Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему:Антигенная характеристика мононуклеарных клетокпериферической крови больных неходжкинскои злокачественной лимфомои на различных этапах опухолевой прогрессии

министерство здравоохранения россии новосибирский медицински« институт

<■1 — ■ >_Л "__

» ! *J - ■ >

; :'< , ¿Г) I - На правах рукописи

УДК 616. 155. 392-097-036.1

КОВЫНЕВ Игорь Борисович

Антигенная характеристика мононуклеарных клеток периферической крови больных неходжкинской злокачественной лимфомой на различных этапах опухолевой прогрессии.

14.00.29—гематология и переливание крови

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

' ¿llonwnuiipci:—НШ

Габота выполнена на кафодро госпитальной терапии с курсом проф-иатологии и физиотерапии педиатрического факультета Новосибирского медицинского института.

Научные руконод11толп:

доктор медицинских наук, профессор М. II. ЛОСЕВА, кандидат медицинских наук И. А. ЛИСУКОВ.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, академик РАМН Л. Д. СИДОРОВА, кандидат медицинских наук Е. Р. ЧЕРНЫХ.

Ведущая организация: Томский медицинский университет. Защита состоится « у{__^99 ^год.

_' г°Да в_час- па заседании специализированного ученого совета К 08/(.52.03 Новосибирского медицинского института (030091, г. Новосибнрск-91, Красный проспект, 52).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирского медицинского института.

Автореферат разослан

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

И. //. ШАРАПОВ.

ОБШАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ. Актуальность исследования.

Среди опухолевых заболеваний кроЕИ особое место занимают неходжкинские злокачественные лимфомы (НЖШ, что определяется их большим удельным г.есом в структуре гемобластозов и высокой смертностью больных, несмотря на интенсивную полихими--отерапию. А. И. Воробьевым (1982) ,Р. С. Самойловой (1990), 5коос1 I. , ТаШ Е. (1991) и другим;! авторами отмечено, что при одном и том гисто-морфологическом варианте,сходных клинических проявлениях дебюта заболевания , р одних и тех же возрастных группах, при одинаковых схемах лечения агрессивность- лимфосар■ комы зачастую различна. Наиболее сложным вопросом в тера- ' певтической такгике лиыфом является прогнозирование опухолевой прогрессии заболевания. Большинство авторов разделяет мнение УесЫо МЛ. , Ьеопсим I. (1991) и Вигке X 5. (1990),что ни <5д-на из многочисленных прогностических моделей, предложенных в последние года! и включающих в себя различные клинические и параклинические критерии, полностью не решает этой проблемы, которая стала особо актуальной с появлением современных программ полихимлотерапии и трансплантации костного мозга.

В публикациях последних лет отмечается наличие глубоких патогенетических связей опухолевой прогрессии ЯХЗЛ с перестройкой в иммунной системе и кроветворении в целом. В. А. Козловым, И. Г. ЦирловоЧ, И. А. Лиеуковым (1937), 0. Д. Халдаыидн (1993) ЭГ-перименталию показано,что агрессизность иеходжкинской злокачественной лимфомы коррелирует со степенью вовлечения в патологический процесс стволовой кроветворной клепси (СКК) и нарушением дифференцкревки ранних гемопоэтичэских предшественников с накоплением в периферической крови и селезенке ранних эрит-рсидных клеток.

А. Ю. Бэрыкниковым (1989), ЗЬоир П. М. «ВаШгп Ь. (1990) и другими выявлена взаимосвязь течения лшфопролиферативных заболеваний и иммунологического фенотипа опухолевых клеток. Анализ функционирования системы иммунитета при опухолевых заболов-киях, проведенных Я. Карром (1980), А. II Воробьевым, М..Д. Бриллиант (1982, 1936), В.' П. Лозовым (1987), Регг1 0. Л. (1930), Е. Р. Черных (19Э2), выявил иммунологическую несостоятельность у больных гемобла-стоэами,обусловленную нарушением дкффереяцпрозки Т- и В-клеток.

Из приведенных данных следует, что быстрота прогрессирова-ния .темфосарком и прочюз заболевания во мк'эгом определяются как антигенным фенотипом опухолевых клеток, который зависит от степени их дифференцировки, так и характером, выраженностью нарушений в иммунной системе. Бое эти процессы находят свое отражение в изменении соотношения отдельных субпопуляций монснукльарных клеток (МНЮ периферической крови. Показано, что среди одноядерных элементов периферической крови у больных неходжкинской злокачественной лимфомой имеют свое представительство элементы трех основных групп : клетки иммунной системы, гешлоэтические предшественники и собственно опухолевые клетки, вымываемые током лимфы из пораженных лимфоузлов в периферическое русло.

В литературе нет данных о комплексном анализе экспрессии антигенов ранних гемопоэтических и лимфоидных меток на Ш1К периферической крови больных лимфосаркомой на различных этапах опухолевой прогрессии. Отсутствуют публикации, позволяющие соотнести данные о нарушении дифференцировки ранних гемсиозтических клеток при НХЗЛ, полученные на экспериментальных моделях, с аналогичными показателями у человека.

Решение этих вопросов может внести определенный вклад в расшифровку патогенетических механизмов опухолевой прогрессии лнмфосаркомы и подойти к определению иммунологических критериев прогнозирования течения заболевания.

Эти положения определили цель и задачи исследования.

Цель исследования.

Изучить соотношение отдельных субпопуляций мононуклеаров периферической крови больных лимфосаркомой на различных этапа:: опухолевой прогрессии и на этой основе разработать критерии прогноза. ,

Задачи исследования.'

1. Изучить соотношение отдельных субпопуляций ШК периферической крови, акспресеируюшдх маркеры Т- и Б-клеток различных мтапов дифференцировки, СКК и эритробластов у больных лимфосаркомой на различных стадиях прогрессировали, в фазу ремие-сии.

2. Выявить особенности костно-мозгоюш кроее';торенш у больных лимфосаркоыой и провести корреляционный анализ взаимосвязи иг/мукологических показателей и данны;' миелограммы.

3. Дать характеристику кммунофэнотипэ МНК крови больных лимфо-саркомой с поражением органов келудочно-кииечного тракта, коки И центральной нервной системы.

4. Вшвить прогностически значимые типы иммунных расстройств у больных лимфссаркомой и с учетом показателей иммунологического профиля Ж крови больных определить прогностические критерии опухолевой прогрессли НКЗЛ.

Научная новинка. •

Впервые показано изменение соотношения отдельных субпопуляций МНК периферической крови у больных неходжкинской злокачественной лшфешй (НХЗЛ) на этапах'опухолевой прогрессии,' что проявляется снижением уровня клеток,зкспрэссирующих антигены Т-кле-т-ок С0Б,С07<ГО4 и нарастанием числа элементов, несущих антигена ранних предшественников млело- и-лимфопозза : С034, С010,ТЬу-1, ¡№6-1, СШс, СБ38,1а-1ТоДобНИе антигены, т-цепь антигены ранних эритроидных клеток (. эритробластов - ЕЛЕ-9--положительные клетки и гликофорина А).

