Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Получение и исследование комплексов включения бета-циклодекстрина с некоторыми синтетическими и природными лекарственными веществами

Министерство здравоохранения Российской Федерации Пятигорский фармацевтический институт

На правах рукописи Для служебного пользования Экз.

КОШАНЦЕВА Евгения Владимировйа

ПОЛУЧЕНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ КОМПЛЕКСОВ ВКЛЮЧЕНИЯ р-ЦИКЛОДЕКСТРИНА С НЕКОТОРЫМИ СИНТЕТИЧЕСКИМИ И ПРИРОДНЫМИ ЛЕКАРСЯЯЕННЫМИ ВЕЩЕСТВАМИ

15.00.02 - фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук

Пятигорск - 1992

Работа выполнена в Пятигорском фармацевтическом институте

Научный консультант: заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор фармацевтических наук, профессор Б.Г.Беликов

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, член-корр. Инженерной Академии Наук Украины Н.А.Казаринов

доктор фармацевтических наук, профессор С.А.Листов доктор химических наук, профессор М.Ф.Маршалкин

Ведущая организация - Государственный научно-исследовательский институт по стандартизации и контролю лекарственных средств.

Защита состоится " " 1892 г. в 9

часов на заседании специализированного совета Д 084.45.01 по защитам диссертаций при Пятигорском фармацевтическом институте (357533, г.Пятигорск, лр.Калинина,11).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пятигорского фармацевтического института (пр. Калинина, 11).

Автореферат разослан " " 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета

доктор фары.наук, профессор

ОПЛАЯ ХЛРАЬТЙТСТШ РАБОТЫ

Дугулта ?:сзт?> тс;. Расахренке арсенала лекарственных срздств га счэт псвьжэния качэства и улучшения еиофармэдззтичэския сбойстг: узэ сучаотзуших препаратов представляет одну из важна проблем игуки и практики. С-оздакиэ эеззетв с

пысокс" ^"р:':"ологь'чзс::ой активность» кэрэдко приводит к появления у них побочны?? нежелательных свойств: раздрагзп'дсе действие :;а слпзлступ о5елс"-:;су, неприятный запах и вкус, еысокзя токсичность. Кроне того, з ряда случаев, есть необходимость . изменения гаргахокгнлт^г.слс;:; здрахгерисгос лехгротгзхыэс эсзесгэ.. Ревекке пз:хс.7су.а ука&яипл вопросов достигается о пскз™&» рззли'-таг-: тох^ологнллпкн;: пг;:лус>з; клппул^ропйния, использования пролснгп-тсрзв, сол^шктЬроз, агеорб^ятоз л т.д..

Одним к? керожпишшч путзЗ сояертакет^овячия йю^.ргецеэ-тп'лсскнх слс:;сгп лт^'ротп, ттогчл^нпл и:с гочзотго язллг.тс;; сезда-ялл логаратпота:« смгм ун осг-югр кокппгксоз зклпч-эния цлллодоке-тр'Л'пр. ;-:нтрр?с к ф!хтодя:гстр;шм и их кочплркслч рчл»«.-ския ч '."/рэ во!?1гхк г, последние» РО лот. ОГ) это;; огадотсльзтоуст рост чч-еля пуо.т.изэдгП гго г,там влщэос*»*.*. ¡тгллллжэ ;-копк патентов, а т.ъг.з 1!рОБзд'чп:о гктл мхмукрроднах п^тто51!у>,;па.Неоо'кодйшо отнэ-Т-'ТЬ, 470 СЛГ<?,ГОЛОК1'УЙ прогресс 0 ЙТОМ 1ТЯПГПГ?ЛЗШа ь'зФмдг.отся и в чяп^л етрглм. В тпду гуд*? прлредтаа ксч^эрэнцкд по :-зпж и технология ияотодекстринов.

,":;тг-рэо к Ц'псло.цстолрннг" ягггп ж унитэльисл способностью олрлло-щлть лслллстхы ялна "гость-::«?;:;::!" с ¿лллотлл-

!.л: гл алл'Г'оП <л;т;лсссЛ лрлрол':. Зги лс:ллл-з;:еы о ряд? случае псгзоляс? «знснкть , следовательно,и бя-

с.;лр:.:лцз5Т!1члскко хврзктср::стйкк лекарствен::-? веществ. Одкяяо, е'.фокого 'лспользопаннл хоя1яо«?ео8 вклвчэжя незоэмозяо достичь озз глубокого изучокм реакции згаикодонствкя цгпУздкзяетргшов с лсхарстссяныия пэд?стза>:и. Установление способности различных класеоз лакарствоккьи вепзств образовывать коиилексы вклзэтекия, спрэдолзние гас состава, устойчивости, ивучоииэ физкчйских '/. т-•ШЧЭСКЗК СЕОКСТВ ПОЗВОЛИТ тучно ОбОСНОЕЭТЬ зозмозность использования циклодзкстрююэ для повьпгния хачастга лекарствонш« средств и поэтому является актуальной проблзкой для фармацевтической науки.

Цзяк н езсата кссяадованкя. Целью нашей работы является теоретическое обоснование и практическое использование комплексов включения в-цжлодекстрина для изменения биофармацевтических характеристик лекарственных веществ.

В задачу исследований входило: -изучение возможности образования комплексов включения р-цик-лодекстрика с лекарственными веществами, производными прегнана, изопреноидов, пиримидяндиона, пиридина;

-разработка способов получения и исследования комплексов вклю-чания, изучение их состава и свойств методами растворимости, УФк ЙК-слектрофотокетрии, дифрактографии, термогравиметрии и другими физико-химическими методами;

-сравнительное изучение биологических и йиофармацезтических свойств лекарственных веществ и кх комплексов включения: -определение перспективных направлений использования получении» комплексов включения в фармации;

Теаа диссертации связана с планом научно-исследовательской работы Пятигорского фармацевтического института ( номер государственной регистрации 01910008823 ), проблема 1006 АМН СССР "Фармация". Тема диссертации в 1889 г, рассмотрена и утверждена на заседании Всесоюзной проблемной комиссии "Фармация" научного совета N10 "Фармакология и фармация" АМН СССР.

Научная новизна. На основании систематических исследований, проведенных на ряде широко применяемых и новых лекарственных веществ доказана возможность получения комплексов включения с производными прегнана, изопрена, пиридина, пиримидиндиона и др..

Показана универсальность использования для получения комплексов включения метода "замешивания".Методом осаждения установлен состав образующихся комплексов включения, при этом установлено, что соотношение ЦП - вещество зависит от линейных размеров молекул вещества.

Изучены возможности химических и физико-химических методов анализа.Для исследования реакции взаимодействия ¡з-циклодекстрина с лекарственными веществами: ИК-, УФ-спектрофотомегрия, методы растворимости, дифракции рентгеновских лучей, термогравиметрия, спектрополяриметрия, высокоэффективная жидкостная хроматография. Показано, что возможности и границы их применения зависят от свойств веществ, а таете от константы устойчивости и свойств образующихся комплексов включения.

На основе комплекса физико-химических исследований достоверно доказано образование комплексов включения 23 лекарственных зецоств, относящихся к производным пиридина, пиуммидиндиока, иаопроноидов и прэгнана..Изучай состав шлхлетеоп включения, их устолчивость,терягч8ская стабильность, рассчитаны параметры кристаллической решетки некоторых комплексов включения.

Методом* УФ- и ИК-спектроекогош, епектрополяриыетрии выявлен характер взаимодействия меаду р-циклодекотриноы к исследуешни вществами.

Полученные результаты исследований позволявт теоретически обосновать использование реакции образования комплексов р-цюсло-декетрина с лекарственными веществами з фармзции и слукат ойсс-нованием нового направления по создаю® лекарственных средств с улучт?ннч»!И биофармацзвтичасюши свойствами.

Щякткззсквя ст'дчг-'зсть. В результате исследования коиплек-сов включения лекарственных вецеств различно?! хиютческой природы показана возможность изменения ряда бнофармаиевткческих характеристик. В частности, достигнуто:

-увеличениэ растворимости и, как следствие, улучшение биодоступности (фтивазид, иэгазид, салюзид, производные прэгк^на);

-пролонгирование действия (тримекаин, фтивазид, мзониазид, диз-тиламид никотиновой кислоты);

-перевод зидкях веществ в порошкообразное состояние (производные изопрвноидов, рыбий сир, диэтилашд никотиновой кислоты);

-уменьшение токсичности и раздражающего действия на слизистые оболочки (изониазвд, лентоксил);

-поБшаяиэ стабильности легко окисляющихся и г»дролизука!ихся препаратов (цитраль, ювемон,- рыбий зир, паршцдан, основание па-аюсарпина, диэгиламид никотиновой кислоты).

Исследования в области анализа и изучения биофзр-ацэвтичес-ких свойств полученных комплексов включения явились основой для разработки новых и совершенствования существующих шэтодшс количественного определения исследуемых препаратов и оценки их доброкачественности.

