Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Ротавирусная инфекция крупного рогатого скота (клинико-экспериментальное обоснование способов диагностики и профилактики)
- Ученая степень
- доктора ветеринарных наук
- ВАК РФ
- 16.00.03
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Ротавирусная инфекция крупного рогатого скота (клинико-экспериментальное обоснование способов диагностики и профилактики)
1 n rv-m да
УШ1НСШЙ ДЕР2АВИИЙ АГРАРИЙ УШВ2РСИТЕГ
На правах рукопису
скибщький володвдр глчйозич
КШВ1РУСНА 1НФЕКЦ1Я BEJMKOÏ РОГАТО'1 ВДОЕИ /КЛ1Н1КО-ЕКСПЕРИ1ШТАЛШ ОБГРЛ1ТУВАНШ iMXBIB Д1АГНОСТИКК ТА
профшктига/
Iß.00.03 - вагзряяарна м1крс£Иолог1я, в1русолог1я, еп1зоотолсг!Я, м1колог1я та 1ыунолопя
АВТОРЕФЕРАТ
дисертацЦ' у вигляд1 спуйлЬсодзно! ыонографГ* на здобутгя паукового ступеня доктора ватэряпарних паук
КиГа - 1994
Дясертад!я е опубл{кованою монографию.
Ройога вдконана в УкраШькому державному аграрному ун!версте?!.
Науковлй консультант - член-кореспондент УААН, доктор б!олог1чышс наук, професор 0НУФР1БВ ВЛ.
ОфЩ1Лн1 опоненти: - член-кореспондент УААН, доктор
ветерииарних наук ФУКС П.П.
- доктор ветеринара»* наук, професор
ЛИТВИН В.П..
- доктор ветеранарнюс наук СХАРЧЕУС АЛ.
Проз!дна уотанова: Полтавський с1льсысогосподарський 1нсгвгут.
Захист дисергацП в!д<5удегься Я^Т///7 1994 р.
о /У годин! на зас1данн! саоц1ал1зовано1 рада Д Г20.71.03 в Укра'1Нсько^у деркавпоиу аграрному университет! /м.Кп1в,вул.По-тах!на, 16, уч. корпус Я 12, ауд. 412/.
Прооиыо взяти участь в обговорена! дисертацИ при П эахястЬ або над1сяати в!дгух на автореферат у двох прЕм1рииках, завхрс-ккх печаткою, за адресов: 252041 ,ц.Хи]£в-41,вул.Гаро1в Оборони,15, соктор захисгу дяоертацШ.
3 дксертад!сю кохна ознайомитись в <Нс5д1отец1 Укра1нського дооаявного аграрного ун1версигету. -
Автореферат роз!сданий " 1994 р.
Вченгй секретер спец1ал!зсвано5Е ради, доктор ветеранарних наук,
врофесор Б0РТН1ЧУК БД.
I. ЗДГМЬКА ХАРАКТЕРИСТИКА' РОЕОТИ
I.I. Актуальность темя. ЗнатаЕС оконсм1чнгос эбиггла гадузх тваршшшмва завдаюгь вяунхово-юшков! захверягаияя повопарод-жеяих. Б1льи1ся» íx вандааэ на феи! порушешш oíain? рачонка у вагтшх твзрип» ко спричиЕое, яокрега, riao^jíCTiia ЬлупноÍ система i, як насл1док,- незда?н1сть колоотраяьвш шишм захястя?и новопародаенвх. Над вирiяониям проблем, поз"язанюс з цЗе» яато--лог i ев, хнгенсивао прадиагь колэкгявн вчеаих, очолавзн! академиками УА.АН Д.О.Меяь'шачуком, Г.ОДмельницымм, члонаул-кореспон-деатама УААН АЛ.Завхрвхс®, В.1«Левченкси, ВЛ.0ну$р1бВйц, .ВЛ.Рошненксгд, А Л .С об ком, ИЛ.Фукс, срофвоорамв, дорл-орга к паук B.A.BopTHiTiOTJ, В.С.Козачхоы, В.ПДи5ВЗНСи, ЗЛ.Наувкпь, В.А .Прискоков, В»0.Сергеевна, А Л.Старчоусом, жаядадагаыа наук б.О.Красяобаева;, .ВЛ.Сгецвкксм га in,
У новозародгопкх геля? часто реесгрувгь диспйнс1в, кол1бак~ тер1сз, крилтоопорэдхоз, a ocraiiHi?,! часом такск еигэратя Bipyesoi природа, зокрегла рстав$руску 1нфакц*в. Ротан{руска 1яфокц1я нз-ликоТ рогато i худоба /рогав!русняй ентеркт геля?, ротаз!русяа . д1арея, Д1арея юля? Нэбраскя/ arai зусгр?.ча<5ться цракгичко тораторП ycix краха спхту / МоЬцв с. А. ,jt ,1369; Turnar
A. X. at ах, ,1973; «toado C.Hst al. ,1974.; Acres 3.Л,
ot (¡1,1975; asherrer H. eí ai, ,1975; Самойлов ПЛ., Пантелеев
B.М., Сюран В.Ы. ,1CJ82, ?а is./.
Неэваяавча на noiüii усгпхд, доояпгуг! ярд взнчеаяЗ рогавг-руспоТ ¿нфекцП велико! poraroi худсби, ряд ваааявю: ппгэзй за-литаотьск недостагвьо доадИдяеншк, шо значао гаягвдв розробку i впровадаенвя у шробнвцтве вадШшх засоб1в д1агносткки та спощг-fí4Ho'í профилактики захвораззааня. Нвдосгагньо зявчено áioaorix; збудояха, зокраиа ангкгениу floro харап?ерас5ику, досигь поверх-
нево в1дг;раць0БЗН0 мотоди культивування, лише частково досл1дкено клх ¡и ко-егпз сою лог 1 чн и Я а опека- ротав!русного витериту телят, особливо при 31ишакях 1кфскц1ях, Потрсбутть подальшого удосксна-леная лабораторна д!агностш'л га специф1чна профилактика захво-рювання.
Дясертащя е п!доумком тривалкх досл1дкэнь, ягл виконаи! В1дпоз1дно до план1в науковс-досл1дних роб!т кафедри м1кроб!олог1У та в1русологП УДА'У з тем: "Удосконалення метод!в проф1яактики та лхкування захворювань твариа в умовах великих спец*ал1 зованих гос-подарств ярсмлслового типу" /номер дернавно! рее;страцП 01026324/; "Розроока теоретичних основ б!отехнологП та створзнкя б!опрапа-рат!в дяя диагностика та спениф1чя01 ароф1лактикя 1 терапП мзсо-вкх захворивань аовонароджених телят з ознакама д1аро'1" /номер дера:. реестрацП 0193У19863/; "Вивченкя ет10Л0Г11. еп1зоотологП, патогенезу I розробка метод1в та засскНв д!агностикя, терапп, проф1лакгики захворюванг» новонародженгх телят з ознаками д:аре1£п /номер держ. роестрацП 134-72-41/.
1.2. Мэта та завдания досл1джонь. Основнию метою досл!джень було кл1н1ко-экс.першлентальне обгрунтування рашональнях аспектов розробки та удосконалекня сп8адф1чнюс засоб!в д1агностики та про-ф{лактшш ротаБ1руоно1 1н$екцП" велико! рогато)' худоби.
31дпов1днс1 до поставлено! мети буди вкзначен1 так! завдання: досл!дяти кяШхо-ел1зоотолог1Ч!и особлквост! ротав1русно1 1кфекц11 велико!' рогато!' худоби;
ъивтатг морфолог!», морфогенез, антигенно-протектЕвн! влас-гивосг! сп{зоогичншс штам!в роташрусу велико? рогато? худобп, у пор)внянп1 IX з доякши еталонявик штамамй ротав!русу веяико1 ро-ггтох худоби та 1шлих його видгв;
оптш1зувати улови культивуваная ротавхрусу велико? рогато? худоба у перзина1Я /НЕК/ та перещепяювзн1й /МЩЖ/ кл1тшшях культурах?
адаптувати штам porasipycy велико? рогато? худоба до гетэ-ролог!чно? кулиури кл!тян /СНЕВ/:
охаракгеризувага у пор1виялвному аспект} лабораторн} теста хндцкади poTaBtpyciB /ЕМ, IEM, РДП, Р1Ф, Ш, РЗК, РЗГА/, опти-м1зувати окрем! елеманти ?х постановки;
в!дпрацвватя досл1дно-промисловш1 регламент культивуваняя ротав]руоу вэляко? рогато? худоби /вакцина} штамп/ в лерэиешго-. ван5й кл1тинпШ культур! ДДБК/j
визаачяги тлив деяких ф1зико-х1ы1чних факторia на збудника poraBipyciioro витериту телят;
розробигл схему Г1лер1муя1зацп лабораториях твариа ротав!-русом з метою одераанвя д1агносгичних сироваток;
вигоговигя моновалентн1 омульгован! формоявашики на основ! дом!нангпих штам!в збудника porasipycaoro витериту телят, розро-бити рац{оиалы1Яй спос!б контролю ?х 1муногенност} на лабораторию; тварднах, охаракторизувати Ьлувогеии! властивосгч препаратов;
виготовиги пол!валонтну кетяИнояаиу емульс1оп-формолвакцяну па основ! дом1наат!1ИХ штам!в poraalpycy, коронав!русяого антигену та $актор1в патогэнност! збудника жшйактергозу. визначита i'i iMyHorenaicTb;
одерааги пол1валаятау г!аер1мунну сироватку прети рота-, поропаЫрусно? 1ифэнцЛ та з;ол!бактер1озу, охарактеризувати превентивно ?? влаетивостIi
сфорцулювати мэтодинп! рзкомендац!? додо flfагностики porasi-р.усмого енгеригу телят.
1.3. навг.зяа 'робоги, Наукова нозизиа шмшано! ройо-м яадягас у г ому, то на таригсрн Укра1а» д!агяооюзано /13821985/ ротав!русну ¡нфакфю взлако! рогам! худой;: /ротавхрусшй ситара?» рмарЛрусну ц!арэя/« кюрае визначано значив Н ношараа-ия, досл1даоао ел1поо1ичл1 нгами збудника /морфолог!», морфогенез, антсвгакяо-проюетивн! влаотивост! та 1н./. Сконогруйошно еыуль-сгДн: лорколвакдшш ка основ! яом!ваатеих втаы!в ротав!русу. РозроЛлоао радЮкалышй метод, контролю 1х 1иуногениост! на лабо-рагорн'вх тЕаркнах. (Загрунтовано «оаяив1оть га доц!льа1сть ство-реняя вол1аалвкгшпс препаратов з щкориотанняи догг1назтшк шта-ы1в рогавхруау, коронав!русяого га еиерхххйиого ангкгеи!в» Ство-рано оразок 1накгавоз8н01.рога-, корона-, оязрШйво? вакцвни, дссв1да»ио П 1«заогена1еть на.лабораториях »варанах та веяга-ЛЗ рога'Яй худое!!. Розроб.тепо схвш г1лер{ыун!зодЛ лабораториях тварик /»роя!ь, морськвх свинок/ з него» одерзхавня'д1агаоогячта сировагок. Закроионовано г!лер!ыуииу нол!валецтяу сдрозатку кров! га взд!ле;шй а нех 1ыуногдобук1н дрогн !нфекц!йнях ентарит1в зш-шяо? природа, охарактеризовано превеитявн! 1'г властивост!. Роз-робдэно ориг!иальгшй спос!б жоадэитрзваиня ротав1р^су !г заотосз-вакнем сорбц1йкоультраф1льтр!вного истоду. Оптировано матодаку вщ!хоят та культавуванвя збуднпка рогав!руеного витериту телят
у кя!?кр.якх культурах, в!;шрацьонано досл!дио-дромясловкй рогла-
кулыдвування вШбраних кого вакцдодх итам!в.
У пор1вняяьному аспект! охарактеризовано ряд лаборатории тесг!в 1ядакацП эбудника ротав1руевого ентардту юлят, оптап-аоваао окрзи! еломеати '¿х постановки. Внзцачзно шлкв двших ф1зако-:к1м1чаих фактср!в на эбудника рогавхрусного еатвриту телят.
1.4. Праятичка ц!п,ч!сть роботн та реал!зад!я тезуяьтат!в дро.ч!дчеяня. Йроводан! досл!днання завершшея розробкею эасоб!в
га радЮиальао! с хеш лаборагорно? д!агностша poranipyouoro ен-геряту толя s, втором доц|1шнтпих иташа ротав!русу велико"! рогато! худобя та конструиваваям на ïx основ! яол!палеятно? закци-ня, одэряанняа иелШяеитио! г!пер1муяаох' сяроваткн э вярзжшаш превеачпттт вяасгюзостяма, обгрунтузанаям мозшвосг! та до-Шльноот! конетруавакня nosiBureiirHinc комб!иовапюс рота-, корона-» еперихШщх пропарат!в.
Результата досл!джепь воображен!: -Матодяте! рэкоаепдацП по д!агкостии та загалыйй прскряаг.-тшг! рота- 1 Koponasipycaoï laФекцП» способах д1агяос«жй, мву-тшгя i проф1лактика порушэнь с-бмхау рвчован у новонародащщпс телят пра д!ареях /затверджея! методичкою koîucîsh УСГА та иауково-техн!чною радоэ оокцИ. "Тваршшицтво i зетершархя" Дэрзагропроиу. УРСР, протокол й 23 р.}д 25 грудня 128? р./, опубл!кован! в 1990 р.
"Каатанова по засгосувашш кров!, .опрса!неяоГультраф1олетови-мя промеяямя, для проф1лаягнхш i гЛкуттш илунково-кишкових ! pecnipai'opBKX захворвзакь телят /схвалэпа иауковр-тгшитаов радою cenui ï "БетерЕнар!яп МСГ ! загог!вель Упра1ни, протокол » 2 в!д 12 грудня 1590 р./,
-Споо!б тятруваши ротав!руоу еолеко? рогато!' худоба методом бляшок /схвалений ученою радой факультету вэгершшрно? медкциш УДАУ 22 лясгопада 1993 р., протокол й 3/;
"Доса^дао-иромЕсловяЯ роглпкзяг культявузакия рогав!русу во-якеох" рогато*" худоЛн у nocîifiniiî л1и1Т кл!тпя нирки ev.Opiона норовя /загвэрджеаий учэвою радою факультету вэтершшрно? иедицика УДУ 22 листопада 1993 р., протокол 1Ь 3/;
- Снос 16 одергагшя potauipycuoro'антигену /рац.пропопид!я, посв1дч®шиг № 23 в!д 4.01.1989 р./.
