Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Применение прибиотики галлиферы при колибактериозе кур

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МОСКОВСКАЯ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ К.И.СКРЯБИНА

На правах рукописи

РОКШ МАГИРАГА ПРИМЕНЕНИЕ ПРОЕИОШКА ГАЛШЕРЫ ПРИ КОЛИЕАКТЕРИОЗЕ КУР

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой / степени кандидата ветеринарных

наук

Москва - 1994

Работа выполнена в Московской ветеринарной академии имени К.И. Скрябина

Научный.руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор Бессарабов Б. 2?.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных: наук, профессор Р.В.Еелоусова

2. Кандидат ветеринарных наук, доцент Е.Б.Дьяконова Ведущая организация -

..Всероссийский научно - исследовательский.: институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко

Защита состоится_1994г. в_часов

на заседании специализированного совета К 120.36.05 по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук в Московской ветеринарной академии им.К.И.Скрябина (109472, Москва, ул.Академика Скрябина,23, тел. 377-93-83). '

С диссертацией мокно ознакомиться в библиотеке академии

Автореферат разослан_'_1994г.

. Ученый секретарь специализированного совета

/ Федосеева Т.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы.

В 1992г. птицеводство России понесло большие убытки,связанные с возросшим отходом птицы, всего погибло 213,4 млн.голов,.в том числе взрослой птицы - 21,4 млн.. В таких объединениях,как Ставропольское, Ростовское, Читинское, Бурятское и др. падеж взрослой птицы составил от 10 до 15,7$. Больше всего молодняка было потеряно в Брянском, Московском,Орловском, Тульском, Липецком, Оренбургском, Кемеровском и некоторых других объединениях.

Особое беспокойство вызывает длительное неблагополучие ряда

хозяйств по инфекционным заболеваниям, в том числе по колибакте-

риозу. Колибактериоз - остро и подостро протекающая инфекционная

болезнь. Бактерии рода ЗзсЬег1сЬ1а впервые описал Т.ЗвсЬейёй в

1886г. Через 5 лет С.О^^-веп установил колибактериоз у те, \

лят. Однако только в 40-е годы нашего столетия сформировалась-точка зрения, что кишечная палочка является одним из возбудителей заболевания, молодняка. В наши дни эшерихиоз относится к числу широко распространенных инфекционных болезней молодняка и регистрируется во всех развитых странах мира. Наиболее ощутимый урон на птицефабриках связан с высокой смертностью, отставания в росте и снижения продуктивности переболевшей■птицы (м?ааагов , X.В1;1ркоу|*в , 19641 А.Ахмедова, Х.Бурханова, 1965;Б.Белицкий, И.Паникар, 1969; Б.Ф.Бессарабов, 1970; С.А. Артемьева, 1972,1977; Г.А. Грошева, 1978,1979; И.А. Радчук, 1990).

Обязательным условием развития инфекционного процесса при колибактериозе кур является пероральное или аэрогенное заражение энтеропатогенннми штаммами эшерихий, адгезия(прилипание) возбудителя в тонком кишечнике, обильное размножение,накопление токсинов, проникновение возбудителя в ряде случаев через стенку кишечника и развитие -патологических процессов различной интен-

сивности.

До последних лет в системе мер борьбы и профилактики коли-бактериоза уделяли внимание в основном применению различных антибактериальных препаратов, а не созданию условий, повышающих общую резистентность организма птицы, что не способствовало предотвращению этого заболевания в птицеводческих хозяйствах. >

Поэтому почти одновременно в ветеринарной практике разных стран появились препараты, которые получили название пробиотиков. Сухие и кидкие препараты пробиотиков содержат набор органических кислот и молочнокислые бактерии. Их действие направлено на профилактику и лечение дисбактериозов молодняка, на повышение естественной резистентности организмаС^- 8efton1999¡A'.Hanák; р. Rudolfo va;

А. Панин, Н.Серых 1992г.).(A.RosendorfskyíKuaprecjx 1991and otheyí

Вопросу борьбы с колибактериозом кур посвящено много работ. Однако до настоящего времени нет надежных средств и методов борьбы с этим заболеванием, поиск таковых остается весьма актуальной задачей.

