Автореферат диссертации по ветеринарии на тему S. enteritidis - инфекция у кур (эпизоотология, патогенез, меры профилактики)
РГ6 од
п 'Л17 :г!пс>
''¡ЛШИИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ВСЕРОССИЙСКИЙ научно-исследовательский ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ ПТИЦЕВОДСТВА
На правах рукописи
РАДЧЕНКО
Вера Александровна
УДК 616.98 : 579.842.140 : 636.5
Б. ENTERITID1S — ИНФЕКЦИЯ У КУР (ЭПИЗООТОЛОГИЯ, ПАТОГЕНЕЗ,
МЕРЫ ПРОФИЛАКТИКИ)
16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология
А В Т О Р С Ф Е Р А 1
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
САНКТ-ПЕТЕРБУРГ
1993
Работа выполнена во Всесоюзном научно-исследовательском ветеринарном институте птицеводства, на кафедое микробиологии и вирусологии СПбВИ и на птицефабриках Ленинградской области.
Научный руководитель — доктор ' ветеринарных наук, профессор 1Н. А. Радчук.(
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, зав. лабораторией вирусологии П. Н. Сисягин; кандидат ветеринарных наук, доцент М. М. Широбокова.
Ведущее научное учреждение — Всесоюзный институт экспериментальной ветеринарии (г. Москва).
Защита диссертации состоится « (о * ОМЛ, 1993 г.
в 13.00 часов на заседании специализированного Совета Д 120.20.02 при Санкт-Петербургском ветеринарном институте. Адрес: 196084, Санкт-Петербург, Московский проспект, 112.
у С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского ветеринарного института.'
Автореферат разослан » г.
Ученый секретарь
специализированного совета • М. В. Шустрова
ОБЩАЯ' ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Сальмонеллез - серьезная социальио-эконо-
!ческая проблема для всех стран мира имеет тенденцию к широкому ютространению среди людей и животных, увеличению инфицированного окружающей среды и продуктов питания (Килессо В.А., 1985; фягина Е.И., 1986; Покровский В.И., 1986; Апувг гмр^еи ,1966; ну «.п. , 1979).
В нашей стране заболеваемость людей сальмонеллезом с. 1961 го-| по 1976 год возросла в 5,5 раза, в последующие годы по отдель-1м регионам этот показатель резко повысился: в Молдавии - в 17 13, Казахстане - в .32, раза, в Армении - в 66 раз (Попова П.П. с »8вт., 1987).
Увеличилось количество зараженных сальмонеллезом домашних, [ких животных и птицы-до 14,4?. Оулествуют стационарно неблаго-лучные по сальмонеллезу очаги и постоянно появляются новые, зна-тельно возросло поступление птгаад на вынужденный убой (до 58$), деж молодняка при вспышках заболевания поднялся до 30% (Матвиен-Б.А., 1986; Попова П.П., 1967). • •
В птицехозяйствах промышленного типа среди заболеваний бак-риальной этиологии с 1986 года участились случаи регистрации льмонеллеза, обусловленного ¿Фь'Св-Ы НсСс£
У молодняка сальмонеллез часто протекает как ассоциированная фекция, что затрудняет постановку диагноза и своевременное про-дение оздоровительно-профилактических мероприятий.
В связи со сложной эпизоотической ситуацией по сальмонеллезу хозяйствах Ленинградской области с целью предотвращения токсико-екций у людей через продукты животного происхождения, контами-рованные сальмонеллами, Леноблисполком принял решение № 249 от .06.88 г. "О мероприятиях по снижению заболеваемости сальмонел-эом в Ленинградской области".
Цель и задачи. Целью исследований было изучение эпизоотической туации по сальмонеллезу в птицехозяйствах Ленинградской области, ыскание методов борьбы и профилактики с сальмонеллезом птиц. ■ В связи с этим перед-нами были поставлены следующие задачи:
I. Изучить эпизоотическую ситуацию по сальмонеллезу, обуслов-нному 8.»г11<>гШс!:е , на ряде птицефабрик Ленинградской области:
- установить источник возбудителя, факторы передачи, пути зпрострэнения и заражения сальмонеллезом;
- изучить особенности инфекционного процесса при экспериментальном заражении культурами в.ег^егтсив.
