Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Влияние Т- и В-активинов на функциональную активность иммунной системы и показатели естественной резистентности телок, иммунизированных и реиммунизированных вакциной из штамма 82

На праьах рукописи

ТАНЕЕВА Галина Муфтаховна

Влияние т- и в-акткбинов на функциональную активность

иммунной систему и показатели естественной резистентности телок, иммунизированных и реиммунизирозашых вакциной из штамма 82

16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Воронеж 1998 год

Работа выполнена в отделе фармакологии к токсикологии к в лаборатории по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ве те ржа рнсго института

Научный руководитель: академик Академии ветеринарных наук,

доктор ветеринарных наук, профессор

И.Д. Александров

Официальные оппокектк:

1. Доктор биологических наук Б,И. Беляев

2. Кандидат биологических каух П.А- Паркий

Ведущая организация - Ставропольская государственная сельскохозяйственная академия

Зашита состоится _^ 1998 года б " "/3" часов на

заседании диссертационного совете. Д С2О.65.02 при Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, "б").

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института Автореферат разослан _¿Х___1998 года

Учений секретарь диссертационного совета, доктор ветеринарных наук

М.Н. Аргунов

Актуальность проблемы. Иммунофармакология является интенсивно развивающимся направлением ветеринарной медицины. Все большее значение приобретает необходимость коррекции иммунной системы и восстановления дефицитов активности ее отдельных звеньев. Эффективность применения иммуностимуляторов зависит от патогенеза инфекционного процесса и состояния макроорганизма. Предпочтение отдается существующим в организме и обладающим избирательным действием веществам, корректирующим нарушения иммунологического Гомеостаза. Этим критериям полностью отвечают препараты из органов иммунной системы - тимуса, костного мозга и Фабрициевой сумки.

В этой группе иммуномодуляторов перспективны низкомолекулярные пептиды: Т- и В-активины. Они усиливают гуморальные факторы неспецифической защиты у телят-трансплантантов (Петров A.M., 1994), являются'стимуляторами роста и корректорами иммунологического статуеа"телят и поросят (Воронин Е.С. и др., 1990; Павлов Г.В. и др., 1991; Беляев В.И., Сартасов E.JI., 1992; Александров И.Д., Сидоренко Н.М., Ковалева Л.О., 1993; Липатов A.M., Липатова O.A., 1995).

Имеются свидетельства о применении Т- и В-активинов в качестве иммуномодулирующих препаратов при экспериментальных инфекциях: инфекционном ринотрахеите телят (Воронин Е.С. и др., 1991), сальмонеллезе (Окапаттах Годвин Агбеко Куджо, 1991) и пастереллезе (Сума Лансака, 1991) белых мышей.

Комплексное применение Т- и В-активинов обеспечивает высокую лечебную эффективность при острых желудочно-кишечных и респираторных болезнях телят (Девришов Д.А., Воронин Е.С., 1986; Грязнева Т.Н. и др., 1991; Воронин Е.С. и др., 1994; Äa-ров A.B., 1995). Также имеются данные о применении этих иммуномодуляторов в качестве адъюгантов при антигенных нагрузках (Лаков М.С., Ьукозз A.n., 1991; Кирпиченок В.А., Сергеев Ю.О., 1991; Жуков M.G. и др., 1994; Нехуров Л.Б. и др., 1996; Умаро-ва С.К., 1996).

Мммуномодулирующая роль фармакологических веществ у крупного рогатого скота, иммунизированного вакциной из штамма 82, практически не изучена. Исследования в этом направлении только

начинаются. Установлено, что в экспериментальных условиях введение кошдона с вакциной из штамма 82 телкам 3-5-месячного возраста усиливает активацию иммунокомпетентных клеток, что повышает напряженность противобруцеллезног-о иммунитета на 25 % (Иванова О.Н., 1996). Влияние вакцины в комплексе с имму-номодуляторами на активность иммунной системы и естественную резистентность телят более раннего возраста не изучено.

Учитывая природное происхождение Т- и В-активинов, оригинальным представляется изучение их иммуномодулирувдей роли в комбинации с противобруцеллезкой вакциной из штамма 82 на телках раннего возраста.

Цель и задачи исследования, цель - выяснение влияния Ти Б-активинов на протективные свойства вакцины из штамма 82.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1) оценить активность иммунной системы и естественную резистентность телок различного возраста;

2) определить оптимальные схемы и дозы введения животным природных иммуномодуляторов Т- и В-активинов;

3) изучить иммуномодулирующую роль Т- и Б-&кткеинов на фоне специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота вакциной из итамма 82;

4) разработать основные положения метода оптимизации иммунопрофилактики бруцеллеза крупного рогатого скота с. использованием иммуномодуляторов Т- и В-активинов и вакцины из штамма 82.

