Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной

Шарова, Ольга Владимировна

Диссертации по фармакологии → Фармацевтическая химия и фармакогнозия

Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Шарова, Ольга Владимировна Самара 2007 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 15.00.02

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной

На правах рукописи

ШАРОВА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА

ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПО СТАВДАРТИЗАЦИИ И СОЗДАНИЮ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ КАЛЕНДУЛЫ ЛЕКАРСТВЕННОЙ

15.00.02 - Фармацевтическая химия, фармакогнозия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Самара-2007

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

Доктор фармацевтических наук, профессор Куркин Владимир Александрович Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Шатапаев Иван Федорович доктор фармацевтических наук, профессор Дмитрук Степан Евгеньевич

Ведущее учреждение ~ Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

На заседании диссертационного совета К 208 085 03

При ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава»

(443 079, г Самара, проспект К Маркса, 165 Б)

С диссертационной работой можно ознакомиться В библиотеке ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава» (Самара, ул Арцыбушевская, 171).

Автореферат разослан «ЛР » 2001 г

Ученый секретарь

Диссертационного совета

Защита состоится «_

2007 г в

часов

Кандидат фармацевтических наук

EJB. Авдеева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы Препараты календулы лекарственной, или ноготков лекарственных (Calendula officinalis L.) успешно используются в аллопатической и гомеопатической медицине как средства обладающие ранозаживляющими, противовоспалительными, регенерирующими, желчегонными и отхаркивающими свойствами Календула широко культивируется в Российской Федерации, а Самарская область является регионом, где сосредоточена самая крупная сырьевая база календулы лекарственной (СГПУ «Сергиевский», ЗАО «Самаралектравы» и ООО «Кентавр»)

В настоящее время цветки календулы лекарственной используются в отечественной медицинской практике в виде настойки (МО на 70% этиловом спирте), экстракта жидкого (1:2 на 40% этиловом спирте), масляного экстракта, мази, суппозиторий, входят в состав комплексных препаратов. Ротокан, Витаон, Алором, Венен гель, сбор желчегонный №3, сбор грудной №4 и др.

Широкий спектр фармакологического действия цветков календулы обусловлен содержанием различных классов биологически активных соединений (БАС). К ведущей группе БАС относятся витамины, а именно' каротиноиды Установлено, что содержание каротиноидов в сырье коррелирует со степенью махровости соцветий, а также зависит от способа сушки и условий хранения, однако анализ цветков календулы на содержание каротиноидов в НД не предусмотрен. Вторая группа

биологически активных соединений представлена флавоноидами, однако данные по компонентному составу являются противоречивыми

Фотохимические аспекты показателей качества в случае сырья и препаратов данного растения, также нуждаются в дальнейшем изучении, поскольку в Фармакопейной статье (ФС) 5 ГФ СССР XI издания на цветки календулы лекарственной отсутствуют разделы «Качественные реакции» и «Количественное определение», а содержание действующих веществ оценивается лишь косвенно по показателю «экстрактивных веществ, извлекаемых 70% этиловым спиртом, «не менее 35%»

Решение вопросов стандартизации новых лекарственных средств (ЛС) связано с разработкой объективных и унифицированных методов анализа сырья и препаратов (Арзамасцев А П. и др, 2000; Самылина И.А. и др , 1994)

Актуальна также задача по оптимизации состава и технологии препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий На наш взгляд, повышение в лекарственной форме уровня содержания действующих веществ приведет к усилению антимикробной и противовоспалительной активности

Цель и задачи исследования. Проведение изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области, а также разработка унифицированных методик стандартизации сырья и препаратов на основе данного растения

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи.

1 Изучение химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области

2 Разработка новых подходов к стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной, с учетом принципа унификации методик в

ряду лекарственное растительное сырье - субстанция - лекарственная форма.

3 Разработка методик качественного анализа цветков календулы лекарственной

4. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в цветках календулы лекарственной

5 Разработка методики количественного определения суммы каротиноидов в цветках календулы лекарственной

6 Разработка методик качественного и количественного анализа препаратов «Календулы настойка», «Календулы экстракт жидкий».

7 Оптимизация состава и технологии получения лекарственных препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий»

8 Разработка и изучение числовых показателей препаратов. «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий».

9 Разработка и оформление нормативной документации (НД) на сырье «Ноготков цветки», а также препараты «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий»

Научная новизна. В результате изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области, выделены и идентифицированы 7 индивидуальных соединений, среди которых доминирующее флавоноидное вещество (нарциссин) выделено впервые в РФ из данного растения и идентифицировано с использованием УФ-, 'Н-ЯМР-спектроскопии, масс-спектрометрии и различных химических превращений (кислотный и ферментативный гидролиз)

Показана целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной по каротиноидам (ведущая группа БАС) и флавоноидам

Разработаны подходы к стандартизации, заключающиеся в обнаружении диагностического доминирующего флавоноида - нарциссина с использованием ТСХ-анализа, ГСО рутина и УФ-спектроскопии.

Научно обоснована целесообразность оптимизации состава и технологии получения лекарственных средств «Календулы экстракт жидкий» и «Календулы настойка», обладающих более высокой противомикробной активностью

Практическая значимость:

1 Разработаны методики качественного и количественного анализа цветков календулы лекарственной в проект ФС «Ноготков цветки» предложено ввести новые разделы «Качественные реакции» и «Количественное определение» и числовой показатель «Содержание суммы флавоноидов не менее 1,0%»

2 Разработаны методики качественного и количественного анализа препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» с использованием ТСХ-анализа и спекгрофотометрии.

3 Определены числовые показатели препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» содержание суммы флавоноидов, сухой остаток, концентрация спирта, экстрактивные вещества

4 Обоснована целесообразность применения разработанных препаратов цветков календулы лекарственной «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» в медицинской практике в качестве средств обладающих противомикробными свойствами.

5 Оформлены и направлены в Фармакопейный государственный комитет Министерства здравоохранения и социального развития РФ Изменения №1 к ФС 5 и проект ФС «Ноготков цветки» для включения в Российскую Государственную Фармакопею ХП издания

6 Разработаны проекты ФС на препараты «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий», для которых оптимизированы состав и технология получения 7. Результаты исследований используются в научных изысканиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета (акты внедрения от №1 и №2 от 4.09.2007 г.).

Положения, выдвигаемые на защиту:

1. Результаты изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области

2 Данные результатов исследований по разработке методов стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной.

3 Методики качественного и количественного анализа лекарственного растительного сырья (ЛРС) «Ноготков цветки» и препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» с использованием ГСО рутина

4. Результаты разработки и определения показателей качества ЛРС и препаратов «Календулы настойка», «Календулы экстракт жидкий».

Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Самарского государственного медицинского университета (№ Государственной регистрации 01200105332) и Республиканских программ

1 «Совершенствование лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений в рыночных условиях» по теме-«Создание лекарственных средств природного происхождения антимикробного, адаптогенного и гепатопротекторного действия» (№ Государственной регистрации 01990005277).

2 «Разработка методик качественного и количественного анализа сырья и препаратов лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды и флавоноиды» (№ Государственной регистрации 01990007536).

Апробация работы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на П Всероссийском съезде фармацевтических работников (Сочи, 2005 г.), на X и XI Всероссийском конгрессе "Экология и здоровье человека" (Самара, 2005; 2006 гг); на Межвузовской конференции «Аспирантские чтения» (Самара, 2005, 2006 гг), на конференции, посвященной 25-летию фармацевтического факультета БГМУ (Уфа, 2006 г), на 62-й Межрегиональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2007 г), на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора ЛН Березнеговской «Новые достижения в создании лекарственных средств растительного происхождения» (Томск, 2006 г.); на V международной конференции «Медико-социальная экология личности состояние и перспективы» (Минск, 2007 г ), на ХП Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2007 г), на Ш Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2007 г), на XIV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1620 апреля 2007 г)

Основное содержание диссертации опубликовано в 14 научных работах

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 150 страницах машинописного текста, содержит 17 таблиц, 23 рисунка Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4-х глав, отражающих результаты собственных

экспериментальных исследований и их обсуждение, общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 198 источника, из которых 60 на иностранных языках

Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследования, отмечена новизна и практическая значимость полученных результатов, а также изложены положения, выносимые на защиту.

Глава 1 содержит аналитический обзор отечественной и зарубежной литературы по современному состоянию исследований календулы лекарственной, в котором обобщены и систематизированы сведения по изучению химического состава растения, фармакологической активности, применению в медицинской практике

В главе 2 представлены характеристика объектов и методов исследования Приведены методики химического, физического и физико-химического изучения лекарственного сырья, индивидуальных веществ и препаратов, а также методы контроля качества лекарственных форм на основе цветков календулы лекарственной

В главах 3-6 экспериментальной части приводятся результаты собственных исследований по изучению химического состава цветков календулы лекарственной, совершенствованию методов стандартизации данного сырья и препаратов на его основе, оптимизации состава и технологии получения, оценке их качества и обоснованию целесообразности внедрения в медицинскую практику в качестве антимикробных и противовоспалительных лекарственных средств

В приложение вынесены материалы по разработке нормативной документации и акты внедрения результатов исследований

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. Микроскопический анализ соцветий календулы лекарственной

Анатомические исследования соцветий календулы лекарственной сорта «Кальта» проводили с использованием микроскопа «Биолам» с увеличением х184,8, х924, х1344

Микроскопический анализ цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области показал, что диагностическое значение для данного вида сырья имеют- наличие хромопластов в клетках эпидермиса, форма клеток эпидермиса, строение, вид и расположение волосков трубчатых и язычковых цветков, а также листочков обертки Немалое диагностическое значение играет и пыльца календулы лекарственной Результаты проведенного исследования подтверждаются соответствующими микрофотографиями.

2. Изучение химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области

В результате изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области, выделены 7 индивидуальных веществ относящихся к фенольным соединениям (1-4), каротиноидам (5), сапонинам (6) и стеринам (7) (табл. 1)

Препаративное разделение веществ осуществляли методом адсорбционной колоночной хроматографии Для элюирования использовали смеси растворителей, а именно: хлороформ-спирт в различных соотношениях. Эффективное разделение и очистка веществ достигалась чередованием сорбентов (силикагель, полиамвд) и соответствующих систем растворителей. Кристаллизацию и перекристаллизацию веществ осуществляли с использованием гексана,

хлороформа, этилового спирта и воды. Отсутствие примесей в полученных соединениях контролировали методом ТСХ в нескольких системах с использованием различных способов детекции

Для установления структуры выделенных веществ использовали данные УФ-, 'Н-ЯМР- и масс-спектров, а также результаты химических превращений ЯМР- и УФ-спектры выделенного диагностического флавоноида цветков календулы - нарциссина представлены на рисунках 1 и 2 соответственно

'Н-ЯМР-спектр нарциссина в смеси дейтероацетона и D20 (200 МГц) (Gemmmi 200) 8 (м д) 7,97 (д, 2 Гц, Н'-2), 7,66 (дд, 2 и 8,5 Гц, Н'-6), 6,96 (д, 2 Гц, Н'-5), 6,50 (д, 2 Гц, Н'-8), 6,24 (д, 2 Гц, Н-6), 5,23 (д, 7 Гц, Ни-1 глюкопиранозы), 4,50 (д, 2 Гц, НИ1-1 рамнопиранозы), 3,95 (с, ЗН, СНэО), 3,2-3,8 (10 Н Сахаров), 1,04 (д, 6 Гц, СН3 рамнозы) (рис 1,2) Нарциссин гидролизуется ферментом рамнодиастазой, что позволяет сделать вывод о наличии в данном гликозиде биозы рутинозы. При кислотном гидролизе расщепляется на глюкозу, рамнозу и агликон, идентифицированный как 3,5,7,4'-тетрагидрокси-3'-метоксифлавон (изорамнетин) УФ-спектры с диагностическими реагентами свидетельствуют о гликозилировании 3-ОН-группы изорамнетина

Следовательно, выделенное соединение является З-О-рутинозидом изорамнетина (нарциссин).

