Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Применение иммуномодуляторов для профилактики пастереллеза крупного рогатого скота

ЙИМСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ СЕДКРАЩМ

Московская ветеринарная академия имени К.И.Скрябина

на правах рукописи

СУМА ЛАИСАКА П

Применение иымуномодуллторов для профилактики пастервллвэл крупного рогатого скота

16.00.03 - ветеринарная микробиология,»ирусологик, 8ПИЭООТОЛОГ/Я, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва 1992

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии имени К.И.Скрябина

Научный руководитель: Доктор биологических наук, профессор ВОРОНИН Е.С.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор ОТРЕЛьНИКОВ А.П.

2. Кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник ТИХОНОВ Л.И.

Ведущая организация: Всероссийский ордена Бенина научно-

исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р.Коваленко

Защита состоится 15 января 1993 г., в " " часов на заседании специализированного совета'К 120.36.05 по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии имени К.И.Скрябина (109472,Москва, ул.Академика Скрябина, 23 тел. 377-93-83). С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан " "______ 1993г.

Ученый секретарь специализированного совета Федосеева Т.Н.

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

А к т уз.тьяость п зо б л g 1 : и

Пастереллез крупного рогатого скота наносит зньчнтельний экономический ущерб животноводству со леех странах ккра.Основиим напрэвленн-еи развитии скотоводства является дальнейшее совврцевствогунке де;:,-ствующих и разработка новых эффективных систев профилактических мероприятий при инфекционных заболеваниях животных ( Ншсоноров Л.И.,1587; Осидзе Д.О.,1939; Геведзе В.П.,1989; Саиагоп с.ц. ,1986; Perreau p. 1976 ).Пастереллез крупного рогатого скота распространен повсеместно в Гвинейской республике и и:;еет больной удельный вес среди ин;екцион-ных болезней животных,встречающихся з стране ( Сидпае 0.,1939).Однако профилактика пастереллеза сдерживается нерешенностью ряда ветеринарных проблей,связанных с обеспечением здоровья животных и эпизоотичес-киы благополучием хозяйств.

Убытки от пастереллеза составляют десятки миллионов долларов к рублей.Имеющиеся вакцины против пастереллеза крупного рогатого окота не приносят желаемого результата из-за низкой ккмуногенности.Антибиотики и другие кедикаментные средства также малоэффективны при э^ои заболевании (Ярцев М.Я.,1989; Сидоров М.А..Агаева 3.M.,I982;Eecaade F. 1990; Carter a.R. 1939; Perreau F. ,1976).Последние сообщения,однако .демонстрируют возможность использования иикуномодулп.тороэ не ыичзского и не синтетического,а природного происхождения при ряде болезней животных ( Воронин Е.С.,1987,1989; Арион В.А.,1982; Азима М., 1988).

В этой аспекте заслуживают внимания Т-активин,полученный из тимуса телят и В-активин,выделенный из костного мозга свиней.Поэтому использование их с целью профилактики пастереллеза крупного рогатого скота i/ожет быть целесообразным.Кроне того,эти препараты могут 'повысить имиуноненность некоторых вакцин,включая 'пастереллезную (Петров КВ.,1987; Воронин ¿¡.С.,1989; Чучалин A.1'.,1989; в ernard s., 1981 ). ¡..■: ai

Цели исследований

Изложенные вше данные послужили основанной к изучению возможное-. ти использования ишуномодулирувщих препаратов Т-активина и 3-акти-вина для профилактики пастереллеэа'крупного рогатого скота.

В связи с этим били поставлены следующие задачи:

1. Изучить действие имиуноыодулнторов при экспериментальной пас-. • тереллезе на белых мышах.

2. Изучить действие иммуномодуляторов при экспериментальном пас-тереллезе-на телятах.

3. Изучить действие'иммуномодуляторов при совместном применении

с противопастереллезнини вакцинами на лабораторных животных и телятах,

' ч. Изучить иммунологические процессы при экспериментальном пас-аереллезе и совместном'применении иммуномодуляторов с вакцинами на животных.

