Автореферат и диссертация по медицине (14.01.21) на тему:Эффективность аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток в лечении пациентов с миелодиспластическим синдромом

005011460

Рудницкая Юлия Валентиновна

ЭФФЕКТИВНОСТЬ АЛЛОГЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ЛЕЧЕНИИ ПАЦИЕНТОВ С МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ

14.01.21 - гематология и переливание крови

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 МАР 2072

Санкт-Петербург 2012

005011460

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П.Павлова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации».

Научный руководитель - доктор медицинских наук, профессор

Борис Владимирович Афанасьев Официальные оппоненты:

профессор, доктор медицинских наук Андрей Юрьевич Зарицкий

профессор, доктор медицинских наук Александр Николаевич Богданов

Ведущее учреждение: ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздравсоцразвития России

Защита состоится «12» марта 2012 г. в 13 часов на заседании диссертационного совета Д.208.090.01. при Санкт-Петербургском государственном медицинском университете им. акад. И.П.Павлова (197022, Санкт-Петербург, ул. Л.Толстого, 6/8) в зале заседаний Ученого совета.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета.

Автореферат разослан «07» февраля 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Т.В.Антонова.

Актуальность темы. Миелодиспластический синдром - группа клональных заболеваний, которые возникают на уровне кроветворной стволовой клетки, вследствие генетических и/или эпигенетических изменений и характеризуются признаками дисплазии клеток костного мозга, неэффективным кроветворением, повышенным риском трансформации в острый лейкоз (Афанасьев Б.В., 1985, Алмазов В.А., Зарицкий А.Ю., 1992, Warlic E.D., 2007, Bacher U., Zander A.R, 2010). Это патология старшей возрастной группы: около 80% случаев миелодиспластического синдрома приходится на лиц старше 60 лет (Beraasconi С., 2003, Абдулкадыров K.M.,

В настоящее время лечение миелодиспластического синдрома вышло за рамки наилучшей поддерживающей терапии: заместительные гемотрансфузии, ростовые факторы, проводившейся с целью облегчения симптомов. По результатам исследований общая выживаемость пациентов, получающих только поддерживающую терапию достаточно низка и существенно отличается в различных группах в зависимости от варианта заболевания в соответствии с классификацией ВОЗ (медиана выживаемости пациентов с диагнозом рефрактерная анемия - 63 месяца, рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами -77 месяцев, рефрактерная цитопения с мультилинейной дисплазией - 86 месяцев, рефрактерная анемия с избытком бластов-1 -27 месяцев, рефрактерная анемия с избытком бластов-Н -15 месяцев) (Nôsslinger Th. et al., 2001). При лечении пациентов с миелодиспластическим синдромом малыми дозами цитазинарабинозида медиана ОВ находится в пределах 15 месяцев (Cheson B.D. et al., 1986). Общая 5-летняя выживаемость пациентов, получивших высокодозную химиотерапию, составляет - 7% (Kantaijian H. et al., 2006). По результатам исследования Кохно А.В. и соавт. - при лечении циклоспорином А трансформация исходной рефрактерной анемии в рефрактерную анемию с избытком бластов произошла в 31% случаев, исходной рефрактерной анемии с избытком бластов в острые миелобластный лейкозы — в 34% (Савченко В.Г. и соавт., 2002, Кохно А.В. и соавт., 2010). Терапия новым

2006).

классом препаратов эпигенетического действия - гипометилирующими препаратами сопровождается достоверным увеличением частоты гематологических ответов (30% против 7% при поддерживающей терапии; р<0.001). Однако, между группами больных, которые получали лечение гипометилирующими препаратами и поддерживающую терапию, не выявляется достоверного различия в длительности периода до трансформации в острый миелобластный лейкоз (Kantaijian H. et al., 2006; Грицаев C.B. и соавт., 2008, Steensma D.P. et al., 2009, Fenaux P. et al., 2010). Интенсификация лечения с помощью аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток также не дала обнадеживающих результатов, общая выживаемость пациентов равна 25%, частота рецидивов основного заболевания - более 65% (De Witte T. et al., 1997; Kroger N., 2006). Единственным радикальным методом лечения миелодиспластического синдрома является аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток крови (аллоТГСК). (Афанасьев Б.В. и соавт., 2002, Абдулкадыров К.М., 2006, Alessandrino Е.Р. et al., 2008; Kroger N., 2008, Cutler С. et al., 2010; Field T. et al., 2010). Однако, применение аллоТГСК может быть ограничено из-за возраста пациентов, тяжелой сопутствующей патологии, отсутствия HLA-совместимого донора. Кроме того, проведение аллоТГСК сопряжено с высокой летальностью, которая зависит от развития таких осложнений как неприживление/отторжение трансплантата, реакции «трансплантат против хозяина», токсических и инфекционных осложнений (Chang С.К. et al., 2007; Cutler С. et al., 2010). Выбор оптимального режима кондиционирования может иметь принципиальное влияние на результаты аллоТГСК. Режимы кондиционирования со сниженной интенсивностью доз привлекают наличием меньшей токсичности по сравнению с миелоаблативными режимами кондиционирования, однако более часто приводят к рецидиву основного заболевания у значительного количества пациентов. Так, по данным разных авторов частота рецидивов заболевания у пациентов, перенесших миелоаблативный режим кондиционирования, в среднем составляет 27%, а у перенесших режим кондиционирования со

сниженной интенсивностью доз - 45% (Martino R. et al., 2006, Kindwall-Keller T. et al., 2009). Также на результаты аллоТГСК большое влияние оказывают: прогностический индекс по шкале IPSS и MD Anderson Risk Model Score (Greenberg P., 1997; Garcia-Manero G. et al., 2008), количество гемотрансфузий и связанная с ними перегрузка железом (Armand P. et al., 2011), степень «предлеченности» (Kröger N., 2008, Lee J-H. et al., 2010), варианты цитогенетических поломок (Jurado M. et al., 2002; Tiu R.V. et al., 2011). Анализ этих факторов и групп риска, к которым относится пациент - чрезвычайно важны для определения прогноза лечения. Таким образом, несмотря на возможность использования различных методов лечения, выбор терапии при миелодиспластическом синдроме остается одним из наиболее сложных вопросов и требует проведения дальнейших исследований.

