Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Применение пробиотика галлиферм при колибактериозе кур

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МОСКОВСКАЯ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ К.И.СКРЯБИНА

На правах рукописи

РОКИЯ МАГИРАГА

ПРИМЕНЕНИЕ ПРОШОТИКА ГАЛШЕРЫ ПРИ КОЛИЕАКТЕРИОЗЕ КУР

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология иммунологии

. Автореферат диссертаций на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва - 1994

Работа выполнена в Московской ветеринарной академии имени К.И. Скрябина

Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор Бессарабов Б.<Е.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарныг наук, профессор Р.В.Еелоусова

2. Кандидат ветеринарных наук, доцент Е.Б.Дьяконова Ведущая организация -

Всероссийский научно - исследовательский., институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко

Защита состоится 1994г. в ^ часов

на заседании специализированного совета К 120.36.05 по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук в Московской ветеринарной академии им.К.И.Скрябина (109472, Москва, ул.Академика Скрябина,23, тел. 377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке --------------------------академии

Автореферат разослан ^¿'¿^/¿¿Ш 1994г.

■--Ученый секретарь специализированного совета

/ Федосеева Т.Н.

3.

• ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы.

В 1992г. птицеводство России понесло большие убытки,связанные с возросшим отходом птиш, всего погибло 213,4 млн.голов,.в том числе взрослой птицы - 21,4 млн.. В таких объединениях,как Ставропольское, Ростовское, Читинское, Бурятское и др. падеж взрослой птицы составил от 10 до 15,7%. Больше всего молодняка было потеряно в Брянском, Московском,Орловском, Тульском, Липецком, Оренбургском, Кемеровском и некоторых других объединениях.

Особое беспокойство вызывает длительное неблагополучие ряда

хозяйств, по инфекционным заболеваниям, в том числе по колибанте-

риозу. Колибактериоз - остро и подостро протекающая инфекционная

болезнь. Бактерии рода ЗаоЬег1сЫа впервые описал Т.;ЗвсЬег1с}т в

1866г. Через 5 лет С.ОЛ^г.аеп установил коли.бактериоз у те, I

лят. Однако только в 40-е годы нашего столетия сформировалась точка зрения, что кишечная палочка является одним из возбудителей заболевания, молодняка. В наши дни эшерихиоз относится' к числу широко распространенных инфекционных болезней молодняка и регистрируется во всех развитых странах мира. Наиболее ощутимый урон на птицефабриках связан с высокой смертностью, отставания в росте и снижения продуктивности переболевшей птицы (^еазагов Ь.8-ф>коу££в , 1964; А.Ахмедова, Х.Бурханова, 1965;Б.Белицкий, И.Паникар, 1969; Б.Ф.Вессарабов,1970; С.А. Артемьева, 1972,1977; Г.А. Грошева, 1978,1979; И.А. Радчук, 1990).

Обязательным условием развития инфекционного процесса при колибактериозе кур является пероральное или аэрогенное-заражение энтеропатогенными штаммами эшерихий, адгезия(прилипание) возбудителя в тонком кишечнике, обильное размножение,накопление токсинов, проникновение возбудителя в ряде случаев через стенку кишечника и развитие патологических процессов различной интен-

сивности.

До последних лет в системе мер борьбы и профилактики коли-бактериоэа уделяли внимание в основном применение различных анти бактериальных препаратов, а не созданию условий, повышающих общу резистентность организма птицы, что не способствовало предотвращению этого заболевания в птицеводческих хозяйствах. •

Поэтому почти одновременно в ветеринарной практике разных стран появились препараты, которые получили название пробмотиков Сухие и жидкие препараты пробиотиков содержат набор органических кислот и молочнокислые бактерии. Их действие направлено на профи лактику и лечение дисбактериозов молодняка, на повышение естественной резистентности организмаСТ'беПопЧдэр-.А'.Напак;р.йдаоГГоуа

А. Панин, Н.Серых 1992г. ).(х.Новвпао1<вку*Кииргвсл1 1991гт<1 о^е Вопросу борьбы с колибактериозом кур посвящено много работ. Однако до настоящего времени нет надежных средств и методов борь бы с этим заболеванием, поиск таковых остается весьма актуальной задачей.

