Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Токсичность рапсового шрота для кур и ветеринарно-санитарная оценка мяса и яиц

ВСЕСОЮЗНАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ АКАДОИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ИМЕНИ В.ИоЛЕНИНА

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ДРУЖШ НАРОДОВ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВЕТЕНШАРНОЙ САНИТАШ

На правах рукописи

ЦОЦОРИЯ МАРИНА ШЧИКОЕША УДК 619:636.525615.93

ТОКСИЧНОСТЬ РАПСОВОГО ШРОТА ДЛЯ КУР И ШТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА МЯСА И'ЯИЦ

IS.00.06 - ветеринарная санитария, эетеринарно-санитарная экспертиза и гигиена переработка продуктов животноводства

АВТОРЕФЕРАТ

дясовртазди' на совокание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Моет - 1990

Работа выполнена во Всесоюзном г.дана Дружбы народов научно-исследовательском институте ветеринарной санитарии

Научный руководитель - заслуженный деятель

науки ро&ср, доктор ветеринарных наук, проф. г.а.таланов

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

аебасов т.г. сашвс), >;

кандидат ветеринарных наук, КОХТКЖ Ф.П. (виэв)

• 1

Ведущая организация: Белорусский научно-исследовательский

институт ¡экспериментальной ветеринарии

Защита состоится " 'И " О^ХО^)^ 1990 г. в часов на заседании специализированного совета Д.120.45,01 при ¡всесоюзном ордена Дружбы народов научно-исследовательском институте ветеринарной оани?арии (1230?2, Москва, Звенигородское шоссе, 5, ШИИВС)

С диссертацией можно оавакошться в библиотеке ДОПШС.

Автореферат разослан * Ч г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат биологических наук

Л.П.Ишеноза

■ В В ЕДЕ Н И Е

Дктуалъяооть темы диссертации. Решениями ХШ съезда КПСС, последующими Пленумами ЦК КПСС намечена программа резкого увеличения производства продуктов питания животного происхождения -молока, мяса, яиц. Для решения этой задачи необходимо значительно укрепить кормовую базу и увеличить, прежде всего, производство кормового белка.

Увеличение производства кормового белка монет быть достигнуто путем расширения посевов кормовых.культур (соя, рапс, горох, кормовые бобы и др.) о высоким уровнем его содержания. Одной из наиболее высокоурожайных белковых культур является рало, которий-может использоваться в кормлении сельскохозяйст >~ венных животных как в вида зеленой ыаосы, так и жмыхов ж шротов, получаемых в качестве побочного продукта после извлечения из семян масла. Рапо - неприхотливая, холодоустойчивая культура, которая может выращиваться во всех регионах нашей страны в том. чишш ив суровых климатических условиях Сибири. Поэтому поставлена задача значительного расширения посевов этой культуры в нашей отраве, увеличения производства семян рапса для масло-жировой промышленности и соответственно жмыхов и щротов для нузд животноводства.

Однако жмыхи и шроты, получаемые из семян рапса в значительных количествах (до 8J0, могут содержать глюкозинолаты (тио-глюкозиды), ко торю под действием фермента мирознназы могут гид-ролизоваться с образованием глюкозы и токсичного аглвкона, основную часть которого составляют нзотиоцианаты, химическая структура K0T0pi:x и физиологическая активность недостаточно изучены. По данным одних авторов [josefoeon Е. , 1970; Bell M.S.,

Iäj4 ] , основную часть изотиоцианатов составляв» кротониловое . msc.io (от 26 до 60*). Второе местс ло маосв занимает пватялгор-чичное масло С16-7050 и самую незначительную часть -аллилизо-тиоци; тати- I 2...3,4*[ве11 M.S. , 1984] .

Другие авторы считают, что глюкозинолаты это очень сложные соединения и их агликон может включать изотиацианаты, нжтриль-лыо ооедигения, синапин, гоитрин и другие вещества.

Также недостаточно изучен ж характер токсического действия продуктов раопада глюкозинолатов на различные виды сельскохозяйственных животных и птицы. Ряд авторов считают, что в основе физиологического действия изотиоцинатов лежит гоитрогений эффект, обусловленный связыванием в организме йода и нарушением функций ¡цитовидной железы ГамЪв Y, , Mataunoto Т. , 1976,

ч

1977, 1973]. Другие исследователи указывают, что наибольшее значение в механизме токсического действия лежит гепатотокси-чес-.nfl эффективен J.M., Aherae I*.Zt, 1961, Penwick O.R., Uurtie , I960 ].

Имеются также данные литературы о том, что в рапсовом шро-ге содержится синапин, который оказывает отрицательное влияние нЛорганолептичеслие показатели яиц[мие11ег Ы. , Coleman , i97öt. Peareon A.W. , 197э].

В связи о этим возникла необходимость в койыеконой вете-риьарно-сшштарной и токсикологической оценке кормов из рап'са и, прежде воего, рапсового шрота, как наиболее распространенного белкового концентрированного корма, который можот исдользо-ватьоя в качестве источника белка для прлготоаяения полирационных комбикормов дяя птицы и свиней. В доступной нам литературе мь не нашли материалов по проведению таких исследований.