Цель работы: Оценить эффективность аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток с использованием различных режимов кондиционирования и источников трансплантата у пациентов с миелодиспластическим синдромом.

Задачи исследования:

1. Изучить влияние факторов прогноза, типа донора, варианта источника и клеточности трансплантата, степени гистосовместимости по HLA системе на результаты аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с миелодиспластическим синдромом.

2. Сравнить эффективность миелоаблативных режимов кондиционирования и режимов кондиционирования со сниженной интенсивностью доз при трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с миелодиспластическим синдромом.

3. Выявить частоту возникновения острой и хронической реакции «трансплантат-против-хозяина» в зависимости от варианта режима кондиционирования, типа донора, источника трансплантата и степени гистосовместимости по HLA системе.

4. Изучить факторы, оказывающие влияние на отторжение трансплантата при использовании различных режимов кондиционирования и источников трансплантата.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток эффективна и позволяет увеличить общую выживаемость пациентов с миелодиспластическим синдромом группы промежуточного и высокого риска, при этом общая выживаемость пациентов при неродственной аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток не отличается от общей выживаемости при родственной аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток и не зависит от источника трансплантата (костный мозг или периферические стволовые клетки крови). Общая выживаемость пациентов после аллогенной трансплантации выше при использовании гемопоэтических стволовых клеток от донора - мужчины.

2. При миелодиспластическом синдроме миелоаблативные режимы кондиционирования имеют большую эффективность по сравнению с режимами кондиционирования со сниженной интенсивностью доз ввиду большей вероятности развития рецидива заболевания после трансплантации с вариантом режима кондиционирования со сниженной интенсивностью доз. Общая выживаемость пациентов после аллогенной трансплантации с применением режима кондиционирования со сниженной интенсивностью доз выше при использовании метотрексата в профилактике острой реакции «трансплантат против хозяина». Острая реакция «трансплантат против хозяина» тяжелой (Ш-1У) степени развивается чаще при применении миелоаблативных режимов кондиционирования по сравнению с режимами кондиционирования со сниженной интенсивностью доз.

3. Возраст пациента (старше 50 лет) и неблагоприятный кариотип являются факторами, снижающими общую выживаемость пациентов после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

4. Общая выживаемость пациентов зависит от содержания в трансплантате СВ34+ клеток. Этот фактор, в отличие от костного мозга, имеет большее значение при применении в качестве трансплантата периферических стволовых клеток крови.

5. Частота отторжения трансплантата зависит от содержания СОЭ4+ клеток и источника трансплантата: у пациентов, получивших периферические стволовые клетки крови, кумулятивная частота отторжения достоверно ниже, чем у пациентов, получивших костный мозг.

Научная новизна. Впервые на большой группе пациентов с миелодиспластическим синдромом промежуточного и высокого риска проведен сравнительный анализ миелоаблативных режимов кондиционирования и режимов кондиционирования со сниженной интенсивностью доз перед аллогенной трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток. Установлено, что режимы профилактики острой реакции «трансплантат против хозяина», содержащие метотрексат, существенно повышают общую выживаемость пациентов при проведении трансплантации с режимом кондиционирования со сниженной интенсивностью доз. Получены новые данные по влиянию возраста пациентов, неблагоприятного кариотипа и низкой клеточности трансплантата на результаты аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Практическая значимость исследования. Миелодиспластический синдром из-за разнообразия клинических проявлений, трудностей в диагностике и лечении является одной из самых сложных нозологических форм в гематологии. В настоящее время аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток - единственный способ излечения пациентов с миелодиспластическим синдромом. Факторы прогноза заболевания и профилактика осложнений раннего и позднего периодов после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток имеют решающее значение для повышения эффективности лечения. Определение оптимального варианта режима кондиционирования для каждой группы пациентов, способов профилактики острой «реакции трансплантат против хозяина», источника

трансплантата позволит увеличить общую и безрецидивную выживаемость, снизить смертность, связанную с трансплантацией и рецидивами заболевания.

Внедрение результатов исследования: Основные положения диссертации внедрены в практическую и научно-исследовательскую работу в отделение химиотерапии для онкологических и гематологических больных (с трансплантацией костного мозга) ГБУЗ «Городской клинической больницы №31», онкогематологические отделения, включая отделение трансплантации костного мозга, ГБУЗ «Ленинградской областной клинической больницы».

Структура работы: Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 4 глав, описывающих собственные исследования, обсуждения полученных результатов и выводов, списка литературы. Работа изложена на 117 страницах машинописного текста. Текст иллюстрирован 9 таблицами, 41 рисунком. Библиографический указатель включает 117 литературных источников, из них 111 - зарубежных авторов.