2. Изучить биологические свойства культур За1т,еп1егШсЦв выделенных от больных и трупов птиц.
3. Определить чувствительность выделенных культур в.епигшм к некоторым антибактериальным препаратам и поливалентному саль-монеллезному бактериофагу.
1 4. Разработать и внедрить схему профилактики сальмонеллеза о'использованием поливалентного сальмонеллезного бактериофага.
■ б. Разработать и внедрить схему специфической профилактики инактивированной формолвакциной.
Научная новизна. В результате проведенных исследований установлено ?что в птицехозяйствах промышленного типа Ленинградской области острые вспышки сальмонеллезной инфекции у цыплят до 10-дневного возраста обусловлены в.м^егш^в . Впервые изучены морфологические изменения во внутренних органах цыплят при экспериментальном заражении сальмонеллезом. Для определения фактора патогенности - адгезивности у культур в.еяьегшмвпрвдложен модифицированный (в соавторстве) метод с использованием дрожжевых клеток. Выявлена чувствительность культур з.епгегшив к поливалентному сальмонеллезному бактериофагу и предложена схема . профилактики сальмонеллеза птиц с его использованием. ,
Впервые внедрена инактивированная формолвакцина в систему . оздоровительно-профилактических мероприятий при сальмонеллезе птиц и установлено увеличение титра антител у иммунизированной птицы при добавлении к вакцине диметилсульфоксида. •
Практическое значение. На основании изучения эпизоотической ситуации по сальмонеллезу в птицехозяйствах Ленинградской облает: исследования биологических свойств возбудителя разработаны мероприятия с использованием поливалентного сальмонеллезного бактериофага и внедрена схема'применения инактивированной формолвакци-.ны для специфической профилактики заболевания.
Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Санкт-Петербургского ветеринарного инсти-тута'в 1989-1993 гг.
Публикация научных исследований. По теме диссертации опубликовано 5 научных статей.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена нв страницах машинописного текста.и состоит из введения, обзора ли-
эратуры, собственных исследований, обсуждения результатов ис-чедоввний, выводов, рекомендаций производству, списка литералы, использованной в работе и приложения. Работа содержит 20 16 лиц, Z графика, иллюстрирована 7 рисунками. Список литералы включает 2Ю источника, в том числе {07 зарубежных.
СОДЕНКАНИЕ РАБОТЫ I. Материалы и методы исследований
Работа выполнена в течение 1988-1991 гг. в условиях птице-1брик Ленинградской области "Лаголово","Скворицн", "Войсковииы", Срасные Зори", кафедры микробиологии и вирусологии Санкт-Петер-фгского ветеринарного института, в лаборатории бактериальных )фекций птиц Всесоюзного научно-исследовательского ветеринарно-) института птицеводства.
Эпизоотическую ситуацию по с.альмонеллезу изучали методом щзоотологического обследования птицефабрик промышленного типа.
Материалом для бактериологических исследований служили по-|бшие куриные эмбрионы (230), инкубационные яйца (60), трупы 'иц разного возраста (202) и больные цыплята и куры (69), ком-шорм (10), смывы'с оборудования (81), воздух производственных (мелений (48), вода (14), яичный порошок (10). В результате бы-| выделено 440 культур сальмонелл, 354 из них - от больных и 1ВШИХ птиц.
Патологический материал включал: кровь из сердца, печень, щержимое желчного пузыря, селезенку, костный мозг, нерассо-1вшийся желток, измененные яичные фолликулы.
Для выделения чистых культур сальмонелл и дальнейшего йзу-«ия.их морфологических признаков и культуральных свойств ис -льзовали метод предварительного обогащения в селенитовом буль-:е на аминопептиде с последующим пересевом на плотные дифферен-зльно-диагностические среды Эндо, Левина, Плоскирева, Вильсон-:ера. I
Антигенную принадлежность вьщеленных культур сальмонелл ус-навливали в реакции агглютинации на стекле с поливалентной са-монеллсзной сывороткой АВСДЕ, затем при положительной реакции моновалентными 0- и Н-сьшоротками, используя живую суточную аровую Культуру сальмонелл.
