Автореферат и диссертация по медицине (14.00.33) на тему:Демографические процессы в Западном регионе УССР

'■Э

ч • 1*»

5 9 3 9 0'

ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИИ АКАДЕМИИ НАУК БЕЛОРУССКОЙ ССР

" " • На правах рукописи - -- "-

и

ВИСМОНТ Франтишек Иванович

Центральные нейрохимические механизмы терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке

14.00.17 — Нормальная физиология

Автореферат на соискание учено» степени доктора медицинских наук

Минск - 1989

Работа выполнена в Минском ордена Трудового Красного Знамени государственном медицинском институте и Институте физиологии Академии наук БССР.

Научный консультант — доктор медицинских наук,

профессор, член-корреспондент АН БССР Гурин В. Н.

доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент АН и АМН СССР Медведев В. И.; доктор биологических наук, профессор Манухин Б. Н.; доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент АН БССР Аринчин Н. И.

Ведущая организация — Научно-исследовательский институт нормальной физиологии им. П. К. Анохина АМН СССР.

Защита диссертации состоится « Ж » . ¿/-^УА . 19$(Гг.

/Уос

в .1.1.. час. на заседании специализированного совета Д 006.11.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Институте физиологии Академии наук БССР (220725, ГСП, Минск, ул. Академическая, 28).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института физиологии Академии наук БССР.

Автореферат разослан « ."?. »

Официальные оппоненты:

Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических наук

С Институт физиологии АН БССР, 1989

35УД*Г«1ВЬЙЭё!|

шшен»

К. t. ! SCSEït

i тдол а^кссертай^й

ОВЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ '

Одной из важнейших задач современной физиологии и медицины является разработка проблемы механизмов терморегуляции и саморегуляции процессов жизнедеятельности при высокой температуре. Успешное решение этой проблемы будет -способствовать ускоренному освоению регионов с жарким климатом, оптимальной коррекции функций при лихорадочных состояниях, а также эффективному использованию гипертермии при лечении некоторых заболеваний. В настоящее время особое значение с теоретической и практической точек зрения приобретает всестороннее исследование центральных механизмов регуляции теплообмена и температуры тела при действии на организм высоких теш ера тур и в условиях действия пирогенов.

Известно, что при изучении центральных механизмов регуляции температуры тела весьма информативным является подход.связанный с исследованием нейрохимических процессов. Многие экспериментальные даш.ые указывают на важную роль в них различных нейромедиаторных систем и адренореактивных систем гипоталамуса, В частности (Myers, Yakah, 1969; Bligh, Cottle, Maskrey, 1971; Hellon, 1974; Feldberg, 1975; Hammel et all., 1977; Myего, 1980; Гурия, 1980; Лупандин, 1984; Gordon, Heath ,1986). Однако тлеющиеся сведения не раскрывают в достаточной мере значение адренергических механизмов мозга в терморегуляции в различных температурных условиях. Сравнительные исследования с целью определить роль этих механизмов в терморегуляции при перегревании а экспериментальной лихорадке не проводились.

В последние годы показана тесная взаимосвязь мевду функциональной активностью моноаминергических систем мозга и содержанием в нем простагландинов и описдных пептидов (Hodquist, 1977; Лигихин, 1978; Стьярнье, 1982; Хлуша, IS84; Голанов, 1906; Jean-Didier, Guy, 1287; Лшмарлн, Каменская, 1988). Получены такав доказательства изменения температуры тела у животных в результате центрального Действия простагландшша группы Е , опяоидных И некоторых Других нейропептщов ( Veale, Cooper, 1975; Feldberg, Milton, 1978; Clark, Lipton, 1983; Gordon ot all., 1984; Lipton, c;&rk, 1986). Установлено, что гажннм звеном в процессах образования и инактивации в мозге многих высокоактивных рехулягорных пептидов является ограничений протеолкз ( Rudicer, 1980; Orlowski, 1983; Клуша, 1984;

3

МсКе1уу, В1ишьегв , 1986) и что в условиях гипо- и гипертермии в головном мозге у ряда животных изменяется активность про-теолитических ферментов (Отлишикова, 1976; Эмирбеков и соавт., 1979; 1984; Эмирбеков, 1987). Однако участие протеиназ мозга, нейропепгидов, простагландинов, как и роль катехоламинов в цен-тральних механизмах терморегуляции при перегревании и лихорадочных состояниях не было объектом комплексных исследований.

Основной целью работы явилось экспериментальное обоснование гипотезы о регуляторной функции пептидгидролаз и ренинангиотензиновой системы гипоталамической области мозга в центральных механизмах формирования терморегу-ляторной реакции организма на действие высокой внешней температуры и пирогенала.

В работе решались следующие основные задачи:

1. Исследовать центральные нейрохимические механизмы терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке по показателям активности адренореактивных систем, содержания простагландинов, циклических нуклеотидов, нейропептидов и протеолитичес-кой активности в гипоталамусе и продолговатом мозге.

2. Провести сравнительный анализ изменений в э;{фекторных процессах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке и выяснить их зависимость от центральных нейрохимических механизмов регуляции теплообмена.

3. Изучить механизм центрального действия ряда ингибиторов протеиназ на процессы терморегуляции и температуру тела, показатели активности адренореактивных систем, содержание простагландинов, циклических нуклеотидов, опиоидных пептидов, активность пептидгидролаз и ренинангиотензиновой системы в гипоталамической области мозга.

4. Выяснить роль ренинангиотензиновой системы мозга в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке.

5. Исследовать центральное действие ангиотензина II на развитие пирогеналовой гипертермии и устойчивость организма к перегреванию.

6. Провести сравнительный анализ содержания свободных аминокислот в плазме крови при гипертермии, вызванной действием на организм высокой внешней температуры и пирогенала и изучить роль аргинина в центральных нейрохимических механизмах регуляции температуры тела при перегревании и пирогеналовой лихорадке.

7. Выяснить значение пептидгидролаз, ренинангиотензиновой системы, опиоидаых пептидов и адренореактивных систем гипотала-мической области мозга в центральных механизмах антипиратическо-го действия салицилата натрия.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Повышение активности нейтральных и кислых пептидгидролаз (растворимой ф°рмч) и ренинангиотензиновой системы гипоталами-ческой области мозга играет важную роль в центральных механизмах формирования терморегуляторной реакции организма на действие высокой внешней температуры, а их угнетение - в механизмах возникновения и развития п и ро ген ало пой гипертермии.

2. Ангиотензин II терморогуляторных структур мозга является одним из факторов, способствующих повышению устойчивости организма к перегреванию и активируших механизмы понижения температуры тота в условиях пирогеналовой гипертермии.

Нащнад нрр.изид.шботц. В результате комплексного исследования установлено, что в центральных механизмах формирования ответной реакции организма как на действие высокой внешней температуры, так и пирогенала существенное значение имеет перестройка метаболизма пептидов и катехоламинов, изменение активности ренинангиотензиновой системы и адренореактивных свойств гипоталамуса. Эти сдвиги определяют неспецифический характер и специфичность эффекторных торморегуляторных реакций, которые выявляются при изучении показателей теплообмена, обмена белков и ли-пвдов в терморегуляторных структурах мозга и плазмы крови,активности Ш1С и системы гипоталамус-гипофиз-вдтовидная железа. При гипертермии, развивающейся в результате кратковременного воздействия высокой внешней температуры, повышается содержание общего холестерина в гипоталамусе и продолговатом мозге и снижается его концентрация в липидах пчпзчы крови, а при пироге валовой гипертермии происходит усиленная утилизация терморегулятор-ными структурами мозга свободного аргинина плазмы крови.

Впервые показало, что в развитии сдвигов в эффекторных процессах и гормональных механизмах регуляции теплообмена при перегревании, направленных на повышение устойчивости организма к действию высокой температуры, значительная роль принадлежит повышению активности г,-адренореактивных систем гипоталамичес-ко!>. области мозга. Выявлено, что интенсификация энергетических процессов и угнетение процессов теплоотдачи .приводящее к повышению температуры тела в результате дейстзия пирогенала, обуслов-

5

лены в значительной степени понижением активности X -адроноре-актавных систем в гипоталамусе.

Впервые обнаружено, что в центральных нейрохимических механизмах формирования ответной терморегуляторной реакции организма на действие высокой внешней температуры и пирогоната большое значение имеет состояние активности поптздгцдролаз мозга. Повышение активности ренинангиотензиновой системы, нейтральных и кислых пептидгидролаз (растворимая форма) в гипоталамической области мозга играет важную роль в повышении устойчивости организма к перегреванию, а их угнетение - в развитии пирогеналовой гипертермии.

Впервые установлено, что введение в желудочки мозга некоторых ингибиторов протоиназ, а также иигибиторов ронинангиотензи-новой системы приводит к выраженной гипертермии. Показано, что такая гипертермия является результатом центрального дойствия веществ этой группы, а простагландинн группы Е не являются медиаторами реакции. Исследование гипертермического эффекта ингибиторов протеиназ позволило разработать новый принцип создания экспериментальных моделей гипертермии.

При изучении механизма центрального действия ангиотензина II на температуру тела установлена ранее не известная способность этого пептида стимулировать повышоние импульсной активности теплочувствителышх нейронов переднего гипоталамуса у кроликов, вызываемое повышением температуры мозга при нагревании тела животного.

Показано, что ангкотензин II понижает температуру тела в условиях ПГЕ2 - и пирогонаяовой гипертермии, а также устраняет характерные для действия пирогенала изменения содержания норад-ренатина и р -эндорфина в гипоталамусе. Внорвые установлено , что вещества, угнетающие активность ренинангиотензиновой системы, нарушают развитие терморогуляторных реакций на действие высокой внешней температуры, ускоряют развитие гипертермии и способствуют перегреванию, что дпет основание рассматривать синтезирующийся п мозге янгиотензин II в качестве одного из факторов эндогенного антипиреза и устойчивости к перегреванию.

Результаты исследования существенно расширяют и углубляют представления о структурно-функциональной организации центров

терморегуляции, механизмах формирования терморегуляторних реакций организма на действие высоко!! внешней температур«, а также пирогонала и вносят новый вклад в физиологию терморегуляции.

В работе вперше показана роль нейтральных и кислых пептид-гидролаз (растворимой <}ормы), а такне ронинангиотензнновой систем» гипотатамической области мозга в центральных механизмах формирования ответной реакции организма на действие высокой внешне¡1 температуры и пирогеншга, что имеет значение для понимания этиологии и патогенеза ряда состояний, сопровождающихся гипертермией.

Иолучени новые данные, южные для понимания механизмов он-догеннох'о антиниреза и повышения устойчивости организма к перегреванию. Выявтенноо свойство алгиотензина II повышать устойчивость организма к перегреют)ню и оказывать выраженное гипотетическое дсйстше на высоте пирогеналовой и ПГЕ^-гипертермии дополняет существующие представления о физиологических функциях ронинангиотензиновой системы мозга.

Полученные данное являются теоретическим обоснованием использования фармакологически): препаратов, изменякших активность ренинангиотензиновой системы и некоторых пептидгидролаз мозга, с целью коррекции сдвигов в терморегуляторных реакциях организма при перегревании и лихорадочных состояниях и повышения его устойчивости к действию высокой внешней температуры и пирогонов.

Результаты экспериментальных исследований позволили создать новые модели гипертермии (авторские свидетельства )i II96943 и II 1343438).