Апробация и реализация работы: Основные теоретические и практические положения диссертации представлены в постерных докладах на XXXVI и XXXVII ежегодных симпозиумах Европейской группы по трансплантации крови и костного мозга (Вена 2010, Париж 2011); IV международном симпозиуме, посвященном памяти Р.М.Горбачевой "Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей и взрослых" (Санкт-Петербург, 2010). 11 Международном симпозиуме по миелодиспластическому синдрому (Эдинбург 2011). По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованном ВАК РФ.

Выражаем глубокую благодарность профессору А.Р. Цандеру, профессору Н. Крегеру, доктору Т.С. Забелиной за помощь в подготовке диссертационной работы.

Методы исследования и характеристика пациентов. Алло-ТГСК проведены в период с 2005 по 2011 годы. Исследование выполнялось на базе кафедры гематологии, трансфузиологии и трансплантологии Санкт-

Петербургского государственного медицинского университета им акад. И.П. Павлова при сотрудничестве с отделением трансплантации костного мозга Университетского Медицинского Центра Гамбург - Эппендорф, Гамбург, Германия.

Проанализированы 70 больных в возрасте от 18 до 73 лет (медиана возраста 53 года), 39 мужчин и 31 женщина, страдающие миелодиспластическим синдромом (МДС) и хроническим миеломоноцитарным лейкозом (ХММЛ). Согласно классификации ВОЗ пациенты с диагнозом рефрактерная анемия (РА) составили - 4,3% (п=3), рефрактерной анемией с кольцевыми сидеробластами (РАКС) - 5,7% (п=4), рефрактерной цитопенией с мультилинейной дисплазией (РЦМД) - 7,1% (п=5), рефрактерной цитопенией с мультилинейной дисплазией с кольцевыми сидеробластами (РЦМД-КС)- 2,9% (п=2), рефрактерной анемией с избытком бластов-1 (РАИБ- 1) - 17,1% (п=12), рефрактерной анемией с избытком бластов-Н (РАИБ- II) - 42,9% (п=30), МДС неклассифицируемым - 1,4% (п=1) и хроническим миеломоноцитарным лейкозом - 18,6% (п=13). По Международной прогностической классификации МДС 30% (п=21) относились к группе промежуточного-1 риска, 32% (п=23) к группе промежуточного-2 риска, 19% (п=13) к группе высокого риска. Остальные пациенты (п=13) имели диагноз ХММЛ.

В зависимости от варианта кариотипа сформировано три группы пациентов: группа с благоприятным прогнозом - 62% (п=43), включающая нормальный кариотип, del20q, 1Ц23, с промежуточным прогнозом - 6% (п=4): трисомия 8, трисомия 9, 1(3;3)^21^26), с неблагоприятным прогнозом- 32% (п=23): комплексные нарушения кариотипа и аномалии 7 хромосомы.

У четырех пациентов была проведена повторная аллоТГСК в связи с рецидивом основного заболевания. Родственная аллоТГСК проведена у 23% пациентов (п=16), неродственная аллоТГСК - у 77% (п=54). В качестве источника трансплантата костный мозг (КМ) использовали только у 13% пациентов (п=9). Периферические стволовые клетки крови (ПСКК),

полученные методом аппаратного лейкафереза после мобилизации с помощью колониестимулирующих факторов, получили 87% пациентов (п=61).

От совместимых по десяти локусам доноров (полная совместимость) было проведено 47 аллоТГСК (67%), от частично несовместимых доноров (несовместимость в гене или аллеле) - 23 аллоТГСК (33%).

Режимы кондиционирования и профилактика острой реакции «трансплантат против хозяина» (оРТПХ). Выбор режима кондиционирования и дозировку препаратов осуществляли в зависимости от возраста, предшествующей терапии и общего состояния больного. Большая часть пациентов перенесли режим кондиционирования со сниженной интенсивностью доз (РКСИД) - 55 человек (79%), миелоаблативный режим кондиционирования (МАК) получили 15 человек (21%). Преобладали флюдарабинсодержащие режимы кондиционирования (таблица 1).

Таблица 1.

Варианты режимов кондиционирования у пациентов с МДС

Режим кондиционирования МАК, n(%) РКСИД, n (%)

Busulfan(Bu)+Cyclophosphamide(Cph) (Bu 12,8 мг/кг Вв или 16 мг/кг Вн + Cph 120 мг/кг) 10 (66) -

Treosulfan(Treo)+Fludarabine(FIu) (Treo 36 г/м2 + Flu 150 мг/м2) 2(13,5) -

FLAMSA_BuFlu (Bu 11,2 мг/кг Вв + Flu 120-180 мг/м2 + Amsacrine 400 мг/м2 + Cytarabine 8000 мг/м2) 2(13,5) -

Bu+Flu (Bu 11,2 мг/кг Вв + Flu 180 мг/м2) 1(7) -

Bu+Melphalan(Melph) (Bu 8 мг/кг Вн + Melph 140 мг/м2) - 1(2)

Bu+Flu (Bu 6,4 мг/кг Вв или 8 мг/кг Вн + Flu 150 мг/м2) - 15 (27)

Treo+Flu (Тгео 30 г/м2 + Flu 150 мг/м2) - 1(2)

FLAMSA_BuFlu (Bu 6,4/8 мг/кг Вв/Вн + Flu 120-180 мг/м2 + Amsacrine 400 мг/м2 + Cytarabine 8000 мг/м2) - 35 (63)

FLAMSA_TotaI body irradiation(TBI)Cytarabin (TBI 4 Гр + Cph 120 мг/кг+ Amsacrine 400 мг/м2 + Cytarabine 8000 мг/м2) 1(2)