Научная новизна

.Впервые была показана профилактическая эффективность Т-активина и Г:-активина при экспериментальном пастереллезе' на лабораторных аи-воаных и телятах.

Впервые установлено повышение ии^уногенности пасагереллезной вакцины на телятах при использования Т-актиьина и В-ак"изина.

Практическая значимость

Инадномодулятори Т-активин иВ-активин можно использовать в угро-\meiiux зонах для профилактики пастереллеаа крупного рогатого скота. Д ч! повышение иммуногенности настереллезноИ иакц.шы необходимо применение- ее совместно с 1-активаиом и Б-активиноы.

Луолккации

По материала»! диссипации опубликована I статьи.

ООъеа а структура диссь-гл'ацш;

Диссертация изложена на 102 стр. машинописного текста и состоит из введения,обзора литературы,собственных ис следов алий,виводо в,сво-

.дений о практическом ислользоматм результатов исследований,рекомендаций по использованию научных .выводов,списка литература.

• Работа содержит 15 таблиц;список литературы включает 13'г источил-ка,из них иностранных 68. .

2. РЕЗУЛЬТАТА СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1. Материалы и методы ксследовышп

Работа выполнена ь 1989-1992 г.г. в Московской ветеринарной академии имени К.И.Скрябина и на базе учхоза "Леоновское" ^оскоиской .■ области.

В работе были использованы следуюцче итакиы:Пасторелла лультоци-да й 216, й .116, !й 796, К; 217, !й 5264,выделенные из трупа телсн::а на кафедра микробиологии Грузинского Зооветеринарного института 1982 г.Производственные штаты - сухие культуры пересевались з течение года,хранились при температуре +• 4°С - + Ю°С,патогенны для теленка я лабораторных животных.

Штамм Пастерелла геколитика получен из ВИЭВ'а.

Т-активин и В-активин изготовлены Покровский биозаводоы.

Для выделения и культивирований микроорганизмов использовали питательные среды Эндо,бульон Хоттингера,кровяной 1»ПА .сывороточный • КПА,сывороточный 1.1 ПБ и др.

У всех выделенных культур были изучены морфологические и культу-рально-биохиыичсские свойства.

В наших исследованиях были предприняты попытки испытать Т- и В-активины раздельно и вместе'для профилактики экспериментального пас-тереллеэа на белых мышах и повышения иммуногенности противопастерел-лезной вакцины с помощью указанных препаратов.

Эксперичентальнае исследование проводили на ьышах линии ВАЗВ кассой 16-18 г. '

Для изучения профилактической эффективности Т-активина и В-активи-на при экспериментальной пастереллезе использовали мышей«которые были разбиты на 4 группы по 20 голов в каждой.

1 группа.Кыиац вводили Т-активин в дозе ОД мл одновременно с заражение!: пастерелла мультоцида и затем,тоже еще два дня подряд Т-активина. :

2 группа. Мышам вводили В-активин по 0,3 мг.как и .в первой группе.

3 группа. Кшаи вводили Т-активин и В-активин так же,как в первой и во второй группах.

4 группа. Мышам вводили физиологической раствор.

Вторая схема: в наших исследованиях предпринято испытать нримене-

ни с Т-активииа и В-активина раздельно и виесте с противопастерел-лесной вакциной для профилактики зксперииентадьного пастерелл.еза на бе л их кипах.

ььаи были разбиты на 7 групп по 45 голов в. каждой.

1 группа ь'шлей получала по 0,1 мл Т-активина три раза подряд подкожно на одну мышь до заражения.

2 группа нкшей получала по 0,6 ¡¡г В-активина подкожно каждой киши три дни подряд. ■

' 3 группа икшей получала подкожно по 0,1 мл Т-актшзшт а 0,6 иг В-активина подкожно,и препараты а той же дозе вводили в последующие 2 дня I раз в день.

4 группа,к ыаей иммунизировали фориолвакциной против пастереллеза крупного рогатого скота,буйволов I? овец по 0,?. мл подкожно и однократно.

