Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Влияние селеносодержащих препаратов на морфофункциональный статус тимуса и клоакальной сумки у кур в постнатальном онтогенезе

На правах рукописи

АХТЯМОВ РАМИС РЯШИТОВИЧ _

ВЛИЯНИЕ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ НА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ СТАТУС ТИМУСА И КЛОАКАЛЬНОЙ СУМКИ У КУР В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ

16.00.02 — патология, онкология и морфология животных 03.00.13 —физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

САРАНСК - 2006

Работа выполнена на кафедре ветеринарии ФГОУ ВПО «Пензенская государственная сельскохозяйственная академия»

Научные руководители - доктор ветеринарных наук, профессор,

член-корр. РАЕ

Столяров Владимир Алексеевич - кандидат ветеринарных наук, профессор Трифонов Григорий Андреевич

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

член-корр. РАЕ Селезнев Сергей Борисович доктор биологических наук, профессор Максимов Владимир Ильич

Ведущая организация - Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана

Защита диссертации состоится «11» ноября 2006 в 12 часов на заседании диссертационного совета К 212.117.05 при Мордовском государственном университете имени Н. П. Огарева (430000, г. Саранск, ул. Большевистская, 68).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Мордовского госуниверситета им. Н.П. Огарева.

Автореферат разослан «6» октября 2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Т. А. Романова

1, ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. В практике птицеводства наиболее полному развитию генетического потенциала птицы препятствуют многочисленные стрессы, обусловленные интенсивными технологиями производства птицеводческой продукции, нарушениями кормления к содержания птицы. Это обусловливает снижение обшей неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма сельскохозяйственной птицы (Фесннин В.И., 2005). Поэтому изучение возрастной морфологии им мун о компетентных органов, имеющих непосредственное отношение к иммунобиологическим реакциям, приобретает важное значение. Значительный интерес среда! лимфоидных органов птиц представляют тимус и фабрнциева бурса, которые являются центральными органами иммунитета птиц (Пилипенко М.Е., 1965; 1968).

Одними из средств, способных влиять на развитие иммунных реакций организма животных и птицы, являются соединения селена (Невитов М.Н., 1999; Боряев Г.И., 2000; Мельникова Т.Е., 2004 и др.). Значение микроэлемента селена для организма сельскохозяйственных животных и птицы многогранно. Селен обладает высокой биохимической активностью и способствует интенсификации обмена веществ. Он влияет на процессы тканевого дыхания, регулирует скорость течения окислительно-восстановительных реакций, повышает иммунную реактивность организма. Его недостаток в рационах приводит к снижению роста и развития молодняка, снижению продуктивности и ухудшению воспроизводительных качеств животных, а также нарушению обмена веществ в организме (Ермаков В.В., Ковальский А.И., 1974; Родионова Т.Н., 1984; Кальниц-кий Б.Д., 1985; Двинская J1.M., 1990; Боряев Г.И, и др., 1999; Невитов М.Н., 2000; Перунова Е.В., Трифонов Г.А., 1998, 1999; Сотников Д.А., 1998; Сотников Д. А., Трифонов Г. А., 1999).

Микроэлемент селен применяется в практике животноводства и птицеводства в основном в виде селенита натрия, который обладает высокой токсичностью (Трифонов Г.А., 1998). Поэтому, предпринимались попытки синтезировать менее токсичные соединения селена. Органические формы селена такие, как селенометионин, селеноцистеин и др. не намного отличаются по токсичности от неорганических, В Саратовском НИИ химии В.И. Древко и Р.И. Древко синтезировано селеноорганическое соединение - диацетофенонилселенид, которое обладает меньшей токсичностью.

В связи с этим, представляет большой научный интерес и практическую значимость изучение возрастной морфологии центральных органов иммунитета кур в связи с применением селеносодержащих соединений, в частности селено-органического соединения диацетофенонилселенида, обладающего меньшей токсичностью.

1 Л, Цель н задачи исследования. Целью кашей работы являлось сравнительное изучение влияния диацетофенонилселенида и селенита натрия на пост-натальнын морфогенез тимуса и клоакальной сумки у кур.

Задачи исследования:

1. Изучить влияние диацетофенонилселенида и селенита натрия на макроморфологи1ческие показатели тимуса и клоакальной сумки кур.

2. Выявить морфофункциональные изменения в тимусе и клоакальной сумке кур в корме и при введении в рацион диацетофенонилселенида н селенита натрия.

3

3. Определить параметры изменений гематологических и иммунологических показателей крови кур при применении диацетофенон ил-сел енида и селенита натрия.

U. Научная носизия. В работе впервые изучена возрастная макро- и микроморфология тимуса и клоакальной сумки кур яично-мясного направления кросса «Ломанн-Браум» при применении диацетофенокилселе нида и селенита натрия. Установлено, что масса тимуса у кур, по сравнению с нормой (контролем) увеличивается с 35- суточного возраста. Относительный рост массы тимуса наивысший в 56- суточном возрасте цыплят. Масса клоакальной сумки у кур, получавших селеновые препараты, достоверно увеличивается с 70- по 120- суточного возраста (р<0,05). Количество Т- лимфоцитов у опытных групп увеличивается в 21-, 35- и 70- суточном возрасте цыплят, а В- лимфоцитов - в 7, 56, 70 и 90 суток.

1.4. Теорсти ческа и и практическая ценность. Полученные данные по применению селеновых препаратов могут быть использованы в птицеводческих хозяйствах с целью интенсификации производства птицеводческой продукции. Данные по морфологии, гистологии и цитологии тимуса и клоакальной сумки, результаты гематологических и иммунологических исследований крови могут быть использованы: в учебном процессе на ветеринарных, зооинженерных н биологических факультетах; при проведении научных исследований и написании справочных и инструктивных материалов по применению селекосодержа-щих препаратов.

Положения, выносимые па защиту:

1. Влияние диацетофенон илселе нида и селенита наггрия на живую массу тела, весовые, линейные показатели и микроморфологию тимуса и клоакальной сумки кур кросса «Ломанн-Браун» в постнагтальном онтогенезе.

2. Показатели клеточного и гуморального иммунитета кур при применении диацетофенопилссленида и селенита натрия и их влияние на лейкоцитарный профиль крови.

3. Сравнительные данные воздействия диацетофенонилселенида к селенит натрия на центральные органы иммунитета н крови кур.

1.5. Апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 5 научных стаггей. Основные положения диссертации доложены на:

Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти профессора А.Ф. Блипохватова (Пенза, 2005); Ш Международной научно-практической конференции (Пензз-Нейбранденбург, 2005); Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых (Пенза, 2006); Достижения пауки и техники в АПК (Москва, 2006); на Огаревских чтениях (Саранск, 2006).

1.6. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 134 страницах компьютерного текста и включает разделы: общая характеристика работы; обзор литературы; материал и методы исследования; результаты исследования; обсуждение результатов исследования; выводы; практические предложения; список используемой литературы, который включает' 201 источник, в том числе 61 иностранных. Работа иллюстрирована 9 таблицами и 67 рисунками (графиками и фотографиями).

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.1. Материал и методы исследован и it. Диссертационная работа выполнялась на базе вивария и в лаборатории двух кафедр (ветеринарии и биологии животных) ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА», клинико-диагностической лаборатории {г. Заречного), отделениях цитологии и клинической морфологии Пензенского областного онкологического диспансера с 2004 по 2006 гг. Исследования проводились на курах кросса «Л о манн-Браун» 1-, 7-, 14-, 21-, 28-, 35-, 42-, 56-, 70-, 90-, 120-, 150-, 180-суточного возраста, которые были разделены, по методу аналогов, на три группы по 150 голой в каждой группе.

Первая группа — контрольная получала основной рацион. Вторая группа опытная — получала дополнительно к основному рациону масленый раствор ди-ацетофенонилселенида в дозе 1,2 мг/кг корма, третья группа опытная - водный раствор селенит натрия в дозе 0,66 мг/кг корма. Препараты взвешивались на аналитических весах АДВ-200 М с точностью до 0,01мг и вводились в рацион путем ступенчатого смешивания с запланированным количеством комбикорма. Диацетофенонилселенид - ДАФС-25 {1,5- дифенил-З-селенапентадиол-1,5) синтезирован В.И. Древко и Р.И. Древко (1989) в Саратовском НИИ химии. Он представляет собой органическое соединение селена, в виде жирорастворимого порошка, светло-желтого цвета со специфическим запахом. Содержит 25% селена и обладает средней токсичностью (ЛД;о = 70 — 350 мг/кг живой массы), что в 10 - 50 раз ниже, чем у селенита натрия. Селенит натрия (Na^SeOj) - натрий селеноватистый - ТУ-б-09-209-88 - неорганическое соединение селена, представляет собой порошок белого цвета, без запаха, хорошо растворим в воде. Содержит 47% селена и облазает высокой токсичностью — ДД» — 5,0 - 7,5 мг/кг живой массы.

