Автореферат и диссертация по медицине (14.01.14) на тему:Биохимические изменения аллотрансплантатов компактной и губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти (экспериментальное исследование)
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.01.14
Автореферат диссертации по медицине на тему Биохимические изменения аллотрансплантатов компактной и губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти (экспериментальное исследование)
Нагиева Сайда Эйзудиновна
БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ АЛЛОТРАНСПЛАНТАТОВ КОМПАКТНОЙ И ГУБЧАТОЙ КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ ЗАМЕЩЕНИИ ДЕФЕКТОВ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ
(экспериментальное исследование)
14.01.14 - стоматология, 03.01.04 - биохимия
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Краснодар 2010
- 9 ДЕК 2010
004616135
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Дагестанская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО ДГМА Росздрава)
Научные руководители: кандидат медицинских наук, доцент
Чудинов Александр Николаевич доктор медицинских наук, профессор Быков Илья Михайлович
Официальные оппоненты: кандидат медицинских наук, профессор
Еричев Валерий Васильевич доктор медицинских наук Сторожук Александр Петрович
Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Ставропольская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», г. Ставрополь
Защита состоится « в часов на заседании
диссертационного советгС-Д 208.03^02 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО КГМУ Росздрава) (350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. [861] 262-73-75).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Росздрава. Автореферат разослан
а/А г.
/
Ученый секретарь диссертационного совета Д 208.038.02, профессор Л.А. Скорикова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования. Трансплантация органов и тканей остается актуальной проблемой современной медицины и, в частности, восстановительной челюстно-лицевой хирургии. Как известно, дефекты нижней челюсти различной этиологии приводят не только к деформации и обезображиванию лица, но и к значительным нарушениям жевательной функции, что требует вмешательств с использованием костной пластики [H.A. Плотников 1993, 2003; Н.Е. Сельский, 2000; A.C. Панкратов и соавт., 2001; J.E. Lee et al., 2005; S. Imasato et al., 2006; P. Behrens et al., 2007].
Спорным остается вопрос оценки способности различных по виду костных трансплантатов в разные сроки после операции стимулировать репаративные процессы [Г.И. Лаврищева, 1999, 2006; В.Ф. Куцевляк и соавт., 2005; R. Nicholas et al., 2006; S. Scheele et al., 2007].
Вопрос о состоянии трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти решался разными авторами в основном путем клинических наблюдений, рентгенологических и морфологических исследований репаративных процессов в костной ткани после пересадки различных по характеру и виду трансплантатов [H.A. Томилина и соавт., 2005; A. Joshi, 2004; Е. Leroukel et al., 2004; G. Lansi et al., 2005]. Что же касается метаболизма в самом трансплантате, биохимических превращений, лежащих в основе морфологических и функциональных процессов, протекающих в пересаженной костной ткани и обеспечивающих ее жизнеспособность и эффективность приживления и перестройки трансплантата, то эти вопросы до настоящего времени исследованы недостаточно. В то же время состояние обмена в самом трансплантате, его энергетические ресурсы и ферментные системы, определяющие жизнеспособность трансплантата, позволяют судить об эффективности процесса пересадки костной ткани. Они и являются достаточно информативными критериями эффективности того или иного метода трансплантации, позволяющими в полной мере дать оценку степени приживления или гибели трансплантата и вскрыть механизмы его перестройки
[Ю.А. Петрович, В.К. Леонтьев, 1994; Ю.А. Петрович, Т.П. Вавилова, И.Н. Марокко, 2001; И.П. Ермакова и соавт., 2004; М. Goldberg et al., 2005; I. Pechan et al., 2008].
В связи с изложенным, представляет интерес исследование динамики изменения важнейших биохимических показателей, в частности содержания АТФ и других адениловых нуклеотидов, креатинфосфата, неорганического фосфата, молочной кислоты, гликогена и глюкозы, а также активности пусковых ферментов их превращений в регенерирующих тканях после трансплантации. Интерес к данной проблеме еще более возрастает при трансплантации костной ткани, так как при этом резко нарушается углеводный обмен, и создаются неблагоприятные условия для использования и утилизации гликогена и глюкозы, как для энергетических, так и пластических целей [И.А. Пронченко и соавт., 2005; N. Komerik et al., 2005; J.P. Rake et al., 2006].
Цель исследования. Выявить особенности протекания метаболических процессов в костных аллотрансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте.
Задачи исследования:
1. Исследовать особенности изменений рентгенологической и морфологической картин костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти различными по виду и характеру трансплантатами (губчатой и компактной костными тканями) и определить информативность этих показателей для оценки репаративного костеобразования.
2. Изучить особенности течения биохимических процессов в регенерате костной ткани в процессе репаративной регенерации в различные сроки после аллотрансплантации и определить информативность этих показателей.
3. На основании полученных результатов разработать практические рекомендации для дифференцированного использования различных по характеру и виду костных аллотрансплантатов для замещении дефектов нижней челюсти.
Научная новизна. Впервые изучены особенности биохимических процессов, происходящих в аллотрансплантатах компактной и губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти и установлены параллели между биохимическими, рентгенологическими и морфологическими изменениями при костной трансплантации, свидетельствующие о том, что исход операции пересадки кости и сроки репаративного костеобразования зависят от вида используемого трансплантата.
Получены новые данные о содержании гликогена, глюкозы, креатинфосфата, неорганического фосфата, молочной кислоты, активности амилазы, гексокиназы при аллотрансплантации губчатой и компактной костной ткани в динамике после пересадки, имеющие существенное значение для определения обеспеченности энергетическим и пластическим материалом репаративных процессов в пересаженной костной ткани.
Установлено повышение содержания гликогена, глюкозы и снижение содержания молочной кислоты, креатинфосфата и неорганического фосфата, снижение активности амилазы и гексокиназы в костных аллотрансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти, причем эти изменения более выражены в трансплантатах из компактной костной ткани по сравнению с трансплантатами из губчатой кости.
Практическая значимость работы. Разработан и теоретически обоснован комплекс биохимических показателей, который может быть использован как эффективный критерий оценки состояния энергетических систем жизнеобеспечения костных трансплантатов и жизнеспособности пересаженной костной ткани в различные сроки послеоперационного периода. Полученные в работе данные расширяют имеющиеся представления о биохимии костной трансплантации.
Изучены и установлены параллели между биохимическими показателями, рентгенологическими и морфологическими изменениями, свидетельствующие о том, что исход операции пересадки кости и сроки костеобразования при замещении дефектов нижней челюсти зависят от вида и характера
трансплантата. Это даёт возможность по-новому решать вопросы практической медицины в области трансплантации костей при дефектах челюстей.
Полученные в диссертации результаты используются в учебном процессе Дагестанской государственной медицинской академии при чтении лекций и проведении практических занятий по клинической биохимии и хирургической стоматологии, а также в научном и учебном процессах Дагестанского государственного университета. Результаты работы вошли в учебное пособие «Биохимия тканей полости рта» (утверждено УМО РФ; Махачкала, 2009 г.).
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Установлено, что в процессе перестройки костных аллотрансплантатов происходят значительные изменения исследуемых биохимических показателей в зависимости от вида пересаженной кости (компактная или губчатая). При этом биохимические изменения в большинстве случаев коррелируют с рентгенологическими и морфологическими изменениями в исследуемых костных трансплантатах.
2. Установлено, что в костных аллотрансплантатах спустя 15-30 суток после пересадки происходит существенное повышение содержания гликогена и глюкозы, а также снижение активности ключевых ферментов их метаболизма -гексокиназы и амилазы. В компактной костной ткани даже спустя два месяца после операции пересадки содержание гликогена, глюкозы и активность исследуемых ферментов не достигают показателей контроля.
3. Показано, что рентгенологически и морфологически процессы перестройки и замещения пересаженной костной ткани губчатого и компактного строения происходят однотипно, но завершаются они быстрее и совершеннее при трансплантации губчатой костной ткани.
4. Установлено, что в аллотрансплантатах в ближайший послеоперационный период происходит существенное снижение количества неорганического фосфата, креатинфосфата, молочной кислоты, причем эти изменения более выражены в трансплантатах из компактной костной ткани.
Апробация результатов исследования. Основные положения работы представлялись и обсуждались на международной научной конференции «Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы» (Махачкала,
2006); международной научной конференции «Стоматология и челюстно-лицевая хирургия: современные технологии, новые возможности» (Махачкала,
2007); межвузовской научной конференции «Фундаментальные проблемы морфологии» (Махачкала, 2007); международной Пироговской научной конференции РГМУ (Москва, 2009, 2010); III международном молодежном медицинском Конгрессе (Санкт-Петербург, 2009); межрегиональной научной конференции «Здоровье молодежи и сохранение трудового потенциала России» (Пермь, 2009); научной конференции, посвященной 25-летию кафедры стоматологии ФПК ДГМА (Махачкала, 2010); научной конференции, посвященной 45-летию стоматологического факультета ДГМА (Махачкала, 2010); Всероссийской научной конференции хирургов, посвященной 90-летию со дня рождения чл.-корр. АМН СССР Р.П. Аскерханова (Махачкала, 2010).
Публикации. По материалам данного исследования опубликовано 13 работ, 4 из них в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 275 источников, из них 164 отечественных и 111 зарубежных. Работа изложена на 149 страницах компьютерного текста, содержит 18 таблиц и 15 рисунков.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследования проведены на 74 половозрелых беспородных собаках в возрасте 5-6 лет, средней массой 10-15 кг. В искусственно созданный дефект в области тела нижней челюсти пересаживался аллотрансплантат из компактной или губчатой костной ткани. В качестве трансплантата компактной кости использовали кортикальную пластинку тела нижней челюсти, взятую во время
создания искусственного дефекта, в качестве губчатого - гребень подвздошной кости. Операцию пересадки костной ткани проводили с соблюдением всех правил асептики и антисептики [Т.Г. Робустова, 2001; P.C. Османов и соавт., 2006]. Аллотрансплантация и все последующие исследования: биохимические, рентгенологические и морфологические проводились в сериях с компактной и губчатой костными тканями. Часть фрагмента нижней челюсти, содержащей трансплантат, фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, декальцинировали трилоном Б и заливали в целлоидин. Полученные срезы толщиной 10-15 мк окрашивали гематоксилин-эозином и нитрофуксином по Ван-Гизону. Рентгенографию производили на дентальном аппарате «Уран-70» с фокусным расстоянием от объектива 30 см при экспозиции 1-1,5 сек. Контролем во всех исследованиях служила здоровая костная ткань, взятая из тех же участков кости, что и трансплантат.
Экспериментальные животные были разделены на 3 группы. 1 группа. Контроль (10 интактных животных); 2 группа. Аллотрансплантация губчатой костной ткани при замещении образованного дефекта тела нижней челюсти (32 животных); 3 группа. Аллотрансплантация компактной костной ткани при замещении образованного дефекта тела нижней челюсти (32 животных). Исследования проводились через 7, 15, 30, 45 и 60 суток после операции пересадки.
Для изучения биохимических показателей (кроме активности ферментов) участок челюсти, содержащий трансплантат, после забоя животного тотчас погружался в сосуд с жидким азотом. Фиксация ткани в жидком азоте полностью останавливает ферментативные процессы и позволяет исследовать биологические субстраты весьма близко к прижизненному состоянию.
Определение содержания АТФ и других адениловых нуклеотидов проводили методом ионообменной хроматографии на колонке со смолой Дауэкс 1x8, 200-400 меш и рассчитывали в мкмоль на 1 г ткани, используя молярные коэффициенты экстинкции [М.М. Киреев и соавт., 1979; Э.Р. Нагиев, 2001]. Креатинфосфат определяли по нарастанию неорганического фосфора в
кислой среде в присутствии молибденовокислого аммония и выражали в мкмоль на 1 г ткани [Т.Л. Алейникова и соавт., 2002]. Содержание лактата определяли лактатдегидрогеназной реакцией по образованию НАДН+Н+ и выражали в мкмоль на 1 г ткани [Н.Д. Ещенко, 1988]. Неорганический фосфат определяли колориметрически после осаждения магнезиальной смесью по Фиске-Суббароу с заменой эйконогена аскорбиновой кислотой [В.П. Скулачев, 1962] и выражали в мкмоль на 1 г ткани.
Определение содержания гликогена и глюкозы проводили в безбелковом фильтрате колориметрическим методом и выражали в мг% [В.А. Вилкова, 1988]. Активность амилазы определяли по ее способности гидролизовать гликоген и выражали в мг гидролизованного гликогена на 1 мг белка [Т.Т. Березов и соавт., 1976]. Фосфорилазную активность определяли по количеству связываемого при расщеплении гликогена неорганического фосфата [В.П. Скулачев, 1962] и выражали в мкг на 1 мг белка. Активность гексокиназы определяли по Лонгу [A.C. Шпигель, 1975] и выражали в мкг фосфорилированной за 20 мин инкубации глюкозы на 1 мг белка. Белок в пробах определяли микробиуретовым методом [Г. А. Кочетов, 1989]. Результаты исследований обрабатывали методами вариационной статистики [С. Гланц, 1999; О.Ю. Реброва, 2002], с использованием компьютерной программы «Statistika V.5.5A».
