Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Контаминация продуктов убоя птицы сальмонеллами и их устойчивость к ультрафиолетовому излучению

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ ОЕЛЬСКОХОЗЯдСТЗЕШЫХ НАУК ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИОСЛЕДОЗАТЕЛЬЗШ ИНСТИТУТ Б21Е)Л САНИТАР!®, ГИГИЕНЫ И ЭКОЛОГИИ

РГВ оя

/ л -'Т На зразах рукописи

пушкова галина леонидовна

УЖ 619:614.31:656; 1-04

конташадия продуктов убоя п1шщ салыюнзлшя' И их устойчивость к ультрафиолетово:^ излучению

16.00.06 - ветэрпнарнал санитария, зетзрйнарно-санитариая экспертиза и гишена переработки продуктов животноводства

\

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соисианиэ ученой стопож

кандидата ш таринарных наук

Москва - 1994

пнполнэна зо Всероссийском научно-исследовательском санитарии, гигиены и экологии

а рухозоднтель: доктор ветеринарных наук,

профессор М.П. Бутко

(ИЛЬЕЫЗ оппоненты: доктор ветеринарных наук,

профессор К.Н. Сон (ЗНИИВСГЭ)

кандидат ветеринарных наук, доцент М.5. Боровкоз (МВА)

/гуцеэ учреждение: Санкт -Петербургские ветеринарии!

•г. '

Зал:::тз дагесэртация состоится "/3" 1994 г.

в " "' часоз на заседании специализированного совета Д.020.50.01. при Всероссийском каучно-ясслздовательском институте ветеринарной санитарии,- гигизны и экология {¿23022,' Москва, Звенигородское

ЕОЗЗЭ, 3).

О диссертацией модно ознакомиться в' библиотеке ВШШЗГЭ. АзтореЬерат разослал и И? ¿¿Л 1394 г.

УчзныЗ секретарь специализированного созета, кандидат биологических наук

Л.П.Пименова

ОБЩА.'! Ш>АКТ2РИЛ;1КА Р^БОТ

Актуальность темы. Как отмечено зо взэм мире, с увеличением :роизводства мяза птицы одновременно наблздается тенденция увеличения количестза во пыхе к сальмонелле зной инрекции у л:<ден. Пищаще токсикоин^екции сальмонэллезнол этиологии у населения часто ¡вязаны с продукцией птицафабрик, причем инрицкрозакие последних ¡альмонеллами происходит з результате нарушения ээтеринарно-сани-гарных и гигиенических требовании в процессе производства на раз-1ичных этапах убол и переработки птицы, мяза птицц и субпродуктов I их хранения (Георгиев Л.Н., 1971; Корягина Е.И. с сотр., .¡.386; Зедов Б.А. с сотр., 1990; Сергезнин З.А. с сотр., I99i: Хасьянен-со A.A., 1293; Доклад Комитета Экспертов ВОЗ, 139.; бспгстеЛ- в., [987 flipan i sä а; Ucdvcett^n 338; VenKate^VoZCUi К et.a/.iVoo).

Зо многих странах, з частности, участников 23J в nporpa.vr.iax ю контролю за сальмонеллезом предусматриваются бактернолсгнчес-кие' исследования птицы зо время выращивания, яиц» направленных за инкубацию, кормов и их ингридиентоз; осудэзтвляютзя ветеринарные мероприятия (контроль инкубатороз, оборудования, окружахсзЛ зреды) на всех этапах.выращивания птицы, до и посла убоя, охлаждения, хранения и транспортировки туивк; осуществляются профилактические мероприятия против распространения сальмонеллезных заболевании у лвдеЯ и животных СКаяемяко H.B., 19о8, 1989; Куликовский А.З., 1989; Черкасский Б. Д.. с сотр., 1991; & eZ.oi., IS32; ux^-гсс/э.v1934; T^itf ¿,1987; m^c/bcvdco X Л. ¿937).

Кроме того, ФА0/В03 рекомендовано на национальном уровне развивать систему эпизотологичзского (эппдзмлэлогачззкого) надзора за сальмонеллезом. 3 плане надзора необходимо расширять исследования по разработке новых штодоз быстрой и надежной диаг-гостики сальмонелл как з организме низотных и человека, так и на

объектах ветеринарно-санитарного надзора и в лицевых продуктах.

(Зообцениэ ЗСЗ по эпидемиологическому зозникновзнию сальмонеллезов з птицеводстве к производстве яиц, Еэкева, 20-23 марта 1989; moruUioU4 .CorzZtoZ- tht to£t of ОжитаЛ asu£ jo'xociuct hy^e-nz( Р.£епмга.ъ1.ъъ$\ #¿^,±983,1990).