Результаты настоящей работы используются в научной работе лаборатории функциональных систем Института физиологии АН БССР, отделе биоислитаний Института биоорганической химия АН БССР, лаборатории проблем адаптации 1ШС Минского медицинского института. в учебном процессе а научной работе на кафедрах нормальной ¿изаологкл ¡Ланского, Витебского и Гродненского медицинских ¡шсглтутоз, на ка-Тедрох биологической химии и <?ар&'акатогаи Минского медицинского института, на кафедре фармакологии с общей токсикологией Ленинградского санитарно-гигиечического института.

Результаты проведенных исследований и • кешчоиия диссертации докладавалксь и обсуждались па У Всесоиа-ноа. съезде фармакологов (г.Ереван, 1282), 1У съезде Фармацевтов, фармакологов л токсикологов'БССР'(г.Минск, 1963), Респуб-

7

ликанской объединенной конференция патофизиологов, врачей спортивной медицины и ЛФК (г.Минск, 1985), ХП Всесоюзной конференции по физиологии кортиковисцералышх взаимоотношений (г.Ленинград, 1986), Н конгроссе Польского фармакологического общества (г.Люблин, 1986), У1 Всесоюзной конференции по физиологии вегетативной нервной системы (г.Ереван, I98G), I и II Всесоюзных конференциях "Важнейшие теоретические и практические» проблемы терморегуляции" (г.Нопосибирск, 1982 и г.Минск, 1986), У1 и УП съезде Белорусского физиологического общества им.И.II.Павлова (г.Гродно, 1983 и г.Витебск, 1907), XU ХУ съезде Всесоюзного физиологического общества им. И.И,Паатова (г.Баку, 1983 и г.Кишинев, 1987), II симпозиуме Европейской терморегуляторной группы (г.Минск, 1987), Х1У Международном конгроссе по биохимии (г.Прата, 1988), У Республиканском съезде фармацевтов, фармакологов и токсикологов Белоруссии (г.Минск, 1989), заседании Проблемной комиссии Минского медицинского института "Heiipoгуморальные и иммунологические механизмы регуляции резистентности организма к действию физических и химических факторов" (г. Нине к, 1988), заседании Минского отделения Белорусского физиологического общества им. И.П.Паачова (г.Минск, 1985), Научного совета при ОШ АН БССР по проблемам физиологии, биохимии и морфологии человека и животных (г.Минск, 1989).

ШсЗДЩЩЦЩ!^АУДЬШйВ Д&СШ0.ШШЩ. По материалам диссертации опубликовано 29 основных работ, из которых 3 в зарубежной печати.

Объем дсурудтурд диссертациц. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы методов исследования, 6 глав результатов исследования, главы обсуждения и заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 347 страницах, иллюстрировала 61 рисунком, соде раит 80 таблиц. Список цитируемой литературы включает 401 библиографическое наименование, из которых 185 отечественных и 296 зарубежных работ.

¡.'ЛТЕРЛЛЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Опыты выполнены на 2344 неиаркотизнрованних белых крысах обоего пола массой IC0-I8Q г. и на 367 взрослых ненаркотизиро-ванних кроликах массой 2,5-3,0 кг. дниотнио использовались в экспериментах после I-2-недолыю!! адаптации к условиям вивария. Те.чяература воздуха в виварии поддерживалась на уровне 20-22°С,

8

что находится в пределах термонейтральной зоны для крыс и кроликов (Иванов, 1965; Peole, Stepbmenson , 1977). Животные полу-, чали полноценный пищевой рацион в соответствии с нормами содержания лабораторных тавотных (Западнюк и соавт., 1983). Опыты

проводили строго в определенное время, 8-12 часов утра.

В опытах на крысах и кроликах использована известные экспериментальные модели гипертермии. Перегревание яшвотных осуществляла в суховоздушяой термокамере при температуре воздуха 40-42°С в течение 15, 30 и 60 минут. Экспериментальную ПГЕ^ -гипертермию вызывали введением ПГЕ^ (" sigma ", США) в систему желудочков мозга в дозе 2 мкг. Для создания общепринятой экспериментальной модели гипертермии, наблюдаемой при лихорадочных состояниях, использовали бактериальный липополисахарид пироге-нал (производство НИИЭМ-'им. Н4Ф.Гамалеи). Пирогенал вводили кроликмл однократно в краевую вену уха в'дозе 5 МПД/кг, крысам -внутрибрюшинно в дозе 50 МГЩ/кг. Все наблюдения производились в термонейтральных условиях (20-22°С). Для изменения активности центральных нейромедиаторннх и пептидергических систем мозга использовались адреномиметики, адреноблокаторы, яейропептиды, гормоны, некоторые ингибиторы прогеиназ, а такне аминокислоты и синаптически активные вещества, которые вводили однократно: крысам под местной анестезией (5$-ный новэкаин подкожно) в правый ботовой желудочек мозга в объеме 20 мкл, или в боковую вену хвоста в объеме 0,2 мл; кроликам - в полость правого ботового иди III желудочка через вэдвленные химиотроды в объеме, не пре-вшаичем 50 мкл, или а краевую вену уха в объеме 1,0 мл. С этой целью использовала: л -адреномаметик 1 -норадреналин битартрат моногидрат (" Calbiochem " , США) , клофелин, мезатон, р -ддреномиметик - изопротеранол битартрат дигидрат (" withr&p " , СНА), адреноблокаторы - феноксибензамин и про-пранолол ( " Ayreat Lab'о " , США), кортикотропин (Каунасский завод эндокринных препаратов), • арпшинвазопрессин ("Sigma" , CiüA), у5 -индорфин ( " Sisma " , ClüA ) [Д-AIa } -мет-энкефа-лин ("Sigma" , CHÍA), гидрокортизон ("Гедеон Рихтер", ЕНР),ан-гиотензин II (" Sigma." , CIÜA), ангиотензинакпд (ИОС АЛ ЛатССР, Рижский завод медпрепаратов), брадикинин триацетат ( "Reanal" , ,ШР), конкурентный блокатор рецепторов к ангиотензину II -[3tir1 -AIaßj -англотепзкн II' ( " signá США), ингибиторы протен-ннз пепстатин А ( "3ervn",íIT), к -сукцинил-L -пролин ("Sigma" , ОНА'), брадикинин потенциатор: С ("Зегуа" ,ФРГ), трипсин-ингя -

битор (из сои) ( "Rearml" , ВНР), фенилметилсульфонилфторид ( "Calbioohem" , США), контрикал (ГДР), гордокс ("Гедеон Рихтер", HIP). В опытах использованы также дибутирил-цААй, tip© ("ReanaX" , ВНР), теофилин ( "Sigma", США), арахидоновая кислота ("FiuJca" , Швейцария), 1 -аргшшл солянокислый СРеахим", СССР), хлористый кальций и салицилат натрия.

Для оценки вегетативных показателей в процессе развития гипертермии проводили наряду с определением частоты дыхания регистрацию потребления животными кислорода и частоты сердечных сокращений. Частоту дыхания фиксировали с помощью угольной манжетки и регистрировали на 4-калальном чернильнопишущем электрокардиографе в определенные интервалы времени. Потребление животными кислорода определяли камерным способом методом Миропольско-го, описанным О.Н.Елизаровой (1962). Частоту сердечных сокращений контролировали по ЭКГ,

Нейронную активность регистрировали впеклеточно, применяя вольфрамовые микроэлектроды с диаметром кончика 1-3 мкм. Отведения осуществляли от нейронов переднего гипоталамуса по координатам AgL j 5Hj4 ( Sawyer ei oil. , 1954). Эффекты веществ оценивали по изменению текущей частоты разрядов нейрона, которые регистрировали каждые 4 секунды с помощь» анализатора АМГ-1.

Взятие для исследований крови и тканей (мозг, печень) у животных проводилось за возможно минимальное время после дека-питации. Кровь собирали в охлажденные пробирки и центрифугировали 10 мин (5000 g при +4°С). Полученную сыворотку или плазму отбирали пипеткой и использовали в дальнейшем: сыворотку -для определения НЭЖК, суммарного холестерина (ХС), общих липи-дов и глюкозы, плазму для определения содержания три л сшшо дойных ферментов, уровня гормонов и концентрации свободных аминокислот, Вцделение гипоталамуса при температуре 0 - +4°С проводили по методу J.Glowinaky et all. (1966). Ткань гипоталамуса и продолговатого мозга замораживали в жидком азоте и хранила до использования при температуре -15°С. В случае определения в этих структурах протеолитической активности взятую ткань сразу гомогенизировали. Кислую и нейтральную иептндгидролаэную активность определяли в гомогенатах по метода.» H.L.Anson (1938) а Я.В.Бе-лак и соавт. (1968) соответственно. Митохондрии печени выделяли методом дифференциального центрифугирования на холоду в трис-сахародной среде. Активность сукцинатдегидрогеназы митохондрий

.10

печени определяли колориметрически по методике, разработанной Ф.Е.Путилиной и Н.Д.Ешенко (1969), а активность цитохром-с-ок-сидаз:/- методом, предложенным В.И.Малюк (1962).

Содержание катехоламинов норадреналина (НА) и дофамина (ДА) в гипоталамической области мозга определяли спектрофлуоримет-рическкм методом, описанным R.Lavorty," X.Taylor" (1968). Для изучения скорости оборота НА з ткани гипоталамуса применяли ингибитор тирозингидрокеялазы q-метил-п-тирозин ( "Regis" ,СШЛ) и ингибитор моноаминооксидази (МО) паргилин (внутрибрюшиянне инъекции). Активность 1.IA0 гипоталамуса определяли радиоизотоп-ным методом M.L.Jain ot all.-(l973) з модификации С.В.Петренко и соавт. (1980).

т т

Определение концентрации циклического 3 ,5 -аденозинмоно-

•ТоаТ&га (цАЖ>) и циклического - гуаназишопофосфата

(цПЛФ) в ткани терморегуляторных структур мозга производилось радиоконкурептннм методом с помощью тест-наборов фирмы "Amer-sham" (Англия), а содержания простагландинов группы Е (ПГЕ) и ПГЕ2Л этим не методом с помощью наборов фирмы "Clinical Assays" (США) и наборов Института изотопов Венгерской АН (ВНР). Содержание нейропептидов и гормонов определяли радиоиммунолога-че с кил; методом с помощью наборов следующих Фирм: р-эндорфина -"DRG International Inc." (ШЛ), мет-ЭНКефалИНа - "Immuno Nuclear Согрог. "(CliiA) , арпшин-вазопресслна - "Bublmann Laboratories" (Швейцария), адреиокортккотропного гормона (АКТГ) - "5о-rin Biomodica " (Италия), тиреотропного гормона (ИТ) -"Maiiinclerodt Diagnoatica" (ОРТ), три-, тетраиодтаронияа, инсулина и кортизола - наборами лро!1зводства ИБОХ АН ЕССГ. Активность ренина, концентрацию ангнотензина I и альдостеропа, как и тр;штическую активность плазмы крова, исследовали также ра-диошлмунологическам методом с помощ;.:э наборов ¡Тарки "Sorin Biomedica" (Италия). Радиоактивность в пробах определяли на Ейдкостяом-сиянтйялявд'оиком счетчике LS -I60I или LS -5500 фирмы "Bookman" (Сй.).

Общие липиды из ткани мозга экстрагировала но ивмдкке .М.А.Чехрановой и М.К.Креховой (1971). Содеря-^ние общих липидов в структурах.мозга определяли после экстракция гравиметрическим методом, а в скво ротке крон;!, как и концентрацию впей глгко-зы,~ с подопью наборов био-тест "Lacheraa" (ЧССР). Концентрацию НЭаК з сыворотке' крови определяли методом K.Paihoif ei all.