Соединения выделенные, в ходе проведения фитохимического исследования цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области, представлены в таблице 1

Установлено, что нарциссин является доминирующим и диагностическим флавоноидом впервые и выделенным в РФ из цветков календулы лекарственной.

Pue. 1. JIMP-cnerrp 3-0-p>thho3h4 n3opaMHeTHHa b ^ettTCpoanerOHe (+D20).

Absorption

PHC. 2. y<I>-cneKTp HapnwccHna

Таблица 1

Физико-химические константы соединений, выделенных из цветков календулы лекарственной

№ Название, химическая формула Состав У? Т.пл °С С(ЕЮН), нм

1. Нарциссин рсч, TXJP™ ^Ч^у—Шит С28Н32О16 316 173175° 257,268пл, 367 нм

2. Изокверцитрин он о C21H20OU 302 227229° 256,267пл, 370 нм

3 Кофейная кислота С9Н8О4 180 218221° 235,242, 326

4 Хлорогеновая кислота он CieHjeOp 203205° 243,300 пл, 330

5 Р-каротин НзС- ХЦ, ?"» Нз^Х^

С40Н54 in Jr'

6. Олеаноловая кислота СзоНдаОз т пл. 304307°

7. Р-ситостерин С29Н50 О т пл 135137°

3. Совершенствование методов стандартизации сырья «Ноготков цветки»

Согласно современным требованиям (НД) на ЛРС, фотохимический анализ включает задачи качественного и количественного анализа ЛРС по содержанию ведущих групп БАС, обеспечивающих фармакологическую активность.

Так, в нормативной документации на сырье «Ноготков цветки» отсутствуют разделы «Качественные реакции» и «Количественное определение» и, следовательно, для целей идентификации сырья не используются химические диагностические признаки В этом отношении особый интерес представляет тонкослойная хроматография, которая в последнее время все более широко используется в методиках качественного анализа

Учитывая высокое содержание флавоноидов в цветках календулы лекарственной, их несомненную значимость в проявлении биологической активности данного сырья, представляется целесообразным проведение исследований в плане обоснования возможности стандартизации данного ЛРС по содержанию флавоноидов

Необходимость во внесении изменений в ФС «Ноготков цветки» (ст. 5 ГФ XI издания) объясняется в данном случае отсутствием разделов: «Качественные реакции» и «Количественное определение».

Кроме того, в литературе описаны методики определения подлинности сырья «Ноготков цветки» путем обнаружения рутина, однако, по результатам проведенных нами исследований данное соединение в соцветиях календулы лекарственной не обнаружено, что говорит о нецелесообразности данного подхода

В этой связи, нами предложены новые подходы к стандартизации, заключающиеся в обнаружении доминирующего и диагностического флавоноида нарциссина в присутствии ГСО рутина (качественные реакции), а также определение суммы флавоноидов методом дифференциальной спектрофотометрии

Рис. 3. ТСХ-анализ извлечений цветков календулы лекарственной

(«Силуфол УФ -254», система растворителей: хлороформ - метиловый спирт -вода (26 14:3). Обозначения

1 Государственный стандартный образец рутина

2 Рабочий стандартный образец нарциссина

3. Рабочий стандартный образец Р-каротина

4. Извлечение на 40% этиловом спирте из цветков календулы лекарственной

5 Извлечение на 70% этиловом спирте из цветков календулы лекарственной.

3.1. Качественный анализ цветков календулы лекарственной

С целью определения подлинности сырья «Ноготков цветки» использовали ТСХ-анализ (рис 3), основанный на обнаружении и идентификации доминирующего флавоноида (нарциссин), и качественные реакции

В ходе разработки методики были проведены исследования по выбору оптимальных условий хроматографирования, позволяющие эффективно разделить основные компоненты сырья и однозначно идентифицировать доминирующее БАС-нарциссин.

В результате проведенных опытов с различными хроматографическими системами (хлороформ-этанол, хлороформ-метанол, хлороформ-метанол-вода в различных соотношениях) предпочтение было отдано системе растворителей хлороформ-метанол-вода (2614.3), обеспечивающей наиболее четкое разделение флавоноидов, в том числе и доминирующего компонента - З-О-рутинозид изорамнетина При просмотре хроматограммы в УФ-свете при длине 254 нм З-О-рутинозид изорамнетина обнаруживается в виде доминирующего пятна с ярко-фиолетовой флуоресценцией (Ь^ около 0,5) (рис 3).

На наш взгляд, в данной методике целесообразно использовать ГСО рутина, по физико-химическим свойствам близкий к нарцисеину, так как расчет величины ^ позволит повысить объективность методики для анализируемого вещества

Учитывая разнообразие БАС цветков календулы, целесообразно также определять в сырье наличие (3-каротина и тритерпеновых сапонинов

Для качественного анализа предлагается использовать также данные УФ-спектра водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной имеющий полосы поглощения с максимумами при 256±2 нм (флавоноиды) и «плечо» в области около 330-350 нм (флавоноиды+гидроксикоричные кислоты) (рис 4).

Исходя из полученных данных можно с уверенностью сказать, что выделенный впервые в РФ, из цветков календулы лекарственной диагностический флавоноид (нарциссин), достаточно объективно характеризует данное сырье.

Рис. 4. УФ-спектры растворов извлечений из цветков календулы

. ;

лекарственной.

Обозначения:

1 - раствор извлечения (1:30) из цветков календулы

■

лекарственной;

2 - раствор извлечения (1:30) из цветков календулы

лекарственной с добавлением алюминия хлорида;

3 - раствор извлечения (1:30) из цветков календулы

лекарственной с добавлением алюминия хлорида (дифференциальный спектр)

1.6 -1.4 -

1.2 -1 -о. а

о.б -

0,4 -

0.2 -

о 4200

650

ДпиниН0ЛН

3.2. Количественный анализ цветков календулы лекарственной

В основу предложенной нами методики количественного анализа БАС цветков календулы лекарственной предложено дифференциальное спектрофотометрическое определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин

С целью разработки методики количественного определения суммы флавоноидов нами определены оптимальные условия экстракции цветков календулы лекарственной экстрагент 70% этанол; соотношение сырье-экстрагент - 1-30, время экстракции - извлечение на водяной бане при температуре 85-90 °С в течение 60 мин

При разработке методики количественного определения суммы флавоноидов использовали реакцию комплексообразования с раствором алюминия хлорида для исключения вклада в значение оптической плотности других групп соединений В этом случае наблюдается батохромный сдвиг длинноволновой полосы флавоноидов, который обнаруживается в УФ-спектре в виде максимума поглощения при длине волны 408 нм. Это находит подтверждение в условиях дифференциальной спектрофотометрии. максимум поглощения при 412 нм (рис 4)

Изучение УФ-спектров ГСО рутина показало, что раствор данного стандарта в присутствии алюминия хлорида имеет тот же максимум поглощения (412 нм). Следовательно, рутин может быть использован в методике анализа в качестве ГСО

Метрологические характеристики методики количественного определения флавоноидов в сырье «Ноготков цветки», рассчитаны из результатов анализа одного образца данного сырья в 11 независимых измерениях (табл 2)

__19_

\1cipo 101 нче«.кии хараккриники мсшшьн 1м>.аш2

ко.жчссшенною »¡¡ре имения пммы ф мнинои юн н циспчач ка.юп 1\.1Ы .к-каровс-ннои

/ X 5 Р, % ЦР£ АХ Е, %

1(1 IV) МИНУ 2 2? 0,1)41 \ Н)

Результаты статистической обработки проведенных опытов свидетельствуют о том, что ошибка единичного определения суммы флавоноидов в цветках календулы лекарственной с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,40%. Опыты с добавками ГСО рутина в извлечение из цветков календулы свидетельствуют об отсутствии систематической ошибки

Следует отметить, что цельное и измельченное сырье, на котором проводилась отработка по показателю качества «содержание суммы флавоноидов», соответствовало требованиям ФС 5 ГФ XI издания по внешнему виду, микроскопическим и числовым показателям

4. Совершенствование методов стандартизации препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий»

При разработке подходов к решению проблем стандартизации препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» мы придерживались принципа унификации методик анализа в ряду лекарственное растительное сырье-субстанция-лекарственная форма (И.А. Самылина, 1994,1995 г).

Для качественного анализа препаратов данного растения, как и случае сырья, предложен метод ТСХ-анализа с использованием ГСО рутина, а также идентификация по параметрам УФ-спектра.

Рис. 5. ТСХ-анализ препаратов календулы лекарственвой

(«Силуфол УФ -254», система растворителей хлороформ - метиловый спирт пода. (26-14 3) Обозначения:

1 Государственный стандартный образец рутина.

2 Рабочий стандартный образец нарциссина

3. Рабочий стандартный образец (3-каротина

4. Настойка (1 5) на 70% этиловом спирте го цветков календулы лекарственной

5. Экстракт (1 2) на 70% этиловом спирте из цветков календулы лекарственной

При просмотре хроматограммы в УФ-свете при длине волны 254 нм обнаруживается доминирующее пятно с фиолетовой флуоресценцией-величина около 0,5 (нарциссин) (рис 5) На хроматограмме извлечения возможно обнаружение также других веществ - изокверцитрина (пятно с фиолетовой флуоресценцией), а также р-каротин с величиной Ь^ около 0,9 (пятно желтого цвета) Допускается также наличие других пятен с величиной около 0,8 (кофейная кислота) и 0,2 (хлорогеновая кислота) Также для качественного анализа предлагается использовать данные УФ-спектра водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной с характерным максимумом при 256±2 нм (флавоноиды) и «плечом» в области 330 -350 нм (флавоноиды+гидкроксикоричные кислоты)

В основу количественного определения суммы флавоноидов в настойке и экстракте календулы лекарственной, как в случае сырья положен метод дифференциальной спектрофотометрии Определение

суммы флавоноидов осуществляют в пересчете на рутин, как это предусмотрено и в проекте ФС 42- (взамен ФС 5 ГФ СССР XI издания)

УФ-спектр спиртовых растворов препаратов, в частности экстракта (рис. 6) имеет характерный максимум при Хтоах=256±2 нм (флавоноиды) и «плечом» в области 330-350 нм (флавоноиды+гидроксикоричные кислоты). Поскольку, ранее было обосновано что, оценку качества сырья целесообразно проводить по содержанию флавоноидов, аналитическая длина волны составляет - 412 нм. В данной области спектра спиртовые растворы препаратов и флавоноиды (нарциссин) имеют прямопропорциональную зависимость оптической плотности от концентрации Данное обстоятельство позволяет использовать спектрофотометрию для количественного определения флавоноидов в пересчета на рутин

Метрологические характеристики методики количественного анализа суммы флавоноидов в препарате «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» представлены в табл 4 ,5

Mci po.ioi ii'ii'iкко \<ip:iK-ii|iiiciiiKH Mi-ю ihkii /<<" ''■>/<; 4

KO.III'Kllltl-IfllOIl) Ulipciv.li.llllll оччы ф.ышикш l»lt u

IIUCMIHKI KM.II II 14.11.1 .U'K.ipcillt IIIIOII

_ __ _ __ __ _ _____

10 0,3 J 0,(X)51 95 2.23 0,01147 3,70

Ошибка единичного определения с доверительной вероятностью 95% составляет 3,70% Опыты с добавками ГСО рутина в препарат и в раствор А показали, что относительная ошибка находится в пределах ошибки единичного определения, что свидетельствует об отсутствии систематической ошибки методики

М(.1|10.1<)1ИЧССкИС \jpdk-UpifC1liKI1 М( 1Л1ИКИ ГчШЧЧ I

КО 1ИМСС1ВСПШН О (Игр*. К И'ИИИ 1>ММ1.1 ф.ЫН(1ИОИ ШП II

жирдк-ю кален 1>.1м ¡екарсшеннои

7 т Т7РЪ лх I

10 очл (I ()| ч«. :.■« оогыч

Ошибка единичного определения с доверительной вероятностью 95% составляет 4,65% (табл. 5); ошибка анализа находится в пределах ошибки единичного определения, что свидетельствует об отсутствии систематической ошибки методики (опыты с добавками).

