Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Интегрированная оценка адаптационных возможностей собак в раннем постнатальном онтогенезе при алиментарной депривации

На правах рукописи

Ермаков Алексей Михайлович

к'

С '

ИНТЕГРИРОВАННАЯ ОЦЕНКА АДАПТАЦИОННЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ СОБАК В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ ПРИ АЛИМЕНТАРНОЙ ДЕПРИВАЦИИ

16 00 02 - патология, онкология и морфология животных 16 0001 - диагностика болезней и терапия животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

ооз 1 (

Москва - 2008

003172207

Работа выполнена в Государственном научном учреждении «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» Российской академии

сельскохозяйственных наук

Научные консультанты Заслуженный деятель науки РФ,

доктор биологических наук, профессор Дмитриев Анатолий Федорович

доктор биологических наук Карташов Сергей Николаевич

„ , доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты „ „ Л

Поляков Виктор Филиппович

Заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Тельцов Леонид Петрович

Заслуженный деятель науки РФ, доктор ветеринарных наук, профессор Щербаков Григорий Гаврилович

Ведущая организация ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский

ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Россельхозакадемии

Защита состоится «01» июля 2008 года в II00 часов на заседании диссертационного совета Д 220 042 02 при ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им К И Скрябина» (109472, г Москва, ул Академика Скрябина, 23, тел 377-93-83)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им К И Скрябина» (109472, г Москва, ул Академика Скрябина, 23)

Автореферат разослан «30» мая 2008 г

Ученый секретарь диссертационного совета 1р1я] А И Торба

1. Общая характеристика работы Актуальность темы. Теория адаптации до настоящего времени остается одним из фундаментальных направлений современной биологии Адаптационная деятельность организма животных не только обеспечивает выживание и эволюционное развитие, но и повседневное его приспособление к изменениям окружающей среды (Адо А Д, 1985, Дмитриев А Ф , 1986)

В теория Г Селье об общем адаптационном синдроме показан фазовый характер адаптационных реакций и обоснована ведущая роль истощения регуляторных систем при острых и хронических стрессорных воздействиях в развитии большинства патологических состояний и заболеваний Система кровообращения может рассматриваться как чувствитетьный индикатор адаптационных реакций целостного организма, а вариабельность сердечного ритма хорошо отражает степень напряжения регуляторных систем, обусловленную возникающей в ответ на любое стрессор-ное воздействие активацией системы гипофиз-надпочечники и реакцией симпатоад-реналовой системы (Vrana М , 1993)

Представляет интерес оценка роли нейрогуморальных факторов в развитии адаптивных возможностей организма, в частности, значимость различных отделов вегетативной нервной системы Исследования последних лет показали, что многие патологические процессы (перестройка гомеостаза в условиях хронического стресса) контролируются вегетативной нервной системой (Лютинский С И , 2005, Жаров А В и др , 2007) Признана роль симпатико-адреналовой системы в развитии адаптивного синдрома В доступной нам литературе крайне мало публикаций по влиянию изменений статистических характеристик сердечного ритма на состояние неспецифических адаптационных механизмов организма животных (Hughson R Et all, 1995, Карташов С Н , 2005) Отсутствуют сведения о возможности диагностики заболеваний животных на донозологической стадии и наличие автоматических диагностических систем для мониторинга эпизоотологического состояния хозяйств

Вместе с тем, на необходимость и перспективность проведения фундаментальных физиологических исследований организма животных с целью разработки новых способов превентивных мероприятий указывают ведущие ученые (Allen М, 1991, Дани невская Н В , Коробов А В , Старченков С В , Щербаков Г Г , 2001, Уша Б В , Беляков И М , 2002) и принятые постановления Правительства Российской Федерации (№ 22 от 21 01 99), Президиума РАСХН, а также Целевая федеральная программа (1999-2010 гг )

Цель работы - разработать алгоритм комплексной оценки морфофункциональ-ного состояния интегрирующих систем собак в процессе развития и оценить влияние алиментарной депривации на онтогенетические процессы Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1 Изучить морфофункцнональное состояние организма щенных сук при сбалансированном и несбалансированном кормлении и исследовать зависимость функции генома потомства в раннем постнатальном онтогенезе с учетом типа кормления матерей

2 Определить содержание и динамику ряда основных гормонов (кортизола, тироксина, трийодтиронина, эстрадиола-17р, прогестерона, тестостерона), показателей углеводного и белкового обменов, динамику морфологических показателей крови у щенков в раннем постнатальном онтогенезе при различном физиологическом состоянии

автоматического анализатора вариабельности сердечного ритма для диагностики состояния нервно-гуморального статуса животного, степени напряжения адаптационных систем организма, донозологической диагностики заболеваний Разработан алгоритм групповой и индивидуальной диагностики донозологических патологических состояний у животных

Научно-практическая значимость работы. Алиментарная депривация является этиологическим фактором развития хронического стресса у щенков, что по теории адаптации сопровождается перераспределением энергии в виде глюкозы из соматического пула, в висцеральный под действием кортикостероидов, что сопровождается иммунодефицитным состоянием, снижением резистентности и увеличенной воспреимчивастью к инфекционным заболеваниям Данная гипотеза в процессе работы подтверждена классическими методами исследования, а именно морфологическими и биохимическими показателями крови, определением состояния вегетативной нервной системы по уровню катехоламинов, исследованием гормонов основных эндокринных органов и определением иммунологического статуса

Выяснено, что по мере развития и углубления хронического стресса развивается гиперфункция с последующим истощением функционального резерва вегетативной нервной системы, что сопровождается первоначальным повышением, затем резким падением катехоламинов Падению уровня катехоламинов соответствует наиболее глубокое иммунодефицитное состояние Разработанный экспресс метод определения состояния вегетативной нервной системы по вариабельности сердечного ритма позволяет не только определить функциональный резерв вегетативной нервной системы, но также косвенно судить о степени иммунодефицитного состояния Прогнозировать вероятность развития инфекционного процесса, тяжесть его течения у отдельно взятого животного, а при групповом исследовании судить о вероятности развития эпизоотии

Параметры концентрации гормонов, показателей углеводного, липидного, белкового обменов, морфологических параметров крови, установленные в процессе проведения исследований, используются в диагностической практике в качестве нормативных показателей при оценке функционального состояния организма собак в раннем постнатальном онтогенезе Их необходимо учитывать при определении клинического состояния организма собак разного возраста, в зависимости от напряжения адаптивных систем организма, для оценки течения беременности, внутриутробного развития плода, послеродового периода, прогнозирования риска развития патологии

Материалы работы используются при решении задач, связанных с разработкой приемов эффективной профилактики и терапии болезней собак и других животных, проведении зоотехнических и ветеринарных мероприятий в кинологических питомниках и хозяйствах других направлений с целью совершенствования противоэпнзо-отических и превентивных мероприятий Результаты исследований представлены как справочный материал при составлении учебных пособий и руководств по физиологии и патологии домашних животных, биологии развития для студентов специальностей «Ветеринария», «Зоотехния» и «Биология»

Разработан алгоритм групповой и индивидуальной диагностики донозологических патологических состояний у животных, который может широко использоваться во всех отраслях животноводства

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на ежегодных научно-практических конференциях ФГОУ ВПО «Донской государ-

3 Оценить адаптационные возможности организма щенков в онтогенезе и с разным напряжением адаптационных механизмов изучив динамику катехоламшгов и состояние вегетативной нервной системы

4 Оценить степень и характер влияния условий кормления на гормональный фон, морфологические показатели крови и метаболизм организма собак.

5 Изучить основные закономерности динамики гормональных, морфологических и биохимических показателей крови у щенков в раннем постнатальном онтогенезе с разным напряжением адаптационных механизмов

6 Проследить корреляционную связь между состоянием вегетативной нервной системы и адаптационных резервов организма у собак, гормональным фоном, морфологическими показателями крови и уровнем обменных процессов организма собак в онтогенезе

7 На основе полученных данных разработать новый метод групповой и индивидуальной диагностики предрасположенности к развитию патологических состояний у животных

Диссертационное исследование проведено в соответствии с темой научных исследований Государственного научного учреждения «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» Россельхозакадемии "Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высокопродуктивных животных" государственная регистрация №15070 3666026906 06 8 001 2

Научная новизна. Выявлены морфофункциональные закономерности адаптивной пластичности организма собак послужившие научной базой для разработки методов донозологической диагностики

Впервые изучена динамика гормонального статуса щенков в раннем постнатальном онтогенезе по уровню в крови гормонов коры надпочечников (кортизола), щитовидной (тироксина, трийодтиронина) и половых желез (прогестерона, эстра-диола-17р, тестостерона) в связи с особенностями физиологического состояния организма при алиментарной депривации Определены физиологические параметры, возрастная динамика, и дана сравнительная характеристика гормонального профиля, морфологических и биохимических показателей крови щенков, с разным функциональным резервом организма, выявлены периоды напряжения, перенапряжения и срывов адаптационных систем методом оценки вариабельности сердечного ритма Показано, что длительное неполноценное кормление животных сопровождается изменениями гормонального фона, морфологических и биохимических показателей крови, соответствующих характеру адаптивных изменений

Получены новые данные о комплексном участии кортизола, тироксина, трийодтиронина, эстрадиола-17(3, прогестерона, тестостерона в развитии стресс-реакции в ответ на алиментарную депривацию

Изучено функциональное состояние активности желез внутренней секреции, морфологические и метаболические показатели крови в связи с этапами напряжения адаптивных систем организма животных и в момент срыва адаптационных механизмов Установлены высоко достоверные связи гормонального и иммунологического статуса собак со степенью напряжения адаптационных систем организма

Дана комплексная оценка гормонального статуса, морфологических и биохимических показателей крови щенков в раннем постнатальном онтогенезе при алиментарной депривации Дано теоретическое обоснование возможности применения

ственный аграрный университет», ГНУ «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» в 1996-2007 гг и на 26 всероссийских, международных, межвузовских, республиканских научно-практических конференциях в гг Москве, Ростове, Воронеже, Краснодаре, Тюмени, Самаре, Саратове, Владивостоке, Новосибирске, Кирове, Уфе, Ларнаке (Кипр) и 9 Московских международных ветеринарных конгрессах (1998-2007)

Основные положения, выносимые на защиту:

1 Динамика показателей интегрирующих систем и индигенной микрофлоры ЖКТ у щенков отражает развитие адаптационного синдрома при стрессе, носит диагностический характер и является основой донозологической диагностики при групповом исследовании животных

2 Динамика функционального состояния сердечно-сосудистой системы, показателей гормонального, иммунного и вегетативного статуса у щенков в раннем по-стнатальном онтогенезе, отражает особенности адаптационного синдрома при алиментарной депривации, а изменения в данных системах могут визуализироваться до развития клинических симптомов и являются основой донозологической диагностики при индивидуальном исследовании

3 Имеются выраженные корреляционные связи между иммунным, гормональным и вегетативным статусом животного Экспресс метод оценки вегетативного статуса животных является объективным способом оценки регуляторных и интегрирующих систем в обеспечении онтогенетических процессов и адекватным способом донозологической диагностики

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликованы 44 научные работы, из них 9 - в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, учебно-методические пособия, в том числе справочник по болезням собак и монография

Личный вклад соискателя. Представленная работа является продуктом исследований автора в период с 1995 по 2007 годы

Автор лично провел большую часть наблюдений, исследований и экспериментов, собрал, систематизировал и проанализировал полученные результаты При этом часть научных трудов опубликована в соавторстве с сотрудниками СКЗНИВИ, Дон-ГАУ и ветеринарными врачами клиники «Центр» Доктора наук Дерезина Т Н , Кар-ташов С Н , Миронова Л П , Клименко А И , кандидаты наук Бутенков А И , Валев Н О , Деева А В , Миронова А А , врачи и инженеры Николаева В А , Левченко Н В , Толстик О Н , Розанова Н Н , Андреев Д А , Кувшинников Д А , Никулина А Ю , Токарева О И в справках представленных в диссертационный совет подтверждают, что их данные в нашу диссертацию не вошли

Научные консультанты - доктор биологических наук, профессор Дмитриев А Ф и доктор биологических наук Карташов С Н оказали неоценимую методическую помощь при проведении исследований, анализе полученной информации, обобщении данных и внедрении в клиническую практику и учебный процесс

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы Работа изложена на 420 страницах компьютерного текста, содержит 110 таблиц, 91 рисунков Библиографический список включает 452 источника, в том числе 162 зарубежных

2. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в лаборатории по изучению патологии воспроизводства и болезней молодняка ГНУ «Северо-Кавказский зональный научно-исстедовательский ветеринарный институт» Россельхозакадемии

Для решения поставленных задач организованы и выполнены 19 научно-производственных опытов на взрослых собаках и щенках породы немецкая овчарка Собаки в опытных группах принадлежали питомникам служебного собаководства МВД РФ и МО РФ

Экспериментальные исследования и клиническая апробация полученных ре-зутьтатов проведены в клиниках «Центр» г Москва и г Ростов-на-Дону, в ветеринарных клиниках г Шахты, г Таганрог, г Красный Сулин, г Сальск Ростовской области, в клинике «Неотложной ветеринарной помощи» г Волгоград В процессе работы в период 1995-2007 гг был выполнен объем исследований приведенный в таблице 1

Табпща !

№ п /п Вид проведенного исследования Всего проведено исследований

1 Обследовано животных клинически, голов 42250

2 Катамнестический анализ 1035

4 Реографические исследования, в т ч

Реокардиография здоровых собак 1500

Реокардиография больных собак 1280

Кардиоинтервалография у здоровых собак 1500

Кардиоинтервалография у больных собак 1280

5 Морг ви, из ни »логические исследования сыворотки крох по отдельным показателям 1200 12720

6 Биохимические исследования крови, из них по отдельным показателям 1200 18240

7 Гормональные исследования 5280

8 Бактериологические исследования 6620

Животных для исследований отбирали по мере поступления в ветеринарные клиники, на группы разделяли по принципу пар аналогов У всех животных проводили клинический осмотр, морфологические и биохимические исследования крови В цельной крови определяли количество эритроцитов и лейкоцитов путем подсчета в камере с сеткой Горяева (ПС Ионов с соавт, 1937), количество гемоглобина ге-моглобинцианидным методом, цветовой показатель по А А Кудрявцеву с соавт (1974), гематокрит (В С Камышников, 2000) в полистирольных трубках путем центрифугирования при 4000 об/мин в течение 15 минут

Из биохимических исследований определяли уровень альбумина в сыворотке крови реакцией с бромкрезоловым зеленым, общий белок в сыворотке крови - биу-ретовым методом (метод Кингслея - Вейксельбаума), мочевину - цветной реакцией с диацетилмонооксином, креатинина - методом Поппера, основанного на цветной реакции Яффе, глюкозы - методом Гультмана в модификации Хиваринена -

Никкила с ортотолуидиновым реактивом, фибриногена - гравиметрическим методом по Рутбергу (В.С.Камышников, 2000), сиаловых кислот - методом Гесса (В.Г. Колб, B.C. Камышников, 1974), С-реактивного белка - методом реакции преципитации в капилляре.

Параметры системной гемодинамики определяли с помощью реографа- полианализатора (рис.1) методом ТПГР по Кубичеку, модифицированного нами. Артериального давление измеряли по разработанной нами методике.

lb 50 :.»..'*

(444-U-J4.....44444444......Й444

¿Шмёт^шинп

шшмт

.мол

«3 ^ ED] L R

ЭКГ 1. ЧСС. цц /ми»

\01 131 15R l№

ЭКГ - I. ПП мс

| щ тпгр но ... д '

0) - Mr

Рис. 1. Окно реографа-полианалшатора при проведении исследования у животного.

Для количественного определения кортикостероидов, тиреоидных гормонов, эстрадиола и прогестерона в биологических жидкостях животных проводили конкурентный вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Диагноз на парвови-русный энтерит подтверждали при помощи HiSens теста фирмы НВ1 Co., Ltd (Корея), основанного на иммунохроматографическом анализе.

Функциональное состояние симпатоадреналовой системы оценивали по уровню экскреции А, НА, ДА и ДОФА флюорометрическим методом в порционной и суточной моче (Э. Ш. Матлина с соавт., 1965) на приборе БИАН-130 (М-800). Сбор мочи проводился на каждом этапе обследования, до и после завершения тестирующей функциональной пробы.

Для оценки состояния вегетативной нервной системы щенков применяли динамическую запись кардиоинтервалограмм при выполнении адреналиновой пробы (в/в введение 0,01 мг/кг адреналина гидрохлорида в виде 0,01% раствора).

Полученные данные обрабатывали статистически с использованием IBM PC и пакета прикладных программ «Biostat».

