Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Полимеразная цепная реакция и иммуноферментный анализ в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота
- Ученая степень
- кандидата ветеринарных наук
- ВАК РФ
- 16.00.03
Оглавление диссертации Усольцев, Константин Валерьевич :: 2001 :: Казань
Введение
I. Обзор литературы
1.1 Биохимическая структура микобактериальной клетки
1.2 Иммунитет при туберкулезе
1.3 .Методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота
1.3.1 Эпизоотологические данные
1.3.2 Клинический метод 14 L .3.3 Аллергический метод
1.3.4 Патолгоанатомический и гистологический методы
1.3.5 Бактериоскопический метод 18 I .3.6 Бактериологический метод
1.3.7 Биологический метод
1.3.8 Серологическая диагностика . 22 L4 Иммуноферментный анализ = .', " ' 24 .5 Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота иммуноферментным 27 методом
6 Полимеразная цепная реакция
7 Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза
Материалы и методы исследований
1 Материалы
2 Методы исследования
Результаты собственных исследований
1.2 Оценка методов выделения ДНК M.bovis и проведение амплификации 49 >азличными тест-системами. Определение чувствительности полимеразной (епной реакции. Определение специфичности полимеразной цепной реакции.
2.1 Оценка методов выделения ДНК M.bovis и проведение амплификации 50 •азличными тест-системами.
2.1.1 Оценка метода выделения ДНК M.bovis и проведения амплификации 50 огласно инструкции тест-системы «МТБ-com» ЦНИИ эпидемиологии.
2.1.2 Оценка метода выделения ДНК M.bovis и проведения амплификации 51 огласно инструкции тест-системы НПО «Нарвак».
2.1.3 Оценка метода выделения ДНК M.bovis согласно инструкции набора 51 еагентов «Фаст-преп» ООО НПБО «ё» (г. Пущино, Московская область, Вл. Баранов) и проведение амплификации согласно инструкции тест-системы 1ПО «Нарвак».
2.2 Определение чувствительности полимеразной цепной реакции.
2.3 Определение специфичности полимеразной цепной реакции.
1 Результаты комплексного исследования на туберкулез крупного рогатого 53 кота в хозяйствах республики Татарстан. (РТ) Обсуждение результатов ыводы
Грактические предложения
Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Усольцев, Константин Валерьевич, автореферат
Актуальность темы. Туберкулез крупного рогатого скота представляет большую угрозу для животноводства, поэтому является предметом изучения многих исследователей. Существующие методы диагностики этой инфекции требуют усовершенствования. Так основной метод исследований - туберкулиновая проба не выявляет в стаде всех больных туберкулезом животных. Это вынуждает проводить многократные повторные исследования, что значительно затягивает сроки оздоровления неблагополучных стад. В то же время при исследовании животных в благополучных по туберкулезу пунктах на туберкулин в ряде случаев реагирует большое число здоровых животных, что приводит к значительным экономическим потерям из-за необоснованной сдачи на мясокомбинат реагирующих на туберкулин, но здоровых животных. Для дифференциальной диагностики в этих случаях применяют громоздкую и дорогостоящую схему с привлечением ветеринарных специалистов.
Методы лабораторной диагностики туберкулеза также весьма громоздки, длительны по времени и требуют значительных затрат (питательные среды, реактивы, лабораторные животные). В соответствии с действующей инструкцией для постановки диагноза необходимо выявить специфические туберкулезные изменения в органах и тканях убитых с диагностической целью животных или выделить культуру возбудителя туберкулеза бычьего или человеческого видов.
Современные достижения зарубежной и отечественной биологии и медицины открывают перспективы в создании нового поколения методов диагностики с высокой чувствительностью и специфичностью, таких как имму-ноферментный анализ и полимеразная цепная реакция, которые в мировой практике нашли широкое применение для ранней диагностики вирусных и микробных инфекций.
На кафедре биохимии КГАВМ был разработан способ получения антигена M.bovis, который обладает специфичностью, достаточной для использования его в иммуноферментном анализе при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота (112, 78, 131, 7) и рекомендован для лабораторных исследований. Показано, что метод ИФА позволяет полнее выявлять реагирующих на туберкулез животных. Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота находится в стадии изучения, хотя предложен ряд праймеров для этой цели (189, 125)
Возможность выявления иммуноферментным методом малых количеств антигена в исследуемом материале или специфических антител в сыворотке крови, а полимеразной цепной реакцией - единичных микобактерий в исследуемых пробах, представляет большой интерес в разработке и совершенствовании этих методов для диагностики туберкулеза.
Цель и задачи и исследования Целью работы являлось совершенствование методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота - иммуно-ферментного анализа и полимеразной цепной реакции и внедрение их в широкую ветеринарную практику.
Для выполнения ставились задачи:
1. Отработать метод полимеразной цепной реакции с изучением ее чувствительности и специфичности.
2. Изучить сравнительную эффективность аллергической пробы, полимеразной цепной реакции и иммуноферментного анализа в производственном опыте.
Научная новизна. Определена высокая эффективность иммуноферментного анализа для выявления туберкулеза у животных, положительно реагирующих на ППД, а также не реагирующих на ППД.
Показано, что ИФА более эффективен при выявлении животных, пораженных туберкулезом, чем аллергическая проба. Показана высокая чувствительность и специфичность полимеразной цепной реакции в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота. Предложено усовершенствование этапа выделения генетического материала. Предложены праймеры наиболее вероятные для использования в полимеразной цепной реакции для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.
Практическое значение. Применение экспресс-методов прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота методами ИФА открывают широкую перспективу их применения для выявления эпизоотической ситуации в хозяйствах по туберкулезу. Использование этих методов на производстве позволили сократить сроки диагностики и дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.
Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на Международной научной конференции, посвященной 125-летию академии (Казань 1998 г., КГАВМ), Международной научной конференции, посвященной 70-летию образования зооинженерного факультета (Казань 2000 г., КГАВМ), Всероссийской конференции молодых ученых «Молодые ученные агропромышленному комплексу» (Казань 2000г., Академия наук), Республиканской научно-производственной конференции Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана (Казань 1999 г.), первой Международной конференции, посвященной 70-летию Башкирского аграрного университета (21-22 ноября 2000 года. Уфа 2000) Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ.
Внедрение. Результаты исследования используются в практике ветеринарной службы республики Татарстан, а также в лабораторных исследованиях Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, включены в учебный процесс по специальности эпизоотология, микробиология и биохимия.
На защиту выносится: Результаты исследования экспресс-методами -иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции в прижизненной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота и сравнительная оценка их чувствительности, специфичности и эффективности, что является существенным вкладом в своевременном обнаружении и ликвидации этой инфекции.
Заключение диссертационного исследования на тему "Полимеразная цепная реакция и иммуноферментный анализ в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота"
Выводы
1. Иммуноферментный метод анализа и полимеразная цепная реакция являются высокочувствительными и высокоспецифичными методами диагностики туберкулеза крупного рогатого скота. Они позволяют значительно сократить сроки исследования и повысить эффективность выявления больных животных.
2. Выпускаемые в настоящее время тест-системы ПЦР (НПО «Нарвак» и «МТВ-сош» ЦНИИ эпидемиологии МЗ РФ) позволяют выявлять наличие возбудителя туберкулеза КРС, но требуют усовершенствования метода выделения ДНК. Метод выделения генетического материала для ПЦР набором реагентов «Фаст-преп» (НПБО ООО «ё» г. Пущино Московская обл. метод Вл. Баранова) является высокоэффективным, снижающим затраты времени и труда, а также вероятность ложноположительных и лож-ноотрицательных результатов.
3. Тест-система НПО «Нарвак» является высокочувствительной, т.к. позволяет определить 150 микробных клеток в мл. Праймеры данной тест-системы являются высокоспецифичными к M.tuberculosis complex.
4. ИФА и ПЦР необходимо активно и широко применять в комплексе диагностических мероприятий против туберкулеза, особенно ПЦР, т.к. она является прямым высокочувствительным методом диагностики.
Практические предложения
1. В комплексе мер диагностики туберкулеза крупного рогатого скота рекомендуется использование иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции для ускоренной прижизненной диагностики.
2. Для эффективного выделения генетического материала ДНК рекомендуется метод выделения генетического материала для ПЦР по Баранову В. (ООО НПБО «ё» г. Пущино Московская обл.).
3. На основании изучения последовательности нуклеотидов ДНК генома M.bovis рекомендуется шесть праймеров для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота методом ПЦР
Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2001 года, Усольцев, Константин Валерьевич
1. Авербах М.М. Иммунология и иммунопатология туберкулеза // М., Медицина. 1976. - с 312.
2. Авербах М.М., Мороз A.M., Никоненко Б.В. Иммуногенетика инфекционных заболеваний // М., Медицина, 1985.
3. Авербах М.М., Романова Р.Ю., Инсанов А.Б. и др. Циркулирующие иммунные комплексы и микобактериальные антигены в крови больных Туберкулезом легких //ЖМЭИ, 1984.-Ш2. -с.91-94.
4. Аликаева А.П., Якушева О.В. Об идентификации выделенных от кур атипичных микобактерий // Труды ВИЭВ, 1978. -Т.47.-С.48-52.
5. Ахметов Т.М. Видеоспецифическая иммунохимическая характеристика антигенов M.bovis // Дис.канд.биол.наук. Казань, 1990.
6. Байгазанов А.Н. Совершенствование мероприятий при туберкулезе личных подсобных хозяйств // Туберкулез крупного рогатого скота и меры борьбы с ним // Новосибирск, 1986.- с.49-51.
7. Беклемишев А.Б., Хорошева Е.М. Дифференциальное выявление возбудителей туберкулеза в клиническом материале с использованием двухстадийной полимеразной цепной реакции. Билютень Сибирского отделения Рос. АМН. 1998 - №3. с.76 - 85.
8. Ю.Билько И.П., Матусевич В.Г. Современные представления об ультраструктуре и функции клеточной стенки микобактерий туберкулеза // Проблемы туберкулеза, 1986 №-с.3.
9. Благодарный Я.А. Источники туберкулеза и меры профилактики // Алма-Ата , 1980.-с. 145.
10. Благодатный Я.А., Кривцова А.Е., Бионская Л.И., Блохман И.М. Оптимизация методов бактериологического исследования на туберкулез и некоторые особенности его возбудителя // Проблемы туберкулеза 1986 №9 - с.З.
11. Бокун А.О., Шербоха Ю.И. Патоморфологические изменения при псевдоаллергических реакциях на туберкулин у крупного рогатого скота // Матер.б.Всесоюзн.конф. по патологической анатомии животных. -Тарту, 1977.-т.2.-с. 105-106.
12. Болдырев А.А. Введение в биохимию мембран // М.: Высшая школа. 1986 с.14 - 18.
13. Буряк Е.И. Эффективность разных способов при жизненной диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота // Ветеринария, 1986. -с.23-26. -№6.
14. Ванеева Л.И., Цветкова Н.В. Иммуноферментный метод и его настоящее и будущее // Иммунология, 1980. -№2. -с. 13-19.
