Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфофункциональное обоснование применения лазера при гепатозе собак

ДИССЕРТАЦИЯ
Морфофункциональное обоснование применения лазера при гепатозе собак - диссертация, тема по ветеринарии
АВТОРЕФЕРАТ
Морфофункциональное обоснование применения лазера при гепатозе собак - тема автореферата по ветеринарии
Шиляева, Татьяна Игоревна Екатеринбург 2003 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.02
 
 

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Морфофункциональное обоснование применения лазера при гепатозе собак

На правах рукописи

Шиляева Татьяна Игоревна

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ЛАЗЕРА

ПРИ ГЕПАТОЗЕ СОБАК

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

I 1 )

Екатеринбург, 2003

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Работа выполнена на кафедрах внутренних незаразных болезней и анатомии и гистологии Уральской государственной сельскохозяйственной академии.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор Шкуратова И.А. Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Садовников Н.В.; доктор ветеринарных наук, профессор Стрижиков В.К.

Ведущая организация - Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана

Защита диссертации состоится «Л/» // 2003г. в /(? час. на заседании диссертационного совета Д.220.067.03 при Уральской государственной сельскохозяйственной академии.

Адрес академии: 620219, г. Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта, 42

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уральской государственной сельскохозяйственной академии.

Автореферат разослан « 2-Оу, _2003г.

Ученый секретарь

доцент

диссертационного совета,

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Заболевания печени занимают существенное место среди тяжело протекающих болезней животных. Анализ результатов биохимических показателей сыворотки крови показывает, что значительно чаще у мелких домашних животных стали регистрироваться заболевания, имеющие в своем генезе токсические поражения печени (Б.В. Уша, Т.Б. Горовая, С.Э. Жавнис, 2002).

В настоящее время в диагностике болезней печени все большее распространение получает метод аспирационной биопсии с последующим гистологическим исследованием материала и оценкой морфологического состояния содержащихся в биоптате тканей. Биопсия печени дает возможность более точно по сравнению с другими методами диагностики оценить функциональное состояние органа. Это связано с высоким совершенством компенсаторных механизмов паренхимы печени, которые нивелируют ограниченные изменения ткани, то есть повреждение даже большой массы гепатоцитов может не сопровождаться клиническими и биохимическими изменениями (З.А. Бондарь, 1970; В.И. Фомичев, 1988; O.A. Дунаевский, 1985; П.Ф. Сутер, 2000; К.Ф. Сэне, Д. Фриц, 1999).

Однако метод прицельной биопсии печени при всей его относительной безопасности и малой травматичное™ (Б.В. Уша, 2002) является хотя и эффективным, но достаточно сложным и дорогостоящим методом диагностики, требующим наличия специального оборудования и длительной подготовки животного. Исходя из этого, актуальным становится поиск более простого и доступного для выполнения метода получения клеточного материала печени для экспресс-диагностики ее заболеваний.

Сегодня в большинстве стран мира наблюдается интенсивное внедрение лазерного излучения в биологических исследованиях и в практической медицине. Установлено, что лазерная энергия оказывает стимулирующее воздействие на

синтез пигмента меланина в красном костном мозге у овец после облучения звездчатых узлов. Это свидетельствует о том, что энергия красного света лазера активирует окислительно-восстановительные процессы и повышает уровень обмена веществ в организме животного (А.Н. Михайлов, 2001). Воздействие низкоинтенсивных лазеров приводит к быстрому стиханию острых воспалительных явлений, стимулирует репаративные процессы, улучшает микроциркуляцию тканей, нормализует общий иммунитет, повышает резистентность (устойчивость) организма. В настоящее время доказано, что низкоинтенсивное лазерное излучение обладает выраженным терапевтическим действием (A.A. Городецкий, 1996; С.Б. Брискин, 1996; Г.А. Послов, 2002; В.П. Иноземцев, А.Г. Нежданов, 1999). Анализ результатов ряда исследований, проведенных за последние годы, показывает, что интенсивность восстановительных процессов при воздействии низкоэнергетического лазерного излучения повышается не только в облучаемых участках кожи, но и в подлежащих внутренних органах (И.В. Стряпунина, 1998; 2001). Тем не менее, эффективность применения чрезкожного проекционного облучения печени низкоинтенсивным лазером при гепатозе плотоядных остается малоосвещенным вопросом, требующим дальнейшего изучения возможности использования этого метода терапии как альтернативы медикаментозному лечению.

Цель исследования. Целью настоящей работы явилось изучение влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на морфофункциональные показатели печени при гепатозе собак.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

- изучить распространенность гепатоза собак в условиях промышленного города и дать их клинико-биохимическую характеристику;

- разработать методику чрезкожной цитопункции печени, не требующую использования специального оборудования и длительной подготовки животного;

- дать клинико-биохимическую характеристику влияния низкоинтенсивного

лазерного излучения на организм собак при гепатозе;

.1 / > ) ■

- определить характер морфологических изменений печени при гепатозе собак под воздействием на орган низкоэнергетического лазерного излучения.

Научная новизна. Выявлена степень распространенности гепатоза собак в различных возрастных группах животных, содержащихся в условиях промышленного города.

Разработан и внедрен в практику метод чрезкожной цитопункции, позволяющий проводить прижизненную диагностику заболеваний печени.

Проведены исследования, позволяющие установить взаимосвязь между морфологическими и клинико-биохимическими изменениями, характерными для гепатоза собак.

Дана характеристика гистологических изменений в тканях печени после воздействия низкоэнергетического лазерного излучения, свидетельствующих о развитии компенсаторно-восстановительных процессов в органе.

Практическое значение. Выполненные исследования и полученные результаты позволяют считать чрезкожную цитопункцию печени легковыполнимым, безопасным для животного и достаточно информативным методом экспресс-диагностики заболеваний этого органа, который может быть рекомендован для широкого применения.

С помощью экспериментальных исследований определена эффективная и рациональная схема применения низкоэнергетического лазера при гепатозе собак.

Использование низкоинтенсивного лазерного излучения в качестве эффективного физиотерапевтического метода лечения гепатоза собак можно считать альтернативой другим известным методам лечения данной патологии.

Результаты научно-исследовательской работы используются в учебном процессе, при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам: «Внутренние незаразные болезни» и «Болезни мелких домашних животных» в Уральской государственной сельскохозяйственной академии и Уральской государственной академии ветеринарной медицины.

Основные положения, выносимые на защиту:

диагностическое значение метода чрезкожной цитопункции печени у собак.

морфологическая характеристика печени собак при гепатозе. оценка совокупности клинико-биохимических и морфологических изменений при гепатозе собак.

влияние чрезкожного проекционного облучения печени низкоэнергетическим лазером на гистологическую структуру печени и на клинико-биохимический статус животных.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены и обсуждены на региональной научно-практической конференции «Экологический мониторинг сельскохозяйственных производств в рыночных условиях» (Екатеринбург, 1998); на ежегодных научно-практических конференциях «Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных» (Екатеринбург, 1997, 1999, 2001); на Восьмом международном конгрессе по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных (Москва, 2000); на Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2001); на Российской научно-практической конференции, г. Новосибирск, 13 - 14 февраля 2003г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ в трудах, сборниках и материалах научных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, предложений и библиографического списка.

Работа изложена на 114 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 11 таблицами и 15 рисунками. Библиографический список включает в себя 160 источников, в том числе 52 зарубежных.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Настоящая работа выполнена на кафедрах внутренних незаразных болезней и анатомии и гистологи Уральской государственной сельскохозяйственной академии в период с1999 по 2002 годы.

Объектом исследований служили собаки различных пород в возрасте от 3 до 10 лет, содержащиеся на территории крупного индустриального города. Подбор животных производили с учетом данных анамнеза, которые позволяли предположить у них нарушение функции печени.

На первом этапе работы проводили клиническое и лабораторное исследование животных, прижизненную морфологическую оценку клеток паренхиматозной ткани печени и определение характера патологии.

На втором этапе было изучено действие низкоэнергетического лазера на основные клинико-лабораторные и морфологические показатели состояния печени собак с диагнозом гепатоз при чрезкожном проекционном облучении органа.

Клиническое обследование проводили по общепринятой схеме, обращая особое внимание на состояние пищеварительной системы и печени животных. Обследование прошли 1520 собак, из них 748 животных в возрасте от 3 до 6 лет (младшая возрастная группа) и 772 животных в возрасте от 6 до 10 лет (старшая возрастная группа).

Кровь для лабораторного исследования брали натощак. Определяли скорость оседания эритроцитов по унифицированному методу Панченкова; количество гемоглобина унифицированным гемиглобинцианидным методом; проводили подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева. Мазок крови для морфологического исследования окрашивали по методу Романовского - Гимзе.

