Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Показатели иммунологической реактивности организма животных при химио- и вакцинопрофилактике туберкулеза
КАЗАХСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННА НАУК Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт
ргв оа
< * гшн ДО6
г ^ На правах рукописи
УДК 619:616•982*21:615'371/372
УМАРОВА САУЛЕ КДЦЫРБЕКОВНА
ПОКАЗАТЕЛИ ИШ.1УНОЛОГИЧЕСКСЙ РЕАКТИВНОСТИ,ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ ПРИ ШИО- И ВАКЦИНОПРОШАКЭДКЕ ТУБЕРКУЛЕЗА
16.00.03 - ветеринарная микробиология, иммунология, эпизоотология и инфекционные болезни животных
АВТОРЕФЕРАТ
Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Алматы, 1996
Работа выполнена в лабораториях биотехнологии и биохимии и туберкулеза Казахского научно-исследовательского ветеринарно! института Казахской академии сельскохозяйственных наук
"Научные-руководители-;---доктор ветеринарных наук'
Б.Ф.КЕРИМЖАНОВА
кандидат биологических наук Л.В.КАЦОВА
Ведущая организация - Институт экспериментальной
ветеринарии Сибири и Дальнего Востока
Официальные оппоненты: доктор биологических наук,
профессор Ж.Ж.ЖУМАШЕВ
доктор медицинских наук Г.Т. ХАУАДАМОВА
Защита состоится ¿¿¿¿-/■¿Я- 1996 г. в часов
на заседании специализированного совета Д 55.03.01 при Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте по адресу: 480016, г.Алматы, проспект Райымбека, 223
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института
Автореферат разослан " " ^осо^ 1996 г.
Ученый секретарь специализированного совета,
доктор ветеринарных наук Б.З.Керимжанова
I. СЁЩАЯ ХАРАКТЬСТОКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Одним из важнейших условий развития животноводства является профилактика и ликвидация инфекционных Ч5о-леэней. Роль последних еще больше возрастает в связи с разукрупнением хозяйств, созданием крестьянских фермерских хозяйств и значительным увеличением поголовья скота в индивидуальном секторе.
Среди инфекционных болезней туберкулез крупного рогатого скота занимает особое место, так как наносит значительный экономический ущерб и представляет серъезну» опасность для здоровья людей.
В Казахстане по оздоровлению скота неблагополучных хозяйств от данной инфекции проделана большая многогранная работа, благодаря чему значительно улучшилась эпизоотическая ситуация. Если на качало 1976 года было 1038 неблагополучных хозяйств, то на 01.01.1996 г. их осталось 178, которые, в основной, сосредоточены в Северном к Центральном зонах республики.
С целью профилактики туберкулеза у крупного рогатого скота используют мзониазид и вакцину БЦЖ. Однако применение их ограничено недостаточно высокой напряженностью защиты от заражения возбудителем туберкулеза, вследствие чего я наблюдаются прорывы иммунитета и рецидивы а ранее оздоровленных хозяйствах у животных (Н.П.Оадиенко и др., 1983; Н.П.Оадиенко, 1986; Н.Н.Кощеев, 1989; А.С.Донченко., 1991). Поэтому проблема поводеняя нммуногеякых свойств средств хикяо- и вакцинопрофилазстигш эязьма актуальна.
Успешная профилактика инфекционных болезней требуггт глубокого знания зоех закономерностей возникновения, течения инфекционного процесса. С этих позиций особый интерес вызывает изучение показателей {шцунояагичесхой реактивности оргализш глеотких при хкиао- к эакцинопрофилактике инфекционных болезней и в первую очгргдь туберкулеза. Изучение иммунитета, механизмов его формирования на различных ст&лах течения нк$ехцяи представляет собой перспективное направление. Способность организма ямвотяого противостоят*. инфекция, нарушение "и восстановление иммунного статуса до а nce.se освобождения от возбудителя з значительной степени обусловлены напряженностью его защитных сил, то есть имаунныя ответом, Мммуниый ответ на внедрение и развитие возбудителя в организма животного - сложный, многокомпонентный процесс, который
при туберкулезе недостаточно изучен.
Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований являлось изучение показателей иммунологической реактивности срган-низма кипотних при хкмио- и вакцинопрофилактике туберкулеза.
Для достижения данной цели бш.и поставлены следусщ!« задачи:
1, Изучить е динамике содержание белков острой фазы, Т- к -В-ди>дАоццтое при химиопрофилактике туберкулеза изониазидом в опыте на морских сБинках. --
2, Изучить а динамико содержание белков, Т-к В-лимфоцитои при последовательном применении изониаэида и вакцины БдЖ с целью профилактики туберкулеза в опыте на морских свинках.
3, Определить некоторые неспецифические факторы резистентности организма и иммунологические показатели крови при вакцинации ЕЦЖ С применением иммуностимуляторов в опыте на кроликах,
4, Определить в динамике показатели белков и иммунокомпетент-ных клеток при иммунизации телят вакциной БЦД против туберкулеза
в экспериментальных условиях,.
5, Изучить в динамике содержание белков острой фазы и имму-некомпетентных клеток у телят, иммунизированных одновременно вакцинами из штаммов БЦД и 19 против туберкулеза и бруцеллеза в экспериментальных условиях.
Научная новизна. Впервые изучокы в динамике неспецифические и иммунологические показатели крови лабораторшх кивотных (морских свинок, кроликов) и телят при применении изониаэида, вакцины БЦЖ, сочетании изониаэида и вакцины БЦЙ, вакцины БЦЖ и иммуностимуляторов и одновременной вакцинации штаммами БЦЖ и 19; определена возмохчость применения показателей йеяков острой фазы - С-ре-активмого бе :са, гаитоглобина, церулоплазмина, ЕА-ЕАС-Б-лимфоцитов и Т-лимфоцитоь , антигекреактившх клеток для характеристики иммунного статуса организма животных; составлен комплекс тестов по определенно нммунокомлетенткых клеток и неспецифических факторов иммунобиологической защиты организма животного.
Практическая цепкость работы.На основания подученных данных подготовлена "Методические указания, по определение) кммунокоупе-тентных клеток и неспецифических факторов иммунобиологической заявить! организма животного", рлсмотренные и одобренные Ученмм Со-зетом Казахского КИВИ, утпержлгнше ШС КазАСХН от 17 кал 1996 г.,
протокол >11.
Основные положения, выносимые на защиту:
Экспериментальные исследования в динамике показаний иммуно-компетентных клеток и неспецифических факторов иммунобиологической защита организма аивотного при применении изониазида, вакцины БЦЕ, сочетании изониазида и вакцины БЩ, вакцины БЦЖ и иммуностимуляторов, одновременного применения вакцины из итаммов Б4Д и 19 в сравнении со здоровыми и больными животными.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: научных конференциях молодых ученых Казахского НИЕИ (1987, 1988, 1989 гг); научной конференции молодых ученых института экспериментальной биологии HAH PK (1969); заседаниях Ученого Совета Казахского ШЕИ (1990, 1996 гг); заседании сотрудников лаборатория туберкулеза и меялабораторном заседании сотрудников Казахского НИШ (1996 г).