Научная новизна исследования. Определена возможность иммунизации телок раннего возраста против бруцеллеза в комплексе с применением иммуномодуляторов природного происхождения Т- и В-активиноЕ. Установлено, что эти препараты повышают им-муногенные свойства вакцины из штамма 82 и обеспечивает у животных иммунитет до 12 месяцев, что на 2 месяца больше известного ранее.

Практическая ценность работы. Комплексное использование Т- и В-активинов с вакциной из штамма 82 стимулирует естественную резистентность, клеточный и гуморальный иммунитет, ком-

пенсирует иммунодефицит, в течение 12 месяцев сохраняет проти-вобруцеллезный иммунитет. Результаты исследований послужили основанием для разработки "Способа профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота" (й.д. Александров, Л.А. Малышева, Н.М. Сидоренко, Л.О. Ковалева, A.A. Харченко, Г'.М. Танеева): заявка № 93-031429/13/029544, патент Р# № 2065749, опубликовано 27.08.96. Материалы патента внедрены и применяются в ТОО "Латоново" Матвеево-Курганского района Ростовской области.

Апробация работы. Основные результаты экспериментальных и производственных исследований доложены и обсуждены на 5, 6, 7 и S межгосударственных межвузовских научно-практических конференциях "Новые фармакологические средства в ветеринарии" (г. Санкт-Петербург, 1993, 1994, 1995 и 1997 годы), 1-ой Всероссийской научной конференции "Иммунодефициты сельскохозяйственных животных" (г. МоскЕа, 1994 год), научно-практических конференциях в Воронежском государственном аграрном университете (1996 год) и в Донском государственном аграрном университете (1996 год).

Публикация результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 12 научных работ и получен I патент. На защиту выносятся следующие положения: стимулирующая роль Т- и В-активинов на фоне иммунодефи-цитного состояния;

имкуномодулируюцая роль Т- и В-активиноЕ при комплексном использовании со слабоагглютиногенным и слабовирулентным штаммом Еакцикы Бруцелла абортус 82 на телках раннего возраста.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследования, обсуждения и заключения, выводов. Работа изложена на 153 страницах машинописного текста, иллюстрирована 24 таблицами, список использованной литературы включает 207 источников, в том числе 55 иностранных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЙ Исследования выполнены с марта 1991 по апрель I9S5 года

в условиях отдела фармакологии и токсикологии и лаборатории по изучение бруцеллеза сельскохозяйственных животных Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института и б условиях производства - а колхозе "Родина" Октябрьского района Ростовской области, СХП "Марьинское" Кировского района Ставропольского края и ТОО "Датоново" Матвее-во-Курганского района Ростовской области.

Исследования провели на телках 20-30-суточного и 4-5-месячного возраста, сформированных в группах не менее чем по 5 голов с подбором животных по принципу аналогов.

В 1991 году в группах по 5 телок 20-30-суточного возраста испытали Т-активин в дозах 0,04 и 0,05 мл/кг и В-активин -по 6 и 9 мг на животное. Препараты вводили подкожно один раз в сутки в течение I, 3 и 5 суток подряд. В экспериментах 1992 - 1995 годов животным вводили иммуномодуляторы на фоне специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Вакцину из штамма 82 вводили согласно наставлению в дозе

5 мл.

Т-активин вводили подкожно в дозе 0,04 мл/кг в 0,01 $-ном растворе I раз в сутки в течение 3-х суток, а В-активин - в дозе 6 мг 20-30-суточным телкам и 9 мг 4-5-месячным животным I раз в сутки в течение 3-х суток, растворяя В-активин 0,01 %-ным раствором Т-активина. Комбинированный препарат Т- и В-ак-тивинов вводили двум группам телок (20-30-суточные и 4-5-месячные) через 14 суток после иммунизации вакциной из штамма 82. Контролем служили 2 группы телок аналогичного возраста без введения иммуномодуляторов, только иммунизированных против бруцеллеза. Б группу чистого (параллельного) контроля включены животные, не вакцинированные и не обработанные Т- и В-активинами.

Через 12 месяцев после первичной иммунизации телок иссле-доезлй серологически в РА, РОК и РЕП и при отрицательных реакциях ревакцинировали против бруцеллеза с введением части животных повторно иммуномодуляторов. Т-активин вводили в дозе 6-8 мл, В-активин - 12 мг трехкратно с интервалом 24 часа через 14 суток после реиммунизации вакциной из штамма 82.

