Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Иммунологическая реактивность крупного рогатого скота при моно- и комплексной вакцинации против сибирской язвы, эмфизематозного карбункула и лептоспироза

1 б Оіп ВВ5 , .

МИИИЕРСГШ СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА. И ПРОДОЕОЛЬСЇВИЯ Р$

САРАТОВСКАЯ ГОСУДАГСТЕЕННАЯ АКЩШЯ ШТЕРИНАИЮй 1ЕДЙ5£І

И БЮТЕШШГШ

На правах рукописи

?

' БАРДИН ВЛАДИМИР ИЛЬИЧ

ИІШНОЖГИЧЕСКАЯ РЕАКГИШОСТЬ КРУПНОГО РОГАТОГО СК0ТД ПРИ ЮНО - И КОМШЕКСНОЙ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ, ЭМФИЗЕМАТОЗНОГО КАРБУНКУЛА И ЖПГ0СШР03А

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Саратов - 1995

Работа выполнена в Саратовской Государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии. _ .

Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ, доктор .

ветеринарных наук, профессор Г.П.Домкин

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

С.С.Бирбин

. кандидат ветеринарных наук,, доцент ' В.Г.Ульянов

Ведущая организация: Сангс^Петербургская Государственная академия ветеринарной медицины

Задита состоится " 10 пНЛ)&&р-& 199 5~г. в И часов на заседании диссертационного совета К-І20.97.02 при Саратовской Государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии (4І007І, г.Саратов, ул.Б.Садовая, .220),

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан " к ” 0стл5рЛ. 1995~г.

Учзкый секретарь диссертационного совета, доцент

Ъ .%. Салау

тгл

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ .

Актуальность проблемы. Несмотря на значительные успехи, достигнутые в профилактике сибирской язвы, эмкара и дептоспироза, эти инфекции в последнее время продолжает представлять серьезную угрозу для животноводства. В этой связи проблема совершенствования иммунопрофилактики указанных инфекций сохраняет актуальность. Представляет научный и практический интерес изучение механизмов иммуногенеза у животных при различных способах введения антигенов, количественные показатели содержания общего белка и его фракций в сыворотке крови, поствакцинальные морфологические изменения в различных органах и тканях (И.А.Чалисов,А.Л.Тамарин,1946; Я.Л.Рапоп-порт,1957,1965; С.И.Гинзбург-Калинина, 1963; Н.Н.Гинзбург,1969; ГьФ.Здродовский,1969; Ф.И.Каган,1966; £?.М.Аристов,1972; Н.К.Сатин, 1976; Н.К.Сатин и др. ,1926; А.П.Смирнов и др. ,1975; А.С.Казарян, 190Э; В.А.Абалкин и др.,1990; В.Е.Пивоваров,1991; Fagraeus -> 1943; Tu Vlnh Adler, S.Fain ,1982;. A.M.S.Guzman et all ,

1936 и др.), а тазпке ряд других фундаментальных вопросов, связанных с практикой противоэпизоотич^ских мероприятий.

Наблюдения показывают, что многие широко используемые для иммунизации людей и животных вакцины не всегда оказываются эффективны. Поэтому все чаще пояаляются рекомендации о проведении двукратных прививок против сибирской язвы (Р.М.Алехин,1974; В.И.Каря-гин,1974; А.С.Коротич,Л.И.Погребняк,1976). В результате суммарный обьем проводимых вакцинаций с целью профилактики инфекций увеличивается, что создает определенные трудности охвата прививками всего поголовья животных. В связи с этим изыскиваются ноЬые ассоциированные и совершенствуются способы введения и методы повышения протективных свойств вакцин (А.С.Казарян,1989; И.А.Вакулов,В.А.Гаврилов,19У1; И.А.Бакулов и др.,1993; А.М.Коваленко,1994; И.А.Лут-фуллина,1У94; А.С.Собакин,19У4; Н.М.Швецова и др.).

Недостаточная изученность данного вопроса послужила основанием для проведения исследований по испытанию раздельного и комплексного введения вакцин ярбтив сибирской язвы (СТИ), эмкара и лептоспироза и выявлению особенностей поствакцинальных иммунологических сдвигов в организме крупного рогатого скота.-•

Цель работы. Экспериментально обосновать иммунологическую эффективность комплексной иммунизации крупного рогатого скота против сибирской язвы, эмфизематозного карбункула и лептоспироза. Изучить некоторые механизмы иммуногенеза при моно- и комплексной иммунизации животных, оценить функциональную активность отдельных звеньев

иммунной системы.

Задачи исследований.

1. Изучить морфологическую реакцию организма при моно- и

комплексной иммунизации животных. '

2. Оценить функциональную активность отдельных звеньев иммунной системы при различных способах и схемах вакцинации животных.

3. На основании комплекса иммунологических и морфологических исследований оптимизировать способы вакцинации животных против нескольких инфекций.

4. Оценить антигенную активность и иммунологическую реакцию организма, выяснить возможность проявления конкуренции антигенов при комплексной иммунизации жшдтных.

