Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Изучение фармако-токсикологических свойств сульфоксидов и их виляния на иммунобиологическую реактивность организма животных

РГб Ой

- Ь \ПР ветеринарный институт имени Н.З.Баумана

На праЕах рукописи

ГАСАНОВ АЛИЗАДЕ СОДТАН ОГЛЫ

ИЗУЧЕНИЕ •¿АРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСЙК СВОЙСТВ СУЛМОНСВДОВ И ИХ ВЛИЯНИЯ НА ИШУЮБЮДОГИЧЕСКУЮ РЕАКТИВНОСТЬ ОРГАНИЗМ 2ИВОТНЫХ

16.00.04. - ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ - •

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Казанъ-1994

Работа выполнена в Казанском ветеринарном институте имени Н.З.Баумана к в ВНИВИ (г.Казань).

Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, доцент Гарипов Т.В,

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Папуниди К.Х., доктор биологических наук Тремасов М.Я.

Ведущая организация: Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии.

Защита состоится "// "ил/и^^-ч'-- 1994 г. >1£С

в "/л " часов на заседании диссертационного Совета K-I20.22.0i в Казанском ветеринарном институте (420074,г. Казанъ-74, ветеринарный институт).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанского ветеринарного института имени Н.Э.Баумана.

Автореферат разослан "/т^ п , 1994 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Корнишин А.Н.

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ.

Актуальность теш. Существенной причиной, тормозящей

разработку эффективных методов профилактики и лечения различных патологий, является слабая изу -ченность существующих и еноеь синтезированных средстЕ, применяемых в ветеринарии (И.МоКарпуть, 1981; А.А.Яршшн, Н.И.Шарый, 1991; З.Х.Даугалиева, В«В.Филиппов, 1991). Многие Еопросы их разностороннего дейстЕИя на организм животных не раскрыты до сих пор или раскрыты не достаточно.

Сотрудниками кафедры фармакологии и токсикологии КГВИ среди множества изученных соединений выделены как наиболее перспективные - препараты нефтехимического синтеза (сульфоны, сульфок-сиды), которые эффективны при паразитарных болезнях кожи живот -ных. Это позволило химикам искать новые способы синтеза сульфок-сидое в крупнотонажном объеме, что естественно могло изменить их биологическую активность. В то же время при разносторонней изу -ченностц этого класса соединений, остались не известными их влияние на защитные силы и некоторые другие системы животного организма. В связи с этим изучение биологических свойств ноеых пре -паратов преобретает актуальность, имеет практическое и теоретическое значение.

Цель и задачи исследований: В работе была поставлена

цель проЕести фармакотокси -кологическую оценку сульфоксидов, синтезированных по ТУ-384023-77, изучить лечебное действие и определить их влияние на иммун -ную реактивность больных ушной чесоткой и интактных кроликоЕ. Исходя из этой цели перед наш были поставлены следующие задачи:

1. Изучить острую и хроническую токсичность сульфоксидов.

2. Изучить действие препарата на сократительную деятельность изолированных органов (Сердце и кишечник).

3. Изучить лечебное действие сульфоксидов при псороптозе кроликов.

4. Изучить их Елияние на клеточные факторы иммунитета при внутреннем и нарукном применении интактным и больным псороптозом животным.

5. Изучить их влияние на факторы неспецифической резис ~ тентности при внутреннем и наружном применении интактнш и больным псороптозом животным.

Научная новизна. Определены параметры острой и хроничес--• - кой токсичности сульфоксидов для белых

мышей и крыс. Изучено дейстгие препарата на сократительную дея ~ тельность сердца и кишечника. Впервые изучено влияние сульфокси-дое на иммунную реактивность организма жиеотных. Доказано, что сульфоксиды обладают высокой терапевтической эффективностью при псороптозе кроликов»

Практическая ценность работы состоит е том, что установлена

терапевтическая концентрация сульфоксидов для лечения животных, больных псороптозом, которая наиболее эффективно повышает защитные силы организма.

