Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА БОЛЬНОГО ЛЕЙКОЗАМИ И С ЛЕЙКЕМОИДНЫМИ РЕАКЦИЯМИ

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ ВСЕСОЮЗНОЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА АКАДЕМИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ИМЕНИ В. И. ЛЕНИНА

00На правах рукописи

Аспирант АЗИЗОВ Нухбек Магомаевич

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА БОЛЬНОГО ЛЕЙКОЗАМИ И С ЛЕЙКЕМОИДНЫМИ РЕАКЦИЯМИ

(16.00.03 — Ветеринарная микробиология)

; Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москпа, 1»74

< л ", всесоюзнып' ордена Ленина институт v

экспериментальной ветеринарии :;,у

' всесоюзной ордена ленина академии .;■■ 1 '

' , : сельскохозяйственных наук имени в;-и. ленина .

; • • ; " ' ■ На, правах рукописи

Аспирант АЗИЗОВ Нухбек Магомаевич

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ:ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА. БОЛЬНОГО ' ЛЕЙКОЗАМИ. И С ЛЕИКЕМОИДНЫМИ РЕАКЦИЯМИ- .

'. ' (16.00.03 — Ветеринарная микробиология) ;

. ' Автореферат л ■. '■'■'

диссертации на соискание, ученой степени кандидата

7 .-■:-.■ ■'.-.' ветеринарных Наук • "■■ ■'.;-."'

. ч------;

■ !::.Е.1 1 - ■ : ■ *.....

' .. ■ ■ ■■1 ;

____&

Москна, 1974 -

Работа выполнена в комплексной лаборатории по изучению лейкозов и злокачественных опухолей сельскохозяйственных животных Всесоюзного ордена Ленина института экспериментальной ветерйнарии (директор — действительный член ВАСХНИЛ, заслуженный деятель" науки РСФСР, профессор Я. Р. КОВАЛЕНКО).

Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста, иллюстрирована 17 таблицами и 5 рисунками.

В списке использованной литературы имеется 589 источников, в том числе 372'отечествепных авторов и 217 работ, опубликованных в иностранных изданиях.

Научные, руководители:

доктор ветеринарных паук Л, Г. БУРБА » ' "

доктор ветеринарных наук М. А. СИДОРОВ

Официальные оппоненты;

1. Доктор ветеринарных паук,профессор Б. .К. ПАРАКИН

2. Кандидат ветеринарных паук И. А. ЯБЛОНСКАЯ

Ведущее учреждение — Украинский научно-нсследова-тсльский институт экспериментальной ветеринарии

Автореферат разослан « (0е/

Защита диссертации состоится « А£ » ШПсЧ Г 7п/

в 14 часов па заседании Ученого Совета Всесоюзного ордена Ленина Института экспериментальной ветеринарии (Москва, 109472, Кузьминки, ВИЭВ).

С диссертацией можно ознакомиться, в библиотеке ВИЭВ

Ученый секретарь Совета . кандидат биологических наук , В. В, Калугин

1 : В директивах XXIV съезда Коммунистической партии Со- ' ; t-; ■;■; ветского Союза И В последующих решениях .пленумов ЦК • '

■■..' по девятому „пятилетнему плану! (1971 — 1975) ■ намечены :■ т . ; грандиозные - задачи - по дальнейшему, увеличению, произвол- .;'.' ; ; -

ства и заготовок продуктов, животноводства/В успешном ре- . ' - шении 'поставленных задач исключительное'значение.приоб- , ■ -

ретает совершенствование и разработка нових". методов -'.и- , \ ; средств' борьбы ,с' болезнями сельскохозяйственных живот-

ных, что позволит значительно'Снизить.потери, скота от бо- " -

■ лез ней, сред и'которых определенное ^место занимают-лейко- Ô" ! ' "" " зы крупного рогатого скота, ' ' '". 11 ■ . V1-'

■ .Прогрессирующий рост -заболеваемости, отсутствие оире- - - ' • S:; ■ де^еН'Ных V знании', о причинах заболевания : в.значительной ; V--1 ',* ' степени усложняют разработку-мер борьбы.с этой болезнью. '- . .

' : ;. *. Б настоящее время достигнуты, определенные успехи В ~ ' ; . ■изучении природьт лейкозов 'и злокачественных новообразо- ■ • . л .. ваний.' Установлено, что,в генезелейкозов существенное зна- ; ' чение имеют4повышенный уровень ионизирующей радиации, ■ ^ химические канцерогены, вирусы и;другие, пока неизвестные, v■ , . <-'■.■' факторы внешней среды (Waianabe and Vago,*1958; Е. Е. По- : ; госянц,. 1963; П. Л. Гольдберг, ;1968; .JI. М. Шабад, .1947; • ; •• -'■" В. М. Бергольц, 1954; М. О. Раушенбах, 1956; И.М.'Ней- .'Ч '-4-■■ 'Л ман,M961; Gross,; 1959;' Kaplan; 1959;- Dobberschtem, I960;'. -\Ч -w : Л. Зильбер, ' 1966; -.Katzke, 1935; А. С. Емельянов, 1966; : . Л. Браун, 1968; -Б,1 М. Ярчук, М. Г. Дужаиский,- 1972; Temin, - ■ 1972; С. М, Гершензоп, 1973 и др.). .. ■ - ■ ^: ■ ЧЧ.7 i

' Ч. Некоторые исследователи (Cîerlacii, 1937; В. Л. Крестов- . V. ■ никова,. 1949—1971; Alexander-Jackson; 1954'; А. С. Троицкая, i1 >':.*'■' 1959—1973; Jonston, .1968) . высказывают предположение, о ; ■".'<■.'

' том, что в этш)логин злокачественных новообразовании игра- ' • : .-, ют роль' различные бактерии, в частности Гак назымаемая '

атипичная микрофлора. Однако экспериментальных ; данных ■■'■-/

' по этому вопросу недостаточно. Что касается л ейкозов.крупно- " ; ' ; го рогатйто скота; то'этиопатогенез болезни с позиций микро- • ■ t'■;■' биологии'практически, не изучался; ^е изучен родовой состав^ . . ; ■ бактериальной флоры органов и тканей' больных лейкозами и .*: ■ \ ч

здоровых животных,' неизвестна, частота' контаминации кро- ; Л ви, костного мозга и внутренних органов этнхживотных раз- ■■ . " личными микроорганизмами. ;;;, ."■ ■■ ." ■ v ■ ''; /:':■■.

.у-"'"- '" - Исходя.из изложенного, перёд нами - была -поставлена. за- ; у-'-' ■■.і-.:'.V* у дача ' Провести .микробиологическое' исследование• органов :и V

* тканей крупного рогатого', скота больного разными формами . ■-..и. - лейкозов, с лейкемоидными реакциями и' клинически здоро- у'У вых животііьіх, изучить "основные" биологические свойства вы- ',. . V деленных микроорганизмов с целью их идентификации и ,на :"■■'■ основании этих данных выяснить частоту-контаминации ор- У -. " ' -ганов и тканей этих животных различной микрофлорой.

і :. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ '

у/: ^ Материал и методики исследований, ■ ..;■..' ">'

V' . Настоящая работа является фрагментом комплексного « ■X' изучения лейкозов крупного рогатого скота, проводящегося , \ ;

в лаборатории по изучению 'лейкозов и злокачественных.' ' -опухолей сельскохозяйственных животных Всесоюзного орде- У ,-хУ на Ленина института экспериментальной ветеринарии. у-

. 'У Материал для микробиологического исследования брали .. :.

