ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОРРЕКЦИИ "ФОСФОГЛИВОМ" В РАЗЛИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЙ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ОСТРОЙ ТОКСИЧЕСКОЙ ГЕПАТОПАТИИ

Белоконова, Оксана Николаевна

Автореферат диссертации по медицине на тему ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОРРЕКЦИИ "ФОСФОГЛИВОМ" В РАЗЛИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЙ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ОСТРОЙ ТОКСИЧЕСКОЙ ГЕПАТОПАТИИ

На правах рукописи

Белоконова Оксана Николаевна

ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОРРЕКЦИИ «ФОСФОГЛИВОМ»

В РАЗЛИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЙ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ

СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ОСТРОЙ ТОКСИЧЕСКОЙ ГЕПАТОПАТИИ

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

- 7 И ¡09 2012

Курск-2012

005045472

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ Конопля Александр Иванович

Официальные оппоненты:

Филиппенко Николай Григорьевич - доктор медицинских наук, профессор, Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, заведующий кафедрой клинической фармакологии

Филиппова Ольга Всеволодовна — доктор медицинских наук, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Воронежский государственный университет», профессор кафедры фармации последипломного образования Учебного центра «Фармация»

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита диссертации состоится г. в

на заседании диссертационного совета Д 208.039.03 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России.

Автореферат разослан ■> г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время имеет место существенное учащение токсических, в том числе и лекарственных, поражений различных органов и тканей. Значение этих поражений возросло в связи с либерализацией доступа населения к медикаментам, появлением в свободной продаже большого количества безрецептурных лекарственных средств, широким распространением агрессивной рекламы при отсутствии объективной информации о возможном побочном действии (Конопля H.A., 2001; Топорков A.C. , 2004; Колпаков М.А. и др., 2006).

Известно, что поражения печени, как инфекционной, так и токсической этиологии, характеризуются нарушением иммунной реактивности организма в отношении Т-зависимых антигенов (Конопля А.И., 2008; Долгарева С.А., 2011). Важное значение имеет нестабильность течения патологического процесса как при повышении иммунной реактивности организма на эндо- и экзогенные антигены (активация функции клеток-киллеров, усиление аутоиммунных компонентов заболевания), так и при снижении иммунного отвега (повышение чувствительности к возбудителям инфекционных заболеваний, нарушение иммунологической регуляции процессов физиологической и репаративной регенерации) (Курилович С.А., 2010).

Сегодня можно говорить о том, что эритроциты вовлекаются в патологический процесс не только при гематологических заболеваниях, но и претерпевают серьезные изменения структуры и функции при болезнях разного генеза: злокачественных новообразованиях, воспалении, нарушениях обмена веществ, заболеваниях сердечно-сосудистой системы, психических расстройствах, инфекционной патологии и др. (Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., 2002; Рязанцева Н.В. с соавт., 2002, 2003; Терещенко С.Ю., 2002; Долгарева С.А. и др., 2011).

В настоящее время остается малоизученной роль изменений физико-химических параметров эритроцитов в условиях острой токсической гепатопа-тии, отсутствуют данные об эффективных способах их фармакологической и нефармакологической коррекции.

Большой интерес авторов привлекают лекарственные препараты на основе глицирризиновой кислоты, поскольку это соединение с выраженной имму-номодулирующей, противовирусной активностью. При этом отсутствуют экспериментальные, а тем более и клинические исследования, посвященные изучению влияния данной группы препаратов на структурно-функциональные свойства эритроцитов (Коротаева Т.В., 2004).

Цель работы: разработка способов фармакологической коррекции с использованием «Фосфоглива» в различных лекарственных формах нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при экспериментальной острой токсической гепатопатии

Задачи исследования.

1. Оценить изменения белкового и липидного спектра мембран эритроцитов в условиях острого токсического поражения печени, вызванного индомета-цином и четыреххлористым углеродом.

2. Определить сорбционную способность эритроцитов на различных моделях острого токсического поражения печени.

3. Сопоставить влияние «Фосфоглива», «Фосфоглива Форте» и «Фосфоглива» для инъекций на содержание белков и липидов в мембране эритроцитов, сорбционную способность эритроцитов при остром индометациновом поражении печени.

4. Определить эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах в коррекции нарушений белкового и липидного спектра мембран эритроцитов, их сорбционных свойств в условиях гепатопатии, вызванной четыреххлористым углеродом.

5. Провести сравнительную оценку фармакологической коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов с использованием «Фосфоглива» в различных лекарственных формах при токсическом поражении печени, вызванном введением индометацина и четыреххлористого углерода.

Научная новизна. Впервые установлены выраженные нарушения белкового и липидного спектра мембран эритроцитов и их сорбционных свойств в условиях острого индометацинового и тетрахлорметанового поражения печени.

Впервые выявлено корригирующее влияние «Фосфоглива», «Фосфоглива Форте» и «Фосфоглива» для инъекций нарушений содержания белков и липидов в мембране эритроцитов, сорбционные свойства красных клеток крови при остром токсическом поражении печени, вызванном индометацином и четыреххлористым углеродом.

Впервые установлено, что в условиях острой индометациновой токсической гепатопатии более эффективна в коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов инъекционная форма «Фосфоглива», а при поражении печени тетрахлорметаном - «Фосфоглив» для инъекций и «Фосфоглив Форте».

Определено, что критериями прогнозирования и оценки выраженности острого токсического поражения печени различными по химической структуре

и механизму повреждающего действия токсикантами являются: сорбционная способность эритроцитов, содержание в мембране /3-спектрина и триглицери-дов.

Практическая значимость. Установлена зависимость выраженности нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов от химической природы и механизма повреждающего действия гепатотропных токсикантов.

Экспериментально доказана эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах в коррекции нарушений белкового и липидного спектра мембраны красных клеток крови, их сорбционных свойств на различных моделях острой токсической гепатопатии.

Применение «Фосфоглива», в отличие от «Фосфоглива Форте» и инъекционной формы препарата, в условиях экспериментального острого токсического поражения печени оказалось менее эффективным вне зависимости от химической природы и механизма повреждающего действия гепатотропного токсиканта.

Расширены рекомендации назначения в клинической практике «Фосфоглива» для инъекций с целью коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при остром токсическом поражении печени.

Показана перспектива дальнейшего совершенствования способов фармакологической коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при заболеваниях печени.

Материалы диссертации вошли в учебные рабочие программы и используются в лекционных курсах и на практических занятиях ряда кафедр Курского, Российского, Самарского государственных медицинских университетов и академий и медицинского факультета Белгородского государственного университета.

Положения, выносимые на защиту.

1. Структурно-функциональные свойства эритроцитов при остром токсическом поражении печени изменяются дифференцированно в зависимости от химической природы и механизма повреждающего действия гепатотропного токсиканта.

2. При острой токсической индометациновой гепатопатии наибольшей эффективностью в коррекции нарушений белкового и липидного спектров мембраны и сорбционных свойств эритроцитов обладает «Фосфоглив» для инъекций.

3. У животных с тетрахлорметановым острым токсическим поражением печени эффективными в коррекции структурно-функциональных свойств красных клеток крови являются инъекционная форма «Фосфоглива» и «Фосфоглив Форте».

4. Для прогнозирования и оценки степени выраженности острого токсического поражения печени различными по химической структуре и механизму повреждающего действия токсикантами, наиболее диагностически ценными являются определение сорбционной способности эритроцитов и содержание в мембране /3-спектрина и триглицеридов.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на XVI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2009), IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010), XV Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (Дубай, 2010), Межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии - междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010), совместном заседании кафедр фармакологии, биологической химии, хирургических болезней № 2, акушерства и гинекологии Курского государственного медицинского университета (2012).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ, 6 из которых в рекомендуемых изданиях ВАК РФ; в работах содержится полный объем информации, касающейся темы диссертации.

Личный вклад автора. Автором составлены план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, лично проводились экспериментальные исследования, анализировались показатели структурно-функциональных свойств эритроцитов. Диссертантом самостоятельно выполнялся анализ и обобщение результатов, составление таблиц и графиков, написание диссертации, сопоставление с литературными данными. Доля автора в совместных публикациях составила 7595%.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста, иллюстрирована 9 таблицами и 9 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 106 отечественных и 97 иностранных источников.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследования

Экспериментальные исследования. Эксперименты проводили на 296 здоровых половозрелых крысах линии Вистар, массой 150-200 г. В опытах использовали животных, прошедших карантинный режим вивария Курского государственного медицинского университета и не имевших внешних признаков каких-либо заболеваний. Все животные содержались в одинаковых условиях, на обычном пищевом режиме. Для получения статистически достоверных результатов группы формировали из 10-12 животных. В контрольные и опытные группы входили животные одного возраста, полученные из питомника РАМН «Столбовая» одновременно. Разброс в группах по исходной массе не превышал ±10%. Все исследования проводили в одно и то же время суток, с 8 до 12 ч, с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986), и согласно правилам лабораторной практики РФ (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.). Животных умерщвляли передозировкой средств для наркоза через 24 часа после последнего введения препарата и/или токсиканта.

Дизайн исследования. Способы введения и дозировки фармакологических препаратов. Расчет дозировок препаратов для введения экспериментальным животным проводили при помощи коэффициентов пересчета доз (мг/кг на мг/м ) для крысы и человека в зависимости от массы тела (Freireich E.J., 1966) (табл. 1).

Токсическое поражение печени моделировали внутрижелудочным введением индометацина в дозе 5 мг/кг, внутрижелудочно, трехкратно, через 24 часа (Саратиков A.C., 1995) или внутримышечным введением 3 мл/кг четыреххло-ристого углерода в виде 50% раствора в оливковом масле, трехкратно, через 24 часа (Алексеева H.H., 1991). Токсикант вводили в последние 3 дня получения препаратов «Фосфоглива».

Использованные препараты, дозировки, способы и кратность введения интактным крысам и животным с острым токсическим поражением печени

Препарат Доза, мг/кг, в пересчете на: Введение

Лецитин гк Способ Количество Кратность

«Фосфоглив» 1500 800 внутрижелу-дочно в 1% крахмальной суспензии 14 Через 24 часа

«Фосфоглив Форте» 1500 240 внутрижелу-дочно в 1% крахмальной суспензии 14 Через 24 часа

«Фосфоглив» для инъекций 1500 600 внутрибрю-шинно 14 Через 24 часа

Информация о лекарственных формах «Фосфоглива», изученных в работе. «Фосфоглив» - препарат, состоящий из липоида С80 (0,065 г), глицира-та (0,035 г), микрокристаллической целлюлозы НР 101 (0,08 г), кальция карбоната (0,2636 г), аэросила АЗОО (0,0032), кальция стеарата (0,0032 г), талька (0,01).

«Фосфоглив Форте» - состоит из липоида РРЬ-400 (0,300 г), глицирата (0,065 г), бутилгидрокситолуола (0,0001 г), масла подсолнечного (0,0229 г), спирта этилового ректификата (0,012 г).

«Фосфоглив» для инъекций - лиофилизированный порошок, состоящий из лецитина (0,5 г) и глицирризиновой кислоты (0,2 г).

Исследование структурно-функциональных свойств эритроцитов.