Thyotepa+Flu (Thyotepa 15 мг/кг + Flu 150 мг/м2) - 1(2)

Flu+Melph (Flu 150 мг/м2 + Melph 140 мг/м2) - 1(2)

Среди пациентов, получивших МАК было 10 женщин (67%) и 5 мужчин (33%), медиана возраста пациентов составила 46 лет (18-67), из них возраст меньше 50 лет был у 8 человек (53%), больше 50 - у 7 (47%). 7 человек (47%) имели благоприятный вариант кариотипа, 2 (13%) - промежуточный, 6 (40%) -неблагоприятный. В качестве источника трансплантата КМ использовали у 1 человека (7%), ПСКК - у 14 человек (93%). Родственная аллоТГСК была проведена у 2 пациентов (13%), неродственная - у 13 (87%), при этом донор был полностью совместим по системе НЬА в 20% (п=3), частично совместим в 80% (п=12). Донор и реципиент совпадали по полу в 60% (п=9), донор женщина, реципиент мужчина были в 7% (п=1), донор мужчина, реципиент женщина - в 33% (п=5).

В группе пациентов, получивших РКСИД, было 34 мужчины (62%) и 21 (38%) женщина, медиана возраста составила 54 года (18-37), возраст меньше 50 лет был у 18 человек (33%), больше 50 лет - у 37 (67%). 67% пациентов (п=37) имели благоприятный вариант кариотипа, 4% (п=2) - промежуточный, 29% (п=16)- неблагоприятный. АллоТГСК от родственного донора была проведена у 14 пациентов (25%), от неродственного донора у 41 пациента (75%), от НЬА полностью совместимого донора - у 20 пациентов (36%), от НЬА частично совместимого донора 35 (84%). В качестве источника трансплантата КМ использовали у 8 пациентов (15%), ПСКК у 47 пациентов (85%). Донор и реципиент совпадали по полу в 58% (п=32), донор женщина, реципиент мужчина были в 16% (п=8), донор мужчина, реципиент женщина - в 26% (п=14).

Профилактику оРТПХ у большинства пациентов проводили циклоспорином А (ЦСА) (91%, п=63) в дозе 3-5 мг/кг с дня -1 в комбинации с метотрексатом (10 мг/м2 Д+1, +3, +6) или микофенолат мофетилом (ММФ), либо такролимусом (9%, п=6) в дозе 0,03 мг/кг с дня -1 перед аллоТГСК в комбинации с ММФ или метотрексатом. В случае аллоТГСК от неродственного донора использовали, антилимфоцитарный глобулин (АТГ) в дозе 60-80 мг/кг или алемтузумаб 40 мг (при повторной аллоТГСК). Метотрексат в режиме

профилактики оРТПХ получили 21 человек (30%, п=70). В группе пациентов, получивших МАК (п=15) режим профилактики оРТПХ содержал метотрексат у 10 человек (67%). У пациентов, получивших РКСИД (п=55), режим профилактики оРТПХ содержал такролимус у 12 человек (22%).

До алло-ТГСК у 6 пациентов из 70 (9%) была проведена иммуносупрессивная терапия (ЦСА, глюкокортикоиды или АТГ), у 20 человек (29%)- химиотерапия или терапия гипометилирующими препаратами. Терапию гипометилирующими препаратами получили 7 человек (10%), 5 женщин и 2 мужчин, медиана возраста составила 53 года (22-72). 5 человек имели диагноз РАИБ-П, 1- РЦМД, 1- XMMJI. У 4 пациентов были комплексные нарушения кариотипа, у 2 пациентов - моносомия 7 хромосомы, нормальный кариотип был у 1 человека. При этом децитабин получали 4 человека, 5-азацитидин — 3 человека. Количество курсов препаратов в среднем было 4 (1-7). В последующем 5 пациентов перенесли неродственную аллоТГСК, 2 -родственную аллоТГСК. 5 пациентов получили РКСИД и 2 - МАК.

Для оценки стадии заболевания, определения присутствия минимальной остаточной болезни, контроля донорского химеризма у реципиентов в посттрансплантационном периоде применяли морфологические, молекулярно-биологические, иммунологические, цитогенетические методы исследования.

Для анализа полученных данных использовали методы статистики согласно общепринятым правилам и международным рекомендациям. Анализ общей выживаемости (ОВ) проводили по методу Каплан-Майер, используя log - rank тест для оценки достоверности различий. Регрессионный анализ Кокса использовался для оценки основных факторов, влияющих на выживаемость и вероятность рецидива основного заболевания у пациентов после аллоТГСК. Факторы, имеющие статистическую достоверность р< 0.1 в унивариантном анализе, включались в многофакторную регрессионную модель. Непараметрические показатели сравнивали с помощью U-теста Манна-Уитни и точного критерия Фишера. Статистически достоверными считали различия при значениях < 0.05. Обработку результатов проводили с использованием

стандартного пакета статистических программ Excel® 10.0, Microsoft, Inc., 2002; Statistica© 7.0,10,0, StatSoft и SPSS 17.

Результаты собственных исследований. При анализе полученных данных оценены отдалённые результаты аллоТГСК у пациентов с МДС в зависимости от особенностей донора и реципиента, режимов кондиционирования, развития острой и хронической РТПХ (хрРТПХ).