Отмечено, что увеличение срё^и ШК кре.'Ч числа ранних гемо-позтических предшественников, эритроидных й ранних лимфоидных клеток, тесно коррелируем со снижением клаточгкзети костного' мозга, с/лением основных ростков кроьеявврзяия, нарушением ;дифференцировки зритроидных и гранулоцлтаряых элементов, увеличением числа дамфоидных клеток в том, числе, неоуялх морфологические черты элементов лимфос-аркомы (рас!!;вшжме ядер, клеточный полчморфизм и др. )■ -

Доказано,- что опухолевая прогрессия неходжкинской злокачественной лммфомы во многом определяется особенностями перестройки . ш,»лунной системы и г.емопозза Реакция кроветворной системы на Еозникновен"е и развитие опухоли через, нарушение дйыфзрек-цйровки СКК, накопление ранних оритрокдннх клеток С' о учётом

феномена Ег-супрессии) .влияние системы иммунитета через активацию супрессорных механизмов и перестрой!"/ т-евена определяют быстроту опухолевой прогрессии НХЗЛ Отражением этого процесса являются изменения в соотношении отдельных субпопуляций МНК крови больных лимфосаркомой.

По антигенной характеристике Т~клеток среди больных лимфосар-комой выделена группа с высоким содержанием МНК крови, экспрес-сирующих т-клеточные маркеры. В клиническом плане эти больные разделились на две группы, среди которых у одних выявлено первичное поражение желудочно-кишечного тракта и относительно благоприятное течение заболевания после оперативного вмешательства и полихимиотерапии (ПХГ);у других - более агрессивное течение сопровождалось поражением кожи,центральной нервной системы,резистентностью к проводимой терапии и крайне плохим прогнозом.

Впервые на основе кластерного анализа показателей иммунологического фенотипа ШК крови и клинических проявлений дана характеристика типов иммунных расстройств у больных НХЗЛ и выделены критерии опухолевой прогрессии лимфом.

Практическая значимость работы.

Результаты исследования позволяют рекомендовать в практику онкогематологки критерии неблагоприятного течения иеходжкинс-кой влокачественной лимфомы. При прогрессировании заболевания в периферической крови больных лкмфосаркомой значительно увеличивается количество мононуклеарных клеток, несущи на своей мембране антигены ргшних предшественников гемогюэза и ствола вой кровеурорной клетки (С034,ИГВ-1),ранних эритровдных клеток (антиген эритгэбластов и гликофорин А),лимфобластов (СОЮ), при этом в миелограмме уменьшается количество эритроидных клеток й нарастает число лимфоицных элементов. Эти изменения харак терны для активной фазы лимфосаркомы 1<ак у первичных больных, так и нь. фоне лечения. В фазе ремиссии уровень' указанных маркеров нормализуется и достигает контроля. При рецидиве заболевания вновь отмечается увеличение ШК крови,зкспрессирующих антигены ранних кроветворных клеток. Указанные иммунофенотяпи-•к-екие критерии могут слулить в качестве показателей надекно-пи ромноои'и или рецидива опухолевого процесса даже при отс^т-

- Б -

ствии его клинических проявлений. На основе анализа иммунсфр-нотипической характеристики мононуклеаров крови предложены типы иммунных расстройств у больных лимфосаркомой ("Т-лимфсци-топенкческий", "Т-клеточный", "В-клеточный" \и "атипичный" ) .отражающие своеобразные варианты реакций иммунной системы и миело-позза на возникновение и прогрессирование опухоли. Выделение типа иммунных расгройств дает возможность прогнозировать клинические проявления опухолевой прогрессии заболевания.

Комплекс иммунофенотипических показателей позволяет оценить агрессивность лумфосаркомн на всех зтапэх заболевания, независимо' от гисто-морфологического варианта НХЗЛ,диагностировать рецидив до его этнической малифестации, определить глубину Ремиссии и предложить адекватную терапевтическую тактику в каждом конкретном случае лимфомы

На защиту еыносятся следующие положения.

1. Неходжкмнская злокачественная лимфома характеризуется повышением в периферической крови уровня рашшх гемоп'оэткче.с-гах предшественников на фоне прогрессирующей Т-лимфоцитопении. тго сопровождается увеличением среди мононуклеарных клеток периферической крови (МНК) клеток,экспреоспрующих на своей мембране антигены стволовой кроветворной клетки и ранних гемопозтиче-?ких элеметов (CD34 RFB, 1а-подобные антиген.' ), ранннх лимфоид-шх клеток -- лимфобластов (CD10), преТ- и преВ-клеток ( Thy-1, п-цепь Ig),ранних эритроидиых элементов ( НАЕ-ЗС+), НАЕ-9(+) иементы), скитанием количества СС5,С07-пологзгеельных ¡слеток

i инверсией хелперно-супрессорного соотношения (CD4(+)/CD8(+) глеткИ), что отражает своеобразие реакции кроветворной к именной систем на возникновение и развитие опухоли с нарушением (ифференцировкч СКК, накоплением ранних элементов эритрона,подстройку Т-аяена и определяет быстроту опухолевой прогрессии абэлсвания.

2. Изменения иммунологического- Фенотипа • 'мононуклэзрннх •леток крови (MiF.) тесно коррелирует с показателями м»..ло-раммы. Рост числа ранних гекопоэткческик' и зритроиднкх леток сопровождается снижением неточности ■ костного мозга, арушением дифференцировки ккелопдкого и . гранугодатарлего ядов кроветворения,.- повышением колччесхаа лимфоидных" кл«ток

и элементов лимфосаркомы даже вне фазы лейкемизании.

3. Клинические варианты лимфосаркомы с поражением органов желудочно-кишечного,тракта, центральной нервной системы и кожи отличаются своеобразием иммунологического фенотипа Щ.К крови и характеризуются отсутствием Т-лимфоцитоцедии -I инверсии ходивр-но-супрессорного соотношения.

4. По антигенной характеристике МШ периферической крови у больных лимфосаркомой выделены прогностически значимые типы иммунных расстройств:

- Т-лимфоцитопеничеекий (опухолевый) тип,для которого характерно снижение, относительно донорского,уровня зрелых Г-лимфоцитов ( за счет CD5, CD? И CQ4C+)клеток ), при нормальном количестве В-лимфоцитов ( CDS2,CD3?(+jклетки j;

- Т-клеточиый тип, отличается нормальным или повышенным числом зрелых Т-лимфоцитов ( OD5<OD?,CD4(+)клетки ) И нормальным числом В-лимфоцитов ( CD32,CD37(+)клетки );

- Б-меточный - характеризуется увеличением уровня зрелых Б-клеток ( CD22,C1D3?i, +)клетки ) И сишзнием числа Т-лимфоцитов;

- атипичный - отличается уменьшением количества ЫЦК, несущих маркеры и Т-., и В-лимфоцитов.

5. К чиаду прогностических критериев опухолевой прогрессии лимфосаркомы отнесены: число монояуклеаров крови,несущих на мембране антигены ранних эритроидных элементов ( НАЕ~9( +)клеток более бZ, iiAE-З более 7%) и количество МЩ.акопрессируюядах марке ры ранних предшественников гемопоэза , СКК (RFB-1C+)клеток более £5Д% ) и лимфобластов (0D10(+)клетки более 6,5%); число прцтро-идньсг клеток в миелогранмо менее ?% и лимфоиднвд алемептои более 35iC

Апробация результатов.

Материалы диссертации доложены на Всесоюзном съеода гетто-логов( 199Q), на конференции ЩШ'РАМН (1991), на 60.51.S2 и БЗ-ef научной с-рдоии молодых ученых и отуденто» Ыовсоибирогозго медицинского института ЦШ0,сЛ,92,йЗп'), городской научно-практической конференции врачей к :| QQ-лотию г. Новосибирск 1993). ■

Внедрение результатов исследования,

; Но материалам диссертации опубликовал ? ttvwruux рмОот. п том числе 3 - б нейтральной печати. \ : Работа выполнена на каф?Дре гоеяит^чмгай терапии пединт• 1 рического факумгета Новосибирского м^шшмекого пиететут:> I (зав. itaifeapoft д. м. ц., профессор МИ. Лосеву ) на. баяе гематоло-, гического отделения 2 ГКВ г. НэвесиСирска ( главврач A. R Больно , ва, зав. отделенном Л. Г. Цветков ) .городского" онкологического • диспансера ( га-зедукяций ГОД KV3. Паров ).