Биохимическую активность сальмонелл устанавливали с помощью Б. (систем индикаторных бумажных) и ПВДЭ-(пластин биохимических'
дифференцирухшх энтеробактерий), выпускаемых НИИ эпидемиологии и микробиологии г.Нижний Новгород согласно наставления.'
Вирулентные свойства культур изучали в опытах на белых мышах суточных и 10-дневных цыплятах при лероральном и парентеральном заражении их.
Токсичность 25 выделенных культур определяли в кожной дермо-некротической пробе на кроликах.
Изучение адгезии в.м^епийв к дрожжевым клеткам проводил» по методу КогсЪопеп т.к., et «а. (1985) в нашей модификации (Удос-тов. на рацпредложение № 29 от 13 июня 1989 г., ЛВИ).
Чувствительность культур к антибактериальным препаратам определяли методом диффузии в агар в соответствии с "Методическими ук£ эаниями по определение чувствительности к антибиотикам возбудителе инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных" , утвержденные ГУВ МСХ СССР от 30 октября 1971 г.
Определение активности поливалентного сальмонеллезного бактериофага (АВОДЕ) проводили на МПА в чашках Петри,по общепринятой ме тодике в отношении 30 культур з.ешегш^а . Производственное испытание препарата как лечебно-профилактического средства проводили на 163 тыс.цыплят первых дней жизни методом выпаивания. .
Характер течения инфекционного процесса при сальмонеллезе птк изучали методом клинического, бактериологического исследований с ' учетом эпизоотологических данных и патологоанатомических изменена
Патологоанатомические изменения изучены у 301 птицы, разного возраста, погибших от сальмонеллеза. Гистологическим методом иссле довали характер изменений в печени, селезенке, тимусе, бурсе, тонком и толстом отделах кишечника у 20 цыплят 2-7 дневного возраста, фиксацию, проводку и -заливку образцов тканей внутренних органов в парафиновые блоки проводили по общепринятой методике. Срезы окрашивали гю Лейшману. Всего исследовано 60 гистосрезов.
Для изучения иммуногенных свойств культур а.епгегш^в приготовлена инактивированная формолвакцина и проведена активная иммунизация с последующим перекрестным заражением. В .опытах использовано'60 белых мышей и 60 дыплят 30-дневного .возраста.
Производственное испытание формолвакцины Б.м^вгшшэ проведено аэрозольным методом на 87 тыс.птиц птицефабрики "Лаголово".
Контроль длительности и напряженности иммунитета после вак; цинации осуществляли определением уровня специфических антител.в . сыворотке крови кур 10,30,90 дней, в желтке яиц от вакцинированной. птицы и в сыворотке крови цыплят, полученных из яиц от этих кур..
2. Эпизоотическая ситуация по сальмонеллезу в некот'орнх птицехозяйствах Ленинградской области
Результаты эпизоотического обследования птицехоолйств на саль' конеллез показали, что, начиная с 1967 года сальмонеллеэ птиц регистрируется постоянно, однако, эпизоотические вспышки болезни, эбусловленные з.м^егШсЦа . наблюдаются периодами, что связано те только с воздействием самого возбудителя, но и влиянием стрессовых факторов.
Данные исследований свидетельствуют о том,что основным воз-5удителем сальмонеллезной инфекции в хозяйствах промышленного ти-:а Ленинградской области является в.е^еги^в.
Источником инфекции является больная и переболевшая птица, соторая выделяет возбудителя во внешнюю среду. Так^ при бактерио-югическом исследовании птицы на сальмонеллеэ возбудителя выделя-ш из патологически измененных внутренних органов, костного мозга, 13 фекальных, масс. Наиболее часто сальмонеллы обнаруживали в 'рулах щлшят первого возраста и положительно реагирующей птицы ю ККРНГА.'
Кроме того в отдельных случаях в хозяйствах могут иметься
юэервуяры возбудителя - дикие птицы и грызуны, обитаюяие вблизи 1тицеподческих помещений, установлена высокая обсемененность са-ъмонеллами диких голубей, отловленных ня территории одной из ¡тицефябрик.
Результаты бактериологических исследований на сальмонеллеэ птицы
}!• ' Исследованная птица /п__
Эмбрионы Ц'.ггмятя суточные
Пмплятл до 10-дней
• ей ДН.
