Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Санитарно-токсикологическая оценка амитраза как средства борьбы с демодекозом собак

Р Г 6 од

' 1 На правах рукописи

БИРЮКОВ АНДРЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ

САНИТАРНО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА АМИТРАЗА КАК СРЕДСТВА БОРЬБЫ С ДЕМ0ДЕК030М СОБАК

16.00.06. - ветеринарная санитария и экология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученей степени кандидата ветеринарных наук

Москва - 1998 год

Работа выполнена в лаборатории токсикологт Всероссийского научно-исследовательского институте ветеринарной санитарии, гигиены и экологии.

Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор Г.А.Таланов Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,

профессор Г.Н.Коржевенко, доктор биологических наук, профессор Э.Б. Кербабаев. Ведущая организация: Московская государственная

академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина,

Защита состоится " " _ 1998 г в _ часов

на заседании диссертационного совета {Д 020.50.01) при Всероссийском научно-исследовательском институте

ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (1^3022, Москва, Звенигородское шоссе,5).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. Автореферат разослан "_"___1998 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Майстренко Е.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Демодекоз - широко распространенное инвазионное заболевание собак, которое наряду г экономическим ущербом имеет социальное значение, так-как этот вид животных находится в непосредственной близости с человеком (Ф.Бэне,1972; С.В.Ларионов, 1991; Ф.И.Василевич, 1994; М.В.Шустрова, 1996; Piotrowsri F., 1975; Olsyewski C.Y., 19В8; Havrileck H.R., 1989).

В борьбе с деыодекозом бьши испытаны различные методы и средства от алкоголя, керосина и прижигания пораженных участков тела каленым железом, до применения синтетических акарицидов на основе соединений различных химических групп - хлорорганических, фосфорорганических, карбаматов, пиретроидов, авермектинов (В.А. Говырин, 1955; H.A.Колабский, 1975; Д.К.Поляков, 1957; В.И. Есиков, 1975; С.В.Ларионов, 1991,1993; Л.Н.Скосырский,1993; Ф.И.Василевич, 1993, 1994).

Одним из эффективных акарицидов в борьбе с демоде-козом является амитраз (тактик) - 1,4 - ди - (2,4-диметип фенил)- 3- метил - 1,3,5 -триазапента - 1,4 -диен, синтезированный в 1969 году в лаборатории "Boots Coompany Limited" (Великобритания) ii выпускаемый рядом зарубежных фирм ("Шеринг", "Хехст", Германия) в форм.-20% и 12,5« концентратов эмульсий, 20%, 50% и 60% смачивающихся порошков.

Ресинтез амитраза осуществлен в России и в настояшее время ряд предприятий выпускают препараты на его основе.

э

Амитраз обладает высокой акарицицной эффективностью по отношению к -Ьаркоптоидным, иксодовым, демодекозным клещам, вшам и кровососкам на всех стадиях их развития и, кроме того, снижает способность клещей откладывать яйца (Б.А.Фролов, П.А.Ли,1981; Cannon R.V.,1976; Harrison J. R.,1992).

Однако, данных о полной токсикологической характеристике соединения, в зависимости ,от препаративной формы, кратности и способа применения, его отдаленном токсическом воздействии, а также влиянии на собак различных пород и половозрастных групп, в доступной литературе выявить не удалось. Кроме того, токсикологические исследования проведены в основном с импортной субстанцией. Сведения о токсичности ресинтезированного в нашей стране аналога малочихлены.

Цель работы. Проведение токсикологической оценки амитраза отечественного синтеза и разработка на его основе акарицидного препарата для борьбы с демодекозом собак.

Задачи исследований:

изучить токсические свойства амитраза при пероральном введении и накожном нанесении в остром и субхроническом эксперименте на лабораторных животных;

изучить влияние амитраза на организм собак различных пород и половозрастных групп;

разработать рецептуру амитразсодержащей композиции и изучить ее акарицидные, резорбтивно-токсические свойства и терапевтическую эффективность при демодекозе собак.