■ Апробация работы. Основные положения диссертации доложе-

ны и одобрены: на научно-производствен ных конференциях Казанского ветеринарного института (1992, 1993) межвузовской научно-практической конференции, посвященной 60-ле тию Ставропольского СХИ (1991); научно-практической конференцш "НоЕые фармакологические средства в ветеринарии" г.С.Петербург (1991).

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 статей, в которых отражено основное содержание работы.

■ Основные положения, выносимые на защиту:

I. Сульфоксиды,_ являясь сероорганическиш соединениями неф техимического синтеза, относятся к классу малотоксичных соедине-

ний со слабоЕыра:хенной кумуляцией. Препарат хорошо ЕсасыЕается как при внутреннем, так и наружном применении. Коэффициент кумуляции 5,2-5,3, кожно-оральный - 2,0-2,2.

2. Сульфоксиды в виде 1,5^-ной водной эмульсии проявляют выраженное лечебное действие при псороптозе кроликов, не оказывают отрицательного действия на общее состояние животных. Значительно повышают иммунную реактивность организма.

3. Сульфоксиды в виде 5,0?£~ной концентрации при наружном применении и в дозе 0,2 г/кг при внутреннем введении оказьшают отрицательное действие на иммунный статус ж-шотных.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации

изложены на 123 страницах машинописного текста и включает: общую характеристику работы, обзор литературы, материал и методы исследований, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, еыеоды, практические рекомендации и список литературы. Работа иллюстрирована 21 таблицей, 10 рисунками. Список литературы содержит 284 наименования, в том числе на иностранных языках 62.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материал и методы исследований.

Работа выполнялась в соответствии с планом НИР, утвержденным Ученым Советом КВИ 12 февраля 1990 года (протокол № 2), на кафедре фармакологии и токсикологии и в лаборатории радиацион -ной иммунологии отдела радиобиологии ВНИВИ (г.Казань).

Для выполнения поставленных задач,в сеоих исследованиях использовали сульфоксвды, синтезированные по ТУ-384023-77«

Эксперименты ставились на 92 белых беспородных крысах обоего пола массой 180-190 г, 92 нелинейных белых мышах, 12 кош -ках и 42 кроликах породы серый великан весом 2,5-3,0 кг. Жиеот'-ные для опытое подбирались по принципу аналогов.

При изучении действия сулъфоксидов на жиеотных учитывали общее состояние, отношение их к корму и Еоде, состояние свобод -

но го расположения тел э е окружающей среде.

Острую токсичность сульфоксидов определяли по метода Кербе-ра (1931), а также графическим методом по Миллеру и Теинтеру (1944).

Кумулятивные свойства сульфоксидов изучены по методике Ю.С.Когана, В.В.Станкевича (1964), а также по метода Р.К.Лимм с соавт.(1961). Для характеристики опасности развития смертельного отравления определяли показатель, выражающийся величиной " £> ", равной отношению вероятных Ееличин ЛД^ и ЛД^, который предло -жил В.М.Карасик (1944).

Влияние сульфоксидов на изолированное сердце кошек било изучено по методу Левена-Транделенберга-Писемского, на изолиро -ванные отрезки тонкого отдела кишечника кроликоЕ - по методу Магнуса.

О морфологических изменениях в органах и тканях после применения сульфоксидоЕ судили по картине патологоанатомического вскрытия.

Изучение лечебной эффективности 0,5; 1,5 и 5,С$ эмульсии сульфоксидов проводили на экспериментально и спонтанно зараженных псороптозом кроликах путем погружения их на I минуту в ванну с препаратом при температуре 38-39°С и тщательной обработки ушных раковин. О лечебном действии эмульсии сульфоксидов судили по мере заживления поврежденной ткани коки обнаружением или отсутствием чесоточных клещей в ооскобах, взятых с пораженных участков.

В ходе исследований на 3, 7, 14, 21 и 28 сутки после применения препарата определяли гематологические и иммунологические показатели. Общее количество лейкоцитов определяли общепринятыми методами в камере Горяева, а количество лимфоцитов определяли в мазке крови, окрашенном по Роыановсному-Гимза.

