы производителя («Becton Dickinson (BD)», США). Измерение производили на проточном питометре FACSCalibur (Becton Dickinson, США). Анализ полученных данных осуществляли при помощи программой) приложения BD Cell CellQuest for Mac OS® X. Пролиферацию лимфоцитов оценивали с помощью МТТ-теста [Carmichael J., 1987]. Результаты теста выражали в единицах оптической плотности (ед.опт.пл).

Оценку полученных результатов проводили методами статистического описания и проверки статистических гипотез. Для представления количественных показателей рассчитывали медиану (М), первый и третий квартили (Qj, Q3). Для всех имеющихся выборок данных проверяли гипотезу нормальности распределения (критерий Шапиро-Уилкса). Для оценки достоверности различий выборочных данных, не подчиняющихся критерию нормального распределения, использовали критерий Вилкоксона для зависимых выборок и U-критерий Манна-Уитни для независимых выборок. Для показателей, характеризующих качественные признаки, указывалось абсолютное число и относительная величина в процентах (%). Статистическую значимость различий качественных признаков, относящихся к номинальным данным, проверяли с помощью критерия х2 с поправкой Йетса. Критическое значение уровня статистической значимости при проверке нулевых гипотез принималось равным 0,05. С целью обнаружения связи между исследуемыми показателями проводили корреляционный анализ путем вычисления коэффициента ранговой корреляции Спирмена (г). Для анализа связи между качественными признаками использовался коэффициент ассоциации га [Боровиков В.П., 2003; Гланц С., 1999].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Очевидно, что в основе иммунопатогенеза различных клинических форм туберкулеза легких (ТЛ) лежат неоднозначные механизмы иммунного ответа на Mycobacterium tuberculosis. С иммунологической точки зрения туберкулез является классическим примером иммунопатологической реакции гиперчувствительности замедленного (IV) типа, т.е. клеточноопосредованного иммунного ответа. Однако в зависимости от характера течения туберкулезного процесса выделяют несколько форм специфического иммунного ответа, при этом для инфильтративного ТЛ (ЙТЛ), как правило, характерен Thl -ответ. В случае диссеминированного ТЛ (ДТЛ) преобладает ТЪг-ответ. Что же касается фиброзно-кавернозного ТЛ (ФКТЛ), то у таких пациентов практически всегда специфический иммунный ответ выражен слабо (Т-клеточная

анергия), но возможен и другой вариант, когда при ФКТЛ задействованы оба типа иммунного ответа с преобладанием Th2, что характеризуется усиленной антителопродукцией, массивной бактериемией и, как следствие, деструкцией легочной ткани и казеозным некрозом [Левашов Ю.Н., Репин Ю.М., 2008; Комогорова Е.Э. и соавг.,2005; ХоменкоА.Г., 1996].

Проведенные нами исследования позволили установить небезынтересные факты в отношении групп больных ТЛ с отрицательной реакцией Манту, т.е. с туберкулиновой анергией. С позиции иммунологии анергией (иммунологической толерантностью) принято считать полную или частичную утрату организмом специфической иммунологической реактивности на антигенную стимуляцию. При анергии отмечается отсутствие или снижение пролиферативного ответа различных клонов CD4+ Т-хелперов на специфические антигены и митогены как in vitro, так и in vivo [Тюлькова Т.Е. и соавт., 2008]. В данном случае целесообразно говорить о Т-клеточной анергии. У пациентов с ТЛ она часто ассоциирована с отрицательной реакцией на внутрикожное введение туберкулина [Сахно Л.В. и соавт., 2004; Черных Е.Р. и соавт., 2002]. В то же время следует отметить, что отрицательная реакция Манту у обследованных нами больных ТЛ в 19,28% случаев сопровождалась лекарственной устойчивостью (ЛУ) к основным противотуберкулезным препаратам (ПТП). При оценке связи между наличием лекарственной резистентности и характером пробы Манту нами было установлено наличие данной ассоциации у больных ДТЛ (х?'=6,31, р<0,05) и ФКТЛ (%2=11,10, р<0,01). При этом среди больных ДТЛ и ФКТЛ доля пациентов с лекарственно-резистентным вариантом заболевания и отрицательной реакций Манту составляла 26,83% и 54,18% соответственно. В этой связи можно думать, что штаммы микобактерий, устойчивые к стандартной химиотерапии, обладают определенными свойствами в отношении реализации механизмов супрессии иммунного ответа, возможно, посредством индукции Т-клеточной анергии [Воронкова О.В. и соавт., 2011; Сахно Л.В. и соавт., 2004].

Общеизвестно, что ключевыми клетками иммунной системы, обеспечивающими формирование специфического и неспецифического ответа организма на внедрение инфектогена (в частности МВТ), а также участвующими в реализации механизмов иммунной супрессии, являются лимфоциты крови. Изменения показателей количества лимфоцитов в крови достоверно отражают состояние основной защитной системы организма и являются основой для диагностики и оценки тяжести течения инфекционного процесса [Карпова М.Р., 2000],

При оценке результатов проведенных исследований у больных ТЛ вне зависимости от формы заболевания, характера туберкулиновой реакции и чувствительности возбудителя к ПТП в острую фазу заболевания была установлена характерная для туберкулезной инфекции относительная лимфоцитопения. Более выраженное снижение как относительного, так и абсолютного числа лимфоцитов было выявлено у больных ТЛ с отрицательной (чем с положительной) реакцией Манту вне зависимости от клинической формы специфического процесса.

Одной из важных причин снижения численности лимфоцитов при инфекции, как известно, может служить угнетение их пролиферации. Как показали результаты проведенного нами исследования, у больных как лекарственно-чувствительным (ЛЧ), так и лекарственно-устойчивым (ЛУ) ТЛ вне зависимости от клинической формы заболевания в острый период регистрировалось выраженное снижение активности спонтанной бластгрансформации клеток относительно нормы. Помимо спонтанной пролиферации лимфоцитов, которая отражает общую реакцию лимфоидных элементов периферической крови на инфекцию, нами была оценена индуцированная реакция пролиферации, которая свидетельствует о резервной реактивности Т- и В-лимфоцитов. При этом отражением функционального состояния лимфоцитов, коммитированных на микобактериальные антигены, является пролиферативный ответ этих клеток на добавление в клеточные культуры специфического микобактериального антигена -туберкулина (PPD).

При действии туберкулина в дозе 50 ТЕ уровень пролиферации лимфоцитов у пациентов с ТЛ достоверно не отличался от показателей спонтанной пролиферации, но был существенно ниже нормы. При этом наименьший уровень пролиферативного PPD-ответа лимфоцитов регистрировался при лекарственно-чувствительном ФКТЛ (0,118 ед. опт. пл. при норме 0,321 ед. опт. пл., р=0,001).

Таким образом, отсутствие пролиферативного ответа клеток на PPD при ТЛ свидетельствует об анергии специфичных к микобактериальному антигену лимфоцитов, возможно, вследствие иммуносупрессии или функционального истощения клеток в процессе формирующейся при ТЛ реакции гиперчувствительности замедленного типа.

Приоритет в модуляции реакций пролиферации, дифференцировки и функциональной активности лимфоцитарных клеток, безусловно, принадлежит регуляторным иммуноцитокинам. Одним из них является интрелейкин (IL) 4 -типичный цитокин с плейотропной активностью [Симбирцев A.C., 2004, 1998]. При взаимодействии IL-4 со специфическим рецептором осуществляется широкий спектр

иммунологических функций: поляризация дифференцировки Т-лимфоцитов в направлении Th типа 2, активация B-лимфоцитов, переключение синтеза иммуноглобулинов [Кетлинский С.А., Симбирцев A.C., 2008]. Наряду с этим, IL-4 предотвращает апоптоз регуляторных Т-клеток (Treg-лимфоцитов), усиливает их пролиферацию и повышает супрессорную активность [Расе L. et al.s 2005], ингибирует продукцию Thl-ассоциированных цитокинов (IL-2 и интерферона (IFN) у) [Pritchard D. I. et al„ 2004].

Проведенное нами исследование выявило повышение продукции IL-4 in vitro у больных ДТЛ вне зависимости от реакции на внутрикожное введение туберкулина (до 47,73 пг/мл при положительной и 65,91 пг/мл при отрицательной пробе Манту при норме 39,98 пг/мл, р<0,05), а также (в зависимости от лекарственной чувствительности возбудителя к ПТП) при лекарственно-устойчивом ДТЛ (61,36 пг/мл, р<0,05).

Для оценки индуцированной секреции цитокинов мононуклеарными лейкоцитами крови в качестве антигена использовался вакцинный штамм BCG (живой аттенуированный штамм М. bovis). Анализ BCG-индуцированной продукции IL-4 in vitro показал, что наиболее выраженные изменения данного параметра также отмечались в группе больных ДТЛ, у которых вне зависимости от реакции на туберкулин продукция указанного медиатора превышала контрольные значения, а у туберкулинположительных пациентов - и базальный уровень продукции IL-4.

На наш взгляд, это связано с тем, что при ДТЛ (как указывалось выше) реализуется преимущественно специфический ТЬ2-ответ. С точки зрения иммунопатологии ДТЛ можно отнести к ареактивной форме, для которой характерно резкое снижение функциональной активности Т-лимфоцитов, моно- и полиморфноядерных лейкоцитов, усиление метаболизма B-лимфоцитов и их иммуноглобулинсекретирующей функции [Хоменко А.Г., 1996; Комогорова Е.Э. и соавт., 2005]. Логично предположить, что в иммунных реакциях при ТЛ IL-4 выступает преимущественно как синергист IL-10, соответственно он выполняет свою функциональную роль как активатор Th2-иммунного ответа с гиперпродукцией противотуберкулезных антител. Корреляционный анализ позволил установить наличие положительной взаимосвязи между секрецией указанных иммуноцитокинов при ДТЛ (г=0,7, р<0,001).

Наряду с IL-4 важную роль в формировании противотуберкулезного иммунитета играет IL-2 - ростовой фактор Т-клеток. Анализ IL-2-секретирующей функции мононуклеарных лейкоцитов крови in vitro у больных ТЛ с различной чувствительностью возбудителя к ПТП (ЛЧТЛ и ЛУТЛ) показал, что в группе больных с

диссеминированным и фиброзно-кавернозным ЛУТЛ дефицит образования IL-2 (14,26 пг/мл и 8,62 пг/мл соответственно при норме 22,26 пг/мл) был более выраженным, чем при аналогичных клинических формах ЛЧТЛ (р<0,05). Также в ходе проведенного исследования было выявлено снижение базальной продукции IL-2 in vitro (относительно таковой у здоровых доноров) у туберкулинположительных пациентов с ИТЛ и при ФКТЛ вне зависимости от реакции Манту. Однако наиболее выраженный дефицит базальной продукции IL-2 отмечался в группе туберкулинотрицательных больных ФКТЛ (6,74 пг/мл, р<0,05).

Таким образом, выявленные нами лимфоцитопения и снижение пролиферативной активности лимфоцитов у больных ТЛ могли обуславливаться гипопродукцией IL-2 -основного эндогенного фактора митогенеза лимфоцитов, что подтверждается положительной корреляционной связью между уровнем продукции IL-2 in vitro и относительным количеством лимфоцитов в крови (г=0,7, р<0,05) при ИТЛ и ДТЛ.

Анализ BCG-индуцированной секреции IL-2 in vitro при ЛЧТЛ и ЛУТЛ также показал ее угнетение у всех больных ТЛ вне зависимости от лекарственной чувствительности возбудителя к ПТП и реакции Манту по сравнению с группой здоровых доноров. При этом наиболее выраженным оно было у туберкулинотрицательных больных с ИТЛ (5,48 пг/мл, р<0,05) и ФКТЛ (1,72 пг/мл, р<0,01).

Однако уникальная роль IL-2 в регуляции иммунитета связана не только с выполнением функции ростового фактора, но и с контролем за гиперактивацией иммунной системы за счет стимуляции и дифференцировки регуляторных Т-клеток с иммуносупрессорной активностью [Chen X. et al., 2007; Сахно Л.В. и соавт., 2004; Malek Т., Bayer А., 2004]. Выделяют как минимум две разновидности Treg-клеток: естественные тимические регуляторные Т-клетки (у5Т, NKT, Treg) и индуцированные на периферии (Treg, Thl, Th3, CD8+CD28") [Хаитов P.M. и соавт., 2011]. Предполагается, что естественные Treg-клетки имеют фенотип CD44CD25+(hl)Foxp3+, в то время как к индуцированным CD4+ регуляторным Т-клеткам относятся преимущественно лимфоциты с иммунофенотипом CD4+CD25"Foxp3+, а также CD4+CD25+Foxp3' -гетерогенная субпопуляция Т-лимфоцитов, включающая в себя как регуляторные Т-клетки, так и активированные CD4+ Т-лимфоциты. При этом супрессорной активностью обладают только БохрЗ-экспрессирующие Т-клетки [Ярилин A.A., Донецкова А.Д., 2006; Pop S.M. et al., 2005], т.е. CD4+CD254Foxp3+ и CD4+CD25"Foxp3+Т-лимфоциты.

