Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Патология обмена веществ при хроническом отравлении крупного рогатого скота нитратами и способы его профилактики

Міністерство сільського господарства і продовольства України

Український дерзшипсй аграрній! університет

,Гв Од

На правах рукопису

КАРПОВСЬКИЙ Валаїтш Іванович

УДК 619:616-008.9:546.176:636.2 ПАТОЛОГІЯ ОБМІНУ РЕЧОШІ ПРИ ХРОНІЧНОМУ

о’ірушіі великої рогатої хулоби нітратмш

І СПОСОБИ ЙОГО ПРОФІЛШШШ

Спеціальності: 16.00.02. - патологія, онкологія і

морфологія тварин 16.~0.Q4.. - ветеринарна фармакологія з токсикологією

Автореферат дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук

КИЇВ - 1934

Робота виконана на кафедрі фармакології 1 патофізіології Українського державного аграрного університету.

Науковий керівнім - Академік УААН, доктор ветеринарних наук, професор Хиемьнщьішй Г.О.

Офіційні опоненти:

- Член - кореспондент УААН, доктор ветеринарних наук, профееор Малініи О.О.

Кандидат ветеринарних наук, доцент Тарасеып В.Л.

Провідна організація: Львівська акадеиія пєтсринарпої

мешішш

Захист дисертації відбудеться "а¿2." 1994 р.

/І/ /

о СІ. год. в Українському державному аграрному університеті на засіданні спеціалізованої ради Л 120.71.03. за адресою: 252041, м.Киів-41, вул.Потєхіна, іб, учбовий корпус УДАУ N. 12, ауд. 412. .

Просимо взяти участь в обговоренні дисертації при. 11 захисті або переслати Вад відгук на автореферат за адресою: 252041, «.Київ.- 41, вул.Героїв Оборони. 15, УДАУ, сектор захисту дисертацій.

З дисертацією можна ' ознайомитись в бібліотеці Українського державного аграрного університету.

Автореферат розісланий "/А."_______/і4^___________ 1994 р.

Вчений секретар спеціалізованої ради,

професор Боргвічук В.А.

- З - '

ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

АКТУАЛЬНІСТЬ ТЕИИ Одержання високих врожаїв сільськогосподарських культур неможливе без широкого застосування органічних та мінеральних добрив, виробництво яких збільшується В УСЬОМУ СВІТІ.

Найбільш відчутну прибавку врожаю дають азотні добрива. Але при відсутності ретельного контролю за їх внесенням, а також при несприятливих кліматичних, умовах та гаяних інших Факторах можливе накопичення в рослинах нітратів до концентрацій, небезпечних для здоров'я людей і тварин при вживанні таких продуктів харчування та кормів. В багатьох країнах зареєстровані випадки масових гострих та хронічних отруєнь тварин і людей нітратами, шо потрапляли в організм з кормами. їжею та питною водок» (3. П. Скородинский, з. Г. Олейник. 1974; А. К. Готоснии-кий, 1979; Г. П. Зарубин и др. 1964; Н. И. опопель.Е. В. ДОб-рянская, 1986; С. Ф. Покровская. 1988; Г. А. Хмельницкий и др., 1989). •

Особливу тривогу викликають численні публікації відносно -канцерогенності нітрозамінів. шо утворюються в організмі при надходженні нітратів у підвиисних кількостях. Ця тривога стає більш реальною, якшо врахувати наростаючі масштаби забруднення атмосфери окисами азоту, ялі потім з дошовими водами забруднюють грунти та водойми і під впливом нітрифікуючих мікроорганізмів перетворюються в нітрати (. . ф. Цапенко, Г. о. Хмельницкий, 1990^wierrbowsiu А. .1982; Geilo F., Rapp J., 1981;Grrln R. .1974). .

Патогенез, діагностика і лікування гострих та хроннічних отруєнь тварин нітратами вивчали С. В. Баженов та 1н. <19бЗ),Д.Д. Пслоз та ін. -1979). Д. Н. Вовк (1979). Г.О.Хмель-ницький (1980), TaKahasKi J. (1980), GenrlnK J. Maiesteir,

A. (1980), В. К. Иенькін (1982) > Lena F. (1983). Prasad J. (1983).Madrea H. (1984). И. Ф. Панько (1987), В. М. Слепченко (1988), О. О. Палінін. В. В. Волошенко (1990). Д. Ф. Гуфрій (1990),

B. Б. Духштеький (1991). А. Вокор (1991). А. И. Назуркевич (1SSS),

В. Е. Данілов 1993) , .

Наловивчекими залишаються питання негативного впливу надлишкових кількостей нітратів на організм тварин різних видів прн довготривалому надходженні і особливо вплив іх на продуктивність тварин та якість продуктів харчування, першочергове значення, мають роботи по розробці способів діагностики і профілактики хронічного отруєння тварин нітратами, які забезпечувала б одержання високоякісної продукції при умові звільненого змісту нітратів в кормах та питній воді.

МЕТА І ЗАВДАННЯ ДОСЛІДЖЕНЬ: і. Вивчити особливості білкового обміну в організмі волик рогатої кудобк при тривалому надходженні нітратів в підв шешіх до зал,- ,

£І Вивчити деякі ’аспекти енергетичного обміну та обмі

ЕіСКОР&І нової кислоти в організмі молочних КОРІВ Ц

¡іронічному нітратному токсикозі. ' - .