Схема эксперимента представлена в таблице I.

Схема эксперимента на телках в 1991 - 1995 гг. Возраст !К-з "Родина''ТсхП~иМарьйнское"!~ТОО~"Латоновотг животных '®ез вакцины ! Вакцина шт. 82 !Вакц.шт.82!Рев.шт.82 ______!_ ЙМ_ 1 _0_ | _ЙМ _ | _ 0 _ _!__ЙМ _!_ _0_ I ИМ_!_0_

20-30 суток 40 17 14 16 206 5 197

4-5 месяцев 12 12 10 5 5 6

Контроль

(без шт.82) 5 12 10

Примечание: ИМ - иммуномодуляторы (Т- и В-активины).

Исследования показателей естественной резистентности и активности иммунной системы провели в соответствии с "Методическими указаниями по тестированию естественной резистентности телят" - М.: MBA, IS80; "Методическими рекомендациями по количественному определению и функциональной оценке Т- и В-ликфоцитов в периферической крови крупного рогатого скота" -Харьков, 1983 и "Методическими рекомендациями по исследованию иммунного статуса свиней, крупного рогатого скота и кур" -Покров, 1988.

Использованы следующие методы исследования активности иммунной системы и естественной резистентности животных:

- определение количества лейкоцитов и лейкоформулы;

- выделение, идентификация и количественное определение Т- и В-лимфоцитов крови;

- определение фагоцитарной активности лейкоцитов крови;

- определение лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови;

- определение содержания иммуноглобулиновСг±, и М в сыворотке крови.

Показатели естественной резистентности и активности иммунной системы по вышеуказанным методикам определяли у 20-30-суточных телят, обработанных Т- и В-активинами по различным

схемам, в следующие сроки: фон (до введения Т- и В-активинов), через I, 14, 30, 60 и 90 суток после введения препаратов. У животных, иммунизированных и реиммунизированных вакциной из штамма 82, с применением и без Т- и В-активинов и у контрольных телок вышеперечисленные показатели определяли в следующие сроки: фон (до введения вакцины и иммуномодуляторов), через 14, 30, 45, 60, 75, 90, 180, 270 и 360 суток после иммунизации; через I, 3, 6 и 12 месяцев после реиммунизации.

Дополнительно проводили цитологические и гистологические исследования органов иммунной системы: тимуса, костного мозга, лимфоузлов, селезенки и печени. Через 3, 6, 9 и 12 месяцев после иммунизации в комплексе с Т- и В-активинами телок заражали вирулентным штаммом бруцелл № 54, через 40 суток проводили убой и исследования органов.

Данные об объемах проведенных исследований представлены в таблице 2.

Таблица 2

Объем экспериментальных исследований

Хозяйство, ¡Использовано¡Выполнено имму-!Выполнено пато-срокк исследо- ! животных, !нобиол. и био- !морфологич. вания______ !_голоЕ_ _ ]_химич. анализов]^ анализов____

Колхоз "Родина"

IS9I г. 45 2700 О

СХП "Марьинское"

1991 - 1992 гг. 12 1190 480

ТОО "ЛатоноЕо"

1993 г. 50 2160 О

1994 г. 45 2450 126

1995 г. 25 1000 О

Результаты экспериментальных исследований подвергли статистической обработке по общепринятым методам.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И И* ОБСУЖДЕНИЕ

Иммунодефицитное состояние у телок разного возраста

В ряде хозяйств Северо-Кавказского региона нами были проведены исследования иммунологического статуса молодняка крупного рогатого скота. Результаты сгруппированы по возрасту жи-еотных - 1-3-суточные, 20-30-суточные и 4-5-месячные телки.

У телят 1-3-суточного возраста установлена лейкопения, лимфоцитоз (но количество Т- и В-лимфоцитов достоверно ниже уровня физиологической нормы - Р^ 0,05). Также снижены лизо-цимная (Р^ 0,01) и бактерицидная (Р 0,05) активность сыео-ротки крови, уровень иммуноглобулинов (Р^С 0,01). Соотношение подклассов иммуноглобулина (У-&1 составило I : 3,571. Все эти изменения свидетельствуют о наличии у исследованных телят иммунодефицитного состояния.

У телок старшего возраста часть показателей достигает уровня нормы. Но количество Т- и В-лимфоцитов оставалось достоверно ниже показателей физиологической нормы (Р 0,05 и Р ^0,01 соответственно у 20-30-суточных и 4-5-месячных животных). Также снижены переваривающая активность лейкоцитов крови и содержание лизоцима в сыворотке крови. Соотношение : (У1 составило у 20-30-суточных телок I : 4,465, у 4-5-месячных - I *. 4,267. Таким образом, у этих животных сохраняется иммунодефицитное состояние.