Цедь работц. Провести токсикологическую оценку рапсового шрота и обосновать регламенты его применения'в рационах для кур-

несушек.

Основные задачи:

1. Изучить токсичность аллилизотиоцианата для белих мшеЯ, цыплят, куриных эмбрионов и рыб-гуппи.

2. Определить токсичность рапсового шрота для риб-гуппи и белых мышей.

3. Провести опыты по испытанию токсичности рапсового шрота для кур-несушек.

4. Изучить влияние рапсового шрота ла клинические и биохимические показатели крова и продуктивность птицы.

5. Изузть патологоанатошчэские и гистоморфологические изменения в тканях кур.

6. Провести ветеранарно-санитарную экспертизу мяса и яиц кур, получашшс в рационе рапсовый шрот.

7. Подготовить з ввдать регламенты по использованию рапсового шрота в радаовах 1сур-кесушэк.

{{атчнод иовяздд'. Шервыэ изучена токсичность рапсового шрота для аквариушнх рнб-гушга; комбикормов о его содержанием для белых мышей г кур-нссупок; исслздссан характер гЕСтоморфологйче-ских изменений в органах в тканях кур при введении в ее рационы рапсового шрота о высоким содержанием изотиоцианатов, установлено эыбрио,токсическое действие аллилизотиоцианата для куриных эмбрионов и его токсичность для рыб-гуппи, проведена ветеринар-но-санитарная и биологическая оценка куриного мяса и яиц при включении в комбикорма рапсового шрота.

Практическая ,49.^0^. Научно обоснованны регламенты использования рапсового шрота с высоким содеркатдам азотиовд.?татов

(от 0,8 до 1,0750 в псшюрашюшш комбикормах для кур-несушек, предложены методы , токсикологической оценки рапсового шрота в комбикормов с его включением биолг?ической пробой на аквариум- * них рыбах гуппи и белых мышах.

На защиту выносятся следующие основные положения:

1. Данные экспериментальных исследований по характеру ток-оичаокого действия глшкозинолатов и изотиоцианатов рапсового зрота на аквариумных рыб-гуппи, белых мышей и кур-несушек.

2. Показатели острой токсичности аллилизотиоцианатов для рыб-гуппи, белых мышей и цыплят, характер клинических и пато-морфологичаских изменений у животных при интоксикации.

3. Эмбраотоксичеокое действие ашишзотиоцианатоа на куриные эмбрионы.

4. Влияние ролиорацЕОНных комбикормов, содержаний рапсовый шрот, на клинические, биохимические п геоморфологические показателя кур-носушек н их продуктивность,

5. Токсичность коибакормов с-ралсоюьм шрошл для белых

6. Елияшш рапсового шрота с шсоксм содоркашшы глшози-нолатов на органолаптичаские показатели мяса а япц кур.

Адробашт получениях рээудьтатрв. Осиовныа положения диссертационной работы далогонн ца:

: ■ 1. ' ■■" .л о . .v

I* лабораторном совещании научных сотрудников лаборатории токсикологии ШИВС, 1990 г., Москва.

2. Мехлаборат^рноы совещании научных сотрудников ВКЗ'ВС, 1990 г., Москва,

ДЙШМИЯ результатов иссле^оъа^. По теме диссертации опубликована статья, в которой взломаны основные положения выполненной работы.

- 5 -

ftftgM структура работы. Диссертация сострит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, собственные исследования, обсуждения, выводы, практические предложения. Список литературы включает 30 источников отечественных и 151 иностранного автора.

Работа .изложена на 104 страницах машинописного текста, иллюстрирована 15 таблицами и 16 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы и методы исследоваздй

Экспериментальную работу по теме диссертации проводили в течение 3 лет (1984-1987) в соответствии-о планом научно-исследовательских работ Всесоюзного ордена Дружбы народов научно-исследовательского института ветеринарной санитарии и плана ГКНТ по заданна (0.51.09.08.09), а также на опытной базе Всесоюзного научно-исследовательского и технологического института птицеводства (Загорск, Московской области).

В опытах использовали 30Ó белых мшей, 100 цыплят, 400 экземпляров аквариумных рыб-гуппи, 100 куриных эмбрионов и 650 голов кур-несукзк породы белый ленгорн.

В рапсовом шроте основное токсикологическое, значение представляй* iwu'i'houidiiHii'i'U, в cuctao входит KpoíomwoBoe

пентиниловое (CgHgblS) и аллиловое (C^HgNS) горчичные масла,

В связи с те».-, что не представлялось возможным получить в чистом виде сумму изотиоцианатов, содержащихся в рапсовом шроте, в качестве модельного соединения, по которому определяли характер клинических признаков интоксикации и патологическую 'мртину, использовали наиболее токсичный из изотиоцианатов

_ 6 -

аплилизотиоцианат-аллиловое горчичное масло, выпускаемое отече-стьеиной промименкостью и используемое в различных технологических целях.