Иммунобиологический гомеостаз организма оценивали по факторам неспецифической резистентности и показателям клеточного им -мунитета. При изучении неспецифических факторов резистентности определяли:

-Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) нефеломет-рическим методом в модификации О.В.Бухарина и А^Б.Чемного (1972)

2 отношении 8.COU. (штамм-18).

-Лизоцимную активность сыворотки крови (ЛАСК) нефелометри-ческим методом В.Г.Дорофейчука (1968) <>

-Фагоцитарную активность нейтрофилов по методу Е.А.Кост и М.И.Стенко (1974).

Показатели клеточного иммунитета изучали по уроЕню Т- и В-лимфоцитов, субпопуляции Т-лтлфсцитов, а такке функциональной активности лимфоцитоЕ (РБТЛ)о

Для оценки Т-системы иммунитета е крови определяли количество т-члимфоцитов (E-РОК) методом спонтанного розеткообразоЕания с эритроциташ барана (£íoл&оЛ ЛИ.. OÍ CL¿., 1972), Т-хелперов и Т-супрессоров по методу Limai&uXs Ы. ol¿., 1978). Коэффициент ди-фференцировки Т-лимфоцитов - методом К- 11 ДР* (1982).

Идентификацию В-лимфоцитоЕ проводили методом комплементарного розеткообразования (ЕАС-РОК) по Г.^римелю (1987).

функциональную активность лимфоцитоЕ определяли методом радиометрической постановки РБТЛ по В.А.Бударкову с соавт. (1985).

Влияние сульфоксидов на иммунный статус кроликов определен также при внутреннем введении сульфоксидов в дозах 0,05-, 0,1-и 0,2 г/кг в ввде 10%-аой эвдльсли.

Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с заданной достоверностью р 0,05 на ПЭВМ МС 0505 (ДВК-2Л) по разработанным программам STATJm ДОЭТ.,

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННИК ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. То ксиколо гиче екая ха ра кт е ристика сулксоксадов

Результаты исследований по определению острой и хроничес -кой токсичности сульфоксидов представлены в таблице I.

Таблица I.

Показатели токсичности сульфоксидов

----т---

Вид ! 0пы„ животных! шыт ___■ !___

eeSSJW^^ ¡ВД50(мг/кг) ¡ЛД^мг/кг) |^/?сг) I кок

кум.

острый

хронический

внутрь 300 600 1016,7+202,3 1500 2000

наружно 1000 1200 2250+332»3 3200 3500

внутрь 406,4 1400 5592+777,8 9500 14811,3

2,2

5,2

внутрь 500 800 1484^331,0 1900 2500

острый 2,0

наружно 1500 2000 2916,7+332,3 3100 4000

КРЫСЫ , 5,3

скийИЧе~ ВНУТРЬ 593,6 1500 7986,4+841,2 14400 21625,1

3.2. Влияние сульфоксидов на изолированные органы.

Изучено влияние различных концентраций сульфоксидов на изолированное сердце кошек (12 опытов) и на изолированные отрезки тонкого отдела кишечника кроликов (9 опытов). Сульфоксиды применены в виде эмульсии, приготовленной на рингеровской жидкости.

3.2.1. Влияние сульфоксидов на изолированное сердце

котки.

Изучено влияние сульфоксидов в разведениях 1:1000000, 1:100000, 1:10000, 1:1000.

Установили, что сульфоксиды в разведениях 1:1000000 • не вызывают существенных изменений в работе изолированного сердца кашки. С увеличением концентрации препарата проявляется уменьшение амплитуды и замедление ритма сокращений сердца вплоть до полной и необратимой его остановки (1:1000). Адриналина гидрохлорид (1:1000000) не Еозбудил сердце остановленное сульфоксидами.

3.2.2. Влияние сульфоксидов на изолированные отрезки тонкого отдела кишечника кроликов.