С учетом результатов проведенных исследований возникла необходимость в пересмотре некоторых разделов имеющейся НД на цветки календулы лекарственной и препараты «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий».

5. Обоснование использования разработанных препаратов в медицинской практике

Цветки календулы лекарственной являются перспективным источником для получения лекарственных средств, обладающих, антимикробных, противовоспалительных, ускоряющих регенерацию лекарственных средств Большие ресурсы и доступность сырья, обширные сведения народной медицины, широкий спектр терапевтического действия делают календулу перспективным объектом исследования.

Достаточного широкий спектр терапевтического действия препаратов календулы лекарственной объясняется высоким содержание действующих веществ (флавоноиды, каротиноиды, тритерпеновые сапонины).

С использованием разработанных методик анализа нами оптимизированы состав и технология получения лекарственных средств «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий».

В усовершенствованных лекарственных средствах («Календулы настойка» в соотношении 1 5 вместо соотношения 1 10 и «Календулы экстракт жидкий» на 70% этиловом спирте, вместо 40% этилового спирта) обосновано более высокое содержание биологически активных соединений - каротиноидов и флавоноидов (соответственно в 1,2 и 1,5 раза) Разработанные препараты «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» превосходят в 2 раза по антимикробной активности образцы промышленных аналогов.

ВЫВОДЫ

1 В результате изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области, выделены 7 индивидуальных веществ, относящихся к фенольным соединениям (14), каротиноидам (5), сапонинам (6) и стерлиам (7).

2 Выделенные вещества идентифицированы с помощью УФ-, 'Н-ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии, а также различных химических превращений как нарциссин, изокверцитин, кофейная кислота, хлорогеновая кислота, Р-каротин, олеаноловая кислота и р-ситостерин.

3 Установлено, что доминирующий диагностический флавоноид цветков календулы лекарственной нарциссин (З-О-рутшюзид изорамнетина) выделен впервые в РФ из сырья данного растения

4 Показана целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов цветков календулы лекарственной по содержанию суммы флавоноидов (количественное определение) и по содержанию доминирующего флавоноида нарциссина (качественные реакции)

5 Разработаны методики качественного ТСХ-анализа цветков календулы лекарственной, основанные на обнаружении нарциссина, а также на определении параметров УФ-спектра

6 Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на ГСО рутина с использованием дифференциальной спектрофотометрии. Ошибка единичного

определения содержания суммы флавоноидов с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,40%

7 Содержание суммы флавоноидов в промышленных образцах цветков календулы лекарственной и образцах, культивируемых в Самарской области, находится пределах от 1,05% до 1,63%, что дало основание рекомендовать в качестве нижнего предела показатель «не менее 1,0%».

8 Обосновано включение в проект ФС «Ноготков цветки» дополнения к разделу «Качественные реакции» и введение нового раздела «Количественное определение» с регламентацией числового показателя «Сумма флавоноидов в пересчете на рутин не менее 1%.

9. Осуществлена оптимизация состава и способа получения лекарственных средств «Календулы настойка» (Г5) и «Календулы экстракт жидкий» (1:2) с использованием в обоих случаях в качестве экстрагента 70% этилового спирта

Ю.Разработаны методики качественного и количественного анализа препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» с использованием ТСХ и дифференциальной спектрофотометрии Ошибка единичного определения содержания суммы флавоноидов в настойке и экстракте с помощью разработанных методик с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,65% и ±4,70% соответственно

11. Определены числовые показатели препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» содержание суммы флавоноидов, сухой остаток, содержание спирта, В качестве нижнего предела содержания суммы флавоновдов, в пересчете на рутин, в настойке и экстракте рекомендованы показатели 0,2% и 0,4%, соответственно.

12.На основании экспериментальных данных, полученных в ходе химического изучения и анализа различных образцов цветков календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), оформлены Изменения №1 к ст. 5 (ГФ XI) и проект ФС «Ноготков цветки» для включения в Российскую Государственную Фармакопею XII издания

13.Разработаны проекты ФСП «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий», лекарственные средства на основе цветков календулы, обладающие более выраженной антимикробной активностью по сравнению с соответствующими промышленными аналогами.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Шарова, О В Хроматографическое исследование препаратов на основе цветков календулы лекарственной / О В Шарова // Аспирантский вестник Поволжья Тез. докл. №1, 2005 г. - Самара, 2005.- С. 109.

2. Браславский, В.Б. Перспективы использования антибактериальных растительных средств в медицинской практике. / В Б Браславский, О Е. Правдивцева, А.В. Куркина, В В Стеняева, А И Бонцевич, О В Шарова, Е С Артамонова, В М Рыжов // Экология и здоровье человека Труды X Всероссийского конгресса, Самара 11-13 октября 2005 г - Самара, 2005. - С 42-43

3. Куркин, В.А Современные аспекты стандартизации лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов, содержащих флавоноиды / В А. Куркин, Г Г Запесочная, В Б. Браславский, Е В Авдеева, О Е Правдивцева, А В Супильникова, В В Стеняева, М.В Егоров, А.И. Бонцевич, О В Шарова / П Всероссийский съезд фармацевтических работников. Материалы съезда, Сочи, 5-7 июня 2005 г. - Сочи, 2005 - С 95-96.

4. Шарова О.В. Фитохимическое исследование сырья и препаратов на основе цветков календулы лекарственной / О.В Шарова, В А Куркин // Новые достижения в создании лекарственных средств растительного происхождения Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Л.Н Березнеговской, Томск, 11-12 сентября 2006. - Томск, 2006 -С 370-372.

5. Шарова, О В Фармакогностическое исследование цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области / О В Шарова // Медицинский вестник Башкортостана Специальный выпуск посвящен 25-летию фарм. ф-та БГМУ. - 2006 -№ 1 - С 181-184

6. Шарова О.В Проблемы создания и стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной / О В Шарова // Экология и здоровье человека Проблемы выживания человека в техногенной среде современных городов: Труды XI Всероссийского конгресса, Самара, 5-7 декабря 2006 г - Самара, 2006 - С 18-19.

7. Шарова, О В Фитохимическое исследование сырья и препаратов на основе цветков календулы лекарственной / О В Шарова // Аспирантские чтения: Материалы межвуз конф. молодых ученых -Самара, 2006 - 284-287

8. Куркин, В.А. Флавоноиды цветков Calendula officinalis / В.А. Куркин, О.В Шарова Н Химия природ, соединений. - 2007. - № 2 С. 179-180

9. Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб науч. тр. / под ред. Е.Н. Вергейчика, Н Н. Кареевой / Пятигорская ГФА, Санкт-Петербургская ГХФА - Пятигорск, 2007. -С 416-420.

10. Куркин, В.А. Актуальные аспекты стандартизации лекарственного растительного сырья, содержащего флавоноиды / В А. Куркин, Е В. Авдеева, В.Б Браславский, О.Е Правдивцева, А В. Куркина, М В. Егоров, О В Шарова, Е С Артамонова, В.М Рыжов, Ламрини Мохаммед // Человек и лекарство: Тез. докл XIV Рос. нац конгр, Москва, 16-20 апр 2007 г. - М., 2007 - С. 839

11. Шарова, О В Проблемы стандартизации сырья «Ноготков цветки» / О.В Шарова // Молодые ученые в медицине. Тез докл ХП Всероссийской научно-практической конф., Казань, 25-26 апр 2007 -Казань,2007 -С.270-271

12. Шарова, О В Фитохимическое исследование сырья «Ноготков цветки» / О В. Шарова, В.А. Куркин // Медико-социальная экология личности- состояние и перспективы. Материалы V Международной конф , Минск, 6-7 апр. 2007. - Минск, 2007. - С. 345-347

13. Шарова, О.В Современные подходы к стандартизации сырья «Ноготков цветки» / О.В. Шарова // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья: Материалы Ш Всероссийской конф., книга 2. - Барнаул, 2007. - С 245-249.

14. Шарова, О.В Флавоноиды цветков календулы лекарственной / О.В Шарова, В.А. Куркин // Химия растительного сырья - 2007. №1. С 65-68

Подписано в печать 19 09.2007 Формат 60x84/16. Бумага офсетная Печать оперативная Уел печ л 1,63 Тираж 100 экз Заказ 973

Отпечатано в типографии ООО «ОФОРТ» 443080, г Самара, ул Революционная, 70, литера П Тел. 372-00-56,372-00-57

Оглавление диссертации Шарова, Ольга Владимировна :: 2007 :: Самара

Введение.

Глава 1. Современное состояние исследований цветков календулы лекарственной (Обзор литературы).

1.1. Историческая справка.

1.2. Ботаническое описание.

1.3. Ареал, культивирование.

1.4. Химический состав.

1.5. Микроскопия.

1.6. Числовые показатели.

1.7. Промышленное возделывание.

1.8. Заготовка и первичная обработка.

1.9. Применение цветков календулы лекарственной в народной и 36 традиционной медицине.

1.10. Фармакологические свойства цветков календулы 42 лекарственной и препаратов на ее основе.

1.11. Перспективы создания новых препаратов на основе цветков календулы лекарственной.

Выводы к главе 1.

Экспериментальная часть

Глава 2. Объекты и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Метод колоночной хроматографии.

2.2.2. Метод тонкослойной хроматографии.

2.2.3. Метод спектрофотометрии.

2.2.4. 'Н-ЯМР-спектроскопия. Масс-спектрометрия.

2.2.5. Методы, использованные для установления строения и идентификации выделенных соединений.

2.2.6. Методы, использованные для получения лекарственных средств и определения числовых показателей.

2.2.7. Исследование анатомического строения соцветий календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области.

Глава 3. Микроскопический анализ соцветий календулы лекарственной.

3.1. Методика приготовления микропрепарата «Цветки календулы лекарственной».

3.2. Приготовление микропрепарата на основе пыльцы календулы лекарственной.

3.3. Анализ строения цветков календулы лекарственной.

Выводы к главе 3.

Глава 4. Изучение химического состава цветков календулы лекарственной.

4.1. Получение суммы биологически активных веществ из сырья «Ноготков цветки» и их хроматографическое разделение.

4.2. Физико-химическая характеристика выделенных соединений и их производных.

Выводы к главе 4.

Глава 5. Совершенствование методов стандартизации сырья

Ноготков цветки».

5.1. Качественный анализ.

5.1.1. Методика качественного анализа цветков календулы лекарственной по содержанию флавоноидов.

5.1.1.1. Ультрафиолетовый спектр.

5.1.1.2. Качественная реакция.

5.1.1.3. Методика ТСХ-анализа цветков календулы лекарственной.

5.2. Количественное определение.