Эритроциты получали из 5 мл гепаринизированной крови по методу Е. Веи^ег (1985) с незначительной модификацией. Цельную кровь отстаивали дважды в 10 мМ Ыа-фосфатном буфере (рН=7,4), содержащем 0,9% хлорида натрия и 3% декстрана Т-500, в течение 30 минут при температуре 37°С. После этого кровь центрифугировали, удаляли надосадочную жидкость аспирацией. Эритроци-тарную массу подвергали дополнительной очистке на хроматографической колонке через НВБ-целлюлозу.

Определялась общая сорбционная способность эритроцитов, обусловленная наружной архитектоникой клеточной мембраны (Тогайбаев А.А. и др., 1988), сорбционная емкость гликокаликса эритроцитов для альцианового синего (Семко Г.А., 1998) и уровень малонового диальдегида в эритроцитах (Банко-ва В.В. и др., 1987).

Мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge (1963), разрушая эритроциты осмотическим и механическим гемолизом в 10 мМ Иа-фосфатном буфере, после чего проводили отмывку теней от гемоглобина в 10 мМ и 5 мМ Na-фосфатном буфере. Электрофорез проводили в присутствии додецилсуль-фата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli (1970). Белки окрашивали кумаси голубым R-250 по модифицированной методике G. Fairbanks (1971). Количественное содержание белковых фракций рассчитывали через площадь и известную концентрацию яичного альбумина, выступающего в качестве маркерного белка. Полученные значения пересчитывали на 1 мг общего белка в исследуемом образце сухих мембран эритроцитов. Липиды выделяли методом тонкослойной хроматографии (Крылов В.И. и др., 1984).

Статистическая обработка полученных результатов. Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя параметрические и непараметрические методы, факторный анализ, кластерный анализ, критерий X2, а также коэффициент ранговой корреляции Спирмена (Гублер Е.Г., Ген-кин А.Р., 1973; Лакин Г.Ф., 1980). Статистически значимыми считали различия с р<0,05.

Примечание. Определение белкового и липидного спектра мембран эритроцитов проведено в лаборатории иммуноферментного анализа НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета, за что выражаем сотрудникам соответствующего подразделения глубокую признательность.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Структурно-функциональные свойства мембраны эритроцитов при четыреххлористом токсическом поражении печени и использовании «Фосфоглйва». При ОТПП у экспериментальных животных снижается представительность в мембране эритроцитов обеих подфракций спектрина, анки-рина, анионтранспортного белка (АТБ), белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (Г-З-ФД), тропомиозина, глутатион-Б-трансферазы и повышается уровень белка полосы 4.1 и паллидина (табл. 2). Кроме этого, в данной группе животных снижена ССЭ, СЕГ и повышена концентрация внутри красных клеток крови малонового диальдегида (МДА) (табл. 2).

В группе животных, получавших «Фосфоглив» внутрь, отмечалась частичная коррекция представительности а-спектрина, анкирина, АТБ, белка полосы 4.5, Г-З-ФД. Изменения белкового спектра на фоне применения «Фосфоглйва» приводят к повышению СЕГ до уровня нормы (табл. 2).

При использовании «Фосфоглйва Форте» у животных в условиях ОТПП выявлена нормализация уровня /3-спектрина, белка полосы 4.1, СЕГ, коррекция не до уровня нормы а-спектрина, анкирина, белка полосы 4.5, Г-S-T, ССЭ и концентрация внутри клеток МДА (табл. 2).

Инъекции препарата «Фосфоглив» нормализовали у животных, получавших четыреххлористый углерод, представительность /3-спектрина, белка полос 4.1 и 4.5, паллидина, Г-З-ФД, Г-S-T, СЕГ и корригировали другие измененные показатели структурно-функциональных свойств эритроцитов (табл. 2).

Таким образом, в условиях ОТПП четыреххлористым углеродом выявлены изменения целого ряда белковых фракций в мембране эритроцитов и ее сорбционных свойств, а использование «Фосфоглйва» позволяет корригировать и нормализовать выявленные изменения, при этом максимальной эффективность обладает форма «Фосфоглйва» для инъекций.

После отравления четыреххлористым углеродом у животных в эритроци-тарной мембране повышен уровень холестерина, свободных жирных кислот, моно- и диглицеридов, лизофосфатидилхолина и снижена концентрация эфиров жирных кислот, триглицеридов, фосфатидилхолина и сфингомиелина (табл. 3).

Структурно-функциональные свойства мембраны эритроцитов при ОТПП ЧХУ(М±т)

1 2 3 4 5

Острое токсическое поражение печени (ОТПП) ЧХУ

Показатели ОТПП ЧХУ + «Фосфоглив» ОТПП ЧХУ + ОТПП ЧХУ +

Контроль ОТПП ЧХУ «Фосфоглив форте» «Фосфоглив» для инъекций

о!-Спектрин, мг% 110,3±5,21 74,3±3,8*' 81,5±3,22*1,2 85,6±4,2"м 90,3±3,7Г''2

/З-Спектрин, мг% 93,1 ±4,31 79,5±4,3'' 82,3±4,7*' 88,1±4,05*2 90,2±5,0'2

Анкирин, мг% 71,0±2,04 52,6±2,74"' 62,1 ±4,2 Г1'2 59,4±3,05*1Д 64,1 ±3,08*1,2

Анионтранспортный белок, мг% 169,6±6,22 142,7±5,47*' 156,3±4,8*''2 150,6±5,9Г' 158,2±4,97*''2

4.1, мг% 81,4±4,1 96,1±5,3'' 85,7±4,9 83,1±3,14*2 84,2±4,81*2

Паллидин, мг% 62,13±4,09 74,7±4,8*' 67,8±5,1 69,3±4,92 60,31±3,9*2

4.5, мг% 69,79±3,13 52,6±3,82*' 60,1±3,72*''2 61,1±2,93*1,2 64,5±5,17'2

Дематин, мг% 41,2±2,05 45,6±3,33 40,4±2,7 46,9±4,71 39,5±3,75

Актин, мг% 101,1±4,15 117,7±5,64 108,7±4,3 99,6±8,21 112,6±6,41

Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, мг% 54,3±2,0 40,7±3,14*' 46,4±2,07*''2 45,9±3,12*' 50,1±3,84*2

Тропомиозин, мг% 65,3±3,09 56,2±3,81*' 60,7±3,15 62,7±4,1 63,2±3,7

Глутатион-Б-трансфераза, мг% 59,2±2,45 44,3±2,9Г' 46,4±3,31*' 51,7±3,0*''2 55,6±4,71-2'3

СЕГ, 10 й г/эр. 2,4±0,12 1,8±0,09*' 2,1±0,19*2 2,4±0,20*2 2,2±0,10*2

ССЭ, % 46,2±3,0 12,2±4,84*' 19,6±1,21 21,5±2,37*1,2 28,6±2,89'1-4

МДА, нмоль * 106 эр. 3,21 ±0,09 7,27±0,39*' 6,06±0,25*1,2 5,91±0,29*1-2

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы даны эти различия; ТЛ - традиционное лечение.

Липидный спектр мембраны эритроцитов при ОТПП ЧХУ (мг%, М±ш)

Показатели 1 | 2 3 4 5

Острое токсическое поражение печени (ОТПП) ЧХУ

Контроль ОТПП ЧХУ ОТПП ЧХУ + «Фосфоглив» ОТПП ЧХУ + «Фосфоглив форте» ОТПП ЧХУ + «Фосфоглив» для инъекций

Холестерин 43,0±2,14 54,4±2,39'' 48,4±2,4Г''2 47,3±2,08"''2 45,6±1,97*2

Эфиры холестерина 38,03±2,21 32,б±1,74*' 34,6±1,92'' 33,7±2,03*' 35,6±2,52

Свободные жирные кислоты 4,3±0,17 5,09±0,12'' 4,81±0,15*''2 4,52±0,18"2 4,42±0,16*2

Моно- и диглицериды 10,43±0,42 11,31±0,38*' 10,3±0,24*2 9,45±0,41*2 10,21±0,27*2

Триглицериды 15,63±1,17 11,21±1,ЗГ' 16,2±1,12'2 17,4±2,31*2 16,31±1,38*2

Фосфатидилхолин 24,0± 1,87 17,1±2,0Г' 17,31±1,24*' 18,32±1,12*' 20,41±1,29*м

Фосфатидилэтаноламин 24,63±2,12 22,3±2,07 23,2±1,38 25,6±2,33 24,8±2,51

Лизофосфатидилхолин 22,3±0,13 24,7 ±0,23*' 21,9±0,31*2 22,8±0,18*2 22,71±0,35*2

Фосфатидилинозитол 5,1±0,06 4,94±0,12 5,2±0,14 5,07±0,17 4,88±0,22

Сфингомиелин 11,8±0,49 9,31±0,33*' 9,07±0,19*' 10,52±0,25*'"3 12,04±0,5Г2-4

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы даны эти различия; ТЛ - традиционное лечение.

Использование «Фосфоглива» внутрь у животных, подвергнутых воздействию четыреххлористого углерода, позволило снизить, но не до уровня нормы, концентрацию в эритроцитарной мембране холестерина и свободных жирных кислот, нормализовать уровень моно- и диглицеридов, лизофосфатидилхолина и триглицеридов (табл. 3).

Применение у животных в условиях ОТПП «Фосфоглива Форте» нормализует уровень в мембране красных клеток крови свободных жирных кислот, моно- и диглицеридов, лизофосфатидилхолина и триглицеридов, возрастает, но не до уровня нормы содержание холестерина и сфингомиелина, (табл. 3).

Максимальной эффективностью у данной группы животных обладает «Фосфоглив» для инъекций - его использование нормализует липидный спектр в мембране эритроцитов, за исключением концентрации фосфатидилхолина, уровень которого возрастает, но не до уровня нормы (табл. 3).

Мембраноиротективная эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах при индометациновом токсическом поражении печени. В условиях ОТПП, вызванного введением индометацина, у животных установлено снижение представительности а-спектрина, анкирина, белка полосы 4.5, Г-З-ФД, триглицеридов, сфингомиелинов и повышение количества белка полосы 4.1, паллидина, холестерина, свободных жирных кислот, что приводит к снижению общей сорбционной способности эритроцитов и накоплению в них МДА (рис. 1).

Введение животным «Фосфоглива» per os на фоне токсического воздействия индометацина позволило нормализовать в мембране красных клеток крови концентрацию триглицеридов и частично корригировать представительность а-спектрина, анкирина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-

фосфатдегидрогеназы, свободных жирных кислот и МДА внутри клеток (табл. 4)-

Применение «Фосфоглива Форте» у животных в условиях ОТПП дополнительно, в отличие от предыдущей группы животных, нормализует в эритроцитарной мембране уровень анкирина и корригирует представительность паллидина и повышает, но не до уровня нормы, ССЭ (табл. 4, 5).

л 4

ФИ

а-спектрин СМ 150 - р-сяектрин

Лнкирнн

АТБ

ФЭ

4.1

ФХ

Пяллидин

ТГ !

4.5

МДГ

Дематнн

сжк

Актин

ЭХ

Г-З-ФД Тропомнозин

Холестерин

ССЭ

СЕГ

Рис. 1. Представительность белков и липидов в мембране эритроцитов, ССЭ, СЕГ и концентрация МДА у животных в условиях ОТПП. Примечания.

1. Радиус окружности - показатели у контрольной группы животных (1 группа). "

3. О - р < 0,05 между показателями по отношению к 1 группе.