-Сяос1й пшдагвяяя рогяв!русного автлгезу /рац»пролозяд!яг п0св1дч9епя )» 22 Ь1Д 4.01.1983 р., УСГА/.
Матер1али досшдхень вярогадженг в практику таксж через пуб-ллгхша, зскрома дов1дково1 я1таратури-"Дов1дник вотеркнарного л ¡¡каря", К,:Урожай, 1990.С.96-100; "Хвороба молодняка с!льсь-■ когооподарськшс тварин". - К. :Урожай, 1992. - С.66-86, KpiM го-го, матер!али дисертацН вихшаденз в мотодичи1й aiiepaiypi:"Ре-а)«ц1я затримки гемаглютинацП'" /К, :УСГА, 1990/, "Титрування Bipy-c.iE" К.: УСГА, 1987, як! викорисговуються ветеринарними вузами та факультетами в прсцас! вквчення дисциплин " Еетерянарна в:русоло-г!я" /УДАУ, Льв1вська акадом!я ветеринарно! мадидшш, В1ишщький, Полтсвський та Сумськай о1льськогосподарськ! шотитутя, XapuiB-ський зооветерикарний Знститут/, а гакож викладачами i студентами Кит'вського державного университету im. Г.Г.Шевченка, науховпми сп!вроб1тникама 1нституту'уролог1'1 та нефрологи АМН УкраУни.
1,5. Апробацтк роботи. Основа! положения дцсергацП були викяадеа1 й с:ш:лбгН на наукошх конфератЦях професорсьхо-викла-дацького складу УДАУ /1983-1994 p.p./, науково-виробничИ! кснфе-ренцИ. "АктуалыЦ питания борогьби i про$1лактика зоонозних зах-ворхшнь" /Ки1в, 1983/, сьшому з"хзд! Украгиського нпсрсб1олс-г1чкого товариства /Черн1вцг, 1984/, Рерпубл!канськ1й науново-Bi:po6HJi4iii конферешц! "Berapaaapni проблемы проьшслового тварин-' иицтва"-/Б1ла цэрква, 1985/, Всесоюзной науксвгй конфореицП "Удосконалення ветеринарного обслуговування тгаряннацтва в умовах 1нтенсиф!кац11 "/¿ахачкала, 1987/, Всесоюзному ciMi03iyMi "Bio-тлм!л Ыльськогосподароьких тварин та продоаольча проблема" /Kkie, 1989/, Республ1канськ1й науконо-вкрсбпцч 1 й конферевцИ "Проф1лак-тика га захода борогьби з хворобами молодняка с1льоькогосподарсь-ких тварин", /Шнськ, 1990/,Всесоюзной науковМ конференцП', . прксвяч«эн18 НО р!чча Харк1всым>го зооветеринарного 1нституту 1м. Ы.Ы.Борйовико -Дарк1в, 1991/, науков!й конферанцГ! "Питания веге-
рднарно! Б!русолог!1" /Покров» 1992/, УШ з"!зд! Украхнського м!к-роб!олоПчного товариства /Одеса, 1393/, Республ!кянськ!8 пауко-во-практачн!й копфзренц!I /Дн1пронзгрОБСьк, 13Э4/.
1.6. Публ!кащ? по тем! диоергац!!. За матер!вдаш1 дисорта-цН опубликовано 37 статей, одна моаограф!я, одна методична роко-мендац!я, да!' иэтодячнпх розробки. Матер 1алн робота вгаормстан! таяох при наиисааМ дов!дкозо! л^тератури /"Довдашк ветеринарного л1каря", К.: Урожай, 1590;."Хвороба молодняка о!льськогосподар-ських тварт", К.: Урожай, 1992/. Результата досл!джапь опубл!ко-вэя! в куриалах /"М!кроб!слог!чапй аурнал"/, зб!ряяках науковах драць УДАУ, Алыа-Атинсвкого зооветеринарного 1нстиуту, штер1а-лах з"1зд!в, симпоз!ум!в, хоафереаЩЯ.
1.7. На захист виносятъся:
- кд!н!ко-е11!зоотолог!ча! особливое?! ротав!русно! 1афекцП велико! рогато! худоба;
- основп! б!олог!чн! власгизост! штам!в збуднкка ротавхрусяо-го витериту телят(мор5олог1я, морфогенез, культивувания, антяген-но-иротектазна характеристика); _
- мошнш1сть та доч1лыисгх> коцструвваншт пол!валеатнях, ком-б!новзнях препаратов, на основ! дом!нантнюс штам!в ротав!русу зе-лкко! рогато! худоба, коронав!руспого антигену та фактор!в патогэн-ност! зиер!х!3;
- оптям!зована Й!огехяолог!я вярощування ротавхрусу велико! рогато! худобя;
- пор1вняльна-характеристика удосконаленях тест1в лаборатор-но! !ндикац!! збуднака ротавярусного ентериту телят; ...
- роксмендааП додо лаб.ораторао!;д!агностакя ротав!русаого ентерату телят,
1.8. ОбИем ! структура дяспртад!У. Дксортацхя представлена
у вигляд! моаографи, опуйгаковзаох шдавншхсвом Укр ШГЕ1, -К, 1994, Скяадаегься !з всгусу га II роздШв; епологin, eniaooro-логхя, па!оге.йез, laiHinai озяакя, паюяогоайагом1чк1 sitiHU, Kitei, Äiaruocriiia, л1куваЕ&я, ирофЛдакгЕка, стадйМчна npojiaaK-waca. ваоновка. Ткблщь - 29,- малвшЯв - 6» Список вжорисган.оТ я!?ературя вюшчае 853 яаВшвування лтр-агуриях джэрол в1тчнзвя~ цнх та заруб temc аз1'ор1в.
2. матерш I метода досищень
Робога вдкоаааа з гюрДсд з 1932 но 19Э4 p.p., в умовах ка-федри MiKpcöio-ioril га Bipycoaorii УДАУ i в!русолог!чя!2 лабора-ropi'f, що функцИояуе еря Деяк! досяШаяая булк проведан! в яаборатор!язс Хвстлтуту вэтвразарао! издицшш УААЕ, 1кставу«у uIk.-po5io;:cri'x га вхрусодогп АН Украз'яи, и/и °Бхотесгязбораг'ор1я".
В екоперигаагальапх дсскйскэяиях вшсористаи! рефрзазв! атака porasipycy ваяако! porasoi" худоба /Т1трваль,. Кебраска. 21к-колья/, ротаз!рус маваи / SAH/, еи!зосуичадЕ шаг рогзв'русу евин!, а такоя eni&ooTimf ! золям porasipycy.велико! рогатоi худоба.
Досл!дяе1шя зд!Иеюоваяись на ыорсьхшс свинках, ßiiicc мншах, пацвках, кролях, иовонародяэиих телятах га дорссл!й взляяхй рога-т!Й худоб!. ВгжсрксговувалЕоь таког первшшо-трйпсянхзоваа!, одержан! з аярок ембр!ону корова /НЕГ/, кирок енбр!ону евин! /КЕС/ га перэаоллюваа! культура KSiraa - ЬЖБК, CHEB, TP, JEEK, вирощен! в стад1онарних або ролериих умозах.
Кя1н1ко-0п1зоотодог1чн0 обстеження госдодарств зд1йснвюля за методикою В«И*Урбана /1981/. В!д хворях тварзн з озкакамя д!а-pei та тих, як! не мали> ix, вхдбирада вшет првмо* кшки, в1д ■ труп! в-ша точки серия, легень, печ!нкя, селез!нки, нарок> jn'&m-
тичн! вузди,д1лянки топкого га товстого хвзочагка з шхстом.Магяр!-ал, законсорвований холодом,доставляли в яаборатор!и.
Електронком1кроскоп!ч!1а еослзджзн.чя зд!йснхтали за досомогоэ електроннпх г.пкроскогпз ДЫу!-1003,УЕМЗ-100, ПЕИ-1С0, Тесла.
Ультратонк1 яр!зи з слизозо! оболозки кшючника, експэркион-тально зарагшшх новонароджеаих телят та Ь'.фи-юьапи:: клггпкг.и:-: культур, оцержуваля за допомогои ультрашкротома " ЛКБ",
Серолог!чн1 реакцН /РДЦ, ЮА, РЗК, Р15.РЗГА/ ставили за за-гальноприйнятими методиками у наний модифЬгацП.
Антигенну спор!днеп!сть ротавхрусхв /антигенну р1зншда/зизнача~ ли в перехреснМ РН та РЗГА. В!дпов!д.ч! розрахункя зд!йсшозали за методом Арчет! га Хорсфала /1950/ га В.А .Прискоки /1987/.
1мунн! га г!пер!мунн! сироватки одериувала на морських свинках, кролях, б1лих пацюках, великий рогат!й худоб!.
Бактер1олсг1чно досддаення проводили за методиками,описанимя в офШЙнях вддаяиях/"Лабораторныо исследования в ветеринарии",М„: Колос,1987,"Справочник специалиста ветеринарной лаборатории" -К.: Урожай. 1987;"Краткий определитель бактерий Берги",М.,Мир, 1980/.
КрилтоспоридП" виявляли м!кроскоа!ею препараг!в,пофарбованих за методом Щль-Н1льсена.
Статястична обробка цифровых даних зроблена за методикою, описано» I.А.Чистяковым /1966/.
Результата цигоморфолог!чг гх досл!дже.чь проконсультован1 док-юром ветеринарних наук В.Т.Хом!чем.
У проведена! ряду комплексних досл!дясень брали участь В.Б.Ее-рисевич.М.В.Герстман, Д.Л.Мартичепко,С,З.М!ськзвич, 6.О,Краснобаев. Л.М.Носач, 0.1.Павленко, В.П.ПостоЗ, Ц.А.Собко,С.Г.Таш?та,П.В.Уса-ток, Л.Г.Хомякова,В.Б.Слободян.якям автор висловяюе пиру подяку.
3. РЕЗУЛЬТАТЕ МАСКЕ ДОСЯЩЕНЬ
3.1, КлШко-еахзоотояогхча! еооблавоет! ротав!русно! ¡нфещй! велико!' рогато! худоба
Результата кяШяо-дабораторню: дослхдяень св!дчать про значае ЕошЕренык рогавхрусно: !пфакцП велико! рогато! худоба. Пра вэдчеЕнх 3350 проб сяроваткя кров!, вшбрано! вхд тваргн.що налезала 202 господарствам р!зашс областей Укра!кя, сиецкф!чн1 щсдо ротавхр'усу аатктхяа булк заявлен! в ус!х обстовэкш: госяодар-ствах без внкятку. СеропозгаяБН!сть ходивалася у мехах въд О? Л% /ттркаа а гссподарств Макода'х'всько! сбяаст! / до 98,б£/гаарюш а гооподарс.гв Р1паенсько! ойласт!/ хи.чыисть серопозатавних проб в!д тдарян з госцодарств Килвсьхох, Шкнпцько!, Черкасько! та Хиздышцько! областей такса, буда заачноп 1 в!дпоз$дао становила: 92,4$; 91,2/5, 83,8$, та 32,У двяхпх госаодарствах дой аоказ-нкк хояявався в:д 50^/радгосд 1м, Хллхча Сн!гур!всь:сого району Мн-кола!ваы;ох обдаеях/до 100 % /яоагосп "Маяк", Червоаоахшйсьиого району Р!внейсъко! облает!/«-
Ротав1русыяЗ езтерис телят рееструвада частме у холодау пору року, яерегахно в пар!од з грудпя по квхтень ыхеядь. 1нкола зазеворввакня дхагяоетували 1 влш^у /радгосд "Гоголхвсыий", Броьарського району Кихвсько! облаот!/. Походеения 1нфэкцН було перевакно ондогеншаг. Зкзогепний !! характер спостер!гався у гос-лодзретвах, стадо тварий-якшс пошлоктували за рахуноя молодняхеа, досгавяеного з !шшх гоелодарссв та приватного сектору /радгосп ш.Кхрова Зроварського райоау Кахвсько! облает!/. Дяерелом збуднака буди хвор! новонародзезк! телята та тварЕиа-в!русонос!!. НаШльш ¡вганедвно'екскрегували ротав!рус телята на початку зах-ворвваЕня. У пери! 2-3 доба кондентрац!я збудняка у фекалиях те-
ляг буда надзвкчяйно вксоко» 1 досягала Ю10 - !012 пГрtos.lv/yJu У ф0хаж1ях з!д хворях телкт рогав!рус вкявлжш дротягои 1-2, а 1нполи 3 тръсх тшшз. В умовах неблагополучного стада, к 1д час спалаху захворювавпя, .. в1русовясйлеаня реестругалв не дев» у хворях, а й у кг1я1«шо здоровяг вовояародкеййх геля?» а гакож у тьарзи старзото зиту, нхлючаяча I доросдих. Кдлькхсть тваркн, як! екскротували ротав!рус кодиаалаоя у метах 5,5$ /«гаркав 1-5 ручного В13У до 26,6$ /голяга 2-6 м!сячаого хину/. Наведен: дан* ствврджуигв думку ВЛ.Урбана га I «Л.Еаймакова /1934/ подо взжяи-во1 ролт дорослях тварин, же 'осаозшзх дкерел ягрусних ¿йфэкцпЧ у новоаародкених телят. Про це сз!дчать гаксж результат:: досд!д-кень, проведоних С.Г.Ташутоя /1987-1990/ п!д час вивчення корона-в!руоноТ гифетИ велвгео? рогатоУ худоби.