Для проведения биохимического исследования использовали сыворотку крови без признаков гемолиза. В сыворотке крови определяли: содержание

глюкозы унифицированным глюкозооксидазным методом (1974); количество общего белка по биуретовой реакции (1972); содержание аминотрансфераз унифицированным методом Райтмана - Френкеля (1976); уровень щелочной фосфатазы унифицированным методом Бессея - Лоури - Брока по гидролизу п-нитрофенилфосфата (1972); количество мочевины с помощью унифицированного метода Ферона (1972); уровень общего билирубина унифицированным методом Ендрассика - Клеггорна - Грофа по диазореакции (1972); содержание холестерина унифицированным холестеролоксидазным методом (1972); тимоловую пробу с применением тимолово-вероналового буфера по методу Маклагана, модифицированному Хуэрго и Поппер (1972). Все биохимические исследования сыворотки крови осуществляли с использованием фотоэлектрокалориметра КФК-2.

Исследование мочи проводили с помощью тест - полосок «Гексафан» («Лахема»). Определяли рН мочи, качественное содержание глюкозы, кетоновых тел, уробилина, гемоглобина, количественное содержание белка. Для обнаружения в моче билирубина применяли унифицированную пробу Розина с 1%-ным спиртовым раствором йода. Кроме этого проводили микроскопическое исследование мочевого осадка.

С помощью чрезкожной цитопункции печени получали клеточный материал для цитологического исследования. Животное фиксировали либо в стоячем, либо в левом боковом лежачем положении, в зависимости от его темперамента и от выбранной методики доступа. При нормальных размерах печени или при ее уменьшении применяли различные трансторакальные доступы, при осуществлении которых иглу вводили справа по заднему краю последнего или 2-х предпоследних ребер на расстоянии 1-4 см от мечевидного отростка (в зависимости от размера животного) перпендикулярно поверхности кожи на глубину 2 - 4 см в дорсальном направлении. При увеличении размеров печени иглу вводили непосредственно позади мечевидного отростка или слева между мечевидным отростком и реберной дугой на ту же глубину в дорсальном или

дорсо-каудальном направлении. Одновременно с прокалыванием паренхимы печени с помощью шприца создавалось пониженное давление, что позволяло удержать в игле, при ее быстром извлечении наружу, захваченные клетки. Полученный клеточный материал с помощью малого объема физиологического раствора вымывали на предметное стекло, мазок подсушивали, фиксировали 70%-ным раствором спирта и окрашивали по методу Романовского-Гимзе.

Для проведения гистологического исследования осуществляли краевую биопсию печени под визуальным контролем. Полученный образец печени фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина при комнатной температуре в течение 48 часов. По окончании фиксации кусочки органа обезвоживали в смеси спирта и эфира 1 : 1 в течение 24 часов, затем заключали в целлоидин по Апати и наклеивали на деревянные кубики. Срезы получали на санном микротоме толщиной 7-8 мкм. окрашивали гематоксилином по Эрлиху с докраской 0,5%-ным раствором эозина, а также по ШИК-реакции и заключали в канадский бальзам по Г. Масону. Полученные гистологические и цитологические препараты анализировали под бинокулярным световым микроскопом при увеличении 40 х 12,5. Гистологические исследования печени проведены на кафедре анатомии и гистологии УрГСХА под руководством профессора Л.И. Дроздовой.

Для проведения опыта по облучению по результатам клинико-лабораторных и морфологических исследований отобрали 14 собак с диагнозом - гепатоз. Облучение проводили контактным методом с использованием импульсного низкоинтенсивного инфракрасного лазера «AGNIS LOI» в проекции печени справа по трем точкам, образующим равнобедренный треугольник. Курс лазеротерапии составил 7 сеансов при следующих параметрах: А (мощность) - 5 Вт, M (модуляция) - 70 Гц, F (частота) - 1200 Гц, время облучения в каждой точке - 1 минута (время сеанса - 3 минуты).

Полученные количественные показатели обработаны математически на PC Pentium с помощью прикладной программы «Статистика», для оценки

достоверности полученных результатов использовали критерии Стьюдента и Фишера.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИСЛЕДОВАНИЙ

3.1. Результаты клинического исследования животных. Клиническое обследование животных проводили по общепринятой схеме, обращая особенное внимание на цвет слизистых оболочек, прежде всего склеры, изменение размеров и характера поверхности печени, болезненность при пальпации брюшной стенки, склонность к кровотечению, наличие асцита.

У большинства животных (520 голов) выявляли прямые и косвенные симптомы, свидетельствующие о нарушении функции печени. Специфические для гепатопатии признаки обнаруживали главным образом у животных старшей возрастной группы. Данные клинического обследования представлены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты клинического обследования собак, содержащихся на территории

промышленного города.

I группа (от 3 до 6 лет) II группа (от 6 до 10 лет)

Всего голов 748 722

Период 2000 г. 2001 г. 2002 г. Всего 2000 г. 2001 г. 2002 г. Всего

Нарушение 105 178 180 463 118 325 185 628

аппетита 14% 23% 25% 62% 16% 45% 26% 87%

Нарушение 31 89 94 214 94 121 69 284

дефекации 4% 12% 13% 29% 13% 17% 9% 39%

Рвота 30 44 30 104 45 56 28 129

4% 6% 4% 14% 6% 8% 4% 18%

Увеличение 6 8 8 22 57 72 29 158

печени 1% 1% 1% 3% 8% 10% 4% 22%

Удовднк печми - 18 3% 28 4% 15 2% 61 9%

Боланенвэсть ГЕЧЗШ 9 1% 16 3% 11 1% 36 5% 29 4% 41 6% 31 4% 101 14%

Асцит 16 2% 18 2% 12 2% 46

Ивднеяие цвета слизклых обгаючзс - - - - 21 3% 64 9% 16 2% 101 14%

Кркяявюь ивоспалзме двоен 7 1% 8 1% 15 2% 29 4% 43 6% 14 2% 86 12%

Гипергер^шя 7 1% 16 2% 7 1% 30 4% 14 2% 44 6% 7 1% 65 9%

Нарушение важного покрова 64 9% 122 16% 36 5% 222 30% 113 15% 131 18% 80 11% 324 44%

3.2. Результаты гематологического и биохимического исследования.

Для проведения гематологического исследования было отобрано 190 проб крови от собак младшей и 170 проб крови от собак старшей возрастных групп. Наиболее часто встречающимися изменениями гематологических показателей, характерными для животных обеих групп, является увеличение скорости оседания эритроцитов, а также снижение уровня гемоглобина крови с одновременным уменьшением количества эритроцитов. Данные гематологического исследования представлены в таблице 2.

Таблица 2

Результаты гематологического исследования собак с нарушением функций

печени.

Гематологические показатели Группы Нормы гематологических показателей *

ЦотЗдоб лег) п=170 П (or 6 до 10 лег) п=190

Скорость оседания эритроцитов, мм/час 4,24+0,91 6,83+0,99 1-2

Гемоглобин г/л, 97,5+9,64 95,4 + 9,13 100- 150

Эритроциты, млн/мкл 5,05+0,26 4,72+0,34 5,2-8,4

Лейкоциты, тыс/мкл 9,6±0,43 10,5+0,47 8,5-10,5

Эозинофилы, % 6,12+0,11 6,66+0,23 2-9

Палочкоядерные нейтрофилы, % 3,41+0,09 4,15+0,15 1-6

Сешентоядерные нейтрофилы, % 58,54+0,04 63,0+0,05 43-72

Моноциты, % 1,54 + 0,03 2,13+0,05 1-5

Лимфоциты, % 30,39+0,21 24,0+0,34 21-40

* - нормы гематологических показателей по данным А.А. Кудрявцева, Л.А. Кудрявцевой, И.П. Кондрахина и др. (1991).

Для проведения биохимического исследования сыворотки крови было отобрано 78 проб крови от животных младшей и 55 проб крови от животных старшей возрастных групп. Наиболее характерными изменениями в биохимическом составе сыворотки крови при проявлении клинических признаков нарушения функции печени для собак обеих групп является повышение уровня общего билирубина, щелочной фосфатазы, глюкозы, холестерина, значений

тимоловой пробы, а также снижение уровня общего белка и мочевины. Данные биохимического исследования сыворотки крови представлены в таблице 3.

Таблица 3

Результаты биохимического исследования сыворотки крови собак с нарушением функций печени.

