Функциональная морфология желтых тел яичников коров в норме и при патологии

Шарипов, Ансар Радикович

Диссертации по ветеринарии → Патология, онкология и морфология животных

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Функциональная морфология желтых тел яичников коров в норме и при патологии

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Шарипов, Ансар Радикович Уфа 2004 г.

Ученая степень: кандидата ветеринарных наук

ВАК РФ: 16.00.02

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Функциональная морфология желтых тел яичников коров в норме и при патологии

На правах рукописи

Шарипов Ансар Радикович

Функциональная морфология желтых тел яичников коров в норме и при патологии

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Уфа-2004

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор

Сковородин Евгений Николаевич

Официальные оппоненты - доктор ветеринарных наук, профессор

Галеев Рафаэль Фаррахович

кандидат ветеринарных наук Буканов Азамат Мухтарович

Ведущая организация — ВГО «Башкирский институт перепод-

готовки и повышения квалификации кадров АПК»

Защита состоится «22» декабря 2004 года в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.02 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» 450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, корпус 4.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Башкирский государственный университет»

Автореферат разослан «_18 » ноября 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доцент

Каримов Ф. А.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Изучение функциональной морфологии органов размножения сельскохозяйственных животных в норме и при патологии является одной из наиболее сложных и актуальных проблем биологии и ветеринарной медицины (Шипилов, 1977; Соколовская, Милованов, 1981; Буянов, 1986; Эрнст, Сергеев, 1989; Валюшкин, Гуков, 1998; Миролюбов, 2003; Нежданов, 2003; Hammond, 1927; Hunter, 1980). Большой интерес к ним не исчерпывается чисто теоретическими соображениями, поскольку достижения в данной области непосредственно связаны с кардинальными вопросами воспроизводства, находят прямой и эффективный выход в практику (Полянцев, Синявин, 1989; Зверева, 1991; Иноземцев, Таллер, 1997; Шутов, Буканов, 2001; Пронин, 2003; Noakes, 1986).

Среди работ, раскрывающих проблемы функциональной морфологии яичников крупного рогатого скота (Хватов, 1955; Литвинова, 1964; Хонина, 1984; Курило, 1985; Еремин, 1987; Садирова, Хрусталева, 1993; Свиридов, 1993; Ско-вородин, 1999; Еремин, 2004; Erickson, 1966; Guraya, 1977; Singh, Roy, 1999), недостаточно исследований касающихся строения желтых тел и других лютеи-низированных структур яичников (Киршенблат, 1973; Долинина, 1977; Пономарева, 1981; Середин, 1998; Грига, 1999; Gasse, 1983; Konsaka et al. 1982; Weber et al., 1993; Singh, Roy, 1999). Дефицит информации, относящийся к морфологическому эквиваленту функции этой эндокринной железы, не позволяет эффективно решать целый ряд современных задач, поставленных практикой, таких как трансплантация эмбрионов, синхронизация охоты, профилактика симптоматического бесплодия, дифференциальная диагностика болезней органов размножения, их профилактика и лечение, разработка лютеолитических препаратов. По данным многих исследователей (Кононов, Буянов, 1973; Долинина, 1977; Муруев, 1985; Полянцев, Калашник, 1991; Середин, 1998; Грига, 1999; Нежданов, Душкаева, 1999; Jabb et al., 1985) персистентное желтое тело - одна из причин симптоматического бесплодия. Существующие в настоящее время методы диагностики, основанные на клиническом и, прежде всего, ректальном исследовании, не отражают всей сложности патологических процессов, происходящих в овариальных железах и матке при этой патологии. Не выяснены механизмы лютеинизации и лютеолизиса (Carlson et al., 1989; Bove et al., 2000; Murphy, 2000). Практически не изучены другие типы лютеиновых структур яичников, не выяснена их роль в патологии овариальных желез.

Цель и задачи исследований. Изучить функциональную морфологию желтых тел и лютеиновых структур яичников коров в норме и при патологии. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи.

1. Провести макроскопическое исследование органов размножения коров на протяжении стельности и полового цикла, при дисфункциях овариальных желез.

2. Определить органометрические показатели яичников коров и находящихся в них желтых тел на протяжении стельности и полового цикла, при дисфункциях яичников.

3. Изучить гистологические, гистохимические и гистоэнзиматические показатели желтых тел яичников стельных и циклирующих коров, персистент-ных желтых тел.

4. С помощью электронной микроскопии определить ультраструктурные показатели желтых тел яичников стельных и циклирующих коров, перси-стентных желтых тел.

помощью комплекса клинико-гинекологических, патанатомических, макроскопических, морфометрических, гистологических, гистохимических, электронно-микроскопических методов, а также биопсии проведено исследование органов размножения и желтых тел яичников стельных и циклирующих коров, животных с дисфункциями овариальных желез на фоне патологии матки.

Подробно описаны макроскопические и морфометрические изменения в желтых телах яичников коров на протяжении беременности, полового цикла и при персистенции.

Дана подробная гистологическая, гистохимическая и ультраструктурная характеристика клеток, соединительной ткани, межклеточных взаимодействий, сосудов микроциркуляторного русла активно функционирующих желтых тел беременности, полового цикла, а также персистентных желтых тел яичников коров.

С помощью биопсии и исследования послеубойного материала показано ведущее значение нарушений микроциркуляторного русла, формирования внутриклеточных и мезенхимальных дистрофий, а также роль макрофагов в лютеолитических процессах, развивающихся в норме и при патологии в желтых телах яичников коров, а также при экспериментальном введении аналога про-стагландина Р2а (эстуфалан).

Практическая ценность работы. Описана морфология яичников коров в норме и при дисфункциях яичников. Установленные макроморфологические критерии структуры желтых тел яичников крупного рогатого скота в разные сроки стельности, полового цикла и персистенции можно использовать с целью установления состояния репродуктивной системы в норме и при патологии.

Доказана возможность проведения биопсии желтого тела яичника для диагностики дисфункций овариальных желез и при экспериментальном изучении действия лютеолитических и других биологически активных препаратов на структуру овариальных желез.

Результаты диссертационной работы, иллюстративный материал используются в учебном процессе на кафедре акушерства, патанатомии и хирургии Башкирского государственного аграрного университета.

Полученные данные включены в монографию "Возрастная морфология органов размножения самок крупного рогатого скота" (Сковородин Е. Н., Мень-кова А. А., Брянск, 2002. 208 с.) и в учебное пособие «Руководство к лабора-

торным занятиям по патологической анатомии животных» (Кадыров У. Г, Ско-вородин Е. Н., Уфа, 2003.180 с).

Они также могут быть использованы для разработки способов диагностики болезней яичников у крупного рогатого скота и других видов животных, оценки фармакологических препаратов и рационов, а также в учебных целях по курсам анатомии, гистологии, акушерства и биотехнологии, патологической анатомии, при написании учебников и монографий по сравнительной и патологической морфологии, ветеринарной гинекологии.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены, обсуждены и получили положительную оценку на Международной научно-практической конференции «Проблемы акушерско-гинекологической патологии и воспроизводства сельскохозяйственных животных», посвященной 100-летию А. П. Студен-цова (Казань, 2003), Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины (Уфа, 2003), Международной научно-практической конференции «Проблемы и пути интенсификации племенной работы в отраслях животноводства» (Уфа, 2004), УИ Конгрессе Международной ассоциации морфологов (Казань, 2004), расширенном заседании кафедры акушерства, патанатомии и хирургии Башкирского государственного аграрного университета (Уфа, 2004).

Публикации. Положения диссертационной работы достаточно полно отражены в трех научных статьях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста, состоит из разделов «Общая характеристика работы», «Обзор литературы», «Собственные исследования», «Обсуждение полученных результатов», «Выводы», «Практические предложения», «Список литературы». Список использованной литературы включает 225 источников, в том числе 106 иностранных авторов. Диссертация содержит 4 таблицы, 80 рисунков, в том числе 8 макрофотографий, 12 микрофотографий, 55 электронно-грамм и 5 графиков.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Макроскопическая и органометрическая характеристика овариальных желез и желтых тел яичников коров на разных сроках стельности и полового цикла, персистентных желтых тел.

2. Гистологическая и гистохимическая характеристика желтых тел яичников коров на первом-втором месяцах стельности, на 8 - 12-е сутки полового цикла, персистентных желтых тел разной морфофункциональной активности.

3. Ультраструктура лютеоцитов, межклеточных взаимодействий, элементов стромы и микроциркуляторного русла желтых тел яичников коров на первом-втором месяцах стельности, на 8 - 12-е сутки полового цикла, персистентных желтых тел разной морфофункциональной активности.

4. Морфологические проявления лютеолитических процессов в желтом теле полового цикла после экспериментального введения аналога простагландина Б (эстуфалан).

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материал и методы исследований

Работа выполнена в 2001 - 2004 годах на кафедре акушерства, патанато-мии и хирургии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», в учебно-опытном хозяйстве БГАУ «Мидовское» Уфимского района Республики Башкортостан, в убойном цехе Уфимского мясоконсервного комбината, а также в лаборатории морфологии, гистохимии и электронной микроскопии Всероссийского центра глазной и пластической хирургии «Аллоплант».

В хозяйстве исследовали условия кормления, содержания и эксплуатации животных, анализировали воспроизводительную функцию коров с учетом распространенности патологии половых органов. Клиническое состояние животных определяли по общепринятым в ветеринарной медицине методам, а также выборочного биохимического исследования крови на содержание общего белка, неорганического кальция, фосфора, кислотной емкости и каротина.

На основании этих данных отбирали животных и делили их на следующие группы. Первая группа — 27 стельных коров (по три коровы на каждый месяц стельности). Вторая группа — 21 корова на разных стадиях полового цикла. Половой цикл условно дели на семь стадий (одна стадия составляла последовательно три дня). Третья группа - бесплодные коровы с дисфункциями яичников, а именно: с персистентным желтым телом (п = 10), с гипофункцией яичников (п = 5), с лютеиновыми и фоликулярными кистами яичника (п = 10).

На мясокомбинатах проводили тщательный послеубойное исследование органов коров с последующим макроскопическим, гистологическим, гистохимическим и электронномикроскопическим изучением полученного материала.

После извлечения проводили измерения различных отделов органов размножения. У коров яичники осматривали, отмечая их величину, наличие фолликулов, желтых тел, красных и белых атретических тел. Разрезали поперечно с помощью пластинчатого аппарата, состоящего из двух штоков от шприца типа "Рекорд-Правац" и закрепленных на них с помощью шайб лезвиями от безопасных бритв. Полученные пластинки осматривали и фиксировали в жидком азоте, жидкости Карнуа, 10% растворе нейтрального формалина, в охлажденном 2,5% глютаральдегиде.

Материал, зафиксированный в жидкости Карнуа или в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали и заливали в парафин по схеме Г. А. Меркулова (1969). С помощью микротома получали срезы толщиной 5-6 мкм которые после депарафинации окрашивали гематоксилином и эозином, паноптиче-ским методом по A. Pappenheim. Коллагеновые волокна выявляли по ван Гизо-ну. Дезоксирибонуклеопротеиды (ДНП) и рибонуклеопротеиды (РНП) - по L. Einarson, по J. Brächet, гликоген и нейтральные гликозаминогликаны - по А. Л. Шабадашу, кислые гликозаминогликаны - по Н. F. Steedman. Из материала, фиксированного в формалине, срезы, полученные на замораживающем микротоме, окрашивали Суданом черным по Лизону, Суданом III по Дадди (Конон-ский, 1976).

Из кусочков яичников, фиксированных в жидком азоте, в криостате получали срезы толщиной 10 мкм и в них, по прописям Пирса (1962) и Лилли (1969), выявляли активность дегидрогеназ сукцината (СДГ), лактата (ЛДГ), ни-котинамидадениндинуклеотидфосфата восстановленного (НАДНгДГ), никоти-намидадениидинуклеотидфосфата восстановленного щелочной и

кислой фосфатазы по Берстону в модификации Лойда и др. (1982).