В опытах на белых мшах и цыплятах изучали острую токсичность аллилизотиоцианата при однократном введении внутрь в виде

. • JHf •

раствора на растительном масле. По результатам наблюдений определяли характер клинических признаков интоксикации, сроки поступления симптомов отравления и гибели животных, устанавливали максимально недействующую (подпороговую) и минимально дей-: стиутацую (порогоЕую), (яяникально ст.!ертельнуа и абсолютно смертельную дозы. Расчетном мотодом определяли дозы JLH^q. Павших мышей вскрывали, устанавливали характер морфологических изменений в органах и тканях янвотных.

В опытах на куриных эмбрионах исследовали эмбрнотоксическое и тератогенное действие аллилизотиоцианата при его введении в желточный меаок в различна концентрациях. Рассчитывали- показатель ДЦвд по эмбркотоксичности.

Токсичность аллилизотиоцианата для аквариумных рыб-гуппи еледоБалл с целью подбора биологического теста для токсикологической оценки протов и жмыхов, приготовленных из семян рапса, горчицы или сурепки. На основании результатов Ч:сад<;.ований определяли максимально недействующую, минимально действулцую Дозы, характер клинических признаков интоксикации, а-такае расчетным методом выводили показатель CKg0 - сродкэсмертельную концентрацию для рыб—гуппи. '

Одновременно с этим изучали на рыбах-гуппи токсичность рапсового шрота, содержащего определенную концентрацию изотиоциа-натов.

В опытах на белых мышах 'исследовали субхроническую токсич-

- . 7 -

ность комбикорма с уровнем включения в него рапсового шрота от 5 до 1556.

Основные исследования были проведены во ЕНЕ'ТШе непосредственно в опытно-хозяйстЕенных условиях на курах-несушках, совместно с сотрудниками этого института к.б.н., с.н.с. Егоровым И.А. и к.б.н., с.н.с. ДолбениноД Е.Ф., которым мы выражаем глубокую благодарность за помощь и содействие.

На курах-неоушках проводили зоотехнические испытания и комплекс клин ческих, биохимических, патологоанатомических п гксто-морфологических исследований.

Гистоморфологичесгае исследования выполняли под руководством доктора ветеринарных наук, профессора Тамары Павловны Кудрявцевой, которой мы выражаем искреннюю благодарность и светлую память о ней сохраним в нашем сердце.

Патологический материал фиксировали 10£-ным раствором нейтрального формалина, фиксирующими жидкостями Буэна, Корауа и Шабадаша. Для получения гистологических срезов использовали парафиновую и целлоидную заливку, а также метод замораживания патологического материала. Срезы окрашивали гематоксилин-эозигом на слизь ,яаршнсм !Лейера, на жир-суданом~Ш.

Бетеринарно-санятарную экспертизу мяса кур и яиц, их биологическую ценность проводили в соответствии с общепринятыми'.методами под руководством кандидата ветеринарных наук Келюбина В,П.

; ''РЕЗУЛЬТАТЫ' КССЛЕДОШЛП г , Токсикологические исследования аллилизотиоцианата-

Токсичность для белых мьшз!". При однократном введении ал- ... лилизотйоцианата внутрь бельм мышам з виде раствора на расти-тельном^асле в дозе 750 мг/кг пало, 7 мшей из 10 (7С#), причем 40% из них погибло в течение первых 24 часов, Ш,1? - в течение

- в -

32 часов и 70% - в течение 72 часов, Аллилизотиоцианат в дозе 1000 мг/кг живой массы приводило к гибели 100$ особей в первые 32 часа. Клинические признаки интоксикации характеризовались сильным беспокойством, резко выраженной потливостью, повышенной жавдой, стремлением к поступательному движению.'

Взличина ДЦзд аллилизотиоцианата для мышей При 72-часовом воздействии составила 30±2,5 мг/кг; доверительные пределы при уровне значимости Р^ 0,06; верхний - 600 мг/кг, нижний - 250 мг/кг.

При патологоанатомическом вскрытии павших мышей отмечены острые застойные явления в печени и легких, гиперемия и отек слизистой оболочки желудка и тонкого отдела кишечника, эмфизема, гиперемия, асцит. Желудок переполнен кормовыми массами, трупы павших мышей резко вздуты.

Таким образом, результаты опытов по изучению острой токсичности аллилизотиоцианата для белых мышей показали, что это соединение относится к группе умереннотоксичных веществ при однократном оральном поступлении. Недействующей дозой аллилизотиоцианата для белых мышей можно считать 250 мг/кг, токсичной -500, смертельной - 750 и абсолютно смертельной - 1000 мг/кг живой массы.

Симптомы оотрой интоксикации так же, как и характер пато-логоанатомических изменений в организме животных под действием аллилизотиоцианата, недостаточно специфичны и могут быть использованы при постановке диагноза на отравления токсическими веществами рапса или продуктами его переработки только в комплексе с анамнестическими данными и результатами исследования кормов.

Токсично(?1,т. т^ц цнрчцт- Острую токсичность аллилизотиоциа- . ната для цыплят изучали путем его введения с помощью резинового

катетера на растворе растительного масла непосредственно в зоб в количестве не более 5 мл. При введении аллилизотиоцианата а дозе до 100 мг/кг д. в. видимых признаков интоксикации не отмечали. Цыплята были подвижными, охотно принимали корм и воду, 'активно реагировали на внешние раздракители.