Результаты экспериментальных исследований использованы в подготовке нормативно-технической документации на созданные препараты "Нзокиазид-ОД", "Фтигагэд-Щр, мазь "Скиафетн-ОД" и иате-риалоз, характеризуют их спецкфичэскую активность и безврзд-ность. Созданные на основе коииексов включения препараты "{feo-

- G -

ззгошзд-ЦД" к "Сп2лз::д-ОД" обладают , по сравнении с исходами препаратами, значительным уменьшением токсичности, увеличением продолжительности действия, повышенной биодостулностью. В мази "Синафлан-ЦД" концентрация действующего взцества сокращена в 2 "Сикафлан-ЦЦ"

раза ло сравнения с выпускаемо}- отечественной промышленность;}.

Стспгдь umryzm-z. По результатам исследований получено 3 авторских свидетельства и 3 положительных ресеюш на выдачу последних. Зарегистрированы 15 комплексов включения во ЕШ по безопасности биологически актавизх веществ как вновь синтезированные соединения.

Изучение литературных данных обосцено в виде трех обзоров, опубликованных в центральной печати (журналы "Успехи химии","Хи-мико-фараацевтичаский ауркал", "5армащя'').

Получены заключения о перспективности использования гранул комплекса включения ювеыона в ветеринарной практике от ВШИ ветеринарной санитарии и перспекаквкости препарата "Изониазид-ЦЦ" от Республиканского центра по доклиническому изучения новых лекарственных препаратов и клинической фармакологии противотуберкулезных препаратов.

Материалы по препаратам "Е&кплзлд-Щ" и ''ётемеэд-ОД" получили полоаительнув оценку комиссии по специфической активности Российского Государственного Центра экспертизы лекарственных ерздетв ИЗ РЗ и находятся на дадьнейзаи рассмотрении.

Проекты ESC на препараты "Шоа^таАК-ЦЦ1' и и£*Ш»гзд-ОД" получили положительное закяэчеиие лаборатории экспертизы новых лекарственных ерэдега Российского Государственного центра экспертизу лекарственных средств Ь'З Pu.

¡Материалы по специфической активности и безвредности, проект BSC на казь "С:а^.так-Щ" находятся на рассмотрении Украинского Государственного центра Експертизы лекарств.

Получено заключение от Х$К "Акрихин" о перспективности использования 11Д в микробиологической трансформации стероидов на стадии дегидрирования.

Методика ГПК-определения примесей в препарате нанофин включена в пересмотренную 5С 42-1166-87. Методика определения фтиза-зида в крови внедрена в Московском НИИ туберкулеза МЗ FS. Методики определения гидрокортизона, фтороксипреднизолона ацетонида и ксртексолока в культуралышх кидкостях производства стероидов внедрены в практику лостадийного контроля ОТК ХФЗ "Акрихин".

Методика газо-хроиатаграфического определения цитизина включена э проект изменения £С N42-1231-79 на траву термопсиса очэ-рэднсцвэткового. Методика определения чистоты салюзида используется на Х53 "Акрихуч" для контроля качества салюзида и салюзида растворимого.

По решения центрального методического совета Шй изданы методические рекомендации для преподавателей и студентов "Получение и исследование соединений включения циклодекстрина с лекарственными веществами". Получены акты внедрения от фармацевтических'институтов и факультетов Р5.

С целью дальнейшего развития исследований по созданию новых лекарственных ¿орд ка основе комплексов включения с циклодскст-ркнашг рекомендации диссертационной работы вюточены в отраслевой план НИР (номер государственной регистрации 01810008323) по проблема "Зарняцш1'.

Палргтг'л, га ггтту:

- теоретическое обетование и экспериментальное использование реакции образования комплексов включения р-цихлодекстрика с цэлью изменения биофармоцевтическлх свойств лекарственных веществ;

- обоснование и выбор методов доказательства образования ксгятле-ксов включения и изучения их состава, устойчивости и физико-химических характеристик;

- выбор способов получения комплексов включения на основе физических и химических свойств лекарственных веществ;

- рекомендации к использовании некоторых комплексов включения в фармации.

Апробжцт та;ботн. Фрагменты диссертации докладывались к об-сувдались на III Всесоюзном симпозиуме по молекулярной аидкост-ной хроматографии(Рига, 1834); IV Всесоязном съезде фармацевтов (Казань, 1583), Всесоюзной научно-технической конференции "Актуальные проблемы создания лекарственных форм с заданными биофармацевтическими свойствами" (Харьков, 1898), Первом областном совещании по физической и органической химии с участием ВУЗов Северного Кавказа (Ростоз-на-Дону, 1989), Всесоюзной научной конференции "Актуальные проблемы лекарственной токсикологии" (Москва, 1833), Всесоюзной семинаре "Направленная доставка лекарственных средств" (Москва, 1990), Республиканской научной конфе-

ренции "Реализация научных достижений в практику фармации" (Харьков, 1991), научно-практической конференции "Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики" (Курск, 1981) и пяти научных конференциях Пятигорского фармацевтического института (1888-19б2г.).

Публикации. По теме диссертации опубликована 51 научная работа, в том числа получено 3 авторских свидетельства и 3 полоки-тельных решения на выдачу авторских свидетельств.

Обьш и структура дкссзртацки. Диссертация изложена на 388 стр., состоит из введения, литературного обзора и пяти глав экспериментальной части, общих выводов,списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 48 рисунками и 83 таблицами. Библиография имеет 322 наименования,из которых 197 на иностранных языках, в том числе 51 работа выполнена автором диссертации (самостоятельно или в соавторстве).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Выбор объектов исследования для создания комплексов включения на основе лекарственных веществ производных пиридина,пи-римидошдиона, прегнана, изопреноидов и некоторых других обусловлен важностью лекарств этих классов для терапевтической практики и необходимостью поиска путей устранения характерных для них побочных явлений.

Б качестве объектов исследования выбраны вещества, для которых на основании данных литературы отсутствуют систематические исследования по изучению их взаимодействия с циклодекстри-нами. Все они выпускаются отечественной медицинской промышленностью или находятся на различных этапах внедрения в производство.

Для получения комплексов включения СКВ) в качестве молекулы -"хозяина" использован р-циклодекстрин (ЦД) как наиболее доступный и широко применяемый в мировой практике из всех, выпускаемых промышленностью циклодекстринов. Производство ЦД в экспериментальных количествах налаживается и в нашей стране.

Изучение взаимодействия и установление структуры образующихся КВ проводили, используя современные физико-химические метода,такие как УФ-и ИК-спектроскопия, термогравиметрия, диф-

ракция рентгеновских лучей,спектрополяриметрия, различные вида хроматографии.

ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЦЦ С ДАРСТВЕННЫМИ ВЕЩЕСТВАМИ 3 РАСТВОРЕ

Возможность использования спектрофотомэтрии для исследования процессов образования КВ определяется в основном двумя факторам: величиной изменения светопоглощения и точностью ее измерения.

Как литературные сведения,так и наши наблюдения свидетельствуют о тем, что степень изменения электронного спектра поглощения при образовании КВ мала, по сравнению с изменениями, происходящими при истинном комплексообразовании за счет донор-но-акцепторней связи. Образовало ЬЗ, как правило, не приводит к появлению новых полос поглощения, обычно наблюдается их небольшой сдвиг,а таюте изменение интенсивности сэетопоглощения.

Изменение оптической плотности растзора при образовании КВ зависит от природы полосы поглощения. Если это откосится к полосе поглощения п— ц* перехода, то ее интенсивность с большой степенью достоверности определяется ло уравнении (Катрицкий А.Р. 1566): - . 2

Етах -

¿V

где - частота и полуширина полосы поглоиения>ч см ;

ЗгСг _ сумма плотностей заряда неспасенного электрона.

Т.к. значение ¿¡гс! .например, для гетероциклов с одним и двумя гетерсатсмами азота, находится в пределах 0,3-0,5, а полуширина полос поглощения - 8000 - 5000 см"1 , можно считать, что величина молярного показателя поглощения будет достигать порядка 1-10л, Следовательно, максимальное изменение величины поглощения при образовании КВ не превысит 1*10а - 1-Ю3.

Полученные нами данные показывают незначительные смещения максимумов поглощения исследуемых веществ в присутствии ЦЦ. В большей степени изменяется интенсивность поглощения. Эти наблюдения позволяют сделать вывод, что взаимодействие ЦЦ с препаратами происходит без значительного изменения 1« электронной структуры. На наш взгляд такое изменение поглощения нельзя объяснить однозначно частичной защитой возбужденных электронов в полости ЦЦ (Зге^Ш о., 1682). Мы считаем возможным объяснить

изменение спектров поглощения препаратов при взаимодействии с ЦД образованием водородных связей, т.к. изменение поглощения в присутствии ЦД характерно для веществ, имезздих полосы поглощения п->я* и л->л* переходов Стабл.1).

Там, где обнаружено изменение спектральных характеристик, можно сделать заключение, что взаимодействие ОД с исследуемыми веществами происходит в случае гетероциклических соединений из группы пиримидина и пиридина по типу дипольного и дснорно-ак-цепторного. Только в случае ювемона проявляется типичное тг -электронное взаимодействие.