Электронную микроскопию проводили по общепринятой методике. Материал фиксировали в охлажденном 2,5 % глютаральдегиде на фосфатном буфере с рН 7,3 с последующей дофиксацией 1% раствором осьмиевой кислоты на фосфатном буфере. Кусочки заливали эпон-аралдитной смесью. После получения и окраски полутонких срезов, блоки окончательно затачивали и готовили ультратонкие срезы на ультратоме LKB-III-8800A (Швеция), монтировали их на опорные сетки и контрастировали цитратом свинца по Е. Reynolds (1963). Просматривали на электронном микроскопе JEM-100CXII при увеличениях на 6000-27000.

В криостатных срезах материала, фиксированного в жидком азоте, изучали активность окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов. Гистохимическую активность энзимов оценивали по В.В.Семеновой-Тян-Шанской и ЛАСайковой (1977) с использованием микроскопа МБР-3 (ок.7, об. 90), для чего в тубус микроскопа вставляли измерительный окуляр с сегкой, содержащей 16*16 квадратов (8*8 мм), и с ценой деления квадрата 0,5*0,5 мм. Сетку накладывали на различные участки срезов желтых тел, подсчитывали количество зерен продукта гистохимической реакции.

В поперечных срезах яичника, проходящих через весь орган вплоть до брыжейки, подсчитывали число лютеиновых образований, а также фолликулов с учетом их состояния. При этом использовали Международную гистологическую номенклатуру (1983) и классификацию овариальных фолликулов, предложенную Л. К. Эрнстом и др. (1980) с учетом особенностей ее приложения к гистологическим срезам. Количество гликогена, нуклеопротеидов, гликозами-ногликанов и липидов оценивали по балльной шкале.

Изучение морфологического проявления лютеолитической активности синтетического аналога простогландина Fzu (эстуфалан) было проведено на 24 коровах с использованием биопсии желтого тела яичника. 18-ти коровам опытной группы эстуфалан вводили однократно внутримышечно в дозах 250, 500 и 1000 мкг на восьмые-двенадцатые сутки полового цикла на фоне активно функционирующих желтых тел. Биопсию желтого тела яичника проводили двукратно через 48 часов (девять коров) и 96 часов (девять коров) после введения препарата. Коровам контрольной группы (шесть коров) вводили физиологический раствор и проводили биопсию желтого тела двукратно через 48 часов (три коровы) и 96 часов (три коровы).

реном перпендикулярно поверхности крупа. Иглу продвигали вглубь тканей настолько, чтобы ее конец можно было обнаружить пальцем через стенку прямой кишки. Затем захватывали яичник, оттягивали его каудально и несколько вверх, к своду тазовой полости, где находится конец иглы. Правой рукой иглу вводили глубже, извлекали мандрен и прокалывали желтое тело. При этом небольшая часть ткани остается в просвете иглы. Иглу извлекали, ее содержимое помещали в фиксатор или на предметное стекло. При проведении биопсии левого яичника пункцию проводили левой рукой, а яичник через прямую кишку фиксировали правой.

Количественные данные подвергали математической обработке с помощью прикладных программ на персональном компьютере с использованием критерия Стьюдента.

2.2 Результаты собственных исследований

2.2.1 Макроскопическая характеристика яичников стельных и бесплодных коров

Масса яичника, содержащего желтое тело, изменяется на протяжении беременности. К концу первого месяца стельности этот показатель достигал 12,1 гр., к двухмесячному возрасту достоверно увеличивался на 20,7 % (14,6 гр.), к трем месяцам достоверно снижается на «27,4 % (10,6 гр.), а дальнейшем оставался относительно стабильным (9,3 — 10,1 гр.). Масса яичника, не содержащего желтое тело, на протяжении стельности остается относительно одинаковой (5,3 -6,3гр.).

Изменяется величина желтого тела беременности. К двухмесячному возрасту диаметр желтого тела достоверно увеличивается на 39,2 % и достигает в среднем 28,4 мм. К трехмесячному возрасту этот показатель достоверно снижается на 18,7 % (23,1 мм) и в дальнейшем, несколько снижаясь, остается относительно стабильным (18,9-21,4 мм).

Желтые тела беременности располагаются преимущественно в правом яичнике. Их локализация соответствует расположению плода. К двум месяцам оно возвышается над поверхностью яичника, в центре имеется углубление, под капсулой хорошо выражены кровеносные сосуды. В более поздние сроки кровеносные сосуды видны не так ясно, и поверхность желтого тела становится более гладкой.

Форма яичников стельных коров бугристая вследствие наличия не только желтого тела, но и полостных фолликулов различной величины, выступающих над поверхностью органа. В яичнике с желтым телом число небольших полостных фолликулов диаметром до 10 мм достоверно снижается к двухмесячному возрасту на 44,8 % (8,2), когда желтое тело беременности достигает своего расцвета, в дальнейшем достоверно повышается на 75,6 % (14,4), достигая своего максимума к четырем месяцам (20,1). В дальнейшем снижается к шести месяцам стельности, оставаясь в дальнейшие сроки относительно стабильным (8,1 -12,3). Аналогичная закономерность изменения количества полостных фоллику-

лов диаметром до 10 мм выявлена в яичнике без желтого тела.

На протяжении первых шести месяцев беременности в яичниках можно обнаружить один — два крупных полостных фолликула диаметром более 10 мм. В более поздние сроки эти структуры обнаруживаются чрезвычайно редко.

Число красных тел в обоих яичниках достоверно не изменяется на протяжении беременности. Мы рассматриваем их как остатки желтых тел предыдущей беременности или половых циклов.

Число белых атретических тел, достоверно увеличивается к двум месяцам стельности, когда количество полостных фолликулов снижается. К трем месяцам этот показатель достоверно снижается, а число полостных фолликулов повышается. К четырем месяцам достоверно увеличивается и, снизившись к пяти месяцам, остается стабильным. В яичнике без желтого тела наблюдается такая же закономерность, однако менее выраженная.

У коровы во время полового цикла яичники представляют собой парные органы, лежащие в тазовой или брюшной полости близко к яйцепроводу и рогам матки. Они имеют овальную форму, массу 20-25 г, объем 21-25 см3, длину 5-9 см. В связи с тем, что значительная часть яичника образована временными структурами, такими как фолликулы и желтые тела, относительные его размеры меняются в течение цикла.

ГТерсистентные желтые тела на фоне субъинволюции матки характеризовались крупными размерами (20 — 25 мм в диаметре), выступают на поверхность яичника на 5 — 8 мм, грибовидные, с углублением в центре. Яичник, содержащий желтое тело, обычно бобовидной формы, достигает массы 10-11 гр., длины 35 - 40 мм, высоты 20 - 25 мм, толщины 15-30 мм. Он содержит много фолликулов — от едва заметных глазом, до достигающих величины красных и белых атретических тел. Парный яичник массой 6-8 гр., веретенообразной формы, также может содержать более мелкие желтые тела и фолликулы, достигающие 9 мм в диаметре.

Персистентные желтые тала в яичниках животных с хроническим эндометритом располагаются внутри овариальной железы и имеют меньший размер (10-15 мм в диаметре). На поверхность яичника выступают незначительно, без грибовидного возвышения. Яичник, содержащий персистентное желтое тело длиной 34 - мм, высотой 20 - мм, толщиной 18 - мм, массой 5 - 8 гр. содержит умеренное количество фолликулов, некоторые из которых достигают 10 мм в диаметре. Парный яичник массой 3—6 гр., бобовидной формы, длинной 30 — 35 мм, высотой 15-20 мм, толщиной 5-10 мм, не содержит желтые тела.

У животных с клиническим диагнозом гипофункция яичников после убоя овариальные железы были небольшого размера. Их длина колебалась в пределах от 3 до 4,5 см, ширина - от 1,5 до 2,5 см, высота — от 1,5 до 2,5 см, а объем варьировал в диапазоне от 9 до 28 см3.

2.2.2 Гистологические и гистохимические показатели желтых тел яичников крупного рогатого скота

Поверхность желтого тела беременности покрыто соединительнотканной оболочкой, от которой внутрь его отходят перегородки, содержащие кровеносные и лимфатические сосуды. При окраске по Ван Гизону фуксинофильных волокон не выявляли. Паренхима желтого тела беременности состоит, в основном, из крупных лютеиновых клеток с зернистой цитоплазмой, редко с небольшими вакуолями. В среднем диаметр, лютеоцитов равнялся 27,1±5,3 мкм. Ядро у них крупное, светлое, гетерохроматин располагается по периферии кариоплазмы. Его средний диаметр равен 10,1±1,2 мкм. Встречаются клетки очень крупных размеров, с одним крупным ядром или двумя ядрами. Реже встречаются клетки несколько меньшей величины с крупными вакуолями и небольшим гиперхромным ядром.

Аргирофильные волокна образуют в желтом теле сеточку, в ячейках которой располагаются лютеиновые клетки. По ходу этих волокон располагаются тека-лютеиновые клетки, они более мелкие, вытянутой формы с небольшими ядрами. Их средний диаметр равняется 11,9+2,3 мкм и существенно не отличается от величины этих клеток в желтом теле полового цикла. Величина ядра в среднем составляет 8,5+1,2 мкм в диаметре.

Гликоген выявляли только в капсуле и стенках кровеносных сосудов желтого тела. Рибонуклеопротеиды в цитоплазме крупных лютеиновых клеток содержатся в среднем количестве. Нейтральных жиров в паренхиматозных элементах мало. В крупных лютеиновых клетках они располагаются пылевидно, а в тека-лютеиновых — в виде капель средней величины. Фосфолипиды распределены в паренхиме желтого тела беременности равномерно, в виде мелких капель.

Желтое тело полового цикла достигает максимального расцвета на деся-тые-двенадцатые сутки полового цикла. Оно покрыто соединительнотканной капсулой, от которой к центру направляются тонкие прослойки, содержащие кровеносные и лимфатические сосуды. В середине желтого тела располагается "сердцевина" или "ядро", сформированное из волокнистой соединительной ткани. В единичных случаях в середине желтого тела полового цикла мы обнаруживали полость диаметром от нескольких миллиметров до одного сантиметра. В полости находится мутная тягучая жидкость, содержащая клетки крови и слущенный эпителий. Полость выстлана плоским эпителием и окружена волокнистой соединительной тканью. Фуксинофильных волокон при окраске по Ван Гизону в строме желтого тела полового цикла не выявлено.

Между прослойками соединительной ткани располагаются паренхима желтого тела, представленная крупными лютеиновыми клетками, со средним диаметром 24,2+2,8 мкм. Они имеют зернистую цитоплазму и светлое округлое ядро, расположенное в центре. Средний его диаметр равнялся 9,4+0,9 мкм. Хроматин в виде мелких гранул располагается по периферии ядра. В центре находится крупное ядрышко. Иногда встречаются крупные лютеоциты с вакуоли-зированной цитоплазмой, в которой выявлялись липиды. По сравнению с жел-

тым телом беременности гистограмма распределения диаметров гранулезо-лютеиновых клеток свидетельствует о том, что в последнем больше относительно крупных клеток, хотя по средним показателям разница не достоверна.

По ходу соединительнотканных трабекул и вокруг крупных лютеиновых клеток располагаются мелкие тека-лютеиновые клетки. В среднем их диаметр равнялся 12,1+1,7 мкм. Форма клеток вытянутая или полигональная. Ядра относительно крупные - 8,1 ±0,9 мкм в диаметре, более темные вследствие равномерного распределения гранул хроматина.