15. Васильев В.Н. Микобактериозы и микозы легких // София. Медицина и физкультура. 1971.-с.384.
16. Васильев Н.В. Биохимия и иммунология микробных полисахаридов // Томск: Издательство университета, 1984 -303с.
17. Вахидова Г.А., Гильбурд Б.Ш., Акзамов Р.А. Определение методом иммуноферментного анализа специфических к туберкулину антител M.bovis класса при активных туберкулезе легких // Мед.ж. Узбекистана, 1987.-№9.-с.45-47.
18. Вишневский Б.И., Оттем Т.Ф., Марченко Л.А. применение прибора КЭФ для концентрации микобактерий туберкулеза // Лабораторное дело, 1986. -№5. -с.303-306.
19. Вишняков И.Ф., Цибанова Л.Я. Иммуноферментный анализ // Ветеринария, 1983. -№9. -с.68-70.
20. Выявление микобактерий с помощью полимеразной цепной реакции у детей и подростков // Проблемы туберкулеза 1996 - №1 - с.27 - 29.
21. Гудкин B.C., Горбатов В.А., Овдиенко Н.П. и др. Актуальный вопросы взаимодействия микобактерий с макрофагами животных // Современные проблемы профилактики и лечения зоонозных заболеваний и лейкозов. Минск. -1982. -с.77-79.
22. Гулевская С.А., Немсадзе М.Н. К вопросу о микрокапсуле микобактерий туберкулеза и корд-фактора // Проблемы туберкулеза, 1974. -№3. -с.71-76.
23. Гуткин B.C., Горбатов В.А. Востряков А.П. Индуцированная биохеми-люминесценция макрофагов при взаимодействии с клеточными оболочками микобактерий туберкулеза бычьего вида // Биохемилюминес-ценция в сельском хозяйстве. -М., 1986. -с.35-37.
24. Дзантиев Б.Б. Гетерогенные методы иммуноферментного анализа // Бюллетень ВИЭВ, 1985. -Вып.58. -с. 10-22.
25. Дмитриев В.А. Иммунохимия бактериальных полисахаридов /'/ 5 Всес. Биохим. Съезд «Наука. М., 1985 с.257.
26. Донченко А.С., Донченко В.Н., Мандро М.А., Середин В .А. Взаимосвязь клеточного и гуморального иммунитета при сенсибилизации различными микобактериями//Ветеринария, 1986. -№6. -с.28-30.
27. Емельяненко П.А., Дунаев Г.В., Кудлан Д.Г. и др. Ветеринарная микробиология -М., Колос, 1982. -245с.
28. Земская З.С., Дорожкова И.Р. Скрыто протекающая туберкулезная инфекция /./ М.: Медицина. 1984 с.86 - 94.
29. Зыков М.П., Ильина Т.Б. Потенциально патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов // М., Медицина, 1978. -161с.
30. Каграманов А.И., Макаревич К.М. Современные вопросы эпидемиологии и выявления туберкулеза // М., Алма-ата. 1977.-с.20 - 21.
31. Каграманов А.И., Макаревич Н.М. Современные вопросы и эпидемиологии и выявления туберкулеза // М. Алма-Ата, 1977. -с.20-21.
32. Кадочкин А.Н., Иванова Н.А. Современные данные о возбудители туберкулеза// Ветеринария, 1971. -№3. -с.28-30.
33. Каплин Н.Н., Головачева С.Н, О роли противотуберкулезных антител к различным химическим субстанциям возбудителя // Проблемы туберкулеза," 1977 -№5. -с.64-66.
34. Каримова A.M. Использование питательных сред с добавлением различных препаратов для дифференциации микобактерий // Иммунология, диагностика и лечение инфекционных болезней с/х животных. -Новосибирск, 1986. -с.27-38.
35. Карташева В.М. Об идентификации возбудителя туберкулеза // Ветеринария, 1971.-№3.-с.28-30.
36. Кассич Ю.Я. РСК и ее применение при оздоровлении стад крупного рогатого скота от туберкулеза // Дисс.докт.вет.наук. -М., 1979.
37. Кассич Ю.Я., Борзяк А.Т., Комлексная диагностика туберкулеза // Ветеринария, 1985. -№4. -с.28-29.
38. Кныш С.В. Серологические реакции при экспериментальном туберкулезе телят // Вестник сельскохозяйственной науки, 1968. -№1. —с. 17-18.
39. Ковалев Г.К. О дифференциации микобактерий туберкулеза // Ветеринария, 1984. №3 - с.72 - 73.
40. Коваленко И.В., Дорожкова И.Р. Обоснование и разработка выявления и идентификации форм микобактерий методом иммунофлюоресценции //ЖМЭИ, 1986. -№6. -с.35-38.
41. Козулицина Т.И., Макаревич И.М., Кадочкин A.M. Состояние и перспективы научных исследований по диагностике и профилактике туберкулеза и бруцеллеза и мерам борьбы с этим болезнями сельскохозяйственных животных // Тр. Сиб. НИВИ, Омск, 1980 с.65 - 68 .
42. Козулицина Т.И., Макоревич Т.М., Кадочкина A.M. Состояние и перспектива научных исследований по диагностике и профилактике туберкулеза и бруцеллеза и меры борьбы с этими болезнями с/х животных // Тр.сиб.НИВИ. -Омск, 1980. -с.65-68.
43. Кокуричев П.И. Туберкулез // Атлас патологической анатомии с/х животных. -Л., 1973. -с.39-53.
44. Колычев Н.М. Методы индикации и обезвреживания микобактерий туберкулеза на объектах внешней среды // Дисс.докт.вет.наук. -Омск, 1983.
