Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Ветеринарно-санитарные аспекты борьбы с маститом коров и повышение санитарного качества молока

На правах нукогыиа

дйодсщ. лида даитншш

аВТЕРИНАйЮ-САНИТАИШЕ АСПЕКТЫ БОРЬШ С МАСШТШ

когаа и повышение санитарного качвсгша шишка

I6.UG.U3, - Ветеринарная микробиология,

16.00.06, - Вегараларяая санитария и 9н0л0гея

Автореферат

диооертацид аа соаоканиа учзаой стеиаии доктора взтараяарных наук

вируООЛОГИЯ, эожзоотодогия, 1ШК0Л0ГШ1 а шдяунодогня

Иосква

1997

Работа выполнена в лаборатории санитарки «олояа я профи-пакгпки мастита Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии,гигиены и екологпи (ВШ1В0ГЭ),

Научлнй консультант - . доктор вотэринарннх паук В.М.'Цжов

Доктор ветеринарных наук,профессор М.П.Дргко (ВНЙИВСГЭ) Доктор ветеринарных наук,профессор В.А.Париков (ВШШИИФиТ) Доктор ветеринарных наук,профессор В.И.Слободянян (ВГАУ)

Ведущее научное упреждение - Саратовская государственная ачацомпя ветаранарной медицины ..

Защита состоится А. 1997 г.в Ж. ■час он

на заседали диссертационного совета Д.020.50,01. при Всероссийском нзучпо-иссдедоватояьоком институте ветеринарной санитарии, гягиянн и экологии (ВШГ.ШСТЗ)

Адрес: 1230(22, Москва, Звенш'ородедса.шоссе, 5 (ШИЙЗГЭ) С ялсс-'ртагшай модно ознакомиться в библиотеке ВДВШСГЭ

Офацпалышв огшоненти

Утекай секретарь дисоргат'лонлого совета

Л.П.Шшенова

ОБЩ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темц. Одной из важнейших задач отечественного животноводства независимо от форм собственности является на только увеличение объемов производства молока, но и, самое главное,повышение его санитарного качества, которое оказывает непосредственное влияние на здоровье человека, экономический потенциал хозяйств а предприятий молочной промышленности. Однако анализ закупок молока перерабатывающими предприятиями за последние годы свидетельствует о значительном ухудшении его санитарных показателей в связи о повышенным содержанием соматических клеток и микроорганизмов, механической загрязненностью, наличием ингибирущих вощаств.

Как известно, основным источником соматических клеток и остаточных количеств лекарственных препаратов в молоке, а также первичной контаминации его различными микроорганизмами являются больные маститом коровы (Архангельский И,И.,1974; Путовин В,И,,1974; Ивашура А.И.,1384,1991;Карташова Б,М.,1980;Когал Г,Ф.,Гориноиа Л,П.,1Э9и,\иогвинов Д.Д.,1992;Кэшбелл Д.Р.,Маршалл P.T.,I9bD;

Нeesc/íen W.W.,1936),

Мастит в последаша годы стал самым распространенным заболеванием коров на фермах во всем мире, которое сопровождается глубокими воспалительными процессами-различной тяжести течения в результате проникновения в молочную аелезу патогенных микроорганизмов, В настоящее время аз вымени больных майта^м коров выделено свыше 100 видов различных микроорганизмов, более половины которых относятся к патогенным стафилококкам и стрептококкам (Кузьмин Г.Н,, 1Э96;0ксамитный Н.К.,1988; Полянцев Н.И.,1983;Симецкий 0,A,,I99Ü; Солдатов А.П. и др.,1986,1991; Мс ДопаМ 1/,19а4;О»*0т^еД,1985).

В развитии воспалительного ироцесоа в вымени ваяяча значение имеет не только натогенность возбудителя, но и состояние р зис-

тентнооти организма животного в целом, а также молочной железы в частности. Всевозможные нарушения кормления я условий содержания коров, технологии доения, неудовлетворительный микроклимат в поме, шаниях, в которых складывается определенный дакробиоценоз с высок' патогенными штаммами возбудителей, резистентными к применяемым ле карственным препаратам, и другие неблагоприятные факторы приводят к снижению общей и специфической резистентности организма коров в различные физиологические периоды. Иммунодефицитнов состояние организма способствует усилению патогенности возбудителя, его быстрому проникновении.в молочную железу, выживания в ней и активном; размножении (Париков В.А.,Слободяник Б.И.,Сапожником Н.Д.,1988-1995; Ret'fec 6J978 -Jotte йД982 /VozcrossM С., 1996 « Kenny К. 1986 ; Waison Д.¿.,1988).

В системе мероприятий, направленных на ликвидацию мастита, наряду со своевременной диагностикой, особое внимание уделяется эффективной терапии и всесторонней профилактике.

Профилактические иероприятия должны быть нацравлены, в первую очередь, на устранение предрасполагай®» в маститу факторов и предупреждение проникновения в молочную железу патогенных микр< организмов. Особого вшшания требует санитарная обработка сосков вымени после доения и лечение больных маститом коров в сухостойный период о целью профилактики ег.о в лактацию. Однако в настоящее врейя ветеринарная служба не располагает достаточным количеством необходимых препаратов и данные мероприятия на фермах не bi полняются, что способствует существенному увеличено числа больт маститом коров.

При лечении коров в лактащ; тннй период все еще широко используют актибиотяки как отдельно, так и в сочетай-л друг с другом, или о сулы5днилаиидаг.ш. Широкое распространение получили в

нашей страна мастисаны А,Е, панищшшн, стрептомицин. Однако к антибиотикам часто и давно применяемым на фермах выработалась высокая резистентность возбудителей мастита, в результате чего резко снизилась терапевтическая эффективность этих препаратов (Краков Н.И..Родионов В.И.,1994,'Кузьмин Г.Н.,1У94;0ксамитннй Н.К., 1983; Гейдрих Г.,Ренк В.,1968; tllí Q. et ¿?f,I98I ; L'upk t M, 1982 V Кшгк е., 1987).

В связи: с возможностью попадания остаточных количеств антибиотиков и других лекарственных препаратов в молоко требуется разработка эффективных ускоренных методов контроля их наличия в ней, т.к. применяемые в настоящее время метода трудоемки и не пригодны для массового конгроля молока в условиях рынка, фермы, ветеринарных лабораторий.

Учитывая опасность поступления антимикробных препаратов в пищу людям, требуется наряду с ужесточением контроля качества молока на молочных предприятиях, собладаняем правил браковки его от леченых животных на фермах постепенная, замена этих препаратов на более безопасные средства и методы терапии. Главное внимание не~ обходимо сосредоточить на изыскании а разработке новых эффективных продаратов на основе антибиотиков для лечения коров только в сухостойный период и неантибиотических биологических препаратов и биофизических средств И;методов - в лактаЦив,

Средства и методы терапии долннн обладать не только широким спектром антимикробного действия, оказывать противовоспалительный, обезболивающий эффект, но и стимулировать или нормализовать защитные функции вымени и организма коровы в целом.

Разработка и внедрение эффективной системы терапии и профилактики воспаления вымени у коров, основанной на применении в сухостойный период-новых, антибиотических препаратов, а в лактация -

биологических и биофизических средств п методов, - а также 'ускоренных методов контроля молока на присутствие 'антибиотиков и других пнгибирунцпх веществу даст возможность существенно снизить-:урй- . вань настега на фермах и, том саныа, повысить сааатарлое качоотво молока и молочных продуктов.

С учетом вышеизложенного основной целью асбдодовашай гхвла-лось изучение уровня заболеваемости коров маститой па формах' п комплексах Нечерноземной и Цонтрзльно-ЧарцозшшоЗ й'ба Росопл8раз-работка эффективных прапаратов, биофизических срадсга а катодов лечения, методов оценки их тараиевтичзокод зффойтйвноот п санитарного качества молока.

В соответствии с этш на разрешение бнла постазлшш следующие задачи:

1. Изучить уровень, заболеваемости поров маститое на фдрюх

и комплексах Нечерноземной е. Цан5срально-Чзрноэеь.йюй воа Росспй-

*

ской Федерации-а определить основано возбудители твтяха1>'

2. Изучить в -сравнительно:,! асаокто яочоблуа эффзктпшооть применяемых антибиотических прапаратов ара кастате коров;

3; Разработать биологическао цатода. шадакащш остагошк'-количеств антибиотиков, в молоке а препарат для оцродвязш! в ти ннтибарунцих веществ. '• ' •

й. Разработать высокоэффевтнваыэ щюпаргши дролонгарогглно-го действия на основе антибиотиков дазз яечоаая а арорлактшш мастита коров в сухостойный период.

5. Разработать новне средства и метода падатабаотичаского лечения коров, больных маститом, в лактационный парзод на основе ферментов микробной клетки, растительного сырья, лазерного излучения К КВЧ-ПОЛЯ. . " ;

6. Изучить влияние лазерного излучения, антибиотических а

бялдогнческжх препаратов на имыунодогжчеокие а цитологические показателя крова и секрета вымани здоровых и больных маститом ксриз 7. Разработать научно обосяованнув систему лечения и профилактики мастита, коров на основе рационального применения новых препаратов, биофизических средств и методов.

^аучяая новизна. Определены стейень распространения и уровень заболеваемости коров маститом, роль микробного фактора в этиологии а условиях молочных фара и комплексов Нечерноземной и Цьнтрадьно-Чернозеыной зон Российской Федерации.

Научно обосновано я экспериментально подтверждено новое перспективное направление в лечении и профилактике мастита у дан ^аруоднх воров биологическими препаратами на основе фериентов макробиоЗ клетка, биологически активных вещеотв раотительного происхождения, а такав биофизических средств и матодов.Разработаны препараты лизомаст, лидем, валатер,. аниксид, а также способы лечения мастита у коров цря помсад приборов "Вега-МВ". а "Пен -хивр". . '

. Впервые разработаны новые принципиальные подхода а оценке эффективности применения противомаотитних препаратов, биофизических средств я методов на основа изучения иммунного состояния выменя й воего организма коров.

Впервые в йашей стране, раЗра(Зотана: Лтовая форма препарата для определения ингябиругщйх вещеотВ-.в молоке, ноторая сущебт- , веяно снижав*, трудовые затраты на проведение анализа при. одновременном повышении чувствительности метода. ^^

Предложен ускоренный метод определения в молоке остаточных количеств антибиотиков о использованием сухой питательной среды, позволяицнй в течение 4 ч выявлять все приоутотвущие в продукта антибиотики.

Для леченая и профилактики мастита в сухостойный период предложены два противомаститных препарата пролонгированного действия (апрамаст, галиомаст) на основе новых высокоэффективных антибиотиков,позволяющих снизить заболеваемость коров не только в сухостойный период, но и в последухщую лактацию.

В итоге выполненной работы научно обоснованы принципы терапии и профилактики мастита у коров с применением новых антибиота чеоких препаратов пролонгированного действия в сухостойный период и неантибиотических биологических препаратов, а также биофизических средств в методов в лактацию.

Предложены научно обоснованные высокоэффективные схемы терапии а профилактики мастита о помощью новых препаратов в биофизических приборов, снижающие затраты труда в расходы на лечение больных маститом коров.

Научная новизна работы подтверждена 3 патентами (Ж8 2058781, 2058782, 2064293), одним свидетельством на полезную модель (&55Е одним положительным решением на выдачу патента (й 95Ш417/13 от 03.07.95.).