Цель и задачи исследований

Целью наших исследований явилось изучение действия пробио-тика галлиферм в сравнении с антибиотиками авимиксол и трисуль-шке на кизнеспособность и резистентность цыплят и ремонтного молодняка к колибактбриозу. Исследования проводили с целью дополнения комплекса мероприятий, направленных на профилактику • колибактериоза птиц и снижение экономических потерь.

Задачи исследований

1. Изучить действие галлиферма на микробный клиренс органиг ма цыплят.

2. Определить морфологические изменения в органах цыплят при микробном клиренсе.

3. Изучить влияние галлиферма на изменение биоценоза нормальной пристеночной микрофлоры желудочно-кишечного тракта при введении тест-микроба Е<00^£#

4. Изучить влияние галлиферма на динамику изменений общего, белка, белковых фракций и аминокислотный состав в организме цыплят после введения тест-микроба 3.соЗД. ------------

5. Изучить влияние галлиферма в сравнении с антибиотиками на жизнеспособность и некоторые показатели естественной резистентности ремонтных молодок кур.

Научная новизна работы

Впервые изучено действие пробиотика галлиферм в сравнении с антибиотиками, рекомендованными против колибактериоза, на показатели естественной резистентности и жизнеспособности цыплят. Применение пробиотика галлиферм позволило улучшить некоторые показатели естественной резистентности организма цыплят,повысить живую массу и сохранность по сравнению с контрольной группой. .................; ... ,

Изучен механизм действия галлиферма при проведении микробного клиренса к колибактериозу. Установлено, что микроорганизмы, входящие в состав препарата галлиферм, обладают колонизационной способностью,"' прикрепляясь"' к ' стенкам кишечника, препятствуют проникновению эшерихий через стенку кишечника и задерживают развитие патологических процессов. Эти данные' нашли подтверждение в исследованиях микрофлоры желудочно-кишечного тракта, общего белка и белковых фракций, морфологических изменений органов.

Практическая и теоретическая значимость работы

I. Полученные данные позволяют рекомендовать галлиферм для профилактики колибактериоза с целью повышения естественной резистентности и жизнеспособности цыплят и ремонтного молодняка.

6.

2. Для определения естественной резистентности птицы к колибактериозу целесообразно рекомендовать метод микробного клиренса.

3. Разработаны методические рекомендации по применению пробиотика галлиферм с целью профилактики колибактериоза кур

Апробация материалов диссертации

Основные положения диссертации доложены специалистам ве ринарной и зоотехнической служб Красногорской птицефабрики U ковской области (август 1992г.), сотрудникам кафедры птицево, ства и болезней птиц (октябрь 1993г.), на учебно-методическо: конференции МВА по обмену опытом в подготовке специалистов п< ветеринарной медицине для зарубежных стран (февраль 1994г.).

Публикация результатов исследования

По теме диссертационной работы сданы в Труды МВА 2 науч! статьи. Утверждены методические рекомендации по применению гг| биотиков в птицеводстве.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Влияние галлиферма в сравнении с антибиотиками на ее-. венную резистентность и жизнеспособность ремонтных молодок q профилактике колибактериоза.

2. Микробный клиренс - один из основных показателей ест« венной резистентности птиц.

3. Влияние галлиферма на динамику изменений общего белке и белковых фракций, аминокислотный состав сыворотки крови пос введения тест-микроба E.eoli.•

4. Влияние галлиферма на морфологические изменения орт цыплят после введения тест-микроба E.coli»

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 156 страницах машинописи и состс

из введения,обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения, выводов, предложений для производства, библиограф^ского списка. Диссертация иллюстрирована II таблицами и 36 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

I. Материал и методы исследований

Работа выполнены на кафедре птицеводства и болезней птиц -Московской ветеринарной академии имени К.И.Скрябина и на Красногорской птицефабрике Красногорского района Московской области в период 1990-19ЭЗг.г.

Исследования по изучению профилактируюшего действия пробио-тика галлиферм в сравнении с антибиотиками авимиксол( А\'11а1хо1 ' ) и трисульмикс (Тг1аи1п1х ) против колибактериоза кур проводили на Красногорской птицефабрине. Для опыта использовали цыплят в возрасте 70 дней кросса пБеларусь-9" в двух повторностях каждой серии.