Как показали проведенные исследования, у больных ИТЛ и ДТЛ вне зависимости

от реакции Манту и лекарственной чувствительности возбудителя к ПТП до начала специфической терапии, т.е. в острую фазу воспалительного процесса, отмечалось увеличение количества CD4+CD25+Foxp3+ Treg-лимфоцитов в крови. Схожая картина наблюдалась при лекарственно-устойчивом варианте ФКТЛ и у больных ФКТЛ с положительной пробой Манту (табл. 1).

По-видимому, увеличение числа CD4+CD25+Foxp3+ регуляторных Т-лимфоцитов в крови является неблагоприятным фактором, поскольку в данной ситуации может увеличиваться их функциональная активность, способствующая в дальнейшем формированию как туберкулиновой, так и Т-клеточной анергии. Кроме того, увеличение числа CD4+CD25+Foxp3+ клеток в крови практически при всех клинических формах ТЛ позволяет предположить, что именно они могут выполнять одну из основных иммуносупрессорных функций при туберкулезной инфекции.

Известно, что Treg-клегки с фенотипом CD4+CD25+Foxp3+ «обучаются» в тимусе на этапе негативной селекции и покидают тимус как популяция естественных Treg (Trn), обладающих максимальной супрессорной активностью. Источником CD4+CD25+Foxp3+ Т-клеток могут быть CD4+CD25"Foxp3+ Т-лимфоциты, также формирующиеся в тимусе и образующие резервный пул для генерации CD25+ Treg-лимфоцитов [Zelenay А.С. et al., 2005]. В свою очередь, регуляторные Т-клетки с фенотипом CD4+CD25Toxp3+в связи с отсутствием экспрессии на их поверхности СБ25-маркера принято считать индуцированными, т.е. генерированными на периферии под воздействием TGF-p [Wu Y.E. et al., 2010; Pop S. et al., 2005; Setoguchi R. et al., 2005].

При оценке количества Treg-лимфоцитов с фенотипом CD4+CD25Toxp3+ у туберкулинотрицательных больных с ДТЛ и ФКТЛ отмечалось увеличение их количества по сравнению с таковым у здоровых доноров. При этом у больных с положительной реакцией на туберкулин значения данного параметра были ниже таковых у больных с отрицательной реакцией Манту вне зависимости от формы ТЛ (табл. 1), что может быть связано со способностью индуцированных Treg влиять на формирование туберкулиновой анергии.

Также нами было отмечено достоверное увеличение данной субпопуляции Treg-клеток у больных с ЛУТЛ по сравнению с нормой и лекарственно-чувствительным вариантом заболевания при ИТЛ и ФКТЛ. Таким образом, нельзя исключить тот факт, что при ЛУТЛ происходит активация механизмов иммунносупрессии как за счет естественных, так и за счет индуцированных Treg. С другой стороны, ЛУ-штаммы МБТ могут способствовать угнетению иммунного ответа посредством индукции Treg-клеток.

Таблица 1

Субпопуляционный состав Т-регуляториых лимфоцитов крови у больных туберкулезом легких в зависимости от результатов пробы Манту (Ме (ОгСЬ))

Группы обследованных лиц С04+С025+17охРЗ* (%) СП4+С025+РохРЗ+ (%) С04+СШ5ТохРЗ+ (%)

Здоровые доноры 25,45 (22,30-27,60) 2,63 (2,00-3,29) 5,00 (4,76-10,00)

л I о 5 « а « н 3 Н с к Отрицательная проба Манту 18,00 (13,00-19,00) 5,00 (3,50-6,50) р,=0,04 8,00 (7,00-9,00) Рг=0,02

*п Си С* * « н я с и 5о С Положительная проба Манту 17,00 (9,00-26,00) р,=0,026 4,00 (3,00-8,00) р,=0,007 6,00 (4,00-13,00) Р2=0,046

Больные днссеминированным туберкулезом легких (ДТЛ) Отрицательная проба Манту 16,50 (7,00-21,00) р,=0,0016 5,50 (3,00-8,00) р1=0,017 7,00 (4,00-11,00) р1=0,021

Положительная проба Манту 11,50 (9,00-16,50) р1=0,0032 Р2=0,016 5,20 (2,75-8,00) Р1=0,0142 5,50 (3,50-9,00)

о Э и И " 5 а! Отрицательная проба Манту 25,00 (12,00-26,00) Рз=0,0001 3,40 (2,00-4,00) 11,00 (5,00-14,00) р,=0,014 Рз=0,0006

и а^Х § Г1- Положительная проба Манту 15,50 (13,00-18,00) р,=0,0028 р2=0,047 6,10 (2,20-10,00) р,=0,045 р2=0,0076 6,50 (2,00-11,00) р2=0,0016

Примечание: р1 - уровень статистической значимости различий по сравнению с параметрами у здоровых доноров; р2- по сравнению с параметрами у больных с отрицательной пробой Манту; р3-по сравнению с параметрами у больных ДГЛ.

Известно, что главными клетками-мишенями воздействия Тге§-лимфоцитов являются активированные СЕ>4+- и СШ+-кдетки - основные эффекторные клетки противотуберкулезного иммунитета [Расе Ь. ег а1., 2005]. Выявленное в настоящем исследовании пониженное содержание Т-лимфоцитов с иммунофенотипом С04+С025+, не экспрессирующих транскрипционный фактор БохрЗ, у туберкулинположительных пациентов вне зависимости от клинической формы ТЛ (табл. 1) и в отсутствие взаимосвязи с лекарственной чувствительностью МВТ к ПТП по сравнению с группой здоровых доноров, по всей видимости, можно рассматривать как проявление Т-клеточного иммунодефицита

Предположительно туберкулиновая анергия у больных ТЛ ассоциирована с наличием супрессорной активности регуляторных Т-клеток и развитием неспецифической супрессии, 14

проявляющейся в угнетении пролиферации Thl-лимфоцитов [Сахно Л.В. и соавт., 2004; Салина Т.Ю., Худзик Л.Б., 2001], что подтверждается наличием отрицательных корреляционных взаимосвязей между количеством Treg с фенотипом CD4+CD25+Foxp3+ и пролиферативной активностью лимфоцитов крови - базальной (г=-0,6, р<0,05) и стимулированной PPD (г=-0,7, р<0,05) вне зависимости от клинической формы заболевания. Это является еще одним доказательством того, что именно CD4+CD25+Foxp3+ Treg-клетки оказывают негативный эффект на пролиферацию лимфоцитов и являются ведущим фактором иммуносупрессии при туберкулезе легких.

Известно, что Treg обладают способностью ингибировать функции других клеток иммунной системы при непосредственном контакте или опосредованно через секрецию иммунорегуляторных цитокинов: IL-10 и трансформирующего фактора роста (TGF) (3 [Lee D.C. et al., 2010; Nishikawa H„ Sakaguchi S., 2005; Sakaguchi S. 2004; Takahashi T. et al., 1998].

В ходе проведённых исследований нами было зарегистрировано повышение уровня базальной и BCG-индуцированной продукции IL-10 in vitro при ИТЛ вне зависимости от реакции на туберкулин. Аналогичные изменения наблюдались при лекарственно-чувствительном ИТЛ и лекарственно-устойчивом ФКТЛ (табл. 2). Снижение секреции IL-10 in vitro было отмечено только в группе пациентов с лекарственно-чувствительным ФКТЛ (табл. 2). Уровень базальной секреции IL-10 у больных ФКТЛ с отрицательной реакцией Манту был сопоставимым с аналогичным показателем у здоровых доноров, в то время как уровень BCG-индуцированной продукции значительно снижался, что свидетельствует об истощении IL-10-секреторного резерва С04-позитивных лимфоцитов, в числе которых могут быть и Treg-лимфоциты.

Активированные Treg-клетки сами по себе энергичны: in vitro они слабо пролиферируют и слабо секретируют цитокины, и лишь IL-10 и TGF-P секретируются Treg-клетками в значительных количествах [Хаитов P.M. и соавт., 2011; Kuniyasu Y. et al., 2000], что отчасти подтверждается положительной корреляцией между уровнем образования TGF-J3 и количеством в крови Treg-клеток с фенотипом CD4+CD25+Foxp3+ при ФКТЛ (г=0,9, р<0,01).

При анализе спонтанной продукции TGF-P в группе больных ФКТЛ значимое ее увеличение относительно группы здоровых доноров было зарегистрировано как у туберкулинположительных (1515,26 пг/мл, р<0,01), так и у туберкулинотрицательных (2198,68 пг/мл, р<0,05) пациентов. Выраженное снижение базального уровня секреции медиатора in vitro было отмечено в группе больных ИТЛ и ДТЛ с положительной пробой Манту.

Таблица 2

Уровень продукции IL-10 и TGF-(3 in vitro у больных с лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым туберкулезом легких (TJI) (Me (Q1-Q3))

Группы обследованных лиц IL-10 (пг/мл) TGF-P(nr/M.i)

Без При Без При

индукции индукции индукции индукции

(базальная) BCG (базальная) BCG

Здоровые доноры 25,29 26,21 1108,75 1087,80

(13,50-33,56) (22,74-52,2) 929,80-1487,20 500,00-1412,60

X Инфильтративный 44,37 57,47 1078,95 1030,80

ТЛ (19,27-59,29) (31,66-64,90) (801,30-1650,05) (897,10-1180,00)

fe Pi=0,0014 р 1=0,024

S s X 0 р5=0,006

К к Диссеминированный 23,72 33,36 951,80 685,20

S & ТЛ (9,45-52,14) (20,73-65,73) (750,20-1452,00) (580,03-824,01)

s « Р2=0,00007 р2=0,00007 р,=0,00012

ЬЙ Ю si? р2=0,002

Sí s рз=0,003

a 1 Р;=0,035

s 3 л с 4 S Фиброзно- 20,82 12,20 1360,70 731,28

á s кавернозный ТЛ (11,53-45,49) (10,82-28,38) (871,97-2384,58) (721,82-2877,60)

es 6 р,=0,00007 р,=0,044 р3=0,00007 р,=0,013

ca Р2=0,00007 р2=0,00007 р,=0,021

F р4=0,008 р5=0,049

Инфильтративный 27,44 34,32 584,30 349,50

ТЛ (24,01-45,96) (26,00-59,29) (317,09-775,60) (197,54-912,60)

S 3 р4=0,00007 р1=0,00013 Pi=0,015

g Р2=0,000001 рз=0,004

s р4=0,00007 р4=0,002

° X H g Диссеминированный 19,27 26,79 1686,74 2016,08

в ТЛ (17,83-19,27) (23,71-33,36) (907,28-2466,20) (806,96-3225,20)

I s Р2=0,044 р,=0,00007 р,=0,034

1 0 M n р5=0,005 р2=0,00007 рг=0,041

H 0 & 5. р4=0,003 р4=0,021

& 5» * a. Р;=0,005

« 4> П XO Фиброзно- 32,25 98,13 2621,30 2403,50

W P U * кавернозный ТЛ (10,82-53,68) (42,46-153,80) (2486,00-2756,60) (1969,00-2838,00)

3 Д Рз=0,0005 Pi=0,0004 Р!=0,00007 pi=0,0009

1 р2=0,00007 р2=0,045 pi=0,00014

(8 рз=0,005 р3=0,00009 р4=0,033

р4=0,031 р4=0,005

Р5=0,028

Примечание: Р1 - уровень статистической значимости различий по сравнению с параметрами у здоровых доноров; рг- по сравнению с параметрами у больных ИТЛ; рз - по сравнению с параметрами у больных ДТЛ; р< - по сравнению с параметрами у больных с лекарственно-чувствительным туберкулезом легких; рз - по сравнению с базальным уровнем секреции.

При оценке ВСС-индуцированной продукции ТСБ-Р обращал на себя внимание тот факт, что выраженное ее увеличение регистрировалось только в группе туберкулинположительных больных ФКТЛ (2838,00 пг/мл, р<0,05), у всех остальных пациентов (главным образом туберкулинотрицательных), напротив, указанный параметр

снижался.

Анализ продукции TGF-ß у больных TJ1 с различной чувствительностью возбудителя к ПТП показал наличие разнонаправленных ее изменений у больных с лекарственно-устойчивыми формами заболевания (табл. 2). Так, у больных ДТЛ и ФКТЛ с лекарственной устойчивостью возбудителя отмечалось значительное увеличение секреции данного медиатора in vitro (базальной и BCG-индуцированной), тогда как при ИТЛ было зафиксировано ее снижение (табл. 10). Ниже нормы оказался также уровень продукции TGF-р при индукции клеток вакцинным штаммом BCG при лекарственно-чувствительном ДТЛ и ФКТЛ (табл. 2).