Практическая значимость^ Для лечения и профилактики различных форы мастита у лактврупцих коров без применения антибиотико! предлагаются следулцие биологические препараты: лизомаст, лидем, валетер, анаксид, а также биофизические средства - лазерный прибор "Вега-МВ", прибор на основе КВЧ-поля "Кентавр".•

Для лечения и профилактики различных форы маотита у коров I сухостойный период рекомендованы препараты пролонгированного де{ ствия апрамаст и гелиомаст.

Основные научные результаты исследований вошли в следупцие документы:

- Угверящанные Департаментом ветеринарии: ТУ 9358- 024 -

00494143-9? и наставление'-во применение. препарата дшзомасч' и?» 12,96.); ТУ 9346-020~0049414а«Э6 и временное наставлении но применению адраиаста (26,С/7.-9о,'); ТУ 9346-02.1.-01)494143-96. и временной Наставление по пришне'ншй ге;шоиаста ('26,07.96.) ;ТУ УЗИЬ-ШО 22Ь43549-Э7 н наставление но применению валитера (111.04,97.); 'ГУ 931и-Ш4-0ии08064-97 и вреглсмшоо наставление по применении прел:; рата аниксид (9.10.97,); вршленаыо наставления по применению в Еемршшрйи- Лазерных аппаратов "¡ш'а-ШЗ" ilfi.U9.95,) ,0Л~2Ш,М-01® (17.07.96.),"ДОДТА~МВЙ (27.12,95,),С'Ш-3 (23.12,95.) и прибора "Кентавр" на основе ШЗЧ-иоля (28,07.93.);

- ОСТ 10 080-95 "Цолоко коровье.'Требования при производства молока для продуктов .Детского питания;'

- Утвержденные Главживотноводотва МСХиП РФ, : Система мероприятий по устранению основных-этиологических факторов возникновения мастита ( вклотена в проект рекомендаций по борьбе с ыаотитоа коров- представлен: в Департамент ветеринарии М01и11 РФ); ГУ на пра-

• парат для. определения инги'бируидих ввщойтв в ыолоке (05,01,95,);;

- Одобренные НТС МоооблаГропрома: Рекомендации но; оаатиш мероприятий, направленных на предотвращение попадания в молоко ингибирувдих веществ (2U.I2.9u.); .

- Утверзденные директором В;£[ИЬСТЭ:йотодика определения шь> гибирунцах веществ при. помощи препарата с индикатором тионин и технологическая инструкция по производству препарата для определения ингибирущих веществ в молоке, (22,12.94,); иетодичеокив указания по микробиологическому методу определения антибиотиков в молоке (II.11,96,),

Апробация оаботы.Основнце результаты иослптшваний л,олпяянц ла совотско-4ишшндском симпозиума по. проблема мастита (Ленинград, 199и); Бсаоошнш. каифиранциях (Воронеж,1986,1988;Навоч9р-

касок,1988); Всероссийских конференциях (Москва,1993,-Чебоксары, 1994;Воронеж,1996,1997); межвузовских конференциях (С.-Датербург, 1995,1996); Всаросбййских. семинарах по методам анализа молока (Российская научно-производственная ветеринарная лаборатория,Коси но,1993,1994,1995); Ветфарысовете (1993,1995,1996,1997); заседаниях координационного совещания во ВНИИВСГЭ .(1989,1990)'} мвжлабора-торном совещании сотрудников ВНИИВСГЭ (1997);

Разработанные способы лечения мастита у коров экспонировав лись на ВВЦ в 1993,1995,1996 гг., автор был утварвден участником ВВЦ в награжден 3 медалями "Даурва» ВВЦ",

¡Ш2дйШШВ.По теме диссертации опубликовано 31 научная работа, получено 3 патента на препараты лизомаст, апрамаст, гелиомаст одно свидетельство на полезную модель (прибор "Кентавр"),одно положительное решение на выдачу патента на препарат аниксид, подало 2 заявки на предполагаемое изобретение (лвдем,валетер).

Основные положения, выносимые на задаст:

- распространение и этиологические агенты иастита коров;

- научное обоснование и разработка биологических.а биофизических средств для лечения и профилактики маотита у коров в лакта ционлый период;

- антибиотикотерапия коров в сухостойный период и научное обоснование ее профилактической эффективности в период лактации;

- обоснование необходимости и разработка ускоренных методов контроля качества молока на присутствие антибиотиков и других яи-гибирувдих. веществ; *»

- научно обоснованная система лечения и профилактики мастита коров на основе рационального каймановая новых препаратов и биофизических средств и методов.

Об>ем и структура лисозатшм. Диссертация яз:;го«нл на 333

страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 4-х. глав собственных исследований, обсувдвниь получил ных результатов, выводов, предложений для практики, списка лит ери-туры, включающего 242 отечественных и 240 иностранных, источников, прилсдения. Работа иллюстрирована 59 таблицами, 9 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа проводилась в период с 1975 по 1997 гг. в лаборатории санитарии молока и профилактики мастита ВШШВСГЭ, на молочных фермах и комплексах Московской, Липецкой, Архангельской, Орловской -и Тверской областей. Исследования выполнены в соответствии с государственными теглез: 06,12.;08.14,;0.51.09.08.07,; 03,01,02'. ¿05. 24.

Выявление уровня заболевания коров, маститом'осуществляла в соответствии с нормативными, документами - "Методическими указаниями по: диагностике, лечению и профилактике мастита у корови(1У£2) й "Рекомендациями по борьбе с маститом коров" (1983): с помощью клинических методов, реакции о быстрым маститным тестом, пробы отстаав'ания, бактериологического анализа секрета вымени. Врего

было, обследовано ¿6521 лактирующая а-1404 сухостойных коров, от

. »

которых, для лабораторного анализа было взято 4670 образцов секрета вымена.

Бактериологические исследования секрета вымани коров прово-дали согласно "Методическим'указаниям по диагностике, лечению и профилактике мастита у коров" (1972) и "Методическим.указаниям по бактериологическому исследовании секрета вымени у коров"(1983),

Для дифференциации 1624 культур выделенных стафилококков использовали тесты по определению плазмокоагулирующей способно-

сти, гемолитической и ДНК-азной активности.

Определение серологических груш 850 культур стрептококков проводили следующими методами: реакцией преципитации по Леасфилд, КАШ-тасту,тестам Шёрщана. - '

Чувствительность 397 ввделенных от больных маститом коров микроорганизмов к антибиотикам определяли общепринятым методом стандартных дисков.

Диагноз на заболевание коров■клиническим маститом ставили на основании выраженных клинических признаков: увеличение четверти, болезненность при прощупывании, покраснение, уплотнение воспаленной четверти, нарушение молокоотдачи, изменение внешнего'вида секрета вымени, К больным субклинической формой мастита относили коров при наличии: положительных реакций на быстрый мастит-няй тест и по пробе отстаивания, или положительной реакции на ди-агностикум и присутствии возбудителей мастита в секрете.

Сравнительное изучение" терапевтической эффективности 9 антибиотических иностранных и отечественных препаратов осуществляли на 237 коровах с использованием общепринятых методов обследования на мастит. Для определения сроков браковка молока при лечении коров, больных маститом и эндометритом, было проанализировано S5G образцов секрета вымени.

Для изучения сгтуацгх по ~агразнению молока янгибируидаш веществам било проанализировано 1222 пробы молока из хозяйств редуктазанм методом цо ГОСТ 23454-79, а также 130 образцов - по ГОСТ 24D35-80 (сода),ГОСТ 24066-80 (аглмиак),ГрСТ 24(67-80 (поре-кясь водорода), метода Коряжнова (формаяадвгйИ).методами-ВШИВСГ (пенициллин,тотрадяклкнн, страптомяцин).

При .разработка -методов оаг-здвлеагл антибиотиков и-других -ui глбгрущид г рабств пспольэогали образцы молока. о лскусственнык

внесением ряда ангабирущйх веществ.и сборного из хозяйств.Аля сравнительного иоштания методов определения aHra.6apyEmnjc ь.-*цаотъ в молоке использовала.редуктазный метод по ГОСТ 23454-79, зарубежные . метода с применением готов....; форм препаратов - Интертест, Далвотост-П, АШ Oxoid-icst t а антибиотиков - Абаотест и Под»-гост.

При создании готовой формы препарата для определения инги-бйрующих веществ в молоке было испытано 17 вариантов, 3 режима хранения препарата и 3 реннма его лнойшшзации. Препарат был ; испытан на 708 образцах колона из хозяйств.

Приразработке ускоренного метода определения в молоко антибиотиков дая сравгштельаого анализа была использованы метода Меи-дуаародной:молочной федерации я Минздрава РФ. Испытано 14 вариантов сухой питательной среды, 4.-тест-микроба; Отработанный ускоренный метод был апробирован на 304 проба:: сборного молока,

-Лосладовайия по созданию протавомаститных средств проводила в несколько этапов. Iîa первом этапа .определяли-антимикробную' активность койпонентов и их композиций а отношении основных возбудителей мастита,4 как алузё'&шх, так и"выделанных от большое таоти-тоц koçob, методом.сарайных разведений по йдатраввой. ,Семенову G.ii, (1965), . -

. Протйвомастатные препараты разрабатывала пра участии сотруд-яиков И^татута биохшлщ й.физиология микроорганизмов РАН, Института по изысканию новых антибиотиков РАМН,?Пермской фармакадамаа, и НПО "Давос-А".

Токсические;свойства препаратов изучала в'соответствий с ут-'верздвнныма'нормативными документами ; острую товсачяость определяли да белых иьшах.-'коано-резорбтивное, пожно-раздраааетцеа дай-'стваа - на кролаках, раздражающее .-дойотвва' - аа кроликах, нзро-

вах. На каждое исследование брали не менее 3-5 животных. Все: было гспользовано 93 мыши, 10 кроликов,17 коров.

Общую бактериальную обсеманенность кожи сосков вымени д< после применения протшзомаститных мазай валетер и аниксид пр< дили методом прямого посева на питательный агар смывов с кож. покровов сосков и их разведений.

Терапевтическую и профилактическую эффективность предла шх препаратов изучали в производственных условиях на корова больных субклиническим и клиническим маститом : лизомасг (34 ров/444 четверти), лидем (370/475), апраыаст (54/88), гелиом (52/84), валатер (50/200), аниксид (24/34).Эффективность пре гаемнх режимов биофизических методов лечения больных мастито тавотных определяли на 158 коровах (255 четвертей) при испол вании лазерного прибора "Вега-МВ" и 16 (17) - прибора "Кента на основе КВЧ-поля.

Оценку иммунологического состоящая организма и молочноî лезы здоровых и больных 'маститом коров при воздействии пред; шх средств проводили на животных опытных и контрольных rpyi (не менее 3-5 голов в каждой). При выяснении влияния препарг на молочную железу здоровых коров исследование секрета выми осуществляли до их введения (фоновые значения показателей) i тем через 6-120 ч.

В случае лечения больших, маститом лактирунщих коров ям логический статус молочной явлены определяли через I-I4 дне организма - через 5 дней.

Влияние препаратов пролонгированного действия апрамаст гвгмомаста, вводимых пнтрацистеукально в период сухостоя, D уровень заболеваемости маститом и состояние eciecr венной/г« •••еиуаости определял» на иротялнт;« 5-масяп№ г^ола.^югееЛ д."

