Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Выращивание и использование бифидобактерий для производства препаратов, профилактирующих желудочно-кишечные расстройства поросят и телят
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Выращивание и использование бифидобактерий для производства препаратов, профилактирующих желудочно-кишечные расстройства поросят и телят
йсрашная академия аграрных. наук
Иксгигуг экспериментальной и клкккческой зетеркяаркпЛ недлинны
?г ь од Нв правах рухпписк .
КОНЕ Нохамед Сумане
БЫРАШАНИЕ К ИСПОЛЬЗОВАНИЕ 'ШИДЬШТВРйП'ДЙ-' ПРОИЗВОДСТВА ПРЕПАРАТОВ, ГРСШЛАКТЙРУЕЩЙХ ЖНУДОЧНО-КИЕЗЧШВ РАССТРОИСТЗА ПОРОСЯТ Е ТЕШ
16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и икмунохот*»
•А 3 Т О? В Ф Н Р А Т
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Харьков - 1997
Диссертацией является рукопись
Работа выполнена 8 Полтавском государственном сельскохозяйственной институте на кафедре инфекционной патологии иквотних
Научные руководители: диктор ветеринарных наук, прпфзссор КАРаЖЕЗА А кандидат сельскохозяйственных каук, доцент 73НдКТН:К B.C.
Офкцяальauo оппоненты: доктор ззторинарних каук, старший научный сотрудник ' ГОЛОВКО А.Н. ,
доктор ветеринарных наук, профессор, лауреат государственной премии Украины ПАНИКА? 'О.
Ведущая организация - Харькозский зооветеринарный институт - Минсельхозпрода Украины, г. Харьков
Защита состоится " ViHrLk, 1997 года на заседании
Специализированного ученого совета Д Ui.3Z.QI при Институте экспериментальной и клинической ветеринарной медицины 7ААН, Э1002Э, г. Харьков, ул, Пуакинекая, 83.
С диссертацией кпжно ознакомиться в библиотеке Института. 310023, г. Харьков, ул. Лувкинская, 83^ ;
Автореферат раз ослан
"Ji " лил, 1991 года
Ученый секретарь Спзц-дахгзираванного ученого соэетй
доктор ввтэраяарнкх' иаук А ^ К.2.
1. оеш! характеристика равош
Актт^-льяость теуя, Забоязваекость н сггертЕсать породят г. теля? является ' прттчлвгмв зйачйт&гкж' эзЕОнсаа^сисе пэтсрь гэ странах кпра. Эгк потери ^кгбасяаютгя ггр^лзгузмсгяевно в течесге •гервкх 10-15 'суток г в мвнзя»2 • ствяеви - четкрвх. Ееслсгв ггзгк •келодняка в связг с • забаяеваншшг ,оргаяс5- Еиззввреяяа. -Борьба с шгг остается сикоЗ яз .осйоейкх е саашх кг рсоекия тгро&тгк яяятой ветеркнарнсй наукя / А.С.Сгягзвяов с еоав?..1584;. Гуй'с соаит.. .1937; ,м.А.т5йесэясо,195э д
Яржчгт, вкгнваяше забоаевзяюг я ггбэгь ««гадгнаа,- ааажч-вн; Многие гсследо^етелЕ приходят, г гаводу.- • что'-атвпяоггя дягрей •новсрскаеяюа .имеет-. -коалгвксгу» •пряроду. Веввое'-вааявяге.вря «аз аиее? -соотяоявянв в' гелудопнс—ггшзчкек тракте, аягёробввх с азрзб-нгх групп ¡Зантэ'ргЯ. Вогяякговеяяв' ¿габсгйзаагй ггзесйотщвг ■ варг-■ ке.кхя технологи:- корядеявя и содержания гтггогшгг, сггги» со-'тсствевкуа резистентность иахрооргаййзяа' и"эти» сяособетиувт пре--врадешз- -уисвко-аатогеяной мзкрвфгорн в натогеняуэ / А-.ВЛСорзбов. .К.Х.Шайкаяов, 1977;' Б.С.Бузлага/ В.А.С£ЯЕ£ров,19&1; Я.Й.Овсввев»'Ш. А»0владеез,1984; - З.П,.Скородняс2яй, А.Ф.1>5р2Я,-19В4; Н.Г-Е&яовме», 1 §86'; В.'/бше' .ЬЛПажа ,19ВЭ;
В.й.Федвк, 1968; Р.Е.Згггаиап 333 Д
Дая борьбы с. ДЕарея1ет колоЕШ1ка' з хозяйствах ещюзш. срззягЕШзт ангабаетерзгадьяне 'препараты / -.ентабаитакв,' сульфагагажЕЕ® и др. Д Сиг иё всегда обеспечивают достаточнуюлечебную й£5йе?ееность, а в ряде случаев приводят-к.усутуйязЕКв патологического ¿гропгсеа, зазывая ДЕсСактергсзв.г появленЕ» рзггстеатшх кяЕроортанггмсз / Е. Н.Шхива".; В.Г.Лоро$ейчук.Тб79; Б.А.Астапов. 1931; З.ВеЬгатеаЬ, У;о1з-Ьгир .1982; г.ДПвиока,1982;®. Векауа.1982; И.к.3атаре.1933; М.А.Тимонко с соавт. ,1985; Б.В.ТаракайовИ 937; В.ШЕрайяогоясвец, 1989 г Др. д "
В связе с.;этвг значятеяьнай гнтер«с представляет гагельзова-нге с названной биологических препаратов вз миЕроергаяязиоь.
являющиесяпредставителя»® нормальной шярофхорв хехухочао-жгтч-ного тракта .человека к животных и огаанвагаах актагонгетичеекк . действие на условко-патогевяне бактеркк. К «X числу относятся препараты гз хкепх культур бгфядобактергй. .-...'
Предложены ж среды для яультявжровашш етжх мгнроорганжгнэа. Однако оня относетельяо ежожвн ш дорогн, что значительно удорожает стонмость »шфобгсяогичесвях ирэпаратов.
рель г. задачи исследований. В работе поставлена паль: приготовить -н обосновать з^екткзнооть применения препаратов из бифи-добактерЕй. взращенных на зхспершйентальной среде из сухого бел-. коесго концентрата / СШК /в сравяеякя о применяемой в настоящее время кукурузно-лзктозкой средой / КЛС /, для лечения и профилактики острых расстройств пиве варекия у поросят и телят. Для достижения поставленной пели необходимо было ретать следухше задачи: ' 1. Разработать новуя, относительно простую в изготовлении и зкокожчную срелу. оптимально обеспечивзюагуто питательные потребности би^идобактерЕй..
2. Изучить биологические свойства / морфологические, культу-мльяае, антигенные н др. / бкфилобзктернй, ?ыршзеняь,х на иссле-аувиаг среде вэ СБК.
3. Изучить ьжкрофлору толстого- кишечника эдорови ислодых заветных и кмевштк цаталогкэ желудочяо-1ЖП8Чяого тракта.
4. Приготовить к определить эффективность препаратов ез . добактерий. вкрагеяннх на среде ез СЕК и НЛС, дая леченкя л нрсфв-' лактикк келудочно-кгжэчннх расстройств поросят к.теднт в условиях ; хозяйств.. *
Цатагая.новизна. Впервые разработана на основе СЙК простая в изготовлении и экономичная среда, обеспечкваэдая питательные. до-, требпосги бифвдобактерйй. Изучена кррфоаргвчасязе-. куяьтурадыше е . антигенные сисР.сгвг йафидобахтеряй,. взрайенвых к^ новой лзтгтглькой среде из СЩС. Разработан б предложен способ значатедьяото повышения антигенной активности бкфЕДОбактергй путем воздействия с"определенной интенсивность» к-;экся'038яиёй.'.яазеркого•каления' йяк врздфве-г-гося вдекграгзгннтното поля. Приготовлены новые биопрепараты.из.би-якдоб&ктарий ж показана их лечебно-лрйфилактическая зф>тактЕЕно?5:ь хгри желудочно-ювечннх расстройствах поросят в телят.