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Во всех сериях экспериментов у животных в первые 2-3 суток после пересадки в области операционного поля отмечалась небольшая отечность мягких тканей. При пальпации подчелюстные лимфатические узлы были увеличены. На 7 сутки эти явления стихали и исчезали, заживление раны происходило первичным натяжением. При проведении трансплантации губчатой кости отечность была более выражена и держалась несколько продолжительнее, чем в сериях с компактной костной тканью. Рентгенологически спустя 30 суток после операции трансплантации,
определяются первые признаки репаративных процессов: контуры образованного дефекта нижней челюсти становятся нечеткими и неровными, прозрачность понижена.
Рентгенологические исследования свидетельствуют, что при трансплантации компактной кости процесс перестройки и замещения был сравнительно затяжным. Первые признаки перестройки определялись через 30 суток после пересадки и характеризовались образованием первичной мозоли, сглаживанием краев трансплантата и костного ложа реципиента. В компактной кости (рис. 1А) отчетливо определяются процессы перестройки трансплантата и замещение его регенератом. Отмечается слияние границ трансплантата и краев образованного дефекта. Происходит замещение трансплантата вновь образованной костной тканью. Имеются явления остеопороза. В трансплантатах из губчатой кости начальные признаки резорбции и репаративные процессы костной ткани определяются к концу второй недели. Через 30 суток после операции пересадки трансплантата губчатой кости отмечается замещение трансплантата вновь образованной костной тканью (рис. 1Б). Через 45 суток после трансплантации определяются более выраженные репаративные процессы, контуры становятся округлыми, видно образование костной мозоли. Кроме того, рентгенологически определяются отчетливые процессы резорбции трансплантата и замещение его вновь образованной костной тканью. Контуры аллотрансплантата и послеоперационного дефекта определяются с трудом, выявляется образование костной мозоли.
Спустя 60 суток после трансплантации отмечается замещение трансплантата вновь образованной костью, структура которой во многом сходна с костной тканью нижней челюсти реципиента. На рентгенограмме после трансплантации компактной кости (рис. 1В) границы определяются с трудом из-за костного сращения между трансплантатом и ложем реципиента. В области пересадки отмечается плотность костной ткани, характерная для компактного строения.
На рентгенограмме нижней челюсти собаки через 60 суток после операции пересадки трансплантата губчатой кости (рис. 1Г) имеет место замещение трансплантата вновь образованной костной тканью с признаками продолжающейся его перестройки. Рентгенологически определяется полное замещение трансплантата совершенной костной структурой. Границы между трансплантатом и ложем реципиента практически неразличимы. Трансплантат полностью перестроился и заместился новообразованной костной тканью.
Что касается морфологической картины, то во всех сериях опытов можно выявить как ряд общих изменений, так и некоторые отличия, связанные с видом трансплантата и его структурой. Так, начальные признаки репаративной регенерации при замещении дефекта нижней челюсти трансплантатом компактной кости проявляются позже по сравнению с губчатой и определяются образованием клеточно-волокнистой ткани на 7-14 сутки после пересадки. Начало образования незрелой костной мозоли между трансплантатом и костным ложем реципиента определяется спустя 15 суток после трансплантации. Через 30 суток после операции пересадки трансплантата компактной кости (рис. 2А) происходит приживление трансплантата к костному ложу реципиента посредством образования незрелой костной мозоли. Образование костной мозоли происходит в участке соединения аплотрансплантата с материнским ложем.
При аллопластике губчатой костной ткани начало репаративных процессов определяется на 7 сутки после операции и характеризуется умеренной пролиферацией клеток остеобластов со стороны периоста и эндоста на фоне слабой лимфоидной инфильтрации. Через две недели наблюдается образование незрелой костной мозоли, которая спустя 30 суток после пересадки превращается в зрелую костную мозоль (рис. 2Б). Обнаруживаются мелкие участки костной ткани трансплантата среди зрелой костной мозоли. В трансплантате просматриваются остеоциты, наблюдается усиленная пролиферация остеобластов, которая осуществляется со стороны периоста. В костном ложе реципиента следы значительной перестройки костной ткани.
Спустя 45 суток после операции пересадки аллотрансплантата происходит плотное сращение трансплантата с костным ложем реципиента посредством обильно васкуляризованной вновь образованной костной тканью примитивного строения. Новообразованная кость интимно спаяна с поверхностью трансплантата. Линия соединения неровная с наличием впадин и изгибов. Однако в эти сроки видны еще широкие гаверсовы каналы, заполненные кровеносными сосудами в просвете. Вокруг гаверсовых каналов прослеживается четкий рисунок с наличием остеоцитов. Со стороны периоста происходит усиленная пролиферация клеточно-волокнистой ткани, врастающей в трансплантат.
Через 60 суток после пересадки наблюдается замещение трансплантата вновь образованной костью, сохраняющей черты незрелости. Границы аллотрансплантата как компактной, так и губчатой костной ткани определить невозможно вследствие замещения ткани трансплантатов вновь образованной костью с некоторыми признаками её незрелости в виде наличия широких костномозговых пространств, заполненных кровеносными сосудами (рис. 2 В,
Г).
В костной ткани ложа реципиента наблюдается множество базофильно окрашенных линий склеивания, являющихся следствием перестройки костных структур. При аллотрансплантации компактной кости имеет место плотное спаяние трансплантата с материнским ложем посредством образования зрелой костной мозоли. В случае аллотрансплантации губчатой костной ткани происходит плотное сращение трансплантата с костным ложем реципиента с помощью зрелой костной мозоли широкопетлистого строения, из-за чего границы трансплантата различаются с трудом.
Таким образом, рентгенологические и морфологические исследования показали, что во всех сериях экспериментов конечным результатом пересадок различных по виду трансплантатов является резорбция и замещение дефектов нижней челюсти пересаженной костной ткани. Однако
при пересадке аллогенной компактной кости сроки приживления увеличены, а перестройка и замещение вновь образованной костью завершается позднее по сравнению с губчатой костной тканью. Через 60 суток после операции наблюдается активная перестройка трансплантата, но полного замещения его в компактной кости все еще не происходит.
Анализ полученных результатов свидетельствует, что аллотрансплантация губчатой и компактной кости сопровождается существенными биохимическими изменениями в процессе регенерации. В частности, заметно нарушается содержание и использование основных энергетических ресурсов костной ткани гликогена и глюкозы в зависимости от характера используемой кости - губчатая или компактная (табл. 1).
Так, после аллотрансплантации губчатой и компактной кости наблюдается значительное накопление в трансплантатах углеводных энергетических ресурсов (гликогена и глюкозы), максимальное увеличение которых происходит через 15-30 суток после операции пересадки. В дальнейшем, спустя 2 месяца после пересадки, содержание гликогена и глюкозы в трансплантате губчатой кости практически нормализуются.
Что касается пересадки компактной кости, то при аллогенной ее трансплантации отмечались некоторые особенности, хотя сама направленность изменений носила тот же характер. Так нарастание содержания гликогена и глюкозы в пересаженной ткани в одни и те же сроки исследований происходило в большей степени, а нормализация затягивалась и не наступала даже спустя два месяца после пересадки.
В отличие от губчатой кости, содержание гликогена и глюкозы в трансплантате из компактной костной ткани через 60 суток после операции пересадки достоверно превышают контроль более чем на 60%.
При исследовании активности ферментов обмена гликогена и глюкозы в костных аллотрансплантатах, в частности, фосфорилазы, амилазы, гексокиназы и при сравнении их активностей с содержанием соответствующих субстратов отмечаются интересные закономерности.
Таблица 1
Динамика содержания гликогена и глюкозы в аллотрансплантатах костной ткани
(М ± т; мкмоль на 1 г ткани)
Серии опытов Губчатая кость Компактная кость
Гликоген Глюкоза Гликоген Глюкоза
Сутки после аллотрансплантации Контроль 0,34±0,02 0,118±0,005 0,25±0,02 0,089±0,011
7 суток 0,57±0,02* 0,209±0,008* 0,38±0,02* 0,163*0,011 ♦
15 суток 0,59±0,02* 0,228±0,009* 0,52±0,03* 0,202±0,024*
30 суток 0,58±0,02* 0,216±0,007* 0,48±0,02* 0,188±0,017*
45 суток 0,54±0,02* 0,182±0,009* 0,46±0,02* 0,166±0,013*
60 суток 0,46±0,02 0,165±0,007 0,40±0,02* 0,144±0,012*
Примечание: здесь и далее: *р < 0,05
Следует отметить, что вопрос о костной фосфорилазе изучался и ранее многими авторами в различных аспектах жизнедеятельности костей, но до настоящего времени остается дискуссионным [В.П. Торбенко, 1993; Б.С. Касавина и соавт., 2004; А.Н. Чудинов, 2006].
Нами активность фосфорилазы определялась как в интактной кости, так и в костной ткани в различные сроки после пересадки в дефект тела нижней челюсти. Однако статистически достоверных изменений активности фосфорилазы не выявлено.
По-видимому, это может быть объяснено либо малым содержанием фермента в исследуемых костных тканях, либо трудностью извлечения фосфорилазы из костной ткани, либо, наконец, наличием веществ, тормозящих активность фермента. Последнее обстоятельство следует постоянно принимать во внимание, ибо в экстремальных условиях пересадки ткани такое ингибирование приобретает особое значение. Несомненно, эти вопросы требуют своего дальнейшего разрешения. Во всяком случае, полученные данные позволяют заключить, что при перестройке костных тканей в условиях их аллотрансплантации в дефект тела нижней челюсти, основное внимание для
расшифровки судьбы гликогена следует обратить на амилолитический путь его распада, обеспечиваемый ферментом амилазой. Это согласуется с мнением и других авторов, указывающих на эту особенность обмена костной ткани [A.M. Белоус и соавт., 2002; И.П. Ермакова и соавт., 2004; Б.С. Касавина и соавт., 2007; Э.Р. Нагиев и соавт., 2007; B.R. Robison, 2006; М. Rix et al„ 2008].
Как показали проведенные исследования, в отличие от содержания важнейших энергетических субстратов углеводного обмена гликогена и глюкозы, активности ферментов их утилизации, в частности, амилазы и гексокиназы на многих этапах аллотрансплантации существенно снижаются по сравнению с показателями контрольной группы животных (табл. 2).
Максимальное снижение активности амилазы (54% и 60%) и гексокиназы (41% и 55%) по отношению к контролю в компактной и губчатой костной ткани соответственно наблюдается спустя 15 суток после пересадки (рис. 3,4).
Следовательно, обнаруженные сдвиги в биохимических изменениях субстратов - глюкозы и гликогена - в большинстве случаев коррелируют с изменениями активности ферментов их превращений (гексокиназы и амилазы). При анализе динамики активностей амилазы и гексокиназы, а также сопоставлении их с динамикой содержания гликогена и глюкозы в трансплантатах, обращает на себя внимание то обстоятельство, что в сроки наибольшего содержания в тканях гликогена и глюкозы активность ферментов резко угнетена и, наоборот, значительное и прогрессирующее повышение активности ферментов сопровождается и существенным снижением уровня полисахарида и глюкозы в исследуемых трансплантатах.
Нормальное (исходное) содержание гликогена и глюкозы в аллотрансплантатах наблюдается лишь тогда, когда устанавливается и исходная активность ферментов амилазы и гексокиназы. Следовательно, отмечаемое высокое содержание гликогена и глюкозы в тканях трансплантата в первые две недели после операции является результатом инактивации ферментов, обеспечивающих пусковые механизмы утилизации и использования этих важнейших углеводных ресурсов костной ткани, что, естественно,
свидетельствует о значительном снижении возможностей ее жизнеобеспечения. Отсюда также следует, что уже спустя два месяца после операции в претерпевшей перестройку костной ткани, особенно губчатой, содержание гликогена и глюкозы и возможности их использования в энергетических и пластических целях полностью восстанавливаются.
Таблица 2
Активность амилазы и гексокиназы в аллотрансплантатах костной ткани в различные сроки после пересадки
(М±т; в мг/белка)
Серии опытов Губчатая кость Компактная кость
Амилаза Гексокиназа Амилаза Гексокиназа
Сутки после аллотрансплантации Контроль 0,286±0,019 7,72±0,27 0,156±0,012 4,12±0,43
7 суток 0,194±0,011* 5,48±0,22* 0,098±0,006* 2,72±0,23*
15 суток 0,172±0,010* 4,17±0,19* 0,084±0,004* 1,69±0,09*
30 суток 0,206±0,012* 4,70±0,22* 0,110±0,007* 1,97±0,10*
45 суток 0,234±0,015 5,38±0,23* 0,115±0,008* 2,51±0,18*
60 суток 0,272±0,017 7,18±0,25 0,135±0,009 3,13±0,25*
Закономерной особенностью наблюдающихся биохимических изменений в трансплантатах как губчатой, так и компактной костной ткани является существенное снижение содержания лактата, креатинфосфата и неорганического фосфата (табл. 3).
Так, содержание креатинфосфата через 15 суток после трансплантации падает до 49% и 42% соответственно в губчатой и компактной кости по сравнению с контролем. Спустя 30 суток низкое содержание креатинфосфата сохраняется, а через 45 суток наблюдается тенденция к повышению его содержания и спустя 60 суток в трансплантате из губчатой кости нормализуется, а в компактной кости остается достоверно низкой и составляет около 75% от контроля.