В результате проведенных исследований установлено, что в ряде хозяйств Северо-Кавказского региона у молодняка крупного рогатого скота до 5-месячного возраста имеет место иммунодефицит, проявляющийся нарушениями показателей естественной резистентности, клеточного и гуморального иммунитета.

Определение оптимальных доз и схемы введения природных иммуномодуляторов Т- и В-активинов

. Применение Т- и В-активинов способствует снижению количества Т-лймфоцитов в течение 30 суток при одновременном воз-

растении доли В-лимфоцитов. Наиболее отчетливо этот эффект проявляется в случае использования Т- и В-активинов в профилактических дозах (0,04 мл/кг Т-активина и 6 мг В-активина на животное) при трехкратном введении с интервалом 24 часа (Р ^ 0,01).

Наибольшее увеличение содержания в сыворотке крови иммуноглобулинов в течение месяца (Р 0,05) такке характерно для телят, обработанных Т- и В-активинами трехкратно.

Морфологическая картина крови во всех опытных группах сохранялась в пределах физиологической нормы.

Таким образом, полученные результаты исследований совпадают с литературными данными о наибольшей эффективности применения Т- и В-активинов трехкратно с интервалом I сутки. Эти препараты способствуют у^е через сутки после введения возрастанию показателей активности иммунной системы и естественной резистентности с достижением к 14-м суткам уровня физиологической нормы. Следовательно, Т- и В-активины обладают итуно-модулирующими и корректирующими свойствами.

Иммуномодулирующая роль Т- и В-активинов при комплексном использовании с вакциной из шт. 82

До иммунизации и введения Т- и В-активинов у телят 20-30-суточного возраста соотношение ¿"1 : ^"2 составило I : 4,369 -I ; 4,465, у 4-5-месячных телок - I : 4,267 - I : 5,333,- у животных контрольной группы - I : 4,766. Это свидетельствует о наличии иммунодефицита у животных всех групп.

Динамика этого показателя представлена в таблице 3.

Вакцина из шт. 82 повышает соотношение у телят

раннего возраста через 12 месяцев до I : 2,438 (сохраняется уровень иммунодефицита), а у 4-5-месячных телок - через 14 суток до I : 1,831, ко через 6 месяцев этот показатель восстанавливается до уровня иммунодефицитного состояния.

Применение Т- и В-активинов через 14 суток после введения вакцины из шт. 82 способствовало повышению соотношения ¿"1 :^2 у 20-ЗС-суточвых телят через 75 суток до 1 : 0,750 и поддержи-

Соотношение иммуноглобулинов к

Сроки ! I группа ! 2 группа ! 3 группа !

!20-30 сут.120-30 сут.! 4-5 мес. ! исслед., й ^ им , в ! В + ИМ !

Фон

14 сут. 75 сут. 3 мес. 6 мес. 12 мес.

+ _

: 4,465 : 2,292

: 0,750

; 1,085

: 1,013

; 1,163

4,369 3,465 4,000 4,683 4,463 2,438

4,267 I, Б49 1,969 2,277 4,978 1,515

4 группа ! 5 группа 4-5 мес. ! Чистый В___! контроль

4,766 5,000 3,158

5,333 I 1,831 I 2,231 I

1,767 1

5,293 I 2,000 I

3,124 1,887 1,590

Примечание: В - вакцина из шт. 82, КМ - Т- и В-активины.

вало этот показатель на высоком уровне в течение года наблюдений. У телок старшего возраста соотношение:через 75 суток составило I : 1,969, в дальнейшем была отмечена тенденция к восстановлению этого показателя до уровня иммунодефицита, но через 12 месяцев соотношение¿г1 : ¿?2 было I : 1,515, что ниже, чем у животных, вакцинированных против бруцеллеза в комплексе с Т- и В-активинами в 20-30-суточном возрасте.

В группе чистого контроля соотношение $I : ¿"2 в течение первых трех месяцев исследований сохранялось в пределах уровня имкунодефицитного состояния, в дальнейшем отмечено повышение этого показателя до I : 1,590 через 12 месяцев.

Влияние вакцины из шт. 82 и имкуномодуляторов Т- и В-ак-тивинов на процентное содержание Т- и В-лимфоцитов в периферической крови телок отражено в таблице 4.