При увеличении дозы до 150 мг/кг через 5-6 часов после введения отштеш слабые признаки угнетения, повышенная жаэда. СЬустя' 18 Часой признаки интоксикации исчезали. Цыплята активно передвигались по.клетке, живо реагировали на внешние раздраки-теля, активно принимали коря я воду.

Чареэ день после введения изотиоцианата в дозе 200 мг/кг живой массы отмечено угнетение, депрессия, чувство жажда. В течение третьего и четвертого днеП признаков угнетения исчезали. Полная нормализация функций организма у вшивших цыплят была отмечена на сздвмой дань. Однако в группе о этоП дозой из 7 подопытных цыплят надо 5 (71%),

Аллилизотишианат в дозе 260г. мг/кг внзЕал 100^-ннП падеж. У цыплят этой группы спустя 1,5-2 часа; гезеявн введения его наступали четко выраженные признаки отравления*. ПддвеБоЙ покров взъерошен, дыхание; часток, сильно-выражена диарея „ вздрагивание, подергивание головой*; Через 3-4,5 часа после дачи-препарата отмечено состояние депрессии" - цыплята судорожно', вытягивают шею, Производя при этом глотательные дзи:жния и издавая крик, (¡чувство жаады) . После этого цыпленок еще некоторое время литт„. тяжело дыша, затем сидит на полусогнутых ногах с опущенными крылв-яШё Ёсли гибель цыплят наступает в первые сутки, то она отмечается в период возбуждения. 7 цыплят, гибпупрос на вторые сутки,, смерть наотупает в период депроссии;

. ;' Величина ЛД^д аллилизотиоцианата для ц'шлят бша определена

.■■-.... ю - , . ..': _ , ;, ...

равной 148±0,22 мг/кг; доверительные продолы при уровне значимости Р^ 0,05; верхний - 151,5 мг/; нижний - 145,5 мг/кг.

Таким образом, чувствительность четырехнедельных цыплят к аллилизотиоцианату более чем в три раза выше, чем чувотвитоль-ность белых мышей.

На основании выполненных исследований определены следующие параметры острой токсичности аллилизотиоцианата для цыплят при однократном вводе ют Внутрь: недействуйщая( максимально нетоксическая) доза - 75 мг/кг; токсическая - 100 мг/кг, минимально смертельная - 150 Мг/кг и абсолютно смертельная - 280 мг/кг живой массы.

При вскрытии павших цыплят отмечено: кожа и мышцу цианотич-ны, слизистая ротовой полости спнюшны; ротовая полость, глотка, пищевод, железистый желудок заполнены слизью;- зоб переполнен кормовыми массами; мышечный желудок заполнен непереваренным кормом; легкие ярко-красного цвета, отёчные; желчный пузырь сильно увеличен и переполнен желчью; слизистая тонкого отдела кишечника катарально-геморрагически воспалена; брыжжеечные оооуда наполнены кровью; сердечная мышца дряблая в полосуя сердца находится темного дйета свернувшаяся кровь.

Клинические признака интоксикации так во, как и характер патологоанатшических изменений у цыплят при их отравлении аллил-изсадоцианатом, недостаточно специфичны, хотя и можно выделять отдельные наиболее характерные признаки отравления, которые могут быть использованы о диагностическими далями.

Опыты ставили на куЕшгых эмбрионаХ для изучения эмбриотокси-ческой и тератогенного действия аллилизотиоцианата при введении его в желточный мешок в различных концентрациях.

- II -

Эмбриотоксцческая активности» Аялилизотиоциалат при вшл«-нии его на растворе растительного масла непосредственно в яи?лточный мешок куриного эмбриона оказывает слабое эмбриотокспчоскоо действие. Доза, которая не вызывает эмбриотоксического деГстпш, определена равной 2 мг/яйцо (40 мг/кг), абсолютно смертельное -Ю.мг/яйцс С200 мг/кг). Исходя из получегчкх да!тнх допусти,то считать, что курштые эмбрионы нецелесообразно использовать в качестве биологического теста для токсикологической опенки рапсового шрота или других кортовых средств из культуры рапса.

Одновременно с экш можно сделать предположение, что изотио-цианагы рапсового шрота не могут оказать отршпгельного шг "кг на репродуктивную способность кур-несушек и жизнеспособность куриных эмбрионов.

Токсичность изотиоцианатов для .аквариумных рыб-гуппц

Сначала была изучена токсичность атлилизотиоцианата для аквариумных рыб-гуппи. Для этого аллиловое глоло п^оледователь-но растворяли в ацетоне в пробирках в кониентрашш от 10 ' до

после чего в стеклянные сосудк, емкостью 1 л за двое трое суток до постановки опита заливали зодоп;оводной водою или водой из аквариума, и вводили в них по 6 мл ацетонового раствора аллилизотпоцианата из пробирок с такал расчетом, чтобы его концентрация в сосудах составила 10, 100 н 1000 иг/л. За рыбами в течение 72 часов устанавливали наблюдение, отмечая сроки наступления клинических признаков, ее характер, сроки гибели рыбы.