/ззличенпз производства г/яса птицы бзз скизения его качества, повыигниэ санитарно-гигиенического урошя птицеперерабатывающих предприятий и зыиуокаемол ими продукции, борьба за чистоту экологической среды, диктует необходимость разработки новых подходов, властности использования физических методов санитарной обработки продуктов, сырья и объзктоз птицеперерабатывающей промышленности, В этом отношении представляет практически! интерес применений постоянного ультрафиолетового излучения для санитарной обработки тушек птицы в процессе их переработки, как экологически чистый и эффективный способ санации объектов. В настоящее время 75-облучение используется для различных цзлел: увеличения сроков хранения мяса (Носкова Г.Л., -S7 5; Зтерановпч 3.3., IS75; ДашневД., 1977; Серегин И.Г. с сотр. IS22; Зтеранозич 2.3., Дейнего Г.П., 1976; Дейнего Г.П., Делнего Л.Л., 1993 и дрßanitlz crfß'^aJiacCo Р.; ,1935), ббработки яиц, гнкубатороз, транспортных средств, тары (Прокопенко A.A., 1990,1993 Хух-коз Г.З., iSSJ; Бутко М.П., Тиганоз 3.0., 1993), обеззарахква -кия ззздуха (Закомырдин a.A. с сотр., 1993 и др.), воды ( Фт-сху.— ruxfuLJ,£<l^b9\Llujcen ¿¿InZc^ fUn^t ,1990).

Дэль п задачи исследований. Целью данной работы явилось проведение комплексных исследований но изучению степени послеубойнол кон таминацпи продух то з убоя птицы сальмонеллами по ходу технологическс го процесса первичной переработки и определение устойчивости сальмонелл к ультрафиолетовому излучению, с решением следундих задач:

- изучить распространение сальмонелл на объектах внешней средь птице рабрик;

- изучить степень позлзубойкого обоемзнэния продуктов убоя пи цы сальыонэллаш и другой микрофлорой с учетом ее первичной переработки;

-1- пронести сравнительную оценку лшинезцен^о-серологпческого

бактериологического методов выделения сальмонелл на объектах пти-

перерабатывалцеи промышленности;

- изучить устойчивость сальмонелл к ультрафиолетовому излучению.

Научная нозизка работы. На основе проведенных исследовании были

»лучены результаты, представляйте интерес в научно-практическом от-шзении; а именно:

- установлено, что путями инрицнрозания сальмонеллами цыплят-юллзров в инкубаторе мокет быть: заракэннса я2цо, обсемененное обо-гдование и руки рабочих; во вреда выращивания; больная и павшая пти-I, подстилка и комбикорма, обсемененные сальмонеллами. Отмечено так!, что накопление сальмонелл на объектах внешнем среды в птичниках зоисходат к 32-12 суткам содержания, что монет язляться показателем эблагополучая стада по- иксекции;

- установлены -основные критические контрольные точки кросс-кон-аминации тушек птицы на технологическое линии убоя и переработки, а леяно процессы: тепловая обработка тузек, снятие опэрэния л потро^эние;

- для обнаружения сальмонелл на поверхности тузек птицы разрабо-ан и впервые предложен метод взятия проб-смывов в объемах 100 и 500 я стерильной жидкости;

- испытан и внедрен метод флуоресцирующих антител с контрастирэ-анием фона для индикации сальмонелл в продуктах убоя птицы, на позе-хности тушек, на технологическом оборудовании, что составило 9о-00% совпадений результатов исследовании с бактериологическим аяали-ом. Время исследований сократилось от 5 суток до 2-9 часов;

- изучена устойчивость сальмонелл к УЭ-излучению на яозерхнос-ях различных тест-материалов, тушек кур, яиц и яичной (картонной) ары, колбасной оболочки и синтетической пленки;

- впервые изучены органолептическкэ и физико-химические сзо;1ст-« мяоа кур, микробиологически показатели тушек кур посла У5- облу-ения и в процессе юс хранения.

Пт>ачтпчеуа I ценноетъ. На основании прозеденных исследований 'прэд.-огзны "Методические рекомендации по зкопресс-индикации сальмонелл на поверхности туо:ек птицы" (Утз. директором Птицепрома ИрхутскзЛ области 24.09.1993 г.), которые внедрены и используются з зональноЛ лаборатории по болезням птиц Иркутской области п бактериологических лабораториях .МигэтскоЗ, Ангарской, Иркутской к Братском птицеоабрик.

Аггообация работы..''¿ате риалы диссертации доложены и получили положительную оценку на научно-технической конференции "Зкологичаскш проб лама азтэрзяарно! санитарии", 7-3 апреля 1993 г. Г.Лосква; Мая-лабораторном совещании ЗНЖВЗГЗ, 23 мая 1994 г.

Публикации, По теме диссертации опубликованы три статьи, три статьи сданы в печать.

Ознозяьэ положения выносимые на защиту:

- данные па распространению сальмонелл на объектах внешней среды птицефабрик;

- материалы по изучению послеубойного обсеменения продуктов убоя птицы сальмонеллами и другой микрофлорой с учетом ее первичной переработан;

- метод взят:« проб-смывов со к; а к поверхности туша к птица В ооъэмах 100 и 100 мл ояврашоД зоди;

- материалы по изпатациа и внедрю?» в лабораторную Щ>&НШУ п^Це Мбр:« штода Ьдуоээйцируйцих антител для экспресс- индикации сальмонелл на поверхности туаек, в продуктах убоя птицы, на технологическом оборудовании;

- материалы по изучению устойчивости сальмонелл на поверхностях различных тест-материалов, тушек кур, яиц, яичнод тары, колбас-ноЛ оболочки а сянтетическоЛ пленки;

- материалы по изучению микробиологических показателей, органо-

вптических и физико-химических свойств мяса кур посла У5-облуче-ия и в процессе хранения.