Материалом исследования служили органы иммунной системы цыплят в возрасте 1-180 суток (тимус, клоакальная сумка), а так же кровь. Для решения поставленных задач использован комплекс методов исследований: макро- и ми кроп ре парирование; макро и микроморфометрия с учетом линейных и весовых показателей; гистологические; цитологические; гематологические; иммунологические.

Убой кур осуществляли методом декапнтации, одновременно отбирали кровь для проведения дальнейших гематологических и иммунологических исследований. Анатомическое вскрытие трупов кур проводили согласно методике К.И. Вертинского, АЛ. Стрельникова (1974). Туши кур и отпрепарированные органы (тимус и клоакальную сумку) взвешивали соответственно на электронных весах марки ПВ-6 и «Adventurer», На основании полученных результатов взвешивания рассчитывали относительную массу каждого органа в процентах от обшей массы тела курицы по формуле.

Подсчитывали количество долек тимуса и количество складок в клоакальной сумке, длину, ширину и толщину исследуемых органов измеряли при помощи штангенциркуля и линейки с ценой деления 1 мм.

Для гистологических исследований образцы материала окрашивали гематоксилин-эозином по общепринятой методике. При помощи методики точечного счета с применением окулярной сетки (Автандилов Г.Г., 1990) на полученных гистологических препаратах определяли следующие показатели: на препаратах тимуса - площадь долек, процентное соотношение мозговой и корковой

зои, толщину междольковон прослойки. Кроме того, подсчитывали количество телец Гассапя; на препаратах клоакальной сумки — количество фолликулов на единицу площади, площадь фолликула, процентное соотношение мозговой и корковой зон, толщину основной перегородки, делящей фолликулы на ряды и межфолликулярной прослойки.

Цитологические препараты окрашивали по Пап пен гейму. В окрашенных мазках крови подсчитывали количество отдельных видов лейкоцитов с последующим выведением лейкоцитарного профиля, а в окрашенных мазках-отпечатках с исследуемых органов - 500-1000 клеток, с последующим вычислением их процентного соотношения. Количество лейкоцитов определяли в камере Горяееа, количественное определение Т-лимфоцитов проводили методом спонтанного розсткообразования с эритроцитами барана, а В-лимфоцитов - с эритроцитами мыши (Лозовой В.П., Кожевников B.C., Волчек H.A., 1986}.

Гистологические и цитологические исследования документировались фотографированием на микроскопе «Nikon» с использованием фотокамеры «Panasonic». Цифровой материал, полученный в эксперименте, обрабатывали биометрически на компьютере «AMD AthIon-64 3J00+» при помощи программы MS Excel с вычислением общепринятых констант.

2.1. Результаты собственных исследовании и их обсуждение

2.2.1. Возрастная морфология тимуса. При проведении м акром орфологи-ческих исследований установлено, что абсолютная масса тимуса у 1 - суточных цыплят: левой доли в контрольной группе - 0,113±0,002 г, во второй группе -0,109±0,003 г, в третьей группе 0,108±0,004 г; правой доли - 0,100±0,004 г, 0,099±0,005 и 0,102±0,005 г соответственно. В дальнейшем абсолютная масса тимуса интенсивно увеличивается и достигает максимума к 150-суточному возрасту кур и составляет по группам соответственно: левой доли 3,955±0,169 г, 4,471 ±0,192 г, 4,482±0,175 г и правой доли - 4,268±0,165 г, 4,634±0,217 г, 4,010±0,187 г. В последующем от 150- до 180-суточного возраста, абсолютная масса тимуса уменьшается и равна по группам соответственно: левой доли 3,300±0,166 г, 4,074*0,191 г, 3,567±0,176 г и правой доли - 2,497±0,122 г, 3,99б±0,Ю5 г, 3,021±0,14б г.

Динамика изменения абсолютной массы тимуса показала, что в 1-, 7- и 14-суточпом возрасте цыплят, в которой и опытная группа колеблется незначительно. С 21-суточного возраста масса тимуса цыплят опытных групп увеличивается более интенсивно и к 35-суточному возрасту достоверно превышает показатель контрольной группы (р<0,05). Но к 42-суточному возрасту различия становятся не достоверными, при сохраняющихся более высоких показателях в опытных группах по сравнению с контролем. В последующих возрастах масса тимуса по группам не различается. Снижение его массы тимуса к 180-суточпому возрасту кур происходит более интенсивно в первой и третьей группах.

Отношение массы тимуса к массе тела (относительная масса) с возрастом также изменяется; у суточных цыплят по группам оно не различается достоверно и составляет: левой доли - 0,32±0,01 % в контрольной группе, 0,32±0,01 % -во второй группе, 0,31 ±0,01 % - в третьей группе и правой доли — 0,28±0,01 %, 0,29а0,01 %, 0,29±0,01 % соответственно. В последующие сроки наблюдается увеличение и снижение процентного соотношения к массе тела и достигает своего максимума: левая доля в 56-суточном возрасте у цыплят всех групп

(0,36±0,00 %, 0,3 8±0,01 %, 0,36*0,01 % соответственно) и правая доля в контрольной и второй группах (0,3б±0,02 %, 038±0,01 %) и в 42-суточном возрасте у цыплят третьей группы (0,36*0,02 %). К 180-суточному возрасту кур относительная масса тимуса достигает минимальных значений и составляет по группам соответственно: левой доли - 0,20±0,01 %, 0,24±0,01 %, 0,21±0,01 % и правой доли-0,15±0,01 %, 0,23±0,01 %, 0,18±0,01 %. Относительная масса левой и правой долей тимуса в контрольной группе превышает аналогичный показатель третьей группы в 28- и в 90- суточном возрасте кур соответственно, а относительная масса левой и правой долей тимуса в третьей группе превышает контроль в 150- и 180-суточном возрасте соответственно. Кроме того, относительная масса тимуса во второй группе в 180-суточном возрасте кур достоверно выше, чем в контрольной и третьей группах. Эти данные получены впервые.

Проведенные исследования линейных размеров тимуса (длины, ширины и толщины) показали, что в суточном возрасте по группам они достоверно не различаются. Длина тимуса у 1-суточного цыпленка по группам составляет; левой доли - 35,6±1,7 мм в контроле, во второй группе - 34,7±1,5 мм, в третьей группе — 33,99±1,5 мм, и правой доли - 31,8±1,б мм, 32,7±1,6 мм, 33,4±1,6 мм соответственно; ширина; левой доли - 2,8±0,1 мм в контроле, во второй группе -2,6±0,1 мм, в третьей группе — 2,7±0,1 мм, и правой доли - 2,5±0,1 мм, 2,4±0,1 мм, 2,4±0,1 мм соответственно; толщина; левой доли — 1,4±0,( мм в контроле, во второй группе - 1,5±0,1 мм, в третьей группе - 1,3±0,1 мм, и правой доли -1,4±0,1 мм, 1,3±0,1 мм, 1,4±0,1 мм соответственно, В последующие возраста происходит интенсивное изменение линейных показателей тимуса. Максимальные показатели отмечены в 150-суточном возрасте кур; длина левой доли по группам составляет- 114,8±3,4 мм, 119,4±2,5 мм, 117,2±3,1 мм, ширина левой доли соответственно - 9,8±0,3 мм, 10,б±0,5 мм, 10,9±0,4 мм, толщина левой доли - 5,1 ±0,2 мм, 5,3±0,1 мм, 5,4±0,1 мм; длина правой доли - 117,2±3,7 мм, 118,0±2,5 мм, 115,3±4,6 мм, ширина правой доли - 10,2±0,3 мм, 9,9±0,4 мм, 9,4±0,5 мм, толщина правой доли - 5,0±0,2 мм, 5,1±0,1 мм, 4,8±0^ мм, К 180-дневному возрасту линейные показатели тимуса снижаются и составляют по группам: длина левой доли 105,6±2,6 мм, 110,8±5,4 мм, !09,б±4,2 мм, ширина левой доли - 7,6±0,4 мм, 8,1±0,4 мм, 7,4±0,4 мм, толщина левой доли - 4,9±0,1 мм, 4,7±0,t мм, 4,8±0,1 мм; длина правой доли - 112,3±5,б мм, 113,8±5,б мм, 108,5±4,5 мм, ширина правой доли - 7,1 ±03 мм, 7,2±0,3 мм, 7,5±0,2 мм, толщина правой доли - 4,4±0,2 мм, 4,б±0,2 мм, 4,б±0,1 мм. Достоверные различия с контролем отмечены по ширине левой доли тимуса в 35-суточном возрасте во второй и третьей группах (р<0,05) и в 150-суточном возрасте в третьей группе (р<0,05), а также по толщине правой доли тимуса в 120-суточном возрасте в третьей группе (р<0,05). Данные по макроморфологии тимуса у кур породы «Ломанн- Браун» были подучены впервые.