Анализ изменений светологлощенкя, наблюдаемых при добавлении ЦЦ в различных концентрациях к раствору препарата, позволяет рассчитать концентрационную константу устойчивости комплекса (К).На достоверность определения К шает оказать существенное влияние точность измерения оптической плотности раствора. Получение качественных исходных спектроаналитических данных требует также учета возможных химических превращений в процессе измерения. Исходя из общий формулы К и выражая ее через величины светопоглоцения

дА/д£

К -- , где

(Сп-дА/л В)(Сцй-лА/а£)

Сп - концентрация препарата в моль/л, Сцд- концентрация ЦЦ в моль/л, мокно показать, что основным моментом достоверности К является величина изменения оптической плотности (ДА).

Принятая в литературе погрешность определения величины К не более 10 ?», позволила рассчитать примерную величину да, при которой можно использовать спектрофотометрический метод. Минимальное значение изменений оптической плотности должно быть в пределах 0,06 - 0,1. Оптимизация условий получения исходных спектрсфотсштричесних данных проведена на основании изучения констант ионизации обьектов исследований.

Данные исследований позволили систематизировать оптимальные условия спектрофотоыетрического анализа препаратов производных гшришдиндиона (метацила.пентоксила, 5-фторурацила,фто-рафура, калия оротата и гексаыидина); пиридина (кислоты нико-новой, никотикамида, никодина, пиридоксина гидрохлорида, пар-

Таблица 1

Результаты етгектрофотомэтрического определения константы устойчивости (К) комплексов включения

Вещество ¿В (К±дН).!0' Вещество ЙВ (К±дК>Ю'?

Производные прегнана Производные пиридина

Картекеодоч 1465 1Й,8+2,1 Кислота ни-

Гидрокорти- 1.90! 19,8+2,1 котиновая 253 2,1+0,3

зон Днзтиламид 255 1,5+0,1

Преднизолон 1763 5,2+0,9 никотиновой

Гидрокорти- 2255 4,2+0,4 кислоты

зона оцчгат Никодин 281 0,3+0,08

Фтороксикор- 999 5,3+0,8 Пармидин 230 1,9+0,2

токсолона Зтивазид 2900 10,0+0,1

ацотонид Метазид 1150 27,8+2,2

Триамцшоло- 1933 4,0+0,5 Анабазин 152 0,41+0,07

на ацетонид

Синэфлан 1578 1,8+0,1

Производные изопреноидов 1 гооизэодные пиримидина

Ювемон 3500 3,2+0,03 Пйнтокпил 1158 1,7+0,3

Цитраль 488 4,7+0,1 5-фторура- Т'ГАГТ 500 11,5+2,9

Фторафур 720 2,5+0,2

Нялия оро- ИЗО 0,48+0,06

тат

гйктямидин 52 5,9+0,9

мидина,изониазида,фтивазида метазида. салюзила, ниаламида, анабаяика, цитизина); иаопреноидоя ([¡игароля, метяпрягерола, гефарнатя, ивемона, цитраля); прегнана (кортекеолона, гидрокортизона, гидрокортизона ацетата, фтороксикортексолона, фторок-сипрадюгзолона ацетонида, триамцинолона ацетонида, синафлана), а также тримекаино, дибуфена и ксанакса. Найденные условия позволяют анализировать исследуемые соединения в водной среде, что необходимо для дальнейшего исследования взаимодействия этих веществ с ЦЦ, их определения в присутствии ЦД и изучения свойств образующихся КВ.

Испплппуя внго«прти>еденну*> формулу рассчитали К для веществ,

- -

у которых изменения оптической плотности б присутствии ЦЦ было не менее 0,06 - 0,1 (табл.1). Полученные результаты показывают, что вероятность образования КВ, их устойчивость зависят от химической структуры. Так, значения К находятся в предалах от 0,04 10 до 20 10 . Наибольший разброс наблюдается в группах производных пиридина и пиримидина как менее гидрофобных, в то Бремя как КВ стероидных соединений имеют константы одного порядка от 1,62 10 до 19,8 10 .Очевидно, что наряду с химической структурой лекарственных веществ, на образование КВ большое влияние оказывают их физико-химические свойства. Не всегда степень гидрофобности коррелирует со стабильностью КВ.

Измеренные спектры кругового дихроизма КВ производных ура-цила и изонккотиновой кислоты в присутствии ЦЦ свидетельствуют о том, что проявившиеся здесь эффекты Коттона очень слабые и не дают возмовности получения достоверных значений их эллепти- . чности. Знак не наблюдаемых эффектов дает приблизительную информацию об ориентации молекулы "гостя" в полости ЦЦ.

Большая информация получена наш при изучении спектров дисперсии оптического вращения. Причем,впервые были.изучены спектры при избытке молекул "гостя", т.к. именно в этих условиях удалось наблюдать увеличение взаимодействия в системе "гость-хозяин".

Полученные результаты позволяет предположить, что строение КВ изониазида и иетазида с ЦЦ однотипное. Аксиальное включение ароматического фрагмента цолекулы "гостя" в полость "хозяина", по крайней мере частичное, можно объяснить положительным вращательным вкладом соответствующего КВ за счет искажения конфо-рыации молекулы "хозяина" дополнительным сильным связыванием (типа дашоль-дипольного) азоыетинозого фрагмента "гостя" с ги-дроксильныии группами "хозяина". Частичное вхождение пиридинового фрагмента иолекулы в случае оснований Шиффа (фтивазкд.са-люзид) подтверждается присутствием в спектрах кругового дихроизма соответствующих КВ отрицательного индуцированного эффекта Коттона в области 330 нм. Наибольшее значение [ °Чоо1 наблюдается в случае КВ ниалаыида, единственного соединения, содержащего истинно гидрофобную бензильную группировку,которая в данном случав предпочтительно входит в гидрофобную полость ЦЦ.Это отражается и в спектрах кругового дихроизма достоверным положительным эффектом Коттона при 265 им. Т.о., спектрополяриметри-

ческнй мэтод позволяет высказать продполоиение о структуре об-разуацихся КВ.

Возможности метода растворимости показаны нами на некоторых веществах, взятых из каядой группы препаратов.Низкая растворимость ЦЦ (а аоде не более 1,8 %) значительно ограничивает использование метода раствориыости.Метод применим для изучения взаимодействия ЦЦ с веществами,коэффициент распределения кото-рьх не ниже единицы. Только для метазнда, дибуфена, гексаыи-дина, ксанакса, еикибора и фтороксикортексолока ацатонида наблюдается постепенное увеличение концентрации этих веществ в растворе при увеличении концентрации ЦЦ.что свидетельствует об образовании раствор.кмого КВ.

По диаграммам растворимости производных изопреноидов (цит-раль, ювемон, цигерол), а такзе кортексолока, гидрокортизона и фтивазида было сделано заключение о первоначальном образовании растворжак КБ. При увеличении концентрация ЦЦ эти вещества образуют нерастворимо КВ, что проявляется значительным уменьшением концентрации исследуемых веществ в растворе (табл.2).

Таблица 2

Изучение взаимодействия ЦЦ с некоторыми лекарственный» вещстваыи методом растворимости

Бремя Раство- К ± дК Тип кривой Вещество взаиыодей- римость, 1/моль ствкя,час мМоль/л

Цитраль 72 2,58 _ В3

Овемои 1 0,0186 2902,7+273,2 в5

Цигерол 24 0,20 1458,2+59,1 в5

Гексамидин 1 2,4 522,7^32,0 А«

Иетазид 24 0,294 49,2+4,2

Этивазид 183 0,017 - Ь

Ксанакс 3 0,328 56,315.7 К

Дибуфен 24 0,005 85,5±4,7 К

Силибор 24 - К

Кортексолон 1 0,248 4087,3+98,7 Бз

Гидрокортизон 1 0,900 657,0+77,1 Вэ

Фтороксикортек- 1 0,152 432,5+76,5 Ан

солона ацэтонид

Рассчитанный наклон ^а) прямолинейных участков диаграмм, в которых наблюдается образование растворимых КБ, позволяет предположить образование очень слабых комплексов, состав большинства которых невозможно определить методом растворимости. Однако значения - 0,58; 0,506 ; 0,46 гексашдина,кортексо-лона и гидрокортизона свидетельствуют об образовании КВ молярного соотношения 1:2, что подтверждено изучением состава КВ, выделенных в твердом состоянии.

Недостатком данного метода является сравнительно большая погрешность определения константы устойчивости (5,5 - 28,6/0. Однако, известно,что методой растворимости шшо изучать образование слабых КВ (со значениями К порядка 1-10 ). Поэтому метод растворимости позволил достоверно доказать образование КВ как с низкнш значениями К (штазид, ксанакс, дибуфен), так и с высоки® (ювемон, цигерол, кортексолон и др.),си. табл.2.

Т.о., методом У®-спектрофотоштрии обнаружено наличие взаимодействия ыежду ЦЦ и 22 веществами из 35 объектов исследования, рассчитаны К образующихся КВ. Спектрополяриыетричесюш методом показано,что комплексообразование идет за счет вхоздения части хромофора молекул производных урацила и изоникотиновой кислоты в полость ЦД. Степень вхождения молекулы в полость ЦЦ зависит от их гидрофобности. С помощью метода растворимости получена информация о динамике взаимодействия ЦД с 12 объектами исследования.