Ротавхрусна 1нфекц1я хараятэризузалася ензоогичаам пореб!-гои. АзагЛз умов 1вф!вуваапя иоаазув, ко освовнш гмханх&мом по-пзареная захворюзаяня у стад! о фекальяо-сральний сяосхб пэреза-рааения. Певне заачеаая ярд дьоыу эть такса кон^амшовакг збуд-апком станки, напувадкг, саецодят га 1пш обяек?и зоеяшнього середоЕКпа. П1д час опалаху захворвваавя нам кдавалоея вяяяяятв рогав!рус на згаданях вящэ об"сктах за донского«) Ш.
При задесеан! збудожа в благополучне зодо ротав*руеного энтериту стадо, заххзорвваная може з"явп1ися раптово й ивюто пожарит зол. У государствах, як} триал и", час вэааалкся неблагоиолуч-нгии.воно проявляться в пар!од цасовизг, отелеаь. Захх>орю.ьап1сгь та летальность моаугь колизатися у значаях ыеаах, яо залетать д}д р1вня 1ндив|дуального та групового {мук1тету та ряду 1апях фак-тор!з. У обстеаекях господарстнах захворюБаа1сть стааовшга п!д 20-30 до 80-100 летальность в1д 2-5 до 15-30$, Спалахи рота-вЗруского .энтериту вшосали переважяо у госдодарствах, де реестру-
вала иоруиення сбмхну речозкн у тЬтьних кор1в-катор1Б, в!тамш-ш:й та м!норэльниЯ деф!цятд, гхпопротехнем!» га г1погг;лаглобу~ лхнем1ю, а також мали м}сде порушення зоог!г1СЫИ одорканвя 1 го-д1вл1 новонародаэнях, ведотригання ветеринарно-сайтарних правил. При досл!джеши галаглобул!ц1а у сироватц! кров! новонароддакх телят в одаоцу з кеблагополучнгх иодо ротавхрусиого ентериту телят госгодарств! /агростангЦя УДАУ "Митниця"/. ми в1дахчали дос-тов!рну р1зииця цих компоненти у кгЛнхчао здорових тварин та тих, цо зехвор!лк на рогав!русний ектерлт. Так, у перших при народяэн-к! к!лы«!с?ь гаька-глобулххив у сироватцх кров! становила 3,1+0,825; у ос?анк!х - 0,5+0,042, через 24 .-од. - 13,48+1,88 та 15,7*3,22$ вхдпов1дно. Лага на п"яту доЗу к!лы<хсть га-яна-глобу-л!н!в у кров! хворях телят аеревиишла рхвеаь хх у хлШчно здо-ровнх ! становила 13,2+3,5^ у-перших та 17,92+2,25$ - у останн!х. Прете, зрозуьило, цо цо вяз було результатом спедиф!чаого хв$ек-е!Иного процеоу та иасл!дком дагхдратааП орган!зму.
Кя1ы1чи1 ознаки ротав!русного ентерягу у тваран частхше сгамерггаякся яа другу - чзтверту добу шелл народжеиня. Понос з"являвся растово, або п!сля незиачного пригнхчешш. Калов1 ыаси будд водякг.ст1, з дадЦшкаки елкзу, зрхдка кров!. Шдвищсну на 0,5 ~ 1°С температуру т!ла рееструваля лише у винадках зм1шано! в!руо-бактор!йнох хлфегсцП. Закономерно спсстэрхгалвся явиша, пов"язан! з дзг!дратац1еи органхзиу: змвншэвня глася т-хла, ено£-талъм, хатокскхащя. Виражан1сть осташпх холизалася у знача?л1— р! - в!д ледь пом!гних до надзвичаИно штенеявнах. На ц!й основх ряг; дослхдн2к!в розр!зиязэть легкий та тяжкий деребхги захворпшання. Результате наших досяхдаэнь евхдчать про додЬтькхсть дя$ера;ш!а-ц 11 клШчного перебегу захворивання на легкий,. нап!втяжккй та тяжжЗ. До первого сл!д в!дноситк вшхадкя при яклх кр!м проносу,
то заикае чорез дв!-трк добя, га нозначаого прягнхченяя твзриая, !нших ознак нэ виявляля. Ная1вгяжкяй псресЯг характеризуемся пряеднаиаям до згаданях ознак яом!рно!£ депдратвщ'/ га !нтокси-7ят\11 оргая!з;лу. При тяккоиу пореб1гу пронос профузяий: налов! каон з дом!шками слязу, кров!, м!стять ккэточкя зруйаоваао! сли-зовох оболояди ккгсвчаика. Явиаи дег1дратац11 га ¡атоксикацП" орган! ему надзвячайао вяраяеа!, Залезао в!д умов утриманая, система л!куваяня га дП !ншях фактор!в, легкий пореб!г захворлвааяя ысже зм!нитяся на тяжчяй. При саостерожеяи! за хворями твзринами у рядх госяодарств мл в1ды!чадя. що, як правило яа яочатку спала-ху рееотрусться легкий пероб1г захворивэиня, е. п1зн1ие - ная!в-тяжкий та тяакий. 3 деяких випадках /колгося "СолобковеиьКяй" Ярмолияського району Хмельяицько! облает!, агросташия "Митяиця" Васильк!вського району, держплсмрадгосп "Алехсандр!вкяп Борис-я!льського району Кк1зськоТ облает! та 1а./спостер1гався двофаз-ний яереб!г захворлваная. Саочатку легка перехворювзння у 1-3-денному в!ц! /"рання д!арея"/> а пот!и, через 2-3 добя - тяжче "п!зня д}арея". Под!бний пореб!г ротавхрусаого ентэряту телят опясаний Я ¡кепмя доел!даяяамя / 2е1ечсик рлч ях а1. ,1980/.
Субкл1н1чаяЗ переб!г ротавхрусаох 1а$екцН ресстрували переваяно у тваряп старших в!ковях груя, ароте ! у■нововэродяеяих в1н глав ■ м!сцо. У р}заах госаодарсгвах к1льк!сть новояародженах телят, ао екскрзтували ротав!руо з фекал!ями, ао проявляючи при цьому озяак захворювання, колмвалася у кагглх в!д 2 до 32 ■/£„
Ротав!руош1й еятерят у вягляд! монопйекш! зустр!чався кад-звячайно р!дко. При досл1дхена1 мэтер1ал!э в!д 632 хворях та загяблих телят лише у кости випадках кргм рогав!русу 1нлнх патоген !тз не ваязлеао. На й та от };:о ротаа1русна 1пфекц1я асоц'ювала-ся з ешэр!х!8коп /56,62/ та коров5в1русвог /23,5$/. Результата
цах дсслзджень наведен! у таблада I.
I. Результата дослхдаення матар!ал!в в:д 632 хворях з ознаяаш siapolí та захпблпх новокародженах телят, що налетали господа ротзам УкраУна /1985-1993р.р./
Заявлен! збуднакл
К1льк1сть :Частка позятяв-:ннх результатов, • í
Ротавхрус 6 0,9
Ротав1рус + короаавхруо 66 10,4
PoTaaipyc + E.OGIÍ 265 41,8
Ротазхрус + сальмонелл 18 2.8
Рставхрус + сротей. 13 2,0
PoraBipyc + яриатоспорадП 33 5,2
PoraBipyc + KopcKar.tpvc * s.caxt 81 12,8
PoraBipyc + коронавхрус + в.сэн + 12 1,9
краятоспорвдН
KopoaaBipyc + E.c.oü 34 5,4
PoraBipyc + не гдек тиф i i;osaн i ептеро- 13 2,0
та с арв oe i py з oí: о д i б к x Bipioaa
E.ooli 59 9,3
ТфяптосворидП 7 1,1
Збудшиса H£ вхчвлеао 25 3,8
П&р1зшшчи з MoaoíajoraiifiB, sainani знф&иШ характоразува-лкся законошрно-тякчим перебггом. ОсташМй част!ше cnocrepirsB-ся у раз! в!русо-бакгер!йно"1 асогцудП, особливо ара у паст i протез. Прогэ вазначальаай ьпдив на дереб!г захворювання як у вя-падку моно- так 1 оыiнанят !афекц!й кали фактора, що зушвлювть резистзйта1огь организму тварани, а тахог; умова, до впяиваять на 1х реал1зац!Е, Так, йаявн! колострадьн! фактора забезпечувала ва-рагенай превективкяй ефект лише за умовк регулярного й правильного вгаоюБаЕ'Ня молозива.
Стаб1дьай£ д!кувзльао-проф!лактачняй ефект спсстер!гаЕСя у
вкладках рад!окольного поеднання ет!отрошшх, дагогеяетачянх та симптоматичаих засоб!в. Ейактявною виявкяася схема л!куьання, 7 як!й побднуваля згубний вгляя на збудяика. йогоасоц1ант!в, антидепдрацШгу га аптитокоцчну д!а на организм хворо'! тварини, сти,1уляц1м його захйсаих рэакц!й 1 норгдШзац!» микробного складу шлунково-кишкового тракту. Усгпх торапП залетав також в!д суворсго дотрямання сан11арао-зоог!г1ен1чних вимог, зд1йснелня заходов, спрямованих на знешкодкення зов'пшнього середовпаа В1Д патоген!в.
Патологоморфологхчн! за!ни у б!льиосз1 випадкхв були хирэк-тершми для гоатрого ентериту та дегхдратадП-. организму. Шд чао макрооноа!чного обсгеязняя труп!в выявлялись ознаки серозного чи кагаральао-гаморагхчяого запалення кишок, а 1аколк 3 клунха. Сячуг верапознений газами, ш!сг його р!дкяй, !з згусгками казвГцу, слизоея оболонка набрякла; г!пер9м!Ёована, э.оэааяами краачастих крововшшв!в. У слизов!й оболонц! тонких килок акявлен! псд!бн! зм1ни. Л!мфатичн1 вузли тонког кишки яабрякл!, соков;:?! на роз-р!з1. У вяутр1шн!х органах /печ!нка, селезхнка, нкрки/» - ознаки застойно!' г1перемП. При г!оголог!чяому доол!дженвх /Хомя*овэ Л.Г./-матер1ал1в в!д спонтанно хвор!лих або екопориивнгально ! Пскова ша тварин в ентероцятах виявлено дистро$|чн! та некрогичн! зм!ни. Ввасна слнзовий шар слизово! оболонки тонко? кишки набряклий з др!бнши крововиливами. Кишков! ворсинки мають ознаки даотрук-тивного процеау, дояк! з них деформовань еп!тел!й м!сцями дэ-сквамовакий - вкрявае не всю 1х поверхшо. Цитоплазма б1льшост! еи!тел101щг!в вакуолхзбвана. У власне слизевому шар! слизово!' оболонки тонких кишок,кр!м ознак порушення гамодиаам!ки, слоогв-р!галася 1н$1льтра«1я пром!жно1 тканина кл!тшшкми элементами кров! та г1от1оцятамя...У п!дслизозому иар! - запальиа г!пэрем!я,
набряк, роэркхлення сп олучнотка никних волокон, вогшхща 1нф!ль-грацп кл! тинами запального ексудату. При ы!кроскои1чному дос-лхдкенкх печзнки, нирох - ознаки заст!йних явки. Переважна бхль-спеть гепатоцит1в з ознакаыи зернистоУ дистрофП.
При розгян! трупiв телят, як! загииули В1Д захворювань зм1-ajHO'i пряродн /pora-emepixiSHOi, рота-лрогейно! та 1н./ спосге-р1галкся такса ti/Лни у товстсму Bijmiai кашечакка, характеразу-валися озаакамя катарально-гемораг!«шого коя!ту, проктиту, Hepis-ко з вираженими деструктивно-кекротичаши явидами.
Таким чияогл, 'результата наших дослхдт.ень сз!дчать про значна поширення poraBipycno'i хцфекцН велико}' рогато!' худоби, ензоотич-ний П nepeöir, рхзномахйтняй характер прояву, надзвичайао часту ааод!ацш з !шиями захворюваннями, особливо з коронавхрусною iK-фешцею та кол!бактер!озом.
3.2. Вивчення 010Л0г1чних власгивостей збудника ротавхрусиого ентериту телят
3:2.1. Морфолог1я, кулмивуьания, морфогенез
У результат! пор1внял1>ного досл!дкення морфологи р1зних вадхв i вгсааЦв poiaBipyciB, у тому чксл1 й ротав!русу велико? рогато! худсбя /еп!зоогичн1: Р1вненський, Полтавський, Кихвськкй референта!: Т!верваль, Небраска, Лхвкольк/, ротав!русу иавпи / SAH/ та ротав1русу свян! не виявлеко помхтяо! р!знкцх у ix !лорфодог!чн1й характеристики Еезалезщо в!д виду та штаад во! вони приблизно однакоЕого po3nipy. У pi3HKX матер!алах /культураль-na pijuina iH$iKoi>aHHX кл!тгнаих культур, вл!ст кишечника загиб-лих телят, ректальн! дроби,взят! в!д хворих гваркн/ закономерно
1Э
спостер!галися в!р!оаи трьох тгапв: повн! /двокапсидя!/' д1амет-ром в коках 65 - 78 ям, такого я розм1р-/ "пуст!", лозСавлея1 сер-цовене в1р!ояя та неяози! /однокапсидп/ д1аметром 52-61 нм. Сл1вв1дношсння опясакях в1р10н!в коливалося у значн!£1 м!р1. К1ль-к!сть поааих в1р1оа!в законси!рно зроотала у м!ру адпятацП збудняха до кл!тшто! система. Так, у процос! адаптацН референтного штаму ротав!русу великой рогато! худоби'*Г1Еорваль"до гете-ролог!чно! культури кл!тия С1ЕВ у вершах паоаясах яероваяалк яе-попнГта дефекта! в!р!оня, а на р1вн! 15-20 пасаж!в к!льк!сть песнях в|р!он!в" становшт 60£, дефеятних - не перевкяувала 25$. Пова1 в!р1оня перевааали в магер!алах, одерканах в1д тварип у перш години■прояву захворюваяня, пепоья! та дефекта! - в матэ-р!алах, вШбраяих в1д твариа у пера! да! реконвалесаенц!!, а таког у вяпадку субклШчяого Його переб!гу.