Результаты исследований показапи, что амилизотиоцианат в концентрации 0,05 мг/л не вызывает гибели рыйц. При увеличении концентрации до 0,5 мг/л и выие наблюдали частичную или полную гибель рыбы. В этоЕ яе концентра-дш отг.кчшп; п здшшческие симптомы интоксикации, которые проявляюсь сначала беснокойстгом.

это выражалось в ускоренном поступательном движении. Рыбы поднимались к поверхности как бы "заглатывали" воздух, что свидетельствует о торможении у них функций дыхания. К концу первых суток рыбы теряли равновесие, плавали на боку или вниз хвостовым плавником. При концентрации аллилизотиоцианата'(5 иг/л) рыбы выбрасывались на поверхность воды; затем наступало угнетение, адинамия. Рыбы опускались на дно , движения жаберных крышек были едва заметными. При раскрытии жаберных крышек, резко выделялись сильно гиперемированные жабры.

Величина СКдр аллилизотиоцианата для рыбы при 72-чаоовом воздействии составила 0,275 ыг/л, доверительные пределы при уровне значимости 0,05: верхний - 0,325 и нижний - 235 мг/л.

Из приведенных данных видно, что аллилизотибцианат обладает высокой токсичностью дая рыб-гуппи. Поэтому мы считали необходимым испытать их в качестве тестобъекта для токсикологической оценки рапсового шрота.

Однако из общего содержания изотиоцианатов в рапсовом шроте В0% приходится на кротонилизотиоцианат. Значительный процент составляют пентинилизотиоцианат и лишь 2-3$ приходится на аллил-изотиоцианат. Поэтому возникла необходимость проверить чувствие тельность рыб-гуппи к экстрактам из образцов рапсового шрота с различным содержанием изотиоцианатов и отработать способы очистки экстрактов с тем, чтобы исключить отрицательное влиянйе ко-экстрактивных веществ на рыбу. Для этого была.подобраны образцы отечественного рапсового шрота с общим содержанием глюкозино-латов 3,02% и изотиоцианатов - 0,8%, и шрота, приготовленного из семян рапса, полученных из Эфиопии, с содержанием глюкозинола-тов - 4,04$-.И'изотмоцианатоэ ...

'" Пробка ¿¡рота, массой 16, 20,-.30'и 50 г, содержащие соответ-

- 13 -

ственно изотиоцианаты в количества 80, 160, 240 и 420 № для отечественного шрота и 107, 217, 321 и 525 мг для эфиопского шрота, помещай в стаканчики на 100-200 мл, заливали смесыо ацетон вода (7:3) в соотношении к массе пробы 4:1, перемешивали на шуттель-аппарате в течение I часа, фильтровали через бумажный фильтр, фильтрат центрифугировали при 6СС0 об/мин в течение 20 минут. Надосадочную жидкость сливали в ьнпарительиуэт чашку, упаривали до 5-7 мл в токе воздуха. Количественно переносили в пробирку на 10 мл. Чашку смывали 2-3 мл экстрагирующей смесью и сливали в ту же пробирку. Пробирку доводили экстрагентом до метки. Экстракт вносили в сосуды на I л с водой из аквариума, куда помещали по 10 экземпляров рыб-гуппи и вели па ними наблюдение в течение 24 часов, отмечая характер поведения рнбы и сроки их гибели.

Результаты исследований показали, что экстракты из образцов шрота с содержанием 0,8% изотиоцианатов не вызывают гибели рыбы, или симптомы интоксикации, если масса пробы составляла 10 г (80 мг изотиоцианатов). Экстракт« из перечня., содержащего 1,07$, вызывают гибель 20$ рыб, при той же массе пробы (107 мг изотио-цианата). При массе пробы 20 г (169-214 мг изотиоцианатов) отмечали гибель 80-90$ риб и _30 г (240-321 мг изотиоцианатов) -100^-ная гибель рыбы.

Сопоставляя токсичность для рыб-гуппи аллшшзотиоцианата и изотиоцианатов, извлеченных из образца шрота, необходимо отметить, что токсичность чистого аллилилового масла значительно выше суммы масел, извлеченных из шротов. Так, амплизотиоцианат в концентрации 0,5 мг/л вызвал 100^-ную гибель рнбы в точение 24 часов, тогда как изотиоцианаты рапсового шрота только в расчетной концентрации - 240 мг/л.

- 14 -

Это можно объяснить меньшей токсичностью кротониловых изотиоцианатов для рыбы, которая составляет более 80% общего количества изотиоцианатов, возможно недостаточным извлечением масел гюдно-ацетоновой смесью, неточным определением уровня изотиоцианатов в образцах рапсового шрота,

Однако клинические симптомы при отравлении рыбы аллилизотио-цианатом п экстрактами из проб шротов аналогичны, что свидетельствует об идентичности механизма физиологического действия изотиоцианатов.

Несмотря на это биологическая проба на рыбах-гуппи может быть использована для токсикологической оценки рапсового, горчичного и сурепкового шротов. Принципиальная схема такой оценки может быть рекомендована следующая: экстракция смесью ацетон-вода, осаждение с помощью центрифугирования, концентрирование экстракта и воздействие на аквариумных рыб-гуппи. Масса пробы шрота должна быть не менее 25 г и количество 80 мл растворителя ацетон вода в соотношении 7:3. Это позволит открывать изотиоциа-наты на уровне 0,35$ - предельно допустимая концентрация, которую предполагается установить в рапсовом шроте.