Анализируя вышеуказанные данные, можно предположить, что у обследованных нами больных ИТЛ ведущим цитокином, способствующим поляризации иммунного ответа в направлении Th2, равно как и формированию иммуносупрессии, является IL-10. Несмотря на то, что Treg-клетки являются основными клетками-продуцентами обоих медиаторов - IL-10 и TGF-P, закономерность увеличения продукции TGF-ß прослеживается именно при тяжелых деструктивных формах ЛУТЛ (ДТЛ и ФКТЛ), в том числе сопровождающихся отрицательной реакцией Манту.

Как известно, многие цитокины, в том числе и исследованные нами IL-2, IL-4, IL-10 и TGF-ß, имеют рецепторы на поверхности иммунокомпетентных клеток, через которые реализуются их регуляторные потенции. Одним из факторов, выступающих в качестве акцептора избытка циркулирующих иммунорегуляторных цитокинов, а также регулятора пролиферации и периферической экспансии иммунокомпетентных клеток, может рассматривается аг-макроглобулин (аг-МГ). Существенная часть цитокинов образует комплексы с а2-МГ и поступает в клетки через рецепторы данного белка [Lindner I. et al., 2010; Зорин H.A. и соавт., 2004].

При проведении исследований нами было установлено увеличение концентрации а2-МГ в сыворотке крови у больных ТЛ вне зависимости от клинической формы (до 4,84-7,47 г/л при норме 3,46 г/л, р<0,05-0,01), при этом более выраженное ее увеличение было выявлено у туберкулинположительных пациентов. Корреляционный анализ показал наличие положительной взаимосвязи между концентрацией сь-МГ в сыворотке крови и уровнем секреции in vitro IL-10 (r=0,7, р<0,001 у больных с лекарственно-устойчивым ДТЛ) и TGF-ß (г=0,8, р<0,001 при лекарственно-чувствительном ФКТЛ).

Имеются сведения, что индукторами биосинтеза 02-МГ служат факторы роста, регулируемые самим белком. Инициирующим стимулом к продукции а2-МГ является образование комплексов а2-МГ с TGF-ß [Зорин H.A. и соавт., 2006, 200; Birkenmeier G.,

2001]. Принимая во внимание данные литературы и результаты собственных исследований, можно предположить, что высокий уровень продукции TGF-f) индуцирует увеличение концентрации а2-МГ в крови. Данное предположение подтверждается наличием положительной зависимости между показателями базальной секреции TGF-p in vitro и концентрации а2-МГ в крови (г=0,6, р<0,05) у пациентов с ФКТЛ.

Рис. 1. Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких (по результатам собственных исследований)

Учитывая, что дефицит циркулирующего агМГ, связывающего ионы цинка, опосредует активацию цинкзависимого гормона - тимулина, способного запускать секрецию

IL-2 [Зорин H.A. и соавт., 2004], можно думать, что механизм снижения секреции IL-2 in vitro у больных ТЛ связан с избытком сь-МГ в крови.

Таким образом, в ходе проведенного исследования установлено, что наиболее значимыми факторами формирования супрессии иммунного ответа при ТЛ (рис. 1) являются увеличение количества Foxp3+ Treg-лимфоцитов и а2-МГ в крови, ассоциированное с гиперпродукцией IL-4, IL-10 и TGF-ß на фоне снижения секреции IL-2. Можно предположить, что при ТЛ факторы супрессии иммунного ответа преобладают над факторами активации, что может впоследствии обуславливать диерегуляцию как клеточного, так и гуморального иммунного ответа, и способствовать формированию комбинированной иммунологической недостаточности и дальнейшему прогрессированию туберкулезного процесса.

ВЫВОДЫ

1. Отрицательная реакция Манту (туберкулиновая анергия) вследствие супрессии антигенспецифического иммунного ответа у больных диссеминированным и фиброзно-кавернозным туберкулезом легких сопряжена с лекарственной резистентностью Mycobacterium tuberculosis к противотуберкулезным препаратам.

2. Ведущими факторами иммуносупрессии при туберкулезе легких являются повышение содержания Foxp3+ регуляторных Т-клеток (Treg) и а2-макроглобулина в крови, дефицит секреции IL-2 in vitro, ассоциированный с лимфоцитопенией, гипоэргической пролиферативной реакцией лимфоцитов крови и гиперпродукцией (при инфильтративном лекарственно-чувствительном, диссеминированном и фиброзно-кавернозном лекарственно-резистентном туберкулезе легких) цитокинов с противовоспалительной и супрессорной активностью.

3. Дитокинопосредованная супрессия Thl-ответа при инфильтративном туберкулезе легких определяется гиперсекрецией IL-10, при диссеминированном - IL-4 и TGF-ß. При фиброзно-кавернозном туберкулезе легких сочетанное повышение базальной и BCG-индуцированной продукции IL-10 и TGF-ß in vitro характеризует активацию CD4+CD25+Foxp3+ Treg-лимфоцитов.

4. Увеличение относительного содержания CD4+CD25+ и CD4+CD25" РохрЗ-позитивных регуляторных Т-клеток в крови у больных туберкулезом легких вне зависимости от лекарственной чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам сочетается с дефицитом CD4+CD25+Foxp3" Т-лимфоцитов.

5. Базальная и BCG-индуцированная гипосекреция IL-10 и TGF-ß in vitro при лекарственно-резистентном инфильтративном и лекарственно-чувствительном диссеминированном и

фиброзно-кавернозном туберкулезе легких, коррелирующая с количеством CD4+CD25~ Foxp3+ Т-клеток в крови, свидетельствует о снижении функционального резерва CD25-негативных регуляторных Т-клеток с иммуносупрессорной активностью. У больных с туберкулиновой анергией лимфоцитопения, дефицит BCG-индуцированной секреции IL-2 in vitro, повышение содержания CD4+CD25Toxp3+ Т-клеток в крови и базальной продукции IL-4 и TGF-p (при инфильтративном и диссеминированном туберкулезе легких) более значимы, чем у пациентов с положительной пробой Манту.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Сравнительная оценка показателей адаптивного иммунитета при лекарственно-чувствительном и лекарственно-устойчивом туберкулезе легких [текст] / О.В. Воронкова, О.И. Уразова, Р.Р. Хасанова, В.В. Новицкий, В.А. Серебрякова, И.О. Наследникова, А.Е. Колосова [и др.] // Аллергология и иммунология. - 2008. - Т. 9. -№3.-С. 288-289.

2. Зависимость продукции ИЛ-2 от варианта туберкулеза легких (лекарственно-чувствительный/лекарственно-устойчивый) [текст] / О.В Воронкова, И.О. Наследникова, О.И. Уразова, Р.Р. Хасанова, В.А. Серебрякова, Ю.В. Стамбула,

A.Е.Колосова [и др.] // Российский иммунологический журнал. - 2008. - Т. 2. - № 2-3. -С. 245.

3. Иммунопатогенез бактериальных и вирусных инфекций: роль полиморфизма генов цитокинов [текст] / И.О. Наследникова, О.И. Уразова О.В. Воронкова, В.В. Новицкий, Р.Р. Хасанова, В.А. Серебрякова, Т.Е. Будкина, О.А. Васильева, Е.Л. Никулина, Н.А. Сухоленцева, А.Е. Колосова [и др.] // Аллергология и иммунология. - 2008. - Т. 9. - № З.-С. 289.

4. Роль цитокинов в модуляции субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных туберкулезом легких [текст] / Р.Р. Хасанова, О.В. Воронкова, О.И. Уразова,

B.В. Новицкий, А.К. Стрелис, А.Е. Колосова [и др.] // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2008. - № 3. - С. 31-35.

5. The molecular-genetic bases of management of human adaptable blood system reactivity during infection / V.V. Novitsky, O.I. Urazova, O.V. Voronkova, I.O. Naslednikova, A.E. Kolosova [et al.] // Intemationaler congress and fachmesse. -Hannover, 2008. -P. 65-66.

6. Реактивность лимфоцитов крови при туберкулезе легких [текст] / Р.Р. Хасанова, О.В. Воронкова, О.И. Уразова, В.В. Новицкий, А.К. Стрелис, В.А. Серебрякова, А.Е. Колосова [и др.] // Медицинская иммунология. - 2009. - Т. 11. - № 1. - С. 35-40.

7. Allelic polymorphism of cytokine genes during pulmonary tuberculosis / Т.О. Naslednikova,

O.I. Urazova, O.V. Voronkova, A.K. Strelis, V.V. Novitsky, E.L. Nikulina, R.R, Hasanova, A.E. Kolosova [et al.] // Bulletin of Experimental biology and medicine. - 2009. - Vol. 148. -P. 175-179.

8. Молекулярно-генетические аспекты прогнозирования и иммунотерапии туберкулезной инфекции [текст] / В.В. Новицкий, О.В. Воронкова, О.И. Уразова, И.О. Наследникова, А.К. Стрелис, P.P. Хасанова, В.А. Серебрякова, Е.Г. Чурина, О.В. Колоколова, Т.Е. Кононова, Н.П. Пирогова, E.JI. Никулина, H.A. Сухаленцева, А.Е. Колосова // Успехи физиологических наук. - 2009. - Т. 40. - № 2. - С. 40-46.

9. TGF-ß как фактор иммуносупрессии у туберкулинотрицательных пациентов с различными клиническими формами туберкулеза легких [текст] / А.Е. Колосова, Е.Г. Чурина, О.И. Уразова и [др.] // Инновации в медицине. Социально значимые инфекции: материалы VIII Международной российско-германской научно-практической конференции. - Новосибирск, 2009. - С. 198-199.

10.Особенности субпопуляционного состава лимфоцитов у больных инфильтративным туберкулезом легких в зависимости от выраженности туберкулиновой реакции [текст] / А.Е. Колосова, Е.Г. Чурина, Н.В. Теплова и [др.] II Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2009: материалы научной конференции молодых ученых с международным участием, посвященной 90-летию кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии СПбГМУ им. академика И.П.Павлова. — СПб., 2009. — С. 47.

11.Уровень секреции TGF-ß in vitro и А2-макроглобулина в сыворотке крови у больных деструктивными формами туберкулеза легких [текст] / А.Е. Колосова, Е.Г. Чурина, О.И. Уразова и [др.] // Вопросы патогенеза типовых патологических процессов: труды II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. — Новосибирск, 2010.-С. 169-173.

12.Особенности цитокинового профиля у больных фиброзно-кавернозным туберкулезом легких [текст] / А.Е. Колосова, Е.Г. Чурина, В.А. Серебрякова и [др.] // Актуальные проблемы патофизиологии: материалы XVI Межгородской конференции молодых ученых. - СПб., 2010. - С. 79-81.

13.Цитокин-продуцирующая активность мононуклеарных лейкоцитов периферической крови у больных фиброзно-кавернозным туберкулезом легких [текст] / А.Е. Колосова, О.И. Уразова, Е.Г. Чурина, [и др.] // Науки о человеке: материалы XI Конгресса молодых ученых и специалистов. — Томск: СибГМУ, 2010. — С. 57-58.

14.Особенности продукции провоспалительных цитокинов у больных инфильтративным

и диссеминированным туберкулезом легких [текст] / Е.Г. Чурина, А.Е. Колосова, В.А.

Серебрякова [и др.] // Актуальные проблемы патофизиологии: материалы XVI

Межгородской конференции молодых ученых. - СПб., 2010. - С. 184-185.

15. Роль Т-лимфоцитов в иммунопатогенезе туберкулезной инфекции [текст] / Е.Г. Чурина, О.И. Уразова, О.В. Воронкова, В.В. Новицкий, А.Е. Колосова, E.JI. Никулина // Туберкулез и болезни легких. -2011. - № 3. - С. 3 -7.

