Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Иммунный статус, естественный микробиоценоз, минеральный обмен и их коррекция у спортивных лошадей

Направахрукописи №

КАРЮК ЕЛЕНА АНАТОЛЬЕВНА

ИММУННЫЙ СТАТУС, ЕСТЕСТВЕННЫЙ МИКРОБИОЦЕНОЗ, МИНЕРАЛЬНЫЙ ОБМЕН И ИХ КОРРЕКЦИЯ У СПОРТИВНЫХ ЛОШАДЕЙ

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Уфа 2004

Работа выполнена на кафедре паразитологии, микробиологии и вирусологии при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор Маннапова Рамзия Тимергалеевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Янгуразова Земфира Ахметовна

кандидат ветеринарных наук Янбарисова Светлана Рафаэловна

Ведущая организация: Казанская академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана

Защита состоится «28» декабря 2004 года в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.03 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, 34).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Башкирского государственного аграрного университета

Автореферат разослан «27» ноября 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета:

доктор биологических наук, профессор

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы.

Одними из ключевых проблем коневодства является управление метаболическими процессами в организме спортивных лошадей. Оно обеспечивается за счет использования энергии нетрадиционных кормовых средств, оптимизации полноценности рациона кормления лошадей разных половозрастных групп и направлений использования с помощью биологически активных веществ (БАВ).

Конноспортивные состязания и подготовка к ним связаны с огромными физическими нагрузками на организм лошади на фоне быстро меняющихся условий окружающей среды, принуждения, психоэмоциональных воздействий. При этом, как отмечают исследователи, нарушаются механизмы иммунного го-меостаза, связанного со специфическими и неспецифическими факторами защиты животного организма (Балакин ОА, 1982; Ласков А.А., Пушкарева СА, 1984; Фролов Б.А., 1984; Вогралик М.В., Послов ГА, 1981, 1985). В этой связи большой интерес вызывают биологически активные продукты пчеловодства (мед, прополис, цветочная пыльца), обладающие иммуностимулирующим действием (В.П. Кивалкина, 1948-1991; ААБарсков с соавт., 1988; П.И.Жданов, 1994; Р.Т.Маннапова, АН.Панин, 2000, 2002, 2004; П.Я.Гущин с соавт., 2001, 2003; А.В.Андреева, 2003; Р.ХАвзалов, 2004).

Следует отметить, что вопросы влияния продуктов пчеловодства на неспецифические факторы иммунитета спортивных лошадей в доступной литературе освещены недостаточно.

В связи с вышесказанным, целью работы явилось изучить состояние иммунного статуса, естественного микробиоценоза кишечника и минерального обмена спортивных лошадей на фоне активных физических нагрузок и разработать эффективные методы их коррекции медовыми композициями с прополисом и цветочной пыльцой.

В задачи исследования входило:

1. Изучить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на состояние естественной резистентности и фагоцитоза спортивных лошадей со сравнительной оценкой:

а) динамики активности лизоцима сыворотки крови;

б) динамики бактерицидной активности сыворотки крови;

в) динамики фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

2. Определить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели Т- и В-систем иммунитета спортивных лошадей с учетом:

а) динамики содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-супрессоров в крови;

б) динамики содержания В-ЕАС-лимфоцитов в крови.

3. Установить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели естественного микробиоценоза кишечника спортивных лошадей:

а) динамику количества бифидобактерий и лактобацилл;

б) динамику количества условно-патогенных микроорганизмов.

4. Разработать эффективные методы коррекции минерального обмена в организме спортивных лошадей с применением меда, прополиса и цветочной пыльцы с учетом:

а) динамики общего кальция в сыворотке крови;

б) динамики микроэлементов в сыворотке крови (железа, цинка, меди и марганца).

5. Изучить влияние прополиса, меда в комплексе с прополисом и меда в комплексе с цветочной пыльцой на некоторые биохимические показатели спортивных лошадей:

а) динамику содержания глюкозы в сыворотке крови;

б) динамику содержания общего белка в сыворотке крови.

Научная новизна исследований состоит в том, что впервые проведено изучение влияния медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели естественной резистентности, фагоцитоза, Т- и В-системы иммунитета, минеральный обмен, биохимические реакции и микробиоценоз кишечника спортивных лошадей на фоне интенсивной тренинговой нагрузки.

Теоретическая и практическая значимость работы. На основании показателей естественной резистентности, фагоцитоза, параметров Т- и В-систем иммунитета, состояния минерального обмена, биохимических реакций, микробиоценоза кишечника, с учетом влияния на организм меда и биологически активных продуктов пчеловодства - прополиса и цветочной пыльцы, теоретически и практически обоснована необходимость применения в спортивном коневодстве медовых композиций, как препаратов, обладающих хорошими иммунокоррегирующими и иммуностимулирующими свойствами, способствующих созданию в организме животных иммунного баланса, восстановлению минерального обмена и микробиоценоза кишечника. Полученные данные позволяют рекомендовать их спортивному коневодству как эффективные средства.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Состояние естественной резистентности, фагоцитоза, Т- и В-систем иммунитета у спортивных лошадей, их коррекция медом в комплексе с прополисом и цветочной пыльцой.

2. Оценка естественного микробиоценоза кишечника (нормофлоры и условно-патогенных микроорганизмов) и пути его коррекции медовыми композициями с прополисом и цветочной пыльцой.

3. Состояние минерального обмена у спортивных лошадей при высокой интенсивности тренинговых нагрузок и пути его коррекции биологически активными продуктами пчеловодства.

4. Изменение некоторых биохимических показателей крови (общего белка и глюкозы) при применении прополиса, меда и цветочной пыльцы в различных сочетаниях.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на республиканской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов (Уфа, 2003), на научно-практической конференции БГАУ (Уфа, 2004), международной научно-практической конференции «Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных» (Москва-Уфа, 2004), на международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы» (Москва, 2004).

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 9 научных статьях.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 158 страницах

компьютерного текста, включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 21 рисунком. Список литературы включает 256 наименований, в том числе 73 иностранных авторов.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы исследований

Работа выполнялась в 2001-2004 г.г. в условиях лаборатории микробиологии и иммунологии кафедры паразитологии, микробиологии и вирусологии Башкирского государственного аграрного университета, лаборатории токсикологии БашНПВЛ, а также в условиях конно-спортивного комплекса «Тулпар» Мелеузовского района РБ.

Опыты по изучению иммунного статуса, естественного микробиоценоза, минерального обмена и возможности их коррекции у спортивных лошадей проведены на 20 полукровных жеребцах 5-6 летнего возраста, которые по принципу аналогов были разделены на 4 группы: 1 группа — контрольная, лошади содержались на обычном рационе; 2-4 группы - опытные: 2 группа — лошади, в рацион которых включили настойку прополиса в виде прополисного молочка; 3 группа — мед и настойку прополиса, 4 группа — мед и цветочную пыльцу. Выпаивание прополисного молочка проводили один раз в день перед кормлением в течение 10 дней, в дозе 100-150 мл на животное. Мед - задавали один раз в день перед кормлением в течение 10 дней в дозе 150 г на голову. Цветочную пыльцу - задавали 1 раз в день перед кормлением в течение 10 дней в дозе 40 г на животное. Спортивные лошади содержались в индивидуальных стойлах на опилочной подстилке; рацион включал разнотравное сено, травяную муку, концентраты (овес, ячмень), овощи и фрукты (морковь, яблоки). Рацион был сбалансирован по основным питательным веществам, макро-, микроэлементам, витаминам. Тренинговые нагрузки у всех опытных лошадей были одинаковыми, высокой степени интенсивности.