Публикации. По материала« диссертации опубликовано б научных р*бот „
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 195 страницах машинописного текста и состой? кэ введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, аыводоз, практических предложений, списка литература и приложения. Работа иллюстрирована 12 таблицам я 21 рисункамя. Список литературы вклвчает 213 наименоваияЗ, в ton числе 26 ано-г5Т;гэд!гнх авторов:
2. ССВОТЕНШЕ ИССЛЯДОЭАШЯ 2Л. Уаявриалы » метода исследований
Работа заполнена а лабораториях биотехнологии и биохимии и туберкулеза Казахского ШЙ1 в период с 1986 по IS9S годы. Экспо-р;>*,;еетальныа исследования в дни&шссе поя&эвмиВ .тгмунокомлэтвнт-ш алеток и хеспсцифкческмх факторов кмяунобуологическоа защиты организма ячзотного при применении изониазида, вакцины БЦЖ, сочетании изониазида ¡1 вакцины БцЗ, вокциш БЦЗ и иммуностимуляторов, одкоаременного применения закциш из штаммов ЕЦ5 я 19 в сравнения со здорони«н я больными аивотичми <5нли проведены на 100 морских свинках живой маЙсоЛ 250-350 г; 12 кроликах зесом 2,0 - 2,5 яг; 25 телятах 1-4 иве возраста, подобранных по типу аналогов яявой массой SO-IOO кг.
- б -
При проведении исследований белков острой фазы С-реактиьньй белок (Срб) выявляли согласно "Наставлению по применению диагностической сыворотки к С-реактивному балку" (1981). Количественное определение гаптоглобина (Нр) сыворотки кровк проводили риваноле-выи методом по И.Й.Геронимус (1968). Количество церулоплазыина (ЦП) определяли по оксидазкой активности плазмы крови модифицированным методом Ревина (1985).
Бактерицидную активность сыаороткй^роЕи-спределядп-г.о-мехо^ ду 0.В.Смирновой и Т.А.Кузьмкной (1966). Лизоцимную активность сыворотки крови определяли по О.В.Бухарину (1971). Комплементарную активность сыворотки крови определяли по методу Л.С.Резниковой (1967) а модификации А.Б.Немного и О.В.Бухарина (1972). Бете.-лктичеекую активность сыворотки крови определяли по О.В.Бухарину, Л.Г.Дуда, Р.И.Бигеевой (1970).
Для определения лимфоцитов и их популяций в крови использовали реакцию розеткообразования с поиои;ью гритроцитарнах иаркеров. Постановку данной реакции проводили по унифицированной методике, разработанной а лаборатории молекулярной биологии и биохимии ЕИЭВ (Г.Ф.Корокыслов, В.Л.Солодовников, 1982), Основные этапы проведения иммунологических исследований включали?
1. выделение лимфоцитов из крови исследуемых кивотных;
2. приготовление эритроцитарнюс маркеров, необходимых для икыунохммического анализа поверхности лимфоцитов: для Т-клеток -маркер Е-РОК; В-клетон - ЕА-и ЕАС-РСК; для "икыункмх" к антигекш*-никобактерий туберкулеза - ЕГ-РОК; для "иммуннах" к антигенам бруцелл - ЕБ-РОК;
3. постановку реакций розеткообразования путем смешивания этих компонентов и создания условий для их взаимодействия, из которых после фиксирования образовавшихся коиплексов готовили постоянные препараты для учета результатов реакции, определения икмунокомпетенции лимфоцитов и численности их популяций в крови исследуемых животных.
Для выявления "иммунных" (антигенреактнвных) лимфоцитов использовали метод спонтанного розеткообразования после инкубации с туберкулином (Г.Ф.Корочыслов, В.Д,Солодовников, 1982) и бруцел-лином (Г.С.Суходоова и др., 1980).
Для определения абсолютной численности популяций лимфоцитов и крови ииеледуем'лХ кивотных проводили гематологические исследо-
. аания, Для этого абсолютное количество лейкоцитов в крови определяли в жидкости Тюрка путем подсчета в камере Горяева, а относительное количество лимфоцитов определяли при помощи микроскопа в мазках крови.
Для определения иммунокомпетентных лимфоцитов' также попользовали суспензии неразделенных лейкоцитов (лейкоконцентратов) по методу К.Л.Лебедева и И.Д.Понякина (1990).
Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводили по методу Ю.А.Гринзвича и Н.И.Алферова (1981).
Для учета степени пораженности органов морских свиноп применили цифровой индекс Ю.К.ВеЯсфейлера (1975) - чстырехбальиун систему с максимальным индексом поражения 22. Органы животных (кусочч ки печени, селезенки, легких» паховых лимфатических узлов) подвергали бактериологическому исследованию» которые проводили а следующем порядке: из органов от убитых яивоткых готовили маэки-отпе-чатки и окрашивали по Цяла-Нильсену, а гомогенат использовали для поееэа на две яичные среды (Гельборга, Левенштейна-Йенсэка) ¡я на полуикдкую питательную среду (ДИР) для/-форм м.:1гсОбак?9р:;>'..
2.2. Изучение содержания белков острой фазы, Т-и В-яимфацитов прм хнинопрофилахтике Туберкулеза изоютзядом а опыте на морских свинках
Для изучения влияния ииониазида при химиоярофилактикв туберкулеза кл содержание белков острой фазы (Срб, ЦП» Нр) и !стг«уно-домпетентних клстор' (Т-и В-л:«?£>ецитсв) ивпользоалли 50 ксрзких езинокс Уорские звмнкм 1 группы (30 голов) были зврлхбзм подкоямо дозй 0,001 иг/т И. во*!«, ат.О К ь течение двух месяцев подаер-Г1л:?сь даче нэомияэчдо пероу-плько из рпечета 30 иг/кг *ирсй ».<эссы.
5маоткые П гяушш (15 голов) так?« заражена ?1.Ъоу1я шт.8, ио не получали препарат. И группу (5 голов) составляли мнтактгае зивотны®.
На 10,20,30,45 а 60 су? дачи препарата, а также через 30,60 и 90 сут после прекращения дачн изониазидд гшзотннх по три головы из каждой группы взвешивали и подвергали декапетации. Брали кровь для биохимических и иммунологических исследований. Затем животных вскрывали, описывали йидимые патологоанатомичяские изменения, определяли индекс пораиенности и материал использоаали для бактериологических
исследований.
Анализ результатов экспериментальных исследований показал й динамике иммунологическую перестройку инфицированного организма морских свинок от момента начала дачи препарата с профилактической целью до конца срока применения, а также в период его прекращения. 'Гак, установлено увеличение содержания белков острой фазы в сыворотке крови мпрр.ких^-Винок-на-Щ^О-п-.'Ю-л.ут-наня гл опыта: церулоплазмина до 2,3 - 2,5 г/л против исходного 1,2 г/л; галтоглобина - до 1,9 г/л против исходного 1,4 г/л; положительная реакция на С-реактивнкй белок, тогда как у здоровья - отрицательная.