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста 1 и состоит из сведения., обзора литературы, главы - материалы и .• методы иселедоьаиия, трех глав сооствешшх иссле довгиг 14, обсук-дешгя , выводов и практических рекомендаций, Иллюстрирована 12 ; таблица!,и. 21 оисунком.9 диаграммами и 5 выписками из историк : болезни.« Библиографический указатель сличает £'20 источников ■ литературы (70 отечественных и 100 иностранных авторов).

. МАТЕРИАЛЫ ,4 МЕТОДЫ ЙССЖДОЗАШЙТ. • &та!кко-гематяогическая харшегериегшеа больных.

0 noMoirjbra реакции непрямой иммуиофлюоресценции а моно,. клональнымя антителами 'обме дозою 7S 0олг«ых пеходшшсиой , i злокачественной лимфомой, из них 76 человек - с диффузным и ' I 3-е, фолликулярным характером роста опухоли. Возрастной диа-; пязон от J5 до 83 лет, В' среднем возраст больных составил 52 '. года.Среди больных мукчип-- -46 г,женила'- 54%. Давность заболе-пания от 1 месяца до 3 лет. Всем больяьм проводились современен«?, программы полихимиогерашш (ПХ7) по схемам СОРР .RAC0P-' LAÓP, ЛСОР, АСОР-bleo, в фазу лейкемивакии •• CGP-BLAM; СОР+Ага-С+м&тотроксаа' rKcsfrwr, 193-11 и др.За время наблщения(3.¿года) mi¡79 больных умерло 51. Средняя продолжительность жизни 111.5 месяцев. Лимфобластный вариант выявлен у .37 больных при • этбм 1-Й стадия заболевания - 11 человеку III-IV стадия - ;20 человек., в том числе 0 Сольных в фазе лепкеглиэащш лкм-фэблаитней дамфосариомы. В этой группе S3 человека обследо-; в.'4н в активной стадии заболерания, 4 человека в решеепл, . :' -¿-к бодып-сг mis ли ишуноблаотиый вариант лиифосарког.и ( при

- ь -

иммунофекотипироваиии показатели б этой группе не отличались ит данных при лимфобласт.юй лимфосаркоме.в сВйз'и с чем приводите* вместе).

У i'j больных был выявлен пролимфоцитарный вариант димфооар-комы. Ill стадия - у 8 'больных, III-IV . ст - у 11, один больной о лейкемизировашюй пролимфоцитарной лимфосаркомой.

Кроме того среди исследуемого контингента было 20 пациентов о лкмфоцитарным вариантом лимфосаркомы из них I-'II стадия у 2 ч.-лоин;, 111-IV от - у 17 Оолышх, С больных в фазе лейкемиза-ции и С. больных в фазе ремиссии. .

В целом обследовано 24 больных с I-I1 стадией лиыфосаркоми, ¿В •• е 111-IV от,в том чиqлe Б человек в фазе лейкемизации, 10 пациентов были 'обследованы в ремиссии заболевания.

В качестве группы сравнения обследовано 35 доноров и. 5 больных о хроническим лимфолейкозом (ХПЛ).

Опухолевая прогрессия лимфосаркомы сопровождалась генерализацией процесса, диссеминацией с поражением внелимфатичес-ких'органон и поражением костного мозга (лейкемизацией). Атипичные проявления прогрессирования заболевания были отмечены у 27Х больных (поражение ЦНС встречалось у 6,1Z всех больных лимфосаркомой, 'органов. ЖКТ - 8,1%, кожи - 11,2Z,в части случаев имело место сочетание этих симптомов).

..Методы исследования. »-

Научение особенностей реакции иммунитета и гемопоэза на рпзвиваюшук>)я опухоль у больных лимфосаркомой при различных стадиях опухолевой прогрессии проводилось с помощью реакции непрямой иммунофлюорес^енции с" моноклональными антителами (МКА) против антигенов (АГ) гемопоэтических клеток.

В целях подробного изучения фенотипа мононуклеаров периферической крови была использована панель моноклональных антител против дифференцировочньй антигенов димфэидных и гемояоз-тических клеток серии ИКО (институт клинической онкологии ОНЦ РАМК), включатеэд следующие моноклональные антитела (МКА):

1. против антигенов (AV) Т-лимфоцитов ;

• ШЮ-Ю против Thy-1-антигена, эксцресснровашюго на ранних •симпцитах и преТ-метках;

■ »'К0-&1 к СДО-атигену Т-супрессорних/цитотоксических кдетор,

ИКо 44 пробив ди^рсицироьпчяцх антигенов кортикальных ти» '

- Ч -

моцитов - GD I с,

-• ИКС-80 протин CD5 - оодгго Т-клеточь'рго антигена м особого варианта В-клеточного хронического лимфоаойкша О-ХЛЛ);

- ИКО-86 к CD4-антигену Т-хелперных/и^яукторных (слеток;

- ИКО-87- к CD7-антигену Т-клеток,общего да дрелих Т-лкмфо цитов.

2. против антигенов В-клеток:

- ИКО-1 против мономорфных детерминант Ja-подоОных антигенов (1ILA-Dr системы) В-клеток;

- ИКО-12 к CD2S-антигену общему для В-клеток;

- ИКС-30, выявляющему nv-цеиь ранних D-клеток (преВ-клетки); ИКО-35 против СОЮ-антигена лимфобластов, связывается с

одним из опитопоб антигена общего лимфобластного лейкоза (CALL-антигена),

ИКО-66 к СПЗ?-антигену общему для В- и части Т-клеток.

3. для выявления активационных антигенов использовались КИЛ ИКО-20 против АГ CD38 активированных Т-лимфоцитов, тимоци-

тов, алазматичнеких клеток.

4. в целях характеристики миело-моноцитармых элементов:

- ИКО-ГМ-3 к CDllb-антигену КОЕ-I'M (колониеобразующие грану-лоцитарно-макрофагальные единицы), гранулоцитов и моноцитов.

- ИКО-Г2 против CDtE-антигенп зрелых гранулонитов и моноцитов, б. для идентификации гемопозтических предшественников и СЕК,

ранних предшественников лимфопоэ^а использовались UKA ИКО-40 против антигена RFB-1 и МКА против Му-10-антигена (CD34), лю- . безно предоставленных нам профессором Y. Masacca( Осака, Япония).

В работ« тага» использовались МКА претив дифференцировочных антигенов клеток эритроидного • ряда: - НАЕ-3 к гликсфори-ну-А.экпргссированному на всех ядросодершщих элементам эрит-рона; - ПАЕ-9 против антигена зритробластоз (ЕОНЦ РАМН).