(1973). Зирнокислотный состав липидов мозга изучали методам газожидкостной хроматографии метиловых эфиров жирных кислот, приготовленных методом И.М.Синяк и соавт. (1976). Исследования проводились на газовом хроматографе "Sigma-2" фирмы "Perkin Elmer Corporation" (Швеция) с пламенно-ионизационным детектором. Для работы использовали металлические колонки длиной 1830 мм и наружным диаметром 3 ш. Неподвижная фаза - 15% degs , нанесенная на Chrom-WH . Обработка данных хроматограмм производилась на специализированной машине "Sigma-10 Chromatography Data Station."

Количественное содержание свободных аминокислот в плазме крова и спинномозговой жидкости определяли на автоматическом анализаторе AAA-88I (ЧССР). Подготовка образцов плазмы крови и спинномозговой жидкости для аминокислотного анализа осуществлялась по И.Гианек (1978). Изучение распределения меченого аргинина солянокислого между кровью, ликвором а структурами головного мозга проводилось следующим образом. Меченую аминокислоту вводили в краевую вену уха кроликам (0,6 МБК/кг) на высоте гипертермии, вызванной пирогеналом (5 ШД/кг) или ингибиторам трипсина (0,3 мг/кг). Через 30 мин после введения *4С-арганина солянокислого животные декапитировались. Определение величины радиоактивности в пробах проводили при помощи сцинтшшщионного счетчика LS -I8QI фармн "Beckman" (США).

Фагоцитарное число и фагоцитарный индекс рассчитывала по методике, описанной Д.К.Новиковым и ВЛ.Новиковой (1979). Подсчет количества лейкоцитов в крови проводился общепринятым методом в камере Горяева.

Все полученные цифровые данные обработаны общепринятыми методами вариационной статистики (РокицшШ, 1973; Каминский ,1974).

, ОСНОШЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССВДОВШИЯ И ИХ ОБОТДЕНИЕ

л .шд-

■ ддадада

Опыты, выполненные на ненаркотизированных крысах и кроликах, свидетельствуют о том, что перегревание и дейстше пароге-нала сопровождается значительными изменениями показателей теплообмена, обмена белков и липидов в тергюрегуляторных структурах

12

мозга и плазмы крова, а также гормональных систем, что согласуется с наблюдениями многих исследователей (Веселтшн, 1963; Иванов, 1972; Царюк с соавт., 1974; Rautureau , 1978; Султанов, 1978; Stitt , 1979; Лбдулин с соавт., 1980; Слоним, 1984; Гурин, IS86, 1989; Conception, Angeles , 1986)„

Опыты показали, что кратковременное пребывание крыс и кроликов в термокамере (40-42°С), приводящее к повышению ректальной температуры (на 1,9; 2,8 и 3,2°С у крыс и на 0,9, 1,7 и 2,2°С у кроликов через 15, 30 и 60 мин соответственно) сопро-вовдается значительными изменениями уровня глюкозы я концентрации Н0£К в сыворотке крови. После перегревания уровень глюко-зг; в геровл у крыс сначала (15 мин) повысился, затем (30 мин) понижался и к 60 мин возвращался к исходному значению. У кроликов действие температурного фдктрра сопротгаядагось повышением уровня глюкозы в крови через 15 и 30 мин на 21,8$ и 25,0% соответственно. Концентрация НЭЯХ понижалась в сыворотке крова как у крыс, так и у кроликов (на 31,6$ и 21,4$ соответственно) уже через 15 мин и оставалась низкой в течение Bcffo эксперимента.

Введение пирогенала крысам (50 ЩД/кг) приводило к медленному нарастанию температуры тела и к слабо вырааенпой гипертермия. Тате, температура тела повышалась яа 1,1°С и 1,0°С через 120 и 150 поме введения препарата. Инъекция пирогенала кроликам (5 .'.Щ/кг) приводила к быстрому нарастанию ректальной температуры и к выраженной гипертермии (на 0,5, 1,2 и 1,5°С через 30, СО п 120 мин соответственно). Развитие гипертермии под ачиянаем пирогенала у кроликов сопровождалось двухфазным с;шигом уровня глюкозы (повышением на 23,9^ через 30 мин а по-¡uvzeiizoM ;га 24,6fJ через 60 паи) я увеличением концентрации КЭХК в крови. В условиях действия пирогената чэтттв концентрации 1ШК составляло через 30 , 60 и 120 мин поме инъекции соответственно IB,35,7% и 18,7» У «роликов и'25,6^ через 2 часа у крис.

Исследование влияния перегревания и шутрг.^шшого введения пирогенала па потребление животными кислорода, активность дыхательных ферментов митохондрий, по тени сукцптагдегадрогеназы и цагозгром-с-о «сидазы и изучение' утилизация НЭЕК л глюкозы при ■

этих состояниях дало основание заключить, что пирогенал стимулирует процессы энергетического обмена.в организме, а перегре- .

13

вание их тормозит.

Изучение показателей теплообмена при перегревании и пироге-наловой лихорадке показало, что перегревание крыс а кроликов сопровогздается усилением, а действие пирогенала - торможением процессов теплоотдачи. Об этом свидетельствовало увеличение частоты дыхания, расширение поверхностных сосудов ушной раковины и повышение температуры кокных покровов при действии на организм внешнего тепла и, наоборот, сужение сосудов и повышение температуры кожи уха у кроликов при развитии парогеналовой лихорадки.

Кратковременное воздействие высокой внешней температуры приводило к значительному снижению содержания общих лилидов и концентрации суммарного холестерина в сыворотке крови как у крыс, так и у кроликов. Уменьшением концентрации суммарного ХС в сыворотке крови у кроликов через 15, 30 и 60 мин температурного воздействия составило соответственно 20,; 34,0,1 и 33,7$. Содержание общих липидов в крови у кроликов снижалось на 34,0$ и 31,6$, если перегревание продолжалось 30 и 60 мин.

Внутривенное введение кроликам пирогенала приводило к снижению в сыворотке крови животных концентрации суммарного ХС (на 25,2$ через 60 мин) и к повышению содержания общих липидов (до 126,7$ через 60 мин). На уменьшение содержания общих липидов, фосфолипидов и триглицеридов в сыворотке крови при действии на организм высокой внешней температуры и их увеличение при действии пирогенала ранее указывали некоторые исследователи (Бирюкова, 1973; Царюк, Булат, Рудковская, 1974; Conception, Angeles , 1986).

Известно, что при гипертермии, вызванной воздействием внешнего тепла, в крови собак, кроликов и крыс отмечается снижение содержания общего XQ и его увеличение в тканях продолговатого мозга, сердечной и скелетных мышцах (Забросаева, 1968; Шепелев и соавт,,1973; ЦаркжгБулат,Рудковская, 1974; Burger et all. , 1974; Conception, Angelea , 1986). Принимая во внимание такие сведения, можно предположить, что при перегревании и пирогена-ловой лихорадке будет изменяться содержание ХС и в тканях терморегуляторам структур мозга.

Выполненные опыты подтвердили сделанное предположение. Результаты исследований показали, что кратковременное перегревание кроликов сопровождается увеличением содержания суммарного

14

ХС в липидах гипоталамуса и продолговатого мозга (на 20,6% через 30 мин в гипоталамусе и на 27,4$ и 38,1% через 30 я 60 мин . в продолговатом мозге), а действие в организме пирогепала т-возрастанием концентрации ХС (на 16,9% и 23,2% через 60 и 120 мин после инъекции пррогенала) в лнпидах продолговатого мозга.

Могло предположить,"что причиной снижения содержания суммарного ХС в сыворотке и его увеличения в тканях терморегуляторных структур мозга при перегревании является усиленное поступление ХС из крови в ткани и торможение в них процессов его распада. Снижение содержания суммарного ХС в сыворотке крови при пироге-наповой лихорадке, по-видимому, можно объяснить тем, что скорость утилизации ХС тканями превышает скорость его поступления в кровь. Нарушение баланса этих процессов показано R.H.Fiser,j„ Demiaton (1972) при экспериментальной лихорадке,, вызываемой Dipl.pneumoniae и S. typhi murium . Исследователи устало вили, что скорость исчезновения ХС из плазмы в этих условиях повышается. Очевидно, одном из причин уменьшения концентрации суммарного ХС в крови при пирогеналозой лихорадке может быть и интенсивное его использование в процессах синтеза стероидных гормонов в коре надпочечников. Как известно, введение в кровоток пи-рогенала значительно повышабт активность Ш1С (Сорокин, 1965; Chowers et all., 1966; Абдулин с соавт., 1980).

Предположение о той, что развитие гипертермии под wrnmmeu высокой вкемшй температуры а пирогенала сопровождается разными сдвигами в обмене лип идо в подверждается опытами по изучению жирнокислотного состава общих липидов гипоталамуса и продолговатого мозга.

Под влиянием высокой внешней температуры и пирогенала в плаз;.;е крош и спинномозговой жидкости у кроликов изменялось содержание ряда свободных аминокислот. В условиях перегревания у кроликов возрастало, а после .введения ь кровоток пирогенала снижалось содержание аргинина. Установлено, что после введения в кровоток ^С-аргинина солянокислого в условиях пирогеналовой .гипертермии радиоактивность в плазме крова понижается, а в ткани гипоталамуса и продолговатого мозга резке увеличивается. Подтверждением полученным результата!,! могут служить данные П.!,!,Туряшща с соавт. (ISE4) о том; что при гипертермии у крыс в ткани мозга и его субклеточных структурах изменяется содержание свободных аминокислот.' • .•.

15

Опыты показали, что при гипертермии (30 шш), пиэшшой воздействием высокой внешней температуры или введением в кровоток пирогонала у кроликов снижается содержание аргишшвазо-проссина в ткани гипоталамуса (на С6,9% и 58,0#) и продолговатого мозга (на 36,4$ и 18,2%) и повышается уровень пептида в плазме крови (до 264,2$ и 170,2$ соответственно). Однако, под влиянием перегревания концентрация АКТГ, ГТГ и кортизола в плазме крови понижается, а при пирогеналовой лихорадке - повышается.

Имеющиеся в литературе сведения (Иерусалимский с соавт., 1974; Сорокин, 1965; Chowora et all. , 1966; Krtik, Sadowski , 1978; Абдулин с соавт., 1980) о направленности сдвигов в активности ПНС, системы гипоталамус-гипофизчцитовидная железа и в содержании аргининвазопрессина в гипоталамусе и плазме крова в ответ на воздействие температурного фактора согласуются с полученными данными.

Учитывая, что гор,юны, циркулирующие в крови, влияют на деятельность ЦНС, представляло интерес изучить вчияние введения в желудочки мозга АКТГ, кортизола и аргининвазопрессша на температуру тела и теплообмен аиБотных как в термонейтральных условиях, так и в условиях гипертермии, вызванной перегреванием или пирогеналом.