Клеточный состав в различных участках желтого тела полового цикла: по периферии преобладают мелкие лютеоциты, а ближе к центру крупные. По мере инволюции желтого тела, деструктивные изменения прежде всего обнаруживаются в крупных лютеиновых клетках. Они выражаются признаками белково-жировой дистрофии, пикнозом ядра или развитием апоптоза. Участки, где располагались крупные лютеиновые клетки, заполняются соединительной тканью. Характерно, что на этом фоне мелкие лютеоциты сохраняются длительное время без видимых изменений. В стреме появляются фуксинофильные коллагено-вые волокна, утолщаются стенки кровеносных сосудов.

Персистентные желтые тела имеют разную структуру и их можно разделить на два типа. У одних животных они состоят в основном из крупных клеток с темной эозинофильной вакуолизированной цитоплазмой. Соединительнотканные прослойки содержат мало фуксинофильных волокон. Характерно, что клетки располагаются неравномерно. В центре желтого тела группы клеток с пикнотизированными ядрами и темной эозинофильной цитоплазмой. Тека-лютеиновых клеток в этих участках относительно больше. По периферии люте-оцитов в состоянии жировой дистрофии меньше.

У других животных персистентные желтые тела имеют более толстую капсулу и соединительнотканные прослойки. Лютеиновые клетки сморщены и вокруг них образуются полости. Тека-лютеиновых клеток больше, и они содержат капли жира. Характерны выраженные фиброзные изменения кровеносных сосудов, накопление в их стенке кислых гликозаминогликанов, что свидетельствует о гиалинозе соединительной ткани. Тучные клетки многочисленны, гранулированы, в состоянии низкой морфофункциональной активности.

При гипофункции яичников структуры, напоминающие желтые тела, почти полностью состоят из грубоволокнистой, с участками гиалина, соединительной ткани и единично расположенными сморщенными лютеиновыми клетками. Кроме того, имелись структуры со своеобразным строением. Центр их заполнен грубоволокнистой соединительной тканью, волокна которой идут от белочной оболочки, и радиально отходящими от центра прослойками, между которыми располагаются сморщенные лютеиновые клетки.

В ферментном отношении более активными являются желтое тело беременности и циклическое желтое тело.

Проведенные исследования показали, что одной из причин симптоматического бесплодия коров является персистентное желтое тело яичника. Последнее по своим гистологическим, гистохимическим и гистоэнзиматическим свойствам отличается от желтого тела полового цикла и характеризуется атрофией и

жировой дистрофией лютеоцитов, нарастанием фиброзных изменений соединительной ткани и гиалинозом сосудов. Важную роль в этих процессах играет снижение активности окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов, которое особенно ярко выражено в состоянии инволюции.

Для фолликулярных кист характерно не только лютеинизация отдельных участков стенки кист, но и наличие значительного количества лютеиновой ткани, расположенной в корковом веществе яичников и образованной вследствие лютеинизации крупных полостных фолликулов. Структура этой ткани имеет своеобразные черты, не обнаруживаемые при других состояниях яичника. Прежде всего, эти образования имеют сплющенную форму и располагаются между корковым веществом и кистой, что они происходят из лютеинизированных фолликулов, имевших полость, а не желтых тел возникающих в результате овуляции.

Гистологическая структура лютеиновой ткани характеризуется наличием хорошо сохранившихся крупных лютеиновых клеток диаметром в среднем 21,2±2,4 мкм. Они имеют вытянутую форму и крупные округлые светлые ядра. Лежат они в виде отдельных скоплений. В то же время мелких тека-лютеиновых клеток мало. Они заполнены пигментом и концентрируются преимущественно вокруг кровеносных сосудов и по ходу трабекул. Гистохимическая активность ферментов в этих структурах относительно высокая и приближается показателям в персистентных желтых тел.

2.2.3 Ультраструктурная характеристика желтых тел коров 2.2.3.1 Ультраструктурная характеристика желтых тел стельных коров

При ультраструктурном исследовании желтых тел коров двух месячной стельности (стадия расцвета желтых тел беременности) различали несколько типов лютеоцитов. Прежде всего, это крупные лютеиновые клетки. Они характеризуются следующими показателями: ядро крупное светлое, хроматин располагается по краям в виде глыбок, имеющих сетчатое строение, а также вокруг ядрышка. Иногда в ядрах можно обнаружить участки цитоплазмы, появляющиеся там в результате тангенциальных срезов инвагинаций, что свидетельствует об обширных контактах ядра и цитоплазмы. Ядерная мембрана имеет типичное строение и содержит большое количество пор.

Цитоплазма богата органеллами, имеющими характерное строение. Митохондрии в цитоплазме распределены относительно равномерно. В крупных лютеоцитах они чаще удлиненные, извитые или округлые, в зависимости от того, как прошел срез. На продольных срезах митохондрий их кристы обычно расположены перпендикулярно или под углом к внутренней митохондриальной мембране. Но иногда располагаются и параллельно ей. На поперечном срезе митохондриальные кристы расположены радиально. Кристы митохондрий, как правило, пластинчатого (ламеллярного) типа.

В цитоплазме достаточно много лизосомоподобных и плотных телец, которые располагаются по периферии клетки и контактируют с митохондриями и

эндоплазматическим ретикулумом. Последний образован мелкими округлыми пузырьками или небольшими уплощенными мешочками, наружная мембрана которых обычно не содержит рибосом. В то же время, цитоплазме крупных лю-теоцитов очень редко встречаются липосомы.

Между пузырьками эндоплазматического ретикулума и митохондриями располагаются группы свободных рибосом, образующих розетки. Количество таких групп в крупных лютеоцитах заметно большее, чем в других клетках. Ближе к ядру обычно располагаются узкие каналы гранулярного эндоплазматического ретикулума в виде локальных скоплений (эргастоплазма). Эти усыпанные рибосомами цистерны очень плотно упакованы и лежат параллельно друг другу.

Комплекс Гольджи крупных лютеоцитов хорошо развит и расположен вблизи ядра. Он представлен параллельно ориентированными ламеллами, небольшими вакуолями и микропузырьками, гладкими и окаймленными. Необходимо подчеркнуть, что комплекс Гольджи, в крупных лютеоцитах развит очень хорошо, часто встречается при просмотре ультратонких срезов. Вблизи комплекса Гольджи обнаруживается то большее, то меньшее количество плотных телец, имеющих различную форму и отграниченных четко выраженной однослойной мембраной. По своей ультраструктурной организации они соответствуют лизосомам. Иногда обнаруживаются вторичные лизосомы, образованные в результате слияния вакуолей с первичными лизосомами.

Вторая разновидность крупной лютеиновой клетки характеризуется наличием в цитоплазме липосом, часто контактирующих с гранулярным эндоплазматическим ретикулум. Ядро более темное. Митохондрий в цитоплазме меньше, они более мелкие, по форме чаще округлые или овальные. Локализуются в зонах, где отсутствуют липосомы. Групп свободных рибосом относительно мало. Комплекс Гольджи встречается реже, чем у предыдущего типа клеток. При этом, чем больше в клетке липосом, тем ярче выражены признаки низкой функциональной активности. Ближе к мембране клеток встречаются окаймленные пузырьки с «пушистой» оболочкой.

Третий тип клеток - тека-лютеиновые. Они характеризуются удлиненной формой. Ядро также удлиненное с выраженными инвагинациями и выпячиваниями. На некоторых срезах инвагинации напоминают внутриядерные включения. По периферии ядра хроматин расположен в виде относительно крупных глыбок, а в кариоплазме - он мелкогранулярный и пылевидный. Ядрышко располагается эксцентрично и имеет следующее строение: нуклеолонемная часть выражена хорошо, фибриллярные зоны невелики и не выделены в обособленные участки. Ядерная оболочка с хорошо выраженным трехслойным строением и многочисленными ядерными порами. Все это свидетельствует о высоком уровне синтеза белка.

Цитоплазма богата митохондриями, собранными группами у одного из полюсов ядра. Митохондрии округлые, овальные, мешковидные, реже - удлиненные. Их внутренняя структура характеризуется тем, что кристы обычно сконцентрированы в одной части органеллы. Они короткие и расположены перпендикулярно, под углом к внутренней митохондриальной мембране или

радиально. На поперечном срезе митохондриальные кристы расположены ра-диально. Кристы митохондрий, как правило, пластинчатого (ламеллярного) типа. Внутренняя часть крист светлая, а межкристное пространство темное, содержит пылевидную массу. В отдельных митохондриях обнаруживаются внут-римитохондриальные электронноплотные гранулы.

Между митохондриями и ядром располагаются профили гранулярного эндоплазматического ретикулума и хорошо развитого комплекса Гольджи. Между перечисленными органеллами располагаются округлые и вытянутые пузырьки гладкой эндоплазматической сети. Свободных рибосом мало. Характерно наличие единичных лизосом и электронноплотных телец.

Наружная плазматическая мембрана имеет глубокие впячивания и выросты, направленные в обширное межклеточное пространство, окружающее клетки. Часто с одной из сторон клеток идут нежные коллагеновые волокна и располагаются другие тека-лютеиновые клетки.

Частой находкой в строме желтых тел беременности являются малодиф-ференцированные клетки, фибробласты и макрофаги, расположенные в межклеточном веществе, содержащим многочисленные вакуоли и тельца различной электронной плотности.

Структуированные межклеточные контакты особенно выражены между крупными лютеоцитами и имеют вид простого контакта. При этом плазматические мембраны разделены пространством 15-20 нм. В некоторых участках устанавливали контакт в виде «замка», который представляет собой выпячивание поверхности плазматической мембраны одной клетки в инвагинат (впячивание) другой. На срезе такой тип соединения напоминает плотничий шов. Межмембранное (межклеточное пространство) и цитоплазма в зоне «замков» имеет те же характеристики, что и в зонах простого контакта.

Межклеточные контакты между крупными лютеоцитами и другими клетками простые, но с широкими межмембранными щелями (более 20 нм), содержащими межклеточное вещество, вакуоли и отростки, контактирующие между собой.

Между тека-лютеиновыми клетками эти пространства еще более широкие и менее электронноплотные. В них наряду с клеточными отростками можно обнаружить миелиноподобные тельцы, капли липидов, коллагеновые волокна.

Сосуды желтого тела беременности хорошо развиты. На полутонких срезах видно, что внутренняя оболочка артериол состоит из эндотелиальных клеток, для которых характерна выраженная неровность поверхности и выступающие в просвет сосуда.

При ультраструктурном исследовании кровеносных капилляров хорошо видно, что его стенка состоит из эндотелиальных клеток, образующими между собой стыки по типу «замка» и зоны слипания. Эндотелиальные клетки расположены на хорошо выраженной базальной мембране, контактирующей с отростками окружающих лютеоцитов, фибробластов, коллагеновыми волокнами и аморфным веществом, что свидетельствует о высокой проницаемости капилляра. Хорошо выражены фенестры. Ядра эндотелиальных клеток характеризуются крупными размерами относительно цитоплазмы. Примерно половина их

объема заполнена хроматином. Хроматин располагается по периферии ядра, а в центральной части он мелкодисперстный. Цитоплазма светлая. Органеллы немногочисленны и располагаются в околоядерной зоне.

Цитоплазматическая мембрана, расположенная внутри капилляра, покрыта слоем гликопротеидов (параплазмолеммальный слой) и образует хорошо выраженные «ворсинки» которые увеличивают поверхность эндотелия. Все это свидетельствует об интенсивном транспорте веществ через стенку капилляра. Кроме того, вдоль внутренней и наружной поверхностей эндотелиальных клеток располагаются пиноцитозные пузырьки, отображающие трансэндотелиаль-ный транспорт различных веществ и метаболитов.

Очень хорошо выражены цитоплазматические выросты. Наружная поверхность сосудов снабжена хорошо выраженными отростками, цитоплазма которых содержит свободные рибосомы, а на мембране ядра эндотелиоцита заметны инвагинации и выступы, многочисленными поры.