ПОЛУЧЕНИЕ КОМПЛЕКСОВ ВНДОЧЕНИЯ И ИХ ОЦЕНКА

Процесс образования КВ можно представить следующей схемой:

Осадок ЦЦ "гость" КВ

Иввд *}3Р ИЗКВ

Раствор иЦЦ +■ п "гость" КВ

Взаимодействие ЦЦ с веществом должно происходить в растворе, процесс ускоряется перемешиванием. В зависимости от исходных концентраций и свойств молекул "гостя" этот процесс может длиться от нескольких часов до нескольких суток. Если возможно подобрать систему растворителей, при которой получится перво-

начальна гомогенный раствор обоих компонентов,то регулирование образования КВ можно достигнуть путей удаления растворителя.

При получении КЗ способом удаления растворителя использовали процесс выпаривания и удаление растворителя путей лиофя-лизацян. Из 35 объектов, взятых для исследования, не найдена система, в которой были растворены оба компонента дая фтиваэи-да, метазида, цитраяя, цигерола, овеиона, днВуфена, ыасла базилика и рыбьего аира.

При выявлении факторов, влияющих ка естественный процесс осаждения КВ, было обращено внимание на концентрации исходных

Таблица 3

Условия и результаты получения КВ способом осавдения

Вещество

Вреия перемеси ванкя , час

Найдено в КВ, %

Состав в-зо/ЦЦ

Вьйсод,*

Кортекеолон 0,5 15,5 1:2 95

Гидрокортизон 0,75 12,5 1:2 72

Гидрокортизона ацетат 9 15,0 1:2 62

$тороксикортексолона 8 24,5 1:1 еа

ацотониц

Триамцинолона ацэто- И 18,1 1:1,5 ео

кад

СалЕЗид 3 7,8 1:2 49

Нналаыид 3 18,2 1:2 53

Параидкн 3 9,5 1:2 64

Пахикарпин 24 8,6 1:2 90

Ксанакс 24 12,3 1:1,6 60

Дибуфен 2 17,1 1:1,6 71

Рыбий аир 4 18,8 1:3 90

Свемон 18 8,5 1:3 75

Ыетапрогерол 1 19,5 {•Л 80

Цитраль 4 5,8 1:2 06

Цигерол 7 10,9 1:2 78

Гвфэрнат 4 10,1 1:3 70

Эфирное масло базилика 4 14,8 1:1 82

Силибер 38 10,9 1:3 54

компонентов, температуру реакции, время осаждения и условия перемешивания. На примере производных прегнана с помощью симплексного планирования эксперимента найдены оптимальные условия осаждения и показано, что на выход и время образования КБ в большой сторени влияет константа устойчивости КБ. Кроме того, были найдены оптимальные условия осаждения КБ для производных изопреноидови пиридина, лахикарпина, рыбьего жира, дибуфена. силибора и каанакса (табл. 3).

На примере производных изопреноидов, рыбьего жира и дибу-фена показано, что для оптимизации процесса очень перспективно использовать обработку реакционной смеси ультразвуком, который обеспечивает высокое диспергирование и значительно ускоряет последующий процесс осал;дения.

Гомогенизация системы достигается также путем предварительного автоклавирования водной суспензии ЦЦ с исследуемых™ вр-щэствами, нерастворимыми в воде, такими как производные пригнана, изопрен дов и пиридина. Однако, только пппиявопччд прегнана оказались стабильными при этом процессе.

Метод осаждения позволил определить, еоотаи образующихся продуктов взаимодействия (табл. В).На способность обрааонывать нерастворимые НВ большое влияние окЕаывяет величина гидрофоо-ности вещества и константа устойчивости КВ. С помощью метода осаядения иа 35 объектов исследоьания удалось .получить только 19 КВ.

Так называемый метод "замешивания" наиболее прост в технологическом отношении. В минимальном количестве системы растворителей, обязательно имеющих в своем составе воду, достаточную для осуществления контакта ЦЦ с исследуемым веществом, удается получить КВ с высоким выходом. Этим методом были получены КБ веществ, для которых другие методы оказались неприемлемыми (фтивазид, метазид и др.).

Предварительную оценку свойств образующихся КВ, полученных различными методами, проводили, используя в качестве критериев изменение растворимости и стабильности веществ в КБ по сравнению с исходными препаратами и их физическими смесями (ФС) с ЦЦ.

Исследование влияния ЦЦ на растворимость лекарственных веществ изучали методом "вращающаяся корзинка" для КВ лекарственных веществ, мало или практически нерастворимых в воде, или диализом че^ээ целлофановую мембрану для веществ, хорошо рас-

творимых в воде. Диализ через целлофановую мембрану показал, что для веществ, хорошо растворяющихся в воде (изониазид, пар-мидин, диэтиламид никотиновой кислоты, ниаламид) присутствие ЦЦ (ФС) замедляет скорость высвобождения,при обра'зовании ае КВ скорость.высвобождения замедляется еще больше (от 2 до 11 раз). Для веществ, мало растворимых в воде, ЦД не влияет на скорость высвобождения (КВ ыетапрогерола и пентоксила) или повышает ее (КВ основания тр:.мекаина). Тест "растворение" позволил подтвердить предположение, что во всех случаях присутствие ЦЦ (в ФС) способствует увеличению скорости растворения мало или практически нерастворимых веществ. 3 ряде случаев получение НВ позволило повысить скорость растворения в 2 -7 раз (силибор, фти-вазид, метазид, салюзид, производные гтрегнана и т.д.). Эти исследования показывают,что образование КВ в ряде случаев нозет быть использовано или для пролонгирования действия,или для увеличения биодоступшетя препаратов.В то же время на основе этих исследований иожно сделать заключение о тем, каким способом предпочтительней получать КВ или достаточно ограничиться добавлением ЦЦ в лекарственную форму (синафлан, триаыцииолона аце-тонид, ниаламид,ксанакс). Кроме того,кривые диализа и скорость растворения косвенным путем могуг дать представление о полноте взаимодействия исследуемых веществ с ЦЦ, Так,было установлено, что с предварительным автоклазированиеы образуется КВ только для триамцинолока ацетонида.

Сравнительная оценка стабильности проведена на примерах легко окисляющихся препаратов: ювемон, пахикарпин, рыбий жир и витамин А рыбьего жира или подвергающихся при хранении гидролизу (парыидин, диэтиламид никотиновой кислоты). Для исследования использовали метод ускоренного старения. Так.йодное вдело рыбьего жира при зтом значительно изменилось на третьи сутки хранения, тогда как в КВ оно снизилось на 20% лииь на восьмые сутки и в дальнейшем оставалось без изменения. В КВ увеличивается термостабильность рыбьего 8ира и витамина А в 5 раз, паршдана и ювеыона в 2,5 раза, диэтилаыида никотиновой кислоты в 5 раз, пахикарпина основания б 100 раз.

ИССЛЕДОВАНИЕ КВ РАЗЛИЧНЫМИ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Проведенный анализ КВ с помощью ПК-спектроскопии позволил выявить три характерные спектральные области, в которых наибо-

лев часто, хотя и не одновременно.наблюдаются различия в характере и интенсивности палое поглощения ФС и КБ,1 В ИК-спектрах ФС сохраняются все характеристические полосы ЦД и добавляются полосы исследуемых веществ. При образовании НЕ} наблюдается во всех случаях значительнее увеличение интенсивности полосы поглощения в области 3000 - 3500 см .что характерно для полисахаридов при образовании ыешолекулярной водородной связи. Имеющиеся полосы, характерные для включенного вещества,обычно исчезает в расширении этой полосы (производные прегнана,пиридина, изопреноидоз, гексаиздкн, пентоксил).

Вторая наблюдаемая область изменений, проявляющаяся в ИК-спактрах КВ (хотя к не всегда), относится к изменениям полос поглощения валентных колебаний тех функциональных групп веществ, которые участвуют в образовании ыешолекулярной водородной связи с ЦД. Эти изменения бшш отмечены для полос поглощения, относящихся к валентным колебаниям карбонильной группы (1600 -1700 си ) для КВ пантокенла, матилурацила, фторафура, цитизи-' на, нзопреноидов и тримекаина, а также вторичной амино- или амвдной груш.

Сравнительная оценка полос поглощения, относящихся к деформационным колебаниям углеводородных целей исследуемых веществ, такие иногда показывает изменения в их полоаении и интенсивности, По интенсивности этих изменений можно судить о глубине проникновения молекул в полость ЦЦ.Такие изменения наблюдались в ИК-спектрах КВ производных прегнана, нзопреноидов,пиперидина, ниаламида и др. Было обращено внимание на изменение отношения кнтшшнвностей поглощения полосы группы -С-О- 1140 см (ЦЦ) к широкой полосе 1010 см .При переходе от К к КВ величина этого отнззания уменьшается, иногда до 2-х раз (производные пиперидина и прегнана). Отмеченные изменения могут свидетельствовать о возмозных конформационкых изменениях га счет включения молекул исследуемых вещзств б полость ЦД и возникновения при этом гидрофобного взаимодействия.