Морфогенез егалоаяого /Т1верваль/ га ея!зооитого /Р1виеи-сысяЗ/ штам!в рогав!русу велико! рогато! худоба у гс;лолог1чн!2 . /МДБК, ТР/ та геторолог;чн13 /СНЕВ/ клхтиннях культурах був одно-тивяии. У ногах 0,5-1 год. п!сля 1яф!куваняя, ротав!русняй антя-гэн вдавалося вяявлятя за допомогоп Р1Ф на позерхн! клхтяа та в цитоплазм!, поряд з П мембрааов.Флюоресценц1я у пой час йула ледь помггного. Дещо Я1зн5аз вона не зЕЯвяялася. Пряблязпо через 7-8 год. п!сля заражения, з"являвся неяскравий "ореол" у навко-лоядера!й гон! питоплазгип. В деяких вяяодкох в1н був piB.4ot.iip-нпм, у ^ашх - грануляркЕИ. Через 18-24 год. п!сля заражения в уратаиих кл!тивах ■5япоресц!юзала вся цктоялазма, яри цьому вияв-ляли зруйаотан! кл!тяая та е::^трацелшяра1 <$лиоресц!кизч! коагло-мерати. П1д час елекгрояксм1кроскоя:чаого досл!дзевкя ультратон-кях зр!з1в з перздеплявано! культура кя1г;;п С1ЕВ, !налксвгно! ротавхрусол: велико! рогато! худг^а /ты» ?1зэрБаль/, аа раан1х
сгад1ях в1руош)х хнфекдх! /доява верши озаак ШД/ регулярно вк-ваяяля в!р!они ротавхрусу. Б1руон1 часточки буди на р!зному сту-яек! формуваная. Д1амагр Гх залежяо тд сгупеня фор.гувашш га м!сця дроходаэиня е.рхзу, сгановив 40-80 ни. У б!льшост1 вяаад-к!в скупчэння Б1р;'снго; чаогочок сяоотер1галося -всередан! розша-реакх I часгдово догранульованах кэнальцях гранулярно! ендоплаз-матячно! ох тки. Разом з те.: в канальцах гладенько! ендоплазаа-тячно! схткд гэкож'.-вияюлялв в1р1ояи. 1нколя вони мала взгляд в1льно ро&вдзнах у цатоддазматачному матрико! часточох. У дая-кдх вааадкзх с.юстер1галась В1р1сиа, ,як! брунькуваляся через еле-мектарах иокбраня ендодлазмагнчно! с!тка шутршаьохш тайнах вакуолей, дастера апарага Гальдж!. Формуванпя вхр!онхв, !х скупчен-ня га вид!лсйяя з хлхгин суароводаувалося рвэаиикои диотроф!ч-нес зм!н уяътраотруктур в1русяродукуючях кл1ткн. Набрякайа й ва-куад1зу?аяися 1л1то:сондрх!, сасстерхгадкся дегрануляа1я 1 розши-рення каналья5в евдоялазмагично! сп'хя, зб1льшувалася шлыйсть м1кровак1'олеЗ га 1н. Сгуд1ш> ураження кл1тия корзлпвав з 1нтеи-сцвЩсг» вхрусмох рэдродукци. В енгероцагах екоиершентально !нф!кованого повонародженого телята, забитого через 22 год. хпсля заражения» у ноыенг ааШлып виранвша ознак захворвзання, ваяв-дядя подхбН1 ультрамIкросхоя 1<щ 1 зы!ни. Ротавхруснай антиген хдеЕтд^кувалд аз дало в' еятероцатах тонко! квакв, айв ободовхй та сл!п:2 ккаках,тзкок у л1мфатжчиях вузлах тонко! кишки. Ана-лог!чяу каргану саостер!гада й ахд час досд!джения в1дповхднпх матер!ал1в в!д спонтанно захвор1лах 1 забнтпх з д1агноотачнов кетою новонародаених телят.
Культивуванпя збудацка. Сароби вид1лита га культавувата • ротав1рус велико! рогато! худоба без протеол1тичао! акткв}задИ ваявшихся марнши, Внесения трипсину лише у шдтрямуаче ссредо-
?л
ваше, ado обробка хсйтия цгал фериеятсм зумовяюЕалл акткв1ззд1а т-pyc-iH®ewii лшэ у двоя-трьох послгдовнях nacasax. ПсЫм озиккк 1Щ зникали i за яодальаого пасазування но з"являлися. Стабхяь-няй цитопатогзнний ефект спостер!гавея лише у вияадках, коли в!-русвмхсну oycneH3ia пород заражениям хя1тинно1 культура обробляли трипсином /10-50 мкг/мл протягом 30 хв при а в пхдтримуич»
середовидо вносили фермент у доз! 2-5 мнг/мл. Аналоу!чну картину спостерхгаля як пхд час адалтацП лаборатории шташв ротав!русу до кл1мшних культур / sä II, Пверваль/, так i з npoueoi ви-д1дская та адалтацП еп!зоотичних итачйз ротазхрулу.
Нин! протеол1тичну актив!зац!ю poiaBipyciB застосовувть (Шь~ ш1сть дослШшйв. Вперше цой прийом був запрояонований ъ^Ыим LaA> та !н. /1Э77/. 1нтзрпротац!я механ!зму дИ трипсину та !г;-¡лях протеол1тичяпх фарментхв була р1зномаи:тною. Однак найбхльш аргумектовакгал пояснениям е те, ко фермент моди$!куе повзрхневгй пол1пептад, нар!заючц його на двх ыслэкули та v*®' Е0 за~
бозпечуе роздяганкя ротав!русу i проншионня його у чутливу кл!-тину/ EDtrg м,к, та in., 1981/.
Характер дитопптогенкох д! х, у р!знлх вид! в га шгам!в рота-в!русу був однотилним. Слочатку cnociepiraiaCE рэфрактяльн!сть у раке них ки1тин. ni3Hiae дитсшхазка дэяхадх з них иабузала нитко-аодхйно! форма. У uososrapi rai тин з"являлися "в1г.на". У перших четнрьох-п"яти паеаяах руйнузалося 30-50, у додальзих - siд 7-10 до 60-100$ ыснолюру ыптил, Деяка р!зштця у характеристик! ЦПД, зумовленсму ротаз!русами. епостерхгалася п1д час культквуваяня 'ix у pianrix кл1Тйннкс системах. Зокрема, у перекеплкванН! культур! KsistiH СНЕВ заведя винвяядя клй'иап з ниткопод!биои цктос-лдзыоя, а. у кл1тиннйх культурах ЛЕК, МДБК та 'ЯЗК iвколи реестру-лали ран!шэ описан; доолШпкаыв /xOVOg в . ,1979/-, otto ?■< et в1. ,
1986/ серпо-або флагопод!бя1 клхтшш.
Урожайнёсть ротав!рус!в П1Д час культквування у стац!онар-иих умовах залкшалася низькою. Так, татр референтна штамёв îi-вер.:аль га saii у таких умовах па переващував 5-6 1КГЦДд0/мл, У цллерних умовах останнёй закономерно зростав на 1,5-2 .Подальше дослёдаенкя показали, то певккй шлив на урокайнхсть ротавё-рус!в мае сировагза кров!, яку використовувть у процес! приготу-вання культура клтш. Комврц!йнх cepiï кров"янох сироватки вироб-нидгта Киёвського миясокоыб!нату постёйно ы!стяли протиротав!рус-е! антлтёла, Зв!льнення ïï вед гяобулхновое фракцёУ бёлкёв сприя-ло п!двидэншо титру pcîaaipycy великое рогато'! худоби па 1-2 ie Одаочаово протиротавхрусн! антитёла не влливали на урожайн!сть гетеролопчного штаму ротавёрусу / зАП/.
П!д час адаптацёё та культивування pOTaBipycis нередко спос-терхгалося поступове "затухания" вёруспефекцёё. Це явище ми реест-рували частое п!д час вид!лення poîaBipyciB з патологёчних мате-ршяев. У бхльшост! вшеадкёв "затухания" ЦПД вёдапчалося в пер1од 7-9 пасажёв. Як свёдчать результати електронш>шкроскоп!чного дос-лёдкення воно супроводжувалося нагродадаеннш велико! кёлькостё неповних та дефекташях вёр!оа!в. Остакие, очевидно, ! були одн!е» з причем абортивное вёруо-ёнфекцёё.
Успешна видёлення та адшетадёя poiaBipycy велико'! рогатое худоби, як свёдчать наш! спостерааення, можливё за удави nooriiî-цого контролю динамки ротавёруснох !нфзкцёё клётянноё культури. Вякорисховувчи для ец.о.го pi3Hi серологёча! тести та електронну мёк-роскопёю, наШлып корисну ёнфориацёю i.ui одераували при застосу-вапн! PIS. Так, в процесё адгптацёё ротавёруоу до гетерологёчно1 система клётше за допомогоео цього тесту реестрували иосгупоЕО зб ёльшення кёлькостё уракеешх в! рус ил клётин з 2-4 - у перпкх 4-5
иасажах - до G0-80$ - 7 10-12 пасажах. 1акояи в вроцесЛ едапта-п1! Bipycy в1л?«чалося пом1тяе амекшеаия фякз0ргец1юючюс кл1?-'к. Це було аргументом для корегування методики.
П1д час 1муноф1вореснентногс дослхяжения моиокару зштян, /первшша культура клiтиа НЕК/, заратаяих суспеяз1ею, одержано» з патологичного иатор1алу. у яершях 2-3 касажах часто cnocfopira-ля сяецйрчау флшресценц1ю. У наступил* пасззкзх вона знакала, aöo к 1нгекеявк1с?ь ÏÏ зростала. Характерно, ао ЦЯЕ у таких ва-падках, як правило, не влявлявся i лише спепкф!чяа фяворесаенШя урзкеаих raiтин аргуиентуваяа доц!льн1сть подаяьшого насажу.
Одерган! нами даni дала змогу оппмхзугаги процес вядхлення та культявувакня ротав1русу волгло! рогато! худоба. На ïx ocHoni був вздпрацъоваиий /равсм з Собко К>;А./ досл1дно-промислсвя,1 регламент культцвування ваяцинних итам!в у иост1йн1й л i и х Y клН'иа МДБК.
3.2.2. Антвгенно-протективна характеристика штамхв poianipycy велико! рогато! худобл
Досл1дяен! нами,разом з Гая im А. Д., 2í eniaoosavBi ззолятя pcraBipycy велико! рогато! худоб я. в антигенному гидногенн! зяяэи-лпсь гтслшор.*нши. Останно отосувалося не лгспе BipyciB, вши пенях у рfauns perioaax Дкрг!рл, Росхя. Бхлорусь, Латв1я/, а X тих, ко були зилЛяен! ко територп Украхаи /21 i золят/. Аатигекний полг-морф!зм иевноа uípo» був пов"язаний з депктш обставиаами. Зокре-из, втруся, од-эрзян! на початку спалаху захворквааня вхд îварка ¡зоаыхззяого стада у антигенному в1дяолгеян1 буди практично 1деа-ти'шима. Антигенна р!заиця mis неуд ко перевшувала 28 %. 7 той же час воаа була надзвячайно вяраяенею у ¡золя?!в, одерзввих В1Д телят, що налетали господарству, стадо якого loctííího форму вял а
за рахунок уварка хкаипс господарств та приватного сектору /кол-госп iM.Kiposa Бровзрського району Кй¥веько! обдаст!/. Антитекниа пол1ыор®10м збудвкка poraoipycaoro еатзрату телят пщтварджуеть-ся, у ¡хеш til ь:!р!, такоя результатами дослШення в РЗГА иров"янях сирозагок з п"яти еа!зооти'Ш!мд штатами poraBipycy велико! рогато! худобд /Кя!вський, Р!вненськяй, Полтэеоышё, Б!лоруський, Мое-коесьеий/. Титря анткт!л у кров! твариа з piaaax господарств буля переваяаачашх до того чк iнаorо атаку. Так, до штану "Кн1воькяйп, пор!вняно з.татрами до iHasx штам!з збуднкка, ваШдьм висок! тит-рк антхт1л виязленх у снрсвзтках крсв! тварин, як! налетала рад-госпак "Кй!вське$" та "Хопвсышй" Каевс-Святоианоького району, arpcorusaii УЖУ '"Матняня" Весидьк1веького району, радгосау "Fao-свэт" Saciiвсякого району, г.олгсспу гглЛлд!ча Кагарлицького району, радгосау "KajmsiaEa" Тет!!вського райоау/Ки!вська обдаст^ а га-кок ряду господарств Р!вп8Нсько!, Черкасьно! та Какола!всько! областей, До италу "Р!ваекськ2Й" антиг!яа у аайващюс титрах встанов-лен! у- скровагках ltposi тварлн. ио належали гадим госаодарстшм: коягоеаеа вУкра!ка" та "Програс" Дубровецького району, "Запов!т • 1лд!ча" Острогського району,' "Ксмсомоледь Укра!нии, !м.Свердпова, "Маяк", "Свхтоко:;" Р!вненського району /Р!внзнсыга область/, а такок ряду господарств Хмелышдьяо! та >'я!всько! областей. Под!б-на ситуац!я буда-характерною ! стосовно !нших ютам!в збуднака.
Антигенний пол!цорф!зи збудника рстав!русного энтериту телят п!дтвердаують такок дан! едактрофоретичного досд!джвння РНК eai-зоотичнах штам!в. Незвакаюча на те, до бс! вена належали до так званого " довгого" електрофоретяпу, електрофорзтичний про$!ль у hex. noMiiao в:др!знявся. Досл!дження ряду штам!в ротав!русу велико! рогато! худобя за 3 -ознакою /Собко В.А. та ia., 1992/ дещо допоашеюгь аргументах^» щодс пол!морф!зыу збуднпка ротгвЦуоного
еитероту талят.