Научная новизна. Впервые проведены комплексные токсикологические исследования амитраза отечественного производства в остром и субхроническом эксперименте на лабораторных животных. Установлено, что амитраз относится к умеренно опасным или мало опасным пестицидам с выраженной избирательной токсичностью. Соединение не оказывает сенсибилизирующего эффекта в рамках стандартного протокола исследований, не вызывает местно-раэдражающего действия на кожу, обладает умеренно выраженными кожно-резорбтивными, слабо выраженными кумулятивными свойствами и по параметрам токсичности практически не отличается от своего зарубежного аналога.

Результаты проведенных исследований показали, что амитраз при однократном и многократном применении хорошо переносится собаками разных пород и половозрастных групп в дозах в пять раз превышающих терапевтические, это дает основание считать его перспективным соединением для терапии демодекоза собак.

, На основе амитраза разработан и прошел апробацию препарат "Леда", обладающий выраженной лечебной эффективностью при сквамозной, пустулезной и смешанной формах демодекоза собак. Введенные в состав препарата вспомогательные компоненты, такие как диметилсульфоксид и прополис, способствуют лучшему проникновению акарицида к месту локализации клещей, оказывают бактериостатическое и фунгиостатическое действие на секундарную микрофлору, активизируют регенеративные процессы в коже.

Основные положения диссертации, выносимые на

защиту:

- материалы по испытанию токсических свойств пестицида амитраз отечественного производства;

- результаты лабораторных и производственных опытов по изучению акарицидной активности, токсичности и терапевтической эффективности при демодекоэе собак препарата "Леда";

- практические предложения по использованию препарата "Леда" при лечении различных форм демодекоэа собак;

комплексный метод лечения генерализованной формы демодекоэа собак.

Практическая ценность^' работы. По результатам проведенных исследований разработаны, одобрены Советом по ветеринарным препаратам, согласованы и утверждены Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ:

- Технические условия на препарат "Леда" 9337-008-23519223-97(опытная партия);

- Временное наставление по применению препарата "Леда" при саркоптоидозах плотоядных животных м демодекозе собак Р 13-4-2/830 от 21.01.97.

Апробация полученных результатов. Основные положения диссертационной работы доложены:

л- на Международном координационном ' совещании "Экологические проблемы патологии, фармакологии « терапии животных", Воронеж, 1997;

- на заседании Совета но ветеринарным препаратам Департамента ветеринарии Минсельхозпрода РФ, Москва, 1996;

- на VI Международной конференции по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных, Москва, 1998. '.',.',

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертации изложены в 5 печатных работах.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 169 страницах и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и приложения.

Работа иллюстрирована 34 таблицами, 3 рисунками, 2 фотоснимками.

Список литературы, включает 254 источника, в том числе 74 зарубежных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная часть работы выполнена в период с 1996 по 1998 гг. в лаборатории токсикологии Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, ■ гигиены и экологии, НПП "Биотех БК" и приюте для бездомных животных "Русь*".

В опытах использовали технический амитраз отечественного производства с содержанием 97% действующего вещества (д.в.), технический амитраз производства фирмы "Хехст" с содержанием 98% д.в. и разработанную нами

акарицидную композицию с содержанием 0,2% амитраза -препарат "Леда". ,у*

Изучение токсичности препаратов для теплокровных животных проводили на белых мышах массой 18-25 г, морских свинках массой 250-350 г, кроликах породы шиншила массой 2-2,5 кг, белых беспородных крысах массой 150 -200 г и собаках различных пород массой 3-50 кг.

Для опытов подбирали клинически здоровых лабораторных животных обоего пола. Содержание и кормление животных опытных и контрольных групп было аналогичным.

Препараты вводили белым мышам и крысам внутри-желудочно в форме масляных суспензий с помощью шприца и иглы с булавовидным утолщением, собакам - с кормом.

При наружной обработке ^препараты наносили в форме масляных суспензий на выстриженные участки кожи.

Расчет ЛД50 и других параметров токсичности проводили методом пробит-анализа по В.В.Прозоровскому (1962).

Наблюдения' за экспериментальными животными после однократного введения осуществляли в течение 14 дней, после многократного - в течение 2 месяцев.

У белых крыс и собак при наружном нанесении препарата проводили исследования гематологических, биохимических показателей и патологоанатомических изменений в органах и тканях. В крови определяли содержание форменных элементов и гемоглобина, активность холинэстераэы, в сыворотке крови - общий белок, активность щелочной фосфатазы, в моче - уровень содержания гиппуровой кислоты. .