В виду того, что элементы лимфоеаркомы• имекп' лимфоидкое происхождение, предполагалось, что фенотип собственно опухолевых клеток мояэт быть также охарактеризован .выше перечисленными 'коиоклональными' антителами, У. 5 больных лимфомой с помощьй 'перечисленных антител проведено иммунофзнсткпирование опуоле-зых элементов,выделенных с помогало суспендирования из фрагментов, биспенрованных опухолевых лимфоузлов, в цел.-:х. определения приналлочшости некоторых случаев -ттмфосаркомы. Математический анализ результатов провэдоп о помощью прог-

римм статистической обработки медико-биологической информации ИГЕПСЛ 1 ШТАТ (пакет при"_«адных программ статистического анализа "Ш.ЮТАТ"), разработанных группой математического моделирования и статистической обработки данных института клинической иммунологии СО РАМН под руководством кандидата математических наук. Е. Н. Наумовой. На основе всего массива информации сформирована Саза данных. При обработке материала использованы следующие методы : элементарная статистическая обработка (средние, дисперсии средних, и т. д.) -, непараметрическое сравнение по и-критерию. (Шладнсона-Шина-Уитни); коэффициент корреляции Спирмена для' оценки взаимосвязи меэду лараметрами; варианты частотного анализа, многофакторного регрессионного анализа <кластерный анализ). 'При проведнии математической анализа результаты иммунологического исследования сопоставлялись с клиническими данными ; показателями миелограммы.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И 1« ОБСУЖДЕНИЕ.

Характеристика иммунологического фенотипа ШК крови,эксп-рессируювдх лимфоидные антигены,различных этапов созревани:

У больных лимфосаркомой", независимо от гисто-морфологи; ческого варианта и стадии заболевания отмечалось снижение ' количества зрелых Т-лимфоцитов и изменение соотношения хелле-ры/супрессоры.

Наименьшее количество МНК, зкспрессирушдах С07-лимфоидныз АР,выявлено ч группах с 1-11 стадией лимфоцитарной и 1-11 стадией дкмфоблаетной лимфосаркомы - 14,7±4,3% и 24,9+4,3% соответственно, что было достоверно ниже (р>0,£9) уровня у доноров -41.8±8,В% (рдс. 1) В III-IV стадию и в фазу лейкемизации абсолютное снижение мацонуклеарных клеток, несущих на своей мембране этот Т-клеточный маркер . , сохранялось при обоих гистологических вариантах, однако было несколько выше, чем в 1-П стадию. Последнее мокло объяснить-тем, что в фазу генерализации и лейкемкзания димфрсаркомн. в периферическом русле реако возрастает ¡количество опухолевых элементов, которые .могут нести Т-клеточные маркеры. У больных в фазу ремиссии пне .-»аписимоети от стадии количество МНК, несущи С1)7-мардар, не достигало нормы й ь среднем составляли 24,513,4%.

40 30 20 10

г&т. Ъ

А

Ъ

доноры ремиссия Ы1 Ш-П' ЛЕЯ !-П П1->7 МГ III-IV ЛЕЙ яиифоцитарная пролимфоцггг. лимфсбластяая ЛИМФОСАГКО И А

Рис. 1 Уровень УНК периферической крови,зкспрессирую'дях ан-тиг.ен Т-клеток (СО?), у больных лимфосаркомой на различных стадиях опухгг.евбй прогрессия.

Вместе с тем было отмечено сличение уровня Т-хелпэриых клеток. Выраженность этих изменений у больных различным» вариантам! лимфосаркомы отдичплэсь(»ис. 2).

% ННК

30-;

1С-

И"

доноры ремиссия 1-П III-IV ЛЕЙ 1-1! iii-IV 1-П III-IV ЛЕЙ ! лимфоцитарная лафзбгастная

Л И М Ф О С А Р И О М Л

Рис. Р Уровень периферической крови;. экспрессиручвдх антиген Т->голп;:рсв/:гяду{сгоров (С04) у болькьг: лдафйоркомой нз различит: стадиях опухолевой прогрессии.

1-

Наибольшее отдание числа Т-хелперов (СО-йиоложительные клетки ) обнаружено у больных димфоцнтарным вариантом лимфосаркомы, при этом в фазу лейкемизации число 'f-хэлперов было наименьшим - Б, 0+2,62 против 22,б±1,'ЗХ - у доноров. При про-лимфоцитарной и лиыфобласткой лимфосаркоме теличество CD4(+) меток ташке значительно снижено. В стадии- генерализации и при лейкемизации лимфооластной лимфосаркомы число Т-хелперов ниш, чем б I - И стадию и вдвое ниже уровня доноров. Достоверного изменения количества Т-супрессоров не отмечено. Инверсия хел-нерно-супрессорного индекса выявлена при всех гистс-морфологических вариантах лимфосаркомы. При этом в фазу лейкемизации лиы-фоцитарной и лимфоблаотной лимфосаркомы соотношение CD4(+)/С08 ( клеток оказалось наименьшим 0,2 и 0,5 соотвественно (в группе доноров - 3,7). Сохраняющийся дефицит Т-хелперов/индукторов при ремиссии заболевания отражается и более низким значением индекса - 1,4.

Таким образом, у больных лимфосаркомй при всех гисто-морфо-логических вариантах выявлена инверсия хеллерно-супрессорногс соотношения, что по данным R11/шового и соавторов, Р. С. Самойлс вой и др. в целом характерно для лимфопролиферативных заболеваний.

Наряду с изменением соотношения отдельных субпопуляций аре 'Г-клеток- эфекторов изучено соотношение ÜHK, зкслресеирувдил AI незрелых Т-клеток - ранних тимоцитов ( Thy-1(+) клетки ) и koj тикальных тимоцитов (CD-lc(+)клетки).

Высокий процент Thy-1(+)клеток определяется уже в I-IJ стадии лнмфобластной и пролимфоцитарной лимфосаркоме 12,3i3, ОZ и 12,8±7,3% соответственно,, против 1,1±0,37Z - у доноров. При лимфоцитарной лимфосаркоме в J-II стадии уровень ранних тимоцитов не отличается от динорского. Наибольшее число Thy -1 (+)клеток выявлено в фазу лейкемизации лимфоцитарной .(19¿Sil2,öZ) и лнмфобластной (11,414,2%) лимфосаркомы.

Подводя итог выявленным изменениям в периферическим пуле Т- клеток у больных НХЗЛ, следует отметить что нарастание абсолютной Т-лимфоцитопении, резкое снижение количества Т-хелппрнш/иядукторных клеток и инверсия хелперно/супрессор-иого индекса сочетается с повышением числа незрелых Т-клеток - ргшннх к иоргик&яышх тимоцитов, что, отршает юменеадя в си-«vr^M«' иммуш>ш^за 'при развития и прогреоаировании иэходжкик-

- 13 -

ской злокачественной лимфомы.

Характеристика иммунофенотипа МНК крови, несущих антигены ранних гемопоэтических предшественников.

В целях определения уровня МНК, экспряссирующих антиген раннних кроветворных клеток использовалось МКА ЙКО-40 (рис.3).

% МНК I

so

30-

доноры ремиссия I--II III-IV ЛЕЯ I-II III-IV 1-Й III-IV ЛЕЙ лимфоцитарная про лимфоцит. лимфобластная Л И М. Ф О С А Р К О !,! Л

Рис.3 Уровень МП' периферической крови, экепрессируших антиген ранних гекопозтических предшественников (RFB-1) у больных лимфс-сзркоыой на различных стадиях опухолевой прогрессии. .

выявляющее RFB-1 - АГ ранних гешпсзтическлх предшествеинитов, субпопуляции Т-кдеток , Достоверно высокий уровень RFB-1(+)клеток в сравнении с донорами (15,4+1,4%) определен у больных ли-мфобластной лкмфосаркомой в фазу лейксмизации - 67,6116,2%. Но другим вариантам димфосаркеми мояло говорить лишь о тенденции к повышению RFB-1 (+)клеток при прогрессиронэнии ЕХЗЛ.

У больных лимфосаркошй по мере прогрессировать опухолевого .процесса выявлено увеличение количества ранних гемспозтичес-тх' предшественников и СКК в периферической крови, окспрессирую-антйген CD34(+) (рис.4).