5. Разработать и научно, обосновать оптимальный способ вакци-

нации животных против сибирской язвы, эмфизематозного карбункула и лептоспироза. 1

Научная новизна. Эксперийентально обоснована и представлена иммунологическая эффективность комплексной иммунизации крупного рогатого скота против сибирской язвы, эмфизематозного карбункула и лептоспироза. Установлено, что одновременное введение (полной дозы в несколько точек) вакцинных препаратов (антигенов) с целью иммунопрофилактики указанных «{нфекций не вызывает угнетения функциональной активности иммунокомлетенткых клеток, участвующих в иммуногенезе, и вызывает в организме иммуно морфологическую реакцию в органах и тканях иммунной системы, обусловливающую синтез специфических антител и гамш*-гдобулинов в сыЬоротке крови иммунизированных животных. Полученные данные по количественной характеристике и функциональной активности отдельных звеньев иммунной системы свидетельствуют об отсутствии конкуренции за активацию клеточкой кооперации в процессе синтеза специфических антител между различными антигенами при комплексной иммунизации животных.

Показано, что комплексная иммунизация животных обеспечивает более выраженную иммунологическую реакцию организма и по своей иммунологической эффективности не уступает вахцллации моновадентни-ми антигенами. Дробное .введение антигенов увеличивает их контакт с иммунокомпетентными клетками, участвующими в иммуногенезе, и обеспечивает формирован;» болео напряженного иммунитета.

Практическая значимость. На основании проведенных исследований рекомендован способ "дробного" введения антигенов при комплексной иммунизации животных против сибирской язвы, эмфизематозного •карбункула и лептоспироза, повышающий иммунологическую эффективность вакцинации крупного рогатого скота против указанных инфекций. Полученные данные могут быть использованы с целью повышения эффективности иммунопрофилактики в системе мер борьбы с инфекционными болезнями животных.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены на научно-практических конференциях Саратовской Государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии (1976,1977,1995г> и Саратовской НИВС (1978г).

Публикации. Содержание диссертации отражено в 5 печатных работах. ' •

Обьем и структура работы. Диссертация изложена на. 127 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения результатов, выводов и практических предложений. Библиографический указатель включает 160 источников отечественных и зарубежных авторов. Материалы диссертации иллюстрированы 13 таблицами, 7 Диаграммами, 23 рисунками и приложениями. ’ .

Положения, выносимые на защиту.

1. Результаты исследований по оценке иммунологический эффективности дробного введения вакцин против сибирской язвы, эмкара и лептоспироза. .

2. Особенности иммуногенеза при раздельном и комплексном введении вакцин. .

3. Динамика изменений морфологических» гематологических и серологических показателей При введении указанных вакцин.

• схтшншиссщааши

Материал и метода исследований

Эксперименты, по вакцинации животных и наблюдения проводились в совхозе "Привольный" Ровенского района, Саратовской области с 1971 по 1У93 гг, В трех сериях опытов использовали Ш бычков черно-пестрой породы, живой массой 150 кг и 40,бычков живой массой 350 кг. Против сибирской язвы животных иммунизировали вакциной СТИ, против эмкара гидроокисьаломиниевой формолвакциной, против лептоспироза - поливалентной фенолизированной вакциной. Опыты про-

водились в 10-ти вариантах. Схема включала различные способы введения антигенов (табя.1).

Предохранительные свойства сыворотки крови изучали на 14 день после введения вакцины. Для этого использовались морские свинки, которым подкожно вводилась иммунная сыворотка опытных животных с последующим (через 24 часа) заражением Смертельной дозой культуры Clostridium cbiiuroi - R-15 . Показателем иммунной активности сы-

воротки служила выживаемость инфицированных морских свинок.

Перед началом опыта и через 14 дней после вакцинации у животных исследовали содержание общего белка, белковых фракций сыворотки крови, а также определяли лейкоцитарную формулу крови. Количество белков в сыворотке определяли рефрактометрически (П.П.Аста-нин,1951), белковые фракции - алектрофоретически (Г.В.Троицкий, 1962). Лейкоцитарную формулу определяли двупольным методом подсчета клеток белой крови, окрашенной по Романовскому-Гимза. Иммуно-компетентные клетки учитывались в соответствии с современными представлениями об их морфологии (Р.В.Петров,1983; М.С.Жаков,

В.С.Прудников,1992).

. . Таблица I

Схема опытов по иммунизации животных

Варианты

опытов

Количество

животных

Использованы

вакцины

(Способ введения I антигенов

Доза

1

2

12

6

СиЗиреязвениая вак-1Подкожно в одну цина - СГИ Іточху

Подкожно в две {точки

Полная,

1,0

по 0,5 мл

3

4

5

ал

14

14

Гвдроокисьаламиние-! Внутримышечно в вая формолвакцина )одну точку против эмадра - ГАФ | Внутримышечно в

|ДВ9 ТОЧКИ

{Внутримышечно в ’четыре точки

Полная,

1.0

по 0,0 мл по 0,25мл

б.

7

12

б

Поливалентная фено-1 Внутримышечно в лизированная против!одну точку лептоспироза - ПФД {внутримышечно в ■ Ідве течки

Полная,

1,0

по. 0,5 мл

10

СТИ + Ш

{Комплексное: СГИ Іподкожно; ГАФ -} внутримышечно

Полная

{Комплексное: внут-{римышечно в разше 1 точки__________„__

Полная

Варианты(Количество опытов !кквотных ! Использованы ! вакцины !Спосо6 введения ! -! антигенов !