Молодняк Куры
. Пдампм Р АЯ-
/ю И{Р1:'ГЛ
РШО
Кол-во Сальмонеллы выделе- % вы-
птицы ны от птицы долен.
230. 3 8,7
90 29 31,1
102 47 39,2
36 9 25,0
22 5 22,7
21 2 10,0
30 17 56,7
24 16 66,6
55В 126
Определена роль в распространении возбудителя механизмов передачи. Нами установлена обсемененность скорлупы инкубационных яиц, что не исключает возможности массового перезаражения цыплят на выводе и в первые часы их жизни. Однако, нам не удалось выделить сальмонелл из содержимого яиц.
Изучение горизонтального механизма передачи возбудителя са-льмонеллеза показало его значительную роль.Патогенные культуры Са1т.еп1ег:ша1з выделяли из воздуха помещений, кормов, воды, из смывов с оборудования.
Обнаружение сальмонелл в различных объектах внешней среды в хозяйствах Ленинградской области
№ Наименование материала Кол-во Кол-во %
п/п исследо- положи-
ванных тельных
проб проб
I Смывы с инкубационных яиц 6 I 16,67
2 Воздух из производственных 48 16 33,6
помещений
3 Вода • ' 14 2 14,3
4 Комбикорма 10 '4 40,0
5 Смывы со стен и оборудования 81 9 • 11,0'
6 Яичный порошок 10 2 20,0
7 Куриный помет 9 I П,1
8 Голубиный помет 5 2 40,0
9 Пыль из цехов 10 2 20,0
■ ВСЕГО ■ 193 39 "
Занос возбудителя инфекции в птицехоэяйствах промышленного уи па может происходить в случае поставки контаминированного сальмонеллами молодняка для комплектования стада из неблагополучного по . сальмонеллезу хозяйства. Так была зарегистрирована вспышка сальмо-. неллеза на одной из птицефабрик, когда источником были завезенные суточные цыплята из хозяйства Эстонии.
В результате проведенных исследований было установлено, что наиболее тяжело переболевают цыплята до 10-дневного возраста, у ■ которых инфекция имеет острое течение и сопровождается их гибелью. Так, на одной из птицефабрик отмечали до 10% заболевших.и падеж цыплят до 70%. У молодых кур-несушек заболевание проявляется на пике яйценоскости в форме желточного перитонита. У взрослого по--
головья инфекционный процесс протекает скрыто в виде бактерионосительства, число птиц положительно реагирующих, rio KIffHPA о орит-рогштэрным антигеном достигало 2,7%. При вскрытии у отих птиц регистрировали иеригепатиты, овприитн, перитониты.
Анализ бактериологических исследований по выделении сальмонелл из патологического материала от кур и голубей свидетельствует о том, что наиболее обсеменены сальмонеллами у цыплят печень, селезенка, кровь из сердца, костный мозг, нерассосаотиися желток. V взрослых птиц сальмонелл выделяли такта из патологически измененных яичных фолликулов.
У голубей - печень, селезенка, кровь с»рш'я.
На птицефабриках выявлена циркуляция сальмонелл групп Д и С, наряду с ними выделены культуры Е.coli серовар 02,078, протея, синегнойной палочки, энтерококков, цитробактера.
Отмечали в отдельных случаях смешанное течение сальмонеллеза г 'э'ймр'риозом.
При изучении патогенеза сальмонеллеза у цыплят в опытах с экспериментальным заражением были выявлены патоморфологические изменения во внутренних органах, характеризующиеся септикотоксе-
«ией. При гистологическом исследовании печени отмечали сильную капиллярную и венозную гиперемию с множеством мелких кровоизлияний между балками, диапедез элементов крови через стенки набухших ;осудов. Наблюдали участки некроза и некробиоза паренхимы. Б мелких сосудах присутствовала палочковидная микрофлора.
В селезенке морфологические изменения характеризовались гиперплазией лимТтаидннх фолликулов белой пульпы. Красная пульпа гиперемирована, отдельные фолликулы хороню выражены с размножением вокруг них лимфоидных клеток с примесью псевдооозинофилов. )тмечали также бактериальную эмболию и колонии палочковидной мик-Ю'{лорт.' в красной пульпе.