X Ш

15-

10-

_____«=а._____ЙЬ___

доноры ремиссия лимфоцитарная III-IV

лейкемизированная лимфобластная Л И и Ф О' САРКОМА

Рис. 4 Уровень 1.1НК периферической ::рови, экспреесирущих аитигеь стволовой кроветворной (снетки (С034),у больных лимфосаркомой на различных стадиях опухолевой прогрессии.

Отмечено значительное в сравнении с донорским уровне), 1 повышение ЩК, несущих АГ С034 в фазу генерализации лим-фобластной лимфосаркомы и фазу лейкемизации лимфоцитарной лимфооаокомы - 11,3^8,£%. и 16,3^10.8Х соответственно, против 0,09+0,05%, - в группе доноров и 0,1+0,05Х - в фазу ремиссии. • При всех гисто-морфологических вариантах лимфосаркомы по мере нарастания опухолевой прогрессии в периферической крови увеличивается число ранних " гемолоэтических предшественников (и, 'вероятно, СКК), что подтверждает данные И-Г.Цирловой и соавторов;. 1987) о вовлечении стволовой кроветворной клетки в опухолевую трансформацию при неходгяишскай злокачественной лшТюме. Сб этом свидетельствуют и экспериментальные данные Я А. Лисукова (19871 которым показано увеличение в селезенке и периферической крови мышей линии АК(? ранних эритроидкых клеток при прогрессировали спонтанной лиыфомы. Кроме того, в работе С. Д. Халдаяпиди I иШ) отмечен рост в периферической крови больных лимфосаркомой ¡; (IV стадии ко.тннеобразугаих эрмтроцдгшх клеток С КОЗ-а), »

В связи с этим нами при иммулофенотииировании ШЖ крови использовались ША НАЕ-9 против антигенов зритробластов и НАЕ-Э к гликофорину А (ряс.5). Оказалось, что при всех гисто-морфо-

доноры ремиссия I-II ÍII-IV ЛЕЙ 1-11 III-IV I-11 III-IV ЛЕЙ лимфоцигарная пролимфоцит.. димфобластная Л И U Ф О С А Р К О М А

Рис. б Уровень ШК периферической .;рови,зкспрессирувдих антиген ранних эритроидпых элементов (НАЕ-9(+) клетки) у больных лпмфо-саркоыой на различных стадиях опухолевой прогрессии.

логических вариантах и на всех этапах опухолевой прогрессии димфосаркоыы в крови больных нарастает число МНИ, эколресси-рую-них эти антигены .

Наибольший уровень НАЕ-91+)клеток выявлен при III-IV стадии пролимфоцитарной и лнмфоцитарной лимфосаркомэ в фазу дейкеми-зации { 21, bi&.b'í и 24,114,ЭХ соответственно. В целом число НАЕ-9( +) элементов при всех вариантах л;а,фсгркскы превосходит донорс;шй уровень (0,1+0,05%) более чем в ICO раз.

Выявляется тенденция к повышению числа МЯК, несущих АГ эритроблгстоз.по мере нарастания стадии процесса. В фазу ремиссии', уровень этих мш снижается,но остается в 10 раз выше донорского - 1,610,6%

Аналогичная тенденция наб.вддается и При исследовании чи'.-ла ИЛБ-ЗС i-) элементов.' В III—IV отдии изходжкинекой злокачеоть1)!;-• ной лимоны п периферической крсви больны1' глючите ягн:> п

растает количество НАВ-3( +) клеток' -12,3+4,8%, 8,4+3,6% и 19,4± Ь.ЗХ соответсвенно (в контрольной группе - 0,29±0,1%).

Повышение уровня ранних гемопоэтических элементов и эритро-бластов в периферической крови предшествует быстрому нарастанию агрессивности процесса (лейкемизации, генерализации, диссеми-иации опухоли), что Потверздают наблюдения за 10 бальными НХВЛ обеледованых в динамике. Отмечено,что повышение в крови 'ШК,несущих маркеры предшественников зриро- и лейкопоэза, обнаруживается значительно ранее клиническоГ. манифестации рецидива лимфомы. Это может отргж.гь процесс нарушения контроля за пролиферацией СКК и опухолевых клеток со стороны иммунного надзора, поскольку спонтанная клеточная пролиферация, ш, дшшьа Р. М, Хаитова(1й^9) ,Е А. Кузнецова (1992) поддерживается сходными иммунорегуляторными механизмами, нарушения в которых предшествуют возникновению опухолевого процесса.

Иммуноф^нотип 2Ж крови больных лимфосаркомй в фазу ремиссии.

В фазу клинико-гематологической ремиссии показатели иммунологического фенотипа ШК крови больных НХЗЛ привлекается к уровню в группе доноров (рис.б).

Отмечайся р«акое (в сравнении с рецидивов) сишаз низ числа ранних гемопоэтических предшественников ( RFB-1(+)клетки составляли 12,7+3,6%, CD34( +) - 0,1+0,05* против '15,4+1,7% и 0,09+0, 05£ в группе доноров соответсвенно); в тем числе -' эритрэидных (НАЕ-9 (+)клетки - 1,6+0,6%, НАЕ-3(+) - 2,5+1,0%; 0,1+0,05% и 0,2910,1% у доноров соответсвенно). Тем не менее сохраняется достоверно низкое число Т-клеток (CD5( +) клетки -30,714,6%, CD7(+)клетки ' - 24,613,4% против 45,0+2,ZZ и 41,3± 2,0% - в гр-.*ппе,доноров).Повьппеи и уровень ранних лямфоидных элементов Thy-1(+)клетки составляли 1Б,8±2,92, m-Цепь IgMf+) -9,4.13,3%,, CD10( + ) - 6,fii2,l%; при этом аналогичные показатели у доноров - соответственно 1,1+0,4%, 2,1+0,9%, 1,1*0,7?.. Число Т-хелперов не отличалось от уровня доноров - CD5(+)клетки

Таким образом обнаружено,что в Фазу ремиссии у больных лим-фссйркомсл, независимо от • гисто-зоологического варианта, количество моиощтаеарных клеток-периферической кроли, ".чксар-^с-

сирующих антигены ранних гемопоэтичэских предшественников нор-

% МНК 252015 10 5-

(ранние предшественники т гемопозза)

ИТМ

£

НАЕ-9 НАЕ-3

(глнкофорин А) (ранние эритроидные клетки)

СШ (СКК)

.а

Д Рем Р Д Рем Р Д Рем Р Д Рем Р Д-доноры;' Рем-ремиссия, Р-рецидив лимфооаркомы

Ркс.6 Сравнительная характеристика уровней ШК крови, зкспрееси-рующих антигены ранних гемопозтиче^ких клеток, у больных лимфо-саркомой в фазу решает, рецидива и в группе доноров.

ыализуется' (снижается до уровня доноров). Последнее подтвервда-ет патогенетическую связь изменений иммунофенотипа МНН и прогрессирования (или регресса) опухоли. Сохраняющаяся Т-лимфо-цитопения, Еероятно, отражает иммунодефицитиое состояние индуцированное заболеванием и последующей полихтдаотерапией.

Характеристика показателей костно-мозгового кроветворения у Сольных лимфооаркот".