До начала опыта, а затем на 10, 20, 30 и 60-й дни проводили взятие крови, и каловых масс для иммунологических и микробиологических исследований.

Для определения фагоцитарной активности нейтрофилов использовали ге-паринизированную кровь. Объектом фагоцитоза служили суточные культуры Staphylococcus aureus, выращенные на агаре Хоттингера. Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по П.А.Емельяненко (1980). Содержание в сыворотке крови лизоцима проводили по общепринятым методикам. Лимфоциты из крови выделяли разделением в градиенте плотности фиколл-верографин (плотностью 1,007 г/мл). Определение Т- и В-лимфоцитов в крови лошадей проводили методом спонтанного розеткообразования. Популяции Т-хелперов, Т-супрессоров определяли в реакции розеткообразования с теофиллином.

Для качественного исследования микрофлоры кишечника забор фекалий из прямой кишки производили в стерильную посуду с 10 мл изотонического раствора натрия хлорида с глицерином. Посев 1-2 капель суспензии фекалий проводили на ряд элективных и дифференциальных сред. Для выделения бактерий семейства кишечных палочек материал засевали на среды: Эндо, Левина, МПА, МПБ. Чистую культуру эшерихий типировали в РА. Для выделения стафилококков использовали солевой кровяной МПА. Выделение анаэробных бифидобактерий проводили посевом в среду Блаурокка. Лактобациллы определяли на среде МРС (Мозе-ра-Рогоза-Шарпа). Клостридий культивировали на специальных питательных средах для анаэробов: мясо-пептонно-печеночном бульоне (МППБ) Китта-Тароции, плотной среде Вильсона Блера, глюкозо-кровяном агаре Цейслера. Для выделения протея материал засевали в конденсационную воду свежескошенного агара. Результаты переводили в десятичные логарифмы и определяли относительное соотношение различных групп микроорганизмов в кишечной популяции.

Макро- и микроэлементы определяли на атомно-абсорбционном спектрометре «Квант-2.ЭТА» по стандартной методике. Количество общего белка и глюкозы в сыворотке крови определяли колориметрическим методом с помощью стандартных наборов реагентов. Полученный цифровой материал обработан методами вариационной статистики с использованием проверки выборки на соответствие законам нормального распределения и оценки достоверности различий по критерию Стьюдента.

2.2 Результаты собственных исследований

2.2.1 Иммунный статус и его коррекция продуктами пчеловодства у спортивных лошадей

2.2.1.1 Влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на состояние естественной резистентности спортивных лошадей

Результаты изучения динамики лизоцимной активности сыворотки крови спортивных лошадей представлены в таблице 1, на рисунке 1. Фоновое значение активности лизоцима у животных всех опытных групп находилось на уровне 302,4± 1,72 - 305,3±0,65 ед/мл.

У лошадей контрольной группы показатель активности лизоцима в сыворотке крови за период опытов изменялся незначительно и колебался от 303,7 до 320,7 ед/мл.

Внесение в рацион лошадей настойки прополиса (2 группа) способствовало повышению у животных исследуемого показателя по срокам опыта. Если фоновое значение лизоцимной активности у животных данной группы составляло 305,3+0,65 ед/мл, то на 10-й день опыта оно превышало показатели животных первой контрольной группы в 1,17 раза (на 55,1 ед/мл), на 20-й день - в 1,41 раза (на 140,6 ед/мл), на 30-й день - в 1,65 раза (на 201,9 ед/мл), на 60-й день - в 2,05 раза (на 325,7 ед/мл). К концу исследований (60 дней) активность лизоцима сыворотки крови лошадей данной группы достигла максимального показателя и превышала свое фоновое значение в 2,08 раза (на 329,4 ед/мл).

Сочетание в рационе спортивных лошадей меда и цветочной пыльцы (4 группа) также способствовало активизации лизоцима сыворотки крови по срокам опыта. Причем этот процесс был более выражен, чем во второй опытной группе. Так, на 10-й день исследований исследуемый показатель у лошадей данной группы превысил данные контрольных животных в 1,3 раза (на 94,7 ед/мл), на 20-й день - в 1,47 раза (на 151,7 ед/мл), на 30-й день - в 1,82 раза (на 253,0 ед/мл), на 60-й день - в 2,17 раза (на 361,5 ед/мл).

Наиболее выражено, по сравнению с данными животных второй и четвертой опытных групп, усиливалась активность лизоцима по отношению к контролю у лошадей третьей группы, в рацион которых вводили мед и настойку прополиса.

На 10-й день исследований лизоцимная активность здесь превысила аналогичный показатель контрольных животных в 1,34 раза (на 112,3 ед/мл), на 20-й - 1,55 раза (на 176,0 ед/мл), на 30-й - в 1,93 раза (на 289,1 ед/мл). Максимального значения активность лизоцима у лошадей третьей группы достигла к 60-му дню исследований и была выше на этот срок показателей животных первой, второй и четвертой опытных групп, соответственно, в 2,22 , в 1,08 и в 1,02 раза (на 377,9, на 52,2 и на 16,4 ед/мл).

Бактерицидная активность сыворотки крови исследованных животных контрольной и всех опытных групп на начало опытов (фон) не имела существенных различий и находилась в пределах от 32,7+0,41 до 34,0+1,05 %.

У лошадей, содержащихся на обычном рационе (1 группа), во все сроки исследований, достоверных изменений бактерицидной активности сыворотки крови не регистрировалось. Данный показатель на протяжении опыта находился на уровне 32,6-34,5 %.

В сыворотке крови животных второй группы отмечалось повышение бактерицидной активности, по сравнению с показателями контрольных животных. На 10-й день исследований значение бактерицидной активности сыворотки крови лошадей второй группы было выше аналогичного показателя контрольных животных в 1,15 раза (на 5,2%), на 20-й - в 1,47 раза (на 15,2 %), на 30-й -в 1,59 раза (на 19,9 %), на 60-й день - в 1,64 раза (на 21,1 %). Свое фоновое значение показатель бактерицидной активности сыворотки крови по данной груп-

пе животных превысил на 10-й, 20-й, 30-й и 60-й дни опыта, соответственно, в 1,18, в 1,42, в 1,59 и в 1,61 раза (на 6,1, на 14,2, на 19,8 и на 20,4 %).

Добавление в рацион спортивных лошадей меда и цветочной пыльцы (4 группа) увеличивало показатель бактерицидной активности сыворотки крови по срокам исследования, причем более интенсивно, чем у животных второй опытной группы.

Бактерицидная активность сыворотки крови лошадей четвертой опытной группы превышала данные контрольной и второй опытной групп животных, соответственно, на 10-й день исследования — в 1,26 и в 1,1 раза, на 20-й день — в 2,40 ив 1,64 раза, на 30-й день - в 2,07 ив 1,30 раза, на 60-й день - в 1,78 и в 1,08 раза. Максимальное значение показателя бактерицидной активности сыворотки крови лошадей четвертой опытной группы регистрировалось к 20-му дню исследований и составило 78,2+1,34 %, превысив на данный срок фоновое значение по группе в 2,3 раза (на 44,2 %).