Строение капилляров желтого тела имеет органные особенности которые характеризуются наличием многочисленных и узких капилляров. На своей лю-минальной поверхности они несут большое число микроворсинок, разнообразных по величине и форме, которые в некоторых случаях образуют ундулирую-щие мембраны. Характерны выросты и на базальной поверхности, которые перфорируют межклеточный компонент базального слоя и вступают в контакт с клетками окружающей паренхимы. Капилляры можно отнести ко второму типу - фенестрированный тип с локальными истончениями (фестрами) цитоплазмы эндотелия, что характерно для органов с выраженной эндокринной активностью.

2.2.3.2 Ультраструктурная характеристика желтых тел полового никла

Изучали ультраструктурную характеристику желтых тел коров на восьмые — двенадцатые сутки полового цикла. Установили, что крупные лютеоциты содержат ядро с большим количеством хроматина. Последний расположен не только по периферии, но ив других частях ядра в виде глыбок. Ядро обычно несколько вытянутое. При этом ярко выражена инвагинации оболочки ядра, по сравнению с желтыми телами стельных коров. Ядрышко небольшое, расположено в центре ядра, с хорошо выраженными фибриллярной и гранулярной зонами.

В цитоплазме число митохондрий снижено, но они более крупные. Встречаются гипертрофированные митохондрии с аномальной внутренней структурой, содержащей крупные вакуоли и электронноплотные включения. Преобладают митохондрии округлой формы, реже — овальной или вытянутой. Внутренняя структура митохондрий несколько меняется. Появляется значительное число органелл с трубчатыми кристами с расширенными профилями и прозрачным содержимым.

Гладкий эндоплазматический ретикулум образован мелкими округлыми пузырьками или небольшими овальными мешочками, наружная мембрана которых не содержит рибосом. Характерно, что эти структуры очень хорошо раз-

виты в инвагинациях ядра. Между пузырьками эндоплазматического ретикулу-ма и митохондриями располагаются группы свободных рибосом, образующих розетки. Этих структур относительно много. Гранулярный эн'доплазматический ретикулум умеренно развит и представлен короткими профилями, расположенными в перинуклеарной зоне клетки.

Комплекс Гольджи крупных лютеоцитов хорошо развит и расположен вблизи ядра. Он представлен параллельно ориентированными плотно расположенными ламеллами с узкими профилями.

Число плотных телец, имеющих различную форму и отграниченных четко выраженной однослойной мембраной, значительное. Во всех клетках, но в разной степени распространенности встречаются липосомы и аутофагосомы.

Четкой дифференциации между крупными лютеоцитами с разной синтетической активностью нет. Различия выражены между функционирующими клетками и гибнущими, структура которых описана ниже.

Тека-лютеиновые клетки желтого тела полового цикла содержат ядро вытянутой формы с хроматином, расположенным по периферии. В других зонах клетки он менее конденсирован и лежит в виде мелких гранул или пылевидной зернистости. Ядрышко хорошо выражено, располагается эксцентрично. Ядерная оболочка с хорошо выраженным трехслойным строением и многочисленными ядерными порами.

Цитоплазма бедна митохондриями, которые собраны группами у одного из полюсов ядра. Но как и в случае с крупными лютеиновыми клетками они очень крупные, с трубчатыми кристами. Внутренняя часть крист светлая, а межкристное пространство темное, содержит пылевидную массу. В отдельных митохондриях обнаруживаются внутримитохондриальные электронноплотные гранулы.

Между митохондриями и ядром располагаются профили гранулярного эндоплазматического ретикулума. Комплекс Гольджи обнаруживается в виде расположенных в узкой части цитоплазмы диктиосом. Это удлиненные, плотно расположенные мембранные структуры, практически не имеющие прослойки гиалоплазмы. Гладкая эндоплазматическая сеть умеренно развита и представлена округлыми, чаще вытянутыми структурами. Свободных рибосом не много. Встречаются единичные лизосомы, электронноплотные телеца, липосомы.

Наружная плазматическая мембрана имеет неглубокие впячивания и выросты, направленные в расширенное межклеточное пространство.

Строма желтого тела полового цикла богата фибробластами, фиброцитами, малодифференцированными макрофагами. Последние содержат части гибнущих клеток и липиды.

В желтом теле полового цикла межклеточные контакты между крупными лютеоцитами имеют вид простого контакта с широкими пространствами. Это характерно и для взаимодействий лютеоцитов не только между собой, но и с другими клетками. В межклеточных пространствах содержатся межклеточное вещество, вакуоли и отростки, редко контактирующие между собой.

Между гибнущими клетками эти пространства еще более широкие и менее электронноплотные. В них наряду с клеточными отростками можно обна-

ружить миелиноподобные тельца, капли липидов, коллагеновые волокна, фрагменты мембран и ультраструктур.

Строма желтого тела полового цикла представлена более грубыми колла-геновыми волокнами, расположенными в виде плотных пучков, по ходу которых расположены фибробласты, фиброциты и малодифференцированные макрофаги.

Сосуды желтого тела полового цикла развиты. Но капилляры находятся в разном морфофункциональном состоянии. Одни из них сильно расширены, кровенаполнены, в некоторых участках разрушены. Фенестры выражены плохо. Ядра эндотелиальных клеток пикнотизированы, гиперхромные. Цитоплазма также темная. Органеллы малочисленны и представлены единичными митохондриями с темным матриксом, лизосомами и темными профилями эндоплаз-матической сети. Вокруг таких сосудов отмечается выраженный периваскуляр-ный отек.

Часть капилляров, напротив сужены до исчезновения внутреннего просвета. Рисунок микроворсинок сглажен и цитоплазма эндотелия практически не содержит пиноцитозных пузырьков. Выросты и на базальной поверхности эн-дотелиоцита отсутствуют, и межклеточный компонент базального слоя частично разрушен. В некоторых случаях, наряду с периваскулярным отеком, наблюдается контакты с макрофагами. Последние, вероятно, участвуют в разрушении базальной мембраны и стенки капилляра.

Можно описать механизмы лютеолизиса. Прежде всего, это упрошение межклеточных контактов с развитием широких пространств. Таким образом клетки изолируются друг от друга и не способны кооперироваться для выполнения своей функции. Не последнюю роль играет соединительная ткань, которая фиброзно изменяется, становится грубоволокнистой и приводит к атрофии паренхимы железы.

Несомненна роль в лютеолизисе нарушений циркуляции крови в регионе микроциркуляторного русла. Расширение или сужение сосудов, дистрофия, разрушение их стенок и базальной мембраны с последующим фагоцитозом, пе-риваскулярные отеки и нарушения реологических свойств крови, очевидно, является пусковым механизмом последующих атрофических, дистрофических процессов в паренхиме и фиброзных изменений стромы железы.

По нашим данным ранними признаками начавшейся гибели клетки являются: расширения цистерн эндоплазматической сети, отделение рибосом от мембран шероховатой эндоплазматической сети и диссоциация полисом в моносомы. В дальнейшем на поверхности клеток образуются выпячивания, содержащие только цитозоль, происходит потеря микроворсинок.

В цитоплазме клеток и вне их появляются миелиновые фигуры, формирующиеся из вещества цитоплазмы клеток и мембран органелл, наблюдается набухание митохондрий. Все эти описанные изменения обратимы. Необратимые изменения морфологически ассоциируются с выраженной вакуолизацией митохондрий и их крист, повреждением плазматических мембран и набуханием лизосом. Эти картины, наблюдающиеся преимущественно в крупных лютсино-вых клетках, описаны нами выше.

Наряду с этими изменениями, связанными с нарушениями микроцирку-ляторного русла, вызванного гормональными изменениями (простагландины и т.п.), мы наблюдали гибель клеток путем апоптоза.

При этом наиболее характерными признаками являются конденсация и фрагментация ядерного хроматина, а также сморщивание клетки с сохранением целостности органелл. В дальнейшем клетка распадается на апоптозные тельца, представляющие собой мембранные структуры с заключенными внутри органеллами и частицами ядра. Затем апоптозные тельца фагоцитируются и разрушаются при помощи лизосом окружающими клетками-макрофагами.

2.2.3.3 Ультраструктурная характеристика персистентных желтых тел

Крупные лютеиновые клетки персистентных желтых тел характеризуются небольшим ядром с глубокими и широкими инвагинациями, что придает ему своеобразное крупнолопастное строение. Хроматин расположен по периферии в виде крупных глыбок или заполняет почти всю кариоплазму. Ядрышки обнаруживаются редко и представлены преимущественно гранулярным компонентом. Поры в оболочке ядра обнаруживаются с трудом.

Цитоплазма содержит много жировых капель, представляющих собой нейтральные жиры. Митохондрии гиперплазированные, содержат вакуолизиро-ванные или разрушенные кристы, темные включения, иногда занимающие почти всю органеллу. Гладкий эндоплазматический ретикулум представлен расширенными профилями. Шероховатый эндоплазматический ретикулум не обнаруживается, а рибосомы в небольшом количестве располагаются в цитоплазме в виде небольших скоплений полисом.

Тека-лютеиновые клетки характеризуются вытянутой формой и эксцентрично расположенным ядром. Ядро неправильной формы, с небольшими инвагинациями, глыбками хроматина, расположенного по периферии, и мелкозернистой структурой в центральных зонах кариоплазмы. Ядрышко темное, представлено фибриллярным компонентом.

Цитоплазма содержит капли липидов темного цвета и более светлые лю-теосомы. Митохондрий немного, они располагаются по одной - две в участках цитоплазмы, не содержащей липиды. Митохондрии небольшого размера с трубчатыми или разрушенными кристами. Рядом с митохондриями располагаются единичные, короткие профили шероховатого эндоплазматического рети-кулума. В других участках цитоплазмы встречаются небольшие скопления полисом. Гладкий эндоплазматический ретикулум встречается в виде единичных округлых структур. Клеточная мембрана неровная, клетки располагаются на значительном расстоянии друг от друга.

Тека-лютеиновые клетки почти сплющенной формы, содержат вытянутое ядро с глубокими инвагинациями, узким ободком цитоплазмы бедной органел-лами и содержащей капли липидов.

Для персистентных желтых тел характерно обилие клеток соединительной ткани: фибробластов, фиброцитов, макрофагов различной степени диффе-

ренцировки. Между клетками формируются своеобразные взаимоотношения. С одной стороны, характерны широкие межклеточные пространства между крупными лютеоцитами. Тека-лютеиновые клетки имеют тенденцию близко располагаться к крупным лютеоцитам и образовывать с ними или другими текалю-теиновыми клетками в небольших участках цитоплазмы простые межклеточные контакты.

В персистентных желтых телах мы обнаружили ярко выраженную активность макрофагов. Макрофаги внедряются в разрушающуюся по типу липофа-нероза крупную лютеиновую клетку. У макрофага клеточная мембрана сохраняется, то у лютеиновой клетки она видна только в отдельных участках межклеточного взаимодействия.

Необходимо подчеркнуть, что гибель клеток в персистентных желтых телах развивается по типу дистрофии, а затем некроза. В начале отмечаются обратимые изменения органелл, в дальнейшем разрушение клеточных мембран, прежде всего у митохондрий, появление крупных капель нейтральных жиров. В дальнейшем развивается фокальный некроз цитоплазмы лютеоцитов, который заканчивается гибелью клетки с последующим фагоцитозом ее остатков макрофагами.

Строма персистентного желтого тела хорошо развита, рост соединительной ткани прогрессирует, в связи с чем ею заполняются пространства атрофирующих и гибнущих клеток. Она представлена активно синтезирующими фиброцитами и фибробластами, грубыми коллагеновыми волокнами и межклеточным веществом.