Слизистая оболочка кишечника воспалена с участками десквамации эпителия, ворсинок и желез. Регистрировали бактериальную эмболию юсудов. Палочковидную микрофлору обнаруживали как в просвете ки- . печника, так и в эпителиальных клетках.
Й rcitycc о"',':опя.!:и р',г:и;.!;нио мозговг?; сукенке корковой 30-«н " чопи.'!';ни»и толец Гпссаля, увеличенном их в раз-
>рппу и наличием в них микрофлоры.
В фобрициеоой сумко заметных изменении не отмечали.
3. Биологическая характеристика выделенных культур
В результате проведенных исследований установлено,что культуры в.епьегшав имели свойства, характерные для данного серо-типа. Они обладали подвижностью, при культивировании на простых (МПА, МПВ) и дифференциально-диагностических (Эндо,Левина,Плос-кирева, Вильсон-Блера) средах давали типичный для сальмонелл ■ рост.
При определении биохимической активности установлен} что выделенные культуры в.е^егШй!« не ферментировали лактозу, сахарозу, на образовывали индола, не расцепляли мочевину, ферментировали глюкозу с образованием кислоты и газа, маннит, продуцируют сероводород, имеют ферменты лизин-, орнитиндекарбоксилазы, расщепляют арабинозу, инозит, ксилозу; отрицательную реакцию регистрировали в,тестах с дульцитом, адонитом, сорбитом.
При серологической идентификации 440 культур, выделенных из патологического материала от птицы и объектов внешней среды 431
Культура отнесена К 6.епгегШ<11в | 7 культур - К Б,хранив, И 2 - К З.памрогЧ.
Результаты серотипирования культур сальмонелл, вьщеленных в хозяйствах Ленинградской области ■
Серотип Группа Кол-во Соматический 0-антиген Жгутиковый• Н-антиген
В.вп1егШ«11а А 431 I, 9, 12 и,е '
3;1п1ап1:1в ■ С1 7 6,7 г
б.пекрснЧ ' С2 2 . 6,8 . - еЬ
ВСЕГО 440'
Культуры обладали токсичностью в дермонекротической пробе на кроликах. Гфи этом высокий уровень токсичности показали 24% испытанных культур, средний - 52%, и слаботоксиаными были 24% культур.
Вирулентность культур определяли биопробой.на белых мышах и цыплятах, которых заражали внутрибрюшинно и перорально с водой.При этом выявлена вирулентность' у культур независимо от способа заражения и по степени вирулентности эти культуры отличались'незначительно. 10-суточные цыплята оказались более устойчивыми к заражению, по сравнению с белыми мышами и суточными цыплятами.
. Изучение адгезивной, активности сальмонелл позволило устано-
шть, что бактериальные клетки й.ег^егтсЦв обладают функциональными фимбриями I типа, была определена интенсивность адгезии сальмонелл к Дрожжевым клеткам ( ЗассЬаготуееа сегеу1е1ае ШТ8ММ ь -3). Из 35 исследованных культур 20 (57,14%) обладали выраженными адгезивными свойствами. :
При определении чувствительности сальмонелл к некоторым антибактериальным препаратам отмочена высокая .активность левомице-тина, гентамицина, ампициллин?!, тетрациклина. Часть культур били чувствительны к неомицину, мономицину и нечувствительны к оксаци-лину (100%), олеандомицину (93,355), полимиксину (86,7%), эритромицину (50%).
Определением активности поливалентного сальмонеллезного бактериофага в отношении 30 культур установлена их чувствительность к действию бактериофага независимо от выпускаемой формы.
Активность бактериофага в отношении культур сальмонелл
Поливалентный Кол-во Интенсивность реакции
бактериофаг . культур '++++ +++ ++ + -
Жидкий 30 23 ' 5 2
Сухой 30 23 4 3
4. Мероприятия по профилактике з.еп^гШсНа . инфекции в хозяйствах промышленного типа
В неблагополучных по сальмонеллеэу хозяйствах проводили дезинфекцию помещений в присутствии птицы парями формальдегида,ка-тамином-Б (0,1* водным раствором) с обязательным бактериологичес-сим контролем качества дезинфекции.