10 I о I ! | !С1И + ГА* + П&Д ! ! I ГКомллексное: СГИ -! !подкожно; Гл1',й4Л-Ь- к., I внутримышечно в ? раэнке точки !

Контроль! 10 ! _ ! - ! -

По истечении 14 дней поело экспериментальной ьакцина^ик животных убивали на мясокомбинате и проводили взятие у них лимфатических узлов и селезенки для морфологических исследований. Яате-риал фиксировали в хцдкости :арнуа, а затем подвергали парс^ иловой зелиске. Срезы' готовили толщиной 6-9 мкм. и окрь^и&лк гсиа-токсилииом, а также ихпрагнировались азотнокислым серебром по Бильсовскому (Мадеш). •

Для выявления ДНК срезы окрашивали методом Фелъгена-Рсэе'йе-ка, а РНК - в реакции Браае с подкразиванием метиленовым зелеккч-пиронином по Унна-Паленгейму. Микрофотографии с обьектов исследования получали с помощыв МБЙ-15. цифровой материал обрабатывали биометрически (В.К.Ывркурьева*1964).

геЗУЛЬТАТЫ ИХЩОЬАйЗ .

1.1. Иммуномэрфзлэгичесяие и бксхкмическиэ изменения на введение сибиреязвенное вакцины СГИ '

Учитывая эффект возможных физиологических отклонений у лиьст-них после вакцинации, у спь-тких животных измеряли т-гмпературу, '»°-ределяли частоту пульса и дыхания. Как показали каЗлс^е;’;у», видимых из м-з некий не отмечено. Однако, на 2-3 дни посла пр»:вк£хи и до кан-ца периода опыта обнаружено увеличение регкзнарккх (прг^паточнкй, псверхностнопаховий) лкм4лтг«ск« узлов, на гистологкч^сххх пр^-паратах которых фолликулы жстеми сливались между собой ь о5р.1зс-вывали массивные скопления. Эти скопления состояли из дкм^оцнто^ среди которых обнаруживались поли?ласты и единичное макрофаги. Б синусах таюье выявляли клеточные элементы: лимфоциты, подпблястм на раэличдах стадиях пролиферации я маяр^атк. В лич^гкч-’чГнс узлах ньблодали умеренно выралиэнну» гиперплазия. {-.ьий'..л« «нтсн-скнюе содержание ^’.К установлена в лимфоцитах синусов * т<акей.

Исследования содержания общего белка и его фракций на 14-й день после вакцинации показали статистически достоверное (Р<0,05) увеличение гамча-глобудинов (тайл..2), что свидетельствует об 11Ч^У ноб иояо г иче с ком сдвиге в организме опытных животньлс, который сохранялся до 14 дня, особенно после вакцинации катодом дробного введения антигена. Наблюдаемые измешния с понижением общего белка и альбуминов подтверждены определением А/Г коэффициента.

Таблица 2

Содержание общего белка и белковых фракций в сыворотир крови животных, иммунизированных сибиреязвенной вакциной С1Й ш )

Периоды исследований .

!Коли! Общий !чест! белок, •во ! г % !хи- {

ІВОТ-1

*ных 1

!Альбу-!ыины, %

І

?

Г л о б

---------г

І !

1

улины, -----1—

А

1 А/Г !коэффициент

! .

1

! 2 1

!

!

Перед опытом

Через 14 дней с начала опыта

Животные в возрасте двух лет Контрольная группа

.7.10

±0,003

+?,<я

±0,^4

39,71 15,13 ДО ,71 34,44

-• 1,72 і 2І02 І 1,04 + т со

, Зсі,04 ± і,ІЗ

1,68

15,98 11,25 34,73

- 1,06 і 1,32 - 1,14

,0,66

±0,04

+0.61

Опытная группа . '

Вакцина вводилась в одну точку в полной дог<е

Перед гак-цикацкей 6 .7,36 ±о,оь 39,68 ± 1,39 15,89 ± 0,57 +П.25 ± 1,24 +зздз ± 0.В7. +0,66 ±0,04

Чзрез 14 дней после вакцинации 6 .6,97 ±0,16 Вакцина .38,03 ± 1,04 вводилась .13,60 .10,17 .38,19 ± 1,35 ± С|83 ± 1*23 в две точки по 0,5 дозы +0,61 ±0,03

Перед вакцинацией 3 .7,22 ±0,19 ^36,57 ± 1,70 18,69 ± 0,42 12,99 ± 1,17 +31,74 ± 1,61 .0,57 ±0,04

Через 14 дней поела 3 .7,33 ±0,14 35,10 ± 0,01 • Л1.39 ± ІІ52 13,95 ± 2І74 +39,54 ± X *12 +0,54 ±0,02

вакцинации

Перед опытом ^

Через 14

дне й посла 5

вакцинации

Животные в возрасте шести месяцев

Контрольная группа

+40,33 +15,33 13,03 .31,26

±•1,46 ± 1,64 ± 2,04 ±1,74

+7,оа

±0,22Г

6,84

±0,14

.40,88 .14,04 10*40 .,34,66

± 0,94 ± 1,Зо ± 1,65 ± 1І90

,0,68

±0,033

+0,69

±0,02

- 9-

I ! 2 ! ! 3 ! 4 ! 5 ! 6 . ! ? ' ! у

Опы тнья груп П&

В: э. клика ■вводилась в одну ТОЧКУ Б ПОЛНОЙ Д0Э9

Перед вакцинацией 6 .7,21 ±0,06 .41,10 І 1,43. 17,00 ± 1,оа Л 2,22 і 1,25 29,67 - 0,71 Л .71 -0 ,^5