Изучено влияние сульфоксидов в разЕедениях 1:100000, 1:10000 и 1:1000, а также его действие на фоне пилокарпина гидрохлорида.

Сульфоксиды в разЕедении 1:100000 еызыеэли кратковременное учащение частоты и уменьшение амплитуды сокращений отрезка кишечника. Более концентрированные эмульсии препарата еызыеэли замед -ление ритма и уменьшение амплитуды сокращений еплоть до прекращения работы кишок. Пилокарпина гидрохлорид (1:10000 ) стимулировал работу кишечника, угнетенную сульфоксидами (1:10000), однако не оказывал влияния на фоне действия сульфоксидов е разведении Г:1000.

3.3. Изучение лечебного действия и влияние сульфоксвдоЕ на клеточные факторы иммунитета при псороптозе . кроликов.

Опыты проведены на 24 кроликах обоего шла, эксперимен -талъно и спонтанно зараженных псороптозом в условиях вивария кафедры фармакологии и токсикологии КВИ. Об инвазированности кроликоЕ псороптозом судили по клиническим данным в результатам лабораторных исследований соскобов дожи с внутренних поверхностей ушных раковин.

В ходе опыта обращали гнимание на общее состояние кроли -ков, пищевую возбудимость, сроки выздоровления. О положитель -ном или 'не эффективном действии сульфоксидов на псороптозный процесс судили по изучений соскобоЕ, езятых с пораженных мест. Одновременно брали кровь с целью выяснения влияния сульфоксидов на клеточные факторы иммунитета (популяция Т- и В-лимфоци-тов, субпопуляция Г-клеток и бласгная активность лимфоцитов) и неспецифические факторы иммунитета кроликоЕ (бактерицидная и лкзоцимная активность сыворотки кроги, фагоцитарная активное! нейтрофилсш),

3.3.1. Лечебное действие сульфоксидов при псороптозе

кроликов.

Кролики легко ЕыдержиЕзли купание в течение I минуты в указанных концентрациях сульфоксидов. Сроки выздоровления больных псороптозом животных показаны в таблице 2.

Таблица 2.

Лечебное действие сульфоксидов при псорортозе

коолекое

!Лон -'Число¡Начало отторжешвд!к ф с „ rin „„ Шолное выз

^„„„„Лцент-!живот!некротических ко-г^1" д "1ЛИ!доровление

хруппы, , ных , ек j - | - ,

] (.%) ! ! Тлни) ! 1 ! 2 1 ( дни )

2

3

4

0,5

1,5

5,0

6 6 6

рочек (дни)

2-3

2-3 2-3

все тело ушные рако-

ЕИНЫ

( дни )

I5-I8/5

I2-I5/6 11-15/6 II-I5/6

Примечание: в знаменателе число выздоровевших

животных.

6

Как еидно из таблицы 2 оптимальные результаты получены во второй и третьей грушах животных. В соскобах, взятых с пораженных участков ушных раковин на второй и третий дни, обваружива -лись только мертвые клещи. В эти же сроки начинали отторгаться некротические корочки, они разрыхлялись и на 3-4 день опыта в основном отпадали. Мокнущая поверхность в глубоких складках ушей подсыхала, усиливалась грануляция« Полное выздоровление животных второй и третьей групп наступало через 11-15 дней от начала ле -чения. Вместе с тем у животных третьей группы было замечено не -которое шелушение кожи.

После применения 0,5%~ной эмульсии сульфоксидов в соскобах у одного животного были веделены подвижные личинки клещей, Псо -роптес куникули, поэтому этого животного считали не ЕЫздороЕев -шим.

Таким образом установлено, что сульфоксиды в виде 1,5^-ной эмульсии проявляют наилучший лечебный эффект, хотя и другие испытанные нами концентрации оказывают положительное действие при псороптозе кроликов. В связи с этим представлял значительный интерес изучение влияния сульфоксвдоЕ на факторы иммунитета при разных путях применения.