Результата яшшная антягешно!'. характеристика абуднгкз эдх-ворюваная зумоашт HeoöxijaaioTb розрсбаз рач1окальиога а!дхолу до подбору його кзкцинних щгем1з. У зтз"язку з дам було мпропсао-ваао /Онуфрёев В.П.,СкабШыел2 Б.Г..Шаъквтч С.З. га In./, до складу вакцин вводкти доа!наптн$ штамп ро-гав1р?су велико? рогато? худоб и з вироквм спектром протзктязно? ttoîSHsiY. На raxiâ оо-hobí були скснсгруйован! коне- та полхваленгка емуяьсхйн йормол-вакцяни. ОстанШ! включала аатигеак доьйнантаах итгм1в ротавхрусу /штаыи "Р1зненський", "л"осковсы:;1Йи>"Бхлсруськх1г''/, короязвхрусу та ентеропагогеиаих eaepixlí! /кои"зговаиай ехзотокепл, адгезяаи 1ЭЭ, E4I, A tt -25/. Коронав!руснай та ешерхххйкий антигени «5уда представлен! 1нсгиту?оы експерименгалыхо? i ялШчно? вегериняр-Hcï медицина УААН/м.Харкхв/.'Препарат взяаявоя у дсотатхий Mi pi амтигопкгм. його для títлих мшей та пацвк!в стааозйла 0,34-
0,4 га 0,5-0,6 мл зШовШю. Дворазозе вводеаая препарату в до:<1 25 IMSgQ/iu: /икшяк1/ стимулювало у доросло? велико? рогато? худоб;' синтез гуморальких аатитхл в титрах близько û loj?'
Одна з cepifi ксжЗхкоззко? полхзаяенгко? ваэдккя була вмко-ристааа з метою гхпорif.ry4tзйцiï вибракувааах Kopie. Пол1Балонгнз сирсвэтка та одерзанай з не? ёмуноглобулхн гЛстила достатвю к!дь-Kicîb вхдповхдних спэцк^чяях фактор!в по з1дйсшеен» до ;'.yclx ксм-noaeiiTiB вавдяни. Титр протиротав1руснах антатхл у осганньоыу досягав I : 32000, - протикорокаахрусних - I : 2000, Титря аятятЗл до факторta пзтогеаност! enepixia була в'межах I : 2500-1:10240.
Застссуваиня rinepiMyancx скрсватки та одертзиого з нэ? 1му-ноглобул.тку з лхкувальцо-прсфхдантячасю мероэ з умовах господврств, неблагополучиях щодо кяяковаг захворавань в1русо-«бактер1й1£о? природа у ковснародаених телят,супрсводжувзлося зирааешд.провентяв-
НЕИ ЗфЗКТОМ.
Так, лероральяв введения rinepiMyasoï сароват вовонародаеням голятам у доз! 1,5 мл на 1 кг мави до вяпоявання шхтозива, а по-tím у так!й se доз! через 43 та 72 год. гпд чао спалаху рота-еше-pixiííüoi' iafycxni'i в яолгоояг "Созобковэцьккй" Ярмолияського району ХмаЛЬИИЦЬКО! СбЯОСТ! ЗуМОШЛО SdapeEeHiCTb 92,81 толят. У контрольна rpyni, иеэвакаючи на п'тзнснвну то рая i и нерпацаф1чндаи засобаш, замшуло 12,5?? тваряа. Позитива! результат ааоуооуван-ня rinepiMyHHCi'í еироваткя слосгерхгались мхож j в удавах агро-станцН УДАУ- "Шш1£щя". Засгосування препарату за аналогичной схемою запобхгало кояв! шпнМннх о знак захворазання у 85,7$ т варан дссл}дно'/ трупа, toäi як у контрольна груя! yot твердая тяжко перехворивалк.
2.3.3. СтШ^сть pOTflBipycy велико? рогато"! худоби до ф!зако-х i м iчних фактор!в
В!дсути!сть AtnonposeïHOBOt суивркаповди вопзою Mipos atóüia— чае в!дносау резистентность ротав!рус!в до фактор!в зовШшнього серздовища. Досл1даен! нами гря епхзоотячй! штвми збудиика рота-sipycHoro витериту телят тривадий час виживаяк в умовах пойуто-вого холодильника, буди CTiteMK до eíiipy, хлороформу, Встьковле-но, що ряд факторi в Mosjïb шляьати на вижкван!сг1. ïx. Зокрома, мае значения са1вв1даошоиня у BipycRiü суспеизiÏ повнкх, одно-капекднгх -та дефектах Bipiosus, прозор!сгь рШки, И оклад, наягшеть cTopoHHboï м!г.ро*лорй та in. Так, при стабильному по-казнкку pH /7,0/ в хультуральк!й рдаа! /и 1дтрвмупче середоваке Ш + 1гка/, в умовах-побутового холодильника /+4°С/, в i рус а не втрачали хкфекцШих властавостей ь!д 2 до 4 тда.н!в. При вкосен-Hi у н1дтршуюче серодовидо 0,1% сирозаткоього альбум!ну /ЕСА/ ÏX .нфекц$йн!сть збар1галася до Ю тиж!Цв. В умоsax кязькзадяератур-
ного холодильника /-30°С/ штамп ротаз1русу не зтрачали хн£слщ1Е-иих властпзостэй протягмл 13 м!с. /терм1к саостерожзняя/. Ери температур! *60°С дооя1дяеи1 ытаки майке яовн1стп втрачзла 1нфекц1йй н! властавостх вжо через годину, проте остаточна 1'х шактивашя в!дбувалася за 4-5 год. Ввагаеться, ио ротав1руси аорхваяно розяс-тентн! до х1м1ч_чте речовин /зпоазмаз о.н. а1. , 1977/. У вайях досл1дкеккях 1паигявац1п епхзоотачнюс игам{з збудкякз рэтавх-русного еатериту телят ари наявноот1 у суспензП 0,1£ фордальде-г!ду пра 4°С ш ресстрували через 48 год, Зношкодаашш дшсту ки-печника в умовах к1мнатао! температуря саостер1галося чорэз го-дану пхд д!е» 2-4% формадьдаг1ду. г1дроксяду натр!в, г!дроксиду хал12>.
4. ПОР1ВКЯЛЬИА ХАРАКТЕРИСТИКА I УДОСКСНАЯЕКЫЯ ЛАБОРАТОРИИ МЕТ0Д1В 1НДЖАЦП Р0ТЛВ1Г/СН0Г0 ВИТЕРИТУ ТИЕТ
Оц1ншча тестя 1адака1Ш ротав1рус1в та в1доов1дяях антят1л, мл анад*зувалп IX слецвф1чн5сть, чутлав1сть, д$агностичну !нформа-тизн1сть. Сдецаф{чн1сть, як в!домо, аеобх{диа якхсть тесту пра будь якН1 сятуааП його викорястаная, що ж стосуеться чутлявостЬ то вона аовинна бути адекватной до конкретная аотрэб досл!дкенкя. 1ахадли ионш чутлнвай, але достуаа1шлй тест с б{льа баками:.) /аор!в-няно з вксокочутливш, але таким, ад потрзбуе саед1альпого обдад-наяня, дефШгпшх кокпоя-знггв. 3 урахуваншм ояисанох'о нижче наведено характеристику ряду ааробоваких нами тсст!в 1идикацП ротав!-рус!в та в1дпов1дких антят1л.
Елактронна та 1?луноелектронщу м!кросг.оп1ят Елоктропна м1к-роск0п1я - надзвичайно 1и$орматявяай метод, особливо ц1шшЯ при дослхдаеннх магерхал!в у вяладках зг.и^яшшх }а{екцгй. Оригинальна структура ротав!рус1в дае змогу безаомалково розпхзнавати 1'х.
EaBiTb а!д час викорйстаакя найпрос?inoro П варханту - прямо! ЕМ. У зв"язку з недостагньою чуглйв!стю цього тесту, нами розроб-ленс оригшальпу г^етодкку кокцеатрування доол!дгуваакх матер1ал!в на 0CU03Í сорбцх!-уяьтраф1льтрзц1! на тканшй Пэтрянош. При пкдоя-ливостх кондаатрувапня Bipycy за nica методикою, можиа скоркстати-ся дшдою, зокрюла ;з застосувакняк сульфату awoHira, ado к ультра-центрифугуваная. Ро$ав!руси вдэсться виявляла, якаю концентрацхя. Чх у доо л i дху ва у к: ¡¿a т ер: ала х становить но меншо ЮООООО/мл.
Елоктроапа ;.iii;poc:w.iín s кадзвичайно ц!ш-:им эостсм у aponeci ьзд!лоння та адаятацП ротав!русхв до wxítehhkx культур. Зона дае зиогу не лише констатувати наявнхсть збудника, а й oaiHKsara характер в!рус-щ£ехц!'£ /ародуктивна, абортиваа/, орхснтуючись ка са1вв1даошеяня яозкях, однокаасидких та дефектних Bipionis. Вкко-ристозузчя електронну м!крсскопха в npoueci зивчення морфогенезу збудника ротавхрусного ектериту телят, нами булн охарактеризован! у ль грзм i к? оско nina: 31SÍHK в ураяоних ним кл!тпнах.
1муаяо-одег.троана мхкроскопхя даз зиогу из лише bl-швляти ро-•¿aBipycH, а яря ная?цосг! вхдяовхдиих сироватск, i типувати íx. Подальше удоскоааленая цього тесту пов"язене, зокрема, з аообгЛд-hícts аряготувэная в;;сокоаф1чкях типосяецгфчних сировагок.одер-канням монокпональних актктхл.
Значку роботу ёодо оптш5зац!! електронао! та хмуно-електрон-но! MiKpocKoaií арк ротав!русному витерит! телят, зд!йснив В.ПЛос-той /1285-199С/. Досл!дкуючк д5агноетичиу е$октивк1сть электронно'! мхкроскопхх, було вогановзево, ао вояа пом!тно перевящуе вífinos i дну характеристику íhüikx тестхв /РЗК, РЯД, ?1в/.
Реакдхя дкфуз!йно! прецип1тац!'1 /РДП/. Рхзнх модиф!кзцП' цього тосту ми викоркстовуваяа пхд час детека!! poTasipyciB та .. 8!дпов!диих антягхл. У наведеа!й никчэ таблиц! 2 представлен! ре-
зультатк досл!дкенпя за доасмогов РДД каткаакх та скояцентрованих фекальних mrepiasiB.
2. 1н.дш^ц}я ротав!рус!э за дсасмого» РДП у фекал1ях новонародконих телят неблагополучного госяодарства
аодйрхкацхя
Груда тварин
ознанамя захзогввзнкя : тагШчно здоров!
:досл!д-:кено :вияЕлеао рота: BÎD7C :досл!д-:жено :виязлеко оота-: Binyc
:ароб :к!ль-:к!сть • 1 • /в • :к!яь- : % :к!сть :
Без яоаередяьо-го доацеятруЕаа-ня матер!алу 145 93 64,1 63
Матор!ал,скоя-цевтрований сорб- Ц!;!!10-УЛЬТГаПЙ1ЛЬ~ трхзнам метод си 31 22 70,9 17 2 11,7 .
Наведен! даа! св!дчать про кедсд!льн!сть концентруваккя фекальних матер!ал!в яра д!агпоотвд! ротав!русп.ого витериту телят. Kaai СЕОогорожккя стверднують вяоыовок З.АЛрасксхя /1989/ додо не0бХ1ДЕ0ст! досл!даення у РЛП г.:атер!алгй на менам як 31Д трьох хворях тварин, ймовхрнЮть достов!рного результату зростае такоя у вкладку дссл!дкеяпя гЛлысох, зШбраних з интервалом 3-4 год. в!д хворо!' тварина ректальних проб.
Дсщ!дьнхот.ь кошхентрування фекальних матэр!ал!з wcse бути зу-ыовлена необх!да!ств обстеаеняя тиран на предает ексхрехи ï рота-Bipycaoro антигену s фекал!ями ет!я!чно здорових тварин. Проте в останвьому видадку баггазо скористатися рац!ональн1шим та чутла-в!сам методом, зокремз хмуноферментниа анал!зом.
Наш! досл!дження св!дчать про невисох?у чутяиэ1сть РДП пор!в-няно з !шаами серолог! чаимя тестами. Разом з г ям РЛП ваявилася яаШльи !дфоргатизиок> при д!агностачяих досл!дяенн! фекальних
мЕтерталха. Бона нескладна, адзптовава до умов лабораторёй взтз-ринарнох медншиш, II з усп!хом мокна застосовуватк яхд час д!аг-ноотики рогевхрусною витериту телят.
1кунофсдаентний анал!з /ЮА/. Бивчаючк р)зн! його модифёкаци /"сендв1ч-вар1анг", "дот-аналёг", г1стоххм1чний вар!ант/ л час 1ндигац!1 ротав!русних компонент^ у материалах вхд хворях телят та в ШЛг.овашх культурах клётин, мя аквл!зуваля хх чутлиг.!сгь та сяецлф1чй1огь /табл. 3,4/.
3» Результати постановки р!гних ысддфхкащй 1ФА у зв"язку з виявлекнш ротав!руеного антигену
результати постановки Ш
:1ФА хз засто-:суванням ПАП-:комплексу
Дослдаений матер! ал
: Ш /о е е д-: д о т -а на л: з •.эхч-варх-: :ант/
:к!ль: % :кхль- : :кхсть :к!сть : :к!сть
:к!ль-
Культуральаа рг-дииа хяф!козаних клётинаих культур 60 41 68,3
Фекал!I хвори
телят 132 35 74,2
Суспензхя з ура-асеноТ слазозо1 оболоикя тонких еииок трупiв
телят 37 24 64,8
за
55 21
63,2 43 71,6 71,9 101 76,5
56,7 24 64,5
Разом 229 153 71,2 154 67,2 168 73,3
НаЕеден! в таблицах даа! свёцчать, то хмукогврмбитакй экалхз чутлизШий К1Е РЗК та ?ЛД. Найб1льв чутлиаоя виявял&ск '¿ого м&ди-ф!кац!я з викорксгааняа ПДП-комплексу. При доои!дквнн! фекальакх материал!в кадзвичакяо зручнш виявязся "дот-акал!з". Незважагвчи на дешо ххпзсчу чутливёсть його пор1вияне з !шами м6даф1вац!, його мохоа широко застосовуваги при !нд;н-ад!I ротавхрусяях антиген 1в, як оперативней специ$!чн23. 1 прсстий за техв*коэ вккснання тест.