Наряду с креатинфосфатом в костных аллотрансплантатах параллельно исследовали содержание универсального источника энергии в тканях - АТФ и
других адениловых нуклеотидов, формирующих в клетках аденилатный энергетический заряд [А.Я. Николаев, 2007; Han Bao Fen et al., 2002].
■ Глик. Губч. «АМГубч. ЕГлик. Комп. шАМКомп.
Сутки после трансплантации
Рис. 3. Изменения содержания гликогена и активности амилазы в аллотрансплантатах костной ткани (в % к контролю).
I Глюк. Губч. И Глюк. Комп. ■ ГКГубч. ■ ГККомп.
Сутки после трансплантации
Рис. 4. Изменения содержания глюкозы и активности гексокиназы в аллотрансплантатах костной ткани (в % к контролю).
Содержание АТФ и других аденилатов определяли как в интактной кости, так и после операции аллотрансплантации. Однако ни в одном из этих случаев не удалось использованными нами методами обнаружить ни АТФ, ни ее аналогов с достаточной степенью достоверности.
Очевидно в костной ткани, в отличие от других тканей, функцию хранения и универсального поставщика энергии выполняет не столько АТФ, сколько
19
креатинфосфат. Тем более, как это вытекает из полученных результатов и данных литературы, содержание креатинфосфата в костной ткани существенно превышает его содержание в других органах и тканях [В.В. Цыбульский, 2003; Э.Р. Нагиев, А.Н. Чудинов, 2008; С. Prats et al., 2005; Р. Behrens et al., 2007; A.A. Creen et al., 2008].
Таблица 3
Содержание лактата, креатинфосфата и неорганического фосфата в аллотрансплантате из губчатой костной ткани в динамике
(М ± т; мкмоль/г ткани)
Вид аллотранс-плантата Условия опыта Биохимические показатели
Лактат КФ НФ
Сутки после трансплантации Губчатая 1 кость Контроль 4,51±0,22 31,08±0,79 2626±55,79
7 сут 3,11±0,12* 20,21±0,47* 1995±34,12*
15 сут 2,75±0,09* 15,23±0,38* 1496±23,31*
30 сут 3,26±0,14* 17,83±0,51* 1959±34,07*
45 сут 3,53±0,18* 23,53±0,57* 2163±45,57*
60 сут 4,28±0,23 30,15±0,66 2468±48,65
Компактная кость Контроль 5,99 ±0,37 23,83 ± 0,85 3192±51,93
7 сут 3,59±0,31* 12,86±0,55* 2298±46,13*
15 сут 2,52±0,18* 10,01±0,37* 1691±23,17*
30 сут 3,44 ±0,27* 12,05± 0,42* 1992±28,54*
45 сут 3,46 ±0,29* 14,64±0,53* 2049±37,10*
60 сут 4,39 ±0,26* 18,10±0,67* 2234±45,67*
Аналогичные изменения как в случае креатинфосфата, но выраженные в разной степени, отмечаются и в отношении лактата и неорганического фосфата (рис. 5, 6). Причем во всех случаях имеет место волнообразный характер изменений биохимических показателей: вначале, спустя 7, 15 и 30 суток после пересадки происходит достоверное снижение содержания лактата, креатинфосфата и неорганического фосфата, свидетельствующее не только о снижении энергообеспечения костных аллотрансплантатов, но и о нарушении процессов минерализации пересаженной костной ткани. Вместе с
тем, на заключительном этапе - через 45 и особенно 60 суток в губчатой костной ткани происходит нормализация биохимических параметров.
В аллотрансплантатах компактной костной ткани, хотя принципиально происходят однотипные изменения, они выражены более резко и не подвергаются нормализации даже спустя 2 месяца после операции пересадки.
Как известно, костная ткань отличается высокой активностью лактатдегидрогеназы и интенсивным гликолизом. Анаэробное окисление гликогена и глюкозы в тканях и, в частности, костной ткани приводит к образованию молочной кислоты. Результатом этих реакций является образование двух молекул АТФ в ходе субстратного фосфорилирования [Я. Кольман и др., 2000; С.Е. Северин, 2007; R. Cusso et al., 2006; Н. Koike et al., 2007].
Проведенные исследования показали, что снижение активности гексокиназы -ключевого фермента анаэробного гликолиза, приводит не только к накоплению в аллотрансплантатах глюкозы, но и существенному падению количества молочной кислоты в результате снижения окисления глюкозы по анаэробному пути в этих условиях. Следовательно, в условиях угнетения активности пусковых ферментов превращения углеводов угнетается и течение гликолитических процессов в тканях трансплантатов, особенно резко в аллотрансплантате компактной костной ткани.
Сравнение, сопоставление и анализ полученных результатов позволяет сделать полезные выводы для практического здравоохранения в плане выработки тактики и стратегии при выборе того или иного вида трансплантационного материала, в частности, при замещениях дефектов нижней челюсти. Анализ полученных результатов позволяет заключить, что быстрее и совершеннее происходит процесс регенерации при аллотрансплантации губчатой костной ткани.
К-ль 7 сут 15 сут 30 сут 45 сут 60 сут
Сутки после трансплантации
Рис. 5. Динамика изменения содержания лактата и гексокиназы в аллотрансплантатах костной ткани (в % к контролю).
■ КФ Губч. ■ КФ Комп. НФ Губч. ■ НФ Комп.
7 сут 15 сут 30 сут 45 сут 60 сут
Сутки после трансплантации
Рис. 6. Изменения содержания креатинфосфата и неорганического фосфата в аллотрансплантатах костной ткани (контроль - 100%).
Изменения важнейших биохимических показателей свидетельствует о том, что в процессе перестройки костных аллотрансплантатов в течение первых 30 суток наблюдается снижение их жизнеспособности, а затем наступает постепенная нормализация морфологических и функциональных параметров. Вместе с тем, к концу сроков наблюдений в компактной костной ткани, в отличие от губчатой кости, биохимические параметры восстановленной кости
нормализуются не полностью, что находит подтверждение и рентгенологическими и морфологическими исследованиями.
Таким образом, весь комплекс полученных нами данных свидетельствует о явных преимуществах аллотрансплантатов губчатой кости по сравнению с другим видом костной пластики при замещении дефектов тела нижней челюсти. После двухнедельного периода значительного снижения жизнеспособности таких трансплантатов, к концу второго месяца важнейшие биохимические параметры перестроенной костной ткани восстанавливаются. Это подтверждается рентгенологической и морфологической картиной перестройки трансплантата. В случае же использования аллотрансплантации компактной кости приживление и перестройка трансплантата протекает значительно хуже.
Все это диктует необходимость дифференцированного подхода при подборе пластического материала костной ткани при лечении больных в клинике.
ВЫВОДЫ
1. В экспериментах на собаках показано, что аллотрансплантация губчатой и компактной костной ткани при замещении дефекта тела нижней челюсти имеет ряд отличительных признаков, как по срокам репаративных процессов, так и по характеру изменений метаболизма.
2. Рентгенологическими и морфологическими исследованиями установлено, что процессы перестройки и замещения пересаженной костной ткани губчатого и компактного строения начинаются однотипно, но завершаются они быстрее и совершеннее в аллотрансплантатах из губчатой кости.
3. Установлено, что в аллотрансплантатах из губчатой кости в течение первого месяца происходит более быстрое накопление гликогена и глюкозы, а затем наступает более интенсивное их снижение и нормализация, чем в трансплантатах из компактной кости; причем эти изменения коррелируют с
изменениями активности ключевых ферментов их метаболизма амилазы и гексокиназы.
4. Выявлено, что в ближайшем послеоперационном периоде, как в тех и других костных трансплантатах снижено содержание лактата, креатинфосфата, неорганического фосфата и не выявлено изменений со стороны АТФ и других адениловых нуклеотидов. При этом в трансплантатах из губчатых костей содержание лактата, креатинфосфата и неорганического фосфата постепенно повышается и к концу второго месяца полностью восстанавливается, в то время как в трансплантатах из компактных костей этот процесс существенно отстает.
5. Выявленные особенности в обмене фосфорорганических метаболитов свидетельствует о том, что в костной ткани в послеоперационном периоде энергообеспечение идет в основном за счет резерва креатинфосфата и анаэробного окисления глюкозы, поступающей из крови.
6. Разработанный комплекс биохимических показателей и результаты рентгенологических и морфологических исследований могут служить научно обоснованными критериями для преимущественного использования губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Рекомендовать при восстановительных костнопластических операциях на нижней челюсти использовать комплекс биохимических показателей в качестве информативного критерия состояния энергетических систем трансплантатов и оценки их жизнеспособности.
2. При подборе пластического материала костной ткани для лечения больных в клинике учитывать, что исход операции пересадки кости и сроки репаративного костеобразования при замещении дефектов нижней челюсти определяются особенностями обменных процессов, протекающих в разных по виду и характеру трансплантатах.
Список научных работ, опубликованных по теме диссертации
1. Чудинов А.Н., Нагиева С.Э. Перспективы трансплантологии костной ткани в современной медицине // Труды международной научной конференции «Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы». - Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2006. - С. 254-256.
2. Чудинов А.Н., Нагиева С.Э. Активность ферментов как показатель жизнеспособности костных трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти // Сборник трудов международной научно-практической конференции «Стоматология и челюстно-лицевая хирургия: современные технологии, новые возможности». - Махачкала: Изд. «Лотос», 2007.- С. 62-64.
*3. Нагиева С.Э. Исследование содержания глюкозы и активности гексокиназы в костных аллотрансплантатах в эксперименте // Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2007. - №2 (55) -С. 296-297.
*4. Чудинов А.Н., Нагиева С.Э., Исмаилова Ф.Э. Энергетический обмен при критических состояниях организма и его коррекция перфтораном // Экология промышленного производства. - 2007. - № 1. - С. 46-50.
5. Чудинов А.Н., Нагиева С.Э. Исследование содержания глюкозы и гликогена в трансплантате костной ткани в эксперименте // Материалы межвузовской научной конференции с международным участием «Фундаментальные проблемы морфологии». - Махачкала: ИД «Наука плюс», 2007.-С. 85-87.
*6. Нагиева С.Э. Исследование молочной кислоты в костных аллотрансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте // Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2009. -№3 - С. 54-55.
7. Исмаилова Ф.Э., Нагиева С.Э. Коррекция содержания АТФ и креатинфосфата при критических состояниях организма в эксперименте // III Международный молодежный медицинский Конгресс «Санкт-Петербургские научные чтения». - Санкт-Петербург. - 2009. - С. 31-32.
8. Нагиева С.Э. Изменения содержания креатинфосфата и неорганического фосфата в аллотрансплантатах из компактной кости в динамике после пересадки // Материалы межрегиональной межвузовской научно-практической конференции «Здоровье молодежи и сохранение трудового потенциала России». - Пермь: ГОУ ВПО ПГМА им. акад. Е.А. Вагнера, - 2009. - С. 37-39.
*9. Исмаилова Ф.Э., Нагиева С.Э. Исследование содержания адениловых нуклеотидов в тканях животных при аплотрансплантации и воздействии вредных экологических факторов // Вестник Российского государственного медицинского университета. - 2010. - №2. - С. 495-496.
10. Быков И.М., Чудинов А.Н., Нагиева С.Э. Рентгенологическая картина аллотрансплантатов компактной и губчатой костной ткани при замещении костных дефектов // Актуальные вопросы стоматологии: сборник научных трудов конференции, посвященной 25-летию организации кафедры стоматологии ФПК и ППС. - Махачкала, ИПЦ ДГМА. - 2010. - С. 140-143.
11. Нагиева С.Э., Быков И.М., Чудинов А.Н., Гаджиев А.Р. Морфологические изменения аллотрансплантатов компактной и губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте // Актуальные вопросы стоматологии: сборник научных трудов конференции, посвященной 25-летию организации кафедры стоматологии ФПК и ППС. -Махачкала, ИПЦ ДГМА. - 2010. - С. 143-146.
12. Нагиева С.Э., Чудинов А.Н., Быков И.М., Омаров О.Г. Анаэробный гликолиз в трансплантате костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти // Материалы научной конференции, посвященной 45-летию стоматологического факультета. — Махачкала: ИПЦ ДГМА. - 2010. - С.117-118.
13. Нагиева С.Э., Быков И.М., Чудинов А.Н. Гексокиназная реакция гликолиза в аллотрансплантатах костей при замещении дефектов нижней челюсти // Материалы Всероссийской научной конференции хирургов, посвященной 90-летию со дня рождения чл.-корр. АМН СССР Р.П. Аскерханова. - Махачкала: Изд-во «Юпитер». - 2010. - С. 211-212.
* - работа опубликована в журнале, включенном ВАК в Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий.
