Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфофункциональная характеристика периферических иммунокомпетентных органов поросят при сальмонеллезах

р V Б о»

г г

СйНКТ-ПЕТЕРБУРГСКЙЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ

На правах рукописи УДК: 616.98-097:579.842.14:536.4-053.2.

Парфенов Александр Федорович

МОРФОФННКиИОНАЛЬНЙЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ ИШНОШЛЕТЕНТНЫХ ОРГАНОВ ПОРОСЯТ ПРИ СйАЬМОНЕЛЛЕЗЯХ

1Ь.00.02 - патология, онкология и морфология животннх

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных надк

Санкт-Петербург. 1395

\

Диссертационная работа выполнена на кафедре патологической анатомии Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины

Научный руководитель -Доктор ветеринарных наук, профессор БУЯНОВ fi.fi.

Официальные оппоненты: Доктор ветеринарных наук, профессор 1аиов U.C.

Доктор медицинских наук, профтсс*>}> Беляннн В,Л.

Ведущая организация: Саратовская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии

Завита диссертации состоится " 8 " июни 1995 года г.

в ___ часов на заседании специализированного совета <Д 120.20.01)

при Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины (196084, г. Санкт-Петербург, ул.Черниговская.5),

С диссертацией мовно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

Автореферат разослан " " „¿¿¿а^. 1ЭЭ5 г.

Ученый секретарь специализированного

совета, доцент Никиякна И.В.

- 3 -

i. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность т е и ы. В настоящий период крупные свиноводческие комплексы оказались перед рядок весьма еденных экономических проблей, что обусловило серьезные сбои о уровне и качестве корнлення. Вивотным зачастую скармливавтся не только неполноценные, но явно непригодные, токсичные корка. В ати* условиях все чаце проявлявт свои вирулентные свойства условно-патогенные микроорганизмы. Среди таких инфекций одно из ведущих мест принадлежит сальмонеллезу.

По материалам ветеринарной лаборатории Ленмясокомбината, при бактериологическом исследовании проб от паввих поросят сальмонеллы были выявлены в 33,32 случаев, из них в свинокомплексах Ленинградской области в 85Z случаев высевали Salionella typhlsuis. в ISZ случаев - Salвопе1 la choleraesuls (Урбан В.П.. 1991). При эпизоотических вспышках сальмонеллеза в условиях северо-западной зоны Российской Федерации у свиней выделяли оба серологических варианта: Salionelia typhlsuls - fi0,62, и Salaonella choleraesuls -33,32 (Иолодинаювили Н.й., Ефремов К.П., 1387; Урбан В.П., 1967, 1991).

Исследования 236 пявиих поросят, проводиввиеся в 1988-90 гг. кафедрой 8пизоотологии Санкт-Петербургского ветеринарного института на свинокомплексах "Спутник" и "Восточный" Ленинградской области показали„выделение сальмонелл у 20,3% обследованных трупов, из них Saleonella typhlsuis идентифицирована в 922 случаев, a Saleonella typhlaurlu» - в 6.1Z случаев (Урбан В.П., Закордо-нец B.C., Сцибаровская О.И., Симанская C.B., 19901.

Исследования, проведенные сотрудниками кафедры патологической анатомии Санкт-Петербургского ветеринарного института в 198993 гг. совместно с кафедрой эпизоотологии и лабораторией сальмо-неллезов ВНИИ им. Пастера, такхе подтверждает указанные данные и подчеркивает актуальность проблемы сальмонеллезной инфекции в свинокомплексах Ленинградской области (Тарасов С.А., Буянов А,А. и соавторы, 1993).

Современные представления об инфекционных болезнях как процессах, возникавших в результате взаимодействия микро- и макроорганизма, подразумевая? необходимость морфологического изучения органов иммунитета (Ваксв И,С,, Прудников B.C., 1992). Подробно описано нормальное строение, эмбрио- и гистогенез тимуса, селе-

зенки и лимфатических узлов. Вместе с тем, ряд вопросов, связанных как с функциональным значением некоторых конкретных структур, так и вопросы патогенеза и иммуногенеза различных бактериальных инфекций, особенно сальмонеллеза, остается выясненными не до конца (Покровский В.И, и соавт., 1981; Карпенко Л.Ю., 19S0; Котен-ко AJ., 1990}

Интересным в вопросах патогенеза и патоморфологии явился наблюдаемый нами на протяжении последних лет факт некоторых структурных различий и особенностей, выявляемых при аутопсии трупов свиней, зараженных серотипами Salionella typhisuis и Salio-nella typhimriui.