4. Результат постановки РЗК, РДП та ЮЛ /непрякиЗ Bapiaar/ при виявлзшп ротаз!русного антигену
Досл1джений матеDiал
Кьчь-
KiOTb
проб
Виязлеко ротав!русний антяген
РЗК
РДП
1ФЛ
к:ль-kicts
о» :кхль-" :г.1оть
:к!ль- : :к1ств :
Фекалiя хворих телят 132
Суспо;;з1я з уражених д!лянок тонких кишок 37
Культураяьна pi-дина 1нф1коза-
НЯХ КЛ1ГИНШ1Х
культур £0
61 46,2 43 36,4 98 74,2
19 51,3 16 43,2 24 64,8
53,3 16 26,7 41 68,3
Разом
112
48,Э 80 34,9 163 71,i
Подальше удооконалеиня Ьчунаого анщМзу по в" я за fie з викорис-танням моноклокальаих аятит!л, Застосування ссгаш'Лх у наших досл1-дах сприлло бисоклй специй1чност1 та чугливоот! ISA. Врзховуычя моализ1сгБ аптоматязацИ процесу постановки 1ФА, порхвняяу доступ-Hicrb необх!дяих компонеатхв, це2 тает е одаим is оенозних пре-тендект1в до широкого впрозадяоаая в практику як з метою д!агнос-тикя захворюванпя так i для оц!нки 1мунного статусу организму.
Роакц1я зв"язувааня комплементу /РЗК/. Детокц!я ротав!русао-го антигену з РЗК гриваляй чао була немогиивою is-за яоаирено! антикомплеменгараоот1 доел1дгу-шого датер{алу. Л изо п!сля ycniui-ного розв"язаиня останньо! проблема, за допемогою обробхш матерi-ал1в фреоном, внаоеная фатально! еяроватни /о,ziajia rt ai,,I978; ?.Paola et ui,t 1982/, РЗК розпочали застосовувати а1д час д1-агаоотакя ротав1русно! 1а$екц1! у людиии t твариа. Для цього булс ¿апропоноваяо pi3Hi !! но; афхкацН. Найбгльс региональною, за данная С.В.!.Цськевича /1982 1985 p.p./, е !Лкромодифхкад1я РЗК.
2
Доо«1дяу»та sKOKpeijija кк,клотантзвпязуючого ротав!русного антигену а фекал!яг<ш у ковонародаонях хворих тзарин, ш виявляли floro з перших годин прояву захворюзання. У деяких гварин вяд!лення антигену спосгерхгалооя навхть д1оля кг!н!чного одужепня, про тягом двох-трьох тижрЛв. К(шяомей?звиязуючиа антиген вияшяяя також у ял1н1чно здоровях новонародаэнкх телят та тварнн старших eíkobhx груз неблагополучного щодо potaBipycaoi !вфекцН стада. Наш! дос-л!доения яереконуэть у необх1дкост1 сбереаного п ¿дходу до !нтер~ nporaui'í результатíb РЗК. Бихориотовуичх П з метою детекцИ ро-TñElpycaoro антигену в процос! д!агностики ротав!русного ентеригу телят, сл!д пам"ятатя про вхдноону д!агностичну 1н$0рмативн!сть цього тесту. За васзкик каяк,и, титр комплементзв"язуючого антигену у фокад!ях кл!н!чно здорових телят не перевищував й лог2- У иато-р!алах в!д хворих таарин в!н був звичайно видал. Одзак перiод ви-д!ленкя збудняка у висок!5 кокцентрацЦ досять обмеязняй i пес-таб!лькпй. Що стосуеться ротроспектизно! д!агкостики ротаз1русно-го ектериту телят, РЗК - тест досить зручний. Розробленяй за йашою участю ко;шле1Шнт2видзуючий антиген та гшерхмунна с кроватка за-безяечують аообххда! уиовг для i i застосування.
Реакцтя 1мунойяаор9сиэнд1У /?1Ф/. За допшогоэ PIS ротав!рус-ний антиген у йекалхкх хворих телят ддавалося виявляти лише у вя-падках, коли досл1дкувакя2 ыатер1ал був в!дхбраний у перш! годи-ни кдШчного прояву захворювання. При досл1дяенн! ыазххв-вдаят-к!в, 'зроблекях з по верхи i слизово!" оболонки pÍ3Hax а!др!зкхв кишечника та з внутрхшШх орган i в телят, як! загяяули в!д ротав!рус-ного ентеризу, в!дпов!дний антиген виявляли законсшрно у мазках з слизово? сболонкз тонких кклок, !нколк в препаратах з слизово? оболонхя сл!по1 та ободово'х" кепок. Л1ьфатичних вузл!в бриях. При досл1дкенк! г!стозр!31в /роботу проводили разом з асп!рантсм
S3
Е.Крхстофером/ ротав1руснвй антиген заявляла тахох ворвгагно у препаратах, одерзаних з тонких кяаок.
Р1Ф виявшхася вадзвича5ио хнформатизшй! тостом я!д чао дос-лхдяення EipycitiíGEaií кя!танних культур. У cepií ексаерикект!з по вдд1деннп та адаптацй' ротав!рус1в було доведено, до Pie у да-ному зипадку мае авва i переваги перед !кшими тестами. Так, га I'i допомогоп вжа через 7-Ю год. в окремих випадках мозна було !дс?.н-таф!кувати ротав!русний антиген в урагених клхтинах. Через 12-14 годая пicля заражения специй!чна $люоресаенц!я була досить Ч1ткоа, незпаяаючи на те, но з цеЗ перход ЩД не спостер!галося, а гкти-гев за депомогев Р15К, РДП, PEA не виявяявся. Лкшэ 4 год. п!сля того floro вдаваяося рзсструвати за донского» ISA, а п;е чэраз 10 год, - у РБК. У РД1 та РГА ротав!руонпЯ антиген виявляли лике через 43 год. пхеля заражения.
Саецпф1чн!сть PIO заяетгала в певл!3 Mipi глд характеру доел 1дЕуваиого матер1алу. Так, при викорястаин! казк1в-в!дбвтт:1Е з патологхчного иатерхалу та хнфххсованах хштинних культур /вироще-них моноагаром на яокрИЕНИх скельцях/ достов!рн!сть позатпвких результат íв була абсолютною. У той ~g час яри дослхдкеан! препара-tíb, заготовление з фе кальках матер!ал!в, близько 30$ "яозатявних" результатов PI5 но п!дтвердаувалася. Останне аргументувало наш висиозок щодо недощльяоетх викорлстаняя PIO з мегои датский' ро-тан1русного антигену у фекальних иатер!элах. Що ж стооуеться хн-шах аспект!в i'i засгосувшшя, сумя!в!в наше - PI9 эалишаетьоя одним з найбхльп !нформативакх експресних tcctíb реестрацН в!рус-них антиген!в.
Подальше удосконалення Р1Ф, п!двикеннн И чутлявост! та спецафхчносг! аов"язан!, зокрема, з як i с по в1дасв!дшес д!агнос-тиг.ум!в. Застосування rlnepiwynHOÍ специф!чао¥ сароватки, одерга-
hoï ка гомолог!чний роташрус, 5 наших дослхдзеннях депо п!двищу-вало ïï чутливхсть цорхвняно з випадками, при яких використовували сироватку, одержану на гетеролог1чниГ; штам ротавхрусу. Однак вагдиз1шиш е п!двищепня специф!чкост! цього тосту. Досягти ïï ыохна як за допомого» заотосування вясокоочишених специф1пншс си-роваток /1му ногл обул i к i в/ так i отк.пзац! i умов постановки. Ви-коркстання теоту inriôiuiï PIS дало нам змогу кадШш вШлежува-тгся в!д псевдопозииэних результатiB.
Реакдхя гемаглатинаа!? /РГА/, реавд1я затгчажи гемаглюткпацП ./РЗГА/
У copiï експерпмент!в, разом з Ютесаы Касхм Хасая, було вив-чзно ряд факторхв, що шливанть на гсмяглютинацi йну активность р!зяих вид{в i шташв poraBipycy. В результат! була запропонована оптирована методика постановки РГА та РЗГА. П!д час досл!дкенпя гшаглатинац!йноГ характеристики р!зних впд!в i штам1в ротав!русу виявилося. що,иезванавчи на стандартизован! укови ïx вирощування, вони монутв кати кеоднакову гемаглютикац1йну ¡е,кгквн!сть. Одночас-но й!льи!сть з них наЁактивн1ше екпеювали еритродити кров! морсь-koï свинки, bibui, ментол ы!рсю - кров! корова, свин1 ! майже Re ахлютянуваля еритроцити крош пуски, пашзка /табл. 5/.
Шд час вавчеяия перспектива використаная РГА з кетою виявлен-ня pcraBipyciB у р!зних матархалах /фекал i ï, культуральна pi дина хнфхковапдх кл!тланях культур/, ми д!йили до висновку щодо недо-илльностх заотосування цього тесту при детекцп ротав!руо!в у фекаяьнкх материалах, насамперед тому, що вони шстять доскть часто сторона! гемаглюшинк. Кр!и того, у фекальних матер!алах, як правило, присутн! антитела,як! суттево завакавть одерзсати достс-в!ра! результата постановки РГА га РЗГА. Разом з ткм РГА доспть зручнкй тест при титруванн! poraBipycy в пультурельних матер!аяах.
5. ГемаглвишацШ-. характеристика ешзоотнчнпх агам1в ротав1русу велико! рогато! худоби / =5/
Ерятродити кров! /вид тварин/
Штами ротав!русу
Кк!вськяй
Полтавськпй
Р}вненоький
г«."а г ладила д I 1 и й_ титр_/___
Совки
Морська свинка 4,6 0,2 4,0 0,2 4,2 0,1 4,6 0,2
Еелика рогата худоба 2,6 0,2 3,6 0,2 3,4 0,2 3,6 0,2
В1зоя 3,8 0,1 4,0 3,8 0,1 3,8 0,1
3,4 0,2 3,2 0,1 2,8 0,1 3,2 0,1
Пёвеиь 3,4 0,2 3,2 0,1 3,4 0,2 3,2 0,1
Крёль 2,4 0,2 2,8 0.1 2,2 0,1 2,4 0,2
Гуска 0 1.0 0 0
Пацюк 0 1,2 0,1 1.0 1.4 0,2
Б1ла миша 2,4 0,2 2,0 2,4 0,2 2,2 0,1
Р 01
РЗГА на вхдм£ну В1Д Ш, РЗК, РД1 гияоопацифхчка, ч!тко ко-релюз з роакщезо в1руснейтрзяк:оц1!. Ураховуючи остаяие, а також простоту постановки, РЗГА можаа успхшно застосовувати в ароцесё вир1шекЕя ряд* питаяь, позяЯ2аних з ротав1русною патолог!ею. Здхй-сюоючи постановку РЗГА ыЯкроаэтодсм, або методом шлих об"ешв, мк досл1дилк сироватки кров1 гварин з рхзких рог1онхв Укра!ни,шо дало змору всгаяоаиги 'знание пошарекня захеорюзання. За допомогою цъого п тесту знзяачалк антигекну спсрхдненхсгь рхэних вид!в та штам!в роган!русу.
Реакцхя в{руснойтрая!зацЛ /РН/. _ У нроцес! вив чеши рога-в{русно'х 1н$екаН велю.»!' рогато! худоби ми внкористовувалн рхзнх II модИ'5!хацП, зокрзма - ыакровар!анг /у проб!рках/ та мхкрова-р!анг/ на м1кроианелях/. Тесгуванвя неАгралзоумчого офсету зд!й-снюгали за ЩД або користугалисх, 1ыунсфшореодонтноя детекцхев. Переванне культизуьашш ротав!руоу в ролврпих умовах зумовияо не-обх1ди{сть розробки епеи1ально1 для узких вгшадойа модзМкацН РН. Запровоноэаядй шил вар!ант К вяяоився доскть зручат I надШш, дав амбру оперативно *деагиф1куватя ротавхрус в прсцес1 його зя~ д!яепня чи кулдтивувашхя.
. Пор1вняльце вивчення двох кодиркацхй РН /з посЛйною дозою В1русу 1'р1зшош рсзбавлешшш сироааиш та вавпаля - з пост1йнот дозою сироватки I рхзикми' розбашхенцкыя в!русу, овхдчать» ио обидна вони забезпечують доотов1рн! результати досл1джвнвя. У той же час перший вар!анг зручн!шЕй. Бикорастовуючи його ми, разом з А.Д.Гаи&х, зизначали титри прогирогав1руснях ангитЬх у сироваткаг кров!, характеризували. аатигашшй зв"язск р1заягш видами та штамами ротавхрусу. РН поряд з РЗГА е иад!йним тестом охпнки про-гектизних властивос'тей протяротав!руснях бЮпрепаратхв.
Кр|м описания ваше лабораториях тесни {ндикацН ротов!рус-вих аЕткггнхв та В1ды0вхдких анткт!л у деяких випадках використо-
вуить T8K0S рэекцН лаевко-огл»*иаед1Х » непрямо! геаагхютиззяП, 1мунйзяватроосао$орвз, штод фззоорйскенгпи* зондхв, ОстанрЛ л /Mis-евхо В.А., Новохшова G.B.j 1288/ зослуговус на ссобляву утх-у. Тест високочуглявяЯ i надзвпчайно оперативней. Яа його денег,¡oro» ш ишвяяяя у р!знлх натер1алзх ротав!руснай та KopouaBipycKaîï антигена. На'ааль внроваджеаня його у иироку практику пов"язаке з необх{д;11стя придбання ui иного обладнадня, деф!цктнпх роактявхв та вгсокояк!сгш;с кМт-дннях культур. Ka ней догляд, удосхоналояня лабораториях метод:в ЬчдякацГ/ збудяггЛв чя антктхд повинна бутк сарямов-эням на вякористання тестхв, до но потрейухягг, значаще еко~ вом!<шях витрат, звачайяо з<5 уновя а&беэзечепкя гоотов!рних результат 1в ДООЛХДЙЭННЧ,
Дхагностувчя ротав!русну 1ифвкц1ю велико! poraroï .худобк,' мя здШнмвалк ретельций кд!н!ко-еп!зостолц.г!чкий акалхз, вивчали стлч обмхаккх процесхв у ваг!тнкх тварин i новояародаэпих телят, уыови XX год!зл1 та утримэння. зд1йснвзали бактер1олог1ч;!'з 2 вхрусоло-?1чне дослхдлеапя в1дпсзгдш1Х матер!эл!:в, вяявлялк крзгатссдоридН. У результат! д i itou до -вконовку. ко дхагностувати ротав!русний.. еатери? твлет могна при. хяднкагс! ï ротаз!руо!з у иаголохЧчному йа-тераалх з!д хлорите та загяблкх тварин /експрес-методи/ та назначена! динамiкк В1дп0з!дапх аитиг!л у каовз ХЕорах тварин i рзко-Л1залесцонт{э/ретроспектизна дхагасстяка/, S0CT0Bip:iIr.Ti> лабораторного дгагнозу зростае в раз! побдваная обех аспектов доодШення»
При доолЗдябйн! в РДИ, PSK, 1ФЛ та РЗГА ларкях еярозоток кро-ai, вхдхбранкх вхд.хворих тварин та роконгаяссцантхв /ва початку захворккзанкя та через. 14-15 д!б/. було заф!ксовано доотовхрко п!д-вищеяпя титру протиротав!русних актят!л за дс-псмогом 1ФА, P3S та РЗГА, ¡so аргументу в додхлыйсть викорястаяня них toctíb.b-дродас! вкзпаченая ïx дика>яки /табл.6/.