5 группа шыей.Им вводили вакцину по 0,2 ил вместе с Т-активинсщ и В-активнкои по 0,1 ил и 0,6 иг соответственно.

6 группа мышей служила'контролем.Животным вводили физиологический раствор,

7 группа мышей служила контроле;; и ну подюргалась никаким воздействиям. .

• Спустя 14 дней у рсех мышей воспроизводили экспериментальный пос-тереллез,кроме группы 7.

На 5-е,11-е,18-е и 27-е сутки вскрывал;; по 3 ыиаи из каядой группы.

Для изучения влияния икмуноыодудяторов на селезенку иыаей при экспериментальном ласхереллезе ышш били разбиты на 5 групп по 45 голов в каждой. • ■ '

1 труппа »¡идей получала по 0,6 иг В-ак^ивина на одну кшь в течение трех д^ей и Т-активина по 0,1 ил подкожно,так как В-активина.

2 группа шаей Сила иммунизировано однократно по 0,2 ыл форыол-иикциной против пастерел'юза крупного рогатого скота.буйволов и овец

3 группа кыхей получала подкожно 'Г-активин и В-активин по 0,1 ил и 0,6 ¿г соответственно на одну ишь в течение трех дней.В первый день совместно с Т-активинои и В-активлном однократно по'0,2 ил фор-ьолвакцину против пистереллеза крупного рогатого скота,буйволов и овоц.

4 группа шшей получила физиологический раствор и не подвергала« никаким воздействиям.

5 группа мышей йо луч ала физиологический раствор до заражения.

Спусти 14 дней у всех мышей,кроне 4-й группы воспроизводили экс-

периыентальный пастереллез.На 5-e,II-e,I8-e и 27-е сутки вскрывали-по 3 иыши из каждой группа,на 31-й день эксперимента выживаваих мышей также подвергали вскрытию,делали мазки-отпечатки с рассечением поверхности селезенки.Окраску проводили по Роыановскоыу-Гиша.В каждой препарате .на 5-10 полей зрения микроскопа подсчитывали общее число клеток ( около 300-500):лимфощ!ты,нейтрофилы,моноциты,эозинофнлы и большие базофильные клетки с бластноу структурой ядра.Полученные данные обрабатывали методой вариационной статистики.

Для изучения влияния иммуномодуляторов на иммуногенность противо-пастереллезной вакцины проводили опыты на телятах кассой 100-250 кг.

Животные бяли разбиты на 5 групп по 5 голов в каждой.

1 группа телят получала вакцину в дозе- 3 мл на I голову подкожно и однократно.

2 группа получала вакцину в дозе по. 3 мл на I голову и В-активи- • на подкожно в дозе 3 иг однократно.

3 группа телят получала вакцину в дозе по 3 мл на I голову и Т-активина подкожно в дозе I ил однократно.

4 группа телят получала вакцинусв дозе 3 мл,Т-активин в дозе I мл и В-активин в дозе 3 мг подкожно«однократно.

5 группа контрольная,животным не вводили ни вакцину,ни икмуномо-дуляторы.

Кровь от ьсех групп исследовади на наличие противапастереллезных антител методом латекс-агглютинации до начала опыта, через 14 и 28 дней после начала опыта а лаборатории микробиологии.

Определение иммуноглобулинов классов А,в и U проводили по Менчин в лаборатории НИЛ болезней молодняка.

Всего в работе било использовано 75 проб и 25 голов гелях.

Для изучения воздействия иимуномодуляторов при экспериментальном пастереллезе на телятах формировали две группы клинически здоровых телят в возрасте 1,5 месяца с массой 80-150 кг.Измерение температуры проводили утром и вечером.

X группа. Треп телятам непосредственно перед заражением культурой Засторелла мулиоцида по I мл ( 0.000 мк.т) ,а также иммуномодулнторы Г-активин в дозе I мл и В-активин в дозе 3 нг на одну голову.Культуру в дозе I мл вводили телятам внутримыиечно и через 30 мин животт ' шм вводили Т- и В-активин,подкожно и однократно.

2 группа (контрольная).Трех животных подвергали заражении культу-юД пастерелла в тех же дозах,как и в 1-й группе.