Практическая ценность са^о?ы, С учетом аксаервкеятагьякх данных рекомендовали взамен ияеных сред новые среды, изготовленные ва основе СБК. для культивирования бифидобакгерий как более аконсзаяч-ные "й полностью, обеспечившощие их Ш1тательнне потребности. Определена высокая ©фиктивность препаратов из бифидобактерий. выращенных не среде из СБК, которые рекомендованы для лечения к профилактики острых иелудочяо-кгшечнкхргсстройств поросят и телят.
Аттгюбаотгя л?^ботнт Материала диссертации доложены на заседании . ка^дры инфекционной патологии хивотннх Полтавского государственного сельскохозяйственного института / 1993, 1994. 1995 /. на научно-
пракгячвсхоЗ *' производственно? кояферешп* преподавателей а студентов ПГСХИ / Полтава, 1994. 1995 / а на научно-практической ког-фереазги по сохранности молодняка сельскохозяйственных жпвстяах / Белая Церковь, 1994 /.
По материалам дгссертапяа опубликованы 4 научные работы.
и структта работа, Диссертация изложена на 13? страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литература, материалов и методов исследования,. результатов собственная исследований, выводов и рекомендаций. Работа содержит 37 таблиц я иялю-. стрпрована 16 рисунками. Слисок литературы Еключает 234 источник.*, из которых 102 иностранные.
ДичянЯ вклад диссертанта ? цолучезие научных результатов, выносимых на заздтт. Разработана методика изготовления новой. экономичной и элективной питательной среды из СБК Для выращивания би-фидобактерий; изучены морфологические, культуральные и антигенные свойства этих микроорганизмов, выращенных на предложенной среде; изготовлены препараты из культур бифидобактерий и успеияо испытаны в условиях хозяйства их лечебно-про^лактаческое действие тгра желудочно-кишечных расстройствах поросят и телят.
Автор выражает глубокую благодарность доктору ветеринарных наук Еерднику В.П. за оказание технической помощи при оформления диссертационной работы. :
На запиту выносятся следуйте положения:
1. Разработка во в оЯ эффективной питательной среды на основе СБК для выраягаваяия бифидобактерий.
2. Результаты изучения биологических сройств бифидобактеряй
/ морфологических, куль'туральннх, антагонистических и др. /, сращенных на среде из СЫТ.
3. Результаты сравнительного изучения микрофлоры толстого кишечника здоровых и зтекщк патологию 'галудочяо-кишечного' тракта новороященных поросят и телят.
4. Приготовление и испытание лечебяо-поофилактяческой эффективности препаратов из бифидобактерий. выращенных на сред? из СБЕ .я.КЯС, на поросятах и телятах, страдающих желудочно-кигечншя расстройствам*.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материала'и методы
Диссертационная работа" выполнена з период с 1952 по 1995 гсда
йа слав лаборзтарлй кафедря яй^хгжшсЛ' аагояогта зшотаых ЯГСХИ, лаборатории жйфобзологзя Белорусского чшугвд-ксследозатзльскога инетатуга вксзгржиея'гаяьзоЗ ветеркяарва, лабораторжг ййзтйтуга зоологет ж фязислогяа Академии Няук Рэсаублйки Молдове. Пол^аяо«»-го нагшо-жсогздозатдл&свэго кэстагута- ашироваяного я хаяя'Э&скр-га мазокостроеайя. Полтавского ..мясокомбината,. Полтавской.' облаеткой государственяоЗ лаборатории зетершарной медипивц.
В опытах использовал? кгаим №1 Ы£1аил, полу-
ченный аз БелШйЗЗ.
Сухой белковый концентрат / ЙЕН /,готошй на Доятааскок мя;-еокснбияате путем суики бульонов, ящшигхся побочными продуктами : с технологии переработка мяса. Пигатеяьну» среду для культивирования бзфздобактергй на основе СБЕ а:. лечебно-профклажгйчаскай препарат из нес готовили по разработанным вами ¡методикам.
Для выяснения причин лелудочно-кизечннх расстройств трупы поросят а телят из хозяйства исслздовала с помощь» принятых-латрлого-аяатоначеских и-бактериологических методик. Пробы внутренних органов / селезенки. почки,.печени /, крови сердца, содержимого желуд-' ка, тонкого и толстого отделов кишечника,. брыжеечные :лимфатические узла ж трубчатую кость отбирали дам бактериологических нссдедог-а-; К2Й не позже чем через 1-2 чаоа после гибели■ «тавотного, Отживых... поросят и телят брала пробы содерзимого прямой кишки. С. целью выделения энтеробактерий применяла количественный метод й.Н.Блохина с соавт. / 1990 / с использованием плотных дифЯерзншально-дагагнос-тических сред Зкдо, Плоскиреаа. Сабуро, 5^-ного кровяного агара, МПА, МПБ, 1>-кого сёЛгйгтсвогс бульсйа, гясгдут-суль^ит-агара и среда. Киглера. Выделенные микроорганизма ияэат20ицаровали но Берга : / 1980 /.
Профилактическую и лечебную эффективность. препаратов из бифи-дсбактеряй, выращенных на среде иэ.СБК и, КЯр. испытывали на поросятах и телятах в 3-х хозяйствах Полтавской области.
Поросят-сосунов содержали погнездяо умеете со. свиноматками до отъема. Поросят-отъештей размещали в станках по 8-10 голов. Телята до 20-суточяого возраста были в икдивидуальных метках, а затем их помешали по 10-15 голов а станки.
В связи с •различными Хозяйственными .затруднениями в кормлении * содержании животных наблюдались различные отклонения .от зоотехка-ческих носи, которые обуславливали массовые диареи.
Проведанными лабораторнымидоследованиями*у больны? животных
были исключены диареи•инфекционной этиологии, анаэробная дизентерия новорожденных поросят, сальмонеллез поросят и телят, вирусный трансмиссивный гастроэнтерит поросят, парвовирусная инфекция, ро-тавирусный энтерит поросят и телят.
Во всех обследованных нами хозяйствах диагностировались простая к токсическая диспепсии, колиэнтерит и дясбактерноза, обусловленные нарушения !*и условий короления и содержания поросят и телят.
Всего в опытах по испытаний лечебной эффективности препаратов кз бифидобактерий било. использовано 410 поросят и 158 телят с нарушенной. функцией органов пищеварения, а с профилактической гелъв -732 поросят и 278 телят, которые были кяняически здоровыми, но находились совместно -с больными.
За всеми животными устанавливали постоянное клиническое наблюдение, проводили термометрии, регистрацию длительности диареи к ' прекращение ее. •
В пробах /крови определяли количество гежоглобква по ветоду Саяи,. геигтокрита с помощью жикропектри$уги, ■ эритроцитов с покоаио камеры Горяева, скорость оседания эритроцитов - кикрокетодои Пан-ченко.
В енвороткё крови определяли количе ство кальция по ветоду Ви-чеву / 1976 /. фосфора - по иетоду Лолсу в модификации Г.Ф.Короиы-слова и Л. А.Кудрявцевой / 1978 /, кадия я явтрвя - с поиезз® лабораторной системы. йаго^вяеввеа'^в-'Фшкяшш.^ с-товеики наборами реактивов, общего белка - по бйуретовой ревнан. активность аланин-аминотрансферазн и аспарта»аш1нотрансфераав - по Ра&ткаиу и Френкели / 1975 / и велоадй-'фоЬфатаав ^овмгавйррми^ с использованием набора химических реактивов Лахема / .ЧССР /.
Белковые фракции сывороток крови ж молозива определяли элек-трофоретяческви методом на пленках из апетатпеялслозн с помощью аппарата ПЭФ-3.
. Ияактавашж бнфвдобакзвркй проводили двумя способами: лазерным излучением с помозью приборе типа ЛГН-113 и теащахсткся электромагнитным полем - Б-100К-07. ....
••• Результата обработали метода«;
вариационной статистике / Н.А.Пда«№Кий,1978 ж др. /.
2.2. Результат исследований 2.2.1. Разработга методой приготовления питательно!» среда
для яультивироваяня бифиобаиерий на основе СБК Бифидобактерии являются очень требовательными микроорганизма-
ки к условиям культивирования и б частности к питательна среда!«!. 5 якх добавляют экстракты'мяса, печени или молоко. Это ценные пищевые продукты для.людей с относительно.высокой пеной. Поэтому 'цель исследований состояла в тем. чтобы найти более дешевое, чем мясо, сурье животного происхождения. белок из которого в-равно?.мере-или гаке лучзе удовлетворял: питательные потребности би?кяобектерцй. Вт выбор пал ке мясо-костное сырье, остающееся-после обвалки..туш, преимущественно крупного рогатого скота. СБК /гогозгля со.' следующей', ке-Сырье акстрагхрсвалн в смася с водопроводной водой в сост-ковашш 1:3 в автоклаве прз 1,5-5 атмосферах/в .течение 3-х часов, периодически удаляя жир. Бульон -отстаивали,- -охлакдаям до 70-90°С .и сливали в отдельную.емкость.'При необходимости из aero дополнительно удаляли костный жир путем фглм трата ели 'сепарирования. Затем бульон сушили путем распадения в камере еле на вальцовой, .сушилке.до 5^-ной влажности. СБК - порошок от светло-желтого до серо-хелтого цвета. Он легко рэстворяегОя в, воде ,при-80°С.' Его состав приведен в табл.т,
. ' Таблица 1
Химический состав сухого белкового койцентрата / процент от сухого вещества /
Химические показатели : % .
белок 96,6
Фосфор 0,4
кальций * 0,7
хлог-исткй натрий 0,9
зольные вещества. 0,6
жкзеподобяне вещества 0,8
Из табл.1 гидно. что в СЕК входят все вещества, необходимые для жизнедеятельности бактерий.
Ажною'.сдотвыЯ состав белковой фракции СБК приведен в табл.2. Из табл.2 видно,что в СБК обнаружено 27 ачинокислот, в том. числе и такие необходимые для' микроорганизмов как цистин, аспараги-яо'рая кислота, трипто$ан. иетионин и др. ■■"■' ..
• Питательную среду готовили путбм растворения в 1 л дистиллиро-■ пнп?? воды 50 г СЕК. 0.5 г агара и 10 г лактозы в такой последовательности. ■ - • -'■■..■
Навеску из 50 г СЕК "растворяли в 1л дистиллированной води.
?
язгсятагя 10 мин gpa постоянном авреагаоазанзга, схлаязалг до 3?-33"С я устанавливала'концвятсарогаяяой соляной кислотой рЯ-4,1. Смесь снова нипятялх 15' мая,• $яльтроаали в горячем-виде зягчаяе через ватяо-марявву»,- затем через фаяьтрсвальяу» бумагу а устанавливал» 33£-язм раствором едкого натрия рЯ-8,1-8,2. Смесь еай раз етгя'яшг 10 мая н фильтровали. Затем'из расчета яз. 1 .л добавляла 0,5 г пр?л-аяритзльяо растопленного агара,'-устанавливала рН=в.1-8,2. Смесь as-пятили '15 'мпя. добавляла з йее Ю г лактозы, хорего гереяезивалг, бзльтровала а сбьзм доводила яистйдлароваяясЗ водой до 1 л. Среду стеваякзсвада в автоклаве при 0,5 атмосферах в течение 30 мин.
Лрпготозлеакая среда содасжала 4-5* пептонов и 90-110 мг£ аманного азота. Она имела рН 7,0-7,2.
Таблица 2
Амяяэкислотянй состав сухого белкового конпзятрата'
Аминокислоты . ÎКоличество, мг/100мг
Цястая+цистейя 0,454
Яазия 2.08S
Аргяяин 4,538
Глагога 5,596
Серия . 2,337
Аспаоагин 3,678
Глутамиги-асггаоагиновэя н глутамияовая к-та 6,135
Гндроксипр'олин 6,695
Треонин 1,219
Алания 4,869 -
Пролян 9.6S7
Тасозия 1,096
Валяя 0,545
Метао'нйн . 0,539
Фенилаланая : 1,522
Лейггия 2,470
йзолеЯпян 0,509
Орнатян ' 0,287
Гистадия 0.802
Этаяолзмян " 0.209
Триптофан " 0.095 A-3-У-экияомасляяые кислоты,;
Сразнгнзе состава сред аз основе СЕК и.Вдаурокка ппаведапэ з; табг.З. • '
Таблица 3
Сравнение состава сред а;; основе СБК я Бяаурожка / т/л дистаялгроваяяой вода /
: Коашоненты : Количество
См-за ка основе СБК
СБК 50,0
Лактоза 10,0
Агар 0,5
СГР^ДЯ,, ^трррта,.
Говяжья печень 500,0
Пептон 10,0
Лактоза 10.0
Хлорид натрия. 5,0
Цистейн 0,1
Агар 0.75
Как видно из табл.З. среда СБК имеет более простой состав. Ее основой есть белковый концентрат, который готовится из отходов переработка мяса, не- имевдюс пищевой ценности. Этим экономятся такие пияевне продукта животноводства как говядина я печень. '■".'.
2.2.2. Результаты изучения биологических свойств бйфидобакте-
рий, выращенных на среде из СБК ©гамм *1 В.Ь1П(1и» - анаэробный м^рорганиза.ие растузцй; па обычных питательных средах / МПА. МПБ и др. /. Он проявил хорошзй рост на среде из. СБК. Уже через одна сутки в среде отмечается неравномерное пацутнекже. образование рыхлого осадка и прозрачной жидкости над ним. В полужидкой среде из СБК образуются белые .колотая в форме гранул или гвоздяхов. ОптямальноЗ дли роста микроорганизма была температура в пределах 37-38°С.
Штамм 1*1 в.Ъ1£ 14ви не разжижал желатину , не" образовывал газ и катаяазу. В ряду Гисса он разлагал с образованием кислоты лактозу, глюкозу к сахарозу, но бал инертным по отношению к манноэу, маяни-ту и сорбиту. Кислотность в культуре бв^идобактерий на среде из ■ СЕК дсстигаяа 185°Т. а.на среде блаурокяа - 110°Т.
В начале стапионаряой фазы роста на среде иа СБК урожайность
5кЗждобз.ктерий составляла 8-Ю миллиардов клеток р 1 кл, ъ ка среде Бяауоокка -'4-5 миллиардов.
После пята последовательных пересевов на среде из СЕК Сй1адо-брктерии имели такие же' моофологическис, куд^тураяько-огохимические свойства, как я исходные, выращенные яа'среде Ьчаурэк?-'.
Среды кз СЕК ж Блаурокка сравняли в опыте по выделению добяктерий. из псоб Фекалий телят. Полученные результаты дряведеяк в табл.4.
Таблица 4
Результаты Ечдэлекия битмобактерий из проб фекалий . 20 телят ка средах кз СЕК г Блаурокка
газведенгя
. Количество выделенных культур
■фекалий. 1оБ1С на среде из СЕК ; на среде Блаурокка
;абс, число : % ;абс. число ; %
' 6 11 55.0 11 : 55,0
7 11 . 55.0 ' 8 40,0
8 ' 8 40.0 ■ 8 40.0
9 6 30.0 7 35,0
10 3 15.0 . . 4 . ■ 20,0
Всего- . 39 39.0 38 38.0
Как видно из табл.4. с помощью среды из СБК бифкдобактерии выделили в 39 / 39,05?/ случаях из всех 100 исследованных разведений фекалий, а среды Блаурокка - 38 / 38,0?/.
Таким образом, при использовании "сред из'. СБК и Блаурокка получили почти одинаковые результаты выделения-бифядобактерий из проб фекалкй телят..
Одним из важных показателей для бифядобактерай есть наличтс антагонистической активности по.отношению к патогенным я условно-, патогенным микроорганизмам, ^которые могут .населять желудочно-ютеч-аый. тракт поросят , и телят.. Результаты изучения по ,принятой метода-ке этого свойства у.;. бнфйдобакгерий, выращенных на среде иг СБК приведены в,табл.5." .
Лзнкые тгбх.5 показывают» что щтамм JHB. biíidua ...выращенный яа среде.из СБК. проявил высокую ачтагояистическую рктивность по ; отношению к испытанным микроорганизмам / в. o»ii, st. »ur«u», ír.rui-
Таблица 5,
Результаты изучения антагонистических свойств бифкдобактерий по отношению к эзеркхиям, стафилококку и протек / КОЕ/кл /
Виды бактерий : Сеговар : Е смеси с. 0и*и- " Без бкфидобактеркй : • .:■ добгкт'еркя5!ш / контроль /
Б. etil 08 С 2.78*10^ .
015 0 .-■ ' '. 1,98*10' .
086 2,8 .2.76*1010
0101 2,8 . ■■/ . 3.87-ю]0
0115 0 ■ 2,99*10'u
St, «turriie р 209 28,9 2.5S*109
Tr. 4ruis«i« .. 1Q2 . 13,7 . 3,55*10S
Таким обрезом, полученные .нага; результаты дают оенсьаняя рзк.с мендовать .притотовлегшув кь -.осасье СЕК среду, джя. вультивиревакея Октидобакгерий, взамен лшеннх сред, как. более . экоиокидау» и-'полнее
• .удовлетьорякщев• питательнее пстре.бкости. зтого вида бактерий.
Изучение антигенных свойств бк^йдобэктерий, т^льтивкруе-. мчх на среде из СБК'
Для установления,высокого качества пЕтатедьной; среды.из СБК, обеспечивающего сохранение; антигенных .свойств бифидобактерйй 'наш СЫлк презелеян' спйшталькке исследовэйия. ;
. С зтей дёяь© кзгйтовлгвалйсь е'гёрзадкеь катание препараты "• бг5.гдобактерг5, подучаемне- посредством цеятрифугаровеция .в течеяр 30 мйк при 5000 об/мйк 24-часоьой культуры 'бн£адобактевгЕ, a tbks; бк?гдобактерийнке препарата, •жнакяйврованнке лазерным' 'калучениеи и врашающймся электромагнитным полем. .' -'; '
Инактивацию би£адобак?ерййных антигенов проводили по предварг тельно установленный оптимально режимам: -.лазерным излучением мощностью 10 кЗТ. волны 0,63 *ш, при:.экспозиции 6-9 часов, вращающимся электромагнитным полей мощностью 0,13. Тесла со. • скоростью врадэния 3000 об/ман в течение 1-2 часов.
При изготовлении' депонированных^'-препаратов использовали ланолин-вазелиновую смесь по нашей методика. ,'
. . Контролем инактивации служило отсутствие роста обработанных би'.кдебактерий на питательных средах иа СБК иди КЛС. >.
Для изучения ентигенкыхевойств бифидобактерий бклииспольэо! нк 30 клинически здоровых телят 30-суточяого возраста. Из них cioj
йярсвала несть групп.
Телятам первой группа вводили бифадобактерайный препарат, обработанный лазерный излучением. без адьвванта; второй группы -бяфядобаггерайныа препарат. обработанный лазерным излучением, с ад&вваятоя; третьей группы - бифидобактеряйный препарат, обработанный вращазхцачся электромагнитным полем, без адаюванта; четвертой. группа - бВйшобзгтврнйянЯ препарат, обработанный враяащаисл эдвягромагяятннм 'полем, с адьювазтея;- пятой группы - катпвяая культура бий-адобактера£. без адьозанта в оёстой группы - яатавная культура бз^адобахтесзй, с адьвваятсм. Пятая а шестая группы были контрольными.
Всэ исследуемые препараты вводили внутримышечно з дозах 10 мл на 1 сутка. 7, 14, 21. 10, 4.5 а 60-а сутка.
Для изучения динамика нарастания, татроз специфических агглз>-пгаияоз от телят, отбирала пробы крова до введения аятагеноз а перед хаждкм очередным,введением.
Результаты исследований показала наличие у бифидобактерий, заращенных яа средах аз СБК антигенной активности, которая была Золее высокой после обработай , фи'зачесгат. факторамии добавления атааваята. Так, уже на 7-е суткя после ее введения среднегеометрические татры гомологичных агглютининов в крова телят достигала 1,3±0,2 1в5г, а яатавкых препаратов - 3,34±0.2 1ой2. В последующем зтмечали нарастанае до макетмума титров агглютининов до 5,37-0,1 -•«2 на 30-е сутка у телят, которым згодали препараты, обработан- . гае *азаческама Факторами, без адмззаята а до ?.1±0,2 1ог2на 45-е ! :утка у телят, зммуназироваяных этими препаратами с адьювантом. У гелят контрольных. групп .татры агглютининов были ниже. Максимальные гх татры достигала 4.68-0.2 ^«¿т 21 сутки опыта иммунизация а.-> гагенама без адмзванта а 4.89^0,11О82 на 30-е сутка - с адьсвантом.
На 60-е сутки опыта / срок наблюдения / татры агглютининов з гоова телят, которым привала обработанные фззячв.скгмз ?акторама. антигены без здъювзята, понизились до 3,52±0.2 а с адъювза-
"ом - 5,8-0• 2^против 3.41 £0,1 и 3,56-0,31о32 в козтролях.
Такая образом, нультаваровакие бййдобактеряа на новой питательной среде аз: (Ж обеспечивает высокую.антигенную активность ¡репаратоз, особенно после обработки ах лазерным излучением или юасагггамся электромагнитным полем, а. ташсе после добавления адъс-
13ЯТЭ.
2.2.3. Результата сравнительного изучения микрофлоры толстого отдела юглечника здоровых и больных телят
Пробы фекалий брали для исследований от'новорожденных телят. Всего в опыте было 45 телят с дисфункцией органов'пищеварения /•диспепсш, колкэнтерит / и 20 клинически .здоровых. Пробы'фекалий . отбирали из прямей юшки телят специальными тампонами, которые по-'медали з стерильные бактериологические пробирки. Их исследовали по. методу й.Н.Блохияа с соавт. / 1590 / с использованием сред Зндо, ■ ■ Плосклрева. Сабуро, Кяглера, Китт-таропда, 5&-ного кровяного агара, : ■МПА и МПБ.
Для выделения сальмонелл использовали среду обогащения - \%-ныЗ селенитовый бульон с последующим высевом культура на висмут-, сульфитный агар.
От здоровых а больных с симптомами диареи- телят было выделе--; по 65 культур 'микроорганизмов,-'принадлежащих к. родзм Е»Ьвг1сЫа, К1»Ь»1«ХХ«, Рато^и», 3-$»рЬу1ооооси»,С1^1-оЬаог«г,На-к«гоЬао^вг »* «1.
От телят с дисфункцией органов пищеварения выделили больше культур эшерихий, клебсиелл и стафилококков, а от клинически здоровых - псстея. пдтро- и знтеробактерий. От здоровых телят-не удалось изолировать' культур псевдомонад.
Среди микроорганизмов, которые изолировали.в!существеняо значимых количествах от больных телят, былик1,ь*1,11« рмизва1*« -6,8*107 микробных клеток в одном грамме Фекалий, а1г«ыи»*
P*вt•uв га15**1а _ З'Ю7, Р*в4«и» ао^мИ _ ж»« »в*вв1*в«» - 2,5*10^, 3*арЬу1всвсоив »игвив _ б*105 микробных клеток в одном грамме-фекалий.
Следует отметить, что-заболевание протекало более тяжело у животных, из фекалий которых выделяли выше перечисленные микрооргаг-низмы в различных их ассоциациях. .....
Патогенез заболеваний органов пищеварения молодых животных изучен пока недостаточно. В числе факторов, которые его обуславливают, большая роль принадлежит, видовому составу резидентной / нормальной / микрофлоры, которая заселяет желудочно-кишечный тракт. Известно, что этот процесс проходит в послеродовый период жизни животного. Среди микроорганизмов; колонизирующих пищеварительную трубку, пре обладают * как щавило, энтеробактевии. в числз которых выявляются патогенные ж условно-патогенные виды / М.А.Тамовко.1990/ При отсутствии антагонистического действия по отношению к ним со тгоны резидентных не патогенных микробов, напвимер, биФлдобакте-
.рай, могут возникать дасбахтеряозы а друпгз заболевания.
Дродвсс- заселвайя бифидобактеряяма киазчяикоз кяааачэскз здоровых телят а больных с признаками- -диспепсия мы -изучала з дзнамлгз. учитывая ях -количество в пробах аз 1 г ФекалаЯ прякоЛ кашка з течение: 1-21 суток после рождения животных.
3 работе использовали метод й.Н.Блохина с соавт. / 1950 / и ■ 'разработанную нами'.-среду из-СЕК. Полученные-результата лредставлз-ин графически.на Ряс.1.
йз данных Рис.1 видно, что в содержимом толстого юивечиага.. клинически здоровых телят количество бифидобаКтэряй резко выросло до 9-10 логарифмов микробных клеток в одном грамме / з те-,
чеяю двух - трех суток после рождения и удерживалось з этих пре-.-делах до 21 суток. У больных телят этот показатель через трое суток после роэденяя был на пять, логарифмов ниже, несколько повышался на седьмые сутки и снова снижался к 21 суткам. :
2-2.4. Лечебная и ярофилактзчзская эффективность арепаратоз из бхфидобактерий, выращенных-на среде из СЕК'и.КЛС, при желудочно-кишечных расстройствах поросят и телят 2.2.4.1. Приготовление: жидкого препарата яз. биФидсбактерай ЛечэОно-профилактическиЙ препарат из бжфидсбактерий готовили по такой методике,';В бутылях емкостью 20. л готовили по 17 л среды., из СЕК и. КЛС. Бутыли закрывали ватно-марлевымя пробками с.вмонтированными посевной и сифонной трубками. Бутыли. со средой стерилизовали в автоклаве' при 0.5 атмосферы в течение 50 мин. охлаздали до 37-38°С а вносили по 1.7 л свежевыракенной культуры бифддсбак-теряй / посевной материал 3-ей генерации:/.. Посев выдерживала в : термостате с температурой'37-^80С в течение' 24-30 часов..
Затем отбирали пробы |дгльтуры для определения количества завах бифндббактерлй / методом серийных разведений / ж наличия посторонней мякройлоры / путем посева яа Ж, ,МШ. ?ЯШБ я др. /. После проверки. на. отсутствие посторонней микрофлора я после; определения количества аавих бифядобгктзрай / от 8 до 10 миллиардов в 1мл / в микробную массу вносили 1 $£-ный раствор ЯаНСО^ из расчета, чтобы величина рН.конечного продукта была равна 6,3-7,4. Готовый.к употреблению препарат-стерильно залевала в 200 мл и 500 мл стерильные Флаконы, закупоривали и этакетировали. - ■ >
. . Препарат хранили в холоджльнигз пои тёшгературе -2-4°С э Течение не более;6.месяцев. *
1А
каска талят в зависимости от возраста и кдиничзског»-состоя-! •ни'яг'Т-- кхйнячески здорпвыэ" шзптныз» 2 - ^иапткыэ с .пркз-аака»к дасфующва оргаяоа пищеварения»
2.2.4.2. Исследования-по определению жчебяой а*фгггивностк
бифидобактерийных препаратов 2.2.4.2.1. Опыты на поросятах : Исследования по испктекк» »^етаякостк -бифядоапктердЛнвх препаратов.проводились на 156 новорожденных поросятах.£254 поросятах 30-4 О-суточного возраста,
• Из. яовороивйкнх поросят состав»® 2:водоянтннв груяшг / 1. Г группа / и 2 контрольные группы / 3. 4 группа
Яааояытяы» и контролькш поросятв» два раза в сутяв, в течение 3-5 суток давали «по 5-7 кл пероральяо':
1-2 подопытной группе - препарата, граготевдаяшм ез бзйэдо-бактерий, выращенных на среде из СЕК,
?-й подопытной группе - .претор»?», щ?ягл?(>втеяга1в сэ' бнфкяс— :'бгкгеря$; выраженных на К1С,
3-й контрольной группе — ппепат^лть? Г-Г ор^д?* СВН, на вврашгвада'бь бифидобактерян, '
4-4' контрольно?? группе' - препарата яэ' К1С, за • которой вкраивались бифядобакгерик,; .
, Из. порос5ятгстье.кн1зей ЗСМО-суто>яог6 возраста базе сссгеагана' аналогичные 4, группа,; которязя ввбдклзсь такие ;«е препарата, дозах по 20-25 ет/ дзг раза з суткг» в течзкге 3-5 сттсе.
7 ?ёзультйты/.йссяедов&ягй приведанн в тйбл.5., Изтабл^б',вгдно.. что. 5ф^гптазяоеть 'лв»еней ковгфзжгаазвх .ес-рссят препаратами .яз. ,би?ЕД'оЗа:кгер«й, 'ндецеяясс на'среда нг Ж б КЗС. .составляла 98,б я 95,8% сб.&тэвтетвез^о, .протзз з контрольных группах, лро«е'тогс Б. поросят / 205 / вэрвкЕ чкда-трольнЫГ группа'.я -6' поросят / /'егозой-таатраафвй? гррзаг пало против 1 / 2.0£ / а 2 / 4.2? / в перзс® и во етерой -,«а«Ж4х группах.■
Среднесуточные приросте етвой игеез тела поросЕт-сосунов, ег-торнм вводили препараты нз бктЕДобгЕ-ер'й!. Барагггпяыг' ш сдала -к? СБК к.КЛС, через 60 суток бшж.на 0.052 г 0.047 соответственно больше, чем в лоятролях.
Эр^ектяйность лечения яоросят-отьеишаай' Зй40-су?очгсгс раста препарата1,от из: бифидобактерий, Бкрас-еяныг ян среде жг СЕК г КЛС. составляла 98,5 к 93.3%, против 85,6 е 83,4« .в контрольных группах соответственно. Кроже того 9 поросят / 13.4? / первой контрольной группы и 8.поросят / 13,6? / второй контрольной группы пало йротив 1 / 1,55 / и 1/ 1.75 / в первой в второй опнтянх груп-
пах.
Пороеят-отьемаши'имели среднесуточные приросты '«ивой'кассы на 0.085 к 0,079 кг больше сравнительно с кон.тролямЕ..
Б кковг доросят-отьемшаей.отметали -достоверное- увеличение -/ F < 0,05 - 0,01 / 003 до 6,0*0.05 - 6.2*0,1' т/ч п-стив 5,6*0, V ■ 5,'--0,1 мк/ч в контролях, количества геуоглосчша до 10,7-0,2 -
- 10.6-0.1 т% против 9,5-0,2 - 9,7*0,2 т% ъ контролях, .врктронк-тсь до 5.7*0.2.- 5,5*0,1 *1012/л. против. 5,1*0,1 - 5,0*0.1 'Ю^/л ъ контролях, гематокркта до 35,6*1,0 - 34,8*0.4%. претив 33,1*0,6 -
- 33,0*о,5£ в ноктролях, активности аспартатамкнотранс^разк до 0.390*0,034 - 0,356*0,040 мкглолк против- 0.259*0,017 - 0.268*0,018 кя«сли б контролях е алакйка'«а.четрЕКс1ер£зы до 0,526*0.023 - 0.455 -0,019 ккголи против 0,438*0,019 - 0.436*0,021 мкмоЛи в контролях.
2.2.4.2.2. Опыты на телятах
Исследования по испытание эффективностибифидобактерийных препаратов проводились на 82 новорожденных телятах и 76 телятах . 30-45-суточного .возраста.
Из новорожденных'телят.составили 2 подопытные группы / 1, 2 группа / и 2 контрольные группы /' 3, 4, группа /. .'■
Подопытным и контрольным телятам два раза в сутки, в течение 3-5 суток давали по 50 .мл перорально:
¡-C подопытной группе - преператк,; приготовленные из .бйтидо-с^ктерий, выращенных на среде из СБК.
2-Й подопытной группе - препараты,'приготовленные иг бифидо-бактерЕЙ, вкрааенных на КЯС.
3-й контрольной труппе - препараты из среды СБК, на которой Бнраяквзлись бифкдобгктерии,
4-й контрольной группе - препараты кз КЛС, .на . которой-выращивались бифидобактерги.
Кз телят 33-4 5-суточного возраста были -составлены аналогичные 4 группы, .которым вводились такге «е препараты, но в дезах по 100 мл, два раза в сутки, в течение 3-5 суток.
Результаты исследований приведены в тэбл.6. ."
Из табл.6 видно. чтоэ$3>ективнсстьлэченвд новорожденных телят. гоесаратамк нзТби^обатрай...^вдшеюиоЕ.«a.; среда -кз..СБК'•«' KSC»: составляла 96.2 и 95,2í соотвётственно,. ;прОткк бЬ.О и бО.О? i контрольных группах. При:этом пало по 3 телят в; контрольных группах / 15 в 2Oí /, а в рпытнвх группах по одному теленку / 3.6 ж
о
S-*
л
I . I . !
! TJ ! I Ц
¡ Li V . о >а
I tí С в I I О E-t Ф ^
! а.>»э a.si i О о 2 2 а .. «••(
! I I
ICI !
I Ч I "si !
I I I
..I
I О' I I Я I I С 1
сЯ С.
cu
с «
ч в-t.
ti
к с
i a. i я i с i с I
6- i • ч i
s; i л i a о I
Ч 13 IOS I
О IP I СЗ Г I
fr, I.. .. ...I
III
iß I I 1
Э I. ' I. "S4, I
a I c.i •
X I 4 I I
О I £5 .......I,
w 1С i с i
ísí I I • « I
CI tool
a. i i о s i
С !■ . I вГ: I
Я |..-.1.* wi. . •*i
O l # Ei I I Я I S « П I I 4>! >> I ico a. oi i m ta и ci .«*» .я. a »• ». •• **i I 3> 1 I t-l I I 1У ф til
: i (jo я i
I <D E* о s J i ■ i a-ai
i о о и n Ol
I !
ICI, I 4 I I <3 I
I л I
о
со
N9 <7i
m CVJ
оо rC
VO
ca
сл cu
о
CO 0\
с а ICI 1
с t. I a u. .. ...1 1
'Я 1 С 1 с 1 I
я о I W 1 »4 1. Г
s ■с 1 ci 1 ао { о\ VO 1 -3" 1 CJ
■о - а. 1 3 1 -о s 1 ¿r 1 0J OJ
■с .". с i и i ей s- 1 1
о с I.. ..i.. .. . »•1
с 1 i 1 1
о о 1 i 1 о 1 о
s 3 1 I.&S. 1 ' * « «
ч •Я ■ X I I ICI 1 1 см Л- 1 о 1 CJ ы CJ
■ о 1 в: и, .'. . "1 1
g 14 1 с 1 ЕЗ 1 • Ч 1 1 1
щ с 1 loo 1 У—» <М i -.о
3* . i ю я 1
<D. . с 1 1 (US'- 1 1
Ч ..'я ■ с V »•1 1 1
А ВЗ 1 sc с 1
F* - 1 ч a. fi >, 1 s СО 1 о 1 сэ
а ! 1 с с я a-ml л- 1 (M
с. ■ l is ~ о с. Cl
• • Â • *• .« .. ..I
. rq : 1 i 1 1 t X 1
. 1 'as а к а 3'. ^
1 . m « 1 "J « ^ 1 r-J
14 1 У: XJ s £3 i э- о 1
О 1 -, с <D o 1 s с СП t . И ! л
я . 1 Ч КГ S" ч Kf а 1 s;
ft> ' ' ■ 1 С Cl и i с i 3 л 1 С -
СО ■'. a. ■ г 1 с s n. S í ■ = •3' 3 I о. Ч I О. й
M t 'f 43 e i 3 я - ! сх I
f С ■ . 1 n W 1 л 1 Ei t С
о'. I 3. m S> 1 о. гз .-О у
1 О.' V 1. 2 ** .О. 1 я 1 cl = 1 N
|. ез . г О 1 s 'v; ££ ! ' •"Г Ы 1
1 3 ZXt СО 1 и' О
1 1 3. o tri 1 .. Ci Í3 . О Cl 1 "t ~
1 - 1 tü 1 е: 1. О 1
'Г\
оч
я
<о
«ч
СО ■CN.J
о
m о\
\г\ из
о
1гГ
о
CJ
о\
OJ
о
МЭ
о
о :\1
О
см
ю со
(V
4.35£ /. -
Среднесуточные приросты нивой массы тела новорожденных телят, •.которая давали препараты из бифидобактерий. выражениях на среде из СЕК я КЕС. через 60 суток были на 0,171 я 0,161 кг соответственно . 'больше. чем в контролях.
Эффективность. лечения телят ЗО-45-суточного возраста препаратами из бифидобактерай, выращенных на среде из СБК а КЛС, соста--здяла 100 я 10Сй против' 90,5 - 86,7% соответственно в контролях, где пало 2 теленка в контроле 1 / 9.5? / я 2 теленка з контроле 2 / 13.3* А
Средяесуточные приросты живой массы тела телят 30-45-сугочяо-го возраста были на 0,360 и 0,318 кг больае сравнительно -с контро-,
лями.
В крова телят наблюдали достоверное увеличение / Р<0,05 -
- 0,001 / СОЭ до 6.6±0,3 - 6,3^0,1 мм/ч против 5.9*0,05 - 5,8*0,06 т/ч в контролях, уровня активности аспартатачинотрансферазы до 0,618*0.026 - 0,607*0,033 мкмоли против 0.510*0,030 - 0.490*0.029 якмоли в контролях и алаяпнамиявтраясфзразы до 0,422*0,024 - 0.400* ±0,020 икаоли против 0,318*0,017 - 0,306*0,019 мкмоляв контролях, показателей содержания калия до 6.092*0,040 - 6,078*0,030 мкмсиш/л . , против 5.79*0.06 - 5,72-0,06 мкмоли/л в контролях. натрия до . 133.56*0,85 - 129,58*0,88 «моли/л против 123,32*0,29 - 123.03*0.30 мкмоли/л в контролях, кальция до 1,85*0,08 - 1.73-0,03 мкмолл/л против 1 »626*0.033 - 1,613*0,029 мкмолк/л в контролях и фосфора до : 1.586*0.040 - 1,536*0,019 миколи/л против 1,468*0,020 - 1,442*0.020 нкхоли/л в контролях.
'В сыворотках крови телят было также достоверно увеличенным / Р<0,01 - 0,001 / количество общего белка до 54.8Ci0.85 -.53,Об* -0,85 г/ж против 46,42-0,73 - 46.28*0,55 т/л в контролях. альбуминов до 55,(¿0,41 - 53.8*0,02* против 49,0*0.3 - 48,2*0.4* в контролях и 0-глобулинов до 18.80^0,36 - 18,20*0.17* против 17.20i0.23 -
- 16.90*0,22* в контролях. Одновременно достоверно уменьшалось ,
/ Р<0,001 / в сыворотках крови телят количество »¿-глобулинов до 14.20*0.37 - 14,60*0,08* против 18,0*0.84 - 18,20*0,77* в контролях и р-глобулинов до 12,0*0,1 - 12,4*0,09* против 13,8*0.3 - 14.2* контролях. Одновременно в их крови достоверно уменьшилось / Р 0,05 - 0.01 / количество гемоглобина до 10,6*0.05 - 10,5*0.1 г* против 10,9*0,1 - 10.8*0,1 г* в контролях, гематокрнта до 35.2* *0.2 - 35.3*0.1* против 36:2*0.3 - 36.3i0.2i в контролях, эритроци-
tob до 5,8-0,06 - 5,9*0.02*1012/л против 6.1*0,05 - 6,1*0,04*1012Д в контролях и уровня активности щелочной фосфатазы до 0.834*0,015 -
- 0,826*0,023 мкмола против 0,944*0.017 - 0.942*0,016 ккмслн в контролях. .
Такам образом, данные опытов показывав! целесообразность применения для лечения диспепсии поросят и телят незаразной аткслогЕВ препаратов из бафидобактерий. Препараты, изготовленные'с неаользо-взввем среды гэ СБК. мели более внсокув лечебную эффективность сравнительно с препарата*® на КЛС.
2.2.-4.3. Исследования по определению профилактической эффзк-тнвнсстй бифидобактериййвх препаратов
2.2.4.3.1. Опыты на поросятах
Исследования по шштанкю профилактической эффективности бп-фидобактерийкых препаратов проводились на 320 новороздешшг поросятах, и 512 поросятах 30-40-суточного возраста.
Кз новорожденных поросят составили '2 подопытные группы /1. 2 группа / и 2 контрольные группы.7.3,4 группа /.
Подопытным'ягоятролькшл поросятам сразу пссле .-рогдеядя, а затеи через каждые 24 часа, в течение 3 суток давали по 5 мл перораль-ко препараты ез .бифадобайёрйй., внрааенянх на' сргде. СБК а EIC.
Из поросят 30-40-суточного возраста были составлены аналоггч-нке 4 группы, которым вводились такие ге препарата, во в дозах по 20-25: ия. один раз в сутки, в течение 3 суток.
Результаты лсслвдоваяий приведены в тайл.7.
Из Табл.7 видно, что профилактическая зфТективпссть препаратов из бифЕДобактерий^ выраяенных на среде кз СЕК и КЗС для.новорожден-ных поросят, составляла "97,6 - 9ö,2iS соответственно, против 29.6 -
- 27.3? в кснтрслнх,- где. к тому же, допущена гибель 5 поросят / 8.7% / в контроле 1 и 5 поросят / 8.9^ / в контроле 2.
Среднесуточные приросты живой кассы тела поросят-сосунов, который, вводили препараты из бифидобактерий..выращенных ва"среде из СЗЕ ■а К2С, через 60 суток была на 0,135 и 0,121 кг.соответственно боль-пе, чем в контролях.
Профилактическая эффективность препаратов аз бифвдобактерЕй. выращенных на среде аз СБК и Ю1С для поросят 30-4.0-суточного возраста, составляла 97.2 - 95,1 % соответственно. Этот показатель в контрольных группах был лавь яа уровне 35,3 - 33.7?, где 5 поросят / 7.3/S / в контроле 1 и 5 поросят / 7.7% / в контроле 2 пало.
■ Таблица 7
Эфйоктивплоть применения препаратов из бифидосттории для профилактики дпспзпсии понизятч толя г
Ловорпкдешшэ телята
Прзпа^агн
Првпзрат-.полу-■■ чанный из би~ фидпоактзиий, 03 вырзщэннчх на срэдэ из СБК
Пало ув .забодало;Срэдие-------—---сугпч-
айс.; . * ; ннэ час»: ; привали: ! кг
2 2;4 -
■81. 97,6 0,37'К 33 I 3,0 , -
32 97,0 0,913 .
о
Препарат полученный из би- ' Фид«5акт9ри1'1> 79 выращенных па Ш ■
3 3,в
76 96,2 0,350 29 2 6,8
27' 93,1 0,8:57
Срода из ОШ рл /контроль I/
КЛС
/контрпль 2/
77
57 70,Ч 5 0,7 2'( 29,6 0,239 30 26 8С,б . 2 7,7 4 13,3 0,636
56 72,7 ; 5. 0,9 21 27,3 0,229 2'. 23 »3.5 2 0,7 3 11,5 0/5ЗД
CwimcTrwriC срассста яквсй -«.ста -тел* яозосят 30-40-сугс-:ого возраста iwa на 0,033 я 0,069 кг больгз.сравнительно с хсн-"РО.Ш.Я.
2.2.4.3.г.0ватн на телятах
Исследования. по испктая;т яроФклахтической эффективности би-¡ядобактарпЗанх препаратов проводились на П8 новорожденных теля-вх я 150 телятах 30-45-суточного возраста.
Из яоворохденннх теля? составила 2 подсинтные группы / !, 2 руппа / 2 контрольные группы /3.4 группа /. . Педопатяш' я контрольным -'телятам сразу .после роддения. а -зава через каждые'-24 часа, .в- течение. 3 суток давали по 50 мл прэпа-ата. ■
Из телят 30-45-суточного возраста была составлены аналогичные группы, которым вводились такае яе препараты, но в дозах по ЮО я, один раз в сутки, в течение 3 суток.
Результаты исследований приведены в табл.7.
Из табл.7 видно, что профилактическая .»Активность' препаратов з биФидобактерий, выращенных на. среде из СЕК я КЯС для нозородден-ых телят, составляла 97,0 - 93,15 соответственно против 13,3 -11.55 в контролях. При этом допущена-гибель 2 телят / 7.75 / з онтроле 1 и 2 телят /. 8,75 /, в контроле 2.
Среднесуточные приросты зсивой массы тела новорожденных телят, оторым вводили препараты из бифидобактерий, выращенных на среде из БК и КЯС.' через 60 суток'были на 0,227 я 0,217 кг соответственно ольше, чем В коятролях1 и 2.
Профилактическая эффективность.препаратов та бифадобактерий, аращеяяах на среде из СБК я КЯС для телят 30-45-суточяого возраста, оставляла 97.9 - 97.6% Ьоотвзтстгенно. Этот показатель в контроль-ах группах был лить 'на. уровне 25,6 - 24.35 'соответственно.' При гсм допущена гибель 1 теленка / 3',45 /.в контроле 1 а 1 теленка 4.05'/ в контроле 2.
Среднесуточные приросты живой массы тела телят. 30-4£-сутсчкого ззраста были на 0,425 и 0,322 кг 'больше, сравнительно с контроля;«.
Такт« образсч, данные опытов даззт основание применять дга аро-мактики диспепсии поросят я телят незаразной этиологии препараты ? бифидобактёрий. Препараты, изготовленные на среде из СБК, имела злее.высокую Профилактическув эффективность сравнительна c.troesa-. wra яа КЯС. .
3. ВЫЗОЛЫ -
1. Разработанная нами новая питательная среда на основе сухого белкового концентрата / СБК / пригодна для получения биомассы с высотам числом живых бифлдобактерий. достигающим 8-Ю миллиардов 1 1 * ил. Питательная среда из СБК дает, возможность значительно сократить использование дефицитной и дорогостоящей говяжьей печени и ш требует добавок пептонов и буферных смей.
2. При выращивании на среде из СЕК бМидобактерии имеют хара! теряна морфологические и яультуральные признаки/ высокую ферментативную и антагонистическую активность по отношению к условно-патогенным я патогенным микроорганизмам желудочно-кишечного тракта поросят и телят /К. овИ.З*. *ц»виа,Р*.ти1ваН.» и др. /.
3. Бяфидобактерии на среде из СБК обладают, высокой антигенно: активность®, которую можно увеличить посредством воздействия лазе ного излучения мощностью 10 мВт и длиной волны 0.63 ш в течение 6-9 часов или вращающегося электромагнитного поля напряженностью 0.13 Тесла со скоростью вращения 3000. об/мин в течение 1-2 часов.
4. При введении телятам нативных бифидобактерийных антигенов без адьяваята среднегеометрические титры специфических агглютининов' составига 4.68*0.3 Хвг^ с адьювантом 4.89*0.1 Л.«^
Среднегеометрические титры специфических агглютининов в сыво ротках крови телят, которым вводились бифидоантигены, обрэботаннн лазерным излучением или вращающимся электромагнитным полем, без адьвванта составили 5,87*0,21оег, с адьввантом - 7,1*0,2
5. Количество бифидобактерий в кипечнике клинически здоровых 1-21-суточного возраста телят содержится на 2-4 логарифма выше. * устелят при диспепсии. Бифидобактерии оказывают положительное влг ние на качественный и количественный состав микробов желудочно-кг 529чного тракта, регулируя состав резидентной микрофлоры.
6. Нарушение санитарно-зоргигиеническях условий кормления и содержания молодых животных / сквозняка, резкие колебания темпер; туры и влажности в помещениях, несвоевременное и неполноценное кс мление, выпойка некачественного молозива / обуславливают снаженж резистентности организма телята дисбактериозы, изменение состава нормальной микрофлоры кишечника, увеличение количества условно-ш тогенных микроорганизмов /$«Ь*г1сЬ1а с»11, Р»о*«ц» Б*«р
1*о»ооая «а»«ц»«£ а! /,
7. Препарата бифидобактерий, приготовленные с использование] среды из СБК и К2С, обладают высокой лечебной и профилактической
эффективностью при желудочно-кииечных расстройствах поросят и телят, в дозах: поросятам 2-10-суточного возраста - 5-7 ил к 30-40-суточного - 20-25 мл, телятам 2-10-суточного возраста - 50 ил. к 30-45-сут.очного - 100 мл.. Препараты вводятся животным -перорально с лечебной целью два.раза в сутки, в течение 3-5 суток, с профилактической в тех-*е дозах, но один раз в сутки, в течение 3 суток.
.8, . Для лечения, к профилактики диспепсий незаразной этиологии у телят и поросят положительные результаты получены при применении СифидсбактериЯных препаратов. Использование препаратов из бкфздо-бактеряй, выращенных на среде из СБЕ или КЛО. с лечебно? пельв увеличивает сохранность телят и поросят на 15-2С&, а с профилактической - на 65-80*; а также повышает приросты живой кассы их тела сравнительно с контролями.
4. гакЯШЙАШИ ■
1. Дяя 'иуйьтизировзвия и выделения бяфидсбекгерЕй рекомендуется аовая'эффективная питательная среда на основе сухого белкового тоа-г.ентрэтз /СЕН/, содергаиая 90-110 ит% атанкого азота, 4-5% пептонов.
" 2. Для лечения и профилактики диспепсии у поросят рекомендуется арнкевять перорально препараты из бифкдобактерий, вйрашенюа на сре-Ее из СЕК. в дозах 5-7 мл поросятам 2-10-суточного возраста и 20-25 ет поросятам 30-40-суточного возраста два раза в суткг. в течение ?-5 суток с лечебной целью, а с прсфидггктаческоЗ пельи в дозах 5-7 ад поросятам одяосуточного возраста и 20-25 к'-л поросятам ЗСМО-су-¡гочного. возгаста один раз в сутки, в течение 3 суток.
3. Идя лечения и профилактики диспепсии у телят рекомендуется ГОимйнять перорально препарат« из бифияобактергй, ркрагеяяпх ея среза из. СБК, в дозах 50 кл телятам 2-10-суточного :всзрзста и 100 ил телятам 30-45-тсуточного возраста два раза в сутки, в течение 3-5 зуток с лечебной целыэ, а с профилактической пзльс в дозах 50 кл телятам односуточного возраста к 100 мл телятам 30-45-су?очнсго возраста один раз в сутки, в течение 3 суток.
• СПИСОК (ШБШШОВАНШХ РАБОТ
• 1, Коне Мохамед. Эффективная питательная среда для культивирования бифидобактерий //Проблемы повышения продуктивности животных ¡г з{фективности их лечения: Тез. докя./Респ. науч. поакт. кснф.-Дде-
тропетровск, 1994 .-С. 105-1 Об.
2. Коне Мохамед Сумаяа. Эффективность применения препарата из
бифждобактерий //йнфотзкшшбнвнй .листок 'ЦНТЭ0.~Херш®, 1994. С.'4»
3. Мохамед Сумана Кояе. Антигенные•'• и нивуяйнб:свойства• препарата. из .бифидобактерий, приготовленных -лазерным излучением е-вра-ааюЕкмся 'электромагнитным полем //Сохранность аояодилкэ' сельскохозяйственных-животных - основа 'развития'гжввотновожотва Украины: Сб. статей /Науч. практ. конф.-Харьков, 1-994.-С. 120-121.
4. Коне к.С. йзнсшше- оптимальных режшгов..иизкгл£аш:и:бафзд бактерий воздействием различных физических.факторов я нх контроль //Продуктивность и качество сельскохозяйственной '.ярсдукш?*:' Сб. науч. тр.-Полтава.1995.-С.243-246.
Коне Мохаиеа Сумана. Выращивание к -использование бифидобакте pz.1 для производства-■-препаратов. профтаактяруЕггст жааудочно-кикеч аые расстройства поросят е телят.
. Диссертация sa соискание ученой степени кандидата ветеринара наук по специальности 16.00..03 -'ветеринарная «гякробирлогкя, вирз оология. эпизоотология, мгкология и иммунология.. Институт .аксйерг ментальной й- клинической ветеринарной медвцщщ УААН, Харьков, 19t
Разработана методака таготоэденгя новой. эффективной питвтел! ной среды на основе сухого белкового концентрата / СЕК-средк / 'да выращивания бифящобактерий. Изучены .морфологические, культтралью и анткгенные свойства, бифидобаетердй на СЕК .-среде. В от:гах ев лятах установлена высокая" антигенная активность препаратов из би: добактеркй... обработанных посредством лаэер'кого излучения Ищ вращающегося электромагнитного поля, .йзучен. количественный -и качественный состав микрофлоры кишечнира здоровых к бальвах.'желудочное точными расстройствами ксш>дкх животных. Определена высокая эффе тивность применения препаратов из бкфядобактеркй, выращенных; на ; среде из. СБК. для лечения Е профилактики диспепсии у поросят « т лят. ' ,
Kasti KohtiMd Заиваяг. Cultuara aad uaa oi bifidabact**i«e for tha preduction mf drug U eritr to »roid g»«tre»Bt«rio diaa*a«s of pigltti »ЕЙ в»И. ' .
The Candidate îbaaia fer Daetor a£ Ksylaaeplsy dagraa, Spaci lity 16.00.03 - T«t«ri»arynicrebiology,Tirology, apizoatalegy, sioelagy aed iaauMlogy.- I»atituta ofaxpariaantal a*d.oli»ieal Yatari*ary aadiciea ortha Ufcrai*ia* aeadany af agrarian ecla*e< Eharker, 1997.
Slabarated praparetiea"• aathed ai »•* efftotireaairiilr*
tare free dry preteia on:ntnt«« / DfC-eteeke / for the cul-•e of bifidebacteriee. Studied eerphelegice, cultural« a*d «»title e prepertiee ef bifidebaeteriee 1» BPC-oulture. Duriag experi-ita ea cow*, eatabliehed • high «»tig»» a activity of drug» free idebaoteriee, deae directly «ith lazer ead tumlag eleetremagae-i fields Studied quaatitative aad qualitative eeasoaitla» of ea-•it healthy *»<i eiclc gaetreeaterelogical problene / diarrhoea / age aaiaale. Beteraiaed * high effect? drug iron bifidabaeteriee ■wed ia DPC-cnlturs is order te treat aad te avoid gaetraeatari-i te piglet« aad oewe.
Ключевые слова: СухоЯ белковый концентрат, кукурузнс-лаятозная да, бяфцдобактерии. ягатепсия, препараты, лечение, профилактика, осята, телята.
Подписано к печати 7. 05. Э7г. Формат 60x34 1/15. Бумага йслаг плеча2. Печать офсетная. Объем 1 е. л. Тираж 100 экз. Бесплатно. Заказ N5531. Подразделение оперативкой пояяграфкн управления статистики По-тгагской области, г. Патгава, ул. Пушкина. 103.