Возрастные изменения микроскопического строения тимуса кур показали, что тимус покрыт соединительнотканной капсулой, продолжающейся в перегородки, содержащие сосуды и разделяющие доли на дольки, основу которых образует ретикулярная ткань. У суточного цыпленка тимус в основном представлен разъединенными дольками, паренхима которых уже разделена на корковую и мозговую зоны, между дольками видны узкие прослойки соединительной ткани. Между корковой и мозговой зонами еще нет достаточно четкой границы.

□ корковой зоне дольки сконцентрировано большое количество лимфоцитов, плотно прилегающих друг к другу. Благодаря этому оно имеет на гистологических срезах более темную окраску. Мозговая зона при микроскопическом исследовании выглядит более светлой, так как в ней существенно меньше лимфоцитов. Одним из характерных признаков мозговой зоны является наличие телец Гассапя, которые образованы клетками, расположенными концентрически.

Анализируя гистологическое строение тимуса можно отметить, что между группами в суточном возрасте цыплят нет достоверных различий по соотношению корковой и мозговой зон, площади долек, а также по толщине междолько-вой прослойки н эти показатели находились на уровне: корковая зона 80,1410,98 % в контроле, 80,00^0,96 % - во второй группе, 80,86±0,62 % - в третьей группе; мозговая зона 19,8б±0,98 % в контроле, 20,00±0,96 % - во второй группе, 19,14*0,62 % - в третьей группе; площадь долек 1484,00±72,82 мкмг в контроле, 1499,33±50,06 мкм1 - во второй группе, 1543,13±69,46 мкм1 - в третьей; толщина междольковой прослойки 0,50±0,00 мкм в контроле, 0,50±0,00 мкм - во второй группе, 0,50±0,00 мкм - в третьей группе. Количество тимнческих телец (Гассаля) в дольках тимуса находится в пределах 1-3. С возрастом происходит изменение соотношения корковой и мозговой зон в сторону уменьшения корковой зоны и увеличения мозговой. Кроме того, происходит увеличение количества тимнческих телец. К концу эксперимента эти показатели имели следующие значения: корковая зона 4б,05±0,92 % в контроле, 45,19:4,35 %- во второй группе, 43,18±1,89 %- в третьей группе; мозговая зона 53,95±0,92 %, 54,8!±1,35 %, 56,82±1,89 %; количество тимнческих телец - 1578, 14-63, 18-65 соответственно.

Площадь долек с возрастом постепенно увеличивается, достигая максимума к 70-суточному возрасту кур. В этом возрасте данный показатель находился на уровне: 12854,40*337,37 мкм1, 15054,47±525,57 мкм1, 14906,73±673,30 мкм1 соответственно. Показатели опытных групп в этом возрасте достоверно превышали показатель контрольной группы (р<0,05). К 180-суточному возрасту данный показатель снижается и составляет по группам: 5293,93^256,42 мкм , 6198,33±267,24 мкм1, 5185,53±254,56 мкм1 соответственно. Показатель второй группы достоверно превышал показатель контрольной и третьей группы (р<0,05). Кроме того, в опытных группах площадь долек была достоверно больше, чем в контроле в 28-, 35- и 42-суточном возрасте кур и во второй группе больше, чем в контроле в 14-суточном возрасте, а также больше, чем в контроле и третьей опытной группе в 21-суточном возрасте.

Толщина междольковой прослойки также постепенно увеличивается с возрастом и достигает максимальных значений в 180-суточном возраст« кур. Данный показатель в этом возрасте находится на уровне: 2,00±0,08 мкм в контрольной rpynnej 1,90±0,06 мкм во второй группе, 1,80±0,09 мкм в третьей группе. Следует отметить, что толщина междольковой прослойки в третьей группе в возрасте 21-суток достоверно меньше чем в контроле. Данные по гистологическому строению тушка у кур породы «Ломанн- Браун» получены в первые.

Наряду с изучением гистологического строения тимуса проводились исследования его клеточного состава. Основными клеточными элементами тимуса являются лимфоциты — тимоциты, пролимфоциты и лимфобласты. В не-

большом количеств присутствуют эпителиальные клетки, плазматические, тучные, гранулоциты. В суточном возрасте цыплят клеточный состав тимуса по группам достоверно ие различается. Количество тимоцитов в этом возрасте находится на уровне 91,3±0,5 % в контрольной группе, 91,9±0,5 % • во второй группе, 903±0,б % - в третьей; пролимфоцитов соответственно 5,3±0,2 %, 4,9±0,2 %, 4,9±0,2 %; лимфобластов соответственно 1,8*0,1 %, 1,7*0,4 %, 2,5±0,4 %; тучных клеток I ¿±0,2 %, 1,2±0,2 %, 1,1 ±03 %; эознноф ильных грану лоцито в 0,Э±0,2 %, 0,3±0,2 %, 0,7±0Д %; эпителиальных клеток 0,1 ±0,1 %, 0. ¡±0,1 %,0,2±0,1 %.

С возрастом данное клеточное соотношение существенно не изменяется: тимоциты остаются преобладающей клеточной формой. В возрасте 70-90-суток во всех исследуемых группах происходит смена клеточного состава тимуса, которая более выражена в 70-суточиом возрасте во второй группе. Происходит снижение количества зрелых тимоцитов н увеличение числа лимфобластов и пролимфоцитов. В этом возрасте количество тимоцитов находится на уровне: 68,5±1,1 % в контрольной группе, 58,5*1,6 %- во второй группе, 67,9±2,4 % - в третьей группе; пролимфоцитов 23,4±0,6 %, 29,8±1,$ %, 25,8±1,2 % соответственно; лимфобластов - 5,9±1,0 %, 9,9±1,0 %, 4,9±0,8 %.

Начиная с 120-суточного возраста кур количество зрелых тимоцитов повышается, а лимфобластов и пролимфоцитов уменьшается и к 180-суточному возрасту кур достигает следующих значений: 90,7±0,6 % в контрольной группе, 89,5±0,8 "Л -во второй группе, 90,6±0,7 % - в третьей; пролимфоцитов -6,0±0,2%, 6,1 ±0,2 %, 6,7±0,2 %; лимфобластов - 1,0±0,3 %, 1,0±0,4 %, 1,2±0,4 %. Количество тучных клеток в этом возрасте находится на уровне 0,4±0,1 % в контрольной группе, 1,0±0,2 % во второй группе, 0,3±0,2 % в третьей группе; эозинофильных граиулоцитов 0,9±0,2 %, 0,7±0,2 %, 0,9±0,3 % соответственно; эпителиальных клеток 1,1±03 1,7±0,4 %, 0,3±0,1 % соответственно. Плазматических клеток в данном возрасте не обнаружено. Количество тимоцитов в 14-, 28- и 120-суточном возрасте достоверно выше в опытных группах по сравнению с контролем (р<0,05), В тоже время, данный показатель в контрольной группе выше, чем в опытных в 35-суточном возрасте (р<0,05), а также выше, чем во второй группе в 70-суточном возрасте н выше чем в третьей в 21-суточном возрасте (р<0,05). Кроме того, количество тимоцитов в третьей группе было достоверно больше, чем во второй группе в возрасте 70-суток. Количество пролимфоцитов в 21- и 35-суточном возрасте достоверно выше в опытных группах по сравнению с контролем (р<0,05). В тоже время, данный показатель в контрольной группе достоверно выше, чем в опытных в 14-, 28-и 120-суточном возрасте (р<0,05). Кроме того, в 70-суточнов возрасте во второй группе данный показатель достоверно выше, чем в контроле (р<0,05).

Количество других клеточных элементов не различалось так значительно. Однако количество тучных клеток в контрольной группе было достоверно выше, чем в опытных в возрасте 14-сутох, в в 180-суточном возрасте во второй группе выше, чем в контрольной и третьей группах (р<0,001). Количество эпителиальных клеток в контрольной группе было достоверно выше, чем во второй группе в 56- и 150-суточном возрасте и в 35-суточном возрасте выше, чем в • третьей фуппе (р<0,05). Данные по цитологическому составу данной породы получены впервые.

2.2.2. Возрастили морфология клоакальной сумки. Клоакальная сумка у кур кросса «Ломанн-Браун» от 1 до 180 суточного возраста расположена в грудобрюшной полости тела между позвоночным столбом н клоакой. Она представляет собой полостной мешкообразный орган округлой формы светлосерого цвета, имеющий внутри 12-14 продольных складок. Коротким протоком длиной 2-4 мм она связана с полостью клоаки.Весовые и линейные параметры клоакальной сумки изменяется с увеличением возраста кур. Ее абсолютная масса у суточных цыплят по группам составляет: в контрольной группе 0,045±0,002 г, во второй - 0,048±0,002 г, в третьей - 0,044*0,001 г. В дальнейшем абсолютная масса клоакальной сумки интенсивно увеличивается и достигает максимума к 120-суточному возрасту кур и составляет по группам: 2,085*0,100 г, 3,349±0,167 г, 2,616*0,127 г. В последующем от 120 до 180-суточного возраста, абсолютная масса клоакальной сумки уменьшается и составляет по группам: 1,524*0,065 Г, 1,728±0,079 г, 1,467±0,076 г.

Отношение массы клоакальной сумки (КС) к массе тела с возрастом также изменяется: у суточного цыпленка отношение по исследуемым группам составляет. 0,13±0,00 %, 0,14*0,01 %, 0,13*0,00 %; у 180- суточного возраста -0,09*0,00 %, 0,10*0,00 %, 0,09*0,00 %. Максимальных значений относительная масса КС в контрольной группе достигает в возрасте 56-суток (0,22*0,01 %), во второй группе - в 120-суточном возрасте (0,27*0,01 %) и в третьей группе - в 70-суточном возрасте (0,24±0,00). Относительная масса клоакальной сумки у кур контрольной группы выше, чем в опытных группах в 21-, 28- и 35-суточном возрасте. В возрасте 70-90-суток данный показатель выше в третьей группе по сравнению, как с контрольной, так и со второй группой. Однако, начиная с 120-суточиого возраста и до окончания •жеперимоп'а относительная масса клоакальной сумки выше во второй группе по сравнению с контрольной и третьей группой. Полученные данные по абсолютной и относительной массе клоакальной сумки под воздействием селеносодержащих препаратов получены впервые.

Проведенные исследования по определению линейных размеров клоакальной сумки, ее длины и ширины и толщины имеют следующие данные. Длина клоакальной сумки у 1-суточного цыпленка по группам составляет: контрольная группа <3,2*0,2 мм, вторая группа - 5,910,3 мм, треть* группа - 5,7±0,3 мм, ширина - 4,0*0,2мм, 4,5*0,2 мм, 4,1*0,2 мм, толщина соответственно — 3,4*0,1 мм, 3,7*0,2 мм, 3,6*0,2 мм. В последующие возрастные этапы происходит интенсивное изменение линейных показателей клоакальной сумки. Максимальные показатели отмечены в 120-суточном возрасте кур: длина по группам составляет: контрольная группа 19,0*0,9 мм, вторая группа - 20,8*0,9 мм, третья группа - 17,5*0,9 мм, ширина - 14,2*0,7 мм, 16,8*0,8 мм, 15,8±0,7 мм, толщина -12,2*0,6 мм, 15,2*0,6 мм, 12,8*0,6 мм, К ISO-суточному возрасту линейные показатели клоакальной сумки снижаются и составляют по группам: длина — 13,9*0,6 мм, 14,6*0,7 мм, 13,1*0,6 мм, ширина - 12,5*0,4 мм, 12,3*0,6 мм, 11,2*0,6 мм, толщина-9,0*0,3 мм, 10,7±0,5 мм, 8,2*0,4 мм.. Установлено, что линейные показатели клоакальной сумки кур, используемых групп с увеличением возраста практически не различаются.

Стенка клоакальной сумки состоит из слизистой, мышечной и серозной оболочек. Серозная оболочка, покрытая мезотелием, представлена тонкой прослойкой соединительной ткани. Мышечная оболочка, образованная из ксисчер-

ченной мышечной ткани, состоит из днух слоев: наружного, слабо развитого • • продольного и внутреннего, хорошо развитого - кольцевого. Собственная слизистая оболочка образована сетью тонкнх коллагеновых н ретикулярных волокон, окружающих фолликулы. Слизистая оболочка образует продольные склад* ки, которые покрыты многорядным цилиндрическим эпителием. В каждой складке слизистой оболочки располагается один-два ряда лимфондных фолликулов. Каждый фолликул состоит из корковой зоны, расположенной на периферии и мозговой зоны, расположенной в центре. Корковая зона на гистологических срезах выглядит более темной, образована ретикулярной тканью. Мозговая зона светлее, образована эпителиальной тканью, имеющей вид сети. Зоны разграничены сетью капилляров и базальной мембраной. У суточных цыплят нет днфференнировки лимфоидной ткани фолликулов на корковую и мозговую зоны. Ома наступает только к 14-суточному возрасту цыплят. Относительно других исследуемых показателей следует сказать, что между группами в суточном возрасте цыплят нет достоверных различий по количеству фолликулов на единицу площади, по величине площади фолликула, толщине основной перегородки, делящей фолликулы на ряды и межфолликулярной прослойки. Эти показатели находились на уровне: количество фолликулов - 32,86*0,80 шт. в первой группе, 31,42±1,17 шт. - во второй группе, 32,96*1,10 - в третьей группе; площадь фолликулов - 78,94*2,80 мкм1, 83,34*2,86 мкм1, 80,54*3,84 мкм1 соответственно; толщина основной перегородки - 1,35*0,10 мкм, 1,30*0,09 мкм, 1,40±0,06 мкм соответственно; толщина межфолликулярной прослойки -0,50*0,00 мкм, 0,50*0,00 мкм, 0,50*0,00 мкм.

Соотношение корковой и мозговой зон с возрастом изменяется: происходи! уменьшение мозговой зоны и увеличение корковой. К концу эксперимента эти показатели имели следующие значения', корковая зона 83,22*0,70 % в контроле, 82,25*0,77 % - во второй группе, 82,37*0,79 % - в третьей группе; мозговая зона 16,78*0,70 % в контроле, 17,75*0,77 % - во второй группе, 17,63*0,79% - в третьей группе. Площадь, занимаемая корковой зоной в опытных группах достоверно больше, чем в контроле в возрасте 56- и 70-суток (р<0,05). Достоверно превышает по данному показателю третью группу в возрасте 90-суток вторая группа (р<0,05), а в возрасте 120-суток контрольная и вторая группы (р<0,05). Площадь, занимаемая мозговой зоной в контрольной группе в 56- и 70-суточном возрасте кур достоверно больше, чем в опытных группах, а в третьей группе в 90-суточном возрасте больше чем во второй группе и в 120-суточном возрасте больше чем в контрольной и второй труппах (р<0,05).

Количество фолликулов на единицу площади с возрастом уменьшается и достигает минимальных значений к 120-суточному возрасту кур. В этом возрасте данный показатель находился на уровне: 2,73*0,1 шт. в контрольной группе, 2,19*0,10 шт. - во второй группе, 2,78*0,14 шт. - в третьей группе. К 180-суточиому возрасту кур этот показатель несколько увеличивается, достигая следующих показателей; 3,86*0,19 шт. в контроле, 3,78*0,19 шт. - во второй и 4,16*0,19 шт.- втретьей группе.

Следует отметить, что количество фолликулов в контрольной группе было достоверно больше, чем в опытных группах в 21- и 28-суточном возрасте кур, больше, чем во второй группе в 70- и 120-суточном возрасте и больше, чем в

третьей груши: в 42-сугочном оозрастс (р<0,05). В ipcibcfi группе лот показатель был больше, чем во второй группе в 70- к 120-суточном возрасте (р<0,05).

Площадь фолликулов с возрастом постепенно увеличивается, достигая максимума к 120-суточному возрасту кур. В этом возрасте данный показатель находился на уровне: 1215,09*42,25 мкм1, 1317,44±49,72 мкм1, 1248,30*32,83 мкм1 соответственно. К ISO-суточному возрасту этот показатель снижается и составляет по исследуемым группам: 720,43±2б,05 мкм1, 820,0] ±22.22 мкм1, 702,37±24,35 мкм1 соответственно. Показатель второй группы достоверно превышал показатель контрольной и третьей группы (р<0,05). Кроме того, площадь фолликулов в опытных группах была достоверно больше, чем в контроле в возрасте 28,35 н 42- суток.

Толщина основной перегородки, делящей фолликулы на ряды, с возрастом увеличивается и достигает максимальных значений к концу эксперимента и имеет следующие показатели: 13,00±0,79 мкм в контрольной группе, 10,20^0,60 мкм - во второй группе, 11,30±0,75 мкм - в третьей группе. Толщнна перегородки в контрольной группе была достоверно больше, чем в опытных группах в возрасте 21-, 28- и 120-суток н больше, чем во второй группе в возрасте 35- и 42-суток. Толщина перегородки в третьей группе была больше, чем во второй группе я возрасте 28- н 35-суток (р<0,05).

Толщина межфоллнкулярной прослойки с возрастом также увеличивается и достигает максимальных значений к концу эксперимента и имеет следующие показатели: 2,85±0,22 мкм в контрольной группе, 2,<55±0,19 мкм - во второй группе, 3,05±0,17 мкм - в третьей группе. Достоверных различий по данному показателю кур в исследуемых группах не отмечено.

В препаратах-отпечатках клоакальной сумки при цитологическом исследовании обнаруживались следующие клеточные элементы: лимфоциты, пролим-фоциты, лимфобласты, плазмобласты, шшмоциты, гранулоциты, макрофаги, клетки призматического эпителия. Основными клеточным» элементами являются лимфоциты, а также пролимфоциты и лимфобласты В суточном возрасте цыплят клеточный состав клоакальной сумки по группам достоверно не различается. Количество лимфоцитов в этом возрасте находится на уровне 86,4±0,5% в контрольной группе, 86,8±0,5 % - во второй группе, 8б,5±0,4 % - в третьей; пролимфошпов соответственно - 8,7±0,3 %, 8,4±0,4 %, 8,7±0,2 %; лимфобла-стов соответственно 4,0±0,2 %, 3,9±0,1 4,1 ±0,2 %; митозов - 0,9±0,( %, 0,8±0,1 %, 0,7±0,1 %, С возрастом данное клеточное соотношение существенно не меняется: лимфоциты остаются преобладающей клеточной формой.

В возрасте 70-90 суток в опытных группах происходит смсна клеточного состава КС, что выражается в снижении количества зрелых лимфоцитов и увеличении пролимфоцитоа и лимфобластов, которая особенно выражена в 70-суточном возрасте кур. D этом возрасте количество лимфоцитов находится на уровне 84,3±0,б % в контрольной группе, 82, (±0,6 % - во второй группе, 81,4±0,7 % - втрстьей группе; пролимфоцитоа - 8,0±0,3 %,9,9±0,3 %, 8,8±0,4 % соответственно, лимфобластов - 6,8±0,3 %, 7,0±0,3 %, 8,9±0,3 %. С 120-суточного возраста кур количество зрелых лимфоцитов в опытных группах повышается, а лимфобластов н пролимфоцитоа снижается (р<0,05). К 180-суточному возрасту кур количество лимфоцитов в КС достигает уровня 89,7±0,2 % в контрольной группе, 91,1 ±0,5 % - во второй группе, 92,7±0,3 % - в

третьей; пролимфоцитов соответственно - 6,4±0,2 %, 5,5±0,2 %, 4,4±0,2 %; лимфобластов - 3,0*0,1 %, 2,7±0,1 %, 2,5*0,2 %; плазматических клеток -0,5*0,1 %, 0,7±0,2 %, 0,3±0,1 %, количество митозов - 0,4±0,2 %, 0,1*0,1 %, %. Количество лимфоцитов в контрольной группе в возрасте 70-суток достоверно выше, чем в опытных группах (р<0,05). Показатели опытных групп достоверно превышают контроль в возрасте 14-, 21-, 28-, 56-, 150- и 180-суток (р<0,05). В третьей группе количество лимфоцитов достоверно больше, чем во второй группе в возрасте 21-, 28- и 180-суток (р<0,05).

Количество пролимфоцитов в контрольной группе достоверно больше, чем в опытных в возрасте 14-, 21-, 28-, 35-, 56-, 150- и 180- суток. В опытных группах количество пролимфоцитов достоверно больше, чем контроле в возрасте 70-суток, Во второй группе количество пролимфоцитов достоверно больше, чем в третьей группе в возрасте 180-суток. В третьей группе количество пролимфоцитов достоверно больше, чем во второй опытной группе в возраст« 56-суток (р<0,05).

Количество лимфобластов во второй и контрольной группах в возрасте 21-и 56-суток было достоверно больше, чем в третьей группе. В контрольной группе данный показатель был выше, чем во второй в возрасте 150-суток и выше, чем в третьей группе в 180-суточном возрасте (р<0,05).

В 35-суточном возрасте количество лимфобластов во второй группе было достоверно больше, чем в контрольной и третьей группах (р<0,05). В третьей группе этот показатель был выше, чем в контрольной и второй группах в возрасте 70- и 90-суток и выше, чем во второй группе в возрасте 150-суток (р<0,05).

Количество других клеточных элементов в исследуемые возрастные периоды достоверно не различалось.

2.2.3. Возрастные изменения гематологических и иммунологических показателей кров» кур при применении соединений селена. В крови кур присутствуют практически такие же клеточные элементы, как и в крови млекопитающих. Но следует отметить, что у кур в крови отсутствуют нейтрофнлы и все клетки имеют ядро. Количество лейкоцитов в суточном возрасте цыплят по группам достоверно не различается и составляет: 22,1*1,0x10% в контрольной группе, 20,6*0,8*10% - во второй группе и 22,5*1,1*10%- в третьей группе. С возрастом количество лейкоцитов в крови кур колеблется в пределах физиологической нормы и к 180-суточному возрасту достигает уровня: 31,0*1,5*10% в контрольной группе, 27,7*1,3x10% - во второй группе, 31,7*1,4*10% - в третьей группе. Количество лейкоцитов в крови кур во второй группе бшо достоверно выше, чем в контрольной группе в 42- и 90-суточном возрасте и выше, чем в третьей группе в возрасте 42- и 120-суток (р<0,05), Данный показатель в третьей группе был достоверно выше, чем в контрольной группе в 7- и 56-суточном возрасте и выше, чем во второй группе в 35-суточном возрасте (р<0,05). В суточном возрасте цыплят соотношение клеточных элементов в крови кур по группам существенно не различается. Количество лимфоцитов находится на уровне: 39,2*1,2 % в контрольной группе, 42,4*1,7 % - во второй группе, 39,8*1,8 % - в третьей группе; палоч коя дерн ых - 2,6*0,7 %, 1,4*0,2 %, 1,6*0,5 % соответственно; сегментоядерных эозинофильных гранулоцитов -52,8* 1,4 %, 51,6*2,0 %, 55,2*2,0 %; базофилов - 4,6*0,8 %, 4,0*0,9 %, 3,0*0,4%;

моноцитов - 0,8±0,2 %, 0,6±0,2 %, 0,4±0,2 %. С возрастом лейкоцитарный профиль изменяется и к 180-суточному возрасту кур имеет следующие значения: лимфоциты 44,8±1,2 % в контрольной группе, Зб,8±1,7 % - во второй группе, 31,8±1,4 % - в третьей группе; сегментоядерные эозинофильные гранулоциты -43,8±2,0%, 53,8±2,1 %,61,4±1,7%; базофилы - 6,6±1,0 %, 5,0*0,7%, 4,0*0,4%; моноцитов — 4,8±0,9 %, 4,4±0,7 %, 2,8*0,4 %. Папочкоядерные эозинофильные гранулоциты в этом возрасте не обнаружены.

Анализируя лейкоцитарный профиль крови кур можно сделать вывод, что основными клеточными элементами являются лимфоциты и сегментоядерные эозинофильные гранулоциты. Следует также отметить, что количество лимфоцитов в контрольной группе достоверно выше, чем в опытных в 42- и 180-суток и выше, чем в третьей группе в 90-суточном возрасте (р<0,05). Во второй группе этот показатель достоверно выше, чем в контрольной группе в 28- и 70-суточном возрасте и выше, чем в третьей - в возрасте 70-, 90-, 150- и 180-суток (р<0,05). В третьей группе данный показатель бьш выше, чем в контрольной н второй группах в возрасте 21- и 28-суток. Количество сегментоядерных эозино-фильных гранулоцитов в 28-суточном возрасте в контрольной группе было достоверно выше, чем в опытных группах (р<0,05). Кроме того, в возрасте 56- и 70-суток этот показатель выше, чем во второй группе и в 21-суточном возрасте выше, чем в третьей группе (р<0,05). Во второй группе этот показатель был выше, чем в контрольной в возрасте 42- и 180-суток и выше, чем в третьей группе в 21-, 28-суточном возрасте (р<0,05). В третьей группе данный показатель был достоверно выше, чем в контрольной группе в возрасте 90- и 180-суточном возрасте и выше, чем во второй группе - в 56-, 70-, 90-, 150- и 180-суточном возрасте (р<0,05).

Количество других клеточных элементов изменяется не так значительно, но количество палочкоядерных эозинофильных гранулоцитов в контрольной группе было достоверно выше, чем во второй группе в возрасте кур 7- и 42-суток (р<0,05), В третьей группе данный показатель достоверно выше, чем во второй группе в 7-суточном возрасте кур и в 5б-суточном возрасте выше, чем в контрольной группе. Количество базофилов в контрольной группе в 7-суточном возрасте кур было достоверно выше, чем в опытных группах и в 180-суточном возрасте выше, чем в третьей группе (р<0,05). Количество моноцитов в контрольной группе было достоверно выше, чем в опытных группах в 90-суточном возрасте кур й выше, чем во второй группе в 28-суточном возрасте. В третьей группе данный показатель был достоверно выше, чем во второй группе в 28- и 70-суточном возрасте кур.

Полученные данные показывают, что в суточном возрасте цыплят количество Т- и В-лимфоцитов по группам достоверно не различается и составляет: Т-лимфоцнтов -37,0*1,6 % в контрольной группе, 37,б±1,9 % - во второй группе, 40,4 ±1,3 % - в третьей группе; В-лимфоцитов- 37,2±1,9 %, 34,2± 1,6 %, 36,0±1,7 % соответственно (табл. I). С возрастом происходит изменение количества Ти В-лимфоцитов в группах. Так количество Т-лимфоцитов в опытных группах было достоверно выше, чем в контроле в возрасте 21-, 35-, 70-суток. Следует отметить, что в третьей группе данный показатель был выше, чем в контрольной группе и второй группе в 14-, 28-, 42-, 56- и 120-суточном возрасте кур (р<0,05). К 180-суточиому возрасту кур различия по количеству Т-

лимфоцитов в группах исчезают. В этом возрасте их количество находится на уровне 35,2*1,3 % в контрольной группе, 36,0±1,6 % - во второй группе, 37>2±1,7 % - в третьей группе. Таблица 1

Возраст кур, суток 1 группа 2 группа 3 группа

Лимфоциты, % Лимфоциты, % Лимониты, %

Т В Т В Т В

1 37,0*1,6 3 7,2* 1,9 37,6±1,9 34 ¿к 1,6 40,4*2,0 36,0*1,7

7 14 25,0*1,2 24,4* 1Д 23,4*1,1 26,8*1,2 35,8*1,8*** 24,0*1,1 29,4*1,4*

32,4*1,2 31,0±U** 31,8±1,2 41,2*2,0*** 29,8*1,4

21 22,6*1,1 31,2*1,4 29,2*0,9»* 31.6*1,6 27,4*1,3* 32,4*1,4

28 36,2±1,8 31,4*1,0 38,йЫ,5 35,4*1,6 43,4*1,2** 41,6*0,9***

35 26,0*1,3 33,6*1,4 32,2±1,5* 36,0±1,8 36,0*1,7** 38,8±1,1*

42 35,7±1,6 31,3*1,5 33,9*1,6 3,0±1,3 45,6±2,3** 37,6*1,4*

56 26,9* 1,3 30,6*1,2 28,7*1,3 49,442,3*** 34,0±1,7* 54,4±),7***

70 24,5*1,2 25,4*1,0 29,5*1,4* 34,6*1,6** 30,4*1,5* 43,8*2,0***

90 21,4±1,0 31,4*1,4 19,7*0,9 44,4*2,1*** 24,5±1,1 38,8*1,9**

120 26,1*1,3 35,8*1,4 25,1*1,2 40,8*1,2* 30,5*1,4* 39,2*1,8

150 28,0*1,2 35,0*0,9 30,8*1,3 35,8*0,7 30,1*1,5 31,8*1,3

180 35,2*1,3 36,0*1,7 36,0±1,6 39,0*1,8 37,2*1,7 38,2*1,7

* — различия с контролем достоверны Р < 0,05; ** — Р <0,01; *** — Р <0,001. Количество В-лимфоцитов в опытных группах было достоверно выше, чем в контрольной группе в возрасте 7% 56-, 70- и 90-суток (р<0,05). Следует отметить, что во второй группе количество В-лимфоцитов было достоверно выше, чем в третьей группе в 7- н 150-суточном возрасте кур. В третьей группе данный показатель был выше, чем во второй группе в 28-, 42-, 56-, 70-суточном возрасте и выше, чем в контрольной группе в 28-, 35- и 42-суток (р<0,05), К 180-суточному возрасту различи* по количеству В-лимфоцитов в группах не обнаружены. В этом возрасте их количество находится на уровне 36,0*1,7 % в контрольной группе, 39,0*1,8 % - во второй группе, 38,2±1,7 %- в третьей группе.

1.2.4, Возрастные нзменсп ни живой массы кур при при мене и ни соединений селена. Живая масса цыплят в суточном возрасте по группам достоверно не различалась и составила 35,60*1,21 г в контрольной группе, 34,20*1,59 г - во второй группе и 35,20*1,20 г - в третьей группе. В последующие возрастные этапы происходит значительное увеличение живой массы кур и в 35-суточном возрасте кур в опытных группах она была достоверно выше, чем в контрольной группе (р<0,05). Не смотря на то, что различия по живой массе между группами не достоверны можно отметить, что этот показатель на протяжении практически всего эксперимента выше в опытных группах (табл. 2).

Результаты настоящего эксперимента, касающиеся комплексного изучения макро-микроморфологи и и цитологии центральных органов иммунитета у исследуемых кур кросса «Ломанн-коричневый». Показали как общие принципы их взаимосвязи, развития и инволюции, так и признаки характерные для каждого органа.

Таблица2_-возрастиал д и!нами[ка ш(войасоь^ур поисследуемым группам

Возраст кур,

JCJ^w<

1

_ 1 группа

35,6*1,2

40,6*1,4

Живая масса, г

2 группа

34,2*1,6

44,0*1,1

3 группа

35,2*1,2 43,0*1,3

14

76,4*2,2

77,8*2,7

77,4*2,5

21

106,4*4,8

108,0*3,9

113,0*3,6

28

156,2*6,7

170,6*4,0

175,4*5,1*

35

228,0*9,9

265,0*11,0*

268,4*13,4*

42

347,6*15,4

372,4*10,9

358,0*16,6

56

546,4*16,7

578,4*27,9

583,8*16,5

70

645,4*26,5

738,6*32,5*

671,2*30,5

90

895,4*43,2

841,2*28,9

899,4*34,4

120

1243,0*51,7

1229,8*24,3

1209,8*53,4

150

1554,6*67,2

1622,2*60,7*

1492,2*40,8

180

1695,0*81,3

1706,0*76,7

1702,2*79,4

* - различия с контролем достоверны Р < 0,05.

Паренхима долек тимуса суточных цыплят разделена на корковую и мозговую зоны. Однако четкой границы между ними нет. Паренхима клоакальной сумки у суточных цыплят еще только начинает дифференцироваться и разделение паренхимы на корковую и мозговую зоны происходит в 14-суточном возрасте кур. Максимальных весовых и линейных показателей во всех группах тимус достигает в 150-суточном возрасте кур, а клоакальная сумка — в 120-суточном возрасте. Относительная масса левой доли тимуса достигает максимальных значений во всех группах в 56-суточном возрасте кур, правой дали - в 56-суточном возрасте в контрольной и во второй, в 42-суточном возрасте в третьей группе.