от крупного рогатого скота на'мясокомбинатах Краснодару ■ ского края, Днепропетровской, Ленинградской, Московской, ■ у Калужской и Калининской областей, а также в ряде хо-,:. . .зяйств Дагестанской ЛССР. .

В хозяйствах указанных областей, кроме' Дагестанской ..'.у '/■'" У АССР, сотрудниками лаборатории проводились систематичен V .у, скне кл'инико-гематологнческие исследования крупного рогатого скота на основе «Временной инструкции но борьбе с у у; У. лейкозом крупного рогатого скота». Подезреваемых и боль- * у

ных. ло «лейкозному ключу» животных выделяли из стад и',г '" у ■ переводили в.лейкозные изоляторы для дальнейшего паблю-у '

дения. Условно здоровыми считали животных, которые нахо- - V -,' , дились в неблагополучном по лейкозу стаде, но при пеодно- .; ■'.'».>.. * кратных клини ко-гематологических исследованиях не имели,,'--'

отклонений от нормы. Здоровыми считали животных из1 хо- ■ " / - зяйств, в которых за последние 7 лет не было случаев забо- ;. \

левания лейкозом', туберкулезом .и бруцеллезом, ■'.'■

, Микробиологическому-исследованию подвергнуты органы .' и ткани от 317 коров, а также 5 плодов", полученных от ко- у V і ров больных лейкозами. По гематологическим показателям ''■■'.■■■■' ',■■'■■ , больными лейкозами были признаны 179 животных, из ко-'

торых 164 убиты на мясокомбинатах. Пятнадцать животных - у " находятся В" лейкозиом изоляторе на опытной базе ВИЭВ, -

■ ' ' кровь и костный мозг от которых исследовали ежекварталь- ■

но. Наряду с этим были исследованы кровь и костный мозг -48 условно; здоровых ^клинически здоровых из неблагопо-

1 лучных хозяйств) и 90 клинически;здоровых коров из благо- -', ^ : получных хозяйств. ; ■'■'■' . V-'■■'"■■;■,■.'■;" ; ■ ,

'•> . Перед взятием , материала проводили ч клиннко-гематоло- : .;-■ ■ гические обследования животных. После убоя их подвергали -патологоанатом и чес ком у и гистологическому исследованиям.7" у. . Гистологические исследования проводила доктор ветеринар-пых наук Т. II. Кудрявцева. 4 • './.'. .'-

В результате, комплексных прижизненных и посмертных ; исследований.164 больных и подозрительных животных, ди-' агноз.лейкоза гистологически был подтвержден, в 36 случа- ' _ ях. Из ниху 25 животных был-установлен лимфоидный лей- ' ' -коз; у 3 — гемоцито(бластоз, у 4 — лимфогрануломатоз и у : ч ■ 4 — ретикулосаркома. У остальных 128 животных патомор-' ■' фологически были установлены гепатиты*. гепатохолонгиты,7'' ■ ■ циррозы ' (54 случая), хроническое воспаление; Легких (44 случая), хронический сепсис (10 случаев) маститы раз- ;■■,' ных форм (10 случаев), лимфадениты (4 случая), нефриты , . х (3 случая), капиллярная эктазия печени (2 случая) и у.од- ■ ного животного гиперхроматоз печени. ■ -, . ,

Для микробиологических исследований _от убитых' коров л и плодов брали кровь и цереброспинальную, жидкость по ■ ^ 1—2 мл, костный мозг по 0,5—1,0 мл, а также, кусочки, лег-, : ких, печени, лимфатических узлов, селезенок, почёк, сердца - . ^ и'молочных желез весом по ¡0—15 г. ^ ' ■

Кровь у животных брали из яремной вены в стерильные " пробирки ;с.-< питательной средой, соединенных резиновой трубкой , с иглой. На 5 мл обогащенной питательной среды ( брали по 1—2 мл крови. Иглу извлекали из вены и из остав-' шейся в ней крови готовили мазки по общепринятой мётоди-■ ке и препарат толстой капли крови по методике А. С. Тро- , '._."" никой." - ■ , :.

Костный мозг для микробиологического исследования брали по методике Г. А. Симоняна и Г. С. Петровского ;. ■'.. (1964) перед убоем или сразу после убоя животного и в' ко-. " личестве 0,5—1 мл из шприца над пламенем факела высева-' ли в питательную среду.

Спинномозговую жидкость от животных получали путем „. .. пункции в области, расположенной за каудальными углами крыльев атланта. Для прокола пользовались иглой Боброва с мандреном,' Аспирированную. спинномозговую жидкость в ■ объеме 1—2 мл высевали в 5 мл питательной среды.

■Пробы легких, печени, селезенки, почек,, сердца, лимфатических узлов и молочной "Железы брали после убоя живот- • ных. На границе измененной и нормальной ткани ■ острым ■ скальпелем вырезали кусочки органов весом 10—15 г и дела- ' ' ли. мазки-отпечатки. Затем кусочки органов смачивали спир-

• том, обжигал» и над. .пламенем спиртовки ? вносили .в: сте- .'■.''';''"■,■. рнльные'ленициллиновые' флаковы, плотной закрывали их ре-

/.типовыми пробками,-.маркировали. и помешали в термос со'-. ; / льдом. Доставленный п лабораторию.'материал, заморажива- ,■'■■:

і ли и хранили при 'температуре минус 20°С. Перед; посевом па-; У1 V. ' 'питательную среду, кусочки органов оттаивали при-комнат- . . -

поГГ температуре! фламбировали,. измельчали в стерильных " ' : •; • ступках и помещали в питательную среду," - ; '. .';'. " : ■ ; Дли первичного выделения микроорганизмов ■ использовав \

. ; ли питательную: среду, основой которой являлся триптиче-'; ■ -/..'-/О: ; ский перевар мышцы сердца крупного рогатого скота,- содер- : '*■ : жащий не менее 200 мг% амннного азота. К перевару до-". ...,'•• • ;■.,'бавляли 10% дрожжевого экстракта, 1 % глюкозы, по.0,01 % %

■ аргинина и;цистина и 20 мкг/мл пуклеиповокислого патрия,, " • I. ■■}'■'■ .' Среду на-слабом, огне доводили до кипения, фильтровали че; ч ..* '.'-•.• рез бумажный фильтр, разливали по 5 'мл в пробирки и ; ; ■'

.течение 30 минут стерилизовали при давлении пара. 1,5атм. ; . .'. 'У';;,' К .простерилизован,ной. .среде' перед посевом / добавляли 20%: І-;л

пеинактивнрованпой стерильной сыворотки крови • лошади, ; . , . - • после'чего питательная .среда имела' рН 7,4—7.6. / -■■

/у; - . Полужидкую и плотную питательные среды/ГОТОВИЛИ пу- \

• " тем добавления к жидкой питательной среде сухого рыбно- .

';. : ; 'V го агара или агара Дифко (0,2—1%), ■■"/. '*-,;,

\ , • ; - Первичные :посевы в жидкой -питательной среде выдержи- \""''■ г ■.';■. - • вали в термостате 5—7. дней, затем ихіпересевали на анало.^ : .

: гичную жидкую обогащенную питательную среду.'; При от- . , . . ; сутствни видимого' роста' микроорганизмов проводили доиол- • ' '.'

-';.' иителыю еще 2—-3 слепых "пассажа и, после этого, пезависк- ■ ; ■" .-;..': . мо от' наличия -.' видимого : роста, пересевали' --на 'полужидкую :: Л !" / и ллотную обогащенные среды. При,появлении роста .на плот- * : ' НОН питательной среде все'КОЛОНИИ отпивали В'ЖИДКИе среды , Л-' : для дальнейшего.изучения морфологических! культуральных, ..' 1 : 1 биохимических п'биологических СВОЙСТВ. ' '

- .. - 1' ■ Культуралыю-морфологические, биохимические .и биоло- , .