Результаты собственных исследований н нх обсуждение 3 1 Морфологические и биохимические исследования крови у щенных сук с разным типом кормления

В опытах использовали восемьдесят клинически здоровых сук породы немецкая овчарка в возрасте от 1,5 до 5 лет, принадлежащих частным владельцам Из них нами было сформировано четыре группы контрольная - 20 сук и три опытных группы по 20 голов в каждой Кормление животных контрольной группы осуществляли сухим кормом Pedigree, в объеме согласно наставлению по применению Животные опытных групп находились на обычном «домашнем» рационе весь период исследования Кроме того, животные первой опытной группы не имели дефицита массы тела, животные второй опытной группы имели дефицит массы тела 5-10% (гипотрофия I степени), животные третьей опытной группы имели дефицит массы тела 10-20% (гипотрофия II степени)

Выяснено, что при полнорационном и традиционном кормлении количество гемоглобина и число эритроцитов у сук составляло 155,9±9,81г/л, 6,33+0,12* 1012г/л, и 153,8±9,96г/л, 6,51±1,168Ч012г/л соответственно Тогда как при гипотрофии I и И степени 123,2±12,68г/л, 4,91±1,49* 1012г/л, и 90,01 + 15,57г/л, 3,97±1,327*10|2г/л Показатель гематокрита у животных с I и II степенью гипертрофии был меньше, по сравнению с животными, получающими полнорационные корма, на 11 % и 34 %, что составило 0,33±0,03ед и 0,27±0,04 ед соответственно

СОЭ у животных получавших традиционное кормление составила 4,13±0,93 мм/ч У животных на полнорационном кормлении СОЭ составила 4,04±1,1 мм/ч, что в сравнении с уровнем СОЭ у животных с гипотрофией I степени - 5±1,88мм/ч и II степени - 6,89±3,05мм/ч больше на 25 % и 75 % соответственно

Уровень лейкоцитов у сук, получавших традиционное кормление, 10 4±2,14х 109г/л Тогда как, этот же показатель в группе животных получавших потнорационные корма, был 9,7±1,69x109г/л А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 5,63±1,044 х10чг/л и 7,313,67* 10чг/л соответственно, что на 45% и 29% меньше чем у животных получавших полнорационное кормление Количество эозинофилов у собак, получавших традиционное кормление было 3,68+1,28% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 4,12± 1,08 % А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 2,83±0,21 % и 1,68±0,932 % соответственно, что на 31 % и 40 % меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество палочкоядерных нейтрофилов у собак, получавших традиционное кормление было 7,9±2,27 % Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 6,7+0,991 % А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 11,55+2,17% и 16,23+3,01 % соответственно, что на 71 % и 142 % больше чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество сегментоядерных нейтрофилов у сук, получавших традиционное кормление было 63,05±11,59 % Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма составил 55,9±11,07% А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени поднялся до 61,3±13,18 % и 68,8+14,02 % соответственно, что на 9 % и 23 % больше чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество лимфоцитов у собак, получавших традиционное кормление, было 29,7±7,62% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 21,22±9,61% А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 19,33±2,94 % и 12,2±5,46% соответственно, что на 8% и 42% меньше чем у животных получавших полнорационное кормление

При сравнительном анализе выявлено, что количество моноцитов у сук, получавших традиционное кормление было 3,9±1,06% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 3,8±1,0% А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 4,8±1,56% и 2,5±1,51% соответственно, что на 26% больше и на 34% меньше чем у животных получавших полнорационное кормление

Таким образом, по мере развития гипотрофии отмечается снижение показателей ККК и БКК у собак Вместе с тем, статистически значимых отличий между показателями красной крови у первой и второй группы в данные периоды исследования нами не выявлено

Эти данные совпадают с мнением А Д Адо, 1980, который отмечал анемию и лейкопению у многих животных больных алиментарной дистрофией Недостаточность питания, особенно при дефиците белка и витаминов в рационе всегда сопровождается панцнтопенией Для правильного развития клеток крови требуется достаточное количество витаминов, в частности витамина В12 и фолиевой кислоты В процессе лечения таких животных витамином В одновременно с нормализацией красной крови исчезает и лейкопения (Phillips RW, 1985) Кроме того, известна лейкопения при недостаточности коры надпочечников и гипертиреозе, гипотрофия как фактор хронического стресса являет причиной истощения функции коры надпочечников и гипертиреоза Избыток тиреоидных гормонов приводит к торможению созревания нейтрофилов в костном мозге (Tresnan D В , 1995) Stemel А Е , 1998 наблюдал панцитопению при парасимпатикотонии Картина костного мозга в подобных случаях остается нормальной В происхождении невротических лейкопений допускают участие перераспределительных механизмов, когда зрелые нейтрофилы избыточно накапливаются в пристеночном пуле клеток в сосудах внутренних органов Таким образом, наблюдаемая нами панцитопения при гипотрофии у щенков укладывается в сложный патогенез нейрорефлекторного механизма адаптации обеспечивающего сохранение энергии, что подтверждено дальнейшими исследованиями вегетативного и гормонального статуса животных с алиментарной депривацией

Было выявлено, что для I степени и II степени гипотрофии характерно увеличение активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови соответственно до 104,5±8,67 Е/л, 125,1 ±9,74 Е/л, тогда как в группе животных с полнорационным кормлением эти показатели были 92,03±7,76 Е/л (р<0,001)

Увеличение активности щелочной фосфатазы до 94,73±5,46 Е/л при I степени гипотрофии, до 167,9+6,44 Е/л при II степени гипотрофии (р<0,05), относительно показателей у животных при полнорационном кормлении составило 45% и 158% соответственно

Уровень мочевины у собак, получавших традиционное кормление был 6,11±1,11 ммоль/л Тогда как этот же показатель в группе животных, получавших полнорационные корма был 7,66±1,03 ммоль/л У животных с I и II степенью гипотрофии этот показатель равен 7,34±0,86 ммоль/л и 10,11+0,98 ммоль/л, что в сравнении с показателями животных, получавших полнорационное кормление на 4%

меньше и 31% больше Уровень глюкозы у собак, получавших традиционное кормление был 4,83±0,1 ммоль/л У собак, получавших полнорационное кормление был 4,76±0,29 ммоль/л А в группе жнвошых с гипотрофией I степени и II степени составил 4,89±0,1 ммоль/л и 8,83+0,1 ммоль/л соответственно, что на 2% и 85% больше, чем у животных получавших полнорационное кормление

На втором этапе исследования от сук участвующих в предыдущем опыте были получены щенки При этом щенки находились на идентичном с матерями рационе

У щенков количество гемоглобина (г/л) в группе животных получавших традиционное кормление составляло 93,2±5,57 В группе животных получавших полнорационное кормление этот показатель был выше - 95,68±5,09 При I и II степени гипотрофии количество гемоглобина (г/л) было соответственно на 26% и 35% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление Число эритроцитов у собак, получавших традиционное кормление, было 4,26±0,69, что равно количеству эритроцитов у животных получавших полнорационные корма Тогда как этот же показатель в группе животных с гипотрофией 1 степени и II степени составил 3,21 ±0,84 и 2,76±1,2 соответственно, что на 25% и 35% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Число гематокрита у собак, получавших традиционное кормление, было 0,3+0,02 Тогда как этот же показатель в группе животных, получавших полнорационные корма, был 0,31 ±0,01 А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 0,22±0,03 и 0,2±0,04 соответственно, что на 30% и 36% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество лейкоцитов у собак, получавших традиционное кормление, 10,7±0,35х 109/л Тогда как этот же показатель в группе животных, получавших полнорационные корма, был 9,2±0,3Х 1 09/л А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 5,3±0,78х 109/л и 4,45+1,05х 109/л соответственно, что на 42% и 51% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество эозинофилов у щенков, получавших традиционное кормление, было 7,1+0,17% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 4,5±0,12% А в группе животных с гипотрофией I степени составил 3,4+0,2%, что на 24% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество палочкоядерных нейтрофилов у собак, получавших традиционное кормление, было 10,4±0,13% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 5,8±0,11% А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 18,4±0,39% и 20,4±1,01%, что на 217% и 251% больше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество сегментоядерных нейтрофилов у собак, получавших традиционное кормление, было 51,1 ±1,1% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 53,7±0,74% А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 62,3±1,22% и 65,1±2,08%, что на 16% и 21% больше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество лимфоцитов у собак, получавших традиционное кормление, было 25,4+0,76% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 33,4+0,69% А в группе животных с гипотрофией I степени и II

степени составил 12,8±0,84% и 12,4±1,42%, что на 61% и 62% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

Количество моноцитов у собак, получавших традиционное кормление, было 3,8±0,19% Тогда как этот же показатель в группе животных получавших полнорационные корма был 3,5±0,14% А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 3,1+0,22% и 0,6+0,29%, что на 11% и 82% меньше/, чем у животных получавших полнорационное кормление

Таким образом, отмечается снижение показателей ККК у собак по мере развития гипотрофии Вместе с тем, не выявлено статистически значимых отличий между показателями ККК у первой и второй группы в данный период исследования Также, по мере развития гипотрофии у щенков отмечается развитие лейкопении Особенно выражено снижение абсолютного количества лимфоцитов, их процентное количество отображало трехкратное снижение в группе с гипотрофией второй степени по отношению к здоровым животным, но, учитывая нарастающую лейкопению, абсолютную лимфопению, общее количество лимфоцитов было еще меньше

Выяснено, что для щенков I и II степени гипотрофией характерно увеличение активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови соответственно до 134,69+6,97 Е/л, 144,81+8,13 Е/л, тогда как в группе животных с полнорационным кормлением эти показатели были 112,35+5,41 Е/л (р<0,001) То есть показатели АлАТ при гипотрофии были на 32,5 Е/л выше, чем в группе животных с полнорационным кормлением

Увеличение активности щелочной фосфатазы с 186,12±5,08 Е/л при I степени гипотрофии, до 202,07+7,26Е/л при II степени гипотрофии (р<0,05), относительно показателей у животных при полнорационном кормлении составило 161% и 175% соответственно

Уровень мочевины у щенков, получавших полнорационное и традиционное кормление был 4,27±0,19 ммоль/л Тогда как этот же показатель в группе животных с гипотрофией 1 и II степени был соответственно 6,74±0,26 ммоль/л и 6,47±0,49 ммоль/л Уровень глюкозы у щенков, получавших традиционное кормление был 4,78±0,18 ммоль/л У животных, получавших полнорационное кормление был 4,56+0,17 ммоль/л А в группе животных с гипотрофией I степени и II степени составил 4,5±0,09 ммоль/л и 3,87±0,09 ммоль/л соответственно, что на 8% и 16% меньше, чем у животных получавших полнорационное кормление

В зависимости от типа кормления происходило снижение альбумина в большей степени, чем снижение у-глобулинов при незначительных изменениях а- и р-глобулинов в сыворотке крови Уменьшение содержания альбумина происходило из-за снижения протеинсинтетической функции гепатоцитов Тогда как снижение уровня у-глобулинов и менее выраженное Р-глобулинов, по всей видимости, происходило в силу резкого снижения уровня лейкоцитов, в том числе и лимфоцитов у животных с гипотрофией первой и второй степени, снижении продукции 1§А, 18М

3 2 Гормональные исследования у щенков с разным типом кормления в раннем постнатальном онтогенезе

Гормональный статус у щенков в раннем постнатальном онтогенезе характе-риз>ется большой лабильностью В связи с высокой интенсивностью постнатальной дифференцировки тканей в 5-7-дневном возрасте происходит активное поглощение гормонов, и их уровень снижается Для животных первого месяца жизни характерна значительная интенсивность роста и развития После месяца уровень гормонов щитовидной железы резко снижается

Как видно из таблицы 2 у 1-3 дневных щенков полученных от сук на полнорационном кормлении уровень Тз и Т4 был самым высоким за весь период исследования и составил 8,12±0,32 нмоль/л и 168,29±2,74 нмоль/л, соответственно Соотношение Т/Г), оказалось также самым высоким и составило 4,83±0,23 Тз нмоль/л При исследовании в 5-дневном возрасте уровеньТз резко упал до 2,01 ±0,12 нмоль/л, в период с 10 по 25-дневный возраст у различных щенков в этой группе уровень Тз колебался от 2,45±0,07 нмоль/л до 2,68±0,06 нмоль/л, а после 30 дней, в период отъема уровень Т3 резко повышался в два раза, достигая 4,6±0,09 нмоль/л Но уже в два месяца он снова падал до фонового 2,05±0,10 нмоль/л, и в дальнейшем не отмечаюсь резких сдвигов Т3 у щенков в этой группе

Динамика Т4 была сходна с таковой Т3 отмечалось снижение Т4 с 10 по 15-дневный > различных щенков в этой группе до 104,29±4,91 Начиная с месяца, наб подаюсь достаточно резкое повышение до 157,64±10,92 нмоль/л

Табтца 2

Концентрсчрт гормонов щитовидной жетезы в сыворотке крови щенков, по7) ценных от сук на почнорацнонном кормчешш в возрастном

аспекте

Возраст Тз, нмоль/л Т4, нмоль/л Т/Г4 100,%

1-3 дня 8,12±0,32 168,29±2,74 4,83±0,23

5-7 дней 2,01±0,12*** 131,61±5,33*** 1,53±0,35***

10-15 дней 2,45±0,07** 104,29±4,91** 2,35±0,18

20-25 дней 2,68±0,06* 121,98±8,79 2,20±0,21

1 мес 4,6±0,09** 157,64±10,92 2,9±0,32

2 мес 2,05±0,10** 52,68±4,81*** 3,89±0,47***

3 мес 1,59±0,11** 41,2±2,87* 3,86±0,47

4 мес 2,05±0,23* 62,98±3,15*** 3,26±0,54

5-6 мес 2,45±0,16* 68,26±5,83 3,59±0,82

7-9 мес 2,83±0,31* 88,63±3,38** 3,19±0,37

10-12 мес 2,58±0,09* 78,16±5,40 3,30±0,28

* р<0 05 ** р<0,01, *** р<0 001 разница статистически достоверна в сравнении с предыдущим показателем После месячного возраста происходит более быстрое падение Г4, чем Тз Уровень Т4 снижается с 157,64±10,92 нмоль/л до 52,68±4,81 нмоль/л, при этом отношение Т3/Т4, повышается до 3% к месячному возрасту и уже не снижается ниже этого значения до конца периода исследования

Имеются отличия в динамике гормонов щитовидной железы у щенков находящихся на полнорационном и традиционном кормлении Так нами обнаружено, что у щенков на традиционном кормлении в первые дни жизни уровень Т3 и Т4 был выше на 5% и 7,6%, и составил 8,53±0,35 нмоль/л и 181,08±5,25 нмоль/л соответственно, при этом уже к 5-дневному возрасту их количество, также как и в группе

щенков на полнорационном кормлении, снижается, и резко увеличивается только в период отъема, после чего опять снижается, но не столь выражено как Т3 При этом уровень Т3 и Т4 в период с 5-7 день у щенков на традиционном кормлении оказался на 5,5% и 8,8% выше, чем у щенков на полнорационном кормлении, и составил 2,12±0,21 нмоль/л и 143,19±6,27 нмоль/л соответственно (табл 3)

Табчица 3

Концентрация гормонов щитовидной железы в сыворотке

Возраст Т3, нмоль/л Т4, нмоль/л Т3/Т4 100,%

1-3 дня 8,53±0,35 181,08±5,25 4,71±0,11

5-7 дней 2 12±0 21*** 143,19±6,27*** 1,48±0,13***

10-15 дней 2,59±0,08** 111,07±2,29** 2,33±0,12

20-25 дней 2,88±0,12** 131,62±8,79 2,19±0, 27

1 мес 2,69±0,10 121,25±9,51 2,22±0,24

2 мес 2,22±0,25** 56,05±4,47*** 3,96±0,60***

3 мес 1,70±0,14** 43,75±2,81* 3,86±0,48

4 мес 2,12±0,09* 46,70±3,83*** 4,18±0,54

5-6 мес 2,31±0,18* 65,77±5,47 3,55±0,73

7-9 мес 2,68±0,18 71,68±4,12** 4,03±0,46

10-12 мес 2,57±0,25 71,38±4,17 3,36±0,23

* р<0,05 ** р<0,01, *** р<0 001 разница статистически достоверна в сравнении с предыдущим показателем

С 10 по 15 день уровень Тз и Т( у щенков на традиционном кормлении был на 5,7% и 6,5% выше, чем у щенков на полнорационном кормлении, и составил 2,59±0,08 нмоль/л и 111,07±2,29 нмоль/л соответственно В последующие дни наблюдалась положительная тенденция в росте уровня гормонов щитовидной железы А после 30 дней, в период отъема уровень Т3 и Т4 снижаются до 2,69±0,10 нмоль/л и 121,25±9,51 нмоль/л, что в процентном соотношении с группой полнорационного кормления указывает на снижение уровня Т3 и Т4 на 7,6% и 6,7% соответственно В 3 месячном возрасте в крови щенков понижался уровень тиреоидных гормонов (Т3 с 2,22±0,25 до 1,70±0,14, а Т4 имело более интенсивное снижение показателей с 56,05±4,47 по 43,75±2,81), что в сравнении с первой группой составило Т3 на 7%, а Т4 на 6,2% Интересно отметить, что если до 4-месячного возраста динамика гормонов щитовидной железы практически была идентична динамике у щенков на полнорационном кормлении, но отличалась повышением показателей на 4-10%, то после 4 месяцев отмечалось снижение показателей гормонального статуса щитовидной железы Так в период с 6-месячного по 12-месячный возраст у щенков на традиционном кормлении отмечались следующие показатели Т3 3,31±0,18 нмоль/л, 2,68±0,18 нмоль/л, 2,57±0,25 нмоль/л, что было на 5%, 6,3%, и 4,7% ниже, чем в соответствующем возрасте у щенков на полнорационном кормлении Эта же закономерность наблюдалась и в динамике Т4, уровень которого в 4-х, 6-и, 9-и, 12-и месячном возрасте составил 46,70±3,83 нмоль/л, 65,77±5,47 нмоль/л, 71,68±4,12 нмоль/л и 71,38±4,17 нмоль/л соответственно, что было на 17,3%, 5%, 17,3% и 9% ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении

Таким образом, до 4 месяцев уровень гормонов щитовидной железы у щенков на традиционном кормлении выше на 5-10%, чем у щенков на полнорационном кормлении, но после 4 месячного возраста происходит снижение уровня гормонов

щитовидной железы на 5-17% у щенков на традиционном кормлении в сравнении с полнорационным кормлением

У щенков в возрасте 1-3 суток, отмечался высокий уровень кортизона_и половых гормонов Эти показатели в группе животных на полнорационном кормлении составляли эстрадиола - 0,49±0,03 нмоль/л, прогестерона 2,27±0,19 нмоль/л, тестостерона 2,11±0,08 нмоль/л, кортизола 67,02±11,22 нмоль/л Но уже в последующие 3 дня жизни показатели кортизола снижались до 40,07±5,93 нмоль/л Снижались также показатели и других стероидных гормонов эстрадиола до 0,32±0,04 нмоль/л, прогестерона до 1,22±0,20 нмоль/л, тестостерона до 1,45±0,13 нмоль/л Интенсивное снижение продолжалось до 20 - 25 дня и на данном периоде имело максимальное снижение половых гормонов и кортизола На 30 день в период отъема уровень кортизона и половых гормонов начинал повышаться

У щенков в возрасте два и три месяца концентрация кортизола и тиреоидных гормонов снижалась Установлено, что кортикостероидная и тиреоидная системы регуляции взаимозависимы (Эпштейн Н Л , 1970) Снижение уровня кортизола в период максимального увеличения живой массы щенков можно считать физиологически целесообразным, поскольку, кортикостероиды способны ингпбпровать репликацию клеток, синтез гормона роста, что согласуется с данными зарубежных авторов (Уоигщ V Я , 1980)

Возраст щенков 10-12 месяцев соответствует периоду полового созревания В организме формируется дополнительная мотивация - половая доминанта, которая сопровождается изменениями во всем организме животных В крови щенков повышается уровень кортизола, гормонов щитовидной и половых желез

Концентрация гормонов у щенков с 10-месячного возраста (период физиологической зрелости) соответствует установившемуся уровню метаболизма, характеризующемуся снижением энергии роста и биосинтезирующей активности тканей

Увеличение и стабилизация концентрации стероидных гормонов (половых и кортизола) установлены в крови щенков в 13-18 месяцев Это указывает на завершение формирования половой функции и готовность животных к оплодотворению Содержание гормонов щитовидной железы снижалось

Отражением адаптивных перестроек и возрастания эндоцитоза гормонов тканями является снижение уровня кортизола на 21,17 нмоль/л (р<0,05) и увеличением трийодтиронина и тироксина - на 1,05 нмоль/л (р<0,05), 1,15 нмоль/л соответствен' но у щенков в возрасте 12 месяца по сравнению с 6 месячными животными Стабильный уровень половых гормонов у щенков этого возраста свидетельствует об их нормальной репродуктивной функции

Таким образом, характер колебаний уровня гормонов в крови щенков в пост-натальном периоде отражает всю совокупность физиологических реакций, поддерживающих состояние гомеостаза в разные возрастные периоды

У щенков в группе для кормления которых использовались традиционные корма в возрасте 1-3 суток по сравнению с показателями группы полнорационного кормления уровень эстрадиола, прогестерона и кортизола увеличивался на 2% в первом случае , 2,8% во втором и 8,7% в третьем и составил - 0,50±0,04 нмоль/л, 2,32±0,17 нмоль/л, 73,39±10,13 нмоль/л Что же касается тестостерона, то его уровень снижался на 2,4% и составлял на 2,06±0,06 нмоль/л Но уже в последующие 3 дня жизни показатели кортизола снижались до 43,96±5,49 нмоль/л Снижались также показатели и других стероидных гормонов эстрадиола до 0,33±0,02 нмоль/л, прогестерона до 1,25±0,18 нмоль/л, тестостерона до 1,49±0,14 нмоль/л Но при

сравнении с показателями группы животных для кормления которых использовались полнорационные корма, отмечался рост уровня гормонов, который составлял эстрадиола 3%, прогестерона 2,4%, тестостерона 2,8% и кортизола 8,8% Подобно тому, как и в группе с полнорационным кормлением, стремительное снижение уровня гормонов продолжалось до 20 - 25 дня и на данный период имело максимальное снижение половых гормонов и кортизола Их значения составили эстради-ол 0,11±0,05 нмоль/л, прогестерон 0,68±0,19 нмоль/л, тестостерон 0,83±0,02 нмоль/л, кортизола 29,04±4,38 нмоль/л Что превысило показатели предыдущей группы на 9% у эстрадиола, 3% у прогестерона, 4,8% у тестостерона и 9,1% у кортизона На 30 день в период отъема и в последующий период времени уровень кортизона и половых гормонов начинал повышаться без существенных колебаний

Таким образом, у щенков на традиционном кормлении отмечается некоторое повышение уровня гормонов надпочечников по сравнению с традиционным кормлением в начале жизни, с последующим снижением кортикостероидов к 4 месяцам по сравнению с полнорационным кормлением, что может отражать напряжение в системе гипоталамус-гипофиз-надпочечники При гипотрофии первой степени эти изменения выражены более ярко При гипотрофии второй степени происходит резкое снижение показателей как кортикостероидов, так и половых гормонов Кроме того, дальнейшее снижение уровня кортизола после 4 месяцев жизни более чем в два раза может свидетельствовать об истощении не только гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси, но и всех осей гипоталамо-гипофизарной системы

3 3. Микробная сукцессия кишечника щенков полученных от сук с разным

типом кормления

С первого дня у щенков отмечены различия в количественном и качественном составе микрофлоры кишечника Так у щенков от сук на традиционном кормлении, в 100% случаев фецес содержал непатогенные эшерихии, при этом их количество было 5,93±0,694, тогда как у щенков от сук, получавших «Pedigiee», эшерихии не удалось выделить от одною щенка, при этом их титр у трех особей был ниже 0,5 lg/r фекалий, а разброс значений в выборке составил от 0,28 до 9,27 lg/r фекалий Известно, что непатогенные эшерихии являются нормальной микрофлорой кишечника у щенков первого дня жизни Выделение этих бактерий в большем количестве у животных второй группы нельзя рассматривать, как дисбактериоз или другую патологию Энтерококки были обнаружены в посевах из фекалий обеих групп, при этом в первой группе они были выделены у 17 щенков (65%), а во второй группе у 15 щенков, что составило 82,2%) Эти бактерии высевались в титрах от 1,65 до 6,58 (СКО -0,392 и 0,336 соответственно) Тем не менее, при сравнении 2-х этих групп выявлены статистически значимые отличия в количестве энтерококков в фецесе Лактобак-терии высевались в 74,3% и 49,6% от щенков первой и второй групп соответственно, также обнаружены статистические различия в содержании лактобактерий у щенков первого дня жизни Так в первой группе их количество колебалось от 0 до 11,14 lg/r фекалий, с СКО=0,561, тогда как во второй группе от 0 до 3,12, при СКО=0,864 Бифидумбактерии у щенков первого дня жизни не высевались

Кроме того, у одного щенка 2 группы были выделены клебсиеллы в количестве 0,2 lg/r фекалий и гемолитические эшерихии у 2 щенков в количестве 0,96 и 0,49

Таким образом, у щенков первого дня жизни полученных от сук при кормлении полнорационным кормом и кормлении традиционным кормом, при бактериологическом исследовании фецеса выявлены статистически значимые различия, патогене-

тическое значение которых не вполне ясно, так как развитие щенков в обеих группах происходит адекватно Вместе с тем индикация во второй группе животных условно патогенных микроорганизмов может отражать предрасположенность к бактериальным поражениям желудочно-кишечного тракта

3 4 Результаты применения методик донозологической диагностики 3 41 Резузыпаты изучения имиуноюгического стапцсау щенков с гипотрофией

разной степени тяжести Анализ изучения иммунной системы показал, что процентное снижение Т-лимфоцитов с 39,51±1,8 до 23,53±2,4 у щенков на традиционном кормлении, по сравнению с щенками на почнорацнонном кормлении, сопровождалось гораздо более выраженными изменениями абсолютною количества Т-лимфоцитов с 0,91±0,035х107л до 0,8±0,051 *109/л Эффекты гипотрофии проявились в выраженной лейкопении и лимфопении, количество Т-лимфоцитов периферической крови снижалось до 23,53±2,4 при гипотрофии первой степени и увеличилось до 38,96 ± 2,7% при гипотрофии второй степени Однако на фоне лимфопении нами обнаружено снижение абсолютного содержания лимфоцитов до 0,45±0,069хЮч/л при гипотрофии первой степени и до 0,27±0,1хЮ'7л при гипотрофии второй степени Соотношение Т-хелперов к Т-супрессорам также изменялось, и по мере развития гипотрофии снижалось с 2,57 до 1,79 Анализ показателей, характеризующих гуморальное звено иммунитета у щенков 6-ти месячного возраста, выявил, что относительное содержание в крови В-лимфоцитов у щенков на традиционном кормлении по сравнению с щенками на полнорационном кормлении снижалось с 25,7±3,3 до 22,61 ±4,2%, что в абсолютных значениях составило 0,51±0,01x10% и 0,45±0,039х107л соответственно Разница в общем количестве лейкоцитов у щенков первой и второй группы не имела статистических значимых отличий Отдельные популяции лимфоцитов у щенков на традиционном кормлении статистически отличались от этих показатечей у щенков на полнорационном кормлении, а сдвиги эти были в сторону показателей, характерных для щенков гипотрофиков

3 4 2 Резузыпаты изучения состояния сердечно-сосудистой системы и вегетативного статуса V щенков с гипотрофией разной степени тяжести

Анализ функционального состояния симпатоадреналовой системы (САС) показал, что щенки с различным исходным вегетативным тонусом в сердечнососудистой системе отличаются по уровню экскреции КА и их предшественников У 30% щенков, находящихся на полнорационном кормлении, с преобладанием симпатических влияний на сердечный ритм в условиях покоя отмечается уровень секреции адреналина 9,83±0,37, что несколько выше, чем у животных с эйтонией в этой же группе Между щенками с эйтонией и ваютонией на полнорационном кормлении не отмечалось статистически значимых отличий в уровне адреналина В уровне но-радреналина имелись более выраженные изменения так у щенков с симпатикотони-ей уровень секреции норадреналина оказался на 10% выше, чем у щенков с эйтонией, и на 20% выше, чем у щенков с ваготонией (р<0,05) Очень интересная динамика в показателях предшественников адреналина и дофамина, так уровень дофамина у щенков с симпатикотонией оказался на 20%, а уровень ДОФА - на 58% ниже, чем у собак с ваготонией (р<0,01) Таким образом, именно показатели предшественников адреналина и норадреналина имели наибольшие различия у щенков с разным типом вегетативной активности

На фоне относительно высоких значений адреналина у щенков с симпатик тоническим вариантом исходного вегетативного тонуса (ИВТ), н находящихся i традиционном кормлении отмечалось снижение экскреции с мочой норадреналш на 21%, по сравнению с животными, находящимися на полнорационном кормлеши Такая же тенденция была отмечена и у щенков с эйтонией Если уровень норадрен. лина у щенков в первой и второй группе с нормотонией не имел статистических о линий, то уровень норадреналина был на 17% ниже в группе животных с традищ о иным кормлением Поскольку ваготоников в группе животных с традиционны кормлением не было, то не было и сравнительного анализа Отмечены резкие отл1 чия в уровне предшественников адреналина и норадреналина у щенков первой второй групп Уровень дофамина был на 20% ниже у щенков во второй группе симпатикотонией и на 30% ниже во второй группе у щенков с эйтонией, и составл соответственно 128,29±6,41 нг/мин и 109,33±4,73 нг/мин у симпатотоников 141,17±8,35 нг/мин и 111,40±6,21 нг/мин у щенков эйтоников А вот уровень Д ФА был соответственно 9,35±1,01 нг/мин и 13,42±1,09 нг/мин у симпатотонико 8,17±1,33 нг/мин и 14,34±4,80 нг/мин у щенков эйтоников

Отношение норадреналина к адреналину внутри групп щенков с одинаковы кормлением отличалось слабо, но в группе животных на традиционном кормлени было на 30-50% ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении

Дальнейший анализ уровня катехоламинов у щенков с гипотрофией первой второй степени показал резкое снижение предшественников адреналина и норадр налина в экскретируемой моче Так у щенков с гипотрофией первой степени ур вень дофамина был 95,57±3,27 нг/мин, 91,33±5,12 нг/мин, 85,01±5,84 нг/мин соо ветственно у щенков с симптатико-, эй- и ваготонией Интересно отметить, что есл в группе щенков на полнорационном кормлении уровень предшественников адрен лина и норадреналина был наиболее высок у ваготоников, то при гипотрофии у в готоников отмечался наименьший их уровень Это связано с тем, что в группе полнорационным кормление высокое содержание предшественников катехоламино у ваготоников связано с их более экономным использованием, и, по всей видим сти, отображает особенности типа ЦНС В группе ваготоников с гипотрофией ур вень предшественников отображает их истощение При гипотрофии второй степен истощение адренергических структур достигало еще больших значений и составил соответственно 81,47±7,62 нг/мин и80,14±9,11 нг/мин при ваготонии и эйтонии

Таким образом, ваготония при полнорационном кормлении и гипотрофи имеет разную природу, в первом случае это особенный тип ЦНС и мы имеем дело истиной ваготонией, во втором случае речь идет об истощении адренергически структур

Тестирующая функциональная проба в виде дозированного внутривенног введения адреналина позволила выявить реактивность и функциональные резерв С АС в исследуемых группах

Проведенный анализ показал, что характер реакций САС на адреналинову! пробу у щенков зависит от ИВТ, фонового уровня экскреции катехоламинов и имее ярко выраженные отличия у щенков с разным типом кормления (рис 1) Так, у ще ков-симпатотоников при полнорационном кормлении на фоне относительно выс mix фоновых значений экскреции норадреналина (9,83±0,37 нг/мин) в ответ на адр налиновую пробу происходит ее прирост, составляющий до 11,75±1,54 нг/мин, чт на 16% выше, по отношению к фону Повышается и экскреция норадреналина 20,41±1,94 нг/мин до 22,71±2,32 нг/мин, то есть на 10% При этом выделение ДОФ

поднимается с 9,35±1,01 нг/мин до 14,31 ±3,43 нг/мин, что на 65% выше фонового уровня функционирования САС.

Полнорационное Традиционное кормление Гипотрофия 1 [ нпотрофин 2 степеней

Э в э в с з ОА »НА ОДА ОДОФА

Рис.2. Изменение экскреции катехоламинов и ДОФА в ответ на адреналиновую пробу у и\енков с разным типом кормления и исходным вегетативным тонусом в сердечно-сосудистой системе (%).

Примечание: С - симпатикотония; Э - Эйтония; В - ваготония

У щенков-эйтоников этой же группы происходит повышение адреналина и норадреналина на 8,31±0,76 нг/мин и 12,24±0,98 нг/мин; 18,15± 1,68 нг/мин и 39,41±2,97 нг/мин, соответственно, что выше на 32% и 15,9%. Тогда как уровень ДОФА поднялся с 13,42±1,09 нг/мин до 24,42±2,89 нг/мин, что на 45% выше, чем фоновый уровень.

У щенков-ваготоников отмечался самый высокий уровень прироста катехола-минов и их предшественников с 8,33±0,34 нг/мин до 15,71±1,65 нг/мин адреналина, с 22,71±2,32 нг/мин до 24,31 ± 1,95 нг/мин норадреналина и с 21,24±3,21 нг/мин до 27,38±3,94 нг/мин ДОФА, что на 47%, 69% и 23% выше, чем фоновый уровень. Таким образом, реакцию САС на адреналиновую пробу у щенков, получавших полнорационное кормление, можно назвать адекватной, при данной реакции происходят повышение как катехоламинов, так и их предшественников, что говорит о высокой функциональной и потенциальной способности САС.

Несмотря на достоверно более высокий фоновый уровень экскреции адреналина и норадреналина у щенков с гипотрофией первой степени, значения катехоламинов и их предшественников после адреналиновой пробы имеют отрицательную динамику, уменьшаясь по сравнению с фоном.