Опыты показали, что.АКТГ и кортизол при введонии в желудочки мозга понижают температуру тела у крыс и кроликов. Снижение температуры тела сопровождалось угнетением теплопродукции п усилением теплоотдачи. Гипотормия у крыс и кроликов, вызываемая АКТГ, усиливалась на холоду (+4°С). Однако центральное действие пептида не оказывало влияния на темперагуру тела в условиях высокой (40-42°С) внешней температуры. Б отличие от АЮТ (10 мкг) и кортизола (50 мкг) , введение в желудочки мозга аргининвазопрессина (5 мкг) в термонейтральных условиях не впаяло на температуру тела и изучаемые показатели теплообмена у крыс и кроликов. Центральное действие АКТГ (5 мкг), кортизола (50 мкг) или аргининвазопрессина (5 мкг) ослабляло пирогенало-вую гяпортермшо у кроликов, и приводило к понижению уровня ГОЕК в крови. О том, что АКТГ оказывает гипотермическое действие и антипиретический эффект, указывали в своих работах j.Lipton, J.Clyn (1980) И. 0.Upton et ell.(1984).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что АКТГ

16

я кортизол могут участвовать в терморегуляции в норме, а также препятствовать подъему температуры тела при пирогеналовой лихорадке, угнетая активность центральных механизмов теготообра-зоващя. Подтверждением такому предположению служат результаты опытов, свидетельствующие о том, что длительность и выраженность гипертермической реакции на пирогенал у кроликов ослабляется предварительным введением ЛЮТ. Что касается аргшшнва-зопрессина, то эффект понижения температуры тела пептидом у кроликов на высоте пирогеналовой гипертермии, но не у интактних животных, позволяет предположить, что аргининвазопрессил учаот-вует в центральных механизмах развития лихорадочной реакции. Полученные данние подтверждаются существующим представлением о том, что аргининвазопрессин может быть одним из претендентоз на роль "медиатора" в системе эндогенного антипиреза (Kaating et all., 1900; Kaatlng, Wilkineon ,1386). .

Известно, что недостаток или чрезмерное содержание отдельных аминокислот в крови приводит к нарушению функций нервной системы (Хометиани л соавт., 1973; Гулый, 1973). Учитывая, что при перегревании и пирогеналовой лихорадке о ti.; е чаются значительные и разнонаправленные сдвига в содержании ряда свободных аминокислот в крови и спинномозговой жидкости у кроликов, были выполнены опыты по изучению центрального действия на терморегуляцию некоторых аминокислот, уровень которых при перегревании и пирогеналовой лихорадке более всего изменяется.

Опыты показали, что в термонейтральных условиях, р-ала-шш и DL-валин, при введении в желудочки мозга, поникают температуру тела у интактяых крыс и кроликов. При пирогеналовой лихорадке все исследуемые аминокислоты, за исключением аргинина, не влияли на развитие и выраженность гипертермии. Введение кроликам i -аргинина сотянокнслого б ".елудочка мозга (100 мет) или в. кровоток (20 мг/кг) в условиях разжиги;: пирогеналовой гипертермии, сопровождалось понижением уровня НЗКК в крова и приводило к понижению температуры тола.

Установлено, что в условиях центрального действия АКТГ (5 мкг) уменьшается у крыс содержание а повышается скорость оборота НА в гиполатамической области мозга. Введение в желудочки мозга аргинина' солянокислого (100 мкг) не влияло на содержание ц скорость оборота НА з гипотачилусе. Однако в этих условиях изменяются адренореактивние свойства. тер^орогуляторных структур

IV

ЦНС. Центральное действие НА (10 мет) в условиях предварительного введения в желудочки мозга аргинина оказывает более выраженное и более продолжительное понижение температуры тала по сравнению с контролем.

Следовательно, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что в основе одного из механизмов гшготерма-ческого действия АКТГ лежит, по-видимому, повышение функциональной активности адренореактивных систем гипоталамуса, а в основе антилиретического действия аргинина - изменение адренореактивных свойств терморегуляторных структур ЦНС.

Таким образом, по изменению показателей теплообмена, обмена белков и липидов в терморегуляторных структурах мозга и плазмы крови, баланса гормональных систем ответная реакция организма на перегревшие отличается от реакции на введение в кровоток пирогенала, хотя оба воздействия приводят к повышению температуры тела. При гипертермии, развивающейся в результате кратковременного воздействия высокой внешней температуры, повышается содержание общего ХС в гипоталамусе и продолговатом мозге и снижается его концентрация в липидах плазмы крови, а при пирогеналовой гипертермии происходит усиленная утилизация тер-морегуляторнцми структурами мозга свободного аргинина из плазмы крова. При перегревании понижается, а при пирогеналовой лихорадке повышается активность ЛИС и системы гипоталамус-гипофиз-щитовидная железа.

ттаедамш лияшт

Результаты исследований показали, что перегревание крыс и кроликов одновременно с повышением ректальной температуры сопровождается через 30 и 60 мин повышением скорости оборота НА и снижением содержания ДА и НА в гипоталамусе. Установлено,что развитие гипертермии у крыс сопровождается повышением (на 20,3$ и 21,5$ через 30 и 60 мин соответственно) активности МАО, дезаминирушцей в гипоталамусе НА.

В противоположность перегреванию, действие в организме пирогенала (30 мин) не отражалось на скорости оборота НА в гипоталамусе , хотя и приводило к снижению в нем содержания НА. и ДА (соответственно на 30и 67,7$ через 60 мин после введения в кровоток пирогенала). Результаты выполненных исследований

дают основание заключить, что повышение температуры тела под влиянием воздействия на организм высокой внешней температуры приводит к усилению, а действие пирогенала - к ослаблению функционально,'? активности центральных адренореактивных систем.

Таким образом, полученные данные, как и результаты опытов ряда авторов ( Heid et all.1968; Дышшкова, 1983; Мезидова, Манухия, Султанов, 1984) свидетельствуют о том, что катеход-амини гипоталамической области мозга участвуют в механизмах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке.

О целью выяснения роли адренореактивных систем гипоталамуса в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке было изучено влияние возбуждения - и' ^-адренореактивных систем мозга на температуру тела, некоторые оффекторнче процессы и гормональные механизмы терморегуляции. Было установлено, что введение в боковой желудочек мозга крыс водного раствора IIA в дозе I мкг на животное не отражается на уровне НЭНК в крови и приводит к повышению температуры тела (на 1,0°С через 15 мин и на 0,9°С через 30 мин). С увеличением дозы вводимого НА ответная реакция изменялась. Центральное действие IIA в дозе 10 мкг сопровождалось повышением уровня НЭЖК в крови и понижением ректальной температуры. Введение в желудочки мозга крыс НА в дозе 20 мкг на животное сопровождалось через 15 и 30 мни после инъекция повышением температуры кожи корня хвоста, понижением уровня НЭЯК в сыворотке крови, количества потребляемого животными кислорода и значительным снижением ректачьной температуры. Уже через 15 мин температура тела крыс (п=Ю) снижалась с 37,0*0,09°С до 35,9±0,18°С. Хлористый кальций у кроликов и крыс также понижал температуру тела и увеличивал теплоотдачу. Центральное действие IIA (10 мкг) тормозило появление сосудистой тер-^регуялторкой реагцаи и отражалось на устойчивости крыс, к воздейс^-т тенгсего тепла л холеда. В условиях высокой внешней тешературн (40-42°С) жи-ьешпго быстрее перегревалась, а в условиях толст (-:-4°С> значительно Оыотрве пераохлаздолио,

В опытах ка кроликах показано,' что введение в полость III келудочка НА в дозе 30 мкг приводит к слабовыраженной гипертермии, Так, рекяаяыт температура через 30 и 60 мин после инъекции повчшлгеь соответственно на 0,4 и 0,7°С. Установлено, что действие НА (30 мкг) на подкорковые структуры мозга сопро-

вовдается понижением уровня ЛКТГ и повышением концентрации ар-гининвазопрессина в плазме крови у кроликов.

Учитывая гетерогенность синапсов (Аничков, 1974; Авакян, 1977; Lcvitzkl , 1978), можно предполовить, что IIA в разных дозах (что определяет скорость и степень диффузии веществ из т-лудочков мозга к различным участкам мозга) влияет на различные, в зависимости от доступности, центральные адренорецепторы , функциональное назначение которых в регуляции температуры тела не одинаково ( Zeiaberger, Bruck , 1976; Луландш!, 1977; Гурия, I9Ö0). Подтверадение высказанному предположению было получено в опытах с введением в куяудочки мозга крыс и кроликов адреномиметиков, взаимодействующих преимущественно с .с - и р -адронорецепторами.

Опыты показали, что центральное действие л -адреномиметиков кяофелина (10 мкг) и мезатона (40 мкг) у крыс сопровождается повышением температуры кожи корня хвоста, повышением в плазма уровня НЭ2К и снижением ректальной температуры, а введение в желудочки мозга р -адреномиметика изопротерепола (Ю шт) приводит к значительному понижению уровня Н32К, количества потребляемого животными кислорода и к повышению температуры тела. В опытах на кроликах также установлено, что клофелин (30 мкг) и ме-затон (50 мкг) при введении в желудочки мозга понижают, а изо-протеренол (50 мкг) - повышает температуру тела жизотных. Понижение температуры тела в условиях возбуждения jj -адренореактив-них систем сопровождалось усилением теплоотдачи, на что указывало повышение температуры ушной раковины (возодиллятация). Одновременно наблюдалось уменьшение частоты сердечных сокращений, что могло косвенно свидетельствовать об угнетении процессов, идущих с образованием тепла. Повышение температуры тала, вызванное изопротеренолом, сопровождалось угнетением теплоотдачи.

Центральное действие »с -адреномиметиков кяофелина и мезатона, наряду с изменением показателей теплообмена, сопровождается понижением, а изйпротеренола - повышением в плазме крови экспериментальных животных концентрации АКТГ,

В рпытах на крысах и кроликах установлено, что гипертерш-ческая реакция, вызванная инъекцией в желудочка мозга nTEg, как и введением в кровоток пирогенала, значительно ослабляется центральным действием клофелина, мезатона, а такие CaCIg, но не иэопротеренола. Эффект ^ -адреиомаме тико в и Ca"1-* в значи-

телыюл мере вызван усилением процессов теплоотдачи.

Таким образом, полученный экспериментальный материал позволяет предположить, что НА участвует в центральных тормозных и активирующих нейронных системах, регулирующих теплообмен а активность 1ТНС. Угнетающее влияние НА на центральные механизмы, регулирующие сосудистый тонус и "активность" ИКС, осуществляется через л -адренорецепторы, а активирующее - через уз-ад ре ко рецепторы. Угнетающее влияние НА на центральные механизмы, контролирующие интенсивность термогенеза, реализуется через р -адренорецепторы. Полученные данные свидетельствуют также о той, что для развития пшертермической реакции на введение ПГЕ^ в желудочки мозга или пирогенала в кровоток, большое значение имеет Функциональное состояние центральных л -адренорецепторов.

Перегревание крыс в условиях пре&ларителыюго введения животным О -метил-п-тироз!ша (250 мг/кг),с целью снизить содержание катехоламинов в мозге, приводило к увеличению скорости нарастания температуры тела по сравнению с животными в контроле, а введение предшественника катехоламинов 1 -ДОФА (50 мг/кг),который захватывается нервными клетками и накапливается в них (Шаляпина, Милушева, 1977), хотя и не отражалось на скорости нарастания ректальной температуры, однако повышало выживаемость животных. Выраженность пшертермической реакции на пирогенал у кроликов в условиях действия в организме как $ -метил-п-та-розина, так и 1-ДОФА, т.е. в условиях как низкого, так а высокого содержания катехоламинов в мозге, по сравнению с животными контрольной группы, не изменялась.

Как показали последующие опыты, фармакологические средства, нарушающие взаимодействие катехоламинов с адренорецелтора-ми мозга, также влияют на терморегуляцию при перегревании, но но на введение пирогенала. Кратковременное перегревание крыс и кроликов после предварительного введения в систему желудочкоз мозга пропранолола, в дозах, существенно не отра^эчяихся на изучаемых показателях терморегуляции в терыонейтральных условиях, не проявлялось реакцией понижения уровня 113111*; в крови., возникавшей под влиянием перегревания у животных контрольной группы и сопровождалось более выраженным повышением уровня ЛКТГ в крови и больше Г скоростью нараевдшя температуры тала. При перегревании (15 мин) пропранолол препятствовал возникновению сдвигов оодеулапшг ХС в лнппДах тканей гипоталамической

области и сыворотки крови и приводил к ускоренному развитию гипертермии.

