Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Влияние микроэлементов на поствакцинальный иммунитет при пастереллезе свиней

г ц фев да

ЗвяорусекпЗ яаучно-ясследозгтеяьский виегитут экспериментальной яетзртизрпа ки. С.H.Визюлоссхого

На правах рукописи

УДК 636.22/28:612.015.31

ДНДРССНК Лилия дкптриевна

ВОДЯНКЕ КИКРОЭЯЕИЕНТОВ НА ПОСгВАКЦИИАЯЬНЫЙ

ИММУНИТЕТ ПРИ ПАСТЕРЕЛЛЕЗЕ СВИНЕЙ

1G.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарии* наук

Минск - 1996

Работа выполнена в Белорусском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вкпелесского

Научный консультант

доктор ветеринарных наук, профессор академик ААН Республики Беларусь Ковалев H.A.

Научный руководитель

доктор ветеринарных наук, старпнк научный сотрудник Зашенько A.C.

Официальные оппоненты-.

доктор ветеринарных наук, профессор Тузова Р.В.

доктор ветеринарных наук, профессор ШакоЕ А.Г.

ОППОНИРУЮЩАЯ организация - Гродненский сельскохозяйственный

институт

" ^ß^-ßfOlol^l г. Е '/

РО>

Защита состоится " " _ »'Кт?/'¿/Ус1997 г . в _'У ~7--часов н

заседании Совета по защите диссертаций Д.05.16,01. в Белорусско научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринари им.С.Н.Вышелесского по адресу: 223020, г.Минск, п/о Кунцевщина БелНИИЭБ им.С.Н.ВыЕелесского.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусског научно-исследовательского института экспериментальной ветеринари им.С.Н.Еышелесского.

Автореферат разослан

«зо«

S 1996

Учений секретарь Совета по защите диссертаций, доктор f с .. ветеринарных наук, профессор

В.Я. Ликни

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одним из важнейших мероприятий в борьбе с инфекционными болезнями является специфическая профилактика. Однако ее эффективность зависит не только от качества вакцины и генетических возможностей организма реагировать на те или иные антигены, но и от многих факторов окружающей среды.

Так, исследованиями показано, что степень выраженности иммунных реакций организма свиней зависит от условий содержания, степени инсоляции и освещенности помещений (Я.Р.Коваленко, А.М.Петров, 1985; С.А.Лигачев, Р.Б.Соловьева, 1986). Существенная роль з поддержании иммунной реактивности отводится количеству и качеству протеинового питания (П.Маркевич, 1962; И. 3>рязинова, 1963; Я.Р.Коваленко с соавт., 1970) и обеспеченности рационов витаминами (II.М.Карпуть, 1974, 198.1; М.И.Смирнова, 1974; В.В.Ванте-вЕ, 1980). Учитывая высокую биологическую активность микроэлементов в обменных процессах, ряд исследователей считают, что между содержанием микроэлементов в рационе и интенсивностью иммунного ответа существует тесная корреляционная взаимосвязь (О.З.Бароян, Д.Р.Каупен, 1S78; С.М.Прегер, 1979; Д.Н.Лазарева, Е.К.Алехин, 1985 и др.). По данным E.Miller с соавт.(1968), J.Quarterman (1974), P.Fraker с соавт. (1978), А.П.Авцын (1987), при дефиците цинка уменьшается масса тимуса и, как следствие, снижается не только первичный, но и вторичный иммунный ответ. Важная роль в 1роцессах кроветворения и в воздействии на иммунную систему отводится железу и меди (С.Д.Алиев, В.И.Донцов, 1985; L.Rosch, 1987; V.Sherman с соавт., 1987; F.Gaban, 1988). И тем не менее значение отдельных микроэлементов и их сочетаний в иммунной реактивности организма остается мало изученным, а имеющиеся сведения по этому зопросу носят противоречивый характер. Заслуживает также внимания 13учение количественного и качественного изменения микроэлементов i тканях и биологических жидкостях организма иммунизированных зси-ютных. Единичные сообщения по этому вопросу ке отражают цельной гартины происходящих изменений микроэлементов в организме и не >бьясняют физиологического значения выявленных изменений Ю.Д.Свистун, 1959; С.М.Тимоноза, 1976; С.И.Музычин, П.Н.Шешко, .987 ) .

Связь работы с крупными научными программами, темами. Выполненная работа являлась разделом плановой государственной тематики Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вьшелесского, задания 04.02 и 02. Номера госрегистрации 085141 и 1993136.

Цель н задачи исследований. Целью работы было: изучить роль некоторых микроэлементов в формировании поствакцииального проти-вопастереллезного иммунитета у свиней.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить содержание микроэлементов железа, меди, цинка, кобальта, магния и марганца в органах и биологических жидкостях кроликов, иммунизированных эмульгированной вакциной против пасте-реллеза свиней.

2. Выяснить роль дефицита Т?в, Си, гп и Мп в формировании поствакцинального иммунного ответа против пастереллеза.

3. Изучить влияние дополнительного введения микроэлементов (железа, меди, цинка, марганца) в рацион животным на напряженность противопастереллезного иммунитета.

4. Определить состояние естественной неспецифической резистентности организма и поствакцинального иммунного ответа против пастереллеза у кроликов и поросят на фоне применения железодекс-трановых препаратов (ферроглюкина, микроанемина и ДИФ-З).