16. Особенности продукции цитокинов и аг-мкроглобулина у больных с различными клиническими формами туберкулеза легких [текст] / А.Е. Колосова, О.И Уразова, В.В. Новицкий, Е.Г. Чурина, О.В Воронкова, В.А. Серебрякова // Туберкулез и болезни легких. - 2011.-№ 1.-С. 48-52.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ДТЛ - диссеминированный туберкулез легких

ИТЛ - инфильтративный туберкулез легких

ЛУТЛ - лекарственно-устойчивый туберкулёз лёгких

ЛЧТЛ - лекарственно-чувствительный туберкулёз лёгких

МБТ - микобактерия туберкулеза

ПТП - противотуберкулёзные препараты

ТЛ - туберкулёз лёгких

ФКТЛ - фиброзно-кавернозный туберкулез легких BCG - Bacillus Calmette-Guörin IL - Interleukin - интерлейкин

TGF - Transforming grows factor - трансформирующий фактор роста Th - T-helper - субпопуляция CD4+ Т-лимфоцитов/хелперов Treg - регуляторные Т-клетки (РохрЗ4)

Тираж 120 экз. Заказ № 128. Отпечатано на участке оперативной полиграфии ООО «Печатная мануфактура». 634055, г. Томск, а/л 3967. Тел./факс: (3822) 493-119. E-mail: pechat@tomsk.ru

Оглавление диссертации Колосова, Анна Евгеньевна :: 2011 :: Томск

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о туберкулезной инфекции 13 1.1.1. Клинико-патогенетические особенности отдельных деструктивных форм туберкулеза легких

1.2. Иммунологические особенности течения туберкулезной инфекции

1.3. Иммунносупрессорные механизмы при туберкулезе легких

1.3.1. Роль регуляторных Т-клеток в иммунопатогенезе инфекционных заболеваний

1.3.2. Роль а2-макроглобулина в активации и супрессии иммунного ответа

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Общая характеристика клинического материала

2.2. Материал исследования

2.3. Методы исследования

2.3.1. Техника проведения пробы Манту (приказ Минздрава РФ № от 21 марта 2003 года)

2.3.1.1. Оценка результатов пробы Манту с 2 ТЕ

2.3.2. Определение общего количества лейкоцитов в периферической крови

2.3.3. Подсчёт лейкоцитарной формулы

2.3.4. Исследование цитокиновой секреции in vitro

2.3.4.1. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов периферической крови

2.3.4.2. Иммуноферментный анализ для количественного определения цитокинов

2.3.5. Определение концентрации а2-макроглобулина в сыворотке крови

2.3.6. Определение количества CD4fCD25+Foxp3+, CD4+CD25+FoxP3", CD4+CD25"FoxP3+ регуляторных Т-клеток в периферической крови

2.3.7. МТТ-тест- для оценки пролиферативной активности 52 лимфоцитов

2.3.8. Статистический анализ результатов исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Результаты оценки пробы Манту у больных туберкулезом легких

3.2. Количественные показатели лейкоцитарного звена у больных туберкулезом легких

3.2.1. Характеристика показателей лейкоцитарного звена у больных туберкулезом легких в зависимости от результатов пробы Манту

3.2.2. Характеристика показателей лейкоцитарного звена у больных туберкулезом легких в зависимости от чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам

3.3. Субпопуляционный состав регуляторных Т-клеток периферической крови у больных туберкулезом легких

3.3.1. Содержание CD4+CD25+Foxp3+, CD4+CD25+Foxp3\ CD4+CD25" Foxp3+ регуляторных Т-клеток в крови у больных туберкулезом легких в зависимости от результатов пробы Манту

3.3.2. Содержание CD4+CD25+Foxp3+, CD4+CD25+Foxp3", CD4+CD25" Foxp3+ регуляторных Т-клеток в крови у больных туберкулезом легких в зависимости от чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам

3.4. Продукция цитокинов in vitro у больных туберкулезом легких

3.4.1. Продукция цитокинов in vitro у больных туберкулезом легких в зависимости от результатов пробы Манту

3.4.1.1. Продукция IL-2 и IL

3.4.1.2. Продукция IL-10 и TGF-p

3.4.2. Продукция цитокинов in vitro у больных туберкулезом легких в зависимости от чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам

3.4.2.1. Продукция IL-2 и IL

3.4.2.2. Продукция IL-10 и TGF-p

3.5. Концентрация а2-макроглобулина в сыворотке крови у больных туберкулезом легких

3.5.1. Концентрация а2-макроглобулина в сыворотке крови у больных туберкулезом легких в зависимости от результатов пробы Манту

3.5.2. Концентрация а2-макроглобулина в сыворотке крови у больных туберкулезом легких в зависимости от чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам

3.6. Пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови у больных туберкулезом легких

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Колосова, Анна Евгеньевна, автореферат

В последние годы при исследовании иммунопатогенеза инфекционных заболеваний, в том числе туберкулезной инфекции, особое внимание уделяется регуляторным Т-клеткам, обладающим супрессорной активностью и тем самым способствующим снижению интенсивности антигенспецифического иммунного ответа, направленного на элиминацию патогенов различной природы [Koval'chuk L.V. et al., 2010; Chen X. et al., 2007; Guyot-Revol V. et al., 2006; Сахно Л.В. и соавт., 2004]. Предполагается, что опосредованное регуляторными Т-клетками угнетение пролиферации и дифференцировки Thl-лимфоцитов лежит в основе формирования туберкулиновой анергии у больных туберкулезом легких [Wergeland I. et al., 2011; Но P. et al., 2010; Geffner L. et al., 2009; Сахно Л.В. и соавт., 2004; Салина Т.Ю., Худзик Л.Б., 2001]. Сведения о роли регуляторных Т-лимфоцитов в патогенезе различных заболеваний немногочисленны. Регуляторные Т-клетки отличаются многообразием их типов, однако конкретные механизмы, с помощью которых они реализуют свои иммуносупрессорные эффекты, по-прежнему, остаются неустановленными. Между тем известно, что Т-лимфоциты с иммунофенотипом CD4+CD25+, содержащие внутриклеточный маркер Foxp3+ (Treg-клетки), отличаются от Thl-, Th2-, Thl7-, Th-активированных клеток по спектру продуцируемых цитокинов и способны супрессировать функции всех перечисленных клонов Т-хелперов, а также обеспечивать доминантную иммунологическую толерантность к собственным антигенам [Хаитов P.M. и соавт., 2011; Хайдуков C.B., Зурочка А.В., 2011; Lee D.C. et al., 2010].

Конверсия, индукция Treg-клеток и реализация ими супрессорных свойств опосредуются главным образом иммунорегуляторными цитокинами -интерлейкином (IL)-2, IL-4, IL-10, трансформирующим фактором роста (TGF) (3. Допускается возможность прямого действия Treg-лимфоцитов на клетки-мишени посредством конкурентного ингибирования костимулирующих молекул группы В7 (CD80, CD86) с участием негативного активатора CTLA-4 (CD152) [Hiinig T. et al., 2010; Wu Y.E. et al., 2010; Sharma P.K. et al., 2009; Roberts T. et al., 2007; Sharabi A. et al., 2006; Toure N.O. et al., 2005; Пронина H.A. и соавт., 2004].

В последнее время рассматривается вопрос о роли а2-макроглобулина (а2-МГ) в качестве универсального модулятора действия цитокинов. Как известно, многие цитокины имеют рецепторы на поверхности клеток, через которые реализуются их регуляторные потенции, однако существенная часть цитокинов образует комплексы с а2-МГ и поступает в клетки через рецепторы данного белка. а2-МГ рассматривается также как акцептор избытка циркулирующих цитокинов и, наряду с этим, как фактор, управляющий пролиферацией иммунокомпетентных клеток. В частности продемонстрирована регулирующая (посредством фиксации TGF-(3) роль а2-МГ в отношении перехода хронической воспалительной реакции в острую при аутоиммунных заболеваниях [Lindner I. et al., 2010; Зорин H.A. и соавт., 2006; Герасимов A.M. и соавт., 2003; Мазуров В.И. и соавт., 2002; Lauer D. et al., 2002].

Задачи исследования:

2. Установить особенности субпопуляционного состава регуляторных Т-клеток и секреции in vitro цитокинов с противовоспалительной и иммуносупрессорной активностью (IL-4, IL-10, TGF-ß) у больных инфильтративным, диссеминированным и фиброзно-кавернозным туберкулезом легких в зависимости от характера реакции Манту и устойчивости возбудителя к основным противотуберкулезным препаратам.

3. На основе результатов оценки субпопуляционного состава регуляторных Т-клеток, концентрации а2-макроглобулина в крови, базальной и антигениндуцированной цитокинопродукции (IL-2, IL-4, IL-10, TGF-ß) и пролиферации лимфоцитов in vitro определить патогенетические факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение факторов супрессии антигенспецифического иммунного ответа при различных клинических формах впервые выявленного распространенного деструктивного туберкулеза легких в зависимости от реакции на внутрикожное введение туберкулина (проба Манту) и чувствительности Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам до начала специфической химиотерапии. Продемонстрировано, что туберкулиновая анергия сопряжена с лекарственной резистентностью Mycobacterium tuberculosis к основным противотуберкулезным препаратам. Показано, что увеличение количества Foxp3-позитивных CD4+CD25+ и CD4+CD25" регуляторных Т-клеток с супрессорной активностью при туберкулезе легких у больных с положительной и отрицательной реакцией Манту ассоциируется со снижением числа CD4+CD25+Foxp3" Т-лимфоцитов в крови и гиперсекрецией цитокинов с противовоспалительной и иммуносупрессорной активностью (IL-4, IL-10, TGF-ß). Установлено, что увеличение содержания CD4+CD25+Foxp3+ (Treg) и CD4+CD25"Foxp3+ регуляторных Т-клеток в крови и продукции IL-10 и TGF-ß наиболее выражено при лекарственно-резистентном фиброзно-кавернозном туберкулезе легких. Получены новые данные, свидетельствующие о том, что иммуносупрессия при туберкулезе легких опосредована повышением содержания Foxp3+ регуляторных Т-клеток (CD4+CD25+Foxp3+Treg) и а2-макроглобулина в крови, гиперпродукцией IL-4, ILIO и TGF-ß на фоне дефицита секреции IL-2 in vitro, ассоциированного с лимфоцитопенией и подавлением пролиферативной реакции лимфоцитов в ответ на стимуляцию антигеном. При этом ведущую роль в цитокинопосредованной иммуносупрессии при инфильтративном туберкулезе легких играет гиперсекреция IL-10, при диссеминированном - IL-4 и TGF-ß, в то время как при фиброзно-кавернозном туберкулезе легких отмечается сочетанное повышение базальной и BCG-индуцированной продукции IL-10 и TGF-ß in vitro.

Практическое и теоретическое значение работы. Полученные новые данные значительно расширяют представления об иммунопатогенезе туберкулезной инфекции, вносят существенный вклад в понимание механизмов формирования супрессии иммунного ответа у больных с распространенным деструктивным туберкулезом легких. Результаты исследования теоретически обосновывают необходимость включения в стандартную программу лечения больных туберкулезом легких мероприятий по иммунокоррекции, направленной на регуляцию иммунного ответа в аспекте инактивации выявленных факторов иммуносупрессии. Полученные данные могут быть положены в основу разработки новых подходов к прогнозированию клинического течения туберкулеза легких, что наиболее значимо у пациентов с туберкулиновой анергией и множественной лекарственной резистентностью (особенно в случае фиброзно-кавернозной формы заболевания).

Исследования проведены при финансовой поддержке Федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2012 годы» (ГК №02.512.11.2112 «Молекулярно-генетические основы управления адаптационной реактивностью системы крови человека при инфекции» (руководитель — академик РАМН В.В. Новицкий); ГК №16.512.11.2046 «Разработка комплекса молекулярно-генетических маркеров дизрегуляции иммунного ответа на Mycobacterium tuberculosis для оптимизации диагностики и коррекции вторичной иммунологической недостаточности при туберкулезе легких» (руководитель -профессор О.И. Уразова)).

Положения, выносимые на защиту:

2. Увеличение количества Foxp3-позитивных CD4+CD25+ и CD4+CD25" регуляторных Т-клеток при туберкулезе легких у больных с положительной и отрицательной реакцией Манту сопряжено со снижением числа CD4+CD25+Foxp3" Т-лимфоцитов в крови и гиперсекрецией цитокинов с противовоспалительной и иммуносупрессорной активностью — IL-10 при инфильтративной (лекарственно-чувствительной), IL-4 и TGF-ß при диссеминированной (лекарственно-резистентной) и IL-10, TGF-ß при фиброзно-кавернозной (лекарственно-резистентной) формах заболевания.

3. Иммуносупрессия при туберкулезе легких обусловлена повышением содержания Foxp3+ регуляторных Т-клеток (Treg), а2-макроглобулина в крови на фоне дефицита продукции IL-2, ассоциированного с лимфоцитопенией, гипоэргической реакцией пролиферации лимфоцитов на стимуляцию антигеном и гиперсекрецией IL-4, IL-10, TGF-ß in vitro. Данные изменения более значимы у больных с отрицательной, чем с положительной пробой

Манту.