Ультраструктура микроциркуляторного русла свидетельствует о том, что кровоснабжение железы недостаточное. Капилляры спавшиеся, пустые или содержат единичные клетки крови. Ядра эндотелиоцитов темные, цитоплазма бедна органеллами и почти не содержит пиноцитозных пузырьков. Внутренняя поверхность сосуда без выраженных микроворсинок. Базальная мембрана в отдельных участках разрушена, вокруг капилляра отсутствуют клеточные элементы и развивается отек.

2.2.4 Экспериментальное изучение лютеолитических процессов

Ко вторым суткам после введения препарата в дозе 250 мкг в яичниках отмечаются процессы инволюции желтого тела, проявляющиеся появлением уплотненных пикнозных ядер лютеоцитов, в их цитоплазме образуется большое количество разнообразных по форме и объему вакуолей, которые при окраске суданами содержат фосфолипиды и нейтральные жиры. К четвертым суткам после введения препарата лизис лютеиновых клеток усиливается и у одного животного наступила инволюция функционирующих желтых тел, лютеини-зация и облитерационная атрезия крупных и средних фолликулов. В это же время активируется рост и созревание других фолликулов, в результате чего проявляется половая охота.

Препарат в дозе 500 мкг у коров вызывают более интенсивные процессы инволюции желтого тела, пикноз и лизис ядер, вакуолизацию цитоплазмы лю-

теиновых клгток. У всех животных желтые тела к четырех дневному сроку после введения препарата подвергаются лизису.

У коров указанный препарат в дозе 1000 мкг уже через двое суток после введения препарата вызывают глубокие литические процессы. В лютеиновых клетках, в теке и гранулезе третичных фолликулов, яйцеклетках и в интерсти-циальной ткани яичника наблюдается распад ядер и цитоплазмы. Это явление сопровождается выраженной сосудистой реакцией, гемостазом, инфильтрацией форменных элементов крови в окружающую ткань яичника, фолликулы. Вследствие этого лизис клеток желтых тел к этому времени завершается, стадия возбуждения полового цикла, сопровождающаяся лютеинизацией, геморрагической и кистозной атрезией крупных фолликулов.

Таким образом, большие дозы препарата (1000 мкг) наряду с чрезмерной активацией литических процессов в желтом теле вызывают и лизис текалютеи-новых клеток в сформированных фолликулах, что приводит к образованию кист, в связи с чем препарат в этих дозах не может быть рекомендован для вызывания инволюции желтых тел полового цикла.

Полученные данные указывают на то, что отечественный препарат эсту-фалан обладает лютеолитическим воздействием на лютеиновые структуры и ткани яичника у животных. Исходя из полученных данных, наиболее оптимальными дозами эстуфалана для коров являются 500 мкг.

Электронномикроскопически установили, что при использовании оптимальной дозы препарата (500 мкг) лютеолитические процессы в тканях желтого тела напоминают таковые желтых телах полового цикла, но с более выраженными дистрофическими процессами в лютеиновых клетках, активацией макрофагов, уничтожающих погибающие клетки. Это происходит вследствие развития анемии и ишемии сосудов железы. В тоже время фиброзные процессы в желтом теле выражены слабо, что приводит к быстрому рассасыванию желтого тела без его персистенции и образования лютеиновых рубцов.

ВЫВОДЫ

1. Масса яичника, содержащего желтое тело беременности, увеличивается к двухмесячному сроку стельности, достигая в среднем 14,6±0,8 гр., снижается к трем месяцам стельности до 10,6±0,7 гр. и в дальнейшем этот показатель остается относительно стабильным. К двухмесячному сроку стельности диаметр желтого тела беременности увеличивается и достигает в среднем 28,4±3,1 мм (стадия расцвета), а к трем месяцам стельности этот показатель снижается до 23,1 ±1,2 мм (стадия уменьшения) и в дальнейшем, несколько уменьшаясь, остается относительно одинаковым (стадия стабилизации). В яичниках стельных коров на протяжении первых шести месяцев беременности обнаруживаются единичные полостные фолликулы диаметром более 1 см. Число полостных фолликулов диаметром до 1 см снижается к двухмесячному сроку беременности, в дальнейшем повышается, достигая своего максимума к четырем месяцам стельности, после чего снижается, достигая двухмесячного уровня. Число красных лютеиновых телец в обоих яичниках достоверно не изменяется на протя-

жении беременности. Число белых атретических телец увеличивается к двум месяцам стельности, когда количество полостных фолликулов снижается. К трем месяцам беременности этот показатель повышается, а к четырем месяцам достоверно увеличивается и, снизившись к пяти месяцам, остается стабильным.

2. На протяжении полового цикла происходят закономерные изменения макроскопических характеристик желтого тела. В первые десять суток полового цикла желтое тело увеличивается в размерах, формируются его строма и паренхима, васкуляризация (стадия формирования). На десятые-двенадцатые сутки полового цикла желтое тело достигает наибольшего развития (стадия максимального формирования), в дальнейшем, на фоне венозной гиперемии и дистрофических изменений оно уменьшается в размерах, дольчатость его исчезает (стадия инволюции).

3. Персистентные желтые тела, задержавшиеся на фоне субъинволюции матки, характеризовались крупными размерами (20 - 25 мм в диаметре), грибовидно выступали над поверхность яичника на 5 - 8 мм с углублением в центре. Персистентные желтые тела, задержавшиеся в яичниках животных с хроническим эндометритом, имели меньший размер (10-15 мм в диаметре), чаще располагались внутри овариальной железы и над поверхностью яичника выступали незначительно, без грибовидного возвышения.

4. Паренхима желтого тела беременности состоит, в основном, из крупных лютеиновых клеток диаметром 27,1+5,3 мкм с зернистой цитоплазмой, крупным светлым ядром диаметром 10,1+1,2 мкм. Встречаются клетки более крупных размеров, с одним очень крупным ядром или двумя ядрами. Нейтральных жиров в паренхиматозных элементах мало. Фосфолипиды распределены в лютеоцитах желтого тела беременности равномерно в виде мелких капель. Аргирофильные волокна образуют в желтом теле сеточку, в ячейках которой располагаются лютеиновые клетки. По ходу этих волокон располагаются клетки более мелкие, диаметром 11,9+2,3 мкм. Величина их ядер достигала в среднем 8,5+1,2 мкм. Строма железы при окраске по Ван Гизону не содержит фуксинофильных волокон.

5. Желтое тело полового цикла достигает максимального развития на деся-тые-двенадцатые сутки полового цикла. Оно покрыто соединительнотканной капсулой, от которой к центру направляются тонкие прослойки, содержащие кровеносные и лимфатические сосуды. В середине желтого тела можно обнаружить полость диаметром от нескольких миллиметров до одного см. Между прослойками соединительной ткани располагаются паренхима желтого тела, представленная крупными лютеиновыми клетками, имеющими в среднем диаметр 24,2+2,8 мкм. Они характеризуются зернистой цитоплазмой и светлым округлым ядром, расположенным в центре его, со средним диаметром 9,4+0,9 мкм. Иногда встречаются крупные лютеоциты с вакуолизированной цитоплазмой, в которой выявлялись липиды. По сравнению с желтым телом беременности крупных лютеиновых клеток меньше. По ходу соединительнотканных тра-бекул и вокруг крупных лютеиновых клеток располагаются тека-лютеиновые клетки. В среднем их диаметр равнялся 12,1 + 1,7 мкм. Форма клеток вытянутая

или полигональная. Ядра относительно крупные — 8,1+0,9 мкм в диаметре. Клеточный состав в различных участках желтого тела полового цикла различен. По периферии преобладают крупные лютеоциты, а ближе к центру мелкие. По мере инволюции желтого тела, деструктивные изменения обнаруживаются прежде всего в крупных лютеиновых клетках. Они проявлялись белково-жировой дистрофией, некробиозом или апоптозом.

6. Персистентные желтые тела по своим гистологическим, гистохимическим и гистоэнзиматическим свойствам отличаются от желтых тел полового цикла и характеризуются атрофией и жировой дистрофией лютеоцитов, нарастанием фиброзных изменений соединительной ткани и гиалинозом стенок сосудов. Важную роль в этих процессах играет снижение активности окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов, которое особенно ярко выражено в состоянии инволюции. Различаются гипер- и гипофункциональные типы персистентных желтых тел, отличающихся степенью атрофии лютеино-вых клеток и фиброза стромы.

7. При гипофункции яичников структуры, напоминающие желтые тела, почти полностью состоят из грубо волокнистой, с участками гиалиноза, соединительной ткани и единично расположенными сморщенными лютеиновыми клетками. Кроме того, имелись структуры со своеобразным строением. Центр их заполнен грубоволокнистой соединительной тканью, волокна которой распространяются от белочной оболочки и радиально отходящими от центра прослойками, между которыми располагаются сморщенные лютеиновые клетки.

8. Для яичников с фолликулярными кистами характерно не только лютеи-низация отдельных участков стенки кист, но и наличие значительного количества лютеиновой ткани, образованной вследствие лютеинизации крупных полостных фолликулов. Гистологическая структура лютеиновой ткани характеризуется наличием хорошо сохранившихся крупных лютеиновых клеток диаметром в среднем 21,2+2,4 мкм. Они имеют вытянутую форму и крупные округлые светлые ядра. Лежат они в виде отдельных скоплений. В то же время мелких тека-лютеиновых клеток мало. Они заполнены пигментом и концентрируются преимущественно вокруг кровеносных сосудов и по ходу трабекул. Гистохимическая активность ферментов в этих структурах относительно высокая и приближается к аналогичному показателю в персистентных желтых телах.

9. Ультраструктура желтого тела беременное ги свидетельствует о том, что это активно функционирующая эндокринная железа, представленная крупными лютеоцитами и тека-лютеиновыми клетками с признаками активного синтеза и секреции, крупными лютеоцитами в состоянии «покоя». Эти клетки взаимодействуют между собой через межклеточные контакты, окружены рыхлой соединительной тканью, содержащей много малодифференцированных клеток и макрофагов. Желтое тело имеет развитое микроциркуляторное русло, образованное капиллярами фенестрированного типа с локальными истончениями цитоплазмы эндотелия.

жены и проявляются упрощением межклеточных контактов, фиброзными изменениями соединительной ткани, нарушениями кровообращения в регионе микроциркуляторного русла, апоптозом лютеоцитов с последующим фагоцитозом апоптозных телец макрофагами.

11. Ультраструктура персистентных желтых тел характеризуется развитием жировой дистрофии лютеоцитов, некрозом клеток и фиброзными изменениями соединительной ткани на фоне снижения кровообращения и ишемии. В то же время часть крупных лютеоцитов и тека-лютеиновые клетки продолжают свою синтетическую активность.

12. Полученные данные указывают на то, что синтетический аналог про-стагландина эстуфалан обладает лютеолитическим действием на желтые тела полового цикла коров. Исходя из полученных данных, наиболее оптимальными дозами эстуфалана для коров являются 500 мкг. При этом морфологические изменения в тканях желтого тела напоминают естественные лютеолитиче-ские процессы в желтых телах полового цикла, но с более выраженными дистрофическими изменениями не только в крупных лютеоцитах, но и в тека-лютеиновых клетках, активацией макрофагов, уничтожающих погибающие клетки. Это происходит вследствие развития анемии и ишемии сосудов железы. В то же время фиброзные процессы выражены слабо, что приводит к быстрому рассасыванию желтого тела без его персистенции и образования лютеинизиро-ванных тел.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При выяснении этиологии и патогенеза болезней органов размножения крупного рогатого скота, оценки действия терапевтических средств на репродуктивную систему необходимо проводить выборочное патологоанатомическое и патогистологическое исследование послеубойного и биопсийного материала.