5.2.1. Методика количественного суммы флавоноидов в сырье

Ноготков цветки».

5.3. Методика ТСХ-анализа цветков календулы лекарственной на содержание каротиноидов.

5.4. Методика количественного анализа цветков календулы лекарственной на содержание каротиноидов.

5.5. Обоснование нижнего предела содержания суммы каротиноидов в различных образцах сырья календулы ^ лекарственной.

Выводы к главе 5.

Глава 6. Исследования по разработке и стандартизации новых препаратов на основе цветков календулы лекарственной.

6.1. Качественный анализ препаратов на основе цветков календулы лекарственной.

6.1.1. Методика качественного анализа настойки календулы лекарственной.

6.1.2. Методика качественного анализа жидкого экстракта на основе цветков календулы лекарственной.

6.2. Количественное определение суммы флавоноидов в препаратах на основе цветков календулы лекарственной.

6.2.1. Методика количественного определения суммы флавоноидов в настойке календулы лекарственной.

6.2.2. Методика количественного определения суммы флавоноидов в экстракте календулы лекарственной.

6.3. Оптимизация состава и технологии получения препарата «Календулы настойка».

6.4. Разработка препарата «Календулы экстракт жидкий».

6.5. Обоснование целесообразности использования лекарственных препаратов «Календулы настойка» и

Календулы экстракт жидкий» в медицинской практике.

Выводы по главе 6.

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Шарова, Ольга Владимировна, автореферат

Актуальность темы. Препараты календулы лекарственной, или ноготков лекарственных (Calendula officinalis L.) успешно используются в аллопатической и гомеопатической медицине как средства обладающие ранозаживляющими, противовоспалительными, регенерирующими, желчегонными и отхаркивающими свойствами. Календула широко культивируется в Российской Федерации, а Самарская область является регионом, где сосредоточена самая крупная сырьевая база календулы лекарственной (СГПУ «Сергиевский», ЗАО «Самаралектравы» и ООО «Кентавр»).

В настоящее время цветки календулы лекарственной используются в отечественной медицинской практике в виде настойки (1:10 на 70% этиловом спирте), экстракта жидкого (1:2 на 40% этиловом спирте), масляного экстракта, мази, суппозиторий, входят в состав комплексных препаратов: Ротокан, Витаон, Алором, Венен гель, сбор желчегонный №3, сбор грудной №4 и др.

Широкий спектр фармакологического действия цветков календулы обусловлен содержанием различных классов биологически активных соединений (БАС). К ведущей группе БАС относятся витамины, а именно: каротиноиды. Установлено, что содержание каротиноидов в сырье коррелирует со степенью махровости соцветий, а также зависит от способа сушки и условий хранения, однако анализ цветков календулы на содержание каротиноидов в НД не предусмотрен. Вторая группа биологически активных соединений представлена флавоноидами, однако данные по компонентному составу являются противоречивыми.

Фитохимические аспекты показателей качества в случае сырья и препаратов данного растения, также нуждаются в дальнейшем изучении, поскольку в Фармакопейной статье (ФС) 5 ГФ СССР XI издания на цветки календулы лекарственной отсутствуют разделы «Качественные реакции» и

Количественное определение», а содержание действующих веществ оценивается лишь косвенно по показателю «экстрактивных веществ, извлекаемых 70% этиловым спиртом, «не менее 35%».

Решение вопросов стандартизации новых лекарственных средств (ЛС) связано с разработкой объективных и унифицированных методов анализа сырья и препаратов (Арзамасцев А.П. и др., 2000; Самылина И.А. и др., 1994).

Актуальна также задача по оптимизации состава и технологии препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий. На наш взгляд, повышение в лекарственной форме уровня содержания действующих веществ приведет к усилению антимикробной и противовоспалительной активности.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Изучение химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области.

2. Разработка новых подходов к стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной, с учетом принципа унификации методик в ряду лекарственное растительное сырье — субстанция — лекарственная форма.

3. Проведение анализа анатомо-гистологических признаков соцветий календулы для уточнения диагностических особенностей данного ЛРС.

4. Разработка методик качественного анализа цветков календулы лекарственной.

5. Разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в цветках календулы лекарственной.

6. Разработка методики количественного определения суммы каротиноидов в цветках календулы лекарственной.

7. Разработка методик качественного и количественного анализа препаратов «Календулы настойка», «Календулы экстракт жидкий».

8. Оптимизация состава и технологии получения лекарственных препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий».

9. Разработка и изучение числовых показателей препаратов: «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий».

10.Разработка и оформление нормативной документации (НД) на сырье «Ноготков цветки», а также препараты «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий».

Показана целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной по каротиноидам (ведущая группа БАС) и флавоноидам.

Практическая значимость:

1. Разработаны методики качественного и количественного анализа цветков календулы лекарственной: в проект ФС «Ноготков цветки» предложено ввести новые разделы «Качественные реакции» и «Количественное определение» и числовой показатель «Содержание суммы флавоноидов не менее 1,0%».

2. Разработаны методики качественного и количественного анализа препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» с использованием ТСХ-анализа и спектрофотометрии.

3. Определены числовые показатели препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий»: содержание суммы флавоноидов, сухой остаток, концентрация спирта, экстрактивные вещества.

4. Обоснована целесообразность применения разработанных препаратов цветков календулы лекарственной «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» в медицинской практике в качестве средств обладающих противомикробными свойствами.

5. Оформлены и направлены в Фармакопейный государственный комитет Министерства здравоохранения и социального развития РФ Изменения №1 к ФС 5 (письмо № 123 от 27.01.05г.) и проект ФС «Ноготков цветки» для включения в Российскую Государственную Фармакопею XII издания.

6. Разработаны проекты ФС на препараты «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий», для которых оптимизированы состав и технология получения.

7. Результаты исследований используются в научных изысканиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета (акты внедрения от №1 и №2 от 4.09.2007 г.).

Положения, выдвигаемые на защиту:

1. Результаты изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области.

2. Данные результатов исследований по разработке методов стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной.

3. Методики качественного и количественного анализа лекарственного растительного сырья (ЛРС) «Ноготков цветки» и препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» с использованием ГСО рутина.

1. «Совершенствование лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений в рыночных условиях» по теме: «Создание лекарственных средств природного происхождения антимикробного, адаптогенного и гепатопротекторного действия» (№ Государственной регистрации 01990005277).

2. «Разработка методик качественного и количественного анализа сырья и препаратов лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды и флавоноиды» (№ Государственной регистрации 01990007536).

Апробация работы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на II Всероссийском съезде фармацевтических работников (Сочи, 2005 г.); на X и XI Всероссийском конгрессе "Экология и здоровье человека" (Самара, 2005; 2006 гг.); на Межвузовской конференции «Аспирантские чтения» (Самара, 2005, 2006 гг.); на конференции, посвященной 25-летию фармацевтического факультета БГМУ (Уфа, 2006 г.); на 62-й Межрегиональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2007 г.); на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Л.Н. Березнеговской «Новые достижения в создании лекарственных средств растительного происхождения» (Томск, 2006 г.); на V международной конференции «Медико-социальная экология личности: состояние и перспективы» (Минск, 2007 г.); на XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2007 г.); на III Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2007 г.); на XIV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1620 апреля 2007 г.).

Основное содержание диссертации опубликовано в 14 научных работах.

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 150 страницах машинописного текста, содержит 17 таблиц, 23 рисунка. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4-х глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований и их обсуждение, общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 198 источника, из которых 60 на иностранных языках.

Заключение диссертационного исследования на тему "Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной"

1. В результате изучения химического состава цветков календулы лекарственной, культивируемой в Самарской области, выделены 7 индивидуальных веществ, относящихся к фенольным соединениям (1-

4), каротиноидам (5), сапонинам (6) и стеринам (7).2. Выделенные вещества идентифицированы с помощью УФ-, 'Н-ЯМР спектроскопии и масс-спектрометрии, а также различных химических превращений как нарциссин, изокверцитин, кофейная кислота, хлорогеновая кислота, Р-каротин, олеаноловая кислота и Р-ситостерин.3. Установлено, что доминирующий диагностический флавоноид цветков календулы лекарственной нарциссин (3-О-рутинозид изорамнетина) выделен впервые в РФ из сырья данного растения.4. Показана целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов цветков календулы лекарственной по содержанию суммы флавоноидов (количественное определение) и по содержанию доминирующего флавоноида нарциссина (качественные реакции).5. Разработаны методики качественного ТСХ-анализа цветков календулы лекарственной, основанные на обнаружении нарциссина, а также на определении параметров УФ-спектра.6. Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на ГСО рутина с использованием дифференциальной спектрофотометрии. Ошибка единичного определения содержания суммы флавоноидов с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,40%.7. Содержание суммы флавоноидов в промышленных образцах цветков календулы лекарственной и образцах, культивируемых в Самарской области, находится пределах от 1,05% до 1,63%, что дало основание рекомендовать в качестве нижнего предела показатель «не менее 1,0%».8. Обосновано включение в проект ФС «Ноготков цветки» дополнения к разделу «Качественные реакции» и введение нового раздела «Количественное определение» с регламентацией числового показателя «Сумма флавоноидов в пересчете на рутин не менее 1%».9. Осуществлена оптимизация состава и способа получения лекарственных средств «Календулы настойка» (1:5) и «Календулы экстракт жидкий» (1:2) с использованием в обоих случаях в качестве экстрагента 70% этилового спирта.Ю.Разработаны методики качественного и количественного анализа препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий» с использованием ТСХ и дифференциальной спектрофотометрии.Ошибка единичного определения содержания суммы флавоноидов в настойке и экстракте с помощью разработанных методик с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,65%) и ±4,70% соответственно.11.Определены числовые показатели препаратов «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий»: содержание суммы флавоноидов, сухой остаток, содержание спирта. В качестве нижнего предела содержания суммы флавоноидов (в пересчете на рутин) в настойке и экстракте рекомендованы показатели 0,2% и 0,4%, соответственно.12.На основании экспериментальных данных, полученных в ходе микроскопического и химического изучения, и анализа различных образцов цветков календулы лекарственной {Calendula officinalis L.), оформлены Изменения №1 к ст. 5 (ГФ XI) (письмо №123 от 27.01.05 г.) и проект ФС «Ноготков цветки» для включения в Российскую Государственную Фармакопею XII издания.13.Разработаны проекты ФСП «Календулы настойка» и «Календулы экстракт жидкий», лекарственные средства на основе цветков календулы, обладающие более выраженной антимикробной активностью по сравнению с соответствующими промышленными аналогами.

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2007 года, Шарова, Ольга Владимировна

1. Абдуллабекова, В.Н. Разработка метода количественного анализа цветков календулы лекарственной В.Н. Абдуллабекова, А.А. Тулаганов Химико-фармацевтический журнал 2001. Т. 35. 10. 25-26.

2. Авдеева, Е.В. Изучение некоторых фенольных и терпеноидных соединений, используемых в стандартизации лекарственных растений: Автореф. Дис. канд. фармац. наук Е.В. Авдеева. Москва, 1997.-23 с.

3. Акопов, М.Э. Важнейшие отечественные лекарственные растения и их применение М.Э. Акопов. -УзССР «Медицина», 1986 511513.

4. Амасиаци Амирдовлат Не нужное для для неучей. М.: Наука. 1990.-880 с. 5.

5. Анненков, Н Ботанический словарь. -Пб., 1878. 646 с. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений А.А. Никитин, И.А. Панкова. Ленинград, 1982. 290-293.