Через 14 дней после вакцинации 6 ,6,45 ^■0,14 35,61 - 2,У) 14,54 і 2,56 .6,69 -1,57 - і,іО .0.^ Я>;ий

Бакцина вводилась в дье точки по 0,5 дози

Перед вакцинацией 3 +7,М *0,14 .4о,6о І £,о6 +14,40 ~ 3,63 9,59 ±0,бУ 27,23 ± о,уу 40»''* -0,0 (

Чэреэ 14 дней поелз вакцинации 3 +6,27 ±и,Г? .32,64 ± 3,40 *12,85 І 1,Ь9 0,52 А),од - *,1г +0,« -У.оо

1.2. Іікмунологичаская реактивность

организиа при вакцинации против эм кара

У животных, начиная с 3-5 дней посла вакцинации, найдидалась различная степень ужля&нт регионарных к месту кхъгкцхи антигена лимфатических узлов. На гистологических препаратах отмочено убєличєниз фоллкхулов коркового слоя,' -ксторв» сливаясь меаду собой, об радо вывали каесиькьга скопления лимфоцитов, среди которых мэстаин встречались полибл ас ты и макрофаги. В синусах и мякотных тяхах отмечено сбильное еодерзан.ів ли»*фуцкто.2, иолнбластов, мак-ро^ягов, а так»е гистиоцитов и эпэтедчоКнних хлоток.

В стромо лимфатических .уадов каЗдодались обильная кд&точнлл инфильтрация и отак. Б жглких трабекулах гресбладаял лим^рцутк, единичное зпитедиодкие клетки, гистиоциты; е хрупких траЗаяулах -ігодлагеноше волокна.

3 мелких кровеносных • сосудах отмечены пролиферация ч слухх-войяа з кд о тел иал ькис клеток, переваскуляркая инфіїльтрадяч ля^оцк-тами и гистиоцитами и переь&скуядрнкЯ отех. В отдалекігос д;:«|.ата-ческих узлах структурных изменений не .оп^-чоио,

В лимфоузлах животных, которым вводили вакцину в орду -очку (полная дози), ттттш оказались болэо зирьхоїошин 9 чуайзхула^ 'А синусах, а при дробном видения антигена а нескодыо ълок ~ ь фолликулах.

В селезенка кзиснскйя мз злаке ал и от способа ьмдекия ді’ткг-:-нз и носили однотипный характер. В бэлуй яульп-з.гглрлялаь уженная гимрОАЗэяя $одлпкузоа. Семян? центра а них но оодрмш»

Клеточный состав фолликулов существенно не изменялся, но преобладали. лззфциты, обнаруживались гистиоциты и некоторое количество полибластов. Красная пульпа гиперплазирована. Количественные ■ соотношения клеточных элементов в различных участках были не од/лаковь-мч. Наблюдалось значительное накопление полибластов на различных стадиях трансформации. В отдельных полях зрения преобладало скопление лимфоцитов. Встречались также остатки клеток, подвергшиеся кариопикнозу, неустановленной природы. 11очти во всех полях зрения обнаружены макрофаги,, нагруженные главным образом остатками эритроцитов. .

При исследовании наличия ДНК в ядрах клеток регионарных диетических уз лоз и селезенке обнаружена положительная реакция фельгена, ДИК имела форму красных глкбок, в отдельных ядрах хо-роео просматривалось ядрьпако.. Наибольшее количество ДОК было а лимфоцитах, инфадьтрирующих строму и значительно меньше в лимфоцитах фолликулов. Существенной разницы в содержании Д1К у вакцинированных и невакцинированных животных выявить не удалось. В регионарных, отдаленных от места инъекции лимфатических узлах и селезенке, реакция Брзше на РНК у подопытных животных не отличалась от контрольных. РНК хорошо просматривалась в виде ярко окра-пенных розовых глыб о к и располагалась равномерно по все? протоплазме клеток. '

Изменения в белой крови характеризовались увеличением эоэи-нофилов на 1Ь,645£, у животных двухлетнего возраста, а у шестимесячных - на 19,7% против Исходных показателей. В обеих возрастных группах животных отмечалось - уменьшение моноцитов.

Нарастание уровня гамма-глобулинов отмечено у животных обеих возрастных групп, но статистически достоверное (Р«£ 0,05) увели-«Ение гамма-глобулинов наблюдалось при введении вакцины' в два участка тела животных (табл.З).

- 1Г-

Таблица 3

Содержание общего белка и белковых фракций в сыворотке крови животных, иммунизированных вакциной против эыкара (й*п )

Периоды

исследова-

ний

!Коли! Общий !чест! белок,

!во ! р > !жи- !

!вот-!

!ных !________

Альбу- ! Г л о б у л » я а, %

мины,

V

! А/Г *! коэффициент і

!

т

> 2 !

? 5 !