3,3.2. Влияние сульфоксидов на клеточные факторы иммунитета при наружном применении

3.3«2Л.Динамика Т-и В-лкмФодитов.

Применение сульфоксидов в ввде 0,5/£-ной эмульсии на ЕСё тело животного не вызывает особых изменений как относительного,так и абсолЕггного количества Т- и В-лиыфоцитов во все сроки исследований (3, 7, 14, 21 и 28 сутки).

Во второй опытной группе (1,5^-ная эмульсия) как относительное, так и абсолютное число Т- и В-лимфоцитов, несмотря на некоторое повышение абсолютного количества Т-лимфоцитов, не имели достоверных отличий по сравнению с показателями группы БК.

Обработка Есего тела животных 5,0%-ной эмульсией сульфоксидов вызывала достоверное снижение относительного и абсолютного количества 1- и В-лимфоцитов.

3.3.2.2. Динамика субпопуляции Т-лимфоцитов и их бластной активности*

Сульфоксиды, примененные для обработки всего тела кроликов в виде 0,5- и 1,5^-ных эмульсий не вызывали существенных изменений в относительном и абсолютном количествах теофиллин-резистен-тных (Ттр) и теофиллин чувствительных (Ттч) т-члиыфоцитов и не изменяли их коэффициент диффиреюдаровки (КДТЛ)® Имеющиеся изме -нения имели статистически недостоверный характер по сравнению с показателями БК.

Властная активность лимфоцитов крови кроликов, обработанных 1,5$-ной эмульсией сульфоксидов в среднем на 1-1 была выше, чем у контрольных животных.

После применения 5,0£-ной эмульсии сульфоксидов относительное число Ттр-димфоцнтов во все сроки исследований в среднем составляли 44,5+1,5%, абсолютное - 0,9+0,1 тыс./мкл , против 55,5+1,5$ и 1,4+0,1 тыс./мкл в контроле (Р 0,05). ЭДТЛ состав -лял в среднем 2,4+0,1 тыс./мкл против 3,4+0,5 тыс./мкл контроля

(Р 0,05). Вместе с тем препарат не оказывал отрицательного влияния на число Ттч лимфоцитов.

Следовательно, наружное применение сульфоксидов в виде 0,5-1,5%-тк эмульсии не оказывают отрицательного влияния на субпо -пуляцшо Т-лимфоцитов и их бластнук активность. 5/ь-ная концентрация препарата при применении на Есё тело животного оказывает угнетающее действие на эти факторы иммунитета.

3.4. Влияние сульфоксидов на факторы неспецифкческой резистентности ( бактерицидная -БАСК и лизоцимная активности сьшоротки крови -ЛАСК; фагоцитарная активность нейтрофилов ФА ) при наружном применении интакткым (БК) и больным псороптозом животным.

Купание кроликов в 0,5^-ной эмульсии сульфоксидов в течение I мин. не вызывало существенных изменений в БАСК во все сроки исследований.

БАСК кроликов после применения 1,5^-ной эмульсии сульфок -сидов достоверно возрастала на 28 сутки исследований и была на 2,9% выше, чем у контрольных.

Достоверное снижение БАСК во все сроки исследования наблюдалось после воздействия 5$~ной эмульсии сульфоксидов и состав -ляло в среднем 13,8+0,7%, против 22,1+0,5 в контроле (Р 0,01).

Установлено, что сульфоксида в виде 0,5 и 1,5%-ной эмуль -сии при наружном применении позыиают лизоцимную активность сьшоротки крови кроликов. Разница по отношению к показателям БК достоверна на 28 сутки. Не установлены достоверные изменения после применения сульфоксидов в виде 0,5- и 1,5%-ной эмульсии в показателях фагоцитоза (фагоцитарной активности нейтрофилов -ФА, фагоцитарного числа - ФЧ, фагоцитарного индекса - ФИ и фагоцитарной емкости - ФЁ). Однако, применение 5,0%-ной эмульсии сульфоксидов снижало ЛАСК на 14- и 28-е сутки исследований в среднем до 6,9+0,3$, против контроля 10,3+0,8> (Р 0,01).

ФА нейтрофилов на 7-е и 14-е сутки исследований составляла соответственно 54,0+2,5/4 и 51,7+1,5%, при норме 64,0+2,2$ и 63,3+1,5^ (Р 0,05). ФЁ снижалась е основном на 14 и 21-е сутки

после применения препарата. ФИ и ФЁ не имели отличий от показателей БК за весь период наблюдений.

Таким образом выявлено, что сульфоксиды при наружном применении е виде 0,5- и 1,5$-ных эмульсий несколько повышают фагоцитоз, ЛАСК и БАСК. Факторы неспецифической резистентности угнетаются «при купании животных в 5$~ной эмульсии сульфоксидов.

3.5. Влияние сульфоксвдон на клеточные факторы иммунитета при внутреннем введении.

Сульфоксиды, как активные противопаразитарные соединения, будут рекомендованы к применению в ветеринарии наружно. При этом не исключается возможность попадания препарата внутрь и возникновения тех или иных отрицательных явлений в животном организме. В сеязи с этим важно изучение влияния сульфоксидов на факторы иммунитета при внутреннем введении.

3.5.1. Влияние сульфоксидов на уровень Т- и в-\шшфодитов.

После внутреннего введения сульфоксидов в дозе 200 мг/кг (1/5 от ДЕзд) относительное число Т-лимфсцитов на 14-е сутки стало 60,7+0,8$, на 21-е сутки - 56,3+0,8$ и на 28-е сутки -55,7+0,4$, при показателях БК е эти сроки соответственно 65,6 + 0,4%; 65,3+1,1$ и 65,3+0,8$ (Р 0,05). Абсолютное число Т-лим-фоцитов так же уменьшалось достоверно. Препарат в дозе 0,2г/кг ---угнетаицее действие проявляет и в отношении В-лимфоцитов.

Обратный эффект был получен после введения внутрь сульфоксидов е дозе 100 мг/кг (1/10 от ДПзд). Как относительное, так и абсолютное число Т-лимфоцитов возрастало начиная с 7-х суток и достигали максимальной величины на 28 сутки исследований. На 28-е сутки исследований относительное число Т-лимфоцитов у жи -вотных БК по сравнению с показателями опытных животных на 7-е сутки были ниже на 9,4$; 34-е сутки на 5,7$, а на 28-е сутки -на 11$ (Р 0,05). Абсолютное" число Т-димфоцитов опытных групп

кроликов превышало контрольных в эти сроки исследований в сред -нем на 2,2 - 3,0 тысяч клеток в микролитре крови.

Сульфоксиды в дозе 100 мг/кг при внутреннем введении вызывали достоверное увеличение абсолютного числа В-лимфоцитов крови кроликов на 7-е, 14-е и 21-е сутки исследований, Еместе с тем относительное их число изменялось незначительно.

Сульфоксиды в дозе 50 мг/кг после внутреннего введения до 14-ти суток стимулировали достоверное увеличение абсолютного числа как Т-, так и В-лимфоцитов крови кроликов и не оказывали заметного влияния на их относительное число,

3.5.2. Динамика субпопуляции и бластной активности

Т-лкмфоцитоЕ.

Опыты показали, что сульфоксиды в дозе 0,2 г/кг при внутреннем введении угнетает число теофиллин'резистентных лимфоцитов, что наиболее отчетливо выражается через 14 и более суток после затравки. Относительное число Ттр-лимфоцитов снижалось в среднем до 41,1+1,4$ при 51,4+1,2$ в контроле (Р 0,05), а их абсолютное число доходило до 0,7+0,1 тыс. клеток в I мкл в то время как 2 контроле било 1,6+0,1 тыс/мкл (Р 0,05). ЕДТЛ в опытной груше жиеотных по обоим показателям был в 2 раза меньше, чем в контроле, на 21 и 28-е сутки исследований.

После применения препарата в дозе 0,1 г/кг орально через 7 суток наблюдалось достоверное увеличение как абсолютного, так и относительного числа Ттр-клеток. Относительное число Ттр-клеток на 28 сутки было 62,6+1,7 против 51,6+1,4 контроля (Р 0,05), их абсолютное число 4,1+0,2 тыс/мкл против 1,6+0,2 тыс./мкл контроля (Р 0,05). Однако количество Ттч-лимфоцитов особо не изменялось.

Результаты исследований показывают, что сульфоксиды в дозе 0,1 г/кг при однократном оральном ЕЕедении на 3-й сутки исследования повышают функциональную активность лимфоцитов на 9,3$» На 7-е и 14-е сутки этот показатель ъ основном соответствовал контрольным параметрам.

На 21-е сутки исследования функциональная активность лимфоцитов повышалась на 6,2^ и возвращалась к контролю на 28-е сутки.

Внутреннее введение препарата в дозе 0,05 г/кг не оказывает существенного елияния на субпопуляции Т-лимфоцитов крови кроли -ков.

Следовательно, сульфоксиды е дозе 0,1 г/кг оказывают стимулирующий эффект на бластную активность лимфоцитов в ранние сроки исследования, а в более поздние - образование теофиллин резис -тентных субпопуляций Т-%лимфоцитов.

3.6. Влияние сульфоксидов при внутреннем введении на факторы неспецифической резистентности кроликов.

Проведенные исследования показывают, что сульфоксиды в дозо 0,05 г/кг при внутреннем введении не вызывают изменений в БАСК, ЛАСК, показателях фагоцитоза (ФА, ФЧ, ФИ, ФЁ) нейтрофилоЕ крови

1фоликов.

Сульфоксиды в дозе 0,1 г/кг при введении внутрь через 3 суток достоверно повышают БАСК на 2,4$ (БК - 21,2+0,4$), ЛАСК на 6$ (БК - 19,7+1,0$) и увеличивает 34 на 0,3$. Стимулирующий эффект препарата на указанные показатели сохранялся и в последующие сроки исследований. Наибольший уровень БАСК 29,7+1,7$ (БК - 20,7+0,8$) наблюдался на 14 и 21-е сутки исследований (Р 0,05). ЛАСК также была высокой в эти сроки. ФЧ было одинаковым на 14 и 28-е сутки наблюдений и составляло 6,3+0,1$, в конт -роле 5,5+0,1$ (Р 0,05).

Введение сульфоксидоЕ Енутрь в дозе 0,2 г/кг вызывало достоверное резкое снижение БАСК, ЛАСК и фагоцитоза во все сроки исследований, с наименьшими величинами БАСК (11,0+1,4$) на 21-е су тки, ЛАСК (10,0+1,7$) и 5?А (51,7+2,7$) на 14-е сутки.

Таким образом выявлено, что сульфоксиды при внутреннем введении е дозе 0,2 г/кг снижают факторы неспецифической резистентности кроликов, а е дозе 0,1 г/кг повышают их активность.

ВЫВОДЫ

1. Сульфоксиды, синтезированные из дизельного топлива по ТУ-384023-77 являются малотоксичными серосодержащими соединениями со слабовыраженными кумулятивными свойствами. ЛД^д для белых мышей 1016,0+250,4 мг/кг, белых крыс 1484,0+317,0 мг/кг. Коэффициент кумуляции составляет 5,2 для белых мышей и 5,3 для белых крыс. Кожно-оральный коэффициент 2,2.

2. Клиническая картина острого отравления у животных проявляется угнетением общего состояния, нарушением координации деи -жений, судорожными сокращениями скелетной мускулатуры.

Смерть животных наступает от остановки дыхания. Патологоана-томические изменения при остром отравлении сульфоксидами характеризуются выраженными гиперемией и отеком легких, полнокровием печени, селезенки и почек, асфиксическим сердцем.