6. Арзамасцев, А.П. Основные аспекты совершенствования фармакопейного анализа А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, В.Л. Багирова Хим.-фарм. журн. 2000. №5 47-49.

7. Арзамасцев, А.П. Государственные стандартные образцы лекарственных веществ (проект общей фармакопейной статьи) А.П. Арзамасцев, В.Л. Дорофеев, Н.П. Садчикова Ведомости научного центра экспертизы и государственного средств. МЗ РФ, 2000. 3. 24-26.

8. Арзамасцев, А.П. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Харитонов Ведомости научного центра Ю.Я. и контроля лекарственных экспертизы

9. Арифходжаев, А.О. Галактаны и галактаносодержащие Химия полисахариды высших растений А.О. Арифходжаев природных соединений 2000. №3 185-197.

10. Ароматерапия: Справ. В.В. Николаевский. М.: Медицина, 2000. 41.

11. Астахова, А.В. Лекарственные травы и биологически активные добавки. Безопасность лекарств. 2000. 1. 83-95.

12. Астахова, А.В. Биологически активные добавки (БАД). Безопасность лекарств. 2000. 4. 12-16.

13. Ахрем, А.А. Тонкослойная хроматография А.А. Ахрем, А.И. Кузнецова. М.: Наука. 1964. 153 с.

14. Багинская, А.И., О.А. Коновалова, В.К. Колхир IV Российский национальный конгресс «Человек и лекарство». 1997. 249.

15. Багирова, В.Л. О стандартизации лекарственных средств на современном этапе В.Л. Багирова, Е.Л. Ковалева, Н.П. Садчикова Хим. фарм. журн. 2001.- Т. 34, 11. 46-47.

16. Багирова, В.Л. Ассортимент лекарственного растительного сырья на фармацевтическом рынке России В.Л. Багирова, И.А. Баландина, Т.А. Сокольская, О.Н. Воробьева, Л.Г. Алехина Новая аптека. 2004. 2. С 57-62.

17. Багирова, В.Л. Ассортимент лекарственных сборов на фармацевтическом рынке России В.Л. Багирова, И.А. Баландина, Т.А. Сокольская, О.Н. Воробьева, Л.Г. Алехина Новая аптека. 2 0 0 4 3 С 65-70.

18. Багирская, А.И. Густой экстракт календулы новое ранозаживляющее средство А.И. Багирская, О.А. Коновалова, В.К. Колхир, Н.Г. Глазова, М.Б. Боровкова, Т.Е. Лескова Человек и

19. Бандюкова, В.А. Исследование флавоноидов некоторых видов растений семейства сложноцветных, бурачниковых и бересклетовых /В.А. Бандюкова, Ф. Джумырко, Н.В. Сергеева, А.Л. Шинкаренко Труды первого всесоюзного съезда фармацевтов: Пятигорск, 1 4 1 9 сент. 1967г.-М.: 1970.-С. 253-258.

20. Беленький, Б.Г. Тонкослойная хроматография. В кн.: Успехи хроматографии. К 100-летию со дня рождения М.С. Цвета. Под р е д К.В. Чмутова и К.И. Сакодынского. М.: Наука. 1972. с. 134-162.

21. Беликов, В.В. Реакции комплексообразования в анализе флавоноидов В.В. Беликов, Т.В. Точкова Фенольные соединения и физиологические свойства. Алма-Ата, 1973. 168-172.

22. Беликов, В.В. Применение ВЭЖХ в анализе флавоноидных их препаратов /В.В. Беликов Проблемы стандартизации и контороля качества лекарственных средств: Мат. докл. всесоюз. конф., 1 8 2 1 декабря 1991.-М., 1991.-Т. 2, ч. 1 С 14-16.

23. Березовская, Т.П. Методы микроскопического анализа ботанических объектов Т.П. Березовская, Н.В. Дощинская, Е.А. Серых. Т о м с к 1978.-113 с.

24. Биофлавоноид кверцетин высокоэффективный антиоксидаыт Савченко Л.В., Мусатова З.И., Высоцкий И.Ю., Сафонов Ю.П.: Д е п в УкрННИНТН 0608.90. 1248 Ук. 90.

25. Бирюк, В.А. Фенольные соединения соцветий Calendula officinalis В.А. Бирюк, В.Т. науки Чернобай и Современные Тез. докл. L. проблемы II съезда фармацевтической практики: фармацевтов Украинской ССР: Тез. докл. II съезда фармацевтов Украинской ССР 1972 г. Киев, 1972. 744-745.

26. Бубенчикова, В.Н. Разработка методов анализа растительного сырья содержащего флавоноиды В.Н. Бубенчикова, Т.В. Точкова Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востоке: Тез. докл. Научо-практической конференции посвященной 50-летию фармацевтического факультета 1991 г. Томск, 1991. 117-118.

27. Бурцева, И.В. Исследование нового вида сырья шрота цветков ноготков И.В. Бурцева, Г.И. Олешко, В.Ф. Левинова и др. Фармация. 2004. №4. 16-18.

28. Бурцева, И.В. Фармакогностическое изучение шрота цветков ноготков после получения настойки: Афтореф. дис. канд. фарм. наук И.В. Бурцева. Пермь, 2004. 22 с.

29. Бурцева, И.В. Оптимальные условия поучения масляного экстракта шрота цветков ноготков И.В. Бурцева, М.С. Чигвинцева, В.Ф. Левинова, Л.К. Бабиян Науки о человеке: Сб. ст. V конгр. молодых ученых и специалистов. Томск: СибГМУ, 2004. 338-339.

30. Васильев, В.П. Аналитическая химия. В 2-х ч. Ч II. Физикохимические методы анализа. Учеб. для химико-технол. спец. вузов. В.П. Васильев. М.: Высш. шк. 1989. 384 с.

31. Вечерко, Л.П. Календулозид А из Calendula officinalis L. Л.П. Вечерко, Э.П. Зинкевич, Н.И. Либизов, А.И Баньковский Химия природ, соединений. 1969. 1. 58-59.

32. Вечерко, Л.П. Строение календулозида А Л.П. Вечерко, Э.П. Зинкевич, Н.И. Либизов, А.И Баньковский Химия природ, соединений. 1971. 1. 22-27.

33. Вечерко, Л.П. Строение календулозида F из корней Calendula officinalis L. Л.П. Вечерко, Э.П. Зинкевич, М. Коган Химия природ, соединений. 1973. 4. 561-562.

34. Вечерко, Л.П. Строение календулозидов С и D из Calendula officinalis L. Л.П. Вечерко, Э.П. Зинкевич, А.Ф. Свиридов, М. Коган Химия природ, соединений. 1975. 3. 366.

35. Видюкова, А.И. О противовоспалительном действии полфенольного препарата из календулы лекарственной А.И. Видюкова, ЯМ. Хаджей, Г.В. Оболенцева Четвертый всесоюзный симпозиум по фенольным соединениям: Тез. докл. Ташкент, 1982. 14-15.

36. Высокоэффективная тонкослойная хроматография Под ред. А. Златкиса и Р.Е. Кайзера (пер. с англ. под ред. д.х.н., проф. В.Г. Березкина). М Мир. 1979. 245 с. 38. ВФС 42-1638-

37. Экстракт календулы жидкий Фармакопейный государственный комитет. Введ. 10.06.87 до 31.12.91. 3 с.

38. Гаевский, А.В. Химическая оценка лекарственных культур проблемы селекции на качество. Изменчивость химического состава растений и аналитический контроль в селекционном процессе А.В. Гаевский, P.M. Иванова, А.И. Брыкин Хим. фарм. журн. 1981. №7. 64-69.

39. Георгиевский, В.П. 50 лет тонкослойной хроматографии В.П. Георгиевский, Ю.В. Шостенко Фармация. 1989. Т. 38, 3. 86-87.

40. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С Е Дмитрук Новосибирск: Наука, Сиб. отд., 1990. 330 с.

41. Гринкевич, Н.И. Химический анализ лекарственных растений. Учеб. пособие для фарм. вузов Н.И. Гринкевич, И.А. Баландина, В.А. Ермакова и др. М.: Высшая школа, 1983. 176 с.

42. Головкин, Б.Н. О чем говорят названия растений Б.Н. Головкин. М.: Колос, 1992.-192 с.

43. Гордиенко, А.Д. Гепатопротекторный механизм действия флавоноидов А.Д. Горденко Фармация. 1990. Т. 39, 3. 75-78.

44. Государственная Фармакопея СССР МЗ СССР. 10-е изд.- М.: Медицина, 1968.

45. Государственная фармакопея СССР. XI издание, вып. 1 и 2. М.: Медицина, 1991. Т.2 (вып.2). 47. ГОСТ 17768-

46. Средства лекарственные. Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение.

47. Государственный реестр лекарственных средств Фонд фармацевтич. информ. Офиц. изд. (по состоянию на 1 сентября 2004 г.) М.: «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава РФ, 2004.

48. Григорьева, Н.А. Биологические особенности возделывания календулы лекарственной и ромашки аптечной при минимальных затратах ручного труда, без применения средств химизации: Автореф. дис. канд. биол. наук Н.А. Григорьева. Москва, 2003. 23 с.

49. Гунар, О.В. Особенностииспытания лекарственного растительного сырья на микробиологическую чистоту О.В. Гунар Фармация. 2003.-Т. 51, 3 С 5-7.

50. Долгова, А.А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии А.А. Долгова, Е.Я. Ладыгина. М.: Медицина, 1977. С 215.

51. Дрозд, Г.А., Дрозд, Н.Г. Лекарственные растения, содержащие флавоноиды: ограничения для применения. Сборник работ 68-й итоговой научной сессии КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного научного центра РАМН. В частях. Часть П. Курск: КГМУ. 2002. 215-216. 2-х

52. Дрозд, Г.А. Ограничения и противопоказания для применения лекарственного растительного сырья: Практ. Пособие. Курск-2006. 8 3 с.

53. Жидкостная колоночная хроматография Под ред.

54. Дейла, К. Мацека, Я. Янака (пер. с англ.). М.: Мир. 1978. 428 с.

55. Зайцев, В.М., Прикладная медицинская статистика Лифляндский В.Г., Маринкин В.И. -Пб. Фолиант. 2003. 432 с.

56. Запесочная, Г.Г. Фенилпропаноиды в стандартизации лекарственных растений Г.Г. Запесочная, В.А. Куркин III Международная конференция "Экологическая патология и ее фармакокоррекция": Тез. докл. Чита, 1991. Ч. П. 23.

57. Зимин, В.М. Библиотечка лекарственных растений: собрание народной и научной медицины. В.М. Зимин -Пб.: 1993. Т. I 139-140.

58. Исмагилов, P.P., Костылев Д.А. Календула. P.P. Исмагилов, Д.А. Костылев. Уфа: БГАУ, 2000. 102 с.

59. Казаринова, Н.В. Лекарственные растения Сибири для лечения сердечно-сосудистых заболеваний Н.В. Казаринова, М.Н. Ломоносова, В.М. Триль Новосибирск: Наука. Сиб. Отделение, 1991.-240 с.

60. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография. В 2-х томах. Пер. с англ. Под ред. д.х.н., проф. В.Г. Березкина. М.: Мир. -1981. 1139 с.

61. Колесникова, В.Г., Марченко В.А., Сыровежко Н.В. Лекарственные растения: мифы и реальность В.Г. Колесникова, В.А. Марченко, Н.В. Сыровежко -Пб.: СПХФА, 1998.-261 с.

62. Комаров, В.Л. Практический курс анатомии растений В.Л. Комаров. -Пб.: издательство академии наук СССР. 1938. 225-228.

63. Комисаренко, Н.Ф. Флавоноиды соцветий Calendula officinalis L. Н.Ф. Комисаренко, В.Т. Чернобай, А.И. Деркач Химия природ, соединений. 1988. 6. 795-801.

64. Корсун, В.Ф. Лечение кожных болезней препаратами растительного происхождения: Справочник В.Ф. Корсун. Минск: Беларусь, 1995.-С. 15-37.

65. Корсун, В.Ф. 1001 вопрос о фитотерапии. Книга 1: Растения бальзаи для души и тела В.Ф. Корсун, П.А. Захаров, А.А. Корсун. С-Пб.: «Диля», 1999. 14-16.

66. Костенникова, З.П. Количественное определение флавоноидов в настойке календулы методом УФ-спектрофотометрии З.П. Костенникова, Г.А. Панова, Р. Дамбраускеш Фармация. 1984. Т. 3 3 6 С 33-35.

67. Кражан, И.А. Лечение хронического катарального гингивита с применением календулы, иммобилизованной на полисорбе И.А. Кражан, Н.Н. Гаража Стоматология. 2001. №5. 11-13.

68. Крапивина, И.В. Сравнительное изучение химического состава шрота цветков календулы лекарственной и исходного сырья И.В. Крапивина, В.Ф. Левинова, Г.И. Олешко, А.В. Канин Актуальные проблемы в фармацевтической науке и образовании: Мат. межвуз. науч. конф. -Пермь: ПГФА, 2001. 108-109.

69. Кулатаева, А.К. К вопросу разработки препарата для лечения заболеваний пародонта на основе фитокомпозиции этанольных экстрактов и эфирных масел лекарственных растений А.К. Кулатаева, Р.Н. Пак, С М Адекенов V конгресс молодых ученых и специалистов «Науки о человеке»: Сборник статей. Томск, 2004. 174.

70. Куркин, В.А. Физико-химические методы исследования природных биологически активных соединений. Часть I. Хроматографические

71. Куркин, В.А. Иллюстрированный словарь терминов и понятий в фармакогнозии: Учебное пособие для студентов медицинских и фармацевтических вузов, врачей и фармацевтических работников В.А. Куркин, В.Ф. Новодранова, Т.В. Куркина Москва; Самара: ГП «Перспектива», СамГМУ, 2002. 188с.

72. Куркин, В.А. Итоги и перспективы исследований в области создания препаратов на основе лекарственного растительного сырья, содержащего фенилпропаноиды В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, Е.В. Авдеева Поиск, разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности: Материалы докладов Томск, 2000. 40-42.

73. Куркин, В.А. К вопросу о стандартизации лекарственного сырья содержащего флавоноиды и фенилпропаноиды В.А. Куркин, О.В. Маевская, В.Б. Браславский и др.// Применение хроматографии в пищевой, микробиологической и медицинской промышленности: Материалы Всесоюзной конференции. Геленджик, 1990. 85-86.

74. Куркин, В.А. Физико-химические методы исследования природных биологически активных соединений. Ч.

75. Хроматографические Международной научной конференции. методы: Учебное пособие В.А. Куркин, В.Б. Браславский, Е.В. Авдеева, М.Ф. Сенцов, Л.Д. Климова, И.Ф. Шаталаев. Самара: СамГМУ, 1997.-38 с.

76. Курс органической химии П. Каррер; Пер с немец. В.Э. Вассерберга, Э.М. Левиной, Л.Д. Родионовой; Под ред. М.Н. Колосова. С-Пб.: Гос. Научно-техническое издат. хим. Литературы, 1962.-1216 с.

77. Лавренов, В.К., Лавренова, Г.В. Энциклопедия лекарственных растений народной медицины В.К. Лавренов, Г.В. Лавренова С Пб.: Издательский дом «Нева», 2003, 272 с илл., с. 90.

78. Ладыгина, Е.Я. Календула лекарственная Е.Я. Ладыгина Фармация. 1992.-Т.40. №4. 84-86.

79. Лекарственные растения государственной фармакопеи 1 и 2 том Под ред. Самылиной И.А., Северцева В.А. М. Анми. 1999, 2003.

80. Лекарственные растения (Растения целители): Справ, пособие А.Ф. Гаммерман, Г.Н. Кадаев, А.А. Яценко-Хмелевский. 4 изд., испр. и доп. М Высш. шк. 1990. 451-452.

81. Лекарственные растения Сибири для лечения сердечно-сосудистых заболеваний Под ред. И.М. Красноборов, С В Казначеев Новосибирск, 1991. 169-171.

82. Лекарственные средства: свойства, применение, противопоказания: Справ. Сост.: М.А. Клюев, Н.М. Богданова, О.А. Волкова; Под ред. М.А. Клюева. М.: Рус. кн., 1993. 575 с.

83. Лечение растениями: основы фитотерапии: Учеб. пособие В.М. Баева М.: ООО «Издательство Астрель», 2004. 202 с.

84. Литвиненко, В.И. Гликофлавоноиды в растениях семейства астровые В.И. Литвиненко, В.Н. Бубенчикова, Т.П. Попова Состояние и развитие фармации в Сибири и на Дальнем Востоке: Тез. докл. Научно-практической конференции посвященной 50-летию фармацевтического факультета 1991 г. Томск, 1991. 156-157.

85. Любимов, Б.И. Опыт оценки безопасности фармакологических средств в России (1991-1996) Проблемы и перспективы: Тез. докл. Всероссийского научного симпозиума. -Пб. 1997.- 299-300.

86. Маринина, Т.Ф. Технология и стандартизация мази календулы на основе геля ПЭО 1500 Т.Ф. Маринина Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного

87. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: Практ.пособие. В.2 т. Т.2. 14 изд., перераб., исправ. и доп. М.: Новая волна, 2000. 608 с.

88. Надиров, К.С. Адсорбция фавоноидов на платиновом электроде К.С. Надиров Химия природных соединений 2000. 4. 176.

89. Налепо, Л.Ф. Гиполипидемическое действие настойки календулы Л.Ф. Налепо Гомеопатия и фитотерапия 1997. 2. 86-87.

90. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация Под ред. Багировой В.Л., Северцева В.А. С-Пб.: СпецЛит. 2001.

91. Никитин, А.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений А.А. Никитин, И.А. Панкова. Л., Наука, 1982. С 290-293.

92. Ногаре, Д. Газо-жидкостная хроматография. Теория и практика (пер. с англ.). Д. Ногаре, Р.С. Джувет- Л.: Недра. 1996. 420 с.

93. Носенко, М.А. Подбор лекарственных трав для конструирования косметического противовоспалительного средства М.А. Носенко Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: Материалы 58-й межрегиональной конференции по фармации и фармакологии. Пятигорск, 2003. 343-346.

94. Носов, A.M. Лекарственные растения A.M. Носов. М.: ООО «Издательство «Эксмо», 2004. 350 с.

95. Олешко, Г.И. К рациональному использованию листьев земляники и цветков ноготков Г.И. Олешко, О.В. Петухова, И.В. Крапивина, В.Ф. Левинова Человек и лекарство: Тез. докл. X Рос. нац. конгр., Москва, 2003 г. М., 2003. 643.

96. Олешко, Г.И. Перспективы использования лекарственных средств календулы лекарственной и земляники лесной Г.И. Олешко, Г.А. Иванова, И.В. Крапивина, В.Ф. Левинова, О.В. Петухова Человек и

97. Омельчук, М.А. Календула лекарственная источник сырья для новых лекарственных препаратов М.А. Омельчук Современные методы исследования лекарственных растений: Научные труды. Т. XX.-М., 1983.-С.188-192.

98. Пастушенков, Л.В., Лесиовская, Е.Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии Л.В. Пастушенков, Е.Е Лесиовская Ч. I, II. С— Пб.: СПХФИ, 1995.

99. Патент РФ №2 134584 на изобретение «Способ получения иммуномодулирующего препарата «Настойка эхинацеи пурпурной» В.А. Куркин, В.В. Косарев, О.И. Авдеева, Е.В. Авдеева, П.Г. Мизина, А.В. Жестков; заявитель и патентообладатель Самарский государственный медицинский университет. А61К35/78. Бюл. 23 от 20.08.99

100. Патент РФ №2121358, приор на изобретение «Лекарственные формы для лечения гнойных ран и способ лечения гнойных ран С В Первушкин, А.А.Сохина, М.О. Тархова, В.А. Куркин, Е.А. Столяров //приор, от 30.07.964 зарег. 10.11.98, бюл. №31. ЮО.Просовский, М.А. Перспективы использования сырья календулы после получения настойки М.А. Просовский, Г.И. Олешко, И.В. Крапивина и др. Перспективы использования естественных наук в высшей школе: Тр. междунар. науч. конф. Пермь, 2001. Т.4. 194-198. 101. Прохорова, Л.В. Разработка фармакопейных статей на препараты календулы цветки и календулы настойка Л.В. Прохорова, Н.П. Антонова, Е.И. Богданова, Л.И. Замараева Человек и лекарство: Тез. докл. XI Рос. нац. конгр., Москва, 2004 г. М., 2004. 890891.

102. Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. под ред. Е.Н. Вергейчика, Н.Н. Каревой Пятигорская ГФА, -Пб. ГХФА. Пятигорск, 2007. 207-208.

103. Растения для нас: Справочное издание Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. -Пб.: Учебная книга, 1996. 654 с.

104. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Л.: Наука, Т. 1—7, 1987—1993. Ю

105. Самылина, И.А. Основные направления исследований лекарственных растений на современном этапе И.А. Самылина, И.С. Грицаенко, Н.К. Горчакова Современные аспекты изучения лекарственных растений: Научные труды. Т. XXXIV. М., 1995. 3-6. Ю

106. Северцева, О.В. Изучение каротиноидов бархатца крупноцветкового (Tagetes erekta) и календулы лекарственной {Calendula officinalis L.) О.В. Северцева Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: Материалы IV Международного съезда, Великий Новгород, 29 июня 1 июля, 2000 г 2 0 0 0 С 318-320.

107. Слуева, Е.К. Оценка содержания суммы флавоноидов в настойке календулы Е.К. Слуева, Е.Н. Жукович, Л.А. Шарикова, Т.Ф. Прибыткова, Е.Б. Деревщикова Фармация. 2003.-Т.51, 1. 13-15. 1 Ю.Смирнова, Л.П. Особенности применения стандартного рутина в анализе растительного сырья, образца и витаминных фитопрепаратов Л.П. Смирнова, С. Николаева, В.А. Быков, Л.В. Яковлева и др. Химико-фармацевтический журнал 2000. Т. 34. 1.С. 29-31.

108. Смирнова, Л. Календула, или ноготки лекарственные, золотой ключ к долголетию Авт.- сост. Л. Смирнова. М.: ACT; Мн.: Харвест, 2005. 64 с. П

109. Соколов, Я. Фитотерапия и фитофармакология: Рук. для врачей. Я. Соколов. М.: Медицинское информационное агенство, 2000. 224-228.

110. Соколов, Я. Сравнительное исследование стимулирующих свойств некоторых фенилпропаноидов Я. Соколов, В.П. Бойко, В.А. Куркин Хим. фармац. журнал. 1990. Т. 24, 10. 66-68.

111. Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия): Справ. Сост.: Я. Соколов, И.П. Замотаев. М.: Медицина, 1988. 463 с.