Определение Т-и В-лимфоцитов показало, что в начальный период внедрения патогенного возбудителя в организме морских свинок активируется выработка указанных имчунокомпетентных клеток и их содержание превышает уровень,чем у здоровых животных. У животных I группы содержание ЕЛ-В-ли«£оцятоа повысилось да 10 сут после дачи мзониазида от 12 до 20% и в дальнейшем отот подъем сохранялся на 20 и 30 сут исследований. Количество ЕАС-В-лкмфоцитов Б крови животных резко повысилось в начальный период исследований к составило 35$ против исходного 16$. И почти на этом уровне держалось ¡а период дачи препарата, хотя отмечено было лебольшоо его снижение к 45 сут до 26%. Количество Т-клеток увеличилось к 10 сут с 31 до 38%, но уде к 20 сут оно стало снижаться, в последующем уровень их держался в пределах нормы к составил около 30% с небольшим снижением на 30 сут исследований до 25%. Повышение содержания белков острой фазы н иммунокомпетеитных клеток з начальный период после заражения ы дачи препарата свидетельствует о воздействии на организи животного вирулентной культуры микобакторий туберкулеза бычьего вида.
Противотуберкулезный прэпарат изониазид, оказывая антибактериальное действие, у животных опытной группы способствует организму бороться с возбудителем шфекцми. И поэтому у животных содержание церулоплазмина, галтоглобина, ЕА-ЕАС-В-димфоцитов, Т-лимфоцитов находится на высоком уровне в течение месяца. Затем на 45 и 60 сут пр керо освобождения организма животных от бактериальной формы возбудителя инфокции (о чем свидетельствует бактериологические исследования) иммунобиологическая мобильность организма снижается и показатели белков острой фазы были ц пределах исход-
шх данных.
Активация В-системы иглуиитета предшествует появлению антител в периферической крови. В данном случае аллергические реакции на туберкулез были положительными во все сроки, начиная через 30 сут исследования, но несколько отличались по интенсивности проявления а разный период.
Убой морских свинок в течение 60 сут показал отсутствие видимых изменений, свойственных туберкулезу в органах и индекс по-раженности в этот период составил 0. В тоже зремя у животных контрольной группы отмечены множественные очажки во всех органах и индекс пораженности их составил 19,0.
Однако в дальнейшем прекращение воздействия препарата на возбудителя отражается на уровне исследуемых белков сыворотки крови я их содержание снижается. В своя очередь это свидетельствует о снижении иммунологической реактивности организма морских свинок. Так, результаты исследований крози после прекращения да- • чи препарата на 60 и 90 сут показали положительную реакцию на : С-реактивный белок, ейидетельствуюЕцкй а развитии туберкулезного процесса, что совпадает с результатами патологоанатомических и бактериологических исследований. Устакозлано снияеии© уровня цз-рулоплазмина до 0,5 г/л. что в два раза ниаэ показателей в сыворотка к рев'л у здоровых аизотных. Уровень гаптоглобинэ снизился до 0,8 г/л. Такта снизняся уровень Т-гамфоцитсв до 20% по сравнении с В-ла?ф>цитатп Процентное содержание последних, ответственных :>-а гу«оролм«г1 тс^уший ответ, у ливотинх этой группы бал нисколько аазо 20% {ЕЛч-А-лимфоцкты) или соотячтатютяд кзходяо-му Ш Ш1>В-лчкфоципО.
У эзраденшх чаэогшя, неподаоргаяияхоя деЯстеая явензазяда, обклруконо лояядгиче С-ря'Активного бедка »о вез врак» нсслэдова-::ля„ 1{е»>цеитрздия цзрулоплаачииа я 10 «ут бнла уэод:<чсн& до 2,0г/л, по ^ 20 сут показатель рвзао вияэилоя до 0,15 т/я и э последующей до яе»щй срока каблхдояай а» «оставил 0,4 - 0,7 г/л. Содержание гйптоглобпнл было увеличено почтя в два раза !а 10 су? до 2,4 т/я,, га п 20 еут каблядаля ряэкяй ого спад до 0,4 г/я. 0 пое-ледуяжтвы «оаденграцяя глптоглобиш но прэаыгала 0,8 г/я.
Процент ЕА-г-дшгеоцигоа раз ко повысился та 10 су? до 20%, а я концу месяца еимзмлся до 19%. К 60 еу? количество их было сна-деио до К>5 против 12% у здоровых. Количество ЕАС-й-линфсиитов
качало повышаться постепенно и на 10 сут после заражения составило 21Но к 20 сут отмечен максимальный уровень равнин 37%, т.е. ого количество превысило показатель крови опытных яивогшх. В дальнейшем наблюдалось небольшое снижение уровня содержания и к 60 сут составило 2.7%. Исследования Т-ликфоцитов показали повышение уровня относительного количества их рапного 41% к 20 сут с __Иодладусщкк сникением и через 60 сут составил 18Д,
Таким образок, полученные показате7^к~еодср1;ания-б0лкац_йа2г__ рой фагыс ЕА-ЕАС-В-лимфоцитоь и Т-лимфоцитов свидетельствовали об гнАХуиологическс/Й перестройке организма морских свинок в разнив периоды под воздействием профилактической дозы изониазидас направленной против эгуборкулзза.. Повышение иммунологической рс&к» 1'йвностк организма киэотннх характеризовалось посыцонием содержания: гаптоглобина, церулопл&змина, отсутствием С-реактивного балка, повышением лимфоцитов Т-и В-клеточного звене.. И ¡«¡.оборот, инзккл' уровень н: ¿му н о л о г и ч о с к ой реаятизности организма сопровождался резким снижением содержания гаптоглобина, церулоплазиина, Т-к В-лим£оцитоп, наличием С-реактивного белка. Денные показателя имыуколггичзской реактииностм коррелировали о результатами адлор-гкчбских t ПЕТологоакатонических., бактериологических кеслсдов&шй.
Резтамруя полученные нами результата иоздо сказать, что не-• пользование йэодааэкда пероральио на обеспечивает профилактику туберкулеза животных, что совпадает с мнением иногкх исследователей (H.H.Кощеев» I9Ü9; Б.й.Кэршяканова, 1931 и другие) s< об7Л-нлеч? Причину рецидивов инфекции » ранее оздоровленных хозяйствах С применением хкмиопрофилактики. Это обстоятельство послукило толчком к изысканию новых методов применения средств профилактики. Так, было предложено последовательное применение изониазида и вакцина ВЦК.
2.3. Изучение содержания белков, Т-и В-лимфоцитов при последовательном применении изониазида и вакцины БЦД с целью профилактики туберкулеза в опыте на морских свинках
Изучение профилактической эффективности данного метода оценивали путем аллергических, серологических, патологоанатомических, бактериологических исследований, Однако использование современных методов, таких как определение белков острой фазы, иммунных реакции на Т-и В-клеточше звенья, позволяет более полнее оцени-
вать иммунологические процессы, происходящие в организме животных, что и побудило нас провести исследования при применении данного метода профилактики против туберкулеза в опыте на морских . свинках.