В условиях блокады оС -адренорецепторов мозга феноксибенз-амином скорость развития гипертермии у животных под влиянием перегревания не изменялась. Не было выявлено отличий и в скорости развития пирогеналовой гипертермии у кроликов как в условиях предварительного введения в систему желудочков мозга <£ -адреноблокатора феноксибензамина, так и р -адреиоблокатора пропранолола. В специальной серии опытов установлено, что »с-ад ренобяо кагор федаксибензамин (50 мкг) не только препятствовал повышению уровня НЭЖК в крови у крыс, но и значительно ослаблял гипотермию, вызванную центральным действием Са++.

Следовательно, можно заключить, что ^ - и р> -адрснореактивные системы гялоталаелнческой области мозга играют важную роль в формировании характера ответной терморегуляторной реакции организма на действие высокой внешней температуры и пирогенала. Повышение активности центральных р -адренореактив1шх систем играет значительную роль в возникновении изменений теплообмена при перегревании, а снижение активности -адренорецепторов мозга в условиях действия пирогенала или ПГЕ^, по-видимому, является одним из пусковых механизмов в цепи процессов, приводящих к повышению температуры тела.

Zжшжíяжшmш л ладса

а даштожэдаж дйвдадшшзд два дадешвавд . а,дч1гр.тшео.Ц дтазша

Принимая во внимание существующие представления о роли простагландинов группы Е и циклических нуклеотадов в механизмах высвобовденяя и реализации влияний катехоламинов ( Hedquist, 1977; Ажгахан, 1978; Муратов, Булаев, 1981; Стьярне, 1982), мы предположили, что выявленные сдвиги в активности адренореактив-ных систем гипоталамуса и, как следствие, в эффекторных процессах и гормональных механизмах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке могут быть обусловлены изменением содержания простагландинов и циклических нуклеотадов в гипотала-мичаских центрах терморегуляции.

Опыты показам, что воздействие внешнего тепла, одновременно о повышением температуры тела у кроликов, вызывало снижение в гапоталаыической области мозга экспериментальных животных

концентрации ПП^х и кратковременное увеличение содержания простагландинов группы Е (ПГЕ) (до 324,2$ через 30 мия). В условиях развивающейся гипертермии выявлено понижение концентрации ППи ПГЕ в ткани продолговатого мозга. Развитие пироге-

наловой гипертермии у кроликов сопровождалось в гипоталамусе снижением, а в ткани продолговатьго мозга увеличением концентрации как ПГЕ, так и ПГР^ . Через 60 мин после введения в кровоток пирогенала (5 ЩЦ/кг) концентрация ПГЕ и ПГВ^ в гипоталамусе понижалась соответственно на 35,552 и 32,8$, а в продолговатом мозге возрастала на 80,4% и 50,7$. В опытах на кроликах в условиях развития пирогенадовой лихорадки было также выявлено увеличение содержания ПГЕ на 49,6$ через 60 мин и в спинномозговой жидкости.

Введение в желудочки мозга ПП^, как и натриевой соли ара-хидоновой кислота вшивает у крыс л кроликов повышение температуры тела, что подтверждается результатами исследований a,Milton (1972), j.stitt (1973),w.Veale,K.Cooper(I375)„ Повышение температуры тела животных в резулгтате центрального введения препаратов возникало вследствие угнетения теплоотдачи (вазоконстрик-ция) и повышения интенсивности теплопродукции (повышение частоты сердечных сокращений, активности сукцинатдегидрогеназы и ци-тохром-с-оксидазы митохондрий печени, количества потребляемого животными кислорода в условиях понижения уровня НЭЯК в плазме крови).

Показано, что введение в желудочки мозга ffTEg, наряду с повышением тсйператури тела а активацией ГГНС, вызывает снижение функциональной активности адреиореактивних систем гипоталамуса. Эти даяние согласуются с сущестауэдаш представлениями о том, что TtTS участвуют в одауляшш активности адренореахтивных нейронов в различных отделах UHC-( He.-irjiat, 1977; Ciepc'raen, Громов, 1280; Стьдрнв, 1962), тор'/озят аистю'^.яоийо НА (Hedquiafc , Т970: Tempieton, Hillier , 1979; Стьярне, Г?о2) и повышают со-;j,7.;"i!iie -елкато^ г. "оэгоюй г"5НЗ (А*лазян, 1979; Хинрикус о сисизт., 1980), Установлено, что центральное тестоне «С -ад-реномиметиков клофелина и мезатона- в отличие от ji -здреномиге-тика изопротеренола, в экспериментах с введением этих веществ • ;.к до, тгк и после инъекции ПГ&>, ослабляет HTSj гипертермию "рис и кроликов.

Следовательно, получоннге данные свидетельствуют о том, ч-.о

для развития гипертермической реакции на введение в желудочки мозга lll'Kj большое значение имеет функциональное состояние X -адренореактивных систем гипоталамической области мозга.Снижение активности х -адренорецепторов мозга в условиях действия ПГ&>, по-видимому, является одним из пусковых механизмов в цепи процессов, приводящих к повышению температуры тела. Дополнительным подтверждением служат результаты электрофизиологических исследований влияния клофелина и ПГЕ^. введенных в желудочки мозга, на импульсную активность нейронов переднего гипоталамуса, которые свидетельствуют о том, Что при введении клофелина после IITEg воспроизводится первоначальный эфф;ект -адреномиметика -торможение нейрональной активности. '

Учитывая значимость цАМФ в реализации влияния катехоламинов и простагландинов в структурах ЦНС ( Kuehl , 1974; Hedquiat, 1977; Ажгихин, 1978; Стьярне, 1982) и имеидиеся в литературе сведения об участии цАШ в терморегуляции ( Philipp-Dormston, 1976; Milton, Dasoombe , 1976; Ефремов, Сорокин, 1981; Kanda-вату, Williams , 1983) была исследована роль циклических нук-леотидов в центральных механизмах регуляции температуры тела при перегревании и пирогеналовой лихорадке. Опыты показали,что под влиянием высокой внешней температуры содержание цАМФ в продолговатом мозге повышается (до 165,2$ и 214,3$ через 30 и 60 мин соответственно), а цГОФ - понижается (на 48,9$ через 60 мин). Концентрация цАШ и цИФ в ткани гипоталамуса под влиянием перегревания в течение всего эксперимента достоверно не изменялась. Под влиянием пирогенала содержание цАМЗ повышалось как в гипоталамусе (до 148,0$ через 60 мин), так и в продолговатом мозге (до 214,0$ через 90 мин). Содержание цГМФ в ткани гипоталамуса в условиях пирогеналовой гипертермии понижалось (на 51,5$; 43,4$ и 56,4$ через 30 , 60 и 90 мин после инъекции пирогенала соответственно), а в продолговатом мозге не изменялось на протяжении всего периода исследования. Внутривенное введение пирогенала приводило к увеличению содержания цАМФ (на 56,0$ через 60 мин) и в ликворе. В экспериментах, в которых изучалось центральное действие цА® и цШФ на температуру тела у крыс (50 мкг) и кроликов (100 мкг) установлено, что лишь дибутирил-цАМФ, введенный в желудочки, мозга, повышает температуру тела.

Изучая влияние высокой внешней температуры и пирогенала на терморегуляцию у крыс и кроликов в условиях предварительного

24

введения в организм животных фармакологических средств, изменяющих метаболизм простагландинов и циклических нуклеотэдов, установлена факты, которые дополнили полученные данные и имеющиеся в литературе сведения об участии в механизмах терморегуляции ПГЕ ( Hellon, 1974; Feldberg , 1975; Veale, Cooper, 1975; Peldberg, Milton , 1976; Гурин, 1980) ii позволяли уточнить значение простагландинов и циклических нуклеотидол в цект-рошшг механизм»- формирования отпзтно" тер:.:орегуляторной реакция организма на действие высокой внешней температуры и пкро-генала.

Установлено, что пирогенлловая гипертермия у кроликов ослабляется, но не предупреждается предварительным (за 30 мин до инъекции пироген&ла) внутривенным введением салицилата натрия (100 мг/кг), но не мепакрина (0,3 мг/кг). Выявлено, что такая реакция ослабляется к центральным действием салицилата натрия (2 мкг). Предварительное введение теофилина в нелуяочки мозга (50 мкг) или в кровоток (10 мг/кг), наоборот, усиливало гипертермическую реакщш на лярогенал.

Показано, что кратковрзменное перегревание крыс п кроликов в условиях предварительного внутривенного введения салицилата натрия (100 мг/кг) или введения в желудочки мозга теофилина (50 мкг) приводит,как у животных контрольной группы, к быстрому нарастанию ректальной температуры. Достоверных отличий в скорости развития гипертермии выявлено не было. Гипертермическая реакция на введение в желудочки мозга ПГЕ^ (I мкг) или дибутирил-цАМФ (50 мкг) не предупреждалась предварительным введением аспирина (200 мг/кг) у крыс или салицилата натрия (100 мг/кг) у кроликов и усиливалась в условиях предварительного введения з систему желудочков мозга теофилина (50 мкг).

Таким образом, есть основания полагать, что ПГЕ и цАШ мозга участвуют в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке. Полученные данш:е позволяет заключить, что ПГЕ играют существенную роль в механизмах развития, а не возникновения пирогеналовой гипертермии и что они, по-видимому, но имеют значения в механизмах Еоэ&г.шозеняя гд-пертершш, вызванной действием цШФ.

Ужхшлттт.. дддтдтод шкал. дедхтшашидзшазт

Опыты на кроликах показали, что перегревание животных сопровождается уменьшением содержания яммунореактивяого р -эндор-фина в ткаш1 гипоталамуса на 51,7$ через 60 мин. Концентрация ишуно реа ктя того мет-энкефалина в г ял о талаш чес ко й области мозга в этих условиях достоверно не изменялась. Развитие гипертермии под влиянием воздействия высокой внешней тешературы не отражалось на содержании иммуяореактивного £> -эндорфина и сопро-воадалось повышением концентрации шмунореактивного мет-энкефа-лина в ткани продолговатого мозга (на 73,1% через 60 мин). Введение в кровоток лирогенала вызывало увеличение содержания им-мунорэактивлого -эндорфина до 187,через 60 мин а не отражалось на концентрации шмунореактивного мет-энкефалана в гипоталамусе. В ткани продолговатого мозга уменьшалось содержание иммунореактивного р -эндорфина (на 77,7$ через 60 мин)и повышалась (до 271,6/з через 30 мин) концентрация шмунореактивного мет-энкефалана.

Полученные данные свидетельствовали о том, что опиоидные пептиды могут участвовать в центральных механизмах терморегуляции при перегревания и пирогенаяовой лихорадке. Подтверждение получено в опытах с введением агонистов опиатных рецепторов в желудочки мозга крыс и кроликов. Центральное действие ^ -эндор-фина у крыс (3 мкг) и кроликов (5 мкг) сопровождалось повышением ректальной температуры (соответственно на 1,8°С и 0,8°С через 60 мин). Инстрацистеральное введение кроликам -эндорфина в дозе 5 мкг на животное вызывало гипотермию. Введение в желудочки мозга крыс и кроликов [Д-Л1а ]-мет-энкефалина (50 мкг) также приводило к повышению тешературы тела.