Реализация и апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на конференциях молодых учёных «Актуальные вопросы инфекционной патологии — 2009» (Санкт-Петербург, 2009) и «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2010), Internationaler congress and fachmesse (Hannover, 2008), VIII Международной Российско-германской научно-практической конференции «Инновации в медицине. Социально значимые инфекции» (Новосибирск, 2009), II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Вопросы патогенеза типовых патологических процессов» (Новосибирск, 2010), XI конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2010), а также на научно-образовательных семинарах «Патофизиология системы крови и иммунитета» при Центре компетенции по проблеме инфекционных болезней им. И.И. Мечникова и Р. Коха ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (Томск, 2009).

Заключение диссертационного исследования на тему "Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких"

ВЫВОДЫ

3. Цитокинопосредованная супрессия Thl-ответа при инфильтративном туберкулезе легких определяется гиперсекрецией IL-10, при диссеминированном - IL-4 и TGF-J3. При фиброзно-кавернозном туберкулезе легких сочетанное повышение базальной и BCG-индуцированной продукции IL-10 и TGF-p in vitro характеризует активацию CD4+CD25+Foxp3+ Treg-лимфоцитов.

4. Увеличение относительного содержания CD4+CD25+ и CD4+CD25" Foxp3-позитивных регуляторных Т-клеток в крови у больных туберкулезом легких вне зависимости от лекарственной чувствительности возбудителя к противотуберкулезным препаратам сочетается с дефицитом CD4 CD25 Foxp3" Т-лимфоцитов.

5. Базальная и BCG-индуцированная гипосекреция IL-10 и TGF-P in vitro при лекарственно-резистентном инфильтративном и лекарственно-чувствительном диссеминированном и фиброзно-кавернозном туберкулезе легких, коррелирующая с количеством CD4+CD25"Foxp3+ Т-клеток в крови, свидетельствует о снижении функционального резерва С025-негативных регуляторных Т-клеток с иммуносупрессорной активностью. 6. У больных с туберкулиновой анергией лимфоцитопения, дефицит BCG-индуцированной секреции IL-2 in vitro, повышение содержания CD4+CD25" Foxp3+ Т-клеток в крови и базальной продукции IL-4 и TGF-P (при инфильтративном и диссеминированном туберкулезе легких) более значимы, чем у пациентов с положительной пробой Манту.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Колосова, Анна Евгеньевна

1. Аверченков В.М., Ломаченков В.Д., Федотова Н.И. Вторичная иммунная недостаточность и ее коррекция миелопидом у больных инфильтративным и диссеминированным туберкулезом легких // Проблемы туберкулеза. 1998.- № 2. С. 20-22.

2. Активность аг-макроглобулина и его форм у больных деструктивным туберкулезом органов дыхания / Д.С. Эсмедляева, О.Т. Титаренко, Л.А. Скворцова и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2004. № 11.-С. 40-43.

3. Апоптоз лимфоцитов как возможный механизм нарушения антигенспецифического ответа при туберкулезе легких / H.A. Хонина, Л.В Сахно, М.Н. Норкин и др. // Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3. - № 1.-С. 51-59.

4. Беленький М.С. Клиническая туберкулинодиагностика. — Киев: Здоров'я, 1984. 86 с.

5. Биохимические аспекты оценки реактивности организма у больных туберкулезом легких / Г.О. Каминская, Р.Ю. Абдуллаев, Б.А. Серебряная и др. // Проблемы туберкулеза. 2001. — № 7. - С. 62-65.

6. Боровиков В. П. Statistica. Искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов. 2-е изд. - ЗАО Издательский дом «Питер», 2003. - 344 с:

7. Булыгин Г.В., Камзалакова Н.И., Андрейчиков A.B. Метаболические основы регуляции иммунного ответа. — Новосибирск, СО РАМН, 1999. 346 с.

8. Бумблите И-А.Д. Ингибиторы плазмина // Гематология и трансфузиология.- 1992. Т. 37. - № 5-6. - С. 26-28.

9. Вахидова Г.А., Еремеев В.В., Убайдуллаев A.M. Иммунологические механизмы патогенеза туберкулеза // Проблемы туберкулеза. — 1991. № 5.- С. 69-71.

10. Визель A.A., Гурылёва М.Э. Туберкулёз / под ред. М.И. Перельмана. — М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. 208 с.

11. Влияние лекарственной устойчивости на фитнес микобактерий туберкулеза генотипа W-Beijing / О.С. Тунгусова, А.О. Марьяндышев, Д.А. Каугант и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2005. — № 8. — С. 46-50.

12. Возможная роль трансформирующего фактора роста ß как маркерного цитокина Т-хелперов типа 3 в патогенезе атопического дерматита / H.A. Пронина, B.C. Свиридова, A.A. Денисов и др. // Бюллетень сибирской медицины. 2004. - № 3. - С. 27-30.

13. Генетический полиморфизм клинических штаммов микобактерий туберкулеза, циркулирующих на территории Новосибирской области / A.B. Мокеева, С.Ф. Орешкова, А.Г. Попова и др. // Вестник РАМН. 2005. - № 1.-С. 20-23.

14. Галактионов В.Г. Иммунология: учебник. -М.: МГУ, 1998. 480 с.

15. Генотипирование микобактерий выделенных от больных туберкулезом из пенитенциарного учреждения / JI.H. Черноусова, С.Н. Андреевская, Т.Г. Смирнова и др. // Проблемы туберкулеза. 2001. - № 7. - С. 60-62.

16. Генотипическая характеристика М. tuberculosis возбудителей остропрогрессирующего деструктивного туберкулеза легких / О.В. Воронкова, О.И. Уразова, P.P. Хасанова и др. // Бюллетень сибирской медицины. - 2011. - № 1. - С. 12-17.

17. Герасимов A.M., " Посисеева JI.B., Гришанкова М.А. Молекулы средней массы у пациентов с наружным генитальным эндометриозом // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. - №12. — С. 16-19.

18. Гергерт В .Я, Космиади Г. А., Абрамова З.П. Цитокины в иммунопатогенезе туберкулеза легких // Проблемы туберкулеза. 1995. — № 2. — С. 32-35.

19. Гланц С. Медико-биологическая статистика / пер. с англ. — М.: Практика, 1999.-459 с.

20. Гольдберг Е.Д. Справочник по гематологии с атласом микрофотограмм. — Томск: Изд-во Томского ун-та, 1989. 468 с.

21. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. Томск: Изд-во Томского ун-та, 1992. - 272 с.

22. Голышевская В.И: Роль ультрамелких форм микобактерий в патоморфозе туберкулеза // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2003. — № 3. — С. 26-30.

23. Детекция и характеристика мутаций в гене гроВ резистентных к рифампицину клинических штаммов М tuberculosis / Э.В. Генерозов, M.JI. Альтшулер, В.М. Говорун и др. // Проблемы туберкулеза. 1999. - № 2. -С. 39-42.

24. Диагностика и химиотерапия туберкулеза органов дыхания / В.Ю. Мишин, С.Е. Борисов, В.А. Аксенов и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2005. - № 3. - С. 47-64.

25. Динамика противотуберкулезных IgG-антител у больных туберкулезом легких / В.Г. Авдиенко, H.A. Кондратюк, Н.В. Демьяненко и др. // Туберкулез сегодня: материалы VII Российского съезда фтизиатров. — М.,2003.-С. 53.

26. Динамика экспрессии CD25 в лимфоцитах периферической крови человека, стимулированных фитогемагглютинином и интерлейкином-2 / В.В. Зенин,

27. H.Д. Аксенов, А.Н, Шатрова и др. // Цитология. 2006. - Т. 51. - № 6. - С. 506-510.

28. Еремеев В.В., Майоров К.Б. Взаимодействие макрофаг-микобактерия в процессе реакции микроорганизма на туберкулезную инфекцию // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 3. - С. 54-57.

29. Ерохин В.В., Ельшанская М.П. Морфологические проявления вторичного иммунодефицита // Проблемы туберкулеза. 1990. — № 6. — С. 65-70.

30. Ерохин В.В., Земскова З.С. Современные представления о туберкулезном воспалении // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2003. — № 3. — С. 11-21.

31. Ерохин В.В. О некоторых механизмах патогенеза туберкулеза // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2009. — № 7. — С. 3-8.

32. Ершов Ф.И. Цитокины — новое поколение биотерапевтических препаратов // Вестник РАМН 2006. - № 9-10. - С. 45-50.

33. Ивашкин В.Т. Механизмы иммунной толерантности и патологии печени // РЖГГК. 2009. - № 2. - С. 8-14.

34. Изучение уровня альфа2-макроглобулина человека у больных с ожоговойболезнью и аутоиммунными заболеваниями / Ю.А. Кривенцев, Д.М. Никулина, A.B. Самсонов и др. // Комбустиология. 2002. - № 12-13. - С. 18-22.

35. Иммунология / Д. Мейл, Дж. Бростофф, Д.Б. Рот и др. / пер. с англ. М.: Логосфера, 2007. - 568 с.

36. Иммуномодулятор полиоксидоний в комплексной терапии больных туберкулезом легких / С.С. Аршинова, Б.В. Пинегин, В.А. Стаханов и др. // Иммунология. 2001. - № 3. - С. 35-41.

37. Иммунопатология туберкулеза легких / О.В. Воронкова, О.И. Уразова, В.В. Новицкий, А.К. Стрелис. Томск: Изд-во Том. ун-та, 2007. - 194 с.

38. Индуцированная продукция цитокинов в культуре мононуклеарных клеток периферической крови здоровых лиц / В.И. Коненков, В.В. Авдошина, И.Г. Ракова и др. // Медицинская иммунология. 2006. - Т. 8. - № 4. — С. 517522.

39. Инновационные технологии в диагностике и лечении туберкулезного поражения / Т.И. Виноградова, Б.И. Вишневский, Л.И. Арчакова и др. // Медицинский академический журнал. 2009. - № 4. - С. 68-74.

40. Интерлейкин-2 в коррекции анергии Т-клеток у больных туберкулезом легких / Л.В. Сахно, М.А. Тихонова, A.A. Останин и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2006. — № 1. — С. 48-51.

41. Казак Т.И. Морфологические различия очагов туберкулезного воспаления, отражающие иммунную реактивность организма // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2003. - № 3. - С. 36-40.

42. Карпова М.Р. Реакции системы крови при инфекционном процессе, протекающем на фоне цитостатической болезни: дис. . д-ра мед. наук. -Томск, 2000.-351 с.

43. Кашкин К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность (лекция) // Клиническая лабораторная диагностика. -1998. № 11. - С. 21-32.

44. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного игуморального иммунитета // Иммунология. — 2002. — Т. 23. — № 2. — С. 77-79.

45. Кетлинский С.А., Симбирцев A.C. Цитокины. — СПб.: ООО «Издательство Фолиант», 2008. 552 с.

46. Ковязина А.И. Цитологические изменения крови при химиотерапии больных туберкулезом легких: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. — 1966. 45 с.

47. Козинец Г.И., Погорелов В.М. Консерватизм биологических процессов -стабильность кроветворения // Клиническая лабораторная диагностика. — 1998. -№12. -С. 21-32.

48. Комплексная оценка уровня спонтанной продукции цитокинов в культуре мононуклеарных клеток периферической крови здорового человека / В.И. Коненков, И.Г. Ракова, В.В. Авдошина и др. // Цитокины и воспаление. — 2005. Т. 4. - № 2. - С. 33-37.

49. Лядова И.В., Гергерт В.Я. Реакции Т-клеточного иммунитета при туберкулезе: экспериментальные и клинические исследования // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2009. - № 7. - С. 9-18.

50. Маркелов Ю.М., Дородная И.А. Лекарственный устойчивый туберкулез в Республике Карелия (2000—2005 г.) // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2007. - № 8. - С. 8-10.

51. Маянский А.Н. Туберкулез (микробиологические и иммунопатогенетические аспекты) // Иммунология. — 2001. № 2. - С. 5363.

52. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. — М.: Медицина, 1987. 364 с.

53. Механизмы иммунопатологии / под ред. С. Коена, П.А. Уорда, Р.Т. Мак-Класки. М.: Медицина, 1983. - 397 с.

54. Мишин В.Ю., Чуканов В.И., Васильева И.А. Эффективность лечения туберкулеза легких, вызванного микобактериями с множественной лекарственной устойчивостью // Проблемы туберкулеза. — 2002. № 12. — С. 18-21.

55. Множественно лекарственно-устойчивый туберкулез легких: медико-социальные особенности и эффективность стационарного этапа лечения / Филинюк О.В., Янова Г.В., Стрелис А.К. и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. - № 8. - С. 23-28.

56. Молекулярная медицина и лечение туберкулеза / М.И. Перельман, Ю.Н. Хомяков, В.И. Киселев и др. // Проблемы туберкулеза. — 2001. № 5. — С. 5-7.