При дериватографическоа исследовании использовали сравнительный анализ различных вариантов кривых нагревания исследуе-шх образцов, их £С и КБ. На кривых нагревания КВ исчезают эффекты,характерные для индивидуальных веществ, в то время как при нагревании ЕС эти эффекты сохраняются.

Этот факт является подтверждением процесса взаимодействия

их с ЦЦ, вплоть до образования КВ, например, для КВ пентоксила (табл.4).

Таблица 4

Термоаналиткческое кзучзика КВ пентоксила

Наименование : Эффект ДГА, вещества : Т°С

Природа Эффект ТГ, : Потеря я фекта : ГгС :иасов,%

Пектоксил

20- 70 110-165 255-280 348-365

уд. растя.

дестр.

дестр.

40-100 110-170

235-ыах

0,5 20,0

ФС пентоксила 40- 80 уд.раств.

1 £0-143 дестр.

230-270 дестр.

40- 80 120-143 230-270 270-тх

12,0 3,0 11,0

КВ пентоксила 40- 80 240-260 275-280

уд.расгв. 40-110 12,0 дестр. 240-275 70 дестр. 275- мах ~

По кривым нагревания можно судить и о полноте включения исходных веществ, т.к. наличке их эффектов может подтверждать присутствие исходных компонентов.

Изменение териостабил'ьности веществ при использовании тер-могравиызтрического метода позволило объективно оценивать их взаимодействие с ЦЦ. С этой целью нами впервые использована величина интегральной наблюдаемой температуры разложения (ШТР), которая не зависит от особенностей применяемой методики к позволяет объективно оценивать изменэниа териостабильности исследуемых объектов.

Сравнительная оценка ИНТР индивидуальных веществ и их КВ (табл. 5) свидетельствует о той, что ОД не всегда увеличивает терлостабильность. ЦД может не оказывать влияние на этот параметр и ыояят увеличивать или уменьшать тер-гсстабхльность веществ.

- -

Таблица 5

Сравнительная оценка ИНТР исследуемых веществ и их КВ

Наименование : Т :Наименование : Т

вещества ¡вещество КВ : вещества ¡вещество КВ

Производные пириммдиндиона

Метацил 41,5 218,3 Фтивазид 267,5 264,2

Пентоксил 164 185 Метазид 234,5 253,8

5-фторураг5ил 287,4 223,6 Салюзид 220 197

Фторафур 189,6 223,1 Ниаламид 238,4 217,4

Оротовая кис- 230,9 177,3 Пармидин 261,3 266,6

лота

Гексамидин 325,7 284,7 Производные пиперидина

Анабазин 135 248

Производные пиридина Нанофин 63,4 208,7

Изониаэид 210 210,4 Цитизин 186,8 245

Кислота нико- Пахикарпин 229,7 168,0

тиновая 198,4 248,2

Производные изопреноиов

Никотинашд 204,9 211,5 Цигерол 138,4 174,8

Никодин 184,4 282,1 Гефарнат 171,1 193,9

Диэтиламид 160 245 Ювемон 173,7 207,7

никотиновой Метапрогерол 174,0 197,9

кислоты Цитраль 159,5 206

Причем, увеличение терыостабильности характерно для летучих веществ и веществ с низкой температурой плавления. При образовании с ними КВ происходит увеличение твршстабильности на 100°С, Уменьшение терыостабильности наблюдается в основном для соединений, имеющих высокую температуру плавления (табл.5).

Ввиду того, что полученные КВ имели,как правило, мелкокристаллическую структуру, для исследований использовали метод порошковой дифракции рентгеновских лучей. В основном, зарубежные исследователи изучение КВ методом дифракции ■ рентгеновских лучей сводят к установлению различия между дафрахтограшаш вещества "гостя" и КВ. Известно, что определение параметров элементарной ячейки позволяет обосновать характер КВ. Экспериментальными данными, получаемыми с помощью дифршоимиIра,явля-

X

10

КВ (способ ллосТилизапша)

15 20 &

Изониазвд лиокнжзиро-

ВЭШШЙ

10 15

20

10 15

Ж

ИЗОНИЭЗИД неходкий

КВ (способ "замешивания")

и

5 Ю 15 20 9

Рас. I Дкфрактограг.мы изониазвда и его комплексов включения

стоя углы отразения и относительные интенсивности (рис.1). Основываясь на этих данных мы нашли,что наиболее приемлемо исследуемые порошковые дифрактогрешмы интерпретируются с помощью гексогональной кристаллической решетки. Исходя из результатов определения параметров элементарных ячеек КВ (табл. 8) можно

Таблица 6

Определение параметров элементарных ячеек КВ

Вещество : Параметры гексагональной ячейки а, в (А ) : с (А )

йзониазид 29,8 15,7

Метазид 29,8 15,6

Салюзид 30,4 15,8

Ниаламид 30,1 15,4

Ыетацил 28,5 15,0

Фторефур 28,7 14,98

Нетапрогерол 28,4 17,8

Цигерол 30,0 14,7

Кортексолон 18,14 15,87

Гидрокортизон 18,50 15,87

Гидрокортизона ацетат 18,41 15,21

Фтороксккортекеолона ацетонид 19,03 15,20

Триамцкнсшона ацетонид 20,05 15,00

Синафлан 21,02 15,25

сделать вывод, что КВ производных пиридина и пиримидина изоморфны меяду собой, такая ге зависимость наблюдается и для группы прегнана.

Полученное представление о гексогональной решетке позволяет объяснить строение кристаллов КВ закрытой упаковкой вытянутых каналов, образованных коаксиально выравненными молекулами ЦЦ.

Т.о., использованные оптические, териоаналитические методы, метод дифракции рентгеновских лучей и др. метрды исследования продуктов взаимодействия ЦЦ с лекарственными веществами позволяют достоверно доказать образование НБ, определить характер взаимодействия и установить их физические и химические константы.

- ¿J -

ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ KB И ШКШКШЕЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ЕАРИЩа!

Изменение фкз:п;с;~>жзгчоскзсс свойств проста в KB л,как следствии, изменение биофарыацзвягаеских характеристик в опытах in vitro, обуславлисаст фармакологические пра;шущества полученных КВ.

Изучение биологической активности KB производных изонико-тинобой кислоты проведено на базе Московского НИИ туберкулеза !.!3 Р3 в лаборатории Республиканского центра по доклиническому изучению ноеых лекарственных ттрапаратсв и клинической фармакологии противотуберкулезных препаратов совместно с А.М.Белькинд и Л.П.Овчаренко. Туберкулостатическое действие изучаемых KB сравнивали с действием на микобактерш соответствующих интакт-ных препаратов .Результаты исследований представлены в таблице 7

Таблица 7

Туберкулостатическая активность KB производных изоникотиновой кислоты

Препарат : Минимальная, подавляющая рост мико-

: бактерий туберкулеза, концентрация :- препарата, ккг/ил

: без сыворотки : с 1С?« лошадиной ; сывороткой

Изониазид 0,050 0,050

KB изониазида 0,080 0,080

Фтиваэвд 0,043 0,048

KB фтивазида 0,032 0,016

Метазид И,80 11,80

KB ыотазидда 0.20 0,20

Салюзид 12,5 12.2

KB салюзида 0,081 0,040

Включение производных изоникотиновой кислоты в молекулу ЦД показало,что активность изониазида и фтивазида не изменяется, тогда как КВ метазида и салюзида во много раз превосходят по активности прототипы.

Острая токсичность КБ изониазида в 1,4 раза ниие токсичности изониазида, а максимально переносимая доза (МПД) вдвое • выше . КБ фтивазида, ыетаэида и сялюэидя, как и сами препараты практически нетоксичны.

Сравнительная оценка лечебного аффекта проведена для изониазида и фтивазида, как наиболее часто применяющихся в медицинской практике. Выживаемость мышей свидетельствует о том,что лечебную дозу изониазида Ю мг/кг можно снизить в 2-3 ряэа при использовании его а виде КВ.

Лечебная доза фтивазида 100 мг/кг приводит к выживаемости животных для интактного препарата и нго КБ - 75 100 % выживаемость наблюдается при введении животным лозы 20 мг/кг в виде КВ. Поэтому при введении фтивазидае виде КБ лечебную дозу очевидно можно также сократить в 8-4 раза.

Фармакокинетическими исследованиями установлено, что КБ изониазида поддерживает бактериоотагичеокую концентрацию изониазида в крови в течение 8В часов, что на й~ часов дольше,чем изониазид. КБ фтивазида способен на 24 чася дольше, чем интак-тный препарат сохранять концентрацию фтивазида в крови акспр-риментальных кивотных на высоком бактериостетическом уровне. Следовательно, каолюдается пролонгирование действия препаратов в КВ, концентрация не фтивазида в крови из КБ увеличивается почти вдвое.Сравнительная оценка площадей под фармакпкинетичи-скими кривыми позволяет утверждать, что исследуемые КБ обладают интерметирующим эйректом, т.е.КБ изониазида и фтивазида можно назначать однократно к с большей эффективностью.