При изучении местно-раздражающего и кожно-резорбтивного действия учитывали клинику отравления, состояние кожи (отек, утолщение кожной складки, расчёсы, болезненность), а также определяли параметры токсичности (ЛД50, кожно-оральный коэффициент) как критерии всасывания препарата через кожу.

Местное действие препарата на слизистые оболочки изучали при однократном внесении в конъюнктивальный мешок глаза кролика, отмечая появление и выраженность гиперемии, отечность, инъекцию сосудов склеры и роговицы, ширину зрачка, состояние век. Оценку действия на слизистую оболочку проводили по характеру конъюнктивита.

Кумулятивные свойства препарата изучали на белых мышах по методу Лима с соавторами (1961). Оценку кумулятивных свойств проводили на основании вычисленного коэффициента кумуляции (отношения ЛД50, установленной в подостром опыте, к ЛД щ, установленной в остром опыте).

Исследование состояния центральной нервной системы проводили с помощью учета поведенческих реакций у животных ("горизонтальной" и "вертикальной" двигательной активности и рефлекса "взглядывания в норки").

Аллергенное действие изучали на■морских свинках при многократном накожном нанесении -амитраза в концентрации, не вызывающей при разовом воздействии реакции нормальной кожи.

Влияние амитраза и препарата "Леда" На физиологическое состояние собак при однократном и многократном накожном нанесении изучали на животных

е

разных пород V возрастов как клинически здоровых, так и больных ремсдекс^ом, содержащихся в питомнике и в домашних условиях. В процессе эксперимента проводили комплексные клинические исследования согласно общепринятым методикам.

Для проведения лабораторных исследований было использовано 276 крыс, 550 мышей, 5 кроликов, 6 морских свинок и 55 собак.

Фярмакокинетику амитраза изучали в опытах на белых мышах при однократном и многократном накожном нанесении препарата с использованием метода газо*-жидкостной хроматографии.

Испытание акарицйдной активности амитраза проводили, руководствуясь Методического! указаниями по испытанию пестицидов, предназначенных< для борьба с эктопаразитами животных (М.,1973), в опытах in vitro на изолированных клещах Psoroptes cuniculi, полученных от больных псороптозом кроликов, . в сравнении с неоцидолом и перметрином.

Терапевтическую эффективность препарата "Леда" при демодекозе изучали на больных собаках с разными клиническими формами заболевания. Диагноз на демодекоз ставили по результатам микроскопии глубоких соскобов кожи или содержимого узелков (папул, пустул).

Полученные результаты обработаны статистически, достоверность различий оценивали по Стьюденту.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОаХНИЙ

ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ АМИТРАЗА ДЛЯ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ И СОБАК Изучение острой токсичности при введении в желудок а)Опыты на лабораторных животных

При введении амитраза внутрь белым мышам в дозах 1200-3000 мг/кг первые признаки отравления появлялись через 10-15 минут, в виде кратковременного возбуждения, которое постепенно сменялось угнетением и атаксией. Дыхание сначала было учащенным, затем затрудненным, поверхностным и редким. Смерть животных, как правило, наступала в первые сутки. Препарат в дозе 600 мг/кг вызывал у мышей возбуждение, учащение, а затем урежение дыхания, дрожь. Гибели животных отмечено но было, следовательно, эту дозу можно считать максимально-переносимой.

У выживших животных признаки интоксикации исчезали, в зависимости от введенной дозы, через 1-4 дня. В .последующие сроки гибели животных не отмечали. ЛД5и для белых мышей составила 1614 ± 115 мг/кг.

Клиническая картина отравления при введении мышам зарубежного препарата была в основном аналогична картине отравления при введении отечественного препарата. Амитраз в дозах 1500-3000 мг/кг вызывал гибель животных в первые сутки, в дозах 600 и 900 мг/кг - гибели животных отмечено не было. ЛД50 зарубежного амитраза составила 1665 ± 108 мг/кг.

Патологоанатомические изменения у мышей характеризовались : цианозоа слизистых оболочек, выраженным трупным окоченением, водянистыми истечениями из ротовой и носовой полостей, застойной гиперемией и точечными кровоизлияниями в паренхиматозных органах, отеком легких, катаральным воспалением оболочек желудочно-кишечного тракта.