4. АТБ - анионтранспортный белок, Г-З-ФД - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, Г-S-T - глутатион-8-трансфераза; ЭХ - эфиры холестерина, СЖК - свободные жирные кислоты, МДГ - моно- и диглицериды, ТГ - триглицериды, ФХ - фосфатидилхолин, ФЭ - фосфатидилэтано-ламин, ЛФХ - лизофосфатидилхолин, ФИ - фосфатидилинозитол, СМ - сфингомиелин.

Инъекции «Фосфоглива» более эффективно корригируют и нормализуют нарушенные показатели белково-липидного спектра мембран красных клеток крови в условиях ОТПП: нормализуют количество паллидина, белка полосы 4.5, Г-З-ФД, холестерина и сфингомиелина, корригируя остальные изменённые показатели, за исключением представительности белка полосы 4.1 (табл. 4, 5).

2.

- показатели у животных с ОТПП (2 группа).

Структурно-функциональные свойства мембраны эритроцитов при ОТПП ИМ (М±т)

1 2 3 4 5

Острое токсическое поражение печени (ОТПП)

Показатели ОТПП им + «Фосфоглив» ОТПП ИМ + ОТПП ИМ +

Контроль ОТПП им «Фосфоглив Форте» «Фосфоглив» инъекции

а-Спектрин, мг% 110,3±5,21 63,8±3,2'' 81,6±3,1 Г1,2 85,4±4,Г'"! 87,1±3,2''-2

/З-Спектрин, мг% 93,1 ±4,31 89,7±4,5 92,3±4,7 92,9±4,05 91,1±5,0

Анкирин, мг% 71,0±2,04 57,4±2,3'' 63,7±4,1 '',2 69,4±4,25'' 69,8±3,Г2

Анионтранспортный белок, мг% 169,С±6,22 172,7±5,5 166,3±5,9 170,6±8,9 168,2±4,6

4.1, мг% 81,4±4,1 106,5±8,7'' 103,6±5,9*' 99,7±4,2'' 81,2±4,25*'

Паллидин, мг% 62,13±4,09 85,7±5,Г' 86,3±4,2*' 75,3±2,42*1,2 61,45±3,7*2

4.5, мг% 69,79±3,13 50,1±3,8'' 61,4±3,4*''2 60,5±2,8*1,2 68,5±4,2*2

Дематин, мг% 41,2±2,05 43,1±3,25 40,4±2,7 46,9±3,2 39,5±3,4

Актин, мг% 101,1±4,15 107,1 ±5,61 108,7±6,4 102,6±8,3 107,6±8,1

Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, мг% 54,3±2,0 41,3±3,11*' 45,9±1,86*1-2 46,3±3,3*1,2 52,7±3,2*2

Тропомиозин, мг% 65,3±3,09 66,2±4,6 62,7±3,15 62,7±4,1 63,2±3,4

Глутатион-Б-трансфераза, мг% 59,2±2,45 54,3±3,5 59,4±3,31 58,7±4,0 56,6±4,3

СЕГ, 10"12 г/эр. 2,4±0,12 2,6±0,11 2,5±0,19 2,5±0,20*2 2,4±0,10

ССЭ, % 46,2±3,0 22,2±2,Г' 20,9±1,3*' 29,5±2,П*1,2 28,6±2,89*'"4

МДА, нмоль * 106 эр. 3,21±0,09 6,21±0,52*' 5,12±0,281Д 5,3±0,2*'-2 4,4±0,2*'"4

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы даны эти различия; ТЛ - традиционное лечение.

Липидиый спектр мембраны эритроцитов при ОТПП ИМ (мг%, М±ш)

Показатели 1 | 2 1.3 | 4 | 5

Острое токсическое поражение печени (ОТПП)

Контроль ОТПП ИМ ОТПП ИМ + «Фосфоглив» ОТПП ИМ + «Фосфоглив Форте» ОТПП им + «Фосфоглив» инъекции

Холестерин 43,0±2,14 59,1±3,25*' 58,1±2,5*' 57,2±2,3*' 44,7±1,6*2"4

Эфиры холестерина 38,03±2,21 37,8±1,7 38,1±1,5 36,7±2,2 37,1±2,3

Свободные жирные кислоты 4,3±0,17 5,27±0,17*' 4,89±0,19''-" 4,91 ±0,12*1,2 4,89±0,12*''2

Моно- и диглицериды 10,43±0,42 11,2±0,6 10,9±0,7 10,5±0,9 10,7±0,8

Триглицериды 15,63±1,17 10,12±1,25'' 15,8±1,15'2 16,4±2,1'2 16,6±1,5*2

Фосфатидилхолин 24,0± 1,87 27,1 ±2,2 25,9±1,2 28,32±1,12 23,4± 1,29

Фосфатидилэтаноламин 24,63±2,12 22,3±2,3 23,2±1,3 25,б±2,33 24,2±2,51

Лизофосфатидилхолин 22,3±0,13 21,7±1,2 21,9±0,3 22,8±0,18 22,2±0,35

Фосфатидилинозитол 5,1±0,06 5,2±0,12 5,0±0,3 5,07±0,17 4,9±0,22

Сфингомиелин 11,8±0,49 8,28±0,42*' 9,0±0,18'' 8,9±0,21 *' 11,74±0,81*2"4

Примечание. Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы даны эти различия; ТЛ - традиционное лечение.

Сравнительная эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах при различных моделях экспериментальной токсической гепатопатии. Сравнивая мембранопротективную эффективность различных форм «Фосфоглива» в условиях токсического поражения печени, выявлено, что максимальной эффективностью в отношении нарушенных показателей структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов обладает «Фосфоглив» для инъекций как при ИМ, так и ЧХ токсическом поражении печени, так как позволяет снизить количество измененных показателей с 80% до 24% при че-тыреххлористом токсическом поражении печени и с 48% до 20% при индоме-тациновом (табл. 6).

Представленные выше данные позволяют сделать заключение, что в условиях острой токсической гепатопатии имеет место нарушение метаболического гомеостаза, что проявляется изменением структурно-функциональных свойств эритроцитов, в первую очередь белково-липидного спектра. При этом использование различных форм препарата «Фосфоглив» позволяет корригировать и нормализовать представительность белков и липидов в мембране красных клеток крови. Максимальной эффективностью в условиях ОТПП обладает «Фосфоглив» для инъекций, минимальной - «Фосфоглив», тогда как «Фосфоглив Форте» занимает промежуточное положение (табл. 6).

Таблица 6

Сравнительная мембранопротективная эффективность различных форм

«Фосфоглива» в условиях острого токсического поражения печени

Измененные показатели (%) ЧХУ ИМ

Отравление гепатотоксическим ядом 80,0 48,0

Отравление + «Фосфоглив» 64,0 44,0

Отравление + «Фосфоглив Форте» 52,0 40,0

Отравление + «Фосфоглив» инъекции 24,0 20,0

В целом эффекты препарата обусловлены антиоксидантной активностью лецитина, который замещает и стабилизирует мембраны гепатоцитов, а гли-цирризиновая кислота не только дополнительно стабилизирует лецитин, но и обладает прямым иммуномодулирующим эффектом на клетки иммунной системы, что совместно ускоряет репаративные процессы в гепатоцитах.

В данном случае благодаря своей высокой биодоступности оказался более эффективным «Фосфоглив» для инъекций, введение которого, вероятно, позволяет стабилизировать мембранные структуры гепатоцитов, уменьшить процессы перекисного окисления липидов и снизить выход в кровеносное русло иммуностимулирующих соединений, что сопровождается нормализацией большинства исследованных показателей иммунного статуса.

Полученные результаты диктуют необходимость апробирования данных форм препарата «Фосфоглив» в клинических исследованиях с целью разработки эффективных способов фармакокоррекции метаболических нарушений при острой токсической гепатопатии.

Другой сферой интересов, позволяющей косвенно оценить механизм влияния тех или иных препаратов на изучаемые показатели, служит факторный анализ. С его помощью него удалось редуцировать лабораторные показатели, на которые предложенные схемы оказывают минимальное влияние, и выделить те, которые максимально чувствительны к воздействию препаратов.

Построение графиков факторной нагрузки лабораторных данных установило, что наиболее чувствительными к воздействию «Фосфоглива» вне зависимости от токсического агента является содержание /3-спектрина, триглицери-дов и сорбционная способность эритроцитов, что позволяет использовать данные показатели для прогнозирования и оценки выраженности острого токсического поражения печени различными по химической структуре и механизму повреждающего действия токсикантами.

ВЫВОДЫ

1. При экспериментальной острой токсической гепатопатии, вызванной введением четыреххлористого углерода, в эритроцитарной мембране повышен уровень холестерина, свободных жирных кислот, моно- и диглицеридов, лизо-фосфатидилхолина, белка полосы 4.1, паллидина, внутриклеточного малонового диальдегида, снижена мембранная концентрация эфиров жирных кислот, триглицеридов, фосфатидилхолина и сфингомиелина, обеих подфракций спек-трина, анкирина, анионтранспортного белка, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, тропомиозина, глутатион-8-трансферазы, общая сорбционная способность эритроцитов и их гликокаликс.

2. В условиях острого индометацинового токсического поражения печени в мембране эритроцитов снижен уровнь триглицеридов, сфингомиелинов, а-спектрина, анкирина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, повышено количество холестерина, свободных жирных кислот, белка полосы 4.1, паллидина, снижена общая сорбционная способность клеток.

3. Введение «Фосфоглива» при токсическом индометациновом поражении печени нормализует в мембране эритроцитов концентрацию триглицери-дов, применение «Фосфоглива Форте» дополнительно нормализует уровень анкирина, инъекции «Фосфоглива» - количество паллидина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, холестерина и сфингомиелина.

4. Использование «Фосфоглива» в условиях тетрахлорметанового токсического поражения печени нормализует в мембране эритроцитов представительность паллидина и белка полосы 4.1, «Фосфоглив Форте» дополнительно нормализует уровень свободных жирных кислот, тропомиозина и сорбционную емкость гликокаликса, «Фосфоглив» для инъекций - содержание всех липидов, /3-спектрина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы и глу-татион-Б-трансферазы.

6. В условиях острой токсической индометациновой гепатопатии наиболее эффективно нормализует нарушения структурно-функциональных свойств эритроцитов инъекционная форма «Фосфоглива», а при токсическом тетра-хлорметановом поражении печени - «Фосфоглив» для инъекций и «Фосфоглив Форте».

7. Для прогнозирования развития и оценки степени выраженности острого токсического поражения печени наиболее диагностически ценным является определение сорбционной способности эритроцитов и содержания в мембране 0-спектрина и триглицеридов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать применение «Фосфоглива» для инъекций для коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при остром токсическом поражении печени.

2. Использовать для прогнозирования развития и оценки степени выраженности токсического поражения печени определение сорбционной способности эритроцитов и содержание в мембране /3-спектрина и триглицеридов.

3. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о нарушениях структурно-функциональных свойств эритроцитов при экспериментальной острой токсической гепатопатии и способах их фармакологической коррекции с использованием «Фосфоглива» в различных лекарственных формах.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Белоконова, О.Н. Применение фосфоглива для коррекции иммунных нарушений при острой экспериментальной токсической гепатопатии / H.A. Кедровская, О.Н. Белоконова // Тез. докл. XVI Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство». - 2009. - С. 232.