Таким образом, в ответ на адреналиновую пробу у щенков с гипотрофией первой степени отмечается парадоксальная реакция САС, не происходит повышение уровня катехоламинов и их предшественников, а отмечается их снижение. На наш взгляд это отображает не только истощение САС, но еще и компенсаторные изменения в ее работе, направленные на сохранение энергии и более экономное ее расходование, адреналиновый стимул, или любая другая стрессовая реакция приводит не к стимуляции САС, а к ее торможению.

При гипотрофии второй степени эти изменения в работе САС еще более выражены, так у этих щенков не отмечается исходного симпатического тонуса соответствующего симпатикотонии, а в ответ на адреналиновый стимул САС отвечает торможением выработки катехоламинов и их предшественников во всех случаях

У щенков-эйтоников уровень секреции адреналина снижается с 9,99±0,56 иг/мин до 8,21±0,56 нг/мин, секреции норадреналина с 14,56±1,90 нг/мин до 7,38±1,90 нг/мин, ДОФА с 7,51+1,10 нг/мин до 6,14+1,10 нг/мин, что ниже, чем фоновый уровень на 20%, 100%) и 14% соответственно

У щенков с низким ИВТ, в ответ на адреналиновый тонус отмечается 15% повышение уровня секреции адреналина при снижении на 70% уровня норадреналина и на 16% ДОФА, что составило 6,32±0,87 нг/мин, 10,41±1,53 нг/мин, 5,41±1,76 нг/мин соответственно

Параллельно с анализом функциональной активности САС нами оценивались и гемодинамические параметры, позволившие выявить различия в состоянии ССС в зависимости от типа кормления и особенностей вегетативной регуляции сердечного ритма Так, в покое у щенков на полнорационном кормлении с симпатикотониче-ским вариантом ИВТ, показатели УОК и МОК выше, чем в состоянии нормо- и ва-готонии и составили 5,1 ±0,45 мл, 0,714±0,03 л, тогда как у щенков-эйтоников 4,6±0,21 мл, 0,519±0,07 л , щенков ваготоников 4,4±0,25 мл , и 0,479+0,06 л соответственно (р<0 05 и р<0 01)

Аналогичные различия наблюдаются и в отношении УИ и СИ, которые у симпатотоников выше и составляют 13,4+0,76 мл/м" и 2,1±0,01 л/мин/м" по сравнению с группой эйтоников и ваготоников, у которых этот показатель оказался равным 12,4+0,54 мл/м" и 1,7+0,03 л/мин/м, 11,2+0,12 мл/м2 и 1,5+0,09 л/мин/м2 2 (р<0 05 и р<0 01) При этом значения УПСС, уровень которого обуславливается состоянием периферического сосудистого русла, оказался ниже, что может указывать на физиологическую сбалансированность между периферическим сопротивлением сосудов и МОК, которые находятся в обратно пропорциональной связи (Р А Калюжная, 1973) Относительное снижение УОК, МОК и СИ у эйтоников и ваготоников в этой группе, сопровождающееся более высокими значениями ОПСС может свидетельствовать о преобладающей активности сосудистого компонента в регуляции АД

У щенков на традиционном кормлении с симпатикотоническим вариантом ИВТ, показатели УОК и МОК выше, чем в состоянии нормо- и ваготонии и составили 5,0+0,65 мл , 0,685+0,12 л , тогда как у щенков-эйтоников 4,5+0,24 мл, 0,517+0,02 л , щенков ваготоников 4,3+0,25 мл , и 0,455+0,08 л соответственно (р<0 05 и р<0 01) На полнорационном кормлении эти показатели оказались несколько выше, чем при традиционном кормлении, но достоверные отличия отмечены только в МОК (р<0 05) УИ и СИ у щенков на традиционном кормлении также, как и в предыдущей группе у щенков симпатотоников выше, чем у эйтоников, и составили у симпатотоников 13,2+0,89 мл/м2 и 1,9+0,04 л/мин/м2, у эйтоников и ваготоников этой же группы эти показатели оказались равными 11,1+0,55 мл/м" и 1,6+0,06 л/мин/м, 10,2+0,14 и 1,5+0,07 л/мин/м2 (р<0 05 и р<0 01)

Несмотря на более высокий ИВТ и показатели вариабельности сердечного ритма, интегральные показатели производительности ССС у щенков на традиционном кормлении оказались несколько ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении, по всей видимости, это связано с увеличением УПСС уровень, которого оказался выше, чем в предыдущей группе и составил 3105,5+3873, 3429,0+3973, 3543,1+342,1 у е , у симпатотоников, эйтоников и ваготоников соответственно Сни-

жение УОК, МОК и СИ в группе щенков на традиционном кормлении, сопровождающееся более высокими значениями УГ1СС, по всей видимости, также свидетельствует о более высокой активности сосудистого компонента в регуляции АД, что увеличивает нагрузку на сердце

У щенков с гипотрофией первой степени и симпатикотоническим вариантом ИВТ показатели УОК и МОК выше, чем в состоянии эйтонии, и составили 5,7+0,69 мл , 0,889+0,12 л , тогда как у щенков-эйтоников 5,0+0,46 мл, 0,690+0,03 л У щенков с гипотрофией первой степени производительные показатели ССС оказались выше, чем в предыдущих двух группах, что, впрочем, соответствует самым высоким показателям катехоламинов у щенков этой группы, высокому ИВТ САС, и высокой вариабельности сердечного ритма Ваготонического ИВТ в данной группе животных мы не наблюдали УИ и СИ у щенков с гипотрофией первой степени также оказались самыми высокими и составили 13,9+0,99мл/м2 и 2,6+0,03 л/мин/м", у эйтоников этой же группы эти показатели оказались равными 13,1+0,71 мл/м" и 1,9+0,03 л/мин/м, 10,2+0,14 и 1,5+0,07л/мин/м2 (р<0 05 ир<001)

Необходимо отметить, что более высокие показатели МОК, СИ у симпато-тоников с гипотрофией первой степени связаны также с самой высокой частотой сердечных сокращений, то есть повышение производительности ССС достигается самым неблагоприятным способом У щенков с гипотрофией второй степени ИВТ соответствующий симпатикотонии отсутствует Все показатели системной гемодинамики оказались ниже, чем в предыдущих группах Так, УОК и МОК щенков-эйтоников 4,2+0,24 мл, 0,453+0,02 л , эти показатели у щенков-ваготоников оказались еще ниже и были 3,7+0,25 мл, 0,388+0,092 л , что оказалось значительно ниже, чем у щенков во всех остальных группах

Таким образом, у щенков с разным типом кормления производительные показатели ССС претерпевают закономерные изменения, от их увеличения при гипотрофии первой степени, к резкому снижению при гипотрофии второй степени

3.4 3 Характеристика исходного вегетативного тонуса в сердечно-сосудистой системе у щенков 1,5 мес. возраста с разный типом коричения

Комплексный анализ показателей ИВТ животных первой и второй групп по-звотил нам установить, что индекс напряжения (ИИ) от 100 до 200 у е характерен дтя здоровых животных, находящихся в состоянии покоя, и соответствует эйтонии, а интервал от 200 до 300 у е более характерных для щенков в условиях стресса (недостаточное кормление), характерен для более высокой активности симпатической нервной системы (рис 3)

Для оценки состояния вегетативной нервной системы щенков применялась динамическая запись кардиоинтервалограмм при выполнении адреналиновой пробы (в/в введение 0,01 мг/кг адреналина гидрохлорида в виде 0,01% раствора) Исходный вегетативный тонус у щенков, получавших полнорационный корм, то есть без пищевого стресса, при оценке ИН оказался в пределах 100-200 условных единиц Такой вегетативный тонус у щенков в возрасте 1,5 месяцев, по всей видимости, является стереотипным для абсолютно здоровых щенков и может рассматриваться как нормальный, а состояние вегетативной нервной системы рассматривать как эйтони-ческое (эйтония - сбалансированный тонус вегетативной нервной системы) При исходной эйтонии и отсутствии стресса в ответ на адреналиновую пробу у этих щенков отмечалось резкое повышение тонуса симпатической нервной системы, а ИН увеличивалось в 1-2 раза, соответственно ИН?/ ИН( колебалось у здоровых щенков в

пределах от 1-го до 2-х Такие показатели можно рассматривать как исходную эйто-нию с нормальной вегетативной реактивностью

500 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0

Рис 3 Динамика ИН

Вместе с тем у 5% щенков без стресса отмечался исходный вегетативный тонус ниже 100 условных единиц, но вегетативная реактивность у этих щенков такая же, как и при исходной эйтонии В пределах установленной нами концепции мы рассматривали такие показатели как исходную ваготонию с нормальной реактивностью

У 5% щенков с пищевым стрессом отмечаются показатели характерные для исходной эйтонии, но в отличие от щенков без стресса, у них отмечается снижение вегетативной реактивности, а И1Ь/ ИН| всегда ниже единицы Таким образом, снижение вегетативной реактивности при адреналиновой пробе и исходной эйтонии позволяет убедительно отличать щенков без стресса и щенков, находящихся в состоянии стресса Дальнейшие отличия основной массы щенков с пищевым стрессом первой степени более убедительны и в клинической ситуации будут вызывать меньшие сомнения Так у 95% таких щенков (практически всех) отмечается исходная симпатикотония, то есть исходный ИН значительно выше 200 условных единиц, с выраженной ваготонической реакцией на адреналиновую пробу При этом происходит резкое снижение ИН2, а ИН2/ ИН: значительно снижается ниже 0,1 Поскольку таких показателей у щенков без стресса вообще не встречается, можно рассматривать выраженную ваготонию на адреналиновую пробу как основной диагностический признак стресса любой этиологии, а не только кормовой При этом в дальнейшем у щенков не отмечается симпатической реакции на введение адреналина То есть, стресс приводит к парадоксальным реакциям на адреналиновую пробу, что и является диагностическим признаком этого физиологического состояния (рис 4)

стресс стресс адаптации адалатации

Рис 4 Динамика ИНт/ИН/

У щенков в возрасте 1,5 мес наблюдается неустойчивость вегетативной регуляции сердечного ритма, направленность сдвигов которой зависит от полноценности кормления животных При полнорационном кормлении у щенков в подавляющем большинстве наблюдается сбалансированное влияние симпатической и парасимпатической системы на ССС, а в ответ на адреналиновую пробу происходит усиление работы миокарда, что сопровождается увеличением УОК и МОК При традиционном кормлении у щенков в ответ на адреналинову ю пробу развивается вазотоническая реакция, сопровождающаяся снижение УОК и МОК при одновременном увеличении УПСС

При традиционном корлпенип и гипотрофии первой степени у щенков преобладает симпатические влияния на ССС, тогда как при гипотрофии второй степени преобладает парасимпатической влияние САС на ССС

У щенков с гипотрофией первой степени и преобладанием симпатических влияний на сердечный ритм отмечается более высокий уровень экскреции норадреналина и снижение дофамина и ДОФА по сравнению с эйтоникамп и ваготоннками (р<0 05, р<0 01), наблюдается стойкое преобладание активности меднаторного звена САС над гормональным (ПА/А) У щенков с гипотрофией второй степени отмечается доминирование парасимпатических влияний, снижение экскреции как катехоламинов, так и их предшественников, что указывает на истощение САС, и всегда сопровождается парадоксальной реакцией ВСР на адреналиновую нагрузку, которая заключается в увеличении ВСР и снижении производительных показателей системной гемодинамики

4 Особенности течения заболевания, например, парвовирусного энтерита у собак в зависимости от донозологического состояния

Для исследования заболеваемости щенков парвовирусным энтеритом нами были исследованы 466 щенков получающий полнорационный корм, 800 - получавших традиционный корм, 552 щенка с гипотрофией первой степени и 256 животных с гипотрофией второй степени Из 466 щенков получавших полнорационный корм в период с 1,5 до 2 мес заболели парвовирусным энтеритом 42 головы, что составило 9% от всех исследованных животных в этой группе Из 800 щенков получавших традиционное кормление парвовирусным энтеритом заболело 136 голов, что составило 17% от всех щенков данной группы Из 552 щенков с гипотрофией первой степени в период с 1,5 до 2 мес заболели 265 головы, то есть 48%, и среди 307 щенков

с гипотрофией второй степени заболеваемость составила 77%, то есть 237 голов Всего за период исследования парвовирусным энтеритом заболело 680 щенков Частота встречаемости различных форм гипотрофии и тяжести течения парвовирусного энтерита у щенков с разным типом кормления представлены в таблице №4

У заболевших щенков на полнорационном кормлении до заболевания отмечались следующие показатели вегетативного тонуса и его реактивность

У щенков с легким течением заболевания ИН| - 45,5-87 уел ед , ИН2 - 90-169 уел ед, ИНз/ИН| = 1,65-1,81 ИВТ - состояние ваготонии, нормальная вегетативная реактивность - стресса нет, ИН| - 121-157 уел ед , ИН2-260-320 уел ед ИН2/ИН| = 1,82-2,1 ИВТ - состояние эйтонии, нормальная вегетативная реактивность -стресса нет, ИН, - 210-253,5 >сл ед, ИН2 - 201-258 уел ед, ИН2/ИН, = 0,87-1,51 ИВТ - состояние симпатикогонии, нормальная вегетативная реактивность - легкий стресс или начальная стадия стрессовой реакции

Таблица 4

Частота встречаемости различных форм гипотрофии и тяжести течения парвовирус-_ного энтерита у щенков с разным типом кормления_

всего голов Степень тяжести заболевания

Тип кормления Легкая Средняя Тяжелая Очень тяжелая

% гол % гол % гол % гол

Полнорационное кормление 42 95 40 5 2 - - - -

Традиционное кормление 136 92 125 6,6 9 1.4 2 - -

Гипотрофия первой степени 265 4,5 12 53,2 141 21,5 57 20,8 55

Гипотрофия второй степени 237 0,42 1 3,4 8 77,2 183 18,98 45

Всего голов 680 178 160 242 100

У заболевших щенков на традиционном кормлении до заболевания отмечались следующие показатели вегетативного тонуса и его реактивность

ИИ, - 210-253,5 уел ед , ИН2 - 201-258 уел ед , ИН2/ИН, = 0,87-1,51 ИВТ -состояние симпатикотонии, нормальная вегетативная реактивность - легкий стресс или начальная стадия стрессовой реакции, ИН| - 456-638 уел ед, ИН2 - 295-327 уел ед, ИН2/ИН, = 0,33-0,81

ИВТ - гиперсимпатикотония, ваготоническая вегетативная реактивность - выраженный стресс без напряжения адаптивных механизмов, состояние полной компенсации

У заболевших щенков с гипотрофией первой степени до заболевания отмечались следующие показатели вегетативного тонуса и его реактивность

ИН, - 456-638 уел ед , ИН2 - 295-327 уел ед, ИН2/ИН, = 0,33-0,81 ИВТ - гиперсимпатикотония, ваготоническая вегетативная реактивность - выраженный стресс без напряжения адаптивных механизмов, состояние полной компенсации,

ИН, - 210-227 уел ед , ИН2 - 34-57 уел ед , ИН2/ИН, = 0,18-0,32 ИВТ - эйтония или симпатикотония, ваготоиическая вегетативная реактивность - выраженный стресс с напряжением адаптивных механизмов, состояние неполной компенсации

ИН,-441-570 уел ед , ИН2 - 11-28 уел ед , ИН:/ИН, = 0,1-0,05

ИВТ - гиперсимпатикотония, гиперваготоническая вегетативная реактивность - выраженный стресс с перенапряжения адаптивных механизмов, состояние декомпенсации

У заболевших щенков с гипотрофией второй степени до заболевания отмечались следующие показатели вегетативного тонуса и его реактивность

ИН, - 10-72 уел ед , ИН2- 12-45 уел ед , ИН2/ИН, = 0,16

ИВ Г - ваготония, гиперваготоническая вегетативная реактивность - выраженный стресс со срывом адаптивных механизмов, преднозологическое состояние, резкое снижение иммунного статуса риск развития заболевания

У щенков с вегетативным эйтоников, симпатотоников и ваготоников с нормальной и гиперсимпатической ве1ета1ивной реактивностью, заболеваемость парво-вирусным энтеритом в группе составляет 5% при этом 95% щенков переболевают в легкой форме

У щенков симпатотоников с нормальной и ваготонической вегетативной заболевание развивается со средней тяжестью течения, а заболеваемость в группе доходит до 17%

У щенков нормотоников и ваготоников с ваготонической вегетативной реактивностью развивается тяжелое и очень тяжелое течение заболевания, а заболеваемость парвовирусным энтеритом в группе превышает 40%

Таким образом, у щенков показатели исходного вегетативного тонуса и ве1е-тативной реактивности при групповом исследовании могут служить критерием прогнозирования развития энзоотии, а при индивидуальном исследовании позволяет прогнозировать тяжесть течения развивающегося заболевания

5. Выводы:

1 Алиментарная депривация является этиологическим фактором развития хронического стресса у щенков, что проявляется в перераспределении энергии в виде глюкозы из соматического пула, в висцеральный под действием кортикостерои-дов, что сопровождается иммунодефицитным состоянием, снижением резистентности и увеличенной восприимчивостью к инфекционным заболеваниям Разработанный экспресс-метод определения состояния вегетативной нервной системы по вариабельности сердечного ритма позволяет не только определить функциональный резерв вегетативной нервной системы, но и косвенно судить о степени иммуноде-фицитного состояния, прогнозировать вероятность развития инфекционного процесса, тяжесть его течения у отдельно взятого животного, а при групповом исследовании судить о вероятности развития эпизоотии

2 При изучении морфологических показателей крови у сук с разным типом кормления, нами было выяснено, что по мере развития гипотрофии у собак развивается снижение показателей ККК, а при гипотрофии первой и второй степени отмечается выраженная анемия (90,01±15,57г/л, 3,97±1,327*10|2/л) У животных с гипотрофией разной степени выраженности отмечается лейкопения, от легкой до выраженной Изменения лейкограммы отображают общее снижение количества лейкоцитов по мере прогрессирования гипотрофии, от легкой до выраженной лейкопении При этом развивается эозинопения (1,68±0,932%), моноцитопения (2,5+1,51%)

и выраженная лейкопения (5,6311,044 хЮ'/л)

3 Наиболее характерными изменениями в биохимических анализах сыворотки крови у собак, по мере развития гипотрофии, отмечается развитие гипопротеи-немии (до 46,06±1,21 г/л), гипоальбуминемии (до 16,01±0,77 г/л), гипокалиемии (до 3,53±0,1 ммоль/л), гипергликемии (до 10,01±1,2 ммоль/л), ацидоз (до 7,38±0,01) Снижение альбумина в большей степени, чем снижение у-глобулинов при незначительных изменениях а- и Р- глобулинов в сыворотке крови

4 Динамика дисперсии неспецифических показателей крови (морфологических показателей) отображает ухудшение адаптации животных в пределах одной группы с идентичными условиями содержания к условиям внешней среды Так, она растет по мере увеличение инцидентности возникновения инфекционных заболеваний и может являться прогностическим критерием их возникновения в данной группе При наличии неблагополучия местности по парвовирусному энтериту или другому заболеванию увеличение процента среднеквадратичного отклонения от среднего значения показателя эритроциты (и его производные) до 8% или показателя лейкоциты (и производные этого показателя) до 10% - риск развития заболевания умеренный, увеличение процента среднеквадратичного отклонения от среднею значения показателя эритроциты (и его производные) от 9% до 15% или показателя лейкоциты (и производные этого показателя) от 11% до 20 - риск развития заболевания высокий, увеличение процента среднеквадратичного отклонения от среднего значения показателя эритроциты (и его производные) выше 16% или показателя лейкоциты (и производные этого показателя) выше 20% - риск развития заболевания очень высокий

5 По мере формирования желудочно-кишечного тракта у щенков в раннем постнатальном онтогенезе происходит постепенное увеличение количества инди-генной микрофлоры со стабилизацией ее примерно в 20 дневном возрасте с последующим снижением к моменту отъема Кормление сук полнорационными кормами в период от начала течки до конца лактации приводит к более быстрому формированию и адаптации желудочно-кишечного тракта у щенков полученных от этих сук, в сравнении с щенками полученными от сук, получавших традиционное кормление Корм пение сук в период щенности и щенков в ранний период после отъема полнорационными кормами, способствует более быстрому количественному формированию инднгенной микрофлоры Высокий количественный уровень индигенной мик-рофторы, значительно превосходящий протективный уровень, препятствует размножению в кишечнике у молодых животных условно-патогенной микрофлоры и защищает щенков от неспецифических гастроэнтеритов

6 По мере развития гипотрофии у щенков на скудном кормлении сначала отмечается повышение уровня гормонов щитовидной железы (Т^ до 2,88±0,12 нмоль/л, Т4 до 181,08±5,25 нмоль/л) с последующим их снижением ниже нормы (Т3 до 1,70±0,14 нмоль/л, Т4 до 43,75±2,81 нмоль/л), что отображает первоначальное усиление обмена веществ у щенков с недостаточным кормлением, но при продолжительном скудном кормлении отмечается снижение уровня гормонов щитовидной железы с характерным снижением интенсивности обмена веществ

7 При алиментарной депривации происходит снижение уровня половых гормонов без первоначального повышения их уровня характерного для динамики гормонов щитовидной железы

8 У щенков на неполноценном кормлении отмечается повышение уровня гормонов надпочечников (73,39±10,13 нмоль/л), по сравнению с полнорационным

кормлением в начале жизни (67,02±11,22 нмоль/л), с последующим снижением кор-тикостероидов к 4 мес до 35,99±10,87 нмоль/л, по сравнению с полнорационным кормлением При гипотрофии первой степени эти изменения выражены ярче При гипотрофии второй степени отмечаются резко сниженные показатели как кортико-стероидов, так и половых гормонов После 4 мес жизни наблюдается дальнейшее снижение уровня кортизола более чем в два раза (с 31,48±9,17 нмоль/л до 14,56±6,87 нмоль/л), что отображает истощение не только гипоталамо-гипофизарно-надпочечннковой оси, но и всех осей гипогаламо-шпофизарной системы

9 По мере развития гипотрофии у щенков происходят нарушения как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета Выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отношению к здоровым животным сопровождается снижением клеточного иммунитета, что влечет за собой падение резистентности, в первую очередь, к вирусным инфекциям При гипотрофии происходит резкое снижение В-лимфоцитов (до 13,51 ±2,4%), иммуноглобулинов А (1,42±1,6 мг/мл) и иммуногло-булина-в (11,2±0,82 мг/мл) В 3-й месяца у щенков с гипотрофией развивались более выраженные изменения в Т-клеточном звене иммунитета, чем в период отъема и в 1-2 месячном возрасте, что отражает постепенную декомпенсацию процесса при продолжающемся скудном кормлении

10 На фоне относительно высоких значений адреналина у щенков с симпати-котоническим вариантом ИВТ, и находящихся на традиционном кормлении отмечалось снижение экскреции с мочой норадреналина на 21%, по сравнению с животными находящимися на полнорационном кормлении Такая же тенденция была отмечена и у щенков с эйтонией Если уровень норадреналина у щенков в первой и второй группе с нормотонией не имел статистических отличий, то уровень норадреналина был на 17% ниже в группе животных с традиционным кормлением Отмечены резкие отличия в уровне предшественников адреналина и норадреналина у щенков первой и второй группы, уровень дофамина был на 20% ниже у щенков во второй группе с симпатикотониен, и на 30% ниже во второй группе у щенков с эйтонией Отношение норадреналина к адреналину внутри групп щенков с одинаковым кормление отличалось слабо, но в группе животных на традиционном кормлении было на 30-50% ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении

11 Адреналиновая функциональная проба у щенков 1,5 месячного возраста вызывает сдвиги в показателях функционального состояния симпатоадреналовой системы, характер которых зависит от исходного вегетативного тонуса в сердечнососудистой системе, зависящего в первую очередь от типа кормления щенков У щенков находящихся на полнорационном кормлении наблюдается увеличение экскреции НА, ДА и ДОФА, при этом выраженность реакции САС тем выше, чем выше ИВТ, щенков находящихся на традиционном кормлении наблюдается увеличение экскреции НА, ДА и ДОФА, при этом выраженность реакции САС тем несколько ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении, у щенков с гипотрофией первой степени наблюдается резкое увеличение экскреции НА, ДА при одновременном снижении ДОФА, что говорит в пользу начинающегося истощения САС, у щенков с гипотрофией второй степени наблюдается резкое снижение экскреции как НА, ДА так и ДОФА, что говорит об истощении САС и прекращении ее регуляторный и адаптивных влияний на организм животного

12 У щенков в возрасте 1,5-2 месяцев происходит увеличение активности симпатического отдела вегетативной нервной системы при традиционном кормлении и гипотрофии I степени, резкое снижение тонуса симпатического отдела и по-

вышение тонуса парасимпатического - при II степени гипотрофии Характер изменений вегетативного гомеостаза практически не зависит ни от периода возникновения гипотрофии, ни от ее формы, а совершенно отчетливо связан лишь со степенью гипотрофии

13 Кардиоинтервалография как унифицированный и стандартизованный метод, позволяет регистрировать смещение вегетативного баланса в сторону преобладания симпатических или парасимпатических влияний в сердечно-сосудистой системе и тем самым прогнозировать состояния организма на грани нормы и патологии Комплексно изучены вариабельность сердечного ритма, состояния симпагоадрена-ловой и сердечно-сосудистой систем у щенков 1,5 месячного возраста, как в условиях покоя, так и после выполнения функциональной пробы

14 У щенков эйтоников, снмпатотоников и ваготоников с нормальной и гиперсимпатической вегетативной реактивностью, заболеваемость парвовирусным энтеритом в группе составляет 5% при этом 95% щенков переболевают в легкой форме

У щенков снмпатотоников с нормальной и ваготонической вегетативной реактивностью заболевание развивается со средней тяжестью течения, а заболеваемость в гру ппе доходит до 17%

У щенков нормотоников и ваготоников с ваготонической вегетативной реактивностью развивается тяжелое и очень тяжелое течение заболевания, а заболеваемость парвовирусным энтеритом в группе превышает 40%

15 У щенков показатели исходного вегетативного тонуса и вегетативной реактивности при групповом исследовании могут служить критерием прогнозирования развития энзоотии, а при индивидуальном исследовании прогнозирования тяжести течении возникшею заболевания

6. Рекомендации по использованию научных выводов

1 С целью групповой донозологической диагностики использовать метод расчета вариабельности морфологических показателей крови

2 Использовать показатели индексов напряжения по методу вариабельности сердечно! о ритма с целью диагностики напряжения и истощения адаптационных механизмов организма при алиментарной депривации, развития стрессогенного иммунодефицита и прогнозирования вероятности развития инфекционных заболеваний на неблагополучных территориях

3 Данные по морфологическим, биохимическим, гормональным, иммунологическим и кардиотогическим исследованиям используются в учебном процессе по специальностям «Биология», «Ветеринария» и «Зоотехния», написании учебных пособий и практических рекомендаций

Результаты наших исследований опубликованы в соавторстве в следующих научно-практических разработках (рекомендациях)

1 «Онредетение объема циркулирующей крови у собак при критических состояниях и интерпретация полученных результатов» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области,), -Новочеркасск, 2005,

2 «Использование реографии в исследовании системной гемодинамики и определении артериального давления у животных» -Новочеркасск ГНУ СКЗНИ-ВИ, 2005 -21с

3 «Определение параметров системной гемодинамики, диагностика критиче-

ских состояний» (методические рекомендации) (рассмотрены и рекомендованы НТС Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору Ростовской области), - Новочеркасск, 2005 - 22 с

4 «Применение антибактериальных препаратов при септических состояниях у собак» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области) - Новочеркасск ГНУ СКЗННВИ, 2005 -15с

5 «Рентгенодиагностика патологических процессов у собак» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области) СКЗНИВИ - Новочеркасск ГНУ СКЗНИВИ, 2005 -24с

6 «Определение объема циркулирующей крови у собак при кршических состояниях и интерпретация полученных результатов» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области) -Новочеркасск, ГНУ СКЗНИВИ, 2005 -16с

7 «Малые гемодинамические профили в диагностике критических состояний у собак» (одобрены экспертным советом вегер)тарного отдела Федеральной службы по Ростовской области) - Новочеркасск, ГНУ СКЗНИВИ, 2005 -22с

8 «Использование реографии в исследовании системной гемодинамики и определении артериального давления у собак» (рассмотрены и одобрены в секции «Патология, фармакология и терапия» отделения ветеринарной медицины РАСХН), - Новочеркасск, 2005 -23с

9 «Определение адаптационных возможностей организма и степени адаптации к стрессам различной этиологии методом ВСР» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области), -Новочеркасск, 2007,

10 «Биохимические изменения крови у щенков в период отъема полученных от сук с разным типом кормления» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области), -Новочеркасск, 2007,

11 «Иммунологический статус у щенков с гипотрофией разной степени тяжести» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области) Новочеркасск, 2007,

12 «Состояние ССС и вегетативного статуса у щенков с гипотрофией различной степени тяжести» -Новочеркасск, 2007 -20с

13 «Морфологические показатели крови у щенков, полученных от сук с разным пиюм кормления» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области) -Новочеркасск, 2007, -25с

14 «Особенности течения парвовирусного энтернта у собак в зависимости от до-нозологического состояния» -Новочеркасск, 2007, -16с

15 «Новые методы диагностики и схемы лечения собак при парвовирусном энтерите» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области) -Новочеркасск, 2007 -20с

16 Ермаков А М Патент на изобретение №2188001 «Способ лечения миксомаю-за и вирусной геморрагической болезни кроликов» от 27 08 2002 /Ермаков

А М , Малышева JIА , Шаповалов А В //Федеральная служба по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам РФ

7 Сведения о практическом использовании научных результатов

Материалы диссертации используются в научно-практической деятельности ктиник «Центр» г Москва и г Ростов-на-Дону, в ветеринарных клиниках г Шахты, г Таганрог, г Красный Сулин, г Сальск Ростовской области, в клинике «Неотложной ветеринарной помощи» г Волгоград

Они внедрены в учебный процесс и используются на кафедрах морфологического цикла, кафедрах клинической диагностики, внутренних незаразных болезнен, эпизоотологии Донского государственного аграрного университета, Ставропольского государственного аграрного университета, Саратовского государственного аграрного университета имени Н И Вавилова, Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К И Скрябина, Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н Э Баумана

8 Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1 Ермаков, А М Эффективность иммуностимуляторов при лечении энтеритов \ собак / А М Ермаков, А Я Маныцков /Тез докл конференции по итогам НИР Дон ГАУ 1991-1995 г, январь 1996, Персиановка, 1996

2 Ермаков, А М Опыт применения иммуноактивных препаратов НВЦИ при лечении и профилактике инфекционных болезнен у собак / А М Ермаков // «Препараты центра Игнатова Теория и опыт применения», Ларнака (Кипр), Тезисы докладов конференции, 1997

3 Ермаков, А М К вопросу о некоторых иммунологических параметрах крови \ собак / А М Ермаков, Т Н Дерезина, Н О Валев // «Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе», Гезисы док-тадов конференции, -Персиановка, 1998

4 Ермаков, А М Влияние иммуномодуляторов на некоторые показатели естественной резистентности / А М Ермаков, Т Н Дерезина, Н О Валев //«Актуальные пробтемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказ» Тезисы докладов конференции,-Персиановка, 1998

5 Ермаков А М Разработка и использование программного обеспечения гос-ветслужбы /А М Ермаков, НН Розанова//«Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе», Тезисы докладов конференции, -Персиановка, 1998

6 Ермаков, А М «Ветеринар 1,0» база данных для ветеринарной клиники (информационная карта алгоритма и программы) / А М Ермаков, Н Н Розанова // Инвентарный номер ВНТИЦ 50990000073 Код ВНТИЦ 03 0322 569 0355, 1999

7 Ермаков, А М Опыт применения энтеростата при вирусных болезнях мелких домашних животных / А М Ермаков, В А Николаева, ТН Дерезина, Н В Левченко, О Н Толстик // Восьмой международный конгресс по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных Материалы 6-8 апреля 2000 г, Москва, Россия -М , 2000 -с 249

8 Ермаков, А М Системы учета, накопления и обработки информации для ветеринарной лечебницы (клиники) и лаборатории ветеринарно-санитарных экспертиз «Ветеринар 1,0» и «Ветеринар 1,1» // Информационный листок, РЦНТИ, 2000, №192000

9 Ермаков, А М Опыт применения аминовита вМ при парвовирусном энтерите собак / А М Ермаков, Т Н Дерезина, В А Николаева, А В Деева, Н В Левченко /"Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных",

Материалы 3-й Международной конференции, 19-20 октября 2000г, -и Персианов-ский, 2000 -с 136-137

10 Федюк, В И Справочник по болезням собак и кошек / В И Федюк, ИД Александров, ТН Дерезина, А М Ермаков, В И Ильченко, С Н Карташов, 11 С Ладан, Е П Мажуга, Н И Полянцев, Г Г Таран, Н Ф Фирсов // Ростов-на-Дону, «Феникс», 2000 - 351 с

11 Ермаков, А М Применение Аминовита йМ при лечении энтеритов вирусной этиологии / А М Ермаков, Т Н Дерезина, В А Николаева, А В Шаповалов, А В Деева // IX Московский международный ветеринарный конгресс, Материалы -Москва, 12-14 апреля 2001

12 Ермаков, АМ Влияние гетерогемотерапии на состояние неспецифической резистентности организма собак, больных стафилококкозом / А М Ермаков, Т Н Дерезина, В А Николаева //«Актуальные вопросы биологии, экологии и ветеринарной медицины домашних животных Сборник статей -Тюмень ИПК 1ГСХА, 2002 -150с -с 46-47

13 Ермаков, АМ Принципы диетотерапии при стафилококкозе собак / АМ Ермаков // «Одиннадцатый Московский международный ветеринарный конгресс» Материалы 17-19 апреля 2003года, Москва, Россия -М , 2003 -с 114-115