Объем и структура диссертации. Диссертация гзлотгна на 155 траницах машинописного текста и состоит из введения, обзора лите-атуры, собственных исследования, обсуждения результатов исследо-аний, выводов, рекомендаций производству, списка использованной ятературы и прилокения. Работа иллюстрирована 20 таблицами, 21 язунком и 3 фотоснимками. Список литературы вклодает д.90 нсточ-иков, в том числе иностранных авторов./¿>/.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы. Работа выполнена в период 1991-1993 гг.

лаборатории ветеринарной санитарии на транспорте, госгранице и гсоперерабатыващих предприятиях ЕНЖЗСГЭ, Щелковской птицафаб-псе и в Кучинском госплемсозхозе Московской области, в зональной Моратории по'болезням птиц Иркутского Пищепрома,, ГДигэтзкоЛ и >атской птицефабриках Иркутской области.

Для изучения распространения сальмонелл на объектах внешне,! »еды птицефабрик провели бактериологические исследования на двух яцефабриках Иркутской области. В период инкубации и выразивання ото отобрано и исследовано 127 проб и смывов, в том числе: эмбрно-; - 180, яйцо инкубационное - 60 смывов, оборудование - 5 смызов, ивы с отходов инкубации - 50, руки обслуяизапцего персонала - 10 ывов, внутренние органы, мышечная ткань больных и павзих цыплят-проб, смывы с пола, стен, оборудования - 60, комбикорма - 27 об.

Отбор проб, смывов проводили согласно "Лабораторной диагности-сальмонелл человека и животных, обнаружения сальмонелл з кормах, одуктах питания и объектах внешней среды" (х989);"Инструкции по яитарно-микробиологическому контролю тушэк, мяса птицы, птпцзпро-стов, яиц и яйцепродуктов на птицеводческих и птицеперерабатыза-с предприятиях" (1990).

Джг бактерполэгпчесяих исследований на линии убоя и переработки птндн отбирали па точках: технологического процесса по 12 худах кур (зсаго было отобрано 456). Для определения бактериального обсе :.:е нения поверхности тупа к кур проводили отбор проб-сшзов с площади ICO о:.Г поверхности тулки, которые исследовали согласно "Инструкции по са:-1итарко-:.Е:кробиологическо>.!у контроля тушек, мяса птзщь птицепродуктоз, яиц и ялцепродуктоз на птице зодческих и птицеперерабатывающих предприятиях" ti SSO) и ГОЗТ ";,1ясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Методы микробиологических исследовании" (1392). Отбор проб проводили через I час, 2,5 часа и 4 часа работы конвейера на участках технологического процесса: до и посла прохо-:."денпязаннк тепловой обработки, после снятия опйрения, после потро пенил, после опаски и охлаз^енгд под дуззвыми устройствами, после сортировки и :.:йр?п1рон:-:и туаэк. Для бактериологических исследований отбирали такие через I, 2,5 и 4 часа работы конвейера пробы воды и: панны тепловой обработки, смывы с резиновых бил перосъешой машны слгызы с рук персонала, работающих на участках потрошения и сортиро:

Определение ирис у тс т зил сальмонелл проводюш согласно ГОСТ 7702.02-74 ".¿zoo птицы. Методы бактериологического анализа"; "Мег/ду-народны.': стандарт (IÍO) 3355 ЮО ".Мясо и кяошз продукты. .'Ликробио-логпчзекпе исследования на сальмонеллез. Арбитражный метод".

Определение микробного числа, бактерии рода Протеус и бактери?. группа кипечных палочек (БГКП) проводили согласно "Инотррукции по санитарнс-\~Плрсбнолог::ческо:.:у контролю тушк, мяса птицы, птицепро-духтоз, лщ и .=й:депродуктов на птицеводческих: и птицеперерабатывающих предприятиях" (IS20).

На двух птице-фабриках Московской области провели бактериологические исследования с использованием метода флуоресцирующих антител

фигел с контрастированием фона альбумином, меченным родам:шом (прямой способ), для индикации сальмонелл в продуктах убоя птицы, в смывах с поверхности тушек и в смывах с ооорудования. Всего исследовано 120 проб-смывоз с проведением ,2Ю экспертиз. Окраску ма-зкоз проводили согласно "Наставления по применения комплексной и группозых сальмонеллезных сывороток", утв. ГУВ МЗХ ЗЗСР 10.05.75 г.

Изучение устойчивости сальмонелл к УЭ-издучвнид проводила в соответствии с"Методаческиш указаниями, о порядка испытания новых дезинсекционных средств для ветеринарной практики"(1937). При этом • э качестве тест-объектов использовали материалы, применяемые при строительстве и отделке помещений птицеперерабатывающих предприятий, а также синтетическую пленку 03T-Í0-88-87 и кутизиновую оболочку (из сырья коявзэнного производства фирмы "^¿étajv, Бразилия), используемых для производства колбас.