Установленные в результате экспериментов параметры острой токсичности позволили отнести ' амитраз отечественного и зарубежного производства, согласно принятой гигиенической классификации пестицидов, к группе мало токсичных для мышей препаратов.

В связи с тем, что клиническая картина отравления и параметры острой токсичности амитраза российского и зарубежного производства бьши практически одинаковыми, то - дальнейшие токсикологические исследования мы проводили с отечественным амитразом.

Препарат крысам вводили в желудок в дозах 1002200 мг/кг (по д.в,). Первые признаки отравления у крыс, получивших препарат в летальных дозах, появились через 2 часа и проявлялись теми же симптомами, что и у мышей. Гибель крыс в зависимости от введенной дозы препарата наблюдалась через 6-36 часов.

ЛД5о амитраза при однократном введении в желудок составила для белых крыс 871182 мг/кг, что свидетельствует о большей чувствительности к акарициду этого вида животных.

б) Опыты на собаках

В опытах использовали животных разных пород, возраста, массы, пола и физиологического состояния. Амитраз задавали животным в виде технического вещества с куском сливочного масла в дозах 1,5 и 10 мг/кг массы.

Исследования показали, что введение внутрь собакам амитраза в дозе 1 мг/кг массы не вызывает каких-либо признаков интоксикации; в дозе 5 мг/кг ~ вызывает слабое кратковременное беспокойство и отказ от корма; в дозе 10 мг/кг - брадикардию, урежение и ослабление дыхания, у некоторых собак незначительное снижение температуры тела (на 0,4°-1,0°С). Симптомы интоксикации проходили в течение 5-20 часов.

Не было установлено повышенной чувствительности к амитразу у собак разных пород, пола, возраста и физиологического состояния, а также изменений в гематологических показателях. Минимально-толератная доза амитраза (доза, вызывающая появления первых видимых признаков интоксикации) для собак составила 5 мг/кг массы животного.

Изучение кожно-резорбтивного и местно-раздражающего действия амитраза

Острую токсичность при накожном нанесении изучали на крысах, которым амитраз в виде суспензии наносили однократно на выстриженные участки тела в дозах от 500 до 3000 мг/кг.

Испытания показали, что амитраз хорошо всасывается через неповрежденную кожу и в токсических дозах

вызывает клиническую картину отравления, как и при пероральном введении, варьируют лишь сроки наступления, выраженность и продолжительность симптомов.

ЛД50 составила 1750 ± 198 иг/кг и кожно-оральный коэффициент - 2,1. Установленные параметры позволяют отнести аиитраз, в соответствии с гигиенической классификацией пестицидов, к соединениям с умеренно выраженной кожно-резорбтивной токсичностью.

Оценку местно-раздражающего действия амитраза проводили при аппликации его на кожу м внесении в конъюнктивальный мешок глаза крыс.

Опыты показали, что , однократные и 10-кратные аппликации на кожу амц^раз^[ в дозе 50 мг/кг масс» не сопровождались признаками раздражения. При повторных аппликациях препарата в дозе 200 мг/кг у крыс отмечалась реакция кожи в виде слабой гиперемии.

При внесении 1% суспензии амитраза в конъюнктивальный мешок глаза у крыс было установлено слабо выраженное, кратковременное раздражающее действие, проявившееся в виде слезотечения, гиперемии и незначительного отека конъюнктивы.

Результаты опытов свидетельствуют о том, что амитраэ обладает слабо выраженным местно-раздражающим действием.

Изучение кумулятивных свойств амитраза

Исследование кумулятивных свойств амитраза проводили на белых мышах путем сравнения показателей токсичности при однократном и многократном введении внутрь по

методу Лима (Lin et ail,. 1961). ЛД50 a подострен* эксперименте составила 2187 ± 110 мг/кг и коэффициент кумуляции - 1,35, что характеризует амитраэ как соединение со слабовыраженными кумулятивными свойствами,

. Изучение сенсибилизирующего действия амитраза Опыты проводили на морских свинках. Препарат наносили в виде 0,5% раствора в ацетоне. Всего было проведено 15 аппликаций.

