Сравнительная оценка качества воспроизведенных препаратов омепразола

Азимова, Ирина Джалиловна

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Сравнительная оценка качества воспроизведенных препаратов омепразола

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Азимова, Ирина Джалиловна Москва 2009 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Сравнительная оценка качества воспроизведенных препаратов омепразола

На правах рукописи

АЗИМОВА ИРИНА ДЖАЛИЛОВНА

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ВОСПРОИЗВЕДЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ОМЕПРАЗОЛА

15.00.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

2 2 ОНТ ?пгс

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Москва - 2009

003480981

Работа выполнена в ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени

И.М. Сеченова

Научные руководители:

доктор фармацевтических наук, академик РАМН, профессор

Александр Павлович Арзамасцев доктор фармацевтических наук, профессор Владимир Львович Дорофеев

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, Виктор Владимирович Чистяков доктор фармацевтических наук, профессор Александр Семенович Берлянд Ведущая организация:

ФГУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения Росздравнадзора».

Защита состоится « 2009 г. в в часов на заседании

Диссертационного совета (Д 208.040.09) при Московской медицинской академии имени И.М.Сеченова по адресу: 119019, Москва, Никитский бульвар, 13.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ММА имени И.М.Сеченова по адресу: 117998, Москва, Нахимовский проспект, 49.

Автореферат разослан « /У » О^Тл^}^ 2009 г.

Ученый секретарь Диссертационного

Совета Д 208.040.09

доктор фармацевтических наук

профессор

Наталья Петровна Садчикова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Язвенная болезнь является одной из важнейших гастроэнтерологических проблем здравоохранения. Она относится к наиболее распространенным заболеваниям, поражает людей в активном творческом возрасте, часто обуславливая временную, а нередко и стойкую потерю трудоспособности. Омепразол является противоязвенным средством, ингибитором протонной помпы (ИПП), наиболее широко используемым в медицине. Высокая эффективность и безопасность при длительном применении делают его препаратом выбора при лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, пептических язвах и других кислотозависимых заболеваниях. Мировой фармацевтический рынок характеризуется высокой долей оборота воспроизведенных лекарственных средств (дженериков). В частности, большое количество дженериковых препаратов (более 30) характерно для омепразола.

В связи с этим большое значение имеют унифицированные методы анализа лекарственных субстанций и препаратов омепразола, в том числе, методы ИК-спектроскопии в средней и ближней области, тонкослойной хроматографии, теста «Растворение».

Особую значимость этот вопрос приобретает в связи с выходом 12 издания Государственной фармакопеи РФ.

Одним из методов сравнения дженериков, согласно рекомендациям ВОЗ, являются испытания in vitro, например анализ дозированной формы по тесту «растворение», который используется для приблизительной оценки относительной биодоступности дженериков. Другой важной проблемой является фальсификация лекарственных средств. В мировой практике известны случаи фальсификации препаратов омепразола.

Несмотря на обилие информации о фармакологических свойствах и клиническом применении данного лекарственного средства, в доступной литературе имеется недостаточное количество информации об использовании различных аналитических методов для анализа препаратов, содержащих омепразол.

Учитывая вышеизложенное, разработка унифицированных подходов к сравнительной оценке качества лекарственных средств омепразола с использованием современных физико-химических методов анализа является необходимой и актуальной задачей.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы являлась разработка унифицированных подходов к сравнительной оценке качества воспроизведенных лекарственных средств омепразола с использованием современных физико-химических методов анализа. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- разработка унифицированной методики анализа субстанций и препаратов омепразола (капсул, таблеток) методом ИК-спектроскопии и составление атласа ИК-спектров;

- изучение омепразола методом БИК-спектроскопии и составление атласа БИК-спектров субстанций и препаратов (капсул, таблеток);

- изучение хроматографических характеристик и разработка унифицированных методик установления подлинности препаратов омепразола методом тонкослойной хроматографии (ТСХ);

- изучение воспроизведенных и фальсифицированных препаратов омепразола с использованием теста «Растворение».

Научная новизна исследования. Составлен атлас ИК-спектров субстанций и лекарственных средств омепразола различных производителей. Изучены спектральные характеристики омепразола в средней и ближней инфракрасных областях. Впервые разработаны методики установления подлинности лекарственных средств омепразола в лекарственных формах «таблетки» и «капсулы» методом ИК-спектроскопии.

Впервые установлено, что метод БИК-спектроскопии может быть использован для подтверждения подлинности субстанций омепразола и идентификации их производителя. Разработана методика пробоподготовки субстанций и лекарственных препаратов омепразола для анализа методами ИК-спектроскопии и ТСХ. Изучено влияние подвижных фаз различного состава на хроматографические характеристики лекарственных средств омепразола при их анализе методом ТСХ. Разработана унифицированная методика установления подлинности лекарственных средств омепразола методом ТСХ. Впервые показано, что тест «растворение» позволяет проводить сравнение воспроизведенных препаратов омепразола и выявлять фальсифицированные препараты. Практическая значимость исследования. Разработанные методики идентификации лекарственных препаратов омепразола с использованием ИК-спектроскопии в средней области и метода тонкослойной хроматографии

апробированы и используются в испытательной лаборатории «Московского областного центра сертификации и контроля качества лекарственных средств».

Полученные ИК-спектры в средней и ближней областях могут быть использованы при стандартизации и контроле качества по разделу «подлинность» соответствующей нормативной документации (НД) на субстанции и лекарственные препараты омепразола и для выявления фальсифицированных препаратов.

Методика установления подлинности методом ТСХ предлагается для стандартизации и контроля качества субстанций и лекарственных препаратов омепразола с последующим их включением в соответствующие разделы нормативной документации, а также для выявления фальсифицированных препаратов.

Выбранные условия теста «Растворение» предлагаются для сравнения препаратов омепразола различных производителей и для выявления фальсифицированных препаратов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на: XIV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2007 г.), 3-й всероссийской научно-методической конференции «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Создание новых биологически активных веществ» (Воронеж, 2007г.), VIII конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2008 г.), межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Фармация в XXI веке: эстафета поколений» (Санкт-Петербург, 2009г.). Апробация работы проведена на научно-практическом заседании кафедры фармацевтической химии с курсом токсикологической химии фармацевтического факультета ММА им. И.М. Сеченова 11 июня 2009г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ.

Связь исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в рамках комплексной темы кафедры фармацевтической химии ММА им. И.М. Сеченова «Совершенствование контроля качества лекарственных средств» (№ гос. регистрации 01.200.110545).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (материалы и методы, результаты исследования и их обсуждение), выводов, списка литературы, а также отдельно включает в себя 1 приложение. Работа иллюстрирована 5 таблицами и 25 рисунками.

Библиографический справочник включает 173 источника, из них 93 на иностранных языках.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты исследования лекарственных субстанций и препаратов омепразола методами инфракрасной спектроскопии в средней области;

- результаты применения инфракрасной спектроскопии в ближнем диапазоне для идентификации лекарственных субстанций и препаратов омепразола разных производителей;

- результаты изучения хроматографических характеристик и унифицированные методики установления подлинности препаратов омепразола методом ТСХ с использованием пластин отечественного производства «Сорбфил»;

- результаты сравнительного биофармацевтического анализа капсул омепразола различных фирм-производителей с использованием теста «Растворение».

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ 1. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектами исследования являлись стандартные образцы, субстанции и препараты омепразола различных фирм производителей.

Кислотный центр (атом азота пиррольного типа)

Рис. 1. омепразол - 5-метокси-2-[4 метокси-3,5-диметил-2-пиридилметилсульфинил]- бензимидазол. Структура и кислотно-основные свойства омепразола

2. ОБОРУДОВАНИЕ И УСЛОВИЯ ИСПЫТАНИЙ 2.1. ИК-СПЕКТРОСКОПИЯ

В работе использовали однолучевой интерференционный (с обратным преобразованием Фурье) ИК-спектрофотометр Инфралюм ФТ-02 (НПФ

«ЛЮМЕКС», Россия). Параметры записи спектров: диапазон 4000-400см"', разрешение 1 см'1, циклическая запись с количеством сканов 20, аподизация стандартная. Фоновый спектр (воздух) получали непосредственно перед записью каждого спектра испытуемой пробы. Управление прибором и обработку спектров осуществляли с использованием программы «Спектралюм» (версия для Windows НПФ «ЛЮМЕКС», Россия) и программы ACD/SpecViewer, Freeware Version (Advanced Chemistry Development, Канада).