3. розробим методи профілактики хронічних отруєнь нітрата: великої рогатої худоби.

' • наукова новизна роботи

В хронічних дослідах на коровах.встановлено, шо під вплі вом нітратів янижуєтьсь рівень аргініну, аланіну і тирозіі ■у вільних амінокислотах крові і амінокислотах цілісні

крові» а при досліджені амінокислотного складу плазми крої концентрація цих амінокислот підвішувалась.

Доведено, шо при хронічному отруєнні нітратами поруш: едься синтез і розподіл аскорбінової кислоти а органах. Зиеі шег,ня вмісту аскорбінової кислоти в кадниркоьих залозах зег до.порушення синтезу гормонів, а селезінка при цьому стає рс зеряуаром відновленої аскорбінової кислота для всього оі ганізму.

На основі сорбентів, антиоксидантів, мінеральних та ог ганічнм: речовин розроблені нові нітритопротектори, які знижу ють токсичний ВПЛИВ Нітратів ПРИ ХРОНІЧНИХ ОТРУЄННЯХ велико рогатої худоби. . ;

Наукова новизна роботи підтверджена патентом н 179037 . . від 22. їх. 1992 р

ТЕОРЕТИЧНА ЗНАЧИМІСТЬ І ПРАКТИЧНА . ЦІННІСТЬ '.РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ встановлення! Факту .зниження антиоксидантної активност крові та’;, функціонального стану гідроксшіюючої системи печінкі при 'хронічному отруєнні велйкої рогатої худоби нітратами да< пістави вести пойуки засобів нормалізації обмінних процесів і попередження^негативного їх впливу на організм тварин 1 якісті продуктів харчування. .: '

-АПІРОНАЦІЯ роботи Матеріали дисертації.доповідались на: Міжнародному з'їзді патоФізюлогів ; (Москва, . • 1991 р. )/ 5-ому українському біохімічному з?’ізді (Київ, 1987 р.о» 4-ому Всесоюзному симпозіумі "Виохимия животных и продовольственная программа"

:киіз. 1989 р.). Всесоюзних конференціях (Казань, 1990 р.; Еи-зинів. 1937 р. ), Міжреспубліканській конференції (Волгоград, .990 р.), Республіканській конференції ( Київ, 1990 р.), конференціях викладачів УСГА (1903 М99/і'рр.).

ВПРОВАДЖЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ . Деякі матеріали дисертації використані з "Методических ■казаннях по диагностике, профилактике и лечению отравления :ельскохозяйственных животных нитратами и нитритами ”, затверджених Держагропронон СРСР (1986) та Дйрхкоиісіею ГМ СРСР 1991). :

ПУБЛІКАЦІЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ

Основні положення дисертаційної роботи викладені в 18 ■публікованих роботах.

Дисертація викладена на 176 сторінках машинописного ■ексту; складається з вступу, огляду літегатури, власних осліджень, обговорення Результатів досліджень, висновків, рактичких пропозицій, списку використаної літератури У додат-:у, Робота бміпує ЗО таблиць і 18 діаграм. Список літератури кличае 216 вітчизняних 1 90 зарубіжних джерел. '

МАТЕРІАЛИ І КЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ

Дисертація виконана на кафедрі Фармакологи та патоФі-іологіі Українського державного аграрного університету згідно планом науково-дослідної роботи по розробці наукових основ і учасних методів боротьби з хворобами сільськогосподарських, варин і птахів (державний регісграційний номер 77002115).

Експериментальна частина роботи виконана в умовах ослідяоі станин м'ясного скотарства УСГА (смт Зорзель) в 983-1991 роках.

Біохімічні дослідження проводили в лабораторії Дослідної такті м'ясного скотарства УСГА, кафедр Фармакології та па-офізіологіі, біохімії УСГА.б НДІ проблем онкології їм. Кавепь-ого АН України.

Екпериментальні дослідження по вивченню ХРОНІЧНОГО ітратного отруєння проводились на і “і ( 7 дослідних і 7 конт-ольних ) коровах- аналогзх чорно-рябої породи З - 5 лактаті умовах дослідної станки н'ясного скотарства УСГА .

Умови утримання та годівлі тварин дослідної і контрольної руп були однаковим протягом усього дослідного періоду, але

о раціону корів дослідної групи додатково вносили рівну ількість нітрату калію і нітрату натрію із розрахунку 0. 35 г ітрат-юну на 1 кг маси тіла , тварин з урахуванням змісту

. - б ' нітрат-іону б кормах та питній-воді.

■ У підготовчий період ( 90 днів ) тваринам постійно підвищували дозу нітрат-іону від о. і до 0. 35 г аа і кг наси тіла.

Дослідник період продовжувався 28 місяців, протягом якиї проводили постійний контроль за станом здоров'я тварш клінічними 1 клініко-геиатологічішми методами.

У дослідах по вивченню хронічного нітратного токсикозу : розробці способів його профілактики використовували 20 бу-гайців-аиалогів чорно - рябоі породи віком б -10 місяців. Тварин розділили на 4 групи по 5 голів кожна. Перша група б'/л. контрольною , всі інші - дослідні.