За телятами проводили ежедневной клинический контроле.

Для специальных исследований б^ли- стао'илкзированнуп кровь с *£? / ' '

■определения количества лейкоцитов,Т~ и В-лимфоцитов.Получали сыворотку крови для определения бактерицидной активности иммуноглобулинов и специфических антител.

Брали смывы из носовой полости для выделения бактериальной исходнуц культуру пастерелл.

Всех телят,павших в течение периода наблюдения,подвергали тщательному патморфологическому и гистологическому исследованию органов павших животных.

Патмореологические исследования проводили на кафедре патанатошш.

Все методы выполняли согласно "(¿етодическим указаниям по тестированию естественной резистентности телят" (Емельяненко П.А. и др., 19о0).

2.2. Результаты исследований 2.2.1. Клиническая картина • У контрольных мышей через несколько часов после заражения снижался аппетит,они становились малоподвижными и пали на третий день опыта.При вскрытии отмечали увеличение селезенки в 2-4 раза,кровоизлияния в легких,кишечнике,почках,печень в виде беспокойства или угнетения.У павших мышей наблюдали после вскрытия,отмечали незначительное увеличение .селезенки с мелкими некротическими очагами в легких,печени и почках.Первоначальные исследования были посвящены изучению профилактического действия иммуномодуляторов при экспериментальном пастереллезе на белых мышах.Установлено,что профилактическая э.^ек-тилнооть Т-активина при экспериментальном пастереллезе составила В-активина - 70'^,при совместной применении Т- и В-актившш -

70%.

Дальнейшие исследования посвяцены изучении совместного дейс "-я иммуномодуляторов и вакцины при экспериментальном пастереллезе, с ¿лих ¿.шпах.В результате исследований установлено,что профилактическая ;.;-:т1:вность Т-активина при эксперт,'витальном пастереллезе на 5елых ныиах составила В~активина - 71^, Т- и В-активина - 75 ^.вакцина - 73,и при совместном применении Т-активина,Е-актк^на и вак-цлчы - 93,В контрольной группе все мыии погибли на 2-7 день после 5;-ра;шння.Т;ж1м образом,наилучший эффект при экспериментальной пастереллезе ни белых мишах был получен при совместном введении вакцины и иммуномодуляторов.При вскрытии мышей на 21-й день опыта видимых изменений,характерных для пастереллеза.не наблюдали в сравнении с контролем.

2.2.2. Результаты цитологических исследований селезенки у белых мышей при экспериментальном пастереллезе

При проведении исследований больных,страдающих пастереллезои.надо учитывать не только длительность периода лизни и процент выживания животных,но также количество клеток у них в селезенке.Цитология иаэ-ков-отпечатков у контрольных мыаей показала уменьшение количества плазыобластов.

Анализ исследования в динамике клеточного состава селезенки белых мышей показал,что уде на 5-й день после начала опыта увеличилось число базофильных клеток с бластной структурой ядра,эозинофильных, иейтрофильных и ионоцитных клеток.

В труппе мышей,получавших Т- и В-активин установлено,что в 5-й, 11-й,18-й и 27-й день после заражения процент различных клеток сос- ■ тавлял:лимфоциты - 62,21 * 1,25?«;61,07 * 1,29?*; 57,27 ± 1,28,%; 64,10 * 1,24£;

нейтрофилы - 29,4 * 1,18?.; 30,1 * 1,18'/,; 33,2 ± 1,22?»; 29,7 * 1,18?ь; моноциты - 1,27 ± 0,28/-; 1,4 * 0,5>; 3,53 ± 0,47?о; 1,23 ± 0,28?= ; ' эозинофилы - 0,70 * 0,22а; 0,73 ± 0,22?ь; 2,В7 * 0,43?»; 1,34 * 0,29^;. базофилы - 6,5 - 0,6ЧУ, 6,7 * 0,65?г>; 3,13 ± 0,45?;,; 5,81 * 0,49?»;