14 Ермаков, АМ Результаты тестирования полнорационного корма \Vhiskas / АМ Ермаков//Ж «Вестник ветеринарной медицины», №3, 2004 -с 15-16

15 Ермаков, А М Лямблиоз как причина диарей у собак /Ермаков А М И ХШ международный московский конгресс по болезням мелких животных Материалы 23-25 апреля 2005года, Москва, Россия -М , 2005 -с 20-21

16 Ермаков, А М Особенности рентгенологической диагностики кишечной непроходимости и способы ее устранения при парвовирусном энтерите /Ермаков А М , Карташов С Н // Научный журнал КубГАУ [Электронный ресурс] -Краснодар К) 6ГАУ, 2005 -№0(14) - Режим доступа Ьпр //\v\vw ej киЬа^о ги/2005/06/08/р08 аэр

17 Ермаков, А М Реография в диагностике критических состоянии у животных / АМ Ермаков, С Н Карташов//Ж «Аграрная наука», №9 2005 -с 23-27

18 Ермаков, А М Результаты морфологического исследования крови у сук с гипотрофией в сравнительном аспекте с суками находящимися на полнорационном кормлении /А М Ермаков, С Н Карташов //Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины -Т189 - Казань, 2006 - С 64-71

19 Ермаков, А М Гипотрофия у собак как проявление хронической стрессовой реакции /А М Ермаков, С Н Карташов //Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины -Т190 -Казань, 2006 - С 41-51

20 Ермаков, А М Некоторые закономерности развития иммунопатологических реакций на антигены парвовирусной вакцины у здоровых трехмесячных щенков с разным типом кормления /А М Ермаков, С И Карташов //Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины -Т 190 -Казань, 2006 -С 51-57

21 Ермаков, А М Дискинезии и гистологические изменения кишечника при гипотрофии у собак /А М Ермаков, С И Карташов //Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины - Т 190 - Казань, 2006 - С 57-62

22 Ермаков, А М Иммунопатологические реакции у здоровых трехмесячных щенков с разным типом кормления /Ермаков А М //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы

Всероссийской научно-практической конференции -Новочеркасск, 2007 с 15-17

23 Ермаков, А М Морфофункциональные показатели у собак с разным типом кормления /А М Ермаков //«Актуальные проблемы функциональной и морфофунк-циональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции-Новочеркасск, 2007 с 17-21

24 Ермаков, А М Статус вегетативной нервной системы у щенков с разной степенью гипертрофии /А М Ермаков, А А Миронова, Д А Андреев, О А Миронова //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции -Новочеркасск, 2007 с 25-30

25 Ермаков, А М Оценка адаптационных резервов организма щенков с гипотрофией разной степени /А М Ермаков, О А Миронова, Д А Андреев, С Н Карта-шов //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики бопезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции -Новочеркасск, 2007 с 30-37

26 Ермаков, А М Некоторые аспекты применения новых адсорбентов при лечении энтеритов у собак /А М Ермаков, Д А Кувшинников //«Актуальные проблемы фу нкционатыгой и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции -Новочеркасск, 2007 с 120-122

27 Ермаков, А М Функциональные нарушения кишечника у собак больных ато-пическим дерматитом /А М Ермаков, Д А Кувшинников //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции -Новочеркасск, 2007 с 122-123

28 Клименко, А И Парентеральное питание при поражении желудочно-кишечного тракта у собак /А И Клименко, А М Ермаков, Д А Андреев, С Н Кар-ташов //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции-Новочеркасск, 2007 с 123-124

29 Миронова, Л П Морфофункциональные особенности желудочно-кишечного тракта у собак с атопическим дерматитом /Л П Миронова, Д А Кувшинников, С Н Карташов, А М Ермаков //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции-Новочеркасск, 2007 с 124-125

30 Ермаков, А М Морфологические аспекты поражения слизистой пищеварительного тракта у собак при атопии /А М Ермаков, Л П Миронова, Д А Кувшинников, С Н Карташов //«Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» Материалы Всероссийской научно-практической конференции -Новочеркасск, 2007 с 125-126

31 Никулина, АЮ Клиническое значение исследования белков крови (общий белок, альбумины, СРБ) /А Ю Никулина, А М Ермаков, О И Токарева //Ж «Ветеринария Кубани», №4 2007 -с 28-29

32 Ермаков, А М Дискинезии и гистологические изменения кишечника при атопии у собак /А М Ермаков, А И Бутенков, Д А Кувшинников, С Н Карташов, В В Половинка //Ж «Известия высших учебных заведений Северо-Кавказский регион Естественные науки», №2 2007 -с 131-133

33 Ермаков, А М Эффективность использования готовых диетических кормов в период реабилитации щенков и молодых собак, после перенесенных ими заболеваний желудочно-кишечного тракта /А М Ермаков //Доклады Тимирязевской СХА, выпуск 279, т 2, -М , 2007 -с 154-157

34 Ермаков, А М Функциональное состояние сердечно-сосудистой системы у щенков 1,5 месяцев с различным типом кормления //Ж «Известия высших учебных заведений Северо-Кавказский регион Естественные науки», №5 2007 -с 128-130

35 Ермаков, АМ Реакции сердечно-сосудистой системы на адреналиновую пробу у щенков с различным типом кормления //Ж «Ветеринарная патология», №3 2007

36 Ермаков, А М Состояние симпатоадреналовой системы щенков в условиях неполноценного кормления //Ж «Ветеринария Кубани», №5 2007 -с 24-25

37 Ермаков, А М Гормональные исследования у щенков с разным типом кормления в возрастном аспекте /Ермаков А М , Карташов С Н //«Актуальные проблемы патологии, морфологии и онкологии животных» Материалы Всеросс науч -практич конф 29-30 октября 2007г -Новочеркасск, 2007 -с 82-94

38 Ермаков, АМ Состав микрофлоры кишечника щенков первого дня жизни, полученных от сук с разным типом кормления /Ермаков А М, Карташов С Н //«Актуальные проблемы патологии, морфологии и онкологии животных» Материалы Всеросс науч -практич конф 29-30 октября 2007г -Новочеркасск, 2007 -с 95-99

39 Ермаков, А М Результаты изучения иммунологического статуса у щенков с шпотрофией разной степени тяжести /Ермаков АМ //«Актуальные проблемы патологии, морфологии и онкологии животных» Материалы Всеросс науч -практич конф 29-30 октября 2007г -Новочеркасск, 2007 -с 99-109

40 Ермаков, А М Результаты изучения состояния сердечно-сосудистой системы и вегетативного статуса у щенков с гипотрофией разной степени тяжести /Ермаков А М , Карташов С Н //«Актуальные проблемы патологии, морфологии и онкологии животных» Материалы Всеросс науч -практич конф 29-30 октября 2007г -Новочеркасск, 2007 -с 109-119

41 Ермаков, А М Особенности течения парвовирусного энтерита у щенков 1,5-2 месяцев с разным типом кормления /Ермаков А М , Карташов С Н //«Актуальные проблемы патологии, морфологии и онкологии животных» Материалы Всеросс науч-практич конф 29-30 октября 2007г -Новочеркасск, 2007 -с 119-122

42 Бутенков, А И Парентеральное питание при поражении желудочно-кишечного тракта у собак /Бутенков А И, Ермаков А М , Андреев Д А , Карташов С Н Ветеринарная медицина домашних животных Сборник статей - Выпуск 4 -Казань Печатный двор, 2007 - 227 с

43 Ермаков, А М Морфофункциональные изменения при печеночно-почечной недостаточности развившейся на фоне парвовирусного энтерита /Ермаков А М, Бутенков А И , Карташов С Н Ветеринарная медицина домашних животных Сборник статей - Выпуск 4 - Казань Печатный двор, 2007 - 227 с

44 Ермаков, А М Новые аспекты в применении синтетических Сахаров при поражении желудочно-кишечного тракта у собак /Ермаков А М , Карташова Е В , Бутенков А И , Андреев ДА //Изв вузов Сев -Кав регион Естеств науки 2008 №1, с 132-133

Использованные в тексте условные сокращения

Мо - мола Д\- вариационный размах, Л - адреналин АМо - амплипда молы, БКК - белые кровяные ыеткп ВИС- вегетативная нервная система, ДА - дофамин ДЛД - дласгочическое артериальное давае-ние ИВ1 - исходный ве1етагнвный тон\с ИН - индекс напряжения КА - катехотамииы ККК - красные кровяные клетки МОК - мши гнын объем крови НА - норадреналин, ОПСС - общее периферическое сопротивление сосудов, САД - систотческое артериальное давление САС - симпатоадреналовая система, СИ - сердечный индекс, ССС - сердечно-сосудистая система УИ - парный индекс, УОК - )дарный объем крови УГ1СС - удельное периферическое сопротивление сосудов ЧСС - частота сердечных сокращений,

Подп в печ 28 05 2008 Формат 60x90/16 Объем 2,0 п л

Бумага офисная Печать цифровая

Тираж 100 экз Заказ № 455

ГОУВПО «Государственный университет управления» Издательский дом ГОУВПО «ГУУ»

109542, Москва, Рязанский проспект, 99, Учебный корпус, ауд 106 Тел /факс (495) 371-95-10, e-mail diric@guuru www guu ru

Актуальность темы. Теория адаптации в настоящее время является одним из фундаментальных направлений современной биологии и физиологии. Адаптационная деятельность организма животных не только обеспечивает выживание и эволюционное развитие, но и повседневное приспособление к изменениям окружающей среды. В теории Г.И. Селье об общем адаптационном синдроме показан фазовый характер' адаптационных реакций и обоснована ведущая роль истощения регуляторных систем при острых и хронических стрессорных воздействиях в развитии большинства патологических состояний и заболеваний.

Принципиальная ориентация ветеринарной профилактики на нозологический подход к оценке здоровья привела к тому, что и меры первичной профилактики заболеваний разрабатываются по отношению к определенным видам вероятной патологии. Так, хорошо изучены факторы риска развития инфекционных заболеваний и разработано огромное количество разнообразных вакцин практически против большинства инфекционных болезней животных. Существуют календарные планы вакцинаций, к которым, по сути, сводятся все профилактические мероприятия в отдельных хозяйствах. Однако, отсутствие патологических отклонений, которые необходимы для постановки диагноза, несмотря на наличие определенных факторов риска, дает ветеринарному врачу основание отнести животное к категории здоровых или практически здоровых. Вместе с тем известно, что болезнь не возникает внезапно. Она является результатом снижения приспособительных (адаптационных) возможностей организма и развивается постепенно через стадии донозологических и преморбидных состояний. Проблема оценки текущего уровня индивидуального здоровья животных и контроля за его изменениями приобретает все более важное значение для племенного животноводства, особенно в условиях, когда закупается импортный племенной скот, больше подверженный болезням адаптации, чем районированный отечественный.

В этой связи, представляет интерес оценка роли нейрогуморальных факторов в развитии адаптивных возможностей организма, в частности, значимость различных отделов вегетативной нервной системы. Исследования последних лет показали, что многие патологические процессы (перестройка гомеостаза в условиях хронического стресса) контролируются вегетативной нервной системой. Признана роль симпатико-адреналовой системы в развитии адаптивного синдрома. В доступной нам литературе крайне мало публикаций по влиянию изменений статистических характеристик сердечного ритма на состояние неспецифических адаптационных механизмов организма животных. Отсутствуют сведения о возможности диагностики заболеваний животных на донозологической стадии и наличии автоматических диагностических систем для индивидуальной и групповой донозологической диагностики.

Вместе с тем, на необходимость и перспективность проведения фундаментальных физиологических исследований организма животных с целью разработки новых способов превентивных мероприятий указывают принятые постановления Правительства Российской Федерации (№ 22 от 21.01.99.), Президиума СО РАСХН (№ 2 от 21.01.99.), а также Целевая федеральная программа (1999-2010 гг.).

Цель работы — разработать алгоритм комплексной оценки морфо-функционального состояния интегрирующих систем собак в процессе развития и оценить влияние алиментарной депривации на онтогенетические процессы.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить морфофункциональное состояние организма щенных сук при сбалансированном и несбалансированном кормлении и исследовать зависимость функции генома потомства в раннем постнатальном онтогенезе в зависимости от типа кормления матерей.

2. Определить содержание и динамику ряда основных гормонов (кор-тизола, тироксина, трийодтиронина, эстрадиола-17Р, прогестерона, тестостерона), показателей углеводного и белкового обменов; уровень морфологических показателей крови у щенков в раннем постнатальном онтогенезе в разном физиологическом аспекте.

3. Оценить адаптационные резервы организма щенков в онтогенезе и с разным напряжением адаптационных механизмов, изучив динамику ка-техоламинов и состояние вегетативной нервной системы.

4. Оценить степень и характер воздействия условий кормления на гормональный фон, морфологические показатели крови и уровень обменных процессов организма собак.

5. Изучить характер и основные закономерности в динамике гормональных, морфологических и биохимических показателей крови у щенков в раннем постнатальном онтогенезе с разным напряжением адаптационных механизмов.

6. Проследить корреляционную связь между состоянием вегетативной нервной системы и адаптационных резервов организма у собак, гормональным фоном, морфологическими показателями крови и уровнем обменных процессов организма собак в онтогенезе.

7. На основе полученных данных разработать алгоритм групповой и индивидуальной диагностики предрасположенности к развитию патологических состояний у животных.

Диссертационное исследование проведено в соответствии с темой научных исследований ГНУ Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института "Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высокопродуктивных животных" государственная регистрация №15070.3666026906.06.8.001.2.

Научная новизна. Выявлены морфофункциональные закономерности адаптивной пластичности организма собак послужившие научной базой для разработки методов донозологической диагностики.

Впервые изучена динамика гормонального статуса щенков в раннем постнаталыюм онтогенезе по уровню в крови гормонов коры надпочечников (кортизола), щитовидной (тироксина, трийодтиронина) и половых желез (прогестерона, эстрадиола-170, тестостерона) в связи с особенностями функционального и физиологического состояния организма в условиях неполноценного кормления. Определены физиологические параметры, возрастная динамика, дана сравнительная характеристика гормонального профиля, морфологических и биохимических показателей крови собак, с разным функциональным резервом организма, выявлены периоды напряжения, перенапряжения и срывов адаптационных систем методом оценки вариабельности сердечного ритма. Показано, что длительное неполноценное кормление животных сопровождается изменениями гормонального фона, морфологических и биохимических показателей крови, соответствующих характеру адаптивных изменений.

Получены новые данные о комплексном участии кортизола, тироксина, трийодтиронина, эстрадиола- 17р, прогестерона, тестостерона в развитии стресс-реакции в ответ на алиментарную депривацию.

Изучено функциональное состояние активности желез внутренней секреции, морфологические и метаболические показатели крови в связи с этапами напряжения адаптивных систем организма животных и в момент срыва адаптационных механизмов. Установлены высоко достоверные связи гормонального и иммунологического статуса собак со степенью напряжения адаптационных систем организма.

Дана комплексная оценка гормонального статуса, морфологических и биохимических показателей крови щенков в раннем постнаталыюм онтогенезе при алиментарной депривации.

Дано теоретическое обоснование возможности применения автоматического анализатора вариабельности сердечного ритма для диагностики состояния нервно-гуморального статуса животного, степени напряжения адаптационных систем организма, донозологической диагностики заболеваний. Разработан алгоритм групповой и индивидуальной диагностики донозологических патологических состояний у животных.

Научно-практнчсская значимость работы. Выявлено, что алиментарная депривация является одним из этиологических факторов развития хронического стресса у щенков, что сопровождается перераспределением энергии в виде глюкозы из соматического пула, в висцеральный под действием кортикостероидов, и приводит к иммунодефицитному состоянию, снижению резистентности и повышением восприимчивости к инфекционным заболеваниям. Данная гипотеза подтверждена результатами исследований морфологических и биохимических показателей крови, определением состояния вегетативной нервной системы, эндокринного и иммунного статуса.

Выяснено, что по мере развития и углубления хронического стресса развивается гиперфункция с последующим истощением функционального резерва вегетативной нервной системы, что сопровождается первоначальным повышением, затем резким падением катехоламинов. Падению уровня катехоламинов соответствует наиболее глубокое иммунодефицитное состояние. Разработанный экспресс метод определения состояния вегетативной нервной системы по вариабельности сердечного ритма позволяет не только определить функциональный резерв вегетативной нервной системы, но также косвенно судить о степени иммунодефицитного состояния, прогнозировать вероятность развития инфекционного процесса, тяжесть его течения.

Параметры концентрации гормонов, показателей углеводного, ли-пидного, белкового обменов, морфологических параметров крови, установленные в процессе проведения исследований, используются в диагностической практике в качестве нормативных показателей при оценке функционального состояния организма собак в раннем постнатальном онтогенезе. Их необходимо учитывать при определении клинического состояния организма собак разного возраста, в зависимости от напряжения адаптивных систем организма, для оценки течения беременности, внутриутробного развития плода, послеродового периода, прогнозирования риска развития патологии.

