Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Анальгетическая активность новых лигандов протон-чувствительных ионных каналов
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.25
Оглавление диссертации Литасова, Елена Викторовна :: 0 ::
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Проблема боли и обезболивания
1.2. ГТротон-чувствительные каналы (ASICs)
1.3. Известные лиганды ASICs
1.4. Возможные методы синтеза лигандов ASICs
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Фармакологические исследования снтезированных соединений in vivo
2.2. Фармакологические исследования снтезированных соединений in vitro
2.3. Конформационный анализ известных пептидных лигандов ASICs
2.4. Синтез соединений
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ПРОВЕДЕННЫХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Анализ связи структура-активность в ряду пептидных лигандов ASICs. Конструирование непептидных лигандов
3.2. Синтез новых потенциальных непептидных лигандов ASIC's
3.2.1. Синтез N-ацил-О-амидов аргинина
3.2.2. Синтез производных N-ариламидов со-гуанидинокарбоновых кислот
3.3. Исследование биологической активности синтезированных соединений
3.3.1. Исследование действия новых соединений на изолированных нейронах спиналъных заднекорешковых ганглиев крыс
3.3.2. Изучение аналъгетического действия новых соединений на модели «корчи» (writing test) у мышей
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Исследование связи структура-активность в ряду производных аргинина
4.2. Исследование связи структура-активность в ряду производных гуанидина
Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Литасова, Елена Викторовна, автореферат
Боль является неотъемлемым компонентом ряда патологических состояний; Общепризнан определяющий вклад фактора боли в этиологии и патогенезе травматического шока, который; в отдельных случаях приводит к смерти. Болевые ощущения не только тяжело переносятся сами по себе, но и ухудшают течение основного заболевания. Не будет преувеличением утверждать, что проблема борьбы с болью занимает одно из центральных мест в современной биологии и медицине. В настоящее время она переживает период интенсивного изучения: Боль является важной социальной- проблемой. Конгресс GUIA объявил 2001-2010гг. декадой контроля над болью и науки о боли: По всему, миру проводятся масштабные исследования этой проблемы общечеловеческой значимости. Все это свидетельствует о большой значимости болеутоляющих средств — анальгетиков, для практической медицины. Анальгетические препараты являются одной из важнейших групп лекарственных веществ: В настоящее время для подавления боли используют анальгетические препараты, которые подразделяют на два класса в зависимости от механизма действия: наркотические и ненаркотические. Наркотические анальгетики обладают более выраженным и специфическим эффектом, но вызывают лекарственную зависимость — наркоманию; Ненаркотические не вызывают привыкания; но имеют более слабый анальгетический эффект, и весьма часто оказывают негативное влияние: на органы,, участвующие в процессах метаболизма. Очевидно^ что круг применяемых на даннышмомент анальгетических средств явно, недостаточен, кроме того, многие анальгетики обладают целым рядом побочных эффектов, поэтому необходимо пополнять арсенал анальгетических препаратов, расширяя список выбора для практического врача.
Сейчас уже можно довольно детально представить морфофункциональную, нейрофизиологическую и нейрохимическую организацию различных звеньев и процессов формирования и регуляции болевой чувствительности [Прощаев К.И. и др, 2006]. Болевые ощущения воспринимаются специальными рецепторами, которые получили название «ноцицепторы». Ноцицепторы представляют собой окончания древовидно разветвленных афферентных волокон, расположенных в коже, мышцах, суставных капсулах, надкостнице, внутренних органах и т. п. Ноцицептивными раздражителями могут быть механические, термические и химические воздействия. Нередко причиной боли является патологический процесс (например, воспаление) [Харкевич 1987]. Воспаление, сердечная ишемия, опухолевый рост, как правило, сопряжены с хронической болью, и обычно сопровождаются ацидозом ткани. Известно, что ацидоз тканей приводит к активации протон-чувствительных ионных каналов (ASICs - Acid Sensing Ion Channers). Открытие протон-чувствительных ионных каналов и методов их регуляции внеклеточным pH явилось огромным шагом вперед в борьбе с болью [Krishtal O.A., et.al., 1981, Waldmann 1997А].
Известны эндогенные вещества, которые, воздействуя на ноцицепторы, способны вызвать болевые ощущения, например природный тетрапептид FMRFa. Последний, и некоторые родственные ему пептиды широко представлены в организмах беспозвоночных и являются модуляторами токов, протекающих через протон-чувствительные ионные каналы [Askwith 2000]. Учитывая то, что практически любые метаболические нарушения, равно как и повреждения, ведут к закислению тканей, вопрос о все еще неясной связи протон-чувствительных каналов с ноцицепцией становится все более интригующим. Можно предположить, что лиганды-модуляторы протон-чувствительных ионных каналов будут проявлять анальгетическое действие. В связи с этим вызывает интерес разработка методов синтеза и изучение механизмов действия веществ, влияющих на протон-чувствительные ионные каналы. Однако применение аналогов FMRFa пептидной природы затрудняет изучение биологических свойств новых соединений вследствие энзиматической лабильности пептидов в организме. Синтез непептидных аналогов FMRFa, модуляторов ASICs, предоставляет возможность обнаружения соединений, обладающих анальгетическими свойствами и устойчивых в организме при патофизиологических значениях рН.
С этой точки зрения проблема поиска новых анальгетических препаратов является одной из важных и неотложных задач современной фармакологии и химии лекарственных веществ. Цель исследования.
Целью работы явился поиск новых соединений, обладающих анальгетической активностью, механизм действия которых связан с влиянием на протон-чувствительные ионные каналы.
Задачи исследования.
1. Выявить особенности пространственного строения известных пептидных лигандов-модуляторовА81СБ.
2. Построить трехмерную модель лигандов-модуляторов ASICs.
3. На основании предложенной модели синтезировать непептидные лиганды ASICs.
4. Определить анальгетическую активность новых соединений.
5. Установить зависимость связи структура-активность в ряду полученных соединений.
Научная новизна работы.
Впервые синтезированы два ряда новых соединений, являющихся лигандами протон-чувствительных ионных каналов и проявляющих анальгетическую активность, что указывает на возможность создания группы ненаркотических анальгетиков с новым механизмом действия. Основные положения, выносимые на защиту.