циз в сравнении с. контрольными здорошш животными.

В секрете вымени и крови определяли: количество иммуноглосу-лилов классов в,Ы,А, методом радиальной ишунодаффузии с использованием моноспецифических сывороток крупного рогатого скота ко Нанчияи (1965); фагоцитарную активность по Гостеву B.C.(1964); фагоцитарный индекс и активность вычисляли то общепринятой методике; количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу - по Кудрявцеву A.A..Кудрявцевой Л,А. (Г973). Дополнительно в секрете вымени определяли активность лазоцима-LI по Мутовину В.И.{1974), количество соматических клеток методами кашрным и Прескотта-Брнда, а & крови - бактерицидную активность сыворотки : фотонефалиметрл ческам методом по Смирновой Q.B.,Кузыишой Т.А. (1966).

Определение классов иммуноглобулинов проводили в лаборатории иммунологии ВИЗВ.

Ьыполнено 35Uü иммунологических и цитологических анализов при исследовании 470 образцов крови и секрета молочной иелезы.

Оценку результатов лечения больных животных осуществляла через 5-7 дней при помощи бактериологических и клинических методов, исследования.

Статистическую обработку полученных данных проводили по методике Садовского H.B. (1975).

2.-РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЦЦОВАНИЙ

2,1, Уровень заболеваемости коров маститом и этиология воспаления

В период с 1975 по 1997 гг. проведены исследования по выяснении благополучия ферм по £:аотиту коров в ряде областей Нечерноземной и Центрально-Черноземной зон России - Jockoeckoü, Архангельской, Тверской, Липецкой и Орловской. Установлено, что в

среднем за отот период заболеваемость маститом составила-14,23^ сряди лакирующих коров и 29,2% - в сухостойный период. В Лактацию соотношение клвйического й субкдиничеЪвого масткта находилось в пределах 1:1,54, тогда тв в сухостойный период на один' случай субклинического мастита приходилось 4,78 случаев клиниче-окого.

Рис;1 Уровень заболеваемости лактирупцих коров маститом на протяжении 1975-1997 гг»

** 14..

к) е-1 о о Ч о

1 10

3

э

12 10 +

8

6..

4

г.:

~Вг£г

"ЖЕ-ё"

"Года*

клинический —о— субклинический - - раздражение мастит мастит

Как видно из данных рис, I, отмечено существенное возрастание числа случаев заболевания'Актирующих коров клиническим маститом с 2,12$ в 70-е года до 9.80,,: - в 90-е; н преобладание клн~ '¿ачесйого воопадешая вымени над субклиническим (1:0,65). Анализ ситуации отдельно по хозяйствам показал, ,что-ва "некоторых фер-шх чаще регистрировала клинический мае ит, щ^чем в запущенной форме, а на других - наоборот,болыга** процент йиво'ших выяышн с субклизячвеким'воспалением вякяип,

льтятн исследований. по нчкеиешш бшТОрЛОЛУГ^ЧвСКОГО

статуса чогвертей вымзни коров, представленные в таблица 1,сввдв-ттгльствувт о той, что оснсвшми возбудителями мастита в ла.-гацв-оншй'и сухостойный периоды являются стафилококки, причем, на дола золотистого приходилось соответственно 29,06 и 40,66$ от числа выделенных культур микроорганизмов, а коагулазоотрицательных - 34,65 и 40,29$. Стрептококки в лактационный период составляли только 35,24$, а в сухостой - 19,05$ случаев находок, причем, с годами резко снизилось число случаев выделения как агалактпйно-го стрептококка, так а стрептококков других серогрупп.Так, если в 70-е года агалактийный-стрептококк обусловливал 31,05$ случаев мастита животных, то в 90-е годы - только 11,25$.

В. лактацию субклинический мастит почти в одинаковой пропорции был обусловлен золотистым и коагулазоотрпцатадьным стафилококкам, агалактийным стрептококком,тогда как в'сухостойный пе-' раод 'преобладающим микроорганизмом бил коагулазоотрацатвлышй стафилококк-- 55,56$ от числа ввделенных культур микробов.При клиническом мастите основным возбудителем был золотистый стафило-воккг40,55 и. 48,95$ соотваствешю,а у клинически здоровых коров -коагулазоотрицательный стафилококк - 42,94 и 63,16$.

Для выяснения чувствительности выделенных от коров возбудителей ггйстита к ряду, антибиотиков испытано 262 культуры стафилококков и 135 - стрептококков. Проведенные'исследования показали, что к бг чьщинству антибиотиков указанные микробы были чувствительны в 60-96$ случаев. Отмечено, что с кяждьгодом чувствительность стафилококков к пенициллину снижалась:если в 70-е годы ба-ло 51,83$ устсйчивпх штаммов,то в 90-е - уже 60,38$.Такао сниаа-лась чувствительность стафилококков к стрептомицину - с 70,12$ до 57,14$ соответственно, хотя процент резистентных к нему стафн-. лококков оставался примерно на одном уровне.Среди стрептококков

Бактериологический статус четвертей вымени коров при мастите

Таблица -1

Бактериологический статус ! четвертей вымени Г

ГТГГП и гТ т Л** '

■Д9ШД,

лактационный

сухостойный

Количество исследованных проб секрета выкени

Выделено культур микроорганизмов : _ всего процент

Из них:

, золотистый стафилококк: всего

процент

коагулязоотрицательные стафилококки: всего

процент

агалаятийный стрептококк: всего

процент

стрептококки других серогрупп: всего

процент

Примечание: числитель

знаменатель -

4130

2202 53,32

640

15.50 29,06

763

18*42

34,65 481

317

ът.

14,40

540

273 50,56

III 40,66

ПО

20.37

40,29

42

7

,3£ 10 : 3,66

процент от числа исследованных проб

процент от числа выделенных микроорганизмов

увеличилось число устойчивых штаммов к стрептомицину,неоаицину, мономицину - соответственно с 14,28 до 66,7$.

Поскольку в последние года у нас в стране основными терапевтическими средствами были мастисаны А,Е, мастицид, имешие в своем составе указанные антибиотики, то этим можно объяснить не-п.^ктявность лечения коров, больных масгйтом,. особенно стафилококковой дгпологии, о чем свидетельствуют дальнвйм-'о. исследован:; г сразите чьи?« г'слекга отечественных и зарубежных •лрепа.ратэв.

2.2. Сравнительное изучение терапевтической эффективности рада антибиотических препаратов при мастите коров

Для выяснения терапевтической эффективности применяемых антибиотических средств проведены сравнительные испытания отечественных Сыастиоан-А, мастидид) и иностранных (гентамаст, рилексин -200, клоксаколя, оинулокс, тетра-дельта-оуспанзия, линкомицин-4) препаратов. Испытания их провели на 251 корове с серозным,са-розно-катаральнш', катаральным и гнойно-катаральным маститом.

Выполненные исследования показала преимущество зарубежных прзпаратов перзд отечественными по уровню, излечивания больных животных - 83,3-100,0 а 71,4-75,0$ соотва'стввнно. При острых формах серозного мастита эффективность мастиоана-Д и иностранных препаратов; была одинаковой - 100$, но при усилении тяжести воспалительного процесса процент излечивания животных отечественными препаратайа ОШ на уровне 60,0-66,7$* тогда как иностранных -76,5-400,1$. Это. Объясняется тем, что в состав наших препаратов входят давно применяемые антибиотики (пенициллин, стрептомицин)» в которым ыакрббрганизыы Приобрели высокую устойчивость. В состав же иностранных препаратов включены антибиотики, получившие распространение . лишь в последние годы - клоксациллин, гентамицин, амоксйциллин, линкомицин, новобиощШ и др., что а обусловливает нх шсокую эффективность. '

Указанные препараты обеспечивали устранение возбудителей ■ мастита посЛа курса лечения в пределах 54,5-100,0$, причем нан-высшра эффективность отмечена в отношении стафилококков. Так, число случаев выделения золотистых отафалококхов было снижено на В7,18/{, коагулазоотрицательных отафалококков - 81,13$, агадактай-ных отрептококков только на 63,64$. Наиболее эффективными в отношении стафилококков были синулокс (86,67$), линкомишш-Ф (87,1%),

рилексия-гоо; (87, Б%).

Изучение эффект^нооти отечественных препаратов показало, что ликвидация возбудителей мастита в вымени посла окончания печения была в пред одах 51), О - 66,67$, особенно трудно поддавались излечиванию коровы с наличием в молочной железе стафилокок-ков (55,5650'. \

2.3; Изучения влияния лечения коров при мастите и эндометрите на качество молока

Одними ИЗ' наиболее распространенных заболеваний коров являются мастит и эндометрит, болея того у 50^ коров, больных эндометритом,, часто диагностируют мастит. Для лечения животных о данными'. заболеваниями применяются различные хлмиотарапввтически'? препараты, в том числе и содержащие антибиотики, поэтов при их использовании необходима обязательная браковка молока.

При испытании .вышеуказанных противомаотитных препаратов и II схем лечения коров с эндометритом определяли сроки выделения остаточных" количеств антибиотиков с молоком..

Установлено, что при лечении коров с маститом требуется браковать молоко после окончания курса;терапии в течение 1,5-5 дней.. Следовательно, в случав нвсобладвния этих ороков возникает опасность попадания остаточных количеств препаратов в пищу лвдям.

Анализ данных по изучению длительности наделения препаратов о молоком при лечении коров с эндометритом показал, что почти во всех случаях оно содержало ингибирупцие вещества уже в слздуипую после введения препаратов дойку, при этом их величие устанавливали в течение 3-12 доек, а антибиотики выделялись на протяяешш 3-4 доек. .

Все это свидетельству«? о том,что при леченк.п короп с мае -

титоы и эндометритом возникает опасность загрязнения молока лекарственными препаратами, наиболее опасными из которых явля^л'оя антибиотики. Кроме того, не исключается вероятность применения антибиотиков для лечения животных при других заболеваниях.

2.4. Разработка методов определения антибиотиков и других ингибирущих веществ в молока

В связи о тем, что до настоящего времени антибиотика н другие ингибирупцие вещества еще широко применяются в ветеринарии, требуется проведение периодического контроля по выявлению их присутствия в молоке. Существуете в нашей стране методы Средуктаоный а диффузии в агар) трудоемки и не пригодны для проведения массовых исследований в условиях ферм,молзаводов,рынков н ветеринарных лабораторий. В связи с этим возникает необходимость разработки эффективных ускоренных методов контроля качества лолока на присутствие в нем ингибирущих веществ, в том число в антибиотиков.

: 2.4.1. Определение уровня загрязнения молока ингибирущици веществаЬш

С"целью установления частоты загрязнения молока ингибируици-ыа веществами была проведены исследования в хозяйствах Истринской зоны датского питания. Для выявления в молоке ингибирупцнх веществ использовали редуктазный метод по ГОСТ 23454-79, а антибиотиков - метод диффузии в агар. Установлено, что ингибирупцие вещества были обнаружены в 10,64$ проб молока, причем на долю антибиотиков приходилось 2,45$ ила 23,12$ от числа образцов о ингибиторами. Природу остальных ингибирующих веществ на удалось выяснить.