1. Эффективность аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с миелодиспластическим синдромом в зависимости от факторов, связанных с характеристиками доноров и реципиентов. Сроки ОВ пациентов после аллоТГСК составили 16-1842 дня. Медиана ОВ достигнута не была. Общая 5-летняя выживаемость в группе пациентов с МДС после аллоТГСК составила 53% (п=70). Бессобытийная выживаемость (БСВ) пациентов была равна 47% (п=70) (16-1842 дня). Пятилетняя ОВ в зависимости от диагноза оценена в четырех группах пациентов: РАИБ-I (п=12), РАИБ-П (n=30), XMMJ1 (п=13) и другие варианты МДС (п=15). Не было получено достоверных различий среди пациентов с диагнозами РАИБ-I, РАИБ-Н и другими вариантами МДС, ОВ составила 54%, 55% и 55%, соответственно. В группе пациентов с диагнозом XMMJI ОВ составила 45%, р=0.9.

При унивариантном анализе 5-летней ОВ не выявлено различия в следующих группах сравнения:

В группе пациентов, перенесших родственную аллоТГСК, 5-летняя ОВ составила 62% (п=16), в группе аллоТГСК от неродственного донора - 50% (п=54), р=0.8.

Пятилетняя ОВ в группе пациентов перенесших аллоТГСК от полностью совместимого по системе HLA донора была 58% (п=47), в группе пациентов с частичной совместимостью - 43% (п=23), р=0.2.

В группе пациентов, получивших КМ или ПСКК в качестве источника трансплантата, ОВ составила - 52% и 53% (п=9 и п=61, соответственно, р=0.6).

При сравнении ОВ в зависимости от возраста показано, что ОВ была несколько выше у пациентов моложе 50 лет - 67% (п=26) против 42% (п=44) у пациентов старше 50 лет (р=0.1).

В группе пациентов с неблагоприятным и благоприятным кариотипами 5-летняя ОВ составила 43% (п=23) и 57% (п=43), соответственно (р=0.3).

ОВ пациентов с количеством бластов в костном мозге до аллоТГСК менее 10% составила 56% (п=38), более 10% - 49% (п=32), р=0.7. Отсутствие статистически значимой разницы в двух исследованных группах может быть связано с тем, что все пациенты на момент начала лечения по совокупности факторов относились к высокому или промежуточному риску МДС по Международной прогностической классификации.

Пятилетняя ОВ пациентов с трансфузионным анамнезом и возрастом меньше 50 лет была 77% против ОВ пациентов с трансфузионным анамнезом старше 50 лет - 37% (р=0.2). При сравнении 5-летняя ОВ пациентов в возрасте до 50 лет, получивших химиотерапию в период предшествующий аллоТГСК, составила 75%, тогда, как показатель ОВ у пациентов, получивших химиотерапию в возрасте старше 50 лет, составил 37% (р=0.6).

При совпадении по группе крови ОВ была равна 56% (п=29), при малой несовместимости - 34% (п=15), в группе пациентов, где донор и реципиент имели большую несовместимость по группе крови - 62% (п=26) (р=0.2).

При сравнении показателей ОВ при совпадении/несовпадении донора и реципиента по полу достоверно лучшие результаты были получены в группе, где донором был мужчина, а реципиентом женщина - 77% (п=19), (р=0.04), при этом различий в группах, где донором была женщина, а реципиентом мужчина и совпадающих по полу не было - 45% (п=9) и 45% (п=41), соответственно.

Пятилетняя ОВ после аллоТГСК в группе пациентов, получивших терапию гипометилирующими (децитабин, 5-азацитидин) препаратами, составила 72% (п=7). Терапия не сопровождалась тяжелыми побочными явлениями и позволила достичь стабилизации основного заболевания (отсутствие признаков прогрессии заболевания) у 5 пациентов или

гематологическое улучшение (уменьшение зависимости от гемотрансфузий) у 2 пациентов.

В зависимости от клеточности трансплантата проанализированы результаты аллоТГСК у 69 пациентов. Клеточность трансплантата по СО 34+ не была оценена у 1 пациента (аллоТГСК от 2006 года). В группе пациентов, получивших трансплантат с СБ34+ более 3.0 х 106/кг, ОВ была выше, чем у пациентов, получивших трансплантат с клеточностью С034+ менее 3.0 х 106/кг - 56% (п=61) и 30% (п=8), соответственно, р=0.15. У пациентов, получивших в качестве источника трансплантата ПСКК, ОВ в группе аллоТГСК с трансплантатом высокой клеточности составила 56% (п=58), в группе с трансплантатом низкой клеточности летальность в течение года была 100% (п=3), р=0.04. Медиана приживления трансплантата по лейкоцитам составила 11 дней (7 - 26) при использовании трансплантата высокой клеточности и 17 дней (11 - 22) в случае использования трансплантата низкой клеточности, р=0.0005.

При мультифакторном анализе вышеуказанных параметров статистически достоверно была выявлена корреляция с неблагоприятным кариотипом - р=0.05 (Ш1 1.8 (СІ 95% 0.98-3.32)). Показатели ОВ были выше при количестве СБ34+ в трансплантате больше 3.0х10б/кг - р=0.04 (Ш10.75 (СІ 95% 0.62-0.92)).

2. Эффективность аллоТГСК в зависимости от варианта режима кондиционирования. При сравнении результатов аллоТГСК с применением МАК и аллоТГСК с РКСИД - лучшие показатели ОВ были получены в группе пациентов, получивших МАК (80%, п=15), тогда как в группе пациентов с РКСИД ОВ составила 45% (п=55), р=0.08. Статистически достоверно показано, что показатели ОВ выше в группе пациентов получивших МАК при неродственной аллоТГСК - 85% (п=13) против 40% при РКСИД (п=41), р=0.03. Ввиду малого количества пациентов, у которых использовался МАК при родственной аллоТГСК (п=2), эта группа не анализировалась статистически.