'."■ ' гические свойства у .выделенных микроорганизмов изучали - '•.'•.• V;' • общепринятыми в микробиологии методами, используя СО-: і

ответствующие питательные среды, ' ■•': '

■:':■■. .--Окислительно-восстановительные ферменты изучали в / V ^ ■ {'-."■Х- реакциях, восстановления »метиленовой СИНЬКИ И хлористого і ; • ; ■ ,'у V ■ тетразолйя,. гемолитические свойства на обогащенном агаре ? ."■ '. ' , .' ■: ■гс добавлением 5%. дефибринированной Крови мелкого -или. ,'.".-• '■ '. -крупного рогатого скота;;-:; / - ■ - /'у4' :

Патогенность выделенных бактерий определяли на белых -.' • > "' ;,.' ■■'' беспородных. мышах; Во всех случаях.'отбирали животных . г ; одинаковых по возрасту, , весу и полу. Заражали их внутри-.- : : -'■'-.; у " брюшинно и подкожно'. . ■■. . ■".;". V: ■

'Х'Х '- 6

'. '■'/^ . После'окончания''/изучения - морфологических, культураль- , '.: -/пых," биохимических/и - биологических свойств микроорганиз- . .. . мое, определяли их родовую принадлежность . при ПОМОЩИ •

■ ■" определителей "микробов: Р. 'А,-Циона ( 1948):, Н. А. ■ Красил: - .',ч

/ ' . . пикова (1949), Д. Бердже-'( 1957)'..При., этом' таКжо исполь-' , V зовали руководства Я. Е! Полякова'(1952, 1965), 51. Р.-Ко- : ! л валенко (1954)М. В. Рево и М. Д. Жуковой (1958), Н. И! 1 ; - .Мельникова (1962), Н. С. Егорова (1971), К. Д. Пятки и л -V. . (1971), л. С-.Пабинскоп (1972), М. О. Биргера (1973). Куль- •; ' ' -■: . .- туры мнкоплазм н ;микрококков ' ¿¿следовали в серологнчо ; г /'--' ;. скнх реакциях. . .'•• . ""/'^ о■:■" /■' -V у. - :'.V ^ ■';■ *

. •■ : '"■:.■ .Перекрестные ■ реакции агглютинации .и 'йнгибицин роста ; .;

,'. ■ - ' ставили общепринятыми методами . С I гипериммунным И'.СМВО- :: ;; ' .-.'■,- . ротками кроликов. - ' / ::/."■-' ; -:

>7-\ г ," Для: гипериммунизации кроликов, культурами лолиморф-

* '' ■, ного микрококка брали клинически* здоровых :кроликов .по- :: ■

: г, роды шиншилла; весом 2,5 кг. Антигены готовили из . 14ч ;"/'■''■. :-; штаммов* микрококков, выделенных из крови и'Других орга-■-; ■'.'■"''■ .;-/■' нов. .Микроорганизмы культивировал и-на; обогащенной илот--;- ..'/■ '/:;. '.:. . "ной питательной среде, в течение 48—72 часов, колонии смы- • . / ' - вали стерильным физиологическим раствором ;■:. и готовили •

суспензию. ; ч ■ /;.' Т ";' ' . .У ; '."•/; / ■' Л ;/ '■'.

.:: Б а ктер и а л ь ну юсу С П е 1! з и ю концентрацией 1- МЛрд/мЛ: вво- , **,-■-. '-; дилй кроликам ^одновременно под'кожу- п области внутрен- ' ;>

'.'У1' ■ ней поверхности-бедра обеих тазовых конечностей й иод ко- • '• ;''■'■.■ • ж у в области лопатки с.двух сторон по 0,2 мл в- каждую

: .-, ¡- , . точку,(всего 0,8 мл). Через 7 дней кроликам три дня подряд .;.'■ :; пиъекцировали ;внутривенно по' 0,2 мл этой же суспензии.- : -,1,

* <; г г..' ~ . После трехдневного перерыва 'вновь вводили внутривенно '

П0 0,5 мл антигена в течение 3 дней..Еще через 3 дня культу^./,'..'■' '■■■'.'■' ру микрококков вводили внутривенно 3 дня подряд по I мл. ': - ■/. 1 Через 7 дней после последней инъекнии антигена кроликов ; /;У; ' обескровливали- получали сыворотку,, консервировали ее ,т;ю-

■ мерсаном-и хранили в холодильнике при 4°С. • -' -; - '. -: / / ' - . М " Для гнпериммуиизации культурами мнкоплазм . исиольза-ч; .■-.•;'

■ - , вали. 12. кроликов породы шнншилла 'весом 3 кг. Антиген, го- *. -" ':товили из;. 12 штаммов микоплазм, выращенных в. обогащен-" ;

■ . ;-.!. - ной жидкой питательной среде в течениеЧ—5 суток. Бульон- ' ;

.. иые1 культуры после проверки на чистоту роста микроскопией; . - у V мазков -центрифугировали в '. течение 15 минут '• при

: . ; ~ . 10000 об/мин, надосадочную жидкость, сливали, .к полученное - " ■ -г/. -му осадку добавляли физиологический раствор и вновь цент- - ' .

* ; рифугировали. .К-отмытой трехкратно . культуре- добавляли '/. . .'■■■'. • физиологический раствор в количестве.. 1 /50 части исходной ': ' :, р

: : 1 бульонной культуры. Приготовленная таким образом суснеи- ; ' V,- зия.служила антигеном для гипериммунизации кроликов. • . ■

' Концентрированный в 50 раз- антиген" с полным адъюван-. том Фрейнда вводили-три дня подряд'по. 0,2 мл-в. центр по-; душечек лап задних -конечностей, внутрикожно в четыре.точки области спины » по 0,5 мл в две точки в плечевые муску-;, лы. После, трехдневного перерыва им вводили еще по 0,5 мл антигена без адъюванта.в обе плечевые и обе мышцы бедра.. Через 21 день цикл гипериммунизации повторяли и спустя 7 дней после.последней инъекции кроликов обескровливали для получения сыворотки. \

' Полученные сыворотки использовали ,в реакции агглкгги-' нации и пробе ннгибиции роста,- пользуясь методическими указаниями по выделению, культивированию и поддерживанию микоплазм (Я. Р. Коваленко, М. А, Сидоров, И. А. Яблонская, Э. А. Шегидевич, Д. Шиммель и В. Багке^ 1970).

у

- РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ,

Бактериологическому исследованию были подвергнуты по 367 проб крови и костного мозга, по 169 проб цереброспинальной жидкости, лимфатических узлов, легких, печени, селезенок, почек, сердца и 164 пробы молочных Желез, полу. чеиных от 322 животных. В результате чего было выделено и идентифицировано 921 культура "различных микроорганизмов. ■ -

: .На основании изучения культурально-морфологических, тинкториальных,- биохимических свойств и патогенности для лабораторных животных, все выделенные культуры были отнесены к 7 семействам 10 родам'микроорганизмов. В диссертации приводится, подробное описание основных таксономических признаков выделенных микроорганизмов.

Из органов и тканей 36 животных, больных лейкозами было выделено 157 культур микроорганизмов, из них 21 культура микоплазм, 23 — стафилококков, 18 — стрептококков, 20 — нестабильных Л-форм бактерии,'32—полиморфных микрококка,, 12'—эшерихий, 13 — диплококков, 7 — стабильных Л-форм бактерий и по 5 культур грибков и- эитерокок-; ков.',Из крови и костного:мозга 16 животных с гематологиче-" ским диагнозом на лейкоз, исследованных в динамике заболевания, было выделено 90 культур микроорганизмов, .из которых 56 культур отнесены" к микоплазмам и 34 — к полиморфным микрококкам. ... * Из органов и тканей 5 плодов, полученных от коров больных^ лейкозами, было выделено 18 культур микроорганизмов (10 культур.— микоплазм'и Л-форм бактерий,, и 8 — полиморфных микрококков).

Vr 4' Из органов .и тканей 128 животных с лейкємоидішмп рс- ' акциями было'.выделено 477 культур,'из которых. 15(3 куль- \ тур определены как эшерихни, 102 — стафилококки, 47т- , " . . полиморфные микрококки, 41 — микоплазмы, 18 — грибки, ■.-:.

53 — Диплококки, 42 — энтерококки ^и : 18 культур'—стрепто-\ . .

у: ■ ■ КОККИ. ' ' ■ ' '' ■' '• ■■. ',.■ '. ' '' '<'■>■■■■"''■ Ч/;;. J-'

' - . Из крови и костного мозга 138 , к л и и и к о-гем а то л о г и ч еск 11 ' ' -.

здоровых животных из благополучных; и из неблагополучных1. по лейкозу хозяйств было выделено 79-культур микроорга-. ■ низмов (14 культур микоплазм, 30;—полиморфных микро- _ , ■■' і кокков,.21—Л-форм бактерий, 8— стрептококков и 2 куль-' .'7 !•'.-■ туры стафилококков). ■ < \ . ' '

_ 1.. Микрофлора органов и тканей больного лейкозами

крупного рогатого скота. ' /

При бактериологическом исследовании проб органов 'и. ^ тканей было выделено 157 культур микроораиизмов, ""кото-"

рые ПО культурально-морфологическим, биохимическим . И биологическим свойствам условно разделили на 9 групп. : , К первой Труппе отнесли 20 культур, " ИЗ НИХ 9 были ВЫ де- ,

лены, из проб крови, 5 — из костного мозга, 3 — из церебро-, ■ спинальной .жидкости, 2 — из лимфатических узлов и Одна * из молочной железы. Эти культуры были получены после ; ' 3—4 слепых пассажей в жидкой обогащенной питательной _■-':'

среде. Все'штаммы для белых беспородных мышей были 11$ Л

пзтогеины. При исследовании в реакции агглютинации им ели ОДНО- 'или. двухсторонние антигенные СВЯЗИ. В результате '.."■'/ р'. 1 изучения , культуралыю-морфологических, . биохимических, . \ биологических и серологических свойств эта группа'была ot-v

'v ' несена к роду Mycoplasma. Наиболее часто микоплазмами .

1 контамииированы были кровь и костный мозг (50% и 41,6%, ■ соответственно).1 ■ : -'.'.' " , "' !'•■

Ко второй группе были отнесены 8 культур, выделенные ,

от 5'из'36 больных животных. Все штаммы были получены '.. ,"■ \ : после проведения'2—4-х слепых пассажей и условно отнесе-^ : ''V'.. " ны к стабильным Л-формам бактерий. Они были' выделены

из крови и костного мозга,'Частота обнаружения их в крови 7

и костном мозге не превышала 13,8%. 1 , . - ■ ■ " *

■ К третьей группе микроорганизмов, выделенных из орга: -нов:и тканей животных больных лейкозами, было отнесено" \ v 20 культур. По морфологическим признакам они были подоб- v ' V';* ны нестабильным 'Л-формам бактерий. При длительных пе-' <■ ,'1 ресевах в обогащенной полужидкой питательной, среде бел .." | добавления пенициллина и уксусно-кислого таллия все штам- * .'. " мы. реверсировали в бактериальную форму. Не стабильные- <- ■ , .

Л-формы б а ктер и й ■ б ыл и .выдел еи ы в 22.2 % : случаях из кро-:ви, 8,3%- из костного мозга, 13,8% — из ликвора,. 8,3% — из .лимфатических узлов и в одном случае (2,7.%) г из селезенки, ■■■..• К 'четвертой-1 группе, от.несли. 23■: культуры, которые; по образованию пигмента. па плотной питательной ■'■ среде -были подразделены на две подгруппы;' л;'.'■■ V; :' . ■

К первой подгруппе отнесли .17'культур образующих светлые, прозрачные колонии, а во вторую:— 5, образующих, золотистый не диффундирующий в^ питательную среду пигмент: Эта группа/микроорганизмов была отнесена к стафилококкам. Культуры стафилококков, были выделены из органов и тканей 14 животных рольных лейкозами. В 27,7% они были выделены из крови,'-в 8,3% из селезенки, по'5,5% случаев'из молочной железы,': почек,' лимфатических узлов и; по - 2,7.% случаев из легких; печени," костного мозга.: ... ' : '

;' Лятую : группу., составляли 32 культуры, которые были выделены после 6—8 пассажей-на обогащенной сывороткой и ростовыми веществами среде. По культурально-морфологи-ческим, биохимическим и биологическим Свойствам эта группа микроорганизмов была разделена'на : 3 подгруппы,-В ■первую' -'подгруппу ■ было отнесено '. 11, во • вторую,. 7 и-в третью 14 культур. Эти микроорганизмы были выделены из костного мозга 33,3%. животных; из крови'25,0% и из лимфатических 'узлов 13,3% больных ' лейкозом животных. Довольно-часто (11%) эти микроорганизмы выделяли из пе-. реброспинальной; жидкости н реже —из печени и' мышцы сердца/ ■ ,;;.V ■ ■ :-:■.■..;■ л

Из 14 животных; у. которых .были выделены эти микроор^ ганизмы,- только У-двух (14,2%) микрококки обнаружены'по-.чти во всех исследованных органах и тканях.!' ~ '

, ■"■■■■ Таким образом,';при бактериологическом.; исследовании органов н тканей животных больных'лейкозами выделяются полиморфные микроорганизмы, ' иё поддающиеся точной идентификации/условно отнесенные -нами к семейству АУс'го-соссасеае ;(лервая .;и .третья* подгруппы) и СогупеЬас1ё-. п'асеае (вторая,подгруппа). - . ; . . ./.'■■" ■

К шестой 'группе^ отнесли 13 культур, выделенных из лег-' ких 13 животных: больных лейкозами.-После . применения пробы устойчивости бактерий к желчи, крупного рогатого скота они были отеесены-к роду 0|р1ососсиБ. Все выделенные культуры.диплококков были патогенны ^ля белых беспородных мышей. ■ ■ • _ 1 , .■■ ■■' .■ V .7 К седьмой группе отнесли 18:культур, выделенных из легких, печени, молочной'Железы, почек, мышцы сердца й видном случае из' селезенки. Патогенностью для белых беспородных мышей обладали отдельные культуры.'- В результате

■■■'■.' .изучения культуральио-морфологичсскйх, ^биохимических И ' : : - \ б И О Л О П1Ч е С К И X' свойств культуры >'этих' микроорганизмов ОТ- • ,

; '. внесли к группе "гемолитических стрептококков. '. • ,' ' ", / ^ ■ • Восьмую группу представляли 5 культур; .'выделенных из , ' ; ' . /проб, печени, пяти животных, больных лимфоидным лейкозом. "Л" Патогенностыо для белых беспородных мышей обладали не ■■ псе штаммы. ; " '-..'■ - ;; V' >. :' ;

V • ' На "основании изучения ' культуральио-морфологичсских,;/. . : • г :биохимических и. биологических свойств эти культуры были ,

отнесены к энтерококкам; . 1 '. :

. 1 Девятую группу составляли 12 культур. Три-культуры вы- г л

! 1 делены из молочной железы, Т—из селезенки,,2—из.легких, ' ■.'.'■-,.".'

1 — из почек, 2 — из печени. Эти культуры изолированы от .. :' > . .-"•" 6 ЖИВОТНЫХ -больных Л СИКОЗАМИ. Для белых беспородных МЫ. • ' шей весом 16—18 г они были патогенны. На основании изу- , 1^ ■ чения ;культурально-морфолог.ических, биохимических и био- Г л ; логических свойств, девятую группу микроорганизмов отнес-; 1 . ; . •

^ 5 . ли к :роду Эшерихий. Из крови, костного мозга и ;ликвора .* " -. >'больных лейкозом животных Эшерихии нив одном случае . ' ^'-.'. ■ "не выделены. " - --, • '•'

'.' • К 'десятой группе были отнесены 5-культур, выделенных ; ; : ■ * . из проб/ легких от 5 больных1 лейкозами животных." Куль+у- .V-■'■■'; ры были культивированы на'среде Чапека. Для беспородных ' \ . '' -'.мышей были 'пенатогенны. По морфологическим' свойствам Д.., ■ "■■-.О] эти. культуры,"выделенные из легких коров, больных, лейко- : -' :'--'■'.'■ за ми, отнесл и к роду Льрог^Шиэ'.' ■'■'■ .. ■ ; ■ ;;

.'.■.-..'''.'.'■'■.■'г-V Таким; образом, при бактериологическом исследовании / ',' органов и тканей 36 животных больных разными - формами*:' л 'лейкозов,.'от 4 животных {11Л %) ни один из перечисленных родов микроорганизмов не выделен. Из органов и тканей'.-.; :.-". 17 животных (47,2%) были выделены микоплазмоподобные '

. микроорганизмы, у 14—(38,8% ), полиморфные микрококки, .;■ ■ ; , " у 12—(33,3%)' нестабильные Л-формы . бактерий, у 13 — '

(33,3%) стафилококки и диплококки,,у 5— (13,8%) энтеро- ' л ' , /,:■. .. '.л кокки и;грибы, у 7— (19,4%) стер п то кокки и у 6 животных '

(16,6%) культуры Эшерихии.', . ' " ■ ; . ■

. Пз крови 12 животных (33,3%) было выделено по.2 рода/ . г;. - микроорганизмов, преимущественно микрококков с ми ко- ■ ■ . ■" ' плазмами и'Л-формами. . ■ .

• . " • Из костного мозга выделялись по одному роду микроор- ;;' . " - ганизмов,- преимущественно микрококки, миколлазмы , или / > - . Л-формы бактерий. Наибольший 'Процент контаминации кро- ; • , ■:;:ви, "ликвора,' костного мозга, а также- внутренних 'органов ' , . был выявлен у животных больных гемоцитобластозом и ре-тикулозом. ' . . " ' ;

■И

. . ; Кровь,: костный мозг 'и -цереброспинальная-- жидкость - у ■ \ - животных больных: лимфоидным^ейкозом .условно отнесен-;, .V." . ' ■ ных к терминальной й 'развернутой, стадиям контаминирова1 ны различными микроорганизмами сравнительно чаще, чем / ' J .;. у животных в начальной стадии. ' ,/■ ' > - • . :

2, Микрофлора крови'и (костного мозга крупного рогатого скота гематологически положительного на лейкоз (в динамике болезни) •

При бактериологическом исследовании крови и костного -; мозга у этой группы животных было выделено 90 культур' ' '>• микроорганизмов, из них 22 культуры отнесены к роду Мусо-, { -У>; ■" plasma,^36 — к Micrococcus, 10 — к стабильным и,22 песта- v,'.-' бильиым Л-формам бактерий- - . :

Анализ полученных данных показывает, что в крови боль-' ' . ных лейкозами животных микоплазмы, микрококки и Л-фор-мы бактерий появляются периодически и выделяются пело- : . ^ сто я шю. У 5 коров эти микроорганизмы были выделены из < • • крови.во. все сроки исследования, тогда как у 1,0 коров из ■ ■ *.'"V'.'. ■ 15 исследованных микоплазмы были выделены не во все сроки исследования./Из костного мозга микоплазмы были-вы-., делены во все сроки исследования только у одной коровы. Л-формы бактерий, (стабильные и нестабильные) также выделялись от отдельных животных непостоянно. Культуры МИ-' крококков были'выделены из крови ИЛИ костного мозга ОТ 9 животных из 15, а от'6 животных; этой группы подобные '^v ' , культуры не выделены. • ■ > . " . i-1

3. Микрофлора органов и тканей плодов, полученных от больных лейкозом коров

Бактериологически исследовали органы и ткани плодов; ■' от 3 коров больных лимфоидным-лейкозом и по одному — : от коров, больных гемоцитобластозом и ретикулосаркомой , (всего 5 плодов 6—7-месячного возраста). , При вскрытии 'плода от коровы № 4782. (диагноз ретикулосаркома), было : обнаружено увеличениепредлопаточных н брыжеечных лим- -фатических узлов. У других ПЛОДОВ ВИДИМЫХ изменений не ■.*'■,!

обнаружено. ......

При высеве крови, костного мозга,! ликвора, а также тка- Л ней лимфатических ' узлов, легких, печени и селезенки . от плодов было выделено 20 культур, отнесенных к родам Mycoplasma (7 культур),-Micrococcus (8 культур) и Л-фор-; -мам бактерий (5 культур). 1 ( " ;

Исследования' показали, что от всех пяти исследованных плодов, полученных от коров больных лейкозами ■ : выделены ; культуры микоплазм, микрококка или Л-форм бактерий, ана-; логичные-,таковым, выделенным из крови и костного мозгам коров-матерей. , ■ ■ 4' •. V : ; '

"4, Микрофлора органов и тканей крупного рогатого скота с лейкемоидными реакциями

\ При бактериологическом исследовании из органов и тканей- этихг'животных было выделено 473 культуры различных "микроорганизмов.

, По культурально-морфологическим и биохимическим свойствам 156 культур отнесены к роду эшерихиа, 103 — к стафилококкём, 53 — диплококкам, 42 ,— к полиморфным микрококкам, 42 — к энтерококкам, 41 — к микоплазмам н по 13 культур к стрептококкам и грибам из рода Aspergillus, л Candida. ■ *. .

Из крови и костного мозга животных с лейкемоидными-реакциями микоплазмы были выделены соответственно в 4,6% и 6,2%, а микрококки, идентичные выделяемым от лей-козных коров — в 8,5% и 6,2% случаев. Кроме указанных микроорганизмов из крови, этих животных довольно часто выделялись-зшерихик (28,1%) и стафилококки (14,9%), особенно у/ животных с. хроническими процессами в легких и при хрониоселсисе. - ' "

У отдельных животных (6,2%) микоплазмы были выделены из цереброспинальной жидкости, а' микрококк обнаружен только у',7 животных (5,4%). : . • " ■■

Сравнительно низкий процент выделения микроорганизмов отмечался из лимфатических узлов и селезенки. Так, микоплазмы из этих органов выделены от 6,2 и 3,9%, а микрококки — от 7,8 до 4,6% животных соответственно.

Из селезенки 9,4% коров, страдающих поражениями печени и хрониосепсисом, выделены стафилококки. Из печени, "почек и.легких всех животных микоплазмы и микрококки не были выделены, тогда как у 4,6% животных микоплазмы обнаруживались в молочной . железе. Печень, почки, легкие и :молочная железа 25—28% животных контаминированы стафилококками, стрептококками. Диплококки были выделены только из легких 39% и почек 3,3% животных.

Таким образом, у животных, страдающих различными болезнями нелейкозной природы, наибольшее количество микроорганизмов, из рода стрептококков, стафилококков обнаруживаются в легких, печени, почках, молочной железе, а в крови;—эшерихии. ^ ' ' ; '

' . 5.-Микрофлора крови « костного мозга1здорового крупного • Г "- ' > рогатого скота из -неблагополучных по лейкозу хозяйств '

'Ч', : ,Л Бактериологическое.исследование крови и костного мозга

"-у : ,:'; * проводили у 48,клинически;.;, и ^гематологически здорового • ; *iУ';г крупного рогатого скота,. происходящего из стад, - в которых у ':,

■;у..;■'■ неоднократно выявляли'" больных .:. лейкозом . животных.;. Из;. г . ! •"."'. крови этих животных » 12,5% случаев были выделены поли-' л; морфиые микрококки и -r 16,0%'случаев Л-формы бактерий. Относительно реже из крови были выделены микоплазмы'' ■ у Х- (0,2 % случаев)* и стрептококки (4,1 % случаев). Из костного . мозга этой ,группы животных: были * изолированы микоилаз-мы" в ■ 0,2.% случаев, полиморфные микрококки в 12,5%, Л-' :■ ; .-' í : -формы бактерий в 14,7% 'и стрептококки в 4,1% случаев. ;

6. Микрофлора крови и костного мозга здоровых животных • ■ЛУ.У; из благополучных;по ^лейкозу хозяйств' "■: '■■:■''-'.'; * 'i,

'.■.'/V■'■'..'/.'л--'■' При бактериологическом исследовании крови' и костного у/- • мозга от 90 здоровых животных; из ^благополучных по л ей ко-;.'

" . зу хозяйств-выделено;42 культурькразл'ичных микроорганиз- у.,, ? ;■ ' мов (микоплазмы, микрококки, . стрептококки и ¡стафилокок-; .

':..'. ки). Из крови в 4,3% случаях были изолированы микоплаз- *"-,.; -!'■ ''■;■■' мы, в 7,2% — полиморфные микрококки, в 8,6% — 'Л-фор-у.[],■; .у-;";' мы бактерий и* в *2,9%:-случаях стрептококки. Из костного

.мозга 5,7% : животных- выделены ..микоплазмы, 14,4%'' по- / . лиморфиые; микрококки j 9,4%; — Л-фор мы бактерий, 1,4% — стафилококки н, 2,9%- исследованных, животных стреито-': ••..' у • ' • кокки. у у" ■ ■';-у y'V■ - ' '

•Л-М^р- ' . ' . * ОБСУЖДЕНИЕ ■ ' 'у

; При изучении этиологии неопластнческих заболеваний у ■'■ У , у" ;;'.у людей некоторые отечественные исследователи (В. А. Крес-товпикова, 1960, 1965; 1971; Л. С. Тропикам, 1959, 1963, 1906 у. ' ; ; V ' и 1973 и др.), было высказано'предположению о том,, что воз-, -■-.'■.'i' У-'\ 1 будителем лейкозов и ,зл о качественных опухолей могут быть' У ■jyyy-;';' -мнкрооргапизмьУ сУ атипичными культуральпо-морфологиче-» ;

\ скими признаками, названными авторами «полиморфным ми-;; ' : ■.•уУу""'' кробом» или«глобоидпьшительцами».. . . -' ..У- У .

у '-',у, '.. у Ряд-исследователей ,(С: Н. Клодннцкая, 1973; Гайа с ' ; уууу'f coaвт, 1.973; Дитрих, с соант., 1973; Дакао с соавт., • ;■ 1973; -уЛ.у- ' Шпмпф с со авт. 1973 и др.) склонны считать, что выдел я е- у. '"'-у-''■■":>;*■ МЬ1е 113 органов и:тканей больных лейкозами и злокачествен-: .. : ными опухолями людей и лабораторных животных различ- '.у ' = -. ■. ные микроорганизмы* осложняют течение' основного; заболе-

'ваиия,: вследствие чего.они имеют определениое: патогенети-- ;;' ческое значение,-' 'Y7 ■'■:.>:'■ '>■■ '-,■.у -'■■■г,';■'''. .;■ 7 V, ' \■ В"связи с тем^ что вопрос о:степени контаминации тка- ' г -. К'*'' • '.ней и^органов'больных лейкозами н здоровых ;животных ; в ' .i?.1 V.v литературе не освещен, нами были, проведены соответствую—':

, щие исследования. - ■..'■' "■■ '-■'-.'■' 7 WV' ■

; ■ • В результате бактериологических исследований из-тканей-.;. С v',7' ; : и органов больных лейкозами с лейкемондпымн реакц'иями;и :' ;■;.' i • здоровых корон нами было ' выделено ,и идентифицировано ..'. ;]. '. ';■■■■' десять-родов различных микроорганизмов {микоплазмы, ста-' • :: бильные" и. нестабильные Л-формы, полиморфные микрокок-: "•> /1511, стафилококки, стрептококки, .диплококки, энтерококки,, . :

эшерихии и грибы из рода Aspergillus и Candida). .' " Так' - как большинство исследователей предполагающих i---¡о. ',"' бактериальную этиологию лейкозов и злокачественных ново-., -

р, .:' -образований / у. людей, Лабораторных животных и растений,-. ;'T''V.'"V '.'обращают, особое внимание на выделение нз.крови, костного '■}■ \

V: ; ;мозга>"измененных(тканей так называемой нетипичной .ми-"; Г - -г'4 - 'крофлорЫ; (микоплазмоподобные микроорганизмы ;и ' поли- 7л ■ . /морфные микрококки), обладающей повышенными потребно- ./Vr '■■ стями в питательных, веществах, представляет интерес изу- г.-;

чнть ;контаминированпость тканей и органов , этими микро- ': л , ■ j Л организмами и установить-частоту'их выделения из различу - '-.х^;':; ных органов и'тканей больных лейкозами животных. .'V

■ : * результате проведенных' исследований и'анализа полу-. -V. :>,-.'■; 'г чениых' данных намн впервые показана" частота, выделения, >; .'■:.-'■%,-V , . нетипичной микрофлоры от больных лейкозами, с лейкемонд-,': ,-

. ними реакциями, здоровых животных благополучных н не-, ■ ' , ' \ ' благополучных по лейкозу хозяйств (таблица). •'■■'■; \У ,'х -■ -V : , ' Контаминированпость . крови мнкоплазмоподобными ми-' ■.. : - ¡V .' ,. V.-.J кроорганизмами у больных лейкозами животных составляла . '

/19,8%', тогда как у животных с различной патологией лелей-:'козной природы,- а также у клинически-здоровых животных. . ; /.{ благополучных ' по лейкозу хозяйств частота'^ выделения ■ нх> ' .'. 7 не превышала^, 6—7,3%. -..'■-'. ■ '■■.■' V V'-.■■■ ' ■■ '< *■-

Из крови, клинически здоровых коров из неблагонолуч-ных но. лейкозу хозяйств микоплазмоподобные микроорга- ; : . пнзмы были . выделены в 22,9%: случаев. ' Культуры поли- . .^ .морфных ^микрококков были выделены из крови 25,0% боль- . :. "V- ':*■ ••;. пых лейкозами животных, у 12,5% клинически здоровых ко- -'' : . •; . ров из неблагополучных по лейкозу хозяйств, тогда как из ? 7 крови- животных с лейкемоидиымн реакциями, а также здо--, ..".;■ -. ' рових из благополучных по лейкозу хозяйств- микрококки * ' : . '.-;: ;выделяли соответственно в 8,5% и 4,4%' случаев. ■■ ..■ - ' .'.

• Из костного мозга больных 'лейкозами .животных мпко- ■

',- ■плазмоподобные микроорганизмы и полиморфные микрокок- .»

1 ' Таблица

Сравнительная частота выделения нетипичной микрофлоры от больных лейкозами, с

лейкемоидными реакциями н клинически здоровых животных

1':. кровь костный мозг цереброспин. ЖИД. ■ "лимфоузлы V :

Группа животных ? \ ■ ' . Ч 3 -о = я м о ■ ' а ^ а к ■е* Э* л X х =; з: о ^ мико-плазмы и Л-фор- мы . микрококки . 1 мико-плазмы и Л-формы мнкро-. кокки мнко-п лаз мы и Л-фор-мы микрококки : МИКО- плазмы ■*■■' и Л-фор-' МЫ ' ■ микро- '■ 1 кокки л

Больные лейкозами ;36 493 ' 25,0 " 30,4 33,3 22,2 ' 13,8 - - 1 V 11,1 - л' 13,8 •.,{•;'

С различной патологией не- , лейкозной -природы 128 ; 4,6 . : 8,5 ■ 6,2 6,2 6,2 л 7,8; '

Клинически здоровые из неблагополучных по лейкозу ХОЗЯЙСТВ 48 22.9 12,5 20,8 12,5 не исследовали - ■ -■.

Клинически здоровые из благополучных по лейкозу . хозяйств . , .90 7,3. .4,4 1 ■ 12,2 15,5 ' ■. ■ не исследовали -

■ ..■'С-"' . - . --'.V. ■ ■ * ^ . ^ * \ -

, V \ | . / " -Л с

. '.'■ '"ки '¿ыли выделены: в 50,4 и ¿¿,3% случаев,' & от ЖиёЬ+нШ £ .'■ :*;'

различной патологией нелейкозной природы —1 6,2%',, О г кли- ■ . ■ ■ ; ■ ■ ническн здоровых коров неблагополучных по .лейкозу -ХО- • 'Л. V'. -- \ " зяйст эти микроорганизмы были выделены в 20,8% и 12,5%,. " а от клинически здоровых животных из благополучных по ... лейкозу,хозяйств — в 12,2 и 15,5% случаев. ■' . ■->*'';.'■

> Из- цереброспинальной ЖИДКОСТИ ' микоплазмоподобные

-■ микроорганизмы выделены у 22,5% животных больных '-4 ' лейкозами, тогда как от животных с различной патологией , 1' нелейкозной природы,— 6,2%, т. е. почти в 4 раза меньше. Г. ■Ч'Т* ' * Контаминированность микоплазмами и Л-формами бак- .-■■-■у V,'-Л^ %терий лимфатических узлов больных лейкозами животных .-' ■■:■}" У-' ' - составляла 11,1%, а у животных с различной патологией л' 'у, . нелейкозной природы — 6,2%. ^ , . . -. V

IV. : \ Из цереброспинальной жидкости и лимфатических узлов . .(

.' > животных больных лейкозами культуры -полиморфных ми-V-' ; крококков были выделены в .13,8% случаях, тогда как из це- • ' ' ■ ■ реброспииалыюй жидкости и лимфатических узлов ЖИВОТ-1 "'■ ных с различной патологией нелейкозной природы они были . - д

' выделены соответственно в 5,4% и 7,8% случаях, т. е. почти * ' -.■ V в два раза реже, " •

.. Следовательно в крови, костном мозге, а также в лимфа- -. , : тических узлах и цереброспинальной жидкости , животных ! 7'*..' : больных лейкозами микоплазмы, Л-формы бактерий и поли- - I

. морфные микрококки обнаруживаются в 6—10 раз чаще, .;

■..;'■ чем у животных не больных лейкозами. Более ТОГО, ЭТИ МИ: ■ .. ■

V: , ■ кроорганизмы чаще выделяются из крови и костного мозга

. " , здоровых животных, происходящих из неблагополучных по V ' 1 ; ' .лейкозу ХОЗЯЙСТВ. .:■ ; ■.

' - Вышеуказанные данные нами получены впервые и поэтому ' У у . нет. возможности сопоставить их с результатами других иссле- . 4 УУ - дователей.

, Представляют большой интерес результаты, полученные .у':, при бактериологическом исследовании крови и костного моз-. ' ■ га'животных с гематологическим диагнозом на лейкоз в ди-', у ■ намике пёреболевания, ' , ; "-..'

у.."у.; Из-крови этих животных в 86,6% случаях были выделе- У У , / *ны Микоплазмоподобные микроорганизмы и в 60% случа- ■ /;..'■ -У ях' — полиморфные микрококки, а из костного мозга соот- ■ • ветственно — в 66,6% и 40% случаях, причем у некоторых . .V : у'.- животных эти микроорганизмы выделялись постоянно, а у • • . многих — непостоянно. Тем не мене, при четырехкратном V ■■'. .■* .'исследовании аналогичные культуры от одних и тех же жи-г .. *; ■ *• вотных выделены не менее двух раз, что указывает на их У.'; * ' ." присутствие в организме в процессе перебо^евання лейкозом. ■ у

У У. ' При бактериологическом исследовании тканей и органов Г' -; '4/;; . Плодов коров больных . лейкозами, миконлазмоиодобные ми-. ; кроорганизмы , и УполиморфиыеУ микрококки-были■ ныделены • соответственно в 80% и . 40% случаев из крови, и в.60% н ~ * V - 40% случаев.из костного мозга. Эти же культуры выделены ' V; из крови коров, от которых получены плоды, . ,.'.•' У;УV:';У; у ■■'';' N / Выделение -микоплозмоподобных микроорганизмов ' и ми- У . Крококков.. из.'..цереброспинальной жидкости больных лейко: за ми коров, а также от плодов- является доказательством ■ у У;У глубоких нарушений гематоэнцефалического и . плацентарно-.' • .: ■ . . го барьеров при лейкозах крупного рогатого скота..В пользу "

,этого положения^свидетельствует факт более высокой часто- ../' ты' их. выделения от'; животных на 1 поздних стадиях течения ' V. '.V--:■':■''лейкоза. . '"■■ 'У'■■.-' ■ .'" - : ;. -."■..-'■ ' ■ - ■' ■ / "у .' .'.

Кроме' микоплазмоподобиых* микроорганизмов И ПОЛИ-. У /■' • у' морфных микрококков . из органов и тканей - исследованных;'у. " У. У животных нами были выделены культуры .¿тафйлококков.:-Из';. , » ■ -: •. кропи животных больных, лнмфоидным лейкозом (начальная ; л'г'г'У стадий) стафилококки были 'выделены в 18,1 % случаев,, в ; -' У * развернутой стадии в-22,5% и от животных в терминальной , У

стадии в 33,3% случаев; , . ■",

'У? ' У' '.у. . Из органов и тканей животных 'больных гемоцитобласто- У^Ч'" .•''•• зом стафилококки были изолированы в 100% случаев из; - У

' ' крови и в 33,3%; из костного мозга. Из крови у животных • : .-:. больных ретикулозами стафилококки были выделены и 25% ' У .:;т-У '.случаев.- .. -у 'У;'/-'-., ■. ■ У '-л :"''УГ-.У: ..'; У У'У ]у'" /

. '/■' Из костного у мозга здорового ' крупного рогатого скота'. У- ' .''благополучных по лейкозу.хозяйств культуры стафилококков - .;; - ;; >У ; были выделены только в; 2,2% случаев. Сравнительно чаще 1 ; ■' ■ - ^У ' (13% случаев) культуры . .стафилококков изолировали!, из У" ■'".■"•У крови животных с лейкемондными-реакциям и. ' *' ул Лч'У ;

-У-. Культуры стрептококков из крови . и костного мозга боль-, У ;■ . : - пых лейкозами животных не были- изолированы, по выделены ' ';;; ■ У„-■■■■.■ Ув 11,1 % случаев из легких, в 8,3% -У- из печени, почек :Н:МО-: ■ . ■ лоччой железы и —в 5,5% случаев из сердечной мышцы... У ;'УУ

..;:*'-.'■■ "У'5'," Из Крови И КОСТНОГО. МОЗТ'а здоровых ; ЖИВОТНЫХ благопо-;

- лучных по лейкозу■ хозяйств стрептококки, были изолнрова- л

/ ИЫ В 2,8% случаев. V . . /у ..уУ'УУ. .. ,'/ / '- У. '-У - ;,у;у'7 . ^ V "=У--;-.Определенный; интерес представляет -обнаружение кишеч-• ной палочки в различных органах;больных лейкозами корон. ..У V: У Культуры эшерихий, был И изолированы ИЗ. МОЛОЧНОЙ железы ■-.;. УУ1 .'У и почек животных с диагнозом лимфондный лейкоз началь-. ;' У-- ' ная стадия'в 12,5% . случаев, : в У терминальной стадии —в ' . . ' 16,6% и от больных, ретикулозом—V 25% случаев. Из яру- ' • • . гих органов 1г тканей коров больных лейкозами кишечную • '

палочку.'не'выделяли. Из крови животных с лейкемоидными реакциями эшерихии были выделены в 30,4% случаев.

Культуры диплококков и .грибков были выделены только 113 легких больных лейкозами животных и от животных с лейкемоидными реакциями. '

Анализ полученных нами результатов бактериологического исследования органов и тканей больных лейкозами животных показывает, что ¡із крови, костного мозга, цереброспинальной жидкости и лимфатических узлов выделяется ати-. пичная:непатогенная микрофлора, тогда как ¡із других органов 'и тканей выделялась типичная факультативно патогенная микрофлора. В развернутой и терминальной стадиях лимфоидного лейкоза, при ретикулозе и гемоцитобластозе частота выделения типичной микрофлоры из органов увеличивалась в 2—3 раза, по сравненшо с животными в начальной стадии лимфоидного лейкоза.

;".; ;; ! выводы

I. При бактериологическом исследовании органов и тканей животных больных различными формами лейкозов были изолированы микоплазмоподобные микроорганизмы (мико-Плазмьг и- Л-формы бактерий) в 47,2% случаев, полиморф-, пые микрококки в 38,8%, диплококки в 30,5%, -стафилококки в 27,7%, эшерихии в 14,1 %, грибки, стрептококки и энтерококки по 11,1% случаев.

- 2. Из органов и тканей животных с лейкемоидными реакциями микоплазмоподобные микроорганизмы выделены в 12,5% случаев, полиморфные микрококки в 11,7%, диплококки в 39,6%, стафилококки в 30,4%, эшерихии в 37,5%, грибки в 14%, стептококки в 8,5% и энтерококки в 32,8% исследованных случаев.

3, Из.крови и костного мозгаз дорового крупного рогато-, го скота были изолированы'микоплазмоподобные микроорганизмы в 15,2% случаев, полиморфные микрококки в 17,1%, стрептококки в 3,1% и стафилококки в 1,4% исследованных случаев, ■ '■

4, Культуры микоплазмоподобных микроорганизмов и полиморфных микрококков из крови животных больных, лейкозами выделены в 49,8 и 25%,случаев, а из костного мозга в 30,4% и 33,3% случаев соответственно.

Из крови животных с лейкемоидными реакциями указанные микроорганизмы выделялись в 4,6% и 8,4% случаев, а из костного мозга в 6,2% и 6,2% случаев. " ■ ,

' .Следовательно, контаминация крови и костного мозга

больных: лейкозами животных в б—10 раз выше,-чем у' жи . ВОТНЫХ С леЙКСМОИДНЫМН реакциями.' ; . ' ' ;

' - 5. В развернутой^ и терминальной, стадиях'* лимфоидного лейкоза/ а также при ретикулозах и гемоцитобластозе ь1ико-плазмоподобные микроорганизмы, и полиморфные микрокок-' ки из крови и' костного■ мозга.выделялись чаще, чем'в" начальной стадии;лимфоидного лейкоза.-.1 , ■

6, У животных с. гематологическим диагнозом- на''лейкоз, исследованных в ; динамике заболевания, культуры'-, мико-плазмоподобвых микроорганизмов и полиморфных микрококков из крови и-костного мозга выделялись непостоянно,1 -- 7, Культуры микоплазмоиодобных микроорганизмов и-по-лиморфных микрококков^ выделенные из органов и ■ тканей' плодов и больных лейкозом коров-матерей, обладали идентичными культурально-морфологическими, биохимическими и биологическими^сройствами, что позволяет'предполагать об их проникновении через- нарушенный плацентарный, барьер 'У коров-матерей. • V."".. ■ "■-. . ■_'"

' 8. Из культур'микроорганизмов, выделенных от' животных больных,' лейкозами, патогенными Для беспородных' белых мышей оказались диплококки, эшернхии, белый и золотистый стафилококки, некоторые ■ штаммы стрептококков и энтерококков. Микоплазмоподобные микроорганизмы и полиморфные: микрококки не обладали выраженной' патоген-ностью для.белых мышей; - V.

9. Некоторые'штаммы полиморфных микрококков на;6—" 8 сутки после подкожного введения белым беспородным мышам вызывали образование абсцессов с последующим рассасыванием их й очаговым; разрастанием, молодой соединительной ткани. Реизолировать, исходные культуры полиморфных микроорганизмов после'заражения, удавалось на ' 10 день. .К 30 дню они элиминировались из организма. 1.;.

V Ю. Полученные, нами данные по частоте контаминации крови и костного мозга-коров больных.лейкозами свидетель: ствуют о том, что микоплазмоподобные микроорганизмы " и полиморфные .микрококки вероятно 'являются факторами,, ■имеющими патогенетическое:значение в .развитии лейкозного процесса. У-: V.''-1::-'- -- '■■; У V - г;

' ■ ■ : • , \ СПИСОК ■ .■•У..',;.У;

' опубликованных работ по теме диссертации : уЧу

.1. Микрофлора органов и тканей при лейкозах и ретикулозах у крупного рогатого скота.: ■'.-■., - У ' ' ' " Бюллетень ВИЭВ, 1973, вып. XVI.

2. Сравнительное изучение микроорганизмов, выделенных из органов и тканей больного лейкозами крупного рогатого скота. «Доклады ВАСХНИЛ», № 6, 1974 г.

Материалы диссертации .в декабре 1973 г. доложены и одобрены Ученым Советом ВИЭВ.

Ответственный за выпуск автореферата доктор ветеринарных наук Л. Т. БУРБА

22. 5. 74 г. Типография ТАСС, Звездн. бул., 17 Зак. 634