57. Молекулярно-генетическая характеристика устойчивых к рифампицину изолятов Mycobacterium tuberculosis выделенных в Новосибирске / О.В. Норкина, М.Л. Филиппенко, А.А. Никонова и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких.-- 2003. № 12. - С. 22-25.

58. Наполов Ю.К., Шимановский Н.Л. Оценка иммунотропной активности рентгеноконтрастных средств in vitro // Физиология и патология иммунной системы. 2004. - № 9. - С. 21-28.

59. Нечаева О.Б., Скачкова Е.И. Причины и факторы формирования лекарственной устойчивости при туберкулезе легких // Проблемы туберкулеза. 2003. - № 9. - С. 6-9.

60. Особенности иммунитета у больных с различными формами туберкулеза легких / Н.А. Хонина, С.Д. Никонов, С.В. Шпилевский и др. // Проблемытуберкулеза. 2000. - № 1. - С. 30-32.

61. Пальцев М.А. Значение биомедицинских фундаментальных исследований для фтизиатрии // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2004. — № 2. -С. 3-7.

62. Перельман М.И., Корякин В.А., Протопопова Н.М. Туберкулез. М.: Медицина, 1990. - 304 с.

63. Повышение эффективности иммунодиагностики туберкулеза путем применения моноклональных антител против IgG человека / В.Г. Авдиенко, С.Ю. Кондратов, Н.В. Куликовская и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - № 6. - С. 22-35.

64. Применение системного иммуномодулятора ксимедона при деструктивных формах туберкулеза легких / Ю.Д. Слабнов, A.A. Визель, Г.В. Черепнев и др. // Проблемы туберкулеза. 2000. - № 3. - С. 28-32.

65. Продукция цитокинов при различных формах туберкулеза легких / Б.Е. Кноринг, A.C. Симбирцев, И.Я. Сахарова и др. // Проблемы туберкулеза. -1998.-№3.-С. 67-71.

66. Противотуберкулезные IgE-антитела (I часть). Иммунодоминантные агенты / В.Г. Авдиенко, Г.А. Космидиади, A.B. Баенский и др. // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 2. - С. 30-33.

67. Регуляторные Т-клетки при аллергии у детей / А.Д. Донецкова, Н.И.

68. Шарова, М.М. Литвина и др. // Медицинская иммунология. 2008. - Т. 10. -№2-3. -С. 159-166.

69. Роль клеток-регуляторов CD4+CD25+ в развитии хронических инфекционных заболеваний / A.A. Воробьев, С.Н. Быковская, Е.П. Пашков и др. // Вестник РАМН. 2006. - № 9-10. - С. 24-29.

70. Руководство по лёгочному и внелёгочному туберкулёзу / под ред. Ю.Н. Левашова, Ю.М. Репина. СПб., 2008. - 544 с.

71. Салина Т.Ю., Худзик Л.Б. Иммунопатогенетические механизмы в течение туберкулезной инфекции // Проблемы туберкулеза. — 2001. — № 8. — С. 32-34.

72. Салина Т.Ю., Морозова Т.И. Продукция интерферона-у мононуклеарными клетками крови больных при разных типах течения туберкулезного процесса // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 10. - С. 19-22.

73. Сахно Л.В., Тихонова М.А., Курганова Е.В. Т-клеточная анергия в патогенезе иммунной недостаточности при туберкулезе легких // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 11. — С. 23-28.

74. Симбирцев A.C. Интерлейкин-2 и рецепторный комплекс интерлейкина-2 в регуляции иммунитета // Иммунология. — 1998. — № 6. С. 3-8.

75. Симбирцев A.C. Роль цитокинов в регуляции физиологических функций иммунной системы // Физиология и патология иммунной системы. — 2004. — № 10.-С. 3-10.

76. Симбирцев A.C. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. — 2004. — Т. 3. — № 2. С. 16-21.

77. Стаханов В.А., Васильев H.A. Клиническое значение иммунологических методов исследования при туберкулезе // Российский медицинский журнал. 2001. -№ 1.-С. 26-28.

78. Субпопуляционная принадлежность Т-клеток, подверженных анергии и апоптозу у больных туберкулезом легких / Е.Р. Черных, Л.В. Сахно Н.А Хонина и др. // Проблемы туберкулеза. 2002. - № 7. - С. 43-47.

79. Тунгусова О.С., Марьяндышев А.О. Молекулярные механизмы формирования лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза //

80. Проблемы туберкулеза. 2001. - № 6. - С. 48-49.

81. Тюлькова Т.Е., Чугаев Ю.П., Кашуба Э.А. Особенности функционирования иммунной системы при туберкулезной инфекции // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. - № 11. - С. 48-55.

82. Универсальный регулятор а2-макроглобулин (обзор литературы) / H.A. Зорин, В.Н. Зорина, P.M. Зорина и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - № 11. - С. 18-21.

83. Урсов И.Г. Эпидемиология туберкулеза: монография. Новосибирск: Изд-во Института теплофизики СО РАМН, 1997. - 104 с.

84. Урсов И.Г. Эпидемиология туберкулеза и диспансеризация населения. — Новосибирск, 2003. 182 с.

85. Участие оксида азота в развитии туберкулиновой анергии у больных туберкулезом легких / JI.B. Сахно, H.A. Хонина, О.В. Норкина и др. // Проблемы туберкулеза. 2001. - № 8. - С. 42-46.

86. Фенотипическая и функциональная характеристика моноцитов у больных туберкулезом легких / JI.B. Сахно, М.А. Тихонова, B.C. Кожевников и др. // Медицинская иммунология. — 2005. — Т. 7. № 1. — С. 49-56.

87. Филинюк О.В. Факторы риска, ассоциированные с множественно лекарственно-устойчивым туберкулезом: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. -Новисибирск, 2011. 47 с.

88. Формирование локального иммунного ответа при туберкулезе легких у человека / Г.А. Космиади, Т. Ульрихс, В.В. Мищенко и др. // Туберкулез сегодня: материалы VII Российского съезда фтизиатров. М., 2003. - С. 31.

89. Фрейдлин И.С. Мононуклеарные фагоциты в противоинфекционной резистентности (К дискуссии по статье Д.Н. Маянского «Система фагоцитов: методологические проблемы») // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1986. № 2. — С. 87-90.

90. Фрейдлин И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляторной сети // Иммунология. — 1995. — № 3. — С. 44-48.

91. Фрейдлин И.С., Тотолян A.A. Клетки иммунной системы. СПб.:1. Наука, 2001.-390 с.

92. Фрейдлин И.С. Паракринные и аутокринные механизмы цитокиновой иммунорегуляции // Иммунология. 2001. — № 5. — С. 4-7.

93. Фрейдлин И.С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функции // Медицинская иммунология. 2005. - Т. 7. - № 4. - С. 347-354.

94. Функциональная активность альвеолярных макрофагов при обострении туберкулеза легких / О.П. Макарова, JI.H. Шишкина, А.П. Огиренко и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2003. — № 11.-С. 29-31.

95. Функциональная активность фагоцитирующих клеток крови при туберкулезе легких / О.В. Филинюк, О.И. Уразова, В.В. Новицкий и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2006. — № 1. -С. 79-81.

96. Хаитов P.P., Ярилин A.A., Пинегин Б.В. Иммунология: атлас. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 624 с.

97. Характер специфического иммунного ответа и продукция цитокинов мононуклеарами крови больных разными формами туберкулеза легких / Б.Е. Кноринг, И.С. Фрейдлин, A.C. Симбирцев и др. // Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3. - № 1. - С. 61-68.

98. Хайдуков С.В., Зурочка A.B. Цитометрический анализ субпопуляций Т-хелперов (Thl, Th2, Treg, Thl7, Т-хелперы активированные) // Медицинская иммунология. — 2011. Т. 13. - №1. - С. 7-16.

99. Характеристика деструктивного туберкулеза легких (по результатам клинико-математйческого анализа) / О.Т. Титаренко, Н.П. Алексеева, Л.А. Скворцова и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2005. - № 11.-С. 10-14.

100. Хоменко А.Г. Современные представления о патогенезе туберкулеза // РМЖ. -1996. Т. 6. — № 17.-С. 23-29.

101. Хоменко А.Г. Туберкулез. М.: Медицина, 1996. - 496 с.

102. Худзик Л.Б., Морозова Т.Н. Комплексная оценка защитных систем убольных инфильтративным туберкулезом легких // Проблемы туберкулеза. 1990. - № 12. - С. 20-22.

103. Худзик Л.Б., Морозова Т.И. Протеолитические системы крови у больных туберкулезом легких // Проблемы туберкулеза. — 1994. — № 5. — С. 56-58.

104. Цитокиновый профиль при гранулематозных заболеваниях легких / Л.Д. Гунтупова, С.Е. Борисов, Е.А. Купавцева и др. // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2007. - № 6. — С. 4-10.

105. Черешнев В.А., Гусев Е.Ю. Иммунология воспаления: роль цитокинов // Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3. - № 3. - С. 361-36.

106. Шкарин А.В., Белоусов С.С., Аникина О.А. Уровень цитокинов в плазме крови у больных активным инфильтративным туберкулезом легких // Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2008. — № 8. — С. 34-38.

107. Шувалова Е.П., Антонова Т.В. Протеолитические системы крови при вирусном гепатите // Клиническая медицина. — 1989. № 9. — С. 25-29.

108. Ярилин А.А,, Донецкова А.Д. Естественные регуляторные Т-клетки и фактор FOXP3 // Иммунология. 2006. - № 3. - С. 176-188.

109. Absence of a prominent Th2 cytokine response in human tuberculosis / Y. Lin, M. Zhang, F.M. Hofman et al. // Infect. Immun. 1996. - Vol. 64. - № 4. -P. 1351-1356.

110. Activated CD4+ CD25+ T cells suppress antigen-specific CD4+ and CD8+ T cells but induce a suppressive phenotype only in CD4+ T cells / D. Dieckmann, H. Plottner, S. Dotterweich, G. Schuler // Immunology. 2005. - Vol. 115. - №3.-P. 305-314.

111. Alpha 2-macroglobulin: a binding protein for transforming growth factorbeta and various cytokines / JJ. Feige, A. Negoescu, M. Keramidas et al. // Horm. Res. 1996. - Vol. 45. - № 3-5. - P. 227-232.

112. Alpha 2-macroglobulin binds CpG oligodeoxynucleotides and enhances their immunostimulatory properties by a receptor-dependent mechanism / R.B. Anderson, GJ .Cianciolo, M.N. Kennedy et al. / J. Leukoc. Biol. 2008. - Vol. 83. - № 2. - P. 381-392.

113. Alpha2-macroglobulin inhibits the malignant properties of astrocytoma cells by impeding beta-catenin signaling / I. Lindner, N.Y. Hemdan, M. Buchold et al. // Cancer Res. 2010. - Vol. 70. - № 1. - P. 277-287.

114. Andersen P. Host responses and antigens involved in protective immunity to Mycobacterium tuberculosis // Scand. J. Immunol. 1997. - Vol. 45. - № 2. -P. 115-131.

115. Antigen-specific and persistent tuberculin anergy in a cohort of pulmonary tuberculosis patients from rural Cambodia / V.A. Boussiotis, J.C. Delgado, E.Y. Tsai et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - Vol. 99. - № 11. - P. 75767581.

116. Antony P.A., Restifo N.P. CD4+CD25+ T regulatory cells, immunotherapy of cancer, and interleukin-2 // J. Immunol. 2005. - Vol. 28 - № 2. - P. 120-128.

117. Apoptosis and T cell hyporesponsiveness in pulmonary tuberculosis / C.S. Hirsch, Z. Toossi, G. Vanham et al. // J. Infect. Dis. 1999. - Vol. 179. - № 4. -P. 945-953.

118. Apoptosis of Thl-like cells in experimental tuberculosis (TB) / G. Das, H.

119. Vohra, B. Saha et al. // Clin. Exp. Immunol. 1999. - Vol. 115. - № 2. - P. 324-328.

120. Armstrong P.B., Quigley J.P. Alpha2-macroglobulin: an evolutionarily conserved arm of the innate immune system // Dev. Comp. Immunol. 1999. -Vol. 23. - № 4-5. - P. 375-390

121. Baliko Z., Szereday L., Szekeres-Bartho J. Th2 biased immune response in cases with active Mycobacterium tuberculosis infection and tuberculin anergy // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1998. - Vol. 22. - № 3. - P. 199-204.

122. Birkenmeier G. Targetting the proteinase inhibitor immune modulatory function of human a2-mucroglobulin // Mod. Asp. Immunol. 2001. - Vol. 2. -P. 32-36.

123. Bluestone Selective miRNA disruption in Treg cells leads to uncontrolled autoimmunity / X. Zhou, L. T. Jeker, B. T. Fife et al. // J. Exp. Medicine. -2009. Vol. 205. -№. 9. - 1983-1991.