2. Использованный нами способ биопсии желтого тела яичника у крупного рогатого скота (патент № 2083165 РФ, МКИ А61В10,00) позволяет достаточно быстро, без сложных оперативных вмешательств получить необходимый для морфологического и биохимического исследования кусочек желтого тела или другой ткани яичника. При этом не требуется значительных материальных затрат и не оказывается отрицательное влияние на репродуктивную функцию животного. Данную пункцию можно использовать для интраовариальных инъекций.

3. Материалы проведенных исследований включены в монографию и учебное пособие с грифом УМО вузов Российской Федерации по образованию в области ветеринарной медицины и зоотехнии: Е. Н. Сковородин, А. А. Мень-кова «Возрастная морфология органов размножения самок крупного рогатого скота» Брянск, 2003. 208 с. (монография); Кадыров У. Г., Сковородин Е. Н. «Руководство к лабораторным занятиям по патологической анатомии животных» Уфа, 2003. 180 с. (учебное пособие).

4. Полученные материалы исследований могут быть использованы в учебном процессе при проведении лекционных и лабораторно-практических

»23904

занятий по гистологии, ветеринарному акушерству и гинекологии, патологической анатомии животных, при написании учебников и руководств по вопросам морфологии и патологии репродуктивной системы.

Слисок работ, опубликованных по теме диссертации

1. Сковородин Е. Н. Морфология желтых тел яичников коров / Е. Н. Ско-вородин, А. Р. Шарипов // Материалы Международной научно-практической конференции «Проблемы акушерско-гинекологической патологии и воспроизводства сельскохозяйственных животных», посвященной 100-летию А. П. Сту-денцова. Казань, 2003. Ч 2. С. 139-144.

2. Шарипов А. Р. Использование биопсии для изучения морфологии желтых тел яичников коров / А. Р. Шарипов // Материалы Международной научно-практической конференции «Проблемы и пути интенсификации племенной работы в отраслях животноводства», Уфа, 2004. С. 274 — 276.

3. Шарипов А. Р. Строение персистентных желтых тел яичников коров / А. Р. Шарипов // Морфология. 2004. Т 126. С. 140.

Лицензия РБ на издательскую деятельность 0261 от 10 апреля 1998 года Лицензия на полиграфическую деятельность № 848366 от 21 06 2000 года Подписано в печать 17 11 2004 года Формат 60x84/16 Бумага типографская Гарнитура Times Уел печ л 1,40 Тираж 100 экз 3ак.№834 Издательство ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет Типография ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет Адрес издательства и типографии 450001, г Уфа, ул 50 лет Октября, 34

Оглавление диссертации Шарипов, Ансар Радикович :: 2004 :: Уфа

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1 Бесплодие крупного рогатого скота (этиология, меры борьбы и профилактика)

2.2 Функциональная морфология яичников в норме и при патологии.

Введение диссертации по теме "Патология, онкология и морфология животных", Шарипов, Ансар Радикович, автореферат

Среди работ, раскрывающих проблемы функциональной морфологии яичников крупного рогатого скота (Хватов, 1955; Литвинова, 1964; Хонина, 1984; Курило, 1985; Еремин, 1987; Садирова, Хрусталева, 1993; Свиридов, 1993; Сковородин, 1999; Еремин, 2004; Erickson, 1966; Guraya, 1977; Singh, Roy, 1999), недостаточно исследований касающихся строения желтых тел и других лютеинизированных структур яичников (Киршенблат, 1973; Долинина, 1977; Пономарева, 1981; Середин, 1998; Грига, 1999; Gasse, 1983; Konsaka et al. 1982; Weber et al., 1993; Singh, Roy, 1999). Дефицит информации, относящийся к морфологическому эквиваленту функции этой эндокринной железы, не позволяет эффективно решать целый ряд современных задач, поставленных практикой, таких как трансплантация эмбрионов, синхронизация охоты, профилактика симптоматического бесплодия, дифференциальная диагностика болезней органов размножения, их профилактика и лечение, разработка лютеолитических препаратов. По данным многих исследователей (Кононов, Буянов, 1973; Долинина, 1977; Муруев, 1985; Полянцев, Калаш-ник, 1991; Середин, 1998; Грига, 1999; Нежданов, Душкаева, 1999; Jabb et al., 1985) персистентное желтое тело — одна из причин симптоматического бесплодия. Существующие в настоящее время методы диагностики, основанные на клиническом и, прежде всего, ректальном исследовании, не отражают всей сложности патологических процессов, происходящих в овариальных железах и матке при этой патологии. Не выяснены механизмы лютеинизации и люте-олизиса (Carlson et al., 1989; Bove et al., 2000; Murphy, 2000). Практически не изучены другие типы лютеиновых структур яичников, не выяснена их роль в патологии овариальных желез.

3. Изучить гистологические, гистохимические и гистоэнзиматические показатели желтых тел яичников стельных и циклирующих коров, перси-стентных желтых тел.

4. С помощью электронной микроскопии определить ультраструктурные показатели желтых тел яичников стельных и циклирующих коров, пер-систентных желтых тел.

5. Исследовать морфологию лютеолитических процессов в яичниках коров при беременности, половом цикле, персистенции желтых тел, а также в эксперименте после введения синтетического аналога простагландина F2a (эстуфалан) с использованием биопсии желтого тела яичника. Научная новизна настоящей работы заключается в том, что впервые с помощью комплекса клинико-гинекологических, патанатомических, макроскопических, морфометрических, гистологических, гистохимических, элек-тронномикроскопических методов, а также биопсии проведено исследование органов размножения и желтых тел яичников стельных и циклирующих коров, животных с дисфункциями овариальных желез на фоне патологии матки.

С помощью биопсии и исследования послеубойного материала показано ведущее значение нарушений микроциркуляторного русла, формирования внутриклеточных и мезенхимальных дистрофий, а также роль макрофагов в лютеолитических процессах, развивающихся в норме и при патологии в желтых телах яичников коров, а также при экспериментальном введении аналога простагландина Бгс (эстуфалан).

Практическая ценность работы. Описана морфология яичников коров в норме и при дисфункциях яичников. Установленные макроморфологи-ческие критерии структуры желтых тел яичников крупного рогатого скота в разные сроки стельности, полового цикла и персистенции можно использовать с целью установления состояния репродуктивной системы в норме и при патологии.

Полученные данные включены в монографию "Возрастная морфология органов размножения самок крупного рогатого скота" (Сковородин Е. Н., Менькова А. А., Брянск, 2002. 208 с.) и в учебное пособие «Руководство к лабораторным занятиям по патологической анатомии животных» (Кадыров У. Г., Сковородин Е. Н., Уфа, 2003. 180 е.).

Апробация работы. Материалы диссертации доложены, обсуждены и получили положительную оценку на Международной научно-практической конференции «Проблемы акушерско-гинекологической патологии и воспроизводства сельскохозяйственных животных», посвященной 100-летию А. П. Студенцова (Казань, 2003), Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины (Уфа, 2003), Международной научно-практической конференции «Проблемы и пути интенсификации племенной работы в отраслях животноводства» (Уфа, 2004), YII Конгрессе Международной ассоциации морфологов (Казань, 2004), расширенном заседании кафедры акушерства, патанатомии и хирургии Башкирского государственного аграрного университета (Уфа, 2004).

Публикации. Положения диссертационной работы достаточно полно отражены в трех научных статьях.

Объем н структура диссертации. Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста, состоит из разделов «Общая характеристика работы», «Обзор литературы», «Собственные исследования», «Обсуждение полученных результатов», «Выводы», «Практические предложения», «Список литературы». Список использованной литературы включает 217 источников, в том числе 107 иностранных авторов. Диссертация содержит 4 таблицы, 80 рисунков, в том числе 8 макрофотографий, 12 микрофотографий, 55 электроннограмм и 5 графиков.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

4. Морфологические проявления лютеолитических процессов в желтом теле полового цикла после экспериментального введения аналога про-стагландина Р2а (эстуфалан).

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертационного исследования на тему "Функциональная морфология желтых тел яичников коров в норме и при патологии"

выводы

1. Масса яичника, содержащего желтое тело беременности, увеличивается к двухмесячному сроку стельности, достигая в среднем 14,6±0,8 гр., снижается к трем месяцам стельности до 10,6±0,7 гр. и в дальнейшем этот показатель остается относительно стабильным. К двухмесячному сроку стельности диаметр желтого тела беременности увеличивается и достигает в среднем 28,4±3,1 мм (стадия расцвета), а к трем месяцам стельности этот показатель снижается до 23,1±1,2 мм (стадия уменьшения) и в дальнейшем, несколько уменьшаясь, остается относительно одинаковым (стадия стабилизации). В яичниках стельных коров на протяжении первых шести месяцев беременности обнаруживаются единичные полостные фолликулы диаметром более 1 см. Число полостных фолликулов диаметром до 1 см снижается к двухмесячному сроку беременности, в дальнейшем повышается, достигая своего максимума к четырем месяцам стельности, после чего снижается, достигая двухмесячного уровня. Число красных лютеиновых телец в обоих яичниках достоверно не изменяется на протяжении беременности. Число белых атретических телец увеличивается к двум месяцам стельности, когда количество полостных фолликулов снижается. К трем месяцам беременности этот показатель повышается, а к четырем месяцам достоверно увеличивается и, снизившись к пяти месяцам, остается стабильным.

3. Персистентные желтые тела, задержавшиеся на фоне субъинволю-ции матки, характеризовались крупными размерами (20 - 25 мм в диаметре), грибовидно выступали над поверхность яичника на 5 - 8 мм с углублением в центре. Персистентные желтые тела, задержавшиеся в яичниках животных с хроническим эндометритом, имели меньший размер (10 - 15 мм в диаметре), чаще располагались внутри овариальной железы и над поверхностью яичника выступали незначительно, без грибовидного возвышения.

4. Паренхима желтого тела беременности состоит, в основном, из крупных лютеиновых клеток диаметром 27,1±5,3 мкм с зернистой цитоплазмой, крупным светлым ядром диаметром 10,1*1,2 мкм. Встречаются клетки более крупных размеров, с одним очень крупным ядром или двумя ядрами. Нейтральных жиров в паренхиматозных элементах мало. Фосфолипиды распределены в лютеоцитах желтого тела беременности равномерно в виде мелких капель. Аргирофильные волокна образуют в желтом теле сеточку, в ячейках которой располагаются лютеиновые клетки. По ходу этих волокон располагаются клетки более мелкие, диаметром 11,9±2,3 мкм. Величина их ядер достигала в среднем 8,5±1,2 мкм. Строма железы при окраске по Ван Гизону не содержит фуксинофильных волокон.

5. Желтое тело полового цикла достигает максимального развития на де-сятые-двенадцатые сутки полового цикла. Оно покрыто соединительнотканной капсулой, от которой к центру направляются тонкие прослойки, содержащие кровеносные и лимфатические сосуды. В середине желтого тела можно обнаружить полость диаметром от нескольких миллиметров до одного см. Между прослойками соединительной ткани располагаются паренхима желтого тела, представленная крупными лютеиновыми клетками, имеющими в среднем диаметр 24,2±2,8 мкм. Они характеризуются зернистой цитоплазмой и светлым округлым ядром, расположенным в центре его, со средним диаметром 9,4±0,9 мкм. Иногда встречаются крупные лютеоциты с вакуолизи-рованной цитоплазмой, в которой выявлялись липиды. По сравнению с желтым телом беременности крупных лютеиновых клеток меньше. По ходу соединительнотканных трабекул и вокруг крупных лютеиновых клеток располагаются тека-лютеиновые клетки. В среднем их диаметр равнялся 12,1±1,7 мкм. Форма клеток вытянутая или полигональная. Ядра относительно крупные - 8,1 ±0,9 мкм в диаметре. Клеточный состав в различных участках желтого тела полового цикла различен. По периферии преобладают крупные лю-теоциты, а ближе к центру мелкие. По мере инволюции желтого тела, деструктивные изменения обнаруживаются прежде всего в крупных лютеиновых клетках. Они проявлялись белково-жировой дистрофией, некробиозом или апоптозом.