Научная новизна полученных результатов. Впервые изучено распределение железа, меди, цинка, кобальта, магния и марганца в органах кроликов, иммунизированных вакциной против пастереллеза свиней и обосновано физиологическое значение этих изменений. Выявлена негативная роль дефицита микроэлементов и положительное влияние дополнительного их введения в рацион животным при формировании поствакцинального противопастереллезного иммунитета. Установлено отрицательное влияние железодекстрановых препаратов (ферроглюкина, микроанемина и ДИФ-3) на напряженность поствакцинального противопастереллезного иммунитета, что послужило основой для определения сроков их применения поросятам во время проведения вынужденных прививок.

Практическая значимость полученных результатов. С целью повышения естественной резистентности организма, напряженности поствакцинального противопастереллезного иммунного ответа и снижения потерь живой массы животных в поствакцнальный период пред-

лагается за 7-10 дней до и в течение 7-10 дней после вакцинации вводить в рацион свиней дополнительно сверх кормы на 25-30% глицерофосфат железа, углекислые соли цинка, меди и марганца. (Рекомендации утверждены ГУБ Минсельхозпрода РБ 21.11.1990 г.). Определены сроки применения железодекстрановых препаратов поросятам во время проведения вынужденных прививок против пастереллеза с целью снижения их негативного влияния на поствакцииальный иммунитет. (Одобрены Ученым советом БелНИИЭВ им.С.Н.Вышелесского в 19 92 г.).

Экономическая значимость полученных результатов. Рекомендованное нами для внедрения б производство дополнительное введение в рацион свиней солей микроэлементов (железа, цинка, меди и марганца) до и после иммунизация их против пастереллеза предупреждает снижение потерь живой массы в среднем на 1,65 кг в поствакцинальный период. Экономический эффект от их применения составляет 9,5 рубля яа один рубль затрат.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- закономерности распределения микроэлементов в организме кроликов, иммунизированных эмульгированной вакциной против пастереллеза свиней;

- роль некоторых микроэлементов и железодекстрановых препаратов в формировании иммунного ответа на введение вакцины против пастереллеза свиней и пути повышения эффективности проводимых специфических мероприятий против этой болезни;

Личный вклад соискателя. Изложенные в диссертации материалы по изучению распределения железа, меди, цинка, кобальта и марганца в организме кроликов, иммунизированных против пастереллеза, роль некоторых железодекстрановых препаратов, дефицита и повышения доз по сравнению с нормой указанных микроэлементов в образовании поствакцинального иммунитета у животных выполнены лично автором .

Апробация результатов диссертации. Материалы диссертации доложены на Республиканских научно-производственных конференциях: "Современные проблемы профилактики зоонсзных болезней и пути их решения" (г.Гродно, 1939); "Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных (г.Витебск, 1990); "Проблемы научного обеспечения животноводства Молдавии" (г.Кишинев , 1990); "Технология получения и выращивания здорового молодняка сельхозживотных и рыбопосадочного материала" (г.Минск,1993);

"Ветеринарные и зооинженерные проблемы животноводства" (Витебск, X9S6).

Опубликованность результатов исследований. Основные положения диссертации опубликованы в 12 научных работах, в т.ч. в 6 статьях и 6 тезисах докладов.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 141 странице машинописного текста и состоит из оглавления, введения, общей характеристики работы, основной части, выводов, практических предложений и приложения. Работа иллюстрирована 19 таблицами и 20 рисунками. Список литературы включает 217 источников.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ

ОБЩАЯ МЕТОДИКА И ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальная часть работы выполнена в 1988-1994 годах в лаборатории бактериальных инфекций Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Выше-лесского и в ряде хозяйств Минской области.

Экспериментальные и производственные исследования проведены на 152 поросятах, 84 кроликах и 1597 белых мышах.

Для изучения содержания Fe, Cu, Zn, Со, Mn, Mq в органах иммунизированных эмульгированной вакциной против пастереллеза свиней в опыте использованы 24 кролика. Животным 1 группы (12 голов) подкожно вводили по 3 мл вакцины, а кролики - П группы (12 голов) служили контролем. На 5-й, 10-й, 15-й и 20-й дни после иммунизации убивали по 3 кролика из каждой группы и отбирали пробы сердца, тимуса, легких, печени, почек, селезенки, костного мозга и крови для определения микроэлементов, содержание которых проводили на атомноабсорбционном спектрофотометре С-302.

Опыты по изучению влияния дефицита микроэлементов на формирование поствакцинального иммунного ответа проведены на 12 кроликах и 12 поросятах 45-дневного возраста, из которых были сформированы 3 группы. Для животных 1 группы рацион был сбалансирован так, что дефицит Fe, Cu, Zn, Mn, составлял 50% нормы. Содержание указанных микроэлементов в рационах животных П и Ш групп было доведено до нормы за счет дополнительного их введения. На 10-й день после содержания поросят и кроликов на указанных рационах животным 1 и П группы ввели эмульгированную вакцину против пастерелле-

за свиней в дозе 3 мя. В начале опыта, перед вакцинацией, а затем ка 7-й, 15-й, 20-й и 30-й дни после нее отбирали пробы крови для определения морфологического состава, показателей естественной неспецифической защиты организма, уровня микроэлементов и превентивных свойств сьшоротки. На 30-й день после вакцинации животных всех групп заразили летальной дозой Р.пш^ос1с1а.

Для изучения влияния повышенных доз микроэлементов на формирование поствакцинального иротивопастереллезного иммунного ответа было проведено 3 опыта на 24 кроликах и 12 поросятах. Б каждом опыте сформировали 3 группы животных по 4 головы в каждой. Содержание микроэлементов в рационах поросят и хролихов (1-й опыт) П и Ш групп было сбалансировано по железу, меди, цинку, марганцу согласно рекомендуемым нормам. В рацион животных 1 группы дополнительно вводили на 25-30% выше нормы глицерофосфат железа и углекислые соли меди, цинка, марганца, которые скармливали в течение 20 дней. На 10-й день после содержания поросят и кроликов на указанных рационах животным 1 и П групп подкожно ввели эмульгированную вакцину против пастереллеза свиней в дозе 3 мл.