2. Белоконова, О.Н. Влияние различных лекарственных форм «Фосфоглива» на сорбционные показатели эритроцитов в условиях токсического поражения печени / О.Н. Белоконова, H.A. Кедровская // Материалы IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков. 25-26 февраля 2010 года. Том I / Под ред. В.А. Лазаренко — Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2010.-С. 82-85.

3. Белоконова, О.Н. Иммуномодулирующие и гепатопротекгорные эффекты различных лекарственных форм «Фосфоглива» в условиях ин-дометацинового токсического поражения печени / H.A. Кедровская, О.Н. Белоконова // Курский науч.-иракт. вестн. «Человек и его здоровье». -2009.-№4.-С. 5-8.

4. Иммуномодулирующие эффекты фосфоглива при экспериментальном токсическом поражении печени / H.A. Быстрова, О.Н. Белоконова, АЛ. Локтионов, H.A. Кедровская // Международный журнал по имму-нореабилитации. - 2010. - Т. 12, № 2. - С. 159.

5. Применение различных лекарственных форм фосфоглива в коррекции нарушений иммунитета при экспериментальном токсическом поражении печени / Е.В. Орлова, О.Н. Белоконова, В.А. Рагулина, Е.В. Авдеева // Российский аллергологический журнал. - 2010. - № 5, Вып. 1. -С. 36-37.

6. Коррекция функциональной активности нейтрофнлов периферической крови производными З-гидроксипиридина при остром токсическом поражении печени / О.Н. Белоконова, В.А. Рагулина, Е.А. Орлова и др. // Российский аллергологический журнал. - 2010. - № 5, Вып. 1. - С. 236-237.

7. Эффективность различных лекарственных форм «Фосфоглива» в коррекции структурно-функциональных нарушений мембраны эритроцитов при остром токсическом поражении печени / В.П. Гаврилюк, О.Н. Белоконова, А.И. Конопля, H.A. Быстрова // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2011. - Т. 10, № 2. - С. 269-273.

8. Нарушения белково-липидного спектра мембраны эритроцитов при экспериментальной гепатопатии, коррекция различными формами препарата «Фосфоглив» / О.Н. Белоконова, А.И. Конопля, В.П. Гаврилюк и др. // Фундаментальные исследования. - 2011, № 11 (3). - С. 481-484.

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

la - a-спектрин, мг%

1 и - /З-спектрин, мг%

АТБ - анионтранспортный белок или белок полосы 3

Г-З-ФД - глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа

Г-S-T - глутатиon-S-трансфераза

ИМ - индометацин

ЛФХ - лизофосфатидилхолин, мг%

МДА - малоновый диальдегид, нмоль * 10б эр.

МДГ - моно- и диглицериды, мг%

ОТПП - острое токсическое поражение печени

ПОЛ - перекисное окисление липидов

СЕГ - сорбционная емкость гликокаликса, 10"12 г/эр.

СЖК - свободные жирные кислоты, мг%

СМ - сфингомиелин, мг%

ссэ - сорбционная способность эритроцитов, %

тг - триглицериды, мг%

ФИ - фосфатидилинозитол, мг%

ФХ - фосфатидилхолин, мг%

ФЭ - фосфатидилэтаноламин, мг%

эх - эфиры холестерина, мг%

Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г. Сдано в набор 26.05.2012 г. Подписано в печать 26.05.2012 г. Формат 30x42'/g Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 206"А" Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Оглавление диссертации Белоконова, Оксана Николаевна :: 2012 :: Курск

ВВЕДЕНИЕ.

РАЗДЕЛ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Иммунокорригируюшие, антиоксидантные и мембранопротектив- 10 ные эффекты глицирризиновой кислоты.

2. Роль эссенциальных фосфолипидов в метаболических процессах при патологии печени.

РАЗДЕЛ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3. Материал и методы исследования.

4. Структурно-функциональные свойства мембраны эритроцитов при четыреххлористом токсическом поражении печени и использовании «Фосфоглива».

5. Мембранопротективная эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах при индометациновом токсическом 56 поражении печени.

6. Сравнительная эффективность «Фосфоглива» в различных лекар- 67 ственных формах при различных моделях экспериментальной токсической гепатопатии.

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Белоконова, Оксана Николаевна, автореферат

Актуальность проблемы. В настоящее время имеет место существенное учащение токсических, в том числе и лекарственных, поражений различных органов и тканей. Значение этих поражений возросло в связи с либерализацией доступа населения к медикаментам, появлением в свободной продаже большого количества безрецептурных лекарственных средств, широким распространением агрессивной рекламы при отсутствии объективной информации о возможном побочном действии (Конопля H.A., 2001; Топорков A.C., 2004; Колпаков М.А. и др., 2006).

Известно, что поражения печени, как инфекционной, так и токсической этиологии, характеризуются нарушением иммунной реактивности организма в отношении Т-зависимых антигенов (Конопля А.И., 2008; Долгарева С.А., 2011). Важное значение имеет нестабильность течения патологического процесса как при повышении иммунной реактивности организма на эндо- и экзогенные антигены (активация функции клеток-киллеров, усиление аутоиммунных компонентов заболевания), так и при снижении иммунного ответа (повышение чувствительности к возбудителям инфекционных заболеваний, нарушение иммунологической регуляции процессов физиологической и ре-паративной регенерации) (Курилович С.А., 2010).

Сегодня можно говорить о том, что эритроциты вовлекаются в патологический процесс не только при гематологических заболеваниях, но и претерпевают серьезные изменения структуры и функции при болезнях разного генеза: злокачественных новообразованиях, воспалении, нарушениях обмена веществ, заболеваниях сердечно-сосудистой системы, психических расстройствах, инфекционной патологии и др. (Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., 2002; Рязанцева Н.В. с соавт., 2002, 2003; Терещенко С.Ю., 2002; Долгарева С.А. и др., 2011).

В настоящее время остается малоизученной роль изменений физико-химических параметров эритроцитов в условиях острой токсической гепато-патии, отсутствуют данные об эффективных способах их фармакологической и нефармакологической коррекции.

Большой интерес авторов привлекают лекарственные препараты на основе глицирризиновой кислоты, поскольку это соединение с выраженной иммуномодулирующей, противовирусной активностью. При этом отсутствуют экспериментальные, а тем более и клинические исследования, посвященные изучению влияния данной группы препаратов на структурно-функциональные свойства эритроцитов (Коротаева Т.В., 2004).

Цель работы: разработка способов фармакологической коррекции с использованием «Фосфоглива» в различных лекарственных формах нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при экспериментальной острой токсической гепатопатии

Задачи исследования.

1. Оценить изменения белкового и липидного спектра мембран эритроцитов в условиях острого токсического поражения печени, вызванного индо-метацином и четыреххлористым углеродом.

2. Определить сорбционную способность эритроцитов на различных моделях острого токсического поражения печени.

3. Сопоставить влияние «Фосфоглива», «Фосфоглива Форте» и «Фосфоглива» для инъекций на содержание белков и липидов в мембране эритроцитов, сорбционную способность эритроцитов при остром индомета-циновом поражении печени.

4. Определить эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах в коррекции нарушений белкового и липидного спектра мембран эритроцитов, их сорбционных свойств в условиях гепатопатии, вызванной четыреххлористым углеродом.

5. Провести сравнительную оценку фармакологической коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов с использованием «Фосфоглива» в различных лекарственных формах при токсическом поражении печени, вызванном введением индометацина и четыреххлористо-го углерода.

Научная новизна. Впервые установлены выраженные нарушения белкового и липидного спектра мембран эритроцитов и их сорбционных свойств в условиях острого индометацинового и тетрахлорметанового поражения печени.

Впервые выявлено корригирующее влияние «Фосфоглива», «Фосфоглива Форте» и «Фосфоглива» для инъекций нарушений содержания белков и липидов в мембране эритроцитов, сорбционные свойства красных клеток крови при остром токсическом поражении печени, вызванном индометацином и четыреххлористым углеродом.

Впервые установлено, что в условиях острой индометациновой токсической гепатопатии более эффективна в коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов инъекционная форма «Фосфоглива», а при поражении печени тетрахлорметаном - «Фосфоглив» для инъекций и «Фосфоглив Форте».

Определено, что критериями прогнозирования и оценки выраженности острого токсического поражения печени различными по химической структуре и механизму повреждающего действия токсикантами являются: сорбци-онная способность эритроцитов, содержание в мембране Р-спектрина и триг-лицеридов.

Практическая значимость. Установлена зависимость выраженности нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов от химической поиоолы и механизма повоежлаюшего действия гепатотоопных токсикантов.

А А ' 1 А ' 1 1 ' ' А

Экспериментально доказана эффективность «Фосфоглива» в различных лекарственных формах в коррекции нарушений белкового и липидного спектра мембраны красных клеток крови, их сорбционных свойств на различных моделях острой токсической гепатопатии.

Применение «Фосфоглива», в отличие от «Фосфоглива Форте» и инъекционной формы препарата, в условиях экспериментального острого токсического поражения печени оказалось менее эффективным вне зависимости от химической природы и механизма повреждающего действия гепатотропного токсиканта.

Расширены рекомендации назначения в клинической практике «Фосфоглива» для инъекций с целью коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при остром токсическом поражении печени.

Показана перспектива дальнейшего совершенствования способов фармакологической коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при заболеваниях печени.

Материалы диссертации вошли в учебные рабочие программы и используются в лекционных курсах и на практических занятиях ряда кафедр Курского, Российского, Самарского государственных медицинских университетов и академий и медицинского факультета Белгородского государственного университета.

Положения, выносимые на защиту.

1. Структурно-функциональные свойства эритроцитов при остром токсическом поражении печени изменяются дифференцированно в зависимости от химической природы и механизма повреждающего действия гепатотропного токсиканта.

2. При острой токсической индометациновой гепатопатии наибольшей эффективностью в коррекции нарушений белкового и липидного спектров мембраны и сорбционных свойств эритроцитов обладает «Фосфоглив» для инъекций.

3. У животных с тетрахлорметановым острым токсическим поражением печени эффективными в коррекции структурно-функциональных свойств красных клеток крови являются инъекционная форма «Фосфоглива» и «Фосфоглив Форте».

4. Для прогнозирования и оценки степени выраженности острого токсического поражения печени различными по химической структуре и механизму повреждающего действия токсикантами, наиболее диагностически ценными являются определение сорбционной способности эритроцитов и содержание в мембране (З-спектрина и триглицеридов.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на XVI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2009), IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010), XV Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (Дубай, 2010), Межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии - междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010), совместном заседании кафедр фармакологии, биологической химии, хирургических болезней № 2, акушерства и гинекологии Курского государственного медицинского университета (2012).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ, 6 из которых в рекомендуемых изданиях ВАК РФ; в работах содержится полный объем информации, касающейся темы диссертации.

Личный вклад автора. Автором составлены план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, лично проводились экспериментальные исследования, анализировались показатели структурно-функциональных свойств эритроцитов. Диссертантом самостоятельно выполнялся анализ и обобщение результатов, составление таблиц и графиков, написание диссертации, сопоставление с литературными данными. Доля автора в совместных публикациях составила 75-95%.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста, иллюстрирована 9 таблицами и 9 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 106 отечественных и 97 иностранных источников.