Список сокращений
АТФ - аденозинтрифосфорная кислота
НАД - окисленный никотинамидадениндинуклеотид
НАДН+Н4- восстановленный никотинамидадениндинуклеотид
НФ - неорганический фосфат
КФ - креатинфосфат
АМ - амилаза
ГК - гексокиназа
Нагиева Сайда Эйзудиновна
БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ АЛЛОТРАНСПЛАНТАТОВ КОМПАКТНОЙ И ГУБЧАТОЙ КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ ЗАМЕЩЕНИИ ДЕФЕКТОВ НИЖНЕЙ ЧЕЛЮСТИ
(экспериментальное исследование)
14.01.14 - стоматология, 03.01.04 - биохимия
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Подписано в печать 10.11.2010 г. Набор компьютерный. Гарнитура Times. Усл.п.л. 1,6.
Тираж 100 экз. Заказ № 78. Отпечатано на копировально-множительной технике ИП Калашников, г. Краснодар, пр-т Чекистов, 22. dusya95@yandex.ru
Оглавление диссертации Нагиева, Саида Эйзудиновна :: 2010 :: Краснодар
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Биохимические особенности строения и состава костей и зубов
1.1.1. Химический состав и механизмы минерализации костей
1.1.2. Строение и свойства твердых тканей полости рта
1.2. Перспективы костной пластики в стоматологии
1.3. Биохимические изменения в костных трансплантатах компактной и губчатой костной ткани
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Техника взятия трансплантатов из компактной и губчатой костной ткани
2.2. Методы биохимических исследований
2.2.1. Определение содержания нуклеотидов
2.2.2. Определение содержания креатинфосфата, неорганического фосфата и молочной кислоты
2.2.3. Определение содержания гликогена и глюкозы
2.2.4. Определение активности фермента амилазы
2.2.5. Определение активности фосфорилазы
2.2.6. Определение гексокиназной активности
2.3. Статистическая обработка результатов исследований
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Рентгенологические исследования трансплантатов компактной и губчатой костной ткани
3.2. Морфологические исследования трансплантатов компактной и губчатой костной ткани
3.3. Биохимические изменения в аллотрансплантате из губчатой кости в динамике после операции пересадки
3.3.1. Изменения содержания гликогена и глюкозы
3.3.2. Исследование активности фосфорилазы
3.3.3. Исследование активности амилазы
3.3.4. Изменения гексокиназной активности
3.3.5. Определение содержания молочной кислоты
3.3.6. Изменения содержания креатинфосфата
3.3.7. Изменения содержания неорганического фосфата 92 3.4. Изменения биохимических показателей в аллотрансплантате компактной костной ткани в динамике после пересадки
3.4.1. Изменения содержания гликогена и глюкозы
3.4.2. Изменения активности амилазы и гексокиназы
3.4.3. Исследование содержания молочной кислоты
3.4.4. Изменения содержания креатинфосфата
Введение диссертации по теме "Стоматология", Нагиева, Саида Эйзудиновна, автореферат
Актуальность исследования. Трансплантация органов и тканей остается актуальной проблемой современной медицины и, в частности, восстановительной челюстно-лицевой хирургии. Как известно, дефекты нижней челюсти различной этиологии приводят не только к деформации и обезображиванию лица, но и к значительным нарушениям жевательной функции, что требует вмешательств с использованием костной пластики [H.A. Плотников 1993, 2003; Н.Е. Сельский, 2000; A.C. Панкратов и соавт., 2001; J.E. Lee et al., 2005; S. Imasato et al., 2006; P. Behrens et al., 2007].
Спорным остается вопрос оценки способности различных по виду костных трансплантатов в разные сроки после операции стимулировать репаративные процессы [Г.И. Лаврищева, 1999, 2006; В.Ф. Куцевляк и соавт., 2005; R. Nicholas et al., 2006; S. Scheele et al., 2007].
Вопрос о состоянии трансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти решался разными авторами в основном путем клинических наблюдений, рентгенологических и морфологических исследований репаративных процессов в костной ткани после пересадки различных по характеру и виду трансплантатов [H.A. Томилина и соавт., 2005; A. Joshi, 2004; Е. Leroukel et al., 2004; G. Lansi et al., 2005]. Что же касается метаболизма в самом трансплантате, биохимических превращений, лежащих в основе морфологических и функциональных процессов, протекающих в пересаженной костной ткани и обеспечивающих ее жизнеспособность и эффективность приживления и перестройки трансплантата, то эти вопросы до настоящего времени исследованы недостаточно. В то же время состояние обмена в самом трансплантате, его энергетические ресурсы и ферментные системы, определяющие жизнеспособность трансплантата, позволяют судить об эффективности процесса пересадки костной ткани. Они и являются достаточно информативными критериями эффективности того или иного метода трансплантации, позволяющими в полной мере дать оценку степени приживления или гибели трансплантата и вскрыть механизмы его перестройки [Ю.А. Петрович, В.К. Леонтьев, 1994; Ю.А. Петрович, Т.П. Вавилова, И.Н. Марокко, 2001; И.П. Ермакова и соавт., 2004; М. Goldberg et al., 2005; I. Pechan et al., 2008].
В связи с изложенным, представляет интерес исследование динамики изменения важнейших биохимических показателей, в частности содержания АТФ и других адениловых нуклеотидов, креатинфосфата, неорганического фосфата, молочной кислоты, гликогена и глюкозы, а также активности пусковых ферментов их превращений в регенерирующих тканях после трансплантации. Интерес к данной проблеме еще более возрастает при трансплантации костной ткани, так как при этом резко нарушается углеводный обмен, и создаются неблагоприятные условия для использования и утилизации гликогена и глюкозы, как для энергетических, так и пластических целей [И.А. Пронченко и соавт., 2005; N. Komerik et al., 2005; J.P. Rake et al., 2006].
Цель исследования. Выявить особенности протекания метаболических процессов в костных аллотрансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте.
Задачи исследования:
1. Исследовать особенности изменений рентгенологической и морфологической картин костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти различными по виду и характеру трансплантатами (губчатой и компактной костными тканями) и определить информативность этих показателей для оценки репаративного костеобразования.
2. Изучить особенности течения биохимических процессов в регенерате костной ткани в процессе репаративной регенерации в различные сроки после аллотрансплантации и определить информативность этих показателей.
3. На основании полученных результатов разработать практические рекомендации для дифференцированного использования различных по характеру и виду костных аллотрансплантатов для замещения дефектов нижней челюсти.
Научная новизна. Впервые изучены особенности биохимических процессов, происходящих в аллотрансплантатах компактной и губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти и установлены параллели между биохимическими, рентгенологическими и морфологическими изменениями при костной трансплантации, свидетельствующие о том, что исход операции пересадки кости, и сроки репаративного костеобразования зависят от вида используемого трансплантата.
Получены новые данные о содержании гликогена, глюкозы, креатинфосфата, неорганического фосфата, молочной кислоты, активности амилазы, гексокиназы при аллотрансплантации губчатой и компактной костной ткани в динамике после пересадки, имеющие существенное значение для определения обеспеченности энергетическим и пластическим материалом репаративных процессов в пересаженной костной ткани.
Установлено повышение содержания гликогена, глюкозы и снижение содержания молочной кислоты, креатинфосфата и неорганического фосфата, снижение активности амилазы и гексокиназы в костных аллотрансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти, причем эти изменения более выражены в трансплантатах из компактной костной ткани по сравнению с трансплантатами из губчатой кости.
Практическая значимость работы. Разработан и теоретически обоснован комплекс биохимических показателей, который может быть использован как эффективный критерий оценки состояния энергетических систем жизнеобеспечения костных трансплантатов и жизнеспособности пересаженной костной ткани в различные сроки послеоперационного периода. Полученные в работе данные расширяют имеющиеся представления о биохимии костной трансплантации.
Изучены и установлены параллели между биохимическими показателями, рентгенологическими и морфологическими изменениями, свидетельствующие о том, что исход операции пересадки кости, и сроки костеобразования при замещении дефектов нижней челюсти зависят от вида и характера трансплантата. Это даёт возможность по-новому решать вопросы практической медицины в области трансплантации костей при дефектах челюстей.
Полученные в диссертации результаты используются в учебном процессе Дагестанской государственной медицинской академии при чтении лекций и проведении практических занятий по клинической биохимии и хирургической стоматологии, а также в научном и учебном процессах Дагестанского государственного университета. Результаты работы вошли в учебное пособие «Биохимия тканей полости рта» (утверждено УМО РФ; Махачкала, 2009 г.).
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Установлено, что в процессе перестройки костных аллотрансплантатов происходят значительные изменения исследуемых биохимических показателей в зависимости от вида пересаженной кости (компактная или губчатая). При этом биохимические изменения в большинстве случаев коррелируют с рентгенологическими и морфологическими изменениями в исследуемых костных трансплантатах.
2. Установлено, что в костных аллотрансплантатах спустя 15-30 суток после пересадки происходит существенное повышение содержания гликогена и глюкозы, а также снижение активности ключевых ферментов их метаболизма - гексокиназы и амилазы. В компактной костной ткани даже спустя два месяца после операции пересадки содержание гликогена, глюкозы и активность исследуемых ферментов не достигают показателей контроля.
3. Показано, что рентгенологически и морфологически процессы перестройки и замещения пересаженной костной ткани губчатого и компактного строения происходят однотипно, но завершаются они быстрее и совершеннее при трансплантации губчатой костной ткани.
4. Установлено, что в аллотрансплантатах в ближайший послеоперационный период происходит существенное снижение количества неорганического фосфата, креатинфосфата, молочной кислоты, причем эти изменения более выражены в трансплантатах из компактной костной ткани.
Апробация результатов исследования. Основные положения работы представлялись и обсуждались на международной научной конференции «Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы» (Махачкала, 2006); международной научной конференции «Стоматология и челюстно-лицевая хирургия: современные технологии, новые возможности» (Махачкала, 2007); межвузовской научной конференции «Фундаментальные проблемы морфологии» (Махачкала, 2007); международной Пироговской научной конференции РГМУ (Москва, 2009, 2010); III международном молодежном медицинском Конгрессе (Санкт-Петербург, 2009); межрегиональной научной конференции «Здоровье молодежи и сохранение трудового потенциала России» (Пермь, 2009); научной конференции, посвященной 25-летию кафедры стоматологии ФПК ДГМА (Махачкала, 2010); научной конференции, посвященной 45-летию стоматологического факультета ДГМА (Махачкала, 2010); Всероссийской научной конференции хирургов, посвященной 90-летию со дня рождения чл.-корр. АМН СССР Р.П. Аскерханова (Махачкала, 2010).
Публикации. По материалам данного исследования опубликовано 13 работ, 4 из них в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.
Заключение диссертационного исследования на тему "Биохимические изменения аллотрансплантатов компактной и губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти (экспериментальное исследование)"
выводы
1. В экспериментах на собаках показано, что аллотрансплантация губчатой и компактной костной ткани при замещении дефекта тела нижней челюсти имеет ряд отличительных признаков, как по срокам репаративных процессов, так и по характеру изменений метаболизма.
2. Рентгенологическими и морфологическими исследованиями установлено, что процессы перестройки и замещения пересаженной костной ткани губчатого и компактного строения начинаются однотипно, но завершаются они быстрее и совершеннее в аллотрансплантатах из губчатой кости.
3. Установлено, что в аллотрансплантатах из губчатой кости в течение первого месяца происходит более быстрое накопление гликогена и глюкозы, а затем наступает более интенсивное их снижение и нормализация, чем в трансплантатах из компактной кости; причем эти изменения коррелируют с изменениями активности ключевых ферментов их метаболизма амилазы и гексокиназы.
4. Выявлено, что в ближайшем послеоперационном периоде, как в тех и других костных трансплантатах снижено содержание лактата, креатинфосфата, неорганического фосфата и не выявлено изменений со стороны АТФ и других адениловых нуклеотидов. При этом в трансплантатах из губчатых костей содержание лактата, креатинфосфата и неорганического фосфата постепенно повышается и к концу второго месяца полностью восстанавливается, в то время как в трансплантатах из компактных костей этот процесс существенно отстает.
5. Выявленные особенности в обмене фосфорорганических метаболитов свидетельствует о том, что в костной ткани в послеоперационном периоде энергообеспечение идет в основном за счет резерва креатинфосфата и анаэробного окисления глюкозы, поступающей из крови.
6. Разработанный комплекс биохимических показателей и результаты рентгенологических и морфологических исследований могут служить научно обоснованными критериями для преимущественного использования губчатой костной ткани при замещении дефектов нижней челюсти.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Рекомендовать при восстановительных костнопластических операциях на нижней челюсти использовать комплекс биохимических показателей в качестве информативного критерия состояния энергетических систем трансплантатов и оценки их жизнеспособности.
2. При подборе пластического материала костной ткани для лечения больных в клинике учитывать, что исход операции пересадки кости и сроки репаративного костеобразования при замещении дефектов нижней челюсти определяются особенностями обменных процессов, протекающих в разных по виду и характеру трансплантатах.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Нагиева, Саида Эйзудиновна
1. Аврунин A.C., Тихилов P.M. Уровни организации минерального матрикса костной ткани и механизмы, определяющие параметры их формирования // Морфология. - 2005. - №2. - С. 78-82.
2. Алатыцев В.В., Александров А.Е., Лекланов А.У. Содержание 2,3-дифосфоглицерата и АТФ в эритроцитах и кислотно-основное состояние у взрослых и новорожденных крыс при острой гипоксии // Бюлл. экспер. биологии и медицины. 2005. - Т.129, № 6. - С. 631-633.