Среди пациентов, получивших РКСИД при родственной аллоТГСК ОВ составила 60% (п=14), р=0.9.

Ввиду недостаточного количества пациентов, получивших МАК и трансплантат с низкой клеточностью (п=1), эта группа не анализировалась статистически. Пятилетняя ОВ у пациентов, получивших МАК и трансплантат с клеточностью СБ34+ более 3,0 х 106/кг, составила 86% (п=14) и была выше, чем у пациентов с РКСИД и трансплантатом с высокой клеточностью (п=48) -34% (р=0.04). При этом 5-летняя ОВ у пациентов, получивших РКСИД и трансплантат высокой клеточности, была 48% (п=48), а у пациентов, получивших РКСИД и трансплантат низкой клеточности - 34% (п=7), р=0.4. Медиана приживления трансплантата по лейкоцитам при МАК составила 15 дней (10 - 26), при РКСИД - 11 дней (7 - 22).

При мультифакторном анализе ухудшение показателей ОВ у пациентов с МДС статистически достоверно коррелировало с вариантом режима кондиционирования (РКСИД) - р=0.05 (ЯЛ 3.5 (СІ 95% 0.97-12.7)). При этом, профилактика оРТПХ оказала существенное влияние на ОВ пациентов при РКСИД, ОВ составила 70% (п=12) и 38%(п=43) (р=0.06) при использовании/не использовании метотрексата, соответственно. При МАК ОВ была равна 80% (п=10 и п=5, соответственно) (Рис.1).

го р-.-—.-.-.-.-.-.-■-.-

о,

4 <ЦМАК без метотрексата 80% а^" 1 ¿ЛАК с метотрексатом+80%

0,7 & і-і-.-.-1-,—к 'к

* ^ РКСИД с метотрексатом 70 'о

і 0,6 4 к

0,2 0,1

0,0 Ь-----------

0 365 730 1095 1460 1В25 2190

Время, дни

Рисунок 1. Общая выживаемость пациентов в зависимости от варианта режима кондиционирования и профилактики оРТПХ (при использовании/не использовании метотрексата) (п=70)

К л—МАК без метотрексата 80%

МАК с метоірексатом~80%

РКСИД с метотрексатом 70 р-0.06

р=0.05

рксид без метотрексата 38%

При сравнении результатов аллоТГСК в группе пациентов с диагнозом РАИБ-И не было получено статистически достоверного различия. Общая выживаемость пациентов, перенесших МАК и РКСИД была 67% (п=6) и 50% (п=24), соответственно (р=0.6).

3. Осложнения и причины смерти пациентов с МДС после алло ТГСК при различных вариантах режимов кондиционирования.

Среди осложнений аллоТГСК в исследовании рассматривались основные: развитие острой или хронической, отторжение трансплантата. Частота развития оРТПХ тяжелой (Ш-1У) степени составила 12% (п=55) при использовании РКСИД и 33% (п=15) при МАК (р=0.07). Не учитывались пациенты, перенесшие первичное отторжение или неприживление трансплантата В группе пациентов, получивших родственную, полностью совместимую по системе НЬА аллоТГСК частота оРТПХ Ш-1У ст составила 27%. В группе неродственной аллоТГСК частота оРТПХ тяжелой степени существенно не отличалась в случае использования полностью или частично совместимого по системе НЬА донора (12 и 14%, соответственно, р=пб).

Кумулятивная частота развития хрРТПХ распространенной формы была 23% (п=15) у пациентов, перенесших МАК и 32% (п=55) у пациентов с РКСИД, ограниченная форма хрРТПХ встречалась у 8 и 21%, соответственно, р=ш. При использовании в качестве источника трансплантата костного мозга кумулятивная частота хрРТПХ составила 28% (п=9). В группе пациентов, получивших в качестве источника трансплантата ПСКК, частота развития хрРТПХ была 61% (п=49) при неродственной и 43% (п=12) при родственной аллоТГСК, р=пв.

В группе пациентов, получивших РКСИД, кумулятивная частота первичного отторжения трансплантата составила 6% (п=55), в группе пациентов с МАК отторжений трансплантата отмечено не было. (р=0.3). При анализе кумулятивной частоты отторжения трансплантата в зависимости от типа донора достоверных различий получено не было - 4% (п=54) при неродственной аллоТГСК против 6% (п=16) при родственной аллоТГСК, р=0.6.

При анализе частоты отторжения в зависимости от клеточности трансплантата, частота отторжения была ниже в группе пациентов, получивших трансплантат с высокой клеточностью (более 3.0 х 106 С034+/кг) и составила 2% (п=61) против 24% (п=8) в группе пациентов с трансплантатом с низкой клеточностью, р=0.004. При исследовании частоты отторжения в зависимости от источника трансплантата у пациентов, получивших ПСКК кумулятивная частота отторжения была достоверно меньше, чем у пациентов, получивших КМ- 2% (п=61) против 22% (п=9), соответственно, р=0.005.