Наиболее выраженное увеличение показателя бактерицидной активности сыворотки крови отмечалось у лошадей третьей группы, в рацион которых вводили мед в сочетании с настойкой прополиса. У данной группы отмечали максимальный показатель бактерицидной активности сыворотки крови среди всех опытных лошадей на 20-й день исследований. Он превысил на этот срок показатели животных контрольной, второй и четвертой опытных групп, соответственно, в 2,66, в 1,81 и в 1,11 раза (на 54,1, на 38,9 и на 8,5 %). К концу опыта (60 дней) бактерицидная активность сыворотки крови лошадей третьей группы несколько снизилась, но продолжала превышать на данный срок исследований аналогичные показатели животных первой (контрольной) группы в 1,87 раза (на 28,6 %), второй группы - в 1,14 раза (на 7,5 %), четвертой группы - в 1,05 раза (на 3,1 %).

2.2.1.2 Фагоцитоз, его коррекция медом в композиции с прополисом и цветочной пыльцой у спортивных лошадей

Фагоцитарная активность сыворотки крови лошадей контрольной группы за период опытов находилась на уровне 52,8+0,54 -54,4+0,61 %.

Активность фагоцитоза нейтрофилов в опытных группах в процессе исследований повышалась, по сравнению с первоначальным фоновым уровнем.

Так, фагоцитарная активность нейтрофилов лошадей, в рацион которых вводили настойку прополиса (вторая группа) и мед в сочетании с цветочной пыльцой (четвертая группа) усилилась, по сравнению с фоновыми значениями по группам, к 10, 20, 30 и 60-му дням опыта, соответственно, в 1,09 и 1,25 раза (на 5,2 и 13,0 %), в 1,17 и 1,34 раза (на 9,2 и 18,0 %), в 1,27 и 1,51 раза (на 14,9 и 26,8 %), в 1,11 и 1,29 раза (на 5,8 и 15,0 %).

Максимальный уровень активности фагоцитоза нейтрофилов среди опытных животных регистрировался у лошадей третьей группы, в рацион которых добавляли мед и настойку прополиса. На 10-й день опыта описываемый показатель превышал аналогичный параметр контрольных животных в 1,27 раза (на 14,5 %), лошадей второй и четвертой опытных групп, соответственно, в 1,15 и 1,05 раза (на 9,2 и 3,3 %), на 20-й день - в 1,51 раза (на 27,1 %), в 1,25 и 1,13 раза (на 16,2 и 9,3%).

Пик фагоцитарной активности нейтрофилов опытных лошадей наблюдался на 30-й день исследований. Описываемый показатель у животных третьей

группы, на указанный срок, превышал контроль в 1,62 раза (на 33 %), данные лошадей второй группы - в 1,25 раза (на 17,2 %), четвертой группы - в 1,09 раза (на 7,2 %). К концу опыта (60 дней) фагоцитарная активность крови лошадей третьей группы несколько снизилась, но продолжала превышать аналогичный показатель животных контрольной группы в 1,32 раза (на 17,3 %), второй группы — в 1,18 раза (на 11,1 %), четвертой группы - в 1,06 раза (на 3,8 %).

2.2.1.3 Влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели Т- и В-систем иммунитета спортивных лошадей

У лошадей контрольной группы уровень Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови за период опытов находился в пределах от 35,7±0,31 до 38,1+0,69 %. Внесение в рацион опытных лошадей продуктов пчеловодства (настойки прополиса и цветочной пыльцы в сочетании с медом) способствовало увеличению количества Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови животных.

Данные по изучению в крови лошадей динамики Т-Е-РОК-лимфоцитов представлены в таблице 1.

Таблица 1 Динамика содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови спортивных _лошадей (в %, M±m, P)_

Опытные группы и использованные продукты пчеловодства Статистический показатель Фон Сроки исследования, в днях от начала опыта

10 20 30 60

1 Контроль М± 37,9 37,4 38,1 35,7 36,9

ш 0,30 0,67 0,69 0,31 0,13

Р

2 Настойка прополиса М± 38,0 40,1 42,3 43,1 42,0

ш 0,63 0,46 0,53 0,59 0,47

Р ** ** **

3 Мед + настойка прополиса М± 37,8 44,1 46,2 47,0 46,3

т 0,49 0,46 0,63 0,61 0,49

Р *** #** *** ***

4 Мед + цветочная пыльца М± 37,3 42,0 44,9 45,7 45,2

ш 0,60 0,47 0,47 0,91 0,65

Р ** *** ** ***

Примечание: * - Р>0,95, ** - Р>0,99, *** - Р>0,999

Фоновое значение содержания Т-хелперов в крови спортивных лошадей контрольной и опытных групп находилось на уровне 18,7-19,2 %.

Содержание Т-хелперов в крови лошадей первой (контрольной) группы по срокам опыта достоверных изменений не имело и колебалось от 18,7±0,23 до 19,3±0,35 %.

Добавление в рацион спортивных лошадей прополиса, меда и цветочной пыльцы в различных сочетаниях, вызывало увеличение исследуемого показателя с разной степенью интенсивности.

Введение в рацион лошадей настойки прополиса (вторая группа) увеличивало содержание Т-хелперов в крови данных животных. На 10-й день исследований показатель Т-хелперов в крови лошадей второй группы превышал контроль в 1,08 раза (на 1,5 %), на 20-й день - 1,13 раза (на 2,6 %). На 30-й день достиг максимума по группе и превышал контроль в 1,18 раза (на 3,5 %), на 60-й день - в 1,13 раза (на 2,5 %).

У лошадей четвертой опытной группы по срокам опыта также отмечалось увеличение уровня Т-хелперов в крови, причем более интенсивно, чем у животных второй группы. На 10-й, 20-й, 30-й и 60-й дни исследований содержание Т-хелперов в крови животных этой группы превышало показатели лошадей контрольной и второй групп, соответственно, в 1,19 ив 1,11 раза (на 3,7 и на 2,2 %), в 1,20 и в 1,06 раза (на 3,9 и на 1,3 %), в 1,29 и в 1,09 раза (на 5,5 и на 2,0%), в 1,26 и в 1,11 раза (на 4,9 и на 2,4 % ), но несколько уступало на эти же сроки опыта показателю животных третьей группы.

Наиболее активно увеличивалось содержание Т-хелперов в крови лошадей третьей группы, которые получали мед и настойку прополиса. У данных животных регистрировались максимальные значения описываемого показателя на протяжении всего опыта. Так, на 10-й день исследований, уровень Т-хелперов в крови животных третьей группы превысил аналогичные показатель контрольной, второй и четвертой опытных групп, соответственно, в 1,31,в 1,21 ив 1,1 раза (на 5,9, на 4,4 и на 2,2 %), на 20-й день - в 1,35, в 1,19 и в 1,12 раза (на 6,7, на 4,1 и на 2,8 %), на 30-й день — в 1,45, в 1,22 и в 1,12 раза (на 8,5, на 5,0 и на 3,0 %), на 60-й день - в 1,42, в 1,25 и в 1,13 раза (на 7,9, на 5,4 и на 3,0 %).

Данные по исследованию содержания Т-супрессоров в крови спортивных лошадей представлены на рисунке 1.

14,6 14,4 • 14,214 ■

Фон 10 20 30 60

Дни исследований

- Контроль '2 • Настойка прополиса

* 3 - Мсд+иастойка прополиса '4 - Мед+цветочиал пыльца

Рисунок 1 Динамика содержания Т-супрессоров в крови спортивных лошадей

В начале опыта содержание В-ЕАС-лимфоцитов в крови спортивных лошадей первой контрольной группы составило 13,2+0,10 % и до конца исследований (60 дней) достоверных изменений относительно фонового значения не отмечалось.