I 7

)

Перед ОПЫТОМ 5

Через 14 дней с нача- 5 ла опыта

животные в возрасте двух лет Контрольная группа

.7,10

*0,003

+7,01

*0,24

.39,71 15,13 .10,71 .34,44

* 1І72 * 2^02 - 1,04 ~ 1,68

.38,04 .15,98 .11,25 +34,71

* 1,13 і 1,06 * 1,32 І 1^14

+0,6б

^0,04

+0,61

*0,09

Опытная группа Вакцина вводилась в одну точку я полной дозе

Перед вакцинацией

Через 14 .

дней после вакцинации

Перед вакцинацией

Через 14 дней после вакцинации

Перед вакцинацией

Через 14 дней после вакцинации

.7,12

*0,05

.37,74 17,12 ^12,65

* 0,48 * 1*36 * 0,93

,32,27 * і:і?

-О,0ч

Л *6'71 *32,Ь2 Д9,06 12,03 ,36,06

Ь *0,15 *1,13 *0,91 І 0,17 *1,42

Вакцина вводилась дробно в две точки по 0,5 дозы 3

4.0

-0,02

,7.0В

*0,13

+7,00

*0,08

ЗЬ,ь7 11,97 Л6,11 33,03

* 1,17 * 2,71 * 0,89 * 1,35

.37,09 .12,34 12,11 38,45

* 2,20 * 0,36 * 1,10 * 0,94

*0,63

*0,02

+0,5Э

*0,05

Вакцина вводилась дробно в, четыре точки по 0.25 дозы 3

3

±0,03

+7,13 . *0,24

.37,45 .16,17 15,56 Э0,80

* 2,69 * 0,81 * 0*43 * 1,82

.37,16 17,19 10,52 35,11

- 0,74 * 1,9У. ~ 1,18 *0,98

Перед опытом ^

Через 14 дней после на-5 чала опыта

Животные в возрасте шести месяцев Контрольная группа

+7,08

*0,22

.6,84

*0,14

.40,33

* 1,48

,40,88

* 0,94

.15,33 .13,03 . 31,26

* 1,64 * 2,04 * 1,74

,14,04 .10,40 .34,66

* 1,36 * 1,65 ± і,!#

.0,59

*0,02

-0,02

.0,68 *0,03

+0.69

*0,02

і ...» г ! 3 !. 4 .! 5 _ ! 6 1 7 ! В

Опытна*} группа •

Вакцина вводилась в одну точку в полной дозе

Перед ь-к- 6 динацией .,6,31 ,43,20 ±о,зб ± і;7о *17,54 ± 0,66 . .11,75 ± 0,67 '27,49 ± 0,72 *0,72 ±о,оа

Через 14 дней после 6 вакцинации .6,37 ,34,29 ±0,07 ± 0,92 .14,89 ± 1137 -иЫ4 ±1{34 *41,66 ± г ,22 +0,52 ±0,02

Вакцина вводилась дробно в две точки по 0Г5 дозы

Перед вак- з цинацией .7,02 .42,13 ±0*26 ± 1,(Й 16,25 ± ^43 *12,16 ± 0,53 .29,44 ± 2,69 *0,73 ±0,02

Через 14 дней после 3 вакцинации 6,61 .36,44 ±0,22 і 0,43 ,14,6а ± 0,43 *10,19 ± о,ьг .33,ТО ±-1,25 0,56 ±0,01

Вакцина вводилась в четыею точки по 0,25 дозы

Перед вак- о цинацией .7,06 46,64 ±0*06 ± 1,47 *Н ,95 ± 1^22 .9,61 ±1.65 *31,79 ± 1,65 *0,67 ±0,05

Через 14 дней после 3 вакцинации ,6,50 .36,33 ±0,03 ± 1,в5 ,13.76 ± 1,30 .8,88 ±1,47 *40,93 ± 0,94 *0,57 ±0,02

Д.З. Иммунологическая реакция организма на комплексное введение сибиреязвенной и вакцины против эыкара .

Начиная с 3-5 днейпослз инъекции сибиреязвенной (СТИ) и вакцины против эмкара, у животных наблюдалось различной степени увеличение регионарных лимфатических узлов. На14-Й день фолликулы в основном имели нормальное гистологическое строение, но в некоторых участках коркового слоя они были увеличены и с неотчетливыми контурами, просматривалось обильное скопление лимфоцитов. Ими были заполнены синусы и мякотные тяжи, встречались также макрофаги. Выявлялось большое разнообразие трансформирующих полй5ластов и единичные нейтрофиллы. .

Белая пульпа селезенки гилерллазирована, фолликулы увеличены и содержали лимфоциты. Красная пульпа также изменена и содержала различные иммунокомпатентныз клетки: лимфоциты, гистиоциты, макрофаги, единичные полинуклеары. В количественном отношении преобладали лимфоциты. ' .

Дг1К в ядрах клеток регионарных лимфатических узлов и селезенки выявлялась в виде фиолетово-красных гдыбок, а ШК 8 протоплазме - в виде розовых глыбок. Количественного различия в содержании

- ІЗ -

нуклеиновых кислот у опытшх и контрольных животных не наблюдалось.

Состав белой крови характеризовался увеличением эозинофкяов на 36,3? у двулетних и на 33,33 - у шестимесячных животных. Наблюдалось татаэ сн'.'-дени? уровня моноцитов у животных езст'/мзсячкого возраста. _

Исследование общего белка и его фракций показало, что статис-?!!чески достоверное увеличение га-мма-глобулинов наблюдалось как у двулетних (Р-^0,05), так и у шестимесячных (Р<0,01) животных (табл.4). ^то свидетельствует о том, что комплексное введение вакцин ССТИ. и эмкара) вызывает более выраженный иммунологический ответ у животных, чем при инъекции моновакцин.