Материалы работы используются при решении задач, связанных с разработкой приемов эффективной профилактики и терапии болезней собак и других животных, проведении зоотехнических и ветеринарных мероприятий в кинологических питомниках и хозяйствах других направлений с целыо совершенствования противоэпизоотических и превентивных мероприятий. Результаты исследований представлены как справочный материал при составлении учебных пособий и руководств по физиологии и патологии домашних животных, биологии развития для студентов специальностей «Ветеринария», «Зоотехния» и «Биология».

Разработан алгоритм групповой и индивидуальной диагностики доно-зологических патологических состояний у животных, который может широко использоваться во всех отраслях животноводства.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на ежегодных научно-практических конференциях ФГОУ ВПО «Донской государственный аграрный университет», ГНУ «СевероКавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» в 1996-2007 гг. и на 26 всероссийских, международных, межвузовских, республиканских научно-практических конференциях в гг. Москве, Ростове, Воронеже, Краснодаре, Тюмени, Самаре, Саратове, Владивостоке, Новосибирске, Кирове, Уфе, Ларнаке (Кипр) и 9 Московских международных ветеринарных конгрессах (1998-2007).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Динамика показателей интегрирующих систем и индигенной микрофлоры ЖКТ у щенков отражает развитие адаптационного синдрома при стрессе, носит диагностический характер и является основой донозологи-ческой диагностики при групповом исследовании животных.

2. Динамика функционального состояния сердечно-сосудистой системы, показателей гормонального, иммунного и вегетативного статуса у щенков в раннем постнатальном онтогенезе, отражает особенности адаптационного синдрома при алиментарной депривации, а изменения в данных системах могут визуализироваться до развития клинических симптомов и являются основой донозологической диагностики при индивидуальном исследовании.

3. Выраженные корреляционные связи между иммунным, гормональным и вегетативным статусом животного - основа для экспресс-метода оценки вегетативного статуса животных, являющегося объективным способом оценки интегрирующих систем в обеспечении онтогенетических процессов.

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликованы 44 научные работы, из них 9 - в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ; учебно-методические пособия, в том числе справочник по болезням собак и монография.

Личный вклад соискателя. Представленная работа является продуктом исследований автора в период с 1995 по 2007 годы.

Автор лично провел большую часть наблюдений, исследований и экспериментов, собрал, систематизировал и проанализировал полученные результаты. При этом часть научных трудов опубликована в соавторстве с сотрудниками СКЗНИВИ, ДоиГАУ и ветеринарными врачами клиники «Центр». Доктора наук Дерезина Т.Н., Карташов С.Н., Миронова Л.П., Клименко А.И., кандидаты наук Бутенков А.И., Валев Н.О., Деева А.В., Миронова А.А., врачи и инженеры Николаева В.А., Левченко Н.В., Толстик О.Н., Розанова Н.Н., Андреев Д.А., Кувшинников Д.А., Никулина А.Ю., Токарева О.И. в справках представленных в диссертационный совет подтверждают, что их данные в нашу диссертацию не вошли.

Научные консультанты - доктор биологических наук, профессор Дмитриев А.Ф. и доктор биологических наук Карташов С.Н. оказали неоценимую методическую помощь при проведении исследований, анализе t полученной информации, обобщении данных и внедрении в клиническую практику и учебный процесс.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы. Работа изложена на 435 страницах компьютерного текста, содержит 110 таблиц, 91 рисунков. Библиографический список включает 452 источника, в том числе 162 зарубежных.

5.ВЫВОДЫ

1. Алиментарная депривация является одним из этиологических факторов развития хронического стресса у щенков, что проявляется в перераспределении энергии в виде глюкозы из соматического пула, в висцеральный под действием кортикостероидов, и приводит к иммунодефицитному состоянию, снижению резистентности и повышению восприимчивости к инфекционным заболеваниям. Разработанный экспресс-метод определения состояния вегетативной нервной системы по вариабельности сердечного ритма позволяет не только определить функциональный резерв вегетативной нервной системы, но и косвенно судить о степени иммунодефицитного состояния, прогнозировать вероятность развития инфекционного процесса и тяжесть его течения.

2. При изучении морфологических показателей крови у сук с разным типом кормления, выяснено, что по мере развития гипотрофии у собак снижаются показатели ККК, а при гипотрофии первой и второй степени отмеча

10 ется выраженная анемия (90,01±15,57г/л, 3,97±1,327*10 /л). Изменения лей-кограммы отображают общее снижение количества лейкоцитов по мере про-грессирования гипотрофии, от легкой до выраженной лейкопении. При этом развивается эозинопения (1,68±0,932%), моноцитопения (2,5±1,51%) и выраженная лейкопения (5,63±1,044 хЮ9/л).

3. Наиболее характерными изменениями в биохимических показателях сыворотки крови у собак, по мере развития гипотрофии, является гипопро-теинемия (до 46,06±1,21 г/л), гипоальбуминемия (до 16,01±0,77 г/л), гипо-калиемия (до 3,53±0,1 ммоль/л), гипергликемия (до 10,01 ±1,2 ммоль/л), ацидоз (до 7,38±0,01). Снижение уровня альбумина выражено в большей степени, чем снижение у-глобулинов при незначительных изменениях а- и р- глобулинов в сыворотке крови.

4. Динамика дисперсии неспецифических показателей крови (морфологических показателей) отображает снижение адаптационных возможностей животных в пределах одной группы с идентичными условиями содержания к условиям внешней среды. Так, она возрастает по мере увеличения инцидентности возникновения инфекционных заболеваний и может являться прогностическим критерием их возникновения в данной группе. При наличии неблагополучия местности по парвовирусному энтериту или другому заболеванию: увеличение процента среднеквадратичного отклонения от среднего значения показателя эритроциты (и его производные) до 8% или показателя лейкоциты (и производные этого показателя) до 10% - риск развития заболевания умеренный; увеличение процента среднеквадратичного отклонения от среднего значения показателя эритроциты (и его производные) от 9% до 15% или показателя лейкоциты (и производные этого показателя) от 11 % до 20 -риск развития заболевания высокий; увеличение процента среднеквадратичного отклонения от среднего значения показателя эритроциты (и его производные) выше 16% или показателя лейкоциты (и производные этого показателя) выше 20% - риск развития заболевания очень высокий.

5. По мере формирования желудочно-кишечного тракта у собак в пост-натальный период происходит постепенное увеличение количества индигенной микрофлоры со стабилизацией ее примерно в 20 дневном возрасте с последующим снижением к моменту отъема. Кормление сук полнорационными кормами «Pedigree» в период от начала течки до конца лактации приводит к более быстрому формированию и адаптации желудочно-кишечного тракта у щенков, полученных от этих сук, в сравнении с щенками, полученными от сук, получающих традиционное кормление. Кормление сук в период щенности и щенков в ранний период после отъема полнорационными кормами «Pedigree», способствует более быстрому количественному формированию индигенной микрофлоры. Высокий количественный уровень индигенной микрофлоры, значительно превосходящий протективный уровень, препятствует размножению в кишечнике у молодых животных условно-патогенной микрофлоры и защищает щенков от неспецифических гастроэнтеритов.

6. По мере развития гипотрофии у щенков на скудном кормлении сначала отмечается повышение уровня гормонов щитовидной железы (Т3 до 2,88±0,12 нмоль/л; Т4 до 181,08±5,25 нмоль/л) с последующим их снижением ниже нормы (Тз до 1,70±0,14 нмоль/л; Т4до 43,75±2,81 нмоль/л), что отображает первоначальное усиление обмена веществ у щенков с недостаточным кормлением, но при продолжительном скудном кормлении отмечается снижение уровня гормонов щитовидной железы с характерным снижением интенсивности обмена веществ.

7. Происходит снижение уровня половых гормонов при всех нарушениях кормления без первоначального повышения их уровня, характерного для динамики гормонов щитовидной железы.

8. У щенков на неполноценном кормлении отмечается повышение уровня гормонов надпочечников (73,39±10,13 нмоль/л), по сравнению с полнорационным кормлением в начале жизни (67,02± 11,22 нмоль/л), с последующим снижением кортикостероидов к 4 мес. до 35,99± 10,87 нмоль/л, по сравнению с полнорационным кормлением. При гипотрофии первой степени эти изменения выражены ярче. При гипотрофии второй степени отмечается резко сниженные показатели как коритикостероидов, так и половых гормонов. После 4 мес. жизни отмечается дальнейшее снижение уровня кортизола более чем в два раза (с 31,48±9,17 нмоль/л до 14,56±6,87 нмоль/л), что отображает истощение не только гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси, но и всех осей гипатоламо-гипофизарной системы.

9. При гипотрофии у щенков происходят нарушения как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета по мере развития гипотрофии. Выраженное снижение количества Т-лимфоцитов по отношению к здоровым животным сопровождается снижением клеточного иммунитета, что влечет за собой падение резистентностии, в первую очередь, к вирусным инфекциям. При гипотрофии происходит резкое снижение В-лимфоцитов (до 13,51±2,4%), иммуноглобулинов А (1,42±1,6 мг/мл) и иммуноглобулина-G (11,2±0,82 мг/мл). В 3-й мес. у щенков с гипотрофией развивались более выраженные изменения в Т-клеточном звене иммунитета, чем в период отъема ив 1-2 мес. возрасте, что, по всей видимости, говорит о постепенной декомпенсации процесса при продолжающемся скудном кормлении.

10. На фоне относительно высоких значении адреналина у щенков с симпатикотоническим вариантом ИВТ, и находящихся на традиционном кормлении, отмечалось снижение экскреции с мочой норадреналина на 21%, по сравнению с животными, находящимися на полнорационном кормлении. Такая же тенденция была отмечена и у щенков с эйтонией. Если уровень норадреналина у щенков в первой и второй группе с нормотонией не имел статистических отличий, то уровень норадреналина был на 17% ниже в группе животных с традиционным кормлением. Поскольку ваготоников в группе животных с традиционным кормлением не было, то не было и сравнительного анализа. Отмечены резкие отличия в уровне предшественников адреналина и норадреналина у щенков первой и второй группы, уровень дофамина был на 20% ниже у щенков во второй группе с симпатикотонией, и на 30% ниже во второй группе у щенков с эйтонией. Отношение норадреналина к адреналину внутри групп щенков с одинаковым кормление отличалось слабо, но в группе животных на традиционном кормлении было на 30-50% ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении.

11. Адреналиновая функциональная проба у щенков 1,5 мес. вызывает сдвиги в показателях функционального состояния симпато-адреналовой системы, характер которых зависит от исходного вегетативного тонуса в сердечно-сосудистой системе, зависящего в первую очередь от типа кормления щенков: у щенков, находящихся на полнорационном кормлении, наблюдается увеличение экскреции НА, ДА и ДОФА, при этом выраженность реакции САС тем выше, чем выше ИВТ; щенков, находящихся на традиционном кормлении, наблюдается увеличение экскреции НА, ДА и ДОФА, при этом выраженность реакции САС несколько ниже, чем у щенков на полнорационном кормлении; у щенков с гипотрофией первой степени наблюдается резкое увеличение экскреции НА, ДА при одновременном снижении ДОФА, что говорит в пользу начинающегося истощения САС; у щенков с гипотрофией второй степени наблюдается резкое снижение экскреции как НА, ДА, так и

ДОФА, что говорит об истощении САС и прекращении ее регуляторных и адаптивных влияний на организм животного.

12. У щенков в возрасте 1,5-2 мес. происходит увеличение активности симпатического отдела вегетативной нервной системы при традиционном кормлении и гипотрофии I степени, резкое снижение тонуса симпатического отдела и повышение тонуса парасимпатического - при II степени гипотрофии. Характер изменений вегетативного гомеостаза практически не зависел ни от периода возникновения гипотрофии, ни от ее формы, а совершенно отчетливо был связан лишь со степенью гипотрофии.

13. Кардиоинтервалография как унифицированный и стандартизованный метод, позволяет регистрировать смещение вегетативного баланса в сторону преобладания симпатических или парасимпатических влияний в сердечно-сосудистой системе, и тем самым прогнозировать состояния организма на грани нормы и патологии. Комплексно изучены вариабельность сердечного ритма, состояния симпатоадреналовой и сердечно-сосудистой систем у щенков 1,5 месячного возраста, как в условиях покоя, так и после выполнения функциональной пробы.

14. У щенков эйтоников, симпатотоников и ваготоников с нормальной и гиперсимпатической вегетативной реактивностью, заболеваемость парво-вирусным энтеритом в группе составляет 5%, при этом 95% щенков перебо-левают в легкой форме.

У щенков симпатотоников с нормальной и ваготонической вегетативной реактивностью заболевание развивается со средней тяжестью течения, а заболеваемость в группе доходит до 17%.

У щенков нормотоников и ваготоников с ваготонической вегетативной реактивностью развивается тяжелое и очень тяжелое течение заболевания, а заболеваемость парвовирусным энтеритом в группе превышает 40%.

15. У щенков показатели исходного вегетативного тонуса и вегетативной реактивности при групповом исследовании могут служить критерием прогнозирования развития энзоотии, а при индивидуальном исследовании прогнозирования тяжести течении развития заболевания.

6. Практические предложения

1. С целыо гурповой донозологической диагностики использовать метод расчета вариабельности морфологических показателей крови.

2. Использовать показатели индексов напряжения по методу вариабельности сердачного ритма с целыо диагностики напряжения и истощения адаптационных механизмов организма, развития стрессогенного иммунодефицита и прогнозирования вероятности развития инфекционных заболеваний на неблагополучных территориях.

3. Даные по морфологическим, биохимическим, гормональным, иммунологическим и кардиологическим исследованиям используются в учебном процессе по специальностям «Биология», «Ветеринария» и «Зоотехния», написании учебных пособий и практических рекомендаций.

Результаты наших исследований опубликованы в соавторстве в следующих научно-практических разработках (рекомендациях):

1. «Определение объема циркулирующей крови у собак при критических состояниях и интерпретация полученных результатов» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области,), -Новочеркасск, 2005;

2. «Использование реографии в исследовании системной гемодинамики и определении артериального давления у животных» -Новочеркасск: ГНУ СКЗНИВИ, 2005. -21с.

3. «Определение параметров системной гемодинамики, диагностика критических состояний» (методические рекомендации), (рассмотрены и рекомендованы НТС Федеральной службы по ветеринарному и фито-санитарному надзору Ростовской области), - Новочеркасск, 2005. - 22 с.

4. «Применение антибактериальных препаратов при септических состояниях у собак» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области). - Новочеркасск: ГНУ СКЗНИВИ, 2005.-15с.

5. «Рентгенодиагностика патологических процессов у собак» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области). СКЗНИВИ. - Новочеркасск: ГНУ СКЗНИВИ, 2005. -24с.

6. «Определение объема циркулирующей крови у собак при критических состояниях и интерпретация полученных результатов» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области). - Новочеркасск, ГНУ СКЗНИВИ, 2005. -16с.

7. «Малые гемодинамические профили в диагностике критических состояний у собак» (одобрены экспертным советом ветеринарного отдела Федеральной службы по Ростовской области). - Новочеркасск, ГНУ СКЗНИВИ, 2005. -22с.

8. «Использование реографии в исследовании системной гемодинамики и определении артериального давления у собак» (рассмотрены и одобрены в секции «Патология, фармакология и терапия» отделения ветеринарной медицины РАСХН), - Новочеркасск, 2005. -23с.

9. «Определение адаптационных возможностей организма и степени адаптации к стрессам различной этиологии методом ВСР» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области), -Новочеркасск, 2007;

10.«Биохимические изменения крови у щенков в период отъема полученных от сук с разным типом кормления» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области), -Новочеркасск, 2007;

11.«Иммунологический статус у щенков с гипотрофией разной степени тяжести» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области) Новочеркасск, 2007;

12.«Состояние ССС и вегетативного статуса у щенков с гипотрофией различной степени тяжести» -Новочеркасск, 2007. -20с.

13.«Морфологические показатели крови у щенков, полученных от сук с разным типом кормления» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области) -Новочеркасск, 2007; -25с.

14.«Особенности течения парвовирусного энтерита у собак в зависимости от донозологического состояния». -Новочеркасск, 2007; -16с.

15.«Новые методы диагностики и схемы лечения собак при парвовирус-ном энтерите» (одобрены Управлением ветеринарии Ростовской области) -Новочеркасск, 2007. -20с.

16. Ермаков A.M. Патент на изобретение №2188001 «Способ лечения миксоматоза и вирусной геморрагической болезни кроликов» от 27.08.2002 /Ермаков A.M., Малышева Л.А., Шаповалов А.В. //Федеральная служба по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам РФ

Сведения о практическом использовании научных результатов

Материалы диссертации используются в научно-практической деятельности клиник «Центр» г. Москва и г. Ростов-на-Дону, в ветеринарных клиниках г. Шахты, г. Таганрог, г. Красный Сулин, г. Сальск Ростовской области, в клинике «Неотложной ветеринарной помощи» г. Волгоград.

Они внедрены в учебный процесс и используются на кафедрах морфологического цикла, кафедрах клинической диагностики, внутренних незаразных болезней, эпизоотологии Донского государственного аграрного университета, Ставропольского государственного аграрного университета, Саратовского государственного аграрного университета имени Н.И. Вавилова, Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина, Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана.