Дифференциация присутствующих в молока антибиотиков показала, что:чаще всего обнаруживали пенициллин (59,26$ проб), стран-

томипин (22,22$) и тетрациклвны (18,52$),

Низкий процент определения природы ингибитора возможно объ-яояяэтоя тем фактом^ что для анализа положительных проб использг вали методы ди^врвнцированно^о определениятольно пенициллина, стрептомицина, твтрациклинов, тогда как в ветеринарии применяется большее число антибиотиков. Следовательно, для более полного вцяснения вида ингибитора требуется применение ряда методов для выявления конкретного антибиотика, что практически невыполнимо. Для этих целей целесообразна разработка универсального метода, позволяющего выявлять по возможности все антибиотики, которые применяются в ветеринарии для лечения больных животных.

2.4.2. Микробиологический метод диффузии в агар для определения в молоке антибиотиков

Учитывая вое вышесказанное,' были проведены исследования по разработке ускоренного метйда определения в молоке антибиотиков. В результате проведении щсодадоваяи! ро 'Чувст-

вительного тест-микроба, возводящего выявлять в молоке максимально широкий спектр антибиотиков, установлено, что наиболее подходящим для этих целей является Вас, rieaiotAec тор Л ¡ ¿Vr ifax. raCioíoCaett's С-953. Поскольку в нашей стране данный теот-микроб отсутствует, были проведены сравнительные испытания 3 штаммов Bao. steatotfiti^op^i Cus отечественной яоллея-цжи и штата С-953 яа образцах молока о искусственным внесением ряда антибиотиков. Из испытанных штатов для дальнейшей работы был выбран шташ BKMB-5I0, не уступавший по «Твоей чувствительности общепризнанному штамму С-953,

• Обшеяявестно, что большие трудности в проведении анализа представляет приготовление питательных г.рчд, от качнсгва которых во многом яавяоит чувствительность метода.Нл порвом ->тяпв глхжо--

дала исследования по подбору состава сухой питательной среды. Для этого в качестве компонентов были использованы пептон,дрожжевой экстракт,натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузаше-щенный, глюкоза. Всего было испытано 14 вариантов питательной срады.Основными показателями пригодности среды являлись чувствительность метода, время получения результатов'.анализа и четкооть зон аагабпцаа.

Наиболее подходящим оказался вариант № 12, содержащий дрожжевой экстракт, хлористый натрий, глюкозу пра рН'7,1>0,1. Данный ооотав позволял выявлять в молоко 0,0025-0,005 ВД/ем3 пенициллина, 0,5-1,0 наг/см3 стрептомицина, 0,1-0,25 мкг/см3 окоитетра-цпкдппа в течение 4-5 ч. '■

Пра отработка уоловай проведения анализа изучали влияние количества агара, теот-культуры, температуры анкубацаа на время шяучзнля результатов г чувствительность метода. Установлено, что для получения четках зон; пнгабпцяи • а хорошего (лакройного га-ооаа исобходс^о ваооить 40 шш опор Вас. гт^аюЬкегторА! ВШВ-^510 ца I см3 питательной срадш В чашка Петри вносят по 11+ I ег5 зспшшаоа срэды. Иакубацая чшив пра 62+2°С в .течение 4 ч.

. В сеязй о тем, что а последуемой молоке могут присутствовать другао аагабарусцае ведоства, определяла чувстватзльнооть разработанного цатода даффузна в агар на пробах о искусственным внооенаем ряда антпбзотаков, аульфанялагтдов, ндтрофуранов,химических в,ещэств.Йсследованая молока проводили по трём методам: предлагаемым, Иаздународной молочной федерацаа и редуктазным по ГОСТ 23454-79,. Проведенные исследования показали,высокую чувствительность предлагаемого метода к антибиотикам, которая существенно не уступает международному методу а выше, чем у редунтазво-го. Так, он позволял.выявлять в молоке и,0С25-0,005 ВД/см3 пени.-

циллвна; 0,5-1,0 мкг/ом? отрептомицина;0,1-0,25 - тетрациклина, окситетрациклина? 0,05-0,1 - хлортетрациклина, эритромицина;0,25 - 0,5 - нвошцина;2,5 мкг/ом3 - левомицетина. К другим ингибиру-кщим вещеотвам (сульфаниламидам, нитрофуранам, химическим веществам) испытанные метода диффузии в агар показали низкую чувствительность по сравнению с редуктазным методом. Это объясняется тем, что данные вещества хуже диффундируют в агар, чём антибиотики, Химические вещества улавливаются методами диффузии в агар в таких концентрациях, что их можно выявить органолептически,т.е. тех/- которые нереальны в практике.

Предлагаемый метод позволяет выявлять более широкий круг антибиотиков, чем референтный метод Минздрава РФ, пригодный для определения только пенициллина,стрептомицина, тетрациклинов.Кро-ме того, он снижал трудозатраты^ проведение анализа и время получения результатов - 4 ч йротив 16-18 /ч..

Разработанный метод апробировали на сборном молоке из хозяйств, давшим положительную реакцию на присутствие ингябирующих веществ по ГОСТ 23454-79. Всего было исследовано 708 проб молодка, из которых 173 (24,44$) содержали ингибиторы. Расшифровка

. что. "

природы ингибирувдих веществ показалЗуД»41% проб (или 58,06% от тасла положительных) содержали антибиотики, а 1,98$ (8,09$) -химические вещества: соду (0,99^), аммиак (0,56$) и формальдегид (0,42$).

Результаты проведенных исследований указывают на возможное попадание антибиотиков и других ингибирующих веществ в сборное молоко и необходимость осуществления контроля его на присутствие в нем не только антибиотиков, но и ингибиторов в целом.

2.4.3. Биологический препарат для определения ингибирущих веществ в молоке

. Для успешной борьбы с загрязнением молока ингибирущими веществами требуется разработка и в^эдрание в практику ускоренных эффективных методов их выявления. За рубежом для этих целей предложены редуктазные методы на основе использования готовых форм препарата, что позволяет существенно снизить трудозатраты на проведение анализа. Подобных препаратов в нашей страна нет, поэтому была поставлена задача,по его разработка.

В связи с тем, что использование споровой тест-культуры на дает полного представления о пригодности молока для производства молочнокислых продуктов, были проведены сравнительные испытания ряда тест-микробов с целью определения их чувствительности к ингибиторам, скорости кислотообразования в зависимости от их количества. На основании выполненных исследований для дальнейшей работл был взят термофильный стрептококк,активаторы роста (пептон,глюкоза) , отработана концентрация тест-микроба в препарате (0,7 см3 культуры, предварительно выращенной в течение 15 ч в термостате при температуре 12-43°С).

В качестве показательного индикатора был избран тионин,который давал лучшие результаты из 28 проверенных не только по цветовой гамме, но а отсутствии отрицательного« влияния на рост теот-иикроба. Для получения четких результатов анализа в 10 см3 молока необходимо было вносить 0,05 см3 0,5%-у го раствора тионина.

3 связи с тем, , что готовая форма должна быть подвергнута лиофилизации, была проведена работа по подбору защитной оредн, которая бы позволяла максимально сохранить жизнеспособность микробов и не влияла бы на течслиа реакции и чувстЕительность.На основе ряда'компонентов была создана.защитная среда, содержащая

пептон, сахарозу,дрожжевой экстракт, лимоннокислый натрий.

Диофилизацию готовой формы препарата вели по трем режимам. Оценку качества препарата после высушивания осуществляли на протяжении 12 месяцев хранения его при комнатной температуре, в холодильнике и морозильной камере. На основании проведенных иосле-

выбран

дованийуЬледукщий режим лиофилизапии: замораживание жидкого состава препарата при -50°С в течение 3 ч, период сублимации не более 12 ч, дооушивание при + 25°С в течение 4-6 ч. Лучшими условиями для хранения препарата была холодильник и морозильная камера, что не приводило к снижению чувствительности метода и увеличению времени анализа даже после 12 мес..по сравнению о исходными показателями сразу после лиофилизации.

Для изучения чувствительности предлагаемого препарата к ра; личным ингибирующим веществам в сравнении с тестированным редук-тазним методом использовали молоко с искусственным внесением данных веществ в различных концентрациях. Полученные результаты приведены в таблице 2.

Данные,представленные в таблице 2, показывают, что готовая форма препарата по своей чувствительности не уступает тестированному методу, а по некоторым ингибиторам (пенициллин, стрептомицин, эритромицин, олеандошщин) превосходит «го.Преимуществом предлагаемого метода также является снижение трудозатрат на про ведение анализа за счет исключения операций по подготовке индик тора, тест^-культуры,уменьшения количества посуды.

При сравнительном испытании гостированного и предлагаемого методов анализа на 382 пробах сборного молока из хозяйс—з не от мечено расхождений в количестве выявленных проб о ингибиторами (по 7,33$).

Таким образом, проведенные исследования позволили разряд-

Таблица 2

Чувствительность нового и тестированного методов по определению ингибирующих веществ в молоке

Ингибиторы

! Единица! (измерз-! !ния Г

Минимальные иягвбируьдие кон_цадхшр во. шмт__

предлагаемыйГ тестированный

АвдяФготвзд

Бензилпенициллия

Стрептомицин

Окситетрациклии,

хлорт етрациклия,

тетрациклин

Олеандомицин

Неомицин

Ыономицин

Левошщетин

Эритромицин

Щ/смэ мкг/см3

Сульфаниламиды

Сульфадимезин

Стрептоцид

Сульфацил-натрия

0,005

1,0-2,5

0,25-0,5

1,0-2,0 2,5

2,5-5,0 2,5-5,0 0,1

250,0-500,0

2500,0

250,0-500,0

0,01

7,0-10,0 0,5

2,5 2,5 5,0

2,5-5,0 0,25

250,0-500,0

2500,0

250,0-500,0

Фу^ациллин Фурагин

25,0-50,0 10,0

Химические вешеотва

25,0-50,0 10,0

АКТИВНЫЙ йод Процент 0,025 0,025

Сода кальцинированная 0,25 0,25

Сода двууглекислая 0,5 0,5

Формальдегид _ 0,002 . 0,003

Перекись водорода 0,01-0,005 0,01

Аммиак _!>_ 0,05 0,05

Новокаин 0,5 0,5

Мокли? порошок 0,25 0,25

Моще-аезин^ицирукщае ср'- ?;стГ|0 Д(1'а-Ц 0,25-0,5 0,25-0,5

II

И

п

и

тать ускоренные методы выявления в молоке антибиотиков и других ингибируидих веществ, использование которых в практике даст возможность более 110.ЛЮ выявлять антибиотики, другие ингибируицие вещества, учитывая их высокую чувствительность к ним. Кроме того, готовая форма препарата пригодна для применения непосредственно в условиях ферм, рынков, ветеринараых лабораторий,

2,5, Разработка среден - и методов борьбы с маститом коров

2,5,1, Новые антибиотические препараты для лечения и профилактики мастита у коров в сухостойный период

■ Для решения вопросов профилактики а лечения коров, больных маотихом, в сухостойный период о целью снижения уровня заболевания их в последующую лактацию была поставлена задача по разработке высокоэффективных противомастигных препаратов пролонгированного действия на основе новых антибиотиков.