’ Підготовчий період тривав . 45 днів. Тварини були ні прив'язі, рашок однотипний на протязі всього досліду. У pauloi бхгайців дослідник груп додавали нітрат-іон у дозі О. 2 - 0. 7 і на f кг маси тіла у'вигляді калієвої і натрієвої селітр. Нітоа; ти згодовували двічі на день разом з комбікормом.

1 група (контрольна) утримувалась на звичайному длі господарства раціоні; на тваринах 2-1 і 3-і дослідних груі

• тварин вивчали дію нітритопротекторів; тварини 4 дослідно: групи нітритопротектори не отримували. Us дало можливість од: ночасно досліджувати два нітритопротектори і враховувати результати їх дії. Досліджувані нітритопротектори задавали чере: рот змішаними з кормон. Дію нітритопротекторів оцінювали з; клінічними ознаками і результатами досліджень крові через ‘ години після годівлі, введення нітрат-іону і нітритопротектора.

Матеріалом для досліджень були зразки крові, сечі, органи і тканин.

В зразках крові досліджували вміст: метгемоглобіну - аг

методом Еоярчука і Лутова (1966): нітратів 1 нітритів - з ви-

користанням реактиву Гриса за методом,модифікованим на кафедрі (1991); сечовини - з використанням диметилглиоксиму (1970); цукру - з використанням антронового реактиву за методом Ро і модифікації Н. И. Бабаскіна (1976); аміаку і амідного азоту глютаміну - за методом А. І. Сілаковоі та ін. (1962); молочної кислоти за методом Діше і Ласло з використанням кольорової реакції пдрохінона (1962) ; органічних кислот (піруват , шав-лево-оцтова кислота) -спектрофотометрично (В. С. Асатіані. 1969): амінокислот - за допомогою амінокислотного аналізатора Е-вОС (Чехо-Словакія) і у відповідності з прикладеною інструкцією; величину рн 1 газовий склад крові - з допомогою апарату ОР -215 (Угоршийа) і у відповідності з прикладеною до ньогс

ІНСТРУКЦІЄЮ.

У сироватці крові досліджували Рівень холестерину за методом Ілька (1971).

активність мікрооксигенної системи біоптат/ печінки про-аили після виділення мембран ендоплазматичного ретикулука за голом ,описаним у кішяі "Биохимические исследования немб-'і'. 1979 P. Активність цитохрому - Р-450 1 шітохрону - Ъ

:ліджували згідно методу Снура 1 Сато (19&4) на спектрофото-грі "Hitachi” за диференпійною схемос.Активність НАДФН-пи-кром-Р-450-редуктази - при допомозі спектоФотометга "

lford" за методом, описаним Dalіпег(1963). Активність питох-чу р-450 досліджували за реакцією Я-Ш(мєтилування аиінопіри-1 п-гідроксшгуваїшя аланіну за метолом, описаним в книзі ^временные методы в биохимии"(1977); вміст білку - зг мето-И Л0УР1 (1951).

Для гістохімічного дослідження аскорбінової кисло ГИ (по гелі 1 Чайно) відбирали шматочки тканин розміром 1»! см, для охімічного аналізу - 500 мг Гістопрепарати вивчали під кроскопом ЯВІ - 6, оптичну цільність екстрактів Із ткати значали приладом КФК-2-УХЛ 4,2 при довжині хвилі 520 нм.

Одержані результати досліджень оброблені статистично за годом Ненцевічуте-Ерінгене (1964) з використанням ПЕОН IBM (програма "VETSTAT", прог. 0. В. Лев^ій), а також програмовим калькулятором НК-52.

РЕЗУЛЬТАТИ ВЛАСНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ

ВПЛИВ НІТРАТІВ НА РІВЕНЬ ГЕМОГЛОБІНУ. МЕТГЕМОГЛОБІНУ І КІНЦЕВІ ПРОДУКТИ АЗОТНОГО ОЕНІНУ КРОВІ-КОРІВ Рівень нітрато - нітритів у ґ рові тварин дослідноі групи 3 0,18910.01 - 0,30410,033 НГ/Л, КОНТРОЛЬНОЇ - 0.029*0.005 -г>88±0,005 нг/л. При цьому в сумі нітрат-нітритних іонів

грити у крові тварин дослідної групи складали 6,9 '>■, а у

»ві контрольних тварин - 7. 7 У тварин дослідної групи, шо одержували нітрат - іон, милувався рівень нітрато-нітритів у крові на 330 - 795 х. у в разів збільшувався рівень нітратів у крові дослідних тва-н порівняно г контролем (взимку і на початку весни).

При дослідженні рівня метгемоглобіну його концентрація у рів дослідної групи була i,058t0ii2 - г.бббіО, 004 г/л. а

КТРОЛЬНОІ - 0,093і0>005 - 1.92110,063 г/л. У серпні вміст

ттемоглобіну в крові тварин контрольної групи був особливо СОКИМ - 1.921 ± 0.063 мг/л. ТОМУ шо для годівлі виксристо-валась кукурудза молочно-воскової стиглості з великим

істом нітратів. Збільшення рівня метгемоглобіну в крові

слідних корів по відношенню до контрольної групи було У 1.4

12.9 разів. Так у березні було збільиення в 12.9 разів, а у

- 6 - .. . серпні' - е 1.4 рази. ' На'наш погляд. •. дя різниня залежить зід якості і' кількості'' кормів, які надходять до органіану тварин і Впливають на вміст нітратів у крові дослідних корів.

У дослідних тварин концентрація гемоглобіну в крові була З,вЬіО,1Ч-~ 10.17*0.24'г/я» а у ; контрольній - а,97*0,14 -'

9.3410.13 г/л. ' ціявншечияРІВНЯ гемоглобін/ В крові до'слідннх корів від 7 у. до ,13. 4 '/• слід розццше&ти як один із механізмів компенсації,; на тривале надходження в. організм корів щтрат-існу і розвиток гіпоксії, і" : ; , .

' В умовах надходження в організм корі? надмірної кількості нітнатів а;дмічено' порушення обмін у кінцевих продуктів азотно-г? обміну..’В.'дослідних корів було збільшення а крові аміаку на

30.3 /. і збільшення'на 27,7 '/■ вмісту амідного азоту глутаміну.

• ВМІСТ СЄЧ0ВІЩЙ У КРОВІ ДОСЛІДНОЇ ГРУПИ ПІДВИЩУЄТЬСЯ на протязі, всього досліду (і,2'37*0. 022 - 3. 408і0. 173 мН/л), а на КОНТРОЛІ - 0,781*0. 007 ~ 2. бЗІіО. 076 мМ/л. Ш зміни свідчать, шоу організмі відбувається перетворення нітратів до аміаку, якіЦчПОТІМ'ЕИЕОДИТЬСЯ 13 ОРГАНІЗМУ у вигляді сечовини.

. ; СТАН .ВУГЛЕВОДНОГО ОБМІНУ ,

; ПРИ ХРОНІЧКОКУ НІТРАТНОМУ ОТРУЕННІ У КОРІВ ,

Стан вуглеводно-енергетичного обміну у дослідних корів ми оцінювали по вмісту цукру,молочної, піровиноградної і щавлево-оцтової КИСЛОТ.,

На протязі всього досліду відмічалось збільшення концентрації ■ ЕУКРУ V КОРІВ ДОСЛІДНОЇ ГРУПИ t3. 73t0.21 -4,57*0.1 НМ/Л>,ТОДІ ЯК на КОНТРОЛІ було 3, 64*0, 23 - 4, 07±0, 13 МН/Л.

.Підвищення-Рівня цукру зв'язане, із зниженням його використання як енергетичного матеріалу. Глюкоза використовується в анаеробному .перетворенні.шо призводить до підвкшення концентраті молочної кислота у крові дослідних тварин (2.62*0,25 -

З, егіо, 12 МИ/л) й дорівняні з контролем (1,72*0, 07 - 1,99*0,07 иН/л). У 'дослідник корів виявлено збільшення иавлево-одтовоі кислоти Ча їв. 9 я,;а пірувату на 10.9 %. порівняно з кров'ю тварин, котрі буди на контролі. . "

. Причиною ^мїн ,у вуглеводно - енергетичному обміні була хронічна гіпоксія.ї;отра виникала в зв'язку з великим вмістом нітратів V кормі,і високії« Рівнем иітрЬгів, нітритів і метгемоглобіну .в крові. Гемоглобін крові перетворюється нітритами у метгемоглобін.котрйй ; невдатний переносити ' кисень тканинам, шо: обумовлює розвиток тканинної гіпоксії. ■ . '

'ГтоКсія призводить до пригнічення .окисно-відвовних процесів, а тому відбувається 'зниження інтенсивності включення піровішогр-здноі .кислоти до никлу лимонної кислоти. При не-

достатній кількості кисно в клітині збільшується кількість воакю 1 відновлених форм НАД 1 НАДФ , які беруть участь у перетворенні піровиноградної кислоти. Відновлений НАД використовується при перетворенні піровиноградної кислоти до молочної та інших субстратів. Накопичення лактату 1 пірувату е результатом порушень окисно-відновних процесів (як наслідок гіпоксії)

1 відповідає данин інших дослідників (Г. О. Хмельницький. /980).

Наші дослідження підтверджують те.шо накопичення у крові великої рогатої худоби цукру, лактату, пірувату 1 шавлево-оп-тової кислоти виникає внаслідок зниження окисно-відновних процесів у тканинах в зв'язку з нестачею кисни при впливі нітратів.

ДЕЯКІ АСПЕКТИ БІЛКОВОГО ОБМІНУ І НОНООШІСАЗНОГО ЦИКЛУ ПРИ ХРОНІЧНОМУ НІТРАТНОНУ ОТРУЄННІ всі речовини, по всмоктуються в органах травлення, потрапляють в загальний кровообіг 1. відповідно, а печінку. Тому в умовах хронічного нітратного отруєння найбільш виразні зміни показників можливі в крові і печінці.

Такі припупєння обумовили нас йровести дослідження.на молекулярному рівні. Ці дослі дження дозволяють вияснити дію нітратів на динаміку геномістких білків крові (метгемоглобіні, мідьмістких (аерулоплазніні. а також білків печінки, які містять у собі негеиове залізо ( білки мітохондрій і трансферів). Важливу групу реакцій окислення складають процеси. шо каталізуються цитохромом - 450. ■ Цитохром - 450 відповідає за реакції гідроксклювання, використовуючи молекулярний кисень і редукційні елементи, джерелом яких служить НАДФН 1 НАДН. •

В клітинах печінки дослідних і контрольних тварин зміст залізосірг.ових центрів (в=і,94).вільних радикалів (8=2,00). а також трансФеріну (8=4,3 1 5.08) істотно не відрізняється.. В аей же час рівень низькоспинної окисленої форми цитохрсму Р-450 (8=2,42) в досліді збільшувався на 16 7/ .

В крові тварин дослідної і контрольної груп вміст грансферіну та дерулоплазміну істотно не відрізняються. Разом

* тим привертав увагу неоднакове значення відношення амплітуди :игналу ЕРП трансФеріну до амплітуди сигналу церулоплазміну: іа контролі не відношення рівне і. 33, а в досліді - 0,68.

Дослідження показників функціонального стану гідроксшіюв-іоі системи проводили спектрофотометричним методом В МІКРОСО-іах печінки, проби котрої відбирали під час забою тварин.Гри іьому було відмічено,шо вміст цитохромV р-450 і р-420 в ткани-іах тварин дослідної групи бишій. ніж у . контрольної.

іидпоізідно в і, 5 і 2,3 рази

Еокпвнтраяія иитокроиу Р-450, дослідкена нетодо^ спектрофотометри, відрізняється віц псказників Епр-спектроскопіі. Це свідчить, ио при кроні'шому нітратному отруєнні порушується Рівновага між окисленою 1 ¡відновлено» Формами ііитохрону Р-450

1 збільшується1 кількість відновленого, цитохрому Р-450, який не сприймається методом ЕПР спектроскопії. Досліджено, ■. шо біля 50 х гемопротеїду в печінні тварин досвідної групи знаходиться,У відновленому стаді; цо слід вважати результатом дії нітратів.

‘Таким чином, дослідження вмісту, парамагнітних центрів в СУБКЛІТИННИХ структурах печінки і крові , корів методом ЕПР спектроскопії, а1 також показників - функціонального стану гідроксилюючоі системи методом спектрофотометрії показало, шо в умовах довгострокового надходження в організм нітратів проходять наступні зміни: знижується антиоксидантна активність

крові за рахунок співвідношення ‘церулоплагміну і трансФеріну;-змінюється рівновага між.окисленою і відновлено» Формами питомому Р- ■■'150/ со оеумоалюе. зниження функціонального стану гідроксшюіочої системи, , Це підтверджується зниженням активності ИАДФН-цитохром Р-4,50 , редуктази. Н- дикетилази і па-раг/дроксилази. ■

АМІНОКИСЛОТНИЙ СКЛАД КРОВІ ПРИ ХРОНІЧНОМУ НІТРАТНОМУ ОТРУЕННІ Порушення змісту вільних амінокислот ‘плазми і, цілісної крові е результатом якісних і кількісних змін при синтезі та розщепленні білку організму. Велика частина амінокислот крові затримується гелдтонитаКи печінки для біосинтезу білку або використовується в метаболічних процесах. Тому слід вважати, шо порушення амінокислотного складу плазми крові, крові і вільних ампюкисдрт крові е наслідком порушень в катаболізмі і анаболізмі ^ілку під.'.впливом суйтоксичн^ік кількостей нітратів.

Відмічена закономірність у динаміт змін вмісту вільних амінокислот крові , а.мікокислот плазми крові і анінокислот цілісної крові при хронічному нітратному отруєнні.

Нозща відділити .6 варіантів таких змін. До першого варіанту слід віднести 'концентрат», лізину і гліцину ; при цьому характерно , підвищення іх рівня у вільних .амінокислотах на 2,9 -

9.9 -V у іплазні - на 10.3 - 18,9 х і у цілісній крові - на 3,0

- 3,9 для даної ацидограми характерне підвищення у всіх се-рероришазі -лізину її глішшу, що зв'язано з невикористанням шга амінокислот організмом, в умовах отруєння нітратами.

другий варіант досить схожий з цераим, але характеризується дуже ведиким підвищенням рівня, вільних амінокислот ( на

- и -

£5.5 - 40,5 /и). • В той час як У плазм), - На 9,6 - 26.1 ГА 1 у крові г на 1,1 - 9.3 ул. до цього варіанту змін відносимо

вміст аспарагінової кислоти, валіну 1 лєкшіну.

Для третього варіанту характерно підзкиення рівня амінокислот у плазмі ка іьб - 53.2 '/•, у крові - на 3.6 - 6.2 з одночасним , зниженням вільних амінокислот на 2, 4 - 16.1 В такому вигляді змінюється концентрація гістидіну. серіну 1 г’лутанінової кислоти, ,

Ашідограиа четвертого варіанту відзначається одночасним гнл*енням рівня вільних амінокислот крові на. 4. 9 - 35, & , і

амінокислот, цілісної крові на 2.5 18.4 '/• . при ньому відбу-

вається збількення їх у плазмі крові на 5, о - іб. е и. Така закономірність змін характерна для аргініну і тіроЗипу.

зменшення рівня проліну 1 ізолейаину у ділісгіїй крові на ‘і, 9 - 6,9 ’/■ при збільшенні їх у плазмі на £', 0 - 5.3 у. і у

вільних- амінокислотах крові до досить високого рівня ( 36,а -

78,9 /• ) характерно для п'ятого варіанту апидограми.

у шостому варіанті аиидограмії відмічалось значне підвищення рівня амінокислот у плазмі (на іо,7 - 37,0 у.) і вільних амінокислот крові (на 6,5 - 23.5 х).При ньому відбувається

зниження вмісту амінокислот у крові на 14, 7 - 44, З За таким типом адидограки змінювались метионін і Фенілаланін, '

РОЗПОДІЛ АСКОРБІНОВОЇ КИСЛОТИ В ОРГАНІЗМІ КОРІВ ПРИ ХРОНІЧНОНУ НІТРАТНОНУ ОТРУЕННІ Вивчена наявність аскорбінової кислоти і цукру, як попередника 11, а також холестерину у крові корів на останньому етапі хронічного, отруєння нітратами.

Аскорбінову КИСЛОТУ ВИЯВЛЯЛИ ГІСТОХІМІЧНО У ВИГЛЯДІ ПИЛЄ-

подібних крупинок, різної.Форми дрібних гранул переважно у цитоплазмі клітгаш, більших і неправильної Форми утворень позаклітинно в тканинах обох груп корів, але порівняно частіше і. в значній кількості у печінці дослідних, селезінці і наднирковій залозі у контрольних. V печінці аскорбінова кислота локалізувалась в міддольковій тканині і волокнистій капсулі, а цитоплазмі печінкових клітин, стінках центральної долькозої вени 1 в артеріолах, у селезінці - в інтерстиційній тканині у гранулах червоної пульпи, по периферії фолікулів, у нирках - в корковому шарі навколо судинних клубочків, • вздовж .прямих і звивистих канальпів.

Біохімічно визначали загальну, окислену (депдро-аскорбінову) і відновлену аскорбінову кислоти. Досліджено, то у селезінці і печінці дослідних корів містилось майже в г рази (ВІДПОВІДНО 130. е±11, 3 - 249.6115.2 179,5 + 11,3- 170,6123,8

- іг -

нмоль/л), у скелетних н’язгх - на 54 ммоль/л загальної аскорбінової кислоти більше, а в наднирковій залозі 1 легенях - на 59.8 - 11.9 ммоль/л менше,ніж у контрольних тварин. V тканинах селезінки, нирок, надниркової залози 1 скелетних м'язів дослідних корів знакоьилось більше дегідроаскорбінової кислоти, ніж у контрольних, а у серці і печінні - однакова кількість. В селезінці і легенях дослідної групи корів відновлена аскорбінова кислота відсутня, а у печінці її дуже багато (119.г ммоль'л). Найвища концентрація окисленої аскорбінової кислоти (255,5 ±6.5 ммоль/ л) у селезінці дослідної ГРУПИ

КОРІВ.

' Кількість цукру в крові тварин, взятої перед контрольним забоєм. становила в дослідній групі 7,3 і 0,4 нмоль/л; контрольній -5.1 ± О. З ммоль/л; холестерину в сироватці крові ВІДПОВІДНО 3.3 * 0.1 1 3,6 ± 0,1 ммоль/л. Р < 0, 01.

Таким чином, при хронічному отруєнні корів нітратами проходять зміни синтезу і розподілу аскорбінової кислоти в органах. найбільш кількість відновленої аскорбінової кислоти накопичувалась у селезінці, яка стає резервуаром для всього організму. Зменшення вмісту відновленої аскорбінової кислоти в надниркових залозах може призводити до порушення синтезу гормонів.

РЕЗУЛЬТАТИ ВИКОРИСТАННЯ НІТРИТОПРОТЕКТОРА Щ-1 При дослідженні нітритопротектора НП - 1 в умовах ГОСТРОГО отруєння нітратами приводило до зниження вмісту у крові

нітратів в і, 7 - 3, і і нітритів в 1,5 - г рази. Клінічних оз-

нак отруєння не спостерігалось.

Використання з профілактичною метою хронічнсто нітратного отруєння препарату НП-і (сечовина і тіосечовина - Ю:і) в дозі

0,1 - 0,2 г/кг маси тіла у бугайаів дослідної групи приводило до зниження кількості нітратів у 5.37 разів, нітритів - у в. в

разів і нетгеноглобіну на 31.8 и .

ВИКОРИСТАННЯ ЦЕОЛІТУ ДЛЯ ПРОФІЛАКТИКИ ХРОНІЧНИХ НІТРАТНИХ ОТРУЕНЬ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ Використання цеоліту з профілактичною кетою нітратного отруєння у тварин в дозі о,5 г/кг маси тіла приводило до зниження кількості нітратів у крові на 16 у. . в цей час нітрити були відсутні зовсін ,а кількість метгемоглобіну знизилась на 58 у.. При ньому рівень нітратів у сечі тварин . шо приймали неоліт. підвищувалась на 39. б * . . ■

■У крові зменшувалась кількість токсичних сполук перетворення нітратів, а самі нітрати і нітрити успшно виводилися з

сечею' із організму. Нормалізувалась кислотно - лужна рівноадга крові. -,

ВИКОРИСТАННЯ НІТРИТОПРОТЕКТОРА нл - з ,При використанні КП - З у крові тварин рівень нітратів знижувався на 201,5 к. нітритів - на 288,5 х, метгемоглобіну -на 507,9 '/• в порівнянні з результатами аналізів крові тварин, яким згодовували нітрат - іон. ■ .

Бугайці, шо разок з токсичною лозою нітратів одержували препарат НП - 3, почували себе добре, клінічні ознаки нітратної:« отруєння були відсутні. ,

ДОСЛІДЖЕННЯ Дії ПРЕПАРАТУ НП - 4 ПРК НІТРАТНОМУ ОТРУЕКНІ

■ Результати використання препарату НП - 4 для профілактики хронічних нітратних отруєнь довели, шо при■використанні.нітри-топротектора у крові тварин рівень нітратів знижувався на

37.9 а, нітритів - на 49. 8 2, метгемоглобіну - на 81.7 у.

ВИКОРИСТАННЯ НІТРИТОПРОТЕКТОРА НП - 7 ПРИ використанні НП - 7 у кгові бугаї'шів Рівень нітратів знижувався на 51.5 г, нітритів - на ¿27. З к, метгемоглобіну -на 662.9 v. в порівнянні з результатами аналізів крові тварин, яким згодовували нітрат - іон. .

ВИКОРИСТАННЯ НІТРИТОПРОТЕКТОРА ЙП - 9 Використання НП - 9 (тараділ, сечовина і тіосечовина -

25:10:1) в дозі 0,35 г/кг маси тіла з метою профілактики хронічних нітратних отруєнь привело до зниження рівня нітратів у крові тварин на 1472 '/■ і повноі відсутності в ній нітритів, чого не було в контрольній групі. Зниження рівня нітратів і відсутність нітритів було і в сечі.

При досідхенні кислотно - лужної рівноваги крові відмічена тенденція до нормалізації рн крові,тиску кисню у крові, надлишку або дефіаиту буферних основ у порівнянні з контролем.

висновки .

і.Довготривале згодовування коровам нітратів в дозі 0,35 г/кг. маси тіла тварини викликає хронічне отруєння, яке характеризується змінами в обміні речовин.

Н. Хронічне отруєння корів нітратами супроводжується підвищенням нітрат-редуктазної активності рубцевої- мікрофлори,, шо призводить до підзишення рівня аміаку і сечовини в крові.

3. Хронічне отруєння корів нітратами супроводжується гальмуван-

- І* -

ням окислювальних процесів в організмі, шо підтверджується значним підвищенням у крові рівня цукру, лактату, пірувату та шавлево-оцтової кислоти.

4.Хронічний нітратний токсикоз корів характеризується зниженням антиоксидантної активності крові 1 порушенням гідрокси-дюючоі системи гепатоцитів.

5.Порушення вміст/ амінокислот в досліджуваних середовииах (вільні амінокислоти крозі, амінокислоти плазми крові і амінокислоти цілісно;, крові) у корів дослідної . груші - е проявом суттєвих змін азотного обміну під впливом нітратів та продуктів їх метаболізму, встановлено збільшення концентрації в плазмі крові дослідник тварин всіх амінокислот і в цілісній крові і у вільних, амінокислотах крові - лізину, аспарагінової кислоти, гліцину, валіну 1 лейцину. 1 зменшен-н.: аргініну, аланіну 1 тирозіну.

6.При хронічному отруєнні нітратами порушується синтез і роз-

поділ аскорбінової кислоти в органах. Селезінка е резервуаром відновленої аскорбінової кислоти для всього організну, зменшення вмісту якої в надниркових залозах може викликати порушення синтезу гормонів. •

7. Використання нітритопротекторів (НП-1,НП-З.НП-4,НП-7,:иІ-9 1 цеоліту) з метою профілактики хронічних отруєнь викликає зниження У КРОВІ рівня нітратів, нітритів 1 метгемоглобіну до безпечних для організму концентрацій, при дії цих препаратів поліпшувався стан кислотно - лужної рівноваги крові,

ПРАКТИЧНІ ПРОПОЗИЦІЇ

і.З метою профілактики хронічних нітратних отруєнь великої рогатої худоби нітратами та змекиення негативного впливу їх на якість м'яса і молока в раціон тварин рекомендується вводити нітритепротектори на основі антиоксидантів, сорбентів 1 деяких мінеральних та органічних речовин.

,г. Натеріали досліджень можуть бути використані для більш глибокого вивчення патогенезу хронічного отруєння нітратами, а також в учбовому процесі при підготовці Фахівців з ветеринарної медицини 1 тваринництва. '

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ РОБІТ ПО ТЕМІ ДИСЕРТАЦІЇ

І.Методические указания по диагностике. проФилакткке . и лечению отравлений сельскохозяйственнші жизотнкх нитратами и нитритами. /хиельницкий Г, А.. Вовк Д. Н., Иазуркевич А. И,, Гіань-КО Н. Ф. .КаРПОВСІМЙ В. И. И ДР. //ГОсагРОПРОМ СССР. -Н. . 1930. -4ІС.

■ - 15 -

?.. назуркевич А. И. I Карповский В. И. . Бергелесов В. М. Изменение хирнокислотного состава и закономерностей кристаллизации полочного жира коров под влиянием нитратов в корнах //Сб. : Актуальные проблемы медицины и биологии.'-Киев. -1986.-т. 1. - С. 310-311. '

3. Хмельниакий Г. А.. Вовк Д. Н., Назуркевич А. И... Карповский В. И. и др.//Проблемы нитратов в животноводстве /Тезисы дс.<л. в сб: Вопросы интенсификации и научно обоснованного вет. обслуживания пром. животноводства. -КонФ. 27 авг. 1967.- г. Кишинев, -1967.-С. 126-127.

4. Назуркевич А. И.. Карповский В. И., Жулкевич A. F- Аминокислотный состав крови коров при хроническом нитратном отравлении //Сб. :Актуальн. проблемы мед. и биол. -К. -198а. -т, 1. -С. 62-66.

5. Хмельннпкий Г. А. . Назуркевич А. И. .Карповский В. И.. Панько Н. Ф. некоторые особенности обмена вешеств в организме коров в условиях хронического отравления нитрато-нитрита,-ни //Сб:Ветеринария.-1989. -вып. 64. -К.,Урожай С. 60-64.

6. Карповский В. И.. Назуркевич А. И., Мельников 0. Р.. Нонот В.Я. Особенности Функционирования гидрЪксклируюшей системы печени у коров в условиях адаптации к ’’лительному воздействию нитратов //Натер. Всес. симсоз. по биохимии. /Биох:ш. с. -к. жизотн. и Продовольств. прогр. -26-20 cûiît. 1989 г. - К. -1989. -с. -101-103.

7. Назуркевич А. И.. Хнельницкий Г. А.. Карповский В. И.. Вовк Д. М., Панько Н. .. функция печени и связанный с ней обмен вешеств при хроническом отравлении нитратами' //Тез.докл. 4 Всес. съезда патофизиологов. /Нарушение механизмов регуляции н ИХ корреляция.-Кишинев, З-б ОКТ. 1989.-н. . 1989. -Т. 3.-С. 1332.

8. Назуркевич А. И., Хмельницкий Г. А.. Карповский В. И..

«ельников O.P., Номот В. Я. особенности функционирования гкд-роксилируюшей системы печени крупного рогатого скота под влиянием высоких доз нитратов //Сб: Ветеринария.-К.-1990.-вып. 65..

-С. 99-104.

9. Назуркевич А. И., Хмельницкий Г. А.. Карповский В. И., Данилов В. Б. Барьерная роль печени крупного рогатого скота при остром отравлении нитратами //Повыш. эффективности лечебно-про-Филактич. мер при незар. болезн. животн. /Нежвуз. сб. науч. тр. -Казанский вет. ин-т. -Казань.. 1990.-С. 66-68.

Ю. Назуркевич А. И., Хмельницкий Г. А.. Карповский В. И., Данилов в.Б. Особенности распределения нитратов и нитритов в ор ганизме крупного рогатого скота при остром экспериментальном отравлении нитратани (данные ангиостомии и биопсии) //Тез. докл. Межреспубл. научн. -техн. конФ. /Проблемы азотистого метаболизма.-Волгоград.-1990.-С. 13.

- 16 -

11. Назуркевич А. И. . Хмельницкий Г. А. .Карповекий В. И. , Величко с. в.. Данилов в. Б. Гормональный статус бычков при отрав-лент, нитрат аки//Тез. докл. Научн. конф. /Экологич. проблемы Фармакологии и токсикологии. -Казань. Г990. -С. 57.

12. Назуркевич А. И. . Карповский В. И. , Данилов В. В., Терес H.A. Некоторые показатели жирового обмена в организме крупного рогатого скота под влиянием высоких доз нитратов //Тез. Peca. конФ./Проблем, цитратов ü животноводстве и ветеринарии. -Киев, 17-сО Сент. -К. . ИЗД-ВО УСХА, 1990. -С. 33-33.

13.Казуркевич А. И.,Величко С. В. .Карповский В. И. Динамика уровня белка и его фракций в крови бычков при остром экспериментальном отравлении нитратами //Тез. Респ. коиф./Проблем, нитратов в животноводстве и ветеринарии.-Киев. 17-го сент. -1C.. ИЗД-ВО УСХА, 1990. -С. 51-52.

Калиновский Г. H., Карповский В. И. Роль аскорбиновой кислоты в организме коров при хроническом отравлении нитратами //Сб:Актуальн. проблемы мед. и биол. -К. -1990. -т. 1. -С. 212-216.

15. HasurKewytsh A. I. .KarPovsKv V. I., Danilov V. в.

Metabolism and liver function unûeranlmals adaptation to nitrate reduncy //Constituen congress international Sosletv for Patchrsiologv. -Moscow, -may ?.6-yune. -1. -1991. -Kuopio.

-finlaftde 1991.-p. 3Q1.

16. Методические указания по диагностике .профилактике и лечению отравлений сельскохозяйственных животных нитратами и нитритами /Хмельнипкий Г. А. , Вовк Д. И.. Назуркевич А. И., Панько Н. ф. . Карповский В. И. и др.//Гос. Комиссия СМ СССР по продовольствие и закупкам. Гл. Упр. ветеринарии с Гос. вет. инспекцией. -Н. . -1991. -75 С.

17. Назуркевич А. И. .Карп&Есккй в. К. , Данилов В. Б. .Способ профилактики отравлений животных нитратами.-Патент N 1790377 ОТ 22. 09. 92 Г.

1S. Назуркевич А. И, . Карповский В. И. , Величко С. В., Дгкилов

В. Ь\ к др. Способ кормления телят. -Заявка на патент Н 5038635/15(012002) ОТ 18.03.1992 Г.

10S<1 УГ.1' УДАУ,»1Г.З*. 100