3. Алейникова T.JL, Рубцова Г.В. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. — М.: «Высшая школа». 2002. - 238 с.
4. Арбуханова М.С. Исследование содержания креатинфосфата и креатинкиназной активности в тканях животных при тяжелой физической нагрузке // Материалы межд. научной конф. «Биохимия — медицине». — Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2002. С. 17-20.
5. Аржанцев П.З., Горбуленко В.Б., Козлов С.В, Труханов Е.Ф. Этапы развития стоматологии и челюстно-лицевой хирургии в Главном военном госпитале // Военно-медицинский журнал. 2007. - Т. 327, №5. - С. 82-86.
6. Ашмарин И.П. Элементы патологической физиологии и биохимии. -М.: Изд-во МГУ, 2005. 192 с.
7. Балаба Т.Я., Торбенко В.П. Ферментный спектр костной ткани норме и при посттравматической регенерации // Вопросы мед. химии — 1979. Т. 16, вып. 4.-С. 372-376.
8. Бажанов H.H., Тер-Асатуров Г.П. Способ соединения костных фрагментов нижней челюсти и фиксация трансплантатов при восполнении её дефектов // Стоматология. 1992. — № 3. — С. 73-77.
9. Бажанов H.H., Тер-Асатуров Г.П., Шалумов А-С.З. Использование компьютерных технологий в восстановительной и реконструктивной хирургии опорных тканей лица // Стоматология. 2000. - Том 79, N 1. - С. 3941.
10. Баранова E.H., Скарга Ю.Ю., Негода А.Е., Миронова Г.О. Ингибирование адениновыми нуклеотидами ДНФ-индуцированного транспорта калия в митохондриях // Биохимия. 2007. - Т. 72, вып. 2. - С.262-267.
11. Белоус A.M., Панков Е.Я. Некоторые итоги исследований по репаративной регенерации кости. В кн.: Механизмы регенерации костной ткани. - М.: «Медицина». - 2002. - С. 284-294.
12. БерезовТ. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. — М.: «Медицина». 2007. - 706 с.
13. Березов Т.Т., Буробина С.С., Волкова JI.B., Евграфов В.Г. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии. М.: «Медицина». -1976.-294 с.
14. Берченко Г.Н., Уразгильдиев З.И., Кесян Г. А. Биоактивные гидроксиапатит-содержащие биоимплантанты в травматологии и ортопедии // Сб. тезисов «Биоимплантология на пороге 21 века». М. - 2001. - С. 40-43.
15. Бессонов С.Н. Пластическая хирургия лицевого скелета: реконструктивные и эстетические аспекты // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. 2004. - N 1 . - С. 67-67.
16. Бессонова С.С., Петрович Ю.А. Влияние ретаболила и тиреокальцитонина на белковый и минеральный обмен костей скелета при переломе нижней челюсти // Стоматология. 1996. -№ I. - С. 8-11.
17. Билалова Т.А., Аникина Т.А, Ситдиков Ф.Г., Гиниатуллин P.A. Влияние экзогенного АТФ на сердечную деятельность крыс // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 2006. - Т. 135, № 4. - С. 377-380.
18. Боровский Е.В., Иванов B.C., Максимовский Ю.М., Максимовская JI.H. Терапевтическая стоматология. -М.: «Медицина», 2001. 736 с.
19. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. М.: Медицина, 1991.-301 с.
20. Бригаднова JI.JI. Комбинированная вторичная костная ауто- и аллопластика нижней челюсти // В кн.: Вопросы аллотрансплантации в стоматологии. 1989. - Вып. 11.- С. 101-104.
21. Быков И.М., Ладутько A.A., Есауленко Е.Е., Еричев И.В. Биохимия ротовой и десневой жидкости. — Краснодар: ООО «Качество», 2008. — 100 с.
22. Вавилова Т.П. Биохимия тканей и жидкостей полости рта. — М.: ГЕОТАР-Медиа, 2008. 208 с.
23. Васильева А.Г., Цыбульский В.В. Содержание креатинфосфата и других фосфорорганических соединений в органах и тканях животных. -Одесса: ИПЦ ОГМУ. 2007. - 129 с.
24. Вилкова В.А. Определение содержания и интенсивности обмена глюкозы и гликогена в тканях. // В кн. Методы биохимических исследований. Л.: Изд-во ЛГУ. - 1988. - С. 234 - 241.
25. Винникова Н.И., Куралесова А.И., Мельникова Г.Б., Филякина Н.С. Использование декальцинированного костного матрикса для стимуляции костеобразования после удаления одонтогенных кист // Стоматология. 1991. -№ 4.-С. 30-31.
26. Виноградова Т.П., Лаврищева Г.И. Регенерация и пересадка костей. -М.: "Медицина". 1998.-257 с.
27. Гемонов В.В., Лаврова Э.М., Фалин Л.И. Развитие и строение органов ротовой полости.-М., 2002.-С. 100-104, 107-111.
28. Генкин A.M. О содержании свободного и связанного гликогена в органах животного организма // Биохимия. 1994. — Т. II, вып. 2. С. 155-167.
29. Гланц Стентон. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. - М., Практика, 1999.-459 с.
30. Горбачев Ф.А. Экспериментальное обоснование применения аллогенного коллаген-фасциального трансплантата для увеличения объема мягких тканей челюстно-лицевой области // Стоматологический журнал. -2005.-N1.-С. 70-75.
31. Горбачев Ф.А. Морфометрический анализ динамики изменения аллогенного коллаген-фасциального трансплантанта для увеличения объема мягких тканей лица // Медицинский журнал. 2005. - N 4. - С. 42-44.
32. Горбачев Ф.А. Определение показаний к применению аллогенного коллаген-фасциального трансплантата для устранения деформаций челюстно-лицевой области // Медицинский журнал. 2005. - N 3. - С. 49-51.
33. Гречуха A.M., Чудаков О.П., Беззубик С.Д. Особенности морфологического репаративного остеогенеза у экспериментальных животных при замещении костных челюстных дефектов "Биоситаллом" // Медицинская панорама. 2006. - N 7. - С. 87-89.
34. Гречуха A.M., Чудаков О.П. Клиническая взаимосвязь местных периодонтальных изменений и показателей гемограммы при замещении костных челюстных дефектов гранулятом "Биоситалла" и гидроксиапатита // Медицинский журнал. 2007. - N 1. - С. 32-33.
35. Грунтовский Г.Х., Корж H.A. Керамопластика дефектов костей // Ортопедия, травматология и протезирование. 1991. - № 12. - С. 38-40.
36. Губайдуллина Е.Я., Цегельник Л.Н., Лузина В.В., Топленинова Д.Ю. Опыт лечения больных с обширными кистами челюстей // Стоматология. -2007. Том 86, № 3 . - С. 51-53.
37. Гулый М.Ф., Коломийченко М.К. К вопросу о характере взаимодействия между ферментом и полисахаридом в фосфорилазной реакции // Укр. биохимич. журн. 1988. - № 21. - С. 221 - 225.
38. Демичев Н.П., Дарвин Е.О. Клиника и лечение опухолей костей кисти // Ортопедия, травматология и протезирование. 2005, № 1. — С. 54-57.
39. Дмитренко Н.П. Внеклеточный аденозинтрифосфат, его источники и влияние на функции клеток животных // Укр. биохим. журнал-2007 Т. 79, №2.-С. 3-12.
40. Евстафьева Е.В., Башкин В.Н., Орлинский Д.Б. Методические подходы к изучению адаптации человека в условиях окружающей среды // Физиология человека. 2005. - Т. 31, № 1.-С. 135-143.
41. Ермакова И.П., Пронченко И.А., Бузулина В.П. Остеопороз и остеопатии. — М.: Медицина. 2004. — 256 с.
42. Ещенко Н.Д. Определение содержания молочной кислоты в тканях и активности лактатдегидрогеназы в тканях. //В кн. Методы биохимических исследований. Л.: Изд-во ЛГУ. - 1988. - С. 222 - 233.
43. Забродин B.C. Способ реконструкции просвета полых и.трубчатых анатомических структур костной ткани // Морфология. 2003. - Т. 12, № 3. — С. 89-90.
44. Загубелюк Н.К. Отдаленные результаты остеопластики послеоперационных полостей челюсти // В кн.: Вопросы аллотрансплантации в стоматологии. М.: - 1989. - С. 50-56.
45. Залозный Ю.Г. Тканевое дыхание кости в норме // В кн.: Вопросы ортопедии и травматологии. Киев. - 2006. - С. 249-253.
46. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А., Западнюк Б.В. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. Киев: Вища школа. - 1983. — 383 с.
47. Зенкевич Т.Д., Касавина Б.С. Состав кислых мукополисахаридов кости и тканей костной мозоли в процессе регенерации // Биохимия. 1992. - Т. 37, № 2. - С. 279-285.
48. Иващенко Н.И., Ипполитов В.Л. Остеосинтез в лечении тяжелых сочетанных черепно-лицевых травм у юношей // Клиническая стоматология. -2007. N 3. - С. 56-59.
49. Кабаков Б. Д. Костная пластика нижней челюсти. СПб.: Медгиз, 1996. - 264 с.
50. Кабак С.Л., Фещенко С.П., Аниськова Е.П. Костно-суставная система. Морфологические и биохимические аспекты формирования. Минск: Навука тэхшка, 1990.-181 с.
51. Калакуцкий Н.В., Вавилов В.Н., Соловьев М.М. Методы повышения эффективности трансплантации с ребром при устранении изъянов нижней челюсти // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. -2004.-N4.-С. 82-83.
52. Канюков В.Н., Стрекаловская А.Д., Килькинов В.И., Базарова Н.В. Материалы для современной медицины. Оренбург. - 2004. - 113 с.
53. Касавина Б.С., Торбенко В.П. Жизнь костной ткани. М.: Наука. 2004. -217с.
54. Касавина Б.С, Торбенко В.П. Минеральные ресурсы организма. М.: Наука.-2007.-284 с.
55. Киреев М.М., Конвай В.Д. Полумикрометод определения кислотоэкстрагируемых нуклеотидов в органах лабораторных животных // Вопросы медицинской химии. 1979. - Т. 25. - № 3. - С. 352-354.
56. Киченко С.М., Петрович Ю.А. АТФ, дегидрогеназы и гексокиназа в слизистой оболочке полости рта и нижней челюсти при её переломе и нару шении иннервации // Стоматология. 1996. - № 5. — С. 112-114.
57. Киченко С.М. Биохимические изменения при регенерации нижней челюсти, нарушении её иннервации и при введении тиреокальцитонина (экспериментальное исследование). Автореф. дисс. . канд. биол. наук - М.:1982.-24 с.
58. Кокунин В.А. Статистическая обработка данных при малом числе опытов //Укр.биохим.журн. 1975. - Т. 47,- № 6. - с. 776-790.
59. Коротких Н.Г., Ходорковский М.А., Петров Б.В. Опыт использования васкуляризированных аутотрансплантатов для замещения дефектов нижней челюсти после ее резекции с экзартикуляцией // Стоматология. 2007. - Том 86, N3.-С. 54-57.
60. Корсак А.К. Хирургическое лечение детей с врожденными расщелинами верхней губы и неба в раннем возрасте // Современная стоматология: международный научно-практический и информационно-аналитический журнал. 2007. - N 4 . - С. 40-43.
61. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа». - 1989.-272 с.
62. Красовская Г.П. Дальнейшее изучение вопросов обмена костной ткани после операции гомопластики у животных перенесших лучевую болезнь // В кн.: Вопросы травматологии и ортопедии Донецк: 2005. - С. 103-106.
63. Красовская Г.П. Динамика некоторых показателей обмена веществ костной ткани при приживлении костных трансплантатов // В кн.: Пластические операции в травматологии и ортопедической практике Донецк: - 2007. - С. 202-209.
64. Кругляков П.В., Соколова A.B. Влияние мезенхемальных стволовых клеток на восстановление костного трансплантата у крыс при трансплантации деминерализованного костного матрикса // Цитология. 2005, № 4. - С. 466477.
65. Крупко И.Л., Ткаченко С.С. Костная гомопластика в клинике и эксперименте // Тезисы докладов 2-й Всесоюзной конференции по проблеме тканевой несовместимости, консервированию и трансплантации органов и тканей. Одесса: - 1991. - С. 171-173.
66. Крупко И.Л., Ткаченко С.С. Костная гомопластика в клинике и эксперименте // В кн.: Проблемы гомопластики и аллопластики. Киев:
67. Здоровье». 2007. - С. 401-403.
68. Кручинина JI.A., Ершова Н.И. Водная фракция смешанной слюны и гомеостаз полости рта /под ред. В.П. Дегтярева. М.: Корал Клаб, 2007. -56 с.
69. Крюкова Г.Н., Цыбульский В.В. Биохимия соединительной и костной тканей. Одесса: ИПЦ ОГМУ. - 2008. - 143 с.
70. Кудряшов Ю.Б. Поражение «критических систем». М.: Изд-во МГУ.-2009.- 96 с.
71. Кузнецова Г.И. Факторы риска снижения минеральной плотности костной ткани // Вопросы современной педиатрии. 2004. - Т. 3, № 3. - С. 9799.