Представлен! на ряс Л дач!, сз!дчать про те. що ротзвхрусний
Par-.I Выявления ротавтруского антигену у tf.fiкал}ях хворкх на ротр.Егруснки ентеркт телят за доног/огою резких серолсгхчних реакшй /Л = 45/
/ i /
100 90 80 70 60 50 40 30 .20 10
i--ЁН
JS,
Л-
у
у
А
/
/
СО
со
Терм+н втдбору матер1алу /доба пгсля прояву захворювання/
Прам1тка: j~j
1ФА
- Pi®
й-
РЛ1
- РЗК
антиген найб1лья часто присутахй у фекал!ях, в1д1браних У перга i дв! доби пхсля прояву ззхворювання, характеризуют» порхваяльиу чутлив.тсть 1ФА, РЗК, РДП та PIO з процесх його виявлоаня.
6. Результата постановки РДП, РЗК, ISA та РЗГА з пэраими сироваткаки кров! хворях на ротавхрусияй ентеркт телят / а = Ю /
Тест
РдП F3K 1ФА РЗГА
Результата досл1дае».'!1я
титр протиротав!- :титр протпротав1ру:1вдокс /збхлыпзн-
русних актит!л у :сних антитхл у ей-:ал титр? у сияоват-
оироватц1 К' I :роватц1 кров! № 2 :ц1 й 2, ncpiBKJwra
/1сй 2/ • /iog 2/ '-3 титром антитia у
' ' : ' ь 7 :скроватш I/
I,5¿0,18 3,1+0,2 4,5+0,1 4,6+0,18
2,2+0,18 5,0+0,2
s.b+o'.is
5,4+0,24
1,4
3,4
4,4.
3,6
3 И С Н 0 3 к и
1. Естановлено значке посярения ротав1русно1' !нфекцГх велико? рогато! худоби на ториторх! Унрахиа. При досл!дте:ш сиро ватки кроз1, одергано! В1д твариа, т налетали 202 гослодарствам рхзнкх областей УкраХни, специф1ч;п шодо ротавхрусу антитьта заявлен! в ycix обстэадаих господзрсгвах. Сораиозитивк1Сть становила 87,7 -98,6 %.
2. PoTaBipyc.'iHü ентерят телят характеризуешься ензостячлгл nope6iroM, з яокхтаим загтетреаяим хнфекцзйного процеоу у холод-ний пер1од року. Спалаху захворэзааня сприяэть порушеная зоо-ririsHÍ4HKX вимог утрклаиня га годхвл! вагзтних Kepis i негел1п. новоаародаесих телят» ветериаарао-сааiтарнпх правил.
3. Основном дкерелсм збудаика pOTanipjcaoro ьатериту о хвор! новонародаенх телята, як! вкдхляють toro з фекэл1ам» особливо i«-
гексивко у перш! двх доби прояву оахворяванпя. Копцацтрацхя в!р1~ он!б у пай перход шеэ досягати Ю10 - Ю^/мл. Вкд1ляти збудник иозугь сахок аовокародяея! телята з лагенткик перед!хт захзорю-вааае, а таксж гвариаи ссараих в!хових грун.
4. У приросшее умезах ротагЛруоккй евтерят у вягляд! ыоно!я-фскцП практично не рееструстьоя, При дссл^ешп глатерхал1в в!д хворях та загаблих аовонародЕених телят у 41/1 проб, нрхм ро*ав1-русу, шла ыЛсие ентеропатогеана кшхове даличка, у 10,4$ - коро-аав!рус, у 2,8$ - саяшонели. у 5,2$ - криатоспоридП, у 2% ~ протай. З^хаанз 1нфекцГх нор!ваяко з дшохнфекцхеэ маать гякчяй сереб!?.
5. Патологоиорфолог1чк1 змхни ара ротавхруенхй хнфекцы телят характера для юсгрого ентеряту та дегхдратаци' органхзку. Типовая гхстсзмхнамя е деформац!я ворсавок тонких кваок, дес-квомадхя еа11'ел1ю, шо хх вкривас. У зласне сдизовому аарх елкзо-во! ободокки тонких кишок - ознаки порушония гемодинамики, хнф1ль-трахЦя яроуЛяноЧ: ткангши кл1еиенеш! елемеаташ кровх та г!ст1сцк-тами. У Екутр*ин1х органах /печ!нка, нарки, селезшка/ - озааки застхйаох гхперемп га зернистой дистрофП, При розтин! труп 1 в телят, якх заганули вяасгЛдок захворювання зм1ианох природа /ро-та-евврШйаоХ, рота-протейно?, рота-криптоспорядШю'х'/« варахе-н! з!л1ни мавть кхецо таксг 1 у товстому в1дд!л! кишечника, Харак-теразуаться воаи озкаками катарадьво-геыорагхчного колхту, проктиту.
6. Пор1вняльне дослхдхенйя морфологП рогавхрусу велико? ро-гатох худоба /референтн! шгами: Тхверваль, Л1акольн, Небраска, еп1зоотича1 1 золям/, ротав!руоу маши /штам 3 АН/, ротав!русу свинх /ея1зоотичний 1золят/ евхдчигь щодо II !дентичнсстх. У подышат та культурадьних матер!алах достойно виявляють повн! /дво-
калсидн!/, пеповги /одаокапснги!/ та дефектах в!р!они. Ся!ьз1дко-исння названия вхрхонхв, у лева13 ы!р!, эалегдгь в!д характеру !нфекцхйного лроцесу /аборгивлэ, продуктивна Iаф-огах: 1/, ступояя адаптаци вирусу до б1слог!чно! система.
7. Морфогенез ет&юниого /Пверваль/ та е\пзоотичкого /Ргв-непеышй/ штамхЕ ротав!русу велико! рогато! худоба у гомологична /ЗДБК, ТР/ та гетерслог!чн!й /СЕЕЕ/ культурах ет!тин однотшхний. Формувакня в1р!оя1в, IX нагромадкешхя та впдхлення супроводкуюгь-ея заксном1рш::.:г! цитоморфоло^чаши явягаки: яабрякаить I вахуо-лхзукгься м1гохоидр1х, спсстерхгавться дэгрануляд!я 1 розширсвня каиалыпв ендсялазглатично! схтки, зб1льиуетьоя кхлъкхсть 1Ш:рова~ куолей. Под!бн1 ультраструктурах з:д!ап еяявляються такая х а ура-яених енгерсцатех експерямекталъао заразеапх ротаз!русо;л телят.
8. Оппм'зсвано методику вйд1лекня, адаптац!! та культ иву гоя-ня збудника ротазхруеяого ентериту телят. Розроблеяо лабораторко-досл1дидй регламент кульмвування я!д}браннх взкцшшнх його икшхв.
Э. Бизпачзно вплпз деямк ф1зкко-х!?л1чянх факторхв па збудника ротзвхруеиого ентэряту тэлят. Встановлепо, ео чуглав}сть до них в1русу, в певн!3 дов"язана з яг;1ста в!рус-суспензГ:
/сплзв1днонзаня повнпх, нел овнах, дофакгних в!рхон!в, ярозорхсгь та склад р!дини/\
10. Розроблено рацхональпий метод визначаняя 1муногеяносг1 прстиротавхрусних ваквди. на лаборатории* твариаах. Витоговлеяо зр^и-ка емульговано! формодвахшини на основ! домхиаитких ктэглхз рота-в!руеу вэликох рогато! худоба, охарактеризовано !х 1иуногеий1сть.
11. Обгруктошно ыостив1стх. та доц!льн!еть коиструввання по-л!эалзатакх х:ом:51нованих препарат !в на основ! дом!кантних пташв збудниаа ротав1русного ентэряту телят, короаав!русу та {фактор!в патогенном! ешер!х1й. Створена ка такхй основ! вакцина харакге-
ркзуззалася виоокоа хмуногеннхств. Одержана з H використанаям поливалентна гшерхкунна сярозатка та зхдповхдний !мукоглобул!н в умовах неблагополучного гослод.эрства забезпечували вяражений пре-вективний офекг.
12. Охарактеризовано особливост! заотооуванкя ряду лаборатории: тесгхв /ЕМ, IEM, РДД, РЗК, Р1Ф, РЗГА. Ш/ у процес! хндикацП ротав!русу велико"! poràroï худоби га в!дпов!дних антитхл, оптиш-зовано окреглх елементи ïx постановки, Встаяовяено, що з метою ia~ дикац!! рогав1русного антигену у фокалхях несбх!дно використову-вати РДД, ISA, в процес! виявлэння протиротавхруснях антитхл у си~ роватщ кров1 - РЗК, Ш, РЗГА, PIS ыоко бути викорисгана при дос-л:д>"екн1 мазк!в-в!йбигк1в з слизово! оболокки гонко! кпшки загиб-лих та забитпх з д1агаостичною метоа твария, а такок в процес! ви-дхлэяня /адаптацхх'/ збудника у кл1т!шних культурах. При д1агиости-ц! згл1шанах хнфекц!а наШлып !Еформагивни>.ш s ЕМ та IEM.
13. Доведено необххда1сть викорястання гомолог!чаях вид!в ро~ гав!русу в процео! одерааная д!агностячних ппер'хмунних сироваток кров!, приэиачених для !ндикацх! збудника ротав!русного ентеригу телят. Застосування сирозаток, отриыаних за таким принципом, за-безпечувало бхлыл високу результатввн!сть серолог!чнпх реакц1й, порхвняно з випадками коли викориетовувались сироватки, отрилан! шляхом rlnepinyaisaui! тварин гетеролог!чним видом poraBipycy/SAII/.
14. ЛЬсувально-профЛлажтичний ефект при ротав1русному ентерк-т1, або з;,пшапих iafeKnisx аовонароднеаих телят,моелизий при paai-ональному вшсористанн!. eriотронаах, сиштоывтячнйх та патогеаетич-яях засобхв, за умови дотримааня д!етотерап1! та вотеринарио-сан!-тарних правил.
15. Д!агностика ротав!русного витериту толят моалива в раз: ретэльаого кл1н!ко-ан!БСотолог!чаого аналхзу,врахування да'вих патологоанатом! чного розтиау, 1ндикахШ збудвика у патолог Иному ма-
гер!ал1 в!д хворях та загиб «ix гларкн /Fi'.lE.'.i, tv
вагна'кзаня дпнам!ки з!дчов!д;ш.:с шшшд у крош дворкх тлзряе га ре«>ивалесцант!в /1ФА,РЗГА,РЗК/. Доотов!ри1оть лабораторного диагнозу зростас в paai поедоанпя об ох оотаин!х осаоуя!в доелшгопня. Паралельяо з в!руоолог1чиим, необх!дно здШсшозати бактарзологгч-ив досл!даеиня» виявлоиия кряптоспоридгй та иозшкзих патогеи!в 1HEIOÏ природа.
ПРОПОЗИЦП ВКРОБЖЦТВУ
Результата проведеаах дослШонь вякористан! прп шдготовц! нижче перерахозаиих норматнвшыахн!чния документ!в va кетодичшге матер!а'пв.
1. Методами! рехомендац!? по д!ашостиц! та ззгальа!!! про§!-лакиии рота-i-коронэз1русао1. хнфекцП, способах ддагнссгс-чИ. ai~ куЕакня i профилактики поруиэнь обм1иу рэчовин у иовонародзаних телят ара дтареях/затвердаен! методично» ком!ci сю ветеринарного факультету УСГА та иауиозо-тахн!чнсю радозз сехцП "Тзаркнняцтво ' i вэтеринар!я" Доряагропрому УРСР 25 грудня 1987 р./, оаубл!кован! у 1930 р./ К;пв, УС ГА/.
2. Настанова по зяотосузаннз кров!, опром1ноноТ ультраф!олэ-товимя лроманямл, дтя профилактика ! лк-сування■илуняозо-киякозях i pecniparepaHX захворпвань талят/схвалека нау:'.ово-теха!чнои радой венцП "Ветеринар!rf*. МСГ ! загопвель Укра'1'ни 12 грудня 1990 р./,
3. ДослШо-прсиаслозай регламент 'кудьтивування ротав!русу всляко! рогато!' худоби у аостШпй д!>Ш кл!тин парки ембр!она норови /схвалоний ученою радою факультету вотерянарао? медицина УДАУ, протокол И 3 з!д 22 листопада 1393 р./.
4. Caooid титрувзиия ротав!русу волико! рогато: худоби методом бляшох /Одобрений вчаяоэ радою факультету ветеринарноУ ;.«?дк-цяни' 22 листопада 1333 р./.
5. Cnociö виявлення ротав1русного антигену у польових маre-pi алах /посв!дчешш на рац.пропозищв № 22 в!д 4.01.1989, УСТА/.
G. Cnociö одеркаиня ротав1русиого антигену /посвхдчення про рац.пропозицШ, й 23, в!д 4.Ol. 1989, УСГА/.
7. Ролорний пристрой дня 0,5 л флакон!в до апарату для кмь-тявувзнкя тканиня /посвЦчення про рац.пропозиц!ю Л 21 в!д 10 грудня 1985 року, Украхнський науково-дослхдний ветеринарний in— ститут/.