Таблица 4

Содержание общего белка и белковых фракций в сыворотке крови бачков,- иммунизированных комплексно: сибиреязвенной

вакциной СТИ и вакциной против эмкара (М±т )

Периоды ! Коли'.Общий !Альбу~ !мины, % I ! ! ! Г л о 6 у л и н ы. % ! А/Г

исследова- ний !чест!белок, !во !г % !жи- 1 1 вот-! !ных 1 ! \<л ! 1 ! і А і * ! 1. ! • ! !коэффициент І I

I ! 2 ! 3 ! 4 ! 5 1 6 ! 7 ! 8

Животные в возрасте двух лет

Перед опытом ^

Через 14

дней с начала . 5

опыта

Перед вакцинацией

Через 14 дней после вакцинации

Контрольная группа

/МЭ

±0,003

У,01

±0,24

.7,28

±0,13

.6,65 -±0,07

.39,71 .15,13 .10,71 34,44

± 1,72 ± 2,02 ± 1,04 ± 1,бь

,38,04 15,98 ЛІ.25 .,34,71

± 1,13 ± 1*06 ± 1,32 ± ІІІ4

Опытная группа ,40,Од ±-1,89

36,17 ± 2,60

.16,25 .14,19 .29,48

± 2,10 ± 0.8Э ± 2,05

,16,19 II ,59 36,02

-± і,7а ± 1,И6 ± о;в2

Животные в возрасте шести месяцев Контрольная группа '

Перед опытом

Через 14 дней с начала опыта

7,08 ±0,22

,40,33 ± 1,48

.15,33 ,13,03 31,26

± 1,64 ± 2,04 ± 1,74

+6,84 . 40,88 .14,04 ,10,40 „34,66

±0,14 ± 0,94 ±1,36 ± 1,65 ± 1*90

0,66

±0,04

.0,61

±0,0У

,0,66

±0,01

.0,57

±0,01

о.ьь

±0,02

5

Перед вакцинацией 5 Ї0ІІ5 Опутн^Ш'Ппа 40,40 17,14 1 1,64 - 0,50 лз.зг - 1,65 *29,12 ± 0,У0 0,Ьсі ±0,и&

Через 14 дней посла вакцинации ь з§;іі „34,81 14,53 і 2,19 і 2І2І Ю, ± 2,41 39,70 І 1,66 *0,54 ±0,05

1.4. Иммунологическая реакция организма на введение вакцины против лелтоспироза

Изучение изменений иммунологических показателей на введение вакцины против лептоспироза показало выраженную реакцию фолликулов регионарных лимфатических узлов. Они были увеличены, сливались в сплошные массивные клеточные скоплений, в которых преобладали лимфоциты к и* переходные фор.чы. В синусах и мякотных тяасах также отмечалось преобладание лимфоцитов, но встречались микро СнеЯтро-филы) и макрофаги (гистоциты). Б трабекулах и капсулах лимфатических узлов наблюдались обширные воспалительные отеки, гомогенизация к слияние коллагеновых волокон, а также лимфогиетиоцитарная инфильтрация. В кровеносных сосудах выявлялись явления ьаскулита и лери-васкудита, в их стенках - инфильтрация лимфоцитами и гистиоцитами, пикноз ядер и сдуяиваниз эндотелиальных меток. В белой и красной пульпе селезенки наблюдалась гиперплазия, вследствие обильного накопления клеточных элементов: лимфоцитов, макрофагов и др.

$1К в ядрах клеток регионарных лимфатических узлов и селезенке выявлялась в виде фиолетово-красных, а ШК в протоплазме - в виде бледно-розовых глыбок. Особенно ясно коктурчровалась $1К в ядрах лимфоцитов, гистиоцитов синусов лимфатических узлов и монее - в их фолликулах.

В крови-животных на 14-й день после вакцинации отмечалось повышение содержания эозинофилов на 55,3^, у двухлетних и на 2-1,7% -у оестимесячных бычков. В 50 же время наблюдалось снкхенис содержания моноцитов. •

Показатели общего белка и белковых фракций сыворотки крови (табл.5) свидетельству*» об их незначительных колебаниях, но увеличение гамма-глобулинов у животных обеих возрастных групп оказалось статистически достовер!шм (Р 0,05). Представленные данные доказывая?, что ьахцлна против лептоспироза, вводимая животным в один или

в -

два (дробно) участка тела, вызывала выршкеннуо.реакций перифер/чзс-кюс органов гивотных вплоть до их убоя (14-й день).

Таблица 5

Содержание общего бэлка и белховкх фракций з сыворотке крови животных, ммуниэированних ■ вакциной против лептосЬироза (м - и)

Периоды !Коли! Общий ! Альбу- і Г л о 6 у л и н ы, % ! А/Г

исследова- ІЧ0СТІ белок, ! мины,? і г ! ’ !кооффл-

ний ! во ! !ж;і- ! г % і І ! 1 <4 і р ! V ! Ц из кт 1

!вот-1 ! 1 1 і і -

1ных ! ! ( ! . ! »

1 ! 2 1 3 ! . 4 ! Ь ! 6 ! 7 » 8

Перед от тон ^

Через 14 дней с начала опыта

Перед вак- 6

ЦИНЙЦЯЭЙ

Через 14 дней после 6

вакцинации

&ивоткиа в возрасте двух лет Контрольная группа

+7*10.

±0,003

.7,01

±0,24

±О,0й

.6,8

±0,09

.39,71 ,15,13 10,71

± 1,72 ± 2,02 ± 1,04

*33,04 15,93 И,25

± 1,13 * 1,06 ± 1,32

Опытная группа

41,30 .15,92 11,40

^ 1,4У ±0,79 ±0,70

,35,93 ,14,92 II, 96

± 1.ІУ ±1,70 ±0,47

*34,44 0,66

± ІІ60 ±0,04

*34,71 0,61

±1,14 ■ ±0,09

*31,37 .0,70

± 1,52 10,04

ДМ4 ^

- 1,00 ±О,0о

Перед вакцинацией

Чгрез 14 дней г.осле вакцинации

Перед опытом

Вакцин* вводилась дробно в ді-з точки по 0,5 дсо-і

±0,0о

б,аэ

±0,09

+30.7і> ± 0,а0

41,61 „Н.іб 12,76

±0,7/ ±1,31 ±0.47

*30,95 * *12,72 *16,23 *36,06

±2,76 ±2,61 ±1,о6 ±0,06

Кивотнке в возрасте шест» цтс^г.рр Контрольная группа

Через 14 дней с начала опыта

+7,0в

±0,22

.40,33 ± 1,46

*6,6-1

±0,14.

*15,33 *13,03 ± 1,64 ± 2,04

.*14,04 *10/а) ± ІІЗЙ і і.бб

Пород иак-цинсцисй

Через 14

глей посла гахцинрдич

*40,66 ± 0,91

- Опитная группа

Вакцина вводилась п одну точку в полной

6,'// *40,16 *17,53 *11,^1

- - - + и <7 [ + Г> О

Д?зе

6

±0,16

*6,57

±0,09

1,40 ± 0,71 ± 0,92

.36,42 - 0,32

14,49 9,72

- 1,79 ±0,Ь9

+Э0.4У

- 0Л<>

зу,;&

- 1,'К

*0,71

-и ,0.<.

С,43 -и ,03

■ 31,26 ,0,63

± 1,74 10,03

*34,66 *0,6в

± 1,90 ±0,02.

• '-’7 "Vі , Ч- 'І

0,‘У.'

“О, V О

I ! 2 ! 3 ! 4 ! 5 ! 6 ! 7 ! 8

б Бакцина вводилась дробно в две точки по 0,5 дозы

Перзд вакцинацией о .7,37 3 ±0,1Ь .41,77 ..15,06 - 2,41 - 0,69 .13,75 - 0)б2 .29,40 І 0,69 .0,72 ±0,07

Через 14 дней после вакцинации 3 +6»60 * ±о,оа *36,31 .18,47 - 1,32 - 0,31 ,Ь,91 ±0,55 .36,30 0,56 ± 0,9й, ±0,03

1.5. Особенности иммунного ответа организма крупного рогатого скота при введении вакцин против, сибирской язвы, эмкара и дептоспироза

При исследовании в РА сывороток крови, полученных от 43 вакцинированных шестимесячных бычков, которым вводили антигены в различных сочетаниях (табл.б), установлено, что наиболее интенсивно реагировали животные, вакцинированные комплексно: эмкар + СТИ (1:5X200), эмкар + лептоспироз (1:51200). Значительно ниже титры антител получены при ионовакцинации.

Испытания на морских свинках превентивной активности сывороток крови, полученных от опытных животных, вакцинированных различными способами, показали, что предохранительная активность сывороток оказалась значительно выше при комплексном введении вакцин, против эмкара + сибирской язвы и эмкара + дептослироза. Доказательством тому служит то, что в этих случаях вы&ивало 50$ пассивно иммунизированных морских свинок, через 24 часа зараженных достаточно большой дозой (250-500 тас.мх) С1<^г1й1иш оЬаито1 . Б других вариантах опыта морские свинки погибали в 75-10056 случаев, - .

Таблица 6

Результаты исследования сыворотки крови крупного рогатого скота, иммунизированного вакцинами против э.чкара, сибирской язвы и лептоспироэа в различных, сочетаниях

. Группы ! [

Животных. .о

*3 І 8 ! -і ~ і

' Контроль .

! ангй-! ! їфиз- Ійьісб-

!ген +!анти~!раст-1ротка !физ- 1 ген !вор !♦■ физ-Іраст-І І Ір&ст-

Івор І І І вор

1 ++4+ ++++ 444 +++ 44+ •^4+ +4-+ 44+ 4+4 ++ •й- ♦+ - - - - - -

2 4+4+ 4+44 444+ 4+++ 4+4+ 4+4+ 4+4 +4*4 44 ++ ++ - - - - - -

3 44+4 4++4 444+ '+»►+ 4+++ 4++ 4++ 4-4+ ++ ■м- +* -м- - - - - ' - . -

4 4+4 + +44+ 4+++ 4+4+ 4+++ ++++ 4+++ 444+ +++ +++ +4* +■+ - - - - -

& 44-44 4+44 4Н+ ++Н- 4+4+ ++++ 4+++ 4++4 ++++ ++++ ++ - - - - -

6 ++++ 4+44 44++ ++++ 44++ 44+ +++ + 4+ +++ +++ ++ +■+ - - а» - , - ' -

і

3

і

Примечание: 1-Группа животных, которым вводилась вакцина против эмкара в один участок

' тзла в- полной дозе; ■

2 - и дъа участка тела по 0,5 дозы;

3 - в четыре участка тела по 0,25 дозы;

4 - иахцшп против эыкара и СГК комплексно;

5 - сахцииа проткь эикара и лептоспироэа комплексно;

6 - вакцина против эыкира, СТИ И лептоспироэа комплексно.

выводы

1. Экспериментально обоснована иммунологическая эффективность

комплексной вакцинации крупного рогатого скота против сибирской язеы, эмфизематозного карбункула и лептоспироэа. Установлено отсутствие конкуренции за активизации гнтигйнов при комплексной иммунизации животных против указанных инфекций. '

2. Изучена иымуноморфологическая реакция организма кивотных при мзио- и комплексной иммунизации. Показано, что дробное введение антигенов обеспечивает более выраженную иммунол о г иче с кув реакции б центральных и переферицеских органах иммунной системы и способствует активизации клеточной кооперации в процессе иммуногенеза.

3. Иммуноморфологическая реакция организма при комплексной иммунизации животных характеризуется: выраженной клеточной пролиферацией в лимфоузлах и селезенке, образованием негнойного лимфаденита, гиперплазией пульш в селезенке,,увеличением эозинофилов ь крови и нарастанием -гамма-глобулинов б сыворотке.

4. Гуморальный, иммунный ответ у животных при комплексной вакцинации характеризуется достоверным увеличением количества антител продуцирующих лимфоцитов, повышением содержания в сыворотке крови общего белка, гамма-глобулшов. и уровня специфических антител. Установлена выраженная превентивная активность сыворотки крови иммунизированных животных па отношений к специфическим ант иго наи.

5. Установлено, что одновременное введение нескольких антигенов в организм животных не вызывает угнетения продуктивной фазы ' иммуногенеза и обеспечивает формирование направленного иммунитета

по отношению к испытанным антигенам. ,

6. Разработан и научно обоснован способ комплексной вакцина-

ции животных против сибирской язвы, 'эмфизематозного карбункула и лептоспироэа, заключающийся в одновременном и дробном введении нескольких антигенов в различные точки организма. При этом не наб-лвдается отрицательных реакций и повивается антигенная активность вакцинных препаратов и сокращаются затраты труда на проведение противозаизоотичаских мероприятий. _

•- ПРАКТИЧЕСКИЕ /ЦВДОЗЕШН '

I* В целях активизации центральных и периферических органов иммунной системы животных рекомендуется способ дробного (в два или несколько' участкод тела) введения вакцины без увеличения дозы антигена.

19

2. Рекомендуется комплексная вакцинация ‘жизоттяс одновр-н«н-но против сибирской язем и змкара, повызаяцея ^і.'унолагі’.чсску'.з эф|«к?иьчость указанных вакцин.

3. Монологические изменения б периферических органах

ной системы жиеоуньх на 14-Я дана после ьад^иьации не д —служить основанием для ограничения в оценка исполчзоглкия ия:,«:х т/л в качасїєз продукта.

список равот, оговлилж. :.їіХ'по т?,:.” досзрга^'-И

1. Бардин В.И. Некоторые дпнмі» о показателях сыкоь.г^к

в динамике 'поствакцинальной реакции у крупного рогатого скота// Труда Саратовской НИХ.-Саратоз,11)7-1, том 9-С.У9.

2. Бардин З.н. Об ім^укологичеекой срг?!;:!?‘'2

в зависимости от метода аппликации глткгеноз// Труды Саратовской _ НИВС.-Саратов, 1976,том ІСКС.63.

3. Бардин В.И. Морфологические проявления в лда^сузлах и се-

лезенке крупного рогатого скота, имчуниаироБйгіНого вакциной СГ.І, эмкара а леятоеллроза// Информационный листок 171-177, 620,2

Саратовского ч-зжотраелзвого центра ндучно-техничосной Игфрмацка

и пропаганды.СаретозДУ77.

4. Бардин Б.И. Ккчуниаорродсгачэскоз пр.;яья‘гкио п.'г.тй-./л.иа.,-.ь-

ноЗ рз акция ни вездзнио яептоспирозной злкчпш;// "СГсЛ/ио г;..х.-.ч: ы”. -Саратов, 6.-С.ЙІ.

5. Еордин В.И., Чире г И.А. Зкслерямент алькзд прс&с|ка ричнах вахциа аротнм с’.йу.рской ’нзьы, оскара и лап;ссп;'р;;(.-.//Т.-?. Г^окл. .научно-практической конкуренции СГЗ^'Д *-О.~0.ч4.

0ТЯЄ7СТРЄ№І«?. за выпуск - заслугчкнмй деятель наука ГІ, доктор ветеркквршл наук, приіссгар Г.П. &.*»хкя ^ ^

Г.одг.і'.'.лно к п^чііи 2и.С'?.^ г. Обн'« і.«- г.. г.. *.^2.

Тир»".*. ІчХі. Го'.'иііргіїїі НалЛІіТ.