72. Кузьмина Э.М. Профилактика стоматологических заболеваний. М.: Изд-во «Поли Медиа Пресс», 2001. - 216 с.
73. Курочкин А.П. Планирование окклюзии зубных протезов на имплантатах в зависимости от коэффициента плотности костной ткани // Стоматология. 2005. - № 3. - С. 51-53.
74. Куцевляк В.Ф., Микулинский Ю.Е., Щегельская Е.А. Регенерация костной ткани в стоматологии и челюстно-лицевой хирургии с использованием клеточных биотехнологий // Стоматологический журнал : научно-практический журнал. 2005. - N 4 . - С. 14-16.
75. Лаврищева Г.И. О морфологических критериях жизни и смерти костной ткани. /В кн.: Вопросы патологии костной системы. -М.: 1999. С. 67-78.
76. Лаврищева Г.И. Морфологические особенности приживления аллокости // Биоматериалы. 2006, № 5. - С. 36-40.
77. Ларионов A.A. О перестройке свободного костного трансплантата вдефекте длинной кости // Ортопедия, травматология и протезирование. — 2006. № 7. — С. 17-21.
78. Лебедев К.А., Понякина И.О., Саган Л.Т., Володина Е.В. Очистка организма от токсических веществ как способ нормализации функционирования иммунной системы// Физиология человека. -2008—Т. 34, № 5. — С. 131-143.
79. Левко A.B., Аксенцев С.Л., Федорович C.B., Конев C.B. Влияние кальция на энергетический статус синаптосом мозга крыс при ацидозе // Биохимия. 2008. - Т. 73, вып. 2. - С. 218-223.
80. Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т.: Пер. с англ. М.: Мир. 1985.- Т. 1. - 367 с. - Т. 2. - 368 с. - Т. 3 - 320 с.
81. Лукьянова Л. Д., Дудченко A.M. Параметры аденилатного пула как предикторы нарушений энергетического обмена в гепатоцитах при гипоксии // Бюлл. эксперим. терапии и медицины 2007.- Т. 140, № 1. - С.41-45.
82. Лущак В.И. Исследование способности нуклеозидтрифосфатов обеспечить транспорт Са2+ фрагментами саркоплазматического ретикулума // Укр. биохим. журнал. 1990. - Т.62, № 2. - С. 64-68.
83. Малышева Н.М., Огородников В.Б. Оценка эффективности использования пористой корундовой керамики для устранения дефектов в челюстно-лицевой области // Стоматология: научно-практический рецензируемый журнал. 2008. - Том 87, N 1 . - С. 22-26.
84. Маршалл В. Дж. Клиническая биохимия. / Пер. с англ.: М. - СПб.: «Изд-во БИНОМ» - «Невский Диалект». - 2003. - 368 с.
85. Меерсон Ф.З. Физиология адаптационных процессов. — М.: Наука, 1986. -639 с.
86. Миннебаев М.М., Бахтиозин В.Ф., Мусин М.С., Попова Л.Г. Активность ферментов, уровень глюкозы, лактата и пирувата в лимфе и крови в раннем постреанимационном периоде // Анестезиология и реаниматология. 1995. -№4.- С. 42-45.
87. Митрошенков П.Н. Пластика тотальных и субтотальных дефектовверхней и средней зон лицевого скелета // Новое в стоматологии. 2005. - N 6. -С. 89-95.
88. Мулдашев Э.Р. Теоретические и прикладные аспекты создания аллотрансплантатов серии «Аллоплант» для пластической хирургии лица. -Автореф. дис. . докт. мед. наук. СПб. - 1994. - 40 с.
89. Муслимов С.А. Морфологические аспекты регенеративной хирургии. -Уфа.-2000.-212 с.
90. Нагиев Э.Р. Хроматографическое разделение нуклеотидов в тонкослойном варианте на ДЭАЭ-целлюлозе и определение активности нуклеозидфосфаткиназ // Оборонный комплекс научно-техническому прогрессу России: Научно-практический журнал. - М.: 2001. - С.75-78.
91. Нагиев Э.Р. Биохимия тканей полости рта /Утв. УМО РФ. Махачкала: ИПЦ ДГМА. - 2009. - 148 с.
92. Нагиев Э.Р., Чудинов А.Н. Способ замещения дефектов нижней челюсти // Каталог Российских разработок. — Российско-Китайский Технопарк «Дружба». КНР, Шеньчжень. - 2008. - С. 77-81.
93. Нагиев Э.Р., Дадашева С.А., Евсеева С.Н, Воздействие экстремальных факторов на метаболизм и некоторые пути направленной коррекции //Экология промышленного производства: Научно-практический журнал. М.: № 1. -2005.-С. 49-51.
94. Наращивание костной ткани для проведения дентальной имплантации // Стоматология. Анекс-Д. — Имплантация зубов. - 2009. - С. 17-22.
95. Наумов П.В., Величко А.Л., Замятин К.К., Соколова Г.Д. Применение костных аллотрансплантатов при замещении изъянов нижней челюсти //Вопросы аллотрансплантации в стоматологии. М.: 2001. - С. 60 - 66.
96. Нигматуллин Р.Т. Морфологические аспекты пересадкисоединительнотканных аллотрансплантатов. Автореф. дис. . докт. мед. наук. - Новосибирск. - 1996. - 40 с.
97. Нигматуллин Р.Т. Очерк истории регенеративной хирургии // Биоматериалы. 2006, № 5. - С. 17-23.
98. Николаев А .Я. Биологическая химия. -3-е изд., перераб. и доп. М.: «Медицинское информационное агентство». — 2007. — 566 с. ил.
99. Номенклатура ферментов (под ред. А.Е. Браунштейна) М.: ВИНИТИ.- 1979-321 с.
100. Османов P.C., Сафаров С.Ю. Хирургическая инфекция, асептика и антисептика. Махачкала: Изд-во «Юпитер». - 2006. - 162 с.
101. Панкратов A.C., Курзин A.C., Робустова Т.Г. Современные проблемы внедрения новых оперативных технологий остеосинтеза костей лицевого скелета в клиническую практику. Биомеханические аспекты
102. Российский стоматологический журнал : научно-практический журнал. -2001. N 4 . — С.13-18.
103. Петрова А. JI. О методе выделения трансгликозидазы из печени и определение ее активности // Биохимия. 1999. - Т. 44. - С. 228-233.
104. Петров В.П. Поражающие факторы при чрезвычайных ситуациях и модели их формирования // Военно-медицинский журнал. 2006. - № 10. - С. 29-33.
105. Петрова И.Н., Орлов A.A., Ипполитов B.JL Экспериментально-клиническое исследование перфторана в реконструктивной челюстно-лицевой хирургии // Вопросы реконструктивной и пластической хирургии : Научно-практический журнал. 2004. - N 3/4 . - С. 79-81.
106. Петрович Ю.А., Леонтьев В.К. Биохимические методы исследования в клинической и экспериментальной стоматологии. Омск: ИПЦ ОГМИ. - 1994. -89 с.
107. Петрович Ю.А., Тамилин В.В. Слюна. Большая медицинская Энциклопедия. -М.: 1988. Т. 23. - С. 703-719.
108. Петрович Ю.А., Вавилова Т.П., Марокко И.Н. Основыстоматологической биохимии. -М.: МГМСУ, 2001. 139 е.: ил.
109. Петрович Ю.А., Подорожная Р.П., Киченко С.М. Гематосаливарный барьер // Российский стоматологический журнал. — 2004, № 4. С. 39 - 45.
110. Плотников H.A. Проблемы костной пластики нижней челюсти // Стоматология. 1993. - № 3. - С. 7-10.
111. Плотников H.A. Костная пластика нижней челюсти. — М.: Медицина. —2003. 136 с.
112. Потапенко Р.И. Макроэргические фосфорные соединения и АТФазная активность митохондрий в головном мозгу крыс разного возраста // Укр. биохим. журнал. -2003. Т. 75, № 3. - С. 563-565.
113. Пронченко И.А, Бузулина В.П. Биохимические маркеры костного метаболизма и потерь костной ткани после аллотрансплантации трупной почки // Биохимия. Клиническая лабораторная диагностика. 2005. - № 11. - С. 3 - 8.
114. Радкевич A.A., Сысолятин П.Г., Гюнтер В.И. Опыт использования остеогенной ткани в хирургическом лечении генерализованного пародонтита // Пародонтология. 2001. - №1-2. - С. 63-67.
115. Реброва О.Ю. Статистический анализ биомедицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTIC А. М.: Медиа Сфера, 2002.-312 с.
116. Робустова Т.Г. Хирургическая стоматология. —М.: Медицина,-2001 -688 с.
117. Рогинский В. В., Комелягин Д. Ю. Пятилетний опыт применения компрессионно-дистракционного остеосинтеза у детей с недоразвитием и дефектами нижней челюсти // Стоматология : научно-практический журнал.2004. Том 83, N 6 . - С. 55-62.
118. Северин С.Е. Биохимия М.: ГЕОТАР-МЕД - 2007. - 784 с. (Серия «XXI век»).
119. Сельский Н.Е. Аллотрансплантат в челюстно-лицевой хирургии // Сборник трудов «Применение биоматериалов». Уфа. - 2000. - С. 121-126.
120. СкулачевВ.П. Соотношение окисления и фосфорилирования в дыхательной цепи. М.: Изд. АН СССР. - 1962. - 152 с.
121. СкулачевВ.П. Биоэнергетика. Мембранные преобразователи энергии. М.: Высшая школа. - 1999. - 271 с.
122. Слуцкий Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. М.: Медицина. - 2005. - 375 с.
123. Снетков А.И., Батраков С.Ю., Франтов А.Р., Авакян A.M. Применение имплантанта «КоллапАн» в клинике детской костной пластики // Детская больница: научно-практический журнал. — 2004, № 1. — С. 16-20.
124. Страйер Л. Биохимия.: Пер. с англ. М.: «Мир». - 1985.- Т. 2. - 400 с.
125. СтроевЕ. А. Биологическая химия. -М.: «Высшая школа». 2002479 с.
126. Сысолятин П.Г. Костная пластика дефектов нижней челюсти «кильскими» трансплантатами // Стоматология. — 1995. № 1.-С.6-8.
127. Сысолятин П. Г., Елизарьева Н. Л., Колосов А. Н. Эффективность использования ларингеальной маски при непродолжительных операциях в челюстно-лицевой области // Стоматология : научно-практический рецензируемый журнал. 2005. - Том 84, N 4 . - С. 20 - 23.
128. Тимашкевич К.Д. Некоторые особенности регенерации при гомотрансплантации трубчатых фрагментов костной ткани в эксперименте // В кн.: Условия регенерации органов и тканей. М. - 2008. - С. 291-294.
129. Титов В.Н., Творогов М.М. Клиническая лабораторная диагностика // В кн.: Клиническая биохимия /под ред. В. А. Ткачука/. М.: ГЭОТАР-МЕД. -2002. - С. 26-28.
130. Тихонов Ю.В. Метаболизм пуриновых и пиримидиновых соединений и опухолевый рост: Автореф. дис. . доктора биол. наук. М.: Университетдружбы народов им. П. Лумумбы. — 1991. — 34 с.
131. Томилина H.A., Ведерникова Р.Н., Ермакова И.П. Биохимические маркеры костного метаболизма // Биохимия.- Клиническая лабораторная диагностика. — № 12. — 2005. С. 12-16.
132. Трезубов В.Н., Щербаков A.C., Мишнев Л.М. Ортопедическая стоматология. Санкт-Петербург: «Фолиант». - 2002. - 576 с.
133. Трифонова В.П., Петрович Ю.А. Применение радиоактивных изотопов В изучении минерального и белкового обмена скелета при ауто- и гомотрансплантации кости // В кн.: Условия регенерации органов и тканей. М. - 2002. - С. 265-289.
134. Ткачук В.А., Добровольский А.Б., Доценко В.Л. // Клиническая биохимия. М.: ГЭОТАР-МЕД. - 2002. - 360 с.
135. Торбенко В.П. Биохимические процессы обызвествления костной ткани // Ортопедия, травматология. 1993. - № 7. - С. 76-82.
136. Торбенко В.П. Углеводный обмен костной ткани в норме при переломах и лучевой болезни // В кн.: Переломы костей и повреждения суставов при лучевой болезни.- М.: «Медицина». 1997. - С. 169-186.
137. Торбенко В.П., Касавина Б.С. Функциональная биохимия костной ткани. М.: "Медицина". - 2002. - 137 с.
138. Фатхудинов, Т.К., Гольдштейн Д.В. Особенности репаративного остеогенеза при трансплантации мезенхемальных стволовых клеток // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2005. - №1. - С. 53-56.
139. Филиппович Ю.Б. Основы биохимии. — М.: Агар, Флинта. 1999. -512 с.
140. Филов В.А. Разработка и методика трансплантата скультивированными фибробластами для повышения эффективности хирургического лечения пародонтита (экспериментально-клиническое) //Автореф. дис. . к.м.н. М. -2004. - 27 с.