Второй опыт на кроликах был проведен по аналогичной схеме. Разница заключалась лишь в том, что для животных 1 группы доза названных микроэлементов была увеличена на 200%.

В начале каждого опыта, перед вакцинацией, а затем на 7-й, 14-й, 21-й и 30-й дни после иммунизации животных ззвешивали к отбирали пробы крови для определения морфологического состава, показателей неспецифической естественной резистентности организма, количества Т- и В-лимфоцитов и превентивных свойств сыворотки крови. На 35-й день подопытных животных заражали вирулентной культурой Р.тиИ:ос1с1а.

Производственное испытание эффективности применения повышенных доз микроэлементов проводили в совхозе им.Ульянова Минского района на 100 поросятах, которым дополнительно вводили в рацион вышеуказанные микроэлементы. Поросята контрольной группы получали комбикорм, содержание микроэлементов в котором соответствовало норме. Через 10 дней после начала скармливания микроэлементов животным обеих групп подкожно вводили эмульгированную вакцину против пастереллеза. В начале опыта и на 30-й день после иммунизации от 5 поросят каждой группы отбирали пробы крови. Всех животных взвешивали перед опытом, на 10-й и 30-й дни после иммунизации.

- б -

Влияние ферроглюкина, микроанемина и ДИФ-З на формирование поствакцинального иммунитета изучали на белых мышах, кроликах и поросятах. Белых мышей (п - 422) разделили на 5 групп, причем первые три из них в свою очередь были разделены на 4 полгруппы. Мышам 1 подгруппы каждой группы вводили внутримышечно по 0,1 мл ферроглюкина, микроанемина и ДИФ-3. Спустя 5 дней после инъекции железодекстрановых препаратов животных иммунизировали эмульгированной вакциной против пастереллеза свиней в дозе 0,3 мл. Белым мышам второй подгруппы вакцину и железодекстрановые препараты вводили одновременно в разные точки. Подопытным животным третьих подгрупп железодекстрановые препараты инъецировали спустя 5 дней, а четвертых подгрупп - через 19 дней после вакцинации. Мышам 1У группы вводили только одну вакцину (контроль), а животные У группы служили чистым контролем. На 20-й день после вакцинации белых мышей всех групп заразили предварительно оттитрованной дозой Р . гг.иИос1с1а.

Аналогичный опыт был проведен на 30 кроликах, которых разделили на 10 групп. Железодекстрановые препараты вводили за 5 дней до, 5 дней после вакцинации и одновременно с вакциной. В начале опыта и на 7-й, 15-й, 20-й и 30-й дни отбирали пробы крови, а на 30-й день опытных и контрольных животных инфицировали предварительно оттитрованной дозой Р.тиИ:ос1с1а.

В опыте по изучению влияния железодекстрановых препаратов на поствакцинальный иммунный ответ использовали 28 поросят-сосунов, из которых сформировали 7 групп, по 4 головы в каждой. Животным опытных групп на 3-й день жизни внутримышечно ввели по 3 мл ферроглюкина (1 и П группы), ДИФ-3 (Ш и 1У) и микроанемина (У и У1 группы). На 10-й день поросятам П, 1У и У1 групп инъекцию указанных препаратов повторили. Животные УП группы служили контролем и железодекстрановых препаратов не получали. На 15-й день жизни подопытным поросятам ввели эмульгированную вакцину против пастереллеза свиней в дозе 3 мл. Перед вакцинацией, на 15-й и 30-й дни после нее отбирали пробы крови для определения морфологических и иммунологических показателей.

При проведении вышеуказанных опытов гематокритное число определяли на микроцентрифуге МЦГ-8, количество лейкоцитов - на счетчике "Пикоскель", содержание гемоглобина и эритроцитов - на эритрогемометре (модель 00594-2), общий белок - методом рефракто-

метрии, количество иммуноглобулинов - сульфатоцинковым методом, бактерицидную активность сыворотки крови в отношении кишечной палочки - методом фотонефелометрии, содержание лизоцима - в бактериальных чайках методом диффузии, фагоцитоз - по методу Е.И.Жито-ва и С.И.Кудряшсвой (1967), Т-лимфоциты - методом спонтанного ро-зетхообразованяя с бараньими эритроцитами, а для определения В-лимфоцитов использовали феномен образования розеток с бараньими эритроцитами, нагруженными комплементом. Определение превентивных свойств сыворотки крови проводили на 1175 белых мьняах по общепринятой методике.

Экономическую эффективность применения повышенных доз микроэлементов рассчитывали согласно "Методическим указаниям по внедрению достижений науки, техники и передового опыта в сельскохозяйственном производстве" (1982) и "Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий" (1982).

Полученный цифровой материал обработан общепринятыми методами математической статистики.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ПАСТЬ

Содержание Fe, Си, Zn, Со, Кп и Mq в органах и крови кроликов, иммунизированных эмульгированной вакциной протиз пастереллеза

Результаты исследований по определению микроэлементов в органах иммунизированных кроликов показали, что формирование иммунного ответа сопровождается их количественным изменением. Так, на 5-й день после вакцинации выявили достоверное увеличение железа в тимусе до 1,31+0,05 мкМоль/г, а в почках до 1,91+0,11 мкМоль/г золы. На 10-й день количество этого элемента возросло и в сердечной мкпце, тимусе, селезенке, почках и легочной ткани. Однако к 15-му дню после иммунизации содержание железа снизилось по сравнению с контролем на 19,0-45,9% в сердце, тимусе, селезенке и почках. Ка 20-й день исследования кроме сердца и тимуса уменьшение железа также выявлено в легких, печени и крови.