Заключение диссертационного исследования на тему "ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОРРЕКЦИИ "ФОСФОГЛИВОМ" В РАЗЛИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЙ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ОСТРОЙ ТОКСИЧЕСКОЙ ГЕПАТОПАТИИ"

ВЫВОДЫ

1. При экспериментальной острой токсической гепатопатии, вызванной введением четыреххлористого углерода, в эритроцитарной мембране повышен уровень холестерина, свободных жирных кислот, моно- и диглицеридов, лизофосфатидилхолина, белка полосы 4.1, паллидина, внутриклеточного малонового диальдегида, снижена мембранная концентрация эфиров жирных кислот, триглицеридов, фосфатидилхолина и сфингомиелина, обеих подф-ракций спектрина, анкирина, анионтранспортного белка, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, тропомиозина, глутатион-S-трансферазы, общая сорбционная способность эритроцитов и их гликока-ликс.

2. В условиях острого индометацинового токсического поражения печени в мембране эритроцитов снижен уровень триглицеридов, сфингомиели-нов, а-спектрина, анкирина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, повышено количество холестерина, свободных жирных кислот, белка полосы 4.1, паллидина, снижена общая сорбционная способность клеток.

3. Введение «Фосфоглива» при токсическом индометациновом поражении печени нормализует в мембране эритроцитов концентрацию триглицеридов, применение «Фосфоглива Форте» дополнительно нормализует уровень анкирина, инъекции «Фосфоглива» - количество паллидина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы, холестерина и сфингомиелина.

4. Использование «Фосфоглива» в условиях тетрахлорметанового токсического поражения печени нормализует в мембране эритроцитов представительность паллидина и белка полосы 4.1, «Фосфоглив Форте» дополнительно нормализует уровень свободных жирных кислот, тропомиозина и сорбционную емкость гликокаликса, «Фосфоглив» для инъекций - содержание всех липидов, |3-спектрина, белка полосы 4.5, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы и глутатион-8-трансферазы.

6. В условиях острой токсической индометациновой гепатопатии наиболее эффективно нормализует нарушения структурно-функциональных свойств эритроцитов инъекционная форма «Фосфоглива», а при токсическом тетрахлорметановом поражении печени - «Фосфоглив» для инъекций и «Фосфоглив Форте».

7. Для прогнозирования развития и оценки степени выраженности острого токсического поражения печени наиболее диагностически ценным является определение сорбционной способности эритроцитов и содержания в мембране (3-спектрина и триглицеридов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендовать применение «Фосфоглива» для инъекций для коррекции нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов при остром токсическом поражении печени.

2. Использовать для прогнозирования развития и оценки степени выраженности токсического поражения печени определение сорбционной способности эритроцитов и содержание в мембране (3-спектрина и триглицери-дов.

3. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о нарушениях структурно-функциональных свойств эритроцитов при экспериментальной острой токсической гепатопатии и способах их фармакологической коррекции с использованием «Фосфоглива» в различных лекарственных формах.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Белоконова, Оксана Николаевна

1. Аковбян, В.А. Изучение монооксигеназной ферментной системы печени с помощью антипиринового теста у больных псориазом / В.А. Аковбян, М.Э. Краковский, А.Х. Аширметов // Вестн. дерматологии и венерологии. 1986. - №9. - С.38-41.

2. Афанасьев, В.А. Окислительный и энергетический иммунный гомео-стаз (нарушение и коррекция): монография / В.А. Афанасьев, И.Л. Бровкина, H.A. Быстрова: под ред. Л.Г. Прокопенко, А.И. Лазарева, А.И. Конопли. Курск: КГМУ, 2003 - 336 с.

3. Бабак, О.Я. Первый клинический опыт применения эссенциале Н на Украине / О.Я. Бабак // Consilium Medicum. 2001. - Экстравып. - С. 11-14.

4. Белозерова, JI.A. Функциональное состояние эритроцитов при хроническом токсическом поражении печени: дис. . канд. биол. наук / JI.A. Белозерова. Ульяновск, 2005. - 169 с.

5. Буеверов, А.О. Место гепатопротекторов в лечении заболеваний печени / А.О. Буеверов // Болезни органов пищеварения. 2001. - Т.З, №1. - С.16-18.

6. Викторов, А.В. Влияние этанола и липополисахарида на сфингомие-линовый цикл в гепатоцитах крысы / А.В. Викторов, В.А. Юркив // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2008. - Т. 146, №12. - С.660-662.

7. Влияние водных извлечений из некоторых растений на процессы свободнорадикального окисления / М.А. Рыжикова, P.P. Фархутди-нов, С.В. Сибиряк, Ш.З. Загидуллин // Эксперим. и клинич. фармакология. 1999. - Т.62, № 2. - С. 36-38.

8. Гепатопротекторные и антиоксидантные свойства экстрактов лабазника вязолистного при экспериментальном токсическом гепатите / И.В. Шилова, Т.В. Жаворонок, И.И. Суслов и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2005. - Т. 142, №8. - С. 35-36

9. Гордиенко, А.Д. Гепатозащитное действие липофена нового комбинированного фосфолипидного препарата природного происхождения. / А.Д. Гордиенко // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2001. -Т. 64, №3,-С. 45-47.

10. Гублер, Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях / Е.В. Гублер, A.A. Генкин. -Л.: Медицина, 1973. 141 с.

11. Гундерманн, К. Новейшие данные о маханизмах действия и клинической эффективности эссенциальных фосфолипидов / К. Гундерман // Клинич. перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2002. - №2. - http: // www.mtu - net.ru/rmvesti.

12. Дашинамжилов, Ж.Б. Влияние фитосредства «Наркофит» на холере-тическую реакцию у белых крыс при экспериментальном гепатите / Ж.Б. Дашинамжилов // Эксперим. и клинич. фармакология. 2008. -Т.71, №3. - С.28-31.

13. Журавель, Е.В. Фосфолипидные препараты в гепатологии: реалии и перспективы / Е.В. Журавель, С.М. Дроговоз // Провизор. 1998. -№12. - http: // www. provisor.kharcov. ua (archive).

14. Земсков, A.M. Иммунокорригирующие препараты и их клиническое применение / A.M. Земсков, В.Г. Передерий, В.М. Земсков. Киев: Здоров'я, 1994.-239 с.

15. Земсков, В.М. Принципы дифференцированной иммунокоррекции/ В.М. Земсков, A.M. Земсков // Иммунология. 1996. - № 3. - С. 4-6.

16. Зинкин, В.Ю. Способ оценки кислородзависимого метаболизма нейтрофильных гранулоцитов человека / В.Ю. Зинкин, В.Г. Годков // Клиническая и лабораторная диагностика. 2004. - №2. - С.27-31.

17. Иванова, А.П. Формирование иммунного ответа и его коррекция при токсическом поражении печени различной этиологии: дис. . канд. мед. наук / А.П. Иванова. Курск, 1995 - 140 с.

18. Ивашкин, В.Т. Иммунный гомеостаз и иммунные заболевания печени / В.Т. Ивашкин // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, ко-лопроктологии. 2009. - T.XIX, №3. - С.4-12.

19. Ивашкин, В.Т. Механизмы иммунной толерантности и патологии печени / В.Т. Ивашкин // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2009. - T.XIX, №2. - С.8-13.

20. Ивашкин, В.Т. Основные понятия и положения фундаментальной иммунологии / В.Т. Ивашкин // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2008. - T.VIII, № 4. - С.4-13.

21. Ильиных, М.А. Влияние аутоиммунного и токсического поражения печени матери на структурно-функциональное становление поджелудочной железы ее потомства / М.А. Ильиных, Г.В. Брюхин // Известия Челябинского научного центра. 2006. - Т.4, №34. - С.34-38.

22. Иммунометаболические эффекты регуляторов энергетического обмена при нарушении гомеостаза / Г.А. Лазарева, И.Л. Бровкина, А.И. Лазарев и др.: под ред. Л.Г. Прокопенко. Курск, 2006 - 329 с.

23. Иммуномодулирующая активность различных форм «Фосфоглива» при экспериментальной токсической гепатопатии / H.A. Кедровская, А.И. Конопля, М.В. Покровский и др. // Аллергология и иммунология. 2009. - Т. 10, № 2. - С. 288.

24. Ипатова, О.М. Фосфоглив: механизм действия и применение в клинике / О.М. Ипатова. М., 2005. - 27 с.

25. Использование препарата «Урсосан» в лечении больных с гипомо-торной дисфункцией желчного пузыря / В.Т. Ивашкин С.А. Иноземцев, B.JI. Кузьмичев и др. // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатоло-гии, колопроктологии. 2004. - Т.14, № 1. - С. 41-46.

26. Карканица, JI.B. К вопросу о продукции колониестимулирующих факторов мононуклеарами периферической крови человека / Л.В. Карканица, М.Е. Комаровская // Иммунология. 1990. - №4. - С. 4648.

27. Каркищенко, H.H. Клиническая и экологическая фармакология в терминах и понятиях / H.H. Каркищенко. М.: 1МР-Медицина, 1995. - 304 с.

28. Климкина, Е.И. Влияние производных 3-оксипиридина на активность ферментов печени при токсическом гепатите / Е.И. Климкина, В.Е. Новиков, Л.Н. Чемодурова // Вестн. Смолен, мед. акад. 2004. -№3. - С. 18-19.

29. Климкина, Е.И. Экспериментальное изучение гепатопротекторных свойств антиоксидантов / Е.И. Климкина, В.Е. Новиков, Л.А. Ковалева // Методологтя и медико-психол. аспекты здорового образа жизни. Смоленск: Универсум, 2004. - С.34-38.

30. Клиническая иммунология и аллергология: пер. с нем. / под ред. Л. Йегера. М.: Медицина, 1990. - С. 527.

31. Конопля, А.И. Взаимосвязь структуры и функции эритроцитов с иммунным гомеостазом (материалы Актовой речи на заседании Ученого совета Курского государственного медицинского университета 9 февраля 2008 г.). Курск: КГМУ, 2008. - 40с.

32. Конопля, А.И. Взаимосвязь структуры и функции эритроцитов с иммунным гомеостазом / А.И. Конопля. Курск: КГМУ, 2008. - 40 с.

33. Конопля, А.И. Системная продукция цитокинов при развитии дисфункции миокарда у больных с циррозом печени / А.И. Конопля, С.А. Прибылов // Вестн. новых мед. технологий. 2006. - Т.13, №3. -С.72-74.

34. Конопля, А.И. Функциональные характеристики стимуляторов иммунного ответа, циркулирующих в крови при токсическом поражении печени / А.И. Конопля // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1982. -№5.-С.23-37.

35. Конопля, А.И. Эндогенные иммуномодуляторы как фактор сохранения гомеостаза при патологии печени: дис. . д-ра мед. наук / А.И. Конопля. Киев, 1989.-312 с.

36. Конопля, H.A. Эритроциты как иммуномодуляторы при токсических поражениях печени: дис. . канд. мед. наук / H.A. Конопля. -Курск, 1995. 170 с.

37. Лазарева, Г.А. Протекторное действие регуляторов энергетического обмена и эссенциале при нитритной интоксикации / Г.А. Лазарева, ИЛ. Бровкина // Патол. физиология и эксперим. терапия. 2006. -№2. - С.21-23.

38. Лив-52 новый взгляд на эффективность при острых и хроничских вирусных гепатитах у детей / В.Ф. Учайкин, Т.В. Чередниченко, Г.В. Чаплыгина, А.Г. Писарев // Детские инфекции. - 2003. - № 3. - С. 4144.