141. Френкель Л.А. Возрастные особенности обмена гликогена костной ткани крыс в условиях острого лучевого поражения // Экспериментальная и клиническая радиобиология. Республ. межведомственный сборник. Киев. -"Здоровья". 2007, № 9. - С. 150-153.
142. Хмелевский Ю.В. Витамины и возраст человека. Киев: «Наукова думка». - 2003. - 263 с.
143. Хмелевский Ю.В., Губский Ю.И. Биологическая химия. Практикум. — Киев: «Вища школа». Головное изд-во. 2005. - 207 с.
144. Ходжаев Т.Б. Применение нового вида костных трансплантатов в микрохирургии // Казанский медицинский журнал. 2006. - Т. 87, № 6. - С. 420-423.
145. Хочачка П., Сомеро Дж. Биохимическая адаптация. /Пер. с англ.: М.: «Мир».-1988.-568 с.
146. Чекман И.С. Биохимическая фармакодинамика. К.: «Здоровья». -2008.-200 с.
147. Чудаков О.П., Горбачев Ф.А. Хирургическая техника устранения деформаций челюстно-лицевой области аллогенным коллаген-фасциальным трансплантатом // Стоматологический журнал : Науч.-практ. журн. 2005. -Том 2,N3 .-С. 22-25.
148. Чудаков О.П., Горбачев Ф. А. Осложнения в контурной пластике челюстно-лицевой области аллогенным коллаген-фасциальным трансплантантом // Медицинский журнал: рецензируемый научно-практический журнал. 2005. - N 4 . - С. 116-118.
149. Чудинов А.Н. Особенности углеводно-энергетического обмена костных аутотрансплантатов при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте. Автореф. дис. .канд. мед. наук -Махачкала. - 2006. -22 с.
150. Цыбульский В.В. Механизмы регуляция минерализации костей и зубов. Роль витаминов и гормонов. ( Историческая справка). Одесса: ИПЦ ОГМУ.-1993.-144 с.
151. Цыбульский В.В., Нагиев Э.Р. Биохимия зубов и слюны. Одесса: ИПЦ ОГМУ. - 2001. - 193 с.
152. Шамсудинов А.Х. Сравнительная биохимическая и морфологическая оценка свойств деминерализованных в различных растворах костного матрикса и его применение для костной пластики. Автореф. дисс. .канд. биол. наук. -М.: 1984.-22 с.
153. Шамсудинов А.Х., Петрович Ю.А., Сумароков Д.Д., Швырков М. Б. Особенности созревания фосфорно-кальциевых соединений притрансплантации костей, обработанных различными способами // Стоматология. -2002,№5.-С. 12-15.
154. Шварц В.В., Гаджиев А.Р. Сравнительная характеристика энергетического обмена костных трансплантатов при ауто- и аллопластике // В кн.: «Трансплантация органов и тканей». Тбилиси: - 2005.- С. 178-183.
155. Швырков М. Б. Хирургическая обработка огнестрельных переломов челюстей // Российский стоматологический журнал: научно-практический журнал. 2001.-N 4 .-С. 42-45.
156. Шпигель А.С. Гексокиназатканей при атеросклерозе. Дисс. . канд. мед. наук. - Куйбышев. - 1975. - 237 с.
157. Яковлев Н.Н., Чаговец Н.Р., Максимова JI.B. Зависимость креатинкиназной и гликогенсинтетазной активностей скелетных мышц от состояния фосфорилированности адениннуклеотидов и обмена сАМР // Укр. биохим. журнал. 2000. - Т. 72, № 3. - С. 298-303.
158. Anderson K.J., Le Goeg J.F., Dingwal J.A. Processed geterogenous bone a basic scientific study with preliminary clinical trials in humans // JAMA. 2007. - V. 193.-p. 374-300.
159. Armiger L. C., Hollia L.G., Sellye R.N. Regional variation in the adenine oxypurine pool of the heart in normoxia and oxygen deficiency // Exp.Pathol. -2006. -V. 30, № l.-P. 33-38.
160. Bai X., Miao D., Panda D. et al. Partial rescue of the Hyp phenotype by osteoblast-targeted PHEX (Phosphate-Regulating Gene with Homologies to Endopeptidases on the X Chromosome) exspression // J. Mol. Endocrinol. -2002. -Vol.16, N 12.- P. 2913-2925.
161. Barber R., Plumb M.A. Elevated mutation rates in the germ line of first- and second-generation offspring of irradiated male mice // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2002. 99, № 10. -P. 6877-6882.
162. Barrker S.B., Summerson W. The colorimetric determination of lactic acid in biological material // J.Biol.Chem. 2001. - Vol. 158 (2). - P. 586-594.
163. Bauss O., Schwestka-Polly R., Schilke R., Kiliaridis S. Effect of differentsplinting methods and fixation periods on root development of autotransplanted immature third molars // J. Oral Maxillofac Surg 2005. - Vol. 63 (3). -P. 304-310.
164. Bauss O., Fenske C., Schilke R., Schwestka-Polly R. Autotransplantation of immature third molare into edentulous and atrophied jam sections // Int. J. Oral Maxillofac Surg. 2007. - Vol. 33 (6). - P. 558-563.
165. Behrens P., Schwaninger M., Meiss L. Calcium Phosfate Bone Substitutte Materials: A Long Term Follow Up. // J. Jone Joint Surg (Br). - 2007. - 79-B. - P. 161-167.
166. Bennick A. Interactions of plant polyphenols with salivary proteins // Crit. Rev. Oral Biol. Med. -2002.-Vol. 13, N 2.- P. 184-196.
167. Boabaid F., Berry J.E., Koh A J. et al. The role of parathyroid hormone related protein in the regulation of osteoclastogenesis by cementoblaste // J. Periodontol. 2004. - Vol. - 75 (9). - P. 1247-1254.
168. Bloometdi C., Cauco A.V., Simpson C.J. // Transplantation. 2005. - Vol. 78, N7.-P. 982-986.
169. Brandenburg V.M. //Transplantation. 2004. - Vol. 77, N. 10. - P. 1566 -1571.
170. Calabrese E. J., Baldwin L.A. Radiation Hormesis and Cancer // Human and Ecological Risk Assessment. 2004. - 8, № 2. - P. 327-353.
171. Campbell N. A. and Reece J. B. (2002). Biology (sixth edition). Benjamin Cummings, San Francisco. This includes the Campbell Biology CD-ROM and Website www.cambellbiology.com.
172. Chaussain-Miller C., Fioretti F., Goldberg M., Menashi S. The role of matrix metalloproteinases (MM Ps) in human caries // J. Dent. Res. 2006.-Vol. 85, N 1. -P. 22-32.
173. Chen H., Banaszak H.M., Orr B.G. et al. Interaction of dendrimers (artificial proteins) with biological hydroxyapatite crystals // J. Dent Res. 2003. -Vol. 82, N 6. - P. 443-448.
174. Goldberg M., Septiers D., Rapoport O. et al. Biglycan is a repressor of amelogenin expression and enamel formation: an emerging hypothesis // J. Dent Res. 2005. - Vol. 81, N 8. - P. 520-524.
175. Gordon E.J. Extracellular ATP: effects, sources and fate // Biochem. J. -2006. V. 243, №2. - p. 309 - 319.
176. Cori C.F., Cori C.T. The kinetics of the Enzymatic Synthesis of Glycogen from Glycogose-i-Phosphate Crystalling Muscle Phosphorylase in Kinetice
177. J.Biol.Chem. -2003. -Vol. 171 (39).-P. 1014-1033.
178. Creen A.A., Eastoe J.E. The chemical composition of Bone In: Biochemists handbook. Eds. King E. // J.I Sperry W.M. London. 2008. - P. 715720.
179. Cusso R., Ovortrup K., Nielsen J.N. Translocation of glycogen synthase to a novel structure during glycogen resynthesis // J. Biol. Chem. 2006. - Vol. 298 (37).-P. 3156-3167.
180. Daryl K. Granner. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. - New Delhi. - 2003. - P. 329-347.
181. Degidi M., Scarano A., Piattelli A. Regeneration of the alveolar crest using titanium micromesh with autologous bone and a resorbable membrane // J. Oral Implantol. 2003. - Vol. 29 (2). - P. 86-90.
182. Dische S., Sounders M., Barrett A. et al. A randomized multicenter trial of CHART versus conventional radiotherapy in head and neck cancer // Radiother. Oncol. -1997. 44. - P. 123-136.
183. Duarte P.M., de Assis D.R., Casati M.Z., Sallum A.W. Alendronate may protect aqainst increased periodontitis-related bone loss in estrogen-deficients rats // J. Periodontol. 2004. - Vol. 75 (9). - P. 1196-1202.
184. Edwards P. A. Calcium. // Molecular Cell Biology, BC 205 Dental. Fall. -2005.-P. 1-17.
185. Embery G., Hall R., Waddington R. et al. Proteoglycans in dentinogenesis // Crit. Rev. Oral Biol. Med. 2006. - Vol. 12. - P. 331-349.
186. Enacar A., Keser E.I., Mavili E., Giray B. Facial asymmetry case with multiple missing teeth treated by molar autotransplantation and orthognathic surgery // Angle Orthod. 2005. - Vol. 74 (1). - P. 137-144.
187. Han Bao Fen., Zhang Ce, Qi Jin-Shun. ATP — sensitive potassium channels and endoginius adenosine are involved in spinae antinociception produced by locus coeruleus stimulation // Acts phisiol. sin. 2002. - V. 54, № 2. - p. 139 - 144.
188. John V., Gossweiler M. Implant treatment planning and rehabilitation of the anterior maxilla, Part 2: The role of autogenous grafts // J. Indians Dent Assoc. 2002. - Vol. 81 (1). - P. 33-38.
189. Joshi A. An investigation of post-operative morbidity following chin graft surgery // Br. Dent J. 2004. - Vol. 196 (4). - P. 215-218.
190. Iijima M., Moradian-Oldak J. Control of octacalcium phosphate and apatite crystal growth by amelogenin matrices // J. Materials Chem. 2004. - Vol. 14. - P. 2189-2199.
191. Iijima M., Moriwaki Y., Wen H.B. et al. Effects of ionic flow amelogenins on the lengthwise growth of octacalcium phosphate crystals in a model system of tooth enamel formation //Mat. Res. Soc. SymP. Proc. 2002. -Vol. 724, N 6.4.1
192. Imasato S., Fukunishi K. Potentialefficacy of GTR and autogenous bone grafts for autotransplantation to recipient sites with osseous defects: evaluation by re-entry procedure //Dent Traumatol., 2006. Vol. - 20 (1). - P. 42-47.
193. Ioannidou E., Makris G.P. Twelvezyear followzup of an autogenous mandibular canine transplant //Oral Surg, Oral Med, Oral Pathol, Oral Radiol Endod. 2006. - Vol. 97 (3). - P. 582-590.
194. Ivanitsky G., Obraztsov V., Sklifas A., Sologub G. Perfluorochemicals and biological membranes: interaction and related problems //11 th. Intern. Symp. Chem. Berlin, 1995. - D-29.
195. Fox I.N., Burk L., Planet G. et al. Pyrimidine nucleotide biosynthesis. A study of normal and purine enzymedeficient ells //J. Biol. Chem. 1998. - V. 253, N. 19.-P. 6794-6800.
196. Kawakami M., Kuroda S., Takada K., Yoshida C.A. Dental follicle cell-conditioned medium enhances the formation of osteoclast-like multinucleated cells // Eur. J. Orthod. 2006. - Vol. 22 (6). - P. 675-682.
197. Kawasaki N., Hamamoto Y., Nakajama T. Periodontal regeneration of transplanted rat molare after cryopreservation // Arch. Oral Biol. 2004. - Vol. 49 (l).-P. 59-69.
198. Kerr S.E. Studies on phosphorus compounds of brain phosphocreatine. // J. Biol. Chem. 1985, 153. - p. 625-635.
199. Kerr S.E. The carbohydrate metabolism of brain I. The determination of glucogan in nerve tissue // J. Biol. Chem. 2006. - 174, 1. - P. 1-7.
200. Kitahara Y., Suda N., Terashima T. et al. Accelerated bone formation and increased osteoblast number contribute to the abnormal tooth gern development in parathyroid hormone-related protein knockout mice // Bone. 2004. - Vol. - 35 (5).-P. 1100-1106.
201. Koike H., Uzawa K., Grzesik W.J., Kasamatsu A. Gluti is highly expressed in cementoblaste but not in osteoblasts // Connekt Tissue Res. 2007. - Vol. 46 (3).-P. 117-124.
202. Кольман Я., Рем К.Г. Наглядная биохимия: Справоч. Изд.: Пер. с нем. М.: Мир, 2000. - 469 е.: ил.
203. Komerik N., Akkaya A., Yildiz М. Oral health in patients on inhaled corticosteroid treatment // Oral Dis. 2005. - Vol. 11 (5). - P. 303-308.
204. Koshy S., Love R.M. Endodontic retreatment of an autotransplanted lover first premolar: a case report // Dent Traumatol. 2003. - Vol. - 19 (4). - P. 228232.
205. Krebs E.G., Pischer W.H. Phosphorylase Activity of Skeletal Muscie. Exts. //Bioch. Biophys. Acta. 1986.-20. - P. 150 -161.