1. Определена структура и построена трехмерная модель фармакофора лигандов протон-чувствительных ионных каналов.
2. Синтезированные соединения, содержащие гуанидиновую группировку, оказывают модулирующее действие на функционирование протон-чувствительных ионных каналов.
3. Лиганды-модуляторы протон-чувствительных ионных каналов проявляют анальгетическую активность в экспериментах ш у/уо.
4. На основе лигандов-модуляторов протон-чувствительных ионных каналов возможно создание новой группы ненаркотических анальгетиков;
Научно-практическое значение работы.
Полученные данные расширяют представление о связи протон-чувствительных ионных каналов и болевых ощущений. Результаты работы, свидетельствуют о перспективности непептидных модуляторов- протонг чувствительных ионых каналов в качестве соединений-прототипов для создания новых высокоэффективных анальгетиков и могут быть использованы для разработки новой группы анальгетических препаратов, класса: ненаркотических анальгетиков. Апробация работы.
Материалы, диссертации докладывались и обсуждались на VII региональном конгрессе европейского союза нейропсихофармакологов (Москва, 2005), Юбилейной конференции молодых ученых ГУ НИИЭМ; РАМН (Санкт-Петербург, 2005), Научной конференции «Современные тенденции в; органическом; синтезе и проблемы, химического образования» (Санкт-Петербург, 2005); Работа поддержана грантом INTAS 01-0651. Публикации.
По теме диссертации опубликовано 4' научных работы (из них две статьи в рецензируемых журналах). Структура и объем диссертации.
Заключение диссертационного исследования на тему "Анальгетическая активность новых лигандов протон-чувствительных ионных каналов"
выводы
1. Показана возможность создания новой группы ненаркотических анальгетиков - модуляторов протон-чувствительных ионных каналов.
2. Предложена трехмерная структура лигандов протон-чувствительных ионных каналов с использованием методов конформационного анализа .
3. На основании предложенной структуры синтезированны два новых ряда соединений - замещенные амиды 1ч[-ациларгинина и Ы-ариламиды со-гуанидинокарбоновых кислот, большинство из которых проявляют анальгетическую активность.
4. Соединения ИЭМ-2036, ИЭМ-2037, ИЭМ-2047, ИЭМ-2055, ИЭМ-2061, ИЭМ-2063, ИЭМ-2075, ИЭМ-2079, ИЭМ-2080, ИЭМ-2081, ИЭМ-2083, ИЭМ-2101 по силе действия превосходят препараты сравнения анальгин и ацетоаминофен и могут представлять интерес как потенциальные анальгетики.
5. Выраженность анальгетического действия определяется общей липофильностью молекулы, формой липофильного облака и расстоянием между положительно заряженной гуанидиновой группой и липофильной частью молекулы.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Известно, что всего лишь одно из тысяч и десятков тысяч веществ, попадающих на исследования по биологической активности, проходит весь путь от разработки до внедрения в клиническую практику. Уже давно установлено, что скрининг на целом организме является трудоемкой и весьма дорогостоящей процедурой. Поэтому оптимальным является рациональный подход.
На сегодняшний день уже сложились основные требования к рациональному дизайну лекарственных веществ. Он включает в себя следующие стадии: выбор биологической мишени; анализ ее трехмерной структуры, подбор in silico комплементарных этой мишени лигандов (докинг) с последующим их синтезом и анализом фармакологической активности в опытах in vitro и in vivo.
Результатом этих исследований является создание соединения-прототипа (lead compound), обладающего выраженной специфичностью действия. Дальнейшая оптимизация структуры этого соединения-прототипа сводится к улучшению его токсикологических, фармакокинетических и других характеристик, что и позволяет подойти в конце пути к лекарственному препарату.
В данной работе в качестве мишени были выбраны протон-чувствительные ионные каналы. Установленное ранее участие ASICs в ноцицепции позволяет рассматривать эти каналы как одну из возможных мишеней для создания новой группы анальгетических препаратов.
Проблема, возникающая при подборе соединений, взаимодействующих с этой мишенью, заключается в том, что до сих пор не известна трехмерная структура этих каналов, что делает невозможным процедуру докинга. Поэтому в работе был использован химико-фармакологический подход, заключающийся в моделировании узнающего (связывающего) сайта по комплементарным к нему лигандам.
Протон-чувствительные ионные каналы принципиально отличаются от других каналов тем, что они открываются не под! действием каких-либо лигандов, а лишь при изменении рН среды. Однако функционирование этих каналов можно регулировать через модуляторный сайт связывания пептидов типа ГМЯРа. Лиганд-модулятор связывается с узнающим сайтом канала в закрытом состоянии, а затем при открытии канала при закислении среды изменяет свойства канала: как по амплитуде возникающего тока, так и характеристики его десенситизации. Поэтому именно этот модуляторный сайт и был выбран в качестве основной мишени (см. схему).
Схема дизайна соединений обладающих фармакологической активностью. В данном случае в качестве мишени выбраны протон-чувствительные ионные каналы для получения соединений обладающих анальгетической активностью.
Проведенный компьютерный конформационный анализ известных пептидных лигандов этих каналов позволил определить структуру фармакофора модуляторного сайта протон-чувствительных ионных каналов и построить трехмерную модель лигандов. На основании построенной модели синтезированы два ряда соединений. Проведенные первичные фармакологические тесты in vitro и in vivo показали правильность выбранного подхода. Синтезированные соединения, содержащие гуанидиновую группировку, оказывают модулирующее действие на функционирование протон-чувствительных ионных каналов. Лиганды-модуляторы протон-чувствительных ионных каналов проявляют анальгетическую активность в экспериментах in vivo. Анализ структурных требований к подобным пептидам и рациональный подход к дизайну новых соединений позволил получить ряд соединений-прототипов непептидной природы, проявляющих выраженное анальгетическое действие. Соединения обоих рядов проявляют анальгетическую активность, причем величины ЕД50 некоторых соединений из обоих рядов ниже ЕД50 таких известных и широко распространенных анальгетиков как анальгин и ацетоаминофен.
120 100
JP 40 о ш
1 Ф iO о о о о см см см ем см <м см
Рис. 27. Диаграмма анальгетического действия (ЕД5») некоторых из синтезированных нами соединений и стандартных анальгетиков.
Таким образом, на основе лигандов-модуляторов протон-чувствительных ионных каналов показана возможность создания новой группы ненаркотических анальгетиков. Более детальное изучение полученных соединений и дальнейшая оптимизация их структур позволит создать новые анальгетические препараты, механизм действия которых будет связан с регуляцией ASICs.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 0 года, Литасова, Елена Викторовна
1. Беспалов А.Ю., ЗвартауЭ.Э. Нейропсихофармакология антагонистов NMDA рецепторов. СПб.: «Невский диалект», 2000 — 297 с.
2. Вальдман A.B. // Сборник научных трудов Нейрофармакологические аспекты боли Л., 1982. - 184с.
3. Василенко A.M. Нейроэндокринноиммунные механизмы болевых синдромов//Боль и ее лечение. 2000.-N 12. - С.4-10.
4. Вислобоков А.И., Игнатов Ю.Д., Мельников К.Н. Фармакологическая модуляция ионных каналов мембраны нейронов. СПб., 2006.- 278 с.
5. Говырин В.А., Жоров Б.С. Лиганд-рецепторные взаимодействия в молекулярной физиологии. СПб.: «Наука», 1994.-240 с.
6. Головенко H.A. Физико-химическая фармакология. Одесса: «Астропринт», 2004. - 720 с.
7. Гринштейн Дж., Виниц М. Химия аминокислот и пептидов. М.: Мир, 1967.-821 с.
8. Гусев Е.И., Бурд Г.С., Никифоров A.C. Неврологические симптомы, синдромы, симптомокомплексы и болезни. М.: «Медицина». - 1999. - 880с.
9. Дашевский В.Г. Конформационный анализ органических молекул. М.: «Химия». - 1982. - 272с.
10. Кассиль Г.Н. Наука о боли. М.: «Наука», - 1975. - 400с.
11. Комиссаров И.В. Механизмы химической чувствительности синаптических мембран. Киев: «Наукова думка», — 1986. — 239с.
12. Крыжановский Г.Н. Общая патофизиология нервной системы. М.: «Медицина», - 1997. - 350с.
13. Машковский М.Д. «Лекарственные средства» 14-е издание. М.: «Новая волна».- 2000. - 1200с.
14. Мелзак Р. Загадка боли. М.: «Медицина», - 1981. - 232с.
15. Мецлер Д., Биохимия. М.: «Мир», - 1980. - т.1. - 365 с.
16. Насонова В.А. Значение ЦОГ-2 в развитии боли // Терапевт, арх. 2001. -№5. - С.56-57.
17. Патологическая физиология // ред. Фролов В.А. М.: ОАО «Издательство «Экономика», 1999. - 616 с.
18. Пептиды. Основные методы образования пептидных связей. // Ред. Э. Гросс, И. Майенхофер. М.: «Мир». 1983. - 421с.
19. Пиотровский Л.Б., БородкинЮ.С. Методология поиска медиаторных средств избирательного действия // Сборник «Методологические вопросы в медицинских исследованиях». Ленинград. - 1987. - С.72-81.
20. Пиотровский Л.Б., Думпис М.А., Гмиро В.Е. Фармако-химические подходы к изучению строения нейрональных рецепторов // Институт Экспериментальной медицины на рубеже тысячелетий. С-Пб.: «Наука», — 2000. с.67-88.
21. Позднев В., Подгорнова Н., Зенцова Н. Получение трет-бутилокси-карбонильных производных аминокислот с применением ди-трет-бутилпирокарбоната.//ХПС.-1979. №4. - С. 543-548.
22. Прощаев К.И., Ильницкий А.Н, Князькин И.В., Кветной И.М. Боль. Молекулярная нейроиммуноэндокринология и клиническая патофизиология. СПб.: Изд.ДЕАН, 2006. - 304с.
23. Слиеде Ю.Б., РожковЕ.Н., Пасторе П.В., Зицане Д.Р., Равиня И.Т, Гудриниеце Э.Ю., Калей У.О. Ферментные субстраты. V. Синтез п-нитроанилидов-Ы-незамещенных L-a-аминокислот // Изв.АН Латв.ССР, Сер.Хим. 1987. - №3. - С.345-347.
24. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Петров В .И. Рецепторы. Волгоград: «Семь ветров», - 1999. - 639с.
25. Стюард Дж., Янг Дж. Твердофазный синтез пептидов. М.: Мир, - 1971. -391с.
26. Харкевич Д.А. Фармакология. М.: «Медицина», - 1987 — 560с.
27. Adams С.М., Anderson M.G., Motto D.G., Price M.P., Johnson W.A., Welsh M.J. Ripped pocket and pickpocket, novel Drosophila DEG/ENaC subunits expressed in early development and in mechanosensory neurons // J. Cell Biol. 1998. -V.140,№1.-P. 143-152.
28. Allard M., Rousselot P., Lombard M.C., Theodosis D.T. Evidence for neuropeptide FF (FLFQRFamide) in rat dorsal root ganglia // Peptides. 1999. -V.20, №3. - P.327-333.
29. Allenn J., Attwell D. Modulation of ASIG channels in rat cerebral Purkinje neurons by ischaemia-related signals. // J. Physiol. (Lond.). 2002. - №543. -P.521-529.
30. Alvarez d.l.R., Canessa C.M., Fyfe G.K., Zhang P. Structure and regulation of amiloride-sensitive sodium channels. // Ann. Rev. Physiol. 2000. - V.62:573-94. - P.573-594. ;
31. Anderson G.W., Zimmerman J.E., and Callahan F.M., Reinvestigation of the mixed carbonic anhydride method of peptide synthesis // J. Am. Ghem. Soc. -1967.- V.89.-P.5012-5017.
32. Anger T., Madge D. J., Mulla M., Riddall D. Medicinal chemistry of neuronal voltage-gated sodium channel blockers. // J. Med. Chem. 2001. - V.44. - P. l 15137.