Из всей рассматриваемой группы структуру смертности проанализировали у 30 пациентов (43%). В качестве основных причин смертности у 10 пациентов (33%) установили инфекционные осложнения различной этиологии и локализации (грибковой этиологии - 2 пациента, бактериальной этиологии - 8 пациентов), в том числе на фоне тяжелой о/хрРТПХ (3 пациента) или первичного отторжения трансплантата у 1 пациента. В 8 случаях (27%) причиной смерти явился рецидив заболевания, в 3-х случаях (10%) - геморрагические осложнения (острое нарушение мозгового кровообращения по геморрагическому типу (2 пациента), легочное кровотечение- (1 пациент). 2 пациента (7%) погибли от тромботической тромбоцитопенической пурпуры (ТТП). Тяжелая о/хрРТПХ явились непосредственными причинами смерти у 23% (7 пациентов). При этом причинами смерти пациентов, получивших МАК были ТТП у 1 пациента и о/хр РТПХ у 2х пациентов. Из 27 умерших пациентов, получивших РКСИД, причиной смерти 30% пациентов (п=8) стал рецидив основного заболевания, 37% (п=10) - инфекционные осложнения, 18% (п=5) - о/хрРТПХ, 11% (п=3) -геморрагические осложнения и 4% (п=1) - ТТП.

В исследуемой группе пациентов не было отмечено различия в смертности, связанной с трансплантацией, в периоде до Д+100 при использовании МАК и РКСИД - 23% (п=15) и 22% (п=55) , соответственно, Р=пб. Показатели смертности, связанной с трансплантацией, были несколько хуже у пациентов старшей возрастной группы, даже, несмотря на

использование РКСИД (41% против 11% в группе пациентов моложе 50 лет, перенесших МАК, р=0.2).

При этом не было отмечено достоверного различия в смертности, связанной с трансплантацией в зависимости от типа донора: 40% (п=16) при родственной аллоТГСК, 34% (п=54) при неродственной аллоТГСК, р=П5.

Смертность, связанная с трансплантацией, была достоверно выше в группе пациентов, получивших трансплантат низкой клеточности - 70% (п=8) при менее 3.0 х 10б/кг против 30% (п=61) в группе с высокой клеточностью, р=0.05.

При мультифакторном анализе с увеличением смертности, связанной с трансплантацией, статистически достоверно была выявлена корреляция с возрастом пациента р=0.05 (ЯЛ 2.51 (С195% 0.85-7.36)) и количеством СИ34+ в трансплантате меньше 3.0х106/кг - р=0.05 (ЯЯ 1.04 (С195% 1.0-1.09)).

4. Частота рецидивов основного заболевания у пациентов с МДС в посттрансплантационном периоде. В исследуемой группе пациентов была проанализирована кумулятивная частота рецидивов основного заболевания после аллоТГСК. При унивариантном анализе вероятность рецидива была несколько выше в группе пациентов с неблагоприятным кариотипом - 37% (п=23) против 17% (п=43) в группе пациентов с благоприятным кариотипом, р=0.1.

Кумулятивная частота рецидивов отличалась в зависимости от варианта режима кондиционирования (33% (п=55) при РКСИД и 7% (п=15) при МАК, р=0.1). При этом в группе пациентов, перенесших РКСИД, кумулятивная частота рецидивов составила 47% (п=16) при неблагоприятном кариотипе и 19% (п=37) при благоприятном кариотипе, р=0.2. В группе пациентов, перенесших МАК с неблагоприятным кариотипом, кумулятивная частота рецидивов составила 18% (п=7), тогда как в группе пациентов с благоприятным кариотипом, перенесших МАК рецидивов не было (п=6), р=0.2.

Не наблюдали рецидивов заболевания в группе пациентов с благоприятным кариотипом, перенесших родственную аллоТГСК (п=6). У

пациентов, перенесших родственную аллоТГСК и имеющих неблагоприятный кариотип, кумулятивная частота рецидивов составила 27% (п=10). Частота рецидивов заболевания у пациентов после неродственной аллоТГСК с неблагоприятным и благоприятным кариотипом составила 45% (п=13) и 24% (п=37), соответственно(р=ш)

При сравнении кумулятивной частоты рецидивов в зависимости от источника трансплантата получены следующие данные: не было рецидивов заболевания у пациентов, получивших в качестве источника трансплантата КМ, тогда как в группе пациентов, получивших ПСКК, частота рецидивов составила 28% (п=61) (р=0.2).

При мультифакторном анализе с увеличением вероятности рецидива заболевания в посттрансплантационном периоде статистически достоверно была выявлена корреляция с вариантом режима кондиционирования (РКСИД) -р=0.05 (РЖ. 7.2 (СІ 95% 0.81-64.6)) и с неблагоприятным кариотипом - р=0.01 (Ш16.2 (С1 95% 1.5-28.8)).

Выводы:

1.Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток -эффективный метод лечения пациентов с миелодиспластическим синдромом, пяти-летняя общая выживаемость составила 53%, безрецидивная выживаемость -43%.

2.При миелодиспластическом синдроме миелоаблативные режимы кондиционирования имеют большую эффективность по сравнению с режимами кондиционирования со сниженной интенсивностью доз: показатели общей выживаемости у пациентов с миелодиспластическим синдромом составили 80% и 45%, соответственно (р=0.08), при трансплантации от неродственного донора 85% и 40%, соответственно (р=0.03), от родственного донора - 60% при режимах кондиционирования со сниженной интенсивностью доз.

3.Возраст пациента (старше 50 лет) и неблагоприятный кариотип являются факторами, снижающими общую выживаемость пациентов после аллогенной трансплантации гемопоэтических клеток (р=0.05 и р=0.04,

соответственно). При этом общая выживаемость пациентов при неродственной аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток не отличается от общей выживаемости при родственной аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток и не зависит от источника трансплантата (костный мозг или периферические стволовые клетки крови).

4.При сравнении показателей общей выживаемости при совпадении/ несовпадении донора и реципиента по полу общая выживаемость достоверно выше в группе, где донором был мужчина, а реципиентом женщина - 77% (р=0.04), общая выживаемость в группах донор женщина - реципиент мужчина и совпадающих по полу была одинакова и составила 45%.