206. Kudoetal J., Carlini R.G. // Am. J. Kidney Dis. 2006. - Vol. 36, N 1. - P. 160- 166.
207. Lascu J. Nucleoside diphosphate kinase — new functions for and old enzyme // Rev. roum biochim. 1991. - V. 28, N 3-4. - P. 143-147.
208. Laver Drek R. Lenz Gerlinde K.E., Lamb Graham D. Regulation of the calcium release channel rabbit skeletal muscle by nucleotides ATP, AMP, IMP and adenosine // J. Phisiol. 2001. - V. 537, № 3. - P. 763 - 778.
209. Lansi G., Termine C., Capsoni C. Facial erythema associated with short stature, absent distal phalanx, dental and nail anomalies: case report and neuropsychological profile // Clin. Dismorphol. 2005. - Vol. 14 (2). - P. 105-160.
210. Lee C.Y. Procurement of autogenous bone from ramus with simultaneous the mandibular third-molar removal for bone grafting using the Cr: YSGG laser: a preliminary report // J. Oral Implantol. 2005. - Vol. 31 (1). - P. 32-38.
211. Lee J.E., Nam J.H., Kim S.J. Muscarinic activation of Na+- dependent ion transporters and modulation by bicarbonate in rat submandibular gland acinus // J.Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. -2005. -Vol. 228. P. 822-831.
212. Leroukel E., Libouban H., Basle M.F., Audran M. Mandibular bone loss in an animal model of male osteoporosis: a radiographic and densitometric study // Osteoporos Int.-2004.-Vol. 15 (10).-P. 814-819.
213. Lin J., Krishnara J., Kemp R.G. Exogenous ATP enhances calcium in flux intact thymocytes // J. Immunol. 2005. - V. 135, №5. - P. 3404 - 3411.
214. Linton J.L., Sohn B.W. Effecte of calcium phosphate ceramic bone graft materials on permanent teeth eruption in beagles // Cleft Palate Craniofac J. 2002. -39(2).-P. 197-207.
215. Malhier H. Pyrimidin Nucleotide and Leitunoyrbegrenrung der ZNS //
216. Med. actuell. 2008. - T. 16, N 5. - S. 232-235.
217. Matin K., Nakamura H., Osawa H. Impact of recombinant human bone morphogenetic protein-2 on residual ridge resorption after tooth extraction an experimental studi in the rat // Int. J. Oral Maxillofac Implants. 2003.- 16 (3). - P. 400-411.
218. Meyer R., Daidson B., Binker A., Hoffman P. The acid mucopolysaccharides of connective tissue. // Biochem. Biophys acta. 2006. - 40. -P. 506-518.
219. Michel Patrick P., Marien Marc, Ruberg Merle, Colpaert Francis, Agid Yves. Adenosine prevents the death of mesencephalic dofaminergic neurous by a mechanism that involves astrocites // J. Neurochem. 1999. - V. 72, № 5. - P. 2074-2082.
220. Moyad M.A. Osteoporosis. Part 111-Not just for bone loss: potential benefits of calcium and vitamin D for overall general health // Urol Nurs. 2003. — Vol. 23 (l).-P. 69-74.
221. Nair P.R., Schug J. Observatione on healing of human tooth extraction sockets implanted with bioabsorbable polylactic-poliqlicolic acids (PLGA) copolymer root replicas // Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. -2004. 97(5). - P. 559-569.
222. Natin K., Senpuku H., Hanada N., Ozawa H., Ejiri S. Bone regeneration by recombinant human bone morphogenetic protein-2 around immediate implants: a study in rats // Int J Oral Maxillofac Implants. 2002. - 18(2). - P. 211-217.
223. Nelson M.A. Photometric adaptation of the Somogyi method for the Determination of Glucose. //J.Biol.Chem. 1995. 163. P. 375-380.
224. Nethander G. Autogenous free toth transplantation with a two-stage operation technique // Swed. Dent J. Suppl. 2006. - Vol. 161.-P. 1-51.
225. Neuberger A., Perrone J. C., Slack H. G. The relative metabolic inertia of tendon collagen in the rat. // Biochim. J. 2001. - 69. - P. 199-204.
226. Neuhard J., Nygaard P. Purines and Pyrimidines // Cell, and Mol. Biol. -2007.-V. 11.-P. 445-473.
227. Nicholas R.W., Lange T.A. Granular Tricalcium Phosfate grafting of cavitary legions in human bone // Clin. Orthop. 30b. 2006, 197. - P. 123-126.
228. Ninomiya M., Kamata N., Nagata T. et al. Application of enamel matrix derivative in autotransplantation of an impacted maxillary premolar: a case report // J. Periodontol. 2002. - Vol. 73 (9). - P. 346-351.
229. Oba Toshiharu, Murayana Takashi, Ogawa Yasuo. Redox states of type 1 ryanodine receptor alter Ca release channel response to modulators // Amer. J. Physiol. 2002. - V.282, №4. - p. 684 - 692.
230. Osawa H., Irie K. Periodontal regeneration of transplanted rat molare after cryopreservation P. 11 //Arch. Oral Biol. - 2006. - Vol. 51 (4). - P. 195-209.
231. Pappalardo S., Baglio O.A., Frasca M., Grassi F.R. Alveolar ridge augmentation by means of onlay grafts harvested from mandibular symphysis // Minerva Stomatol. 2004. - Vol. 52 (4). - P. 143-150.
232. Pechan I., Halcaki, Liska Branislav. Syntera adeninovych a uridinovych nukleotidov a RNA morgonej kore morciat // Bratisl., Lek. Listy. -2008. -V. 74, N l.-P. 30-36.
233. Penttinen R. Metabolism of fracture callus on rat In vitro. I. oxygen-consumption and lactic acid production // Acta phisiol. Scand. 2003. - 87. - I, 133-137.
234. Pereira da Silva S.L., Sallum A.W. Comparison of bioabsorbable and non resorbable membranes in the treatment of dehiscence-type defects. A histomorphometric studi in dogs // J. Periodontol. 2000.- 71 (8). - P. 1306-1314.
235. Peter A. Mayes. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. -Boston.-2003.-P. 102-160.
236. Peter A.M., de Servaux R.G., van Hoof H.J. et al. // Nephron Clin. Prakt. -2003.-Vol. 93,N l.-P. 121-128.
237. Prats С., Cadefau J.A., Cusso R. et al. Phosphorylation-dependent translocation of glycogen synthase to a novel structure during glycogen resynthesis //J. Biol. Chem. -2005. Vol. 280 (24). - P. 23165-23172.
238. Rahnama M., Bloniars J., Zabera S. et al. Study of estrogen deficiency impact on manganese levels in teeth and mandible of rate after ovariectomyl // Roce Panstw Zaki Hig. 2003. -Vol. 54(1).-P. 33-38.
239. Rake J.P., Visser G., Piers D.A. Bone mineral density in children, adolescents and adults with glycogen storage disease type la: a cross-sectional and longitudinal study // Triherit Metab Dis. -2006.- Vol. 27 (9). P. 415-428.
240. Rapoport J. Drung J., Rapoport S.M. Catabolism adenine nucleotides in rabbit blood cells // Biomed. Biochem. Acta. 2000. - V. 59, №1. - p. 11 - 16.
241. Рапопорт C.M. Медицинская биохимия. Пер. с нем. М.: «Медицина». - 1979. - 892 с.
242. Reith Е. J. The binding of calcium within the Golgi saccules of the rat odontoblast // Am. J. Anat. 2005. - Vol. 147, Is. 3. - P. 267-271.
243. Rix M., Levin E., Olgaard K. // Transplantation Rev. 2003. - Vol. 17, N. 4.-P. 176-186.
244. Roberti K. Murray. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. - Toronto: 2003. - P. 495-542.
245. Roberti K.M., Wolczynski S., Malyszko J.S. et al. // Transplantation Proc. 2005. - Vol. 35, N 4. - P. 1351-1354.
246. Robison B.R. The possible significance of hexose-phosphoric esters in ossification // Biochem J. 2006. - 49. - P. 286-293.
247. Rodwell V.W. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. -New York. - 2003. - P. 343-388.
248. Rogers J.D., Palmer R.J., Kolenbrander P.E. Role of Streptococcus gordonii amylase-binding protein A in adhesion to hydroxyapatite, starch metabolism, and biofilm formation. — Infect Immun. 2006. - Vol. 69 (11). - P. 7046-7056.
249. Roe S.D., Porter C.J., Godber I.M. // Osteoporos Int. 2005. - Vol. 16, N. 2.-P. 142-148.
250. Romanenko V., Nakamoto T., Srivastava A. et al. Molecular identification and physiological roles of parotid acinar cell Maxi-IC channels // J.Biol.Chem. -2006. -Vol. 281, Is. 38. P. 27964-27972.
251. Santos M., Line S. The genetics of amelogenesis imperfecta. A review of the literature // J. Appl Oral Sci. 2005. - Vol. 13, N 3. - P. 212 -217.
252. Scheele S., Falk M., Franzen A. et al. Laminin 1 globular domains 4-5 induce fetal development but are not vital for embryonic basement membrane assembly//PNAS. 2007. - Vol. 102, N5.-P. 1502-1506.
253. Schram K.N. Purines and pyrimidines // Mass Spectrometry. Berlin, New York. - 2007. - S. 507 - 570.
254. Shibata D., Peinado M.A., lonov Y. et al. Genomic instability in repeated sequences is an early somatic event in colorectal tumorigenesis that persists after transformation //Nat. Genet., -2004. Vol. 6, № 3. - P. 273-281.
255. Seifert J., Buchar E. The biosynthesis of cytidine nucleotides in rat liver after administration of D. galacto somine // Biochem. Soc. Trans. - 2001. -V. 9, N 2.-P. 314-318.
256. Smith B.W., Roe J.K. A. photometric method for the Determination of amylase in Blood and Urine with use of the Starch-Jodino Color // J.Biol.Chem. -1989.- 179, l.-P. 53-59.
257. Stewart G., Hansen B.F., Ploug T. Glycogen synthase to a novel structure during // J. Biol. Chem. 2005. - Vol. 281 (28). - P. 2316-2327.
258. Tanser J.M., Grant L. Amilase-binding proteins A and B differentially affect colonization of rate teeth by Streptococcus gordonii // Microbiology. 2003. -Vol. 149 (Pt 9). - P. 2653-2660.
259. Tanu D., van der Veer E., Smit G.P. Bone mineral density in children, adolescents and adults with glycogen storage disease type la: a cross-sectional and longitudinal study // Triherit Metab Dis. 2005. - Vol. 26 (4). - P. 371-384.
260. Thone M., Reychler H. Auto-transplantation of an impacted or retained maxillary canine (Article in French) // Rev. Stomatol Chir. Maxillofac. 2002. -Vol. 103 (5).-P. 288-293.
261. Van Den Berghe G., Vincent M.F., Bontemps F. Pathways and control of adenine nucleotide catabolism in anoxic rat hepatocytes // Biomed. Biochem. Acta. 1999. -V. 58, №2/3.-P. 510-516.
262. Van Den Berghe G., Bontemps F. Adenine nucleotide catabolism in human erythrocytes: Pathways and Regulation // Biomed. Biochem. Acta. 2000. - V.59, №2/3. -P. 117-122.
263. Veis A. Biomineralization: On the Trail of the Phosphate. Part II: Phosphophoryn , the DMPs, and More // J. Dent. Res. 2004. -Vol. 83, N 1. - P. 6 -10.
264. Velich N., Hrabak K., Nemeth Z., Barabas J., Szabo G. Correction of maxillary atrophy with onlayzplastyl (Article in Hungarian) // Fogorv Sz. 2006. -Vol. 95 (6). - P. 245-248.
265. Voet D., Voet J.G. Biochemistry. 3rd Edition. Wiley International Edition. USA. 2004. - 854 p.
266. Victor W. R. Harpers Illustrated Biochemistry. International Edition. -London. - 2003. - P. 603-641.
267. Wen X., Lei Y.P., Zhou Y.L. et al. Structural organization and cellular localization of tuftelin-interacting protein 11 (TFIP11) // Cell Mol. Life Sci. 2007. -Vol. 62,N9.-P. 1038-1046.
268. НАУЧНЫЕ РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
269. Чудинов А.Н., Нагиева С.Э. Перспективы трансплантологии костной ткани в современной медицине // Труды международной научной конференции «Фармакология и фармакотерапия: достижения и перспективы». Махачкала: ИПЦ ДГМА, 2006. - С. 254 - 256.
270. Чудинов А.Н., Нагиева С.Э., Исмаилова Ф.Э. Энергетический обмен при критических состояниях организма и его коррекция перфтораном // Экология промышленного производства. 2007. — № 1. - С. 46 - 50.
271. Нагиева С.Э. Исследование молочной кислоты в костных аллотрансплантатах при замещении дефектов нижней челюсти в эксперименте // Вестник Российского государственного медицинского университета. 2009, №3 - С. 54 - 55.
272. Исмаилова Ф.Э., Нагиева С.Э. Коррекция содержания АТФ и креатинфосфата при критических состояниях организма в эксперименте // III
273. Международный молодежный медицинский Конгресс «Санкт-Петербургские научные чтения». Санкт-Петербург. - 2009. — С. 31 - 32.