39. Лохеин новый препарат для лечения заболеваний печени / Э.И. Бе-лобородова, A.C. Саратиков, А.И. Венгеровский, A.A. Шаловай // Клинич. медицина. - 2000. - Т.78, № 6. - С. 56-57.

40. Маев, И.В. Заболевания желчевыводящих путей и печени: лечение препаратом гепабене / И.В. Маев, Е.Д. Саечникова // Фарматека. -2004.-№ 5.-С. 28-31.

41. Мальберг, К. Метод локального гемолиза / К. Мальберг, Э. Зигль // Иммунологические методы: пер. с нем. / под ред. Г. Фримеля. М.: Мир, 1987,- С. 57-72.

42. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. -14-е изд. М.: Новая Волна, 2002. - Т.1. - С. 506-510.

43. Медведев, А.Н. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза / А.Н. Медведев, В.В. Чаленко // Лаб дело. 1991. - № 2. - С. 19-20.

44. Мелатонин как фактор коррекции процессов свободнорадикального окисления при токсическом поражении печени крыс / С.С. Попов, А.Н. Пашков, Т.Н. Попова и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. -2007. Т.70, №1. - С.48-51.

45. Метаболическая корекция токсических и лекарственных иммунопа-тий / Л.Г. Прокопенко, E.H. Конопля, И.Л. Ласкова и др. Курск, 1997.- 199 с.

46. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова и др. //Лаб. дело. 1988. - №1. - С. 16-19.

47. Минушкин, О.Н. Некоторые гепатопротекторы в лечении заболеваний печени / О.Н. Минушкин // Лечащий врач. 2002. - № 6. - С. 5558.

48. Мирсаев, Т.Р. Изучение гепатопротекторной активности оксимети-лурацила в эксперименте / Т.Р. Мирсаев // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2007. - Т. 143, №5. - С. 508-510.

49. Михайлова, Е.В. Каталитические свойства NADP-зависимой малат-дегидрогеназы из печени крыс в норме и при экспериментальном токсическом гепатите / Е.В. Михайлова, O.A. Сафонова, Т.Н. Попова // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. 2009. - №3. - С.39-43.

50. Муравьева, H.H. Эффективность применения Лив-52 у детей группы риска по холелитиазу / H.H. Муравьева // Больница. 2001. - № 12. -С.11.

51. Никитин, И.Г. Гепатопротекторы: мифы и реальные возможности / И.Г. Никитин // Фарматека. 2007. - № 13. - С. 14-18.

52. Новые принципы оценки и коррекции иммунологических расстройств / A.M. Земсков, В.М. Земсков, И.Э. Есауленко и др. М.: «Триада X», 2008. - 336с.

53. Новый отечественный фосфолипидный препарат «Фосфоглив» как эффективное средство при лечении больных острыми вирусными гепатитами / В.Ф. Учайкин, В.И. Лучшев, С.Н. Жаров и др. // Клинич. медицина. 2000. - Т.78, № 5. - С. 39-42.

54. Обоснование применения эссенциальных фосфолипидов при хронических заболеваниях печени: динамика электрических и вязкоупру-гих параметров эритроцитов / С.А. Курилович, М.В. Кручинина,

55. A.A. Громов и др. // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2010. - №11. - С. 44-52.

56. Оковитый, C.B. Клиническая фармакология гепатопротекторов /C.B. Оковитый // ФАРМиндекс: ПРАКТИК. 2002. Вып. 3. - С. 33-58. -http: // pharmindex.ru/practic/3 hepat.html.

57. Опыт использования глицирризиновой кислоты в лечении пациентов с алкогольной болезнью печени / И.Г. Никитин, И.Е. Байкова, В.М. Волынкина и др. // Рос. журн. гастроэнтерологов. 2009. - №1. -С.53-58.

58. Печеночная недостаточность: современные проблемы лечения / С.П. Чикотеев, А.Н. Плеханов, Н.Г. Корнилов, А.И. Товаршинов // Терапевт. арх. 2003. - №12. - С.77-81.

59. Печень и иммунологическая реактивность / H.H. Алексеева, Т.М. Брызгина, С.И. Павлович, Н.В. Ильчевич. Киев: Наук. Думка, 1991. - 168 с.

60. Плеханов, А.Н. Гемодинамические и иммунологические критерии оценки функциональных резервных возможностей печени / А.Н. Плеханов, С.П. Чикотеев // Хирургия. 2006. - №8. - С.51 -53.

61. Подымова, С.Д. Оценка эффективности препарата гептрал у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени с синдромом внутрипеченочного холестаза / С.Д. Подымова, М.Ю. Надинская // Клинич. медицина. 1998. -Т.16, № 10. - С. 45-48.

62. Посохова, Е.А. Микросомальная ферментная система и патология печени / Е.А. Посохова // Эксперим. и клинич. фармакология. 1996. - Т.59, №4. -С.73-79.

63. Препараты растительного происхождения в лечении гепатита С /

64. B.Т. Ивашкин, М.А. Морозова, М.В. Маевская, Е.А. Федосьина // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. -2009. T.XIX, №3. - С.70-75.

65. Применение фосфолипидного гепатопротекторного препарата Фос-фоглив у больных Псориатическим артритом (предварительные результаты) / Т.В. Коротаева, E.J1. Насонов, О.М. Ипатова и др. // Научно-практическая ревматология. 2004. - № 3. - С. 40-45.

66. Про- и антиоксидантны в центральной лимфе при экспериментальном хроническом токсическом гепатите / Ю.И. Бородин, Ю.В. Баш-кирова, М.С. Любарский, М.А. Колпаков // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2008. - Т. 146, №11. - С.499-502.

67. Прокопенко, Л.Г. Иммунометаболические нарушения и их коррекция / Л.Г. Прокопенко, И.Л. Бровкина // Окислительный, энергетический и иммунный гомеостаз (нарушение и коррекция). Курск, 2003. -С. 13-34.

68. Прокопенко, Л.Г. Метаболическая иммуномодуляция / Л.Г. Прокопенко, А.И. Конопля. Курск: КГМУ, 2000. - 308 с.

69. Романова, Е.С. Поиск средств фармакологической коррекции нарушений иммунного гомеостаза при сочетанном воздействии гепато-тропных агентов и постоянного магнитного поля: дис. . канд. мед. наук / Е.С. Романова. Курск, 2006. - 138 с.

70. Скакун, Н.П. Клиническая фармакология гепатопротекторов / Н.П. Скакун, В.В. Шманько, Л.М. Охримович. Тернополь: Збруч, 1995. -272 с.

71. Спрыгин, В.Г. Влияние комплексного полифенольного препарата «Калифен» на процессы восстановления биохимических показателей печени после поражения этиловым спиртом / В.Г. Спрыгин, Н.Ф.

72. Кушнерова // Вопр. биолог., мед. и фармацевт, химии. 2002. - №4. -С.22-26.

73. Стальная, И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии / под ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.

74. Структурно-функциональные свойства эритроцитов в норме и при патологии / А.И. Конопля, Л.Г. Прокопенко, С.А. Долгарева и др. -Курск : Изд-во КГМУ, 2011. 199 с.

75. Сюткин, В.Е. Сочетанная инфекция вирусами гепатита и вирусами-сателлитами / В.Е. Сюткин // Гепатология. 2004. - № 1. -С. 4-11.

76. Теоретические и практические аспекты применения глицирризина / Г.И. Сторожаков, И.Е. Байкова, И.Г. Никитин и др. // Клинич. перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2003. - № 1. - С.35-39.

77. Тибирькова, Е.В. Антиоксидантные и мембранопротекторные свойства тролокса / Е.В. Тибирькова, В.А. Косолапов, A.A. Спасов // Экс-перим. и клинич. фармакология. 2009. - Т.72, №2. - С.47-50.

78. Топорков, A.C. Алгоритм диагностики и лечения токсических и алкогольных поражений печени / A.C. Топорков // Русский медицинский журнал. 2004. - № 7. - С. 47-53.

79. Топорков, A.C. Алгоритм диагностики и лечения токсических и алкогольных поражений печени /A.C. Топорков // Русский медицинский журнал. 2004. - №7. - С.47-53.

80. Учайкин, В.Ф. Применение фосфоглива при острых и хронических вирусных гепатитах у детей / В.Ф. Учайкин, О.Б. Ковалев // Детские инфекции.-2006.-№1,-С. 38-42.

81. Участие лимфатической системы в регуляции окислительного го-меостаза у крыс при хроническом токсическом поражении печени /

82. М.А. Колпаков, Ю.В. Башкирова, С.М. Тарабукина, М.С. Любарский // Вестник НГУ. Серия: Биология, клиническая медицина. 2006. -Т. 4, №2. - С. 64-68.

83. Ушкалова, Е.А. Проблемы применения гепатопротекторов / Е.А. Ушкалова // Фарматека. 2004. - № 4. - С. 45-55.

84. Фосфоглив: механизм действия и эффективность применения в клинике / А.И. Арчаков, А.П. Сельцовский, В.И. Лисов и др. // Вопр. мед. химии. 2002. - Т.48. - С. 139-151.

85. Храмцова, Ю.С. Роль B-лимфоцитов в регуляции репаративной регенерации печени / Ю.С. Храмцова, Б.Г. Юшков, К.А. Озорникова // Медицинская иммунология. 2007. - Т.9, №2-3. - С. 169-170.

86. Шарипов, К.О. Роль органических производных селена в регуляции антиокислительных процессов в печени при экспериментальном токсическом гепатите / К.О. Шарипов // Вопр. биол. мед. и фармацевт, химии. 2002. - №3. - С.41-44.

87. Широкова, E.H. Хофитол в терапии неалкогольного стеатогепатита / E.H. Широкова, B.C. Ешану, В.Т. Ивашкин // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2004. - Т. 14, № 2. - С. 7477.

88. Шишкина, Л.Н. Липиды эритроцитов крови и их функциональная активность / Л.Н. Шишкина, О.Г. Шевченко // Успехи современной биологии. 2010. - Т. 130, №6. - С. 587-602.

89. Шульпекова, Ю.О. Неалкогольная жировая болезнь печени: патогенез, диагностика, лечение / Ю.О. Шульпекова // Фарматека. 2007. -№ 6. - С.48-53.

90. Шульпекова, Ю.О. Флавоноиды расторопши пятнистой в лечении заболеваний печени / Ю.О. Шульпекова // Рус. мед. журн. 2004. -Т.12, №5. - С. 248-250.

91. Шульпекова, Ю.О. Эссенциальные фосфолипиды в лечении заболеваний печени / Ю.О. Шульпекова // Рус. мед. журн. 2003. - Т. 11, №5. - С.300-301.

92. Эффективность различных гепатопротекторов при печеночной энцефалопатии / О.В. Любшина, В.Е. Гречко, А.Л. Верткин, И.В. Маев // Клинич. медицина. 1999. -Т.77, №10. - С. 17-20.

93. Юшков, Б.Г. Влияние имумномодуляторов на регенерацию печени / В.Г. Юшков, И.Г. Данилова Ю.С. Храмцов // Эксперим. и клинич. фармакология. 2006. - Т.69, №1. - С.53-55.