Предлагаемый метод обладает достаточной экспрессностью, имеет удовлетворительную чувствительность.

Токсичность полнорациоюмх комбикормов в

рапсовым шротом длд белых мышей

Во ШЙИ ТИП (Загорск) с целью изучения влияния рапсового шрота на продуктивность кур-несушек были изготовлены образцы полнорационных комбикормов (ПК), в которые были введены рапсовнй шрот отечественного производства и шрот, полученный из семян рапса,- импортированных из Эфиопии. Количество введенного шрота и содержание в нем глкжозинолатов и изотиоцианатов представлено

- 15 -

в разделе "Опыты по испытанию токсичности рапсового шрота для кур-несушек" и в таблице 2.

Комбикпша с разным содертанием рапсового шрота скарллнвали белым мьшам вволю в течение I месяца. Всего было сформировано 8 опытных и 2 контрольные группы (но 10 мышоП в.каздоЯ). За мышами, вели постоянное наблюдение отмечая сроки и характер наступления гибели животных. Результаты и схема опытов предстапт!-ны в таблице I.

" Таблица I

Токсичность для белых мшвП тлнбритоннях комбикормов для кур с введенным в ¡шх ралсопым шротом

Отечественный рапсовый шрот, :Шрот из семги, импортированных из глюкозинолаты - 3,02$, изо- :Эфиопии, глакозиполаты - 4,04$, тиоцпаната - 0,8% :изотиоци;шат - I,07$

введение :содержа- :гибель :введение :содеряса- ггнбель мы-шрота в :ипе изо- :мышеП че-:иротз в :ние иоотио-:иой чероз комбикорм:тиоциана-: рез носяп:комбикорм:цианато в :месяц _ШЧ......;_И__i , , ., .„—J—;_

% : Я

контроль - 0 контроль - 0

5,0 С,04 0 5,0 С,54 С

7,5. 0,06 30 7,5 С,08 50

I0¿0 0,С8 80 10,Ó 0.IC8 100

15,0 0,12 100 15,0 0,162 100

Материалы проведенных исоледозанай показывают, что. при скармливании белым мышам полно рационных комбикормов, предназначенных для кур-несушек с введением в них рапсовым шротом не отмечается табели белых мыле , если суммарное содержание в комбикорме изотпоцианатов не превышает 0,05$, при 0,06$ - гибнет 30$ мшей; 0,08 - 50-80$ и свыше 0,08$ - 100$.

Патологоанатошческое вскрытие павших мшей показало гемо-

- 16 -

рагические поражения печени, острую, з^тойную гиперемий легких и желудка, отек слизистой оболочки. Желудок наполнен желтой жидкостью. Бршная полость резко &здут&, сосуды кровенаполданы, ¿а-' стойная гиперемия И катарально-геморрагическое воспаление слизистой тонкого а толстого отделов кишечника. Аналогичные патолого- „. анатомические изменения отмечены в остра* отп?ах не белых шаш испытавших с аллиллзотоцианатом." -

Опыты по испытанию токсичности ^рапсового шрота

Ощгвд 5а щщшт токсичности рапсового фрота И его Питательной а^вдости дгм кур-несушек проводили на" базе ахсперимзн- , талыюго хозяйства Все сошного йаучно-йсследозатедьского и технологического института птицеводства в 1965-1967 гг. - -

Первцй опыт,. Для опыта были подобраны куры-ве сушки яичного направления Кросса Старт о 150 и до 450-дневного возраста* Эксперимент проводили на 9 группах птици (по 36 голов в каадсм>* Схема постановде опытов по испытанию питательности рапсового шрота , приведена ^ таблице 2» .

Определение-. в шроте гл&козинолатоа и изотиоцинатов проводили по ГОСТу Принцип метода основан на ферментатив- . ном гидролизе, тиоглюкозвдов отгонке их с водяным паром,' переводе в производные тиомочешны с' последующим титрованием раствором перманганата калия (КЬ^О^). Содержание глкжозинолатов в отечественном шроте составило 3,02$, иэотиоцианатов - 0,6^, в эфиопском - 4,04 и 1,07% соответственно.

■ Комплекс клинических и биохимических исследований (содержание ферментных элементов-крови, гемоглобина, фоофора, кальция, . общего белка, активности ацетилхолинэстеразы крови), а также зоотехнические исинтатш покапали-, .чфо 'но:? использованные нами

- 17 -

показатели не претерпевают изменений при вводе mm.я комбикорма для кур-несушек рапсового гарота в количестве от 5 до 15$ к массе комбикорма.