Для контаминации тест-объектов, поверхности тушек кур и лиц использовали вззесь суточных культур сальмонелл трех штам:«\ов^Г-г^а^'-iun¿art(штамм 3013) S.errfouitdUl (штамм 97) Sduf&jb (штамм Ж-Н&г). полученные в лаборатории санитарной микробиологии (jiH/LIiJPd). 3 качестве белковой защиты использовали сыворотку лошади з количества 0,5 мл на I тест-объект.

Анализ сюда ста мяса кур после обработки /^-излучением проводили по ГОЛТ 7702,0-71 "'.1ясо птицы, Методы отбора образцов. Орга-нолэптическиэ мэтоды оценки качества", а химический и микроскопический по ГОЗТ 7702.1-74 "1ясо птицы. Мэтоды химического и микрос-копичоокого анализа с .то каст и í-ma".

Результаты исследований подвергнуты статистической обработке методами, рекомендованными Н.В. Садовским(1975), Н.Э. Ракитеким (X9SI).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗЗЛЗДОМШ „Изучение путей шг&ицирозания сальмонеллами цыплят-оройлеэоз в технологическом цикле их выращивания. Редая эту задачу, мы проза-

лл исследования по определению наличия сальмонелл в инкубаторе,, где объектами были: ялцо до и после газации парами формальдегида, эмбрионы з разные сроки инкубация, отходы инкубации, смывы с оборудования выводного и сортировочного отделении инкубатория и с рук рабочих этих отделение. В период технологического выращивания цып-лдт-бро.-!лэроз на наличие сальмонелл исследовали: внутренние органы и ткани Сольных и павзих цыплят, смывы с пола, стен и оборудования птичника, комбикорм.

Результаты налкх исследовании з инкубаторе показали , что сал монзллк ка поверхности яиц после дезинфекции в отобранном колкчест гз?.уйадгэнн»х яиц отсутствовали, однако в процессе гнкубацшг они 6: ли выделены из замерхих эмбрионов на 11-19 сутки, что составило £/ тов от исследованных проб, а в период вывода молодняка из отходов инкубации з 60,«-тз проб, в смывах с лотков выводных шкафов в 40/5-т, проб. Сальмонеллы тахнз были зыдэлены з 20;з-те смывов с рук сортировщиц молодняка.

3 период технологического цикла выращивания цыплят сальмонелл выделяли: от больно! и павпзЛ птицы, в смывах с пола, стен и обору дозлнпл птичника, из комбикорма. 3 первые сутки низни цыплят-брой-лэров наблэдглн наибольшее количество случаев звделения сальмонелл из тканел и внутренних органов (в <Ю£-те от исследуемых проб), на 32-12 сутки выращивания отмечали накопление сальмонелл на объектах впеанеп среды в 23,9^-тов от числа изслэдозанных проб-смывов, а у цыллят-броллзроз выявляли бессимптомное бактерионосительство сальмонелл. Установлено, что заражение цыплят сальмонеллами происходит при скармяизаяии зарагэ иного комбикорма (13,5/5 от числа исследован них проб). Из 39 выделенных культур 84,относились к серовару р(а 15,4;» кв. ¿йЁех/Х^гШ Таким образом, проведенные исследования свидетельству ют,' что путями инфицирования цыплят во время инкубации были з арата иное яйцо, обсемененное обору

дование, а во время технологического цикла щращивания - больная и павшая птица, обсемененная подстилка и комбикорм.

Изучение бактериально.; обремененности перьевого покрова и рогового покрова ног кур в начальном этапе их технологического процесса переработки. Сальмонеллы выделены с рогового покрова ног кур в 16,7/5, а с перьевого покрова - 8,3/1 случаев. Общее количество микрофлоры составило (в I мл смыва) на перьевом покрове (7,50^1,б5)хаО° микр. тел, а на роговом покрове ног (1,20^0,30)х10® микр. тел; БГКП и бактерии рода Протеус выделены с перьевого покрова соответственно в 100$ и 83,3$, а в смывах с рогового покрова ног кур з 100/ь и 100^ случаев. Полученные данные показывают, что исследованные объекты могут служить как один из вероятных факторов загрязнения воздуха по" мещенил, оборудования и вторичного обсеменения туаек сальмонеллами и другой микрофлорой. Выделенныв сальмонеллы (3 культуры) были отнесены к сзровару

• Изучение бактериальной обсемененности тушек кур, рук рабочих и технологического оборудования в процессе переработки птицы. ,=3 результате проведенная исс^одоздний установили,что на линии технологической переработки птицы три процесса, а именно:-тепловая обработка тушек, снятие оперения и потрошения являются основными в после-убойной контаминации птицы сальмонеллами и другой микрофлорой, и от-Л0001Ш наш к критическим контрольным точкам. Так, вол-,: до вашш тепловой обработки на поверхности тушек (без оперения) количество :ли-кроорганизмов оооташло э ородном - (4,20^|,07)х10£' шкр. тэл/ом2,