"Изониазкд-ЦЦ" и "Фтивазид-ЦЦ" - препараты, созданные на основе КЗ,прошли рассмотрение и получили положительное заключение экспертной комиссии по специфической активности и аналитической комиссии ВШЭЯС. При тао'лвтировании КЗ этих препаратов масса таблетки должна увеличиться почти в Í0 раз. Это обстоятельство заставило нас предложить для них лекарственную форму "Дозированный порошок".

При изучении специфической активности диэтиламида никотиновой кислоты установлено, что он в виде КБ сохраняет срои фя-рмакодинамичеокие свойства в отношении возбуждения дыхания и по активности не уступает применяемому в медицинской практике кордиамину. Однако, диэтиламид никотиновой кислоты при введении его в видн КБ проявляет выряженный пролонгированный эффект.Зги

- '¿о -

позволило создать твердую дозированную лекарственную форму пролонгированного действия (тпмртки), более стабилъиуг» по сравнению с нордияминси и не имрюшуш неприятного яяпяхя и вкуса.

Сравнительный анализ отологической активности пентоксила и его КВ показал, что в опытах ня животных его специфическая активность (рянояйливляюгтей дрйстяир) нй изменяется. В то же время почти полностью исчезает меотнораздрожающее действие при применении КБ пентоксила и острая токсичность уменьшается в 3,5 раза. Проврдрнные ипслелпвяния подтвердили возможность использования И'В пентоксила для наружных целей и получения дозированных лекарственных форм, не раздражающих слизистую желудка, что особенно ценно при использовании их в детской практике. В связи о этим была разработана технология таблетированной детской лекарственной формы на основе КБ пентоксила,содержащей 0,085 г тейстнутагрго вещества.

Известно, что кортикостероиды, проявляя инсокув биологическую активность, ой'лядявт и рядом побочных эффектов, поэтому увеличение биодоотупнпоти этих препарятгж позволит достичь необходимого терапевтического яффектя при использовании меньшего количества препарата. Ввиду того, что специфическая активность синафлана в огштах на животных в присутствии ЦЦ увеличивается в 2 пчря, разработана технология мази, содержащей в 2 раза меньшую концентрацию синафлана по сравнению о мянью и линиментом синафлана,выпускаемых отечественной промышленность».

Малая концентрация синафлана в мази позволяет предположить, что ЦЦ не будетсущественно влиять на технологический промесс. Присутствие ЦД требует использования основ, содержащих в своем составе воду. Оптимальной оказалась основа мази препнизолоно-вой при внесении в нее 2 % ЦД.

Проведенные фармакологические исследования подтвердили адекватность действия созданной мази - линименту синафлана 0,025°4, выпускаемому Бакинским химико-фармацевтическим заводом. Подготовлены все материалы, необходимые для рассмотрения вновь предлагаемой мази в Фармакологическом Комитете.

Сравнительная оценка специфической анестезирующей активности КВ тримекаина основания свидетельствует о выраженном эффекте пролонгированного действия по сравнении с тримекаина гид-рохлогидом. Эффективность же действия при одинаковой концентрации снижается только на 30 % в максимуме. Тримекаина гидрах-

лорид также ыохет использоваться как антиаритиическое средство. Однако, для его пэроралького применения отсутствует лекарственная форма, т.к. при приеме внутрь препарат быстро всасывается и инактивируетея в кровяной русле. Нами показано замедление высвобождения триыэкаина из таблеток на основе КВ. Известно такнэ, нто эффективность действия тримекаина повышается с увеличение« рН среды. Высокая термостабильность КВ тримекаина-ос-нования позволит решить проблему применения основания в твердой дозированной лекарственной форме. Т.о., создание таблеток КВ гриыекаина открывает перспективу для продолжения исследований по использовании тримекаина как антиаритмического средства.

На основе ювеиона были созданы гранулы и микрокалсулы, в которых при проведении биологических испытаний препарат сохранил свою инсектицидную активность.

Проведенные исследования по ранозаживляющей и противооао-говсй активности позволяют заключить, что в КБ рыбий жир. сохраняет свою активность и несколько превосходит прототип. Зто, в свою очередь, свидетельствует о перспективности использования КВ рыбьего аира в медицинской практике в виде присыпок или других лекарственных форм, э которых рыбий жир стабилен при длительном хранении.

При сравнительной оценке специфической активности цигерола и его КВ было найдено, что количественно процессы заживления кожно-ыышечнъиС ран с применением как КВ цигерола, так и 25 % маляного раствора протекают идентично. Однако, дифференцирование соединительной ткани, скорость эпителизации в опытах с КВ протекают без оелокненкй и быстрее. Результаты исследований сравнительной оценки антимикробной актизности свидетельствуют о той, что при получении КВ цигерол не теряет этой активности. Значительная гидрофкльность порошка цигерола (КВ) и использование его в виде присыпки может способствовать назначению при гнойных воспалительных процессах.

При исследовании антибактериальной активности КВ эфирного масла базилика можно отметить, что в КВ активность эфирного масла возрастает, особенно по отношению к E.eoli (более чем в 10 раз), и к Bacillus subtillis (в 4 раза),оставаясь на одном уровне с эфирным маслом по отношению к St.aureus и Proteus vulgaris. Эти данные позволяют предположить снижение дозировки эфирного ыасла и,благодаря увеличению термической стабильности

б КБ, использование для изготовления лекарственных форм, требующих нагревания, для которых ранее применение эфирного масла было невозможно Ссуппозитории, шарики и т.д.).

Проведенные исследования по сравнительной оценке специфической активности и токсичности лекарственных веществ в КБ показали во всах случаях изменение ряда их характеристик, обеспечивающих улучшение биофармацевтических свойств в опытах на животных.

Получение ИВ с лекарственными веществами, хоропо растворимыми в воде, как правило., сохраняет их специфичную активность ;~:а уровне исходного препарата, но способствует уменьшению токсичности (пектонсил, изониазид), устраняет раздражающее действие на слизистую оболочку (пентоксил), обеспечивает пролонгирование действия (игонлазид, диэтилаыид никотиновой кислоты).

Получение КВ с лекарственными веществами плохо или практически нерастворимыми в Еоде приводит к увеличению специфичной активности (фтивазид, салпзид, метазид, цигерол, рыбий кир, синафлан, эфирное масло базилика).

Т.о., получете и исследование КВ ряда лекарственных веществ производных лрегнача, изолреноидов, пиридина, лиримидин-даона и некоторых других позволило выявить наиболее перспективные из них для создания лекарственных ферм с улучшенными бно-фар;ацевтичэскими характеристиками. Предварительные исследования по получению лекарственных фора ка основе КВ подтвердили возможность создания таблеткрованных форы для КВ метапрогерола, пен-токсила,тримекаина основания и диэтиламида никотиновой кислоты; гранул н ыикрокалсул КЗ вземока. Б зависимости от способа получения и физико-химических свойств КВ для каддого вещества необходимы специальные технологические приемы.

Нрсыэ изменения бисфармацевтическкх сбойств лекарственных веществ с помощью ЦЦ, показана возможность его использования для увеличения растворимости исходных продуктов биотрансформа-1Щ при произвадегве Рйдракергаэона, яреднизолона и синафлана. В наших опытах и опытах, проведенных на базе ПО "Акрихин",было достигнуто увеличение растворимости таких исходных продуктов в присутствии ЦД, как кортексолон, гидрокортизон, фтороксикорте-ксолона ацегонид н фтороксипреднизолона ацетонид.

Установлено, что различие в характеристиках реакции комп-лексообразования (время, константа устойчивости) может способ-

2а -

сгвовать препаративному разделению смесей различных веществ. Эта возможность показана на примере выделения пахикарпина основания из смеси сопутствующих алкалоидов, содержащихся в термопсисе ачередноцветковом, таких как цитизин и метилцитизин.

В процессе выполнения работы при необходимости проводились исследования по разработке и совершенствований методик анализа изучаемых объектов. Так,были разработаны методики определения примесей в препаратах канофин и салюзид, количественного определения цитизина в растительном сырье, анализа стероидов в ку-яьтуральных хвдкоетях, методика определения фтивазида в крови. Эти методики включены в ряд ФС, используются в работе ОТК ПО "Акрихин" и в НИИ туберкулеза МЗ РФ.

ОБЩЕ ВЫВОДУ

1. Теоретически обоснована возможность использования, электронной спектрофотсметрии для изучения процесса комплексооб-разования ЦЦ с лекарственными веществами.Показана приемлемость метода для определения констант устойчивости КВ для веществ, имеющих полосы поглощения и ->л* и л ->л* переходов. Рассчитаны константы устойчивости для КВ 22 веществ,значения которых находятся в пределах от 0,04 103 до 20 103 1/моль.

2. Установлено, что образование КВ зависит от гидрофобно-сти и химического строения веществ.Обоснован выбор способа получения КВ в зависимости от свойств веществ. Впервые показана возможность увеличения скорости образования и выхода КВ с помощью автоклавирования и обработки ультразвуком на примере производных изопреноидов к триамцинолона ацетояида.