112. Справочник лечебных средств и терапевтических методов The prevention how to dictionary of healing remedies and techniques: Более 350 различ. методов лечения: Пер. с англ. М.: Рипол классик,2001. 4 7 2 с ил. Пб.Тахтаджан, А. Л. Жизнь растений. Цветковые растения А.Л.Тахтаджан, Ан. А.Федоров. М.:Просвещение, 1981. Т. 5. Ч. 2. 468-469. 117.ТУ 64-4-72-88. ОКП 93 7662 0491 05 Плод облепихи сухой (Взамен ТУ 64-4-72-86). Введ. 01.05.88. 8 с.

113. Тумаков, А. Хроматография на бумаге и в тонком слое. Теория и практика. Учеб. пособие для студентов, врачей и фармацевтов А. Тумаков, Р.А. Тимирбулатов, В.Я. Кириллова. Самара, СамГМУ, 1999.-70 с.

114. Турищев, Н. Фитотерапия ревматических болезней Н. Турищев Фармация. 2003. Т. 51, 4. 46-48.

115. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение А.Д. Турова. М., «Медицина», 1974. 218-222.

116. Фадеева, О.В. Исследование некоторых представителей семейства Астровых (сложноцветных) на содержание

117. Фармакогнозия. Атлас. Учеб. пособие для студентов фармацевт, интов и фармацевт, фак-тов мед. ин-тов Е.Я. Ладыгина, Н.И. Гринкевич, И.А. Самылина и др.; Под ред. Н.И. Гринкевич., Е.Я. Ладыгиной. М.: Медицина, 1989. 511 с ил. (Учеб. лит. для студентов мед. ин-тов Фармацевт, фак-т).

118. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических вузов В.А. Куркин. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2004. -1180 с.

119. Фармакология: Учеб. Д.А. Харкевич 9-е изд., перераб., доп. и испр. М.: ГЭОТАР Медиа, 2006. 736 с ил.

120. Федеральное руководство для врачей по использованию лекарственных средств (формулятивная система). Вып. 1. М.: ГЭОТАР Медицина, 2000. 974 с.

121. Федоров, А.А. Атлас по описанию и морфологии высших растений. Соцветие А.А. Федоров, З.Т. Артюшенко. -Пб.: Наука, 1979. 296 с.

122. Фитотерапия с основами клинической фармакологии: Справ. Под ред. В.Г. Кукеса. М.: Медицина, 1999. 192 с.

123. Флора СССР Под ред. В.Л. Комарова. Москва-Ленинград: Издательство академии наук СССР, 1961. Т. 26. 857-860. 129.ФСП 42-02061363-

124. Календулы настойка Фармакопейный государственный комитет. Введ. 27.06.01 до 27.06.06. 6 с.

125. Хакимова, Д.Р. Унификация методов стандартизации флавоноидов в процессе производства препаратов боярышника, зверобоя и календулы: Афтореф. дис. канд.фарм. наук Д.Р. Хакимова. Москва, 1994. -24 с.

126. Харитонов, Ю.Я. Аналитическая химия (аналитика). В 2 кн. Кн.

127. Количественный анализ. Фимзико-химические (инструментальные) методы анализа: Учебник для вузов. М.: Высш. Шк. 2001. 559 с ил.

128. Чернобаева, М.Г. Адсорбционная и ингибирующая активность календулы и фурацилина на полисорбе в отношении микрофлоры ротовой полости М.Г. Чернобай Актуальные вопросы клинической стоматологии- 1997. 16-17.

129. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации клинической биохимии М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалеи,. М.:Мир, 1980.-Т. 1,2.

130. Энциклопедия лекарственных растений. Пер. с немец. Предисл. И.А. Губанова. М., Мир, 1998. 209-210.

131. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: Учеб. пособие Под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. -Пб.: Спец. лит., 1999. 407 с.

132. Balza F., Towers G.H.W., Phytochemistry, 1984. Vol. 23, 10. P. 2333.

133. Bauer, R., Wagner H. Echinacea: Handbuch fur Arzte Apotheker i i n d andere Naturwissenschaftler.-Stuttgart: Wissenschaftliche Verlagsgeselschaft, 1990. -182 s.

134. Extracts of plants and thear cosenelis application. Part YII Chimical cheracteristies of extracts from. onfloresceuces of marigold {Calendula officinalis L.). 147.CA. 1983, 99, №15, 119372 g. The stereochemistry of hydroxylation the carotenoid Rutein or Calendula officinalis I B.V. Milborrow Phytochem. 1982. 21 (12), 2853-7. 148.CA. 1885, 102, №23, 201209 y. Value of Calendula officinalis L_ inflorescences as a tannin source /

135. Declio Herba Pol. 1983. 29 (3-4) 211-16. 149. CA. 1985, 103, №3, 19919 y. Changes in the levels of prenyeguinones a n d tocopherols in Calendula officinalis during vegetation W. Iaiszowska, I_ Rygier Physiol. Plant,l 985, 63(4), 425-30.

136. Chemli, R., et al. Arvenoside A and B, triterpenoid saponins frorrx Calendula arvensis R. Chemli, A. Badadjamian, R. Faure, K. Boukef, Gr. Balansard, E. Vidal Phytochemistry. 1987. Vol. 26, №6. P. 1785-1786.

137. Chemli, R., et al. Etude des acides amines de Calendula arvensis eix arvensis Maire R. Chemli, K. Boukef, G. Balansard, A. Gayte-Sorbier Plant, med. phytother. 1986. T. 20, №3. P. 203-209.

138. Cholc V.S A Simple Assembly for Rapid Measurements of R, in Paper t Chromatography Biiochemical Educaiion (IUB) Pergamon Press. Oxford, UK t 1982, V. 10, 1. p 26-26/

139. Danzer, K. Three- and higher-dimensional calibration in analytical chemistry: Abstr. 14 th Sernin. Atom. Spectrochem., Hightatraso f Podbanske, Sept. 7-11, 1998 K. Danzer ISP Inf. Newslett. -1999.- Vol. 24, №8. P. 642.

140. Dean P D G, Johnson W S, Middle F A Ed Affinity Chromalography i. A Practical Approach 1RL Press. Oxford, England 1985. 215 p.

141. Ellis, B.E. Natural products from plant tissue culture B.E. Ellis Phytochemistry. 1988. Vol. 5, N. 9. P. 581-612.

142. Ellis, B.E. Phytochemistry- 1983 -vol. 22, 9 P:1941 1943.

143. European Pharmacopoeia. 3 r d Edn. 1

144. Strasbourg. Council of Europe. 1996.-1800 p.

145. European Pharmacopoeia, Ttchnical Guide for the Elaboration Monografs, 3 r d ed., Strasbourg: Council of Europe. 1999.

146. Flavonoid and antioxidant agents: impotance of their interaction with biomembranes F. Saija, M. Scalese, M. Lanza et al. Free Radical Biol.Med.-1995.- Vol. 19, 4.- P. 481-486.

147. Forgacs E., Cserhati T. Molecular Bases of Chromatographic Separation. Springer-Verlag, Heidelberg, Germany. 1997. 288 p.

148. Gaspar, G. Cromatographie in plase gazeuse. Pasymetrir de de pin nest pas une fatalite /G. Gaspar Srectra anal. 1997.- Vol.26, 199. -P.3637.

149. Geisman, T.A. The chemistry of flavonoid compounds T.A. Geisman.Oxford; London; New-York; Paris, 1962.- 666 p.

150. Haslam, E. Natural polyphenols (vegetable tannins) as drugs: possible modes of action E.Haslam// J. Nat. Prod. 1996. 59. P. 205-215.

151. Hartwell, J.L. Plants used against cancer Lloidia. 1968. Vol. 31, N 2. P. 71-170.

153. Berlin; New York, 1975. Bd 1. 1311 S. 166.1sraelsen, L.D. 1

154. Phytomedicines as a new crop opportunity, p. 669671. 167.1n: J. Janick and J.E. Simon (eds.), New crops. Wiley, New York. J Nat Prod. 1987Nov-Dec; 50(6): 1059-64. of

155. Karrer, W. Konstitution und Vorkommen der organischen Pflanzenstoffe. Basel-Boston-Stuttgart: Birkhauser Verlag, 1985.- Erganzung 2.- Teil 2.2328 s.

156. Kirchner, J.G. Eds. Thin Layer Chromatography Techniques of Chemistry, Vol XIV Part 1 Techniques Part 2 J.G. Kirchner, E.S Perry Applications 2nd ed -Sigma Chemical. U.S.A. -1990 1137 p.

157. Kurkin, V.A. Phenylpropanoids: perspective biologically active compounds of medicinal plants V.A. Kurkin Physical-chemical Basis of Plant Physiology: Absracts of Annual Symposium. Pushchino, 1996. P. 147.

158. Kurkin, V.A. Phenylpropanoids as biologically active compounds and standards of the medicinal plants V.A. Kurkin, V.N. Ezhkov, E.V. Avdeeva and all Polyphenols communications 2004. XXII International Conference on Polyphenols Helsinki 2004. P. 619-620.

159. Kurkin, V.A. Phytochemical and Pharmacologycal investigation of some medical plants conenting flavonoids V.A. Kurkin, A.N. Dubishchev, E.V. Avdeeva Polyphenols communications 2006. XXIV International Conference on Polyphenols Winnipeg, Manitoba, Canada, 2006. P. 513-514.

160. Mabry, T.J. The Systematic Identification of Flavonoids T.J. Mabry, K.R. Markham, M.B.Thomas Springer Verlag: Berlin Heidelberg N e w York.-1970.-354 p.

161. Martens, S. Biochemical properties of dioxygenases involved in flavonoid biosynthesis in parsley: an evolutionary aspect S.Martens and al. XII International Conference on Polyphenols. Helsinki, 2004. P. 31-32. 175.0kuda, T. In Polyphenolic phenomena T. Okuda Scalbert, A., Ed., INRA Publications: Paris, 1993. P 221-235.

162. Poole, CF Chromatography today CF Poole, SK Poole. Amsterdam: Elsevier Science 1 9 9 1

163. Pinkas, M., Torek, M., Perrin E., Recherches sur la composition du Sonsides champs C. r. Acad. sci. D. 1975. T. 281, N. 5-8. P. 447-450.

164. Polyphenolic compounds with biological and pharmacological activity Herbs Spices Medicinal Plants T. Adzet 1986. №1. S. 167-184.

165. Prog Drug Res. 1997;48:147-71.: Izv Akad Nauk SSSR Biol. 1965 SepOct;5:762-5.

166. Rice-Evans, С Structure-antioxidant activity relationship of flavonoids and phenolic acids C. Rice-Evans, N J Miller, G. Paganga Free Radical Biol.Med.-1996.- Vol. 20, 7.- P. 933-956.

167. Reich, E. Современный ТСХ анализ препаратов и на основе по растительного сырья. Критический обзор предложения улучшению методик Е. Reich, A. Blatter, В. Meier Handbook of Thin-Layer Chromatography 3 r d ed, Chapter 18. New York: Dekker; 2003 (in print).

168. Robert, A., Nejamis I.E. Am. J. Physiol. 1983. V. 245. P. 113-121.

169. Singia, A.K. Quantitative spectrofluoromet determination of flavonoids and their glycosides A.K. Singia, Kamla Pathak Indian J. Pharm. Sci. 1991.-Vol. 53,№l.-P.27-30.

170. Sheffer, J.J.C. De goudsbloem (Calendula officinalis) als geneeskruid in verleden en heden. «Pharmaceutisch week-blad», 1979, v. 114, №42, p. 1149-1157.