Максимальных значений относительная масса клоакальной сумки достигает у кур в контрольной группе в 56-суточном возрасте, во второй группе - к посуточному возрасту, в третьей — к 70-суточному возрасту. Абсолютная масса клоакальной сумки у кур второй группы увеличивается параллельно увеличению живой массы, что не наблюдается у кур в контрольной и в третьей группе. Этим объясняется наиболее эффективное действие д нацетофенонил селен нда на ткани клоакальной сумки. Снижение весовых и линейных показателей, клоакальной сумки связано с наступлением половой зрелости и началом яйцекладки (Пили-пенко М.Е., 1966; Пилипенко М.Е., Косов В.А., 1968; Вракин В.Ф., Сидорова М.В., 1984), В этом возрасте наступает инволюция органов, которая связана с повышенным синтезом половых гормонов, а также с развитием у кур защитных барьеров в виде лимфоидной ткани в слизистой дыхательных и пищеварительных органов. Инволюция клоакальной сумки наступает раньше, чем инволюция тимуса. Гистологически это проявляется увеличением количества соединительной ткани, изменением соотношения коркового и мозгового вещества и уменьшением площади долек тимуса и фолликулов клоакальной сумки, замещение фолликулов клоакальной сумки иа кисты, увеличением количества зрелых клеточных элементов и уменьшением молодых, появлением макрофагов, эпителиальных элементов и плазматических клеток.

Проведенное исследование по влиянию селенита натрия н диацстофено-нилселенида на морфогенез центральных органов иммунитета кур показало, что включение данных препаратов в рацион кур способствует более интенсивному развитию тимуса и клоакальной сумки, особенно в группе, получавшей с кормом диацетофенонилселенид. Это выражается в более высокой массе исследуемых органов: левой доли тимуса - в 35- и 180-суточном возрасте у кур второй группы, правой доли — в 35- и 180-суточном возрасте обеих опытных групп, клоакальной сумки - в 28-, 35- и42-суточном возрасте у кур опытных групп и в 180-суточном возрасте - второй группы; увеличении площади долек тимуса в 14-, 28-, 35-, 42- и 70-суточном возрасте у кур опытных групп и 21- и 180-суточном возрасте у кур второй группы; фолликулов клоакальной сумки в 28-, 35-, 42-суточном возрасте у кур опытных групп и в 180-суточном возрасте -второй группы. Во второй опытной группе кур процессы инволюции органов происходят менее интенсивно, чем в первой и третьей. О положительном действии селена на развитие тимуса и клоакальной сумки указывается в работах Магигк!е\У1Сг М. е* а!. (1992) и Т.Н. РодионовоК (2004), что подтверждается па-шими данными.

На цитологическом уровне в отпечатках тимуса и клоакальной сумки в опытных группах по сравнению с контрольной группой отмечалось увеличение клеточности препаратов, увеличение количества молодых форм клеток (лим-фобластов и пролимфоцитов). Указанные изменения особенно выражены в 70-суточном возрасте у кур второй группы. По-видимому, данное обстоятельство можно объяснить тем, что селенит натрия и диацетофенонилселенид вызывают пролиферацию клеточных элементов лимфоидного ряда, тем самым, оказывая воздействие на иммунную систему в целом.

Диацетофенонилселенид и селенит нэтрня оказывают влияние на гематологические и иммунологические показатели крови кур. Отмечено увеличение количества лейкоцитов во второй группе в возрасте 42- и 90-суток и в третьей группе в возрасте 7- и 56-сугок (р<0,05). Кроме того, количество Т-лимфоцитов в опытных группах было достоверно выше, чем в контроле в возрасте 21-, 35-, 70-суток (р<0,05). Следует отметить, что в третьей группе данный показатель выше, чем в контрольной группе н второй группе в 14-, 28-, 42-, 56- н 120-суточном возрасте кур (р<0,05). Количество В-лимфоцитов в опытных группах достоверно выше, чем в контрольной группе в возрасте 7-, 56-, 70- и 90-суток (р<0,05), Следует отметить, что во второй группе количество В-лимфоцитов у кур достоверно выше, чем в третьей группе в 7- и 150-суточном возрасте кур. В третьей группы данный показатель был выше, чем во второй группе в 28-, 42-, 56-, 70-суточном возрасте и выше, чем в контрольной группе в 28-, 35- и 42-суток (р<0,05). Исходя из полученных нами данных можно сделать вывод о том, что включение в рацион кур диацетофенонилселенида и селенита натрия приводит к более активному формированию клеточного и гуморального иммунитета, способствует улучшению иммунологических показателей крови. На положительное влияние селена на клеточное и гуморальное звено иммунитета указывает ряд авторов (Магигк1е\*1сг М. е1 а1., 1992; Остапчук А.В., 2003; Мельникова Т.Е., 2004; Старостина Н.С., 2005).

Диацетофенонилселенид и селенит натрия не оказали существенного влияния на живую массу кур. По-видимому, это связано с тем, что основным видом продуктивности кур кросса «Ломан-коричневый» является яичная, а не мясная

и в связи с другим направлением исследований она нами не учитывалась. Тем не менее, многие авторы указываю на положительное влияние селена на различные виды продуктивности (Прытков Ю.Н., 1995, 1997; Перунова Е.В., 1998, 1999; Кокорев В.А. и др., 1995, 1997, 2000; Невитов М.Н., 2000; Сотников Д.А., 2002; Давлетшина Д.Ф., 2002 и др.).

При сравнении опьггных групп между собой установлено, что у кур, получавших с кормом диацетофенонилселенид, в течение практически всего эксперимента, площадь долек тимуса крупнее, чем у кур, получавших с кормом селенит натрия. Аналогичные изменения наблюдались при оценке площади фолликула на гистологических препаратах клоакальной сумки. По-видимому, ди-ацетофенонилселеннд оказывает более выраженное действие на пролнфератив-ные процессы в центральных органах иммунитета кур по сравнению с селенитом натрия и замедляет процессы инволюции в них.

ВЫВОДЫ

1. Дача с кормом цыплятам и курам диацетофенонилселенид и селенит натрия оказывает влияние на интенсивность роста, показателей массы тимуса и клоакальной сумки. Наиболее выражены эти показатели у кур второй группы. Это касается и линейных показателей тимуса и клоакальной сумки.

2. Площадь долек тимуса и фолликулов клоакальной сумки у кур опытных групп увеличивалась раньше, чем у кур контрольной группы, особенно во второй группе. Количество соединнгельнотканных элементов клоакальной сумки увеличивается более интенсивно. Они образуют перегородки, которые делят фолликулы При анализе клеточного состава тимуса кур выявлена тенденция: в 70-Суточном возрасте во всех исследуемых группах наступает смена клеточного состава, заканчивающееся к 120-суточному возрасту, которое выражается в уменьшении зрелых лимфоцитов и увеличении пролимфоцитов и лимфобластов. Смена клеточного состава в тимусе наиболее выражена у кур второй группы. Эта тенденция отмечена при анализе клеточного состава клоакальной сумки кур, но только в опытных группах.

3. Включение в рацион кур диацетофенонилселскида к селенита натрия способствует увеличению количества лейкоцитов в крови кур, активному формированию клеточного и гуморального иммунитета, увеличению количества Т- н В-лимфоцитов.

4. Живая масса кур в опытных группах выше, чем в контрольной группе, но достоверные различия отмечены у кур в третьей группе в 28- и 35-суточном возрасте (р<0,05). При даче диацетофенонилселенид а на показатели гистологического, цитологического строения и клеточного состава тимуса, клоакальной сумки более выражены по сравнению с препаратом селенита натрия.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Полученные данные о применении препаратов, содержащих селен можно использовать в практическом птицеводстве. С целью стимуляции деятельности иммунной системы кур предлагаем включать в их рацион диацетофенонилселенид или селенит натрия в дозе 1,2 мг/кг корма.

2. Сведения о возрастной морфофункцнональной характеристики органов иммунной системы и крови кур могут быть использоваться в учебном процессе при написании пособий по сравнительной анатомии, гистологии, цитологии и физиологии животных и птиц,

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Ахтямов, Р. Р. Динамика массы центральных органов иммунитета цыплят в ранний постнатальный период онтогенеза при применении соединений селена / Р. Р. Ахтямов, Р. И. Аксенов, Г. А. Трифонов // Образование, наука, медицина: эколого-экономический аспект: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти профессора А. Ф. Блинохва-това. - Пенза, 2005. - С.26.