При исследовании 164 тыс. птиц разного возраста по ККРНГА с эритроцитарным антигеном положительно реагирующих было 3468(6$), сомнительная реакция отмечена у 1352 (2,2%). Наибольшее количе- ■ ство•положительно реагирующих было среди птиц старше 200-дневного возраста (2,7%).
При бактериологическом исследовании 30 кур, положительно реагирующих по ККРНГА с эритроцитарным антигеном, у 17 (56,66%) обнаружены сальмонеллы, наиболее часто .выделяли возбудителя из печени 17(100%), селезенки 13(76,5%), желчи 13(76,5%), крови серд-
ца 9(52,9/П , костного ¿мозга 1(5,9%), измененных яичных фолликулов 16(94,Ш).
Проводили аэрозольную обработку цыплят в выводном шкафу с использованием растворов ампициллина и гентамицина.
После определения чувствительности культур сальмонелл к поливалентному сальмонеллезному бактериофагу, последний был испы-- тан в качестве профилактического средства сальмонеллеза у цыплят первых дней жизни.
На птицефабрике "Войсковицы" бактериофаг выпаивали с первым корглением из расчета 0,2 мл нативного препарата на цыпленка в разведении 1:10 с водой в течение 3 дней йодряд.При этом заболе-■ ваемость и падеж цыплят до 20-дневного возраста от сальмонеллеза регистрировали в единичных случаях. Падеж цыплят в контрольных партиях был выше на 2,79$, чем в подопытных группах.
В опытных партиях в 55-дневном возрасте из 16 тыс. исследованных по ККРНГА положительная.реакция установлена в 19 случаях.
5. Специфическая профилактика
Вопросы специфической профилактики сальмонеллеза кур до настоящего времени не достаточно изучены и являются актуальной проблемой .
Поэтому нами проводились изыскания возможности вакцинации против сальмонеллеза птиц в хозяйствах промышленного типа.
Для изготовления вакцины (ыло отобрано 3 штамма патогенных В.вп1ег1иа1в , выделенных из трупов цыплят, павших от сальмонеллеза. Штаммы, использованные для изготовления вакцины по своим морфологическим, культурально-биохимическим свойствам были характерными для сальмонелл .и обладали выраженными вирулентными свойствами ЛДзд для суточных цыплят 3 вакцинных штаммов соответственно составляли 44,57; 67,35; 88,92 млн.микробных клеток. По своей антигенной структуре вакцинные штаммы были типичными • для й.егпсгШсИв и давали положительную реакцию агглютинации с типовыми сальмонеллезными сывороткам: поливалентной (АВСЩЕ) и моновалентными О- I, 9, 12 и Н- п,е сыворотками.
Активной иммунизации формолвакциной, приготовленной из каждого исследуемого штамма (содержащей 8 млрд.микробных клеток в I мл) были .подвергнуты белые мыши и цыплята месячного возраста с последующим заражением ЗДД^д. Животных подопытных групп вак-
цшшровали внутримышечно - бе пых мышей в дозе 0,3 мл, а ныплит -0,5 мл, большинство иа них после заражения остались живши, тогда как все животине контрольных групп ¡шли. Из результат-в опы--та следует,что взятые для изготовления вакцины штамни е'и . м днелл обладали пнражшшюш иимуногшшыми свойствами и щ ^докргшли:» пни -ллт и белых швпей от заражения любим иа них.
ОЭДоктш'сс.ть тпстктив)'рорчнной вякганн против сальмонеллеза
кур В прОИЗВОДС'] УСЛОВИЯХ исгытан." с'.'->р03тьш;п 1,!1;\г 'НОМ и •
родительским стаде ь.иццфабри:« "¿аголсео". Птицу ь.кч 1.»I:«-5ли г^кратно с интервалом два дня, концентрация используемой вакцины иисйьлша 13 :.и..,_.д.;,г,!кро5:а;:: " I "ч, » ипич-нотч, а.чри-золя - 1й млрд.микробных клеток в 1 ПСМСЛСНИЛ с експизициеи 40 минут после полного распыления вакцины.
Б результате проведенных исследований сыворотки крови установлено, что ивксшпльный титр специфических агглютининов у иммунизированных кур регистрируется на 10 день после вакцинации (1:160 - 1:320), к 60 дню снижается до 1:80, через 90 дней - не регистрируется.