5.Общая выживаемость пациентов зависит от содержания в трансплантате СЭ34+ клеток (менее/более 3.0 х 106 СБ34+/кг). Показатели общей выживаемости выше при количестве СЭ34+ в трансплантате более 3.0х106/кг (р=0.04). Этот фактор в отличие от костного мозга имеет большее значение при применении трансплантата периферических стволовых клеток крови (р=0.04).

6. Применение метотрексата в профилактике острой реакции «трансплантат против хозяина» увеличивает общую выживаемость пациентов после аллогенной трансплантации с применением режима кондиционирования со сниженной интенсивностью доз (с/без метотрексата - 70% и 38%, соответственно, р=0,06), при этом острая реакция «трансплантат против хозяина» тяжелой (1Н-1У) степени развивается чаще при миелоаблативных режимах кондиционирования по сравнению с режимами кондиционирования со сниженной интенсивностью доз и составляет 33% и 12% , соответственно (р=0.07).

7.Вероятность рецидива заболевания после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток выше при проведении режимов кондиционирования со сниженной интенсивностью доз (р=0.05) и неблагоприятном кариотипе (р=0.01).

8.Частота отторжения трансплантата зависит от содержания СБ34+ клеток и источника трансплантата. Кумулятивная частота отторжения ниже у пациентов, получивших трансплантат с высокой клеточностью (более 3.0 х 106 СБ34+/кг) и составляет 2% по сравнению с 24% в группе пациентов с трансплантатом с низкой клеточностью (менее З.ОхЮ6 СБ34+/кг), р=0.004. При использовании периферических стволовых клеток крови в качестве источника трансплантата кумулятивная частота отторжения достоверно меньше, чем у пациентов, получивших костный мозг- 2% и 22%, соответственно (р=0.005).

Практические рекомендации. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток является методом выбора у пациентов с миелодиспластическим синдромом высокого риска. При отсутствии противопоказаний целесообразно проведение миелоаблативного режима кондиционирования. Для увеличения общей выживаемости пациентов при режимах кондиционирования со сниженной интенсивностью доз необходимо проведение профилактики оРТПХ, содержащей метотрексат. Использование трансплантата с высокой клеточностью (более З.ОхЮ6 СБ34+/кг) улучшает результаты аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Дарская Е.И., Бондаренко С.Н., Эстрина М.А., Бабенко Е.В., Смирнова А.Г., Станкевич Ю.А., Рудницкая Ю.В., Афанасьев Б.В. Роль трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток в лечении пациентов множественной миеломой // Вестник гематологии. -2009. Т. V, N3.- С.12-15

2. Дарская £. И., Алексеев С. М., Рудницкая Ю. В., Бабенко Е. В., Эстрина М. А., Афанасьев Б. В. Роль трансплантации аутологичных стволовых гемопоэтических клеток в терапии пациентов, страдающих множественной миеломой. Обзор литературы и результаты работы одного центра // Клиническая онкогематология. - 2010. Т. 3, №1. - С. 14-20.

3. Rudnitskaya Y., Morozova E., Afanasyev B. Decitabine for treatment of relapsed myelodysplasia syndrome after allogeneic stem cell transplantation. // Cellular Therapy and Transplantation (CTT). -2009. -Vol. 2, No. 5

4. Ivanova M., Morozova E., Vasilieva Y., Rudnitskaya Y., Nabiev R., Zubarovskaya L., Afanasyev B. Iron overload: causes, assessment methods, significance in transplantation setting and therapeutically approaches. // Cellular Therapy and Transplantation (CTT). - 2009. - Vol. 1, No. 3

5. Рудницкая Ю.В., Васильева Ю.В., Казанцев И.В., Ширяев С.Н., Морозова E.B. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток с использованием режима кондиционирования со сниженной интенсивностью у пациентов с миелодиспластическим синдромом. // Вестник гематологии. — 2010. T. VI, N2,- С.79

6. Rudnitskaya Y., Morozova E.,.Zalyalov Y., Kazantsev I., Afanasyev B. Allogenic hematopoietic stem cell transplantation with reduced-intensity conditioning in patients with myelodysplastic syndrome. // Bone marrow Transplantation. - 2010. Vol 25, S406

7. Rudnitskaya Y., Morozova E., Afanasyev B. Successful second allogenic stem cell transplantation from the same donor after alemtuzumab containing reduced-intensity conditioning regimen in patient with myelodysplastic syndrome after previous graft rejection. // Bone marrow Transplantation. -2010.- Vol. 25, Supp.2, S407

8. Rudnitskaya Y., Morozova E., Zalyalov Y., Kostorov V., Zubarovskaya L., Afanasyev B. Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation with reduced-intensity conditioning in patients with myelodysplastic syndrome. // Cellular Therapy and Transplantation (CTT). - 2010. Vol. 3, No. 9

9. Mamaev N., Morozova E., Gindina T., Rudnitskaya Y., Afanasyev B. Dacogen and allogeneic bone marrow transplantation in the treatment of high-risk myelodysplastic syndromes with non-random chromosome abnormalities. // Leukemia Research. - 2011. - Vol. 35, S72 (184)

Подписано в печать 06.02.12 Формат 60x84'Дб Цифровая Печ. л. 1.31 Уч.-изд.л. 1.31 Тираж 100 Заказ 03/02 печать

Отпечатано в типографии «Фалкон Принт» (197101, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Пушкарская, д. 54, офис 2)