Сравнительное испытание бактерицидной и бактериостатической

активнооти апрашцина, эремомицина, ристомицина,гелиомицина про-

и

вели в отношении .. ряда возбудителей мастита-- золотистыйУкоа-гулазоотрицательный стафилококка, стрептококки серогрупп В,Е, эшерихий, псевдомонады, клебсиеллы. Наиболее эффективными в отношении грамполохительных микроорганизмов были гелиомицин и эре-момицин: бактерицидное действие они проявляли в концентрации 0,1 -0,25 мкг/см3, а бактериосгатическое - 0,05 мкг/сы3. Ь отношении граыположителышх и грамотрицательных микроорганизмов эффективным был апрамицин: его бактерицидная концентрация в отношении золотистого стафилококка была 1,0-5,0 мкг/см3, стрептококков -1,0 , а грамотрицательных микробов - 2,5-10,0 мкг/см3. На основании полученных результатов для дальнейшей работы взяты апрамицин и гелиомицин, а также определены пролонгаторы их действия -

ланолин а вазелин.

Проведенными исследованиями было установлено, что для эффек-

■

тавйого лечения больных «астатом сухоотойных'коров необходимо, чтобы препараты содержсли в дозе 400 тыс.ЦЦ апрамицина я 300 тио, 1Щ гелиомицина.С учетом полученных данных было создано два препарата на основа этих антабяотиков -апрамаст и гелиомаст.

Определение острой токсичности препаратов на белых мышах показала, что препараты относятся к малотоксичянм соединениям (4 класс опасности), •

Определение раздражающего-действия препаратов на ткани молочной яелезы проводили на здоровых сухостойных коровах, которым ият-рацистернально вводили по 10 см3 апрамаста и гелиомаста.В течение 3 дней наблюдения не отмечено признаков воспаления и раздражения молочной железа.

С целью более детального изучения раздражающего действия апрамаста на молочную железу его вводила интрацистернально в доза 10 см33 »здоровым лактирупцим коровам. Анализ шлока осуществляла до введения препарата й в течение 5 дней после этого в сравнении с контрольными коровами. Устаноалено, что введение препарата на

■а ' ■ ■

вызывало появления положительных реакций на быстрый маститный тест и по проба отстаивания, хотя было отмечено увеличение числа соматических клеток в молоке со 171,9+20,8 тыс/сы3 до 2346*138.9 тыс/см3 в течений первых 24 ч, но затем к 4-5 дню оно пришло я исходному значению. Это свидетельствует о слабом раздражавшем действии препарата на молочную железу.

Определение длительности нахождения антибиотиков в вымени после введения препаратов проводили на протяжении первых 5 недель сухостойного периода, а также анализировали секрет вымени после отела при помощи предлагаемого наш метода диффузии в агар.

Проведенные исследования показали,что антибиотики в вымани оухо-отойннх коров сохраняются в тачание 4 недель после введения препарата и отсутствуют в молозива после отела. Следовательно, указанные препараты обеспечивают защиту вымени в течение одного месяца сухостойного.периода, наиболее опасного для возникновения воопа-лвтя молочной железы.

Посла предварительн^л изучения препаратов были проведены производственные испытания апрамаста а гелиомаста в сравнении о Французаили препаратом рилвкоин-500. Их вводили по 10 см3 в пораженные четверти шмаля: предлагаемые препараты - сразу после после /1014» доения шш в течение первых 2-3 недель сухооюйного перд-ода,а рилексиа-500 - строго за 2 месяца до предполагаемого отела. Вовго лечению было подвергнуто ащ/оыастам - 54 коровы (08 четвар-тей), гедиошотом - 52 (84),рилвксааом-500 - 36 (68).Как показали проведенные испытания, при использовании апрамаста было вылечо но 98,15$ коров (97,73$ четвертей), гешшихаЧ - 100$, ралввса-на.-500 - 97,22$ (97,06$). Подучонаш результаты свидетельствуют о высокой терапевтической аффактаавоата разработакних препаратов а возможности их широкого внедрения в практику.

Большой интерес представляло изучение влияния препаратов ва находящиеся в вымени возбудители мастита.Установлено,что процент ликвидации микроорганизмов был наивысший в группа о гелаоцастом-96,57$,затем апрамастоы - 81,36$,ралакоином-500 - 69,57$ со сравнению о 66,7$ у контрольных нелеченых коров.Новоэ инфицирование леченых четвертей реже отмечали при применении гелиоааста-3,77$, тогда как при использовании апрамаста оно составляло 12,68$, ра-лексшш-500 - 23,33$ , а у контрольных коров - 27,45$ четвертей. Шло изучено влияние антибиотикотерапии на уровень заболеваемости коров маститом и состояние естественной разистентноота орга

япзка а молочной железы опытных а коятропъпнх коров.Апаллз coif" яння вымени на протяжении первых 5 учо. лаятациа показал, что уро -веяь заболеваемости маститой лечвннт. четвертой был невысовЕм - по 5,26$ оразу после отеля я на третий месяц лактации, тогда как у контрольных животных мастит сразу пооле отела регистрировали в 11,25$ четвертей и затем на уровне 1,25-10,0$ каждый наояп. Это показывает, что введение препарата обеспечивает заяшту ежэм яа только в сухостойный пэряод,но я поеледухадую лактацию.

С цзлью опре'делання природы таксШ защити вымени была проведены ш.!мунологичео,н*!0 и цятологячео'яае вооледованяя крови а секрета молочной яалвзы.до введения препарата э через 10,20 дней а 1-5 месяцев после отела. Полученные рззультаты представлены в таблице 3 я рзо.2.

Проведенные Еооледогания показали, что число соматических клеток в оэарзта выг.{0ня после отела было на уровне контрольных животных. Количество лимфоцитов я нейтрофилоэ в гюлояв опытных воров соответствовало такому здоронах контрольных животных на 20-30 день лактация,тогда яая фагоцитараая активность найтрофплов,фагоцитарный индекс, концентрация Ig 3 - на 30-60 дня, Аналогпчзна иэ-кзпеняя откачаны н в крова. Это евздэтельотвует о том, естественная резистентность организма а иолочной железы опытных коров в тачание 1-2 мес. лактация находится, на более высокой уровне, что обэопе'пшает защиту впгзнп а этот период, каз наиболее опасный для возникновения воспаления.

Для вкяснения профилактического действия предлагаемых препаратов их в начало сухостойного периода вводила эдоровшд коровам ивтргмиаотврпяльно по 5 см3. Исследования показали, что после отела яя одмя опытная корова но заболела маститом, тогда как у коят-рольчих (нчлочаннх) коров воолалчнио отмечено в 16,67$ случаев.

Таблица 3

Лияамияа показателей резистентности вшеяя даятирупцЕХ коров после лечения их е сухостойный период препаратом апрамаст

показатели

! Группа ! коров

¿йугещу? лвшзшзС I г1.

до введо- , ния препа-;'

, .гаха ., ,...

10

др^да .ртеда чщз.

1.

20

30

60

¿имфоцяты, %

Моноциты, %

Базофилы, %

Эозинофилы, %

Нейтрофцлы, % -палочкоядерные

-сигмектоядёрные

Фагоцитарная-активность, %

Фагои::тарный индекс

¿изоцим, мм ЗЗР

Контрольная Опытная

Контрольная Опытная

Контрольная Опытная

Контрольная Опытная

Контрольная Опытная

Контрольная Опытная

Контрольная Опытная.

Контрольная . Опытная •

Контрольная Опытная

49,3+5,3 62,4+7,0

5.1+1,1 1,^,3

5,8+1,6 6,££и,7

5,5+1,2

9,3+0,9 5,270,6

25,0+2,0 20,^1,6

53,3+2,4 46, £^2,2

3,43+0,65 3,ШГи,44

20,4+1,5 13*6р,2 -

50,5+6,8 48,5+1,5 57,¿£3,7 5о,С+2,9

0,5 2,0+0,2

Э.ЗЙ.в 8,ф1,2

2,3+0,6

13,3+1,5

24,1+2,1 23,ф,7

34,0+1,7 37,4+1,6

I,48+0,4 2,Ц70,3

23,6+3,2

. 7,0+1,0 7,Е*1,0

8*5+2,5 2,(50,4

■ 8,0+1,0 II,.0+0,6

26,0+2,0 23,571,6

38,4+2,1 41^2,и

1,46+0,5 2,24+0*5

25,0+2,4 2В,5£0,9

58,0+1,2

2,0+0,2 4,С£и,5

10,0+1,8 7.651.5

12,2+2,2 1о|о+1;9

18*0+1,7 19,0+1,5

42,и-1,9 43,2+2,0 .

1.72+0,6 2,22+0,4

25,4+3*1

61,7+2,0 и,7+0,3

5,7+1,7 4^.0

4,5+1,3 5*0+0,5

6,8+1,4

б;е£г;2

20,6+1,5 23,651,7

44,5+2,2 45,0+1,6

1,76+0,7 2,1670,55

25,9+3,2 27,672,6

с

мг/мл

Ряс,2 Динамика уровня иммуноглобулинов в-

класса в секрете вымени коров после отела (опытная и контрольная группы)

, — 19 8 (опыт) — 19 в (контроль)

т о

W JÖ . .

2,4 Ц6.. 0,8-.

1о 20 30" ¿0 : I¿0 "Дни

Слвдовагвльно^ггримвявяие разработанных препаратов пролонгированного действия - апрамаста и гелиомаста,обеспечивает не только ликвидации мастита в оухостойный период, но и защиту молочной железы от возникновения воспаления в последующую лактацию за очвт подавления возбудителей мастита и активизации занятной функции вымани и организма коров в целом.

2,5,2, Разработка неантибиотических средств для лечения я профилактики мастита у коров в лактационный период

В полях снижения уровня заболеваемости коров маститом в лактационный период, снижения риска загрязнения молока остаточными количества*® лекарственных препаратов и попадания их в пищу людям весьма перспективна разработка неантибиотических средств и мето~> дов лечения и профилактики воспаления молочной железы.

' 2.5,2,1. Ферментные препараты для лечения больных маститом коров

В гялествэ биологического средства борьбы с маститом коров в лаг'тяпиошшй период -разработал и испытан препарат на основа комплотов С-актерполитических'. л протеолитическнх ферментов мшгроб-нойтлятки под общим' нляванпр.м лю'отеладэяч.йига проведены иоследо-

^сшил по иауч«а«1и бактерицидной и протеолахичеокой актавноотн лизоамидазы. Установлено ,что она проявляла бактерицидное действие против стафилококков в концентрации 0,1-0,2 яитической еданицн 1.ЛК) на I см3,стрептококков - 1,57-12,5 1£/см3,но была неэффективной против грамотрицателышх микроорганизмов - более 25,0 .¡Ц/см8. Ь бактерицидной концентрации дизоамидаза не оказывала отрицательного протеолитичеокого дайствая-молоко оставалось без изменения.

В опытах на белых мышах н кроликах установлено,что лизоамида-¿1а относится к ыалотоксичным соединениям, не обладает кохно-^ре-зорбтившш и раздражаицим действием.

Реактогешше свойства лизоамидазы изучали на 3 здоровых дак-тарущах коровах, которым однократно ннтрвцистернадьао ввела 10 ЛЕ препарата. Анализ секрета вымени после Введения лизоамидазы показал, что через 24 ч число соматических клеток в опытных четвертях увеличилось оо 156,3+10,4 тыс/см3 до 6578,1^385,4 тыс/см3,что сопровождалось появлением положительной реакции по быотроыу маотйт-ному тесту, но отрицательной - по пробе отстаивания.Число клеток к 5 дни снизило«, до 182,3+17,4 тыс/бы3. Это свидетельствует о слабом раздражающем действии лизоамидазы на ткани вымени. Аналогичные изменения отмечены и концентрации иммуноглобулинов: через 24ч количество 19 0 увеличилось в 14 раз по сравнению о исходным значением, а 1д М - в 2 раза.Однако «48 ч эта показателе снизалась до первоначального (фонового) значения, что свидетельствует об аммуноыодулируацеы действии лизоамидазы.