Добавление в рацион спортивных лошадей настойки прополиса (вторая группа) способствовало увеличению содержания в их крови В-ЕАС-лимфоцитов. Сравнивая с фоновым значением по группе (13,6+0,11 %), содержание описываемых клеток в крови увеличилось на 10-й день исследований в 1,09 раза (на 1,2 %), на 20-й день - в 1,20 раза (на 2,7 %), на 30-й день - в 1,24 раза (на 3,3 %), на 60-й день -1,16 раза (на 2,2 %).

Более активно увеличивался уровень В-ЕАС-лимфоцитов в крови спортивных лошадей, которые наряду с обычным рационом получали мед и цветочную пыльцу (четвертая группа). У животных данной группы содержание В-ЕАС-лимфоцитов превысило фоновое значение по группе (12,8+0,12 %) на 10-й день исследований в 1,19 раза (на 2,4 %), на 20-й день - в 1,35 раза (на 4,5 %), на 30-й день - в 1,38 раза (на 4,8 %), на 60-й день - 1,26 раза (на 3,3 %).

Наибольшее содержание В-ЕАС-лимфоцитов в крови отмечали у лошадей третьей опытной группы, в рацион которых были добавлены мед и настойка прополиса. У исследуемых животных к 10-му дню опыта количество В-ЕАС-лимфоцитов увеличилось, по сравнению с первоначальным уровнем (фон) в 1,28 раза (на 3,7 %), к 20-му дню - в 1,41 раза (на 5,4 %), к 30-му дню - в 1,39 раза (на 5,2 %), к 60-му дню - 1,36 раза (на 4,7 %). Во все сроки исследований уровень В-ЕАС-лимфоцитов в крови у животных данной группы превышал аналогичные показатели животных остальных опытных групп.

2.2.2 Микробиоценоз кишечника и его коррекция у спортивных лошадей

В начале исследований (фон) бифидобактерии и лактобациллы в кишечнике спортивных лошадей всех опытных групп обнаруживались в количестве 6,88,0 ^ КОЕ/г и 7,0-8,0 ^ КОЕ/г соответственно.

В процессе опыта количество бифидо- и лактофлоры в кишечнике спортивных лошадей первой (контрольной) группы, которые содержались на обычном рационе, изменялось незначительно и находилось на уровне 6,7-7,9 КОЕ/г.

Количество бифидобактерии в кишечнике спортивных лошадей второй группы имело тенденцию к умеренному повышению, и во все сроки опыта превышало свое фоновое значение: на 10-й день — в 1,33 раза (на 2,6 ^ КОЕ/г), на 20-й день - в 1,6 раза (на 4,8 ^ КОЕ/г), на 30-й день - в 1,5 раза (на 4,0 ^ КОЕ/г), на 60-й день — в 1,3 раза (на 2,4 ^ КОЕ/г), достигнув максимального показателя к 20-му дню исследований.

Более выражено увеличивалось количество бифидобактерии в кишечнике лошадей, получавших дополнительно к основному рациону мед и цветочную пыльцу (четвертая группа).

Аналогичная динамика количества бифидобактерии, выделенных из кишечника лошадей, наблюдалась в третьей опытной группе, но произошедшие

изменения в бифидофлоре здесь были наиболее интенсивными. На 20-й день исследований бифидобактерии у лошадей третьей группы выделялись в максимальном количестве и превышали аналогичный показатель первой, второй и четвертой групп, соответственно, в 2,28 раза (на 8,8 ^ КОЕ/г), в 1,23 раза (на 2,9 ^ КОЕ/г) и в 1,16 раза (на 2,2 ^ КОЕ/г).

Результаты исследования динамики лактобацилл представлены на рисунке 2.

Фон 10 20 30 60

Дни исследований

-Контроль '2 - Настойка прополиса

• 3 - Мед+настобка прополиса '4 - Мед+цветочная пыльца

Рисунок 2 Динамика содержания лактобацилл в кишечнике спортивных лошадей

Количество стафилококков, обнаруженных в кишечнике лошадей всех опытных групп до начала исследований составляло 6,7-7,0 ^ КОЕ/г.

У лошадей контрольной группы количество стафилококков, выделенных из кишечника за весь период исследований изменялось незначительно - от 6,7

Настойка прополиса, которую получали лошади второй группы, привела к снижению количества стафилококков в кишечнике, относительно первоначального их уровня на 10-й день исследований - в 1,08 раза (на 0,5 ^ КОЕ/г), на 20-й день - в 1,17 раза (на 1,0 ^ КОЕ/г), на 30-й день - в 1,40 раза (на 1,9 ^ КОЕ/г), на 60-й день - в 1,31 раза (на 1,6 ^ КОЕ/г).

Особенно активно уровень стафилококков в кишечнике понижался у лошадей третьей группы. Примененные здесь продукты пчеловодства (мед + настойка прополиса) способствовали уменьшению количества стафилококков, по сравнению с фоновым значением, на 10-й день исследований - в 1,38 раза (на 1,9 ^ КОЕ/г), на 20-й день - в 1,60 раза (на 2,6 ^ КОЕ/г), на 30-й день - 2,3 раза (на 3,9 ^ КОЕ/г ), на 60-й день - в 2,09 раза (на 3,6 ^ КОЕ/г).

Наблюдалась тенденция к уменьшению количества стафилококков в кишечнике лошадей и под влиянием меда и цветочной пыльцы (четвертая группа), но изменения были менее интенсивны, чем у животных третьей группы.

Количество эшерихий в кишечнике лошадей первой группы по срокам опыта достоверных изменений не имело и колебалось в пределах от 7,5 до 8,0 ^ КОЕ/г.

Примененные продукты пчеловодства оказывали бактерицидное действие в отношении кишечных палочек, выделяемых из кишечника спортивных лошадей.

Наиболее активно снижение количества эшерихий, обладающих гемолитическими свойствами, происходило у животных третьей группы, которые получали в добавлении к обычному рациону мед и настойку прополиса. Уже к 10-му дню исследований кишечные палочки у данной группы выделялись в 1,45 раза (на 2,4 ^ КОЕ/г), к 20-му дню - в 1,67 раза (на 3,1 ^ КОЕ/г), к 30-му дню - в 1,93 раза (на 3,7 ^ КОЕ/г) и к 60-му дню - в 1,83 раза (на 3,5 ^ КОЕ/г) меньше первоначального значения (фон).

Данные по изучению в кишечнике спортивных лошадей динамики клост-ридий, вульгарного протея и псевдомонов представлены на рисунках 3,4 и 5.

2.2.3 Минеральный обмен и его коррекция у спортивных лошадей

Содержание общего кальция в крови спортивных лошадей первой контрольной группы колебалось на протяжении опыта в пределах от 3,18+0,05 до 3,34±0,07 ммоль/л.

У животных второй-четвертой опытных групп содержание в крови общего кальция увеличивалось с разной интенсивностью по срокам опыта.

Так, у лошадей второй группы описываемый показатель на протяжении опыта умеренно повышался в пределах от 3,19±0,04 до 4,15+0,09 ммоль/л.