3. Сульфоксиды е слабых разведениях 1:1000000 (сердце) и 1:100000 (кишечник) не оказывают отрицательного действия на изолированные органы. Высокие концентрации сульфоксидов (1:1000) в перфузионном растворе вызывают угнетение деятельности указанных органов вплоть до полной необратимой и невосстанаЕливаемой остановки.

4. Сульфоксиды в виде 1,5??-ной еодной эмульсии проявляют наилучший лечебный эффект при псороптозе кроликов. Полное выздоровление животных наступает через 12-15 дней после щупания и обработки всей поверхности ушных раковин 1,5^-ной эмульсией.

5. Сульфоксиды при наружном применении в виде I,5%-ной эмульсии больным псороптозом; внутрь в дозе 0,1 г/кг интактным животным, стимулируют процессы лимфопоэза, функциональную способность иммунокомпетентных клеток, достоверно повышают бактерицид -ну в и лизоцимную активность сыворотки кроЕи, а также фагоцитарную активность нейтрофилов.

6. Сульфоксиды при применении внутрь в дозе 0,2 г/кг и наружно е виде 5,0%-кой водной эмульсии у интактных и больных псороптозом животных вызывают:

- снижение содержания лимфоцитов;

- снижение БАСК, ЛАСК, ФА нейтрофилоЕ, уровень Т- и Б~ лимфоцитов и их функциональную способность трансформироваться в бласты.

7. Использование 1,5%-ной водной эмульсии сульфоксидов для обработки животных при псороптозе обеспечивает хороший лечебный эффект, не угнетает процессы иммуногенеза и является еыгодным и доступным для практических ветеринарных специалистов, методом лечения паразитарных болезней кожи»

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕЮМЕВДАШШ.

1. Для лечения ушной чесотки кроликов рекомендуется применять сульфоксиды в виде 1,5/^-ной водной эмульсии» Сульфоксиды

в указанной лекарственной форме следует наносить на наружную и внутренние поверхность ушных раковин кроликов до полного пропитывания некротических корочек, не допуская затекания во внутреннее ухо. Б необходимых случаях можно проводить обработку всего тела животных.

Препарат при одно-двухкратном применении в данной концентрации обеспечивает высокий лечебный аффект и повышает иммунную реактивность животных.

2. Не рекомендуется проводить обработку всего тела животных 5,0%-нсй эмульсией сульфоксидов, так как препарат, несмотря на хороший лечебный эффект, оказывает иммунодепрессивное действие на кроликов.

По теме диссертации опубликованы работы

1. Гарипов Т.В», Гасанов A.C. Влияние сульфоксидов на иммунную реактивность кроликов./Тезисы докладов к 3-ей межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства е ветеринарии".-Санкт-Петербург, I99I.-C.26.

2. Гарипов Т.В., Гасанов A.C. Острая токсичность сульфоксидов фракции 180-360°С./Научные достижения молодых ученых и специалистов - животноводству. Тезисы докладов. Республиканской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов. -Семипалатинск, I99I.-C.39-40.

3. Гасанов A.C. Влияние сернистого оксидата дизельного топлива на изолированное сердце лягушки,/Тезисы докладов межвузовской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов, посвященной 60-летию Ставропольского Ордена Трудо-еого Красного Знамени с/х института«-Ставрополь, I99I.-

С.II0-III.

4. Гарипов Т.В., Гасанов А.С, Влияние сульфоксидов на функциональную активность Т-лимфоцитоЕ периферической кроЕИ кроликов. / Материалы Всеросийской научной конференции.-Троицк, 1992.-С.13-14.

5. Гарипов Т.В., Гасанов A.C. Динамика содержания лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови кроликов под влиянием сульфоксидов./Межвузовский сборник научных трудов.-Казань, 1993.-С. 95-98.

Заказ ». ?•*. Подала ьс> .> пt-чть £¿.03.94. фориа? 60 х 6ч /16 Бумага писчйг., Пе*:ет1 о.^сетнчя. I п.л. Тирах Iüj эка. Уча;ток офсетнск п (."■•■• гй ,-ib.*. Ьгтаься:?;/!.