Раэрешаицую дозу препарата о концентрации, примененной а хода сенсибилизации, и о трах раэведенмлх (1:10 >1:50;1:100)наносили через 14 дней »а участки коки противоположной стороны. Но было отмечено эритемы, инфильтрации, изъязвления я других кояныя проявлений аллоргии, а также изменений гематологически» показателей. Результаты опытов свидетельствуют о том, что амитраз не обладает сенсибилизирующими свойствами и не вызывает аллергенного дерматита.

Изучение влияния амитраза на функциональное состояние нервной системы При изучении влияния амитраза на функционирование центральной нервной системы использовали метод сценки двигательной активности. После 10-дневных накояныз аппликаций амитраза в дозе 50 мг/кг было отмечено некоторое повышение двигательной активности у животных опытной группы, но установленные различия статистически недостоверны и не являются гигиенически значимыми.

ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОКИНЕТИКИ АМИТРАЗА Исследования проводили при консультации с кандидатом биологических наук С. А. Лавиной

Аыитраз в виде 0,2» раствора в диметилсульфоксиде наносили накожно в дозе 0,5 ил/кг массы животного 10-кратно с 'интервалом 3 дня. Препарат определяли е почках, печени, мышцах и коже через 1, в и 24 часа, л затем через 3 и б дней. Определение амитраэа в органах и тканях проводили методом гаэо-жидкостной хроматографии.

В результате опытов было установлено, что после однократного, 5-кратного и 10-кратного нанесения препарат» на кожу мышам, в мышцах, печени и почках остатки амитраза методом ГЯХ обнаружить не удалось, В коже препарат определяли в течение 5 дней а максимальной концентрации 7,2 мкг/г. Через б дней после последнего нанесения препарата его остаточные количества в коже обнаружены не были.

РАЗРАБОТКА ПРЕПАРАТА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕМОДЕКОЗА СОБАК, ОЦЕНКА ЕГО ТОКСИЧНОСТИ И ЭФФЕКТИВНОСТИ Опыты по изучению акарицидной активности амитраза проводили на клещах Peoroptee cuniculi in vitro в сравнительном аспекте с диазиноном и перметрииом, руководствуясь Методическими указаниями по испытанию пестицидов« предназначенных для борьбы с эктопаразитами животных (1973).

Полученные результаты показали, что амитраэ обладает выраженными акарицидными свойствами и не уступает в

1в

степени активности диазинону и перметрину. СКц0 амитраза для клещей составила 0,003%.

Определение акарицидной активности амитраза по отношению к клещам рода Оешоаех и отработку лечебных концентраций и доз препарата проводили непосредственно на больных демодекоэом собаках.

В результате научных поисков был разработан препарат "Леда", содержащий в^ качестве действующего вещества 0,2% амитраза и вспомогательные компоненты, в качестве которых использовали диметилсульфоксид и прополис. Они обеспечивают лучшее проникновение активного вещества в кожу,' активизируют в ней регенеративные процессы и • предотвращают развитие секундарной микрофлоры.

Препарат "Леда" представляет собой готовую к применению стандартную и стабильную композицию. Для контроля качества препарата разработаны ТУ {на опытную партию), которые согласованы в установленном порядке с Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ.

Изучение токсичности препарата "Леда" для лабораторных животных и собак

Изучение острой токсичности препарата "Леда" проводили на белых мышах. Препарат вводили непосредственно в желудок из расчета, чтобы объем вводимой жидкости не превышал 1 мл.

Расчетная, величина ЛД^о, составила для белых мышей более 50000 мг/кг массы, что позволяет отнести препарат

"Леда", согласно гигиенической классификации пестицидов, к препаратам IV класса опасности - "мало опасные".

Местно-раздражасяцее и кожно-резорбтивное действие препарата "Леда" изучали путем однократного и десятикратного погружения хвостов белых мышей в нативный препарат при экспозиции 2 часа. В течение всего опытного периода внешних признаков токсикоза и гибели мышей не ;>тмечали. Опытные животные по своему поведению и внешнему виду не отличались от контрольных.

Изучение кожно-резорбтивного действия препарата "Леда" изучали также на крысах путем 7-кратных накожных аппликаций на выстриженные участки спины животных в количестве 1 мл. Признаков токсикоза и гибели крыс не отмечали. Не было также установлено различий в динамике прироста массы и ректальной температуры у опытных и контрольных животных, клинических показателях крови, активности холинэстеразы и щелочной фосфатазы сыворотки, уровня содержания в моче гиппуровой кислоты. Отмечено лишь некоторое увеличение весовых индексов печени у крыс подопытной группы. Весовые коэффициенты других внутренних органов достоверно не отличались от контроля.