Чяррд ТО пней после повторной епкцгнргпн , когда отмечена наиболее «-!<"и;>хп степень нппрллогшосш нем; нитетл , провопи::!! отбор и исеячдовишы яиц, с цш»; спрод^н-ы;.! тлтрв спенк^п'иских нн-тител в уелтко. Наличие антител и >• ;тт[■ г- установлено и разведении 1:80 - 1:160.
Нреастдвляло интерес ощ.йцйлить и;<иряжсииость иммунитета •¡•окне у суточных щтлит, полученных из яиц вакцинированных кур.
Титр антител в сторотке у таких цыплят бил на уровне 1:40 -1:00, а к 20 дню специфические антител« регистрировали только в КШ1ГА.
' -В результате вакцинирования птицы увеличилась сохранность
молодняка на 2,6-3"'> , повысился выход деловой молодки на 4,7? и среднесуточный прирост живой массы но 0,5 г.
Учитывая, что эффективность большинства вакцин можно значительно увеличить за счет добавок различных неантигенных веществ, нами проведена вакцинация кур инактивированной формол-вакциной с добавленным к ней 10% димотилсульфоксида, в результате установлено наличие антител в более высоких титрах.
Система лечебно-профилактических мероприятия.при сальмонеллезе птиц, обусловленном з.е^егШсИа на птицефабриках прошшленного
типа
Организационные
1. Контроль за выполнением лечебно-профилактических мероприятий. " •
2. Контроль за кормлением, ' поением, содержанием птицепогодовья.
3. Проведение бесед,лекций с обслуживавшим персоналом.
Общие
1. Комплектование стада из благополучных хозяйств.
2. Карантинирование вновь завозимой птицы и раздельное инкубирование яиц, полученных из хозяйств-
тизация птицеводческих помете- поставщиков.
ний? кормоскладов и кормоцеха. - 3. Утилизация трупов и от-
4. Вакцинация птицы инактивиро- ходоа.
ванной формолвакциной по схе- . 4. Улучшение .кормления,поеме. ния, содержания.
Специально-ветеринарные
1. Диагностические исследования птицы, кормов, ВОДЫ.'
2. Лечебно-профилактические, мероприятия.
3. Дезинфекция внешней с^эер! помещений . Обеззаражл$)£ние$ера-
I
6. Система оздоровительных мероприятий в неблагополучных по сальмонеллезу птицехозяйствах промышленного типа
В систему оздоровительных мероприятий в неблагополучных по сальмонеллезу птицехозяйствах входят обяеорганизационные и специально-ветеринарные мероприятия, предусматривающие диагностические исследования, лечебно-профилактические обработки лекарственными и биологическими средствами, дератизацию и дезинфекцию производственных помещений, а также вакцинацию птицы. Прежде всего необходимо вакцинировать родительское стадо каждые 3 месяца, цыплят в 20-22 дневном возрасте по той же схеме. В 145-дневном возрасте провести ККРНГА с эритроцитарным антигеном, после выявления положительно реагирующей птицы и удаления ее из стада, остальных подвергнуть вакцинации.
ВЫВОДЫ
1. Сальмонеллеэ кур, обусловленный з.е^егпшв установлен на птицефабриках Ленинградской области: "Лаголово","Сквори-цы","Войсковицы" ."Красные Зори",
2. Источником сальмонеллеза в данных хозяйствах является больная и переболевшая птица. Пути распространения - алиментарный и аэрогенный. Из патологического материала выделено 401 культура, из объектов внешней среды 39; 7 культур отнесены к ВЛпГапив И 2 - К Э.пвирмЧ , 431 - К 3.11ПеНиа1э.
3. 3,еп1егишв - инфекция протекает чале в латентной форме, однако установлено и клиническое проявление заболевания у молодняка 1-10-дневного возраста.
4. Патоморфологические изменения у экспериментально зараженных суточных цыплят, характеризуются септикотоксемией и проявля-
' ется бактериальной эмболией, расстройством гемодинамики, воспалительными, дистрофическими и некротическими изменениями во внутренних органах.
5. Выделенные культуры сальмонелл в биологической проба,про-веденной на белых мышах, суточных иДО-суточных цыплятах были патогенными при парентеральном и пероральном заражении.