Иммунизация вакциной из шт. 82 телят 20-30-суточного возраста снижала количество Т-лимфоцитов в течение 12 месяцев на 1,3 - 3,9 % по сравнению с фоном, но с показателями контрольной группы достоверных различий не установлено. Количество В-клеток через 75 и 90 суток было достоверно ниже, чем у контрольных животных.

Введение вакцины 4-5-месячным телкам не вызывало резкого снижения количества Т-лимфоцитов, эта тенденция отмечена толь-

Количество Т- и В-лимфоцитов

I Т гтп/гтя ! ? гпуппя !

Сроки ! I группа ! 2 группа ! 3 группа

120-30 сут.120-30 сут.! 4-5 мес. исслед., в+ш | в ! в + ИМ

4 группа ! 5 группа 4-5 мес, ! Чистый __В__ 1 контроль

Т-лимфоциты

ФОН

14 сут. 75 сут. 3 мес. 6 мес. 12 мес.

¿9,1*0,3 29,9-0,2 31,2*0,I1 31,3-0,21 31,5*0,2^ 31,2-0,I

30,4*0,3 29,9*0,2 29,7*0,1 29,7*0,I 29,5*0,1

30,4*0,2 29,7*0,3 31,8*0,4 29,8*0,1 29,9*0,2 31,0*0,1

1

29,2*0,1

В-лимфоциты

31,2*0,7 32,1*0,4 30,4*0,7 29,4*0,1 29,9*0,3 30,9*0,1

30,3*0,3 30,7*1,0 30,0*0,4 29,7*0,4 30,0*0,3 31,0*0,5

Фон 10,8*0,2 9,7*0,4 10,4*0,2 10,8*0.5 9, 9*0,2

14 сут. 10,7*0,1 9,2*0,1 9,8*0,2 11,3*0,3 10,1*0,3 9,7*0,7

75 сут. 11,0*0,2 10,7*0,1 10,5*0,1 11,0*0,2

3 мес. 11,3*0,4 9,7*0,I3 11,1*0,6 10,7*0,О1 11,3*0,2

6 мес. 10,7*0.2 9,8*0,1 10,6*0,4 10,1*0,1 11,2*1,6

12 мес. 11,6*0,1 10,7*0,2 11,7*0,1 10,0*0,3 12,0*2,0

Примечание: В - вакцина из шт. 82, ИМ'- Т- и В-активины. Знаки достоверности: I - Р -¿0,05, 2 - Р < 0,02, 3 - Р <0,01,

ко через 75 суток и сохранялась в течение 12 месяцев. Концентрация Б-лимфоцитов была ниже фоновой в течение Есего периода исследований, а через 3 месяца - текже ниже уровня животных контрольной группы.

Применение Т- и В-активмнов способствовало увеличению количества иммунокомпетентных клеток в крови. У 20-30-суточних телят содержание Т-лимфоцитов в течение 6 месяцев было достоверно выше, чем в контрольной группе, количество В-клеток оставалось в пределах показателей контрольных животных. У телок, обработанных иммукомодуляторами в 4-5-месячном возрасте, повышенный уровень Т-лимфоцитов сохранялся в течение 75 суток.

Динамика содержания в сыворотке крови иммуноглобулинов представлена в таблице 5.

Таблица 5

Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови (мкг/мл)

Сроки

иссдед

! I группа ! 2 группа !20-30 сут.120-30 сут. ! 3 + ИМ ! В

группа

! 3 ! 4-5 мес. ! В + ИМ

4 группа ! 5 группа 4-5 мес. ! Чистый _В_ !„контроль

Фон

4,3-0,4 14 сут. 19,2*1,б3 75 сут

44,8*3,З4

3 мес. 41,3-5,4'

3

Иммуноглобулин СГ1 4,6*0,6 6,0-0,4 4,3-0,5 16,6*1,93 15,44,8-0,7

19,2-1,3е 4,1*0.9 16,6-1,7

6 мес. 39,4-3,7 4,1*0,9"' 12 мес. 17,8-1,5

5он 19,2*2,5,

14 сут. 44,0-1,5 75 сут. 33,6*2,5,. 3 мес. 44,8*1,6^ 6 мес. 39,9-3,4"

12 мес. 20,7*1,5

9,0*1,I 7,3*0,6 9,9*0,9

Иммуноглобулин

20,1*3,8 25,6*3,4 4 Т1. п+т с3 30>у+2,1

37,8*2,2 37,6*3,2

14,9*1,53

19,2*3, 19,2*0,6" 18,3*3.8 17,8*2,0

Фон 3,7*0,3

14 сут. 14,4*1,24 75 сут. 9,2*1, 3 мес. 6,5*0,б2 6 нес. 4,1*0,2 12 мес. 2,7*0,22

2,7*0,2 I,9*0,23 1,8*0, 1,4*0,I4 1,3±0,Г

4,8*0,9 4,7*0,3 1,63 5,4*1,1 9,5*1,5 8,3*2,1 8,8*0,9 10,5*2,1

10,4*1,5 12,2*0,6т 5,8*0,41 6,1*1,4

44,8*1,93 15.0*1,5

Иммуноглобулин М 3,6*0,4 4,5*0,2 7,2*0,8^ 11,5*1,I1 3,6*0,2 2,1*0,I4 1,6*0,1

25,6*5,2 28,2*2,6 23,2*3,4_ 21,6*2,б! 30,7*3,I1 12,2*2,1

4,2*0,3 3,8*0,4 6,6*1,1

22,4*2,3 27,0*1,1 30,0*4,1 32,8*2,3 16,8*3,5 13,2*2,3

4,0*0,3 4,4*0,1 7,0*0,9 2,6*0,23 3,6*0,0 1,4*0,14 3,6*0,1 1,2*0,О3 1,8*0,1

Примечание: В - вакцина из шт. 82, ИМ - Т- и В-активины.

Знаки достоверности:

I - Р ¿ 0,05, 2 - Р 0,02, 3

4 - Р-< 0,001.

Р -¿0,01.

Иммунизация 20-30-суточных телят вакциной из шт. 82 сни-

жала концентрацию иммуноглобулинов:- в течение 6 месяцеЕ, и М - в течение 12 месяцев. Использование вакцины на телка к 4-5-месячного возраста не вызывало снижения количества иммуноглобулинов (х1 и&2, но уровень иммуноглобулина М через 3 месяца был достоверно ниже уровня контрольной группы, зта тенденция сохранялась до конца срока наблюдений.

Применение Т- и В-активинов на фоне специфической профилактики бруцеллеза у 20-30-суточных телят способствовало устойчивому повышению концентрации иммуноглобулинов. Такие же изменения характерны и для животных старшего возраста, но их показатели были ниже, чем у телок, обработанных иммуномодуля-торами в 20-30-суточном возрасте.

В динамике фагоцитарной, бактерицидной и лизоцимной активности отмечены аналогичные тенденции.

Динамика иммунологических показателей подтверждается результатами морфологических исследований органов иммунной системы.

Таким образом, ранняя компенсация иммунодефицитного состояния позволяет сохранить у телок, иммунизированных против бруцеллеза с дополнительным введением Т- и 3-актиЕинов в 20-30-су точном возрасте, высокий уровень естественной резистентности и активности иммунной системы в течение года после применения вакцины в комплексе с иммуномодуляторами. У жиеотных, обработанных Т- и В-активинами на фоне иммунизации вакциной из шт. 82 в 4-5-месячном возрасте, отмечено лишь кратковременное стимулирующее действие, иммунодефицит компенсировался в течение 6 месяцев с последующим его восстановлением.

Вакцина из шт. 82 не оказывала иммуномодулирующего влияния на показатели клеточного и гуморального иммунитета, естественной резистентности, не компенсировала иммунодефицит и сохраняла его в течение 30 - 60 суток, а по показателям фагоцитарной активности лейкоцитов - до 6 месяцев. При этом более выраженное негативное влиянле на показатели иммунологического статуса было отмечено у телят раннего возраста, что подтверждает нецелесообразность иммунизации вакциной из шт. 82 животных 20-30-суточного возраста без применения иммуномодули-

рующих препаратов.

Повторное введение Т- и В-активинов через 12 месяцев после первичной обработки в комплексе с реиммунизацией вакциной из шт. 82 не обеспечивало дополнительного стимулирующего влияния на показатели естественной резистентности, клеточного и гуморального иммунитета. Применение этих препаратов вызывало большее негативное воздействие на иммунную систему телок, первично иммунизированных с дополнительным введением Т- и В-акти-винов в 4-5-месячном возрасте.

Взаимозависимость изменений показателей естественной

резистентности, клеточного и гуморального иммунитета и

их корреляция с процессами в органах иммунной системы

Т- и В-активины повышают прямую корреляцию показателей активности иммунной системы и естественной резистентности у телок, иммунизированных вакциной из шт. 82. Более тесная положительная связь установлена после применения этих препаратов животным раннего возраста. Прямая зависимость ослабляется с увеличением возраста иммунизации и обработки иммуномодулятора-ми и у только вакцинированных телок без введения Т- и В-акти-

виное.

Эти препараты обусловливают в клеточном и гуморальном от-Бете иммунной системы телок раннего возраста превалирующую роль тимуса. У животных старшего возраста возрастает роль других органов; лимфоузлов, костного мозга и селезенки. У телок, вакцинированных против бруцеллеза без применения Т- и В-актк-виков, иммунный ответ преимущественно обусловлен морфологическими процессами в костном мозге. В динамике показателей естественной резистентности отмечены аналогичные тенденции.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенные исследования позволяют заключить, что у телок раннего и позднего неонатального периода развития установлен иммунодефицит, усиливающийся после иммунизации вакциной

из шт. 82. Т- и В-актйЕины на таком фоне оказывали стимулирующее влияние на активность иммунной системы и естественную резистентность. Эти препараты уже через сутки после введения повышают уровень иммунологического статуса животных и обеспечивают к 14-м суткам компенсацию иммунодефицитного состояния, имевшегося у телок на начало эксперимента.

Использование Т- и В-активинов на фоне профилактической иммунизации против бруцеллеза вакциной из шт. 82 стимулирует у телок 20-30-суточного возраста клеточный и гуморальный иммунитет, естественную резистентность значительнее, чем у 4-5-месячных животных. Вслед за колостральным противобруцеллезным иммунитетом формируется высокий уровень специфической защиты животных, что подтверждено патентом на "Способ профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота" № 2065749.

Итак, иммуномодуляторы Т- и В-активины у 20-30-суточных телят компенсируют иммунодефицит, в течение 12 месяцев сохраняют е пределах физиологической нормы активность иммунной системы и неспецифическую резистентность. Однако, дополнительное введение этих препаратов через 12 месяцев после первичной обработки Т- и В-активинами на фоне реиммунизации вакциной из шт. 82 не сопровождалось дальнейшим нарастанием показателей естественной резистентности, клеточного и гуморального иммунитета.

ВЫВОДЫ

1. Иммунодефицит у телок раннего неонатального периода жизни характеризуется лимфоцктозом с дефицитом Т- и В-клеток, снижением уровня иммуноглобулина&■ на 50 $ и иммуноглобулина М — на 64 % при соотношении (£[ : &2 как I : 3,571, сохраняющийся в течение 5 месяцев постиатадьного развития.

2. Т-активин в дозе 0,04 мл/кг живой массы в 0,01 $-кои растворе и В-активин в дозе 6 мг на животное после трехкратного Еведения в интервалом в 24 часа в течение 3-х месяцев сохраняют повышенное содержание в крови Т- и Б-лимфоцитов, высокий уровень лизоцима в сыворотке крови и ее бактерицидной ак-

тивности; в течение месяца превалирует синтез иммуноглобулина М над продуцированием иммуноглобулина устраняя к 14-м суткам иммунодефицятное состояние.

3. Т- и В-активлны на фоне иммунодефицита стимулируют показатели клеточного и гуморального иммунитета, естественной резистентности в большей степени у 20-30-суточных телок и оказывают более слабое влияние на показатели у 4-5-месячных животных.

4. Использование Т- и В-активинов телкам раннего возраста в течение 12 месяцев сохраняет еысокий уровень активности иммунной системы и естественной резистентности.

5. Т- и В-активины у животных 4-5-месячного возраста компенсируют иммунодефицит только в течение 6 месяцев. Через 12 месяцев после использования препаратов уровень содержания иммуноглобулинов и лизоцима в сыворотке крови, показатели фагоцитарной активности лейкоцитов у зтих телок были ниже показателей животных раннего возраста.

6. Вакцина из шт. 82 не оказывает иммуномодулирующего и стимулирующего влияния на клеточный и гуморальный иммунитет, естественную резистентность и сохраняет у животных иммунодефицит в течение 30-60 суток, а низкую фагоцитарную активность лейкоцитов - до 6 месяцев.

7. Дополнительное введение Т- и В-активинов в комплексе

с реиммунизацией вакциной из шт. 82 телкам, первично иммунизированным и обработанным иммуномодуляторами в раннем Еозрасте, не компенсирует снижения показателей активности иммунной системы и естественной резистентности, сохраняя более высокий уровень этих показателей, чем у только ревакцинированных животных.

8. Повторное введение Т- и В-эктиеинов на фоне реиммуни-зации вакциной из шт. 82 телкам старшего возраста не стимулирует активность иммунной системы и естественную резистентность и сохраняет у них уровень Т~ и В-лимфоцитов, иммуноглобулинов (/1 и (/2 ниже, чем у телок раннего возраста.