Изучение иммунологических реакций в пораженном организме может помочь сравнение структуры и функции иммунокомпетентных органов, которыми в наиих исследованиях явились селезенка и лимфоузлы, осуцествлявцие, соответственно, иммунный гомеостаз крови и лимфы (1аков U.C., Прудников B.C., 1992). При этом морфофункцио-нальные и морфометрические исследования Т- и В-зависимых зон этих органов иогут дать возможность более глубокого понимания патогенеза сальмонеллезов и роли в развитии болезни гуморального и клеточного иммунитета.

Цели и задачи исследования. Цельп работы явилось определение особенностей патологоанатомического и гистологического проявления сальмонеллеза у поросят в зависимости от серотипа возбудителя (Salionella typhlsuls и Salionella typhi«urlui) на основе изучения патоморфогенеза в периферических иммунных и других органах.

Для достижения цели необходимо было режить следующие задачи: 1. Изучить с помоцьо гистологического и морфометрического методов исследования количественный и качественный клеточный состав периферических иммунокомпетентных органов у интактных поросят в зависимости от возраста (2 и 4 месяца);2. На основе результатов патологоанатомического, бактериологического и морфометрического методов исследования изучить характер патомор-фологических изменений в органах у поросят при сальмонеллезе в зависимости от серотипа возбудителя СSalmonella typhisuls и Salionella typhlBurlui). 3. Изучить с помощью гистологического, гистохимического и морфометрического иетодов исследования количественный и качествен-

ный клеточный состав в иммунокомпетентных органах у поросят при сальмонеллезе, в зависимости от серотипа возбудителя.

Научная новизна работы. Впервые осуществлена попытка определения специфического воздействия различных серо-типов сальмонелл на клеточный состав иммунокомпетентных органов у поросят. Одновременно выявлены особенности патологоанатомического проявления сальионеллеза у поросят в зависимости от серотипа возбудителя.

Теоретическая и практическая значимость. Изучен характер изменения количественного и качественного состава клеток иммунокомпетентных органов у поросят в зависимости от серотипа сальмонелл. Выявлены особенности патологоанатомического проявления сальмонеллеза в зависимости от ятамма возбудителя.

Результаты исследования могут быть использованы для патоло-гоанатомической дифференциальной диагностики сальмонеллеза. Материалы работы рекоиендуится к внедрении в учебный процесс при подготовке ветеринарных врачей.

Апробация работы. Материалы исследования доложены на научных конференциях профессорско-преподавательского состава в 1990-1993 гг., на Международном семинаре "Проблемы моделирования патологических процессов у человека и «ивотных и испытание биологически активных препаратов" (Санкт-Петербург, 1992), на Международном симпозиуме по теме "Проблемы моделирования патологических процессов у человека и животных; иммунодефициты, их диагностика и коррекция" (Санкт-Петербург, 1994).

Внедрение. Материал, изложенный в диссертации, используется в лекционном курсе, на лабораторных занятиях в СПГйВМ.

Публикация. Основные положения диссертации опубликованы в материалах Международного семинара "Проблемы моделирования патологических процессов у человека и животных и испытание биологически активных препаратов" (Санкт-Петербург, 1992), в журнале "Ветеринария" Н? (1993), в материалах Международного симпозиума "Проблемы моделирования патологических процессов у человека и животных: иммунодефициты, их диагностика и коррекция" (Санкт-Петербург. 1994).

Основные положения диссертации, выносимые на зациту:

- б -

1. Серотипы S.typhlsuls и S.typhliuriui оказывает системное патогенное воздействие на иммунокомпетентные органы, печень и легкие поросат.

2. Сальмонеллез (S.typhlsuls и S.typhliuriui), независимо от серотипа, сопровождается подавлением активности в В- и Т-за-виснмых зонах селезенки и регионарных лимфоузлов; количественный и качественный состав клеток в периферических иммунных органах зависит от серотипа возбудители,

3. Степень и характер поражения иммунокомпетентных тканей тцвваритвЛьного канала позволяет дифференцировать проявления сальмонеллеза в зависимости от серотипа возбудителя.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 135 страницах мажинописного текста, вкличая 22 таблицы, 100 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, предложений. Список литературы включает 182 источнника, в том числе 34 иностранных автора.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы исследования

Исследования были проведены на свинопоголовье совхозов "Восточный", "Спутник" Ленинградской области и на свиньях, поступавших для убоя на Санкт-Петербургский мясокомбинат: Патоло-гоанатомически исследовано 197 трупов паввих и вынужденно убитых свиней в возрасте 4 месяцев, больных сальмонеллезом Salio-nella typhisuis и 14 трупов свиней 2-месячного возраста, зараженных серотипом Salnonella typhliurlua. При этом для уточнения диагноза и определения серотипа возбудителя в каждом случае отбирали материал для бактериального исследования, а такхе материал для гистологического, гистохимического и морфометрического исследований.

Аутопсия проводилась с полной эвентрацией внутренностей по методу lopa и последуоцей патологоанатомической оценкой органов (глоточные миндалины, тимус, сердце, легкие с бронхиальными и срвдостенными лифоузлами, печень с регионарными лимфоузлами, селезенка с регионарными лимфоузлами, тонкий и толстый кижечник с регионарными лимфоузлами, желудок). Для аутопсии, бактериологического анализа, гистоисследований использовались трупы без при-

- 7 -

знаков аутолиза и разложения.

Бактериологические исследования. Выполнены на базе кафедры эпизоотологии Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины, в Санкт-Петербургской городской ветеринарной лаборатории, а также в отделе сальмонеллезов лаборатории кижеч-ных инфекций ВНИИ эпидемиологии и микробирологии им. Пастера под руководством старвего научного сотрудника, кандидата медицинских наук Кафтыревой Л.ft, и старвего научного сотрудника хоздоговорной темы 9/10, кандидата ветеринарных наук Закардонец B.C.

Полученный при аутопсии патологический материал (кусочки печени и селезенки с регионарными лимфоузлами, брыжеечные лимфоузлы тонкого и толстого кижечиика, легкие, средостенные бронхиальные лимфоузлы) высевали на МПй, затем на специфические среды Зн-до, Олькеницкого, где сальмонеллы образовывали типичные для рода колонии, проводили оценку интенсивности роста колоний. Изучали биохимические свойства возбудителей на цветном ряду, серологические свойства по 0- и Н-антигену, оценивали подвижность.

Для гистоисследования отбирали стандартный набор органов от 30 трупов свиней, зараженных Salmonella typhi suis и 14 трупов, зараженных Sal»onella typh^urlue. Данный набор включает в себя селезенку и печень с регионарными лимфоузлами, брыжеечные лимфоузлы. Кусочки органов толщиной 0,3-0,5 си фиксировали в спирте, 10Z нейтральном растворе фориалина, жидкости Карнуа; проводку материала вели по общепринятой методике и заливали в парафин. Получали парафиновые среза толщиной З-б «км. Затем окравивали среза гематоксилин-эозином для общего обзора и азур-П-эозином с целью более качественной дифференциации в селезенке и лимфоузлах клеточных элементов^миэлоидНого, ретикуло-эндотелиального и лимфоид-ного ряда. Соединительную ткань выявляли окраской по Ван-Гизону с квасцовым гематоксилином Зрлиха. выдержанным в течение 3 лет (L1111 К., 1969; Меркулов Г.Я., 1969).

Для гистохимических исследований парафиновые срезы обрабатывали жифф-йодной кислотой по Мак-Манусу с цельв выделения макрофагов, мукополисахаридов и слизи; жировые включения в клетках органов выявляли обработкой замороженных срезов насыщенным спиртовым раствором судана III; содержание гемосидерина в органах определяли реакцией на берлинскую лазурь по Ргрлсу и реакцией на турнбулеву синь по Тириану-Вмельцеру.

Для контроле количественного содеражания ДНК и РНК, плазматических ч тучных клеток использовали окраску метиловым-зеленым-пиронином по Инна-Паппенгейму и методу Браже (Кононский Я.И., 1978),

Изучение содержания и распределения лейкоцитов в определенных зонах селезенки и лимфоузлов проводили окраской замороженных срезов по Гольдману,

фотографирование интересующих объектов проводили при помочи микроскопов М5И-15 и labowal - 4, При морфометрическом исследовании Т- и B-зон селезенки и регионарных лимфоузлов с помощью светового микроскопа использовали метод сравнения препаратов по концентрации клеток и количеству клеточных элементов различных групп на постоянной площади окулярной вставки (сетки Глаголева fl.fi.), составляющей 151,25 мкм.кв.

Результаты патологоанатомических, гистологических, гистохимических, бактериологических исследований были аналмзированн с целью дифференцированного освещения патологического воздействия на иммунную систему организма и на другие системы органов свиней серотипов Salionella typhi suis и Salionella typhlBurliu,

Полученный в результате морфологического исследования Т- и B-зон селезенки и лимфоузлов цифровой материал статистически обработан, с вычислением среднеквадратических ошибок и доверительных интервалов среднеарифметических величин с помощью таблиц Стрелкова P.S., по методу Стефанова С.Б. и Кухаренко Н.С. (1989).

2.2. Результаты исследований

2,2.1, Норфофункциональная характеристика периферических иммунокомпетентных органов у интактных поросят 2-х и 4-х-месачного возраста Исследования позволили установить следующие особенности клеточного состава иммунных органов. В селезенке число лимфоидных фолликулов в поле зрения микроскопа (80) составляло соответственно к 2-х и 4-х-месячномц возрасту S,81+_0,72 и 6,11+_0,24, средний диаметр фолликулов - 159,1+_24,2 и 173,0+_18,1 мкм. Концентрация лимфоцитов в них была наиболее высокой, в селезеночных тяжах и красной пульпе наблюдалось ее снижение. При stom достоверных различий в содержании лимфоцитов в селезенке в зависимости от возраста не выявлено.

Плазмоциты обнаруживались бо всех зонах селезенки поросят в незначительном количестве, однако в селезеночных тяваг. их концентрация повивалась и составляла соответственно возрасту 0,43+. 0,1 и 0,5б+_0,14, что говорило о тенденции к усилении плазмоци-гогенеза в более старией возрастной группе. Макрофаги в селезенке интактных поросят наблюдались в незначительной количестве и равномерно распределялись по всем зонам. Цифровые значения при этом имели неболыие возрастные вариации. В единичных макрофагах встречался гемосидерин в видемелкозернистых вклвче.чий в цитоплазме.

Ретикулярные клетки также выявляли во всех зонах, отмечалась тенденция к повывенип их концентрации с возрастом. Зозинофильныз и нейтрофильные гранулоциты встречались в красной пульпе и селезеночных тяжах, при этом достоверных возрастных изменений в их концентрации отмечено не было.

В регионарных лимфоузлах селезенки количество лимфоиднм* фолликулов в поле зрения составляло у 2-х-месячных поросят 4,«?+-0,28, у 4-х-месячных - 4,3+_0,13. В них наблидалась самая высокая концентрация лимфоцитов, что по возрастам составило 8,8+_0,24 и 8,9+_0,48. Для фолликулов характерна и наибольвая концентрация клеток. Изменений в количестве лимфоиднвх клеток по возрастным группам не отмечалось.

Ретикдлярнке клетки встречались во всех зонах лимфоузлов, но чаще в реактивных центрах лимфоидних фолликулов и составляли 0,В0+_ 0,024 и 1,23 +_0,110 соответственно у поросят 2-х и 4-х-месячиого возраста.

Концентрация макрофагов достоверно повивалась в лимфоузлах поросят старлей группы в центре лимфоидннх фолликулов, в мозговых тяжах и корковом плато.

Плазмоциты заселяли все зоны лимфоузлов. Плазмоцитзгеиез был более выраженным у старшей возрастной группы поросят в мозговых тявах и составлял 1,?+_0,13.

Зозинофильные и нейтрофильные гранулоциты выявлялись в мозговых тяжах и корковом плато. Обнаруживалась некоторая тенденция к повывенив их числа у 4-х-месзчных поросят, причем количество нейтрофильных гракулоцитов в корковом плато лимфоузлов этой возрастной группы достоверно повивалось с 0,18+_0,01 у З-г.-месячних поросят до 0,3+_0,024 - у 4-х-месячных.

- 10 - -

Об активности иммуногенеза говорило наличие митозов и блас-тов во всех морфологических зонах селезенки и лимфоузлов.

Таким образом, гистологические, гистохимические и морфомет-рические данные показали, что в 2-х-месячном возрасте у поросят в селезенке и регионарных лимфоузлах формировался клеточный состав, указывавший на повыпение реактивной функции димфоидной ткани с возрастом: бласты, митозы, макрофаги, плазмоциты, а такие заселение Т- и В-зон соответствующими типами лимфоцитов.

В регионарных лимфоузлах печени количество лимфоидных фолликулов в поле зрения составляло 4,1+_1,01 и 4,3+_0,85 соответственно 2-х и 4-х-месячному возрасту поросят. Размер равнялся 188,1+_18,9 и 17б,3+_21,2 ыкм. В них отмечалась самая высокая концентрация клеток, основную массу которых образовывали лимфоциты. Возрастных изменений в структуре белой пульпы и количестве лимфоидных клеток не было отмечено. Количество ретикулярных клеток у поросят старвей группы достоверно увеличивалось в центре лимфоидных фолликулов, а макрофагов - в мозговых тяжах и корковом плато, У зтой же группы на периферии лимфоидных фолликулов и корковом плато увеличивалось количество плазмоцитов, что, наряду с повывенивм концентрации других форы клеток, говорило о повышении иммунной активности и формировании полноценного клеточного взаимодействия в лимфоузлах печени.

В брыжеечных лимфоузлах тонкого кижечника структура белой пульпы по возрастай не отличалась. Отмечали незначительную тенденцию к повышению числа плазмоцитов, ретикулярных клеток и ней-трофильных гранулоцитов у поросят 4-х-месячного возраста, а у 2-х-месячных - эозинофильных гранулоцитов. Характерным был высокий процент митозов и бластов во всех морфологических зонах.

В лимофузлах толстого кишечника наблюдалось достоверное по-вывение числа нейтрофильных гранулоцитов у 4-х-месячных поросят, эозинофильных гранулоцитов - у 2-х-месячных.

Результаты исследования интактных поросят показали структур нув сформированное^ белой пульпы у 2-х-ыесячных поросят и повыпение концентрации ретикулярных клеток, макрофагов, плазмоцитов и нейтрофильных гранулоцитов с возрастом, что, видимо, было связано с нарастанием иммуногенеза, обусловленного воздействием раз личных антигенных факторов.

- 11 -

2.2.2. Результаты бактериологического исследования

Для бактериологического исследования органов у поросят при

спонтанном сальмонеллезе, вызванном ЗДурШиЬ и $ЛурЫжиг1иж, использовали аутопсийный материал печени, селезенки, легких, сре-достенных и бры!еечных лимфоузлов, миндалин. Выращенные серотипы полностью соответствовали своим характеристикам по подвижности, росту на специфических средах Зндо, Олькеницкого, по биохимическим и серологическим свойствам. Количественная характеристика проводилась на среде Зндо. Выделенные из материала печени, селезенки, легких, средостенных и брыжеечных узлов колонии жтамма БЛурЫзи^ почти всегда имели спложной рост. Зто указывало на лимфо- и гематогенную диссеминациш БДурЬЬи^ в пораженном организме и на длительность инфекционного процесса, в течение которого происходило интенсивное обсеменение органов и тканей сальмонеллами. При этом между интенсивностью обсемененности и глубиной патологических изменений просматривалась положительная корреляция.

У поросят, зараженных З.ЬурМжиНиж, возбудитель в 1002 случаев находился в печени и колонии характеризовались спложным ростом. Менее интенсивный рост колоний наблюдался в селезенке, а в материале из легких, средостенных и брыжеечных лимфоузлов 5Ду-рЬ1жиг1иж выделить удавалось не всегда. Это говорило о менее выраженной или непостоянной гемо- и лимфогенной диссенинации возбудителя в связи с более острым течением болезни, при котором не успевал развиться в полной мере деструктивный компонент воспаления в иммунокомпетентных органах, печени и легких.

2.2.3. Патологоанатомическая характеристика органов поросят при сальмонеллезе, вызванном БДурМгиЬ и 5ДурЫ«иг1иж

Патологоанатомическая характеристика органов поросят при спонтанной сальмонеллезе показала, главным образом, патологические изменения в иммунокомпетентных органах, печени и легких, обуславливающие лифференциальную диагностику сальмонеллезов, вызванных серотипами БДурМз^з и БДурМишЧиж. Исследование указывало на то, что наряду с общими, характерными для исследуемых серо типов изменениями, выражающимися в эксикоэе, исгонении, цианозе видимых слизистых оболочек и кожи, акцидентальной трансформации

- 12 -

тимуса, наблпдались и дифференцированные.

Различия патологического воздействия S.typhlsuls и S.typhi-виг 1ив в основном касались остроты инфекционного процесса и степени поражения органов и тканей. Бактерии S.typhlsuls вызывали в организме заражениях поросят тотальные воспалительно-деструктивные изменения, характеризующиеся в пищеварительном канале тотальным катаральис-гнойным и некротическим тонзиллитом (до 100%), сопровождающимся полной деструкцией лимфоидной ткани (19,3%). В то же время серотип S.typhiiurlui в 602 вызывал острый катаральный тонзиллит с милиарными некрозами, и ливь у 21,4% трупов наблюдался острый фибринозный тонзиллит. В толстом кивечнике у зараженных S.typhlsuls поросят отмечались тяжелые формы зкссудатного воспаления (очаговый и диффузный фибранояно-дифтеритический колит) с переходом воспаления на брюжину и развитием фибринозного и фиброзного перитонита (60%). Серотип S.typhiiurlui вызывал мелкоочаговый дифтеритический (21%) или острый катарально-дифтеритический колит с набуханием лимфондных фолликулов кишечника (73%). В этом случае незначительная деструкция ткани кишечника (в т.ч. и лимфоидной), а также кровоизлияния, видимо, обусловлены острым течением болезни, при котором не успевал развиться деструктивный компонент воспаления.

Аналогичный принцип дифференциации серотипов S.typhlsuls и S.typhiiurlui при аутопсии, 8 зависимости от степени деструкции ткани и остроты инфекции, лежит в основе диагностики поражений легких. Так, у трупов поросят, зараженных S.typhlsuls, главным образом наблюдались тотальные двустрронние зкссудативные пневмонии с некрозом ткаки, часто охватывающим целые доли легких и переходящим на плевру с развитием фиброзного плеврита. В легких трупов поросят, зараженных S.typhiiurlui, преимущественно встречались острые зкссудативные формы воспаления: 64% - двусторонняя лобарная катарально-гнойная бронхопневмония, 35,7% - двусторонняя лобулярная катаральная пневмония. На остроту процесса указывали также кровоизлияния под эпикардом и на реберной плевре ( 35,7%),

Гипоплазия селезенки была отмечена у 100% трупов, зараженных S.typhlsuls, из них 3% селезенок имели очаговый коагуляцион-ный «вкроэ. Селезенки у поросят, зараженных S.typhiiurlui были незначительно кровенаполнены. В регионарных лимфоузлах селезенки,

печени, кииечника и средостенных лимфатических узлах дифференцированное воздействие сальмонелл заключалось в проявлении у зараженных 5. ЬурЫяи! э поросат визуально различимого некротического воспаления, в то время как БДурЫжиМив вызывала острые лимфадениты с кровоизлияниями в паренхиме.

Таким образом, данные аутопсии трупов свиней, паввнх от сальмонеллеза, показали возмовность патологоанатоыической дифференциальной диагностики поражений, вызванных различными сероти-пами сальмонелл. При этом диагностический критерий обусловлен длительностью инфекционного процесса и ее положительной корреляцией с глубиной патологических изменений,

2.2.4. Гистологическая, гистохимическая и морфометри-ческая характеристика периферических иммуно-компетеитных органов у поросят при спонтанном сальмонеллезв, вызванном БДурЬ^иЬ и 5ЛурЬ1виг1иж

При сальмонеллезе, обусловленном $ДурЬ1зи18, количество лимфоидных фолликулов в селезенке составляло 5,4+_0,бЗ, при этим диаметр фолликулов равнялся 1б0,В+_22,1 ыкм, что не имеет достоверных отличий от показателей интактной группы поросят. Однако, количество лимфоцитов в белой пульпе снималось в 2 раза и боте и составляло в центре лимфоидного фолликула 4,0+_0,72. Остальные клетки в этой зоне представлены ретикулярными (3,5+_0,72), макрофагами (2,3+-0,96), плазмоииты почти не встречались. Митозы и бласты не обнаруживались, что указывало на снижение или полнее отсутствие иммуногенеза. При этом оставшиеся лихфоидные клетки были подвержены некрозу (чаще кариопикнозу). Аналогичная картина наблюдалась в красной пульпе селезенки, также в этой зоне наблюдался активный гемолиз эритроцитов и, как следствие, местный ге-мосидероз, Плазмоциты встречались, главным образом, в селезеночных тяжах, в количестве 1,5+_0,2, однако это не обеспечивало полноценный синтез иммуноглобулинов, на что указывало наличие двух-ядерных плазмоцитов и липофагов (формы неактивных плазмоцитов). В 4 случаях исследований были обнаружены сухие некротические образования округлой формы, при этом вокруг некротического детрита начиналась пролиферация фнбробластов, между которыми располаг;-лись эозинофильные гранулоциты, макрофаги, ретикулярные клетки и

- 14 -

незначительная часть некробиотических лимфоцитов.

Таким образом, разрушавшиеся структуры белой пульпы, отсутствие митозов и бластов, некроз лимфоидных и других клеток, отвлечение основной массы макрофагов на утилизацив гемосидерина обуславливали нарушение клеточного взаимодействия и снижение иммунной функции селезенки у поросят, зараженных 5.ЬурЫ$и15.

При сальмонеллезе, обусловленном 5ЛурМвиг1иж, в селезенке количество фолликулов в поле зрения составляло 2,96+_0,24. их диаметр был равен 125,0+_15,б. Все лимфоидные фолликулы имели выраженные реактивные центры, состояние, однако, в основном, из ретикулярных клеток, макрсфагов и незначительного количества лимфоцитов, часть которых находилась в состоянии некроза. Характерными были кровенаполненность красной пульпы, незначительный гемосиде-роз, а также наличие в красной пульпе нейтрофильных гранулоцитов, которые образовывали очаги, состояние на 70-75X из нейтрофилов, остальная часть клеток в них была представлена лимфоидными в состоянии некроза (кариопикноз). Такие микроскопические очажки чаче наблвдались в подкапсульной зоне селезенки. В среднем количество нейтрофильных гранулоцитов в красной пульпе составило 1,5+_ 0,5. Изменения, обнаруженные в селезенке, позволяли предположить острое течение сальмонеллеза, вызванного БЛурМкшЧиж.

В регионарных лимфоузлах селезенки у поросят обеих зараженных групп не отмечалось достоверных изменений в количестве и размере лимфоидных фолликулов. У поросят, зараженных серотипом 5. 1урМзи1з наблюдалась незначительная кровенаполненность сосудов, отечность строиы. краевых и мозговых- синусов. Концентрация лимфоидных клеток снижалась во всех зонах, вто сопровождалось их заменой на ретикулярные и макрофаги. Было отмечено повышение концентрации зозинофильных гранулоцитов. В мозговых тяжах их количество достигало I,14+_0,24. Плазмоциты встречались в мозговых тяжах, в паренхиме присутвовали единичные липофаги.

Противоположная патологическая картина в лимфоузлах селезенки была вызвана действием 5.1урЫжиНиш. Она характеризовалась острой кровенаполненностьо сосудов, отечностью стромы и синусов, а также кровоизлияниями в паренхиме и синусах, не распространявшимися, однако, на белую пульпу. Концентрация лимфоидных клеток снижалась, значительный процент занимали ретикулярные и макрофаги. Некроз клеток и отсутствие митозов и бластов указывали на

снижение иммуногенеза в лимфоузлах селезенки в целом. В корковом плато и мозговых тяжах отмечалось увеличение числа нейтрофильных гранулоцитов, которые пролиферирозали диффузно или образовывали микроабсцессы. Нейтрофильный гранулоцитоэ в лимфоузлах селезенки наряду с острой венозной гиперемией, отеком паренхимы и кровоизлияниями позволяет дифференцировать патологический процесс как острый катаральный лиыфаденит.

Результаты морфометрического исследования показали, что в В-и Т-зонах селезенки и лимфоузлов у поросят, зараженных 5.1урЬ1-зи!з и 5ЯурМжиг1иж в последней стадии болезни в 2 раза и более снижалось количество клеток лимфоидного ряда. Значительная часть лимфоцитов находилась в состоянии некротических изменений. При этом во всех зонах селезенки и лимфоузлов повышалась концентрация ретикулярных клеток и макрофагов. ЗЯурМзи!? вызывала увеличение количества эозинофильных гранулоцитов, а БЛур^жиПиж - нейтрофильных гранулоцитов. Садьмонеллез, обусловленный серотипом 5Яу-рМ$и1з, протекал более длительно, о чем говорила выраженная деструкция белой пульпы и некроз клеток, э то же время серотип 5, 1урМвиг1иа воздействовал остро, обуславливая повывение числа нейтрофильных гранулоцитов и появление других перечисленных выше признаков острого воспаления.

В регионарных лимфоузлах печени также наблодались значительные изменения клеточного состава, но количество и размер лимфоид-ных фолликулов не имели достоверных отличий от таковых у интакт-ных поросят. Отмечали снижение концентрации и некроз лимфондных клеток и пролиферации ретикулярных и макрофагов. У поросят, зараженных 5.1урМ5и15, в корковом плато лимфоузлов обнаруживали очажки рексиса клеток округлой формы, до НС мкм в диаметре (микронекрозы). Незначительное количество нейтрофильных гранулоцитов встречалось в некоторых участках краевых синусов. Для серотипа Б. 1урЫжиг1иж был характерен нейтрофильный гранулоцитоэ (в корковом плато до 2,0^-0.31), но микроабсце'ссы в паренхиме не выявлялись.

В брыжеечных лимфоузлах тонкого кишечника наблюдались процессы снижения реактивности лимфоидных фолликулов и некроз клеток. Количество и размер фолликулов в сравнении с таковыми у ин-тактных поросят не изменялся. Лимфоцитопоэз резко снижался.

В лимфоузлах поросят, зараженных 5.ЬурМжиг1иж обнаруживали ярко выраженную гиперемию паренхимы, кровенаполненность сосудов и

отечность строки и синусов, а тайме увеличение количества нейтро-фильннх гранулоцитов в корковом ллато и краевых синусах, что подтверждает патологоанатомический диагноз - острый лимфаденит.

В брыжеечных лимфоузлах толстого кивечника поросят, зараженных ЗЛурЫзи15, отмечали более выраженные процессы деструкции белой пульпы и клеточный некроз. Это сопровождалось повыжением концентрации зозинофильных гранулоцитов. Нейтрофильные гранулоци-ты встречались в небольно* количестве (0,5+_0,18) только в корс-ковом плато, также выявляли микронекрозы округлой формы диаметром около 62 мкм, основная часть их клеточного состава представлена лимфоцитами в состоянии кариопикноза. Микроабсцессы наблюдались в корковом плато лимфоузлов поросят, зараженных БДурМвиМив, нейтрофильные гранулоциты пролнферировали в мозговые тяжи и на периферию лимфоидных фолликулов.

Моррометрическое исследование лимфоузлов кижечника показало, что сальмонеллез сопровождался значительным изменением клеточного состава, снижением клеточной концентрации (в основном за счет лижфоидных клеток), отсутствием признаков активности как клеток, так и лимфоидных Фолликулов. Клеточная концентрация снижалась в В- и Т-зонах. Никронекрозы и микроабсцессы в данных зонах вызывали необратимые наружения иммуногенеза. $.ЬурЫги15 обуславливала деструкцию в иммунных органах и тканях за счет аллергического воспаления, на это указывала пролиферация зозинофильных гранулоцитов и интенсивное повреждение тканей и органов. 5ЛурМвиг1иж действует остро, вызывая описанные выже типы зкссудативного воспаления в лимфоузлах. .

ВЫВОДЫ

1. Серотипы $ЛурМзи1з и БЛурМмиНиж оказывают системное воздействие на инмунокомпетентные органы, печень и легкие поросят:

- обусловливают акцидентальнув трансформацию тимуса, блокируя Т-систему;

- вызывают деструктивные процессы в лимфоидных фолликулах пицеварительного канала, регионарных лимфоузлах, селезенке и печени, блокируя В-систему;

- 5.1урМ$а18 вызывает более выраженные по сравнению с ¡Лу-рМжиг1иа деструктивные изменения в иммунных органах, печени и легких, но 5.ЬурМвиг1ив обусловлиливает более острое течение бо-

лезни;

2. Салъмонеллез, вызванный S.typhlsuls протекает с некротическим тонзиллитом, диффузным дифтеритичвски-некротическим колитом, ареактивными некрозами в бршеечных, бронхиальных, средо-стенных и других лимфоузлах, печени и селезенке.

3. Сальмонеллез, вызванный S.typhiiurlui, протекает с мелкоочаговым поражение* толстого кишечника, ограниченным, как правило, границами солитарных фолликулов без макроскопического проявления поражения лимфоузлов, печени, селезенки.

4. Интенсивная обсемененность печени, селезенки, легких, их регионарных и брыжеечных лимфоузлов бактериями серотипов S.typhlsuls и S.typhiiurlui свидетельствует о гематогенной и лимфоген-ной диссеминации возбудителей.

3. Клеточный состав иммунных органов у имтактных поросят обеих возрастных групп идентичен, но отмечена тенденция н повышение концентрации ретикулярных клеток, плазмоцитов, макрофагов н нейтрофильных гранулоцитов у поросят 4-х-месячного возраста.

в. При сальмонеллезе, независимо от серотипа возбудителя, отмечается некроз лимфоидных клеток, снижение их концентрации и отсутствие активности в В- и Т-эависимых зонах селезенки и лимфоузлов.

7. S.typhlsuls вызывает повышение концентрации эозинофильних гранулоцитов в селезенке и лимфоузлах, S.typhiiurlui - повышение концентрации нейтрофильных гранулоцитов,

8. Результаты исследования показывает возможность дифференциальной диагностики сальмонеллеза у поросят в зависимости от серотипа возбудителя с учетом характера патологического процесса в лимфоидной ткани кишечника, количественного и качественного клеточного состава в периферических органах иммунной системы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1, Материалы диссертации могут быть использованы при чтении лекций, проведении лабораторных занятий по патологической анатомии, при написании научно-методической литературы.

2, Результаты исследований могут быть использованы для дифференциальной патологоанатомической диагностики сальмонЕллеза в зависимости от серотипа возбудителя.

- IB -

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Буянов Й.А., Кафтырева Л.П., Парфенов А.Ф. Моделирование сальмонеллеэа свиней на белых мыжах Проблемы моделирования патологических процессов у человека и животных и испытание биологически активных препаратов: Тез.докл. Иеждунар, семинара 19-21 окт. 1992,- СПб., 1992,- В с.

2. Буянов fl.fl.. Нифаитов В.Д., Лаковников Е.А., Парфенов П.Ф., Закардонец B.C. Влияние тимогена на выживаемость белых мыаей к локализацию возбудителей при вксперимвнтальном заражении сальмонеллами // Проблемы моделирования патологических процессов U человека и животных, иммунодефицит, их диагностика и коррекция: Таз. докл. Неждунар, симпозиума 12-16 сент. 1994.- СПб., 1994.- С. 10-11.

3. Тарасов С.А., Буянов А.В., Иванвжин Б.И., Паланов А.П., Парфенов Й.Ф. Патоморфодогия болезней свиней в промыалеиных комплексах Ленинградской области // Ветеринария,- 1993,- К 7,- С,42-44.