Эксперименты проведены на 50 морских свинках. Перед постановкой опыта провели аллергические исследования ГВД-туберкулином для млекопитающих. Схема постановки опыта была аналогична предыдущему. с дополнительной иммунизацией вакциной БЦЕ через 10 дней после прекращения дачи препарата.
Анализ результатов проведенных исследований по изучению влияния последовательного применения химио- и вакцинопрофилактики туберкулеза показал, что в период применения изониазида содержания белков острой фазы (ЦП -2,7 г/л; Нр - 2,0 г/л) и иммунокомпатект-ных клеток (ЕА-РОК - 20%, ЕАС-РОК - 23?, Б-РОК - ЗВ%) превышаю* уровень показаний у здоровых животных и аналогичны полученным и описанным нами в разделе 2.2. Эти результаты свидетельствуют о положительном эффекте изониазида на иммунологическую реактивность организма животных в период дачи препарата.
Спустя 10 сут пссле прекращения дачи изониазида, согласно схемы последовательного применения изониазида и вакцины ЩХ, животные опытной группы были вакцинированы. Дальнейшие исследования при применении живой вакцины БЦЖ через 10 н 60 сут показали, что она способствовала выработке иммунитета у животных. Это отражено в содержании белков острой фазы и имиунокомпетентиых клеток. Так, исследования на 60 сут показали повышение содержания э сыворотка крози гаптоглобина до 1,7 г/л, церулоплаэшшз - до 2,0 г/л. Урезан,» ЕЛ-В-лимфоцятов поэывен до 20%, ЕАС-В-лигвфсцитов повуяен-до Î5%, >i?o отражает гуморальный иммунитет, оодерзаниа Т-лиИ^оцатоа в крови осталось а пределах нормы, что свидетельствует о специфической резистентности организма»
Таким образом, экспериментальные исследования, проведенные в опыте на морских свинках по изучению содержания, белков острой фазы, Т-м В-ли!4-оцитоа при последовательном прямеиенлн изониазида и закцинн БиД с целью профилактики туберкулеза показали высокое развитие иммунитета после вакцинации. Эти результаты коррелировали с показаниями индекса пораяенносги, который составил 0,6 при показаниях у контрольных - 18,4 и отрицательными бактериологическими исследованиями материала от убитых в этот период живот-
них. Сравнительный анализ полученных показателей с результатами предыдущего опыта при применении только изони&зида в эти сроки, когда в организме морских свинок развился туберкулезный процесс и индекс пораженности составил 16,4, такхе свидетельствует о высокой иммунологической реактивности организма кивотных достигнутой за счет вакцины БЦН.
_Полученные результаты выше^-излокенных опытов путей комплексного подхода в сравнении с-;разшмк^.а.-тодйми^1СУ1дедйшншМ^^ гическкй, п.атолого&натомический с определением индекса пораженности органов, бактериологический) позволяют сделать эаклячение о возможности определения иммунологической реактивности организма животных на основе показателей содержания белков острой фазы, Т-и В-лимфоцитоа а крови.
2А, Некоторые нсспецифнческио н иммунологические показатели крови при вакцинации Б.Д с применением иммуностимуляторов в опыте на кроликах
С целью повышения протективных свойств вакцины ЕЦй проводятся изыскания, эффективных и иммуностимулирующих вещоств, способ*-vjux усиливать специфический {гуморальный и клеточным) иммунный ответ. В этом направлении нами совместно со старщиы научным сотрудником лаборатории туберкулеза, кандидатом ветеринарных наук А.С.Кумаьгвьм был проведен опогг на кродиких по изучению влияния вакцины БЦК с применением иммуностимуляторов (Т-активииа, тш-юли-на) .на некоторые неспецифичеекио и иммунологические показатели крови.
Такие факторы, как бактерицидная активность сыворотки крови, лизоцим, комплемент, бета-лизин, циркулирующие иммунные комплексы обладает виракенным антимикробным действием, участвуют Li регенерации и фе чировании специфического иммунного ответа и играет всш!ую роль в устойчивости организма к туберкулезу. Перечисленные метода наряда- с показаниями общего белка, гаптоглобина, церуло-плазмика были положены в основу наших исследований а данном опыте.
Схема постановки опыта следующая: все кролики были иммунизированы вакциной БцЖ внутрикокно в дозе 0,1 мг/мл в сочетании с подкокным введением 0,5 мл: животным I группу Т-актиеина, Л группы - тимолина. Контролем слудчли кролики только вакцинированное (Iii группа) и интактные (1У группа).
Через два месяца кролики всех четырех групп были заражены
внутривенно культурой М. ъо.чз шт.8 в дозе 0,001 мг/мл.
Кровь для исследований брали до вакцинации, затем через 7, 15,30,45 сут после вакцинации, а также на 15,30,60 и 90 сут пос-* ле заражения. В сыворотке крови у кроликов I группы процент общего белка з период иммунизации с Т-активином снизился на 7 сут до 6,23% против исходного 7,2%. В последующие сроки исследования через 15 и 30 сут содержание его повышалось и к 45 сут составило 7,79%, что выше нормы. В тоже время у кроликов П группы процентное содержание общего белка во все сроки посла введения повышалось с небольшими колебаниями и на 45 сут составило 7,4/í протип исходного 7,I2¡£. У кроликов Ш группы процент содержания общего белкз в течение двух месяцев после вакцинации был незначительно снижон и к 45 сут равен 6,83^ против исходного 7,12$.
Реакция на С-реактивный белок у кроликов всех групп до иммунизации была отрицательной. После иммунизации у кроликов воех опытных групп на 7 и 15 сут отмечена положительная реакция С-реактив-ного белка, тогда как ка 30 и 45 сут была отрицательной. В последующие сроки на 60 и 90 сут после заражения у аиьотных всех групп в сыворотке крови следы наличия С-реактнвного белка сохранялись.
В содержаний гаптоглобина в сыворотке крови у кроликов опытных групп в период иммунизации были незначительные изменения. При отоя на 7 сут у кроликов П группы значение ого было выше, чем у других групп киаотннх и составило 1,5 г/л против исходного 1,2 г/л. В посдедувдш сроки исследования еодярзанио гаптоглобина в сизо« poTK«i крови было зыкз у к рол и к от) Ш группы г: согтавило на 30 сут 1,6 г/г. против неходкого 1,2 г/я. Посла заражения H.bovis пт.О у кроликов I группы было отпечено значительное узоличениа содержания гаптоглобинаt что составило 1,7 г/я, но к 90 сут было отмечено снижение aro у псех опытных групп животных. У кроликов контрольной группы после заражения п содержании гаптоглобина было отпечено снижение на 15,30,60 и к 90 сут исодздозаиия составило 0,3 г/л против исходного 1,0 г/л.
Содержание церулоплазмина у кроликов опытных групп наии было изучено только в период вакцинации. При этом было установлено розкое снижение у кроликов осех опытных групп к 15 сут: у кроликов I группы до 1,15 г/л; И группы - до 1,13 г/л; Ш группы - до 1,13 г/л против исходного 2,24 г/л. Однахо к концу вакцинации на 45 сут было отмечено повышение активности церулоплазмина у кроли-
ков всех опытных групп и значения их были близки к исходному уровне.