3. Изучена реакция взаимодействия ЦД с лекарственными веществами методом растворимости.Стехиометрические отношения реагирующих веществ рассчитаны для трех НВ, константы устойчивости - для девяти КВ. Значения констант устойчивости в большинстве случаев совпадают с аналогичными значениями, полученными спектрофотометрическим методом.

4. Методами растворимости, диализа через целлофановую мембрану и с помсшью теста "растворение" изучено влияние комплек-сообразования на растворимость к скорость высвобождения лекарственных веществ. Установлено, что растворимость веществ в КВ может увеличиваться от двух (ксанакс, дибуфен) до семи раз

(синафлан, метазид),а скорость эыевобоадения замедляться в два (ниаламид) - четырнадцать раз (изокиазид).

5. Разработаны методики оценки доброкачественности и количественного определения исследуемых лекарственных веществ в КВ спектрофотометрическим и хроматографическими методами.Методики приемлемы для стандартизации КВ по фармакологически активным компонентам,для контроля производства и вклвчены б проекты нормативно-технической документации.

6. С помощью УФ-,ИК-спектров и спектров кругового дихроизма изучены КВ в твердом состоянии и растворах.Показано,что образование КВ происходит за счет возникновения межмолекулярных водородных связей и гидрофобного взаимодействия.

7. Термоаналитическим методом подтверждено образование новых соединений ЦЦ с 33 лекарственными веществами. Показано,что метод позволяет достоверно определить взаимодействие для веществ, имеющих температуру плавления (кипения) ниже температуры деструкции ЦЦ.

8. Методом дифракции рентгеновских лучей показано образование новых кристаллических соединений. На основе рассчитанных параметров кристаллической решетки доказано, что КВ имеют канальную структуру.

8. Фармакологическими исследованиями подтверждено изменение биофармацевтических свойств КВ по сравнению с исходными веществами. Обнаружено увеличение специфической активности (фти-вазид, синафлан, рыбий аир, цигерол, эфирное масло базилика), уменьшение токсичности (изониа?ид, пентоясил),пролонгирование действия (фтивазид, изониазид, диэтиламид никотиновой кислоты).

10. Подтверждена возможность повышения стабильности лекарственных веществ при ксштлексосбразованки с ОД в два (пармидин)--десять раз (рыбий жир).

11. Показана возможность создания новых лекарственных форм на основе КВ: таблеток тримекаина, пентоксила, диэтиламида никотиновой кислоту, метапрогерола; гранул и микрокапсул ювемона; дозированных порошков изониазида и фтивазида; шши"Синафлан-ЦЦ"

12. Обоснованы возможности использования реакции комплексо-образования с ЦЦ для интенсификации технологических процессов: улучшения разделения смеси алкалоидов (термопсиса), увеличения растворимости исходных продуктов синтеза кортикостероидных препаратов.

Основное содержанке диссертационной работы изложено в сле-ущих публикациях:

1. Соединение включения 4-пкридинкарбоновой кислоты (изони-азида) и гептоциклоамилозы,обладающее противотуберкулезной активностью A.c. 1В00307 СССР, МКИ 51 5С 08В 37/18 ( соавт.Беликов В.Г., Овчаренко Л,П., Белькинд A.M.) ДСП

2. Соединение включения 4-метил-5-оксиметилурацила ( пенто-ксила) и ß -цжлодекстрика A.c. 1674542 AI СССР, МКИ СО 8В 37/16 А 6Ш 311/70 (соавт. Алфимова Г.В., Айрапетова A.D., Ку-янцева A.M.) ДСП

3. Соединение включения диэтиламида никотиновой кислоты и р-цжлодекстрина A.c. 4786341/041 011218 СССР,МКИ 5С 08В 37/16 НА 611К31/715 (соавт. Лукашва Л.А., Куянцева A.M.)

4. Соединение включения фтивазида (3-метокси-4-оксибензили-денгидразид нэонмкотиновоЯ кислоты) и в-циклодекстрина Пол. реш. на выдачу а,с. 4915916/0419208 СССР, МКИ 5 С 08В 37/i6 / (соазт. Беликов В.Г., Овчаренко Л,П., Еелькикд A.M.) ДСП .

5. Соединение вклвчения цигерола и е-циклодекстрина Пол. реш. -на выдачу а.с.4813462/05(041263)СССР, МНИ 5С 08В 37/16 А 61 К 31/715 (соавт. Клочков С.В., Лебедева А,И. и др.)

6. Определение содержания фтивазида в крови Пол. реш. на выдачу а.с. 4841752/14 СССР, МКИ G Ol N 33/48 (соавт. Беликов В.Г., Овчаренко Л.П., Еелькикд A.M.),ДСП

7. Кислотно-основные свойства фармацевтических препаратов производных иммдазола и оптимальные условия их спектрофотомет-рического анализа // Фармация -1976.-Т,25,Н4,-С.41-43(соавт. Беликов В.Г., Вергейчик E.H.)

8. Соединения включения, перспективы применения в фармации/'/ Фармация -1983.-Т.32,N 3,-С.54-58.(соавт. Беликов В.Г.)

Э. Изучение клатратообразования р-ииклодекстрина с лекарственными веществами // Повышение качества лек. помощи амбул. и стацион.больным на основе ускорения научно-технического прогресса в свете решений XXVII съезда КПСС: Тез. докл. - Казань, 1988. -С.331.(соавт. Беликов В.Г.)

10. Циювдекетршш и их соединения включения с лекарственными средстваш! //Хш.Фаргац. яурн.-1386. -T.20.N 5. -С.525-532. (соавт. Беликов Б.Г., Ботеэат-Белый D.H.)

11. Определение цитизина в траве Ternopsis altherniflora методой газо-видкостиой хроматографии,//Химия природ.соединений.

-1SE3.-N 1.-С.118. (соавт. Беляков Б.Г., Кудрин С.А.)

12. Количзстеоннсо определение алкалоидов экстракта термопсиса латгцотокздюго негоден газо-аадюетноЯ хроилтогр^фни //5apîamM.-lS37.-T.se,N 6.-C.S3-39. (соавт. Беликов В.Г. .Кудрин С.А., Еотезат-БольД D.K.)

13. Количествен!«! анализ трю/еканна методом производной спек-трофогометрии //Химики Северного Кавказа-народно!^ хозяйству: Тез.докл.'2 регкоиальн. конф. 8-10 окт. 1987. -Махачкала, 1S87. -С..205. (соавт. Лукашова Л.А., Назареико Е.В.)

14. Использование ВЭЗХ для изучения устойчивости соединения включения '¿отилурацила с в-циклодекстрином// Третий Всесоюзн. симпозиум по молекулярной зидхостн. хроматографии: Тез. докл.-Pnra,lÇ5S.-C.lS0-192. (соавт. Еотсзат-Еэлый D.K.)

15. Использование термсаналитического метода для изучения соединений включения а-циклодекстрина с локарствйнни.ш сродства);]! //Съезд фармацевтов АзССР (3;1588;Баку): Тез.докл. -Баку,1S88.-С.51-53. (соавт. Беликов В.Г., Вергейчик E.H.и др.)

16. Газохрокатографичоскоэ опрздзлениэ доброкачественности нанофина //Современные методы анализа Фармацевтических препаратов./ВН31Ф.-1988.-т. 2S.-С. 86-88. (соавт. Ботезат-Еэлый Ö.K., Шардннов В.Н., Бердникова A.B.)

17. Дерива.тографнческое исследование соединений зклвчедая лекарственных средств, производных пиридина и пиперидина с .з-щклодекстриноы //Хим.фарьэд. журн. -1S89. -Т.23,N.10. -С. 1270-1273. Сссавт. БергеИчнк E.H., Полков S.A. и др.)

10. Изучение комплексообразования производных урацнла с ß~ ц^клодекстринсн хироптическими методами //1 обл. совещ. по Аи-зичэекоЯ и органической в?®! с участием ВУЗов Северного Кавказа -Ростов-нз -Дону, 1S89.-C.74. (соавт. Зданоз O.A., Сачар-скоза Н.И. и др.)

19. Определение принеси глюкозы в р-цихлодвкстрине методом хроматографии в тонких слоях сорбента //Химики Северного Кавказа - народному хозяйству: Тез.докл. Э рзгиональн, конф.4--9 окт. 1089. -Грозньй, 1989. -С. 156. '(соаег. Кудрин С.А.)

20. Изучение комплексов включения атаалоидов с ß-циклодекст-рином // Новые лекарств, препараты из растений Сибири и Дальнего Востока: Тез. докл. Всесовзн. конф.-Томск, 1939. -Был.2. -С.83. (соавт. Кудрин С.А., Ботезат-БелыЯ D.H.)

21. Исследование взаимодействия р-циклодекстрина с неко-

торыми лекарственными средствам», производными пириыидяндиона //Фармация.-19В9. -Т.38,N 6.-С.33-36. (соавг. Беликов В.Г..Попков В.А. и др.)

22. Изучение соединений включения производных пиримидина // Актуальные проблемы создания лекарственных форм с заданными биофармацевтическими свойстзаыи:Гез. докл. Всесоюзн. науч.-техн. конф. 24-26 окт.1989. -Харьков,I98S, -С.45-46.