При определении кади на 5-й день выявили ее увеличение в тимусе кроликов опытной группы до 0,84+0,07 мкМоль/г, против 0,26+0,01 мкМсль/г золы в контрольной и снижение ее содержания в

легких и костном мозгу. К 15-ку дню после вакцинации количество меди увеличилось во всех исследуемых органах за исключением печени, где содержание ее снизилось до 0,71+0,05 ккМоль/г золы. Начиная с 20-го дня достоверное уменьшение меди отмечено в сердце, тимусе, селезенке, почках, легких и крови.

Содержание цинка на 5-й день после иммунизации снизилось в сердечной мышце и селезенке соответственно до 1,42+0,01 и 3,03+0,08 мкМоль/г золы и одновременно возросло в тимусе, почках, легких и печени. На 10-й и 15-й дни исследования его количество по сравнению с контролем возросло во всех исследуемых органах, кроме легких и тимуса, в которых его содержание снизилось на 10-й и 15-й день соответственно. К 20-му дню тенденция к увеличению цинка сохранилась в сердце, почках и печени, а в тимусе, костном мозгу и крови выявлено достоверное его снижение.

Количество кобальта у животных, иммунизированных эмульгированной вакциной против пастереллеза, существенно не изменялось. Лишь на 5-й день после вакцинации возросло его количество в тимусе, селезенке и почках до 0,86+0,06-1,19+0,01 мкМоль/г золы, а на 10-й день увеличение отмечено только в селезенке, почках и костном мозгу. На 15-й день выявлено снижение этого элемента в селезенке до 0,29_+0,02 мкМоль/г, а на 20-й день в тимусе до 0,44+0,01 мкМоль/г золы.

При определении магния наиболее существенные изменения выявлены в органах кроликов на 10-й и 20-й дни после иммунизации. 3 первом случае его уровень возрос во всех исследуемых органах, за исключением сердечной мышцы, тимуса и костного мозга, до 43%, а на 20-й день исследования произошло достоверное снижение этого элемента в тимусе, селезенке, легких и крови.

Данные по определению марганца показали, что в сердечной мышце во все сроки исследования, а на 5-й день в легких и печени содержание было достоверно более низким, чем у животных контрольной группы. Что касается других органов, то к 10-му дню его количество возросло по сравнению с контролем в селезенке, почках, легких, печени и крови. Выявленная тенденция к увеличению указанного элемента сохранялась в тимусе, селезенке и почках на 15-й день, а в крови и на 20-й день после вакцинации. Вместе с тек, содержание марганца в других органах к этому сроку исследования достоверно снизилось.

Таким образом, из представленных данных видно, что содержание исследуемых микроэлементов в органах вакцинированных кроликов изменяется от фазы иммуногенеза. В первые 10 дней, т.е. в период индуктивной фазы, происходит увеличение их в большинстве органов, а к концу иммунологической перестройки отмечается их резкое уменьшение, за исключением костного мозга, где их содержание было повышенным.

Поствакцинальный иммунный ответ при дефиците микроэлементов в рационе животных

Результаты 1-го опыта, проведенного на кроликах, показали, что у животных, содержащихся на рационе, в котором дефицит Ре, Си, 2п и Мп составлял 50% к норме, к 28-му дню снизилось количество эритроцитов до 4,86+0,18 г/л и гемоглобина - на 14%. Достоверных изменений в содержании общего белка и количестве иммуноглобулинов мы не выявили, однако на 28-й день поело вакцинации содержание общего белка у животных 1 группы было более низким и составляло 56,52+1,34 г/л, против 60,55+2,23 г/л у кроликов контрольной группы. К этому сроку у опытных кроликов снизилась бактерицидная активность сыворотки крови до 7 6,18+6,15% и фагоцитарная активность нейтрофилов до 81,60+0,98%.

Формирование поствакцинального иммунитета сопровождалось снижением содержания Те, Си, 2п, Мп, но наиболее низкими эти показатели были у кроликов 1 группы.

После вакцинации интенсивность роста кроликов была разной. Если у животных контрольной группы {невакиннирозанные) прирост живой массы возрос в среднем на 0,45 кг, а у животных П группы на 0,37 кг, то у кроликов 1 группы составил в среднем 0,15 кг.

При изучении превентивных свойств сыворотки кропи установили, что у животных 1 группы ее защитный эффект был на 10,0% ниже, чем у аналогичных кроликов, но содержащихся на сбалансированном по микроэлементам рационе. После заражения подопытных животных оттитрованной дозой культуры Р.тиИ:ос1с!а все кролики контрольной группы (невакцинирсванные) пали. В 1 группе коэффициент иммунологической защиты составил 40,0%, а во П - 60%.

Во втором опыте, проведенном на поросятах, мы ке выявили негативного влияния дефицита Ре, Си, 2п, Мп на морфологической сое-

тав кровк иммунизированных животных в первые 20 дней и лишь к 30-му дню заметно возросло содержание лейкоцитов у поросят 1 группы на 12,8%, а П - на 29,0%. Дефицит указанных микроэлементов в рационе поросят оказывал негативное влияние на формирование неспецифических и специфических факторов защиты. Уже к 7-му дню после иммунизации фагоцитарная активность нейтрофилов у поросят 1 группы снизилась до 68,0+2,31% (Р<0,05), а начиная с 15-го дня достоверно возросла бактерицидная активность сыворотки крови и составила 96,25+0,74%, а на 20-й день - 95,14+1,04%. На 7-й и 15-й дни после иммунизации у поросят 1 и П групп возросло содержание В-лимфоцитов, но к 30-му дню у животных 1 группы этот показатель снизился до 15,00+3,03%. На 15-й и 20-й дни у поросят этой группы выявлено более высокое содержание Т-лимфоцитов.