сальмонеллы выделены в 8,3% случаев через 2,5 часа и 1 часа работы конвейера, то после прохождения ванны тепловой обработки микробное число в смывах с тушэк увеличилось в 45 раз и находилось в пределах (2,98*0,70)х103 - (5,80±2,37)х104 микр. тел/см2, увеличилось количество БГКП а 37,4 раза и составило (0,53±2,29)хЮ2-'и,10-0,53)х!04 микр. тел/см2» Сальмонеллы выделены в 16,7$ случаев через 2,5 часа

работы и 33,3% случаев через 4 часа работы конвейера, бактерии рода Ир о 73 ус в ЮЭ;5. Из воды ванны тепловоз обработки тушек сальмонеллы были выделены в 16,7$ .через ¿,5 часа и 25,0$ через 4 часа работы конззЛера, бактерии рода Протеус в 16,7$ случаев. Общее ми

О

кробное число зоды находилось в пределах (1,88- 0,44)х10 -

(3,34±0',93}х107 микр. тел/мл, количество БГКП ~(6,78:!:1,-16)х103 -

(4,6 4-1,94)хХ0Э мпкр. тел/мл.

После прохождения процесса снятия оперения микробное число з

смывах с поверхности тупвк кур ушличшюсв в 98 раз и находилось

пределах (2,30±0,52)х10° - (7,25±1,69)х106 микр. тел/см2, а коли— 4 + чество дГХП з 61 раза а составило (5,33-2,43)х10 -(1,Пх0,58)х10

микр. тэл/сы~, сальмонеллы выделены в 16,7$ случаев через I час :

в 25,0$ случаев через 2,5 часа и в -'41,6$ случаев через 4 часа раб

ты кояззпэра. Причинен увеличения обсе.мензнности тушек микрорлоро.

на этом процессе, на кая взгляд является несовершенство самого пр

цесса, где снимаемое перо многократно ударяясь о тушку, дополни -

тэльно обзе.-.БНяет еэ, а такта резиновые билы, в смывах с которых

+■ 8

микробное число достигает (1,23-0,39)х10 микр. тел/мл, а количе-

Ч* б

стзо БГКП -(9,23-3,55)х10 микр. тел/мл. Выделение сальмонелл из с.мывов поверхности бил увеличивается с 8,3$ в начале до 75.0$ в

конце взолэдовашй. Бактерии рода Протоус хадэленн в 100$ олучаов Наибольшая микробная обсемзненность поверхности тушек устано лзка К2?.гл поз до лроцосоа их логрошзнкя. Так, микробное. число в см

вах с тусек увеличилось в 129 раз к достигло через 4 часа работы

+ 8 ^ конззиера (9,53-2,89)х10 микр. тел/с;Г, а колете стзо БГКП в 539,.

-г й 2

раза п достигло Со,31-2,59)х10 микр. тел/см . Сальмонеллы заделе.

ны з 50$ случаев в начале и 75$ случаев в конца исследований.

Исследование смывов с поверхности перчаток персонала, работа нцзго на участке потрошения и с рук персонала на участке сортро-

-12- Г

I

зки показало, последние таккэ з значительной степени оосемакяотся } микроялорол. Так, сальмонеллы выделены из смызоз с рук персонала | (з перчатках) в 53,3;? случаев через 1 час работы, з 83, 3/^ случаев через 2,5 и 4 часа работы конвейера, а из смызоз с рук перзо- | нала на участке сортировки и маркировки в 33,3^ случаев в начале * и в 41,66/2 случаев конце исследований. .Ликробная обсешненность ;

рук рабочих (з перчатках) на участке потрошения через 4 часа рабо-

+ 9 2

ты конвейера составила (1,73-0.72)х10 микр. тел/см , а количество-

БГКП (8,6з14,11)х£0^ микр. тал/см", на участке сортировки и маркировки соответственно (2,92±1 Д7)П06 ц (1,37^0,57)х10&мпкр. тел/с:/.

Таким образом, в смывах с поверхности тузэк кур з процессе их технологической переработки наш было выделено 4 серозара саяьмо- .

нелл:<5*" е/г^е^&с^, X куркьтМЛл.согп. S. риМсгсит (рвМ^палсслг),

гдз преобладающими были серозаршХ ¿^(^¿¿(Ас^ Xгпичссот которые определены соответственно 48,23 и 27,05% случаез, Из воды ванны тепловой обработки и з сшвах с бил выделены такзз 1 серовара

сальмонелл /¿¡^¿/,'Х Ьурк^тии¿от, XраЛохат фа/йпмлигп)

где преобладающим был серовар ы^/^^^^-бЗ$.

3 смывах с рук персонала установлена 3 серовара сальмонелл: 5, оЬойше^^, ¿и.X ^р/йтиъСит,где преобладающим был серовар 5%.

Опыты по сравнительному изучению методов отбора проб с позерх-ностя тулзк птицы для нсследозания на налганэ сальмонелл. 3 лабораторных условиях проззли исследования по сравнительному изучении трех способоз отбора проб-смывов с поверхности тушек .кур: метод смыва затно-марлззым тампоном с познрхяоети х'ОО см^ туши, способом взятия проб-смывов со всей поверхности тулки з объемах : 100 и 500 мл стерильной зоды, который осуществляли следувдим образом -исследуемую тушку помещали в чистый полиэтиленовый пакет, . куда наливали стерильную воду, затем пакет встряхивали з горззон- ;

тальном и вертикальном направлениях з течение' I минуты (около 50 раз). Затем отбирали 25 мл смывной жидкости и проводили бактериологические исследования. Установлено, что взятие проб-смызов в объеме 100 и 500 мл с поверхности тушек птицы позволяет обнаруживать до 2500 микробных клеток сальмонелл на их поверхности, повышает частоту обнаружения сальмонелл в исследуемых пробах-смызах по сравнению с общепринятым з среднем на 30$ и обеспечивает 100$ -ноэ зыделвние сальмонелл с поверхности тушек птицы при этом способе отбора проб-смызоз.

Экспресс-индикация сальмонелл на поверхности тушек птицы.

3 пэрзои серии опытов провели сравнительную оценку лшинесцеш но-серологичзского и бактериологического методов исследования прод}

ктов убол птицы и оборудования на сальмонеллы, на Щелковской птицефабрике и Кучикском госплзмсовхозе,.которые показали, что методом флуоресцирующих антител с контрастированием фона альбумином, меченным родамином, в пробах мышечной ткани, печени Смазки-отпечатки"после подрагивания проб в течение 4-6 часов в термостате) и в смывах с поверхности тушек птицы и оборудования (мазки, сделанные из срэд-накоплэнпя посла 6-8 часового инкубирозания) сальмонеллы были выявлены з 17 случаях, что составило 96$ совпадений результатов с бактериологическим анализом. Бактериологическим мэтодом сальмонеллы бия: зилолзни иа эти за проб и о:шоз а 49 случаях. Данный мотод индикации сальмонелл поззолязт соркатить время иаследованид с 3-5 суток (по ГОЗТу) до 8-3 часов. О помощью флуоресцирующих сывороток сальмонеллы были идентифицированы по группам Д^ и В. Бактериологическим методом вняатзно, что они откосились к сероварам: 5! епХ0с1 -

ЪсИЛ - 57/и -10> проб,-Г £>¿¿¿/¿¿>2- -28, 6% проб.

"Во зторол серии опытоз использовали метод флуоресцирующих антител для индикации сальмонелл в смывной кидкооти, . полученой взя».'

гием проб-смывов о поверхности т/ак кур з объеме хСЭ и 500 мл. [•ля исследования в убойном цехе Кучянского госплемсовхозэ были отобраны 18 тушэк кур. В лабораторных условиях на наруянюю и внутреннюю поверхность тушек наносили смьга суточной агаровой культуры <.егйе^исйб из расчета 2о0000, 25000 к 2500 микробных тел з объеме 100 мл стерильной зоды. Затем тулки помещали а пакеты, куда напивали 100 и 500 мл жидкости, встряхивали та в течение 1 минуты, после чего отбирал! пробы. При подготовке проб-смывоз к исследованию з МЗА отбирали 25 мл смывной кидкости и центрифугировали 20 минут ари 3000 оборотов в минуту, затем из осадкоз готовили мазки -и одновременно делали аысез в среду обогащения, инкубировали в течение 3-8 часов, готовили мазки и исследовали з .'ДА. Результаты этих исследований показали, что испытанны,! метод взятия проб-смызоз в объемах 100 и 500 мл кидкости с их одновременным исследованием з :ЛЗА позволяет обнаруживать сальмонеллы в цэнтриругате на объема 100 мл едкости при минимальном обсеменения тушки (2500 микробных тел на тушку или около 5 микробных тел на с.м"), а в объеме 500 мл только после инкубирования в среде обогащения з течение 6-8 часов. 3 производственных условиях этот методический прием позволил обнаружить сальмонеллы в объеме пробы 100 мл з 10 случаях к в объеме 500 мл также - 10 случаях. Бактериологические исследования этих ~з проб-смывоз подтвердили все случаи индикации сальмонелл, что составило 100/? совпадений результатов исследозания.Регламентированшал методом отбора проб-смывоз с площади 100 см~ поверхности тугшси сальмонеллы были выделены только з 6 случаях. Данный метод экспресс-индикации сальмонелл на поверхности тушек птицы позволил позысить частоту обнаружения сальмонелл в исследуемых пробах и сократить время исследования до 2-х часов.

Устойчивость сальмонелл к ультрафиолетовому излучения на различных объектах. Проведены исследования по изучению устойчивости

сальмзнелл на поверхностях различных гест-материалов, тушек кур, лиц, личной тары, колбасной оболочки и синтетической пленки, а так:гз изучено изменение микробиологических показателей, органолеп-тичезких и физико-химических свойств мяса кур после У5-Облучения и его злилния на процесс хранения тушек. В качестве источника У5-излучения использовали блок из двух ламп ДБ-30-1 (общая мощность

60 Вт) и разработанную з лаборатории совместно с НПО "Астрофизика" экспериментальную самодзияуцую установку, состоящую из 9-ти ламп ДБ-30 (общая мэщность-270 Вт).

При изучена? выживаемости сальмонелл на поверхности тест-мате-

т!т;ялов исследовал}: рекимы У5-облучения с интенсивностью бактерицидного потока 0,0159 Зт/см , при длине золны 251 нм и расстоянии 3043 см от обл/чатзгл и различных-экспозициях. Бактерицидный эффект в указанном режима по отношению к сальмонеллам, находящимся на поверхностях гладких тест-материалов ( алкминевые и стальные пластинки, кафельные и стеклянные плитки), достигался при экспозиции 2025 минут (19,03-23,85 Вт с/см ). Применение белковой защиты увеличило бактерицидное дзцстзие УЗ-облучения, которое составило в наши:

2

опытах 15—50 минут (42,93-47,70 Вт_с/см ). Эффективность У5-излуче;

кия по отношению к сальмонеллам такке снижалась при облучении конт< минированных тест-материалов с рыхлой и пористой структурой (бетон плитка половая, дереза, резина, фанера, дрешсно-стружэчная плитка! цр;г экспозиции 30 минут (28,62 Вт с/см ) и без белковой защиты на этих материалах снижение обсемэнэнности сальмонеллами после У5-об-лучения составило 93,6-99,37;» (дровасно-струкачная клитка-70$). Ьзлковая защита на этих материалах предохраняла часть сальмонелл от У¿-облучения и процент снижения обсеменности на бетоне составил —33,7/1, а на плиткэ для пола-31,1.

Эксперименты но изучению заагааемости сальмонелл на поззтосносу ти ттщэк кур, (искусственно обсемененных в количестве 10 тысяч

мир. тал/ом ) яри воздействии УЗ-облучения показали, что инактивация достигает 99,1^ на серозных оболочках при экспозиции 5 минут-(4,7? Зт с/см^), а на поверхности тушек кур наблюдается инактиза-ция сальмонелл при экспозиции 25-30 жнут (23,85-28,62 Зт с/см4) в 39$ случаев.

На поверхности кутизиновой колбасной оболочки и синтетической плешей, контамширозанных сальмонеллами (20 млн. микр. тел/см ), бактерицидны.!' эдрект достигнут при 25-35 минутных экспозициях (23,8533,39 Вт с/сы2).

При применении УЗ-облучония поверхности яиц, кочтаминиоозанных — — — — — — — — — — — 2

зальмонеллами в количестве :50 тыс. шкр. тел/см* бактерицидный

! - 2

э$£ект достигается при экспозиции 20 минут (19,08 Зт с/см ), а при

9

обсеменении 20 млн. микр. тел/см" при экспозиция 40 минут (33,15 Зт з/см2).

На поверхности яичной таиы (картонной), контаминирозанкой сальмонеллами бактерицидный э55ект при У>-облучз.нии достигнут в 60$ случаев при экспозиции 100 минут (95,1 Зт с/см~).

Злиянпе У 5-из лучения на микробиологические показателя, орг.^но- . септические и Физико-химические сз01с,тза мяса кто з ггоопессз хоанэ-гая. Для изучения влиУ-5-излучения на качественные показатели ляса кур прошли облучение опытной партии охлажденных тупзк кур (20

ятук) по следующему режиму: интенсивность бактерицидного потока У

2

тучей на поверхности тушки - 11,31 Вт с/см", в течение 15 минут, гои длине волны 254 нм и расстоянии 30-Ю см. Мясо опытней и контрольной '.необлученной партии тузе к исследовали после облучения и з 1роцессе хранения при температуре +4°С в течение 1.-16 суток по слз-*у;сщим показателям: органолэптические показатели;(микробное число, галичие бактерий группы килечной палочки и сальмонелл); физико-хмми-геским данным (содержание аммиака и солей аммония, летучих жирных

кпзлот, кислотное и изрэкпскоэ число кнра)устаноЕлено, что облучение тупа:-: кур з указанном ре:-:;;:\!-з увеличивает срок хранения в 2 раза (с 7 до 11 суток), а по органолзптичэским, микробиологическим и рнздко-химпческпм показателя:.! мясо кур находилосв в пределах норны з соответствовало требованиям ГОСТ а.

ВЫВОДЫ

1. В период технологического цикла выращивания цыплят-бройлеров наблюдается наибольшее накопление сальмонелл на объектах внешней среды к 32-42 суткам содержания цыплят, а также формирование сзлъмзнеллззоносптелъстза среди птицы, что монет служить сигналом неблагополучия стада по сальыонэллезнод инфекции.

2. При первичной переработке птщы наибольший уровень контами нации тущек, оборудования и рук персонала сальмонеллами и другой . :лпоозлоро.1 отмечается на процессах тепловоц обработки, снятие опе ренпя п. погро^енпя тусзх, по которым предлагается проводить бакте-рнологзческХ: контроль санитарного состояния тушек птицы и оборудо

3. Используемая при теплозсд обработке тушек вода с температу рой 52-5 х (по технологическому регламенту) не обеспечивает инак

тивацих) в не,1 различной михроблоры (з том числе, и сальмонеллы), что приводит к значительному ее накоплению и последуице! кросс-кон таминацпн ту~ек, и что требует совершенствования данного процесса обраооткп тулзк.