(соавт. Вергейчик E.H., Ботезат-Белый В.К., Алфимова Г.В.)

23. Использование метода тонкослойной хроматографии в контроле качества салюзида // Химические проблемы отраслей народного хоз-ва Тюменского региона и пути их решения: Тез. докл. обл..конф. Тюмень. 12-13 мая 1989. -Тюмень, 1989. -С.131. (соавт. Овчаренко Л.П.)

24. Использование метода тонкослойной хроматографии в контроле качества нкаламида//Хишки Северного Кавказа -народному хозяйству. Грозный,4-9 сент.1989: Тез. докл.-Грозный,1989.-С.370. (соавт. Овчаренко Л.П.)

25,.Применение отечественных пластинок для тонкослойной хро-иатографии в анализе (З-цикяодексгрина // НЙШШИМ. Методы анализа и контроля качества продукции -19SQ.- Выя.5. -С.27. (соавт. Гаврилин М.Б., Кудрин С.А.)

26. Использование р-циклодекстрина для модификации биофарца-цэвтичэских свойств соединений группы ГйНН //Актуальные проблемы лекарственной токсикологии: тез. докл. Всесоюзн. кауч. конф. -М.,1990. -4.2. -0,216. (соавт. Овчаренко Л.П,, Езль-КИИД A.M.,)

27. Изучение физико-ишических и биофарыацевтических свойств клатрата трииекаина с р-циклодекстриноы //Синтетические и биологические полимеры в фармации./БНИИФ.-1890.■-Т.28.-С.11-15. (соавт. Беликов В.Г., Лукапова Л.А., Вергейчик E.H.)

23. Исследование взаимодействия р-циклодекстрина с кортек-еолсноу //Хим. фармац, яурн, -'590.-Т.24,N 10.-С.81-62. (соавт. Гаврилин U.E., Еотезат-Белый D.H.и др.)

29. Определение гидрокортизона в культуральной жидкости методом высокоэффективной жидкостной хроматографии // ШИТЭХНМ. Методы анализа и контроля качества продукции. -1990.-Вып.5.-С,24--25.(соавт. Гаврилин Ы.В., У«нова Э.4>,, Кудрин С.А.)

30, Изучение соединения включения пентоксила с р-циклоде-кстрином //Химиотерапия опухолей в СССР.-М.,1990.-N 55.-СЛ11 ДСП

-114. (соавт. Лазарян Д.С., Алфимова Г.В. и др.)

31. Изучение влияния р-циклодекстрина на растворимость некоторых препаратов стероидах гормоиоа.//Состояние и перспективы создания новых готовых лекарственных средств и фитопрепаратов: Тез. докл. Всесоюзн. науч.-техн. кояф.,Харьков 2-5 окт., 1S90.-Харьков, lSGj. -С.243-250. (соавт. Беликов В.Г., Гаэри-лин М.В.)

£2. Исследования стабильности лекарственных фор.« проиыален-ного и индивидуального изготовления // Отчет по KKF (заклвчи-тельный)/Пятигорский фары. ин-т.-01870(51455; инв.К02910053593 -Пятигорск, 1990. -123 с. (соавт. Беликов В.Г., Алфимова Г.В.и др.)

33. Опыт получения и изучения соединений включения с лекарственными средствами.//Химиотерапия опухолей в СССР. -1930.-N55. -С.105-110. (соавт. Беликов В.Г., Озчаренко Л.П.), ДСП

24. Туберкулостатическая активность клатратов ыетазида и са-люзида с р~циклодекстрином.// Поиск новых лек. средств и их использование в клинике: Тез. докл. научи.-практ. конф.-Чита, 1890. -Ч.2.-С.283-284. (соавт. Беликов В.Г., Овчарэнко Л.П.)

33. Создание клатрата ыетазида с высокой туберкулостатичес-кой активностью // Современные направления создания и оценки качества лек..препаратов антибиотиков и антимикробных веществ: Тез. докл. Всесоюзн. кокф. Москез. 27-23 июля. 1080.-М.,1Б£0. -С.12. (соавт. Беликов В.Г., Вэргойчик E.H., Овчаренко Л.П.)

S3. Количественное определение гидрокортизона в культуральной падкости методом высокоэффективной вздкостной хроматографии //НИШЭХШ. Науч.-тех.и реф. сб.:Рац. предл.и передовой произв. опыт.-1ШЗ.-Вып.5.-С.24-26. (соавт. Гаврилш М.В., УмноваЭ.®., Кудрин С.А.)

37. Перспективы получения и использования соединений включения лекарственных средств с ¡э-цюслодекстрином//Реализация научных достижений в практ. фармации:Тез. докл. Республ. науч. конф. 16-18 окт.1990г. -Харьков,1990.-С.184.

33. Влияние (з-циклодехстрина на улучшение растворимости препаратов, производных прегнана и пиридина //Материалы 46 региональной конференции по фармации и фармакологии. Сб. научи, тр. -Пятигорск, 1991. -С.6-7. (соавт. Беликов В.Г., Гаврилин Ы.В. и др.)

39. Изучение взаимодействия р-циклодекстринов с диэтилаии-

док никотиновой кислоты //Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востока:Тез. докл. науч.-практ. конф.-Тоыск, 1S91.-С.145-145. (соавт. Лукаагава Л.А., Куякцзва A.M. и др.)

40. Изучение влияния е-циклодекстрина на растворимость некоторых стероидных гориоков в воде //Фармация.-1S91 .-T.4Q.N 2. -С.35-37. (соавт.Беликов В.Г., Гаврнл>ш Ю.и др.)

41. Изучение влияния р-цкклодекстрши на стабильность лекарственных средств //Проблемы стандартизации и контроля качества лекарственных средств.Том 2,Часть 2.5иэико-химическнэ из-тоды стандартизации и контроля качества лекарственных соэдстб

и средств медицинского макроанализа.Тез. докл. :-!'. ,1691.-С. 150 -151. (соавт. Газрплин М.В,, Макшашнко Т.И.к др.)

42. Изучение ьозыоккостк использования а-циклодекстрина для совзряенстЕоздккя производства продьнзолона // йш. фзрьац. ¡зурн.- 1901. -T.25,N 2.-С.48-45. (соазг. Беликов Б.Г., Гаврилки U.B., Умноэя Э.О. )

43. Йзучениа возкскностк кслользоьакия а-цчклод^хстрика в производстве сиж$юка //Биотехнология.-1S31 .-N 5.-С.83-64. (соаат.Бсликоэ З.Г.. Геэрплни Ы.5., Укнова Э.§.)

'14. Изучанке коыплексообр?оваяяя некоторых стсроидк^: гормонов с р-цкхлодекстрином //Изз.СККиВШ "Естественнее наук.1:". -ÎS3L.-N 3. -С.36-39. (ссазт. Беликов Е.Г., Е.Н.Взргейчкк E.H.)

45. Ксследоэаниэ клатсатоабразования в-цкклодэкстрина с метапрогеролш //Хим. фзрмац. гдгря. 1S91.~T.25,N 7.-С.67-69. (соавт. Клочков C.B., Еердник К.И.и др.)

t.S. Получение и исследование соединений включения "v.zzzv.s^r-т»:зо:;а с рнзшгадекстршоа //Резервы созар^энствошшя лакар-ствзккого обаслзчэния шеоленкя FC5CP: Тез.докд.науч.-практ. кокй. плзнума ЕИ05, Вдадааф, 12-13 карта 1831.- Вяадакр, 1831,- С.10-11. (соазт. Беликов В.Г., Гаврклин М.В., Естезат--Бэльй Ю.К.)

47. Разработка технологии и анализа лекарственных ферм, со-дер^аяж еоедннания еклвчгния тгамекаина и мзтапрогеролг // Актуально вопросы фар,.;, науки и практики: тез. докл. научко--прахт. конф. Курск. 3-5 ьпр. 1SS32.4.2 -Курск,1931.-С.120-121 (ссазт. Клочков С.В., Лукааоэа Л.А. и др.)

45. Получение соединения вкяючзкия с базиликовым з&грнш масло,« //Материалы 47 региональной кокф. по фармации н фармако-

norm. Сб. научи. тр.-Пятигорск,1992.-С.38.(соавт. Ткачева H.A., Андреева И.Н.)

49. Создание детских лекарственных форд на основе ¡з-циклоде-кстрина// Человек и лекарство: Тез. докл. Первого Российского национального конгресса,Москва 12-16 аир.,1892.-М.,1802.-0.225

50. Индуцированная оптическая активность в комплексах цюсло-декстринов //Успехи химии. -1882.-Вып.8.-С.1025-1048 Ссоавт. Яданов Ю.А., Алексеев D.E., Вергейчик E.H.)

51. Изучение структуры комплексов включения методом дифракции рентгеновских лучей //Материалы 47 региональн. конф. по фармации и фармакологии. Сб. научн. тр.-Пятигорск,1982.-С.25.

( соавт. Вергейчик E.H., Гаврилин М.В., Овчаренко Л.П.)