6. Персистентные желтые тела по своим гистологическим, гистохимическим и гистоэнзиматическим свойствам отличаются от желтых тел полового цикла и характеризуются атрофией и жировой дистрофией лютеоцитов, нарастанием фиброзных изменений соединительной ткани и гиалинозом стенок сосудов. Важную роль в этих процессах играет снижение активности окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов, которое особенно ярко выражено в состоянии инволюции. Различаются гипер- и гипофункцио-нальные типы персистентных желтых тел, отличающихся степенью атрофии лютеиновых клеток и фиброза стромы.

7. При гипофункции яичников структуры, напоминающие желтые тела, почти полностью состоят из грубо волокнистой, с участками гиалиноза, соединительной ткани и единично расположенными сморщенными лютеино-выми клетками. Кроме того, имелись структуры со своеобразным строением. Центр их заполнен грубоволокнистой соединительной тканью, волокна которой распространяются от белочной оболочки и радиально отходящими от центра прослойками, между которыми располагаются сморщенные лютеино-вые клетки.

8. Для яичников с фолликулярными кистами характерно не только лю-теинизация отдельных участков стенки кист, но и наличие значительного количества лютеиновой ткани, образованной вследствие лютеинизации крупных полостных фолликулов. Гистологическая структура лютеиновой ткани характеризуется наличием хорошо сохранившихся крупных лютеиновых клеток диаметром в среднем 21,2±2,4 мкм. Они имеют вытянутую форму и крупные округлые светлые ядра. Лежат они в виде отдельных скоплений. В то же время мелких тека-лютеиновых клеток мало. Они заполнены пигментом и концентрируются преимущественно вокруг кровеносных сосудов и по ходу трабекул. Гистохимическая активность ферментов в этих структурах относительно высокая и приближается к аналогичному показателю в перси-стентных желтых телах.

9. Ультраструктура желтого тела беременности свидетельствует о том, что это активно функционирующая эндокринная железа, представленная крупными лютеоцитами и тека-лютеиновыми клетками с признаками активного синтеза и секреции, крупными лютеоцитами в состоянии «покоя». Эти клетки взаимодействуют между собой через межклеточные контакты, окружены рыхлой соединительной тканью, содержащей много малодифференци-рованных клеток и макрофагов. Желтое тело имеет развитое микроциркуля-торное русло, образованное капиллярами фенестрированного типа с локальными истончениями цитоплазмы эндотелия.

10. На ультраструктурном уровне желтое тело полового цикла представлено крупными лютеоцитами и тека-лютеиновыми клетками с признаками умеренной синтетической активности. Лютеолитические процессы хорошо выражены и проявляются упрощением межклеточных контактов, фиброзными изменениями соединительной ткани, нарушениями кровообращения в регионе микроциркуляторного русла, апоптозом лютеоцитов с последующим фагоцитозом апоптозных телец макрофагами.

12. Полученные данные указывают на то, что синтетический аналог простагландина р2а эстуфалан обладает лютеолитическим действием на желтые тела полового цикла коров. Исходя из полученных данных, наиболее оптимальными дозами эстуфалана для коров являются 500 мкг. При этом морфологические изменения в тканях желтого тела напоминают естественные лютеолитические процессы в желтых телах полового цикла, но с более выраженными дистрофическими изменениями не только в крупных лютеоци-тах, но и в тека-лютеиновых клетках, активацией макрофагов, уничтожающих погибающие клетки. Это происходит вследствие развития анемии и ишемии сосудов железы. В то же время фиброзные процессы выражены слабо, что приводит к быстрому рассасыванию желтого тела без его персистен-ции и образования лютеинизированных тел.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При выяснении этиологии и патогенеза болезней органов размножения крупного рогатого скота, оценки действия терапевтических средств на репродуктивную систему необходимо проводить выборочное патологоана-томическое и патогистологическое исследование послеубойного и биопсий-ного материала.

2. Использованный нами способ биопсии желтого тела яичника у крупного рогатого скота (патент № 2083165 РФ, МКИ А61В 10,00) позволяет достаточно быстро, без сложных оперативных вмешательств получить необходимый для морфологического и биохимического исследования кусочек желтого тела или другой ткани яичника. При этом не требуется значительных материальных затрат и не оказывается отрицательное влияние на репродуктивную функцию животного. Данную пункцию можно использовать для ин-траовариальных инъекций.

3. Материалы проведенных исследований включены в монографию и учебное пособие с грифом УМО вузов Российской Федерации по образованию в области ветеринарной медицины и зоотехнии: Е. Н. Сковородин, А. А. Менькова «Возрастная морфология органов размножения самок крупного рогатого скота» Брянск, 2003. 208 с. (монография); Кадыров У. Г., Сковородин Е. Н. «Руководство к лабораторным занятиям по патологической анатомии животных» Уфа, 2003. 180 с. (учебное пособие).

4. Полученные материалы исследований могут быть использованы в учебном процессе при проведении лекционных и лабораторно-практических занятий по гистологии, ветеринарному акушерству и гинекологии, патологической анатомии животных, при написании учебников и руководств по вопросам морфологии и патологии репродуктивной системы.

2.3 Заключение

Анализ литературы, посвященной морфологии и физиологии органов размножения свидетельствует о том, что это наиболее сложные и актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины (Шипилов, 1977; Соколовская, Милованов, 1981; Буянов, 1986; Эрнст, Сергеев, 1989; Валюшкин, Туков, 1998; Миролюбов, 2003; Нежданов, 2003; Hammond, 1927; Hunter, 1980). Большой интерес к ним не исчерпывается чисто теоретическими соображениями, поскольку достижения в данной области непосредственно связаны с кардинальными вопросами воспроизводства, находят прямой и эффективный выход в практику (Полянцев, Синявин, 1989; Зверева, 1991; Иноземцев, Тал-лер, 1997; Шутов, Буканов, 2001; Пронин, 2003; Noakes, 1986).

Недостаточно изучены вопросы возрастной морфологии лютеиновых структур, хотя известно, что они появляются уже у поздних плодов (Сковородин, 1999;

Противоречивы данные литературы о макроскопической анатомии желтых тел на протяжении беременности (Устинова, 1970; Долинина, 1977; Ава-каянца, 1982; Середин, 1998; Rüssel, 1971) и полового цикла (Буянов и др., 1991; Еремин, 2004; Ireland et al., 1979; Ireland et al., 1980 Hansel a. Dowd, 1986).

Недостаточно изучены вопросы происхождения лютеоцитов (Тарасе-вич, 1936; Хватов, 1955; Черемисинов, 1968; Долинина, 1977; Corner, 1921; McNutt, 1927; Hammond, 1927Donaldson, Hansel, 1965; Lay, Swan, 1966; Alila, Hansel, 1984), причины и механизмы лютеинизации (Vaughan, 1996; Murphy, 2000), клеточный состав желтого тела (Долинина, 1977; Parry et al., 1980; Koos, Hansel, 1981; Gasse, 1983; Chegini et al., 1984; Hansel et al., 1987; Weber et al., 1987; Peukert-Adam et al., 1987; Shea et al., 1989; Zayed, 1999).

В мировой литературе имеются единичные источники посвященные ультраструктурной характеристике желтых тел крупного рогатого скота (Qurrk et al., 1979; Kohsaka et al., 1982), механизмам лютеолизиса (Тарасевич,

1936; Хватов, 1955; Нежданов, 1983; Еремин, 2004; Carlson et all, 1988; Pate , 1994; Zhao, 1998; Bove, 2000).

Наконец практически не изучена лютеиновая ткань кист, атретических тел остатков желтых тел у половозрелых и созревающих животных, плодов (Киршенблат, 1973; Студенцов и др., 1980; Павлов, 1984; Хонина, 1984; Amoros, Fin, 1962; Ingram, 1962; Kayanja, Blankenship, 1973; Eckstein, 1977; Weir, Rowlands, 1977; Mbassa, 1989; Weber et al., 1993).

По данным многих исследователей (Кононов, Буянов, 1973; Долинина, 1977; Муруев, 1985; Полянцев, Калашник, 1991; Середин, 1998; Грига, 1999; Нежданов, Душкаева, 1999; Еремин, 2004; Jabb et al., 1985) персистентное желтое тело - одна из причин симптоматического бесплодия. Существующие в настоящее время методы диагностики, основанные на клиническом и, прежде всего, ректальном исследовании, не отражают всей сложности патологических процессов, происходящих в овариальных железах и матке при этой патологии.

Дефицит информации, относящийся к морфологическому эквиваленту функции этой эндокринной железы, не позволяет эффективно решать целый ряд современных задач, поставленных практикой, таких как трансплантация эмбрионов, синхронизация охоты, профилактика симптоматического бесплодия, дифференциальная диагностика болезней органов размножения, их профилактика и лечение, разработка лютеолитических препаратов.

Цель и задачи исследований. Изучить функциональную морфологию желтых тел и лютеиновых структур яичников коров в норме и при патологии.

3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Материал и методы исследований

Работа выполнена в 2001 - 2004 годах на кафедре акушерства, патана-томии и хирургии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», в учебно-опытном хозяйстве БГАУ «Миловское» Уфимского района Республики Башкортостан, в убойном цехе Уфимского мясоконсервного комбината, а также в лаборатории морфологии, гистохимии и электронной микроскопии Всероссийского центра глазной и пластической хирургии «Ал-лоплант».

На основании этих данных отбирали животных и делили их на следующие группы. Первая группа - 27 стельных коров (по три коровы на каждый месяц стельности). Вторая группа- 21 корова на разных стадиях полового цикла. Половой цикл условно дели на семь стадий (одна стадия составляла последовательно три дня). Третья группа - бесплодные коровы с дисфункциями яичников, а именно: с персистентным желтым телом (п = 10), с гипофункцией яичников (п = 5), с лютеиновыми и фоликулярными кистами яичника (п = 10).

Материал, зафиксированный в жидкости Карнуа или в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали и заливали в парафин по схеме Г. А. Меркулова (1969). С помощью микротома получали срезы толщиной 5-6 мкм которые после депарафинации окрашивали гематоксилином и эозином, па-ноптическим методом по А. Pappenheim. Коллагеновые волокна выявляли по ван Гизону. Дезоксирибонуклеопротеиды (ДНП) и рибонуклеопротеиды (РНП) - по L. Einarson, по J. Brächet, гликоген и нейтральные гликозаминог-ликаны - по А. JI. Шабадашу, кислые гликозаминогликаны - по Н. F. Steedman. Из материала, фиксированного в формалине, срезы, полученные на замораживающем микротоме, окрашивали Суданом черным по Лизону, Суданом III по Дадди (Кононский, 1976).

Из кусочков яичников, фиксированных в жидком азоте, в криостате получали срезы толщиной 10 мкм и в них, по прописям Пирса (1962) и Лилли (1969), выявляли активность дегидрогеназ сукцината (СДГ), лактата (ЛДГ), никотинамидадениндинуклеотидфосфата восстановленного (НАДН2ДГ), ни-котинамидадениидинуклеотидфосфата восстановленного (НАДФН2ДГ), щелочной и кислой фосфатазы по Берстону в модификации Лойда и др. (1982).

Электронную микроскопию проводили по общепринятой методике. Материал фиксировали в охлажденном 2,5 % глютаральдегиде на фосфатном буфере с pH 7,3 с последующей дофиксацией 1% раствором осьмиевой кислоты на фосфатном буфере. Кусочки заливали эпон-аралдитной смесью. После получения и окраски полутонких срезов, блоки окончательно затачивали и готовили ультратонкие срезы на ультратоме LKB-III-8800A (Швеция), монтировали их на опорные сетки и контрастировали цитратом свинца по Е. Reynolds (1963). Просматривали на электронном микроскопе JEM-100CXII при увеличениях на 6000-27000.