4. Наблюдается широкая циркуляция различных сероваров сальмоне в продуктах убоя птицы, и технологическом оборудовании, в частносч

ггС&иХСсил, Тур!ипш.гии,гп-, £ раМсисгп- ( )

среди которых преобладающими видами были^! - (51; 42$)

Тур/иггилисст- (27,62).

5. Разработан метод взятия проб-смывов в объеме 100 мл (для '. zsк взоом до 1,5 кг)н 500 мл (для тушек более 1,5 кг), стерильней

юды о поверхности тушэк птицы с послэдухцпч исследование:,! смызной шдкости методом рлуоресцяруэдих антител, который позволяет позы-г !ить частоту обнаружения сальмонелл в исследуемых пробах в сразивши с общепринятым исследованием на 40$, и который обеспечивает Ю0$-ное выделение сальмонелл с поверхности тушек.

6. Бактерицидны:! эЬрект постоянного У5-облучения с интенсивностью бактерицидного потока 0,0159 Вт/с:/, при длине волны 251 нм и )асстоянии 30-40 см от облучателя, по отношению к сальмонеллам на гладких тест-материалах, достигается при экспозиции 20-25 минут

о

19,08-23,85 Вт с/см ). Применение белковой защиты увеличивает вре-щ бактерицидного действия УЗ-излучэния, которое составило 15-50 ми-гут (42,93-47,70 Вт о/см2).

7;. Выживаемость сальмонелл к У5-излучению на поверхности тушек :ур и серозных оболочек незначительна. Так, инактивация сальмонелл з этом случае достигается на поверхности тушек кур до 99$ при эксдо-1ицйи 25-30 минут (23,85-28,62 Вт с/с:/), а на серозных оболочках.

99,1$ при экспозиции 5 минут (4,77 Вт с/с?,Г).

На поверхности кутп^ллб1зггзгколблс'?ой оболочки и синтетической гленки, контаминированных сальмонеллами при УЗ-облучении бактерици-даый эрект достигнут при 25 и 35 минутных экспозициях (23,85 -53,49 Вт о/ом2).

8. При применении Уз-облучения поверхности яиц, контаминиролан-1ых сальмонеллами в количестве 50 тыд/см" бактерицидна! эррект достигается яри экопозиции 20 минут (19,08 Вт с/см^), а при обсеменении

9 2

Ю млн/см" при экспозиции 40 минут (33,16 Зт с/см ).

На поверхности яичной (картонной) тары контаминирозакноЗ сальмонеллами, после У'Б-облучения бактерицидны;! эЬаект достигнут з 60$ 1роб при экспозиции 100 минут (95,40 Зт с/см2).

9. Облучение тушек постоянным УФ-излучением позволяет увели-шть сроки их хранения в 2 раза (с 7 до 14 суток).

Псслз У5-облучэяия Tfzзк происходит снижение общего количества ш-роорганлзмзв на 93,8$, а количество БГКП на 99,2$. Наблщается увеличение лагрззы до 4-х суток. По органолелтическим и физико-химическим показателям на 14 сутки облученные тулки соотватстзовали тре Оовакилм ГОСТа.

ШЗДЮСЕЕЫ ДЕЛ ПРАКТИКИ

1. Рекомендован метод отбора проб-смнвоз в объемах 100 и 500 мл стзрпльнэй воды со зое2 позэрхности тушки птицы с последующим исследованием смызной нидкости методом флуоресцирующих антител.

2.Прэдло.'эн для практического применения на птицефабриках метод Злуоресцпруксих антител с контрастированием фона (прямой; способ) хл-- индикация сальмонелл з процессе санитарно-бактериоло-гпчзского контроля первично,; переработки птицы.

3. Разработаны и внедрены "Методические рекомендации по экспозе о-индикации сальмонелл на поверхности тусэк птицы " (Утв. директором Птицепрома Иркутской области 24.09.1993 г.). Рекомендации при'.снязтсл в зональной лаборатории по болезням птиц Иркутской облает:! и бактериологических лабораториях Мигетской, Ангарской, Иркутской и Брспскэй птицерабрик.

список СлУьлжозлнкдХ работ по те:е дюсзртацм

1. Пухлл::оза Г.Л. „5етоды ускоренного выявления сальмонелл в -птицепзрерабатаааздэй промышленности. -Тр.ЗШШЗЗГЭ.- Проблемы пет. сан. и скол.-Ч.2.-19S3.-С.38-95.

I. Пухлякова Г.Л. Перспективы признания УЗ-излучения з пти-цедерорабатьсащэй промышленности. -Экологические проблемы вет.сан. Тез.докл.научн.кон$. 7-8 апреля 1393.-1.1,-3.73.

3. Пухлдкова Г.Л..Экология сальмонелл на объектах вэтеринарно-санптарного надзора. -Тр.ВНИИЗСГЭ.-Проблемы зет.сан. и экол.-Т.ЭЗ.-4.2.-1991.-3. 43.

БКИ1В0ГЗ, ISQ4r.s Москва, Звенигородское ш, 5, ъъх.. т;:гаг. 80 зкз,