Во второй группе мыыей,получавших вакцину.количество клеток,установленных на 5 - II - 18 и 27-й день составляло: лимфоциты - 62,3 4 1,25/ь; 60,66 * 1,22£; 44,67 ± 1,28^; 53,0 * 1,29% нейтрофилы - 33,4 ± 1,21£; 37,33 * 1,25?,; 47,73 * 1,29^; 40,1 * 1,27% моноциты - 2,0 ± 0,35/ь; 0,9 * 0,24^; 2,00 * 0,36?»; 1,4 ± 0,3?«. эозинофилы - 1,4 1 0,30£; 1,47 * 0,31?.; 3,07 * 0,44^ 2,0 ± 0,36?» базофилы - 0,93 ± 0,24?»; 5,6 1 0,59^; 2,53 * 0,417«; 3,47 ± 0,47?* соответственно.

Таким образом,при введении вакцины на 18-й день опыта количество лимфоцитов снизилось,но соответственно увеличилось количество нейт-рОфИЛОЕ и эоэинофилов.

В группе «гышей.получаьаах Т-ахтивин,В-активин и вакцину установили,что в 5-11-18- и 27-й день процент различных клеток составлял: лимфоциты - 61,67 * 1,26; 58,13 * 1,27?.;51,33 * 1,29?*; 64,53 * 1,24?Ь нейтрофилы - 30,06 * 1,17?.; 30,9 4 1,29?в; ^0,7 * 1,27?с;28,73 * 1,17?0 моноциты - 1,27 * 0,28?,; 1,4 ± 0,30?.; 2,1 * 0,37?.; 1,3 * 0,27>з ' эозинофилы - 1,2 * 0,27?.; 1,3 * 0,29?.; 2,93 * 0,43?.; 1,45 0,47?. базофилы - 5,81 1 0,60/.; 8,06 ± 0,70?.; 2,87 * 0,51?ь: 4,13 1 0,51?. соответственно.

В этой группе наибольшее количество больших базофильных клеток с бластной структурой ядра приходилось на П-е сутки,нейтро^илоя - на

18-1! день и лимфоцитов на- 27-й день,в отличие от мышей,получавших вакцину.У контрольных нишей (физиологический раствор) установили на 5-11-18 и 27-Я день количество различных клеток в процентах:' лимфоциты - 75,53 * 1,21%; 66,6 * 1,22%; 67,3 * 1,21%; 66,01 * нейтрофилы - 28,4 ± 1,26%; 28,86 ■* 1,17%; 28,8 * 1,17%; 22,47 * 1,18% моноциты -'2,0 ± 0,36%;2,0 * 0,37%; 1,13 * 0,27%; 1,3 ± 0,2.9% эозинофилы - 1,13 ± 0,27%; 1,8 * 0,34%; 1,3 ± 0,29%; 1,53 1 0,32%.

Полученные данные позволили сделать следующее заключение:изиене- ' ния в селезенке кышей,получавших иммунвшодуляторы раздельно и совместно с вакциной»свидетельствуют о повышении иммунологической функции селезенки.

2.2.3. Результаты изучения действия противопастерел-лезной вакцины и иццуномодуляторов на телятах ■

. Нами были проведены серологические исследования сыворотки крови • телят до и после введения пастереллезной вакцины совместно с иимуно-иодуляторами через 30 дней.

Серологические исследования сывороток крови телят показали наличие антител против серотипа А,В и Д,а также иммуноглобулинов А,6 и 11.

Установлено,что титр антител против серотипа В пастерелл увеличился на 14-й день в Зраза и сохранялся до конца периода наблюдения.

У животных,получавших В-активин и вакцину,титр увеличился на 14-й день в 4 раза и в 5 раз на 30-й день и составил 1:19,2 - 5,724 до введения; I: 76,8 1 22,898 на 14-й день и 1:89,6 * 34,347 на 30-й день дпыта.

В группе животных,получавших Т-активнн и вакцину,титр антител .увеличился на 14-й день в 3 раза,сохранялся до 30-го дня и составил 1:22,4 * 8,586 и 1:76,8 * 22,898 соответственно.