Пробоподготовку субстанций осуществляли в соответствии с требованиями ГФ XI (вып. 1, стр. 37). Навеску субстанции массой 15 мг измельчали в агатовой ступке и растирали с 1-2 каплями вазелинового масла качества для «ИК-спектроскопии». Полученную пасту наносили между двумя пластинками из КВг и получали ИК-спектр образца. Полученные ИК-спектры сравнивали со спектрами стандартных образцов омепразола, интерпретацию спектров проводили с использованием литературных данных. Пробоподготовку лекарственных препаратов (таблетки и капсулы) омепразола проводили путем предварительной экстракции действующего вещества по разработанной нами методике.

Также использовали однолучевой ИК-Фурье спектрометр Digilab Со Pharmalyzir (США) с приставкой для получения спектров пропускания в дисках калия бромида, полученных прессованием по методике ГФ XI. Разрешение - 8 см' количество сканирований 32, область измерения от 650 до 4000 см'1, базовую линию проводили по воздуху. Обработку результатов проводили с помощью программы OMNIC.

Навеску субстанции или стандартного образца омепразола (около 1 мг) помещали в агатовую ступку, измельчали, к полученному порошку добавляют около 300 мг калия бромида для ИК-спектроскопии, снова растирали и перемешивали.

Полученную тритурацию помещали в пресс-форму и прессовали диск при давлении 8000 тонн/см2, откачивая воздух с помощью масляного насоса. Полученный диск помещали в держатель и снимали ИК спектр пропускания. 2.2. БИК-СПЕКТРОСКОПИЯ

Исследования проводили на приборе ИК-Фурье спектрометр Antaris II фирмы Thermo Electron Corporation (США) с интегрирующей сферой; разрешение - 8 см'1, количество сканирований 16, область измерения от 4000 до 10000 см"1, базовую линию проводили по эталону из тефлона, количество сканирований - 32. Время анализа - 2 минуты, что включает снятие спектра встроенного в прибор

эталона (образца сравнения), снятие спектра анализируемого образца, и обработку полученных данных при помощи внешнего компьютера.

Субстанцию или пеллеты слоем 4-6 мм в специальной кювете с закрытой крышкой помещали на интегрирующую сферу и снимали спектр не менее трех раз для каждого образца, перемешивая его перед каждым измерением. Капсулу с содержимым вертикально помещали в интегрирующую сферу, фиксировали с помощью специального устройства и снимали спектр. Анализировали 10 капсул из каждой серии препарата, измеряя каждую капсулу не менее трех раз. Таблетку помещали на интегрирующую сферу, фиксировали с помощью специального устройства и снимали спектр. Анализировали 10 таблеток препарата, измеряя каждую таблетку не менее трех раз с двух сторон.

Обработку результатов проводили хемометрическим методом с помощью программы TQ Analyst, (дискриминантный анализ, расстояние Махаланобиса - 3 единицы, вероятность 95 %). Обработка БИК-спектров основана на сочетании спектроскопии и статистического метода анализа многофакторных зависимостей. 2.3. ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Хроматографирование проводили на отечественных пластинах для высокоэффективной ТСХ «Сорбфил» размером 10x10 (ТУ 26-11-17-89 «Сорбполимер», г. Краснодар), покрытых силикагелем с люминофорным покрытием. Пластина с материалом подложки: алюминиевая фольга (ПТСХ-АФ-В-УФ). Также использовали пластины Silica gel 60 HF254 (0,25 mm) Merck размером 20x20 см (вырезали 10x15 см). В качестве подвижной фазы использовали смесь: метиленхлорид, насыщенный аммиаком - метиленхлорид -изопропиловый спирт в соотношении 10:10:1,8 для пластин «Сорбфил» и в соотношении 10:10:5 для пластин Silica gel 60 HF254 Merck.

На линию старта пластин с помощью микрошприца раздельно наносили 10 мкл испытуемого раствора и 10 мкп раствора стандартного образца омепразола. Растворы стандартного образца и испытуемого препарата (таблетка, освобожденная от оболочки; содержимое капсулы) готовили путем растворения в смеси хлористого метилена и метанола 1:1. Помещали количество порошка растертых таблеток или содержимого капсул, эквивалентное 7,5 мг омепразола, в мерную колбу вместимостью 50 мл и прибавляли 25 мл растворителя. Обрабатывали ультразвуком в течение 5 мин, доводили объем раствора до метки и перемешивали. Фильтровали полученный раствор через фильтр типа «белая лента», отбрасывая первую порцию фильтрата.

При приготовлении растворов 1, 2 и 3 стандартных образцов веществ-свидетелей (СОВС) омепразола, растворяли навеску 2,5 мг в 5 мл растворителя (раствор 1- концентрация 0,5 мг/мл). Разбавляли этот раствор количественно растворителем до получения стандартного раствора 2 и стандартного раствора 3 с известными концентрациями около 0,15 мг/мл и 0,05 мг/мл, соответственно.

Пробы наносили таким образом, чтобы расстояние от места нанесения до левого или правого края пластины, а также между пятнами составляло не менее 14 мм. Сушку проб осуществляли с помощью нагревательного устройства УСП-1 («Сорбполимер») при температуре около 45°С. Использовали стеклянные хроматографические камеры размером 150x120x80 мм и 190x195x65 мм. Насыщение камеры парами подвижной фазы (ПФ) проводили в течение 20-30 минут. Пробег фронта растворителя составлял 10 см для пластин «Сорбфил» и 15 см для пластин «Мегск».

Проявление пятен проводили в свете УФ-лампы (при 254 нм) облучателя хроматографического УФС 254/365 (ЗАО «Сорбполимер», г. Краснодар) после высушивания хроматографической пластинки в сушильном шкафу при 100°С в течение 5 минут. При облучении УФ-светом омепразол проявляется в виде темных фиолетовых пятен на люминесцирующем фоне пластины. 2.4. ТЕСТ «РАСТВОРЕНИЕ»

Тест «Растворение» проводили в соответствии с ОФС 42-0003-04 «Растворение» на приборе SOTAX AT 7 smart (Швейцария), аппарат «вращающаяся корзинка». Количественный анализ осуществляли методом УФ-спектрофотометрии по предложенным нами методикам.

В качестве раствора сравнения использовали соответствующую среду растворения, стандартными образцами служили субстанции, отвечающие нормативной документации. Скорость вращения «корзинки» 100 об/мин, температура 37°С.

Исследование проводили на 6 образцах капсул для каждого препарата в две стадии: кислотную (500 мл 0,1м хлористоводородной кислоты) и буферную (готовили после кислотной стадии путем прибавления к имеющейся в сосуде 0,1 м хлористоводородной кислоты 400 мл 0,3м раствора гидрофосфата натрия дигидрата). Время отбора проб для кислотной стадии - через 120 мин., для буферной - через 5, 10, 15, 25, 35, 45 и 60 минут после начала испытания. После каждого отбора проб среду растворения восполняли в соответствующем объеме. Отобранные пробы фильтровали через фильтр типа «белая лента».

Количество лекарственного вещества, перешедшего в среду растворения, определяли методом УФ-спектрофотометрии на спектрофотометре Аквилон СФ-103 (Россия) при длине волны 301 нм. Для каждого исследования на спектрофотометре проводилось трехкратное измерение оптической плотности стандартного раствора, и в расчетах использовалось её среднее значение. Управление прибором осуществляли с использованием программы «Спектр» (Аквилон, Россия). Обработку спектров осуществляли с использованием программы «ACD/SpecViewer», Freeware Version (Advanced Chemistry Development, Канада).

В качестве раствора сравнения использовали соответствующий растворитель. Для каждого исследования отдельно готовили раствор стандартного образца в концентрации 20 мкг/мл. Стандартные растворы фильтровали через фильтр «белая лента» (как и испытуемые растворы). Расчеты и статистическая обработка полученных результатов осуществлялась на персональном компьютере с использованием программы Microsoft Excel. Расчет доверительных интервалов для каждой точки осуществлялся по методу Стьюдента при объеме выборки п=6 и доверительный вероятности 0,95.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. ИССЛЕДОВАНИЕ ОМЕПРАЗОЛА МЕТОДОМ ИК-СПЕКТРОСКОПИИ

ИК-спектры субстанций.

Было проведено исследование лекарственных субстанций и препаратов омепразола с использованием метода инфракрасной спектроскопии в средней области. На рис. 2 в качестве примера представлены ИК-спектры субстанции омепразола в вазелиновом масле, которое не искажает ИК-спектр изучаемого вещества. Методика пробоподготовки с вазелиновым маслом является экспрессной и удобной и может быть использована при фармакопейном анализе данного лекарственного средства и при накоплении стандартных ИК-спектров.

В изучаемых спектрах полосы около 2955, 2924, 2855 см-1 соответствуют валентным колебаниям vc_h, 1462, 1378 и 722 см"1 -деформационным колебаниям 5С-н вазелинового масла. Полосы с частотами около 2361, 2346, 2334 и 666 см-1 соответствует колебаниям присутствующего в атмосфере углекислого газа.

УУауепитЬвг(спИ)

Рис. 2. ИК-спектр субстанции омепразола в вазелиновом масле

Также получали ИК-спектры субстанции омепразола в дисках с калия бромидом путем тщательного перемешивания в агатовой ступке тонкоизмельченного образца с порошком КВг и последующего прессования смеси

в пресс-форме, в результате чего получается прозрачная или полупрозрачная таблетка.

Рис. 3. ИК-спектр субстанции Омепразола серии 14452033 фирмы Баго (98,5%) в КВг

ИК-спектры лекарственных препаратов омепразола.

Проводили исследование препаратов омепразола с использованием метода ИК-спектроскопии с предварительным извлечением действующего вещества из лекарственной формы. При получении ИК-спектров препаратов омепразола без предварительной экстракции вспомогательные вещества искажают картину и маскируют полосы действующего вещества. Для экстракции омепразола из капсул и таблеток были изучены разные растворители и их сочетания (хлороформ, гексан, ацетонитрил, спирт 96 %, фосфатные буферные растворы и т.д.) с последующим выпариванием экстрагента при 50 °С и диспергированием сухого остатка в вазелиновом масле. При выборе растворителя в качестве критерия оценки использовали сравнение с ИК спектром субстанции омепразола.

В результате проведенных исследований установили, что для экстракции омепразола из содержимого капсул наилучшие результаты дает хлороформ, из таблеток - смесь ацетонитрила и 0,003м раствора калия дигидрофосфата (3:7). При этом вспомогательные вещества, входящие в состав капсул и таблеток не переходят в фильтрат (особенно парафин из таблеток, который мешает

дальнейшему процессу концентрирования). На рис. 4 в качестве примера представлен спектр капсул в вазелиновом масле (4000-400 см'1).

Е 30

¡Р

3000

УУауепитЬег (ст-1)

1800 1700 1600 1500 1400 1300 1200 1100 1000

\Л/ауепитЬег (ст-1)

Рис. 4. ИК-спектр капсул омепразола ООО «Озон»

ИК-спектры содержимого исследуемых нами капсул полностью совпали между собой и по локализации основных характеристических полос практически

полностью совпадают с полосами спектра субстанции омепразола. Аналогичная ситуация наблюдается и для других препаратов омепразола.

На основании анализа спектров субстанции омепразола имеющихся в нашем распоряжении серий и производителей были изучены характеристические полосы поглощения омепразола. Сильные полосы поглощения омепразола в области 12301170 см"1, 1100-1000 см"1, две сильные полосы в области 900-650 см"1, средние полосы 1510-1500 см"1 и 1600-1587 см"1 соответствуют пиридиновой группе; сильные полосы в области 1040-1060 см'1, 1090-1000 см'1 соответствуют сульфоксидной группе.

На основе полученных данных был составлен атлас ИК-спектров субстанций, капсул и таблеток омепразола, которые могут быть использованы в качестве стандартных при анализе по разделу нормативной документации «подлинность», а также при выявлении фальсифицированных препаратов, не содержащих указанное на упаковке действующее вещество.

3.2. ИССЛЕДОВАНИЕ ОМЕПРАЗОЛА МЕТОДОМ ИНФРАКРАСНОЙ СПЕКТРОСКОПИИ В БЛИЖНЕМ ДИАПАЗОНЕ

Проводили исследование омепразола с использованием метода БИК-спектроскопии и изучена возможность применения данного метода в анализе субстанций омепразола и его твердых дозированных форм (капсулы и таблетки).

На рис. 5 представлены БИК-спектры субстанций омепразола разных производителей. В них видны полосы средней и малой интенсивности в области смешанных колебаний (от 4000 до 5000 см'1) и первых обертонов (от 5000 до 6250 см'1), обусловленные преимущественно смешанными колебаниями и обертонами групп -С-С-, -СН-, -СН2 и -ЫН. В области локализации вторых обертонов (от 6250 до 9000 см'1) полосы, пригодные для подтверждения подлинности омепразола слабо выражены.

Хемометрическая обработка результатов (дискриминантный анализ) спектров субстанций показал, что они имеют статистически достоверное различие: делятся на группы, по которым можно идентифицировать производителя (расстояние Махаланобиса во всех случаях превышало 3 единицы).

ШэчгапипЬег* (ст-1)

Рис. 5. Усредненные БИК-спектры субстанций омепразола четырех производителей

Результаты обработки 12 спектров субстанций от четырех производителей представлены в виде двумерного графика в координатах Махаланобиса по осям X и У на рисунке 6. Возможными причинами наблюдаемых различий могут быть: разная степень очистки субстанций и степень дисперсности, различная технология получения, полиморфизм и др.

со сч □а

1 произв. > произв. 4 произв. 3

о ■1 28

Рис. 6. Статистическое разделение образцов субстанций омепразола четырех разных производителей в координатах Махаланобиса

В БИК-спектрах капсул, леллет (содержимое капсул) и таблеток характеристических полос омепразола не обнаружено (рис. 7). Однако можно использовать полученные спектры в качестве интегральной характеристики препаратов омепразола.

Рис. 7. БИК-спектры капсул (1), пеллет (2) и таблеток омепразола (3)

По производителям препарата капсулы разделились на пять дискриминантных групп (первая - ОАО «Фармстандарт», вторая - «KRKA», третья - «Гедеон Рихтер», четвертая - «Dr.Reddy's Lab.» и «Ranbaxy Lab. Ltd.», пятая - ОАО «ХФК «Акрихин», ЗАО «Канонфарма продакшн», ООО «Озон» и ЗАО «Северная звезда»), пеллеты - на две (рис. 8).

Отдельную дискриминантную группу образовали пеллеты, входящие в состав капсул омепразола фирмы «Гедеон Рихтер». Остальные фирмы использовали для изготовления своих препаратов пеллеты, близкие по своим характеристикам и не имеющие достоверных различий, которые могли бы быть установлены с помощью ближней ИК-спектроскопии.

При анализе таблеток омепразола выявлены большие различия в спектрах таблеток внутри серии. Дискриминантный анализ спектров таблеток омепразола (всего обработано 90 спектров) выявил очень большие различия между таблетками внутри серии (расстояние Махаланобиса достигало 95 единиц по осям

таап

IT1-1

CM-I

X и У при допустимом значении не более 3), что не позволяет различать таблетки омепразола разных производителей.

СО' 9 i ц , 0 4 iD W7

О 1 \ i i ^ t В

г- % 4 " Щ) ®5 ™ф « 8

0 1 0 _ Î bSSiapfciSiîl ш»«нм — 1 • ' ' t \tdâ i

Рис. 8. Результаты дискриминатного анализа БИК-спектров капсул (верхний рисунок) и пеллет омепразола (нижний рисунок), используемых для изготовления препарата разными производителями: (1) «Гедеон Рихтер», Венгрия; (2) «Dr.Reddy's Lab.», Индия; (3) ОАО «ХФК «Акрихин», Россия; (4) ЗАО «Канонфарма продакшн», Россия; (5) «KRKA», Словения; (6) ООО «Озон», Россия; (7) «Ranbaxy Lab. Ltd.», Индия; (8) ЗАО «Северная звезда», Россия; (9) ОАО «Фармстандарт», Россия

Таким образом, установлено, что ближняя ИК-спектроскопия в сочетании с дискриминантным методом анализа может быть использована для подтверждения подлинности субстанции омепразола. С помощью указанного метода можно идентифицировать производителя субстанции и в ряде случаев капсул омепразола.

3.3. ИССЛЕДОВАНИЕ ОМЕПРАЗОЛА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методом тонкослойной хроматографии исследовано влияние подвижных фаз различного состава и полярности на подвижность пятен омепразола. Бьшо установлено, что методика ТСХ для омепразола, указанная в Европейской фармакопее, воспроизводится на пластинах Merck, но не подходит для пластин отечественного производства.

Соответственно, нами решалась задача разработки такой методики с использованием пластин для высокоэффективной ТСХ «Сорбфил», покрытых силикагелем с люминофорным содержимым. Элюирующую силу ПФ оценивали по диэлектрической проницаемости входящих в ее состав растворителей. Для достижения оптимальной подвижности стремились к достижению значений Rf пятен испытуемых веществ в диапазоне от 0,2 до 0,8. Для снижения эффекта размывания пятен испытуемых веществ включали в состав ПФ раствор аммиака 25%. ПФ также включает в себя растворитель метиленхлорид и изопропиловый спирт. Меняя их соотношение можно регулировать полярность ПФ, а, следовательно, выбирать оптимальную подвижность изучаемого лекарственного вещества.

Таким образом, было установлено, что оптимальная подвижность омепразола наблюдается в ПФ с промежуточной полярностью (значение диэлектрической проницаемости смеси составляет около И) следующего состава: метиленхлорид, насыщенный аммиаком (встряхивают 25 мл метиленхлорида с 7,5 мл конц. аммиака в делительной воронке, дают слоям отделиться и используют нижний слой) - метиленхлорид - изопропиловый спирт (10:10:1,8). Экстракцию омепразола из таблеток, капсул проводили растворителем метиленхлорид-метанол (1:1).

Все пробы наносили в объеме 10 мкл. При этом на пластинах «Сорбфил» Rf имеет значение около 0,6, что является оптимальным. На рис. 9 схематично представлена соответствующая хроматограмма. При установлении подлинности предполагается параллельное нанесение растворов испытуемого лекарственного средства и соответствующего стандартного образца.

Предел обнаружения составил 0,5 мкг. Рекомендуемая нагрузка на пластину - 1,5 мкг действующего вещества.

/К

Рис. 9. Хроматограмма субстанции и препаратов омепразола в подвижной фазе метиленхлорид, насыщенный аммиаком - метиленхлорид - изопропиловый спирт (10:10:1,8) на пластинке «Сорбфил» (1 - стандартный раствор 0,5 мг/мл, 2 -стандартный раствор 0,15 мг/мл, 3 - стандартный раствор 0,05 мг/мл, 4 -испытуемый раствор (капсулы омепразол-Акри, 0,15 мг/мл), 5 - испытуемый раствор (таблетки Лосек МАПС, 0,15 мг/мл)

На основе полученных данных были разработаны унифицированные ТСХ методики установления подлинности омепразола, которые могут использоваться для выявления фальсифицированных препаратов, не содержащих указанные на упаковке лекарственные вещества, а также могут быть включены в раздел НД «подлинность» для субстанций и лекарственных препаратов омепразола.

3.4. ИССЛЕДОВАНИЕ КАПСУЛИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ОМЕПРАЗОЛА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТЕСТА «РАСТВОРЕНИЕ»

Молекула омепразола содержит различные функциональные группы, обладающие кислотно-основными свойствами и вступающие друг с другом в сложное взаимодействие (рис. 1). Амфотерные свойства омепразола учитывали при разработке методик установления подлинности и количественного определения субстанций и лекарственных препаратов данной группы.

Присутствие в молекуле омепразола кислотного центра (атом азота пиррольного типа) обусловливает хорошую растворимость этого соединения в растворах щелочей. Гетероатомы азота пиридинового типа обуславливают основные свойства. В воде омепразол очень мало растворим. В кислой среде омепразол химически нестабилен (период его полураспада при рН 2 составляет около 2 мин). Поэтому капсулы, содержащие омепразол, являются желудочнорезистентными.

Сложная система сопряжения и основный характер должны оказывать существенное влияние на УФ-спектр вещества (рис. 10), а также на растворимость при определенных значениях рН.

Рис. 10. УФ-спектр субстанции омепразола (20 мкг/мл) в фосфатном буферном растворе (рН 6,8)

В настоящей работе мы изучили дифференцирующие условия теста «Растворение», позволяющего выявлять различия между препаратами-дженериками омепразола (капсулы по 20 мг) и являющегося одним из испытаний in vitro, по которому оценивают биодоступность лекарственного препарата.

Профиль растворения в определенных условиях может являться специфичным для каждого препарата, поэтому целесообразно использовать тест «Растворение» для выявления фальсифицированных лекарственных средств. Подбор среды растворения осуществляли с учетом кислотно-основных свойств лекарственного вещества.

В кислотной стадии степень высвобождения лекарственного вещества из капсул не превышает норму высвобождения для капсул омепразола - не более 10% через 120 мин с начала исследования. На рисунке 11 представлены кривые высвобождения омепразола при использовании в качестве среды растворения фосфатного буферного раствора. Видно, что профили растворения различаются. Все испытуемые образцы, за исключением фальсифицированного препарата «Омез», удовлетворяют требованиям ШР 30.

Время, мин

• Омепразол, 20 мг фирмы "Гедеон Рихтер" —О— Омепразол-Акри, 20 мгОАО "ХФК Акрихин"

—т- Омепразол, 20 мг ООО "Озон" —V— Ромесек, 20 мг фирмы "Ranbaxy Lab. Ltd."

■ Омез, 20 мг фирмы "Dr.Reddy's Lab." —О— Омез, 20 мг фирмы "Dotsy", фальсификат

Рис. 11. Высвобождение омепразола из капсул в фосфатном буферном растворе (рН 6,8)

Для сравнения профилей высвобождения использовали рекомендованный FDA и утвержденными в РФ «Методическими указаниями по проведению качественных исследований биоэквивалентности лекарственных средств», модельно-независимый метод путем расчета параметра «фактора подобия» (f:). Различие между кривыми присутствует, если f2 < 51. В таблице 1 представлены значения фактора подобия в среде фосфатного буфера с рН 6,8, полученные для

каждой пары препаратов. Практически во всех случаях наблюдаются явные различия между кривыми, что позволяет отличить препараты-дженерики. Таблица 1. Сводная таблица значений факторов подобия, для кривых высвобождения омепразола из капсул в фосфатном буфере (рН 6,8)

Омез Омез фальс. Омепразо л-Рихтер Ромесек Омепразол-Озон

Омепразол-Акри Г2= 46,08 36,24 26,43 {г= 39,62 52,94

Омез 1г= 26,32 32,15 Тг= 31,63 {2= 60,95

Омез фальс. Ь= 17,80 ^=31,21 Ь= 28,57

Омепразол-Рихтер {2= 18,25 {2= 32,88

Ромесек Ь= 33,11

Анализ полученных данных свидетельствует о возможности использования теста «растворение» с применением в качестве дифференцирующей среды фосфатного буфера с рН 6,8 для определения различий между воспроизведенными лекарственными препаратами, а также для вьивления фальсифицированных препаратов омепразола.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Разработана унифицированная методика анализа субстанций и лекарственных средств омепразола методом ИК-спектроскопии и составлен атлас соответствующих ИК-спектров, которые предлагаются для использования в качестве стандартных при анализе по разделу нормативной документации «подлинность» и для выявления фальсифицированных препаратов, не содержащих указанное на упаковке действующее вещество.

2. Установлено, что метод ближней ИК-спектроскопии (БИК) в сочетании с дискриминантным методом анализа может быть использован для подтверждения

подлинности субстанций омепразола, а также с целью идентификации производителя субстанции.

3. Разработаны условия метода ТСХ и методики пробоподготовки субстанций и препаратов омепразола. Подобран унифицированный состав подвижной фазы для препаратов омепразола: метиленхлорид, насыщенный аммиаком - метиленхлорид - изопропиловый спирт в соотношении 10:10:1,8 для пластин отечественного производства «Сорбфил». Установлено, что для надежного детектирования пятен омепразола на пластину следует наносить 1,5 мкг действующего вещества. Разработанные методики предлагаются для включения в раздел «подлинность» нормативной документации на субстанции и препараты омепразола.

4. Показано, что тест «растворение» может быть использован для установления различий между дженериками омепразола. С этой целью необходимо проводить испытание в фосфатном буферном растворе со значением рН 6,8 и с построением кривой высвобождения.

5. Для выявления фальсифицированных лекарственных средств омепразола, содержащих действующие вещества, указанные на этикетке, но изготовленных другим производителем, возможно использование теста «растворение» в комплексе с другими аналитическими методами при условии параллельного испытания в дифференцирующих условиях подлинного лекарственного средства.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Установление подлинности лекарственных препаратов, содержащих действующее вещество омепразол методом ИК-спектроскопии / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П. // Материалы XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - Москва. - 2007. - С. 790.

2. Анализ препаратов омепразола с использованием метода ТСХ / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П. // Пути и формы совершенствования фарм. образования. Создание новых биологически активных веществ: материалы 3-й всероссийской научно-методической конференции. -Воронеж, 2007. - ч. 1. - С. 32-33.

3. Использование метода ИК-спектроскопии с целью выявления фальсифицированных лекарственных препаратов, содержащих действующее вещество омепразол / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев В.Л.,

Арзамасцев А.П. // Материалы VIII конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке». - Томск. - 2008. - С. 218-219.

4. Применение метода ближней инфракрасной спектроскопии для идентификации лекарственных средств / Долбнев Д.В., Дорофеев B.JL, Арзамасцев А.П., Азимова И.Д. и др. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 6. - С. 27-30.

5. Анализ омепразола в твердых дозированных формах методом ИК-спектроскопии / Азимова И.Д., Арзамасцев А.П., Дорофеев В.Л.// Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. -2009. -№3. -С. 48-51.

6. Использование теста «Растворение» для сравнительной оценки качества препаратов-дженериков омепразола / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П. // Фармация. -2009.-№ 1. - С. 9-11.

7. Применение метода ИК-спектроскопии ближнего диапазона в анализе субстанций и готовых лекарственных форм омепразола / Азимова И.Д., Арзамасцев А.П., Титова A.B. // Материалы Межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Фармация в XXI веке: эстафета поколений».-Санкт-Петербург. - 2009. - С. 47-48.

ООО «ВНИПР» 127644, МОСКВА, КЛЯЗЬМИНСКАЯ УЛ., Д.15 (495) 486-80-76 зак.№ 6319 от 13.10.2009 г. тираж 100 экз

Оглавление диссертации Азимова, Ирина Джалиловна :: 2009 :: Москва

Список сокращений и обозначений.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Фармакологические аспекты.

1.1. Фармакологические свойства и механизм действия ИПП.

1.2. Номенклатура ингибиторов протонной помпы.

2. Фармакопейный анализ омепразола.

2.1. Фармакопейные требования к качеству субстанций омепразола.

2.2. Фармакопейные требования к качеству препаратов омепразола.

3. Нефармакопейный анализ омепразола.

4. Инфракрасная спектроскопия в средней области.

5. БИК-спектроскопия.

6. Тонкослойная хроматография.

7. Биоэквивалентность дженериков. тест «растворение».

7.1. Исследование биодоступности и биоэквивалентности.

7. 2. Биофармацевтические аспекты теста «растворение».

8. Выявление фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов.

8.1. Проблема фальсификации лекарственных средств.

8.2. Подходы к обнаружению фальсификатов.

8.3. Выводы по литературным данным.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

9. Материалы и методы исследования.

9.1. Объекты исследования

9.2. Оборудование и условия испытаний.

9.2.1. ИК-спектроскопия в средней области.

9.2.2. БИК-спектроскопия.

9.2.3. Тонкослойная хроматография.

9.2.4. Тест «Растворение».

10. Структура и кислотно-основные свойства омепразола.

11. Анализ лекарственных средств омепразол методом

ИК-спектроскопии в средней области.

11.1. Задачи исследования.

11.2. Методика пробоподготовки.

11.3. Атлас стандартных ИК-спектров омепразола

11.4. ИК-спектры лекарственных средств омепразола.

11.5. Выводы по главе.

12. Анализ лекарственных средств омепразола методом БИК-спектроскопии.

12.1. Задачи исследования.

12.2. Методика анализа лекарственных средств омепразола.

12.3. БИК-спектры лекарственных средств омепразола

Анализ полученных спектров.

12.4. Выводы по главе.

13. Анализ лекарственных средств омепразола методом

13.1. Задачи исследования.

13.2. Пробоподготовка для анализа лекарственных средств. омепразола методом ТСХ.

13.3. Разработка условий хроматографирования.

13.4. Полученные результаты.

13.5. Выводы по главе.

14. Анализ лекарственных средств омепразола с помощью теста «растворение».

14.1. Задачи исследования.

14.2. Объекты исследования.

14.3. Методика проведения теста «растворение».

14.4. Количественное определение высвободившегося вещества.

14.5. Результаты теста «растворение».

14.6. Выводы по главе

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Азимова, Ирина Джалиловна, автореферат

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ

Язвенная болезнь является одной из важнейших гастроэнтерологических проблем здравоохранения. Она относится к наиболее распространенным заболеваниям, поражает людей в активном творческом возрасте, часто обуславливая временную, а нередко и стойкую потерю трудоспособности [38]. Омепразол является противоязвенным средством, ингибитором протонной помпы (ИПП), наиболее широко используемым в медицине [31,96,97].

Высокая эффективность и безопасность при длительном применении делают его препаратом выбора при лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, пеп-тических язвах и других кислотозависимых заболеваниях.

Мировой фармацевтический рынок характеризуется высокой долей оборота воспроизведенных лекарственных средств (дженериков). В частности, большое количество дженериковых препаратов (более 30) характерно для омепразола.

Особую значимость этот вопрос приобретает в связи с выходом 12 издания Государственной фармакопеи РФ.

Другой важной проблемой является фальсификация лекарственных средств. В мировой практике известны случаи фальсификации препаратов омепразола.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью данной работы являлась разработка унифицированных подходов к сравнительной оценке качества воспроизведенных лекарственных средств омепразола с использованием современных физико-химических методов анализа. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- изучение хроматографических характеристик и разработка унифицированных методик установления подлинности препаратов омепразола методом ТСХ;

- изучение воспроизведенных и фальсифицированных препаратов омепразола с использованием теста «растворение».

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

Составлен атлас ИК-спектров субстанций и лекарственных средств омепразола различных производителей. Изучены спектральные характеристики омепразола в средней и ближней инфракрасных областях.

Впервые разработаны методики установления подлинности лекарственных средств омепразола в лекарственных формах «таблетки» и «капсулы» методом ИК-спектроскопии.

Впервые установлено, что метод БИК-спектроскопии может быть использован для подтверждения подлинности субстанций омепразола и идентификации их производителя.

Разработана методика пробоподготовки субстанций и лекарственных препаратов омепразола для анализа методами ИК-спектроскопии и ТСХ.

Изучено влияние подвижных фаз различного состава на хроматогра-фические характеристики лекарственных средств омепразола при их анализе методом ТСХ. Разработана унифицированная методика установления подлинности лекарственных средств омепразола методом ТСХ.

Впервые показано, что тест «растворение» позволяет проводить сравнение воспроизведенных препаратов омепразола и выявлять фальсифицированные препараты.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Разработанные методики идентификации лекарственных препаратов омепразола с использованием ИК-спектроскопии в средней области и метода тонкослойной хроматографии апробированы и используются в испытательной лаборатории «Московского областного центра сертификации и контроля качества лекарственных средств».

Полученные ПК спектры в средней и ближней областях могут быть использованы при стандартизации и контроле качества по разделу «подлинность» соответствующей нормативной документации (НД) на субстанции и лекарственные препараты омепразола и для выявления фальсифицированных препаратов.

Методика установления подлинности методом тонкослойной хроматографии предлагается для стандартизации и контроля качества субстанций и лекарственных препаратов омепразола с последующим их включением в соответствующие разделы НД, а также для выявления фальсифицированных препаратов.

Выбранные условия теста «растворение» предлагаются для сравнения препаратов омепразола различных производителей и для выявления фальсифицированных препаратов.

СВЯЗЬ ЗАДАЧ ИССЛЕДОВАНИЯ С ПРОБЛЕМНЫМ

ПЛАНОМ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

Диссертационная работа выполнена в рамках комплексной темы кафедры фармацевтической химии ММА им. И.М. Сеченова «Совершенствование контроля качества лекарственных средств» (№ гос. регистрации 01.200.110545).

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на: XIV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2007 г.), 3-й всероссийской научно-методической конференции «Пути и формы совершенствования фарм. образования. Создание новых биологически активных веществ» (Воронеж, 2007 г.), VIII конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2008 г.), межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Фармация в XXI веке: эстафета поколений» (Санкт-Петербург, 2009г.).

Апробация работы проведена на научно-практическом заседании кафедры фармацевтической химии с курсом токсикологической химии фармацевтического факультета ММА им. И.М. Сеченова 11 июня 2009г.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертационного исследования на тему "Сравнительная оценка качества воспроизведенных препаратов омепразола"

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

2. Установлено, что метод ближней ИК-спектроскопии (БИК) в сочетании с дискриминантным методом анализа может быть использован для подтверждения подлинности субстанций омепразола. С помощью указанного метода можно идентифицировать производителя субстанции и в ряде случаев капсул омепразола.

3. Разработаны условия метода ТСХ и методики пробоподготовки субстанций и препаратов омепразола. Подобран унифицированный состав подвижной фазы для препаратов омепразола: метиленхлорид, насыщенный аммиаком - метиленхлорид - изопропиловый спирт в соотношении 10:10:1,8 для пластин отечественного производства «Сорбфил». Разработанные методики предлагаются для включения в раздел «подлинность» нормативной документации на субстанции и препараты омепразола.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2009 года, Азимова, Ирина Джалиловна

1. Абдулхаков Р.А., Кудрявцева J1.B., Исаков В.А. Резистентность Helicobacter pylori к основным компонентам эрадикационной схемы // Журнал "Педиатрия им. Г.Н. Сперанского", приложение 2. - 2002 - С. 21-22.

2. Азимова И.Д., Дорофеев B.JL, Арзамасцев А.П. Анализ омепразола в твердых дозированных формах методом ИК-спектроскопии // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2009. - №3. - С. 5053.

3. Аналитический документ по вопросам фальшивых лекарств в России. -Москва: AIPM, 2001.

4. Анализ препаратов омепразола с использованием метода ТСХ / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев B.JL, Арзамасцев А.П. // Вестник ВГУ. -2007.-С. 32-33.

5. Андерсон А.А. Жидкостная хроматография аминосоединений. — Рига: Зинатне, 1984.- 295с.

6. Арзамасцев А.П., Сенов П.Л. Стандартные образцы лекарственных средств — Медицина, Москва, 1978.- 65с.

7. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Титова А.В. Современное состояние проблемы применения ИК-спектроскопии в фармацевтическом анализе лекарственных средств // Химико-фармацевтический журнал. — 2008. — т. 42. № 8. - С.47-51.

8. Арзамасцев А.П., Яскина Д.С. Ультрафиолетовые и инфракрасные спектры лекарственных веществ: Вып. I. — М.: Медицина, 1975 — 151с.

9. Багирова В. Л., Киселева Г. С., Тенцова А. И. Методические указания по разработке теста «Растворение» на индивидуальные препараты // Фарматека.- 1997.- № 1.- С. 39-40.

10. Баранская Е.К. Язвенная болезнь и инфекция Helicobacter pylori. Том 2,№ 1, 2000 56-58с.

11. Белоусов Ю. Дженерики — мифы и реалии // Ремедиум. 2003. -Июль- август. - С. 4-9.

12. Беллами Л.Д. Новые данные по ИК-спектрам сложных молекул. — М.: Мир, 1971.- 16-20с.

13. Березкин В.Г., Бочков А.С. Количественная тонкослойная хроматография. М.: Наука, 1980. - 183с.

14. Биологическая доступность лекарственных средств: принципы и проблемы. Доклад Научной группы ВОЗ № 536. Женева: ВОЗ, 1975.

15. Бранд Дж., Эглинтон Г. Применение спектроскопии в органической химии. М.: Мир, 1967. - 280с.

16. Браун Д., Флойд А., Сейнзбери М. Спектроскопия органических веществ. М: Мир, 1992.

17. Вольская Е., Коковин Е. Сила и слабость дженериков: российский рынок воспроизведенных препаратов // Ремедиум. 2003. — Июль — август. С. 10-13.

18. Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии (планарная хроматография): Т. 1,2. Пер. с англ. М., 1999.

19. Герасимова В.Б., Журувлева М.В., Румянцев А.С. Актуальность пострегистрационных исследований воспроизведенных лекарственных препаратов // Ведомости НЦ ЭСМП. 2007. - № 1. - С. 37-40.

20. Гончаров А.И., Корнилов М.Ю. Справочник по химии. Киев: Ви-ща школа, 1977. - 304с.

21. Гордон А., Форд Р. Спутник химика: Пер. с англ. М.: Мир, 1976. -544с.

22. Гороновский И.Т., Назаренко Ю.П., Некряч Е.Ф. Краткий справочник по химии. Киев: Наукова Думка, 1974. - 992с.

23. Государственная фармакопея СССР №11, 1989г., выпуск 2. — 400с.

24. Григорьев П.Я., Яковенко Э.П. Helicobacter pylori: гастрит, дуоденит (гастродуоденит), язвенная болезнь и другие геликобактерассоциированные заболевания // Российский гастроэнтерологический журнал 1999. - № 4. -С. 12-15.

25. Григорьева А.И. Введение в колебательную спектроскопию неорганических соединений. М., 1977. — 3-34с.

26. Дорофеев ВЛ. Номенклатура и фармакопейный анализ лекарственных средств групп фторхинолонов // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2001. - №4. - С 5-14.

27. Ивашкин В.Т., Лапина Т.Л. Лечение язвенной болезни: новый век — новые достижения — новые вопросы / Российский медицинский журнал. — 2002. том 4. - №1. - С. 20-24.

28. Идентификация органических соединений / Р.Шрайнер, Р.Фьюзон, Д.Кёртин, Т.Моррил. М.:Мир, 1983. - 704с.

29. Исаков В.А. Диссертация кандидата медицинских наук «Хронический геликобактерный гастрит при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки: клинико-морфологическое исследование», НИИ питания РАМН, 1996.

30. Исаков В.А. Ингибиторы протонного насоса: их свойства и применение в гастроэнтерологии. -М.: ИКЦ «Академкнига», 2001. — 304с.

31. Использование современных методов анализа для выявления фальсифицированных лекарственных средств / А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, А.А. Коновалов и др. // Фармацевтический вестник Узбекистана. — 2004. — № 1. С. 104-109.

32. Использование теста «Растворение» для сравнительной оценки качества препаратов-дженериков омепразола / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П. // Фармация. 2009. - № 1. - С. 9-11.

33. Использование теста «Растворение» для сравнительной оценки препаратов-дженериков ранитидина / Степанова Е.В., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, №5, 2008 С.49-51.

34. Кирсанова Т.Г. Анализ состояния фармацевтического рынка России // Фарматека.— 1998.— № 1.— С. 6-9.

35. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. В 2 т. — М.: Мир, 1981.

36. Клинические лекции по гастроэнтерологии и гепатологии: В 3 т. Под ред. А.В. Калинина, А.И. Хазанова. М., 2003. т. 1. - С. 236-282.

37. Кондратенко С.Н., Стародубцев А.К., Белякова Г.А. и др. / ВЭЖХ определение, фармакокинетика и относительная биодоступность Омепразо-ла-Акри // Химико-фармацевтический журнал. 2002. - т. 36. - № 10. - С. 49-50.

38. Кондратенко С.Н., Стародубцев А.К., Подъячева Н.Г. и др. // Ведомости Научного центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств Минздрава России. — 2001. № 4. — С. 90-92.

39. Крищенко В.П. Ближняя инфракрасная спектроскопия. — М., 1997. -13,237, 564 с.

40. Лопина О.Д. Механизм действия ингибиторов протонного насоса // Российский журнал гастроэнтнрологии, гепатологии, колопроктологии. — 2002. том XII. - № 2. - С. 38-44.

41. Машковский А.П. Рекомендации ВОЗ в области определения эквивалентности воспроизведенных лекарственных препаратов // Фарматека.— 1998.—№3.—С. 3-7.

42. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах. Т.1. — Изд. 13-е, новое. Харьков: Торсинг, 1997. - 287с.

43. Молекулярно-биологические проблемы создания лекарственных средств и изучение механизма их действия / О. В. Никифорова, В. В. Чистяков, Е. В. Ших, А. П. Арзамасцев. // 1999. С. 3-5.

44. Никифорова О.В. Диссертация кандидата медицинских наук: Сравнительная фармакокинетика и биодоступность «Гастрозола» отечественного аналога омепразола. - Москва, 1999.

45. Никифорова О.В., Архипова Д.Е., Чистяков В.В. Клиническая лабораторная диагностика, — 1998. — № 9, С. 18.

46. Никифорова О.В., Чистяков В.В., Ших Е.В., Арзамасцев А.П. / Фармакокинетика и биодоступность Гастрозола // Химико-фармацевтический журнал. 1999. т. 32. - № 4. - С. 3-5.

47. Нифантьев О.Е., Машковский А.П., Нифантьев Е.О. Аббревиатуры, термины и определения в сфере обращения лекарственных средств: Словарь-справочник. М., 2001. - С. 78.

48. Опыт применения препарата лосек (омепразол) в гастроэнтерологии / И.В. Маев, Е.С. Вьючнова, Е.Г. Лебедев и др.// Терапевтический архив. — 2001.- №7.- С. 79-82.

49. Оценка относительной биодоступности и клинической эффективности омепразола (Гастрозола) / Г.В. Раменская, С.Ю. Сереброва, К.С. Давыдова, В.Г. Кукес // Новые Санкт-Петербургские врачебные ведомости. -2002.-С. 34-36.

50. Панков С.А. и Борзенко А.Г., Вестн. Моск. ун-та, Сер. 2, Химия, 47(3), 2006.-С. 174-176.

51. Пентин Ю.А., Вилков JI.B. Физические методы исследования в химии.-М: Мир, 2003.

52. Пиотровский В.К., Вайс М.Н. Математическое моделирование в фармакокинетике: экспериментальная и клиническая фармакокинетика // Сб. тр. АМН СССР, НИИ фармакологии. 1988. - С. 16-28.

53. Потемкин В.Г. MATLAB 6: среда проектирования инженерных приложений. -М.: ДИАЛОГ-МИФИ, 2003. 448 с.

54. Преч Э., Бюльманн Ф., Аффольтер К. Определение строения органических соединений. — М: Мир, 2006.

55. Применение метода ближней инфракрасной спектроскопии для иде-ентификации лекарственных средств / Долбнев Д.В., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П., Азимова И.Д. и др. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2008. - № 5. - С. 68-72.

56. Проведение качественных исследований биоэквивалентности лекарственных средств. Методические указания. — Москва, 2007.

57. Родионова О.Е., Померанцев А.Л. Хемометрика в аналитической химии Изд-во Ин-та химической физики РАН, Москва, 2005. - 61с.

58. С.Н. Кондратенко, А.К. Стародубцев, Г.А. Белякова и др., Химико-фармацевтический журнал, 36(10), 2002. С. 49-50.

59. Смит А. Прикладная ИК-спектроскопия. Основы, техника, аналитическое применение. Мир, Москва, 1982.

60. Старостин Б.Д. Ингибиторы протонной помпы в гастроэнтерологии // Русский медицинский журнал. 1997. - 6 (19): 1271-1280с.

61. Схунмакерс П. Оптимизация селективности в хроматографии: Пер. с англ. М.: Мир, 1989. - 399с.

62. Тенцова А.И., Ажгихин И.С. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств. М.: Медицина, 1974. - 336с.

63. Тенцова А.И., Ажгихин И.С. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств. — М.: Медицина, 1974.

64. Установление подлинности лекарственных препаратов, содержащих действующее вещество омепразол методом ИК-спектроскопии / Азимова И.Д., Теплякова Н.Г., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П. // Человек и лекарство. Тез. докл. 2007. - С. 790.

65. Фармацевтический сектор: основы законодательства в Европейском Союзе / Авт.-составители Н.А. Ляпунов, В.А. Усенко, А.Л. Спасокукоцкий, Е.П. Безуглая. К.: Морион, 2002. - С. 7- 65.

66. Фармацевтический сектор: основы законодательства в Европейском Союзе / Авт.-составители Н.А. Ляпунов, В.А. Усенко, А.Л. Спасокукоцкий, Е.П. Безуглая. К.: Морион, 2002. - С. 7- 65.

67. Харитонов Ю.Я. Аналитическая химия (аналитика). В 2 кн. М.: Высшая школа, 2001. — 615 с.

68. Хацкин С., Щелкунов Г., "Ремедиум" 2000. - №3.

69. Химическая энциклопедия: В 5 т. М.: Сов. энцикл./ Большая Российская энцикл., 1988 - 1998.

70. Чулановский В.М. Введение в молекулярный спектральный анализ. 2 изд., М.-Л., 1951.- 376с.

71. Шараф М.А., Иллмэн Д.Л., Ковальски Б.Р. Хемометрика, Пер. с англ. М: Мир, 1987.

72. Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии: Пер. со словацкого. М.: Мир, 1980.

73. Шептулин А.А. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под ред. В.Т. Ивашкина -М.: МЕД пресс-информ, 2002. 125-127с.

74. Шталь Э. Хроматография в тонких слоях: Пер. с нем. М.: Мир, 1965.-508с.

75. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств. Практическое руководство. Фторхинолоны и цефалоспори-ны./ А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, А.А. Коновалов и др. М.:Изд. Дом Русский врач, 2003. - 132с.

76. Юнг Г. Инструментальные методы химического анализа. Мир: Москва, 1989.

77. A. A. Mantea and Р. К. Narang, J. Chromatogr. Biomed. Appl., 70, 216222 (1988).

78. A. J. Neil, R. D. Jee, G. Lee, et al., NIR, D: 19 (2007).

79. Antal I., David A.Z. / Fundamentals and pharmaceutical applications of near-infrared spectroscopy // Glatt International Times, 23 (2007).

80. B.G. Osborne, T. Fearn. Near Infrared Spectroscopy in Food Analysis, Longman Scientific and Technical, Harlow, Essex, England, 1986.

81. Basic Tests for Drugs: Pharmaceutical substances, medicinal plant materials and dosage forms. Geneva: WHO, 1998. - iv + 92 p.

82. Berentsen S., Stoltz Т., Molt K. // J. Molec. Struct. 1997. 410. P. 581

83. Blanco M., Coello, J., Itirriaga, H, Maspoch, S, Pezuela, C. Near-infrared spectroscopy in the pharmaceutical industry, Analyst 123 (1998) 135R- 150R.

84. British Pharmacopoeia (Br. Ph.) (2007).

85. Brandstrom A., Lindberg P, Junggren U. Structure activity relationships of substituted benzimidazoles. Scand J Gastroenterology 1983; 85: 900-7.

86. C. Pasquini, J. Braz.Chem. Soc., 14(2), 198-219 (2003).

87. C. Spiegel, Y. Roggo, C. Gendrin, et al., NIR, D:39 (2007).

88. C. W. Howder, Clinical Pharmacokinetics, № 20, 38-49 (1991).

89. Comparative pharmacokinetic/pharmacodinamic analysis of proton pump inhibitors omeprazole, lansoprazole and pantoprazole, in humans / M. Katashima, K. Yamamoto, Y. Tokuma et al. // Eur. J. Drug Metabol. Pharmacokinet. -1998.- Vol.23. P. 19-23.

90. Counterfeit drugs. Threat to Public Health: 55th World Health Assembly. Geneva: WHO, 2002.

91. CPMP/EWG/QWP/1401/98. Note for guidance on the investigation of bioavailability and bioequivalence. London: CPMP/EMEA, 26 July 2001.

92. Cullen D., Collins В., Humphries H. et al. Campilobacter pylori and re-currens of duodenal ulcers a 12-month follow-up study. Lancet, 1987, 2, 11091111.

93. Current European concepts in the management of Helicobacter pylori infection. The Maastricht Consensus Report. European H.pylori Study Group. Gut, 1997, Vol.41 (1), p. 8-13.

94. Cziurcziak W. E. Pharmaceutical and Medical Applications of Near-Inrared Spectroscopy, Marcel Dekker Inc., (2002), New York.

95. D. L. Massart. Chemometrics: a textbook, Elsevier, NY, 1988.

96. Dattilo M., Figura N. Helicobacter pylori infection, chronic gastritis, and proton pump inhibitors. J Clin Gastroenterol 1998; 27 (Suppl 1):SI63-9.

97. David Littlejohn. Analyst, 2008, DOI: 10.1039/b713919e.

98. Drennen J. K., Lodder R. A. (1990). Non-destructive near-infrared analysis of intact tablets for determination of degradation products, J. Pharm. Sci., 79, 622-627.

99. E. N. Lewis, J. E. Carroll, and F. Clarke, NIR, 12(3), 16-18 (2001). 86

100. Effects of long-term treatment with proton pump inhibitors in gastro-oesophageal reflux disease on the histological findings in the lower oesophagus / M. Stolte, M. Vieth, J.M. Schmitz et al. / Scand. J. Gastroenterol. 2000. - Vol. 35.- P. 1125-1130.

101. European Pharmacopoeia, 5th ed. (Eur. Ph.) (2005).

102. Eustaquio M., Blanco R.D., Moffat A.C. // Analitica Chimica Acta. 1999. 383. P. 283.

103. Eva-Karin Anderbenq et al. Bioequivalence between omeprazole MUPS tablets and omeprazole capsules. Gastroenterology 1998; 114 (4, pt 2): A56.

104. F.E. Barton, Spectroscopy Eur., 14(1), 12-18 (2002).

105. FIP Guidelines for Dissolution Testing of Solid Oral Products // Dissolution Technol. 1997. - №4.- P. 5-14.

106. Frasson Scafi S.H., Pasquini C. // Analyst 2001. 126. P. 2218.

107. Gold Т. В., Buice Jr. R.G., et al. (1997). Determination of extent of formaldehyde-induced crosslinking in hard gelatin capsules by near infrared spectroscopy, Pharm. Res., 14, 1046-1050.r

108. Gombas A., Antal I., et al. (2003). Comparison of x-ray powder diffrac-tometry and near-infrared spectroscopy used for quantification of crystalline and amorphous lactose-monohydrate, Int. J. Pharm., 256, 25-32.

109. Guidance on the Selection of Comparator Pharmaceutical Products for Equivalence Assessment of Interchangeable Multisource (Generic) Products. -WHO Technical Report Series, №. 902, 2002.

110. Guidance for Industry: Bioavailability and Bioequivalence Studies for Orally Administered Drug Products General Considerations. - Rock-ville, MD: U.S. Department of Health and Human Services, FDA, Center for Drug Evaluation and Research, 2003.

111. Guidance for Industry: Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms. Rockville, MD: U. S. Department of Health and Human Services, FDA, Center for Drug Evaluation and Research, 1997.

112. Guidance for Industry: Extended Release Oral Dosage Forms: Development, Evaluation, and Application of In Vitro / In Vivo Correlations. Rockville, MD: U. S. Department of Health and Human Services, FDA, Center for Drug Evaluation and Research, 1997.

113. H. M. Heise, R. Winzen, Fundamental chemometric methods, in: H.W. Siesler, Y. Ozaki, S. Kawata, H.M. Heise (Eds.), Near Infrared Spectroscopy: Principles, Instruments, Applications, Wiley-VCH Verlag GmbH, Weinheim, 2002.

114. H. P. Xie, J. H. Jiang, Z. Q. Chen, et al., Anal. Sci., 22(8), 1111-1116 (2006).

115. Hamad M. L., Wang J. Т., et al. (2005). Process Analytical Technology (PAT) Tools: Chemometric Evaluation of Furosemide Tablet Formulations, FDA Science Forum, April 27-28, Washington Convention Center.

116. H.Leeson L. J., Carstensen J. T. Dissolution Technology. Whitlock Press, Inc., 1974. - 197 p.

117. Hentschel E., Brandstatter G., Dragosics B. Et al. Effect of ranitidine and amoxycillline plus metronidazole on the eradication of H. pylori and the recurrence of duodenal ulcer. N.Engl. Med., 1993, 328, 398-312.

118. J. Dubois, J.-C. Wolff, J. K. Warrack, et al., Spectroscopy, Feb. 1 (2007).

119. J. L. Ramirez, M. K. Bellamy, and R. J. Romanach, AAPS Pharm. Sci. Tech., 2(3), article 11 (2001).

120. J.-H. Guo, G. W. Skinner, W. W. Harcum, et al., Drug Develop. Industr. Pharm., 25(12), 1267-1270 (1990).

121. K. Koboyashi, K. Chiba, M. Tani, et. al., J. Pharm. Biomed. Anal., 12(6), 839-866(1994).

122. Kenyon A.S., Layoff T.P. A Compendium of Unofficial Methods for Rapid Screening of Pharmaceuticals by Thin-Layer Chromotography. St.Louis, MO: FDA, 1999.

123. Lau JYW, Sung JY, Lee KK, et al. Effect of intravenous omeprazole on recurrent bleeding after endoscopic treatment of bleeding peptic ulcers. N Engl J Med 2000;343:310-16.

124. Lin Щ, Lo WC, Lee FY, Perng CL, Tseng GY. A prospective randomized comparative trial showing that omeprazole prevents rebleeding in patients with bleeding peptic ulcer after successful endoscopic therapy. Arch Intern Med. 1998 Jan 12;158(l):54-8.

125. Lin Т. P., Hsu С. С. (2002). Determination of residual moisture in ly-ophilized protein pharmaceuticals using a rapid and noninvasive method: near infrared spectroscopy, J. Pharm. Sci. Technol., 56, 196-205.

126. Lind T. et. al. The MACH 2 Study: role of omeprazole in eradication of Helicobacter pylori with 1-week triple therapies. Gastroenterology 1999; 116: 248-253.

127. M. Blanco, M. Alcala, J.M. Gonzalez, et al., J. Pharm. Sci., 95(10), 2137-2144 (2006).

128. M. Donoso and E.S. Ghaly, Pharm. Dev. Thechnolog., 11(3), 389-397 (2006).

129. Mark H. L., Tunnell D. (1985). Qualitative near infrared reflectance analysis using Mahalanobis distances. Anal Chem., 57, 1449-1456.

130. Mark S. Kemper, Edgar J. Magnuson, Napasinee Aksornkoae et al. Use of Transmission Spectroscopy for the Quantitative Analysis of an Active Ingredient in a Translucent Pharmaceutical Topical Gel Formulation, AAPS Pharm Sci 2001; 3 (3) article 23.

131. Marketing Authorization of Pharmaceutical Products with Special Reference to Multisource (Generic) Products: A Manual for Drug Regulatory Authorities: WHO/DMP/RGS/98.5. Geneva: WHO, 1998.

132. Martens, H., and Martens, M. Multivariate Analysis of Quality: An Introduction. John Wiley & Sons, 2001, Chichester.

133. McGregor A. Counterfeit Drugs Flood Developing World // Lancet. -1997.-350, 1690.

134. Modlin I.M., Sachs G. Acid related deseases: biology and treatment. -Schnetztor-Verlag GmbH D-Konstanz, 1998; 197-241.

135. Molt K. Cho Y.J. // J. Molec. Struct. 1995. 349. P. 345.

136. Morii M., Takata H., Fujisacki H. The potency of substituted benzimida-zoles such as E3810, omeprazole, Ro-18-5364 to inhibit gastric FrK+-ATPase iscorrelated with the rate of acid-activation of the inhibitor. Biochem Pharmacol 1990; 39; 661-667.

137. Morisseau, К. M., Rhodes, С. T. (1995). Pharmaceutical uses of near-infrared spectroscopy, Drug. Dev. Ind. Pharm., 21, 1071-1090.

138. Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on Registration Requirements to Establish Interchangeability // WHO Technical Report Series. 2006, № 937. - Annex 7.

139. NIH consensus development panel on Helicobacter pylori in peptic ulcer disease. Helicobacter pylori in peptic ulcer disease. JAMA; 1994; vol. 272; 65-69.

140. Note for guidance on the use of near infrared spectroscopy by the pharmaceutical industry and the date requirements for new submissions and variations. CPMP / QWP / 3309 / 01 from 20 Febr. 2003.

141. O. Y. Rodionova, L. P. Houmler, A. L. Pomerantstev, et al., Anal. Chem. Acta, 549(1-2), 151-168 (2005).

142. Omeprazole copies stability concerns. SCRIP, 1997, № 2204, p. 21. 157

144. P. Geladi, K. Esbensen. Chemometrics, a growing and maturing discipline (Editorial). Chemom. Intell. Lab. Syst., 7, 197 (1990).

145. Plugge W, van der Vlies C. (1993). Near-infrared spectroscopy as an alternative to assess compliance of ampicillin trihydrate with compendial specifications. J. Pharm. Biomed. Anal., 11, 435-442.

146. R. Kramer. Chemometric Techniques for Quantitative Analysis, Marcel-Dekker, 1998.

147. R. P. Cogdill, C. A. Anderson, and J. K. Drennen, AAPS PharmSciTech., 6(02), E284-E297 (2005).

148. R.P. Cogdill, C.A. Anderson, and J.K. Delgado-Lopez, AAPS PharmSciTech., 6(02), E262 E272 (2005).

149. Radon E.C., Reuben M.A. Ann. Rev. Physiol. 1990; 52: 321-344.

150. Radtke G., Knop K., Lippold C. In-process control of direct pelletisation in the rotary fluidized bed using NIR spectroscopy, NIR News, 10, 4-12, (1999).

151. Rauws EAJ, Langenberg W, Houthoff HJ, Zanen HC, Tytgat GNJ. Campylobacter pyloridis-associated chronic antral gastritis. A prospective study of its prevalence and the effects of antibacterial and antiulcer treatment. Gastroenterol 1988;94:33-40.

152. Reich G. Mechanism and optimization of plasticizers in soft gelatin capsules, Pharm. Ind., 56, 915-920 (1994).

153. Reich G. NIR spectroscopy An alternative approach to assess the mechanical performance of hard gelatin capsules, AAPS PharmSci. 2001, article 1830.

154. Reich G., Frickel H., Gil Bernabe A. M. Use of near-infrared transmission spectroscopy to detect batch-to-batch variability of hard gelatin capsule shells, Pharm. Sci. Suppl. 1. (1999).

155. Reich, G. Near-infrared spectroscopy and imaging: basic principles and pharmaceutical applications, Adv. Drug Deliv. Rev., 57, 1109-1143. (2005). 79 и

156. S. Wold. Chemometrics; what do we mean with it, and what do we want from it? Chemom. Intell. Lab. Syst., 30, 109 (1995).

157. Sekulic S. S., Ward H. W. et al. (1996). Aldridge, Online monitoring of powder homogeneity by near-infrared spectroscopy, Anal. Chem., 68, 509-513.

158. Sinsheimer J. E., Poswalk N. M. (1968). Pharmaceutical applications of the near infrared determination of water, J. Pharm. Sci., 57 2007-2010.

159. T. Andersson. High-performance liquid chromatographic assay for human liver microsomal omeprazole metabolism. J. Chromatogr., 619(2), 291-297 (1993).

160. T. Norris, P. K. Aldrige, and S. S. Sekulie, Analyst, 122, 549 552 (1997).

161. The United States Pharmacopoeia XXX (USP XXX) (2007).

162. Valker J., Frost J., Molt K. // J. Molec. Struct. 1997. 410. P. 573.

163. Vanderhoff B.T. Proton Pump Inhibitors: An Update / B.T. Vanderhoff, R.M. Tahboub // American Family Physician. 2002. - № 15. - p. 273-283.

164. Weng Li Yoon, Near-Infrared Spectroscopy: A Novel Tool to Detect Pharmaceutical Counterfeits, APR, 2005, Volume 8, Issue 5, on pages 115-119.