124. Bonner J.C., Brody A.R. Cytokine-binding proteins in the lung // Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 268. - № 6. - Pt.l. - P. 869-878.

125. Borth W., Luger T.A. Identification of alpha 2-macroglobulin as a cytokine binding plasma protein. Binding of interleukin-1 beta to "F" alpha 2-macroglobulin // J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 264. - № 10. - P. 5818-5825.

126. Burnett D., Stockley R.A., Serum and sputum alpha 2 macroglobulin in patients with chronic obstructive airways disease // Thorax. 1981. - Vol. 36. -№7.-P. 512-516.

127. Carmichael J. Evaluation of a Tetrazoliumbased Semiautomated Colorimetric Assay: Assessment of Chemosensitivity Testing // Cancer Research. 1987. - Vol. 47. - P. 936-942.

128. CD4+CD25high regulatory cells in human peripheral blood / C. Baecher

129. Allan, J.A. Brown, G J. Freeman et al. // J. Immunol. 2001. - Vol. 167. - № 3. -P. 1245-1253.

130. CD4(+)CD25(+)FoxP3(+) regulatory T cells suppress Mycobacterium tuberculosis immunity in patients with active disease / X. Chen, B. Zhou, M. Li et al. // Clin. Immunol. 2007. - Vol. 123. - № 1. - P. 50-59.

131. CD4+CD25+ regulatory T lymphocytes in tuberculous pleural effusion / Q. Xue-jun, S.H.I. Huan-zhong, L. Qiu-li et al. // Chinese Medical Journal. 2008. - Vol. 121. - № 7. - P. 581-586.

132. CD28 costimulation of developing thymocytes induces Foxp3 expression and regulatory T cell differentiation independently of interleukin 2 / X. Tai, M. Cowan, L. Feigenbaum et al. // Nat. Immunol. 2005. - Vol. 6. - № 2. - P. 152-162.

133. CD28 and IL-4: two heavyweights controlling the balance between immunity and inflammation/ T. Hünig, F. Lühder, K. Elflein et al. // Med. Microbiol. Immunol. 2010. - Vol. 199. - № 3. - P. 239-246.

134. CD40 ligand trimer enhances the response of CD8+ T cells to Mycobacterium tuberculosis / B. Samten, B. Wizel, H. Shams et al. // J. Immunol. 2003. - Vol. 170. - № 6. - P. 3180-3186.

135. Cell surface antigen CD 109 is a novel member of the alpha(2) macroglobulin/C3, C4, C5 family of thioester-containing proteins / M. Lin, D.R. Sutherland, W. Horsfall et al. // Blood. 2002. - Vol. 99. - № 5. - P. 16831691.

136. Cellular basis of skin allograft rejection in mice: specific lysis of allogeneic skin components by non-T cells / N. Yamamoto, K. Einaga-Naito, M. Kuriyama et al. // Transplantation. 1998. - Vol. 65. - № 6. - P. 818-825.

137. Cianciolo G.J., Enghild J.J., Pizzo S.V. Covalent complexes of antigen andalpha(2)-macroglobulin: evidence for dramatically-increased immunogenicity // Vaccine. 2001. - Vol. 20. - № 3-4. - P. 554-562.

138. Comparison of three molecular assays for rapid detection of rifampin resistance in Mycobacterium tuberculosis / S.A. Watterson, S.M. Wilson, M.D. Yates et al. // J. Clin. Microbiol. 1998. - Vol. 36. - № 7. p. 1969-1973.

139. Cooper A.M., Flynn J.L. The protective immune response to Mycobacterium tuberculosis // Curr. Opin. Immunol. 1995. - Vol. 7. - № 4. - P. 512-516.

140. Correlation between the kinetics of Thl, Th2 cells and pathology in a murine model of experimental pulmonary tuberculosis / R. Hernández-Pando, H. Orozcoe, A. Sampieri et al. // Immunology. 1996. - Vol. 89. - № 1. - P. 2633.

141. Critical role of mitochondrial damage in determining outcome of macrophage infection with Mycobacterium tuberculosis / L. Duan, H. Gan, D.E. Golan et al. // J. Immunol. 2002. - Vol. 169. - № 9. - P. 5181-5187.

142. Dannenberg A.M. Delayed-type hypersensitivity and cell-mediated immunity in the pathogenesis of tuberculosis // Immunol. Today. — 1991. — Vol. 12. P. 346-348.

143. Decreased FOXP3 levels in multiple sclerosis patients / J. Huan, N. Culbertson, L. Spencer et al. // J. Neurosc.i Res. 2005. - Vol. 81. - № 1. - P. 45-52.

144. Decrease in CD4+CD25+FoxP3+ Treg cells after pulmonary resection in the treatment of cavity multidrug-resistant tuberculosis / Y.E. Wu, W.G. Peng, Y.M. Cai et al. // Int. J. Infect. Dis. 2010. - Vol. 14. - № 9. - P. 815-822.

145. Depletion of .CD25+ regulatory cells uncovers immune responses to shared murine tumor rejection antigens / D. Golgher, E. Jones, F. Powrie et al. // Eur. J.1.munol. 2002. - Vol. 32. - № 11. - P. 3267-3275.

146. Determination of risk factors of smear-negative pulmonary tuberculosis / N.O. Toure, A. Diatta, Y. Dia et al. // Dakar Med. 2005. - Vol. 50. - № 3. -P. 98-103.

147. Dicer-dependent microRNA pathway safeguards regulatory T cell function / A. Liston, L.-F. Lu, D. O'Carroll et al. // J. Exp. Med. 2009. - Vol. 205. -№. 9. -1993-2004.

148. Differential expression of the alpha(2)-macroglobulin receptor and the receptor associated protein in normal human endometrium and endometrial carcinoma / C. Foca, E.K. Moses, M.A. Quinn et al. // Mol. Hum. Reprod. — 2000. Vol. 6. -№ 10. - P. 921-927.

149. Differential response of a(2)-macrogIobulin-deficient mice in models of lethal TNF-induced inflammation / T. Hochepied, P. Ameloot, Brouckaert et al. // Eur. Cytokine Netw. 2000. - Vol. 11. - № 4. - P. 597-601.

150. Differentiation of regulatory Foxp3+ T cells in the thymic cortex / A. Liston, K.M. Nutsch, A.G. Farr et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2008. -Vol. 105. - P. 11903-11908.

151. Distinct IL-2 receptor signaling pattern in CD4+CD25+ regulatory T cells / S.J. Bensinger, P.T. Walsh, J. Zhang et al. // J. Immunol. 2004. - Vol. 172.9.-P. 5287-5296.

152. Enhance response to Mycobacterium tuberculosis antigens by human alveolar lymphocytes during active pulmonary tuberculosis / S.K. Schwander, M. Torres, E. Sada et al. // J. Infect. Dis. 1998. - Vol. 178. - P. 1434-1445.

153. Ellner J.J. Regulation of the human immune response during tuberculosis // J. Lab. Clin. Med. 1997. - Vol. 130. - № 5. - P. 469-475.

154. Feedback control of regulatory T cell homeostasis by dendritic cells in vivo / G. Darrasse-Jeze, S. Deroubaix, H. Mouquet et al. // The Journal of Experimental Medicine. 2009. - Vol. 206. - № 4. - P. 741-750.

155. Flesch I.E., Kaufmann S.H. Activation of tuberculostatic macrophage functions by gamma interferon, interleukin-4, and tumor necrosis factor // Infect Immun. 1990. - Vol. 58. - № 8. - P. 2675-2677.

156. Flynn J.L., Ernst J.D. Immune responses in tuberculosis // Curr. Opin. Immunol. 2000. - Vol. 12. - № 4. - P. 432-436.

157. Flynn J.L., Chan J. Immunology of tuberculosis // Annu. Rev. Immunol. -2001.-Vol. 19.-P. 93-129.

158. Foxp3-dependent programme of regulatory T-cell differentiation / M. A. Gavin, J. P. Rasmussen, J. D. Fontenot et al. // Nature. 2007. - Vol. 445. - P. 771-775.

159. FoxP3+ regulatory T cells suppress effector T-cell function at pathologic site in miliary tuberculosis/ P.K. Sharma, P.K. Saha, A.Y. Singh et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2009. - Vol. 179. - № 11. - P. 1061-1070.

160. Gao G.F., Rao Z., Bell J.I. Molecular coordination of alphabeta T-cell receptors and coreceptors CD8 and CD4 in their recognition of peptide-MHC ligands // Trends Immunol. 2002. - Vol. 23. - № 8. - P. 408-413.

161. Genotypic assessment of isoniazid and rifampin resistance in

162. Mycobacterium tuberculosis: a blind study at reference laboratory level / A. Telenti, N. Honoré, C. Bernasconi et al. // J. Clin. Microbiol. 1997. - Vol. 35. -№ 3. - P. 719-723.

163. Gordon S. The macrophage // Bioessays. 1995. - Vol. 17. - № 11. - P. 977-986.

164. Grang J.M. Immunotherapy of tuberculosis. // Tubercle. 1990. - Vol. 71. -№ 4. -P. 237-239.

165. Hibbetts K., Hines B., Williams D. An overview of proteinase inhibitors // J. Vet. Intern. Med. -1999. Vol. 13. -№ 4. - P. 302-308.

166. Ho P., Wei X., Seah G.T. Regulatory T cells induced by Mycobacterium chelonae sensitization influence murine responses to bacille Calmette-Guerin. // J. Leukoc. Biol. 2010. - Vol. 88. - № 6. - P. 1073-1080.

167. Homeostasis of peripheral CD4+ T cells: IL-2R alpha and IL-2 shape a population of regulatory cells that controls CD4+ T cell number / A.R. Almeida, N. Legrand, M. Papiernik et al. // J. Immunol. 2002. - Vol. 169. - № 9. - P. 4850-4860.

168. Hori S., Sakaguchi S. Foxp3: a critical regulator of the development and function of regulatory T cells // Microbes. Infect. 2004. - Vol. 6. - № 8. - P. 745-751.

169. Howard J., Zwilling S. Reactivation of tuberculosis is associated with a shift from type 1 to type 2 cytokines // Clinical & Experimental Immunology. -1999. Vol. 115. - № 3. - P. 428-435.

170. Hubbard W.J. Alpha-2 macroglobulin-enzyme complexes as suppressors of cellular activity // Cell Immunol. 1978. - Vol. 39. - № 2. - P. 388-394.

171. Identification of a T cell-derived b cell growth factor distinct from interleukin 2 / M. Howard, J. Farrar, M. Hilfiker et al. // J. Exp. Med. 1982. -Vol. 155. - № 3. - P. 914-923.

172. IL-10 acts on the antigen-presenting cell to inhibit cytokine production by Thl cells / D.F. Fiorentino, A. Zlotnik, P. Vieira et al. // J. Immunol. 1991. -Vol. 146. -№ 10. - P. 3444-3451.

173. IL-10 is produced by subsets of human CD4+ T cell clones and peripheral blood T cells / H. Yssel, R. De Waal Malefyt, M.G. Roncarolo et al. // J. Immunol. 1992. - Vol. 149. - № 7. - P. 2378-2384.

174. IL-13 signaling through the IL-13alpha2 receptor is involved in induction of TGF-betal production and fibrosis / S. Fichtner-Feigl, W. Strober, K. Kawakami et al. // Nat. Med. 2006. - Vol. 12. - № 1. - P. 99-106.

175. Immune responsiveness and lymphokine production in patients with tuberculosis and healthy controls / F.O. Sanchez, J.I. Rodriguez, G. Agudelo, L.F. Garcia // Infect. Immun. 1994. - Vol. 62. - P. 5673-5678.

176. Immunological and pathological comparative analysis between experimental latent tuberculous infection and progressive pulmonary tuberculosis / A.K. Arriaga, E.H. Orozco, L.D. Aguilar et al. // Clin. Exp. Immunol. 2002. - Vol. 128. - № 2. - P. 229-237.

177. Immunopathologic effects of tumor necrosis factor alpha in murine mycobacterial infection are dose dependent / L.G. Bekker, A.L. Moreira, A. Bergtold et al. // Infect. Immun. 2000. - Vol. 68. - № 12. - P. 6954-6961.

178. Immunosuppression by CD4+ regulatory T cells induced by chronic retroviral infection / M. Iwashiro, R.J. Messer, K.E. Peterson et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol. 98. - № 16. - P. 9226-9230.

179. Immunosuppression by human alpha 2-macroglobulin, a 3800 Mr peptide, and other derivatives / W J. Hubbard, B.D. Anderson, A.E. Balber et al. // Ann. N.Y. Acad. Sei. 1983. - Vol. 421. - P. 332-329.