Таблица 2

Схема постановки опыта по оценке токсичности и питательной ценности рапсового шрота в производственных условиях

Гп_ . "Ориентировочный уровень

nil '. Характеристика комбикормов гирота_а комбикормах, %

. :отечественный!эфиопский

.рапс : р-лпе

Контрольная - полноценный комбикорм (ПК) с 10$ подсолнечного и 5-6$ соевого шрота

Опытная ПК с замене Г. 5$ подсолнечного шрота рапсовым

Опытная ПК с заменой 7,5$ подсолнечного шрота рапсовым

Опытная ПК с полной заменой подсолнечного шрота рапсоЕым

Опытная ПК с полной заменой подсолнечного шрота и части соевого шрота рапсом

Комплекс клинических и биохимических исследования (содержание ферментннх элементов крови, гемоглобина, <Тос]юра, кальция, общего белка, активности ацотилхолпнэстерпзн крови), а таюяе зоотехнические испытания показали,, что все использованные нами показатели не претерпевают изменений при введении в комбикорма ■ цля кур-несушек рапсового шрота б количестве от 5 до 15$ к массе комбикорма.

Однако при этом имеет место сгетенпэ яичной продуктивности <ур-несушек на С,8$ по отноаеншэ при оодв;хзаииц-в ши&зеорю [зоткоциататов в количестве 0,04$ до 12$ при их уровш С,162$.

'Результаты нешпх исследований подтэзредхлг дашшо зарубея-

5 5

7,5 7,5

10 10

15 15

них авторов о снижении яичной продуктивности кур-несушек ^ИагсЬ

В.Е., 1972, 1978; Ве11 ^М. , 1982; Ьеевоп Б. . , 1977,. 1978].

Латологоанатомичэокое и гистошрфологическид измецездя в тканях кто, получавших в рационе ШС.Щй. ш.Ш

Учитывая, что в опытах на курах-несушках морфологические и биохимические исследования крови (определение форменных элементов, гемоглобина, общего белка, активности ацетилхолинэстеразы крови, неорганического фосфора, кальция) была аналогичны в опыте и контроле, мы основное внимание уделяли изучению характера па-тологоанатомических, и, прежде всего, гистоморфологических исследований.

Результаты этих исследований показали, что наиболее существенные изменения имеют место в яелудочно-кишечном тракте, почках, легких и особенно в печени.

В опытах о дозами рапсового шрота, введенного в комбикорма для птиц, в количестве 5% (содержание изотиоцианатов а комбикорме 0,04-0,054$) отмечается лишь слабо выраженная десквамация эпителия почечных канальцев. ■

При увеличении норлы введения шрота в комбикорма до 7,55? к массе имеет место жировое перероздение клеток печени кур, десквамация эпителия ворсинок слизистой оболочки кишечника и железистого желудка. Интенсивность гистоморфологических изменений возрастает пропорционально увеличению нормы введения шрота в комбикорма. При норме 10-15$ имеет место амило1щное перероадение печени, разрыхление структуры ткани, дистрофия гепатоцитов.

Результаты наших исследований подтвврздают данные некоторых зарубежных авторов, которые считают, что в развитии патологического процесса при отравлении животных продуктами разложения

: - 19 -

глюкозинолатами рапоового шрота является гепатотоксическое действие.

В щитовидной железе У птиц всех групп каких-либо отклонений, от нормы не отмечалось, за исключением одной подопытной группы, у которых имело место увеличение фоликулов щитовидной железы. .

В легких у всех птиц опытной и контрольной групп отмечены застойные явления, общее уплотнение и огрубение тканей. Это мо-?ет Сыть связано с тем, что птицы в течение длительного времени содержатся в плеточных условиях.

Результаты гистоморфологических исследований дают основание считать, что отмеченные изменения, особенно в печени, являются наиболее объективным показателем, отражающим токсическое действие вредных включений, содержащихся в рапсовом шроте и четко коррелируют о дозой его введения в комбикорма для птицы.

Штдринато-санитарная экспертиза мяса и

яиц кур, получавших в рационе рапсовый шрот

ПослеубоР.ный осмотр тушек птицы проводили в соответствии с "Правилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветершарно-сан'дтарной экспертизы а мясных продуктов".

Вндалениа !«тароорг?ну.змов из продуктов убоя птицы осущаст-вляли в соответствии о ГОСТом 7702.2-74 "Мясо птицы.'Мэтоды бактериологического анализа*. .

Биологическую ценность мяса птицы определяли согласно "Методическим рекомендациям по использованию инфузорий те^аоМтепа РУг1Гоги4а для биологической оценки продуктов и кормов".

Яйца исследовали по "Правилам ветеринарйо-санитарной экспертизы яиц куриных, утиных и гусиных".

; При послоубойном осмотре тушек кур, получавших в рационе

рапсовый шрот, органолоптических .изменений не обнаружено.Патогенные и условно-патогешшо микроорганизмы, из тушек и внутренних органов выделаны но были.

Спзпко-хииические показатели мяса опытных и контрольных групп кур отличий ни ш.юли. Величина р£1 белых мьшеП у подопытных и контрольных кур находилась в пределах 5,81^(5,3; красных мышц -0,05*С,04.

Tyiiiicii подопытных и контрольных кур прл температуре плюс 2-4°С нрояьпяли одинаковую стойкость к хранении и по всем орга-налептичосктл показателям характеризовались как доброкачественный и пригодный к использованию на пг.извые цели.