Цель и задачи исследований

Целью наших исследований явилось изучение действия пробио-тика галлиферм в сравнении с антибиотиками авимиксол и трисуль-микс на жизнеспособность и резистентность цыплят и ремонтного молодняка к колибактариозу. Исследования проводили с целью дополнения комплекса мероприятий, направленных на профилактику колибактериоза птиц и снижение экономических потерь.

Задачи исследований

1. Изучить действие галлиферма на микробный клиренс организма цыплят.

2. Определить морфологические изменения в органах цыплят при микробном клиренсе.

3. Изучить влияние галлиферма на изменение биоценоза нормальной пристеночной микрофлоры желудочно-кишечного тракта при введении .тест-микроба е.С(д14

4. Изучить влияние галлиферма на динамику изменений общего белка, белковых фракций и аминокислотный состав инэрганизме цыплят, после введения тест-микроба В.чоЦ. ''

5. Изучить влияние галлиферма в сравнении с антибиотиками на жизнеспособность и некоторые показатели естественной резистентности ремонтных молодок кур.

Научная новизна работы

Впервые изучено действие пробиотика галлиферм.в.сравнений с антибиотиками, рекомендованными против колибактериоза, на показатели естественной резистентности и жизнеспособности пыплят. Применение пробиотика галлиферм позволило улучшить.некоторые показатели естественной резистентности организма цыпйят,повысить живую массу и сохранность по сравнению с контрольной группой. ;

Изучен механизм действия галлиферма при проведении микробного клиренса к колибактериозу. Установлено, что микроорганизмы, входящие в состав препарата галлиферм, обладают колонизационной способностью, прикрепляясь к стенкам кишечника, препятствуют проникновению эшерихий через стенку кишечника и задерживают развитие патологических процессов. Эти данные нашли подтверждение в исследованиях микрофлоры желудочно-кишечного тракта, общего белка и белковых фракций, -морфологических изменений органов.

Практическая и теоретическая значимость работы

I. Полученные данные позволяют рекомендовать галлиферм для профилактики колибактериоза с целью повышения естественной резистентности и жизнеспособности цыплят и ремонтного молодняка. ~

6.

2. Для определения естественной резистентности птицы к колибактериозу целесообразно рекомендовать метод микробного клиренса.

3. Разработаны методические рекомендации по применению пробиотика галлиферм с целью профилактики колибактериоза кур.

Апробация материалов диссертации

Основные положения диссертации доложены специалистам ветеринарной и зоотехнической служб Красногорской птицефабрики ¡Московской области (август 1992г.), сотрудникам кафедры птицеводства и болезней птиц (октябрь 1993г.), на учебно-методической конференции МВА по обмену опытом в подготовке специалистов по ветеринарной медицине для зарубежных стран (февраль 1994г.).

Публикация результатов исследования

По теме диссертационной работы сданы в Труды МВА 2 научные, статьи. Утверждены методические рекомендации по применению про-биотиков в птицеводстве.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Влияние галлиферма в сравнении с антибиотиками на естес венную резистентность и жизнеспособность ремонтных молодок при профилактике колибактериоза.

2. Микробный клиренс - один из основных показателей естественной резистентности птиц.

3. Влияние галлиферма на динамику изменений общего белка

и белковых фракций, аминокислотный состав сыворотки крови после введения тест-микроба е.eoli. ■

4. Влияние галлиферма на морфологические изменения органов цыплят после введения тест-микроба В. coli.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 156 страницах машинописи и состоит

из введения,обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения, выводов, предложений для производства, библиографического списка. Диссертация иллюстрирована II таблицами и 36 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

I. Материал и методы исследований

Работа выполнены на кафедре птицеводства и болезней птиц -Московской ветеринарной академии имени К.И.Скрябина и на Красногорской птицефабрике Красногорского района Московской области в период 1990-1993г.г.

Исследования по изучению профилактирующего действия пробио-тика галлиферм в'сравнении с антибиотиками авимиксолС А\'1шЬ:о1' ) и трисульмикс (Тг1ви1ыЬс ) против колибактериоза кур проводили на Красногорской птицефабрике. Для опыта использовали цыплят в возрасте 70 дней кросса "Беларусь-9" в двух повторностях каждой серии.

Всего использовано 4000 голов цыплят, которые были разделены на 4 группы по 1000 голов в каждой. Схема опыта представлена в таблице I.

Таблица I

Схема опыта на Красногорской птицефабрике

№№ Группы Кол-во Возраст Доза Курс п/п - шплят цыплят Препарат препарата применения _(гол.) (дней)_

I. Опытная

2.

1000

1000

3. 1000

4. Контрольная 1000

70 галлиферм

70

авимиксол

70 трисульмикс 70

400 г на тонну корма

2,5г на 2л воды или 1кг корма

1г на 1л

воды

10 дней,повторно через 10 дней

5 дней

5 дней

-• ' г. . е..

"Условия корм^ления и содержания в опытных труппах цыплят были одинаковыми и отвечали принятым нормам, утвержденным

внитап.

ГАЛЛИФЕРМ

1. Общие сведения

1.1. Галлиферм - бактерийный препарат, содержащий в 1г 25 млрд.живых клеток гомоферментативных молочнокислых бактерий родов Iectobaoillus lacti u Streptoeoccue'lactls.

1.2. Препарат представляет собой сухой однородный порошок от светло-кремового до светло-коричневого цвета, со слабым спе-

—цифическим запахом, легко суспедируетск в воде.-

2. Фармакологические свойства

.Препарат галлиферм способствует нормализации микрофлоры пищеварительного тракта животных. Молочнокислые бактерии, входящие в состав препарата, подавляют развитие условно-патогенной и гнилостной микрофлоры; кишечника, предупреждает развитие дис-бактериоза, нормализуют обменные процессы организма и функции желудочно-кишечного .тракта, что обусловливает стимулирующее действие галлиферма на рост и развитие птиц.

Применение пробиотика галлиферм позволяет:-- -

- исключить из лечебно-профилактических-средств кормовые и ветеринарные антибиотики и получать экологически чистую продукции,

- исключить из состава комбикормов ферментные препаратн,

- повысить качество продукции.

Показания к применению: эффективен против сальмонеллеза, колибактериоза, кокковой инфекции, дисбактериоза, диспепсии, кутикулитах и гастроэнтеритах незаразной этиологии.

АВИМИКСОЛ CocTaBErytronycine...700000uj Ercipient proteo-oligo Vit 100g

Это активный антиинфекционный препарат против грамоотри-цательных возбудителей и антистрессовый по своему витаминному составу (BI, В2, В6, BI2) и по микроэлементам (p9f cu, Zn. )•

Препарат рекомендуют для профилактики и лечения респираторных и септических заболеваний птицы: колибактериоза, пас-тереллеза, инфекционного синовита и др.

Препарат дают птице с б недельного возраста в течение 5 дней перорально с питьевой водой.

ТРИСУЛЬМИКС Состав Bulfadlnethoxine sodique 20;Trlmethoprine 4g qep200g

Этот препарат рекомендован при кишечных и респираторных инфекциях бактериального происхождения (колибактериоз, саль-монеллез, стафилококк^ птиц и животных.

Препарат дают с питьевой водой в течение 5 дней или с кормом. В процессе эксперимента проводили такие исследования: Иммунобиологические:

а) лизосомально-катио^ый тест (количественная оценка содержания лизосомально-катионных белков) определяли по методике ВНЙВИП (1989);

б) содержание - глобулина в сыворотке крови определяли методом Манчини в модификации БНИВИП (i960). Биохимические:

а) общий белок определяли рефрактометрическим методом;

б) для разделения белков сыворотки крови нами использована методика электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ), описанная Б.А. Устинниковым и Г.А. Ермолиным (1972).

■ 1С..

Микробиологические:

Микробный клиренс определяли по методике предложенной Г.Зон (1992).

Для определения микробного клиренса организовали три группы цыплят в возрасте 35 дней. В первой и во второй груше находились цыплята, которые получали в течение 10 дней галлиферм, третья группа служила контролем. Исследуемая птица второй и третьей групп была заражена кишечной палочкой. Схема опыта представлена в таблице 2.

Таблица; 2

Схема опыта микробного клиренса

Группы Препарат

Кол-во Метод Доза цыплят заражения заражения

Сроки исследования крови_

Опытная I Галлиферм 15 Опытная 2 Галлиферм 15 Контрольная - 15

через 1,3 6,24 часа

внутри- ЮОмлн. брюшинно микр.кл. ., в I ¿а

Морфологические:

Для гистологического исследования брали кусочки органов зоба, мышечного желудка слепых отростков от цыплят., получавших галлиферм и после введения им внутрибрюшинно тест-микроба Е, Кусочки"органов фиксировали в 10$ растворе нейтрального формалина. Заливку проводили в целлоидине. Толщину срезов производили от 5 до 10 микрон. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Зоотехнические:

Учитывали сохранность,динамику живой массы и надеж птицы. Экспериментальные данные обработаны методом вариационной статистики "с" помощью интегрированной системы РгапетеогЬ: .. на ПЭВМ согласно методических указаний по общей теории статистики (1990г.) и математической статистики (1990г.).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ !• Микробный клиренс у цыплят под влиянием галлифеша

В первой группе во все сроки исследований от цыплят не была выделена кишечная палочка. Во второй группе через I час после заражения обнаружено 46 колоний, а в третьей группе -

- в 2;23раза больше. Через 3 часа наблюдается увеличение числа колоний во второй группе в сравнении с первым исследованием в 2,1, а в третьей группе - в 1,35 раза. При этом в третьей группе количество колоний в 1,45 раза больше, чем.во второй группе

Через 6 часов после введения кишечной палочки во второй группе наблюдается снижение, а в третьей группе продолжается увеличение числа колоний кишечной палочки. В третьей группе через 6 часов после введения тест-микроба количество колоний

превышает вторую группу на 158,7. -----------

Через 24 часа во второй группе отмечаются единичные колонии, в .пределах 8,6+3,18. В то время как в третьей группе наблюдается нарастание сепсиса. Количество колоний составило 420,6, т.е. в сравнении со второй группой - это в 48,9 раз больше.

2. Изменение микрофлоры кишечного тракта у цыплят

В результате проведенных исследований было выявлено,что введение внутрибрюшинно тест-микроба Е. coli вызывало увеличение общей микрофлоры и кишечной палочки, по сравнению с цыплятами, которым скармливали галлиферм, но не вводили кишечную палочку. Количество общей микрофлоры через Г чае после введения составилов в первой группе - 205,83+7,14, во второй -

- 225,37+5,8, в третьей - 247,07+6,16, через 3 часа соответственно 212,43+17,21, 252,43+ 1,63, 293+5,35.

Через 6 часов наблюдается увеличение общей микрофлоры во второй и третьей группах, по сравнению с первой.

Через 24 часа после введения е. coli количество общей микрофлоры во второй группе составило 213,7+7,51, т.е. было на том же уровне, что и до опыта, а в третьей группе по-прежнему наблюдается увеличение количества общей микрофлоры по сравнению со второй группой в 1,7 раз, в с первой группой - в 1,84 раза. Наблюдается высокая достоверность полученных данных.

Динамика изменения количества кишечной палочки адекватно общей микрофлоре.

Однако увеличение общей микрофлоры и кишечной палочки во второй и третьей группах происходит не одинаково. Наиболее сильное увеличение микрофлоры кишечника наблюдается в третьей группе. Через 6 часов эта тенденция выражена более четко. Так количество кишечной палочки в третьей группе превышало первую в 2,3 раза, а вторую - в 1,97 раз.

3. Динамика изменений содержания общего белка и белковых фракций сыворогки крови у цыплят после введения тест-микроба

Анализируя полученные данные, необходимо отметить,что уже до введения соц в группах 2 и 3 наблюдаются различия в содержании общего белка и белковых фракций. Применение галли-ферма оказало влияние на содержание защитных белков сыворогки крови у цыплят. Так во второй опытной группе отмечено достоверное увеличение- и s^ -глобулинов и снижение -глобулинов, а также увеличение транспортного белка-церулоплазмина, который является белком острой фазы. На фоне применения галлиферма в организме цыплят шла более интенсивная выработка антител класса (В2) в ответ на введение В •

4. Сохранность ремонтного молодняка кур за период опыта" (70-дневного и 130-дневного возраста) на Красногбрской птицейабрике

Сохранность выше была в группе, где применяли трисульмикс и составила 97,5%, во второй группе, где применяли авимиксол, она равнялась 97,2$. В первой группе сохранность цыплят составила 96$, она была выше плановой по фабрике и значительно выше контрольной группы на 2,4%, в то же время уступая опытным группам с применением антибиотиков.

Во второй и третьей группах не наблюдался падеж птицы от колибактериоза. В контрольной группе падеж от колибакте-риоза составил 2,6$, в 1-ой группе - 1,2$.

5. Влияние галлиферма и антибиотиков на рост и развитие ремонтных молодок кур

Необходимо отметить,что молодки по разному реагировали на дачу препаратов. В конце опыта (это возраст молодок 130 дней) значительное увеличение живой массы;отмечено в первой группе с использованием галлиферма,чем в остальных группах. Эта разница составила со второй группой - 130г или 8,7$ (Р < 0,05), с третьей - 120г или 8$ ( Р < 0,01), с четвертой(контрольной) - 199г или 10,9$ (Р 4 0,05). _

6. Влияние галлиферма и антибиотиков на естественную резистентность "ремонтных молодок кур при профилактике колибактериоза.

В нашем опыте мы -не отметили существенных различий в отношении ЛКБ и иммуноглобулина ц .В зависимости от возраста происходило увеличение этих показателей, а к концу опы-" та они были почти на одном уровне во всех группах.

Количество общего белка во все сроки исследований в опытных группах превышало контрольную. Наибольшее количество общего белка к концу, опыта наблюдается в I группе,где применяли про!

биотик галлиферы и составила 5,30+0,17 (Р 0,05).

ВЫВОДЫ

1. Для определения состояния резистентности организма птицы целесообразно использовать метод микробного клиренса, т.е.способности организма освобождаться от микробов, попавших в его внутреннюю среду.

2. При пероральном курсовом применении галлиферма через 24 часа после введения тест-микроба j. coli У цыплят обнаруживались единичные колонии этого микроба -.8,6, а в контроле -- в 48,9 раза больше, а также отмечали уменьшение количества общей микрофлоры и нишечной палочки в желудочно-кишечном тракте.

3. Изучение морфологических изменений во внутренних органах у цыплят, обработанных пробиотиком, свидетельствует об усиленной пролиферации клеточных элементов лимфоидных органов: тимуса, фабрициесой сумки, селезенки, которые ответственны за клеточный и гуморальный иммунитет.

4. После применения пробиотика галлиферм у цыплят на введение возбудителя В.coli происходило более интенсивное образование антител: защитные белки: - ßi глобулины в опытной группе составили - 3,3+0,9, а в контрольной - 2,5 +0,2.

5. Аминокислотный обмен интенсивнее был у цыплят опытной группы.

6. При сравнительном производственном испытании галлиферма (I группа) с авимиксолем и трисульмиксом наблюдалось повышение живой массы у иыплят на 130г в сравнении со второй группой,

на 120г- с третьей^на 199г-с контролем.

7. Показатели иммуноглобулина G и ЖБ во всех опытных и контрольных группах были почти на одном уровне. Общий белок

в первой группе составил 5,3+0,17, а в других опытных группах соответственно - 5,51+0,07, 5,31+0,16, а в контрольной - 5,03+ +0,69.

8. Введение в рацион галлиферма способствовало уменьшению падежа птицы от колибактериоза: в 2,16 раз по сравнению с контролем. Сохранность составила 96%, а в контроле - 93,6%,

РЕШЖНДА1Щ 1-0 ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ вшсдсв

1. Для определения состояния резистентности организма птицы к инфекционным заболеваниям рекомендуем использовать метод микробного клиренса.

2. Для профилактики колибактериоза кур рекомендуем применять экологически чистый препарат - пробиотик галлиферма в дозе 0,04% к рациону в течение 10 дней с повторным курсом применения через 10 дней.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО 1ЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Магирага Рокия. Динамика изменений общего белка и белковых фракций у цыплят.получавших галлиферм,после введения тест-микроба е.соУ# печати/.

2. Магирага Рокия. Влияние галлиферма на развитие и сохранность ремонтного шлодняка кур. /В печати/.