Полученные результаты изучения кожно-резорбтивного действия показали, что препарат "Леда" не обладает способностью проникать в организм через неповрежденную кожу в количествах, вызывающих отравление животных, а также изменять функциональное состояние жизненно важных органов и систем организма при его накожном нанесении в течение семи дней в суммарной дозе по д. в. 70 мг/кг массы животного.

Н опыте на кроликах изучали местное действи препарата на слизистые оболочки глаз. Препарат "Леда" вносили в конъюнктивальный мешок глаз кролика я количестве одной капли. Оценку раздражающего дейетри< проводили по характеру развития конъюнктивита. Чере:! 30 минут после воздействия были отмечены слезотечение и умеренно выраженная гиперемия. Указанные явления исчезали через 6-12 часов.

«

Таким образом, было показано, что местно-раздражающее действие у препарата "Леда" слабо выражено и носит кратковременный характер.

Влияние препарата "Леда" на физиологический статус собак изучали на 15 собаках (9 кобелей, 6 сук) длинношерстных и короткошерстных (беспородные, колли, бультерьер, бульдог) в возрасте от б месяцев до 3 лет, массой 5-35 кг. Препарат применяли в терапевтической дозе (0,5 мл/кг) и превышающей терапевтическую в два и пять раз,. нанося однократно и семикратно на выстриженную поверхность здоровой кожи в области спины. Животным контрольной группы наносили комплекс вспомогательных компонентов испытуемого препарата.

Результаты исследования показали, что однократное нанесение препарата "Леда" в терапевтической и превышающей ее э 2 и 5 раз дозах, а также семикратное нанесение его в терапевтической дозе, не вызывает отклонений от нормы в клинических и гематологических показателях собак разных пород, возраста и иола. Не было также выявлено местного раздражающего действия препарата

На кожу.

Изучение терапевтической эффективности препарата

"Леда" при демодекозе соОак Терапевтическую эффективность препарата "Леда" изучали на пораженных демодекозным клещом собаках а процессе ччстной практики в городе Москва, а также на собаках, содержащихся в приюте для бездомных животных ••Русь".

Диагноз заболевания ставили на основании клинических и акаролопических исследований. Всего в опытах было использовано 29 собак разных пород, возраста и пола, в том числе, 12 животных со сквамозной формой, 9 животных с пустулезной и 8 животных со смешанной формой демодексза. Для сравнения терапевтической эффективности контрольным животных применяли аверсектиновую мазь в соответствии с наставлением по ее применению.

Препараты накосили на предварительно подготовленные участки пораженкой кожи (шерсть выстригали, очищали от струпьев тампоном, смоченным, спиртом) с захватом пограничной здоровой кожи до 1 см.

В результате клинических испытаний было показано, что препарат "Леда" обладает выраженной терапевтической эффективностью при сквамозной, пустулезной и смешанной формах демодекоза. Кратность обработок и длительность лечения зависят от клинической формы заболевания и степени поражения кожно-волосяного покрова.

В целях повышения эффективности лечения при генерализованной форме демодекоэа 2Го значительными поражениям;- тела был предложен и апробирован комплексный способ лечения, включающий одновременное использование

препаратов контактного и системного действия, В качестве системного акарицида использовали фосфорорганический препарат "Сайфли", производства фирмы "Цианамид" (США). В форме таблеток препарат, назначают собакам при демодекозе каждые три дня в дозе 3 мг/кг массы в течение б недель,

Совместное применение препаратов позволило добиться полного излечения1 животных, сократить сроки лечения, уменьшить суммарную дозу ахарицидных средств и, тем самым, предотвратить возможность их побочного действия и интоксикации животных.

Ввиду того, что деыодекоз сопровождается иммунодефицитом и нарушением обмена веществ, для лечения больных животных мы применяли иммуно-корректоры (препарат "Дина", байпамун) и биологически активные вещества (витамины, микроэлементы, элементарную серу), что способствовало повышению резистентности организма и эффективности лечебных мероприятий.