При исследовании показателей мнедограммы у больных НХ8Л .было отмечено,что по мерз прогрессировать лпмфосаркомн сникает-ся неточность суернадького яупктетв (до 25-40хШсл/д) и только в фазу лэй:;з!/П!зации у некоторых больннх диыфоцитерной и ли-ыфоЗлаотнсй лиытосаркомок отмечается повышение ксеючностй точного иэзга (до 80-100х10ет/л) 8« счет элемептои липЯюсаркомч (19,4+4,0% - пяп ¿мИоцотарной яиыфоме, ЯУ.ьЗ.бХ - при як>»1о-

блаетной лимфосаркомо).

lipu анализе зритроидного ростка кроветворения отмечено снижение общего числа его элементов при незначительных колеба-. нидх уровня эритробластов (0,17+0,5%).

Так, если'в Ы1 стадии лимфоцитарпой и пр-олимфоцитарной ли' wJccapKOMe количество элементов красного ростка ке отличалось от нормы (14,5+2,0% и 17,3+1,4% соответсвенко),то в 111-IV стадии-уровень эритроидньк клеток снижается до 10,0+1,17, и 10,9. ±'¿,7%. У больных лимфсблагтной лшфосаркоыой сужение зрит-роидного уядз определялось уже в 1-II ста;.ли - 10,9+2,2%; и, особенно, - при'III-IV'стадии - 6,1+2,1%.

Наиболее низкая численности красного ростка отмечалась в фазу лейкемизации лимфоцитарпой и люгобластной ляыфосаркош ( 7,5+0,3% и 5,5+?., SZ соответственно ). При атом сужение эритрона происходило преимущественно за . счет клеток поздних стадий дифференцировки - полихроматофнльиьк- и оксифильных нормэцитов. Индекс созревания аритрокариоцигов существенно не отличался ит нормы ( 0,9-0,6 ) и толькз в III-IV стадии про-лиифоцитаркой дкмфосаркомы составил 1,0.

Выявленное изменение костномозгового кроветворения подтверждается данными И. Б. Кашшсксй и соаггоров (1982) .отметивших уменызениэ неточности зритроидного рос*»«* костного мозга у больны;: с прогрессирующей неходгззвнсгеой яимфомой.

Представляет интерес результаты корреляционного ана- • лив'а изменений зритроидного ряда в- мяздэграше и числом ИНК периферической крови. несущих АГ эрш'робластсв (НАЕ-9(+) клетки). Обнаружено, что по увеличенvzz в крови МЕ-9(+)злэмэе-тов в костной юзге' онмветса. чэтло клеток иор5оаогияески вден-тифииируешх кач зритроблаоты. Наиболее >.зрактерны&? это оказалось для лиифоблзстйой"лиыфосзркомы (КС (коэффлщкпг ранговой корр'сляциг по Сггармзку ) равнялся ;-)0,Б>. Ироьге того с нарастание!.! уровня НАtv-У(+) клеток в .сровй в шелограмие снижается общее ..число зрш-роидкьк элементов (Щ.-)0,4 для лим-фобластиой лимфосаркош), число пронормоцигов (KCi~)0,7) vr более ¿релых форм эригроидиого ряда - полихромауофильиых ч оксифильных нормоштгов (К'Л -) Oj СО. Указанные изменения « те-лограммс коррелировали' к с. коэффициентом созровглнл зритроб-лаогоа.

Таким образом, прогрясогроганиё ио/годзг-звтекои -:локачостп-зк-

-19. ной лимфош характеризуется уменьшением клеточности костного мозга,"сужением основных ростков кроветворения в мнелограмме, нарушением созревания эритроидных и гранулсцнырных элементов. Это можно связать с блоком диффереяцировки ранних предшественников гемопоэза (в том числе эритроидных и грануло-цитарных) и CliK при нарастиии явлений опухолевой прогоессии лимфосаркомы, что подтверждают данные культ/ральиых исследований Brown 6. (1987) ,С. Д. Халдаяниди (1993).

Мммунсфенотипиче^кая характеристика вариантов НХЗЛ с поражением органов желудочно-кишечного траста,кожи и центральной нер.ной системы.

Изучение экспрессии лимфоидных маркеров на МНК периферической крови больных лимфосаркоюй позволило выявить группу пациентов (п>17),у которых в активной фазе заболевания не наблюдалось снижения уровня Т-клеток ( СПБ(+) клетки - 52,6+2,8%, CD7(+)клетки - 56,3x2,32, в группе доноров 45,0+2,2% и 41,3+2, 6% соответственно). Б клиническом плане среди этих больных выделены ДЕе подгруппы : у одних нечоддаинская лимфома протекала благоприятно (п-6), характеривов:лаоь первичными поражениями органов жздудочно-кишечного тракта; у других '(п-11) - процесс носил крайне агрессивный характер о метастатическими поражениями центральной нервной системы и ко?®. При иммунофенотипиро-ваиии опухолевых элементов, проведенном у трех больных последней подгруппы .отмечено,что опухолевый субстрат представлен Т-клетками.

. По данным Horning Р- ,Hu Е, (1990) Т-клеточнш ЩШ1 характеризуются большим выходом опухолевых клеток п лерис^ричеекое русло фз пораженных лимфоузлов о toicom лимфы даяо о I-11 стадию заболевания. Этим, вероятно, к обменяется выязленпыа нами изменения иымунодогкчешодго фенотипа ВД1 крови у этих больных.

ТШ! трупных расстройств у больных дамфосаркомой,

Даяяк© литературы последних дат свидельствугс? о наличии устойчивых кедпдоксов реакций иммунитета, л гемопоава на те или иные патологические процессы..

Так С, S. Bene, А, Вгоп<4зг( 1979) вндедшда тип иммунных р:-'Г!и

- so -

йств при аутоиммунных заболеваниях - иоликлональную В-клеточную активацию, а В. IL Лозовой, В. С. Ширине кий (1S87) - угнетение функции •^специфических Т-супрессоров,повышение содержания аутоантител и циркулирующих иммунных комплексов у больных ревматоидным артритом (РА) гак г?ип иммунных растройст.в при РА.

Проведенный нами кластерный математический анализ (A. A. Af i-fi, 1979) позволил выявить среди больных лимфосаркомой группы, которые характеризуются устойчивыми сочетаниями иммунофенотипичес-ких и клинических признаков. Клинические проявления опухолевой прогрессии ь каадой группе имели свои особен», зстй. Это дало возможность выделить следующие типы нарушений иммунитета и ге-мопоэза в целом при'лимфосаркоме :

I тип - "Т-лимфоцитопенический"(клг "опухолевый") (п-39) характеризуется изменениями иммунофенотипа ШК крови сходными со сдвигами в иммунологическом статус*, у больных солидными опухолями ( Svenneveg J. .LoviK M. ,Svaar H. (1979), A. Ю. Уман-еккй, В, Г. Пинчук( 1982), что проявляется снижении уровня CD5 и CD7( +)кгпетик ), инверсией хелперно/супрессорного. индекса (за счет снижение числа С1Ж +)клеток ), повышением в крови ксличест ва лимфоидных клеток ранних стадий дифферениировки (CIJ10, го-мрпь Ig, Thy-1(+)клетки ) и нормальным числом В-лимфоцитов ( CD22 и CD37(+)клетки ).