Всего использовано 4000 голов цыплят, которые были разделены на 4 группы по 1000 голов п каждой. Схема опыта представлена в таблице I.

Таблица I

Схема опыта на Красногорской птицефабрике

№№ Группы Кол-во Возраст Доза Курс п/п • цыплят уыплят Препарат препарата применения _(гол.) (дней)_

I. Опытная

2.

1000

1000

3. 1000

4. Контрольная 1000

70 галлиферм

70

авимиксол

70 трисульмикс

70

400 г на тонну корма

2,5г на 2л воды или 1кг корма

1г на 1л

воды

10 дней,повторно через 10 дней

5 дней

5 дней

тт

Условия кормления и содержания в опытных группах цыплят были одинаковыми и отвечали принятым нормам, утвержденным ВНИШ1.

ГАЛЛИФЕРМ

1. Общие сведения

1.1. Галлиферм - бактерийный препарат, содержащий в 1г 25 млрд.живых клеток гомоферментативных молочнокислых бактерий родов Iectobaoillas laotl ц Streptococcus lactls.

1.2. Препарат представляет собой сухой однородный порошок ■"от светло-кремового до светло-коричневого цвета, со слабым спе

цифичесщгм запахом, легко суспедируетсн в воде.

2. ТЕрмакон&'^аёские свойства

----------¡Препарат галлиферм способствует нормализации микрофлоры

пищеварительного тракта животных. Молочнокислые бактерии, входящие. в. состав препарата, подавляют развитие условно-патогенно и гнилостной микрофлоры кишечника, предупреждает развитие дис-бактериоза, нормализуют обменные процессы организма и функции желудочно-кишечного тракта, что обусловливает стимулирующее действие галлиферма на рост и развитие птиц. \ -------Применение пробиотика галлиферм позволяет:.

- исключить из лечебно-профилактических средств кормовые ветеринарные антибиотики и получать экологически чистую проду! цис,

- исключить из состава комбикормов ферментные препараты,

- повысить качество продукции.

Показания к применению: эффективен против сальмонеллеза колибактериоза, кокковой инфекции, дисбактериоза, диспепсии, кутикулитах и гастроэнтеритах незаразной этиологии.

АВИМИКСОЛ СоставSrj'tronyclne...700000uJ Excipient proteo-oligo Vit 100ß

Это активный антиинфекционный препарат против грамоотри-пательных возбудителей и антистрессовый по своему витаминному составу (BI, В2, В6, BI2) и по микроэлементам (рв> сц, zn. ).

Препарат рекомендуют для профилактики и лечения респираторных и септических заболеваний птицы: колибактериоза, пас-тереллеза, инфекционного синовита и др.

Препарат дают птице с 6 недельного возраста в течение 5 дней перорально с питьевой водой.

ТРИСУЛЬМИКС Состав Suif adlnethoxine eodique 20;Trimethoprine 4g qsp200g

Этот препарат рекомендован при кишечных и респираторных инфекциях бактериального происхождения (колибактериоз, саль-монеллез, стафилококк«} птиц и животных.

Препарат дают с питьевой водой в течение 5 дней или с кормом. В процессе эксперимента проводили такие исследования: Иммунобиологические:

а) лизосомально-катиорный тест (количественная оценка содержания лизосомально-катионных белков) определяли по методике ВШВИП (1989);

б) содержание j/jG- - глобулина в сыворотке крови определяли методом Манчини в модификации ВНИВИП (i960). Биохимические:

а) общий белок определяли рефрактометрическим методом;

б) для разделения белков сыворотки крови нами использована методика электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ), описанная Б.А. Устинниковым и Г.А. Ермолиным (1972).

.. 1Р-

Микробиологические:

Микробный клиренс определяли по методике предложенной Г.Зон (1992).

Для определения микробного клиренса организовали три группы шплят в возрасте 35 дней. В первой и во второй группе находились цыплята, которые получали в течение 10 дней галлиферм, третья группа служила контролем. Исследуемая птица второй и третьей групп была заражена кишечной палочкой. Схема опыта представлена в таблице 2.

Таблиц* 2

Схема опыта микробного клиренса .....