Интенсивность роста подопытных поросят была неодинаковой. К 30-му дню средняя масса одного животного 1 группы была на 4,1 кг ниже, чем у контрольных животных. Сыворотка крови поросят 1 группы предохраняла от гибели 68,7% белых мышей, в то время как сыворотка крови животных П группы защищала 78,1% белых мышей, зараженных летальной дозой возбудителя пастереллеза. После заражения поросят культурой Р.тиИ;ос1с1а все животные контрольной группы пали. Вакцинированные поросята остались живыми, но клинические признаки на введение возбудителя пастереллеза были более выраженными у животных 1 группы.

Влияние повышенных доз микроэлементов на формирование поствакцинального иммунного ответа

Иммунизация кроликов вакциной против пастереллеза свиней на фоне дополнительного введения в рацион Ре, Си, Мп сопровождалось увеличением общего белка до 62,97+1,09 г/л (Р<0,05), более высоким содержанием иммуноглобулинов и стимулированием фогоцк-тарной активности нейтрофилов. Если в начале опыта их поглотительная активность составляла 87,33+1,91%, то к 14-му дню после вакцинации у кроликов 1 группы она возросла до 92,0+1,3% (Р<0,01).

Содержание железа, меди и марганца у кроликов 1 группы почти соответствовало данным контрольной группы, за исключением цинка, количество которого на 7-й день после вакцинации возросло до 4,37+1,83 мкМоль/л, а на 21-й день - до 3,98+0,92 мкМоль/л (Р<0,05).

Сыворотка крови кроликов 1 группы предохраняла от гибели 65,0% белых мышей, инфицированных летальной дозой Р. тиНюсД-йа, а П группы - 48,3%. После инфицирования сохранность животных в I группе составила €6,7%, во второй - 60,0%, а среди неиммунизиро-вашшх летальность достигла 100%.

Результаты П опыта, в котором доза микроэлементов для кроликов была увеличена сверх нормы на 200%, показали, что после иммунизации у них возрастало гематокритное число и к 14-му дню оно составило 0,41+0,02 г/л, количество гемоглобина увеличилось на 18,7%, В то же время содержание общего белка заметно снизилось и это уменьшение, видимо происходило за счет иммуноглобулинов, количество которых на 7-й день после иммунизации составило 8,15+0,19 мг/мл против 11,30+0,25 мг/мл в контроле. К 7-му днго после вакцинации средняя масса одного животного снизилась на 380 г. Затем она несколько возросла, но была ниже, чек у кроликов П и Ш групп.

При изучении превентивных свойств сыворотки крови и устойчивости животных к заражению установлено, что если сохранность белых мышей, которым вводили сыворотку крови кроликов П группы, составила после заражения Р.ти11ос1аа 78%, то в 1 группе - 63%. Летальность среди кроликов 1 группы после их инфицирования культурой возбудителя пастереллеза достигла 66,7%, во П - 33,3% и Ш -100%.

О стимулирующем влиянии солей Ре, Си, 2п, Мп, введенных в рацион сверх нормы на 25-30%, подтверждают данные опыта, проведенного на поросятах. Начиная с 7-го дня после иммунизации у животных 1 группы возросло содержание гемоглобина, количество эритроцитов, лейкоцитов, увеличилась бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови, а также фогоцитарная активность нейтро-филов. Одновременно возросло процентное содержание Т- и В-лимфо-цитов и к 30-му дню после введения вакцины оно составило соответственно 53,5+3,01 и 58,25+3,84%.

Содержание железа в крози поросят 1 группы соответствовало данным контрольной группы, а цинка и меди достоверно возросло.

Дополнительное введение микроэлементов в рацион поросятам способствовало более высокому приросту живой массы. Так, к 30-му днв у поросят 1 группы средняя масса одного животного была на 3,0 {г выие, чем у поросят контрольной группы.

Превентивная активность сыворотки крови поросят 1 группы составляла 81,2%, П - 78,1% и Ш - 25,0%.

При производственном испытании эффективности применения повышенных доз микроэлементов для снижения потерь живой массы в поствакцинальный период и стимуляции иммунного ответа установлено, что у поросят опытной группы содержание гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка и гекатокритное число были более высокими, чем у животных контрольной группы. На 30-й день после иммунизации средняя масса одного поросенка опытной группы была на 1,65 кг выше, чем контрольного. Сыворотка крови поросят, содержащихся на обычном рационе предохраняла от гибели 83,3% белых мышей, зараженных Р.ти15:ос1йа, а животных 1 группы - 84,2%.

Экономический эффект от применения микроэлементов для стимуляции иммунного ответа и снижения потерь живой массы поросят в поствакцинальный период составил 9,5 руб. на 1 руб. затрат.

Таким образом, дополнительное введение в рацион животных железа, меди, цинка и марганца сверх нормы на 20-30% не только предотвращает снижение живой массы животных в поствакцинальный период, но и способствует формированию более стойкого иммунного ответа. Увеличение дозы микроэлементов на 200% сверх нормы вызывает угнетающее действие на напряженность поствакцинального иммунитета.