Больииптво.(п»39) больных находкинской злокачественней липомой в активной фазе заболевания (в.че ремиссии) имели этот тип расстройств -59,Z1. Среди них выделялись две основные подгруппы, отличавшиеся по уровню ранних эритроидных и других гемо-позтических предшественников в периферической крови и соответственно по прогнозу заболевания, Клинические- проявления опухолевой прогрессии носили .типичный характер: опухолевый рост лимфоузлов, опухолевая интоксикация,лейкемйзэция и др. Относительное преобладай;-э лимфоблаотяого гисто-морфологического варианта -51,3%(п-20) против 25,5?. (л-10) -прлимф-оцитариого и £3,2X(n=S) -лимфоцитарногс вариантов объясняется, вероятно,тем что больные с лимфобластной лимфосаркоюй преобладали в сбследовакао;^ контингенте ( 37 из' 79 больных -пздионты е лкмфоблютным гарк-антом.1.0' - .с пролик'фощиарным, 20 -с. лвмфоцитерным, 3 - е им-мунэбЛастным вариантом лдафооаркомы); ;

■ II тип - -'Т-Агето^шьй" (п-47) (25,'П) .остается иоеш»и-ным или нормальным уроЕНем ÎMmctok. ( С№( +), CD7( <-}, С04( +) кле-т-

от).отсутствием изменения числа В-лимфоцитов. В этом кластере преобладали больные с лимфобластным (п-8 - 47,17.) и пролимфоаграрным вариантом (п=5 - 29,3£);лимфоцитарная лимфосарксма была выявлена у 4 больных -23,6%.

Среди с пациентов этйм типом в соответствии с отмеченными гыше прогностическими критериями иммунофенотипа ШК крови были выделены две подгруппы,которые отличались не только по прогнозу заболевания, но и по клиническим проявлениям. Первая - прогностически благоприятная ( п=б ) подгруппа характеризовалась наличием в дебьге заболевания поражений органов ЖКТ. Вторая подгруппа ( п-11 ) - отличалась поражениями ДНО и кожи и имела плохой прогноз.

III тип - "В-клеточный" со значительным повышением MHR. экспресеирувдих B-клеточный маркер CD22 и умеренной Т-лимфоци-топенией. В клиническом плане для этой группы (п=5 - 7,5% ) ха рактерно длительное течение ( 1,5-2 года ),отсутствие стойкой ремиссии, большая опухолевая масса ( конгломераты лимфоузлов до 7-10 см ),относительно умеренно выраженная интоксикация.

При пересмотре гистологических препаратов Выявлена выраженная реакция стромы, диффузный склероз ткани опухолевого лимфоузла,независимо от гисто-морфологического варианта НХЗЛ. В атом кластере несколысо преобладали больные с лимфобластным (п»2) и пролимфоцитарным вариантом (п=2).

IV тип - "атипичный" тип имунных растройств (п-Б - 7,5% от числа больных о диффузной лимфосаркомой в активной фазе процесса)характеризуется умеренным снижением Т- и В-клеточных маркеров на МНК крови, отсутствием выражнного повышения уровня ранних гемопозтических клеток полиморфизмом и атипичностыо ¡эдикичерких проявлений ( диффузное поражение легочной ткани, днмфоувлов средостения, миндалин и т. д. ), что позволило пред-по^озкить клияико-иммунологкчеокую неоднородность этой группы больных. Гието-юрфологическая характеристика препаратов би-опсированных лимфоузлов выявила преобладание труднодюйерен-цируемых вариантов НХЗЛ

Следует отметить, что при-анализе данных четкой зависимости типа иммунных расстройств от гието-морфолсгического варианта заболевания не выявлено. В ка.тдаэ ив перечисленный групп яходвлй больные с раэличшм 'глсто-морфологическими варигигаш ony;umi?ero процесса, бес достоверного • преобладания гпк'Я' > f-i.

то ни было.

Б литературе отсутствуют , данные о типах расстройств иммунной системы и кроветворения у больных НХЗЛ. Б работе Уагпк* Й. (1991) отмечается лишь ш.!мунологичес!Сая и клиническая неоднородность обследованного автором Массива больных лимфосаркомо и отсутствие в ряде' случаев -.четких корреляций прогноза заболе вания и гиетоморфологическога варианта 1ДОЛ.

- Исследование иммунологического фенотипа моионуклеарных кл ток крови, проведенное у 1ё пациентов в динамике процесса, по твердило ктойчивость выявленных типов иммув..ых расстройств п НХЗЛ.ЭТ0 доказывает ■ положение о многообразии реакций иммунно системы и миелопоэза при опухо-звом рс :тс и наличие патогенет ческой взаимосвязи типов этих реакций о клиническими вариант ми опухолевой прогрессии неходжкинской злокачественной лимфоь

Критерии прогноза опухолевой прогрессии НХЗЛ.

Кластерный анализ полученных нами данных позволил шдс лить й качестве критериев опухолевой прогрессии лимфосарко; показатели иммукологичео/сого биотипа.моноиуклеарос перифер! ческой к,юви и миелограшы. коррелируйте между. сг-Зой. 0?об< прогностической ценностью обладает коыплекп антигенных харак ристик мотнуклеароа : количество МНК, несутся* на мембран антигены ранних предшественников- эритропозэа (НАЕ-ЗС+).ЯЛЕ-В клетки, прогностический порог. более те и более соотье твенка); маркеры СКК И предшеотьэинюсов ге^опсэоа (Р^ГВ-1 (+) к тки бзлэе. 25,1 % ; яикфобластоэ - С010( г)кле'хки белее 6,5%); и казателп мйзяограммы ; 'зриярекариащггы менее 7% и лиь&ищв клетки более 85,0%. КтШинащгя бтиХ" пригвеков выд^яет до 99 больных с плохим прогнозом, при' этом прогностическая точ кость метода,( с учетом случаев с прогрессией заболэваш: при прогностических показателях н.лг? порогового уровня и вар антов с выоогоши вначенияш критериев, но без цинического щ. грассирования в дишдао наблюдения) составила «5,7%,

В результате проведенного исследования с учета; литературных дайны;« ноаио продлолоаать, что ечлтрота опухол* воП прогрессии 1-даЛ зависит с одной стороны от птепег.и зрел; стк опухолгвых злекэиов и.сязповательно,гис1ю--ь<орфод!огичее1 го варианта а йШувологичеекого фенотипа - клеток ли* холл, с- д!

гей стороны "от особенностей перестройки иммунной системы и ее взаимоотношений с гемопоззом. Реакция кроветворно», системы на возникновение и развитие, опухоли через нарушение дифферен-цировки СКК, накопление ранних эритроидных клеток ( с учетом феномена Ег-сулрессии) .влияние системы иммунитета через активацию сулреесорных механизмов и перестройку Т-звена и определяют, на над взгляд , быстроту опухолевой прогрессии НХЗЛ

ВЫЕОДЫ,

1. Неходжщюкая злокачественная лимфома при манифестации заболевания й рецидиве сопровождается характерными изменениями иммунологического фенотипа мононуклеарных клеток СМНК) периферической кроЕИ, которые проявляются в большинстве случаев прогрессирующей Т-лимфоцитоиепией, нарастанием уровня мононук-леаров, экспрессирующих маркеры ранних гемопоэтических пред-иественников ( в том числе - стволовой кроветворной клетки,ранних эритроидных элементов и лимфобластов), что отражает своеобразную реакцию кроветворной системы на возникновение и развитие опухоли.

2, Клшшо-гзматодогическая ремиссия лимфомы характеризуется нормализацией числа 1ШК крови,несувях антигены ранних гемо-поэтических клеток (С034(+) ,СШО(+) ,1?РВ-1(+), НА13-3(+),НАЕ~9 (+)клеток) до уровня донеров. .Количество Т-лимфоцитов несколько увеличивается, но не достигает нормы.