8. 1нвертований ихкроскон на основ! звичайного м!кроскопа /посв!дчення на рац,пропозиц!ю В 35 в!д I червья 198Э р.,УСГА/.
9. Титрування в!рус!в /1'етодич!п рекоме дацП з в!русологП з алоыент&ми програмованого контролю та обчислювальнох техн!ки для са'лсстхЗно: роботи студент!в ветеринарного факультету,Ки1в, 1987/,
Ю.Реакцхя затримки гекаглютинаш i /РЗЕА/.Мэтод-розробка для студэнгхв ветеринарного факультету Д.,УСГА, 1990 р./.
СПИСОК НАУКОВИХ ПРАЦЬ.ОПУВДКОЕАЫИХ ПО TEMI ДИСЕРТАЦП
1. Скнбицьккй В.Г..Собко Ю.А. Электронно-цикроскопическое изуч&низ ротавируса крупного рогатого скота /шгам Ткворзаль/.реп-родуцированного в гетерологической системе клеток //Ветеринарные проблема промышленного животноводства:Тез.докл.наук.-произв.конф,-Белая Церковь, 1985. - С. 74.
2. Скибидкий В.Г.«Миськович С.В.Дерес А.С.,и др.Культивирование ротавируса SAH и Тиверваль в перевиваемой клеточной культуре СПЭВ для получения диагкостикумов/Детершарные проблемы промышленного животноводства: Тез.дохих.науч.-произв.кокф.Белая Церковь, 1985. - С.75.
3. Ииськевич С.Б.,Гере план Н.В. .Скибиакий В.Г, .Онуфриев В.П. Реакция связывания комплемента в ыикромодификахуш при ротаверус-ной диарее новоровдакных геляг.К,,УГАУ.Деп.ВНШТЭИСХ,№ 510.18.12. 1985.11. с.
4. Китовой Сумбу.Миськевич С.3.,0нуфрнев В.П.,СккблцкиЙ В.Г. Применение реакция диффузионной преципитаций для диагностика рота-иирусаой диареи новорожденная телят.-К.,УСИ.-Деп.ВКИИТЭКСХ.-
№ 5I0.-BC-8Ö, 1985. - 14 с.
5. Миськсвия C.B..Герстман R.B..Постой В.П.,Сккб:щк:1Й В.Г., Онуфриев В.П, Серологические и вирусологические метода диагностики ротавирусаой диареи телят.-К. ,УСХА,-Деп.ЕШ1ГЭКСХ,-.'4 4 509, -ВС-85, 1985. - II с.
6. Иди Кристофер,Миськевич С,В., Скибнцкий В.Г., Онуфриев В.П. Применение реакции клмунофлзосресцеацаи дня диагностики ротавирусаой инфекции новорожденных телят.-К.УСХА.-Дон.В1ШТЗИСХ. -J4 4509.-ВС-85. - 14 о.
7. Скабпцкий В .Г. .Гонтарь А.В.,Медведева A.M., Борисович S.B. Этиология а мери борьбы с гасгрознтероколитами новорожденных поросят в условиях хозяйства промышленного типа //Болезни парнокопытных животных в условиях Украины: 7СХА, Сборник научных трудов.
- К.. 1966. - С. 14-18.
8. Онуфриев В.П,,Скибицкий В.Г.,Герстман Н.В. и др. Обнаруае-ние ротавируса в материалах больных и павших новорозденнвх телят. К.,УСХА.Деп.ВШИТЭИСХ. Й61. ВС-87, 1987. - 10 с.
9. Онуфриев В.П., Скибкакий В.Г.,Миськевич С.В, и др.Гемагглю-тияация /РГА/ и задержка гемагглютинации /РЗГА/ пра диагностике ро-тавирусной шфекция крупного рогатого скота.-К. :УСХА.-Деп.ВШЙТЭИСХ.
- й 62, 1987. - 9 о.
10. Онуфриев В.П., Скибицкзй В.Г.,Миськевич C.B. и др.Реакция пассивной ге.магглгсгинации яри изучении рогавирусов.-К.:УСХА.-Ден. ВКШТЭИСХ. - 62. - BC-S7, 1987..- С. 6.
11. Оцуфраэв В.п.,Скибицкий В.Г..Миськевич'C.B. Лабораторная диагностика ротавирусаой инфекции крупного рогатого скота. -К.:УСХЛ. 1987. - 3 о.
12. СкибицкиЯ В.Г. Титрование ротавируоов: Методразрабогка по виругслогяи с элементами программированного контроля и вычислительной техника для самостоятельной работы студентов.-К.:УСХА, 1987. - 21 с.
13. Скибвдкий В.Г.,Собко Ю. Л.,Постой ВJ3. и др. РСК, РДП и электронная микроскопия ари изучат.и ротавирусоз у новорожденных телят //Совершенствование ветеринарного обслуживания в условиях интенсификации Еивотноводства: Тез.докл.воесоюзн.каучн.конференции.--Махачкала, 1987. - С. 6-7.
14. Онуфриев ВЛ..Ски6ецкйЙ В.Г.,Нди Кристофер,Миськевич C.B. Рракция ишунофлюоресденци': при диагностике ротавирусной илфэкади новорожденных телят //Сове шенстповаяие ветеринарного обслуживания в условиях интенсификации яивотноводсгза: Тез.докл.всес.неуча.
кекферокция. -Махачкала, 1987. --С .10-11.
15. Онуфриев В.П.,Скибвдкий В.Г.Дисъкевич С.З,.Ибгасам К.Х., Гйкии k.JU Приткеяие реакции пассивной геаатотишшиа /В1ГА/ яря изучении рогашрусов/уСовершонсгаоБавив ветеринарного оболуаи-взняя в условиях иягонсифиаации гявотноводегва: Тез,докл.всесошзн. научк.конйерондая.-Махачкала, I987.~C.II.
16. Онуфраев В.П.,Скибицккй В.Г..Ыиськевич Ç.B, Совврвеис!-вование РТА и РЗГА при ротавирусной инфзкциа телят //Совершенствование ветеринарного обслуживания в условиях ингенсификацки яивот» новодства:Твз.доЕЛ.всеоовзн.ваучн.конферанций.^Мвзгачкала, 398?.-C.50-5I.
1?. Онуфриев В,И.,Скибицкяй В.Г.,Миськевич C.B. Разработка средств диагноста и профилжшши рогавирусной инфекции крупного рогатого скота //Груда Ш съезда Украинского микробиологического общества. -К,- Черноты,IS89. - С.214.
18. Онуфриев В Д., Галкин А.П.,Ганигл Л.Д.,Ске6йцкпй В.Г., Элоктрофорегический анализ фрагментов нуклеиновой кислота /РНК/ некоторых штаммов ротавируса в аолиакряламвдном голе //Биохимия сельскохозяйственных кизотапх и продовольственная програг.зла:Тез. дохх.всвсовзн.сишозиума.-К., 1983. - С,58.
16. Онуфриев В.П.,Ыиоькевнч C.B.,Постой З.П»,Иванченко Г.А., Скибицкий В.Г. Результаты изучения эффективности РСК,РДД,РИФ и электронной .микроскопии при диагностике ротавирусиой инфекции// Биохимия сельскохозяйственных кивотных и продовольственная про -блема ; Тез.Всесоюзн.сиипоэаума- К,: 1989. - БЭ с.
20. Онуфриев В,П,,0гбу 0.,Ганим А .Д. .Скибицккй В.Г, .Ииськэ-вич С.В..Определение Ешуногеиносги и безвредности инактявироваи-ной вакцины против ротавируса крупного рогатого скота //Биохимия сельскохозяйственных кивотных и продозольотвешшя проблема:Тез. всесошн.симпозиума.-К. ;1989 .~С.222.
21. Ону$риав В.П.,0гбу 0.,СкеЗицзшй В.Т.,Ииоькевич С.В.Йзу-чениа устойчивости рэгавируса крупного рогатого скота к формальдегид? /^етершарная иедшдина:экономические, социалышэ и экологические проблема: Тез.докл.республ.конференции,-Харьков,1990.-С.261
22. Скибкцкий В.Г.,Собко Ю.А.Д'оатарь А.3,Электронно-микроскопическое изучение ротавируса крупного рогатого скота,репродуцированного в гетерологичзской сиотемэ клеток/Д'руда УП съезда Украинского макробиодогического общества.-К. ¡Черновцы. 1989 ,-¿.-221.
23. Ибатуляпаа O.K. .Кбатуллш И.И. .Сккбкцкий В.Г. Обизя ихиу-
дологическая реактивность организма телок чорко-построй породи в зависгаоетя от сбалансированности рационов макроэлементами, ~К.: УСХА.-Доп.ВШМТЭИСХ.-Js 56Э.-ВС~2-в9, I98J.
24. Сккбицкий З.Г.,Ибатудлина O.S. Реакция торможения гема-гглвтяшщии /РТГА/. - К.-.УСХА.I9S0.- 14 с.
25. Онуфриев Ь.П.,Скябяцкпй В,Г.,Мяськовлч С.З. и др.Методи-ческие рекомендация по диагностике и профилактике рота-.коронави-русной инфекции,способам диагностики» лечения я профилактики нарушений обмена веществ у новорожденных телят при диареях.-К.:УСлА, 1990. - 48 с.
26. Огбор патологического материала для бактериологического и вирусологического исследования /Скибицкмй В.Г. к др.//Справочник ветеринарного врача.-К, :Урозай, 1990, - С.96-100.
27. СккбВДкиЗ В.Г. .Проценко О,г. Серологическое обследование крупного рогатого скота va наличие противоротазируснвх антител. //Профилактика и мера борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных пивотнах: Тез.докл.иаучн.-произв.коаферетиш.-Ушюк, 1990. - С.10.
28. Онуфриев В.П.,Скибицкай В.Г.,5одссешсо О.В., Будду S.iï. Внделягалооть ротазирусаого антигена с фекалиями в неблагополучном по ротавируоаоя инфекции стаде крупного рогатого скота // Прс^а-дактика а шрн борьба с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных: Тез.докл.научно-произв.конференции, - Mkhck,I9SQ.-C.I5.
29. Онуфриев Е,П.,Скибициай В.г..Маськевач С.З. к др.Кон-отруярованиэ поливалентных комбинированных специфических биопрепаратов дая профшгаксиЕИ желудочяо-виаочаых заболеваний у новорожденных телят // Там яе. - С.35.
30. Наставлении по применении крова, обработанной ультрафиолетовыми лучами для профилактики гэлучно-кяшечных и расаиратор-нах заболеваний телят / Сост.:Борксевач В.Б.,Тарес М.А.,Медведев С.С., Колесник З.Я.«Сухоноо ВJI..Скибицхий В.Г, Утверзздояо НТС ЫСХ и продовольства Украшш 12 дегабря 1290 г./,
31. Скибпцкий В.Г., Талу та С.Г.,Онуфриев В.П. Изучение динамики специфических антител в крови телят неблагополучного по ро-ташрусиой и дороязвирускоИ инфекция стада аизотинх //Вопросы ветеринарной вирусологии,микробиологии и эпизоотологии: Натер.научн. копф. ВНЙИВВЙМ. -Покров, '1992. - С. 27?..
32. Онуфриев В .П., С кабацкий В.Г.,Ивоькваяч; C.B. к др. Отра-
тегия борьбы с желудочно-кишечными болезнями новорожденных телят // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиология и эпизоотологии: Ыатер. научн конф.ВНШНБИМ.-Покров, 1992. - С.280.
33. Борисевич З.Б..Колесник В.Я.,"Медведев С.С,,Скибицкий В.Г, и д?р. Использование УФОК при квлудочно-кишечной патологии телят
// Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии; Натер, научн.конф. ВНШаВЙМ.-Покров, 1992. -.С.281.
34. Скибицкяй В,Г.,Гопка Л.И.,Собко Ю.А.,Иванченко Г.А.Оп-тимйзация биотехнологии выращивания ротавирусов //Диагностика, профилактика и лечение болезней шшотных в специализированных хозяйствах: Труды УСХА: К.: 1992. - С.6-9.
35. Эффективность некоторых методов диагностики ротавирусной инфекции крупного рогатого скота /Онуфриев В.П.,Миськевич C.B., Скибицкий В.Г..Гопка Л.И. .Постой В.П.// Диагностика, профилактика и меры борьба с инфекционными болезнями животных: Труда Алма-Атинского зооветипстктута.-Алма-Ата, 1992, - С, 87-89.
36. Онуфриев Е,П.,Скибицкий В.Г.,Ыиськевич С.В.,Герстыан Н.В, Лабораторная диагностика ротавирусной инфекции крупного рогатого скота// Диагностика, профилактика и лечение болезней животных в специализированных хозяйствах: Труда УСХА.-К, : 1992.- С.3-5.
ЭТ. Литвин В Д.,Береза В,И.,Скибицкий В,Г.,Калиновский Г .И., Пожявил А.И. Болезни молодняка сельскохозяйственных животных.-К.: Урожай, 1992. - 155 с.
28. Скиб!цькиЙВ.Г.,Носач Л.М. .Мартиненко Д.Я.,0ну$р!ев В.П. 1мунофлюоресцентний а нал! з в процес! вид!лення га адаптацИ' рота-Bipycy езлико! рогат о ï худоби до юпшших культур// М!кроб1оло-г!чний журнал. - 1993. - Т.55. - № 2. - С.52-57.
ЗЭ. Скиб1цький В.Г. Паразкюценолог!ча! аспекти природы шлуя-ковс-кпшкових захворювань 'у новонародкених телят// Тез.дсшогпдеВ XI кокфереицН Укра'1НЕ.-Кй1в, 1993. - C.I81.
40, Скибщький В.Г. Використашш PIS в npoqeoi пцшкацН збуднвка ротав!русного витериту телят //Проблема агропри,мелового комплексу : попгук, досягнення:Тез .доя .наук, конф.проф.-внкл. складу та аоп!раит1в.-КяХв,УДАУ.- 1993. - С.84.
41. ОшНцький В.Г.Ротав!русна iH$QKaiH велико! рогато!" худоби /ротав1русний витерит телят/.-Кп'/в,У rpIHTEI ,1294.-207 с.
■¿<J7t jw 7*4 'M-frc