180. Increased immunogenicity of HIV envelope subunit complexed with alpha2-macroglobulin when combined with monophosphoryl lipid A and GM-CSF / H.X. Liao, G.J. Cianciolo, H.F. Staats et al. // Vaccine. 2002. -Vol. 20.- № 17-18. P. 2396-2406.

181. Increased spontaneous apoptosis of CD4+CD25+ T cells in patients with active rheumatoid arthritis is reduced by infliximab / E. Toubi, A. Kessel, Z. Mahmudov et al. // Ann. N. Y. Acad. Sei. 2005. - Vol. 1051. - P. 506-514.

182. Induction of in vitro human macrophage anti-Mycobacterium tuberculosis activity: requirement for IFN-gamma and primed lymphocytes / M.G. Bonecini-Almeida, S. Chitale, I. Boutsikakis et al. // J. Immunol. 1998. - Vol. 160. - № 9. - P. 4490-4499.

183. Induction of transforming growth factor beta 1 by purified protein derivative of Mycobacterium tuberculosis / Z. Toossi, T.G. Young, L.E. Averill et al. // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63. -№ 1. - P. 224-228.

184. Interleukin-10 / R. de Waal Malefyt, H. Yssel, M.G. Roncarolo et al. // Curr. Opin. Immunol. 1992. - Vol. 4. - № 3. - P. 314-320.

185. Interleukin-10 downregulates Mycobacterium tuberculosis-induced Thl responses and CTLA-4 expression / J.H. Gong, M. Zhang, R.L. Modlin et al. // Infect. Immun. -1996. Vol. 64. - № 3. - P. 913-918.

186. Interleukin-10 suppresses the development of collagen type II-induced arthritis and ameliorates sustained arthritis in rats // S. Persson, A. Mikulowska, S. Narula et al. // Scand. J. Immunol. 1996. -Vol. 44. - № 6. - P. 607-614.

187. Kintzel P.E., Calis K.A. Recombinant interleukin-2: a biological response modifier // Clin. Pharm. 1991. - Vol. 10. - № 2. - P. 110-128.i s'

188. Kuz'mina I.K., Gubkina M.F. Pulmonary tuberculosis in children and adolescents with hyperergic tuberculin susceptibility: clinical and X-ray characteristics and methods of detection // Probl. Tuberk. Bolezn. Legk. — 2009. -№ 1. P. 20-23.

189. Lauer D., Reichenbach A., Birkenmeier G. Alpha 2-macroglobulin-mediated degradation of amyloid beta 1—42: a mechanism to enhance amyloid beta catabolism // Exp. Neurol. 2002. - Vol. 167. - № 2. - P. 385-392.

190. Li L., Lao S.H., Wu C.Y. Increased frequency of CD4(+)CD25(high) Treg cells inhibit BCG-specific induction of IFN-gamma by CD4(+) T cells from TB patients // Tuberculosis (Edinb). 2007. - Vol. 87. - № 6. - P. 526-534.

191. Malek T. R., Bayer A.L. Tolerance, not immunity, crucially depends on IL-2 // Nat. Rev. Immunol. 2004. - Vol. 4. - № 9. - P. 665-674.

192. Maltseva N.V., Zorin N.A. The Comparison of Immunoregulatory Properties of Human Alpha2-Macroglobulin and Pregnancy-Associated Alpha2-Glycoprotein // Russ. J. Immunol. 1997. - Vol. 2. - № 2. - P. 97-102.

193. McCoy M.E., Finkelman F.D., Straus D.B. Th2-specific immunity and function of peripheral T cells is regulated by the p56Lck Src homology 3 domain // Immunol. 2010. - Vol. 185. - № 6. - P. 122-127.

194. Mice deficient in CD4 T cells have only transiently diminished levels of IFN-gamma, yet succumb to tuberculosis / A.M. Caruso, N. Serbina, E. Klein et al. // J. Immunol. 1999. - Vol. 162. - № 9. - P. 5407-5416.

195. Modulation of growth factor binding properties of alpha2-macroglobulin by enzyme therapy / D. Lauer, R. Müller, C. Cott et al. // Cancer Chemother. Pharmacol. 2001. - Vol. 47. - P. 4-9.

196. Murine alpha 2macroglobulin increase during inflammatory responses and tumor growth / L. Isaac, M.P. Florido, D. Fecchio et al. // Inflamm. Res. 1999. -Vol. 48.-P. 446-452.

197. Mycobacterium tuberculosis subverts the differentiation of human monocytes into dendritic cells / S. Mariotti, R. Teloni, E. Iona et al. // Eur. J. Immunol. 2002. - Vol. 32 - № 11. - P. 3050-3058.

198. Naturally anergic and suppressive CD25(+)CD4(+) T cells as a functionally and phenotypically distinct immunoregulatory T cell subpopulation / Y. Kuniyasu, T. Takahashi, M. Itoh et al. // Int. Immunol. 2000. - Vol. 12. - № 8.-P. 1145-1155.

199. Neonatal cord serum alpha 2-macroglobulin and fetal size at birth / S.P. Cliver, R.L. Goldenberg, N.R. Neel et al. // Early Hum. Dev. 1993. - Vol. 33. -№ 3. - P. 201-206.

200. Nishikawa H., Sakaguchi S. Definition of target antigens for naturally occurring CD4(+) CD25(+) regulatory T cells // J. Exp. Med. 2005. - Vol. 201. -№ 5. - P. 681-686.

201. O'Garra A., Murphy K. Role of cytokines in determining T-lymphocytefunction // Curr. Opin. Immunol. 1994. - Vol. 6. - № 3. - P. 458-466.

202. Orme I.M. Development of new vaccines and drugs for TB: limitations and potential strategic errors// Future Microbiol. 2011. - Vol. 6. - P. 161-177.

203. Pace L., Pioli C., Doria G. IL-4 modulation of CD4+CD25+ T regulatory cell-mediated suppression // J. Immunol. 2005. - Vol. 174. - № 12. - P. 76457653.

204. Pathogenic Mycobacterium tuberculosis evades apoptosis of host macrophages by release of TNF-R2, resulting in inactivation of TNF-alpha / M.K. Balcewicz-Sablinska, J. Keane, H. Kornfeld et al. // J. Immunol. 1998. — Vol. 161. -№ 5. - P. 2636-2641.

205. Petersen C.M., Moestrup S.K. Interactions between cytokines and alpha 2 macroglobulin // Immunol. Today. 1990. - Vol. 11. - № 12. - P. 430-431.

206. Petersen C.M. Alpha 2-macroglobulin and pregnancy zone protein. Serum levels, alpha 2-macroglobulin receptors, cellular synthesis and aspects of function in relation to immunology // Dan. Med. Bull. 1993. - Vol. 40. - № 4. - P. 409446.

207. Pritchard D.I., Blount D.G., Heaton P.R. Changes to levels of DNA damage and apoptotic resistance in peripheral blood mononuclear cells and plasma antioxidant potential // J. Nutr. 2004. - Vol. 134. - Suppl. 8. - 2120S-2123S.

208. Possible mechanism of immune regulation produced by alpha2M-macroglobulin / A. Alomran, B.K. Shenton, G. Proud et al. // Lancet. 1982. -Vol. 2.-№8308.-P. 1168.

209. Progress in understanding the human immune responses to Mycobacterium tuberculosis / P.F. Barnes, B. Samten, H. Shams, R. Vankayalapatib //

210. Tuberculosis (Edinb). 2009. - Vol. 89. - Suppl. 1. - S. 5-9.

211. Raghvan S., Holgren J. CD4+CD25+ suppressor T cells regulate pathogen induced inflammation and disease // FEMS Immunol. Med. Microbiol. — 2005. -Vol. 44.-P. 121-127.

212. Raupach B.S., Kaufmann H. Immune responses to intracellular bacteria // Curr. Opin. Immunol. 2001. - Vol. 13. - № 12. - P. 417-428.

213. Regulatory potential and control of Foxp3 expression in newborn CD4+ T cells / H.C. Dujardin, O. Burlen-Defranoux, L. Boucontet et al. // Proc Natl Acad Sei. USA. 2004. - Vol. 101. - № 40. - P. 14473-14478.

214. Regulatory T cells and immune tolerance / S Sakaguchi, T. Yamaguchi, T. Nomura et al. // Cell. 2008. - Vol. 1 33.-775-787.

215. Regulatory T cells are expanded in blood and disease sites in patients with tuberculosis / V. Guyot-Revol, J.A. Innes ,S. Hackforth et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2006. - Vol. 173. - № 7. - P. 803-810.

216. Rouse D.A., Morris S.L. Molecular mechanisms of isoniazid resistance in mycobacterium tuberculosis and mycobacterium bovis // Infect. Immun. — 1995. -Vol. 63 № 4. - P. 1427-1433.

217. Sakaguchi S. CD4+ Tregs and immune control // J. Clin. Invest. 2004.

218. Vol. 114, № 9. P. 1209-1217.

219. Selective upregulated expression of the alpha2-macroglobulin signaling receptor in highly metastatic 1-LN prostate carcinoma cells / I.R. Asplin ,U.K. Misra ,G. Gawdi et al. // Arch. Biochem. Biophys. 2000. - Vol. 363. - № 1. -P. 135-141.

220. Single cell analysis shows decreasing FoxP3 and TGFbetal coexpressing CD4+CD25+ regulatory T cells during autoimmune diabetes / S.M. Pop, C.P. Wong, D.A. Culton et al. // J. Exp. Med. 2005. - Vol. 201. - № 8. - P. 13331346.

221. Sheppard D. Transforming growth factor beta: a central modulator of pulmonary and airway inflammation and fibrosis // Proc. Am. Thorac. Soc. -2006. Vol. 3. - № 5. - P. 413-417.

222. Shimizu J., Yamazaki S., Sakaguchi S. Induction of tumor immunity by removing CD25+CD4+ T cells: a common basis between tumor immunity and autoimmunity // J. Immunol. 1999. - Vol. 163. - № 10. - P. 121-127.

223. Suppressor of cytokine signaling-3 is affected in T-cells from tuberculosisTB patients / M. Jacobsen, D. Repsilber, K. Kleinsteuber et al. // Clin. Microbiol. Infect. 2010. - Jul 29. doi: 10.1111/j.l469-0691.2010.03326.

224. T-cell cytokine responses in human infection with Mycobacterium tuberculosis / M. Zhang, Y. Lin, D.V. Iyer et al. // Infect. Immun. -.1995. Vol. 63. - № 8. - P. 3231-3234.

225. The inhibitory effect of IL-1 beta on IL-6-induced alpha 2-macroglobulin expression is due to activation of NF-kappa B / J.G. Bode, R. Fischer, D. Haussinger et al. // J. Immunol. 2001. - Vol. 167. - № 3. - P. 1469-1481.

226. Thornton A.M Signal transduction in CD4+CD25+ regulatory T cells: CD25 and IL-2 // Front. Biosci. 2006. - Vol. 11. - P. 921-927.

227. Thronton A.M., Shevach E.M. Suppressor effector function of CD4+CD25+ immunoregulatory T cells is antigen nonspecific // J. Immunol. -2000. Vol. 164. - № 1. - P. 183-190.

228. T regulatory cells and Thl/Th2 cytokines in peripheral blood froms

229. Treatment outcome and mortality among patients with multidrug-resistant tuberculosis in tuberculosis hospitals of the public sector / D.S. Jeon, D.O. Shin, S.K. Park et al. // J. Korean Med. Sci. 2011. - Vol. 26. - № 1. - P. 33-41.

230. Uhlig H.H., Powrie F. The role of mucosal T lymphocytes in regulating intestinal inflammation // Springer Semin. Immunopathol. 2005. - Vol. 27. - № 2.-P. 167-180.

231. Wagner V, Wagnerová M. Significance of immunoreactive alpha 2-macroglobulin in health and disease // Cas. Lek. Cesk. 1977. - Vol. 116. - № 19.-P. 580-583.

232. Wells C.D. Global Impact of Multidrug-Resistant Pulmonary Tuberculosis Among HIV-infected and Other Immunocompromised Hosts: Epidemiology, Diagnosis, and Strategies for Management. // Curr. Infect. Dis. Rep. 2010. -Vol. 12. -№ 3. - P. 192-197.

233. Wergeland I., Assmus J., Dyrhol-Riise A.M. T regulatory cells and immune activation in Mycobacterium tuberculosis infection and the effect of preventive therapy. 2011. - Vol. 73. - № 3. - P. 234-242.

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких

Автореферат диссертации по медицине на тему Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких

Оглавление диссертации Колосова, Анна Евгеньевна :: 2011 :: Томск

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Колосова, Анна Евгеньевна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Факторы супрессии иммунного ответа при туберкулезе легких"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Колосова, Анна Евгеньевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций