Автореферат и диссертация по медицине (14.00.06) на тему:Активный транспорт катионов и структурно-функциональные свойства клеток крови в процессе развития гипертонической болезни



с, 9

v-'

ЛЕНИНГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ

На правах рукописи

МОИСЕЕВА Ольга Михайловна

АКТИВНЫЙ ТРАНСПОРТ КАТИОНОВ И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА КЛЕТОК КРОВИ В ПРОЦЕССЕ РАЗВИТИЯ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ

14.00.06. — Кардиология

АВТО РЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 1992

Работа выполнена в Ленинградском научно-исследовательском институте кардиологии А13 РСФСР.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Б. Б. Бондаренко, доктор медицинских наук В. С. Гуревич.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Б. М. Липовецкий, доктор медицинских наук, профессор И. М. Суворов. Ведущее учреждение — Военно-медицинская академия им. С. М. Кирова.

Защита диссертации состоится ^ъЫтО&АУ 1992 г.

в « /3 » часов на заседании специализированного Совета Д 074.16.01 по защите докторских диссертаций при Ленинградском государственном институте усовершенствования врачей (193015, г. Санкт-Петербург, ул. Салтыкова-Щедрина,

д. 41):

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института,

Автореферат разослан tC¿■í{■Z<SJ^/ 1992 г.

Ученый секретарь / специализированного совета

к. м. н. К. Г. Ефремова

• asij '"«•эл ДЦМ j

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ, неханязш становления И прогрвс-шш гипертонической болезни (ГВ) относятся к чисдг

наиболее актуальный проблем кардиологии. Биохимические п биофизические аспекты нарушения натриевого н кальциевого гоиеостаза в клетках различных тканей н преаде всего в меткая почек, гяадкомыкечных клетках сосудов и скнаптссомах, осуиествля-вких контроль за артериадьнш давлением (АД). легли в основу неибранвой теории патогенеза ГБ (Постнов ¡0. В. .Орлов С. IL. 1967; Blaustein 1!. Р., 196'И. Активный транспорт катноноз считается основной скстеной. определявшей постоянство концентрации натрия и калышя в клетке. До настоящего вренени не ясен вопрос являются ли нарушения активности натриевого и кальциевого насосов при ГБ генетически детермннировашдми (Постнов Ю. В. Орлов С. Н., 1987; Лекрптский П. Н.. Арабидзе Г. Г. . 1990) иди возникают под влиянием гуморальных и горнокалыыя Факторов, участвукгия в регуляции артериальной гипертепзии (АГ) (De Wordener II. 2., С1 aiK-ЗОП Е. 15. , 19S5. ZideK Ы. . Vetter Н. . 1967).

В качестве основной экспериментальной подели для исследования клеточных ненбран при ГБ использугягся клетка крови. Изучение катионтранснортной функции эритроцитов и тронбошгтов представляет интерес не только вследствие простота п доступности объекта исследования, но п в связи с тем. что нарушение реологических показателей крови при ГБ рассматривается в качестве одного из Факторов стабилизация повышенного АЛ (Dlntenfass L. , 1981, Разе J. II. ,1987). Одна!» данные об активности транспортных АТФаз клеток крови носят противоречивый характер. Это обусловлено отсутствием детального анализа влияния на показатели активного транспорта катионов особетостей клинического течения ГБ (Сапезза Н.,1983) и процесса естественного старения клеток (Bernstein .Е.,1987). В связи с этим представляется актуальным изучение активного транспорта натрия и калышя клеток крови н из функциональных свойств на этапах эволюции ГБ ( пограничной артериальной гинертензии (ПАП.ГП X и II стадии) с учетом Возрастных особенностей клетки и обратимости выявляешь наруиений в условиях медикаментозных воздействий.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ, Язуу^т*, изненення активного транспор-

та натрия и кальпия. а такхе структурно-функциональные свойств клеток крови в процессе становления ГБ и в условиях лекарственной терапии.

ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ РАБОТЫ:

1. Изучить функциональную активность натриевого насоса в эритроцитах и особенности изменения активности На, К-АТФазы в различных возрастных субпопуляциях эритроцитов при НАГ. ГБ I и II стадии.

г. Исследовать изменения структурно-функциональных свойств эритроцитов в процессе развития гб.

3. Изучить и сопоставить изменения активности На, К- и не, Са-АТфаз с функциональной активностью тронбоцитов при различных стадиях ГБ и ПАГ.

4. Оценить влияние ионотерапии неселектившаш £-блокато-рани и антагонистами кальция на активность транспортных АТФаз п Функциональнее свойства клеток крови.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ. ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. В процессе, развития ГБ происходят закономерные изменения активности натриевого насоса в эритроцитах. ПАГ свойственно повышение активности На,Г-АТФазы за счет фракции "старых" клеток,увеличение скорости уабаин-зависимого выхода натрия и снижение внутриклеточной концентрации катиона в эритроцитах. ГБ I .стадии характеризуется снижением констант Функционирования натриевого насоса на Фоне повышения суммарной активности На.К-АТФазы эритроцитов. При ГБ II стадии имеется снижение активности натриевого насоса за счет дефекта активного транспорта натрия во фракции "нолодых" эритроцитов.

Е. В процессе становлении происходит закономерное снижение активности На, Ж- и Hg. Са-АТФаз тромбоцитов, тесно связанное со степенью повышения АД.

3. ГБ характеризуется сопряженностью изменений функциональных свойств и активности натриевого и кальциевого насосов клеток крови, зависящих от стадии заболевания и уровня АД.

4. ГБ I и II стадии свойственно снижение упорядоченности липидного бислоя эритропитарных ненбрав,что приводит к увеличению их проницаемости для одновалентных катионов, изменению активности На. К-АТФазы и снижению

дефорнабельности эритроцитов.

5. Ионотерапия мягкой и умеренной АГ анаприлинон сопровождается сшшениен активности На, К-АТФази и дефорнабельности эритроцитов. На Фойе терапии коринФарон происходит улучшение реологических свойств крови и активация транспортных АТФаз эритроцитов и тромбоцитов.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые изучено изменение активности На, К-АТФазы в возрастных' субпопуляциях эритроцитов, что позволило выявить увеличение суинарной активности транспортного Фернента при ПАГ и ГВ I стадии за счет фракции •старых" эритроцитов и снижение его активности при II стадии заболевания за счет фракции "молодых" клеток. Показано-снижение упорядоченности линидного бислоя эритроаитарных ненбрая при ГБ,что свидетельствует о повышенной их проницаемости для одновалентных катионов. Прогрессирование заболевания характеризуется иовышениен "аесткости" плазмапгческих ненбран. что сопровождается снижением активности На, К-АТФазы и дефорнабельности эритроцитов. Установлено, что изненения акпшности натриевого и кальциевого насосов, а также функциональных свойств эритроцитов и тромбоцитов является звеньями единой систены, определяющей состояпие клетки и тесно связанной со стадией заболевания и уровнен АД. Показано, что снижение дефорнабельности эритроцитов при ПАГ и подгруппе лиц с отягощенным по ГБ ананнезон по материнской линии .- раннее проявление мембранных нарушений, свойственных ГВ.

практическая значимость. Закононерная динамика изменений активности натриевого насоса эритроцитов и их функциональных свойств в процессе становления ГБ позволяет использовать разработанный конплекс методов в качестве объективного критерия стадии заболевания. Для ПАГ характерны активация натриевого насоса и снижение. интегрального показателя осмотической зритрограмны по сравнению с норной. ГБ " I стадии свойственно снижение констант функционирования натриевого насоса на Фоне сохраняющейся активации На, Х-АТФазы,снижения дефорнабельности, повышения агрегации эритроцитов и интегрального показателя осмотической эритрогранмы. ГБ II стадии свойственно снижение активности

натриевого насоса . на Фоне повышения внутриклеточнз; концентрации натрия и снижения упорядоченности лишшногу бислоя эритроцитариых нембран, сопровохдаюиееся дальнейшие ухудшением реологических свойств крови и повышением, интегрального показателя осмотической эритрограммы.

Отсутствие изменений скорости уабаин-зависиного выхода натрия из эритроцитов и констант функционирования натриевого насоса ножет быть использовано в качестве дополнительного дифференциально-диагностического критерия при вазоренальной АГ и ГБ. Определение активности транспортных АТФаз в клетках крови рекомендуется для прогнозирования эффективности гипотензивной терапии антагонистами кальция.

АПРОБАЦИЯ И РЕАЛИЗАЦИЯ. Результаты диссертации доложены на городской конференции "Молодые ученые - практическому здравоохранению" (Ленинград. 1961) и конференции молодых -/ченых в Ленинградском НИИ кардислоги'и нз РСФСР (1989). Основные положения диссертации изложены в 5 статьях, опубликованных в периодической печати и в сборниках научных трудов. Результаты работы внедрены в клинике Ленинградского НИИ кардиологии НЗ РСФСР.

ОБЪЕИ РАБОТЫ. Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста, из них 103 страницы основного текста, состоящего из 3 глав, обсуждения, выводов, практических рекомендаций. Работа включает 20 таблиц, 11 рисунков. Библиография: 89 отечественных и 136 иностранных источников.

НАТЕРНАЛЫ И НЕГОда ИССЛЕДОВАНИЯ. Настоящая работа включает результата обследования 140 мужчин: 41 практически здорового донора (средний возраст 24.3±1,3 г) и 99 больных с АГ. Диагноз ГБ верифицирован после исключения синптонатической АГ. Классификация ГБ осуществлялась в соответствии с критериями ВОЗ. Обследовано 30 человек с ПАГ (средний возраст Cg^,2tl,3 г), 28 больных ГБ I стадии (средний возраст 24, 1±1,4 гГ.^й больных ГБ II стадии (средний возраст 35. 9±2,2 г ) и 9 больных вазоренальной АГ (средний возраст 30,6+3,9 г). В исследование включались лица без сопутствующей заболеваний, гилерлипидемии и не получавшие медикаментозной терапии до двух

xhí/.éa ственность по материнской линии и у 9 больных по ваковской линии. Исследование проводилось до начала и на седьной день гипотензивной терапии. Обследовано 7 больных ГБ I ц II стадии {средний возраст 31.6*5,4 г; среднее АД llOtl.6 км î>t. ст. ), получавших ионотерапии ашшршшиом и дозе 80-120 иг/сутки. и 10 болышк ГБ II стадии (средний возраст за, 1 *5, s г, среднее АД 126*5,2 нн рт. ст. ). получавтик коринфар в дозе 40-60 иг/сутаи.

Для оценки Функционального состояния натриевого и кальциевого насосов в эритроцитах и тромбоцитах использовали: определение активности На, К-АТФазы в возрастных субпопуляшшх эритроцитов (Казепяов A.M. и др. , 1984), Фракционированных в' собственной плазме нетодон дифференциального центрифугирования ШигрЬу J. К.. 1973); определение внутриклеточной концентрации натрия в эритроцитах с поноиыо атонно-абсорбционной спектрометрии па AAS-3 ("Carlzeias",ГДР); определение скорости уабаин-зависимого выхода натрия из эритроцитов по методу Smith J. В. et al. (1964) ' с расчетом констант Функционирования Натриевого насоса I порядка (отношение абсолютной скорости Уабаин-зависимого выгода натрия из эритроцитов к внутриклеточной концентрации катиона) и II порядка (отношение абсолютной скорости уабаин-зависимого выхода натрия из эритроцитов к внутриклеточной концентрации катиона и сукмарной

активности На.К-АТФазы тецей эритроцитов) ; определение

i

активности на, Х-А'ГФазы тромбоцитов но методу Baron I). Я. > ¡Khan F. А. (1986);. определение активности Нй. Са-АТФазы тромбоцитов путей ннкубашш мембранной фракякя кровяных

пластинок, полученных по кетоду Гуревича B.C. и др. (1990), г» среде, содержаией loo нН KCl, 5 ни икс 12. 2,5 нН АТФ, 20 нН

трис-hcl, рн= 7, 5 в присутствии о, 1 нй cacl 2 ми 1 ни эгта в

течение 30 нмнут при t = 37°С. Реакго1» останавливали добавлением равного объема 10 у. трихлоруксусной кислота. АТФазнгю активность выражали в никромояях неорганического фосфата (Фн), определяемого неФелометрически (Bible H., Land3 У. В. Н., 1969) на 1 мг ненбранного белка (Lowr? О, H. et al.. 1951).

Оценка реологических царл.четроп и Фупгшкопальган:

б

свойств клеток крови осуществлялась на основании изучения: спонтанной агрегации эритроцитов методом Ашкинази Н. Я. (1977)! деФорнабельности эритроцитов (Моисеева O.K. и др. .1990); спонтанной агрегации тромбоцитов in vivo по нетоду Уч К.К.,НоаК J.C. (1974) в кодификации Bowry S. К. (1985).' 4 тромбоцитарного Фактора по методу O'Brien J. R. (1974). модифицированного для подсчета тромбин-гепаринового времени свертывания крови с сопошью прибора для коагулогических исследований "Bioraeneux" (франция); структуры ненбран эритроцитов с помошыо спинового зонда 5-доксилстеарата иетодои электронного парамагнитного резонанса (ЭПР).на основании спектров которого рассчитывался параметр упорядоченности и ориентированности липидного бислоя, параметр s¡ оснотической резистентности эритроцитов по нетолу идельсон л. И., Бриллиант Н. Д. (1970) с расчетом интегрального показателя оснотической эритрограимы иетодон численного интегрирования на эвм; среднего объема эритроцитов и гематокрита с понопыо счетчика крови "Hycel* (4'Раншш). Статистическая обработка материала проводилась с помошью стандартного пакета статистических программ "Stateraf-го" на 1Ш pc AT - 286/287. Применялись методы параметрической и непараметрической статистики, корреляционного, регрессионного и факторного анализов.

результаты собственных ксс/ЕД0ВЛ1ШП. ПАГ характеризуется активацией натриевого насоса в эритроцитах, что выражается в повышении активности На, К-АТФазы теней эритроцитов, скорости уабаин-зависииого выхода натрия из клетки, увеличении констант Функционирования натриевого насоса I и II порядка (таблица 1). Увеличение суммарной активности lia, К-АТФазы происходит за счет активашш Фермента во Фракции "старых" эритроцитов, клетках длительно находящихся в циркуляции и подверженных активирующему действию гуморальных и гориопалышх Факторов. Тогда как активность Ка.К-АТФазн Фракции "полодия" эритроцитов сушественно не отличалась от нормы. Активация транспортного Фермента, по-видшоиу, обусловлена действием эндогенного активатора, эффект которого модулируется через изменение кальциевого гонеостаэа в результате повышения активности сянпато-адренало-вой системы, уровня тиреоидяиз гогноиоп, пролактина, альдостерона.

t

Таблица 1. Результата исследования активного транспорта натрия и каяышя в клетках крова

у практически здоровых доноров п диа с ПАГ.

Показатели □ НОРНА И + а а ПДГ И + ¡а Р

Активность На, К-АТФазы

(икноль Фн/нг белка-час)

-пефракоиояироваяных зрятродитов 34 0.17*0. 007 23 0, 551+0, 018 р<0, 001

-{рагапш "молодых" эритроцитов 18 о, 743 + 0. 014 15 0,760+0, 016 р>0, 05

-фракции "старых" эритроцитов 22 0, 343+0. 013 17 0, 442±0» 019 р<0. 001

Внутршслеточяая концентрация

натрня(кмодь/д эритроцитов) 12 7.83 + 0. 28 в 6,5510. 44 р<0, 05

Уабапн-зависккый выход натрия

(ииоль/д эритроцитов-час! 12 1.92+0. 13 8 г. аа±о. 21 р<0. 01

Константа X порядка 12 0. 25+0. 02 8 0. 39+0. 03 р<0.01

Константа XI порядка 12 0, 5210, 02 8 0.7210. 05 р<0, 01

Активность На. К-АТФазы тронбо-

татов (ккнодь фн/нг белка-час) 17 0. 5310. 05 б 0. 50+0. 12 р>0. 05

Активность кг, са-АТФазы трон&о- •

патов (нкноль фи/нг белка*час) 17 2. 7310, 15 б 2. 10+0. 24 р<0, 05

инсулина при плг. (Петруняка в. В. и др., 1990, Алназов В. А. и др. ,1991, KalKner В. et al., 1990).

Дополнительным Фактором повышения внутриклеточной коп-центрации кальция при ПАГ является нарушение Функции кальциевого насоса,что подтверждается снижением активности Нс.Са-АТФазы тромбоцитов т&е на предгипертевзивной сташш. Изменение гоиеостаза двухвалентных катионов приводит к повышению Функциональной активности тромбоцитов, иаркерон которой является уровень 4 трсмботаггарного фактора в плазме крови (3,96*1,46 с', п=б; при норме О, 94±0,24 с; n=17, р <о, 05). Выявленная в результате Факторного анализа отрицательная корреляционная зависимость (г= -о,9S5; р <о,001) между Факторани давления и функционального состояния клетки, которое на 96,1х определяется дефорнабельиостыо эритроцитов, активностью На,Е-АТФазы и длительность»; повышения АД. свшетеиьству.ет о компенсаторной роли изменении натриевого насоса в эритроцитах на Фоне нарушения вязко-эластических свойств, плазматической мембраны и повшения АД. Об адекватности компенсаторных механизмов ■ при ПАГ говорит снижение внутриклеточной концентрации натрия в эритроцитах и повышение их устойчивости к осмотическому гемолизу, что выражается ешкепиеи интегрального показателя осмотической эритрограш-щ до 9. у5+0, 13. 11=13 (при норне 10. OOiO. 15; п=25, р<0,05). Увеличение функдиопалт-ной активности тромбоцитов, тенденция к сяилепио деФорнабельности эритроцитов до 0,614+0.016, п=24 (при порие 0,592 ±0. oil; n-зв.р>0,05) и увеличению гематокрита при повышении АД (г = 0,402; п=24,р<о.05) свидетельствуют о нарушении реологических свойств крови на предлтертензивиой стадии. Однако отсутствие статистически значимых изменений реологических показателей крови указывает на неоднородность группы лиц с ПЛГ в плане перспектив развития гв. особый интерес представляет снижение деформационных свойств дгитролитов у лип ПЛГ с отягощенной по гв наследственностью по материнской линии (0, b3ajs.0, 039: п-0 и О, 549io, 025; п= 18 соответственно, р<0,05), подтверждающее голь ггшетическшг детертшант о структурных изменениях мембран зритропитоя.

При ГБ I стадии происходит дальнейшее снижение деФорна-

бельпости эритроцитов (0,638+0,011; п=24,р<0,01), которое обусловлено структурными изменениями в зритропнтарноЯ некбрале. Эти данные подтверждаются положительной корреляционной зависимостью между параметром 3 спектров ЭПР и коэффициентом деФормабельности эритроцитов (га =0.706; п=1б,р<0,01). О существовании дефекта молекулярной организации клеточных мембран при ГБ свидетельствует уменшепие величины паранетра 3 при 1 стадии заболевания до 0.646+0.004; п=8 ( при норн»: О, 608а0, 003;п=8, р<о.оо1). БкоЗизяческий скасл ' сяияештв упорядоченности и ориентированности липшшого бислоя эритроюттарных неибрая заключается пе только в увгяичешш ш; пропипаекости для одновалентных катионов, но и в создшин оптимальных условий для работа трапснорпшх АТФаз. Этот процесс следует рассматривать как компенсаторный механизм, направленный на восстановление • понкого гокеостаза и характеризующийся пошшинием активности На, К-Тфазц в обиеи пуле и фракции "стати" эритроцитов (таблица 2). Однако прл гб X стадии активации Еа.К-АТФазн недостаточно для поддераання постоянства кондентрашш катионов в метке, что выражается снижение»! констант Функционирования патрттосого насоса I Я II порядка. О нарлгетпм компелсаторшлг механизмов прл зтой стад;:л заболевания свидетельствует тенденция к попылегогэ внутриклеточ-

V,____

пой концентрата! натрия и увеличение степени осмотического гемолиза эритроцитов (ю. 73±о. 19; п=12, р<0,05), которая положительно коррелировала с величиной среднего АД (га * О, 532;я=1.5,Р< 0,05).

Нарушение активного транспорта натрет ведет к спияеякэ трансиембрапного потенциала и увеличении спонтанной агрггашш эритроцитов до 75.3+1,7/ (ига иовде 65,3±2,9( 11=21. р<0, 01). Наряду со сшкепиен деФориабельпости зрятроцитои (0,630+0.011; п=24, р<0,01) п повмшекиеи их агрегации к нарушению реологических свойств кропи при гп i стадии приводит увеличение генатскрита по 49.4+0,9 и; п-23 (при норме 46,1+0. п=29. р<0,05), в основе попьдения которого лежит иропесс гамойонцентрациа. Сгтхение актщшости Ня, Са-АТФаэц тромбоцитов при I с та яш заболевания (табщша 2) сопровождается дальнейшим увеличением 4 тронбоюттарпого фактора (5,0+1. 8 с;

Таблшга 2. Результата исследования ахтиввого транспорта натрия в кальция в клетках кровз г больнж с гипертонической болезнь» I и II стадии.

Показателя и гв Я ± I стадия В Р-1 П ГВ II стадии И 2 и Р 2

Активность На.К-АТФазы

(ккгкхль фя/нг белка час) -нефраншгогшроваяных эритроцитов 22 0, 54810, м*я 021 р>0, 05 32 0. 43210,010** 0, 57310.017 р<0, 001

-фракции "нолодах" эритроцитов 16 0, 71210, 028 р>0, 05 18 р<0, 001

-Фракция "старых" эритроцитов 22 0,41810, 024 р>0. 05 22 0,31910.014 9. 3810. 28 р<0.01

Шутрикаеточная концентрация в в. 1210. 32 р<0. 05 16 р<0, 05

натрия (кмоль/л эритроцитов)

Уабанн-завнснмый внход натрия & 1,7110. 09 р<0, 05 16 1.5410,09* р>0, 05

(киоль/л эритроцитов час) 0, 1610.01 «x 0. 3810. 02 0,3110, 05

Константа I порядка В 0.2110, 01* р<0. 05 16 р<0,01

Константа IIпорядка 8 0.4210. 01 р<0. 05 16 р<0, 01

Активность На. К-АТФззы тромбо- 6 0.4710. 04 р>0, 05 11 р<0, 01

цитов (нкмоль Фн/иг белка час) ** 1,6010, 11

Активность Нв.Са-АТФазы тромбо- б 2.0810, 20 * р>0. 05 и р<0. 01

цитов нкнояь Фн/кг белка час!

«(р<0.05). ««(р<0,01).«««(р<0.001) - достоверность отличия от норкн

р1 - достоверность отличия ГВ I стадия от НАГ; достоеэреость отличия ГН II стадия от ГН I стадии.

n=6.p<o.oí), свидетельствующим о повклении функциональной активности кровяных пластинок.

гб II стадии характеризуется угнетением активного транспорта натрия в эритроцитах, что подтверждается снижением скорости уабаш1-эависимого выхода натрия из клетки, констант функционирования натриевого насоса I и II порядка, повкзениек внутриклеточной концентрации катиона (таблица 2). Активность На.К-АТФазы снижена во всех возрастных субпопуляпиях эритроцитов. Особый интерес представляет снижение ¿ктивности Фермента во Фракции "молодых" эритроцитов, свидетельствующее о костно-мозговой продукции клеток с уменьшенной АТФазпой активностью, полученные результаты сопоставим.' с данными о появлении "аномальных" ретикулоцитов с уненькенной длительность» циркуляции в кровотоке при экспеиментальном стрессе и уменьшении длительности гнзни эритроцитов н тромбоцитов при увеличеннкп вязкости кроен и гб (Ашсинази И. Я. ,1977; De ClerK F. , 1986; НоЫе H. А., 1990). О дефекте активного транспорта натрия и кальция при гб II стадии свидетельствует такае спизение активности К'з. Са- и Па, К-АТФаз тромбоцитов. Это сопровождается появлением спонтанной агрегапки кропяних пластинок (16. з±г. 7И при отсутствии из в норме,р<о. 01) и дальпейшин увеличением уровня i тронбодитарпого Фактора в плазме кропи (8, 9tl. 14 с; п= 11>Р<0.01).

По мере становления П5 происгодит увеличение"хесткоста" эритропитарных мембран, что подтверждается увеличением параметра S спектров эпр при ГБ II стадии по сравпеш® с I стадией заболевания (0,бб5±о,001;п=9.р<о,001). изменение параметра упорядоченности и ориентированности дкшздного бнслоя сопровождается снияением активности На, К-АТ$азы ( rg =-0, 033;п=14.Р<0,01). Однако по срагпенкю с нормой степень упорядоченности эритроюттарных мембран при ГБ II стадии остается сниженной, что свидетельствует об их попиленной проницаемости для однсвалентга;х катионов. Нарушение вязко-эластических свойств мембраны эритроцитов по пере прогрессирования ГБ приводит к снижению активности натриевого насоса и повкиешда внутриклеточной концентрации натрия. который опосредованно через изменение кальпиэвого о,бмена приводит к дальнейшим

12 ' -структурный изменениям мембраны. уменьшению деФормабельности (0,742±0.014;п=28,р<о.001), среднего объема эритроцитов «о 05,5+0,9 шаАп=29 (при норне вб,4±о.В8 ш»^;п=19. р>0.05) и дальнейшему увеличению их агрегашш (82.8+0. &'/■; п=2в. р<0,001). Повышение конпентратаа свободного кальция в клетке при ГБ • осуществляется через механизма гормональной редепшш под влиянием Факторов, обладающих вазоспастическин эффектом:ангио-тензина II. ваэопрессина, трокбоксана А2>эндотелина. Сушествова-н'ле дозозависимой направленности эффекта ионов кальция на функшда натриевого и кальциевого насосов подтверадается 'обратной корреляционной зависимость» иеаду активностью На. К(г= -О.,362; п=21. р<0.001) и Иа. Са-АТФаз (г=-о, Тб5; п=2Н. р<0.001) тронбосзггов, активность» На.К-АТФазы Фракции "молодые" эритроцитов (г=-0,477;п=64. р<0, 001) и средним АД. О влияния дигиталис-подобной субстанции на активный транспорт катионов в клетках крови свидетельствует обратная корреляционная зависимость иекд.' активностью На, К-АТФазы во Фракции "молодые" эритрошггов и концентрацией натрия в плазме кроби (г=-о, 379;п=3в, р<0. 05), повышение которого характерно для ГБ с низкой активностью решша плазш крови и более высоким уровнен натрийуретического Фактора. Отсутствие изменений активности натриевого насоса при вазореналыгой А? по сравнении с норной (скорость уабаин-зависи-иого выхода натрия 1,С5д0,08 иколь/л эритроцитов - час, п=9. р> 0,05; константа функционирования натриевого насоса I порядка 0,23+0,01, р>0, ОЬ и II порядка 0,54±о, 01. р>о, 05) и достоверно непее выраженные изменения реологических параметров крови (коэффициент деФормабельности эритрошггов 0,664+0.021. р<о. 01; степень ик агрегашш 77,0+2,9*,р<0.05) свидетельствуют о специфичности нарушений ионного гоиеостаза при ГБ.

Данные Факторного анализа отражают нарушение механизмов компенсации и образование патологических связей при лабильной АГ. Положительная корреляционная зависимость неяду Факторами давления и функционального состояния клетки (г=о,707.р<0,001) указывает па то, что в процессе развития заболевания на Фойе нарушения активного транспорта натрия происходит снижение деФормабельности и повышение агрегации эритроцитов, которые через изменение вязкостного сопротивления крови в резистивнык

1 3

сосудах приводят к стабилизации АД. Дефект активного транспорта натрия и кальция в тромбоцитах способствует повышению спонтанной агрегации кровяных пластинок, которая, наряду с вазоактивныки агентами, высвобождаемыми п процессе истиваши. приводит к повышению обшего периферического сопротивления.

В результате монотерапии кориноарон, эффективной У 70я больных, улучшилась деформируемость эритроцитов (от 0,71640,023 до О. 622+0,02,р<0,01), уменьшилась степень их агрегации ( от 02,0*1,4И до 65, 9лЗ, 6Z,p<o, 01), снизилась ' функциональная-активность тромбоцитов, наркерон которой является уровень 4 тромбоцитарного Фактора в плазме крови (от 7,5±).4 с до 2,54:0,55 с, р<0,05). Улучшение реологических свойств крови сопровождалось повыиениен активности транспортных АТФаз тромбоцитов ( На,к-АТФазы от О.зо*о,01 до О.5б±о,03 икмоль Фн/нг белка^час, р<0, 05 и fis. Са-АТФазы от 1.68+0, 07* до 2,60+0,4 мкноль Фи/иг белка<час, р<0, 05) и на.Е-АТФазы эритроцитов (от О. 410+0, 025 до О; 489+0. 020 мкноль фн/нг белка • час, р<0. 05). Важно отнетить, что динамдаа транспортных АТФаз в iслетках крови зависела от степени снижения АД. У больных с гипотензивным эффектом коринФара непее 10Z динамики. активности На.К-АТФазы эритроцитов не выявлено (0,415±. 0.049 и 0.459+0,051 мкмоль Фн/нг белка-час соответственно. р> 0.05). Повышение активности натриевого и кальциевого насосов под влиянием терапии коринФаром направлено на ¿восстановление нарушенного ионного гонеостаза и функциональных свойств клеток крови.

Под влияниен ионотерапии ананрилинон, эффективной у йох обследованных, выявлено снижение деформационных свойств эритроцитов (от о, 645+0. 017 до о, 639+0,027, р<0,05). Повышение "жесткости" клеток сопровождалось достоверный снижением активности На, Е-АТФазы эритроцитов (от 0.539JtO, 023 до 0,482+0,022 мкноль Фн/нг белка • час. р<и, 01 ), что обусловлено кенбраностэбилизируюиин эффектом препарата. На ■ Фоне терапии анаприлином степень агрегации эритроцитов имела тенденцию к снижению, что, возможно, обусловлено неспециФическии эффектом препарата, связанным с блокадой входа натрия и кальция в клетку (27, 5±г, 8и и 32. 3+4.4И соответственно. р>0, 05).

1 4 '

ВЫВОДЫ.

1. В процессе развития ГБ происходит закононерное ухудшение реологических свойств крови: снижение деформируемости эритроцитов, увеличен!',! агрегации эритроцитов и тромбоцитов. Степень изменения реологических свойств крови находится в пряной зависимости от стадии заболевания и уровня АД.

2. в процессе становления заболевания систена активного транспорта натрия в эритроцитах проходит стадии от компенсаторной гиперфункции при ПАГ к ее функциональной недостаточности при ГБ XI стадии. Реологические показатели крози и активность натриевого насоса являются звеньями единой системы.определяющей функциональное состояние клетки и тесно связанной с изменением величины АД.

3. При ПАГ и ГБ I стадии повышение . активности На, К-АТФазы эритроцитов происходит за счет фракции "старых" клеток, что обусловлено активиртаии действием плазменных «акторов на клетки, длительно находящиеся в циркуляции. Переход ко II стадии заболевания сопровождается снижением активности На. К-АТФазы во фракции "молодик" эритроцитов, свидетельствующим о Формирования клопа клеток с дефектом активного транспорта натр;1я. (

4. При гб снижена упорядоченность дииидного бислоя эригрошггарння кеибран, что приводит к их повышенной проницаемости для одновалентных катионов. Переход от I ко II стадии заболевания сопровождается повышением "жесткости* плазматических кеибран по данный ЭПР-спектронетрии. что обуславливает снижение деформабельности и активности На. К-АТФазы эритроцитов.

5. По мере становления ГБ происходит закономерное снижение активности натриевого и кальциевого насосов в тромбоцитах.что сопровождается повышением функциональной активности кровяных пластинок.

в. Ионотерапия анаприлинон при мягкой и унеренной гкпертензии приводит к снижению деформабельности и активности На. К-АТФазы эритроцитов. На Фоне терапии коринФаром отмечатся улучиение реологических свойств и активация транспортных АТФаз

1 5

клеток кропи, что указывает иа большую патогенетическую пелесо-образиость применения антагонистов кальция.

7. Отсутствие изменений скорости уабаин-зависимого выхода натрия из эритроцитов и констант функционирования натриевого насоса при вазоренальной АГ по сравнению с норкой может быть использован в качестве дополнительного диФФереп-пнально-диагзостического критерия с ГВ.

практические рекомендации:

1. В качестве объективного критерия стадии ГВ предлагается при ПАР определение активности патриевого насоса и осмотической резистентности эритроцитов! щи ГВ I й II стадии - деФориабельности и агрегации эритроцитов, интегрального показателя осмотической зритрогранма.констант функционирования натриевого насоса и параметра упорядоченности липидного бпслоя эритрошггарныя мембран с поноиыэ ЗПР-спектрометрии.

2.' Для оценки эффективности гипотензивной терапии антагонистами кальпия предлагается определение активности транспортных АТФаз в эритроцитах и тромбоцитах,

3. В качестве дополнительного днФФереншальио-диагностического критерия иеаду вазорецадьной'АГи ГВ рекомендуется использовать определение скорости габаш-записикого выхода натрия из эритроцитов и констант -, фушештокировапия натриевого насоса. >

4. Выявление у лиц о ПАГ сшиелаой деформабельностя эритроцитов следует рассматривать как Фактор погзыпетюго риска развития ГВ. \

СПИСОК РАБОТ ПО ТЕЛЕ /КССЕРТАГОГЯ:

1. Моисеева о. и. Изменения реологических параметров крови у больных гипертонической болезяыо // Проблемы совершенствования медицинской поношя н?сеаешж» г. Ленинграда: Тезнсн городской паучно-практическоа конференция молодых специалистов-учреждений здравоохранения. ЛенЕЯград, 1900, с. 6В.

2. моисеева О. И. ■ Нонсеев С, и., Ггревич В. С. Способ определения дефорнабеяьности эритроцитов // Лав. деяо. -1990. -НЮ. -с. 55-57.

3. титкоп Ю. С. I Теширов А. А. • Бубнова Л Н.. знскина Р. А. >

Черникова Н. А., Даибладзе Д. В., Моисеева о. Н. Частота антигенов НЬА у мужчин молодого возраста с пограничной артериальной гипертензией // Кардиология.-1990.-Н1й.-с. 67-68.

4. Моисеева О, Н.. Михайлова И. А., Гуревич в. С. Особенности реологических свойстх крови и активности На.К-АТФази возрастных субпопуляций эритроцитов у больных гипертонической болезнь» // Депонировано редколегней журнала "Кардиология". Ден. Н20931. -н.. 1991. -8с.

5. Бондаренко Б. Б. .текиров А. А. .Моисеева О. Н. Функциональные свойства эритроцитов при гипертонической болезни // Гипоксия И окислительные процессы", Нижний Новгород.-1991.-с. 8791.

Подписано к печати 13 января 1992 г. Объём 1,0 п.л.Тир.ЮО.Бесплатно.Зак.54.

Тип.ВАС.