94. Яковенко, Э.П. Гептрал в лечении внутрипеченочного холестаза / Э.П. Яковенко, П.Я. Григорьев // Рос. журн. гастроэнтерологии, ге-патологии, колопроктологии. 2002. - Т.12, №1. - С. 84-87.

95. Яковенко, Э.П. Хронические заболевания печени: диагностика и лечение / Э.П. Яковенко, П.Я. Григорьев // Рус. мед. журн. 2003. -Т.11, №5. - С.291-296.

96. A case of severe recurrent hepatitis with common variable immunodeficiency / K. Fukushima, Y. Ueno, H. Kanegane et al. // Hepatol. Res. -2008. Vol. 38, №4. - P. 415-420.

97. A decrease in AFP level related to administration of interferon in patients with chronic hepatitis C and a high level of AFP / S. Murashima, M. Tanaka, M. Haramaki et al // Dig Dis. Sei. 2006. - Vol.51, №4. - P.808-812.

98. A survey of Chinese herbal ingredients with liver protection activities / R. Wang, J. Kong, D. Wang et al. // Chin. Med. 2007. - №10. - P.2-5.

99. Abittan, Ch. Alcohol liver disease / Ch. Abittan, C.S. Lieber // Clin. Percpect. Gastroenterol. 1999. - №. 7 - P. 257-263.

100. Amantadine therapy for chronic hepatitis C / J.P. Smith, T.R. Riley, A. Devenyi et al. // J Gen Intern Med. 2004. - Vol. 19. - P.662-668.

101. Bashir, R. BioMEMS: state-of-the-art in detection, opportunities and prospects / R. Bashir // Adv Drug Deliv Rev. 2004. - Vol.56. - P. 15651586.

102. Beil, W. Effects of flavonoids on parietal cell acid secretion, gastric mucosal prostaglandin production and Helicobacter pylori growth / W. Beil, C. Birkholz, K.F. Sewing // Arzneimittelforschung. 1995. - Vol.45. -P.697-700.

103. Beneficial effect of hyperbaric oxygenation on liver regeneration in cirrhosis / M. Ozdogan, E. Ersoy, K. Dundar et al. //J. Surg. Res. 2005. -№1. - P.76-79.

104. Beutler, E. How do red cell enzymes age a new perspective / E. Beutler // Brit. J. Haemat. 1985. - V. 61.-P. 377-384.

105. Bioavailability study of glycyrrhetic acid after oral administration of glycyrrhizin in rats; relevance to the intestinal bacterial hydrolysis. / S. Takeda, K. Ishthara, Y. Wakui et al. // J. Pharm. Pharmacol. 1996. -Vol. 48. - P.902-905.

106. Biochemical and histological effects of 26 weeks of glycyrrhizin treatment in chronic hepatitis C: a randomized phase II trial / H. Orient, B.E. Hansen, M. Willems et al. // J. Hepatol. 2006. - Vol.45, №4. - P.539-546.

107. Bovine inter-leukin-12 and modulation of IFN gamma production / R. Collins, C. Howard, S. Duggan, D. Werling // Vet Immunol Immuno-pathol.- 1999.-Vol. 68. P. 193-207.

108. Calderon, R.O. Lipid composition and phospho-lipid asymmetry of membrane from Schwann cell line / R.O. Calderon, G.H. deVries // J. Neuro-sci. Res. 1997. - Vol.49. - P.372-380.

109. Cholesterol lowering properties of a complex compound simvastatin with glycyrrhizic acid (simvaglyzin) in experimental models / V.A. Vavilin, N.F. Salakhutdinov, Iul Ragino et al. // Biomed. Khim. 2008. - Vol.54, №3. - P.301-313.

110. Cuendet, M. The role of cyclooxygenase and lipoxygenase in cancer chemoprevention / M. Cuendet, M. Pezzuto // Drug metabol. Drug interact. 2000. - № 17. - P. 109-157.

111. Cytochrome P450 II D6 specific effector CD8 T-cell immune responses miiTor disease activity in autoimmune hepatitis type 2 / M.S. Longhi, M.J. Hussain, D.P. Bogdanos et al. // Hepatology. - 2007. - Vol.46. - P.472-484.

112. Dhiman, R.K. Herbal medicines for liver diseases / R.K. Dhiman, Y.K. Chawla // Dig. Dis. Sei. 2005. - Vol.50, №10. - P. 1807-1812.

113. Dodge, G.T. The preparation and chemical characteristics of hemoglobin free ghosts of human eryrhrocytes / G.T. Dodge, C. Mitchell, D.J. Hana-han // Arch. Biochem. Biophys. 1963. - V. 100.-P. 119-130.

114. Effect of interferon-gamma on hepatic fibrosis in chronic hepatitis B virus infection: a randomized controlled study / H.L. Weng, B.E. Wang, J.D. Jia et al. // Clin. Gastroenterol. Hepatol. 2005. - Vol. 3, №8. - P.819-828.

115. Effect of the extracts from Glycyrrhiza uralensis Fisch on the growth characteristics of human cell lines: Anti-tumor and immune activation activities / W.T. Chung, S.H. Lee, J.D. Kim et al. // Cytotechnology. 2001. -Vol.37, №l.-P.55-64.

116. Effects of 18alpha-glycyrrhizin on the pharmacodynamics and pharmacokinetics of glibenclamide in alloxan-induced diabetic rats / Y. Ao, J.

117. Chen, J. Yue, R.X. Peng // Eur. J. Pharmacol. 2008. - Vol.587, №1-3. -P.330-225.

118. Fairbanks, G. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane / G. Fairbanks, T. Steele // Biochemistry. -1971.-V. 10.-P. 2606-2616.

119. Girish, C. Drug development for liver diseases: focus on picroliv, ellagic acid and curcumin / C. Girish, S.C. Pradhan // Fundam. Clin. Pharmacol. 2008. - Vol.22, № 6. - P.623-632.

120. Glycyrrhetinic acid as inhibitor or amplifier of permeability transition in rat heart mitochondria / V. Battaglia, A.M. Brunati, C. Fiore et al. // Bio-chim. Biophys. Acta. 2008. - Vol. 1778, №1. -P.313-323.

121. Glycyrrhizic acid suppresses type 2 11-P-hydroxy steroid dehydrogenase expression in vivo / T. Tanahashi, T. Mune, H. Morita et al. // J. Steroid Biochem Mol Biol. 2002. - Vol.80. - P.441-447.

122. Glycyrrhizin and its metabolite inhibit Smad3-mediated type 1 collagen gene transcription and suppress experimental murine liver fibrosis / T. Moro, Y. Shimoyama, M. Kushida et al. // Life Sci. 2008. - Vol.83, №15-16.-P.531-539.

123. Glycyrrhizin as a potential treatment for chronic hepatitis C. / T.G.J, van Rossum, A.G. Vulto, R.A. De Man et al. // Aliment Pharmacol Ther. -1998. -№12.-P. 199-205.

124. Glycyrrhizin attenuates endotoxin- induced acute liver injury after partial hepatectomy in rats / B. Tang, H. Qiao, F. Meng, X. Sun // Braz. J. Med. Biol. Res. 2007. - Vol.40, №12. - P.1637-1646.

125. Glycyrrhizin enhances interleukin-12 production in peritoneal macrophages / J.H. Dai, Y. Iwatani, T. Ishida et al. // Immunology. 2001. -Vol.103.-P.235-243.

126. Glycyrrhizin prevents of lipopolysaccharide/D-galactosamine-induced liver injury through down-regulation of matrix metalloproteinase-9 in mice / K. Abe, T. Ikeda, K. Wake et al. // J. Pharm. Pharmacol. 2008. -Vol.60, №l.-P.91-97.

127. Hepatic protection by glycyrrhizin and inhibition of iNOS expression in concanavalin A-indused liver injury in mice / N. Tsuruoka, K. Abe, K. Wake et al. // Inflamm. Res. 2009. - Vol.58. - P.593-599.

128. Hepatic stimulator substance administration ameliorates liver regeneration in an animal model of fulminant hepatic failure and encephalopathy / A.P. Margeli, L. Papadimitriou, S. Nicos et al. // Liver Int. 2003. - Vol. 23, № 3. - P.171-178.

129. Hepatoprotective and anti-hepatocarcinogenic effects of glycyrrhizin and matrine / X.Y. Wan, M. Luo, X.D. Li, P.He // Chem. Biol. Interact. -2009.-Vol. 181, №1. P.15-19.

130. Hepatoprotective effects of 18-ß-glycyrrhetinic acid on carbon tetrachlo-ride-induced liver injury: inhibition of cytochrome P450 2E1 expression / H.G. Jeong, H.J. You, S.J. Park et al. // Pharmacol. Res. 2002. - Vol. 46. - P.221-227.

131. Hepatoprotective effects of marine and kuhuang in liver transplant recipients / X. Xu, Q. Ling, F. Gao et al. // Am. J. Chin. Med. 2009. - Vol.37, №1. - P.27-34.

132. Herbal product use by persons enrolled in the hepatitis C Antiviral Long-Term Treatment Against Cirrhosis (HALT-C) Trial / L.B. Seeff, T.M. Curto, G. Szabo et al. // Hepatologv. 2008. - Vol. 47, №2. - P. 605-612.

133. Hulbert, A.J. The acyl composition of mammalian phospholipids: an al-lometric analysis / A.J. Hulbert, T. Rana, P. Couture // Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2002. - Vol. 132. - P.515-527.

134. Identification of OATP1B3 as a high-affinity hepatocellular transporter of paclitaxel / N.F. Smith, M.R. Acharya, N. Desai et al. // Cancer Biol. Ther. 2005. - Vol.4, №8. - P.815-818.

135. In vivo glycyrrhizin accelerates liver regeneration and rapidly lowers serum transaminase activities in 70% partially hepatectomized rats / M. Ki-mura, T. Moro, H. Motegi et al. // Eur J. Pharmacol. 2008. - Vol.579, №1-3. - P.357-364.

136. Inhibitory effect of glycyrrhizin on lipopolysaccharide and d-galactosamine-induced mouse liver injury / T. Yoshida, K. Abe, T. Ikeda et al. // Eur. J. Pharmacol. 2007. - Vol. 576, №1-3. -P.l36-142.

137. Kalaiarasi, P. Antihyperglycemic effect of 18 beta-glycyrrhetinic acid, aglycone of glycyrrhizin, on streptozotocin-diabetic rats / P. Kalaiarasi, K.V. Pugalendi // Eur. J. Pharmacol. 2009. - Vol. 606, №1-3. - P.269-273.

138. Kidd, P. A review of the bioavailability and clinical efficacy of milk thistle phytosome: a silybin-phosphatidylcholine complex (syliphos) / P. Kidd, K. Head // Alternative medicine review. 2005. - Vol. 10, №3. -P. 193-203.

139. Kumada, H. Long term treatment of chronic hepatitis C with glycyrrhizin (SNMC) for preventing liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma / H. Kumada // Oncologv. 2002. - Vol. 62 (suppl. 1). - P.94-100.

140. Laemli, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterophage T4 / U.K. Laemli // Nature. 1970. - V. 227. - P. 680.

141. Lipoprotein lipase expression, serum lipid and tissue lipid deposition in orally-administered glycyrrhizic acid-treated rats / W.Y. Lim, Y.Y. Chia, S.Y. Liong et al. // Lipids. Health. Dis. 2009. - №29. - P.8-31.