33. Askwith C.C., Cheng C., Ikuma M., Benson C., Price M., Welsh M. Neuropeptide FF and FMRFamide potentiate aside-evoked currents from sensory neurons and proton-gated DEG/EnaC channels //Neuron. 2000. - V.26. -P.133-141.
34. Baamonde A., Lastra A., Juarez L., Hidalgo A., Menendez L. TRPV1 desensitisation and endogenous vanilloid involvement in the enhanced analgesia induced by capsaicin in inflamed tissues // Brain Res. Bull. 2005. - V.67. -P.476-481.
35. Babinski K., Catarsi S., Biagini G., Seguela P. Mammalian ASIC2a and ASIC3 subunits co-assemble into heteromeric proton-gated channels sensitive to Gd3+ // J. Biol. Chem. 2000. - V.275, №37. - P.28519-28525
36. Benson C.J:, Eckert S.P., McCleskey E.W. Acid-evoked currents in cardiac sensory neurons: A possible mediator of myocardial ischemic sensation // Circ. Res. 1999. - V.84, №8. - P.921-928
37. Bergman M., Zervas L., Rinke H. Proteolityc enzymes (III) synthesis of lysine and their behavior towad proteolytic enzymes // Z. Physiol. Chem. 1934. - V.224. -P.40-42.
38. Berse C., Piché L., Uchiyama A. The preparation of 1-arginyl dipeptides of asparagine, glutamine, and some basic amino acids // Can. J. Chem. — 1960. — V.38. -P.1946-1950.
39. Beyerman H., van der Brink W., Weygand F. Racemization and Bifunctional catalysts in peptid synthesis //Rec. Trav. Chim. 1965. - V.84, №2. - P.213-231.
40. Bezas B., Zervas L. On the peptides of L-lysine // J. Am. Chem. Soc. 1961. — V.83.-P.719-722.
41. Bianchi L., Driscoll M. Protons at the gate. DEG/ENaC ion channels help us feel and remember//Neuron. 2002. - V.34, №3. - P.337-340.
42. Birkhofer L., Bierwirth E., Ritter A. Decarbobenzoxylierungen mit Triathylsilan // Chem. Ber. 1961.-V.94. - P.821-824.
43. Blaha K., Rudinger J. Rates of fission of some substituted benzyloxy-carbonylglycines and two heterocyclic analogues with hydrogen bromide in acetic acid // Collect. Czech. Chem. Communs. 1965. - V.30, №2. - P.585-598.
44. Blau K., Waley S. Ohymotrypsin-catalysed transpeptidations. // Biochem. J. -1954. V.57.-P.538-541.
45. Bodanzky M. Synthesis of peptides by aminolysis of nitrophenyl esters // Nature. 1955. - V. 175, №4459. - P.685-689.
46. Bodanszky M., Ondetti M. Peptide Synthesis Willey, New York, - 1966. -243p.
47. Bodanszky M., Tolle J. Side reaction in peptide synthesis V.A. reexamination of the mixed anhydride method. // Int. J. Pept. Protein Res. -1977. V.10. - P.380-384.
48. Boissonnas R. Selectively remavable aminoprotective groups used in the synthesis of peptide. //Advan. Org. Chem. 1963. - V.3. -P.159-163.
49. Brenner M., Huber W. Herstellung von a-Aminosaureestern durch Alkoholyse der Metylester // I Ielv. Chim. Acta. 1953. - V.36, №5. - P. 1109-1115
50. Garpino L., Giza C., Carpi no B. O-acylhydroxylamines. 1. Synthesis of o-benzoylhydroxylamine // J. Am. Chem. Soc: 1959, - V.81, №4. - P.955-957.
51. Carpino L. New methods of introducing the carbo-t-butoxy protective group. Preparation of t-butyl cyanoformate. // J: Am. Chem.Soc. 1960. - V.82, №11. -P. 2725-2731.
52. Caterina M.y Julius D. The vanilloid receptor: a molecular gateway to the pain pathway.//Annu. Rev. Neurosci. 2001. - V.24. - P.487-517.
53. Coric T., Zhang P., Todorovic N., Canessa C.M. The extracellular domain determines the kinetics of desensitization in acid-sensitive ion;channel !. // J. Biol. Chem. 2004. - V.278, № 46. - P.45240 45247.
54. Coscoy S., Lingueglia E., Lazdunski M., Barbry P. The Phe-Met-Arg-Phe-amide-activated sodium channel is a tetramer. // J. Biol. Chem! 1998. - V.273, №14. -P.8317-8322.
55. Cottrell G. The wide range of actions of the FMRFamide-related peptides and the biological importance of peptidergic messengers. // EXS. 1993. - V.63. -P.279-285
56. Cottrell G., Davies N. Multiple receptor sites for a molluscan peptide (FMRF amide) and related peptides of Helix. // J. Physiol. 1987. - V.382. -P.51-68.
57. Cottrell G.A., Green K.A., Davies N.W. The neuropeptide Phe-Met-Arg-Phe-NH2 (FMRFamide) can activate a ligand-gated ion channel in Helix neurons. // Pflugers Arch. 1990. - V.416, №5. - P.612-614.
58. Curtius Th. Synsthetische Versuche mit Hippurazide. // Chem. Ber. -1902.-V.35, №3. — P.3226-3228.
59. De La Rosa D.A., Krueger S.R., Kolar A., Shao D., Fitzsimonds R.M., Canessa C.M. Distribution, subcellular localization and ontogeny of ASIC 1 in the mammalian central nervous system. // J. Physiol. 2003. - V.546, №Pt 1. — P.77-87.
60. Drummond H., Gebremedhin D., Harder D. Degenerin/Epithelial Na + Channel Proteins: Components of a Vascular Mechanosensor // Hypertension. — 2004. — V.44. -P.643-648.
61. Escoubas P., De W.J., Lecoq A., Diochot S, Waldmann R., Champigny G., Moinier D., Menez A., Lazdunski M. Isolation of a tarantula toxin specific for a class of proton-gated Na+ channels. // J.Biol.Chem. 2000. - V.275, №33. -P.25116-25121.
62. Eskandari S., Snyder P.M., Kreman M., Zampighi G.A., Welsh M.J., Wright E.M. Number of subunits comprising the epithelial sodium channel. // J.Biol.Chem. 1999. - V.274, №38. - P.27281-27286.
63. Ferreira J., Santos AR., Calixti JB. Antinociception produced by systemic spinal and supraspinal administration of amiloride in mice. // Life Sci.- 1999. — V.65.-P.1059-1066.
64. Fields H. L. Pain // McGraw-Hill, New York, 1987. - 269p.
65. Firsov D, Gautschi I, Merillat A.M., Rossier B.C., Schild L. The heterotetrameric architecture of the epithelial sodium channel (ENaC). // EMBO J. 1998. - V.17, №2. - P.344-352.
66. Fling M, Minard F.N, Fox S.W. Prolyl and phthalyl derivatives of enantiomorphs of valine and leucine // J. Am. Chem. Soc. 1947. - V.69, №10. - P.2466-2467.
67. Freindinger R, Hirschmann R, Veber D. Titanium (III) as selective reducing agent for nitroarginyl peptides: synthesis of arginine vasotocin. // J. Org.Chem. -1978. V.43, №25. - P.4800^1802.
68. Fruton J.S. Proteolitic enzymes in the biosynthesis of proteins. // Advan. Protein Chem. 1949. - №5. -P. 1-4.
69. Gayton R.J. Mammalian neuronal actions of FMRFamide and the structurally related opioid Met-enkephalin-Arg6-Phe7. // Nature. 1982. - V.298, №5871. -P.275-276.
70. Gibian H., Schroder E. Synthesen von Argininhaltigen Peptiden. // Ann.Chem.Liebigs. 1961. V.642. - P.145-162.
71. Gillespie P.G., Walker R.G. Molecular basis of mechanosensory transduction. // Nature. 2001. - V.413. - P. 194-202.
72. Gish D.T., Katsoyannis P.G., Hess G.P., Stedman R.J. Unexpected formation of anhydro compounds in the synthesis of asparaginyl and gutaminyl peptides. // J. Am. Chem. Soc 1956. -V.78.-P. 5954-5954.
73. Gish D.T., Carpenter F.H. Preparation of arginyl peptides. // J. Am. Chem. Soc. 1953.-V.75.-P.5872-5877.
74. Goldschmidt S., Jutz C. Über peptid-synthesen, III. Mitteil.: Eine neue synthese des glutathions.//Chem. Ber. 1953. - V.86. - P. 1116-1121.
75. Gouarderes C., Sutak M., Zajac J.M., Jhamandas K. Antinociceptive effects of intrathecally administered F8Famide and FMRFamide in the rat. // Eur.J.Pharmacol. 1993. - V.237, №1 - P.73-81.
76. Grassmann W., Schulte-Uebbing E. Die synthese einiger peptide nach dem phthalyl-verfahren. // Chem. Ber. -1950. V.83. - P. 244-247.
77. Greenberg M.J., Price D.A. Relationships among the FMRFamide-like peptides. // Prog.Brain Res. 1992. - V.92. - P.25-37.
78. Grotenhermen F. Cannabinoids. // Curr Drug Targets CNS Neurol Disord.-2005.-V.4.-P.507-30.
79. Grunder S., Geissler H.S., Bassler E.L., Ruppersberg J.P. A new member of acid-sensing ion channels from pituitary gland. // Neuroreport. —2000. V.ll, №8. - P.1607-1611.
80. Guttmann S, Pless J. Protection of the guanidino group of arginine. // Chimia (Aarau). 1964. - V. 18. - P. 185-189.
81. Halpern B, Nitecki D. The deblocking of t-butyloxycarbonyl-peptides with formic acid. //Tetrahedron Lett. 1967.-№31. - P.3031-3033. .
82. Hayakawa T, Fujiwarw Y, Naguchi I. Anew mehtod of reducing nitroarginine-peptide into arginine-peptide wiht reference to the synthesis of poly-L-arginine hydrochloride. //Bull. Chem. Soc. Jap. 1967. - V.40, №5. - P. 1205-1208.
83. Hinuma S., Habata Y, Fujii R, Kawamata Y, Hosoya M, Fukusumi S, Kitada C, Masuo Y, Asano T, Matsumoto H, Sekiguchi M, Kurokawa T, Nishimura O, Onda H, Fujino M. A prolactin-releasing peptide in the brain. // Nature. -1998. V.393, №6682. - P.272-276
84. Holdcroft A. Future pain drugs. // Drugs. 2000. - V.3. - P.626-628.lOO.Issberner U, Reeh, P.W., Steen, K.H. Pain due to tissue acidosis: a mechanismfor inflammatory and ischemic myalgia? // Neurosci. Lett. — 1996. — V.208. — P. 191-194.
85. Jacobus W.E, Taylor G.J., Hollis D.P, Nunnally R.L. Phosphorus nuclear magnetic resonance of perfused working rat hearts. // Nature. — 1977. — V.265. -P.756-758.
86. Jones N., Slater R., Cadiou H., McNaughton P:, McMahon B. Acid-induced pain and its modulation in humans // Neuroscience. 2004. - V.24, №48. -P. 10974-10979.
87. Julius D., Basbaum A. Molecular mechanisms of nociception. // Nature. 2001.- V.413. -p.203-210.
88. KatchaIski E. Poly-a-amino acids. // Adv. Protein Chem. 1951. - V.6. -P. 123-185.
89. Kavaliers M. Calcium channel blockers inhibit the antagonistic effects of Phe-Met-Arg-Phe-amide (FMRFamide) on morphine- and stress-induced analgesia in mice // Brain Res. 1987. - V.415, №2. - P.380-384
90. Kavaliers M., Hirst M. FMRFamide, a putative endogenous opiate antagonist: evidence from suppression of defeat-induced analgesia and feeding in mice. // Neuropeptides. 1985. - V.6, №6. - P.485-494.
91. Kellenberger S., Schild L. Epithelial Sodium Channel/Degenerin Family of Ion Channels: A Variety of Functions for a Shared Structure // Physiol Rev. — 2002.- V.82. P.735-767.
92. Khorana H.G. The chemistry of carbodiimides. // Chem. Rev. 1953. - V.53. -P.145-166.
93. Konig W., Geiger R. Chemistry and biology of peptides. // Ed. J. Meinhofer. -Michigan: Ann. Arbor. Sei. Publ. -1972.-343 p
94. Kostyuk P.G. Intracellular perfusion of nerve cells and its effects on membrane currents//Physiol Rev. 1984. - V.64, №2. - P.435-454.
95. Kress Mi, Reeh, P.W. Chemical excitation and sensitization in nociceptors. // In Neurobiology of nociceptors. F. Cervero and C. Belmonte, editors. Oxford University Press. New York, New York, USA. 1996 - P.258-297
96. Krishtal O. Pidoplichko V. A receptor for protons in the nerve cell membrane. //Neuroscience.- 1980.-V.5, №12.-P.2325-2327.
97. Krishtal O., Pidoplichko V. A receptor for protons in the membrane of sensory neurons may participate in nociception. // Neuroscience. 1981. - V.6, №12. -P.2599-2601.
98. Krishtal O., Osipchuk Y., Shelest T., Smirnoff S. Rapid extracellular pH transients related to synaptic transmission in rat hippocampal slices. // Brain Res. -1987. V.436, №2. - p.352-356.
99. Krishtal O.A. ASICs: signaling molecules? Modulators? // Trends. Neurosci. -2003. V.26. - P.477-483.
100. Kupryszewski G., Formela M. O depsipeptydach. (3). Zastosowanie a-bromo-propioniatu t-butylu do syntez depsipeptydow kwasu mlekowego. // Rocz. Chem. — 1963. V.37. - P. 161-165.
101. Kurzer F., Douraghi-Zadeh K. Advances in the Chemistry of Carbodiimides // Chem. Rev. 1967. V.67, №2. - P. 107-152.
102. Lai C., Hong K., Kinnell M., Chalfie M., Driscoll M. Sequence and transmembrane topology of MEC-4, an ion channel subunit required for mechanotransduction in Caenorhabditis elegans. // J. Cell Biol. 1996. - V.133, №5. - P.1071-.1081.:
103. Lamberts S., Macleod R. Regulation of prolactin secretion at the level of the lactotroph. // Physiol Rev. 1990. - V.70, №2. - P.279-318.
104. Leucks H. Ueber die Glycin-carbonsaure. // Chem. Ber. 1906. - V.39, №1. — P.857-861. !
105. Lingueglia E., Deval E., Lanzdunski M. FMRFa-gated sodium channels and ASIC chennels: A new class of ionotropic receptors for FMRFamide and related peptides//Peptides. 2006. - V.27. - P. 1138-1152.
106. Lilley S., Tissier P., Robbins J. The discovery and characterization of a protongated sodium current in rat retinal ganglion cells // J. Neurosci. 2004. - V.24, №5. - P.1013—1022.
107. Lingueglia,E., Deval W., Bassilana F., Heurteaux C., Sakai H., Waldmann R., Lazdunski M. A modulatory subunit of acid sensing ion channels in brain and dorsal root ganglion cells // J. Biol. Chem. 1997. - V.272, №47. - P.29778-29783.
108. Lingueglia E., Champigny G., Lazdunski M., Barbry P. Cloning of the amiloride-sensitive FMRFamide peptide-gated sodium channel // Nature. 1995. - V.378, №6558. - P.730-733.
109. Losse G., Zonnchen W. Die formyl-gruppe eine oxydativ entfernbare Schutzgruppe bei Peptid-Synthesen // Angew. Chem. - 1960. - V.72. - P.385-389.
110. Mamet J. Proinflammatory mediators, stimulators of sensory neuron excitability via the expression of acid-sensing ion channels // J.Neurosci. -2002. V.22. -P.10662-10670.
111. Matsumoto H., Noguchi J., Horikoshi Y., Kawamata Y., Kitada C., Hinuma S., Onda H., Nishimura O., Fujino M. Stimulation of prolactin release by prolactin-releasing peptide in rats // Biochem.Biophys.Res.Commun. 1999. - V.259, №2. - P.321-324.
112. Mercado F., Vega R., Soto E. Ion channels that are sensitive to the extracellular concentration of protons: their structure, function, pharmacology and pathophysiology//Rev. Neurol. 2005.-V.41, №11. - P.667-675.
113. Muthal A, Mandhane S, Chopde C. Central administration of FMRFamide produces antipsychotic-like effects in rodents // Neuropeptides. 1997. - V.31, №4.-P.319-322.
114. Nelson L, Kim K, Memmott J, Li C. FMRFamide-related gene family in the nematode, Caenorhabditis elegans //BrainRes. Mol. Brain Res. 1998. - V.58, №1-2. - P.103-111.
115. Palmer L., Andersen O. Interactions of amiloride and small monovalent cations with the epithelial sodium channel. Inferences about the nature of the channel pore//Biophys. J. 1989. - V.55, №4. - P.779-787.
116. Palmer L. Epithelial Na channels: function and diversity // Annu. Rev. Physiol. 1992.-V.54.-P.51-66
117. Pless J, Boissonnas R. Uber die Geschwindigkeit der Aminolyse von Verschiedenen neuen, aktivierten, N-geschutzen-Amino-saure-phenylestern, insbesondere 2,4,5-Trichlorphenylestern // Helv. Chim. Acta. 1963. - V.46, №176. — P. 1609-1625.
118. Price D, Greenberg M. Purification and characterization of a cardioexcitatory neuropeptide from the central ganglia of a bivalve mollusk // Prep. Biochem. -1977.-V.7, №3-4.-P.261-281.
119. Price D, Greenberg M. Structure of a molluscan cardioexcitatory neuropeptide // Science. 1977. - V.197, №4304. - P.670-671.
120. Price M, Snyder P, Welsh M. Cloning and expression of a novel human brain Na+ channel // J.Biol.Chem. 1996. - V.271, №14. - P.7879-7882.
121. Price *M., Mcllwrath S., Xie J., Cheng C., Qiao J., Tarr D., Sluka K., Brennan T., Lewin G., Welsh M. The DRASIC cation channel contributes to the detection of cutaneous touch and acid stimuli in mice // Neuron. 2001. - V.32, №6.-P. 1071-1083.
122. Raffa R.B., Heyman J., Porreca F. Intrathecal FMRFamide (Phe-Met-Arg-Phe-NH2) induces excessive grooming behavior in mice // Neurosci.Lett. 1986. -V.65, №1. - P.94-98.
123. Raffa R.B. The action of FMRFamide (Phe-Met-Arg-Phe-NH2) and related peptides on mammals // Peptides. 1988. - V.9, №4. - P.915-922.
124. Raffa R.B., Connelly C.D. Supraspinal antinociception produced by D-Met2.-FMRFamide in mice //Neuropeptides. 1992. - V.22, №3. - P. 195-203.
125. Raja S. N., Meyer, R. A., Ringkamp, M. & Campbell, J. N. // in Textbook of Pain (eds Wall P. D., MelzackR.). 1999. -P. 11-57.
126. Reeh P.W., Steen, K.H. Tissue acidosis in nociception and pain // Prog. Brain Res. 1996. - V.l 13. - P.143-151.
127. Renard S., Lingueglia E., Voilley N., Lazdunski M., Barbry P. Biochemical analysis of the membrane topology of the amiloride-sensitive Na+ channel // J. Biol. Chem. 1994. - V.269, №17. - P.12981-12986.
128. Ressler C., Formation of a,y-diaminobutyric acid from asparagine-containing peptides // J. Am. Chem. Soc. 1956. - V.78. - P.5956-5957.
129. Roberts J., Johnson R. Synthesis of N-carbobenzoxyamino acid and pentafluorphenyl esters as intermediates in peptide synthesis // J. Org.Chem. -1970. V.35, №10. - P.3563-3564.
130. Roumy M., Zajac J.M. Neuropeptide FF, pain and analgesia // Eur. J. Pharmacol. 1998. - V.345, №1. - P. 1-11.
131. Rühlmann K., Kaufmann U. Über die Si-N-bindung, // J. Lieb. Ann. Chemie. -1962. V.656.-P.22-23.
132. Saugstad J.A., Roberts J.A., Dong J., Zeitouni S., Evans R.J. Analysis of the membrane topology of the acid-sensing ion channel 2a // J. Biol. Chem. 2004. - V.279, №53. - P.55514-55519.
133. Schmidt R.F. Novel classes of responsive and unresponsive C nociceptors in human skin//Neurosci.- 1995,-V. 15.-P.333-341.
134. Schnabel E., Li C.H. The synthesis of L-histidyl-D-phenylalanyl-L-arginyl-L-tryptophylglycine and its Melanocyte-stimulating Activity // J. Am. Chem. Soc.- 1960. V.82. - P.4576-4579.
135. Schneider L.E., Taghert P.H. Isolation and characterization of a Drosophila gene that encodes multiple neuropeptides related to Phe-Met-Arg-Phe-NH2 (FMRFamide) // Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 1988. - V.85, №6. - P. 19931997.
136. Schwyzer R., Iselin B., Kappeler H., Riniker B., Rittel W., Zuber H. Die Synthese des ß-Melanotropins (ß-MSH) mit der Aminosäurensequenz des bovinen Hormons // Helv. Chim. Acta. 1963. - V.46. - P. 1975-1996.
137. Scroggs R.S., Fox A.P. Calcium current variation between acutely isolated adult rat dorsal root ganglion neurons of different size // J. Physiol. 1992. -V.445 - P.639-658.
138. Sheehan J.C., Chapman D.W., Roth R.W. The synthesis of stereochemically pure peptide derivatives by the phthaloyl method // J. Am. Chem. Soc. 1952.- V.74. — P.3822-3825.
139. Sheehan J.C., Hlavka J.J. The use of water-soluble and basic carbodiimides in peptide synthesis // J. Org. Chem. 1956. - V.21. - P.439-441.
140. Shepard K., Halozenko W., Cragoe E. Aktivated esters of substituted pyrazinecarboxylic acid // J.Het. Chem. -1976. V.13. - P.1219-1221.
141. Sherrington C. S. The Integrative Action of the Nervous System. Scribner, New York, 1906
142. Shimada S, Yamamura H, Ueda T, Yamamoto T, Ugawa S. Functional analysis of acid sensing ion channels // Yakurigaku Zasshi. 2004. V.24, №4. - P.243-246.
143. Sluka K.A., Kalra A., Moore S.A. Unilateral intramuscular injections of acidic saline produce a bilateral, long-lasting hyperalgesia // Muscle Nerve. 2001. -V.24, №1. - P.37-46.
144. Smith E.L., Spackman D.H. Leucine aminopeptidase. (V). Activation, specificity, and mechanism of action // J. Biol. Chem. — 1955. — V.212. — P.271-299.
145. Smithwick E., R.Shuman. A new sinthesis of 1ST, №, NG-tribenzyloxy-carbonyl-L-arginin and related derivatives // J. Org.Chem. 1974. - V.39, №23.-P.3441-3444.
146. Sorenson R.L., Sasek C.A., Elde R:P. Phe-met-arg-phe-amide (FMRF-NH2) inhibits insulin and somatostatin secretion and anti-FMRF-NH2 sera detects pancreatic polypeptide cells in the rat islet // Peptides. 1984. - V.5, №4. -P:777-782.
147. Steen K., Reeh P. Sustained graded pain and hyperalgesia from harmless experimental tissue acidosis in human skin // Neurosci. Lett. — 1993. — V.154. — P.113-116.
148. Steen K.H., Steen A.E., Kreysel H.-W., Reeh P.W. Inflammatory mediators potentiate pain induced by experimental tissue acidosis // Pain. 1996. - V.66. -P. 163-170.
149. Steen K.H., Reeh, P.W., Anton, F., Handwerker, H.O. Protons selectively induce lasting excitation and sensitization to mechanical stimulation of nociceptors in rat skin, in vitro II J. Neurosci. 1992. - V. 12. — P.86-95.
150. Sutherland S.P, Benson C.J, Adelman J.P, McCleskey E.W. Acid-sensing ion channel 3 matches the acid-gated current in cardiac ischemia-sensing neurons //. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2001. - V.98, №2.- P.711-716.
151. Tang J, Yang H.Y, Costa E. Inhibition of spontaneous and opiate-modified nociception by an endogenous neuropeptide with Phe-Met-Arg-Phe-NH2-like immunoreactivity. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1984. - V.81, №15. -P .5002-5005.
152. Telegdy G, Bollok I. Amnesic action of FMRFamide in rat'// Neuropeptides. -1987. V.10, №2. - P. 157-163.
153. Thiemermann C, al-Damluji S, Hecker M, Vane J.R. FMRF-amide and L-Arg-L-Phe increase blood pressure and heart rate in the anaesthetised rat by central stimulation of the sympathetic nervous system // BBRC. 1991. -V. 175, №1. -P.318-324.
154. Uwaga S, Ueda T, Takahashi E, Hirabayashi Y, Yoneda T, Komai S. Cloning and functional expression of ASIC-beta2, a splice variant of ASIC-beta //Neuroreport. 2001. - V. 12. - P.2865-2869.
155. Uwaga S., Ueda T, Ishida Y, Nishigaki M, ShibataY., Shimada S. Amiloride-blockable aside-sensetiv ion channels are leading asid sensors expressed in human nociceptors // J. Clin. Invest. 2002. - V.l 10. - P. 1185-1190.
156. Vaughan J.R. Jr., Osato R.L. The preparation of peptides using mixed carbonic-carboxylic acid anhydrides // J. Am. Chem. Soc. 1952. - V.74. - P.676-678.
157. Vilim F.S, Aarnisalo A.A, Nieminen M.L, Lintunen M, Karlstedt K, Kontinen V.K, Kalso E, States B, Panula P, Ziff E. Gene for pain modulatory neuropeptide NPFF: induction in spinal cord by noxious stimuli // Mol. Pharmacol. 1999.-V.55, №5.-P.804-811.
158. Voiley N. Nonsteroid anti-inflammatory drugs inhibit both the activiti and the inflammation-induced expression of acid-sensing ion channels in nociceptors // J. Neurosci. 2001. - V.21. - P.8026-8033.
159. Voillcy N. Asid-sensing ion channels (ASICs): new targets for analgesic effects of non-steroid anti-inflammatory drugs (NSAIDs) // Gurr Drug Targets In flamm Allergy. 2004. - №3(1) - P.71-79.
160. Waldmann R., Bassilana F., de Weille J., Ghampigny G., Heurteaux G., Lazdunski M. Molecular cloning of a non-inactivating proton-gated' Na+ channel specific for sensory neurons // J; Biol. Chem. 1997. - V.272, №34. -p.20975-20978.
161. Waldmann R., Champigny G., Bassilana F., Heurteaux G., Lazdunski M. A proton-gated cation channel' involved in> acid-sensing // Nature. 1997A. -V.386, №6621. - P.173-177.
162. Waldmann R., Lazdunski M. H(+)-gated cation channels: neuronal' acid sensors in the NaC/DEG family of ion channels // Curr. Opin. Neurobiol. -1998. V.8, №3. - P.418-424.
163. Waley S.G., Watson J. Trypsin-catalysed transpeptidations. // Biochem. J. -1954. V.57. - P.529-538.
164. Weisblät D.L, Magerlein BJi, Myers D.R. The cleavage of sulfonamides // J. Am. Chem. Soc. 1963. - V.75. - P.3630-3632.
165. Weygand F., Hunger K. Acylierung von: aminosäuren mit pht-methoxybenzyloxycarbonyl-azid //Chem. Ber. — 1962— V.95.—P; 1-6.
166. Weigang F., and Csendes E. N-Trilluoracetyl-aminosäuren // Angew. Chem. -1952. V.64. - P. 136-138.
167. Weygand F., Swodenk W. N-Trifluoracetyl-aminosäuren, IX. Peptidsynthesen mit N-trifluoracetyl-aminosäure-cyanmethylestern // Chem; Ber. — 1957. — V.90. P.639-645
168. Wieland T., Schafer W.,Bockelmann E. Uber Peptidesynthesen .5. Uber eine bequeme Darstellungweise von Acylthiophenolen und ihre Verwendung zu Amid- und Peptid-Synthesen // J. Lieb. Ann. Chem. 1951A. - V.573. - P.99-104.
169. Woolf C.J., Salter M.W. Neuronal plasticity: increasing the gain in pain // Science. 2000. - V.288. - P. 1765-1769.
170. Xie J., Price M., Wemmie J., Askwith C., Welsh M. ASIC1 and ASIC3 mediate FMRFamide-related peptide enhancement H+-gated currents in cultured dorsal root ganglion neurons // J. Neurophysiol. 2003. - V.89. — P.2459-2465.
171. Yang H., Fratta W., Majane E., Costa E. Isolation, sequencing, synthesis, and pharmacological characterization of two brain neuropeptides that modulate the action of morphine // Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 1985. - V.82, №22. -P.7757-7761.
172. Yiangou Y., Facer P., Smith J.A., Sangameswaran L., Eglen R., Birch R., Knowles C., Williams N., Anand P. Increased acid-sensing ion channel ASIC-3 in inflamed human intestine // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 2001. - V.13, №8. - P.891-896.
173. Yudin Y., Tamarova Z., Ostrovskaya O., Moroz L., Krishtal O. RFa-related peptides are algogenic: evidence in vivo and in vitro // Eur. J. Neurosci. 2004. - V.20. — P.1419-1423.
174. Zahn H., Diehl J. F. Synthesis of dipeptides of arginine // Z. Naturforsch. — 1957.-V. 12b.-P.85-87.
175. Zegarska B., Lelinska A., Tyrakowski T. Clinical and experimental aspects of cutaneous neurogenic inflammation // Pharmacol. Rep. — 2006. V.58. -P.13-21.
176. Zervas L., Winitz M., Greenstein J.P. Studies on arginine peptides. I. Intermediates in the synthesis of N-terminal and C-terminal arginine peptides // J. Org. Chem. 1957. - V.22.-P.1515-1521.