Группы

Препарат Кол-во цыплят

Метод Доза Сроки ис-заракения заражения следования _крови_

Опытная I Галлиферм 15 Опытная 2 Галлиферм 15 Контрольная - 15

через 1,3 6,24 часа

внутри- ЮОмлн. брюшинно микр.кл. В I

Морфологические:

Для гистологического исследования брали кусочки органов зоба, мышечного желудка слепых отростков от цыплят, получавших галлиферм и после введения им внутрибрюшинно тест-микроба Е, Кусочки „органов фиксировали в 10% растворе нейтра льного формалина. Заливку проводили в целлоидине. Толщину срезов производили от 5 до 10 микрон. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Зоотехнические:

Учитывали сохранность,динамику живой массы и надеж птицы. Экспериментальные данные обработаны методом вариационной ста-

тистики -с- помощью интегрированной системы

Framework-

на

ПЭВМ согласно методических указаний по общей теории статистики (1990г.) и математической статистики (1990г.).

и.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Микробный клиренс у шплят под влиянием галлиферма

В первой группе во все сроки исследований от цыплят не была выделена кишечная палочка. Во второй группе через I час после заражения обнаружено 46 колоний, а в третьей группе -

- в 2,23раза больше. Через 3 часа наблюдается увеличение числа колоний во второй группе в сравнении с первым исследованием в 2,1, а в третьей группе - в 1,35 раза. При этом в третьей группе, количество колоний в 1,45 раза больше, чем-во второй группе.

Через 6 часов после введения кишечной палочки" во второй группе наблюдается снижение, а в третьей группе продолжается увеличение числа колоний кишечной палочни. В третьей группе через б часов после введения тест-микроба количество колоний превышает вторую группу на 158,7. '""*""...........

Через 24 часа во второй группе отмечаются единичные колонии, в пределах 8,6+3,18. В то время как в третьей группе наблюдается нарастание сепсиса. Количество колоний составило 420,6, т.е. в сравнении со второй группой - это .в..48,9.-раз больше.

2. Изменение микрофлоры кишечного тракта у шплят

В результате проведенных исследований было выявлено,что введение внутрибрюижнно тест-микроба Е. coli вызывало увеличение обшей микрофлоры и кишечной палочки, по сравнению с цыплятами, которым скармливали галлиферм, но не вводили кишечную палочку. Количество общей микрофлоры через час после введения составилов в первой группе - 205,83+7,14, во второй -

- 225,37+5,8, в третьей - 247,07+6,16, через 3 часа соответственно 212,43+17,21, 252,43+ 1,63, 293+5,35.

Через 6 часов наблюдается увеличение обшей микрофлоры во второй и третьей группах, по сравнению с первой.

Через 24 часа после введения s. coli ' количество общей микрофлоры во второй группе составило 213,7+7,51, т.е. было на том же уровне, что и до опыта, а в третьей группе по-прежнему наблюдается увеличение количества общей микрофлоры по сравнению со второй группой в 1,7 раз, а с первой группой - в 1,84 раза. Наблюдается высокая достоверность полученных данных.

Динамика изменения количества кишечной палочки адекватно общей микрофлоре.

Однако увеличение общей шкрофлоры и кишечной палочки во второй и третьей группах происходит не одинаково. Наиболее силь ное увеличение микрофлоры кишечника наблюдается в третьей группе. Через б часов эта тенденция выражена более четко. Так количество кишечной палочки в третьей группе превышало первую в 2,3 раза, а вторую - в 1,97 раз.'

3. Динамика изменений содержания общего белка и белковых фракций сыворогки крови у цыплят после введения тест-микроба f. се

Анализируя полученные данные, необходимо отметить,что уже до введения Е> coli в группах 2 и 3 наблюдаются различия в содержании общего белка и белковых фракций. Применение галли-ферма оказало влияние на содержание защитных белков сыворогки крови у цыплят. Так во второй опытной группе отмечено достоверное увеличение • post Alb и -глобулинов и снижение Jfj -глобулинов, а также увеличение транспортного белка-церулоплазмина, который является белком острой фазы, На фоне применения галлиферма в организме цыплят шла более интенсивная выработка антител класса (В2) в ответ на введение ß .

4. Сохранность ремонтного молодняка кур за период опыта (70-дневного и 130-дневного возраста) на Красногорской -птицефабрике

Сохранность выше была в группе, где применяли трисульмикс и составила 97,5%, во второй группе, где применяли авимиксол, она равнялась 97,2%. В первой группе сохранность цыплят составила 96%, она была выше плановой по фабрике и значительно выше контрольной группы на 2,4%, в то же время уступая опытным группам с применением антибиотиков.

Во второй и третьей группах не наблюдался падеж птицы от колибактериоза. В контрольной группе падеж от колибакте-риоза составил 2,6%, в 1-ой группе - 1,25?.

5. Влияние галлиферма и антибиотиков на рост и развитие ремонтных молодок кур ; ,"

Необходимо отметить,что молодки по разному реагировали на дачу препаратов. В конце опыта (это возраст молодок 130 дней) значительное увеличение живой массы;отмечено в первой группе с использованием галлиферма,чем в остальные групла-. с та разница составила со второй группой - 130г или 8,7$' (Р"< 0,05), с третьей - 120г или 855 (. Р 0,01), с четвертой(контрольной) - 199г или 10,958" (Р ¿С 0,05).

6. Влияние галлиферма и антибиотиков на естественную резистентность ремонтных молодок кур при профилактике колибактериоза.

В нашем опыте мы не отметили существенных различий в отношении ЛКБ и иммуноглобулина ц .В зависимости от возраста происходило увеличение этих показателей, а к концу"опыта они были почти на одном уровне во всех группах.

Количество общего белка во все сроки исследований в опытных группах превышало контрольную. Наибольшее количествсгобщего белка к концу, опыта наблюдается в I группе,где применяли про-

1

биотик галлиферм и составила 5,30+0,17 (Р 0,05).

ВЫВОДЫ

1. Для определения состояния резистентности организма птицы целесообразно использовать метод микробного клиренса, т.е.способности организма освобождаться от микробов, попавших в его внутреннею среду.

2. При пероральном курсовом применении галлиферма через 24 часа после введения тест-микроба g, соНУ шплят обнаруживались единичные колонии этого микроба -.8,6, а в контроле -- в 48,9 раза больше, а также отмечали' уменьшение количества общей микрофлоры и иишечной палочки в желудочно-кишечном тракте.

3. Изучение морфологических изменений во внутренних органах у цыплят, обработанных пробиотиком, свидетельствует об усиленной пролиферации клеточных элементов ликфоидных органов: тимуса, фабрициеЕой суыки, селезенки, которые ответственны за кл< точный и гуморальный иммунитет.

4. После применения пробиотика галлиферм у цыплят на введение возбудителя B.coli происходило более интенсивное образо-

. : вание антител: защитные белки: - (3t глобулины в опытной группе

составили - 3,3+0,9, а в контрольной - 2,5 +0,2.

5. Аминокислотный обмен интенсивнее был у цыплят опытной группы.

I б. При сравнительном производственном испытании галлифермг

(I группа) с авимиксолем и трисульмиксом наблюдалось повышение живой массы у цыплят на 130г в сравнении со второй группой, на 120г- с третьей^ на 199г-с контролем.

1 7. Показателииммуноглобулина G и ЛКБ во всех опытных

j и контрольных группах были почти на одном уровне. Общий белок

I . .

1 ' :

! ; :

в первой группе составил 5,3+0,17, а в других опытных группах соответственно - 5,51+0,07, 5,31+0,16, а в контрольной - 5,03+ +0,60.

8. Введение в рацион галлиферма способствовало уменьшению падежа птицы от колибактериоза: в 2,16 раз по сравнению с контролем. Сохранность составила 96$, а в контроле - 93,6%.

РЕКОМЕНДАЦИИ 1.0 ПСПСЛЬЗОВАШЮ ЕАУШЖ ВЫВОДОВ

1. Для определения состояния резистентности организма птицы к инфекционным заболеваниям рекомендуем использовать метод микробного клиренса.

2. Для профилактики колибактериоза кур рекомендуем применять экологически чистый препарат - пробиотик галлиферма в дозе 0,04% к рациону в течение 10 дней с повторным курсом применения через 10 дней.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ,ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Магирага Рокия. Динамика изменений общего белка и белковых фракций у цыплят,получавших галлиферм,после введения тест-микроба в,печати/.

2. Магирага Рокия. Влияние галлиферма на развитие и сохранность ремонтного молодняка кур. /В печати/.