В крови животных третьей и четвертой опытных групп содержание общего кальция изменялось более интенсивно по срокам опыта. К 10, 20, 30 и 60-му дням исследований уровень общего кальция в крови лошадей указанных групп увеличился, по сравнению с фоновыми значениями по группам, соответственно, в 1,09 и 1,10 раза (на 0,30 и 0,33 ммоль/л), в 1,19 и 1,21 раза (на 0,62 и 0,69 ммоль/л), в 1,31 и 1,33 раза (на 1,04 и 1,05 ммоль/л), в 1,29 и 1,26 раза (на 0,95 и 0,85 ммоль/л).

Содержание железа в крови животных контрольной группы на протяжении исследований (60 дней) не имело существенных различий и находилось в пределах от 9,6+0,26 до 10,4±0,16 мкмоль/л.

Добавление к обычному рациону настойки прополиса вызывало достоверное увеличение в крови опытных животных содержания железа относительно фонового значения на 20-й день исследований в 1,54 раза (на 5,2 мкмоль/л), на 30-й день - в 1,72 раза (на 7,0 мкмоль/л), на 60-й день - в 1,90 раза (на 8,7 мкмоль/л).

Более активно проявляли свое действие на уровень железа в крови мед в комплексе с цветочной пыльцой (четвертая группа). Здесь исследуемый показатель превышал свое первоначальное значение на 20-й, 30-й и 60-й дни опыта, соответственно в 1,53 раза (на 5,3 мкмоль/л), в 1,78 раза (на 7,7 мкмоль/л) и в 2,06 раза (на 10,5 мкмоль/л).

Максимальное увеличение содержания железа в крови регистрировалось у животных третьей группы, в рацион которых вносили мед и настойку прополиса. На 20-й день опыта количество данного элемента в крови превышало показатель фона в 1,58 раза (на 6,0 мкмоль/л), на 30-й день - в 1,88 раза (на 9,1 мкмоль/л), на 60-й день - в 2,19 раза (на 12,3 мкмоль/л).

У лошадей первой контрольной группы, которые содержались на обычном рационе, содержание цинка в крови находилось на протяжении исследований (60 дней) на уровне 24,4±0,69 - 26,7±0,28 мкмоль/л.

Изменения содержания цинка в крови лошадей, рацион которых был дополнен настойкой прополиса, происходили следующим образом. На 10-й день исследований наблюдалось некоторое увеличение данного показателя, в сравнении с фоновым значением по группе - в 1,16 раза (на 4,0 мкмоль/л), на 20-й день - в 1,19 раза (на 4,6 мкмоль/л). На 30-й день количество цинка в крови достигло максимума по группе, превысив фон в 1,23 раза (на 5,8 мкмоль/л), не-

сколько снизившись к концу опыта (60-й день), но продолжая быть больше первоначального значения в 1,20 раза.

Несколько интенсивнее количество цинка увеличивалось в крови спортивных лошадей четвертой группы, которые получали мед и цветочную пыльцу.

Более активно количество цинка в крови увеличивалось у лошадей, в рацион которых были добавлены мед и настойка прополиса (третья группа). Здесь регистрировали максимальное содержание цинка на 20-й день исследований, когда оно превышало свое фоновое значение в 1,32 раза (на 8,2 мкмоль/л), несколько снижалось к 30-му дню, но до конца опыта оставалось на достаточно высоком уровне: на 30-й день превышало первоначальное значение в 1,30 раза (на 7,7 мкмоль/л), на 60-й день - в 1,29 раза (на 7,6 мкмоль/л).

У животных первой группы количество меди в крови на протяжении всего опыта колебалось в пределах от 12,4+0,14 до 13,6+0,23 мкмоль/л.

В крови лошадей второй группы, которым задавали настойку прополиса, содержание меди умеренно возрастало по срокам опыта, достигнув своего максимума на 30-й день. Относительно первоначального значения (фон) количество меди увеличилось на 10-й день — в 1,18 раза (на 2,4 мкмоль/л), на 20-й день -в 1,28 раза (на 3,7 мкмоль/л), на 30-й день - в 1,32 раза (на 4,2 мкмоль/л), на 60-й день - в 1,23 раза (на 3,1 мкмоль/л).

Введение в рацион спортивных лошадей меда в сочетании с настойкой прополиса (третья группа) способствовало наиболее активному увеличению в крови содержания меди. Уже на 10-й день исследований оно превышало свой фоновый уровень в 1,36 раза (на 4,7 мкмоль/л), на 20-й день - в 1,40 раза (на 5,3 мкмоль/л), на 60-й день - в 1,42 раза (на 5,5 мкмоль/л). Наибольшее содержание меди в крови у животных описываемой группы регистрировали на 30-й день исследований, когда оно превысило фон в 1,47 раза (на 6,2 мкмоль/л).

Сочетание меда и цветочной пыльцы в рационах спортивных лошадей (четвертая группа) также способствовало увеличению содержания меди в крови, хотя и менее интенсивно, чем у животных третьей группы.

Содержание марганца в крови лошадей первой группы за весь период исследований изменялось недостоверно и колебалось от 0,59 до 0,64 мкмоль/л.

Добавление в рацион животных настойки прополиса (вторая группа) вызывало некоторое повышение содержания марганца в крови. К 20-му дню исследований описываемый показатель превышал фоновое значение в 1,18 раза (на 0,12 мкмоль/л), к 30-му дню - в 1,31 раза (на 0,21 мкмоль/л), к 60-му дню - в 1,25 раза (на 0,17 мкмоль/л).

Введенные в рацион лошадей четвертой группы мед и цветочная пыльца повышали уровень марганца в сыворотке крови более активно. Уже на 10-й день исследований содержание сывороточного марганца превышало свое фоновое значение в 1,20 раза (на 0,13 мкмоль/л), на 20-й день - в 1,34 раза (на 0,22 мкмоль/л), достигло максимума на 30-й день, когда разница с фоном составила 1,48 раза (на 0,21 мкмоль/л), несколько снизилось к концу опыта, но продолжало быть больше первоначального значения в 1,38 раза (на 0,25 мкмоль/л).

Наиболее интенсивное увеличение уровня марганца в сыворотке крови отмечалось у лошадей третьей опытной группы, в рацион которым добавляли мед и настойку прополиса. Начиная с 10-го дня опыта, когда количество данного микроэлемента в крови увеличилось в 1,37 раза (на 0,22 мкмоль/л), уровень марганца продолжал увеличиваться — на 20-й день - в 1,57 раза (на 0,34 мкмоль/л), на 30-й день - в 1,63 раза (на 0,38 мкмоль/л). К 60-му дню исследований количество сывороточного марганца несколько снизилось, но продолжало превышать фоновый уровень в 1,55 раза (на 0,33 мкмоль/л).

2.2.4 Коррекция некоторых биохимических показателей крови у спортивных лошадей

В крови животных первой контрольной группы на протяжении всего срока исследований уровень глюкозы изменялся незначительно, находясь в пределах 4,06-4,20 ммоль/л.

Количество глюкозы в крови животных второй, третьей и четвертой опытных групп в процессе исследований повышалось, по сравнению с их первоначальным фоновым уровнем. Этот процесс имел различную степень выраженности, в зависимости от проводимых мероприятий.

Содержание глюкозы в крови лошадей второй группы, в рацион которых включали настойку прополиса, в процессе опыта имело тенденцию к умеренному повышению.

Введение меда и настойки прополиса (третья группа) и меда и цветочной пыльцы (четвертая группа) в рацион спортивных лошадей способствовало значительному увеличению глюкозы в крови. Причем более выраженным этот процесс был в организме животных третьей группы.