3- ПрогрессироЕание лямфосаркомы сопровождается снижением клеточкости костного мовга, сужением аритрондного и гранулоци-тарпого ростков кроветворендя, 'увеличением числа лимфоидних ' элементов, чги еосно корродирует о . иэмэшшями иммунофеногтта

ШВ КРОВИ, \ ; ;

4, 'Дзщ' тадйкиаоиой• йхошчвоэдвшюй• дафмы,' протекают^ о пэрэдзвиём органов ;далудо1Щ()'-л5шФчного:'-'.а1рак7а, центральной нервНой -йко^еда п |<ши хвршетерпо отаутстйю'У- лимфоцитояокш, «швеи-они/ Хвлп0рцо'го5шресйорн6го:■ообтяошниз, что ыю»т Сыть ¡юпо.чько ■¿йцо для прогнозировании клотичеекях Йроявлэйий »{»стфчлсиройшжя

5. Иетджкинская злокачественная лимфома характеризуется устойчивыми типами реакций иммунной системы и гешноэза в целом : "Т-лимфоцитопеническим", "Т-клеточиым", "Н-клеточным" и "атипичным"; каждый из этих типов отличается сочетанием клшш-к.о-морфологических признаков, влияет на прогноз заболевания и выявляется по' иммунологическому фенотипу мононуклеаров периферической крови.

6. Прогностическими кртариями опухолевой прогрессии лимфо-саркомы являются : повышение среди МШ периферической крови про-процента НАБ-9 позитивных клеток более 5%, НАЕ-3 позитивные -более 7% , НРВ-Л(4)элементов более 25,12, С010С+) - более 6,5% и показатели , шелограммы (зритрокариош-.ш менее 77, и лимфоидные клетки 35,0£). Наибольшей прогностической значимостью обладает комбинация этих признаков, позволяющая.выявить до 99% больных с прогрессировать лимфосаркомы вне зависиюстк от гисто-морфо-логического варианта, стадии процесса и особенностей клинических проявлений НХЗЛ.

1РМТИЧЕСЮ1Е РЕКОМЕНДАЦИИ

Исследование ишунологччесгаго фенотш.а моиокуклеарных меток периферической крови у больных неходгшшс!г.й злокачественной лимфомой рекомендуется для прогнозирования опухолевой прогрессии заболевания, при этом высокие уровни МНК.экепрес-сирующих антигены ранних гемопоэтических предшественников (в том числе (?КВ-1 - СКК, СОЮ -, лимфобластов, антигены ранних эрит-роидных клеток), свидетельствуют о большой агрессивности процесса и предложены в качестве критериев неблагоприятного прогноза заболевания, незавнешо от стадии и гисто--морфологического варианта лим; эмн.

. 2. Показатели миелограшы - число эритрокариоцитов{ менее 7") И' димфоидных клеток (более 35,0%) рекомендуется использопть как дополнительные прогностические критерии.

3. Предлойззкные показатели могут служить для определения нз-декности («чнико-тематологичеокой ремиссии и выявления рецидива опухоли до его клинической манифестации; при увеличении Т^Я? »«энонукдогаров пврифермиескг1 -крови больных лямфооаркошй

количества ранних гемопоэтических предшественников ( в том числе - зритроидных) (RFB-1(+)клеток более 25,1%,CD10(+)клеток более 6,5%, НАЕ-9(+)клетки более 5%, ПАЕ-3(+)клетки более 7%), изменении показателей миелограымы - уменьшении эритрокариоци-тов менее 7% и увеличении лимфоидных клеток более 35,0% в динамике наблюдения у больного с клинико-гематологическол ремиссией резко возрастает вероятность рецидива неходжинской злокачественной лимфомы.

4. Определение- типов именных расстройств может быть использовано в целях протезирования клинических проявлений опухолевой прогрессии лимфосаргомы. Снижение числа ; Т-клеток (CD5(+)»CD7(+)элементы) в кровг больных лимфосаркомой характерно для Т-лимфоцитопеиического типа иммунных растройств,при котором отмечаются типичные клинические проявления заболевания-опухолёвый рост лимфоузлов, интоксикация и т. д, Увеличение у пациентов НХЗЛ в активной фазе заболевания в крови МНК, несущих на мембране маркеры Т-лимфоцитов (CDS,CD7,CD4),характерно для Т-кле-точиого типа иммунных расстройств. В клинической картине заболевания следует ожидать поражение органов желудочно-кишечного •гракта, центральной нервной системы и кожи. Повышение количества В-КЛбТОК (CD37, С022-ПОЗИТ11ВНЫЭ K-ieTKil) в крови больных лимфомой характерно для В-клеточного типа иммуииых расстройств. В клинике этим больным свойственно отсутствие ремиссии и медленно прогрессирующее течение лимфеоаркомы. Атипичный вариант иммунных расстройств, выявляемый в группе больных с умеренным сиияением и Т- , и В-клегок, отличается "атипичными" проявлениями лпмфо-саркомы (первичными пораиениями легких и лимфоидной ткани кольца Вальдейра без увеличения периферических,лимфатических узлов).

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЯ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. И. А. Лисуков.М. И, Лосева,П. В. Нсвылев. Экспрессия антигена эритробластов на мембране мононугаеаров периферической крови больных неходжкинокими лимфомами.-Ноаучные труды HoTKSMJi, том 131' /'Структура и функция эритроцитов в норме и патологии",

стр. Б9-64,Новосибирск, 1988ГОД.

2, И. А. Лисуков, И, Б. Ковьшев, Е И. Лосева i,i !1 , И. Г. Иирлояа. Экспрессия дифференцировочных эритроидных антигенов на моно-

нуклеарах периферической крови у бальных лимфосарксмй. ■ "е

матология н трансфузколоп1я,Н6,с. 35-37. ,1989год.

3. Ы. И. Лосева. И, Л. Лисуков, Я. Б. Ковынев. Экспрессия эргтроидню: ди.тфгрекцировочных антигенов на мембране мононуклеаров периферической крови при опухолевой прогрессии ьеходккинских лимфой

-Тез. дога, на научно-практической конференции "Актуальный вопросы анемий".Уфа,1989г.

4. И. Б. К0выпев,м.и. Лосева, И. А. Лисуков, Л. Ю. Зюбика"ПрогнозирОБс опухолевой прогрессии неходжинской злокачественной лимфо-№.!"~Доклад на IV всесоюзном съезде гематологов. -Киров, 1991год.

0. И. А. Лисуков, И. Б. Ковынев, М. II Лосева, Л. ¡а Зюбияа.

Изучение Э1сспрсссия дифференцировочных антигенов лимфопоэза t; мембране мононуклеаров периферической крови при опухолево? прогрессии ЛйМфосаркоыи. -Тер. архив. -I'jOI. -N7. -С. 78.

6.'It 11 Лосева, Л. А. Шпагина, И. А. Лиеую в, Л, Ю. Зюбина, И. В. йзвы-кев И. Б. Структура и функция эритроц'.гтоа при лимфомач. -Гематология и трансфузшлогия. -1992. -N5-6. -С. 16-20.

7. (1 Б. Ковынев, М. JL Лосева, Л. Ю, Зюбина. Новые подходы к прогнозировании опухолев . й прогрессии неходжинской злокачественно! лимфомьь-Тез. докл.: на научно-практической кокференщгл врачей к' .00-летию г. Кэвосибирска,Новосибирск,1993г.

8. Л Б. Ковынев, И. А. Лисуко8"Ыоно:с.аонадьнне антитела в диффе-ptJUSiain>ной Диагностике лимфопролиферативйнх заболеваний"-

;Доклад на .бЗ-конференадш молодых. ученых- Новосибирского меди-• цияско^о' института, 10S3rод.!

Otni чйгвьо Н ! p')Ti!rj.nHff- ЗИЧ, ОНсм-i я,Л. Зак4э ААйЗ, г-v. '<50, 1003 i%