171. Shimizu, N., Tomoda, M., Kanari, M., Gonda, R., Satoh, A., Satoh, N., Chem. Pharm. Bull., 38, №11, 3069 (1990)

172. Shimizu, N., Tomoda, M., Takada, К., M., Gonda, R., Satoh, Chem. Pharm. Bull., 40, 2125 (1992)

173. Sen, A.K., Das A.K., Banerji N., Indian, J. Chem. B, 32, 862 (1993)

174. Sprecher, E. Modedrogen Z. Phytotherapie. 1990. V. 11. 4. P. 103-112.

175. Tomoda, M., Shimizu, N., Kanari, M., Gonda, R., Arai, S., Okuda, Y., Chem. Pharm. Bull., 38, №6, 1667 (1990) 190.The Flavonoids Ed. by J.B. Harborne, T.J. Mabry, H. Mabry. London: Chapman and Hall, 1975. -1204 p. 191. The Flavonoids: Advances and Research Ed. by J.B. Harborne, T.J. Mabry. London: Chapman and Hall, 1982. 744 p. 192. The standart addition methodology for evaluation of resalts Analisis. 1997. Vol.24, №9-10.- P. 374-380.

176. Thin-Layer Chromatography, general metod 2.02.27.00. In: Eur. 4th ed. Strasbourg: Council of Europe. 2002.

177. Touchslone J.C. Practice of Thin Layer Chromatography, 3rd Ed. John Wiley Sons, New York. U.S.A. -1992 416 p.

178. Tyler, V.E. 1987. The new honest herbal. George F. Stickley Company, Philadelphia.

179. Wagner H. Die DC- und HPLC-Analysis der Eleutherococcus Droge H.Wagner, Y.H. Heuer, A. Obermeier et al. Planta Medica. -1982. Vol. 44, N. 2. P. 193-198.

180. Wagner, H. Pharmazeutische Biologie. Drogen und ihre Inhaltsstoffe. Stuttgart-New York: Gustav Fischer Verlag, 1993.- 522 s.

181. Wagner H., Bladt S. Plant Drug Analysis: A Thin Layer Chromatography Atlas. Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg New York, 1995. 384 p. in chromatographic analysis M.G. Bagur, D. Gazguer, M. Sanchervinas ets

182. Показатель качества Внешние признаки Нормируемое значение 4. 5. 6. 7.

183. Числовые показатели Экстрактивных веществ, Не менее 35% извлекаемых 70% спиртом Содержание

184. Побуревших корзинок Других частей растения (кусочков стеблей и листьев) Органической примеси Минеральной примеси Микробиологическая чистота Не более 3 Не более 3 Не более 0,5% Не более 0,5 В соответствии с ГФ XI, вып. 2, стр. 187 и Изменением 3 к ГФ XI от 19.06.03 г., категория 4А. Измельченное сырье. Отклонение от номинальной массы в пачке не должно быть более 5 (по ОСТ 64-4-338-85). В соответствии с требованиями ВДУ ГН 2.6.005-93 В соответствии с ГОСТ 6077-80 и ГОСТ 17768-

185. Отклонение средней массы от номинальной Содержание

187. Срок годности Фармакотерапевтическая группа Внешние признаки. Цельные или частично осыпавшиеся корзинки диаметром до 5 см, без цветоносов или с остатками цветоносов длиной не более 3 см. Обвертка серо-зеленая, одно-двухрядная; листочки ее линейные, заостренные, густоопушенные. Цветоложе слегка выпуклое,

188. Микропрепарат поверхности верхнего эпидермиса с нижней стороны язычкового цветка календулы лекарственной (фото *1344): 1. -простой волосок с длинной конической клеткой; 2. -железистый однорядный волосок с многоклеточной головкой; 3. -простой двурядный волосок. Рисунок

189. Микропрепарат отгиба язычкового цветка. Цветок календулы лекарственной. Нижний фрагмент отгиба цветка (фото х 184,8)

190. Микропрепарат нижней поверхности эпидермиса язычкового цветка календулы лекарственной, (фото х924): 1. -мезофилл (представлен тонкостенными, однородными, паренхимными клетками); 2. межклетники; 3. хромопласты. Рисунок

191. Микропрепарат верхнего фрагмента язычкового цветка календулы лекарственной (фото х 184,8)

192. Микропрепарат пыльцы календулы лекарственной (фото *1344). Рисунок

193. Микропрепарат верхней свободной части отгиба трубчатого цветка календулы лекарственной (фото х924): 1. -пыльца; 2. -клетки эпидермиса (сильно вытянуты в форме сосочков).

194. Микропрепарат нижнего части отгиба трубчатого цветка (общий вид) календулы лекарственной (фото 184,8): 1., 2., 3. разновидности двурядных железистых волосков.

195. Микропрепарат листочка обертки цветка календулы лекарственной (фото х1344): 1. -простой волосок с длинной конической клеткой; 2. -железистый волосок с двурядной ножкой; 3. -простой однорядный волосок.

197. Приготовление раствора диазобензолсульфокислоты. 0,01 г диазобензолсульфокислоты (ГФ X, стр. 876) растворяют в 10 мл 10 раствора натрия карбоната. Раствор используют свежеприготовленным. 3. 0,3 Приготовление г 10% раствора фосфорновольфрамовой (ГФ X, стр. 912) кислоты в 95 этиловом спирте. фосфорновольфрамовой кислоты растворяют в 0,8 мл разведенной хлористоводородной кислоты и разбавляют спиртом этиловым 95% до 10 мл.

198. Приготовление рабочего стандартного образна 0-каротина. 1 мл облепихового масла растворяют в 10 мл хлороформа. Числовые показатели. Экстрактивных веществ, извлекаемых 70% спиртом, не менее 35%; содержание

201. Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-90 и ГОСТ 607

202. Хранение. В соответствии с ГОСТ 6077-80 и ГФ XI, вып. 1, с.

203. Срок годности. 2 года. Фармакологическая группа. Антисептическое, противовоспалительное средство. Примечание. Реактивы и методики определения числовых показателей, приведенные в настоящей фармакопейной статье, описаны в соответствующих

204. Числовые показатели Сумма флавоноидов в УФ-спектрофотометрия Количественное определение (УФ- пересчете на рутин не менее спектрофотометрия) 0,20% Тяжелые металлы Не более 0,001% По ГФ XI, вып. 2, стр.

205. Спирт Не менее 65% ГФХ1, вып. 1, стр.

206. Сухой остаток Не менее 4,0 ГФ XI, вып. 2, стр.

207. Микробиологическа ГФ XI, вып. 2, стр. 193 и Категория 4А Изменение от 28.12. 1995 г. я чистота Номинальный 25 мл (±5%). 30 мл (±3%). ОСТ 64-492-85 объем По 25, 30 мл во флаконы ФВУпаковка 30-20-ОС-1 и ФВ-50-20-ОС-1 по ОСТ 64-2-71-80, укупоренные полиэтиленовыми пробками типа 3.1-20 или 3.220 и навинчиваемыми пластмассовыми крышками типа 1.1-20 по ОСТ 64-2-81 или по 25 мл во флаконыкапельницы по ТУ 64-2-208-79, укупоренные пробкамикапельницами и крышками навинчиваемыми по ТУ 64-264-2-

208. Каждый флакон вместе с инструкцией по применению

209. Транспортирование Содержание

210. Групповая и транспортная упаковка в соответствии с ГОСТ 17768-90 и РД 93010015-05749470-

211. Маркировка упаковочного листа в соответствии с ГОСТ 17768-

213. Ультрафиолетовый спектр раствора Б, приготовленный для количественного определения, должен иметь полосы поглощения с максимумом при 256 нм и «плечом» при 350 нм. желтого цвета с буроватым запахом. Должна соответствовать

216. Приготовление раствора диазобензолсулъфокислоты. 0,01 г диазобензолсульфокислоты (ГФ X, стр. 876) растворяют в 10 мл 10 раствора натрия карбоната. Раствор используют свежеприготовленным. 3. 0,3 Приготовление г 10% раствора фосфорноволъфрамовой (ГФ X, стр. 912) кислоты в 95% этиловом спирте. фосфорновольфрамовой кислоты растворяют в 0,8 мл разведенной хлористоводородной кислоты и разбавляют спиртом этиловым 95% до 10 мл.

217. Каждый флакон вместе с инструкцией по применению упаковывают в коробку из картона коробочного типа хром-эрзац или марки А по ГОСТ 7933-89. На флаконы и коробки наклеивают этикетки из бумаги этикеточной по ГОСТ 7625-86 или бумаги писчей по ГОСТ 1851

218. Групповая и транспортная упаковка в соответствии с ГОСТ 17768-90 и РД 9301-0015-05749470-97.

219. Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-

220. Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-

221. Показатель качества Описание Нормируемое значение Используемый метод Визуальная оценка на соответствие требованиям ГФ XI, вып. 2, стр. 160. 1) УФ-спектроскопия; 2) Тонкослойная хроматография (ТСХ-анализ); система растворителей: хлороформ-метиловый спирт-вода (26:14:3). УФ-спектрофотометрия По ГФ XI, вып. 2, стр. 161. ГФХ1, вып. 1, стр. 26. ГФ XI, вып. 2, стр.

222. Категория 4А ОСТ 64-492-85 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

223. Прозрачная жидкость темнокоричневого цвета, со специфическим запахом, горьковатого вкуса Подлинность 1) щах=360нм±2нм (нарциссин). 2) Пятно светло-желтого цвета с Rf около 0,5 (нарциссин); имеющее по отношению к пятну ГСО рутина значение Rs около 1,

224. Каждый флакон вместе с инструкцией по применению

225. Групповая и транспортная упаковка в соответствии с ГОСТ 17768-90 и РД 93010015-05749470-

226. Маркировка упаковочного листа в соответствии с ГОСТ 17768-

227. Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 1419296. В соответствии с ГОСТ 1776890 В соответствии с ВДУ ГН Радиационный контроль 2.6.005-93 В прохладном, защищенном от света месте 2 года Антисептическое, противовоспалительное средство

228. Маркировка 11. 12. 13. 14.

229. Транспортирование Содержание

230. Подлинность. 1) Ультрафиолетовый спектр раствора Б, приготовленный для количественного определения, должен иметь полосы поглощения с

233. Каждый флакон вместе с инструкцией по применению упаковывают в коробку из картона коробочного типа хром-эрзац или марки А по ГОСТ 7933-89. На флаконы и коробки наклеивают этикетки из бумаги этикеточной по ГОСТ 7625-86 или бумаги писчей по ГОСТ 18510-

234. Групповая и транспортная упаковка в соответствии с ГОСТ 17768-90 и РД 9301-0015-05749470-

235. Маркировка. Маркировка упаковочного листа в соответствии с ГОСТ 17768-

236. Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-

237. Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-

238. Проект дополнений и изменений

239. Пояснительная записка -3 экз. -3 экз. У Ректор Г.П. КОТЕЛЬНИКОВ (2-

240. Проект ФС «Ноготков цветки»

241. Пояснительная записка к ФС 3 экз. 3 экз. Ректор ГЛ. КОТЕЛЬНИКОВ

242. Проект ФС «Ноготков цветки»

243. Пояснительная записка к ФС 3 экз. 3 экз. Ректор Г.П. КОТЕЛЬНИКОВ

244. Методики качественного (ТСХ-анализ) и количественного анализа (дифференциальная спектрофотометрия) цветков календулы лекарственной.

245. Методики качественного и количественного анализа препаратов "Календулы настойка" и «Календулы экстракт жидкий» с учетом принципа унификации методик в ряду лекарственное растительное сырье субстанция лекарственная форма.

246. Проект ФС на лекарственное растительное сырьё "Ноготков цветки".

Оглавление диссертации Шарова, Ольга Владимировна :: 2007 :: Самара

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Шарова, Ольга Владимировна, автореферат

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2007 года, Шарова, Ольга Владимировна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций