Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфологическая и цитохимическая характеристика клеток лимфатических органов крупного рогатого скота при лимфолейкозах и лимфосаркомах

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К. И. СКРЯБИНА

\ На правах рукописи

МУС ИЕН КО Павел Михайлович

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛЕТОК ЛИМФАТИЧЕСКИХ ОРГАНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ЛИМФОЛЕЙКОЗАХ И ЛИМФОСАРКОМАХ

16.00.02 — патология, онкология и морфология животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

МОСКВА 1991

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им. К. И. Скрябина.

Научный руководитель: академик ВАСХНИЛ Доктор ветеринарных наук, профессор Шишков В. П.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор Стрельников А. П.

2. Кандидат ветеринарных наук, доцент Прусак-Глотов В. Э.

Ведущая организация: Казанский ордена Ленина ветеринарный институт им. Н. Э. Баумана.

Защита диссертации состоится «» . .

199^. г. в «ci^yf. » часов на заседании специализированного совета Д 120.36.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им. К. И. Скрябина по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23, тел. 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке МВА.

Автореферат разослан « "70. » . . 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета 1 Слесаренко Н. А.

ОБЩАЯ ХЛРШЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность та,та,' Среди отологических заболеваний крупного 'рогатого скота гемобластозы занимают первое место по частоте и тяяести течения, нанося значительный экологический ущерб.'

Актуальность работы определяется тем, что цитохимические исследования недостаточно широко применяются для диагностики гемоблас-тозов .тивотншс и у крупного рогатого скота выполнены, главным об-> разом, на лимфоцитах крови /А;ТЛ. Никит енко, 1578} Л ГА," Кущ)явц&^ за,1979} Г.а. гоп8 at а! »1979,* КС. Петровский, ГЛ1. Афонина, 1981?' т.к. смп^га «г а! ,1982$ о. кд^шита «4 о! ?1983; Во®. Бронштейн? М.Н.' Данилова,1984{ ИЖ Басова,1988/?

В литературе не приводят конкретных сведений о характерности цитологических и цитохимических особенностей;, которые могут быть исг.олъзовакы в дифференциальной диагностике отдельных форм лимфоид-8 нтк пеоплазий.* Кроме того, предвдущяе работы, являясз цитологичео«* ними или гистологически?.®, мало придерживаются принципа комплексности г еовмегцалцего оба метода на одном и тсм-же материале.1

Цель и задачи исследований^1 Цель исследований - разработать дисН ферищиальную диагностику лимфоидных форм гемобластозоз крупного рогатого скота па основе морфологической и цитохимической характер рнстига клеток лимфатических органов о учетом данянх геиатологшх 2 гистологии;

Исходя из этого бшш составлены ■ следующие задачи;

К' Выявить нормативные показателя морфологии в цитохимии клеток лимфатических органов?

2? Установить цитологические и цятохетшеекзе критерии дифференциальной диагностики лимфоидннх форм геиойластозов?

3? Сопоставить цятоморфологическиа параметра язмфатическнх оргаЛ поз у жйзотянх, больных тгабластозает а неанфтироэаяннх вирусоа лейкоза крупного рогатого скота /ВЛКРС/?

Научная новизна'? Дано систематизированное, а применением вктажз» ютеских методов морфологическое описание отдельных типоз клеток лимфатическая органов у крупного рогатого скота'? Ваяшгетщ цотота» шчеекзе осйбенносга ^етпрех еткфоадяис фора геглоблестозоэ а ста» гяЗ хронического ядафолейкоза^' охарактеризовали цитологические варнаки последнего? ЦзтояорфологЕгсескаэ кссладоганяя болънше гсгс— блаогозама яиаотянх проведена в кояиеяев о гекатолоютесинн и гистологическим методагз а в сравнении в группой серонегативннх

-У-

на наличие антител к ВЛКРС коров?

Научно-практическое значение? Представлены сведения о цитолог«^ 460Kzz и цитохимических особенностях клеток •дафатических органов при световой ютроскошш? Установлены критерии идентификации иш-фоидных опухолей на основе цитологических и цитохимических показь* телей, характеризующих отдельные фораы к варианту и комплексно до» полняющих гематологические и гистологические данные? Создшщ пред-i пооылки для более детализированной классификации гемобластозов и раскрытия их патогенеза;1

Реализация результатов работа1-? Полученные данные используются орз проведении лекционно-практических занятий по патологической морфологии опухолей системы крови на факультете повышения квалифк-Л' кацап ЫВА по sypoy "Диагностика лейкозов"? Кроие зого, они предо-гавлекы з информационном листке Ноообл ЩГГИ "Патологочюрфологичео-кая диагностика лимфондных гемобластозов крупного рогатого скота"J подготовлен и сдан материал для методических рекомендаций "Дифференциальная диагностика гемобластозов п онкорнавирусноЕ инфекции у сельскохозяйотвешшх животных* /1990 r'J/

Игблпкапая работ? По итогаы диссертации опубликована тезисы к тря статьи;1

Апробация работы';* Результата днссертацаоннс2 работы доложены на научных конференциях !Зооковско£ ветеринарной екадемлг /1984,1986, I987s 1930 rr.'/j 9-2, 10-Я с Ц-2 копфереяадях ишщк укппс /1986-1988 гг.1-/ я I-S -ВоеоованоЗ ков^ереицзз иолодых учеши и спе«' щалггетоз /Щ% 1Э&5А'

Объем работы,'1 Диссертация язлояеиа на 1Г.С опрашед*.»^«шопкепо-; го текста, иллюстрирована 40 ыдкрофотогра^лямц, 8 $o?<u»Kf ахами, 2 oxeuasai, 8 таблица;,зг к сосюит из следующвх разделов: »ксдедио, обзор литературы, ообот&енпые исследования, обсуаденве рьяультмов исследований, выводи, вракклдекие предложения." Список лиг^^гурц включает 211 источников, в той числи ISO иностраяшсС На защиту выносятся положения работы:

l'i Раздададе хронического лаыволсЯксза ка spa цигслох-.., i варианта, раздичаявдаоя отоутогькев та наличием MKUiiij»«»«.»^ веЗхрофидьиой реакций ь шмфодльекгл органах.,'

2; Цигохишческие особенности разизигя xpcm;!;f:w.:.vi> фодмдохо-за и точашя лимфовдтариого и ллм^ойлдешого ¡¡af.i«,^». лв^Гоойрго ш, продляющиеся измеккгкямв и ли#аткчоских узлах долей клеток с pasitua характером распределения глакога»;'-

-г-

С01СТВН11ШЕ ИССЛВДОВАНЙЯ

Материал и методы

Работа вшолнена в лаборатории лейкозов и радиодамунологкя о$~хИ животных Московской ветеринарной академий т'.' КЖ Скрябина на материале из хозяйств Московской области;"

Объектами исследований служили лимфатические органы 104 голов крупного рогатого скота черно-пестрой породы;1 Из них - б животных были с отрицательными результатами серологической реакции иимуно-диффузия /РИД/ с антигеном Ш1КРС, выполненной Крикуном; 6 -РИД-пододателышо и 92 - болыше гемобластозами?

Основой для постановки диагноза являлись результаты гематологического и гистологического исследований! Первое проводили совместно с ПС; Петровским; оно включало подсчет количества лейкоцитов, выведение лейкоцитарной формулы и расчет абсолютных количеств лим-фоклгах клеток и нейгрофалов'? Гистологическое исследование селезенки и лимфатических узлов проводили совместно с ГЙЗ!1 Снозом; образцы органов и тканей обрабатывали по общепринятым правилам патоло-гогисгологической техники; парафиновые срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Изучала распространенность выделенных форм яеоплазий /в % о? общего числа больных/} названия формам давали, используя ке.здународиута медицинскую классификацию ВОЗ / а. сз&ь» »4 ах ,1976/ и близкую ей ветеринарную /ВЛ)!1 Смирнова, "П1П: Кудрявцева, 1986/;1 Лимфатические органы от 56 животных исследованы комплексно с применением цитологического и цитохимического методов? Из этого числа выбрапы 5 контрольных коров /РИД -/» а больные гемобластсза-Ш1 разделены на четыре опытные группы в соответствии с установленными формата и вариантами заболевания?

■ Из селезенки и лимфатических узлов делали препараты-отпечатки, которые окрашивали по Романовстчу-Гкмза, обрабатывали на гликоген по Йак-Манусу я Хочкису /реакция ШИК/» неспегщфическую эсторазу /й'^'У по Пирсу в модификации Леффлера, кислую фосфатазу Д?ФУ по Берстон7 2 НПС по Брало.11

Оценка цитологических и цитохимических данных вкличала ярерде всего описание морфологических признаков клеток /форма; особенностей ядра, цитоплазмы, их внутренних структур/ и характера распре-; деления выявляе?щх веществ /диффузного или в виде дискретных частил/Г Затем цитохимические и некоторые цитологические признаки оценивали в процентах1? Для этого в пяти произвольно выбранных полях

зрения микроскопа подсчитывали под иммерсией общее число клеток /около 300-500/ и отделяю считали характеризуемые клетки; Далее рассчитывали количество последних на 100 ядросодержащих элементов; при оценке показателей цитохимии, клетки с очень слабой окраской /сомнительной/ и миелоидние клетки ие учитывали.

Кроме того, в лимфатических узлах определяли доли клеток с различными качественными особенностями реагирования на гликоген /от общей численности подсчитываемых на группу животных ШИК-полокитель-ных клеток, принимаемой за сто процентов/% находили также средний цитохимический показатель /СЦП/ содержания в лимфоидных клетках ШК»1 Полученные данные анализировали в сравнительном аспекте.

Наличие у контрольных и болышх гемобластозами животных нейтро-филии, эозинофилии и плазматизации лимфатических органов /реактивных изменений/ констатировали при выявлении соответственно нейтро-филов, эозинофилов или клеток плазматического ряда: в селезенке -2,6-3,0; лимфоузлах - 1,6-2,0$ /нормативные параметры силенограм^ да и лимфоаденограши приведены JI.iT. Бурбой и др'?,1988/.'

В гистологических препаратах перечисленные показатели оценивали визуально при нахождении скоплений соответствующих клеток /6-8 и более/ в нескольких полях зрения микроскопа /ув?400/?

Качественный анализ.материала, помимо вычисления процентов кле-^ ток с разным характером распределения гликогена, включал изучение частоты встречаемости случаев, имеющих реактивные'изменения и некоторые признаки, рассчитываемой в долях единицы?

Данные сравнительных исследований лимфатических органов и кроЕи подвергали статистической обработке по стандартным формулам для малых выборок или согласно методике схатистиаеского анализа изменчивости по качественным признакам; достоверность различий мезду группами оценивали с помощью таблицы Отыодента,-

РЕЗУЛЬТАТЫ

Морфологические и цитохимические признаки клеток лимфатических органов

В результате исследований охарактеризованы малый и большой лимфоциты} светлоядерный лимфоцит /пролимфоцат/}' шгаэаобласт /¡шцгно-' блаог/| лиыфоплазмоцитоидная клетка} лиафоблао-С} базефшлшй лнм-фобласт; плазматическая клетка; макрофаг} клетка сгрегш?

Малые лимфоциты диаметром 6-8, большие ~ 9-14 мкм с рпперхром-ныы, зерцнсто-глнбчатшд хроматином;' Отличительные особенности свет-

-Ч- '

лоядерных лимфоцитов - разнообразие по величине /8-20 таи/ и преимущественно' зершюто-далкосетчатая структура хроматина, окрашивающегося в розовый или бдсдно-фиолетоЕнй цвета!' При нахождении в ядрах I-3-x крупных }гуклеол, клетки относили к лтшфоблзстам; Базо-фильную разновидность последних отличали чрезвычайно неяшй /топ-кодисперсннй/ хроматин и узкая темно-синяя цитоплазма;

Гликоген в лимфоцитах и лимфобластах имел вид зерен} поясков из мелких гранул; дискретных средних гранул вокруг ядра, которые при слиянии формировали блоки и полоски сверхянтенсивноЯ ИИК-окраскл;

Плазмобласты, размером 12-26 мкм, имели утлеренно широкую и темно-синюю цитоплазму; от типичных базофильншс лимфобластов их отличал обычно более грубый /зернистый/ хроматин;1 Основные различия ллмфоплазмоцитоидной и плазматической клеток - в содержании гликогена, Н.Э.'' и К»ф;; /второй тип клеток цитохимияееки активен/.'

Основные различия макрофага и клетки стромы - в особенностях формы ядра /соответственно округлая й овально-вытянутая/; особенностях цитоплазмы /широкая очерченная, с крупными вакуолями и сравнительно узкая, размытая, без вакуолей/} активности Н;Э;' /чаща сильно выраженная и обычно нулевад/V Клетки, содержащие в цитоплазме частицы гемосидерина, были морфологически близки стромальним?

Гликоген в плазматических и нелимфоидных клетках имел вид диффузного окрашивания цитоплазмы или глнбок /гранул/ на диффузном Фоне!

Цятокорфологическне особенности лимфатической ткани ЩЦ-отряцатедь-hux /контрольных/ животных

7 серонегативных тавотных били зарегистрированы некоторые заболевания: серозно-катаралышй мастит /И 1/{ гнойный перикардит /Л ?J\ интерстициалышй нефрит и остеомаляция /И 3/; фаецполез ¡'А 4/; перелом голени /Л 5/?

В лимфатических органах преобладали лимфоциты и светлоядерпые ли:.".фоциты; лимфатические узлн задней половина тела /в основном па-ру;шые подвздоппша/ характеризовала стромальпо-клеточная реакция; среднее количество клеток строки составило 4,01 £ 0,43%; разница относительно заглоточягос лимфоузлов /1,11 ~ 0,10$/ достоверна /Р< 0,001/ и говорит о большей цитологической стабильности последних?

В селезенке установили нептрофядгго, котсРоя такжэ имела мосто в лимфатических узлах: надвымягаоы /коровы Й I/ л наружном подвздошном /коров Ш 3 и i/',

7 твотях !№ I п Э в селезенке обнаружили эозинофллип; плазма-

ткзация за счет плазмобластов установлена в случаях № 2 /заглоточ-' ного лимфоузла/ и № 5 /заглоточного, и наружного подвздошного/;'

Гематологические и цитохимические данные представлены в таблице 1« Гистологическй в селезенке скопления гранулоцитов просматривались в основном вокруг фолликулов; сами-же оии не увеличены!' Фолликулы лимфатических узлов,, как правило, в состоянии слабой гипер-плазик$ трабекуяы мозгового вещества слегка инфильтрированы лимфо-цитами§ в случаях 2 и 5 отметили резкое расширение светлых центров» У коров №!§ I и 4 обнаружит уменьшение фолликулов наружного подвздошного /№ I/ и предлопаточного /А 4/ лимфоузлов; у коровы й'I также наблюдали редукцию лимфоидной ткани мозгового вещества, состоящей из малых лимфоцитов; .она сохранилась в виде очагов;'

Цитологическая и цитохимическая характеристика ли:дфолейкозов и лим-фосаркои

Диагноз ХЛЛ в наших исследованиях поставлен у 64,1$ животных? Заболевание характеризовали гиперплазия фолликулов селезенки и лимфатических узлов; преобладание в этих органах лимфоцитов /обычно малых/ и светловдерных лимфоцитои^' Среди них встречали плазмоциты, плазмобласты и реже лимфоплазмоцитоидные клетки.

Мы разгранинили три варианта: пеосложненный; с эозинофильной реакцией .и с нейтрофильной реакцией /распространенность соответственно 10,7; 53,6 и 35,7 от численности группы ХЙД/.

Первый вариант включал случаи -без вторичной патологии и существенных реактивных изменений клеточного" состава лимфатических органов; Две коровы тлели слабую пла'зйатйзацдо заглоточных лимфоузлов за счет шазмобластов и отлйайийь самим высоким лейкоцитозом /130,6 и 160,6 тысяч'в!Г ш(л кровд/- преобладанием лимфоблаотов, главным образом, в селезенке и иахмием крупногранулярной ШС-реак-. ции; Данное состояше 'ЬОределено как бластный криз ХЛЛ,-

При ХЯЛ о эозйнофйльной реакцией воспалительные процессы наели в шести случаях, 'из тшх - в трех и еце в одном - гельмянтозы. У тринадцати животных эозикофилия развивалась в селезенке, а у двух коров была' слабо выражена лишь в единичных лимфатических узлах!1 У сема-коров отметили плазматизацкю лимфатических узлов и у семи -возрастание лимфоблаотов /у большнства - базофнльних/,'

При ХЛЛ с нейтрофильной реакидаей у трех из десяти животных заре-; -гистрированц воспалителыще заболевания; нейтрофилия наиболее часто имела место в селезенке. Распространена плазматизация лимфатических

Таблица I

ГЕМАТОЛОтЕСКАЯ И ЩПОХИМИЧЕСЗКАЯ ХАРАКТЕК:СТСА КОНТРОЛЬНЫХ 2ИВОТШХ

Д» КОрОВ:

¡количество лейкбпитов крови (тнс/мкл)

I-

количество лимфовдгапс ' процент реагирующих клеток в 'заглоточных клеток в крови Стыс/мкя)лимфоузлах

ГЛЕКОГ8Н

не специ^иче екая эстераза

1

2

3

4

5

ю;1

6-,-2 12-, I

б;7 5,1 9,8 з;4 7,0

0,6 ~ 1,6 0,8 - г,2 Г.4 - 2,8 0 ,9 - Г;1 0 ,5 !. 1,7

О - 0", 5 0 ,7 1,3 0,6 - 0,7 О - 0~,4 О ¿5 - 0,8

з средней

10,5 1 1-6

6 ,'4 * 0 ,7

1,Э0 £ 0;15

0,54 * О.Ю

»

-ы 1

узлов /славит образом, за счет лимф-оилаздацитоидиых клеток/} ее на выявили лишь у двух коров; В четырех случаях возрастали лиыфоблаоти»

Нейтрофшш занимали мозговые синусы лимфатических узлов, а элементы плазматического ряда - мякотные тяжи. У двух коров отметили появление в мозговом веществе очагов малых лимфоцитов, а у одной из них - сильное уменьшение фолликулов в рубцовом лимфоузле;'

В таблице 2 дана оценка вариантов ХЛЛ» Они отличаются от контроля меньшим содержанием нейтрофилов в селезенка /Р< 0,001/;* Вто-

■ рой вариант выделяется постоянной эозпнофшшей, которая не установлена при ХЛЛ о нейтрофильной реакцией.' При неосложненноы ХЛЛ эозинофилия и неатрофллия отсутствуют, а процент нейтрофилов в селезенке крайни мал /различия со вторым и третьим варианта;,ш;Р< О,

Диагноз ОЛЛ в наших исследованиях поставлен у 9,8$ животных.' Характерно преобладание лимфо б ластов со слабой базофшшей цитоплаз-

■ ш| в отличие от случаев ХЛЛ с нейтрофильной реакцией у больных ОЛЛ как правило не отмечали нейтрофшшю и плазматизацию лимфатических органов;' Показательна постоянная крупногранулярная ШИК-реадцпя в 0,63 г 0,14д лиифобластов;' Гранулы обычно множественные, кра&Ге редко имели вид околоядерних ободков, как правило образуя скопления на полюсах клетки /в расширениях цитоплазмы/.'

Гистологически лиафобластн-занимали в селезенке чаще значительно увеличенные светлые центры или гиперплазцровашше фолл;Н(улЫ{ в лимфатических узлах - резко расширенные светлые центры -шг.; 'обширные участки около трабекул^ В тазовом лиыфатнческом узле одной коровы найдены островки малых лимфоцитов на фоне лимфоблйстов^'

Диагноз лимфоцитарпой лимфооаркоиы в наших исследованиях поставлен в 14,ГХ случаев? Клеточный состав лимфатических органов к морфологические признаки 'лш^оодтов в общем сходны о таковшла при ХМ| у четырех животных в препаратах-отпечатках выявлено возрастание числа двухядернпх лимфоидннх клеток /2,VI £ 0,34/2/| разница с Ш1 /1,38 г 0,20%/ достоверна /Р^0,01/; Характерно усиление птюнино-фзяш цитоплазмы ц ядер /в виде зерен/; С ЦП содержания в лимфоцитах РНК составил 0,33 t 0,05; различия с контролем /0,14 * 0,02/ ч с ХЛЛ /0,16 - 0,02/ достоверны /Р<0,01/;- Атшшзи клеток л:«4оснр-ко мы проявлядоя деформацией ядерной «ммфшкь /у двух иороь/| наличной одиноч:шх, разного размера гранул глпк^^нц в ядрах /у двух коров/ и гиперхрошцх структур в цитоплазме, /у одной коровы/?

У четырех юиютшк обнаружена плазматйзшия лив1««инындах узлов за счет' типичных лнщеплазыоцитуших клеток и плазмсблаатов /6-10$/.'

~ и

Хейлвш 2

особенности вавшггов хронического диаолй&оза.

I I

Г р у и л ¿г \ частота зсгре^аемоем показателей (в долях); содэряанге нейтрофгяов

возвноЗзиия з сзлзззн-ке и лимфоузлах ¡гэйгрофглпя в селезенке и лимфоузлах в селоззкке ( % ) в крова (ткс/кел)

' I 2 3 4

I. К о Л 3 р О Л1 | 0,40 & 0>22 0г=5) 1 1-;оо 9'36 1 0;80 {7*5-14~,0) 3;4 £ (Г,5 (2-,{М,0)

2? ВвослоЕнзкннй ХЛ2Г (П= 3) с 0 а; 83 1 о;1б {ОГЗ&ф) 2ГД £ 1;5 (0и>8)

■?Ч 22Я с зозЕнофгиь-но£ рзЕПщей 1 (а =15) Г,00 . 0;80 & о-;Ю 5^54 ь а,36 (Г, 1-13,5) . . 5",0 1 г;5

¡4? ХЛЛ с яе£трофалъ-; ной рзяпдкзй ! ю) 0 Г;оо 4^51 ~ С-,81 (2т0-7^5) 3,7 1 0,8 (2,1-7,8)

о

I

Нейтрофилию в селезенке и лимфатических узлах, в том числе опухо-. левидных, наблюдали с частотой 0,71 ~ 0,17| количество нейтрофилов было в среднем равно 6,8 - 0,9$, а в крови -.4,3 - 2,4 тыс/мши Особенностями гистологии лимфатических узлов при лимфосаркоме вне.зависимости от ее варианта являлись очаги малых лимфоцитов в мозговом веществе и истончение /атрофия/ корковой зоны; фолликулы селезенки обычно не увеличены, а нередко, даже уменьшены,'

Диагноз лимфобластной лимфосаркош в наших исследованиях поставлен у 12,0/5 больных гемобластозами яивотнши1 Характерны многообра- . зие типов клеточных элементов /лимфобласты; базофильные лимфобласты с разной плотпостью хроматина} лимфоциты п светлоадерные лимфоциты/; крупноячеистое строение ящер части клеток; вариабельность гистологической структуры лимфатических органов и преобладание диффузной опухолевой пролиферации;' Деформацию ядерпой мембраны лим-фоидных клеток выявили у двух швотных, а одиночные гранулы гликогена в области ядер - у одного?

С ЦП содержания в лимфоидних клетках ШК составил 0,12 - 0,02} разница с лимфоцитарным вариантом достоверна /Р4.0,001/, Общий процент клеток с крупными гранулами гликогена 0,28 - 0,Г0;число гранул на клетку обычно 1-3; Расположение в клетках Н.Э.' было похоже на таковое в контроле, п при других темобласто.зах; фермент имел вид гранул и глыбок с колебаниями по количеству и величине, часто на диффузном фоне;' Результаты реакции на К.С>. - слабодлС'Гузнде окрашивание цитоплазмы иле хорошо различимые крупные глыбки; процент клеток, реагирующих на КЖ был равен Г,82 £ 0,46 /разница показателей К.Ф; и недостоверна и говорит о равноценности методик/Г Из таблицы 3 видно, что лимбоцитарная лимфосаркома имеет преимущественно алейкемнческое течете: по количеству лимфоидных клеток . в крови она близка контролю /Р>0,05/ и отличается , от ХМ Л>^0,01/1 Димфобластный вариант выделяется лейкемическими изменениями крови:' количество лимфоидных клеток больше /Р<10,05/, а разница с ХЛЛ по этоцу показателю Р>0,05, Л1ри лшфобластной лимфосаркоме процент реагирующих на гликоген клеток вше, чем в контроле /Р<0,05/, при ХМ /Р<0,01/ и ОМ /Р<0,05/, а на Щ-Э;' - чем в контроле /Р< 0,001/„ при ХМ /Р<0,01/ и лжфхитарноЯ лимфосаркоме /Р<0»01/;1

Из таблицы 4 заметно преобладание в контроле зернистого, и гранулярного распределения гликогена в клетках /условно первого т:та/ -над ди£>5узным и ди®узно-глыбчахшл /второго тица/Г Цри ХЛЛ; умерен- • '■■. но возрастает доля клеток второго типа относительно контроля /Р<

• ■ -/О- .

Тейяща 3

ШШСШШЕСШ 15 ЩИШ^ЗИЧЕСШ ХАРАКТЕРИСТИКА Лй'ОТШй ФСК ГаЮЕСАСТОЗОВ

- .1 -?" - ........ ...... Г р т и п к ¡количество лейкоцитов ¡з кровг {та/ьтл) ! . ■ | колете с тв о лиифоют! клеток в крови (тыс/мкл) : процент рэатирущих клеток в лгайоузлах (гл.обр. заглоточных)

гликоген не спецсфиче окая эстераза

'II 2 3 4

•I. Контроль \ ю;5 * 1,6 (ги=5) (б;2Ы5-,9) 6,4 ¿0,7 Г, 30 1 0*,15 (0,5"-2',8) 0,54 í 0,10 (0-1,3)

2. III («г = 28) 49*5 1 7-,4 С19, о-1 да ;о) 44,7 1 9,4 (16,6-153,6) 1,10 t 0,19 (0,2-2,9) 1,28 1 0,19 (0,8-2,6)

Й, О Л' л (а- 4) • и ' 1,17 1 0,13 (0,6^1,7) -

4,- ЛиыЬоцитарпая лгыфосаркома (Л =7) 13,1 £ 3,4 (5,9-26,0) 9,7 * 3,5 (1,9-18,5) 1,90 1 0,31 (0,4-5,0) 1,04 - 0,32 (0^,5)

Б. Нимфобластная линфосаркома ((%= 5) 31-,6 1 7,9 (14,8-51 ,1) 28,8 1 5,9 (17,7^45,0) 2,90 £ 0,60 (0,9-7,2) 2,63 1 0,42 (1.&4.6)

1

Тайгаца 4

ОСОБЕННОСТИ РАСПВДВЛЕНЕЯ ГЛИКОГЕНА. В КПЕШ1 ЛИШТИЧЕСШ УЗЛОВ ПРИ ГШЕШТГОЗА!

®

Г ру п 8Е доля клеток (в

1 с зернами к мелкими гранулют с ободками из средних гранул о диффузной окраской жщ глнбкадщ /гранула ш/ на диффузном фоне с крупными множаст--вонншги гранулами

1 I 2 3 4

Контроль 84,1 1 2,3 2,811,0 10;3 1 1*6 1 0",8

X Л Л 62-,3 12,8 4,0*1,1 31,1 1 '¿,7 1,3 * 0;6

2. О л ж 20,7 ^7,4 2 ,-5 * 2,5 12 ,9 * 5,5 41,0 * 7,9

Лимфоцятарная лям$о саркома 34,1 1 5,0 7,7 £ 2,8 53,8 »5,2 4,4 1 2,2

ЛшЬобластная лзафэсаркома 40,5 1 5,7 - 47,4 * 5,8 5,4 12,5

Тайдвда 5

ОСОБЕННОСТИ тппщжвт ТЖЖОТЕйк Ъ щгшх ЛМФАТИЧЕСЙИХ УЗЖШ ЕА РАЗНЫХ СТАДИЯХ РАЗИЛИ ХГОШИ2СК0Г0 2Е.ШЕЕЙША

Л

Г р-у л л и доля клеток (з %)

о зэрзгии 2 молиши грапулс£1 с ободвами из средних гранул с двсЬфузпой окраской шш г лыбкаки /гранула ьш/ на диффузном фояо С крупяькг 1ШОЕ0СТ!™ -зеншзга гралуинж

: I 2 3 4

!Г. Контроля 84"Д £ 2^,3 2;8 ¿1,0 20 ¿3 4.1,9 Гг6 1 0?8

НЩ •+; тасзо £9,3 £ 3,7 ' 3,2 £ 1,4 £2*3 £3,4 & ГД

¡3." .1 сгадая ЖЛЖ 55?? & 4^7 2;6 ^ 1;5 40/; ^ 4^6 1. -

¡IV И ет/дая ХИ 61-,31 №,7 4^8 £ 14 6 29 Д 4 3*,5. 2~,4 £

( ¡57' ХП кгадая 222 78^6 4- 4',9 Н^ £ 7*1 £ зд

к.

I

0,001/, а при ОЛЛ значительно увеличивается доля клеток, содержа-' щих крупные множественные гранулы /различия с контролем, и лимфо-бластной лимфосаркоыой достоверны} Р «¿.0,001/,

Лимфосаркому /особенно лимфоцитарный вариант/, по сравнению с контролем и ХЛЛ, характеризует резкое изменение соотношения клеток первого и второго типов /соответственно снижение и повышенно их доле?!/ в лимфатических узлах| различия как правило Р <£.0,001,

Из таблицы 5 заметны увеличение содержания клеток Еторого типа у короз РДЦ + по сравнению с контролем /Р<£0,01/« еще большее возрастание доли указанных клеток в первой стадии ХЛЛ по сравнению с группой РВД+ /Р<0»01/ и постепенное снижение при генерализации; во второй стадии по сравнению с перзэй /Р<0,05/ и в третьей -00 второй /Р<0,001/;

Таким образом, у крупного рогатого скота, больного гемобласто-эаки в лимфатических узлах найдены цитохимические особенности, которые проявляются, главным образом, изменением долей или относительных процентов клеток с разным распределением гликогена.' В связи с неоднородностью хронического димфолейкоза, последние могут варьировать у отдельных животных, а такке зависят от стадийности заболевания,1

выводы:

Ц'1 В серонегативной на наличие антител к ВЛКРС группе коров ' /контрольно/^ цитохимическими показателями лидфатических узлов установлены диффузное и диффузно-глыбчатоо распределение гликогена в 10,3 - 1,9$ я крупные множественные гранулы - в 1,6 - 0, клеток от числа реагирующих и низкое содержание клеток, имеющих активность неспецифической эстеразы /0,54 г О^О/о/','

2'. Хронический лимфолейкоз можно разделить на три цитологических варианта, различающихся отсутствием или проявлением эозино-филыюй и цейтрофильлой реакций в селезенке и лимфатических узлах;'

З."1 В результате инфицирования животных ВЛКРС и развития хронического лимфолейкоза изменяется доля клеток лимфатических узлов с диффузным и диффузно-глыбчатым распределением гликогена: при онкор-яавирусной инфекции -.22,9 ± 3,4^5 в первой стадии - 40,7 - 4,6/£} во второй стадии - 29,1 - 3,5/2} в третьей стадии — 11,4 ~

4Г Острый лимфобластннй лейкоз характеризуется преобладанием в лимфатических органах популяции лимфобластов со слабой базофилией цитоплазмы и крупными множеств енными гранулами гликогена в 41,0 -

-М-

7,9/0 клеток лимфатических узлов от числа положительных клеток«1

5.' У больных лш^оцитарним к линфобластнш варшюшн т^ифзсар-кома наблюдают значительное возрастание в лимфатических уз^-х доли клеток с диффузным и даффузно-глыбчатнм распределенном гликогена /соответственно 53,8 ¿5,2 к 47,4 - 5,8^/;

б;1 Лимфобластная лим^ооаркома отличается от острого ликфоб.тест-иого лейкоза цятолопяесюш полиморфизмом и низкой долей з лш*$а-тичесних узлах клеток с крупными множествешшш гранулами гликогена /5,4 - 2,6;'?/, а" от лимфоцитарной лимфосаркож - леЯкешчееюш течением и высоким содержанием клеток о активностью неслецифичсс-кой эстеразц /2,63 * 0,42 в сравнении с 1,04 4 0,32/£/;<

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРИЛОЖЕНИЯ} ;

Цитологический метод, включающий цитохимические реакция на гликоген и песпецкфлческую эстеразу, может быть использован яри постановке диагноза на гемобластоз и дифференциации отдельных форм у крупного рогатого скота,' Возможная область применения цитоморфо-логпческих исследований селезенки и лимфатических узлов! ветеринарные лаборатории мясокомбинатов| областные ветерянар!Шв лаборатории! учебные и научно-исследовательские ветеринарные институты;1

По материалам диссертации опубликова!щ работы;

II1 Оноз Г;В,8 Мускенха П;И,' Патолого-морфологкческая характеристика лейкозов и злокачественных лимфом крупного рогатого скота я сравнительном аспекте // Актуальные вопросы этиологии, патогенеза и диагностики неоплазий сельскохозяйственных яивотных» ее;« научи;- тр;< /Иоо»;' ветеран? акад? ам? К;«;1 Скрябина,- м;!, 1964,'- С.' 45-51

2;' йзгсаагео ЩМ; Мор1ологичеокаа признаки различных видов лгафеяд-;цос меток у крупного рогатого скота // Актуальные вопрос« профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных: Тез,' докл;* Ее оо о юз. научно-техн: кыгфер;1 молодых ученых Д-' Иоск-ва, 21-23 Ш 1985 г.- и>, 1985;»- 0;'■ 29-31 3«' Мусившю П.1.1; Морфологические признаки различных видов лимфоид-шгх клеток у крупного рогатого скота // ВетеринарияХЭБо;1-

1,- с;* 31-32

Муспенко ¡Т.Н. Цито;.-.;>рфологическая характеристика яимфоидных го-мобластозоп >,-рунного рогатого скота // Ветеринария;"^ Г989;1-

2,-с; 35-;«