Отработку дозы препарата проводили на 25 коровах, больных оубклияичвскиы а клиническим маститом, которым дизоамидазу вводили в дозе 5-10-20 ЛЕ.Лучшие результаты получены при введении 10 ЗД/дозу.Дашшй препарат был назван лизомаст.Сравнительное испытание лнзомаста с мастисанои-А показало,что он был более эффектив-

неа: сокращались срока лечения и кратность введения препаратов, Кромэ того, введение лг-зомаста обеспечивало ликвидацию золотистых стафилококков а 100$ случаев, а мастаоая^А - только в 60$.

В хозяйствах ряда областей Российской Федерация била проведены производственные испытания препарата на 255 коровах (324 чвтварта),которым в пораженные четверти вымени вводила по 10 ом3 лкзомаста с активностью 10 J1E один раз в сутки о интервалом 2Л ч. Выздоровление наступало поело 2-4 введоний, при зтом исчезновение клинических празпатоз глэстита отггзчали у 185 коров ('240 чат-вэртай),что составляат 72,55$ (74,07$). Наивнспкй процзпт нзлвчз-валил был в группах о оубкляническпа.сарозякм (100$).езрозпо-ка-гяральяым (85,25$ коров/85,37$ чатвэртзй) кастятсн,тогда sus лрз катаральной форме воспаления он не прзЕшал 30,26$ (31,11$).

Бактериологический анализ езкрзга Еымднп до п поола лэчзяпя показал,что при.использовании лнз'ойаота в 81,09$ чотвэртай лакея-» дарованы возбудителя,причём золотяотно ста|ялояоккя-в 82,61$,яо-агулазоотряцатэльные стафалококки - 75,95$, агалаятийнкз стрзпто-кокки - 65,79$, другие стрептококки - 75,0$.

При изучении влияния ляэомаста на факторы сстествонной резистентности и иммунологической реактивности установлено,что у лочзных коров с серозный мастнтом (2 введения прэпарата) уровэнь Ig 3,Н-классов увэличивался только поолз первого ввддэнля прэпя-рата-в 1,6-2,0 раза,затем он снижался до нормы к 14 двю.Показатв-лп фагоцит арной, лизошшн ой активности,чзело соматических клеток достигали уровня контрольных аивотных к 7 днв.Всз это свидетельствует oí -активизации защитных сил организма л молочяо^ яелэзн.

7чит:шая тот факт,что организм п молочная яелзза рзагирукт на первоп введение лязомаста п иммунннй ответ сохраняется 24 ч , было про?едпяо испытание измененного рвшга введеввя прэпарата-чв--

риз 48 ч. для этого 92 коровам (120 четвортей).больных маститом, впадали лизсмаст с интервалом 48 ч . Установлено, что терапевтическая эффективность при этом несколько повысилась и составила 79,5?$ (80,С^ четвертей), причем изменение процента излечивания было обусловлено за счет катарального мастита.

С целью усиления антимикробной активности и расширения спектре чувствительных микроорганизмов в состав дязомасга был введен таграбораг натрия (препарат лвдем).

Изучение влияния лвдема на показатели клеточного и гуморального ишунитета показало аналогичные изменения как при лазомасте. Б прои: -.одотвенных условиях препарат двдем был использован для лечения 370 коров (475 четвертой),больных маститой, истории его вбо-дшш в дозо 10 см3 (10 ЛЕ) с интервалом 48 ч. При этом терапевтическая эффективность составила в целом 87,57$ коров (87,37$ четвертей). Это свидетельствует об усилении антимикробного действия,что было подтверждено бактериологическими исследованиями. Прилзнашю лдцеыа способствовало снижению уровня, инфицирования леченых четвертей на 82,12%, причем при золотистом стафилококкена 84,0$, коагулазоотрицательных стафилококках - 85,29$, агалактийном стрептококке - 76,92$, других стрептококках - 77,78$. ,

Следовательно, разработанные неантибиотические биологические препараты лизоыаст и лидем на основе ферментов микробной клетки ооесиачивают высокий процент излечивания животных, болышх маститом, за счет высокого антимикробного и им»луномодулирущего действия. •

2.5.2.2. Антисептические препараты для наружного применения

Одним из основных мероприятий по профилактике мастита у лак-тирущих коров является дезинфекция сосков вымени после доения,

прнчем,использование двзанфидируиии средств в галеобразаом виде более длительно предохраняет кожу сосков от обсеменения микроорганизмами, в т.ч. и патогенными. Поэтому Важйой представлялась разработка средств, обеспечивающих на только снижение уровня нан-ррбной контаминации козшых покровов, сохранение целостности н эластичности кожи, но а терапевтический эффект пра мастите.

Препарат на основе биологачзска активных веществ растительного происхождения

Были испытаны 3 компонента, представленные НПО "Левео-А",обладающие активностью в отношении микроорганизмов я созданные на Основе растительвого сырья: взоборниляцетат, П-3 а П-4, Наиболее автивнш Снлпзоборнилацетат,бактерицидная концентрация которого в отношения грамполояптельных микроорганизмов составила 0,01-0«005# пра 6-часовой н 0,01% - 24-48-часовой анкубацаа, а гртлот-рщательных - 0,05-0,1%, На основе изоборналацетата было составлено н испытано 3 коштозншш препарата а установлено, что яал&злеа эффективной была композиция, содержащая 10% ззоборналяцетата, (препарат валдтер).

-,Пра изучении токсаческах свойств этого препарата установлено, что.ЛД^ц составляла 7100+300 иг/1г? (4 класс опасности), он из обладал ко&но-резорбтавным, ко®ао-раздражаюдпм, оансибилизирущгм дьйотвием при испытании на кроликах^; также раздрааащим дэйотьл-ем на ткани молочной, яеяэзы.

Вило проведено азученае влаяная препарата на ряд показателей клеточного я гуморального аюаунатета молочной жвлазн.Молоно из опытных л контрольных четвертей анализировала до начала опыта и. через 6,;24,48,73 ч после нанесения мази- по следующим показателям; колкчествд соматических клеток,фагоцитарная й лизоцимная актив-нос?* , количество 1д й я 19 М. Проведенные исследования не внява-

яц существенных изменений во анализируешь показателям по сравнению с контрольными животными. Сладовательво, валет ср не оказывает отрицательного влияния на состояние естественной резистентности молочной железы.

Изучение влияния Билетера на микробную контаминацию кожи соо-выменп

ковуйроводили путец.бактериологического исследования смывов о ко-сосков до е после обработка в сравнении с контрольными животными. Установлено, что применение ыази валотвр позволяло сникать микробное обсеменение кожи сосков чероз 3 ч в 4,7, а 6 ч -18,6 раз по сравнению с исходными значениями, в то время как у контрольные коров снижение обсемвненнооти отмечали в первые 3 ч в 2,3 роза,но уге через 6 ч количество микроорганизмов увеличилось в 1,12 раза. Поело применения мази в молоке не обнаружены инги-бируюцае вещества.

Производственное испытание мази валетер с целью определения аа профилактического действия провела в ШЗ "Ачкасово" Московской области на 2 группах коров (по'50 голов), предварительно определив уровень мастита. У коров опытной группы проводили обработку сосков вымени валатером посла каждого доения; у гивотных контрольной группы вымя из обрабатывали и лечению подвергали коров 'с клиническим маститом антибиотическими препаратами.Проведенные.' исследования показали, что в опытной группе число субклишческого мастита через 2 недели снизилось в 2, а через ызсяц - в В раз, клинического соответственно в 2,5 и 5 раз, тогда как в контрольной группе за весь период наблюдения уровень субклиничаского мастита снизался в 1,5-2 раза,но возникли новые случаи клинического воспаления вымени (4%),Применение мази способствовало такав снижению числа инфицированных четвертей на 42,86$, тогда как в конт- ' рольной группе даже при наличии лечения коров о клиническим.мае-

титом - только на 11,23$..

Следовательно, применение мази валетер способствует не только профилактике воспаления молочной яелезы, но и излечиванию коров о субклиническим и острым клиническим ¡/.астатом.

Препарат на основе анестетика

Наряду с бактерицидным и ранозашцшшцлм действием препараты для наружной аппликации должны также обладать1 противовоспалительным и болеутолящим действием. С учетом этого были проведены исследования ряда анестетиков о цолью создания препарата на их осяо-ве.Кз ряда исследованных азостзтяяоа был глбрая анилокаан, обеопе-чпвахщиЗ гибель возбудителе}! маогзта в концентрации 1,25-2,5$,а бактериостатический зффзкт - 0,32-1,25$.

В связи с тем, что препарат применяется наружно, конгтптра-цпя анилокаана в иаза была увеличена до 5$. На основании вютлязн-яых исследований состестно с сотрудниками Пермской фармакацемга' был предложен препарат аниксяд с 5$ аяилокаина, который относится к малотоксичнкм соединениям.

Были проведены цитологические и ит.у но логические исследования сэкрата енмонл коров после обработки сосков вшлояи акяксл-дом. Установлено, что мазь не оказывала отрицательного влияния на состояний резистентности вымени по сравнен'^ с лсходяа.а значениями. И контрольншли ЖИВОТНЫМИ.

Одним из основных требований, предъявляемых к средствам для наружной аппликации на кожу нымзпп, является их бактерицидное действие на микрофлору коли .Для этого у опытных коров до и после обработки, сосков - аавксидом о'гбярялп с:шш с кожи сосков для бак-теряологйччского анализа.Днаюгачяыс образцы скнвов брали у конт-ролы-.чх (бгз -обработка) коров." /яг/шовлено, что через 3 г после

обработки мазьа уровень микробной контаминации кожи сосков вымени сжижался по сравнению о исходным значением в 6,2 раза, а через 6 ч - в 14,3 раза, тогда как в контрольной группа через 6 ч отмечали увеличений, числа микробов на кожа в 1,12 раза. При параллельном асследов/шии молока ингибирующие вещества не обнаруживали.

С учетом полученных данных были проведены исследования по изучению влияния мази аникск, на ликвидацию имеющегося воспаления ъшлани. Для этого были взяты коровы с различными фор,ими мастита, «сего в опыте находилось 12 коров о субклиническим и 12 - клиническим маотитом, которым после каодого доения в кожу пораженной четверти Е"мона втирали мазь аниксвд, а 12 контрольных коров с клинические маститом лечила мастнсаноц-А. Применение-мази аникоид обеспечивало IüCíS-hoq выздоровление коров с субклиничеоким маститом, '1Ь% - серозным, тогда, как при катаральном эффективность.мази не-i¡a(2í$).Kypo лечения составил 1-4 дня (ЗЛ2 процедур).В контрольной группе вылечено в течение 4-6 дней 66,67$ коров, причем при серозном мастита эффективность составила также 75$.

Следовательно, применение мази аниксид способствовало эффективному излечиванию коров о начальными формами мастита в короткие сроки,

2.5.2,3. Биофизические методы лечения больных маотитом коров ,

Учитывая отрицательные моменты при применении аатибиотичоо-

р.ах препаратов для лечения лактарущих коров в связи о возможным

в

попаданием ах остаточных количеств молоко,перспективной,на наш щша, представляете^ разработка наряду о биологическими препарата!« физиотерапевтически:, средств и методов.