ВЫВОДЫ

1. Амитраз по степени острой токсичности относится к мало опасным или умеренно опасным пестицидам, с величиной ЛД5[) при однократном введении внутрь для белых мышей 1614 ±115 мг/кг и для белых крыс - 871 ±82 мг/кг. Минимально-толерантная (пороговая) доза амитраза для собак при внутреннем введении составляет 5 мг/кг массы животного.

Амитраз отечественного производства по токсичности и характеру действия не отличается от аналогичного ' ос-цянеьия зарубежных фирм.

2. В токсических дозах амитраз вызывает у животных 4,*аных видов аналогичную картину отравления, проявляющуюся кратковременным возбуждением с последующим угнетением, регидностью хвоста, парезом конечностей, судорогами, затрудненным дыханием, коматозным состоянием. У аоОак отмечается брадикардия и снижение ректальной гемпьратуры.

3. Амитраз обладает умеренно выраженным кожно-р« юр5тивным действием: ЛДм для крыс составляет 1750 ± 19 8 мг/кг, кожно-оральный коэффициент равен 2,1. Сенсибилизирущего действия у амитраза в рамках стандартного протокола исследований не выявлено.

4. Местно-раздражающего действия на кожу в условиях однократного и повторного нанесения . амитраз не оказывает. Местное действие препарата на слизистые оболочки глаз животных носит кратковременный характер и слабо выражено.

6. Амитраз обладает слабо выраженными кумулятивными

свойствами и быстро разрушается в организме животных.

Во внутренних органах и мышцах белых мышей методом

газо-жидкостной хроматографии не было обнаружено

остатков пестицида после его многократного нанесения на

кожу. В коже максимальное количество остатков было

-ф

обнаружено через 48 часов и составило 7,2 мкг/г.

7. Разработан, испытан на токсичность и лечебную эффективность при демодекозб собак препарат "Леда", » состав которого включен амитраз в концентрации 0,2% л вспомогательные вещества {диметилсуиьфоксид и прополис), обеспечивающие лучшее проникновение действующего вещества к местам обитания клещей, обладающие противовоспалительным и Сактериостатическим действием.

8. Препарат "Леда" по степени острой токсичности относится согласно гигиенической классификации пестицидов к 4 классу опасности - "мало опасные", обладает слабо выраженный кожно-резорбтивкым действием, не вызывает изменений функционального состояния жизненно важных органов.

9. Не выявлено избирательной токсичности препарата "Леда" для собах разных пород, возраста и пола. При однократном к многократном накожном нанесении препарата » терапевтической дозе и превышающей терапевтическую в пять раз, изменений в физиологическом состоянии и гематологических показателях у собак не установлено.

10. Препарат "Леда" при его наружном применении обладает высокой терапевтической эффективностью при сквамозной, пустулезной и смешанной формах демодекоза собак.

11. разработана методика лечения собак при генерализованной форме демодекоза путем комбинации наружных обработок препаратом "Леда" с одновременной дачей внутрь системного фосфорорганического акарицида "Сайфли".

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

1. Временное наставление по применению препарата "Леда" для Оорьбы с саркоптоидозами плотоядных животных и демодекозом собак »13-4-2/830. Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 21.01.9?.

2.Технические условия 93337-008-23519223-97 (опытная партия). Согласованы с Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 21.01.97.

Список опубликованных работ

1.Бирюков A.A. Терапевтическая эффективность препарата "Леда" при демодекозе собак. Сборник научных трудов ВГНКИ, 1996, 60, 26-31.

2.Бирюков A.A. Токсикологические свойства акарицидной композиции "Леда". "Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных", 1997, 181182.

3.Бирюков A.A. Демодекоз собак и амитраз как средство его терапии. "Ветеринарная газета", 1997,7,5.

4.Бирюков A.A. Некоторые биологические свойства соединения амитраз и акарицидной . композиции на его основе. "Проблемы ветеринарной санитарии и экологии", Сборник научных трудов ВНИИВСГиЭ, 1998, 104, 57-64.

5.Бирюков А.-А. Терапия демодекоза собак с использованием амитразсодержаще* комлазиции. "Тезисы VI Международной конференции по проблемам медицины мелких домашних животных", 1998, 29.