Еиологичоекая ценность лиц от кур годопитних групп лишь незначительно отличалась от контроля (р< 0,01). При эетеринар-но-санитарной экспертизе установлено, что яйца из опытной и контрольной групп имели все показатели доброкачественности, однако при органолоптичос:;ой оценке яиц из опытной группы'установили, что они имела посторонний (рыбный) золах, Повидимому, это связшю с том, что в рапсовом шроте содержится синапнн, явл/ио-о!кроы хол:ша а скнапиковой- кислоты прздщхций яйцшл рыбный радах £ Bell J.Ii. , Anderson D.M. , I9BI; Bell J.M. et al., X982j. © '

Общепринятые метода ватеринарно-сакитарной экспертиза мяса кур-нвсуаок, получавших в рационе рапсовый шрот в количестве от 5 до 15$ к массе комбикорма, не позволили установить каких-либо отклонений от нормы. Однако биологическая ценность мнса, установленная тестом с Tetrachymena pyriforois снижалась почти пропорционально дозе шрота, вводимого в комбикорма.

Это, возможно,'связано с нарушение« функции печени, которая,

. ' ■'-" 2i -

играет решающее значение в обезвреживали токсических веществ

и в белково-образовательной функции организма, от.которой в

значительной степени зависит биологическая ценность, получаемых от животных и птицы мяса.

BU B O ли

1. Изучен характер токсического действия изотиоцианатов рапсового ш'рота на белых мышей, аквариумных рыб-гуппи, цыплят

я определены параметры.острой токсичности аллилизотиоцианата для этих видов животных; ДЦ^ ачлилизотиоцианата для белых мышей при однократном введении внутрь составила 300^2,5 мг/кг; для цыплят четырехнедельного возраста - I48jp,22. мг/кг; CK^q для ачвариумннх рыб-гуппи - 0,275 мг/л. Расчетная смертельная концентрация изотиоцианатов, содержащихся в рапсовом шроте, для рыб-гуппи не менее 150 мг/л. ■

2. Клинические признаки острого отравления изотиоцианаташ прояапялтея общим угнетением, обильным потоотделением у мышей, диареей у цыплят, учащенным дыханием. На вскрытии отмечается катаралыю-гэлюррагичоскиЗ гастроэнтерит, отек легшие, гепатит.

3. Йзотиоцианаты обладают слабым эмбриотоксическим дейст-визм. При введении наиболое токсичного из изотиоцианатов аллилизотиоцианата в иелточный мешок куриного эмбриона в дозе 2 мг/ яйцо (40 мг/кг) не бшо устаноплено эмбриотоксического эффекта.

4.Скармливание белым швам в течение I месяца полнорациоц-iiiix комбикормов для кур-кесушйк с введенным в них рапсовым шротом а количестве от 5 до 15% к массе комбикорма и содержанием

в шроте изотиоцианатов от 0,8 до 1,07$ отмечены клинические признак интоксикагпш и глбель мышей при норме введения шрота от 7,5% и более. При норме, введения шротов 10-15$ к массе комбикор-•

ма отшчсна 100$-ная гибель белых мышей.

5. При скарылисшши полнорадиошшх комбикормов в течение 10 месяцев курам-несушкам с ведением в их состав радсрвых шротов в качество от 5 до 15$ к. массе рациона и содержащих изо-тиоцианоти от 0,8 до 1,07$ не било отмечено клинических признаков интоксикации птицы нлл ее падежа, не установлено статистически достоверных юме копий в фориеных элементах крови, гемоглобина, содержание общего болка, фосфора, кальция, активности холинэсте-разц кроши Однако при этом отмоченосшиенио яичной продуктивности птицы и гистомиуфологические избиения в органах и тканях.

6. Гистоиор* алогические изменения в органах и тканях птицы проявляются десквамацксй эпителия почечных канальцев, жировым и амилоидным порероздеиием печени, десквамацией и истончением ворсинок али^сго* оболочки -челезистого желудка и кишечника, огрубением и уплотненном легочной ткани. На установлено г:юто-морфологичес:з1х иэшноний в тканях щитовидной железы.

7. Мясо кур-несуиек, получавших полнорациоицые корда с со-^ртлнаец рапсового прота от 5 до 15$ по ерганолелтичеекгм показателям не отличалось от мяса контрольной птицы, но имело на 7-12$ меньшую биологическую ценность устанощо^у'^.б л о тесту с тетрахгмона пирофоплио, Яйид, получении* от слитных кур (10$ отечественного рапса и 7,5$ Эфиопского рапса) имели рыбный прив-куо и понигенную на 7-10$ биологлческую ценность.

прашческие пр.адошадш

Наши материала вошли в методические рокоыоидшуш: "Лопч'п.-чо-ванио рапсовых кормов в птицеводстве", о.ь',о6[х:иш;о Ш: 10 "Синшти-цоиромом" 13Э0.

По теш диссертнци!* опубликована работа:

I. Цоцория М.Б. Йишнио рапсового шрота из ¡.юрролотпчокио и биохимические показатели крови и продуктивность ±сур /У Кзтори-нария, 1987. - № II. - С.70-71.

ВКИИВС, Зланхгородское ш., д. 5, 1990г., ти*аж 100 эжв. ,3ак. 465^