45. Кондратьев В.Г. Бактериологическая диагностика и биопроба при туберкулезе крупного рогатого скота // Всесоюзн.научн.конф. -Омск, 1980.
46. Конопаткин А.А., Бакулов И.А, Нуйкин Я.В. и др. Эпизоотология и инфекционные болезни с/х животных // М., Колос, 1984. -с. 163-172.
47. Коромыслов Г.Ф., Авилов B.C. Иммуноферментный анализ и применение его в ветеринарии // Бюллетень ВИЭВ, 1985. -Вып.58. -с.6-9.
48. Коромыслов Г.Ф., Устинова Г.И., Овдиенко Н.П., Козин А.И. Сравнительная иммунохимическая характеристика диагностических компонентов из микобактерий // Труды ВИЭВ, 1984. -т.61. -с.3-9.
49. Коронелли Т.В. Липиды микобактерий и родственных микроорганизмов// М„ МГУ, 1984.-с. 18-68.
50. Коронелли Т.В. Липиды сапрофитных микобактерий // Дисс.канд.биол.наук.-М., 1980.
51. Кособуцкий Л.А. фаги микобактерий // Микробиология, 1971. -№1. -0.79-84.
52. Кузин А.И. Оздоровление животноводческих хозяйств от туберкулеза // М., Россельхозиздат. 1987. -141.с
53. Лазовская A.M., Сафронов В.П., Максимова Е.М. Серологическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота // Туберкулез крупного рогатого скота и борьбы с ним. -Новосибирск, 1986. -с.90-96.
54. Лаптева Н.А., Исаева А.Г., Торашенидзе Л.А. Состояние местного иммунитета при экспериментальном туберкулезе легких у морских свинок // Иммунология, 1985. -№2. -с.70.
55. Малахова А.Г., Устинова Г.И., Газарх З.С. Способ получения протеинов из культур микобактерий туберкулеза и кислотоустойчивых са-профитов для изготовления диагностических препаратов // Билютень ВИЭВ. 1979 №34 - с.36 - 37.
56. Маматова З.Б., Искандеров М.И. Иммуноферментный анализ для выявления бруцеллезных антигенов // Ветеринария, 1987. -№4. -с.26-27.
57. Марданлы С.Е., Васильева В.И., Рыбалкина Т.М. и др. Подбор специфических компонентов для постановки иммуноферментного метода с целью выявления маркеров вируса гепатита-А // Лабораторное дело, 1986. -№5. -с.294-296.
58. Мартма О.В. Современное состояние проблемы атипичных микобактерий в ветеринарии // Ветеринария, 1982. -№5. -с.22-26.
59. Мартма О.В., Тяхнас К.К. О возбудителях в течении бактериоза // Туберкулез крупного рогатого скота и меры борьбы с ним. -Новосибирск, 1986. -с.96-100.
60. Мирлина Е.Д. Ланцов В.А., Семеновский А.В., Олейник А.Н., Попова С.С., Маничева О.А., Вишневский Б.И. Диагностические возможностиметода полимеразной цепной реакции при генитальном туберкулезе у женщин // Проблемы туберкулеза у 1998 - № 1 - с.46 - 48.
61. Мникова J1.A., Авилов B.C., Гоголев М.М. Определение антител имму-ноферментным методом // Ветеринария, 1983. -№4. -с.64-66.
62. Мникова JI.A., Авилов B.C., Гоголев М.М. Применение иммуноферментного анализа в диагностике ротовирусной инфекции крупного рогатого скота // Бюллетень ВИЭВ, 1985. -Вып.58. -с.26-29.
63. Найманов А.Х. Туберкулинизация крупного рогатого скота // Ветеринария, 1980. -№.6. -с.39-40.
64. Нарожный П.А. (1971) -В кн.: Ротов В.И., Кокуричев П.И., Савченко П.Е. Туберкулез с/х животных // Киев, Урожай, 1978. -240.с.
65. Непоклонова И.В. Использование ИФА для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота // Дисс.канд.вет.наук, М., 1985.
66. Новак Д.Д. Туберкулез с\х животных. -Алма-Ата, 1977. -140.с.
67. Новошинов Г.П. Иммуноферментный метод // Методические указания. -Казань, 1985.-с.27.
68. Панин А.Н., Обухов И.Л., Шипулин Г.А. Правила проведения работ в диагностических лабораториях, использующих метод полимеразной цепной реакции // Ветеринария 1997 - №7 - с. 19 - 21.
69. Пантелеев О.А., Ванеев Л.И. Непрямой твердофазный метод иммуноферментного анализа, его точность и источники погрешностей // ЖМЭИ, 1986. -№3. -с.95-99.
70. Пантелеев О.А., Ванеев Л.И., Демченко Е.Н., Семенова Г.Б. Проблемы подбора концентрации реагентов в твердофазном иммуноферментном методе при определении концентрации антител // ЖМЭИ , 1987. -№4. -.80-85.
71. Петров А.А., Гертман М.И., Хабибулина С.Х., Сембирцев В.Е. Сравнительная оценка различных методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота // Интенсификация молочного скотоводства и пути увеличения производства молока. Челябинск, 1986. -с.32-33.
72. Пинчук Л. М., Лазовская А. Л. Липиды в таксономии и идеитификации микобактерий.-Горький, 1989.- 126 с.
73. Пинчук Л.М., Лазовская А.Л. Идентификация микобактерий с применением метода газовой хромотографии жирных кислот // Вопросы взаимосвязи туберкулеза человека и животного, Алма-Ата, 1981. -с.148-156.
74. Пинчук Л.М., Лазовская А.Л., Герасимова Г.И., Воронова Е.А. Сравнительное изучение высших жирных кислот липидов М.tuberculosis и M.bovis // Проблемы туберкулеза, 1982. -№3. -с.62.
75. Пожалова Р.В., Попова Л.С., Кузьмина В.В. Сравнительная оценка классического и ускоренного методов бактериологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота и птиц // Тр. Краснодарского НИВС, 1965. -т.З. -с.70-71.
76. Покровский В.И., Ермолин Т.А., Шабалина С.В., Настоящее и будущее иммуноферментного методоисследования в инфекционной патологии// ЖМЭИ, 1983. -№8.-с.3-7.
77. Приймак А.А., Владимирский М.А., Ермолин Г.А., Должанский В.М. Применение иммуноферментного твердофазного метода выявления антител к микобактериям для серологической диагностики туберкулеза // Лабораторное дело, 1986. -№9. -с.558-562.
78. Простяков А.П. Перспективы иммунохимических методов в ветеринарии // Ветеринария, 1983. -№11. -с.71-73.
79. Пташкин В.А., Гуткин B.C., Горбатов В.А. и др. РБТЛ и кожная аллергическая проба при сенстбилизации и экспериментальном туберкулезе крупного рогатого скота// Труды ВИЭВ, 1985. -т.63. -с.21-25.
80. Радюк С.Н., Мацевич Г.Р. Полимеразная цепная реакция в диагностике туберкулеза // Лабораторная диагостика 1997 - c.l 1 - 33.
81. Ротов В.И., Кокуричев П.И., Савченко П.Е. и др. Туберкулез с/х животных//Киев, Урожай , 1978. -240с.
82. Руманчик И.И., Соловенко А.А. Особенности аллергических исследований на туберкулез // Ветеринария , 1984. -№9. -с.30-31.
83. Сафин М.А. Совершенствование диагностики, профилактики и мер ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота // Дисс.докт.вет.наук. -Казань, 1980.
84. Сафин М.А. Туберкулез сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ним // Учебное пособие. -Казань, 1982. -72с.
85. Сафин М.А., Галкин Е.Б. Влияние гормональных препаратов на течение экспериментального туберкулеза // Матер.науч.конф. Казанского вет.ин-та.-Казань, 1971. -с.251 -252.
86. Сидоров А.К. Лабораторная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота//Ветеринария , 1969. -№12.-с.88-89.
87. Скотников О.И., Демпин В.В., Николаева Н.П., Мороз A.M., Литвинов В.И. Использование полимеразной цепной реакции в диагностике туберкулеза легких // Журнал микробилогии, эпидемиологии и иммунобиологии 1999 - №4 - с.81 - 84.
88. Солоненко А.А. Туберкулез и туберкулезоподобные болезни в Белоруссии // Дисс.докт.вет.наук. -Минск, 1983.
89. Солоненко А.А. Туберкулез и туберкулезоподобные болезни свиней в Белорусии // Дисс. док. вет. наук. Минск 1983.
90. Сорокина Н.В., Гаврилова Е.М., Егорова A.M., Колтовая Н.А. Свойства системы JgG—JgG человека в различных модификациях им-муноферментного анализа // ЖМЭИ, 1986. -№12. -с.68-72.
91. Тарасова Г.И. Корд-фактор, биологически активный гликолипид из туберкулиновых микобактерий // Успехи биологической химии, 1987.-т.8.-с. 194-205.
92. Тузова Р.В. Патогенез туберкулеза птичьего типа у млекопитающих // Проблемы туберкулеза, 1966. -№ 1. -с.21.
93. Тузова Р.В. Туберкулез с/х животных и птиц. -Минск, Урожай, 1983. -263с.
94. Туркебаева К.А., Благодарный Я.А. Патологическая анатомия туберкулеза млекопитающих и виды микобактерий // Алма-Ата, Наука, 1981.-216с.
95. Урбан В.П., Широбокова М.М., Данко Ю.Ю. и дрю Аллергическая диагностика туберкулеза крупного рогатого скота // Профилактика и ликвидация заразных болезней с/х животных и птиц. -Л., 1985. -с.80-85.
96. Фадеева Н.И., Дыхно М.М., Кочемасова З.Н., Кассирская Н.Т., Дегтярева Н. Выделение и изучение внутриклеточных белдков туберкулезных микобактерий // ЖМЭИ, 1980 № 12. с 39 - 42.
97. Федосеева B.C. Рубцова И.Н. Знание измененых форм возбудителя в диагностике туберкулеза // Научн. Техн. Бюл. СО ВАСХНИЛ, 1985 №32 с.22 - 27.
98. Хазипов Н.З. Тюрикова Р.П., Нуруллин А.А. Метод твердофазного иммуноферментного анализа для выявления туберкулезных микобактерий в суспензиях // Науч.тр. Казанского вет.ин-та, 1985. -с.98-101
99. Хазипов Н.З., Сафин М.А., Идрисов Г.З. Туберкулез крупного рогатого скота // М., Агропромиздат, 1985. -127с.
100. Харитонов М.В. Совершенствование методов дифференциации неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота // Дисс. канд. вет. наук. Казань. 1983 г.
101. Харитонов М.В. Разработка системы противотуберкулезных мероприятий в условиях широкого выявления неспецифических реакций на туберкулин. // Дисс. док. вет. наук. Казань 1991 г.
102. Ходун JI.M. Оптимизация аллергической и лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота. // Дисс. док. вет. наук. -Омск 1996 г.
103. Хоменко А.Г., Ерохин Н.В. Современные представления о строении M.tuberculosis.// ЖМЭИ, 1982. -№12. -с.33-40.
104. Хоменко А.Г., Макаревич Н.М., Кубин М., Бурьянова Б., Винокурова М. Опыт коллективного изучения нетуберкулезных микобактерий // Проблемы туберкулеза. 1981 №8. с.62 - 66.
105. Хоменко А.Г., Фадеева Н.И., Голышевская В.И.т Морфологические и биохимические изменения микобактерий туберкулеза в процессе химиотерапии // Проблемы туберкулеза, 1983. -№7. -с.48.
106. Чепик Г.В. Вопросы дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота // Матер.Всесоюзн.научн.конф.-Омск, 1980. -с.56-57.
107. Шарифуллин Э.А. Серологическая диагостика туберкулеза крупного рогатого скота и идентификация микобактерий // Дисс.канд.вет.наук.-Алма-Ата, 1981.
108. Шаров А.Н. Изучение эффективности применения симультанной пробы с комплексным аллеогеном из атипичных микобактерий (КАМ) при диагностике туберкулеза // Научн.труды ВГНКИ, 1985. -с.3-8.
109. Шаров А.Н., Седов В.А. Тест-системы ПЦР при туберкулезе. //Ветеринария № з. с.20 22.1998 г.
110. Шаров А.Н. Эффективность методов прижизненной диагностики туберкулеза. //Ветеринария №2,с.16. 2000 г.
111. Шебанов Ф.В. Туберкулез//М., Медецина, 1981.
112. Шлыгин И.В., Лакман Э.Д. Значение иммунологических реакций при эпизоотическом обследовании свежих и стационарных очагов ту. беркулеза крупного рогатого скота // Сборник НИВИ. -Омск, 1976.1. Вып.27. -с.35-41.
113. Шуцкая Е.И., Земинский Ю.Г., Дербикова Т.И., Недточный В.В. Химилюминисцентный метод в диагностике туберкулеза // Биохеми-люминесценция в сельском хозяйстве. -М., 1986. -с.90-92.
114. Юдин Г.А., Чулков Н.А. Дифференциалбная диагностика туберкулеза и ее экономическая эффективность // Научн.труды ВГНКИ, 1985.-с. 17-25.
115. Якупов Т.Р. Иммуноферментный анализ в диагностике туберкулеза крупного рогатого скота. // Дисс. канд. вет. наук Казань 1991 г.
116. Accaria N., Goldman D. Chemical composition of the cell wall of the H37RV strain of Mycobacterium tuberculosis // J.Bact., 1970. -NI02. -PJ33-736 .
117. Avrameas S. Coupling of enzymes to proteins withgluteraldehyde. Use of the conjugates for the detection of antigens and antibodies // Immu-nochemistry, 1969. -№6. -P.43.
118. Azuma J., Yamamura Т., Tahard Т., Onoue K. Isolation of tuberculin active peptides from cell wall fraction of human tubercle bacillus strain "Ayama B" // Jap.J.Microbiol, 1969. -V. 13. -P.220-222.
119. Benjamin R.G., Debanne S.M., Ma Y., Daniel T.M. Evalution of mi-cobacterial antigens in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the serodiagnosis of tuberculosis // J.Med.Microbiol., 1984. -V.18, #3. -P.309-318.
120. Bennet J.J Les difficulties d'interpretation lors du depistage de la tu-berculose bovine: remedes possible // Lyon, 1984. -P. 1-17.
121. Bhattacharya A., Ranadive S.N., Kale M., Bhattacharya S. Antibody-based ELISA for determination of immune complemes in clinical tuberculosis // Am.Rev.Respir. Disease, 1986. -V. 134, #2. -P.205-209.
122. Boguslaski R.C., Li T.M. Homogenous immunoassay // Appl. Bioch. And Technol., 1982.-V.7, #5.-P.401-414.
123. Chasey D. A simple and repid immununepoxidasae test for tehe detection of virus antigenes in tissue culture // J.Vet.record., 1980. #14. -P.506-507.
124. Cocito., Delville N. Biological chemical immunological and staining properties of bacteria isolatade from tissues of leprosy patients // Eur. J. Epidimiol., 1983 -№1 p.202 -206.
125. Daniel T.M., Debanne S.M. The serodiagnosis of tuberculosis and other mycobacterial diseases by enzyme-linked immunosorbent assay // Amer.Rev.Respir. Diseases, 1987 . -V. 135. -P.l 137-1151.
126. Daniel T.M., Oxtoby M.J., Pinto S. The immune spectrum in potients with pulmonary tuberculosis // Am.Rev.Respir.Dis., 1981. -V.123. -P.556-559.
127. Engvall E., Jonsson K., Perlman P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), quantitative assay of immunoglobulin G // Immunochem ., 1971.-V.8. -P.871-874.
128. Fisher L.N.M., Mauch H. Detection of mycobacterial antigenes by enzyme-linked immunosorbent assay using policlunal antibodies // Zbl. Bacterid., Microbiol. And Hys., 1986. -V.262, #2. -P.284.
129. Francis I., Seller R.I., Frost A.I. The effeciency and dose bovine purified protein derivative tuberculin // Australian veter. J., 1978. -#54. -P.45-47.
130. Gilmour N.J.R., Augus K.N. The specificity and senritivity of the fluorescent antibody test in cattle experimentally infected with M.avium and M.jonnei. //Res. In veter. Sc., 1976.-V.20. -#1.-P.69.
131. Grange J.M. The humoral immune response in tuberculosis : its nature, biological role and diagnostic usefulness // Advencesin Tuberculosis Research, 1984. -№21.-P. 1-78.
132. Grange J.M., Gibson J., Antonia B. The specificity of the humoral immune response to soluble Mycobacterial antigens in tuberculosis // The Infer. J. of Tuberculosis, 1980. V.61, #3.-P. 154-156.
133. Grange J.M., Kardjito T. Serological test for tuberculosis; con the problem of low specificity be evercome // Indian J. of Chest Diseases and Appl.Sci., 1982. -V.24, #2-3. -P. 108-117.
134. Gray G.R., Wong M.N.Q., Denielson S.J. The major mycolic acids of M.smegmatic // Progr.Lipid.Res., 1982. -V.21, #2. -P.91-107.
135. Gray G.R., Wong M.Y., Denicison S. Y. The major acids of M.smegmatis // Prog.lipid. Res., 1982. V21, №91 107.
136. Grenner G. Principles and applications of homogeneus and hetero-geneus enzyme immunoassay // Hoppe-Seyler's Z.Physiol.chem., 1982 -V.363. #9. -P1005-1006.
137. Griender K., Wendt K., Fuchs H.W., Boretius J. Atipische Mycobac-terion als Erreger enzootisch verlaufender Mastitigen // Mh.Veter.Med., 1984. -V.39, #21. -P.721.
138. Hawkey P.M. /7 Rev. Med. Microbiol. 1994. - Vol.5, №1 - 3. p.21 -32.
139. Hill H.R., Matsen J.M. Enzyme-linked immunosorbent assay and radioimmunoassay in the serologic diagnosis of infectious diseases // J-.Infect.Diseases, 1983. -V.147, #2. -P.250-263.
140. Hosen H. Moulds in allergy//J.Auth, a Res., 1977. #15.-PI51-156.
141. Imaeda Т., Kanetsuna F., Galine B. Ultrastructure of cell walls of genus Mycobacterium // J.Ultrastruct. Res., 1968. -V.25, #1-2. -P.46-63.
142. Janicki B.W., Wright G.L., Daniel T.M. Iselation and characterisation of mycobacterial antigens. I. Culture filtrate antigens of M.tuberculosis H37RV strain // In proceesings, 10th , Joint US. Japan Tuberculosis Res. Conf., 1975.-P.206-227.
143. Jarnagin J.L., Colgruve G.S. Identification of M.bovis using miniaturised thin-layer chromatography and morphologic characteristics // Amer.• J.Vet.Res., 1986. -V.47, #11. -P.2346-2348.
144. Juana Magdalena, Philip Supply, and Camille Locht. Specific Differentiation between Mycobacterium bovis BCG and Virulent Strains of the Mycobacterium tuberculosis Complex. Journal of Clinical Microbiology, September 1998, p. 2471-2476, Vol. 36, No. 9.
145. Kalish S.B., Radin R.G., Pheir J.P. et al. Use of an enzyme-linked immunosorbent assay techique in the differential diagnosis of active purmonary tuberculosis in humanse // J.Infec.Diseases, 1983. -V.147, #3. -P.523-530.
146. Karen G.L., Joseph O.F. Identificatione of cytoplasmic membrane protein antigens of Mycobacterium avium, M. intracellulare and M. scrofu-laceum // Can. J. Microbiol., 1989 v.35. №5 - p.529 - 534.
147. Kato M. Immunochemical properties of anti-cord factor antibody // In-fect.Immun., 1973 vl7 p.9 -13.
148. Kato M., Goren M. Synergistic action of cord factor and mycobacterial subfaticles on mytochochondria // Infect. Immunity, 1974. v. 10 - p.733 -736.
149. Kemp H.A., Morgan M.R.A. Studies on the determental effects of bivalent binding in a microtitration plate ELISA and possible remidies // J. Immun. Meth, 1986. -V.94, #1-2. -P.65-72.
150. Khuller G.K., Malik U., Subrahmanyam B. Immunological studies wich sulpholipids of Mycobacteria// Tubercl., 1982 v63, №2 - pi07 -.
151. Lamb J.R., Yong D.B. A nuvel approach to the identification of T-cell epitopes in Mycobacterium tuberculosis using human T-lymphocyte clones //Immunology, 1987 . -V.60. #1. -P. 1-5.
152. Larsson L. Use of gas chromatography-mass spectrometry selected ion monitoring for rapid diagnosis of mycobacterial infections, including tuberculosis // Rec.Rev. Mass Spectrom. Biochem., Meg. And Env. Res. 8. Amsterdam e.a., 1983.-P.49-54.
153. Lee H, Park HJ, Cho SN, Bai GH, Kim SJ. Species identification of mycobacteria by PCR-restriction fragment length polymorphism of the rpoB gene. J Clin Microbiol 2000 Aug;38(8):2966-71.
154. Lentonen O.P., Viljanen M.K. Antigen attachment in ELISA // J. of immunol. Meth., 1980. -#34. -P.61-70.
155. Seichi L.A., Zanetti S., Dupre I., Deloga G. Fadda G. Enterobacterial repetitive intergenic consensus sequences as molecular tagets for typing of Mycobacterium tuberculosis strains. J. of Clin. Microbiology. Jan. 1998, p. 128- 132 Vol. 36. №1.
156. Ma Yu, Wang Yu-Mei, Daniel T.M. Enzyme-linked immunosorbent assay using Mycobacterium tuberculosis antigen 5 for the diagnosis of pulmonary -tyberculosis in China// Amer. Rev. Res. Diss., 1986. -V.l 34, №6. -P.1273-1275.
157. Maggio T. Enzyme Immunoassay // CRG Press Inc. Boca Raton. -Florida, 1981.
158. Meyer T.J., Ribi E., Azuma J. Biologically active components from mycobacterial cell walls: suppression and regresior of strain 2 quinea pig hepatoma // J.Natl.Conser Instr., 1974. -V.52. -P. 103-111.
159. Mieko G„ Katsuko O., Vasio S. //1. Jap. Assoc. J. Infect. Dis 1995. v. 69-№5-p.539- 545.177.- Minnikin D.B., Minnikin S., Megan J. Mycolic acid paterns of species of Mycobacterium //Arch. Microbiol., 1984-v. 139 №2-p.225 231.
160. Mitre H. Die differenzierung van bakyerienspezies mit hilfe electro-phoretischer verfahren // Fortschr. Veter. -Med., 1978. -#28. -S.237-251.
161. Morris J.A., Stevens A.E., Stuart P. A pilot study to assess the usefulness of ELISA in detecting tuberculosis in bedgers // The Vet. Rec., 1979. -V. 104, #1. -P. 14.
162. Neil S.D., Hanna J., O'Brein J.J. Radiometric detection of mycobac-teris in abattoir specimens from tuberculin reactive cattle // Vet. Rec., 1986. -V.l 18, #11. -P.304.
163. Ngo T.T., Bovaird J.H., Lenhoff H.M. Separation free amperometric enzyme immunoassay // Appl.Biochem. EJiotechel., 1985. -V.l 1. -P.63-70.
164. Phillips A.P., Martin K.L., Horton W.H. The choise of methods for immunoglobulin IgG purification: yield and purity of antibody activity // J.Immun.Meth., 1984. -V.74, #2. -P.385-393.
165. Redmond W.B., Botes J.H., Engel H.W. Methods for bacteriophage typing of mycobacterium // Meth.Microbiol. London, 1979. -#13. -P.345-375.
166. Reich M., Affronti L.F., Wright G.L. Isolation and partial characterisation of the most immnologically reactive antigen from Mycobacterium tuberculosis H37RV culture filtrate // J. Tubercle, 1982. -V.63, #2. -P.99-106.
167. Rich A. The Patogenesis of Tuberculosis // Baltimore, 1951. -83P.
168. Richeldi L., Barnini S., Soltini S. // Eur.Res. J. 1995 - v.8. suppl.20 - p.689 - 700.
169. Rizvan M. Metobolism of Mycobacteria // J. Bioscience., 1985 V. №3-4-p.421 -431.1
170. Rodriguez, J. G., G. A. Mejia, P. Del Portillo, M. E. Patarroyo, and L. A. Murillo. 1995. Species-specific identification of Mycobacterium bovis by PCR. Microbiology 141:2131-2138.
171. Romero RE, Garzon DL, Mejia GA, Monroy W, Patarroyo ME, Murillo LA. Identification of Mycobacterium bovis in bovine clinical samples by PCR species-specific primers. Can J Vet Res 1999 Apr; 63(2): 101-6.
172. Rouillon A., Perdrizet S., Parrot R. Transmission of tubercle bacilli: the effect of chemotherapy // Tubercle, 1976. -V.57. -P.275.
173. Rubenstein К.В., Schneider R.S., Ullman E.F. "Hamogeneoas" enzyme immunoassay, New Immunochemical technique // Biochem. Biophys. Res. Common., 1972. -V.47. -P.846-851 .
174. Runyon E.N. Differentiation des mycobacteries anonymes (atipiques) et des bacilles tuberculosis des mammifires // Bull. Un.Int.Tubers., 1959. -V.29. -P72-82.
175. Sauer M.J., Foulken J. A., Morris B.A. Principles of enzyme immunoassay // Immunoassay Food Anal. London, New-York, 1985. -P.53-72.
176. Schaefer W.B. Serologic identification and classification of the atypical mycobacteria by their agglutination // Amer.Rew.Resp.Dis.,1965. -#92. -P.85-93.196'. Schuurs A.H., Van Weemen B.K. Enzyme immunoassay // Clin. Chem. Acta, 1977. -V.81. -P.l-40.
177. Straus E.W. Binding assay for detection of mycobacteria // USA, Montefiore Medical Centre, 1983.
178. Stroebel А.В., Richandson H. ELISA based serological diagnosis of pulmonary infection by Mycobacterium tuberculosis 9 II
179. Congr.lat.amer.microbiol., Sao Paulo, 1983.-Programa res. Sao Paulo, 1983. —P.234.
180. Takezo U., Yasuo M., Takeshi Y. Biochemical mechanisms of antibiotic resistance in a clinical isolate of M.fortuitum // Am.Rev.Resp.Dis., 1986. -V133, #4. -P.653.
181. Taylar F.G.R., Patel D., Baerne E. Comparison of sensitives of ELISA and radioimmunoassay for detection of class specific antibody in mour serum //J.Immun.Meth., 1983. -V.65, #1-2. -P.65-73.
182. Thoen C.O., Himes E.M. Pathogenesis of Mycobacterium bovis infec-tione // Prog. Vet. Microbiol. Immun., 1986. v.2. p 198 214.
183. Voller A., Barlett A., Bidwell D.E. Enzyme immunoassay with special reference to ELISA techiques //J.Clin., Patch., 1978. -V.31. -P.507-520.236
184. Williams G.T., Williams W.J. Granulomatous inflammation a review // J.Clin.Patch., 1983. -V.36. -P.723-733.
185. Yo Komizo Y., Yugi H., Merkal H.S. A method for avoiding false-positivereactions in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the diagnosis of bovine paratuberculosis // Jap.J.Vet.Sci., 1985. -V.47, #1. -P.l 1 1.