В группе телят,получавших Т-активин,В-активин и вакцину,титр увеличился в 6 раз на 14-й день,сохранялся до 30-го дня лосле введения и соответствовал 1:22,4 - 8,586 до введения и 1:153,6 * 45,796 на 14-й день после введения.Это подтверждает,что Т-активи и В-активин положительно влияли на увеличение титра противопастереллезных аНТИ-'/еЛ.

У животных,получавших только вакцину,титр увеличился в 2 раза на 1л-й день и сохранялся до 30-го дня ( 1:22,4 * 8,586 до введения и 1:57,6 * 11,449 на 14-й день после введения).

В группе телят,не получавших препарат,титр антител снизился к 30-му дню после введения и составил 1:9,6 2,862 и 1:6,4 * 2,146 соответственно.

При введении Т-активина,В-активина и вакцины титры противопзсте-реллеэных антител были наиболее высокими.

■ При определении титров антител против серотипа А установлено,что у контрольных животных титры снизились с 14-го по 30—й день и составили 1:38,4 i 11,449 и 1:28,8 * 5,724 соответственно.

В опытной группе телят,которые получили только вакцину,титр антител увеличился в 8 раз и 10 раз на 14-й и 30-й день после введения i составил 1:28,8 * 5,724 до введения препарата, 1:40,96 * 137,388 i 1:641,4 i 409,6 соответственно.

В группе телят,которым ввели вакцину и В-активин,титры антител 'величились в 20 раз по сравнению с исходными.

У животных,который вводили Т-активин,В-активин и вакцину,наблю-али самые высокие титры антител,особенно на 14-й день поело введо-

ия,которые пппшышо сохранялись до 30-го дня и составили. 1:1638,4 -49,552.Телятам,которым ввели вакцину и Т-активин.повышение титра

ыло в 20 и 25 раз выше,чем в начале опыта и составили 1:19,2 *

,862. до. введения , 1:921,611 * 183,104 и 1:1228,8 * 366,368 на'

и 30-Я'день после'введения соответственно.

Далее были изучены титры антител у телят против серотипа Д пас-

зрелла мультоцида.

В контрольной группе отмечалось снижение титра антител у животных

течение исследования.

Во второй группе- (вводили вакцину) титр антител достигал- 1:256,00

28,62 (до-введения он составлял 1:14,4 * 2,862).

В третьей группе телят,которым вводили В-активин и вакцину,титр

тител Lia 14-й день достигал 1:665,6 i 263,327, т.е. почти в 50 раз

льне,чем предыдущие, и на 30-й день после введения увеличение тит-

продолжалось ( 1:716,8 1 274,776).

В 4-й группе животные,которые получали Т-активин и вакцину,титр зтигал 1:819,2 * 274,776 на 14-й день и сохранялся до 30-го дня.

В' 5-И группе животных, но луч евших Т-активин,В-актитн и вакцин}/, установлено,что на 14-й день после введения титр антител достигал 1:1228,8 * 503,756 ,т.е. почти в 96,25 раз выше,чем предыдущий и затем сохранялся до 30-го дня.

Таким образом,наибольшие тигры антител против всех серотипов пастерелд установлены при совместном введении вакцины,Т-активина и В-активина.Титры антител были в 3-4 раза выше по сравнению с группами телят,иммунизированных одной вакциной.

Далее было изучено содерхание иммуноглобулинов класса в в сыворотке крови телят установлено,что в 1-й группе (контроль) содержание иммуноглобулинов уменьшилось и составило 12,8 * 2,146 до начала опыта и 12,4 1 2,153 на 30-й день после начала исследования.

Во второй 'группе (введена одна вакцина) содержание иммуноглобулинов класса в у животных увеличилось почти в два раза и составило 23,1 * 2,146.

В третьей группе (В-активин и вакцина) установлено,что содержание иммуноглобулинов увеличилось в 2-3 раза ( 33,3 * 4,311 и 46,6 * 3,935) на 14-Й и 30-й день соответственно.

В 4-й группе (Т-активин и вакцина) увеличение концентрации иммуноглобулинов класса в было почти в два раза выше и составило 12,4 * 2,162 до введения; 28,0 * 8,904 и 29,3 ± 7,156 на 14-й и 30-Й день после введения соответственно.

В 5-й группе содержание иммуноглобулинов класса в также увеличилось на 14-й и 30-й день и составило 12,4 * 2,161 до введения и 44,6 * 3,935 и 46,6 1 3,935 соответственно.

Далее было изучено содержание иммуноглобулинов класса и в сыворотке крови телят всех групп.

Было установлено,что в группе контрольных телят произошло снижение с 0,336 1 0,059 до 0,286 * 0,028 до и 30-й день после начала опыта.Животных,которым вводили только вакцину.установлено увеличение содержания иммуноглобулинов класса М в 1,5 раза.

«

В третьей группе животных (В-активин и вакцина) установлено увеличение концентрации иммуноглобулинов на 14-й день в 3,5 раза и их содержание сохранялось до ЗО-го дня после введения препаратов.

В 4-й группе (Т-актиэин и вакцина) уровень содержания иммуноглобулинов класса увеличивался менее,чем в 2 раза и составил 0,336 * 0,059 и 0,614 i 0,045.

В 5-й группе (Т-активин,В-активин и вакцина) установлено,что уровень содержания иммуноглобулинов класса М увеличился на 14-й день и 30-й день после .введения препаратов и составил от 0,336 * 0,089 до введения до 1,39 * 0,080 и 1,43 * 0,085 соответственно.

И,наконец,было изучено содержание иммуноглобулинов класса А в сыворотке крови телят. .

Установлено,что у всех групп животных до введения препаратов иммуноглобулины класса Л отсутствовали.

Во'второй группе животных обнаружены иммуноглобулины класса А и их уровень достигал 0,5 ^ 0,00,который сохранялся до 30-го дня.Э.тим нивотным вводили только вакцину.

В 3-й группе (В-активин и вакцина) увеличение содержания иммуноглобулинов класса А было почти в 2 раза после введения препаратов и составило от 0,652 1 0,135 до 0,812 * 0,137 на 14-й день и 30-й день.

В 4-й группе уровень содержания иммуноглобулинов класса А составил от 0,592 ¿ 0,135 до 0,652 1 0,135 на 14-11 и 30-й день соответ-t*

ственно.

В 5-й группе (В-активин,Т-активин и вакцина) содержание иммуноглобулинов составило от 1,1 * 0,134 до 1,36 * 0,214 на 14-й и 30-й день соответственно.

2.2.4; Профилактика эксперииентельиого пестереллеза ' •. телят с помощью Т- и В-активиков

Ь опыте было взято 6 телят.Из них 3 опытных и 3 контрольных.Все телята перед опытом были здоровы.Всех телят заразили внутримышечно культурой Пастерелла мультоцида в дозе 8000 микробных клеток..

3 опытных теленка получили подкожно по I мл Т-активина и 3 мг В-активина.Иммуномодуляторы вводили в последующие 3 дня по 2 раза в день.У контрольных телят через 6 часов после заражения наблюдал^ резкое угнетение общего состояния,неподвижность,сухость носового зеркальца,конъюнктивиты,серозные выделения из носовой полости,затрудненное дыхание.Смерть наступила через 24 часа с явлением поноса.

При вскрытии павших животных патологоанатомические изменения характерищовались геморрагическим диатезом в большинстве органов, множественными кровоизлияниями,воспалительной гиперемией.В подкожной клетчатке регистрировали разлитые серозно-фибринозные инфильтраты и . выраженные серозно-фибринозные инфильтраты и геморрагическое воспаление желудка и всего кишечника;из органов павших телят во всех случаях выделяли исходную культуру пастерелл.

В опытной группе телят регистрировали на 2-е сутки после зараже- . ния заболевание.Течение инфекции не отличалось от болезни телят контрольной группы.Все животные пали через трое суток после начала опыта.

Срок наблюдения показал,что показатели крови,количество Т- и Б-лимфоцитов,температура, пульс «дыхание,фагоцитарная активность у. опытных телят были лучшими по сравнению с контрольными.

Полученные данные показывают,что иммуномодуляторы продлевали жизнь животных при экспериментальном пастереллезе в 3 раза,но действие препаратов было не совсем точным в виду явной передозировки пасхерелд.

При исследовании р;;да показателей крови опытных телят било обнаружено,что изменения в содержании эритроцитов крови до и посла заражения значительно ниже и составило 7,26 - 0,40 до введения и 6,97 - 0,38 ( х 10*? /л ) через 3 дня после введения.

Содержание лейкоцитов ( х 10 /л ) снизилось с 10,7 - 0,39 до 9,50 ± 0,32, лимфоцитов от 5,60 * 0,1В до 6,37 ± 0,23, увеличилось тагаз-количество нейтрофилов и составило от 2,63 0,42 до. 3,45 ± 0,40.

У контрольных животных полученные данные не сравнивали потому,что все телята пали через 18 часов.

Далее было изучено содержание Т- и В-линфоциюв и установлено,что процент Т-лиыфоцитов увеличился на 3-й день и составлял 25,2 ^ 0,8 до введения и 30,2 - 1,4 через 3 дня после введения.

Процент В-лиифоцитов увеличился от 13,8 - 0,8 до 15,9 - 1,1 до введения и через 3 дня после введения препаратов соответственно.

У контрольных телят .изучение этих показателей не представлялось возможным из-за гибели их через 18 часов после начала опыта.

Определенно фагоцитарной активности нейтрофилов крови телят показало-чяо процент фагоцитоза увеличился на 3-й день опыта и состав;-:; от 54,3 * 2,40 до'начала эксперимента и. 64,60 ± 2,01 лослэ введения иымупомэдуляторов.

Индекс фегоиитоза составил 1,12 - 0,09 и 2,44 - 0,02 до начала и на 3-й день опыта соответственно.

Процент переваривания увеличился с 55,4 - 3,6 до 72,0 - 4,7 до и пос.-.е начала опыта соответственно.

У контрольных телят исследования не проводили в связи с гибелью всех животных через 18 часов после начала опыта.

В Ы В О Д ■ к

1. При экспериментальной пастереллезе на белых мышах про- . филзктичеслая эффективность Т-активина составила 40^, В-активина-70/1,совместное применение Т-активина и В-активина предохраняло

от гиболп 75'/и зараженных животных.

2. Профилактическая эффективность пастереллезной вакцины при экспериментальном пастереллезе на белых мышах составила 73,3^,при совместном применении вакцины,Т-актнвина и В-активина-93,

3. Цитологические исследования селезенки белых мышей при экспериментальном пастереллезе при использовании иммуномодулято-ров показали резкое повышение иммунологической функции этого органа.

4. Серологические исследования крови телят,привитых проти-вопастереллезной вакциной и иммуномодуляторами,показали резкое увеличение титров антител в 2-5 раз против серотипов А,

В и Д по сравнении с животными,получавшими только вакцину.

5. Установлено,что при совместном введении пастереллезной вакцины и иммуноыодуляторов телятам содержание иммуноглобулинов к 30-му у титров резко увеличилось по сравнению с контрольными животными:класса 0 почти в 4 раза.класса II - в 5 раз,класса А -в 12 раз.

^РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Предлагается для профилактики пастереллеза телят и повышения иымуногенности пастереллезной вакцины применять иммуномо-дуляторы Т- активин и В-активин.

2. Считать целесообразным включить в учебную программу курса эпизоотологии вузов применение иммуномодуллторов с целью профилактики пастереллеза крупного рогатого скота.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО Т21Е ДИССЕРТАЦИИ

1. Профилактическая эффективность Т-активина и В-актившш при экспериментальном пасторэллезе на белых милах // Су мл Ловом 11, Е.С.Воронин. lies, сборн. науч. трудов МВА.Москза, 1391г.,с.31-32.

2. З.М.Бедаова: Межвузовский сб. науч.тр./Моск.вет.акад.им.КиИ. Скрябина.-M.,I99I. - C.3I-32.