2. Ахтямов, Р. Р. Динамика массы центральных органов иммунитета кур в постнатальном онтогенезе при применении соединений селена / Р. Р. Ахтямов, Р. И . Аксенов, Г. А. Трифонов // Инновационные технологии в сельском хозяйстве. Сборник материалов межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых. - Пенза, 2006. - С. 182-183,

3. Ахтямов, Р. Р. Морфологические показатели центральных органов иммунитета кур в постнатальный период онтогенеза при применении соединений селена / P.P. Ахтямов, Р. И. Аксенов, Г. А. Трифонов // Инновационные технологии в сельском хозяйстве: Сборник материалов межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых. — Пенза, 2006. — С, 184-185,

4. Ахтямов, Р, Р, Морфологические показатели центральных органов иммунитета цыплят в ранний постнатальный период онтогенеза при применении препаратов селена / Р. Р. Ахтямов П Агропромышленный комплекс: состояние, проблемы, перспективы: Сборник материалов 3-й Международной научно-практической конференции. - Пенза - Нейбранденбург, 2005. - С. 56-57,

5. Ахтямов, Р. Р. Макроморфологические показатели центральных органов иммунитета кур в постнатальный период онтогенеза при применении соединений селена / Р. Р. Ахтямов, Р. И. Аксенов // Достижения науки и техники в АПК. - Москва, 2006. № 10. - С. 27-30.

Бумага офсетная. Формат 60x84 1/16. Гарнитура Тайме. Печать способом ртографим. Усл. печ. л. 1,6. Уч.-тд. л. 1,7. Тираж 100. экз. Заказ № 244.

Отпечатано с оригинала-макета заказчика в копи-центре "Референт". ИП Тимошкнна Л.В. 430000, г. Саранск, пр-т Ленина, 21

1.1. Актуальность темы. В практике птицеводства наиболее полному развитию генетического потенциала птицы препятствуют многочисленные стрессы, обусловленные интенсивными технологиями производства птицеводческой продукции, нарушениями кормления и содержания птицы, что обусловливает снижение общей неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма сельскохозяйственной птицы. Поэтому изучение возрастной морфологии иммунокомпетентных органов, имеющих непосредственное отношение к иммунобиологическим реакциям, приобретает важное значение. Значительный интерес среди лимфоидных органов птиц представляют тимус и фабрициева бурса, которые являются центральными органами иммунитета птиц (Пилипенко М.Е., 1965; 1968).

Одними из средств способных влиять на развитие иммунных реакций организма животных и птицы являются соединения селена (Невитов М.Н., 1999; Боряев Г.И., 2000; Мельникова Т.Е., 2004 и др.).

Значение микроэлемента селена для организма сельскохозяйственных животных и птицы многогранно. Селен обладает высокой биохимической активностью и способствует интенсификации обмена веществ. Он влияет на процессы тканевого дыхания, регулирует скорость течения окислительно-восстановительных реакций, повышает иммунную реактивность организма. Его недостаток в рационах приводит к снижению роста и развития молодняка, снижению продуктивности и ухудшению воспроизводительных качеств животных, а также нарушению обмена веществ в организме (Ермаков В.В., Ковальский А.И.,1974; Родионова Т.Н., 1984; Кальницкий Б.Д.,1985; Двинская Л.М.,1990; Боряев Г.И. и др.,1999; Невитов М.Н.,2000; Перунова Е.В., Трифонов Г.А., 1998,1999; Сотников Д.А.,1998; Сотников Д.А., Трифонов Г.А.,1999).

Микроэлемент селен применяется в практике животноводства и птицеводства в основном в виде селенита натрия, который обладает высокой токсичностью (Трифонов Г.А., 1998). Поэтому, предпринимались попытки синтезировать менее токсичные соединения селена. Органические формы селена такие, как селенометионин, селеноцистеин и др. не намного отличаются по токсичности от неорганических. В Саратовском НИИ химии В.И. Древко и Р.И. Древко синтезировано селеноорганическое соединение - диацетофе-нонилселенид, которое обладает меньшей токсичностью.

В связи с этим, представляет большой научный интерес и практическую значимость изучение возрастной морфологии центральных органов иммунитета кур в связи с применением селеносодержащих соединений, в частности селеноорганического соединения диацетофенонилселенида, обладающего меньшей токсичностью.

1.2. Цель и задачи исследования. Целью нашей работы являлось сравнительное изучение влияния диацетофенонилселенида и селенита натрия на постнатальный морфогенез тимуса и клоакальной сумки у кур.

Задачи исследования:

1. Изучить влияние диацетофенонилселенида и селенита натрия на макроморфологические показатели тимуса и клоакальной сумки кур.

2. Выявить морфофункциональные изменения в тимусе и клоакальной сумке кур в норме и при введении в рацион диацетофенонилселенида и селенита натрия.

3. Определить параметры изменений гематологических и иммунологических показателей крови кур при применении диацетофенонилселенида и селенита натрия.

1.3. Научная новизна. В работе впервые изучена возрастная макро- и микроморфология тимуса и клоакальной сумки кур яично-мясного направления кросса «Ломанн-Браун» при применении диацетофенонилселенида и селенита натрия. Установлено, что масса тимуса у кур, по сравнению с нормой (контролем) увеличивается с 35- суточного возраста. Относительный рост массы тимуса наивысший в 56- суточном возрасте цыплят. Масса клоакальной сумки у кур, получавших селеновые препараты, достоверно увеличивается с 70- по 120- суточного возраста (р<0,05). Количество Т- лимфоцитов у опытных групп увеличивается в 21-, 35- и 70- суточном возрасте цыплят, а В- лимфоцитов - в 7, 56, 70 и 90 суток.

1.4. Теоретическая и практическая ценность. Полученные данные по применению селеновых препаратов могут быть использованы в птицеводческих хозяйствах с целью интенсификации производства птицеводческой продукции. Данные по морфологии, гистологии и цитологии тимуса и клоакальной сумки, результаты гематологических и иммунологических исследований крови могут быть использованы: в учебном процессе на ветеринарных, зоо-инженерных и биологических факультетах; при проведении научных исследований и написании справочных и инструктивных материалов по применению селеносодержащих препаратов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Влияние диацетофенонилселенида и селенита натрия на живую массу тела, весовые, линейные показатели и микроморфологию тимуса и клоакальной сумки кур кросса «Ломанн-Браун» в постнатальном онтогенезе.

2. Показатели клеточного и гуморального иммунитета кур при применении диацетофенонилселенида и селенита натрия и их влияние на лейкоцитарный профиль крови.

3. Сравнительные данные воздействия диацетофенонилселенида и селенит натрия на центральные органы иммунитета и крови кур.

1.5. Апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 5 научных статей. Основные положения диссертации доложены на:

Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти профессора А.Ф. Блинохватова (Пенза, 2005); III Международной научно-практической конференции (Пенза-Нейбранденбург, 2005); Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых (Пенза, 2006); Достижения науки и техники в АПК (Москва, 2006); на Огаревских чтениях (Саранск, 2006).

1.6. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 135 страницах компьютерного текста и включает разделы: общая характеристика работы; обзор литературы; материал и методы исследования; результаты исследования; обсуждение результатов исследования; выводы; практические предложения; список используемой литературы, который включает 201 источник, в том числе 61 иностранных. Работа иллюстрирована 9 таблицами и 67 рисунками (графиками и фотографиями).

2.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ 2.1. Характеристика строения и развития центральных органов иммунной системы птиц

ВЫВОДЫ

1. Дача с кормом цыплятам и курам диацетофенонилселенид и селенит натрия оказывает влияние на интенсивность роста, показателей массы тимуса и клоакальной сумки. Наиболее выражены эти показатели у кур второй группы. Это касается и линейных показателей тимуса и клоакальной сумки.

2. Площадь долек тимуса и фолликулов клоакальной сумки у кур опытных групп увеличивалась раньше, чем у кур контрольной группы, особенно во второй группе. Количество соединительнотканных элементов клоакальной сумки увеличивается более интенсивно. Они образуют перегородки, которые делят фолликулы При анализе клеточного состава тимуса кур выявлена тенденция: в 70-суточном возрасте во всех исследуемых группах наступает смена клеточного состава, заканчивающееся к 120-суточному возрасту, которое выражается в уменьшении зрелых лимфоцитов и увеличении пролимфоцитов и лимфобластов. Смена клеточного состава в тимусе наиболее выражена у кур второй группы. Эта тенденция отмечена при анализе клеточного состава клоакальной сумки кур, но только в опытных группах.

3. Включение в рацион кур диацетофенонилселенида и селенита натрия способствует увеличению количества лейкоцитов в крови кур, активному формированию клеточного и гуморального иммунитета, увеличению количества Т- и В-лимфоцитов.

4. Живая масса кур в опытных группах выше, чем в контрольной группе, но достоверные различия отмечены у кур в третьей группе в 28- и 35-суточном возрасте (р<0,05). При даче диацетофенонилселенида на показатели гистологического, цитологического строения и клеточного состава тимуса, клоакальной сумки более выражены по сравнению с препаратом селенита натрия.