1.9. Заключение

Снижение адаптационных возможностей организма сопровождается ростом специфических патологических изменений, которые проявляются в виде разнообразных заболеваний. Принципиальное различие между здоровым и больным организмом состоит в том, что в первом случае гомеостаз сохранен, во втором - нарушен. Способность организма адаптироваться к условиям окружающей среды резко уменьшается еще до нарушения гомео-стаза. В состоянии неудовлетворительной адаптации он обладает уже настолько сниженными функциональными резервами, что даже небольшие нагрузки могут нарушить его неустойчивое равновесие со средой.

Из функциональных состояний, пограничных между нормой и патологией (между удовлетворительной адаптацией и срывом адаптации), лишь состояние неудовлетворительной адаптации может быть названо предбо-лезныо в клиническом понимании этого слова (Г.И. Косицкий с соавт., 1968; Б.Е. Филдс с соавт., 1989; J.C. Fleishaker at all, 1994; J.T. Bigger at all, 1996; T.D. Kavvada at all, 1996; A.B. Лебедев с соавт., 2000). Вместе с тем, предболезнь имеет не только клиническое, но физиологическое толкование. С точки зрения донозологической диагностики, в предболезни следует различать две стадии. Первая стадия протекает с преобладанием неспецифических изменений над специфическими, когда гомеостаз еще сохранен и на первый план выступает повышенная активность регуляторных механизмов, благодаря чему и сохраняется неустойчивое равновесие со средой. Вторая стадия протекает с преобладанием специфических изменений над неспецифическими, т.е. на первый план выступают конкретные проявления болезни, определенные симптомы и синдромы.

Весь смысл донозологической диагностики заключается в том, что она позволяет прогнозировать развитие болезни еще до того как появляются ее признаки. Основными прогностическими критериями являются адаптационные возможности организма, в результате снижения которых он переходит последовательно от удовлетворительной адаптации к состоянию напряжения адаптационных механизмов и затем к неудовлетворительной адаптации. Оценить риск развития заболевания можно на основе измерения степени напряжения регуляторных систем с использованием различных методик, в том числе и математического анализа сердечного ритма.

Способность регуляторных систем мобилизовать необходимые функциональные резервы, обеспечивать «физиологическую меру» защиты организма от стрессорных воздействий, позволяет сохранять гомеостаз и поддерживать состояние удовлетворительной адаптации.

Переход от нормы к патологии, от здоровья к болезни происходит постепенно, по мере снижения адаптационных возможностей организма, по мере перехода от напряжения регуляторных систем к их перенапряжению и истощению. Индивидуальные траектории от нормы к патологии редко имеют линейный характер. При использовании результатов донозологических исследований, могут быть построены математические модели перехода от нормы к патологии с учетом функциональных резервов организма и адаптационных возможностей. Вариантами таких моделей являются используемые в алгоритмах донозологической диагностики уравнения регрессии и дискриминантные функции.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Анамнез. Собаки в опытных группах принадлежали питомникам служебного собаководства МВД РФ и МО РФ. При сборе анамнеза жизни и заболевания особое внимание уделяли характеру питания собаки, моциону, моменту начала заболевания, если такое развивалось и возможной его связи с типом кормления, стрессовыми ситуациями, изменениями стереотипа жизни, предшествующим заболеванию.

Клиническое исследование. В опытные группы отбирали только клинически здоровых животных породы немецкая овчарка по принципу пар аналогов с показателями температуры тела 37,5°С - 39,3°С, частотой сердечных сокращений 70-160 ударов в минуту, частотой дыхательных движений 10-30 в минуту. Клинический осмотр проводили по общепринятой методике. Исследовали цвет и состояние кожных покровов, тургор кожи, мышечный тонус, состояние языка, форму и размер живота. Исследование органов грудной и брюшной полостей проводили с применением методов пальпации, перкуссии и аускультации. Оценивали состояние мышц, суставов, скелета, а также неврологический статус животного.

На первом этапе работы из всех поступивших в клинику животных мы отбирали для исследования здоровых сук с различным типом кормления, затем получали от них потомство, и продолжали исследование щенков.

Температуру тела измеряли термометром ректалыю. Пульс прощупывали у собак с внутренней стороны бедра на бедренной артерии, оценивая его по частоте и степени наполнения. Частоту сердечных сокращений определяли по пульсовой волне при соблюдении всех правил данного исследования. В норме у собак пульс аритмичный, происходит его учащение на вдохе и урежение на выдохе, при тахипное и тахикардии эта ракономерность не наблюдается. Учащение пульса коррелировало с повышением температуры и астеническим синдромом (угнетение).

Электрокардиографические исследования проводили с помощью электрокардиографа ЭК1Т-04. Регистрировали стандартные отведения от конечностей (I, II, III), усиленные отведения от конечностей по Голдберге-ру (aVR - между объединенным электродом и правой передней конечностью, aVL - между объединенным электродом и левой передней конечностью, aVF - между объединенным электродом и левой задней конечностью), грудные отведения по Вильсану (rV^ Уг, Уз, У*) в модификации Ланнека. Грудные электроды располагаются: rVi - правая грудная стенка, 5 межреберье, около грудины; V2- левая грудная стенка, 6 межреберье, около грудины; Уз - левая грудная стенка, 6 межреберье, граница реберного хряща; У* - над остистым отростком 7 грудного позвонка. Для точной оценки интервала использовали скорость не менее 50 мм/сек.

Артериальное давление - чрезвычайно важный показатель, который характеризует состояние сердечно-сосудистой системы в каждый конкретный момент. Его значения могут быстро меняться под воздействием проводимой инфузионной и инотропной терапии, поэтому именно системное давление является одним из важнейших показателей, характеризующих адекватность проводимой терапии.

Мы изучали артериальное давление методом реографии. Реография (от греч. rheo - поток, grapho - писать) - метод исследования кровообращения, основанный на изменении электрического сопротивления тела животного, его отдельных участков и органов при введении их в электрическую цепь и электрическое поле высокой частоты. Как известно, кровь перфузирует ткани не ламинарно, а прерывисто, в такт работе сердца, при этом в систолу исследуемый участок тела, как правило, наполнен кровыо больше, чем в диастолу. Кровь - хороший проводник электрического тока, тогда как соединительная и мышечная ткани - диэлектрики. Общее сопротивление тканей будет зависеть от того, чего больше в исследуемом объеме: соединительной и мышечной ткани или крови. Следовательно, в систолу электрическое сопротивление падает, тогда, как в диастолу растет. Географическая кривая отображает изменения сопротивления, по этой кривой программа реографа вычисляет поток крови через любой участок тела. Если начать передавливать, например, предплечье у собаки манжеткой с манометром, то в момент, когда давление в манжетке станет равным давлению в артериальном сосуде, пульсация артерии ниже места передавлива-ния прекратится, а после сдувания манжетки возобновится.

Для определения величины артериального давления у собак на рео-графе-полианализаторе устанавливали режим исследования - предплечье-кисть. Ассистент укладывал животное в боковое положение. Активный электрод помещали на предплечье ближе к запястному суставу, измеряющий (пассивный) электрод помещали на запястье, пневматическую манжетку с манометром помещали на предплечье выше наложенных электродов. При постоянной регистрации реографической кривой на мониторе начинали накачивать манжетку до резкого уменьшения амплитуды реографической кривой и так, чтобы при дальнейшем увеличении давления в манжетке уменьшение амплитуды реографической кривой не происходило (полного исчезновения реографических волн не происходит). Затем давление в манжетке начинали снижать. По мере снижения давления ассистент дает отсчет через каждые 5 мм. рт. ст., оператор устанавливает маркеры на реографической кривой, соответствующие снижению давления.

Давление, регистрируемое манометром в момент подъема амплитуды реографической кривой, соответствует систолическому артериальному давлению. Затем амплитуда реографической волны возрастает выше, чем была до начала исследования. Давление, при котором амплитуда реогра- . фической волны возвращалась к высоте таковой до исследования, соответствует диастолическому давлению.

Данная методика позволяет измерить артериальное давление у собак любой массы тела.

Морфологические и биохимические исследования крови проводились в лаборатории функциональной диагностики болезней сельскохозяйственных животных ГНУ СКЗНИВИ.

Кровь для биохимического и морфологического исследования брали из подкожной вены предплечья, латеральной вены сафена, а при их плохой наполняемости - из яремной вены утром натощак.

Морфологический анализ крови включал: определение числа эритроцитов и лейкоцитов в сетке камеры Горяева, определение концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом, гематокрита по методике, предложенной И. И. Архангельским и JI. П. Сошенко (1993), СОЭ, выведение лейкограммы по общепринятым методикам.

Биохимический анализ крови включал определение следующих показателей: активность щелочной фосфатазы по ферментативному гидролизу n-нитрофенилфосфата, активности аспартатаминотрансферазы и аланина-минотрансферазы по методу Райтмана-Френкеля, а-амилазы - по Каравею, концентрации глюкозы - орто-толуидиновым методом, белка - с помощью биуретовой реакции, билирубина - по методу Ендрашика-Грофа, альбумина - по реакции с бромкрезоловым зеленым, креатинина - методом Яффе, мочевины - по реакции с диацетилмонооксимом в сильно кислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного железа.

Из биохимических исследований, характеризующих воспалительный процесс, проводили определение фибриногена гравиметрическим методом по Рутбергу (Р.А. Рутберг, 1974; B.C. Камышников, 2000), сиаловых кислот - по методу Гесса (В.Г. Колб, B.C. Камышников, 1974), общей активности лактатдегидрогеназы, основанном на оптическом тесте Варбурга (оптическом эффекте, связанном с превращением НАД4" в НАД°Н), С-реактивного белка - методом реакции преципитации в капилляре.

Реакцию среды (рН) и уровень электролитов (ионов натрия, калия, хлора) определяли на ионометре И-500 с использованием ионоселек-тивных электродов, объем циркулирующей крови - по методу Филипса.

Иммунологические исследования. При иммунологическом исследовании был использован комплекс следующих методов: реакция Манчини — для определения концентрации сывороточных иммуноглобулинов, определение количества Т - лимфоцитов и их субпопуляций методами розет-кообразования — Е-РОК. Тимусзависимые Т-лимфоциты имеют рецепторы для эритроцитов барана, которые выступают, таким образом, специфическим маркером для их распознавания (Е-РОК: Erythrocyte — розеткооб-разующие клетки). Выявляли 2 субпопуляции: теофиллинчувствительные Т-лимфоциты (Т-супрессоры), утратившие способность к розеткообразова-нию под влиянием обработки теофиллином, и теофиллинустойчивые Т-клетки (Т-хелперы) лимфоциты, сохранившие такую способность.

Иммунохромотографические исследования. Диагноз на парвови-русный энтерит подтверждали при помощи HiSens теста фирмы HBI Co., Ltd (Корея), основанного на иммунохромотографическом анализе. Парво-вирусные антигены связываются специфическими антителами, нанесенными на тестовую карточку. В результате их взаимодействия образуется комплекс, видимый в форме полоски.

Гормональные исследования. В основе количественного определения кортикостероидов, тиреоидных гормонов, эстрадиола и прогестерона в биологических жидкостях животных лежит конкурентный вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Принцип метода основан на конкуренции между адсорбированным на поверхности лунок планшета эс-традиолом (прогестероном) и свободным (в калибровочной пробе или анализируемом образце) эстрадиолом (прогестероном) за активные центры связывания аффинных антител к эстрадиолу, меченых пероксидазой. В результате иммуноспецифической реакции между антителами к эстрадиолу (прогестерону) и самим эстрадиолом, содержащимся в пробах (стандарты или образцы), и на поверхности лунок планшета образуются комплексы антитела-эстрадиол. Комплекс антиген-антитело, не связанный с поверхностью планшета, удаляют путем промывки.

В результате ферментативной реакции пероксидазы с перекисью водорода субстратного раствора происходит окрашивание 3,3',5,5'-тетраметилбензидина (ТМБ) в синий цвет. Интенсивность окраски обратно пропорциональна содержанию эстрадиола в анализируемом образце. Реакцию останавливали добавлением серной кислоты, вызывающей смену окраски с синей на ярко-желтую. Результаты реакции оценивали на иммуно-ферментном анализаторе (спектрофотометре) при длине волны 450 нм.

Образцы биологических жидкостей, если они не исследуются в тот же день, были заморожены и хранились при температуре минус 20° С.

Кровь брали также как и для проведения биохимического анализа, получали и отбирали по 0,2 мл сыворотки на каждый анализ в стеклянные или полиэтиленовые пробирки. Добавляли по 1 мл диэтилового эфира, закрывали пробирки пробками, интенсивно встряхивали в течение 1 минуты и помещали в емкость, содержащую смесь ацетона и сухого льда до замораживания водной фазы(замораживание водной фазы можно проводить в холодильнике при минус 20°С и ниже);

-переливали эфирный экстракт во флаконы или пробирки и помещали их на водяную баню при +37°С до полного выпаривания эфира;

- растворяли сухой остаток в 50 мкл растворителя для анализируемых проб, добавляли 325 мкл рабочего раствора промывочного буфера и использовали в ИФА.

Функциональное состояние симпато-адреналовой системы оценивали по уровню экскреции А, НА, ДА и ДОФА флюорометрическим методом в порционной и суточной моче (Э. Ш. Матлина с соавт., 1965) на приборе БИАН-130 (М-800). Сбор мочи проводился на каждом этапе обследования, до и после завершения тестирующей функциональной пробы.

Определение параметров системной гемодинамики. Для снятия реокардиограммы по Кубичеку накладывали четыре электрода. Два из этих электродов активные, они создают высокочастотный ток низкого напряжения. Первый накладывали на голову между ушами, второй - на конечность в области бедра, точное положение этого электрода не имеет значения.

Вторая пара электродов - потенциальные, они и регистрируют изменение сопротивления тела. Первый электрод кольцевой, его накладывали на среднюю часть шеи, второй, пластинчатый, накладывали слева от мечевидного отростка.

Регистрация реокардиограммы осуществлялась автамотически с помощью компьютерного комплекса - реографа полианализатора для комплексного исследования параметров кровообращения РГПА 6/12 «РЕАН-ПОЛИ», программного обеспечения - версия 2, профессиональная для «РЕАН-ПОЛИ», и компьютера. На данном реографе при проведении исследования одновременно с реограммой регистрируется электрокардиограмма и фонокардиограмма, что необходимо для определения фаз сердечного цикла.

Измерение амплитуд и временных интервалов осуществлялось от начальной точки и нулевой линии реограммы. Программное обеспечение данного реографа позволяло автоматически определять изолинию, начало реограммы, амплитуду и продолжительность реографической кривой. При этом расчеты около 40 показателей, иногда чрезвычайно сложные, программа проводила автоматически для каждого кардиологического цикла.

На стандартной реограмме выделяли: систолическую волну, максимум амплитуды которой обозначен маркером «S», инцизуру - второй минимум реограммы, обозначенный маркером «i», диастолическую волну, второй максимум реограммы, обозначенный маркером «d», начало реограммы, также соответствует пересечению первой производной с изолинией с левой стороны, обозначен маркером «а», при этом начало следующей реограммы обозначено маркером «а'», на первой производной обозначен маркером «е» второй минимум, соответствует окончанию периода изгнания.

На фонокардиограмме программа отмечает начало первого тона, обозначенного маркером «I», и начало второго тона, обозначенного маркером «II».

На кардиограмме программа отмечает маркером «Q» первый минимум, а маркером «R» первый максимум, маркерами«С)'» и «R'», соответствующие места следующего кардиоцикла.

Расчет ударного объема сердца при трансторакальной тетрапо-лярной рекардиографии производится по Кубичеку.

Оценка вегетативного тонуса. Для оценки состояния вегетативной нервной системы щенков применялась динамическая запись кардиоинтер-валограмм при выполнении адреналиновой пробы (в/в введение 0,01 мг/кг адреналина гидрохлорида в виде 0,01% раствора). Поскольку синусовый сердечный узел является не только водителем ритма сердца, но и индикатором функционирования всех регулирующих систем организма, то такой интегральный параметр кардиоинтервалограммы, как ИН в покое может служить показателем исходного вегетативного тонуса (ИВТ), а его динамика в ответ на изменение функционального состояния под действием адреналина отражает вегетативную реактивность.

Регистрация КИГ на адреналиновую пробу осуществлялась следующим образом: в положении лежа на правом боку проводилась 1-я запись КИГ (исходная); 2-я - регистрировалась сразу же после введения адреналина; 3-я запись КИГ осуществлялась через 10 минут после адреналиновой пробы. В каждом из 3-х массивов кардиоциклов рассчитывался ИН, т. е. соответственно ИН1, ИН2, ИНЗ.

Исходный вегетативный тонус (ИВТ) оценивался по ИН1, а также по ИНЗ. Последний может представлять более точную информацию, т. к. при первой регистрации щенки, как правило, испытывали волнение.

В процессе работы в период 1995-2007 гг. был выполнен объем исследований приведенный в таблице 1.