9. Т- и В-активкны у животных 20-30-суточного возраста компенсируют иммунодефицит, повышают протективные свойства

вакцины из шт. 82, активизируя пролиферативные процессы в тимусе, а у животных 4-5-месячного возраста - усиливая пролиферативные процессы в костном мозге.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИЙ

Результаты диссертационной работы могут быть использованы йрЯ иммунизации молодняка крупного рогатого скота против бруцеллеза в сочетании с иммуномодуляторами.

Положительный эффект заключается в обеспечении высокого уровня защиты животных в более ранний возрастной период жизни и достижении более длительного противобруцеллезного иммунитета (до 12 месяцев).

Материалы диссертации рекомендуются также для использования в учебном процессе студентам факультетов ветеринарной медицины.

СПИСОК РАБОТ, ОПУШКОЬАШХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИЙ

1. Александров И.Д., Ковтун В.Н., Танеева Г.М. йммуномо-дулирующая роль Т- и В-актявинов в морфологических реакциях иммунных органов на фоне специфической профилактики бруцеллеза у телят /Тез. докл. 5-й межгос. межвуз. науч.-пр. конф. -

С.-П., 1993. С. 34-35.

2. Александров И.Д., Сидоренко Н.М., Ковалева 1.0., Танеева Г.М. Зависимость иммунного статуса от Т- и В-активинов на фоне специфической профилактики бруцеллеза у телят /Тез. докл. 5-й межгос. межвуз. науч.-пр. конф. - С.-П., 1993. С. 35.

3. Александров И.Д., Сидоренко Н.М., Танеева Г.М., Ковалева 1.0. Влияние Т- и В-активинов ка иммунологический статус телок, иммунизированных вакциной из ит. 82 /Тез. докл. 6-й межгос. межвуз. науч.-пр. конф. - С.-П., 1994. С. 65-66.

4. Александров й.Д., Сидоренко Н.М., Танеева Г.М., Ковалева Л.О. йммунокоррекция Т- и В-активинами естественной резистентности телок, иммунизированных вакциной из ит. 62 /Тез.

докл. б-л межгос. ме&вуз. НПК - С.-П., 1994. С. 66-6?.

5. Александров И.д., Ковтун Б.Я., Гавеява Г.М. Голь Т- и В-активкноз ъ морфологических изменениях органов иммунной системы телек, иммунизированных вакциной из шт, 82 /Тез. докл. 5-й межгос. межвуз. НПК - С.-П., 1994, С. 68-69.

5. Танеева Г.М. Морфологические аспекты коррекции Т- и В-активиками иммунодефицктнах состоянии у телок, иммунизированных вакциной, из шт. 82 /Тез, докл. 1-2 Всеросс. науч. конф. -M., 1994. G. 19-21.

7. Александров И.Д., Танеева Г.П. Корригирующая роль Т~ и В-ак-тиБИНОв и иммунологические-; статус телок, реиммунизирован-ннх вакциной из st. 82 /Мат. 7-й межгос. ыьжвуз. НШ - С.-П., 1995. С. 34.

8. Александров И.Д., Танеева Г.М. Т- и В-актиЕики и естественная резистентность телок, реиммунизированных вакцкно-Л из ат. 82 /Мат. 7-й межгос. межзуз. НПК - С.-il., iss5. С. 25,

9. Па-тент Р# S 2065749. Способ профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота /Александров Й.Д., Наддаеде Л.А., Сидоренко U.K., Ковалева Л.О., Харченко А.А., Танеева Г.М. Заяв. 8.06.93, опубл. 27.08.95. -• Бюлл. "Изобретения", 1996, S 24.

10. Александров И,Д., Танеева Г.М. Корреляция иммунной активности с морфологическими изменениями в лимфоидннх органах у телок под влиянием вакцины из et. 82 и Т- и В-эктивиков

/Экспресс-информация № 3. - С.-П., 1997. С. 11-12.

11. Александров И.Д., Танеева Г.М. Корреляционная зависимость естественной резистентности с морфологическими изменениями в диифоидных органах у телок под влиянием вакцины из в>т. 82 и Т- к В-активиноз /Мат. 9-й мвнгос, межвуз, НПК - С.-П., 1997. С. 94-95.

12. Александров И,Д., Танеева Г.М. Коррекция Т- и В-акти-вивами показателей корреляции клеточного к гуморального иммунитета у телок, иммунизированных вакциной из ст. 82 /Мат, 9-й межгос. межзуз, КПК - С.-П., 1997. С, 95-96.

13. Танеева Г.М. Коррекция иммунодефицита у телок, иммунизированных вакциной из шт. 82 /Тез. докл. конф. по итогам НИР ДонГАУ ~ Персиаковка, 1998. С. 7.