Полученные нами показатели активности циркулирующих иммунных комплексов, комплемента наряду с показаниями общего белка были повышенными в поствакцинальный период в течение месяца в сравнении с исходными. Однако после заражения М.ьоу!» шг.В ах-"тнаность-БАС —дкзоцима_ксмплемента, бета-лизина, ЦИК в течение
трех мзсяцов возрастала. Применение кымуностимуляторовТ"вероятно^-
регулирует антителогенез в период заражения, что проявляется из-ыэнениями в комплементарной(7Б усл.ед), лизоцимной(27'мкг/мл), бактерицидной (30%), беталитической активности сыворотки крови (72%) циркулирующих иммунных комплексов (65 опт.ед)), по показаниям которых можно судить о состоянии организма животных. При этом наблюдали тенденции к повышение их содержания к третьему мосяцус несмотря на то, что иммунизированные животные были заражены вирулентной культурой микобактерий туберкулеза бычьего вида. Это авидательсгвуог о высок ой устойчивости иммунного организма кроликов к туберкулезу»
Таким образом, Т-активин, тимолик по разному влияют на динамику различных факторов естественной резистантности гуморального ямпа0 но все они в определенной степени сткмулируют иммунобиологическую реактивность организма яеяят.
2.5. Показатели белков и нкмунокомпатенткых клоток при иммунизации телят вакциной БЦК против туберкулеза в гкепериментальных условиях
Опыт был поставлен совместно с аспирантом лаборатории бруцеллеза А.А.Хаустоаым. Иод наблюдением было две группы телят 1-2 мес возраста. Животные опытной группы (5 голов) были иммунизированы внутрикожно .кциной БЦК в дозе I мг/кл. Еивотные второй группы (5 голов) служили контролем, вахцинацик не подвергались. А.А.Ха-устов проводил аллергические, серологические, патологоанатомичес-кие, гистологические и бактериологические исследования. Исследования крови на содержание белков острой фазы и иммунокомпетеитных клеток нами были проведены до вакцинации, через 7,15,30 сут, затем через' каждые 30 сут на протяжении девяти месяцев. После чего яивотные опытной и контрольной групп были заражены вирулентной культурой И.Ьпу1в от.8 в дозе из расчета 0,03 мг/кг живой массы. Биохимические и иммунологические исследования крови после
- 15 -
заражения продолжили в динамике на 7,15,30,60 и 90 сут.
При анализе результатов исследований содержания белков острой фазы и иммунокомпетентных клеток в крови у телят были отмечены следующие закономерности. Введение в организм телят опытной группы вакцины БД® вызвало увеличение в сыворотке крови содержания белков острой фазы - гаптоглобина до 1,6-0,13 г/л и церу-лоплазмииа - до 1,6-0,1 г/л, появление С-реактивного белка уже на 7 сут, как ответную реакцию организма. Повышенное содержание гаптоглобина и церулоплазмина наблюдалось на всем протяжении поствакцинального периода с повторным увеличением количества церулоплазмина на 60 сут и гаптоглобина на 160 сут, тогда как реакция на С-реактивный белок была положительной еще на 15 сут и отсутствовала к двум месяцам как показатель благоприятного течения вакцинного периода.
Показатели содержания относительного и абсолютного количества Т-и B-лимфоцитов у телят этой группы в первый месяц после вакцинации были высокими. При этом относительное и абсолютное число ЕА-В-лимфоцитов в периферической крови было максимально увеличено к 30 сут до 2605^254 кл/мкл или 33-1,8% . Относительное число ЕДС-В-лимфоцитоа возросло также к 30 сут и составило 20-0,3 %,■ а абсолютное число их максимально возросло уже к 15 сут до 2665^326 кл/мкл. Относительное и абсолютное число Т-лимфоцитов подъема достигло к 15 и 30 аут соответственно: 41*2,0% или 3689±65 кл/мкл и 46-0,8% или 2630*188 кл/мкл. В дальнейшем эти показателя с небольаими колебаниями сохранялись на протяжении четырех месяцев поствакцинальногс периода. В последующем отмечено снижение их и содержание абсолютного, относительного числа этих клеток прибли?ллось к показателям невакцикированных животных.
Полученные результаты позволяют сделать заключение о том, что высокий уровень исследуемых клеток в крови после вводения БцК свидетельствует о формировании В-скстемы и Т-клеточного эвена иммунитета.
В период после заражения М.ъ via шт.В,с цолъа проверки напряженности иммунитета.при сравнительном анализе результатов содержания з сыворотке крови белков острой фазы у вакцинированных телят опытной группы и контрольной, неподвергавшихся вакцинации, были отмечены следующие закономерности. Так, реакция на С-реактивный белок была резко положительной на 7 и 15 сут у телят опыт-
ной группы и в последующем до конца наблюдения оставалась слабо-полокктельной, тогда как у телят контрольной группы С-реактивный белок присутствовал в крови в течение трех месяцев (срок наблюдения), что свидетельствовал о развитии туберкулезного процесса в организме. Содержание других белков острой фазы - гаптоглобина до I,4-0,07 г/л и церулоплазмина - до 2,7-0,3 г/л после заражения ~было~увеличено-в-теиекие_30__су.т, причему контрольных животных
уровень их аналогично опытным увеличился: церулоплазмина-до---
2,9-0,37 г/л, гаптоглобина — до 1,5-0,08 г/л. В последующем уровень церулоплазкина к 60 сут снижен в обеих группах, а уровень гаптоглобина в опытной группе сохранился повышенным до 90 сут и составил 1,4^0,12г/л.
Таким образом, в период заражения как у телят опытной группы, так и контрольной, введение а организм вирулентной культуры стимулировал резкий подъем содержания белков острой фазы в сыворотке крови в течение месяца, что свидетельствует об их активном участии в элиминации введенных ыикобактерий в организм и инактивации их токсинов.
В периферической крови у телят опытной группы наблюдается уменьшение относительного и абсолютного количества ЕА-ЕАС-В-лим-фоцитоа и Т-лимфоцитов. Однако ухе к 15 сут уровень их повышается. Содержание относительного до 29*1,1 %,, абсолютного количества ЕА-В-лимфсцитов до 2701^233 кл/мкл и ЕАС-В-лимфоцитоа до 25Ь6±200 кл/мкл или 27,6±2,3 % увеличивается к 60 сут. В последующем уровень ЕАС-Б-ли.чфоцигов нисколько повышается и к концу срока наблюдения (90 сут) составил 2101-385 кл/мкл или 24-1,7/0.
Снижение количества Т-лимфоцитов было существенным. Так, на 7 сут исследования число Т-клеток составило 1641-451 кл/мкл или 18,3^3,2 %. Однако с последующее уровень их несколько повышается до 2560*221 кд/мкл или 22-1,5%, Затеи количество Т-лимфоцитов повторно было сшшено на 30 сут до 1985^93 кл/мкл и ь дальнейшем повысилось к концу срока наблюдения (90 сут) до 3074*672 кл/мкл или 34*2,02 .
Относительное и абсолютное число туборкулинроактквшх лимфоцитов было увеличено на 15,60 сут и к 90 сут по сравнению с показаниями до зпраяения. При отом максимальный уровень их повышения бил отмечен к 60 сут И составил у опытных 3035*372 кл/мкл против 10041175 или 32-1,4 против 11-2Д %, т.о. при воздействии виру-
житной культуры микобактерий туберкулеза на иммунизированных вакциной БЦН телят число туберкулинреактивкых лимфоцитов после зард-аония было повышенным во все сроки наблюдении.
У телят контрольной группы, невакцинированных но ааратгн::ых i. bovia шт.8, в крови набладалась тенденция к снижении относительного и абсолютного количества ЕЛ-ЕАС-З-лимфоцитов, а такге ..'-лимфоцитов ос зее сроки наблюдения после заражения. К 90 сут ¡оказания ЕА-В~лк«роцитоэ составили. 15,2-1,05 . или 1052*393 кл/ыял, тогда как Н^.С-З-лкмфоцитов - 15,5-1,6% или 1092-313 кл/мкл. Содержание Т-клеточного звена соответствовало 25-1,0% или 2043*127 кл/мкл.
По даинчч А.А.Хаустова положительная реакция ка пнутрл:;оя-¡¡ое введение туберкулина у телят, вакцинированных БЦН, регистрировалась к 30 и 60 сут, а поело заражения знутрико*ная реакция па туберкулин у телят опытной группы была выраженной к 30 сут.
Бактериологические исследования органов от убитых животных показали прорыв иммунитета и средний индекс кнфицирсвшшсстн s этой группе состазил 1,58. У контрольных здвотных развилась генерализованная форма инфекции.
2.6. Содержание белков острой фазы и икмунопомлотент-¡pjx клеток у телят, иммунизированных одновременно вакцинами из штаммов Е-1Д и 19 против туберкулеза и бруцеллеза в экспериментальных условиях
Под наблюдением было 15 телят 3—1 иос возраста, иммунизированных вакцинами из штаммов БцК внутрпкокно а доза I мг/мл и 19 подкохно в дозе 3 млрд.м.к. в 4,0 мл физиологического раствора. Контролем слукили китактгме телята, неподваргавшиеся закцинаини и описанные нами в разделе 2.5.
Исследования крови на содержание белков острой фазы я нокомпетентных клеток были проведены до вакцинации, затем через 7,15,30 сут и ежемесячно на протяжении пяти месяцев а поств&кцп-нальнык период. Спустя пять месяцев животные были размещены на три подгруппы по 5 голов в каждой. Животных I еодгруппи заразили одновременно М. tovta пт.8 в дозе 0,03 мг/кг кипой массы и В. abor tus шт.54 в дозе 350 млн.м.к.; П подгруппу - H.bovio иг.в; 21 подгруппу - В. abortus ит.54.
Биохимические и иммунологические исследования после заражения продолжили на 7,15,30,75,90 и ПО сут.
Анализ результатов содержания белков острой фазы и иммуноком-петентных клеток в крови показал следующие изменения. Было отмечено достоверное повышение уровня С-реактивного белка на 7 и 15 сут как после вакцинации, тах и после заражения. Однако если ТГ1Гериод~ьакцикйЦии-через ^.30_сут в сыворотке крови находили следы С-реактивного белка, то в период после заражения-было-установи
лено наличие данного белка острой фазы в более отдаленные сроки -на 90 сут у телят всех подгрупп. Такие же изменения были отмечены при исследовании других белков острой фазы - гаптоглобина и церулоплазмина. Достоверное повышение уровня гаптоглобина и церу-лоплазкина в сыворотке крови било отмечено на 7 (Нр - 1,7-0,1; ЦП - I,7-0,1 ), 15 (Нр - 1,6-0,1; ЦП - 2,1*0,1), 90 (Нр - 1,4±0,07; ЦП - 1,7-0,03) сут после вакцинации. Тогда как после заражения были отмечены некоторые различия в содержании белков сыворотки крови в зависимости от одновременного, раздельного заражения возбудителем туберкулеза н бруцеллеза. Так, динамика содержания гапу тоглобина у телят, зараженных шт.54, была в пределах близких к норме с незначительными колебаниями в повышении и снижении их. В тоже время у телят, зараженных М.bovis шт.8 и одновременно М. bovis ыт.8 и В. nbortua шт.54, отмечены повышение содержания гаптоглобина, которое держалось на ьтом уровне от начала заражения до ПО сут (срок наблюдения).
Б динамике церулоплазмина в период поело заражения отмечалось резкое увеличение, начиная с 7 по 30 еуг включительно во всех подгруппах, независимо от одновременного и раздельного эара-женяя возбудителякк туберкулеза и бруцеллеза. Вместе с ген значительное увеличение церулоплазмина до 2,5-0,06 г/'л было отмечено у телят I подгруппы, зараженных одновременно M.bovia ыт.8 и В.nbortus шт.54, чго показывает высокую напряженность иммунитета, по сравнению с другими подгруппами, зараженных раздельно. Также необходимо отметить, что наблюдалось увеличение содержания данного белка в сыворотке у телят, зараженных ist.54, на 15 сут до 2,4*0,2 г/л и 30 сут до 2,6^0,06 г/л. Это связано, по-видимому, с тем, что вакцина Б^Д активирует иммунитет к бруцеллезу. Однако к 90 сут содержание церулоплазмина у телят всех подгрупп сравнивается с исходны« показателем до заражения. Полученные результаты свидетельствуют о снижении иммунного фона и сочетается с данными
бактериологических исследований, полученных А.А.Хаустовыы (Í96S).
При анализе результатов содержания в периферической крови Т—я В-лимфоцитоп у толят выявлены следующие закономерности, i' телят, иммулизировантос одновременно вакцинами из стаммов ПЦЕ к 19, общее и относительное количество ЕА-В-лимфсцитов я периферической крови повысилось к 15 сут до 2491—167 кл/мкл или 25-1,9% и сохранялось в течение дяух месяцев, причем достоворннэ увеличения в абсолютном количестве наблюдались на 7,15 к 30 аут после иммунизации. Б последующие сроки до 150 сут наблюдается их снижения к пределам исходного уровня 1642-2II кл/мкл или 26,3-1,2%. В абсолютном количестве ЕАС-3-лимфоцитов после о.гуго-временной иммунизации наблюдается такие увеличение их количества ал 7,15 я 30 сут. Tan, к 30 сут показания составили 2098-375 «я/мял (21-3,0%), которое сохранялось до 60 сут. А в остальные сроки установили тенденцию к снижению до пределов исходного уровня. Максимальное повыизние общего числа и процента Т-лимфоцитоэ было зарегистрировано на 30 сут и составило 47,3*2,3% или 4695-342 кл/мкл. Достоверное увеличение их держалось до двух месяцев, затем такай а динамике отмечено снижение.
После заражения вирулентными культурами íl.bovis ti?.о и В.' ubortua ст.54 в крови у данных кивоткых отмечаются однозначные сдвиги з популяциях Т-и 3-лимфоцитоп а иммунных клеток, хотя характер и интенсивность их были несколько отличимы. Так, на 7 сут содержание КА-В-лимфоцитов было увеличило у телят I подгруппы до 2269-245 (25,3—1,2%) и И подгруппы - до 3457*207 кл/мкл (33,6*1,4), а количество ЕАС-В~лимфоцитоэ до 2696-66 кл/мкл (32,7*1,5) и 2453-139 (24-1,1) соответственно; Т-лимфоцитов - до 3037*659 (31/3-1,4) повышено у телят I подгруппы.
В дальнейшем в динамике показателей абсолютного содержания ЕА-ЕАС-В-лимфоцитов наблюдали некоторые различия в зависимости от заражения. Так, у животных I и П подгрупп наблюдалось их снижение в период от 15 до 75 сут: ЕА-В-лимфоцитов до 1725*172 хл/мхя у телят I подгруппы и ЕАС-В-лимфопитоа до 1261*161 кл/мкл у телят П подгруппы. В тоже время как у животных Ш подгруппы, зара-кенных шт.54, в этот период наблюдали повыаекие содержания абсолютного количетсва ЕА- (2580*281), ЕАС- (2505*163) В-лимфзцитов. Показатели ЕА-В-лимфоцитов оставались на этом уровне до 90 сут, а то время как к этому периоду показатели ЕА-и ЕАС-В-лнмфоцитоз
у телят I и П подгрупп сниьллись, но уке к ПО сут все показателя В-лимфоцитоз соответствовали с оде ряд»;; so вакцинированных животных.
Отмечено резкое снинение числа Т~лимфоцитоа к ПО сут исследований к пределам показаний до заражения у телят I подгруппы, тогда как у животных П и Ш подгрупп - незначительное повышение
-до,&% v 2035*120 кл/мкл или 27,0*1,5%
соответственно.
При изучении сенсибилизированных к бруцеллезному и туберкулезному антигенам клона лимфоцитов у иммунизированных животных обнаружили как бруцеллинреактивные, так и туберкулинреактивные лимфоциты.
По данным А.А.Хаустова результаты серологических исследований крови у животных, иммунизированных одновременно БЦХ и шт.19, показали, что наибольшее количество антител, выявляемых в РА регистрировалось до 180 сут, а в РДСК - до 210 сут. В период определения напряженности иммунитета после заражения пологдтельиые значения серологических реакций в крови у телят регистрировал®!; в РА и РДСИ к 14 сут, a » РВП - к 7 еут. У телят, зараженных одновременно, иммунный ответ организма развивался значительно ргль-ше и достигал более высоких пределов, чем в других подгруппах, зараженных раздельно только бруцеллезом к туберкулезом.
Аллергические реакции на введение ШЩ-*убсрйулииа у ли к 30 сут били положительными у всех подгрупп кивогдах и сохранялись
,,ср 210 сут. Б&ктериологлчзокнй исодедо.-^шия органон показал;! пр;»-иммунитета у животных ассх подгрупп,
Так«« ойр&эом, полученные результаты изучения белков острой фази я иммунокоишатен'гньос клето.с в «роли одновременно кммунязн-рошшиых вакцинами из штаммов ЕЩ к 19 теля?, показали необходимость дальнейших ,.сследоьан/й с цчлью повыаения иммуногеичш сеоьегс ч получения окончательном показателей характеристики данного мэтодг. иакцинвхуш.
выводы
1. Пояказние »ы^унолотачсской реактивности организма морских свинок, подвергнутых профилактике нзони&зидсм, характеризовалось увеличением содержаная в течение 60 сут церуяоплазмииа до 2,5 г/л; гаптоглобина до 1,9 г/д; ЕА-В-лй*$оцитов - да
26%; ЕАС-В-лимфсцитов - до 35$; Т-лимфоцитов - до 28%; наличие С-реактивного белка только на 10 и 20 сут. После прекращения дачк препарата на 60 и 90 сут, отмечено их снижение до •уровня показателей зараженных животных и положительная реакция на С-реактивныи белок.
JL. У аивотных, подвергнутых последовательному применение иэпниа-зида и вагщины БДК, через 60 сут (срок наблюдения) после вакцинации отмечено повышение церулоплазмина до 2,0 г/л; гаптоглобина - до 1,7 г/л; ЕА-В-лимфоцитов - до 20%; ЕАС-В-лимфо-цитов - до 15%; отсутствие С-реактивного белка, что свидетельствует о выработке иммунитета, хотя содержание Т-лимфоцитов ниже (25$), чем у здоровых кивотных (30%).
3. Применение вакцины БДН в сочетании с иммуностимуляторами привело к более выраженному повышению иммунобиологической реактивности организма в течение трех месяцев после заражения
ü. bovis шт.8: циркулирующих иммунных комплексов до 65 опт. ед., комплемента - до 78 усл.ед., бактерицидной активности сыворотки крови - до 30%, лизоцима - до 27 мкг/мл, бета-лизк-на - до 72%.
4. В периферической крови у телят, привитых вакциной БЦЕ установлено повышение содерлания в течение 30 сут церулоплазмина до I,6-0,1 г/л; гаптоглобина - до 1,6^0,13 г/л; ЕА-В-лимфоцн-тов - до 2605^254 кл/мкл (33^1,8%); ЕАС-&-лимфоцитоэ - до 2665-326 кл/мкл (30±0,3%); Т-лимфоцитоп - до 3630±188 кл/мкл (46,2-0,8%); отсутствие С-реактивного белка. После заражения через 9 месяцев вирулентной культурой М. bovia ыт.В отмечено резкое повышение в течение 30 сут церулоплазмина до 2,7^0,3 г/л; а гаптоглобина - до 1,4-0,07г/л. Повышение покаэателг'! ЕА-ЕАС-В-лимфоцитов отмечено через 60 сут с последующим ен;<-яением, а максимально количество !-лимфоцитов наблюдалось к 90 сут, что соответствовало уровню здоровых гнаотных.
5. В сыворотка кроак у привитых одновременно против туберкулеза и бруцеллеза вакцинами из зтамгов БД м 19 установлено максимальное повышение к 15 сут содеряания церулоплазмина до 2,1-0,1 г/л, гаптоглобина - до 1„7±0Д г/л с незначительными периодами снижения в последукцие сроки. После одновременного и раздельного заражения через 5 месяцев М. bovis arr.8 и В.
nbortun шт.54 отмочено резкое повышение в точение 20 сут це-
- 22 -
рулоплазмина до 2,4-0,07 - 2,6*0,06 г/л, а гаптоглобина -до 1,4*0,04 - 1,7*0,1 г/л.
6. У привитых вакцинами из штаммов БЦД и 19 в периферической крови в течение 60 сут произошло повышение содержания ЕА-В-лим-фоцитов до 2491*167,4 (25*1,9); ЕАС-В-лимфоцитов - до 2098*375 (21*3,0); Т-лимфоцитов - до 4695*342 (47,3*2,3). Пос-л9~эаражон>;я-б-тецение_90_сут отмечалось повышение всех функ-циональноактивных лимфоцитов~с последующйм~сникениеы-к~110-суж. (срок наблюдения).
7. В периферической крови у зараженных М.ЪоуГзшт.8 телят содержание С-реактивного белка отмечено во все сроки исследования. Выявлено резкое пошшение количества церулоплазмина до 2,9*0,37 г/л и гаптоглобина - до 1,5*0,8 г/л в течение 30 сут с последуагцим снижением этих показателей. В этот период отмечено небольшое повышение содержания ЕА- до 2197*68 и ЕАС~ до 2061*170 В-лимфоцитов и резкое сникение к 90 сут ЕА-В-лимфо-цитов до 1052*393 (15,2*1,0), ЕАС-В-лимфоцигоз -до 1092*313 (15,5*1,6), тогда как количество Т-лимфоцитов снижалось в течение всего периода и составило к 90 сут 2043*127 (25*1,5) против показателя 2950*431 (35*0,5) у здоровых.
С. Приведенные показатели белков острой фазы, ЕА-ЕАС-&-лимфоци-тоа, Т-ликфоцитов плеточного звена и аиткгснреактивных лимфоцитов свидетельствует об иммунологической реактивности организма »квотных в ответ на введение средств хинио- а вакцине-профилактики туберкулеза.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРВДЛОйЕШ
Пр." определении икмунологичсако*: ро&ятиэностк орглнис:',?. животных мохно использовать "Методические указания по определений иымуиокомпетеншых ¡¡легок к неспсцкфйчссках факторов ккмунобно-логическо^ з&циты оргаказкй аииотпого", утсераденлого НТО КаэАСХП от 17 мая 1995 г., протокол У II»
список работ по тай дассьртАщш
I. Умарова С.К. Гапуоглобйн, церулоплазмкн и (¡-реактивный белок с сыворотке ировк крупного рогатого окота при различных схемах иммунизации против бруцеллеза н туберкулеза // Совершенствование мер борьба с бруцеллезом и туберкулезом е.-я.животных. Сборник научных трудов. - Алма-Ата, 1988. - С.17С-183.
2. Умарова С.К.Содержание белков острой фазы у ранее вакцинированных телят при заражении бруцеллезом и туберкулезом //Про-фзлактика и ликвидация заболеваний с.-х. животных бруцеллезом и туберкулезом в Казахстане. Сборник научных трудов. - Алма-Ата, I9E9. - С.I05-112.
3. Умарова С.К. Содержание 1-й В-лимфоцитов в крови у зараженных бруцеллезом и туберкулезом телят (ранее вакцинированных) //Тезисы докладов Всесоюзной нучио-техкической конференции "Соврем кешше пройлемы иммунологии, биотехнологии, генной инкенерик в аетер'.'.нарной медицине'1, 5-7 декабря 1990 года. Нижний Новгород, -Москеа, 1990. - C.I20-I2I.
4. Клыков Т.Л., Умарова С.К., Дазуревская О.С., Тлебаеоа 3,Б„ Некоторые биохимические и иммунологические показатели крог.и пря зекцинации БЦН и применением иммуностимуляторов в окспериментв //Заразные болезни с.-х.животных в Казахстане. Сборник научных трудов. - Алматы, 1904. -С.80-85.
5. Керямжанова Б.Ф., Умарова С.К. Белки острой фазы и нммуно-компетентные клетки у морских езинок, зараженных иикобектсрняии туберкулеза к подвергнутых действию изониазида >з профилактической дозе //Тезисы докладов нзучно-практической конференции "Секоп-ные научные исследования по проблеме туберкулеза и бруцеллеза о.-х. »ипотких, профилактика и организация мероприятий по ликвидации бо~ лр-ч^-Ч з регионе Сибири*. - Новосибирск, 1995. - С.62-63.
6. КвримжаноЕЯ В.Ф., Кгцзва Л.Б., Умарова С.К. !4е?одичйзгп«э указания по определению мммунокоютетентшх клогоя и нсспецнфячео-клх фактороя я««<у[шбяологяческой зг.злгы органяэкл кивотного". Утз. НТО КазАСХН 17 им 19% г., протокол » II.
- 24 -
Омарова Сэуле Кадырбекцызы
ТуберкулездI химияльц 'хане вакциналыц дауалау-дары мал денес1н1ц иммунодогиялы^ икемд!л1г1нН; кврсетх1атер1
--1& т00т03---ЕетерднарАддык микробиология, иммунология,
1ндеттану яэне жануарлардыц хуцпалы аурулары
Биология гылыыыныц кандидаты дэрежес1н алуга арналган
Зерттелд1 - тещз пош^алары, у" цояндары, буэаулар, цан жэне 1як1 бездер мен аРзалар.
Лаборатсриялыц жануарлар /тец1з шоя^алары, уй 1\ояндары/ хзне бузауларды изониазид, БЦЯ закцинасы, изониазид пен БЦЖ вакцинасы, БЦУ. вакцинасы мен иммундыудетНптер жене БЦ2 мен 19 птаммдарын б1р мезетте цолданрандары цанныц тэн емес импуиологиялыц кврсетк1ятер1 динамикасы йойынев зертгелген.
Кал денес1к1ц ицмуидцц статусы» сипаттаура х1т1 хезендег) белок корсетк1итер1н - С-реактивт! белок, гаптоглобин, церуло-плазмин, ЕА-ЕАС-В-лим$оцигтер. Т-лим^оциттер, реактивпккг г.арсы оеткаларды цолдануро болатинднгы аньцталдн.
Мал денег1н1ц иммунологиялыц цоррамуиылыгин тон емес сгбептер1 хонв иымундаура беЙ1и клеткаларди аництайтын тесттер ЗИЫНТЫГЫ хисвлды.
lira oro va Saule Kadirbekovna
THE INDEX OF IMMUNOLOGY REACTION ANIMALS ORGA-
MXSU IN TIMi: CHEMISTRY - AND VACCIHOPROPIIILACTIC OF TUBERCULOSIS
16.00.03 - Veterinary microbiology, Immunology, episoo-tology and Infection illneno of animals.
'2o loóle for aoadénio degree tho candidato of biology science
Object of inventigation; aea plga, rabbits, calió, blood,
patoology material
In dinnraic we learned not-npeclfic and iranunology index oí blood labórate anímala and cnlfa with application isoniazi«!,' vaccine BCJ, tandero izonlarid and vaccine BCJ, vaccine BCJ and lrcnunoatlinulators, at the ansie tima vaccinesatlon ahtansi 19 and BCJ.
The possibility of tho application of index C-reaotiv« protein, gaptoglobin, oeruloplaxmin, EA-KAC-B-lumphoeytea and T-lunphocyte3, untigen-reactlve cells for characteristic of the stntua of the immunity system of organism of anímala was studied and proved.
Made complex testa of definition immunocompetent cell and not-specific factor» inmunobiology.