Влияние железодекстрановых препаратов на напряженность поствакцинального противо-пастереллезного иммунитета

Результаты опыта, проведенного на белых мышах, показали, что степень угнетающего действия железодекстрановых препаратов зависит не только от самого препарата, но и от сроков введения его по отношению к вакцинации. Введение ферроглюкина, микроанемина и ДИФ-3 за 5 дней до иммунизации снижало защитный эффект эмульгированной вакцины против пастереллеза до 33,3%. При одновременном введении ферроглюкина и вакцины сохранность белых мышей после заражения составляла 29,6%, микроанемина - 26,7% и ДИ§-3 - 27,6%. Введение железодекстрановых препаратов спустя 5 дней после иммунизации в меньшей степени угнетало иммунный ответ. При применении ферроглюкина сохранность иммунизированных белых мышей после заражения составила 41,9%, ДИ5-3 - 50,0% и микроанемина - 3 3,3%. Пос-

ле введения ферроглюкина на 19-й день после вакцинации с последующим заражением культурой пастерелл через сутки погибло 33,3% белых мышей, ДИ8-3 - 44,8% и микроанемина - 58,1% белых мышей.

Во втором опыте изучали устойчивость иммунизированных против колибахтериоза белых мышей, обработанных железодекстрановыми препаратами и подвергнутых заражению кишечной палочкой, спустя сутки после их введения. Установлено, что среди мышей, которым вводили ДИФ-3 (п = 22) остались живыми 63,6%, декстрофер (20) - 45,0% и микроанемин (п = 20) - 39,6%. Все иммунные, но не обработанные железодекстрановыми препаратами белые мыши остались живыми.

В третьем опыте, проведенном на кроликах по аналогичной схеме как и на белых мышах, установили, что на 15-й день после иммунизации возросло гематокритное число, количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов у животных, которым вводили микроанемин и ДИ5-3 за 5 дней до иммунизации, а также гематокритное число при

г

введении ферроглюкина одновременно с вакциной, до и после вакцинации, содержание гемоглобина- при иньекции ферроглюкина с вакциной, эритроцитов - после введения микроанемина с вакциной и лейкоцитов - в группе животных, обработанных ДИ5-3 спустя 5 дней после вакцинации.

Количество иммуноглобулинов достоверно возросло на 20-й день после иммунизации лишь у кроликов, которым вводили ДЙФ-3 до вакцинации. Бактерицидная активности сыворотки крови кроликов достоверно возросла во всех группах на 20-й день исследования. Содержание лизоцима существенно не изменялось.

При изучении превентивных свойств установили, что сыворотка крови кроликов, которым вводили микроанемин за 5 дней до вакцинации, предохраняла от гибели 66,7% белых мышей, инфицированных Р.ти11:ос1аа, ДИФ-З - 77,3% и ферроглюкин - 88,9%. При одновременном введении вакцины с железодекстрановыми препаратами защитные свойства сыворотки были ниже и сохранность белых мышей, которым вводили сыворотку крови кроликов, обработанных микроанемином составила 41,7%, ДИФ-З - 50,0% и ферроглюкином - 83,3%. Сыворотка животных, обработанных микроанемином после вакцинации, предохраняла от гибели 77,8%, ДК5-3 - 91,7% и ферроглюкином - 100,0%. Сыворотка крови иммунных кроликов, но не обработанных железодекстрановыми препаратами, защищала от гибели 100% белых мышей.

После заражения подопытных кроликов, обработанных железо-

дехстрановыми препаратами за 5 дней до иммунизации, смертность составила 33,3%, при одновременном их введении с вакциной - 50%, а обработанных спустя 5 дней после вакцинации - 25%.

Результаты опыта, проведенного на поросятах-сосунах, которых одно- и двукратно обрабатывали желеэодекстрановыми препаратами с последующей иммунизацией на день после первичного их введения, показали, что к моменту вакцинации и на 15-й день после нее у животных всех групп достоверно возросло гематокриткое число, количество гемоглобина и эритроцитов. Содержание лейкоцитов было выше лишь у поросят, обработанных ферроглюкином. На 15-й день после иммунизации достоверно возросла бактерицидная активность сыворотки крови у поросят, одно- и двукратно обработанных ДИФ-З и двукратно - микроанемином. Защитные свойства сыворотки крови были разными. Если от контрольных поросят она предохраняла от гибели 81,8% белых мыаей, зараженных возбудителем пастереллеза, то от животных, обработанных микроанемином, всего 33,3% и 46,1%, ДИ§-3 - 41,6% и 53,8% и ферроглюкином - 58,3%.

Таким образом, применение животным железодекстрановых препаратов способствует активизации гемопоэза и профилактике зкелезоде-фицитной анемии. Однако их введение отказывает угнетающее действие на формирование поствакцинального иммунного ответа. Наиболее это выражено при введении микроанемина и в меньшей степени - при применении ДИФ-3 и ферроглюкика, особенно при назначении их через несколько дней после вакцинации.

ВЫВОДЫ

1. Иммунизация кроликов эмульгированной вакциной против пастереллеза свиней в период индуктивной фазы иммуногенеза (5-10-й день) сопровождается увеличением железа, меди, цинка, кобальта, марганца и магния практически во всех исследуемых органах и тканях. К концу иммунологической перестройки в организме вакцинированных животных (20-й день) количество исследуемых микроэлементов в органах уменьшается, за исключением костного мозга, где их содержание, кроме кобальта, было повышенным.

2. Формирование поствакцинального иммунного ответа у поросят на введение эмульгированной вакцины против пастереллеза способствует увеличению бактерицидной активности сыворотки крови, фаго-

г

цитарной активности нейтрофилов и уменьшению прироста живой массы животных в поствакцинальный период в среднем на 2 кг.

3. Вакцинация поросят и кроликов эмульгированной вакциной против пастереллеза на фоне дефицита в рационе железа, меди, цинка и марганца сопровождается угнетением гемопоэза, понижением бактерицидной активности сыворотки крови, фагоцитарной активности нейтрофилов, процентного содержания В- и увеличением Т-лимфоцитов в периферической крови и уменьшением превентивных свойств сыворотки крови по отнокению к Р.ти11ос1с1а в среднем на 10%,

4. Дополнительное введение в рацион животным сверх нормы на 25-30% глицерофосфата железа и углекислых солей меди, цинка и марганца за 7 дней до и в течение 7 дней после вакцинации эмульгированной вакциной против пастереллеза способствует повышению естественной резистентности, формированию более напряженного иммунного ответа и снижению потерь прироста живой массы животных в поствакцинальный период в среднем на 1,6 кг.

5. Более высокие дозы глицерофосфата железа и углекислых солей меди, цинка и марганца (сверх нормы на 200%), вводимые в рацион животным за 7-10 дней до вакцинации и в течение этого срока после введения эмульгированной вакцины против пастереллеза стимулируют бактерицидную активность сыворотки крови, поглотительную функцию нейтрофилов, но одновременно оказывают угнетающее действие на формирование поствакцинального иммунитета. Превентивные свойства сыворотки крови опытных кроликов по отношению к Р.ти^о-схйа. были на 17%, а коэффициент иммунологической эффективности на 7% ниже, чем у контрольных животных.

6. Железодекстрановые препараты ферроглюкин, микроанемин и ДИ5-3 при внутримышечном введении за 5 и 19 дней до иммунизации, одновременно с вакциной и спустя 5-16 дней после вакцинации эмульгированной вакциной против пастереллеза оказывают стимулирующее влияние на гемопоэз, естественную резистентность организма, но одновременно оказывают угнетающее действие на иммунный ответ. Наиболее выраженным негативным действием обладает микроанемин, а также железодекстрановые препараты вводимые до вакцинации и одновременно с вакциной.

7. Иммунизация поросят эмульгированной вакциной против пастереллеза после однократного и двукратного применения железодекс-трановых препаратов сопровождается формированием менее напряжен-

ного иммунного ответа. Причем образуется на введение вакцины микроанемина и ДИФ-З.

16 -

наименее выражена защитная реакция после одно и двукратного введения

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

1. Дополнительное введение сверх нормы на 25-30% солей Ре, Си, Ъп и Ми в рацион свиней за 7-10 дней до и в течение 7-10 дней после иммунизации им против пастереллеза для стимуляции иммунного ответа и снижения потерь живой массы в поствакцинальный период. Одобрено НТС и утверждены Главным управлением ветеринарии Минсельхозпрода 21 ноября 19Э0 г.

2. Сроки применения железодекстрановых препаратов поросятам при проведении вакцинации против пастереллеза с целью снижения их негативного влияния на поствакцинальный иммунитет (не раньше чем через 5 дней после введения вакцины). Одобрено Ученым советом БелНИИЭВ им.С.Н.Бышелесского в 1992 г.

Список опубпккоианннх работ по теме диссертация

1. Андоосик .Л.Д. Напряженность противопастерелдезного иммунитета при дефиците микроэлементов в рационе животных // Современные проблемы профилактики зоонозных болезней и пути их решения: Тез. докл. конф. Гродно, 1987. - С. 148.

2. Иванов Д.П., Андрссих Л.Д. Содержание микроэлементов в органах кроликов, иммунизированных эмульгированной вакциной против пастереллеза свиней // Вет.наука-производству. - Минск: Урад-жай, 1988. Вып. 26. - С. 101-109.

3. Андросик Л.Д., Иванов Д.П. Напряженность поствакцинального прстивопастереллезного иммунитета на фоне применения микроанемина и ДИ®-3 // Вет.наука - производству. - Минск: Ураджай, 1989. Вып. 27. - С. 117-123.

4. Андросик Л.Д. Влияние повышенных доз микроэлементов на напряженность поствакцинального иммунитета. / Ред.жур. "Весцг акадэм!! навук БССР" Серыя сельскагасп. навук1. - Минск, 1969,- 15 1. 5с. - Деп. в ВНИИТЭ агропрома N 527 ВС-87.

5. Андросик Л.Д. Влияние уровня микроэлементов на напряженность иммунитета против пастереллеза // Вет.наука - производству. - Минск: Ураджай, 1990. - Вып. 28. - С. 182-188.

6. Андросик Л.Д. Влияние повышенных доз микроэлементов на напряженность поствакцинального противопастареллезного иммунитета у поросят // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных : Тез.докл.конф. - Минск, 1990. -С. 91-92.

7. Андросик Л.Д. Состояние неспецифической резистентности организма вакцинированных против пастереллеза поросят на фоне дефицита и повышенных доз микроэлементов в рационе // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных: Тез.докл. конф. Минск, 1990. - С. 95-96.

8. Влияние препаратов железа на иммунитет против колибакте-риоза /Иванов Д.П., 'Гутковский A.A., Шешко П.М., Андросик Л.Д.// Проблемы научного обеспечения животноводства Молдавии: Тез.докл.конф. - Кишинев, 1990. - С. 136.

9. Андросик Л.Д. Неспецифическая резистентность и иммунный отЕет у поросят, вакцинированных против пастереллеза, на фоне дефицита микроэлементов в рационе // Вет.наука - производству.

-Минск: Ураджай, 1992. - Вып.30. - С. 69-74.

10. Андросик Л.Д. Иммунный ответ у поросят на фоне применения железодекстрановых препаратов // Технология получения и выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных животных и рыбопоса-дочного материала: Тез.докл.конф. - Минск, 1993. - С. 113-114.

11. Андросик Л.Д., Андросик H.H. Поствакцинальный иммунный ответ у поросят, обработанных железодекстрановыми препаратами // Вет.наука - производству. - Минск: БелНИИ агроэнерго, 1993. -С. 52-59.

12. Андросик Л.Д., Андросик H.H. Влияние микроэлементов на поствакцинальный иммунитет и устойчивость животных к инфекции // Ветеринарные и зоонкженерные проблемы животноводства: Матер. 1-ой междунар.конф. - Витебск, 1996. - С. 83.

РЭЗЮМЕ

Андрос1к Л1л1я Лз1м1трыяуна

Уплыу жалеза, медзо., цынку, марганцу i жалеза-дзкстранавых прэпаратау на паслявакцынны 1мун1тэт супраць пастералвзу CBiHefi

Ключавыя словы: пастэралез, хмун¿тэт, мхкраэлементы, жалеза-дзкстранавыя препараты, натуральная устойл1васць арган!зма, мар-фалаг1чны склад крывз., ахоуная уласц1васць сываратк1 крыв!.

Аб-ектам даследавання з>яулялл.ся белкя мышы, трусы i парася-ты, вакцынацыя эмульгаванай вакцынай супраць пастэралеза. Мзтай працы было вывучыць уплыу некаторых М1.краэлементау i жалезадзкс-транавых прэпаратау на фарм1раванне паслявакцынальнага супраць-пастэралезнага 1мун1тэту. Дасягненне пастаулянай мэты ажыццяуля-лася пастаноука доследау на 152 парасятах, 64 трусах и 1597 белых мышах.

Навуковая нав1зна даследавакняу заключаецця у тым, што упер-шыню вывучана размяшчэнне некаторых мхкраэлементау у органах тру-соу, вакиьшаваных эмульгаванай вакцынай супраць пастэралезу i абгрунтована Ф1з1ялаг1чнае знание гэтых змяненняу. Выяулена зна-чэнне недахопу i завышаных доз м1краэлементау у параунанн! з нор-май у рацыене жывелы пры утварэнн! 1мун1тэту. Вывучаны уплыу фе-раглюк1на, м1краанэм1на i Д1Ф-3 на паслявакцынальны супрацьпас-тэралезны 1мун1тэт.

На аснове вын!кау праведзеных даследаванняу прапанавана схема выкарыстання гл!цэрафасфата жадеза, вугляк1слых салей медз!, цынка i марганца с мэтай павкшэння напружанасцх паслявакцынаваль-нага 1мун1тэту i папярэджання страт приросту жывой масы парасят у паслявакцынальны пэрыяд, а таксама терм1ны прымянення жалезадэкс-транавых прэпаратау жывелам у час правядзення абавязковых прыв!-вак супраць пастэралезу.

РЕЗЮМЕ

Андросик Лилия Дмитриевна

Влияние железа, медк, цинка, магния и железодекстрановых препаратов на поствакцинальный иммунитет против пастереллеза свиней

Ключеые слова: пастереллез, иммунитет, микроэлементы, желе-зодекстрановые препараты, естественная резистентность организма, морфологический состав крови, превентивные свойства сыворотки крови.

Объектом исследования являются белые мыши, кролики и поросята, иммунизированные эмульгированной вакциной против пастереллеза. Целью работы было изучение влияния некоторых микроэлементов и железодекстрановых препаратов на формирование противопастереллез-ного иммунитета. Реализация поставленной цели осуществлялась путем постановки специальных опытов, проведенных на 152 поросятах, 84 кроликах и 1597 белых мышах.

Научная новизна исследований заключается в том, что впервые изучено распределение некоторых микроэлементов в органах кроликов, иммунизированных эмульгированной вакциной против пастереллеза и обосновано физиологическое значение этих изменений. Установлена роль дефицита и повышенных по сравнению с нормой доз некоторых микроэлементов в рационе животных при формировании иммунного ответа. Изучено влияние ферроглюкина, микроанемина и ДИФ-3 на поствакцкнальный противопастереллезный иммунитет.

На основании результатов проведения исследований предложена схема применения глицерофосфата железа, углекислых солей меди, цинка и марганца с целью повышения напряженности поствакцинального иммунного ответа и снижения потерь живой массы поросят в поствакцинальный период, а также сроки применения железодекстрановых препаратов животным во время проведения вынужденных прививок против пастереллеза.

SUMMAKY

The Effect of Fe, Cu, 2n, Mn and Fe-Dextran Preparations on Postvaccinal Immunity to Pas-teurellosis in Swine

L.D.Androsik

Key words: pasteurellosis, immunity, trace elements, Fe-dextran preparations, natural body resistance, morphological composition of blood, preventive properties of blood serum.

Test objects are white mice, rabbits and piglets immunized with an emulsified vaccine against pasteurellosis. The aim of the work is to study effect of some trace elements and Fe-dextran preparations on formation of immunity to pasteurellosis. The aim set has been realized in tests carried out with 152 piglets, 34 rabbits and 1597 white mice.

The scientific novelty of research consists in the fact that, for the first time, distribution of some trace elements in

N

tissues and organs of rabbits immunized with an emulsified vaccine against pasteurellosis is studied and phisiological importance of these changes is substantiated. It is determined a role of deficiency and over norm doses of some trace elements in diets of animals for formation of immune reaction. The effect of ferroglu-kin, microanemin and DIF-3 on postvaccinal immunity to pasteurellosis is studied.

On the grounds of research results it is proposed a scheme how to use ferrum glycerophosphate, cuprous, zinc and manganese carbonates to increase level of postvaccinal immune reaction and to reduce losses of liveweight in piglets after vaccination . Terms for use of Fe-dextran preparations in animals during carrying out of forced vaccination against pasteurellosis are suggested .