Гипертермическал реакция, вызванная центральным зведением р>-эндорфина, ослаблялась предварительным внутривенным введением салицилата натрия (200 мг/кг), а также введением в желудочки мозга животным »с-адрекомиме тиков клофелина (5 мкг), мезатона (20 мкг) и НА (10 мкг), но не СаС]^ (20 мкл 80 »Моль раствора). Введение |> -эндорфина в желудочки мозга крыс (3 мкг) и кроликов (5 мкг) вызывало в условиях нарастающей гипертермии повышение, в то время как центральное действие [Д-А1а ] -мет-энкефалина (30 мкг), сопровождалось понижением уровня АЮТ в плазме крови. Действие а-эндор&ша у кроликов сопро'вовдалось снижением в Г " 26

плазме крови уровня аргашшвазопрессииа (на 30,4$ через 30 мил) после введения пирогенала. Центральное действие ^-эндорфииа у крь'с (через 30 мин послс инъекции) не отражалось на скорости оборота НА в гипоталамусе, хотя и приводило к снижению в нем содержания ДА-и НЛ ( соответственно на 45,0$ с 28,1$), что поз-еоляот про.г,по.чо;::;гп. бос;.:с:::.чсспь угнетения пспткдом активности . тарозингадроисалази и сккжелдо иун^'.снал.^нзл акташосгк адро-кореастаншх састам в гипогсуггаагюеяой сбласти мозга. Такое кредаолоаевде хоров» согласуете;! с ггдествукхцж предстаачонием о модуляторной роли эндогенных огшо«циых пептидов, регулирующих висвобозденае кагехолакшгов путем илгабароваияя их высвобождения и синтеза (Вальдмак, 1382; Гоканец, Аносоз, 1985; Голанок,1986; Ашмарин, Каменская, 1988).

В опытах на крысах а кроликах установлено, что предварительное введение в систему желудочков мозга блокатора опиатных рецепторов налоксона ослабляет развитие пирогепаловой гипертермии и препятствует развитию гнпертермяческой реакции на введение в желудочки мозга р-эндоцфина, ноне [Д-^Иа2]-мет-энкефаяина. Налоксон не влиял на скорость нарастания ректальной температуры при перегревании. Таким образом есть основания полагать, что ^-эндорфин гипоталаыической области мозга имеет важное значение в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пиро-геналовой лихорадке. Снижение содержания р -эндорфина в ткани гипоталамуса при перегревании способствует повышению функциональной активности адренореактивных систем в этой области мозга с последующим угнетением теплопродукции и усилением процессов теплоотдачи, что может, по-видимому, рассматриваться как адаптивное изменение при перегревании. Повышение содержания ^ -эндорфина в гипоталамической области мозга приводит к угнетению активности центральных «а -адренореактивных систем с последующей интенсификацией процессов термогенеза и угнетением процессов теплоотдачи и является одним из факторов , обеспечивающих повышение температуры тела при действии в организме пирогенала.

Известно, что важным звеном в цепи процессов образования и инактивации в мозге многих нейропептидов и, в частности, опио-идных пептидов, является ограниченный протеолаз ( ваас1юси-

Lanctaaan ,1985; Turner et all* , 1985), Показано, что протеоли-тические ферменты играют важную роль и в активации фосфолипазы Ag и, как следствие, в процессах образования простагландияов (Шереметьев с соавт., I960; Kosaki et all. , 1980). В связи с этим представляло интерес выяснить, как изменяется протеолити-ческая активность тканей терморегуляторных структур мозга в условиях действия на организм высокой внешней температуры и пиро-генала.

Опыты показали, что при гипертермии, вызванной воздействием внешнего тепла, общая нейтральная пептидгидролаэная активность через 30 и 60 мин от начала перегревания повышается соответственно на 38,7$ и 24,8$ в ткани гипоталамуса и на 28,4$ и 33,7$ в ткани продолговатого мозга. Общая активность кислых пептидгидро-лаэ как гипоталамуса, так и продолговатого мозга при этом не изменялась, Активность растворимой формы нейтральных пептидгидро-лаз в тканях гипоталамуса и продолговатого мозга (через 60 мин от качала перегревания) била выше, чем у животных контрольной группы, соответственно, на 30,3$ и 29,2$ , а активность растворимой формы кислых пептадгидролаз на 38,6$ и 29,8$.

При гипертермии, вызванной действием в организме пирогенала, общая активность нейтральных пептадгидролаз в ткани гипоталамуса по сравнению с активностью у кнвотных контрольной группы понижалась через 60 и 90 мин на 39,8$ и 26,2$ соответственно, а общая активность кислых пептидгидролаэ на 17,7$ через 60 мин. Активность растворимой формы нейтральных пептидгидролаз вначале понижалась (на 28,6$ спустя 30 мин), а затем (к 60 мин) возвращалась к исходному значению. Активность растворимой формы кислых пептидгидролаз через 30 и 60 мин после инъекции пирогенала понижалась на 31,0$ и 20,8$ соответственно (Рис. I). В ткани продолговатого мозга через 30 мин после введения в кровоток пирогенала общая нейтральная пептидгидролаэная активность повышалась до 130,2$, а через 60 мин - до 128,3$ по сравнению с активностью у контрольных животных. Общая кислая пептидгидролазная активность в течение всего эксперимента не изменялась. Активность растворимой формы нейтральных и кислых пептидгидролаз при этом первоначально (через 30 мин) понижалась соответственно на 20,7$ и 22,2$, а затем (к 60 мин) возвращалась к исходному значению.

В специальной серии исследований установлена, что введенный в кровоток кроликам, в условиях пярогепаловой гипертермии (через

200

150

100

50

"НЕЙТРАЛЬНАЯ" пэитидгидрояаз на я активность

200

150

100

50

"КИСЛАЯ" пептвдгидралазная активность

(а)

(б)

(а)

Рис. I. Изменение протеолитической активности (в % к контролю)

в гипоталамусе у кроликов через 30 (I), 60 (2) а90

(3) мин поело внутривенного введения пирогенала (5 ад/кг).

а - общая пептидгидролазная активность; б - активность растворимой формы пептидгидролаз, Количество животных в каждой группе - 0. х - Изменения достоверны по отношению к контролю (P¿0.05).

60 мин после инъекции пирогеяала) гидрокортизон (5 и.г/кг) или салкцила? натрия (300 мг/кг) не только снижают температуру тела а заметно ослабляют пирогеналовую гипертермию» но и повышают активность нейтральных и кислых пептидгидролаз (растворимая форма) и угнетают общую активность нейтральных пептидгидролаз в гипоталамусе и продолговатом мозге.

Результаты выполненных исследований свидетельствуют о том,

а

3

2

3

2

О

что пептидгидролазы гипоталамуса и продолговатого мозга участвуют в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пирогеналовой лихорадке. Для выяснения роли пептидгвдролаз в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пиро-геааловой лихорадке, представляло интерес изучить влияние на температуру тела и механизмы терморегуляции ряда ингибиторов протеиназ при их центральном я системном введении.

Опыты показали, что введение крысам я кроликам трипсин-ингибитора (из сои) или ФМСФ в желудочки мозга (100 мкг ) или в кровоток (0,3 мг/кг) приводит к развитию гипертермии как у крыс, так и у кроликов. Гипвртермаческая реакция на введение трипсил-ингибитора ослаблялась , но не устранялась у крыс и кроликов предварительным (за.30 мин до инъекции ингибитора) введением са-лицилата натрия в дозе 300 мг/кг (Рис. 2). Повышение температуры тела у животных в результате центрального и системного введения препаратов возникает вследствие усиления теплопродукции (о чем свидетельствовало повышение количества потребляемого животными кислорода в условиях нарастания уровня-НЭНК в крови и возрастание активности СДГ и ЦО митохондрйй печени) и торможения процессов теплоотдачи (на что указывало понижение температуры коки уха у кроликов или корня хвоста у крыс в результате вазо-констрикции). Установлено, что трипсин-ингибитор (из сои) в дозе 0,3 мг/кг наряду с повышением температури тела, угнетает общую нейтральную пептидгидролазную активность, а также активность растворимой формы нейтральных и кислых пептидгвдролаз в гипоталамусе и продолговатом мозге.

Что касается таких ингибиторов протеиназ, как гордокс, конт-рикал и б -аминоналроновая кислота, то в опытах на крысах и кроликах их центральное и системное введение влияния на температуру тела не оказывало.

В опытах на кроликах также установлено, что внутривенное введение трипсин -ингибитора (из сон) в дозе 0,3 мг/кг приводит, подобно действию пирогенапа, к повышению уровня ТТГ (на 17,8^ через 30 мин), АКТГ (до 217,3^ через 120 мин) и кортизола (до 159,9$ через 120 мин) в плазме крови и сопровождается изменением содержания аргининвазопрессияа как в ткани терморегуляторных структур мозга, так и в плазме крови. Трипсин-ингибитор (из сои) з указанной дозе приводит через 60 мин после внутривенного введения препарата наряду с выраженной гипертермией к повы-

AtC i П 3.0, I I

2.0 1.0

о -1.0

I О I 2 3 4 5 6 чао. I О I 2 3 час.

Рис. 2. Изменение температуры тела у крыс (А) и кроликов (Б) под влиянием трипсин-ингибитора (из сои) в условиях предварительного введения в организм салидилата натрия. I - введение ингибитора в систему желудочков мозга (100 ¡от); П - введение ингибитора в кровоток (0,3 мг/кг).

1 - контроль: бидист. вода + бидист. вода (п=Ю);

2 - салицилат натрия + бидист. вода (п=12);

3 - бидист. вода + трипсин-ингибитор (п=16);

4 - салицилат натрия + трипсин-ингибитор (п=16).

п - Число животных в опыте.

I (стрелка) - момент введения сатицилата натрия (300 мг/кг)

или бидист. вэды (в контроле). П (стрелка) - момент введения трипсин-ингибитора (из сои) или бидист. воды (в контроле).

шеншо (до 351,9$) в ткачи гипоталамуса и понижению (на 61,7$) в ткана продолговатого мозга у кроликов содержания иммунореак-тивного jb -эндорфина. Концентрация иммунореактивного метэнкефа-лина в гипоталамусе вначале (30 мин) возрастала (до 144,3$), а затем (через 60 мин) понижалась (на 43,9$) и била повышенной в течение всего эксперимента в продолговатом мозге.

Поскольку в условиях гипертермии, вызванной трипсин-ингибитором (из сои), как и при ПГЕ^-гиперторши, угнетается Функциональная активность адрснореактавных систем гипоталамической области мозга, то представляло интерес выяснить, но являются ли ПГБ, наряду с ^-эндорфином, возможным пусковым фактором в центральных механизмах ее развития. Результаты выполненных экспериментов дали основание полагать, что такая гипертермия является результатом центрального действия исследуемых ингибиторов, и ПГЕ в гипоталамусе не являются "медиаторами" наблюдаемой реакции, так как введение в желудочки мозга трипсин-ингибитора (из сои), как и СИС® , вызывает гипертермию, которая не предупреждается мепакрином, салицилатом натрия, не ослабляется Ca** и сопровождается в условиях нарастающей гипертермия понижением в ткани гипоталамуса концентрации ПГЕ.

Таким образом, результаты исследований позволяют заключить, что протеолитическае ферменты мозга .участвуя в центральных ней-ромедиаторнле и поптидергических механизмах терморегуляции и, соответственно, в регуляции функционального состояния ЦНС, при перегревания и пирогеналовой лихорадке.

ш.|щ .хшедяшата два дздедввдата .я.лтаг-одэдаайй шчшт

Учитывая, что в ЦНС выявлено наличие самостоятельной ренин-алгиотензиновой системы ( Ganten et all. , 1984; Pohl et all» , 1986; Shigematou et all» , 1986) и обнаружена высокая концентрация ангиотензинових рецепторов в гипоталамусе ( McKinley et all., 1987), а также имеющиеся сведения об участии ангиотензина II в регуляции температуры тела ( Shido et all. , 1985; Blatteia et all* , 1986), можно предположить, что в выявленных сдвигах пеп-твдгвдролазной активности тсрморегуляторних структур мозга при перегревании и пирогеналовой лихорадке может иметь значение изменение активности ренин-ангиотензиновой системы.

Результат« выполненных исследований подтвердили такое предположение. Как показали опитц, при кратковременно:.; перегревании животных, одновременно с повышением ректальной температуры, в ткани гипоталамуса возрастает активность ренина (на 56,6$ и 48,0$ через 30 и 60 мин) и понижается содержание аягиотекзика

I (на 21,1$ через 30 мин), а в условиях действия в организме пирогенат (СО ммО, приводящего х> гипертермии, содержание как алгиотеизппз I. так и активность ренина. снимается (на 59,7$ л 21,1$ соответственно). 3 ткани продолговатого мозга, действие внгиного тепла приводило к повинен:.,: (па 49,8$ через 30 мин), а действие я организме иароген.ч ; сопровождалось снижением (на 48,7$ через СО кия) активности р-лшиа. Полученные данные свидетельствуют о том, что перегревание приводит к усменню, а действие ¡шрогенала - к угнетения активности ренин-ангиотензиновой системы в центрах терморегуляция.

С целью выяснения роли ренин-ангиотензиновой системы мозга в центральных механизмах терморегуляции при перэгревании и пиро-геналогоП лихорадке было изучено влияние ангпотонзина II, введенного в желудочки мозга, на температуру тела животных и механизмы терморегуляции. Опыты показали, что введение апгпотеизипа

II или аигиотепзинамида в желудочки мозга крыс и кроликов в дозе соответственно 5 или 10 мкг значительно понижает температуру тела не только у интактних животных, что подтверждается данными O.Shido et all., (1935) и C.M.Blatteis et all. (1386), ко И в условиях развития у них ПГЕ^ и пирогеналовой гипертермии. Понижение температуры тела тавотных в результате центрального введения аигиотонзина II или аигиотеизиномида возникало вследствао усиления процессов теплоотдачи (вазодиллятация поверхностных сосудов, колапноэ) и ослабления теплопродукции (понижение количества потребляемого животными кислорода, снижение частоты сердечных сокращений и уровня НЭЖК в крови). Установлено, что центральное действие ангпотензинамида, наряду с изменениями в теплообмене, приводит к снижению содержания иммупореакттйгого р -эн-дорфина в. гипоталамусе и к кошиению в нем (функциональной активности адронореактивных системна также к повышению уровня АКТГ

в плазме крови.

Следовательно, центральное действие ангиотензшга II вызывает изменения содержания иммунореактивного р -ондорТина и метаболизма катсхоламанов в пшоталамнческой области мозга, которые

характерны для адаптирующихся и проявляющих устойчивость к перегреванию кивотных. Подтверждением этому служат данные опытов по изучении влияния центрального действия ангиотензина II на устойчивость крыс к воздействию внешнего тепла а холода, свидетельствующие о том, что в условиях холода (+4°С) животные быстрее переохлаждаются, а в условиях высокой (40—î2°C) внешней температуры перегревание кивотних, по сразнению с контролем, развивается с меньшей скоростью.

Таким ..образом синтезирующийся в мозге ангиотензян II можно рассматривать в качестве одного из возможных факторов устойчивости к перегреванию и эндогенного антипиреза. Повышение активности ренина и содержания ангиотензина I в гипоталамусе, наряду с понижением температуры тела в условиях действия на организм салицилата натрия свидетельствовало' в пользу такого предположения, а также давало, основание предположить, что повышение активности реникангнотензановой системы в центрах те р,¡ope гуля- . цик имеет вагдое значение в механизме жаропокижащего действия антипиретика.

Представляло интерес выяснить, имеет ли значение в терморе-гуляторных аффектах центрального действия ангиотензина II изменение активности тленно термочувствительных нейронов терморегу-ляторных структур мозга. Выполненные с этой целью опыты на кроликах показали, что ангиотензик II (5 мкг), введенный в желудочки мозга, стимулирует вызываемое повышением тестературы мозга при перегревании возрастание импульсной активности теплочув-ствительных нейронов медиальнопреоптической области гипоталамуса.

Следовательно, результаты выполненных биохимических и электрофизиологических исследований находятся, в соответствии с имеющимися в литературе данный ( story, Ziogaa , 1987; Аппар:ш, Каменская, 1988) о том, что ангиотензин II может не только изменять процесс высвобождения и обратного захвата НА, но и оказывать прямое модулирующее влияние па медиаторную чувствительность и активность нейронов ЦНС (Судаков и соавт., 1976; Аниси--моз, 1986).

С целью уточнения роли рения-ангиотеязияовой системы мозга в центральных механизмах терморегуляции при перегревании и пи-рогеиаловой лихорадке, нами в опытах ка крысах и кроликах было также изучено влияние высокой внешней температуры и пярогенаяа .

на температуру тела к некоторые показателя теплового обмена в условиях угнетения химическими веществами различных звеньев этой системы.

Опиты показал;:, что препарата, угнетающие активность ренин-ангнотепзянозоЯ-системы, способны нарушать разштае тер:орегу--ляторн:;х реакций организма на ле;:ст;>"о яыоокоП в:-:с:1-:сГ: тог.тпер©.-туры, но не пырогспада. Прекваргтелдоо згодсяло в яедудочкх мозг;, блока тора ангиотспзинозих рецепторов саралазина (20 мкг на крысу и 50 ш;г на кролика), как п лиг по' л тора ренина пепста-тинл А, ингибитора ангиотензанпрэврш^аичего фермента n -сукци-нзл-ь -лролкна аяв брадккккяц лотогщагтора С з дозе 5 ;.пг на крысу и Ю мкг на кролика способствовало перегреванию л ускоряло развитие гипертермия»

Таким образом, на оснога:::;:: подученных данных :.:с::лс заключить, что в центральных механизмах формировал:« ответно.5: термо-регуляторной реакции организма на действие высокой внешней температуры и пирогенала имеет значение состояние активности пел-тидгэдролаз мозга. Повышение активности ренин-ангнотеизиноБой системы, нейтральных и кислых пептздгидролаз (растворимая форма) в гипоталашческой области мозга играет важную роль в повышении устойчивости организма к перегреванию, а их угнетение -в развитии ппрогеналовой гипертермии.

ВЫВОДЫ

I. При перегревании или действии в организме пирогекала происходит перестройка обмена пептидов и катехоламинов, изменение адренореактивных свойств и активности ренинангиотенз;шовой системы гипоталамуса, что определяет совокупность эагТ,ег:торних терморегуляторных реакций, отличающихся по изменению показателей теплообмена, обмена белков и. липидов в терморегуляторах структурах мозга и плазмы крови, баланса гормональных систем. При кратковременной гипертермии, развивающееся в результате воздействия высокой внешней температуры, повышается содержание общего холестерина в гипоталамусе и продолговатом мозге и снижается его концентрация в липидах плазмы крови, ада: действах пирогенала происходит усиленная утилизация кз плазмы крозл тер-морегуляторными структурами мозга свободного аргдяхна. ~ри перегревании'понижается, а при. ппрогеналовой гипертермии тютига--ется активность ГГКС и системы гипоталамус - гипофиз - си то гад-

ная келеза.

2. В развитии сдвигов в эффекторных процессах и гормональных механизмах регуляции теплообмена при перегревании, характеризующихся угнетением теплопродукции, усилением процессов теплоотдачи и ведущих а повышении устойчивости .организма к действию высокой температуры, значительная роль принадлежит повышению активности адрено реактивных систем г;ноталамической области мозга. Изменения в активности адренореактивных систем поддерживаются активацией ренинаигиотензиновой системы, нейтральных

и кислых пептидгидролаз (общей и растворимой формы), снижением содержания р -эидорфина в гипоталамусе и увеличением концентрации свободного аргинина в плазме крови и спинномозговой жидкости.

3. Изменения теплообмена при пирогеналовой лихорадке, характеризующиеся интенсификацией энергетических процессов и угнетением процессов теплоотдачи в значительной степени является следствием понижения активности адренореактивных систем гипота-ламической области мозга, которое возникает в результате сдвигов в работе центральных пептидергическвх. механизмов, проявляются угнетением ренинангиотензиновоП система, нейтральных и кислых пептидгадролаз (растворимой Формы) и повышением содержания б -эндор|ина в гипоталамусе. Увеличение при этом концентрации простаглапдошов группы Е в спинномозговой жидкости» а также снижение содержания свободного аргинина в плазме крови и спинномозговой жидкости обеспечивает сохранение низкого уровня функциональной активности центральных х -адренорецепторов, входящих в антипаретическую систем..

4. Адренсргические механизма, мозга, участвуя в тормозных и активирующих нейронных системах, регулирующих теплообмен и активность ШС, являются обеими звеньями в процессах терморегуляции при перегревании и пирогеналрвой гипертермии. Угнетгшее влияние норадреналина на центральные механизмы, регулирующие сосудистый тонус и активность ГТКС, осуществляется через , л -ад- . ренорецепторы, а активирующее - через р> -адренорецепторы. Угне-таюцее влияние, норадреналина на центральные-механизмы, контролирую интенсивность термогенеза, реализуется через р -ад-ренорецепторы. :

5. Направленность изменений функциональной, активности X-и ¡ь -одренороактавних систем гапоталамическо'й области мозга

играет важную роль в формировании характера ответной терморе-гуляторной реакции организма на действие высокой внешней тейпе ратуры и пирогекала. Повышение активности центральных р -ад-ренореактавных систем играет значительную роль в возникновении изменений теплообмена при перегревании. Снижение.активности «¿-адренорецепторов мозга в условиях действия пирогекала или ПГР^, по-видимому, является одним из пусковых механизмов в цепи процессов, приводящих к повышению температуры тела.

6. Направленность а степень изучений активности центральных адронореактивных систем и:.". перегревании и пирогекаловэй лихорадке зависит от содержания /5 -эндорфана в галотаяамачес-кой области мозга. Снижение концентрации р -эндорряна а гипоталамусе при перегревании способствует повышению функциональной активности адренороактавнюг систем в этой области моэга с последующим угнетением теплопродукции и усилением процессов теплоотдачи и может, по-видимому, рассматриваться как адаптивное изменение. Повышение содержания р -эндорйяна в гипоталами-ческой области мозга способствует угнетению активности центральных «6 -адренореактивных систем с последующей интенсификацией процессов термогенеза и угнетением процессов теплоотдачи и является одним из факторов, обеспечивающих повышение температуры тела при действии в организме пярогеката.

7. 3 центральных нейрохимических механизмах формирования терморегуляторных реакций организма на действие высоко:; внешней температуры а пирогенала участвуют пептадгвдролазы мозга. Повышение активности ренинангиотензиновой системы, нейтральных и кислых пептадгвдролаз (растворимой формы) в гилоталамической области мозга играет важную роль в повышении устойчивости организма к перегреванию, а их угнетение - возникновении и развитии пирогеналовой гипертермии. Данные о понижении активности этих ферментативных систем при пирогеналовой лихорадке и о гилертер-мическом эффекте ряда ингибиторов протеиназ позвол:иги обосновать новый принцип создания экспериментальных моделей гипертермии.

8. В центральных механизмах терморегуляции в качестве регулятора активности нейромедиаторных систем мозга принимает участие ангаотензан II. Введение з желудочки мозга акгиотензина II сопровождается снижением содержания норадреналяла, р -зндор/И-ла и повышением функциональной активности <<. -адренореактивных систем в гипоталамусе и понижением температуру тела. Одной из

причин этих изменений является способность ангкотензина II стимулировать повышение импульсной активности теплочувствитель- • ных нейронов переднего гипоталамуса у кроликов в условиях перегревания.'

9. Ангиотензин II мозга пишется одним из факторов устойчивости к перегреванию и эндогенного антипиреза. Ангиотензин II, введенный в желудочки мозга, поникает температуру тела в условиях ПТЕ?- и пирогеналовой гипертермии, а также устраняет характерные для действия пирогенала изменения содержания норадренали-яа и ^-эддорфияа в гипоталавд ческой области. Вещества, угнетающие активность репинангиотензиновой системы при введении в желудочки мозга, нарушают развитие терморегуляторных реакций

на действие высокой внешней температуры, ускоряют развитие гипертермии и способствуют перегреванию.

10. Увеличение содержания холестерина в липидах гилоталами-ческой области мозга при перегревании, приводящем к гипертермии, является одним из факторов повышения резистентности организма

к действии высокой внешней температуры и в значительной степени обусловлено повышением функциональной активности центральных р -адренореактивних систем. Введение в желудочки мозга р -адре-ноблокатора пропраполола предупреждает развитие таких изменений на действие внешнего тепла, ускоряет развитие гипертермии и способствует перегреванию. • ,

11. В механизме действия салицилата натрия, приводящего к понижению температуры тела при пирогеналовой лихорадке, важную роль играет повышение активности оС -адренореактивних систем гипоталамической области мозга, возникающее под влиянием активации ренанангиотензиновой системы, нейтральных и кислых лвптид-гздролаз (растворимой формы), снижения содержания р -эндорфина . в гипоталамусе и простагландинов группы Е в спинномозговой жид-. кости.

12. Вмешательство з центральные нейрохимические процессы с помощью фармакологических веществ, способных направленно изш-. пять активность пептидгидролаз ^¿озга, содержание нейропептидов а аминокислот, может быть использовано в качестве эффективного средства коррекции процессов теплообмена, эндогенного антипире-за при лихорадке и повышения устойчивости организма к действию высоких температур и пирогенных факторов..

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Висмонт Ф,И. О роли бета-адрснореактнвных систам мозга в регуляция липидпого и энергетического обмена в условиях гипертермии // Регуляция нейромедиаторшяс механизмов деятельности мозга. - Минск. • I9C2. - C.I2I-I2G.

2. Висмонт О .'Л. О роли бета-адзенорсактивиых систем мозга в регуляции липадного и энергетического обмена при перегревании // ВшшеЛвао тоорогачсскяе 'i практические проблемы терморегуляции: Тез. дота. I Всссоюз. ко:!;, по терморегуляции, - Новосибирск, 1332. - С.170.

3. Висмонт Ф.И. Влияние высокой внешне"; температурь.' на некоторые показатели липидпого обмена и функциональной активное т:; адрслсреактимгах систем гипоталамуса у крыс // Тез. дом. У1 съезда Белорусского физиологического общества им. И .П .Павлова.-Минск, 1983. - С.47-48.

4. Висмонт Ф.И. 0 роли норадреналина в центральных механизмах терморегуляции // Тез. дота. 1У съезда фармацевтов, фарка-кологов и токсикологов БССР. - Минск, 1983. - С.120.

5. Баларкевач H.A., Висмонт Ф.И. Фармакологический анализ роли нойромедиаториых систем организма в регуляции обмена сложных липидол при перегревании // Тез. докл. ЗУ съезда фармацевтов, йармакологоз и токсикологов БССР. - Кинск, 1983. - С.112-113.

6. Гуран З.Н., Висмонт Ф.И., Царюк В.В. О роли центральных •с-^дренорсцепторов в механизме гилертермаческого действия про-стагландяна Ео // Фармакология- и токсикология. - 1984. - Т.4?, JfG. - С.29-32"

7. Гурии В.Н., Висмонт Ф.И., Царюк В.В., Фпттон А. Анализ механизмов центрального действия пирогенных веществ на терморегуляцию// Физиология а фармакология терморегуляции. - Минск, 1985. - С.32-44.

0. Висмонт O.K. Центральные адренергические механизм!! тет>-морегуляторпых реакций в условиях воздействия высокой внешней тешератури // Физиология, и фармакология терморегуляции. -Минск, 1985. -С.44-54..

9. Висмонт Ф.И. Роль центральных адреиореактивных систем о регуляции температуры тела у крыс при охлаждения, пер^грепа-нии и проотагландиновсл гипертермии// Механизма адаптацек и

компенсации, методы кх тренировки, контроля и стимуляции: Тез. докл. респ. объед. конф. патофизиологов, врачей спорт, медицины и ЛЖ. - Минск, 1985. - С.75.

10. Висмонт Ф.И., Кубарко А.И. Центральные адренергические механизмы регуляции содержания холестерина в липидах мозга при адаптации к перегреванию // Механизм адаптации и компенсации , методы их тренировки, контроля и стимуляции: Тез. докл. респ. объед. конф. патофизиологов, врачей спортивной медицины и ЛФК. -Минск, 1985. - С.75-7$.

11. Висмонт Ф.И., Башаркевич Н.А. Центральные адренергические и холанергические механизмы регуляции обмена липопротеидов и уровня НЭЖК в крови крыс при перегревании // Центральные механизмы нейрогуыораяьной регуляции функций в норме и патологии.-Минск, "Наука и техника", 1985. - С.176-186.

12. Висмонт Ф.И., Гурин В.Н. Гипертермический эффект ингибитора трипсина у крыс и кроликов // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1985. - Т. 100, ЯП. - С.543-544.

13. Гуран В .К., Висмонт ©.И. Способ моделирования гипертермии // Авторское свидетельство .4 1196943. - В.И. ¡1 45 , 07.12, 1985.

14. Висмонт Ф.И. Об участии альфа- и бета-адренореактивных систем мозга в регуляции метаболических процессов и кардиовас-кулярных реакций у крыс // ХП Всесоюз. конф. по физиологии и патологии кортико-висцеральных взаимоотношений, посвященная ЮО-летшо со дня рождения акад. К.М.Быкова: Тез. докл. и науч. сообщений. - "Наука", Ленингр. отД-е, 1986. - С.87.

15. Висмонт Ф.И. Об участии ренин-ангиотензиновой системы мозга в центральных механизмах терморегуляции при лихорадке // Материалы У1 Всесоюз. конф. по физиологии вегетативной нервной системы. - Ереван, 1986. - С.64.

16. Висмонт Ф.И. Об участии сериновкх протеинах в центральных механизмах терморегуляции при лихорадке // Важнейшие теоретические и практические проблемы терморегуляции: Тез. докл. II Всесоюз. конф. по терморегуляции. - Минск, 1986. - С.55. ,

17. Висмонт Ф.И., Белугпн С.Н. Об участии адренореактивных систем гипоталамуса в механизме антипиретического действия кор-тико?рош-ша // Важнейшие теоретические и практические проблемы, -терморегуляции: Тез. докл. II Всесоюз. конф. по терморегуляции.-Глнск, 1986. - С.56.

18. Courlne V..Viamont P. Effect of sodium ealioylate on the hyperthermic reeponoe to intracorobrovontricular(iov) injection of trypain inhlbltor//Nlnth congress of the Poliah pharmacological aocietyiAbstraots. - Lublin Poland, 1986. - P.18.

1У. Висмонт 5J*., Гурки B.H, Способ моделирования гипертермии // Авторское свидетельство Ji 1343438. - 13.'Л. Н 37, 07.ГО.1987.

20. Висмонт Ф.И. Об участии серанових протеиназ мозга в механизмах регуляции функционально;) активности адренореактив-них саст;;м в торморегулятортж центрах // Молекулярные механизмы регуляции метаболических процессов: Сборник кратких науч. сообщений биохимиков Белорусской, Литовской, Латвийской а Эстонской Советских Социалистических Республик. - Минск, 1987. -С.142-143.

21. Висмонт О.И., Башаркович И.А., Богрицовач Ю.И., Касап

B.А. 0 роли центральных адрено- и холинорвактивных систем в механизмах регуляции обмена липопротоидов крови при гипертермия // ХУ съезд Всесоюз. физиологического об-ва им. И.П.Павлова: Тез. науч. сообщений. - Л.: "Наука", 1976. - Т.2. - С.59-60.

22. Висмонт О.И. Центральные адренергические механизмы регуляции активности гипоталомо-гипофизарно-адреналовой системы (ГТАС) у крыс при перегревании // Фундаментальные достижения иойрохимии - медицине: Тез. докл. конф. по биохимии нервной системы. - Горький, 1937. - С.178.

23. Висмонт О.И. Изучение рола калликреин-кишшовой и ро-нинангиотензановоЛ системы мозга в центральных механизмах терморегуляции при лихорадке // Топ. докл. УП съезда Белорусского физиологического об-ва им. И.П.Павлова. - Витебск, 1907. -

C.-52-43.

24. Висмонт Ф.И., Кубарко А.И. О роли центральных .¿-пд-ренороцепторов п механизме антипиретического действия салицила-та натрия // Фармакология и токсикология. - 1987. - Т.50, ХЛ,-С. 122-123.

25. Висмонт О.И., Кубарко А.И. К механизму антипаретичсско-го действия аргинина солянокислого в условиях экспериментальной лихорадка // Фармакология и научно-технический прогресс: Тез. докл. У1 Всесоюэ. съезда Фармакологов. - Ташкент, 1028. -С.70.

26. Gourino V.N.,Vismont F.X. Effects of E.ooli endotoxin, tryain inhybitor end angiotensin II on the level of cyolio AMP and BMP, monoamine? and prostaglandins E in the hypothalamus and on body temperature in rate and rabbits//Abstracts of 7th general meeting of the curopean society for neuroohemistry. -Goteborg, Swedon, 1988. - 1415» - P.118.

27. Gourine V.U.,Vlamont F.I.,Kasep V.A. Effeota of E.ooli endotoxin and trypsin-inhybitor on metabolism in the hypothalamus and fatty acid spectrum of plasma lipoproteins 1л rabbits and rate//XIY Intemat.oongr.of bioohemistryjAbstraots. - Pro-ha, 1988. - Th.690. - P.233.

28. Висмонт Ф.И. Центральное действие ангиотенэинашда на терморегуляцию у крыс и кроликов // Фармакология и токсикология природных и синтетических соединений: Тез. докл. У съезда фармацевтов, фармакологов и токсикологов. - Минск, 1989. -

С.25-26.

29. Висмонт Ф.И., Гомолко Н.Н. О роли р -эндор^ина в центральных механизмах терморегуляции // Фармакология и токсикология природных и синтетических соединений: Тез. докл.

У съезда фармацевтов, фармакологов и токсикологов. - Минск, 1989. - С.26.

На правах рукописи

ШОШГ Франтишек Иьшович

удк 612.591.57.624

ilез îтрастыilíe 1121го:сагшащ механизмы 'гешорегуля! i®! ига перкгреваши и

нирогешовои лихорацкв 14.00.17 Нормальная физиология

АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степоии доктора медицинских наук

Подписано в печать 20.07.89г. AT H III77

Формат 60x84 I/I6 Тираж 100 экз. Заказ X Я002.

Бесплатно

Институт физиологии АН БССР, 220725, Минск, ул. Академическая, 28.

Отпечатано на ротапринте типографии УД СЫ БССР, ишь I9G9 г. 220010, Минск, ул. Советская, II.