Количество глюкозы в крови животных третьей и четвертой групп превысило свой фоновый уровень на 10, 20, 30 и 60-й дни опыта, соответственно, в 1,20 и 1,11 раза (на 0,82 и 0,47 ммоль/л), в 1,28 и 1,22 раза (на 1,15 и 0,93 ммоль/л), в 1,33 и 1,25 раза (на 1,37 и 1,04 ммоль/л), в 1,26 и 1,19 раза (на 1,05 и 0,8 ммоль/л).

Содержание общего белка в сыворотке крови лошадей первой (контрольной) группы за период опытов (60 дней) находилось в пределах от 56,4 до 60,6 г/л.

На протяжении опыта данный показатель в организме лошадей опытных групп имел тенденцию к повышению.

Так, на 10-й, 20-й, 30-й и 60-й дни опыта содержание общего белка в сыворотке крови лошадей второй группы превысил фоновый уровень, соответственно, в 1,09 раза (на 5,3 г/л), в 1,21 раза (на 12,2 г/л), в 1,3 раза (на 17,4 г/л), в 1,30 раза (на 17,2 г/л).

Увеличение количества общего белка в сыворотке крови лошадей четвертой группы (получавших наряду с обычным рационом мед и цветочную пыльцу) за период опытов происходило более интенсивно, чем во второй группе животных. Здесь уже к 10-му дню от начала исследований описываемый показа-

тель повысился относительно своего первоначального значения (фон) в 1,17 раза (на 9,9 г/л), на 20-й день - в 1,29 раза (на 17,0 г/л), на 30-й день - в 1,37 раза (на 21,9 г/л), на 60-й день - в 1,36 раза (на 21,3 г/л).

Максимальное увеличение содержания общего белка сыворотки крови регистрировалось у лошадей третьей группы, в рацион которых вводили мед и настойку прополиса. Данный показатель у животных описываемой группы превысил свое фоновое значение к 10-му дню опыта в 1,21 раза (на 12,4 г/л), к 20-му дню — в 1,33 раза (на 20,0 г/л), к 30-му дню - в 1,44 раза (на 26,4 г/л), к 60-му дню - в 1,42 раза (на 25,1 г/л).

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что интенсивные тренинговые нагрузки вызывают в организме спортивных лошадей снижение показателей иммунного статуса, естественного микробиоценоза и минерального обмена.

2. Настойка прополиса и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой способствуют активизации факторов естественной резистентности и реакций фагоцитоза в организме спортивных лошадей: активность лизоцима максимально превышает контроль на 201,9; 289,1 и 253,0 ед/мл, бактерицидная активность сыворотки крови - на 19,9, 54,1 и 45,6%, фагоцитарная активность нейтрофилов - на 15,8; 33,0 и 25,8 %).

3. Прополис и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой значительно усиливают в организме спортивных лошадей реакции иммуноком-петентных клеток в виде:

а) повышения в крови содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов - в 1,2; 1,31 и 1,28 раза, Т-хелперов - в 1,18; 1,44 и 1,28 раза; В-ЕАС-лимфоцитов - в 1,31; 1,42 и 1,36 раза;

б) нормализации реакции Т-супрессоров.

4. Настойка прополиса и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой способствуют восстановлению микробиоценоза кишечника, выражающегося:

а) активизацией бактерий-пробионтов (бифидо- и лактофлоры в 1,85 и 1,62 раза; в 2,27 и 2,0 раза, в 1,95 и 1,82 раза);

б) затормаживанием роста условно-патогенных микроорганизмов: стафилококков - в 1,47; 2,36 и 1,61 раза; эшерихий - в 1,5; 1,95 и 1,63 раза; клостридий - в 1,4; 1,81 и 1,64 раза, вульгарного протея - в 2,24; 14,0 и 6,48 раза, псевдомонов - в 1,25; 2,24 и 1,86 раза.

5. Исследованные композиционные формы прополиса, меда и цветочной пыльцы активизируют в организме спортивных лошадей показатели минерального обмена в виде повышения в сыворотке крови общего кальция — в 1,25; 1,32 и 1,29 раза, железа - в 1,82; 2,23 и 2,01 раза, цинка- в 1,22; 1,42 и 1,37 раза, меди - в 1,29; 1,43 и 1,38 раза, марганца- в 1,48; 1,63 и 1,6 раза.

6. Настойка прополиса и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой увеличивают некоторые биохимические показатели в организме спортивных лошадей:

а) содержание глюкозы в крови увеличивается в 1,18; 1,3 и 1,24 раза;

б) уровень общего белка в сыворотке крови повышается в 1,27; 1,47 и 1,37 раза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В спортивном коневодстве для профилактики иммунодефицитных состояний и дисбактериозов, нарушений минерального обмена, вызванных интенсивной тренинговой нагрузкой на организм и с целью создания прочного иммунного и минерального баланса целесообразно вносить в рацион медовые композиции с биологически активными продуктами пчеловодства.

2. Наиболее эффективным является применение композиционных форм: мед в сочетании с прополисом и мед в комплексе с цветочной пыльцой.

3. Указанные композиционные формы задавать лошадям один раз в день перед кормлением в течение 10 дней в дозах: мед - по 150 г, прополисное молочко — по 100-150 мл, цветочную пыльцу - по 40 г на животное.

4. Полученные результаты могут быть использованы на ипподромах, кон-но-спортивных комплексах, других коневодческих предприятиях, а также при составлении научной, общеобразовательной, информационной литературы для внедрения в курс лекционных и лабораторно-практических занятий по коневодству, кормлению, иммунологии, микробиологии.

Список опубликованных работ по теме диссертации:

1. Сунаргулов М.М. Т- и В-системы иммунитета башкирской породы лошадей (учалинского типа). / М.М. Сунаргулов, Р.Т. Маннапова, Е.А. Карюк // Иммунобиологические, технологические, экономические факторы повышения производства продукции сельского хозяйства. — Москва-Уфа, 2002. — С. 306308.

2. Андреева Е.Н. Влияние композиционных форм продуктов пчеловодства на гуморальное звено иммунитета. / Е.Н.Андреева, Е.А.Карюк // Иммунобиологические, технологические, экономические факторы повышения производства продукции сельского хозяйства. - Москва-Уфа, 2002. - С. 5-6.

3. Карюк Е.А. Нормофлора кишечника спортивных лошадей/ Е.А.Карюк // Аграрная наука в XXI веке: Материалы республиканской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов (21-22 мая 2003 года). - Уфа, 2003. - С. 52-54.

4. Карюк Е.А. Иммунный статус спортивных лошадей. / Е.А.Карюк // Аграрная наука в XXI веке: Материалы республиканской научно-практической

конференции молодых ученых и аспирантов (21-22 мая 2003 года). - Уфа, 2003. -С. 54-56.

5. Карюк Е.А. Гуморальные факторы иммунитета и их коррекция у спортивных лошадей / Е.А.Карюк // Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных: Материалы междунар. научн.-практич. конф., посвященной 90-летию со дня рожд. засл. деятеля науки РФ и РБ, д-ра вет. наук, проф. Х.В.Аюпова (26-28 января 2004 года). - Москва-Уфа, 2004. - С. 150-152.

6. Карюк Е.А. Фагоцитоз у спортивных лошадей./ Е.А.Карюк // Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных: Материалы междунар. научн.-практич. конф., посвященной 90-летию со дня рожд. засл. деятеля науки РФ и РБ, д-ра вет. наук, проф. Х.В.Аюпова (26-28 января 2004 года). -Москва-Уфа, 2004. - С. 152-153.

7. Карюк Е.А. Минеральный обмен и его коррекция у спортивных лошадей. / Е.А.Карюк, Г.Н.Худов // Материалы 110-й научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству» (2-3 февраля 2004 г.). - Уфа: Изд-во БГАУ, 2004. -С. 23-25.

8. Карюк Е.А. Ферментативные обменные процессы у спортивных лошадей. / Е.А.Карюк // Материалы 110-й научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки -производству» (2-3 февраля 2004 г.). - Уфа: Изд-во БГАУ, 2004. - С. 26-28.

9. Худов Г.Н. Динамика биохимических показателей крови при микстинва-зиях лошадей. / Г.Н.Худов, С.ВЛарионов, Е.А.Карюк // Материалы 110-й научно-практической конференции преподавателей, сотрудников и аспирантов университета «Достижения аграрной науки - производству» (2-3 февраля 2004 г.). - Уфа: Изд-во БГАУ, 2004. - С. 48-50.

10. Карюк Е.А. Минеральный обмен и его коррекция продуктами пчеловодства и пробиотиком «Бактонеотим» у спортивных лошадей / Е.А.Карюк, Р.Т.Маннапова // Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы: Материалы между-нар. конф. (Москва, 2-4 июня 2004 года). - М., 2004. - С. 176.

Лицензия № 223 от 03 08 2000 г. Подписано в печать 19.11 2004 г. Формат 60x84 1/16 Бумага типографская. Компьютерный набор. Печать на ризографе. Тираж 100 экз Заказ № 675

Отпечатано в типографии ООО «Штайм» 450005, Уфа,ул 8емарта, 12/1

»24347

Актуальность работы. В условиях научно-технического прогресса народнохозяйственное значение лошади определяется четырьмя основными направлениями: племенное (коннозаводство), рабочепользовательное, продуктивное и спортивное коневодство.

Спортивное коневодство включает выращивание и подготовку лошадей для классических видов конного спорта, конно-спортивных игр и состязаний, конного туризма и проката, соревнований, олимпийских игр. Интенсификация спортивного направления возможна за счёт совершенствования существующих, создания новых типов и пород лошадей (украинской верховой, англо-кабардинской и др.), разработки и внедрения прогрессивных технологий выращивания лошадей для разных видов спорта, создания специальных центров по подготовке лошадей к международным и олимпийски играм, подготовки квалифицированных кадров.

Развитию конного спорта в Башкортостане стали уделять особое внимание в последние годы. Во многом этому способствовало принятие в 2000 году специального постановления Кабинета Министров РБ, программы развития коневодства в Республике Башкортостан на 2001-2005 годы и создание в 2003 году Координационного совета по коневодству. Все это позволило привлечь к спортивному коневодству максимальное количество коневодческих хозяйств, коневладельцев и спортивных школ.

Организм лошади может проявлять максимальные селекционно-обусловленные признаки работоспособности, в том числе свой резвостный потенциал, при стабильных выступлениях в условиях соревнований и иппо-дромных испытаний лишь при наличии соответствующих условий для их реализации.

Изучение иммунологической реактивности при различных состояниях организма лошадей является одной из основных задач ветеринарной науки.

Конноспортивные состязания и подготовка к ним связаны с огромными физическими нагрузками на лошадь на фоне быстро меняющихся условий окружающей среды, принуждения, психоэмоциональных воздействий. Степень и глубина стрессовых «возмущений» в организме спортивных лошадей, их своеобразная «устойчивость» в период соревнований к различным факторам во многом зависит от рациональной системы тренинга, регулярного ветеринарного контроля за состоянием здоровья, кормления и содержания животных. Недостаточно подготовленные троеборные лошади, как правило, снимаются при ветконтроле или плохо выступают в конкурных соревнованиях и надолго выбывают из строя, так как требуется значительное время (недели, месяцы) для восстановления спортивных (рабочих) кондиций (Вогралик М.В., Послов Г.А., 1981, 1985).

Как показал анализ отечественной и зарубежной литературы, неправильный режим эксплуатации различных видов животных, в т.ч. и спортивных лошадей, оказывает стрессовые воздействия, последствия которых становятся одной из причин или условий возникновения заболеваний многих органов и систем. При этом, как отмечают исследователи, нарушаются механизмы иммунного гомеостаза, связанного со специфическими и неспецифическими факторами защиты животного организма (Балакин O.A., 1982; Ласков A.A., Пушкарева С.А., 1984; Фролов Б.А., 1984).

В настоящее время назрела необходимость изыскания и внедрения способов коррекции естественной резистентности спортивных лошадей, способствующих подавлению последствий нервных и эндокринных механизмов различных стрессов в коневодстве (транспортный, тренинговый и т.д.).

Одними из ключевых проблем коневодства являются управление метаболическими процессами в организме спортивных лошадей, обеспечивающее эффективное потребление энергии за счет нетрадиционных кормовых средств, оптимизация полноценности рациона кормления лошадей разных половозрастных групп и направлений использования с помощью биологически активных веществ (БАВ). Особый интерес представляют препараты, изготовленные из природного, легко доступного сырья. К таковым можно отнести препараты пчеловодства - мед, прополис и цветочную пыльцу, обладающих разносторонней биологической активностью.

Большое количество научных исследований посвящено изучению биологических свойств прополиса (В.П.Кивалкина, 1948-1991; З.Х.Каримова с соавт., 1973, 1980; Н.В.Панкратов, 1979; Т.А.Шуб, 1982; П.Лави, 1985; А.А.Барсков с соавт., 1990; Н.С.Асфандиярова с соавт., 1993; С.П.Приходько с соавт., 1993; Ш.М.Омаров, 1987, 1997; Р.Т.Маннапова с соавт. 1988- 2001; С.О.Шилов, 2000; П.Я.Гущин с соавт., 2001; А.Ф.Загретдинов, 2000, 2001; З.З.Ильясова, 2001 и др.).

Следует отметить, что вопросы влияния продуктов пчеловодства на неспецифические факторы иммунитета спортивных лошадей в доступной литературе освещены недостаточно.

В последние годы появилось достаточное количество работ показывающих, что можно с успехом управлять иммунным ответом и при снижении функции иммунитета стимулировать его. Поэтому одной из важных проблем медико-биологической и ветеринарной науки и практики является изыскание мер и средств, направленных на снижение действия неблагоприятных факторов на гомеостаз организма и профилактику развития иммуно-дефицитных состояний.

С другой стороны, отмечаются значительные отклонения в аутофлоре животных, вызванные такими явлениями, как нарушения условий содержания и кормления животных, постоянные стрессовые воздействия различной этиологии, широкое и бесконтрольное применение антибактериальных препаратов и другие факторы, способствующие негативным сдвигам бифидофлоры. На фоне дефицита бифидофлоры нарушаются нормальные соотношения между облигатными микроорганизмами кишечника. Отмечается снижение количества или полная элиминация латобацилл, увеличение или снижение кишечных палочек и повышение ассоциации условно-патогенных бактерий.

Низкое содержание бифидобактерий и лактофлоры оказывает неблагоприятное влияние на секреторную функцию кишечника, процессы всасывания, некоторые показатели белкового, липидного и минерального обменов, вита-минсинтезирующую и ферментативную функции. Аномально размножающиеся микроорганизмы продуцируют нежелательные продукты метаболизма и создают условия для дисбактериоза (Г.И.Гончарова с соавт., 1989; В.А.Антипов, 1990, 1991; Т.Н.Грязнева с соавт., 1991; А.А.Воробьев с соавт., 1995; Н.И.Малик с соавт., 2001). Поэтому необходимы исследования в направлении поиска средств, оказывающих благоприятное воздействие не только на иммуногенез, но и нормализацию микробиоценоза кишечника, путем создания в нем благоприятного физиологического и биохимического режимов.

В связи с вышесказанным целью нашей работы явилось: изучить состояние иммунного статуса, естественного микробиоценоза кишечника и минерального обмена спортивных лошадей на фоне активных физических нагрузок и разработать эффективные методы их коррекции медовыми композициями с прополисом и цветочной пыльцой.

В задачи исследования входило:

1. Изучить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на состояние естественной резистентности и фагоцитоза спортивных лошадей со сравнительной оценкой: а) динамики активности лизоцима сыворотки крови; б) динамики бактерицидной активности сыворотки крови; в) динамики фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

2. Определить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели Т- и В-систем иммунитета спортивных лошадей с учетом: а) динамики содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-супрессоров в крови; б) динамики содержания В-ЕАС-лимфоцитов в крови.

3. Установить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели естественного микробиоценоза кишечника спортивных лошадей: а) динамику количества бифидобактерий и лактобацилл; б) динамику количества условно-патогенных микроорганизмов.

4. Разработать эффективные методы коррекции минерального обмена в организме спортивных лошадей с применением меда, прополиса и цветочной пыльцы с учетом: а) динамики общего кальция в сыворотке крови; б) динамики микроэлементов в сыворотке крови (железа, цинка, меди и марганца).

5. Изучить влияние прополиса, меда в комплексе с прополисом и меда с цветочной пыльцой на некоторые биохимические показатели спортивных лошадей: а) динамику содержания глюкозы в сыворотке крови; б) динамику содержания общего белка в сыворотке крови.

Научная новизна исследований состоит в том, что впервые проведено изучение влияния медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели естественной резистентности, фагоцитоза, Т- и В-системы иммунитета, минеральный обмен, биохимические реакции и микробиоценоз кишечника спортивных лошадей на фоне интенсивной тренинговой нагрузки.

Практическая значимость работы. На основании показателей естественной резистентности, фагоцитоза, параметров Т- и В-систем иммунитета, состояния минерального обмена, биохимических реакций, микробиоценоза кишечника, с учетом влияния на организм меда и биологически активных продуктов пчеловодства - прополиса и цветочной пыльцы, теоретически и практически обоснована необходимость применения в спортивном коневодстве медовых композиций, как препаратов, обладающих хорошими иммунокорре-гирующими и иммуностимулирующими свойствами, способствующих созданию в организме животных иммунного баланса, восстановлению минерального обмена и микробиоценоза кишечника. Полученные данные позволяют рекомендовать их спортивному коневодству как эффективные средства.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Состояние естественной резистентности, фагоцитоза, Т- и В-систем иммунитета у спортивных лошадей, их коррекция медом в комплексе с прополисом и цветочной пыльцой.

2. Оценка естественного микробиоценоза кишечника (нормофлоры и условно-патогенных микроорганизмов) и пути его коррекции медовыми композициями с прополисом и цветочной пыльцой.

3. Состояние минерального обмена у спортивных лошадей при высокой интенсивности тренинговых нагрузок и пути его коррекции биологически активными продуктами пчеловодства.

4. Изменение некоторых биохимических показателей крови (общего белка и глюкозы) при применении прополиса, меда и цветочной пыльцы в различных сочетаниях.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на республиканской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов (Уфа, 2003), на научно-практической конференции БГАУ (Уфа, 2004), международной научно-практической конференции «Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных» (Москва-Уфа, 2004), на международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбио-тики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы» (Москва, 2004).

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 10 научных статьях.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 158 страницах компьютерного текста, включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 21 рисунком. Список литературы включает 256 наименований, в том числе 73 иностранных авторов.

выводы

1. Установлено, что интенсивные тренинговые нагрузки вызывают в организме спортивных лошадей снижение показателей иммунного статуса, естественного микробиоценоза и минерального обмена.

2. Настойка прополиса и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой способствуют активизации факторов естественной резистентности и реакций фагоцитоза в организме спортивных лошадей: активность лизоцима максимально превышает контроль на 201,9; 289,1 и 253,0 ед/мл, бактерицидная активность сыворотки крови - на 19,9, 54,1 и 45,6%, фагоцитарная активность нейтрофилов - на 15,8; на 33,0 и на 25,8 %).

3. Прополис и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой значительно усиливают в организме спортивных лошадей реакции иммуно-компетентных клеток в виде: а) повышения в крови содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов - в 1,2, в 1,31 ив 1,28 раза, Т-хелперов - в 1,18, в 1,44 и в 1,28 раза; В-ЕАС-лимфоцитов- в 1,31, в 1,42 и в 1,36 раза; б) нормализации реакции Т-супрессоров.

4. Настойка прополиса и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой способствуют восстановлению микробиоценоза кишечника, выражающегося: а) активизацией бактерий-пробионтов (бифидо- и лактофлоры в 1,85 и 1,62 раза; в 2,27 и 2,0 раза, в 1,95 и 1,82 раза); б) затормаживанием роста условно-патогенных микроорганизмов: стафилококков - в 1,47, в 2,36 и в 1,61 раза; эшерихий - в 1,5, в 1,95 и в 1,63 раза; клостридий - в 1,4, в 1,81 ив 1,64 раза, вульгарного протея - в 2,24, в 14,0 и в 6,48 раза, псевдомонов - в 1,25, в 2,24 ив 1,86 раза.

5. Исследованные композиционные формы прополиса, меда и уветочной пыльцы активизируют в организме спортивных лошадей показатели минерального обмена в виде повышения в сыворотке крови общего кальция - в 1,25, в 1,32 и в 1,29 раза, железа - в 1,82, в 2,23 и в 2,01 раза, цинка - в 1,22, в 1,42 и в 1,37 раза, меди - в 1,29, в 1,43 ив 1,38 раза, марганца - в 1,48, в 1,63 и в 1,6 раза.

6. Настойка прополиса и медовые композиции с прополисом и цветочной пыльцой увеличивают некоторые биохимические показатели в организме спортивных лошадей: а) содержание глюкозы в крови увеличивается в 1,18, в 1,3 и в 1,24 раза; б) уровень общего белка в сыворотке крови повышается в 1,27, в 1,47 и в 1,37 раза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В спортивном коневодстве для профилактики иммунодефицитных состояний и дисбактериозов, нарушений минерального обмена, вызванных интенсивной тренинговой нагрузкой на организм и с целью создания прочного иммунного и минерального баланса целесообразно вносить в рацион медовые композиции с биологически активными продуктами пчеловодства.

2. Наиболее эффективным является применение композиционных форм: мед в сочетании с прополисом и мед в комплексе с цветочной пыльцой.

3. Указанные композиционные формы задавать лошадям один раз в день перед кормлением в течение 10 дней в дозах: мед - по 150 г, прополисное молочко - по 100-150 мл, цветочную пыльцу - по 40 г на животное.

4. Полученные результаты могут быть использованы на ипподромах, конно-спортивных комплексах, других коневодческих предприятиях, а также при составлении научной, общеобразовательной, информационной литературы для внедрения в курс лекционных и лабораторно-практических занятий по коневодству, кормлению, иммунологии, микробиологии.