Биохимические показатели Группы Нормы биохимических показателей *

ЦогЗдоблет) п = 78 П (от 6 до 10 лег) п = 55

Глюкоза, ммоль/л 6,49+0,72 6,53±0,78 3,2-6,0

Холестерин, ммоль/л 6,64+0,24 7,62+0,81 3,2-6,5

Мочевина, ммоль/л 3,32+0,17 3,14+0,18 3,5 - 8,3

Общий белок, г/л 54,04+1,04 52,82±1,02 55-75

Общий билирубин, мкмоль/л 9,77 ±2,1 10,38 ±2,4 0-7,0

Тимоловая проба, ЕД 5,18 ±0,94 5,63 ±0,99 0-4

Ал АТ, мкмоль/ (ч' мл). 0,451+0,03 0,468±0,04 0-0,44

АсАТ, мкмоль/ (ч * мл). 0,256±0,04 0,257±0,04 0-0,25

ЩФ, Е/л 181,52+0,27 190,03±0,3 4 30-160

* - нормы биохимических показателей сыворотки кровы по А.Н. Голикову, Г.В. Паршутину и др. (1990).

3.3. Результаты исследования мочи. Для исследования было отобрано 170 проб мочи от собак младшей и 190 проб мочи от собак старшей возрастных групп. Исследование мочи выявило, что наиболее часто встречающимися изменениями являются: сдвиг рН мочи в щелочную сторону, появление в моче следов белка и наличие в моче значительного количества жировых капель. У животных старшей

группы, кроме этого, обнаружены положительные качественные реакции на содержание в моче кетоновых тел и сахара, а также обильное содержание в моче капель жира.

Исходя из данных клинико-лабораторного обследования животных установлено, что все перечисленные изменения в клиническом состоянии животных, а также в составе крови и мочи в большей степени выражены у собак старшей возрастной группы. Это свидетельствует об ослаблении у большинства из них защитно-компенсаторных процессов организма и предполагает накопление так называемой «критической» массы гепатоцитов.

Изменения состояния и состава крови и мочи свидетельствуют о нарастающей интоксикации организма, нарушении белкового, углеводного и пигментного обмена, и развитии холестатического и цитолитического процессов в печени.

3.4. Результаты цитологического исследования печени и сочетание их с результатами клинико-лабораторных исследований. Для проведения цитологического исследования печени было отобрано 45 собак (20 животных из I группы и 25 животных из П группы). Группы были сформированы из животных, обследование которых показало наличие характерных для гепатоза клинических признаков, а также характерных изменений в биохимическом составе сыворотки крови и мочи.

Цитопункцией установлено, что появление признаков зернистой дистрофии различной степени выраженности в клетках печени характерно для 50% животных I группы и для 20% животных II группы; признаки жировой дистрофии гепатоцитов обнаружены у 5% животных I группы и 34% животных II группы. Сочетанное нарушение жирового и белкового обмена в клетках печени отмечено у 45% животных I группы и у 38% II группы. У 8% животных II группы присутствие в цитологическом препарате значительного количества лимфоцитов может свидетельствовать о хроническом воспалении органа. Морфологические

изменения гепатоцитов у животных с клинико-биохимическими признаками гепатоза приведены в таблице 5.

Таблица 5

Морфологические изменения гепатоцитов у собак с клинико-биохимическими признаками гепатоза.

Морфологические изменения Младшая группа п = 20 Старшая группа п = 25

Зернистая дистрофия гепатоцитов 15% 20%

Зернистая дистрофия гепатоцитов с явлениями кариолизиса 35%

Зернисто — жировая дистрофия 45% 38%

Жировая дистрофия с явлениями кариолизиса 5% 30%

Жировая дистрофия с явлениями кариолизиса и цитолиза - 4%

Зернистая дистрофия гепатоцитов и скопление в пунктате лимфоцитов - 8%

Характерно, что признаки ярко выраженной зернисто-жировой дистрофии гепатоцитов, свидетельствующие о сочетанном нарушении белкового и жирового обмена в клетках печени, обнаружены у большинства животных обеих групп; отдельно друг от друга признаки зернистой дистрофии чаще встречаются у

животных младшей группы, а признаки жировой дистрофии у собак старшей возрастной группы.

Проведенное цитологическое исследование показало, что степень проявления клинико-биохимических признаков гепатоза напрямую зависит от степени и характера повреждения гепатоцитов. Ярко выраженная зернистая дистрофия клеток печени сопровождается умеренно проявляющимися клинико-лабораторными признаками нарушения функциональной активности печени. Морфологические признаки жировой и смешанной дистрофии гепатоцитов сопровождаются более глубокими изменениями клинического состояния животных (стойкое нарушение аппетита, нарушение дефекации, ахолия; увеличение и болезненность печени; ухудшение состояния кожного покрова). Биохимические изменения состава сыворотки крови и мочи у этих собак подтверждают нарушение жирового и белкового обмена, развитие холестатических и цитолитических явлений, снижение активности процессов гликогенеза.

3.5. Результаты применения низкоэнергетического лазерного излучения при гепатозе собак. Для проведения чрезкожного проекционного облучения печени было отобрано 14 собак в возрасте от 3 до 8 лет с диагнозом гепатоз. Животных отбирали на основании совокупности данных анамнеза, клинического, биохимического и цитологического обследования. По данным цитологического исследования у всех отобранных животных имелись признаки выраженной зернисто-жировой дистрофии гепатоцитов.

После проведения курса лазеротерапии о повышении функциональной активности печени позволяют судить изменения в биохимическом составе сыворотки крови, которые свидетельствуют об активации процессов гликогенеза, восстановлении белоксинтезирующей и мочевинообразующей функций печени, уменьшении признаков холестаза и улучшении жирового и пигментного обмена.

Изменения гематологического состава крови свидетельствуют об активизации процессов кроветворения, снижении интоксикации и

сенсибилизации организма. Динамика изменения гематологических и биохимических показателей представлена в таблице 6.

Таблица 6

Динамика изменения гематологических и биохимических показателей крови

собак.

До курса облучения После курса облучения

Глюкоза, ммоль/л 6,94 + 0,31 5,72 ±0,28

Холестерин, ммоль/л 9,01 ±0,99 6,16 + 0,43

Мочевина, ммоль/л 2,77 ±0,17 3,34 ±0,22

Общий белок, г/л 52,6 ±1,53 58,7 ±2,58

Общий билирубин, мкмоль/л 9,36 ± 0,61 6,88 ±0,18

Щелочная фосфатаза, Е/л 190,03 ±6,34 146,1 ±8,4

Аланинаминотрансфераза, мкмоль/(ч' мл) 0,468 ±0,04 0,345 ±0,06

Аспартатаминотрансфераза, мкмоль/(ч' мл) 0,257 + 0,04 0,223 ± 0,05

Тимоловая проба, Ед 6,57 ±0,87 4,71 ±0,63

Скорость оседания эритроцитов, мм/час 10,71 ±0,89 7, 57 ±0,98

Гемоглобин, г/л 86,4 ± 4,28 90,7 ±3,15

Эритроциты, млн/мкл 3,86 ±0,19 4,5 ±0,32

Лейкоциты, тыс/мкл 9,82 ±0,51 10,85 ±0,92

Эозинофилы, % 9,28 ±1,61 7,78 ±1,07

Лимфоциты, % 20,28 ±2,04 25,0 ±2,5

Таким образом, результаты сравнительного анализа данных клинико-лабораторного обследования животных, проведенного до и после их облучения

лазером, позволяют говорить о наличии положительных изменений в метаболических процессах организма при использовании низкоэнергетической лазеротерапии для лечения гепатоза собак.

При гистологическом исследовании биоптатов печени, окрашенных гематоксилином и эозином, были выявлены аналогичные изменения в ее тканях, просматриваемые в большинстве изученных препаратов.

Ядра большинства гепатоцитов резко базофильны, в некоторых клетках видны ядра, имеющие неправильную форму. Также обнаруживаются клетки, ядра которых находятся в состоянии кариолизиса и безъядерные клетки с нечётко выраженными контурами.

Некоторые погибшие клетки сливаются между собой, образуя поля некроза гепатоцитов (до 3-5 клеток в одном поле).

Изменения в цитоплазме гепатоцитов представлены главным образом развитием в ней выраженной зернистой дистрофии или же появлением признаков жировой декомпозиции с образованием в цитоплазме клеток мелких жировых капель, что свидетельствует о нарушении белкового и липидного обмена. Отмечается отложение в цитоплазме клеток липофусцина.

Имеют место также явления общего цитолиза клеток печени с разрушением клеточных мембран (периферический цитолиз) и полным исчезновением ядер гепатоцитов.

В препаратах, окрашенных по ШИК - реакции вокруг островков микронекроза наблюдается повышенное насыщение цитоплазмы неповрежденных гепатоцитов гликогеном; в остальных участках гликоген содержится в незначительном количестве и зачастую располагается неравномерно.

Полученные патоморфологические данные, подтверждают клинико-биохимическую картину гепатоза у опытных животных. Под влиянием

лазерного излучения в печеночной ткани происходят трофические и морфофункциональные изменения, свидетельствующие о улучшении

метаболических процессов и сопровождающиеся изменением клинико-лабораторных показателей у облученных животных.

Наблюдается усиление фагоцитарной активности в тканях печени, которое проявляется в положительном таксисе эозинофильных лейкоцитов и мононуклеарных фагоцитов к некротизированным участкам паренхимы. Кроме того, активизируются клетки, расположенные в перисинусоидальных пространствах (эндотелиоциты и звездчатые ретикулоэндотелиоциты).

Ядра клеток печени четко просматриваются, имеют умеренно выраженную базофильность. Происходит активное размножение гепатоцитов вокруг некротических очагов, появляются отдельные двуядерные клетки. Отмечается практически полное восстановление трабекулярного и дольчатого строения печени, что свидетельствует об усилении ее функциональной активности.

Регистрируется уменьшение количества липидных капель и снижение зернистости цитоплазмы вплоть до полного их исчезновения. Морфологически усиление метаболических процессов проявляется в снижении явлений жировой и белковой дистрофии.

При микроскопии срезов, окрашенных по ШИК - реакции, наблюдается зачастую незначительное, но тем не менее равномерное отложение гликогена. В некоторых гистологических срезах отмечается тотальное накопление и равномерное распределение гликогена.

¿ВЫВОДЫ.

1. В условиях промышленного города гепатозы собак регистрируются у 29% животных младше 6-летнего и у 42% животных старше 6-летнего возраста.

2. Цитопункция печени является достоверным методом ранней диагностики болезней печени у собак.

3. Гепатозы собак характеризуются наличием в пунктате гепатоцитов в состоянии зернистой и мелкокапельной жировой дистрофии с кариолизисом ядер и отложением липофусцина.

4. Клиническими проявлениями гепатоза собак являются: увеличение печени, диарея, кожный зуд, истеричность слизистых оболочек, асцит. Изменения биохимических показателей крови свидетельствуют о развитии холестатического и цитолитического синдромов, что проявляется повышением уровня холестерина до 9,01 + 0,99 ммоль/л, общего билирубина до 9,36 + 0,61 мкмоль/л, щелочной фосфатазы до 190,03 + 6,34 Е/л, аланинаминотрансферазы до 0,468 + 0,04 мкмоль/ (ч ' мл), аспартатаминотрансферазы до 0,257 + 0,04 мкмоль/ (ч ' мл), глюкозы до 6,94 + 0,31 ммоль/л, а также снижением уровня общего белка до 52,6 + 1,53 г/л и мочевины до 2,77 + 0,17 ммоль/л.

5. Проекционное чрезкожное облучение печени собак аппаратом низкоэнергетического лазерного излучения «АвМв Ь 01» в течение 3 минут при амплитуде 5 Вт, частоте 1200 Гц и модуляции 70 Гц способствует улучшению клинического состояния животных и нормализации гематологических и биохимических показателей.

6. Гистологически установлено, что для гепатоза собак характерно появление в паренхиме печени очагов микронекроза. Структура органа подчеркнута обнажившимся синцитием. ШИК - реакцией выявлено незначительное содержание и неравномерное распределение гликогена в гепатоцитах.

7. Под влиянием низкоэнергетического лазерного излучения в печени уменьшаются признаки зернисто-жировой дистрофии, наблюдается активизация звездчатых ретикулоэндотелиоцитов, усиливаются регенерационные процессы; ШИК - реакцией выявлено повышение содержания гликогена и равномерное его распределение в паренхиме печени.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Метод чрезкожной цитопункции печени рекомендуется как информативный, безопасный для животного и простой в исполнении способ экспресс-диагностики заболеваний печени, не требующий специального дорогостоящего оборудования и заблаговременной подготовки животного. Данный метод внедрен в работу в лечебно-диагностическом центре УрГСХА, в ветеринарной клинике «Неовиг» г. Екатеринбурга, на станции по борьбе с болезнями животных г. Новоуральска и ряде других ветучреждений.

2. В качестве эффективного немедикаментозного способа лечения гепатоза собак рекомендуется применение низкоэнергетического импульсного лазерного излучения при следующих параметрах: мощность излучения 5 Вт, частота импульса 1200 Гц, модуляция 70 Гц. Облучение рекомендуется проводить контактным способом по нескольким точкам в проекции облучаемого органа на поверхность кожи; время одного сеанса 3 минуты, продолжительность курса лазеротерапии - не менее 7 сеансов.

3. Материалы диссертации рекомендуется использовать в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам «Внутренние незаразные болезни» и «Болезни мелких домашних животных» при подготовке специалистов ветеринарного профиля.

& СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Ченчубаева Т.И., Котомцев В.В. Использование лазерной терапии при лечении экзем // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: Сб. ст. - Вып. 2. - УрГСХА. - Екатеринбург, 1997. - С. 14 - 16.

2. Ченчубаева Т.И., Котомцев В.В., Шкуратова И.А. Применение магнитолазерной установки «Терус» при лечении экзем // Экологический мониторинг сельскохозяйственных производств в рыночных условиях: Тез. студ. науч. конф. - УрГСХА. - Екатеринбург, 1998. - С. 14 - 15.

3. Ченчубаева Т.И. Использование низкоэнергетического лазера при лечении экзем // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: Сб. ст. - Вып. 3. - УрГСХА. - Екатеринбург, 1999. - С. 79 - 80.

4. Ченчубаева Т.И. Применение лазерной терапии при лечении экзем // Материалы 8-го международного конгресса по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных (6-8 апреля 2000 г): Сб. ст. - Москва, 2000.-С. 89-90.

5. Ченчубаева Т.И. Применение лазерного излучения при гепатозах мелких домашних животных // Материалы Второй международной конференции (25 -26 января 2001г): Сб. ст. - Уфа, 2001. - С. 127 - 128.

6. Ченчубаева Т.И. Клиническое и диагностическое значение пункционной биопсии печени при гепатозах плотоядных // Материалы научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии: Сб. ст. - Часть 1. - Казань, 2001. - 233 - 234.

7. Ченчубаева Т.И. Определение структурно-функциональных особенностей печени при гепатозах плотоядных с помощью цитопункции // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: Сб. ст. - Вып. 4. -УрГСХА. - Екатеринбург, 2001. - С. 178 - 179.

8. Ченчубаева Т.И. Определение структурно-функциональных особенностей печени при гепатозах собак с помощью цитопункции // Материалы Российской научно-практической конференции: Сб. ст. - Новосибирск, 2003. - С. 91 - 92.

* 17 0 6

Огкопировано ООО "Таймер КЦ" Екатеринбург, ул.Луначарского, 136 тел.: (3432) 503-903, 569-363

 
 

Оглавление диссертации Шиляева, Татьяна Игоревна :: 2003 :: Екатеринбург

1. Введение.

2. Обзор литературы

2.1.Патогенетическая характеристика основных клинических синдромов при гепатозах собак.

2.2. Морфофункциональные особенности строения печени собак.

2.3. Диагностика гепатозов.

2.4. Механизм воздействия низкоэнергетического лазерного излучения на живой организм.

3. Собственные исследования

3.1. Материал и методы исследования.

3.2. Особенности клинического проявления и распространенность гепатоза собак в условиях промышленного города.

3.3. Результаты гематологического и биохимического исследования крови и мочи при гепатозе собак.

3.4. Результаты цитологического исследования печени и их сочетание с клинико-биохимическими характеристиками гепатоза собак.

3.5. Результаты применения низкоэнергетического лазерного излучения при гепатозе собак.

3.5.1. Влияние лазерного излучения на основные клинико-лабораторные . показатели состояния собак.

3.5.2. Влияние лазерного излучения на морфологическую структуру печени при гепатозе собак.

4.0бсуждение полученных результатов.

5. Выводы.

6. Практические предложения.

 
 

Введение диссертации по теме "Патология, онкология и морфология животных", Шиляева, Татьяна Игоревна, автореферат

1.1. Актуальность темы. Заболевания печени занимают существенное место среди тяжело протекающих болезней животных. Анализ результатов биохимических показателей сыворотки крови показывает, что значительно чаще у мелких домашних животных стали регистрироваться заболевания, имеющие в своем генезе токсические поражения печени (Б.В. Уша, Т.Б. Горовая, С.Э. Жавнис, 2002).

В настоящее время в диагностике болезней печени все большее распространение получает метод аспирационной биопсии с последующим гистологическим исследованием материала и оценкой морфологического состояния содержащихся в биоптате тканей. Биопсия печени дает возможность более точно, по сравнению с другими методами диагностики, оценить функциональное состояние органа. Это связано с высоким совершенством компенсаторных механизмов паренхимы печени, которые нивелируют ограниченные изменения ткани, то есть повреждение даже большой массы гепатоцитов может не сопровождаться клиническими и биохимическими изменениями (З.А. Бондарь, 1970; В.И. Фомичев, 1988; O.A. Дунаевский, 1985; П.Ф. Сутер, 2000; К.Ф. Сэне, Д. Фриц, 1999).

Однако метод прицельной биопсии печени при всей его относительной безопасности и малой травматичности (Б.В. Уша, 2002) является хотя и эффективным, но достаточно сложным и дорогостоящим методом диагностики, требующим наличия специального оборудования и длительной подготовки животного. Исходя из этого, актуальным становится поиск более простого и доступного для выполнения метода получения клеточного материала печени для экспресс-диагностики ее заболеваний.

Сегодня в большинстве стран мира наблюдается интенсивное внедрение лазерного излучения в биологических исследованиях и в практической медицине. Установлено, что лазерная энергия оказывает стимулирующее воздействие на синтез пигмента меланина в красном костном мозге у овец после облучения звездчатых узлов. Это свидетельствует о том, что энергия красного света лазера активирует окислительно-восстановительные процессы и повышает уровень обмена веществ в организме животного (А.Н. Михайлов, 2001). Воздействие низкоинтенсивных лазеров приводит к быстрому стиханию острых воспалительных явлений, стимулирует репаративные процессы, улучшает микроциркуляцию тканей, нормализует общий иммунитет, повышает резистентность организма. В настоящее время доказано, что низкоинтенсивное лазерное излучение обладает выраженным терапевтическим действием (A.A. Городецкий, 1996; С.Б. Брискин, 1996; Г.А. Послов, 2002; В.П. Иноземцев, А.Г. Нежданов, 1999). Анализ результатов ряда исследований, проведенных за последние годы, показывает, что интенсивность восстановительных процессов при воздействии низкоэнергетического лазерного излучения повышается не только в облучаемых участках кожи, но и в подлежащих внутренних органах (И.В. Стряпунина, 1998; 2001). Тем не менее, эффективность применения чрезкожного проекционного облучения печени низкоинтенсивным лазером при гепатозе плотоядных остается малоосвещенным вопросом, требующим дальнейшего изучения возможности использования этого метода терапии как альтернативы медикаментозному лечению.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на морфофункциональные показатели печени при гепатозе собак.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

- изучить распространенность гепатоза собак в условиях промышленного города и дать их клинико-биохимическую характеристику; разработать методику чрезкожной цитопункции печени, не требующую использования специального оборудования и длительной подготовки животного; дать клинико-биохимическую характеристику влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на организм собак при гепатозе;

- определить характер морфологических изменений печени при гепатозе собак под воздействием на орган низкоэнергетического лазерного излучения.

1.3. Научная новизна исследований. Выявлена степень распространенности гепатоза собак в различных возрастных группах животных, содержащихся в условиях промышленного города.

Разработан и внедрен в практику метод чрезкожной цитопункции, позволяющий проводить прижизненную диагностику заболеваний печени.

Проведены исследования, позволяющие установить взаимосвязь между морфологическими и клинико-биохимическими изменениями, характерными для гепатоза собак.

Дана характеристика гистологических изменений в тканях печени после воздействия низкоэнергетического лазерного излучения, свидетельствующих о развитии компенсаторно-восстановительных процессов в органе.

1.4. Практическая значимость. Выполненные исследования и полученные результаты позволяют считать чрезкожную цитопункцию печени легковыполнимым, безопасным для животного и достаточно информативным методом экспресс-диагностики заболеваний этого органа, который может быть рекомендован для широкого применения.

С помощью экспериментальных исследований определена эффективная и рациональная схема применения низкоэнергетического лазера при гепатозе собак.

Использование низкоинтенсивного лазерного излучения в качестве эффективного физиотерапевтического метода лечения гепатоза собак можно считать альтернативой другим известным методам лечения данной патологии.

Материалы научно-исследовательской работы используются в учебном процессе, при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам: «Внутренние незаразные болезни» и «Болезни мелких домашних животных» в Уральской государственной сельскохозяйственной академии и Уральской государственной академии ветеринарной медицины.

Результаты исследований вошли в методическое пособие «Практические рекомендации по применению низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения для проекционного облучения печени при гепатозе собак» (Екатеринбург, 2003), утвержденное МСХ Свердловской области.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту:

1. Диагностическое значение метода чрезкожной цитопункции печени у собак.

2. Морфологическая характеристика печени собак при гепатозе.

3. Оценка совокупности клинико-биохимических и морфологических изменений при гепатозе собак.

4. Влияние чрезкожного проекционного облучения печени низкоэнергетическим лазером на гистологическую структуру печени и на клинико-биохимический статус животных.

1.6. Апробация работы. Материалы диссертации были представлены и обсуждены на региональной научно-практической конференции «Экологический мониторинг сельскохозяйственных производств в рыночных условиях» (Екатеринбург, 1998); на ежегодных научно-практических конференциях «Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных» (Екатеринбург, 1997, 1999, 2001); на Восьмом международном конгрессе по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных (Москва, 2000); на Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2001); на Российской научно-практической конференции, (Новосибирск, 2003).

1.7. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ в трудах, сборниках и материалах научных конференций.

1.8. Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, предложений и библиографического списка.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Морфофункциональное обоснование применения лазера при гепатозе собак"

ВЫВОДЫ.

1. В условиях промышленного города гепатозы собак регистрируются у 29% животных младше 6-летнего и у 42% животных старше 6-летнего возраста.

2. Цитопункция печени является достоверным методом ранней диагностики болезней печени у собак.

3. Гепатозы собак характеризуются наличием в пунктате гепатоцитов в состоянии зернистой и мелкокапельной жировой дистрофии с кариолизисом ядер и отложением липофусцина.

4. Клиническими проявлениями гепатоза собак являются: увеличение печени, диарея, кожный зуд, иктеричность слизистых оболочек, асцит. Изменения биохимических показателей крови свидетельствуют о развитии холестатического и цитолитического синдромов, что проявляется повышением уровня холестерина до 9,01 + 0,99 ммоль/л, общего билирубина до 9,36 + 0,61 мкмоль/л, щелочной фосфатазы до 190,03 + 6,34 Е/л, аланинаминотрансферазы до 0,468 + 0,04 мкмоль / (ч ' мл), аспартатаминотрансферазы до 0,257 + 0,04 мкмоль / (ч ' мл), глюкозы до 6,94 + 0,31 ммоль/л, а также снижением уровня общего белка до 52,6 + 1,53 г/л и мочевины до 2,77 + 0,17 ммоль/л.

5. Проекционное чрезкожное облучение печени собак аппаратом низкоэнергетического лазерного излучения «АвЫ^ Ь 01» в течение 3 минут при амплитуде 5 Вт, частоте 1200 Гц и модуляции 70 Гц способствует улучшению клинического состояния животных и нормализации гематологических и биохимических показателей.

6. Гистологически установлено, что для гепатоза собак характерно появление в паренхиме печени очагов микронекроза. Структура органа подчеркнута обнажившимся синцитием. ШИК — реакцией выявлено незначительное содержание и неравномерное распределение гликогена в гепатоцитах.

7. Под влиянием низкоэнергетического лазерного излучения в печени уменьшаются признаки зернисто-жировой дистрофии, наблюдается активизация звездчатых ретикулоэндотелиоцитов, усиливаются регенерационные процессы; ШИК - реакцией выявлено повышение содержания гликогена и равномерное его распределение в гепатоцитах.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Метод чрезкожной цитопункции печени рекомендуется как информативный, безопасный для животного, простой в исполнении способ экспресс-диагностики заболеваний печени, не требующий специального дорогостоящего оборудования и заблаговременной подготовки животного. Данный метод внедрен в работу в лечебно-диагностическом центре УрГСХА, в ветеринарной клинике «Неовит» г. Екатеринбурга, на станции по борьбе с болезнями животных г. Новоуральска и ряде других ветучреждений.

2. В качестве эффективного немедикаментозного способа лечения гепатоза собак рекомендуется применение низкоэнергетического импульсного лазерного излучения при следующих параметрах: мощность излучения 5 Вт, частота импульса 1200 Гц, модуляция 70 Гц. Облучение рекомендуется проводить контактным способом по нескольким точкам в проекции облучаемого органа на поверхность кожи; время одного сеанса 3 минуты, продолжительность курса лазеротерапии — не менее 7 сеансов.

3. Материалы диссертации рекомендуется использовать в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам «Внутренние незаразные болезни» и «Болезни мелких домашних животных» при подготовке специалистов ветеринарного профиля.

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2003 года, Шиляева, Татьяна Игоревна

1. Абдуллаев Н.Х., Каримов Х.Я. Печень при интоксикациях гепатотропными ядами. Ташкент: Медицина УзССР, 1989. - 144 с.

2. Авруцкий М.Я., Катковский Д.Г., Мусихин Л.В. и др. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на основные биологические процессы и гомеостаз больных // Анестезиология и реаниматология, 1991. № 5. - С. 74-78.

3. Адо А.Д. Проблема повреждения клетки в современной патологической физиологии // Пат. физиол. и экспер. тер., 1972. № 6, - С. 12 — 20.

4. Акаевский А.И. Анатомия домашних животных. М., 1968. — 582 с.

5. Александров М.Т. Основы лазерной клинической биофотометрии. М., 1991.-65 с.

6. Алиев A.A., Мартюшов В.М. Роль печени в регуляции липидного обмена крупного рогатого скота // тезисы докл. I Всес. Симпоз. По липидному обмену с/х животных и птиц. — Боровск, 1972. С. 3 - 4.

7. Алиев И.М. Магнитолазерная терапия в комплексном лечении и профилактике печеночной недостаточности при механической желтухе: Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1989. - 24 с.

8. Альтгаузен А.Я. Клиническая лабораторная диагностика. М.: Медгиз, 1969.-332 с.

9. Арчаков А.И., Карузина И.И. Молекулярные механизмы воздействия четыреххлористого углерода с мембранами эндоплазматического ретикулума печени // Успехи гепатологии. — Рига, 1973. — В. 4. С. 39 — 59.

10. Байбеков И.М., Ворожейкин В.М., Артыков Ш.П. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на ультраструктуру и пролиферацию клеток печени крыс при экспериментальном гепатозе и циррозе // Бюл. экспер. медицины и биологии, 1992. № 4. - С. 424 — 426.

11. И.Байматов В.Н. Белковообразовательная функция у овец. Ветеринария, №5, 1991.-С. 51-52.

12. Байматов В.Н. Белоксинтезирующая функция печени у коров. -Животноводство, № 6, 1985. С. 47 - 49.

13. И.Байматов В.Н. Гепатозы продуктивных животных и их профилактика // Уч. пособие для слушателей ФПК и студ. вет. фак. — Уфа, 1990.

14. И.Байматов В.Н. Механизм развития гепатоза у животных. Доклады Российской Академии с.-х. наук, № 2-3,1993. - С. 86 — 91.

15. Байматов В.Н. Уровень межуточного обмена углеводов и белков у коров. Ветеринария, № 4,1982.-С. 57 - 60.

16. Байматов В.Н. Этиология и патогенез заболеваний печени. Уральские нивы,№9, 1986.-С. 50.

17. Байматов В.Н., Савойский А.Г., Кушнирская А.М. Метаболизм у коров при нарушении функции печени. Ветеринария, № 8, 1982. - С.50 — 52.

18. Байматов В.Н., Шпильман И.Д. Болезни нарушения обмена веществ в современном животноводстве. Сельское хозяйство за рубежом, № 8, 1980. - С.47 -52.

19. Бекетова Т.П. К обоснованию специализации функций различных по структуре гепатоцитов // Актуальные вопросы клинической морфологии. -М., 1982.-С. 64-67.

20. Бекетова Т.П. Некоторые функциональные характеристики темных и светлых клеток // Бюл. экспер. биологии, 1975. № 7. — С. 107 — 109.

21. Баринский И.Ф. Вирусные гепатиты людей и животных // Вопр. вирусологии, 1967. № 3. с. 259 - 267.

22. Белановский A.C. Оптические излучения в ветеринарии. М.: Агропромиздат, 1979. - 94 с.

23. Белов А.Д., Данилов Е.П., Дуркур И.И. и др. Болезни собак. М.: «Че-Ро», «TREADE PABLISHERS», 1994. - 368 с.

24. Биохимические методы исследования в клинике: (Справочник) / Под ред. A.A. Покровского. — М.: Медицина, 1970. 352 с.

25. Блюгер А.Ф. Вирусный гепатит. — Рига, 1978. — 146 с.

26. Блюгер А.Ф. и др. Ультраструктурная патология печени: Электронно-микроскопический атлас. Рига: Зинатие, 1989. — 86 с.

27. Блюгер А.Ф. Основы гепатологии. Рига, 1975. - 440 с.

28. Блюгер А.Ф. Прижизненное морфологическое изучение печени. — Рига, 1964. 250 с.

29. Блюгер А.Ф. Тайны и парадоксы печени: (Азбука гепатологии). — М.: Знание, 1988.-326 с.

30. Блюгер А.Ф., Максимова JI.A., Карташова О.Я., Майоре А.Я. Проблема холестаза в современной гепатологии // Успехи гепатологии. Рига, 1975. -В.5.- с. 397-426.

31. Блюгер А.Ф., Новицкий И.Н. Практическая гепатология. — Рига: Звайгзне, 1984.-285 с.

32. Болезни печени и желчевыводящих путей у детей: (Руководство для врачей) / Под ред. Н.И. Нисевич Л.: Медицина, 1981. - 384с.

33. Бондарь З.А. Клиническая гепатология.- М., 1970. 246 с.

34. Брискин Б.С, Полонский А.К., Носов A.A. и др. Влияние низкоэнергетического лазерного излучения на метаболические и репаративные процессы в организме // Клиническая медицина, 1996.-№1.-С. 54-55.

35. Бышевский А.Ш., Терсенов O.A. Биохимия для врача: Справочник, 1994. -384 с.

36. Васильева Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных. М„ 1974.-268 с.

37. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М., 1972. 46 с.

38. Гальперин Э.И., Семендяева М.И., Неклюдова Е.А. Недостаточность печени. М., 1978. - 124 с.

39. Гамалея Н.Ф. Лазеры в эксперименте и клинике. — М.: Медицина, 1972. -216 с.

40. Гамалея Н.Ф. Влияние низкочастотного лазера на кровь // Врачебное дело. 1988. - № 9.- С. 67 - 70.

41. Гамалея Н.Ф., Стадник В .Я. Внутрисосудистое лазерное облучение крови // Вестник хирургии им. Грекова. 1989. - Т. - 142. - № 4. — С. 24 — 26.

42. Гамалея Н.Ф., Стадник В.Я., Рудых З.М. Применение лазеров в хирургии и медицине. М.,1989. - Ч. 1. - 504 с.

43. Гладкова Н.Д., Зверева К.В. Лазеры и медицина. — Ташкент, 1989. — 4.1. -С. 57.

44. Генес С.Г. Адаптационное значение глюконеогенеза в здоровом и больном организме // Патол. физиология и экспер. терапия, 1974. № 6. -С. 74-80.

45. Гуревич Е.С. Токсическая дистрофия печени. — Л., 1963. 128 с.

46. Денисенко В.Н., Кесарева Е.А. Биохимические показатели сыворотки крови собак // Материалы 10-го московского международного ветеринарного конгресса. М., 2002. - С. 228 - 229.

47. Дунаевский O.A. Дифференциальная диагностика заболеваний печени. -2-е изд., перераб. и доп. Л.: Медицина. Ленингр. отделение, 1985. — 76 с.

48. Жаров A.B. Роль морфологических исследований в изучении нарушений обмена веществ // Ветеринария, 1975. № 1. - С. 70 - 74.

49. Закржевский Е.Б. Пункционная биопсия и ее диагностическое значение. -М., 1970.-85 с.

50. Илларионов В.Е. Основы лазерной терапии. М., 1992. - 168 с.

51. Ионов П.С., Мухин В.Г. и др. Лабораторные исследования в ветеринарной клинической диагностике. М., 1967. 112 с.

52. Карташова О .Я., Максимова JI.A. Функциональная морфология печени. — Рига: Зинатие, 1979. 148 с.

53. Кассирский И.А., Алексеев Г.А. Клиническая гематология. Изд. 4-е, испр. и доп. -М.: Медицина, 1970. — 105 с.

54. Козлова В.И., Байбекова И.М. Морфологические основы низкоинтенсивной лазеротерапии. — Ташкент, 1991. 98 с.

55. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в клинике. JL: Медицина, 1976. — 384 с.

56. Кондрахин И.П. Болезни органов пищеварения собак: незаразные болезни собак.-М., 1991.- 120с.

57. Кончугова Т.В. Иммуномодулирующие эффекты лазерного излучения // Вопросы курортологии и физиотерапии. 1997. - № 1. - с. 42 - 46.

58. Корепанов В.И. Теория и практика лазерной терапии. М., 1994. — 96 с.

59. Котомцев В.В., Ченчубаева Т.И. Использование лазерной терапии при лечении экзем // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: Сб. ст. Вып. 2. — УрГСХА. - Екатеринбург, 1997. -С. 14-16.

60. Крейман М.З. Низкоэнергетическая лазеротерапия // Тр. Томского университета. 1993. - С. 31 - 40.

61. Кривчик A.A. Портальная гипертензия: (Некоторые вопросы патогенеза). -Минск: Беларусь, 1979. 164 с.

62. Крутских Е.В. Дифференциальная диагностика хронических заболеваний печени. — JI.: Медицина. Ленинград, отделение, 1980. — 172 с.

63. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник // Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.; Под ред. В.В. Меньшикова. — М.: Медицина, 1987. 368 с.

64. Логинов A.C. Лечение хронических заболеваний печени // Тер. арх. — 1977. № 1.-С.З-9.

65. Логинов A.C., Аруин Л.И. Морфологическая диагностика заболеваний печени по биопсиям // Метод, рекомендации. — М., 1979. 146 с.

66. Логинов A.C., Аруин Л.И. Клиническая морфология печени. — М.: Медицина, 1985. 286 с.

67. Малаховский Ю.Е., Лихачев A.A., Голин A.A., Мордовкин В.Б. Жировой гепатоз у детей // Вопр.охр. матер, и дет., 1975. № 9. - С 50 — 56.

68. Мансуров Х.Х., Мироджов Г.К. Метаболизм коллагена в печени при хронических, диффузных ее поражениях // Успехи гепатологии. — Рига, 1981.-вып. 9-С. 25-38.

69. Мансуров Х.Х., Мироджов Г.К., Салиев Ф. Ш. Внутрипеченочный холестаз // Сов. мед., 1977, № 2, С. 69 74.

70. Мансуров Х.Х. О недостаточности печени и оценка ее тяжести // Сов. мед., 1970.-№7.-С. 38-42.

71. Мансурова И.Д. Аминокислоты печени при ее заболеваниях // Успехи гепатологии. Рига, 1978. - Вып. 7. - С. 55 - 75.

72. Мацейна С., Веселюнас Й., Мураускас В. Методические рекомендации по применению импульсного инфракрасного терапевтического лазера, Вильнюс, 1995. 56 с.

73. Мишенева М.Г., Климова Г.В., Шкуратова И.А. Синдромы поражения печени у собак // Материалы научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. Ч. 1. - Казань, 2001. — С. 215 — 216.

74. Морфологическая диагностика заболеваний печени / Акамова С.М., Бекетова Т.П., Серов В.В. и др. М.: Медицина, 1989. - С. 46 - 49.

75. Мосин В.И., Алпатова Э.А. Клинические методы исследования желчевыводящих путей и печени: Учебно-методическое пособие. -Ставрополь: Ставропольский мединститут, 1983. — 196 с.

76. Мясников АЛ. Болезни печени и желчных путей. — М., 1956. 214 с.

77. Ниманд Х.Г., Сутер П.Ф. Болезни собак. Практическое руководство для ветеринарных врачей // М.: «Аквариум», 1998. 816 с., ил.79.0рлов В.Н., Фомичев В.И. Хронические заболевания печени. — М.: Знание, 1988.-310 с.

78. Панько Н.С., Власенко В.М. Применение лазеров в ветеринарии. — Киев: Урожай, 1987. 96 с.

79. Печень и липидный обмен /Ю.П. Никитин, С.А. Курилович, Г.С. Давидин; отв. ред. JI.E. Панин. Новосибирск: Наука. Сиб. отделение. — 1985. —С. 31 -37.

80. Подымова С.Д. Болезни печени: Руководство для врачей. — 2-е изд. перераб. и доп. — М.: Медицина, 1993. — 286 с.

81. Подымова С.Д. Клиническое значение пункционной биопсии печени при ее хронических, диффузных заболеваниях // Тер. Архив, 1968. № 5. — С. 36-39.

82. Подымова С.Д. Хронический гепатит. -М., 1975. 140 с.

83. Покровский A.A. Биохимические методы исследования в клинике. М., 1979.-68 с.

84. Покровский A.A. Роль печени в поддержании гомеостаза // Успехи гепатологии. Рига, 1978. - вып. 7. - С 5 - 21.

85. Попов В.И. Воздействие лазерного излучения на митотическую активность гепатоцитов регенерирующей печени // Вопр. курортологии, физиотерапии и леч. физкультуры, 1980. № 6. - С. 10—11.

86. Попова И.Л. Периферическая кровь и лазер. // Гигиена труда, профзаболевания. 1985. - № 11. - С. 44 - 45.

87. Послов Г.А. Отрицательные моменты лазеротерапии у собак // Материалы 10-го московского международного ветеринарного конгресса. М., 2002. - С. 27 - 29.

88. Рафес Ю.И., Шелекенлене И.И. Общие принципы распознавания и лечения нарушений холесекреции // Гастроэнтерология. — Киев, 1973. — С. 171-173.

89. Скорина И.А. Изменение биохимических показателей крови при заболеваниях печени // Актуальные вопросы ветеринарной медицины домашних животных. — Екатеринбург, 1999. — С. 68 71.

90. Скуя H.A. Хронические заболевания желчных путей. Л., 1972. - 228 с.

91. Современные методы лазерной терапии // Сб. науч. тр. / Под ред. Б.И. Хубутия. Рязань, 1988.

92. Соколовский В.В. Молекулярные механизмы биологического действия излучения гелий-неонового лазера // Влияние лазерного излучения на здоровье человека. — М., 1985. С. 7 - 10.

93. Соринсон М.Н. Желтухи. Горький, 1976. - 265 с.

94. Стряпунина И.В. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на морфологические изменения печени коров при субклиническом кетозе: Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук: 16.00.02. Екатеринбург, 1998. - 117 с.

95. Стряпунина И.В. Эффективность использования импульсного лазерного излучения при миокардиодистрофии плотоядных // Материалы научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. Ч. 1. - Казань, 2001. - С. 226 - 227.

96. Тареев Е.М., Семендяев М.Е., Мухин A.C., Розанова Л.Б., Блинков И.Л., Безпрозванный Б.К. Ятрогенные (лекарственные и другие) поражения печени // Успехи гепатологии. — Рига, 1975. — В. 5. — с. 154 — 176.

97. Уколова M.B. Гомеопатическая терапия гепатопатий собак // Материалы 10-го московского международного ветеринарного конгресса. — М., 2002. -С. 130-131.

98. Улащик B.C. Введение в теоретические основы физической терапии. Минск: Наука и техника, 1981.- 128 с.

99. Улащик B.C. Новые методы и методики физиотерапии. — Минск: Беларусь, 1986.-198 с.

100. Улащик B.C. Очерки общей физиотерапии. — Минск: Наука и техника, 1994. 156 с.

101. Уша Б.В. Ветеринарная гепатология. — М.: Колос, 1979. — 263 с.

102. Уша Б.В., Горохова Т.Б., Жавнис С.Э. Применение у собак прижизненной пункционной биопсии печени в сочетании с лапароскопией // Материалы 10-го московского международного ветеринарного конгресса. — М., 2002. — С. 68 — 69.

103. Уша Б.В., Беляков И.М., Большакова И.И. Липидно-углеводный обмен и резервная щелочность плазмы крови собак при острой печеночной недостаточности // Материалы 10-го московского международного ветеринарного конгресса. М., 2002. — С. 219.

104. Хронические гепатиты и циррозы печени: Сборник научных трудов / Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт/ Под ред. Ф.В. Курдыбайло. Л.: ЛСГМИ, 1989. - С. 26 - 31.

105. Шеметило И.Г., Воробьев М.Г. Современные методы электро- и светолечения. Л.: Медицина. Ленинград, отделение, 1980. - 212 с.

106. Царфис П.Р., Френкель И.Д. Биохимические основы физиотерапии. — М.: Высшая школа, 1991. 58 с.

107. Aledort L.M., Levine Р.Н., Hilgartner М et al. A stady of liver biopsies and liver disaese among hemophiliacs // Blood, 1985. P. 124 - 137.

108. Andus Т., Bauer J., Gerok W. Effects of cytokines on the liver // Hepatology, 1991.-P. 13-22.

109. Arthur M.J.P., Iredale J.P. Hepatic lipocytes, TIMP-1 and liver fibrosis //J. Royal Coll. Phys. Lond., 1994. P. 44 - 65.

110. Avgerinos A., Harry D., Bousboulas S. et al. The effect of an eucaloric high carbohydrate diet on circulating lrvels of glucose, fructose and non-esterified fatty acids in patients with cirrhosis // J. Hepatol., 1992. P. 312 — 315.

111. Baxter G. David. Therapeutic laser . London, 1994. — 149 s.

112. Berk P.D., Noyer C. Bilirubin metabolism and the hereditary hyperbilirubinaemis // J. Hepatol., 1992. -112 s.

113. Bismuth H. Sugrical anatomy and anatomical sogrery of the liver // World. J. Surg., 1982. -P. 47-51.

114. Bissell D.M., Choun M.O. The role of extracellular matrix in normal liver // Scand. J. Gastroenterol., 1988. P. 13 - 23.

115. Blum U., Rossle M., Haad K. et al. // Budd-Chiari syndrome: Technical, hemodynamic, and clinical result of treatment with transjugular intra-hepatic portosystemic shunt // Rudiology, 1995. P. 443 - 446.

116. Bonnett R., Davies J.E., Hursthouse M.B. Structure of bilirubin // Nature, 1976.-P. 154- 167.

117. Bouwens L., Wisse E. Pit cell in the liver // Liver, 1992. P. 3 - 12

118. Braet F., De Zander R., Baekeland M. et al. Strukture and dynamics of the fenestrae-associated cytoskeleton of rat liver sinusoidal endothelial cells // Hepatology, 1995. P. 65 - 78.

119. Cheng W.S.C., Murphy T.L., Smith et al. Dosedependent pharmacokinetics of caffeine in humans: relevance as a test of quantitative liver function // Clin. Pharmacol. Ther., 1990. P. 212 - 231.

120. Conn H.O. Transjugular intrahepatic portal-systemic shunts: the state of the art // Hepatology, 1993. P. 56 - 89.

121. Deaciuc I.V., Bagby C.J., Niesman M.R. et al. Modulation of hepatic sinusoidal endothelial cell function by Kupffer cell: an example of intercellular communication in the liver // Hepatology, 1994. — P. 143 — 145.

122. Degott C., Feldmann G., Larrey D. et al Drug-inducted prolonges cholestasis in adults: a histological semiquantitative study demonstrating progressive ductopenia // Hepatology, 1992. P. 59 - 65.

123. Dixon A.K., Nunez D.K., Bradley J.R et al. Failure of percutaneous liver biopsy: anatomycal variation // Lancet, 1987; 2: 437.

124. Elias E., Muller D.P.R., Scott J. Association of spinocerebellar disorders with cystic fibrosis or chronic childhood cholestasis and very low serum vitamin E // Lancet, 1981. P. 67 - 98.

125. Ellison R.T., Horburgh C.R., Curd J. Complement levels in patients with hepatic dysfunction // Dig. Dis. Sei., 1990. P. 225 - 234.

126. Feldmenn G. The cytoskeleton of the hepatocyte // J. Hepatol., 1989. -P. 11-15.

127. Fever J., Vanstapel F., Blanckaret N. Bile pigment metabolism // Clin. Gastroenterol., 1989. P. 78 - 90.

128. Frerichs F.T. von. Uber den Diabetes // Hirschwald, Berlin, 1984. 434 s.

129. Hacki W., Bisher J., Preisig R. A new look at the plasma disappearance of sulfobromophthalem (BSP): correlation with the BSP transport maximum and the hepatic plasma flow in man // J. Lab. Clin. Med., 1976. P. 145 - 209.

130. Harry D.S., Mclntyre N. Plasma lipoproteins and the liver // In Wright's Liver and Biliary Disease, 3rd edn, Millward-Sadsler GH, Wright R., Arthur M.J.P., eds. W.B. Saunders, 1992. P. 36 - 76.

131. Internashional Working Party. Terminology of nodular hepatocellular lesions // Hepatology, 1995. P. 83 - 99.

132. Ishii M., Vroman B., N.F., LaRusso N.F. Morphologic demonstration of receptormediated endocytosis of epidermal growth factor by isolated bile duct epithelial cells // Gastroenterology, 1990. P. 44 - 67.

133. Jacobs W. H., Goldberg S.B. and The Patient Care Committee of the American Gastroenterological Association. Statement on outpatient percutaneous liver biopsy // Dig. Dis. Sci., 1989. — P. 34 — 52.

134. Jorgenson B., Fisher E., Ingeberg S. et al. Decreased blood platelet volume and count in patients with liver disease // Sciald. J. Gastroentorol., 1984.-P. 19-32.

135. Krowka M.J., Dickson E.R., Cortese D.A. Hepatopulmonary syndrome: clinical observations and lack of therapeutic response to somatostatin analogue //Chest.,1993.-P. 104-115.

136. Kubo S., Rodriguez Jr. t., Roh M.S. it al. Stimulation of phagocytic activity of murine Kupffer cell by Tuftsin // Hepatology, 1994. P. 19-45.

137. Lange P.A., Stoller J.K. The hepatopulmonary syndrome // Ann. Intern. Med., 1995.-P. 122-156.

138. Lebrec D., de Fleury P., Rueff B. Portal hypertension, size of esophageal varices and risk of gastrointestinal bleeding in alcoholic cirrhosis // Gastroenterology, 1980. P. 79 - 139.

139. Lee S.S., Moreau R., Hadengue A. et al. Glucagon selectively increases splanchnic blood flow in patients with well-compensated cirrhosis // Hepatology, 1988. P. 8 - 37.

140. Lindor K.D., Janes C.H., Crippin J.S. et al. Bone disaese in primary biliary cirrhosis: does ursodeoxycholic acid make a difference? // Hepatology, 1995. — P. 21 -44.

141. Lin R-S., Lee F-Y., Lee S-D. et al. Endotoxemia in patients with chronic liver disease: relationship to severity of liver diseases, presence of esophageal varices, and hyperdynamic circultion // J. Hepatol., 1995. P. 3 - 31.

142. Maher J.J., Friedmann S.L. Parenchymal and nonparenchymal cell interactions in the liver // Semin. Liver Dis., 1993. P. 13 — 22.

143. Meyer-Wyss B., Renner E., Luo H. et al. Assessmen of lidocaine metabolite formation in comparison with other quantitative liver function tests // J. Hepatol., 1993. P. 76 - 89.

144. Morgan M.Y., Marshall A.W., Milsom J.P. et al. Plasma amino-acid patterns in liver disease // Gut., 1982. P. 88 - 96.

145. Ohshiro T., Calderhead R. Low level laser therapy: a practical introduction // Chichester, 1990. 556 s.

146. Olsson R., Stigendal L. Clinical experience with isolated hyperbilirubinemia // Scand. J. Gastroenterol., 1989. 321 - 342.

147. Rappoport A.M. The microcirculatory acinar concept of normal and pathological hepatic structure//Bcitr. Path., 1976; 157: 215.

148. Ronada M., Milani L., Mercel C. et al. Value of prealbumin plasma levels as a liver test // Digestion, 1987. P. 37 — 72.

149. Ruff F., Hughes J.M.B., Stanley N. et al. Regional lung function in patients with hepatic cirrhosis // J. Clin. Invest., 1988. P. 50 - 124.

150. Sakamoto M., Ueno T., Kin M. et al. Ito cell contrtaction in response to endothelin-I and substance P. // Hepatology, 1993. P. 18 - 78.

151. Schneeweiss B., Graninger W., Ferenci P. et al. Energy metabolism in patients with acute and chronic liver disease // Hepatology, 1990. P. 11 - 27.

152. Sherlock S. Carbohydrate changes in liver disaese // Am. J. Clin. Nutr., 1970.-P. 23-46.

153. Sherlock S. The liver-lung interface // Semin. Resp. Med., 1988. P. 9 -24.

154. Shimada M., Yanaga K., Makowfa L. et al. // Significance of lecithin: cholesterol acyltransferase activity as a prognostic indicator of early allograft function in clinical liver transplantation // Transplantation, 1989. P. 48 - 60.

155. Soazec J-Y., Feldmann G. In Situ immunophenotyping study of endothelial cells of the human hepatic sinusoid: results and functional implications // Hepatology, 1991. P. 14 - 37.

156. Smedsrod B., Do Bleser P.J., Braet F. et al. Cell biology of liver endothelial and Kupffer cell // Gut., 1994. P. 35 - 55.

157. Toth C.A., Thomas P. Liver endocytosis end Kupffer cell // Hepatology, 1992.-P. 16-25.

158. Tavill A.S., Craigie A., Rosenoer V.M. The measurement of the syntetic rate of albumine in man // Clin. Sei., 1987. P. 2 — 23.