Изучение терапевтической эффективности лазерного . излучения при гластите коров а разработка способа лечения

Учитывая высокий терапевтический эффект лазерного излучвная а медицинской практике", была поставлена задача по изучении возможности использования нязкоинтенсивного лазерного изучения пр™ лечении больннх маститс,л коров,

. . В. качества источника излучения был взят лаззрный прибор мз-дединского назначения "Азор". В хозяйстве на больных маститом коровах испытали три ражима лазерного облучения: ауторазонансянЗ (колебания волн от 30 до 3000 Гц) с экспозицией 256 с, с частотой волны 3000 Гц а экспозиции 32 о а 1500 Гц и 64 с. Нааболоэ эффза-тввнш "оказался последний режим,.ара котором было вылочано 30-100$-коров с субклппзчоским а клиническим мзетптомпрл 50$ в контрольной группе (мастисан-А).Это указывает па вогмоялость признания данного роаща излучения для лзчония больннх маститом коров.

На основании проведанной работы едзланн прздяоязпяя по усовершенствованию прибора, о учетом которых Ш НИИ "Пожя" создан лаэ ерзай' прибор "Взга-Ши о автономным питанием для ветеринария.

■ Широкие" производствзшшз пештания данного прибора проводили в хозяйствах Липецкой .Московской и Твореной областей на 158 коровах (255 четвертей) с субкланнческим, острим я подостри,! серозным, сариэзно-катаральннгл а катаральным маститом.В целом эффективность лечения при 2-4 процедура* составила 69,75$ (82,75$ четвертей). При ззяуг.заных формах катарального мастита и подостром тачании результаты баз. хуже,, что снижало обший процент выздоровления.

Для изучения азвийия лазерного излучвния яа показатели естественной резистентности а тздаэяогичвекой реактявноетя ергз-низма и молочной железы проведеач исследования крови и молока по ряду показателей. Выяснило, что после окончания лечения ( ча-

рва 2-3 для ) показателя фагоцитарной и лязоцшшой активности, концентрации иммуноглобулинов 8- и М-алассов превышали значения у : контрольных животных на 15,4-37,8$,

Таким образом, предлагаемый метод терапии больных маститом животных лазерным излучением может быть альтернативой медикаментозному лечению при острых формах воспаления;- Кроме того, этот метод лечения способствует получению экологически чистого молока.

Эффективность токов крайне высокой частоты (КЬЧ) при маститб

С целью изучения возможности применения электромагнитных волн токов крайне высокой частоты (КВЧ-поле) миллиматрового диапазона натепловбй интенсивности для лечения коров при мастито был использован прибор "Кентавр"., разработанный НШ "Исток" в со-отвзтетваа с нашими рекомендациями.Пралачэняи коров рупор облучателя располагали в поясничной области С3—4 позвонки).Процедуры выполняла один раз в день в течение 20 ыин.

Испытание проводили, на коровах с субклиническкм а кланичес-КЕМ цаотитоы, которих 'распределяли на 4 группы:! -лаченив КВЧ-по-леи (10 коров/13 четвертей); 2 - лачанае КВЧ-полаи +. одно-дву* ' кратное введение антибиотического препарата .в пораженную четворть, С1{»Д^)гЗ - лачёииа шстисааом-А (8/10); 4 - 'коровы .о оубкляна-чеокш мастатоа без лечааая (12/12). В результате проведанных, исследований наиболее эффективным оказался' режим использования квч-поля с одновременным янтрациотврнальным одно-двукратным ввзденаоы маотисана-А - уровень выздоровления животных оказался с пределах 87,5$ в сравнений с 50$ пра применении только КВЧ-тарапли.Е 75$ в 3(контрольной) группа. При отсутствий леченая коров о субклшш-чаоклы маститом (4 группа) самовыздоровление животшх отмочено у 25$ коров, переход воспаления в клиническую форму - 25$,а у Ь0$-

субклиняческая форма маотата регистрировалась на протяженна всего срока наблюдения (10-15 дней).

Низкий процент внэдоровленая животных при использовании толт ко КБЧ-поля объясняется сохранением в вннени после курса леченая золотистого стафилококка. Следовательно,сочатанвое применение КОТ -поля и антибиотического препарата позволило существенно повысить эффективность лечения при одновременной снижении раока загрязнения молока антибиотиками за счет сокращения кратности ях введения.

2.5.2.4. Система леченая и профилактики мастита коров

На основании проведенных исследований била разработана система мероприятий по лечению н профилактике мастита у коров о использованием разработанных лечебно-профилактических средств н методов, внедрена« которых будет способствовать повышенно эффективности леченая больных животных за счет аятиыаробной активности препаратов в активизации фаеторов защиты организма и молочной железы.

Разработадная снотема является дополнением к сущэствувдим мероприятиям и не предполагает отмену рекомендуемых другими исследователями средств н катодов леченая больных маститом коров.

Система лечения и профилактики предполагает замену антибиотических препаратов в лактацию на биологические и биофизические методы и средства, а использование антибиотиков - только в сухостойный период. Это позволит существенно снизить риск загрязнения молока остаточными количествами антибиотиков и других химиотера-певтическях препаратов.

Разработанная система рекомендуется для внедрения на молочных фермах страны, особенно зонах по произродству продуктов детскэго питания.

выводи

1. Выполненными исследованиями за период с 1975 по 1997 гг, установлена тенденция увеличения уровня заболеваемости коров маститом на фермах и комплексах ряда областей Нечерноземной и Центрально-Черноземной зон Российской Федерации:

- общая заболеваемость лактируюцих коров в указанный период составляла в среднем 14,23% при соотношении клинической а субкли-ничеокой форы мастита .1:1,54 ;

- в последние годы клиническая форма мастита у лактируицих коров диагностируется в 4,62 раза чаще по сравнению о 70-ми го-дама, тогда как число случаев оубклинического мастита а раздражения вымени снизилось в 1,9 и 12,76 раз соответственно ;

- воспаление молочной железы отмечено у 29,2$ сухостойных коров, причем на один случай оубклинического мастита приходатоя 4,78 случаев клинического.

2, Установлено, что ооновными возбудителями мастита в обследованных хозяйствах являются стафилококки а стрептококки. На, долю золотистого отафилококка приходилось 29,06$ в лактацию в 40,66$ в сухостойный период от числа всех выделенных микроорганизмов ;коагула80отрицателышх стафилококков- соответственно 34,65 а 40,29$, Из всех серологических групп отрвптококков в оекрете молочной железы больных маститом коров чаще обнаруживали агалактийный стрептококк - 21,84$ в лактацию а 15,39$ в оухостой-ный период.

, 3, Установлено повышение устойчивости кокковой микрофлоры вымени больных маститом коров к некоторым антибиотикам за последние десятилетия:

« число резистентных к пенициллину штаммов стафилококков возросло с 51,83 до 60,38$,. а стрептококков к стрептомицину - с

14,48 до 66,67$ ;

- соотношение числа случаев наделения стрептококков и стафилококков-, изменилось о 1:1,52 до 1:5,72. ,

4. Сравнительное испытание ряда зарубежных противомастптшы препаратов для лакхарупцих коров, содержащих новые выоокоэффектг ныв антибиотики, показало, что они обеспечивали до 100$ яэлёчива-ниа больных животных, тогда как отечественные препараты на ооновя пенициллина и стрептомицина имели эффективность 71-75$ при более длительном курсе лечения.

*

5, При использования антибиотических препаратов для лечопю? лактирущих коров, больных маститом и эндометритом, остато лше количества антибиотиков выделялись о молоком в течение соответствен^ 1,5-5 а. 1-4 дней после последнего введения. При анализе проб сбораого молока из хозяйств установлено, что в 15,7$ случа-оз оно содержало ннгвбируадиа вещества, прячем аз них на долю ая-табаотаков праходалось 43,57$.

6, Предлагаемый метод диффузии в агар для определения антибиотиков я редуктазяый метод с использованием готовой формы препарата для выявления аягабирущих веществ в молоке позволяет в течений 1,5-4 ч давать объективную оценку его качества по этим показателям, обеспечивая высокую чувствательвооть анализа.

7. Разработанные препараты пролонгированного действия апра-маст а геляомаст на основе новых антябаотаков способствуют повышенна естественной резистентности организма и молочной аелвзн,проявляющееся увелачением концентрацая иммуноглобулинов, фагоцитарной актавноста нейтрофалов а других показателей как в сухостойный период, так в последующую лактацию.Ото обеспечивает терапевтическую эффективность после отела коров в пределах 15-100,С$,снаяе~ яие урозкя инфицирования внме.чл осяовкша юзбудата.тяня мастита

на 82,05-96,30$ против 69,5?$ при использовании контрольного препарата.

Применение этих препаратов п^^^^ировало возникновение воспаления н течение первых 4-5 месяцев^ 94,74$ коров.

В. Ферентный препарат лизомаст для лечения дактируицих ко-риь, больны* маститом, особенно, стафилококковой этиологии, оказывает стицулируицее влияние на факторы клеточной; и.гуморальной защиты организма и молочной железы, что обеспечивает снижение уров-нл контаминация четвертей вымени микроорганизмаии на В1„09$ а те-11Ш8В'«ическую эффективность в пределах 72,55-79,-57$.

, 9. Препарат лидем на основе бактериолитических ферментов микробной клетки и тетрабората натрия обладает достаточно высокой ак-I пенисты» в отношении грамположительных и граыотрицатальныхвцикро-/ргадй'л-ит л способствует усилению факторов задиты вымени и орга-шзма жнво'шого. При лечении коров, больных, маститом, дриманиниа иршшрт'ц обеспечивало снижение уровня инфицирования лвчьиих. чот-а«р1и4 и п.филококками на .04,0-85,29$, а стрептококками -76,У2~ 77,78%, эффективность лечения при этом достигала 07,57$.

10.Препараты иа основе биологичиски актинннх веществ растительного происхождения (валетер) и анастетика (ашшовд) обдадшот ирогнвовоопалнгвльнш, обезболивающий, рано'заживляюцим,¿мягчащим двйогвавм и бактерицидными свойствами при иаружной аппликации на кожу сосков вымени коров посла доения. Бактериальная, обсецанен-! иооть кожи после 3-часовой экспозиции снижалась ,в 4,7-6,2 раза,а 6-часовой - в 14,3-10,6 раз по оравнанию с исходными показателями.

Применение мази валетер способствовало снижении числа случаев заболевания коров клиническим маотитом в В,а субклиническим -в 8 раз. Бтиранаа в кожу сооков вымени после каждого доения мази аниксид было эффективным в 75-100$ случаев субклшшчооного и серозного мастита при курсе лечения 1-3 дня.

■ 45

11. Лазерное излучение п электромагнитные волны миллиметроро-го диапазона СКВЧ-полз) являются эффективная! биофизически®! оря к •отвала- для аятавпзацпн -защитных сил организма и повияеняя устой"1' востй коров к каотпту. Курс лечения больных янвотшк составляет л~ 10 процедур в зависимости от Форда п. точеная мастита.

12.■ Прздяагаилзя научно обоснованная система лечения н-про-фзлшйшга -каотвта коров, внлючаацая црлмененио новых антибиотических црзсаратоз- в сухостойный период,.биологических и биофизических

средств п иотодоз в ладтацшэ, способствует получению высокого те. * рапойтнческого эффекта Но только за счет антимикробной активности,.

но л ио&згзвт естественно!! резистентности организма коров и ью-

яочной гояёзн,

ВРАШЧЕСКИЕ ПЕРДОШПЙ

. I, Прэдлозопз система лечения п профилактики мастита у ко--рои в различило физиологические периоды с пепользованиом новых лечебяо-профйлактачЬскпх п бпофззпчоских средств и методов:

• - Для лочоияя норов с гласите?,? в лактации предлоаепы фермонт." йно -хф'опараш лдзогдаог п лпдем4 которая прпшнягог антрацпотерналь-но в дозе 10 с1.33. с адтйплостью 10 ДЕ один раз в день с интервалом 48 л;

- Дяя йзчашш сувягшшйзекого л острого клинического мастита продлозела дрогавотстимат 'мазь анянепд, которую втирают после натдого доойгя а колу лбрззоплой четверти вымени до исчезновения нлпшгеб'шк .дрлаяааов;. . , •

- Для. яачеапй и йрофздашш! ыаогнта8 отеков, образования грейна сосков рзшлглдоЕано использовать" цротивомаотитну» мазь ва-летор, которуи втзрззт з козу сосков енглонй после каздого доения.

- С дальо сЯЕзапи! уровня гястпта в сухостойный период д последующую лактецшэ предложено проводить антибяотикотерапшо с ис-пользованаем-сцрамаста плд гелломаста» -которые однократно вводят после последнего доения иля в первые 2-3 недели сухостойного периода в поратешша четверга вымани до 10 см3 ила' здоровые четверти-

ко 5 см3.

- Для лечения мастита у лактирушцих коров предлагается использовать лазерный прибор "Вега-МВ", позволяющий проводить обработку ныменл больных животных в любое время независимо от доения один раз в день по I мин.

- Для лечения лактирущих коров предложено использовать прибор "Кентавр" на основе КЬЧ-поля в сочетании с 1-2-кратным введем нием антибиотического препарата.

2. Разработаны и предложены методы определения в молоке: антибиотиков ускоренным методом диффузии в агар и ингабирувдих веществ с использованием готовой формы препарата.

3, Определены сроки браковки молока при лечении коров о эндометрите которые вошли в ОСТ 10 080-35.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1, Карташова £..4. .Демидова Д.Д. Чувствительность патогенных стафилококков и стрептококков, выделенных из молока, к антибиотикам // Проблемы повышения вет.-сан. качества .и биологич.ценности продуктов питания животн. происхождения и животноводч. сырья;Тез. докл.Всесоюзн. конф.. - М,,1976, - С. 140-141.

2. Ивановцев В.В. ,Демидова Д.Д. Бактериологические исследования соскового и паренхимного молока при диагностике окрытых форм мастита // Тр.ВНШВС, - 1979. - Т. 63. - С. 80-82.

3. Демидова Д.Д. Обсемененность молока патогенными стрепто- . кокками на фермах- промышленного типа // Тр.ВНИИВС.-1980.-С.98-100.

4. Карташова В.М. Демидова Д.Д. Диагностика мастита коров стрептококковой этиологии // Вопросы ват.фармации и фармакотерапии; Тез, докл. ^сесоюзн.конф. - Рига,1982, - С,45-47,

5, Карташова В.М. Демидова Д.Д. Распространение стрептококков различных серогруш на молочных комплексах и фермах // Тр, Воесоюзн.конф, - Воронеж, 1936, - С.23.

6, Карташова В.М.Дрипунова Л.В. Демидова Л.Д. Изучение состояния вымена коров путем бактериологического и цитологического исследования секрета вымени // Бактер. и вирусн. болезни с.-х. жив-х и птиц в хозяйствах Сев. Кавказа: Сб. научн.тр. - Новочеркасск, 1968. - С. 106-108,

7. Каргашова В.М., Демидова ... .Д. Определение некоторых антибиотиков в сборном молока // Бактор. и варусн. болезни с.-х.жяв-х к пищ в хозяйствах Сев.Кавказа: Сб.науча.тр* - Новочеркасск,I9~J.

- С.108-109.

8. Демидова Л.Д.,1усева A.C. Методы определения ч молока ая-гчбярующах веществ // Таз.докл. сов.-финлянд. си!.шозиума по пробло-ме мастита. - Ленинград,1990. - С. £2-23.

9. Карташова В.М., Демидова Л.Д. Ветераларно-санатарные и технические мероприятия по обеспечении высокого санитарного качества молока// Проблемы видустриализацаа ароаз-ва молока: Сб.'научн. тр. ШШТИЫЭЖ, - Запорожье, 1989. - C.I0I-I05.

10. Демидова Л.Д. Антибиотики в молоке: санитарное значение а метод опрвделзная // Зкологач. проблемы ввг.санитаргагТез.докл. научно-тех. конф. -М.,1993. - 4.2. - С. 88-89.

. II. Хрков Б.И. .Демидова Л.Д Дечеаае.и профалакгака мастита у коров в сухостойный период с всаользованяем новых форм антабао-таков //Гигиена,ветсанатарая а экология аавотноводства: Мат. Всаросс. ндучно-проазвод. конф. - Чебоксары, 1994. - С. 494.

12, Демидова Л.Д,, Юрков 3.U, Сравнительное испытание лекарственных препаратов при терапия мастита у коров // Диаг-ка» терапия и профилактика акушерско-ганекологвч. патологии у жав-х: Сб. научи, тр. 1.ША. - ?.!,, 1994. - C.II7-I20,

13, Демидова Л.Д, Влияние леченая коров,больных эндометритом на санатарноа качество молока // Диаг-ка, терапия и профилактика акушерско-гинэкологяч. патология у жав-х: Сб. научя.тр.МВА .

- М,,1994, - С.85-66. -

14, Демидова Л.Д.,Реброва Т,Б.,Балпбалова E.H. Разработка высокоэффективного метода лечения коров,больных мастатом а эндомет-ратом,' йра помощи прибора "Кентавр" // Дааг-ка, терапия и проф_лак-така анушерско-гинеяологич, патология у яав-х: Сб.науча. тр.МВА.

- М,, 1994. - С, 120-123,

- 15, фков В.Ы. Демидова Л.Д, Состояние а перспективы исследований по диагностике, терапии а профилактике мастита коров // Проблемы вет.санитария я экологии: Сб.научн.тр. ВНЙИВСГЭ. - М.,1995.-Т. 98. - 4,1. - C.92-IC3.

I ). Демидова Л.Д,,¡Срков В.М,.Миляяовскай А.Г. Актуальные проблемы санитарии проаз-ва молока // Проблемы вот,санитария и эколог:ш:Сб.научя.тр.ВКИИВСГЭ.- М.,1995. -Т.Э8. -42, -C.I03-II3.

17. Демидова Л,Д,,К£коз В.М. Новые антабиотака пра леченаа и

црофалантаке мастита у коров в сухостойный период // Ноша фарыа--кологич. средства в ветеринарии: Мат. 7-й межгосуд. межвузов.науч. ирактич. чонф. -с.-Петербург,IS95. - С.75-76.

18. Демидова Л,Д.,Козловский А.Г., Ежов H.A. Экспериментальный данные по терапевтической эффективности лазомаста при мастите коров//Новые фармаколог, средства в ветеринарии :Ыат.7«й межгосуд. ыажвузов. шуч.-практич.конф. - С.-Петербург,1995. - С.73-74.

19. Демидова ДД.,К4жов В.М..Панцуркин В,И.,Одещко Л.Н.,Алек-иееьа И.и. Антисептическая гчзь 11 Анаконд" для профилактики и леченая мастита у коров // Новые фармаколог, средства в ветеринарии: tor, 8-й ыежгосуд.межвузов.ндуч.-практич.конф.-С.-Петербург,I9S6. - ОДОЗа.

20. Демидова ДД.,крков В.Ы.«Иноземцев В.П. .Балковой 11.11. Лазеротерапия коров при мастите// Kayчн,аспекты профилактики и терапии öo. ¡зт& с.-х. жив-х: Цат.научн. конф.,посвящ.70-летив фак-та нет,медицины Воронеж.ГАУ им.Глинки К.Д.-Воронеж,1996. -С.69-70,

21. Демидова ¿.Д., Юрков В.М. Биологический препарат на основе ферментов для лечения больных маститом коров// Научи.аспекты профилактики а терапии болезней с.-х. жив-х:Мат. научн.конф, ,по-сбшд. 70-летию фак-та вет.медицина Воронеж.ГАУ им. Глинка К.Д,-Воронвж,19&6. - 4,1, - C.70-7I.

22. Федоров Ю.Н.,Крков B.U. Демидова Л Д. Уровень иммуноглобулинов у лактирушщх коров при мастите// Научн.аспекты профил-ки а терапии болезней о.-х.жив-х:Ыат.науча,конф,,посвящ.70-лвтию фак. вех.медицины Воронеж.ГАУ вы,Глинки КД.-чВоронея, 1998.-4.1,-0.1Ü3-124. / . ь

23Демидова Л.Д. Диагностика а црофилактика мастита у коров // Животновод. - U,, 1997. - Л 9. - С, 16-17.

24. Юрков В.М. Демидова Л.Д. Противомастатные препараты // Животновод. - М,, 19а7.~Л 10. - С, 16,

25Демидова ЛД.,£рков В.М.,Еалковой И.И., Иноземцев В.П,, Черкаосов A.C.,Свирин В.Н. Применение лазерного ветеринарного шн парата "Bera-Uü" при ыаотите коров // Ветеринария. - 1996. - Й5, -С,9-12.

26, Крков В.М. Демидова ДД. Антибиотики для лечения коров, больных маститом // Ветеринария, - 1997, - д ю. _ с. 30-32.

27, Демидова Л.Д, Ускоренный метод определения ангибарующих веществ о использованием готовой формы препарата//Акт.проблемы bci оан,контроля с.-х.продукции: Таз.2-й Мавд.науч.-практ.конЛ.-й,, 1997, - 4.2. - С. 96.

28, Демидова Л.Л.Этнология мастита у корон // Трз. докл. Jï Нездунар.симпозиума по маш.доеяил с.-х. яив-х.- C!(,0Ht1y]U',iW,-С.188-189,

29. Демидова Л.Д. Динамика уроряч заболеваемости коров маститом// Tes. докл.IX Мегдулар.симпозиума по мап.довнил с.-х.жив. - Оренбург, 1997, - С, 190-192.

ЭС;; Юрков ü.M., Демидова Л.Д. Влияли« лечения оу застойных коров на уровень мастита в период лактации // Тоз.докл. IX Мвжлуяяр симпозиума по малг.доеппю о.-х. жив~х. - Оренбург,I997.-G.225-226.

31, Демидопа Л.Д. Экологически ЗезопасчнЯ способ пдчения мае -тпта у короз с использованием препарат* лялям // Tqp. 2-й Межцул. яауч.-прпгггпч. кочф."Лкт.ироблпмн ввт.-озн. контроля с.-х.продукции. -»,,1997, -4.2. - G. [OÜi'J

ШИЙВСГЭ, 1997г., г.Москва, Звенигородское Ш., 5, зап. 2622/1 тира я 00 г-к я.