6. Модифицированным методом определения адгезивной активности с применением дрожжевых клеток выявлены адгезивные свойства у
7. У культур в.еп^гпшэ определена высокая чувствительность к левомицетину, гентамицину, ампициллину и полирезистентность к оксацилину, олеандомицину,- полимиксину.рифампицину.
8. В лабораторном эксперименте установлена активность поли-, валентного сальмонеллезного бактериофага в отношении 30 культур
,9. Применение поливалентного сальмонеллезного бактериофага на одной из птицефабрик суточным цыплятам в течение 3 дней в утреннее кормление по 0,2 мл позволило сократить•падеж цыплят до 20-дневного возраста на- 2,78% и предотвратить распространение заболевания.
10. В лабораторных опытах инактивированная формолвакцина, приготовленная на кафедре микробиологии и вирусологии Санкт-Петербургского ветеринарного института из патогенных штаммов а,еп1:егШс118 проявила высокую иммуногенную активность для 30; дневных цыплят.
11. .Инактивированная формолвакцина з.ег^егШсЦе при двукрат-• ной аэрозольной вакцинации родительского стада кур в условиях
хозяйств способствовала формированию напряженного иммунитета у кур сроком до 3 месяцев.
- титр специфических антител в сыворотке крови составлял 1:160-1:320, в желтке яиц этих кур - 1:80 - 1:160, а в сыворотке крови суточных цыплят - 1:40 - 1:80.
12. В производственном испытании формолвакцины з.епгегиша увеличилась сохранность молодняка на 2,5-3%, повысился выход деловой молодки на 4,7% и среднесуточный прирост живой массы на ■ 0,5 г.
РЕКОМЕНДАЦИИ
В птицехозяйствах, неблагополучных по сальмонеллеэу необходимо соблюдать рациональный режим содержания и кормления, с учетом возрастных особенностей птицы и выполнять ветеринарно-санй-тариые'правила. 13
Комплектовать птицепоголовье только из благополучных по сальмонеллеэу хозяйства. •
Проводить бактериологическое исследование комбикормов»поступающих в хоэяйсша и при необходимости подвергать их грануляции.
Для лечения больных цыплят применять антибактериальные сред. ства после определения их активности в отношении сальмонелл. В
качестве лечебно-профилактического средства можно использовать поливалентный еальмонеллезный бактериофаг, выпаивая его в дозе 0,2 мл на цыпленка в течение 3 дней.
8 комплексе лечебно-оздоровительных мероприятий при саль-монеллезе,BH3BaHH0MS.enteritidis использовать инактивированнуш формолвакцину.
Родительское стадо вакцинировать азрояольно, двукратно с интервалом в 2 дня из расчета 18 млрд.микробных клеток на I м'^ помещения, рев^кцинировать каждые 3 месяца.
Цыплят вакцинировать с 20-22 дн.возраста по той же схеме.
Список работ, опубликованных по теме диссертации:
I. Качмазов Г.С., Радченко. В.А.Изучение адгезивных свойств к различным субстратам. Сб.науч.тр.' СПбВИ. Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных и птиц. СПбБИ. - Л., 1989. -'С.67-70.
2« Качмазов Г.С., Радченко В.А. Патоморфологические изменение у цыплят при экспериментальном сальмонеллезе, обусловленном
//Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных и птицы/Сб.науч.тр.ЛШ.-Л., 1990.. - С.44-46. ' '
3. Радченко В. А.Культурально-биохимические свойства культур s.enteritidis , выделенных от больной и павшей птш¡^//Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных и птш.и/'Сб.науч.тр. ЛЕИ. - Л., 1990. С104
4. Радченко В. А.Иммуногенная активность формолвакцины для кур( приготовленной из s.en-uritidie //Актуальные проблемы ветеринарии/Тез. докл. науч. конф. проф. препод, состава ,науч.сотр. и аспирантов ЛВИ. - Л., 1991. -С. 76
' 5. Радченко В.А,Эффективность поливалентного бактериофага, применяемого с целью профилактики садьмоиеллеэа кур//Актуальные проблемы ветеринарии/Тел.докл.науч.конф.препод.состава,науч. сотр.и аспирантов ЛВИ. - Л., 1991. - С. 7?