142. Long-term follow-up of alpha-interferon treatment of patients with chronic hepatitis B / M. van Zonneveld, P. Honkoop, B.E. Hansen et al. // Hepatology. -2004. Vol. 39. -P.804-810.

143. Luper, S. A review of plants used in the treatment of liver diseases: part 1. / S. Luper // Altern. Med. Rev. 1998. - Vol.3. - P.410-421.

144. Muriel, P Beneficial drugs for liver diseases / P. Muriel, Y. Rivera-Espinoza // J. Appl. Toxicol. 2008. - Vol.28, №2. - P.93-103.

145. Nanovectors for anticancer agents based on superparamagnetic iron oxide nanoparticles / L. Douziech-Eryrolles, H. Marchais, K. Herve et al. // Int. J. Nanomedicine. 2007. - № 2. - P. 541-550.

146. Neuregulin-1P and Neuregulin-1 a Differentially Affect the Migration and Invasion of Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumor Cells / J.M. Eckert, S.J. Byer, B.J. Clodfelder-Miller, S.L. Carroll // Glia. 2009. - Vol. 57, № 14.-P. 1501-1520.

147. Novel formulations of a liver protection drug glycyrrhizin / K. Koga, S. Kawashima, N. Shibata, K. Takada // Yakugaku Zasshi. 2007. - Vol. 127, №7.-P.l 103-1114.

148. Novel polyion complex micelles for liver-targeted delivery of diammoni-um glycyrrhizinate: in vitro and in vivo characterization / K.W. Yang, X.R. Li, Z.L. Yang et al. // J. Biomed. Mater. Res. A. 2009. - Vol.88, №1. - P.140-148.

149. Optimization of static magnetic field homogeneity in the human and animal brain in vivo / K.M. Koch, D.L. Rothman, R.A. de Graaf et al. // Prog .Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 2009. - Vol. 54, № 2. - P. 69-96.

150. Optimized high gradient magnetic separation for isolation of Plasmodium-infected red blood cells / S.C. Bhakdi, A. Ottinger, S. Somsri et al. // Malar J. 2010.-№ 9. - P. 38.

151. Oxidative stress and autonomic nervous system functions in restless legs syndrome / M.A. Cikrikcioglu, M. Hursitoglu, H. Erkal et al. // Eur. J. Clin. Invest. 2011. - 10.1111/j.1365-2362.2010.02461.x. Epub ahead of print. PMID.

152. Oxidative stress and inducible nitric oxide synthase induction in carcinogenesis / F. Farinati, M. Piciocchi, E. Lavezzo et al. // Dig. Dis. 2010. -Vol. 28, № 4-5. - P. 579-584.

153. Paradhan, S.C. Hepatoprotective herbal drug, silymarin from experimental pharmacology to clinical medicine / S.C. Paradhan, Girisn C. // Indian J. Med. Res. 2006. - P.491 -504.

154. Pariente, A. Treatment of chronic hepatitis C with interferon alpha and ribavirin. Results in "real life" / A. Pariente, A. Djilloul, J.F. Cadranel // Gastroenterol Clin Biol. 2003. - Vol.27. - P.590-595.

155. Pharmacokinetics of glycyrrhizin in normal and albumin-deficient rats / K. Koga, M. Tomoyama, K. Ohyanagi, K. Takada // Biopharm. Drug. Dispos. 2008. - Vol. 29, №7. - P.373-381.

156. Polyphenols: food sources and bioavailability / C. Manach, A. Scalbert, C. Morand et al. // Am J Clin Nutr. 2004. - Vol.79. - P.727-747.

157. Preparation and evaluation of N-caproyl chitosan nanoparticles surface modified with glycyrrhizin for hepatocyte targeting / A. Lin, J. Chen, Y. Liu et al. // Drug. Dev. Ind. Pharm. 2009. - Vol.35, №11. - P.1348-1355.

158. Prevention of free fatty acid-induced hepatic lipotoxicity by 18beta-glycyrrhetinic acid through lysosomal and mitochondrial pathways / X. Wu, L. Zhang, E. Gurley et al. // Hepatology. 2008. - Vol. 47, №6. -P.1905-1915.

159. Protection by glycyrrhizin against warm ischemia-reperfusion-induced cellular injury and derangement of the microcirculatory blood flow in the rat liver / A. Mabuchi, K. Wake, M. Marlini et al. // Microcirculation. -2009.-№4.-P.364-376.

160. Protective Effect of L-Carnitine and Coenzyme Q10 on CCl(4)-Induced Liver Injury in Rats / S.A. Ali, L. Faddah, A. Abdel-Baky, A. Bayoumi // Sei Pharm.-2010.-Vol. 23, №4.-P. 881-896.

161. Protective effect of Liv.52 on Na/K- ATPase activity in paracetamol-induced hepatotoxicity / S.K. Rala, S. Gopumadhavan, M.V. Venkata-ranganna et al. // Medicine Update. 2002. - № 10. - P. 53-56.

162. Protective mechanism of glycyrrhizin on acute liver injury induced by carbon tetrachloride in mice / C.H. Lee, S.W. Park, Y.S. Kim et al. // Biol. Pharm. Bull. 2007. - Vol.30, № 10. - P. 1898-1904.

163. Pulsed Electromagnetic Field Stimulates Cellular Proliferation in Human Intervertebral Disc Cells / H.-Mo Lee, Un-Hye Kwon, H. Kim et al. // Yonsei Med J. 2010. - Vol. 51, № 6. - P. 954-959.

164. Quantitative intracellular magnetic nanoparticle uptake measured by live cell magnetophoresis / Y. Jing, N. Mai, P.S. Williams et al. // FASEB J. -2008. Vol. 22, № 12. - P. 4239-^247.

165. Radio frequency magnetic field effects on a radical recombination reaction: a diagnostic test for the radical pair mechanism / K.B. Henbest, P. Kukura, C.T. Rodgers et al // J. Am. Chem. Soc. 2004. - Vol. 126. - P. 8102-8103.

166. Rahman, S Chemopreventive activity of glycyrrhizin on lead acetate mediated hepatic oxidative stress and its hyperproliferative activity in Wistar / S. Rahman, S. Sultana // Chem. Biol. Interact. 2006. - Vol. 160, № 1. -P. 61-69.

167. Rapid synthesis and turnover of brain microsomal ether phospho-lipids in the adult rat / T.A. Rosenberger, J. Oki, A.D. Purdon et al. // J. Lipid. Res. -2002. Vol.43.-P.59-68.

168. Recent advances in plant hepatoprotectives: a chemical and biological profile of some important leads / A.S. Negi, J.K. Kumar, S. Luqman et al. // Med. Res. Rev. 2008. - Vol.28, № 5. - P.746-772.

169. Reduction therapy of alanine aminotransferase levels prevent HCC development in patients with HCV-associated cirrhosis / Y. Rino, K. Tarao, S. Morinaga et al. // Anticancer Res. 2006. - Vol. 26, №3B. - P.2221-2226.

170. Role of Cortical Cell Type and Morphology in Sub- and Suprathreshold Uniform Electric Field Stimulation / Th. Radman, R.L. Ramos, J.C. Brumberg et al. // Brain Stimul. 2009. - Vol. 2, № 4. - P. 215-228.

171. Scott, L.J. Interferon-alpha-2b plus ribavirin: a review of its use in the management of chronic hepatitis C / L.J. Scott, C.M. Perry // Drugs. -2002,-Vol.62.-P.507-556.

172. Solov'yov, I.A. Magnetic field effects in Arabidopsis thaliana crypto-chrome-1 / I.A. Solov'yov, D.E. Chandler, K. Schulten // Biophys. J. -2007. Vol. 92. - P. 2711-2726.

173. Song, H.U. Prevention of hepatocellular carcinoma / H.U. Song, S.G. Hwang // Korean. J. Gastroenterol. 2007. - Vol.49, №4. - P. 201-208.

174. Static Magnetic Field Therapy: A Critical Review of Treatment Parameters / A.P. Colbert, H. Wahbeh, N. Harling et al. // Evid. Based. Complement Alternat Med. 2009. - Vol. 6, № 2. - P. 133-139.

175. Swanson, J. Biophysical mechanisms: a component in the weight of evidence for health effects of power-frequency electric and magnetic fields / J. Swanson, L. Kheifets // Radiat. Res. 2006. - Vol. 165. - P. 470-478.

176. Systems toxicology used in nanotoxicology: mechanistic insights into the hepatotoxicity of nano-copper particles from toxicogenomics / B. Yang, Q. Wang, R. Lei et al. // J. Nanosci. Nanotechnol. 2010. - Vol. 10, № 12.-P. 8527-8537.

177. Targeted magnetic iron oxide nanoparticles for tumor imaging and therapy / X.-Hong Peng, X. Qian, H. Mao et al. // Int. J. Nanomedicine. 2008. -Vol. 3,№3.-P. 311-321.

178. The disposition of diammonium glycyrrhizinate and glycyrrhetinic acid in the isolated perfused rat intestine and liver / J. Yang, L. Zhou, J. Wang et al. // Planta. Med. 2008. - Vol.74, №11. - P. 1351-1356.

179. The inhibition of apoptosis by glycyrrhizin in hepatic injury induced by injection of lipopolysaccharide / D-galactosamine in mice / T. Ikeda, K. Abe, N. Kuroda et al. // Arch. Histol. Cytol. 2008. - Vol. 71, № 3. - P. 163-178.

180. The reduced form of coenzyme Q10 mediates distinct effects on cholesterol metabolism at the transcriptional and metabolite level in SAMP1 mice / C. Schmelzer, J.G. Okun, D. Haas et al. / IUBMB Life. 2010. -Vol. 62, № 11.-P. 812-818.

181. The use of diammonium glycyrrhizinate in the treatment of hepatic dysfunction in burn patients / H.H. Jin, G.P. Zheng, W.R. Chen et al // Zhonghua Shao Shang Za Zhi. 2005. - Vol.21, №5. - P.353-355.f)

182. The use of selected nutrition supplements and complementary and alternative medicine in liver disease / A.J. Hanje, B. Fortune, M. Song et al. // Nutr. Clin. Pract. 2006. - Vol.21, №3. - P.255-272.

183. Therapeutic effect of diammonium glycyrrhizinate lipid ligand on carbon-tetrarchloride induced fatty livers in rats / L.G. Lu, H.J. Xu, Y.J. Wang et al. // Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 2005. - Vol.13, №10. - P.786-788.

184. Tripathi, M. Glycyrrhizic acid modulates t-BHP induced apoptosis in primary rat hepatocytes / M. Tripathi, B.K. Singh, P. Kakkar // Food. Chem. Toxicol. 2009. - Vol. 47, №2. - P.339-347.

185. Zaporozhan, V. Mechanisms of Geomagnetic Field Influence on Gene Expression Using Influenza as a Model System: Basics of Physical Epidemiology / V. Zaporozhan, A. Ponomarenko // Int. J Environ Res Public Health. 2010. - Vol. 7, № 3. - P. 938-965.

186. Zeng, C.X. A comparison of the distribution of two glycyrrhizic acid epi-mers in rat tissues / C.X. Zeng, Q. Yang, Q. Hu // Eur. J. Drug. Metab. Pharmacokinet. 2006. - Vol. 31, №4. - P.253-258.

Оглавление диссертации Белоконова, Оксана Николаевна :: 2012 :: Курск

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Белоконова, Оксана Николаевна, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Белоконова, Оксана Николаевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций