Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Разработка технологии жидкого и гранул с полисахаридами из чашелистиков гибискуса Сабдариффа

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАЗООХРЛНБШ И МВДИШьСКОЙ р^ ^д ПРОЖШЕШЮСТИ Р£

ПЯГ.ГСГС!ОЙ. ГОСУДЛРСТБЕШИЙ ФАРМЩ5ВТНЧКСКЙЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

/ V мИЗЗ''*-'-

АСИМ МОХАМЕД АЕБЛС АХМЕД

УДК 615.451.16'453.3:5'!7.450:582.79б] .012 (043.3)

РАЗРАГОТКА ТЕХНОЛОГИИ ЭКСТРАКТА ЖИДКОГО И ГРЛ11/Л С ШМСАХАВДШ! ИЗ ЧАШЕЛИСТИКОВ ПШ1СКУСА

ели тш

15.00.01 - технология лекарсг. и

организация фэрмацеЕтического дела

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

ПЯТИГОРСК 1994 г.

. ■ А

I

у

Работа вполнона в Пятигорском фармацевтическом института.

Научный руководитель: доктор фармацевтических наук,

профессор 1ШУК0В ЗЭ.Г.

Научный консультант: доктор биологических наук,

профессор БАНДШОВА В.А.

Социальные оппоненты:

Доктор фармацевтических наук, профессор МОЛЧАНОВ Г.И. Доктор фармацевтических наук,профессор ЧИЮМЗИТЬКО В.А.

Ведущая организация - Пермский фармацевтический институт

Зашита состоится ......1994 г, в

....... часов на заседании специализированного совета

Д.084.45.01 по зашитаы диссертаций при Пятигорском фармацевтическом институте ( 357533, г.Пятигорск, пр.Калинина,II ).

С диссертацией можно ознакомиться п библиотеке Пятигорского фармацевтического института.

Автореферат разослан " ............1994 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, доктор фармацевтических наук,

Е.В.К0МГШЩЕ8А

ВВВДЕНИЕ

Актуальность проблема» Б настоящее время во всем мире большоо внимание удаляется разработка препаратов растительного происхождения, имевших существенное преимущество перед синтетическими. При этом выбор объектов исследования часто базируется на опыте народной медицины. Так, в странах Среднего Востока в народной медицине широко используются цветки и чашелистики гибискуса са бдя риф*«, в качестве гипотензивного, спазмолитического и антимикробного сродства.

Гибискус сабдариффа культивируется в Судане и является тредмвтом экспорта, а внутри страны используются чашелистики, ■■лавныы образом, в пишевой промышленности для приготовления трохладительнык напитков, компотов, желе и т.п. В официальной медицине Судана чашелистики гибискуса сабдариффа не использугот-;я, препаратов медицинского назначения из этого сырья страна ^е производит. В атоД связи органы здравоохранения Судана обратились в Пятигорский фармацевтический институт с просьбой зазработать на базе чашелистиков гибискуса сабдариффа препарат 1ля медацинского назначения.

Цель и задачи исследования. Целью исследования является »заработка технологии яидкого экстракта чашелистиков гибискуса ¡абдариффа, а таквд способа выделения полисахаридов из ирота ; получение гранул на их основе.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить ледуюшие задачи:

• выявить ыорфюлого-анатсмические особенности сырья - чашелистиков, позволяющие отличить их от цветков; исследовать состав биологически активных соединений, содержащихся в чашелистиках, выбрать показатель для. количественной

оценки качества сырья и экстракта кидкого ;

- разработать метод количественной оценки качества сырья и экстракта по избранному показателю ;

- провести исследования по выбору оптимального экстрагента

для производства экстракта кидкого ;

- разработать кормн качества на чашелистики гнбгскуса сабда-риффа по содержанию действующих и экстрактивных велеств к влажности ;

- определить технологические показателя качества сырья, коэффициенты: съема готовой продукции, поглощения, образования внутреннего сока и увеличения объема при растрорешш экстрактивных вешветв ;

- провести теоретические и экспериментальные исследования

по разработке оптимальных условий экстрагирования при производстве экстракта кидкого ;

- разработать нормы качества на экстракт гибискуса сабдариффа жидкий по содержанию фармакологически активных и сухих • вешеств, концентрации спирта и плотности ;

- разработать условия экстракции и выделения полисахаридов из шрота чашелистиков гибискуса сабдариффа, остающегося при производстве экстракта шцкого ;

- разработать нормы качества на выделенные полисахариды ;

- разработать технологию гранул с полисахаридами гибискуса сабдариЛфа и установить нормы их качества ;

- провести фармакологические исследования экстракта едкого и гранул с полисахаридами.

Гпучная новизна. Впервые установлено, что для количественной сценки чашелистиков гибискуса саСдари^фа и соот^отствушсго экстракта жидкого, показателем качества «оке-, служить содержание

основного фармакологически активного ветества - ангоцианов.

Для их количественного определения в сырье и препарате, разработки споктросТ-отомстричеоиий метод анализа.

Впервыо разрабоганн нормы качества на чаиолистики гибискуса сабдариффа по содергтанию ан-тоцианов, экстрактивных веществ и влажности. Эти норки мшут быть положены в основу НТД на чашелистики гибискуса еабдариффа.

Впервые разработана технология экстракт? гибискуса саб-дариффа гадкого, обеспечивавшая эффективность экстракции сырья на 90?' . На экстракт гибискуса сабдариффа жидкого установлены научно обоснованные нормы качества, учитывавшие качество исходного сырья и фактическую эффективность предложенного способа экстрагирования. Нормами, харакгеризушими качество прэ -парата, являются: содержание аьтоцианов, сухих веиестз, концентрация спирта и оло'гность.

Впервые разработаны технология экстракции и условия выделения полисахаридов из шрота, остающегося после получения экстракта, что делает переработку чашелистиков гибискуса сабдариффа безотходной. Па базе полисахаридов разработана технология гранул и установлены нормы их качества.

Биологические и фармакологические исследования, проведенные на базе Пятигорского фармацевтического института, показали, что экстракт гибискуса сабдариффа кидкий штат быть использован в практической медицине: для лечения инфекционных заболеваний, вызванных патогенными стафилококками, энтеробактериями и бациллами, как капилляроукрепляшее, адаптогенное средство, как защитное средство от токсического влияния на организм алкоголя, водорастворимые полисахариды из чашелистиков гибискуса сабдзриф-фа могут быть использованы иан антиаллергическое средство, что

-А -

подтверждается приоритетной справкой по авторской заявке ¡? 93-017301/14 ( 016478) от 12.04.93 г.

Практическая значимость ь внедрение результатов исследования« Установлено, что содержание антоцианов может служить показателем для оценки качества чашелистиков гибискуса саб-дариффа к соответствующего экстракта. Разработанный спэктрофо-тоыетршеский метод количественного определения антоцианов в сырье и препарате позволили установить нормы качества на сырье и препарат, что является основой для НТД на соответствующие объекты.

Разработанные нормы позволяют контрольным органам здравоохранения осуществлять надзор за качеством чашелистиков гибискуса сабдариффа и соответствующего экстракта. Предложенные препараты чашелистиков гибискуса еабдариффа: экстракт жидкий, водорастворимые полисахариды и гранулы на их основе, пополнят арсенал лекарственных средств, применяющихся в практической медицине.

Для производства пр'здлоиенных препаратов разработана технология, не требуюшая слоя-лого оборудования и обеспечивающая " высокую эффективность экстракции сырья.

Все это особо важно для Судана - страны, располагавшей мошной сырьевой базой и обратившееся в этой свя и в Пятигорский фярмацеьгический институт с просьбой о создании из чаиедис тиков гибискуса еабдариффа препаратов медицинского назначения и разработке технологии их производства.

Результаты научно-исследоьательской работы будут использована в Судане при разработке нормативно-технической документации на сырье и препараты, а также при организации производ ства предложенных препаратов.

ППЯОТЧОНПЯ. В;)ПВПГЧП»Ш НЯ Я ВОТ) Ту.

Ка зьилту выносятся слвдутив шноьямв пиложония, характеризующиеся научной новизной:

- Цитохимические исследования чашелистиков гибискус» сабдариффа ;

- обоснования к использованию антоциянов » качестве показателя для количественной оценки качества ч.чмзлисгиков гибискуса сабдариффа и соответствующего пкстракг», я тяккэ спектро-фотшетрическиЯ метод их определения в сырье и препарате ;

- теоретически и экспериментально обоснованная технология экстракта гибискуса сабдариффа яидкого, отличающаяся о? принятой тем, что с целью повышения степени истощения сырья

до 90* экстрагирование проводят способом реперколяции с завершенным циклом в батарее из б диффузоров при соотношении фаг 1:1,8 .обеспечивающем контакт сырья с экстраген-том на шести ступенях якотракции ;

- технология комплексной переработки чашелистиков гибискуса сабдариффа, позволявшая кроме экстракта жидкого получать из шрота и водорастворимые полисахарида ;

- технология гранул с водорастворимыми полисахаридами гибискуса сабдариффа, способ оценки их качества и раэрабоганные нормы качества ;

- результата изучения фармакологической активности экстракта жидкого и полисахаридов, полученных из чашелистиков гибискуса сабдариффа.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на региональных конференциях по фармация и фзрыакологии ( г.Пятигорск 1991-1993 г.г. ), на межобластной практической конференции в г.Томске - 1991 г., на юбилейных конференциях

мед.институтов в г.Курске (1991 г. ) и в г.Уфе (1991 г. ).

Связь задач исследования с проблемным таном фармацевтических каут.'.

Диссертация выполнена в соотвотствии с планом научно-исследовательских работ Пятигорского фармацевтического института ( К' гос.регистрации 01910000619 ) и соотвотствует проблеме № 4802 научного совета № 4-8 "Фармация" АМН Рф,

Публикации. По темо диссертации опубликовано 8 работ, имеется приоритетная справка по авторской заявке № 93-017301/ 14(016478).

Объем я структура диссертации. Диссертация изложена на 166 странигах машинописного текста. Состоит из б глав, выводов, списка литературы, включавшего 219 источников, из кото-рЕ-'Х 70 иностранных, иллюстрирована б схемами, 0 рисунками и 27 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

I. Фигохимические' исследования чашелистиков гибискусасаб-

да^яффа,

Чателисккя гибискуса сабдариффа, по данным литератур», содержат органические кислоты, протеины, в состав которых входят 13 аминокислот, полисахариды, флавоноклы и антоцианн.

Нами из спирто-видны* извлечений чашелистиков гибискуса сабдариффа с применением хроматографии - бумажной, тонкослойной, колоночной, высокоэффективной жидкостной хроматографии к гельф«лътрации через сефадекс пли молселвк" выделены флавоноида, котсрие, по данным кислотного гидролиза, физическим константам и УФ-спекграы в присутствии иормзирувших и к.;мплексообразушйх добавок идентифицирована как кверцетян,

киряцстин, гибисцебин и ого 3-плокозид гибнсцетрин. С применением гелт,-фильтрации через молсолект вами виделвин антоциа-нч: дедьфишдин-3-самбубиозид, цианидин-Э-самбубиозид, циани-д::н-3-г.-токсзид и цкапядлн. Последние два соединения в чашелистиках нами обнаружены впервые.

В литературе отсутствуют данные о составе фенолкарбоко-знх ветесть, обладающих разнообразным фармакологическим действием. Нами в спирто-водннх извлечениях: чашелистиков гибискуса сабдариффа хроматографнческим методом идентифицированы кофейная и хлорогеновнэ кислоты, а методом ЮЮС определен» О-кумярлвая, П-кумарсвая, феруловая кислоты и еше две неидеи-ч'ифяцировлнные кислоты.

Изучение состава элементов показало, что чашелистики со-лертат достаточное количество макроэлементов - калия, натрия, магния и кальция. Отсутствуют токсические элементы: висмут, мышьяк, уран, торий, сурьма.

Изучение водных извлечения из чашелистиков показало, что в сырье содержатся водорастворимые полисахариды в количества 10,2-13,8?..

Разработка методов анализа сырья и экстракта тадаого

Для количественной оценки качества чашелистиков гибискуса сабдариффа и экстракта гадкого ш сочли целесообразным в число показателей ввести содержание антоцианов.

Для количественного определения антоцианов в сырье и экстракте нами разработан спентрофотометрич'?ский метод, основанный на изменении оптической плотности испытуемого объекта в сравнении со стандартным раствором конго красного, светопоглошав-ность которого подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера.

Измерение оптической плотности извлечений из растительного

сырья, при оценке его качества, или пкстрлкта проводят в кювете с толщиной слоя 1,0 см при дчикв волны 510 им. Параллельно измеряют оя.'ичоскую плотность стандартного раствора конго красного на 70£ этаноле с кснцаитрвцией 10"^ г/мл.

Выбор окстрагента

Быбор оптимального экстрагента для производства жидкого пкотракта проводили путе): изучения якстрпгируюшей способности водных растворов отанола различной концентрации. Критерием оценки различных опытов служило количество антоцианов и сухих вепеств, извлекаемых различными экстрагонтпш. Результаты опытов показали, что лучшим экстрагентом ямяотся 70% раствор этанола.

Разработка норм качества на чашелистики гибискуса сабда риффа

Нормы качества на сырье по содер'. ни» антоциннов и экстрактивных вешеств разрабатывали, исп'-.гьзуя в качестве якстра-гонта, 70Й раствор ятанола, Содержание антоциянов в сырье определяли по разработанной нами методике, содержание зкет-рактивкнх вошеств по методике ГФ XI. Кроме того, качество сырья оценивали по содержанию влаги. Изучению подвергали чашелистики, заготовленные в различных регионах Судана, Йемена и Египта за три года ( таблица I ).

Результаты исследования позволили установить нормы качества на чашелистики гибискуса сабдариффа. Зткки нормами являются:

- содержание актоцианов-не менее 2,1% ;

- содержание зкетракгивных вешеств-ке менеа 30£

- влажность, обеспечивающая стабильную сохранность сырья -на более 13ь.

Таблица I

Результаты анализа чашелистиков гибискуса сабдариффа

!.'есто Содержание вешеств , %

сбора -

сырья ¡экстрактивных: антоцианов

Год заготовки сирья

1990 1991 1992 1990 1991 1992

СУДАН:

Алрауад 33,70 34,21 34,80 4,12 3,78 3,91

Нияла 35,50 33,09 33,07 4,20 4,02 4,18

Умруаби 30,21 32,15 31,02 1,97 1,58 3,42

Алрахад 30,20 30,97 32,40 2,29 2,45 3,84

ЕГИПЕТ:

Каир 30,25 31,78 30,68 1,48 2,24 1,78

ЯШ01:

Аден 30,45 30,25 30,14 1,91 2,34 1,89

П. Оценка качества чашелистиков гибискуса сабдариффа по товароведческим и технологическим показателям

При производстве гадких экстрактов большое значение имеет качество сырья. К показателям, определяющим качество продукции, относятся: содержание фармакологически активных и экстрактив-нмх веществ и влатаость. Эти показатели характеризуют качество сырья как товара, а потому их принято называть товароведческими показателями качества сырья.

Вместо с тем, для расчетов эффективности различных способов экстрагирования, прогнозирования и но рмярования качества тидких экстрактов и настоек, а также научной организации и реализации различных способов экстрагирования необходимо располагать дополнительной информацией о технологических параметрах лекарственного растительного сырья.

Обычно технологические параметры сырья принято выражать через соответствуйте коэффициенты: погловения, образования внутреннего сока, сыэмл готовой продукции, увеличения объема при растворении пкстргшгившх: вошеств.

Коэффициент поглощения слупит мерой объема экстрагента, поглощаемого единицей массы сырья при его набухании.

Коэффициент съема готовой продукции служит марой объема раствора, образующегося в порах частиц единицы массы сырья после это набухания и растворения в подложенном экстрагенте экстрактивных ветеств и влаги С воды ) содержащихся в сырье.

Эта информация необходима для расчетов эффективности равновесиях способов экстрагирования.

Коэффициент увеличения объема при растворении экстрактивных всшеств сдушт мерой прироста объема жидкости при растворении в неЯ единицы массы экстрактивных веществ. Используют при прогнозировании и нормировании качества жидких экстрактов и настоек.

Определение товароведческих показателей сырья

Качество 4 образцов сырья оценивали по содержании антоциа-нов р экстрактивных ва.чсгв X и влаги В .

Таблица Z

Результаты определения товароведческих показателей сырья

образцов Р {%) в Ш X ( %)

I 4,18 9,03 33,7

2 4,12 10,38

3 4,02 8,99 33,9

4 4,20 7,42 ЗЬ,5

Определение Т'з\1ь-л> гичсмких показателей сырья

Для определения к <.-:>,У^иггжт' а: поглошвнпя Кп , образования внутреннего еокч К и ужчичрцня обьема при .ютпореши экстракта..них вешоств 2. ми ноопаль.'юмлниь и зостной мотодикой их одновременного спродечения.

Опяты проводили на тех же Л образцах сырья. Резулз гати опн-тоь позволили установить средою значения искомых коэффициентов:

Кп = 0,79 см3/г ; К =1,12 смэ/г ; И ■= 0,867 см3 / г

Разработка методики определения коэффициента С1 еыа готовой продукции

На кафедра технологии лекарств Пятигорского фармацевтического института доказано, что для повышения эффективности экстракции скрья необходамо увеличивать не только число диффузоров в батарее, но а коэффициент съема готовой продукции (соотношение фаз ) до значений, при которых обеспечивается "зеркало" на каждой ступени экстракции. Учитывая изложенное, мы задались целью установить оптимальное значение коэффициента сьема готовой продукции при производстве экстракта гибискуса сабдариффа чпдкого, для чего потребовалось разработать методику определения этого параметра экстракции. Итогом исследований явилась меТ'--ша, суть которой в следушем: около 50 г сырья ( фиксирз ч/ У ) измельченного до частиц размером не более 5 мм загружа л1 в д.'ффузор, уплотняют его вибрацией до прекращения изменений в объеме, фиксируют его уровень прижимной решеткой, заливают сирье избытком экстрагента и оставляют набухать. После прекращения снитения уроъня жидкости избыток сливают, совыения ее уровень с уровнем прижимной решетки. Жидкость, оставшуюся в диффузоре, полностью сливаю? в цилиндр и

изменяют ее сбьеы ( фиксируют ¿¡г ).

По результатам анализа емчисляют значение коэффициента

с

съема готовой продукции по формуле: Ц -

з

Результаты грех параллельных опытов по разработанной методике позволили установить сроднее значение коэффициента съема готовой продукции ^ =1,8 см3/г.

Ы. Разработка технологии и корм качества оксграктя гибискуса сабдариффа тадкого

Разработка технологии

Способ гжстракции сырья, предлагаемый для производства гадкого экстракта долкен обеспечивать максимальную оф^ектявность. Под эффективностью пкстракции принято понимать степень истощения сырья в процентах.

Метода расчета эффективности реперколяции с завершенным циклом связывают зависимостью объемы внешнего и внутреннего соков с числом ступеней { диффузоров ) экстракции.

Объемы внутреннего и внешнего соков можно внртзить через соответствуювип коэффициенты: образования внутреннего сока К =1,12 см3/г и съеыа готовой продукции у = 1,0 см3/г. Тогда отношение у к К составит: £ = 1,8 / 1,Т2 = 1,7.

Значения К и у , а следовательно и £ на каждой ступени экстракции остаются постоянными. Таким образом, поиск условий, обеспечивающих квксимальную эффективность зкетракции сводится к изучению числа ступеней экстракции или числу диффузоров в батарее. Теоретические расчет оффектизьости реперколлвди с завершенные циклом проводили по известному уравнению для Сатчрви с числом ди^'зоров от 3 до 7.

Результаты расчетов, изображенные графически ( рис.1 ^ пг-кпэывдют, что эффективность пкетракции икиет суиаственкыЯ рост

при увеличении числа диффузоров ч батарее до б. При этом эффективность экстракции составляет S = 95%.

л

% 05,SO

Рис,1. Г]""',1:ческое изображение функции S = ffo) при ^ = CO/ír¿'¿

tt

Итогом проведенных исследований является технология экстракта, суть которой в том, что сырье экстрагируют в батарее из б диффузоров при соотношении фаз 1:1,8 ( у= 1,0 см3/г ) Экспозиция настаивания сырья с пкстрагентом на каждой Из б ступеней экстракции составляет соответственно 8,15,8,16,8,16 час. Ото создает условия, при которых все операции вписываются з pe^iM рабочего дня.

Гкпгрлгировчпие сирьл в батарее проводится по принципу противотока. íleo шесть доз экстрагента при таком способе экстрагирования подаются в первыИ диффузор. После ввода в работу всех диффузоров батареи отбор всех шести порция экстракта производят ил головного шестого диффузора, при этом, с началом отбора готопоП продукции впведят поочередно из работы квостовме дифЬ'эиря с отработанным енрьем и ставят их на лтда.ку спирта. Всо и»зсть порцуП извлечения объединяют, тоа-re.tbiio перемегивапт я отстпквпэт при температуре не гыае о°С г течение нескольких суток, после чего фильтрую:, проводят

оценку качества к, если ее результаты удовлетворительны, направляют готовый экстракт на фасовку.

Предлагаемая нами технология экстракта гибискуса сабдариффа жидкого экспериментально проверена в лабораторных: условиях на 4 образцах различного сырья. Качество сырья оценивали по содержанию экстрактивных вешесгв X и антоцианов £ , качество якстракгг по содержанию сухих веиоств С и антоцианов Л . По дать» анализа сырья и препарата, массе сирья и объему

экстракта <£• рассчитывал;! фактическую эффективность экстрагирования $ ф по формулам:

„ _ 100 8с _ . с 100 6Л

= ~ > = "Я"/"

Результаты опытов показывают, что эффективность экстракции Фактическая £ф близка к теоретически вычисленной В = 95 Й ( таблица 3 ), что является основанием для рекомендации к приме нению разработанной нами технологии в промышленном производстве экстракта гибискуса сабдариффа яидкого.

Таблица 3 Сравнительные данные £ и £ ^ .

"0 X > € С -А $

_ио___ т . [1Л (см3 ■) (%) (%) (36) со

300 . 33,7 4,18 535,0 17,00 2,10 89,96 95,0

300 34,9 4,12 540,0 18,20 2,12 93,86 95,0

300 33,9 4,02 540,0- 17,40 1,97 92,38 95,0

300 35,5 4,20 5-10,0 18,34 2,17 93,00 95,0

Разработка норь качества

Нормы качества на экстракт гибискуса сабдариффа кидкий ус-

- К -

таш вливали по содержанию актоциласв, сухих вешеств, концентрация спирта и плотности. Для нормирования качества препарата по приведенным показателям мы воспользовались методом разработанным на кафедре технологии лекарств Пятигорского фармацевтического института.

Нормирование качества препарата проводили в два этапа. На первом -)таг.о определяли экспериментально фактическую эффективность способа экстрагирования, но втором - проводили теоретический расчет норм качества продукции. Низший предел норм качества экстракта по содержания антоцизнов Хц и сухих ве-яеств рассчитывали дая сырья с предельно низким содержа-

нием антот^пнов fi - 2,23 и экстрактивных зешеств Хн =30,ОЙ л максимально допустимой влажностью Вы = I3Í.

Нижний предел качества препарата по содержакт спирта Рн и верхний пэедел его плотности fy рассчитывали для сырья с максимально возмотемй содержанием экстрактивных зотеств Хм = и предельно допустимой влажностью Ви» 13%, Проведенные исследования показали, что экстракт гибискуса :абдариф{а жидкий должен иметь следующие показатели качества: - содержание антоцианоя не менее 1,02* ;

• содержание сухих вешеств не ыегее Г1,88£ ;

• концентрация спирта на менее 5 !, 2 ;

• плотность не более 0.9.У7Т г/сы3,

Экспериментальная проверка разработанных норм качества на кстракт подтвердила их обоснованность.

У. Разплг'стка технологии выделения подисахаш тов из тоста чааелистиков_гийпскуса_сабд2т>иФ15_и создание лекарственной дгют т кг. основа.

При производстве жидного экстракта из чашелистиков гибискуса сабдариффа в качестве экстрагента используется 70% этанол Полисахарида в эт.ом эксграгенге не растворяются и поэтому остаются в щроте, причем их содержание составляет 10-13Й. Это дает право рассматривать шрот как сырьевой источник для получения полисахаридов, что и явилось основанием для исследований 1 этом направлении.

Поиск оптимальных ус. ? • .-¡й экстрагирования полисахаридов

из шрота

Шрот чашелистиков может перерабатываться в двух вариантах: первый - на специализированном предприятии, куда он поступает после высушивания; второй - внутри одного предприятия без высушивания.

Условия экстрагирования шрота сухого

Для научней организации процесса экстрагирования ирота сухого нами установлены технологические показатели качества шрота по методикам приведенным ранее, и качестве экстрагента использовали воду дистиллированную. Данные трех параллельных опытов позволили установить среднее значение Кп = 1,02 см3/г; К = 1,14 см3Уг; у = 1,8 смэЛ\ Это позволило установить значение £ = У/К = 1,8 / 1,14 - 1,58.

Поиск условий обеспечивающих высокую эффективность экстракции полисахаридов из шрота показал, что в батарее из б диффузоров теоретическая эффективность экстракции может составлять

£ = 93,2«.

Опыты показали, что экспозиция настаивания на каждой ступени экстракции при температуре 90-95°С долкна состаачять один чйс. Таким образе ,1, определены все условия для реализации спо-

сойя реперколяции с завершенным >:,иклом при экстрагировании полисахаридов из шрота.

Этичч условиями являются: батарея из 6 диффузоров, соотно-лсиив газ 1:1,8 Су- 1,8 см3/г ), температура 90-95°С , лкгпоз.'.пия настаивания на каядой ступени экстракции I час.

При птих условиях концентрация полисахаридов в извлечении составляет около &%, чего нельзя добиться другими способами г итерирования.

Уочовия экстрагирования шрота влажного

Экстрагирование полисахаридов из шрота влажного внутри одного предприятия следует проводить в той та батарее диффузоров, в которой нарабатывался *идкг:Й экстракт. После вывода из рябпты хвостового диффузора производят отгонку спирта из шро-тя, шрот при этом насыщается водой и, поптому отпадает ну-:да учитнвпть поглощаемость сырья. П!рот заливают горячей дистиллированной водой соблюдая при зтоы соотношение флз равное 1:1,8.

Экспозиция настаивания на каждой ступени зкетракцли зависит от интервалов, через которые выводится кз работы каждый очередной хвостовой диффузор. Таким образом, определены условия пкетракции полисахаридов из прота сухого и илажсго.

Полученное извлечение подогревают до 90°С, для снижения вязкости, фильтруют И посла пхла^дэния *вделяпт полисахариды путем добавки двойного объема 90г> птаноля.

На выделенные полксахаридн-субстпнциго разработаны нормы качества.

Разработка ссстава и технологии гранул полисахаридов

гибискуса са5яари,Ма

Одной из лекарственных фор-», об5СпетизлЕст:г стабиль»: -

и позволявшей улучшить вкусовые качества полисахаридов являются гранулы.

При разработке технологии к состава гранул были изучены различные сочетания полисахаридов с глвкозой, сахарозой, молочным сахаром и лимонной кислотой. В качестве увлажнителей в различных опытах были использованы: вода дистиллированная, спирт этиловый 96?. и 40? и сахарный сироп 205.

Критериями оценки качества гранул, полученных с ргзличными наполнителями и увлажнителями, являлись: их прочность на истираемость, распадаемость, внешний вид и вкус.

Результаты опытов показали, что самой высокой прочностью, удовлетворительной распадаемостью, стабильностью при хранении и хорошими вкусовыми качествами обладают гранулы следующего состава:

- полисахаридов - 10%

- сахарозы - 88?£

- лимонной кислоты - 2%,

получаемые с использованием в качестве увлакнителя 40?. раствор этанола. Проведенные исследования позволили рекомендовать технологическую схему производства гранул, отвечающих всем требованиям статьи ГФ XI "Гранулы".

Контроль качества гранул мы предлагаем проводить по содержанию полисахаридов, количество которых определяется путем осаждения двойным объемом 9&% этанола из раствора 2 г гранул в 50 мл воды с последующим определением массы высушенного осадка.

Кроме того, мы предлагаем качественную реакцию на нейтральные полисахариды с раствором едкого натра ( осадок полисахаридов дает желт е окр'.шивание ),

Для отличия полисахаридов, от :ектинов мы предлагаем использовать ЮЙ раствор кальции хлорида, который полисахарида из зотчого раствора не осаждает, тогда как с пектинами образу-эт осар 'К.

Нор-'.н качества на гранулы разрабатывали по содержанию полисахаридов и влаги. Опыт» на 3 сериях гранул показали, что содержание полисахаридов в гранулах должно быть не менее 7,2Й, а влажность не более 6,7*.

У1. Биологическое и фармакологическое действие экстракта

бискуса сабдариффа

Антибактериальное действие экстракта чястолистинпв гибискуса сабдарифТ-а падкого изучали методом двухкратных серийных разведений а плотной среде - питательном агаре (ГШ на 12 тест-яультурах: па I видах ппгогенннх стафилококков, Ъ видах робакторий 3 видах бацилл. Результаты опытов показали, что антибактериальное действие экстрактов прояатялось на вое тест-культури.

Отот факт свидетельствует о возмо^юсти применения окстрчк-та з практической медицине для лечения заболеваний, вызванных патпгонними стафилококками, эитеробантераями и бациллам.

¿лиянио_экстрчнтя_ня осяистентность клшлляпов изучали с помощью аппарата для определения проницаемости кои типа КГ!К-5. а -ячестве препарата сравнения использовали рутин. Лров^п.еннь'э исследования пс.кпзлли, что экстракт гибискуса зчбг.апи'Ыз ».ип-кий подобно рутину обладает кяпиллярпукрепляюсим деЛг-.-вием.

Зяситноэ действие экстракт пр'л алкогольном с.тэта-г-чя -туча "и на белых крргмх. Пер so Я груиг.я крм ззогили яерчрал - з

помошью иглы с оливой по I ил 70Й этанола, второй - по Т мл 70? этанола и по I мл экстракта жидкого, третьей - по I мл экстракта жадного. Опыты описанным способом проводили ежедневно в течеше 7 дней. Критерием оценки опытов являлись вменения в составе крови, а также данные наблюдения за поведением животных. Эксперименты по изучению изменений картины крови под влиянием алкоголя позволили установить, что изменение состава крови достоверно только в отношении моноцитов и : озино-филов. При введении животным в хроническом опыте ~танола наблюдалось значительное угнетение их состояния и сдвиги в составе крови: эозинофиллия и моноцитспения. В опытах с сочетанием этанола и экстракта и только экстракта изменений в составе крови и поведении животных не замечено. Это дает право считать, что экстракт яидкий оказывает защитное действие от токсического влияния на организм алкоголя.

Адаптогенную активнос,ть_экстракта при гкпобарической гипоксии изучали на морских свинках. В барокамере с тавотными создавали разряжение 180 ым.рт.ст., что соответствует подъему на высоту Г0500 и над уровнем моря. "Подъем и спуск" производили со скоростью 100 м/сек.

Первой группа тиеотных вводили экстракт в дозе 0,02 мл/кг, второй - 1,0 мл/кг за 40 мин.,до опыта, третьей - контрольной, вводили физиологический раствор с добавкой этанола в количестве соответствующем его содержанию в экстракте. Об адаптации животных судали по времени их пребывания на заданной высоте до наступления судорог.

Результаты эксперимента показали, что время пребывания ви-вотных в барокамере посла введения экстракта в дозе 0,02 мл/ю и 1,0 мл/кг уве.те шваег.ся в сравнении с контролем на 264ь и

\

318:1 соответственно. Это являв;.;я основанном для вывода, что пкстракт жидкий повышает устойчивость морских свинок к этому виду гипоксии,

Исследования &нтианафилактического действия водорастворимых полисахаридов ип чашелистиков гибискуса сабдарнффа и гранул на их основе проводили ira модели реакции пассивной кочпюй анафилаксии ( РИСА ) у крыс, опосредованной антителам класса

[ « которая является общепризнанным методом для оценки антиаллергической активности вешеств.

Результаты опытов показали, что исследуемый полисахарид по своей антиаллергичесяой активности аналогичен препарату сравнения дк азолину.

Основньга выводы

1. Изучен состав полифенолънмх соединений в чашелистиках гибискуса сабдариффа. Установлено наличие антоцианов: цнанидин-3-сямбубиозидя, цианидин-3-глшоэидз, пиянпдина, дельфинидин-З-сямбубисзида; флапонпидов: кверцетина, кечпферола, мирице-тина, гибисцетина и его З-гликозида ( гнбисцитрина ); фекол-карбоновмх кислот: орто- и пара-кумаровой, феруловой, хло-рогенопой и кофейной.

-Количественное содержание аьтоциянов колеблется в пределах от 1,2 дл 4,2'*. н.ч абсолютно сухую массу сырья.

2. Установлено, что в чашелистиках содертатся от ТО до IV, полисахаридов С выход водорастворимых 0.CÎC, пектиновых ветеств 2,-1?>, гекицчллплоа - Q,S"- ) . Б составе водорастворимого полисахарида обнаружены Ù -глпкуронезля кислота, I/ - рлмно-за, ù -арабиноза и Ù -галактоза.

3. Определен макро- и мнкроэлсментьнй состав чааелистаяоз. Устэновюно, что з сырье спдергкгся достаточное количество

макро- и микроэлементов; отсутствуют токсические элементы. Полученные данные показывают биологическую ценность чашелистиков, используемых в Судане для получения напитков.

4. На основании проведенных фотохимических исследований сделано заключение о возможности использования антоцианов в качестве показателя для оценки качества сырья и препаратов. Разработан спектрофотоыетрический метод для количественного определения антоцианов в чашелистиках гибискуса сабдариффа и соответствующем гадком экстракте.

5. Разработаны нормы качества на чашелистики гибискуса сабдариф-фа по содержанию антоцианов, экстрактивных вешеств и платности. Эти данные могут быть использованы при разработке НТД на сырье, а в настоящей работе являются исходными для нормирования качества экстракта кидкого.

6. Проведены теоретические и экспериментальные исследования, позволившие установить оптимальные условия экстрагирования при производстве экстракта гибискуса сабдариффа -жидкого, обеспечивающие истощение сырья на 90Й. Этими условиями являются батарея из б диффузоров н коэффициент съема готовой продукции, равный 1,8 см3/г ( соотношение фаз 1:1,8 ).

7. Разработаны теоретически обоснованные кормы качества на экстракт гибискуса сабдариффа жидкий по содержанию антоцианов, сухих вешеств, концентрации спирта и плотности, учитывающие качество исходного сырья и эффективность предложенного способа экстракции. Эти нормы могут быть положены в основу В£С на экстракт.

8. Изучена возможность комплексной переработки сырья с цель» получения из шрота, остающегося после производства экстракта жидкого, во."ораст >оримых полисахаридов.

Разработаны условия окстрактр.н к гмделения полисахаридов, установлены норки их качества по содержанию полисахаридов и алаги.

). Разработана технология гранул с водорастворимыми полисахаридами чашелистиков гибискуса сабдариффд. Установлены нормы их качества по содер'тачию полисахаридов.

0. Биологические и фармакологические исследования показали, что экстракт гибискуса сабдзриффа кидкий может быть ис-попъгзован в практической медицине длл лечения инфекционных заболеваний, виз ванных патогенными стафилококками, энтеробактериями, бациллами; как ^япилляроукрепляюаее и и адаптогепное средство; как защитное средство от токсического влияния алкоголя.

Водорастворимые полисахариды могут быть использованы кок антиаллергическое средство.

По теме диссертации опубликованы следушке работы: Лббап Л.М., Пшукоп Ю.Г., Еандкжова Б.А. Исследование по разработке технологии и ¡¡ори качества на цпеткн н ялдкиП экстракт гибискуса сабдариф»фа П Поиск биологически активных веиестн и проблемы лекарственного обеспечения. Тез.дпкл.туч.конф., посади. 10-лотип фэрм.фякульте-та Т99г.- Уфа, Г991.- с.э_7.

Аб&т Л.!.!., Гангякова Б.Л., Пшукоз Ю.Г.

Макро- и кикооолсмзнтныЗ состав едкого экстракта, полученного иэ паоелистиков гибискуса слб.дарифА' Ц Рягаонэ.-ькая конференция по Ларнэции и фармакологии ' 17; 1902; Пятигорск ): Материя **' ... - Пятигорск, 1992 - о.31. Асим ''охаиог, Аббае, Сатт.Г'КОза Л.А., ГЬухоз 2.Г. Гибискус сзбдэриЛфз - пеосг.витканоа сырь г для гглученг^я

препаратов витаминного действия )} Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востоке: Тез.докл. науч.-практ.конф., посияв. 50-летию фярм.факультета.-1991.-Томск, 1991,- С.158-170.

4. Разработка способов анализа цветков и сухого окстракта гибискуса сабдариффа и лекарстиенных форм на его основе I Саул -кина A.C., Кечатова H.A., Байдакова В.А., Аббас A.M. N Пяти-

5. Разработка технологии и норм качества экстракта цветков гибискуса сабдариффа / Аббас A.M., Пщуков Ю.Г,, Байдакова В.А. и др. У/ Региональная конференция по фармации и фармакологии

( 46; 1991; Пятигорск ): Материалы... - Пятигорск, с. 10-49.

6. Разработка методик анализа антоцианов в экстракте цветков гибискуса сабдариффа/ Асим fá.A,, Пшуков Ю.Г., Байдакова В.А. и др. Ц Актуальные вопросы фирыац.науки и практики. Тез.докл.науч.-практ.конф., посвяш, 25-летию фармац,факультета Курского мед.инстигута: в 2-х ч,- Курск, 1991.— чЛ - с.195,

7. Биологически активные вещества некоторых растений семейства мальвовых / Бандакова В.А., Дигай Л.В., Аббас A.M. и pp. // Проблемы фармации, подготовки и использования провизорских кадров: Материалы рэспубл.мгучн.конф. по фармации и фармакологии,- Пятигорск, 1993,- с.8-9.

8. Полифенолы и полисахариды чашелистиков fhi¿scas Sa¿c¿a/>¿ffa / Асим Мохамед Аббас, Байдукова В.А, Пщуков Ю.Г. и др. 1} Раст.ресурсы,- 1993,- вып.2,- C.3W0.

горек, 1991,-

Деп. ВИНИТИ 29.07.91 ü 3229-1391.