В криостатных срезах материала, фиксированного в жидком азоте, изучали активность окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов. Гистохимическую активность энзимов оценивали по В.В.Семеновой-Тян-Шанской и Л.А.Сайковой (1977) с использованием микроскопа МБР-3 (ок.7, об. 90), для чего в тубус микроскопа вставляли измерительный окуляр с сеткой, содержащей 16*16 квадратов (8*8 мм), и с ценой деления квадрата 0,5*0,5 мм. Сетку накладывали на различные участки срезов желтых тел, подсчитывали количество зерен продукта гистохимической реакции.

В поперечных срезах яичника, проходящих через весь орган вплоть до брыжейки, подсчитывали число лютеиновых образований, а также фолликулов с учетом их состояния. При этом использовали Международную гистологическую номенклатуру (1983) и классификацию овариальных фолликулов, предложенную Л. К. Эрнстом и др. (1980) с учетом особенностей ее приложения к гистологическим срезам. Количество гликогена, нуклеопротеидов, гликозаминогликанов и липидов оценивали по балльной шкале.

Изучение морфологического проявления лютеолитической активности синтетического аналога простогландина F2a (эстуфалан) было проведено на 24 коровах с использованием биопсии желтого тела яичника. 18-ти коровам опытной группы эстуфалан вводили однократно внутримышечно в дозах 250, 500 и 1000 мкг на восьмые-двенадцатые сутки полового цикла на фоне активно функционирующих желтых тел. Биопсию желтого тела яичника проводили двукратно через 48 часов (девять коров) и 96 часов (девять коров) после введения препарата. Коровам контрольной группы (шесть коров) вводили

РСССЛЛС^Л«", ГОСУДАГ С 144 & И МАЯ БИБЛИОТЕКА физиологический раствор и проводили биопсию желтого тела двукратно через 48 часов (три коровы) и 96 часов (три коровы).

Биопсию желтого тела яичника осуществляли следующим образом. Корову фиксировали. Место пункции, находящееся в области средней трети линии, соединяющей наружный бугор подвздошной кости с кожной подхво-стовой складкой, выстригали и дезинфицировали. При исследовании правого яичника левую руку вводили в прямую кишку. Правой рукой делали укол иглой с мандреном перпендикулярно поверхности крупа. Иглу продвигали вглубь тканей настолько, чтобы ее конец можно было обнаружить пальцем через стенку прямой кишки. Затем захватывали яичник, оттягивали его кау-дально и несколько вверх, к своду тазовой полости, где находится конец иглы. Правой рукой иглу вводили глубже, извлекали мандрен и прокалывали желтое тело. При этом небольшая часть ткани остается в просвете иглы. Иглу извлекали, ее содержимое помещали в фиксатор или на предметное стекло. При проведении биопсии левого яичника пункцию проводили левой рукой, а яичник через прямую кишку фиксировали правой.

3.2 Результаты собственных исследовании

3.2.1 Макроскопическая характеристика яичников стельных н бесплодных коров

Результаты органометрии яичников стельных коров представлены в таблицах 1, 2, 3, 4.

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2004 года, Шарипов, Ансар Радикович

1. Авакаянц Б. М. Патологическая морфология и патогенез желтых тел и кист яичников коров: Автореф. дис. канд. вет. наук / Б.М. Авакаянц. М., 1982.24 с.

2. Алексеев И.А. Анализ бесплодия крупного рогатого скота в хозяйствах Чувашской АССР / И.А. Алексеев, Т.Е.Григорьева, Г.К.Иванов // Профилактика и меры борьбы с болезнями животных в условиях промышленного животноводства.- Горький, 1979. С.43-44.

3. Андреева A.B. Эффективность препаратов прополиса при эндометрите коров / A.B. Андреева // Ветеринария. — 2003. № 6. - С. 30-33.

4. Бибиашвили A.C. Симптоматология и морфологические изменения при гипофункции яичников у коров: Дисс. канд.наук. /A.C. Бибиашвили.-Л., 1970. 167 с.

5. Бочаров И. А. Бесплодие сельскохозяйственных животных./И.А. Бочаров-М.-Л., 1956.-101 с.

6. Буянов А. А. Эндокринные механизмы патогенеза и совершенствование гормональной терапии при дисфункциях яичников у коров: Авто--реф. дис. д-ра. вет. наук./ A.A. Буянов Л./ 1986. - 46 с.

7. Валюшкин К.Д. Влияние витамина А на морфологию эндометрия и яичников при их гипофункции у коров. / К.Д. Валюшкин /Ф.Д. Гуков //Актуальные вопросы патологоанатомической диагностики болезней животных. Л., 1982. - С.38-40.

8. Валюшкин К.Д. Витамины и микроэлементы в профилактике бесплодия коров./К.Д. Валюшкин -Минск, 1981. 96 с.

9. Валюшкин К.Д. Влияние витамина А на морфологию эндометрия и яичников при их гипофункции у коров./ К.Д. Валюшкин /Ф.Д. Гуков //Актуальные вопросы патологоанатомической диагностики болезней животных.- Л., 1982. С. 38-40.

10. Варганов А. И. Профилактика симптоматического и искусственно приобретенного бесплодия у коров и телок: Автореф. дис. д-ра вет. наук./ А.И. Варганов Воронеж, 1988. - 23 с.

11. Велиток И. П. Организация воспроизводства на молочных фермах в условиях постоянной диспансеризации маточного поголовья. / И.П. Велиток // Воспроизводство и искусствен, осеменение с.-х. животных.-М., 1990.-С. 5-20.

12. Волкова О.В. Функциональная морфология женской репродуктивной системы./ О.В. Волкова М., 1983. 224 с.

13. Галиева Л.Д. Цитогенетический анализ овоцитов антральных фолликулов коров и в процессе созревания: Дис. канд. биол. наук./ Л.Д. Га-лиева. Ленинград-Пушкин / 1981. 175 с.

14. Горбунов Ю. А. Инволюция половых органов коров лимузинской породы. / Ю.А. Горбунов // Зоотехнич. наука Белоруссии / 1988. — Т. 29. -С. 15-19.

15. Грига Э. Н. Детерминированность функции яичников структурой желтых тел / Э. Н. Грига // Вестник ветеринарии. 1999. № 13. С. 18 -22.

16. Григорьева Т.Е. Профилактика алиментарного бесплодия коров (недостаток микроэлементов)./Т.Е. Григорьева /Г.И.Иванов // Ветеринария, 1996. №3. С.41-45.

17. Данилов М.А. Активность неспецифических фосфатаз в яичниках стельных и бесплодных коров. / М.А. Данилов/С.Л. Петросян, A.A. Шахбазян // Биологический журнал Армении. 1976. 29. 5. С. 113-114.

18. Долинина Э.В. Материалы к изучению морфологии и функции желтых тел яичников коров: Дисс. канд. вет. наук./ Э.В. Долинина Киров / 1977.217 с.

19. Еремин С. П. Функциональная морфология яичников у коров в онтогенезе, процессе развития послеродовой патологии, ее диагностика, профилактика и терапия: Автореф. дис. д-ра вет. наук./ С. П. Еремин Санкт-Петербург, 2004. - 23 с.

20. Жаров A.B. Патология органов размножения при нарушении обмена веществ у молочных коров / A.B. Жаров, E.H. Сковородин // Вестник сельскохозяйственной науки. 1990. -N10.- С.55 -62.

21. Жуков П. И. Влияние экологических факторов на воспроизводство крупного рогатого скота / П. И. Жуков, В. А. Кленов // Актуальные проблемы и достижения в области репродукции и биотехнологии размножения животных. Ставрополь, 1998. - С. 188 - 190.

22. Заянчковский И. Ф. Бесплодие сельскохозяйственных животных и борьба с ним / И.Ф. Заянчковский. Уфа, 1989. - 40 с.

23. Зверева Г. В. Восстановление воспроизводительной функции у коров при симптоматическом бесплодии / Г.В. Зверева, С.П. Хомин, P.M. Антонишин // Интенсификация воспроизводства и профилактика бесплодия с.-х. животных. Казань, 1989. - С. 16-18.

24. Зверева Г. В. Гинекологические болезни коров / Г. В. Зверева, С. П. Хомин. Киев, 1976. 152 с.

25. Ибрагимов М. Акушерско-гинекологическая диспансеризация коров в условиях молочных комплексов Туркменской ССР: Автореф дис. канд. вет. наук./М. Ибрагимов Ашхабад/ 1987. - 16 с.

26. Иноземцев В. П. Изучение распространения задержаний последа и заболеваний коров эндометритом / В. П. Иноземцев // Диагностика, терапия и профилактика акушер.-гинекол. патологии у животных. М.,1994.-С. 17-22.

27. Иноземцев В. П. Изучение распространения задержаний последа и заболеваний коров эндометритом / В. П. Иноземцев // Диагностика, терапия и профилактика акушер.-гинекологической патологии у животных. М., 1994. С. 17-22.

28. Иноземцев В. П. Современные задачи ветеринарного контроля за воспроизводством крупного рогатого скота / В. П. Иноземцев, Б. Г. Таллер // Ветеринария. 1997. 6. С. 3 7.

29. Исаханян С. Ш. Причины бесплодия коров и меры борьбы в Октем-берянском районе / С. Ш. Исаханян, Р. А. Тадевосян, Х.Г. Хачатрян // Агропром: наука и пр-во Госагропром АрмССР.- 1988. № 2. С. 4759.

30. Киршенблат Я. Д. Сравнительная эндокринология яичников / Я. Д. Киршенблат. М., 1973. 176 с.

31. Китаев Э.М. Элиминация половых клеток в процессе гаметогенеза и значение ее в репродукции / Э. М. Китаев // Акушерство и гинекология. 1977. 8. С. 13-18.

32. Козло Н. Е. Воспроизводство животных/ Н. Е. Козло М., 1984. — 224 с.

33. Кононов Г. А. Основные принципы диагностики, терапии и профилактики бесплодия коров / Г. А. Кононов, А. А. Буянов. Ленинград, ЛВИ/ 1973.-28 с.

34. Копытин В. К. Причины и профилактика бесплодия коров / В. К. Ко-пытин//Ветеринария. 1986. № 1.-С.47-48.

35. Крус Самрано А. Этиология и профилактика бесплодия коров в условиях тропического климата провинции Гранма республики Куба: Ав-тореф. дис. канд вет. наук. /А. Крус Самрано М./ 1983. 20 с.

36. Кудряшов Н. С. Акушерско-гинекологическая диспансеризация и ветеринарный контроль за воспроизводством крупного рогатого скота. /Н. С. Кудряшов. Саранск, 2000. - 56 с.

37. Курило JI. Ф. Морфо-функциональная характеристика оогенеза млекопитающих: Автореф. дисс. .докт. биол. наук. / Л.Ф. Курило М. / 1985.-47 с.

38. Лукьяненко В.М. Иммунологическое состояние и морфологические показатели полового аппарата бесплодных коров: Дис. канд. вет. наук / В. Н. Лукьяненко. Львов / 1973. 164 с.

39. Луппа X. Основы гистохимии. М., 1980. 343 с.

40. Макаримов С. С. Опыт применения лазерной терапии при эндометрите коров / С. С. Макаримов, А. Н. Агафонова, В. Г. Данилов, Д. В. Михайлов, В. И. Родин, В. Н. Мирон // Ветеринария. 2002. - №4. -С. 29-32.

41. Малигонов A.A. О росте главнейших тканей и органов во вторую половину эмбрионального и в постэмбриональные периоды / А. А. Малигонов, Г. Ф. Расходов //Избранные труды. М., 1968. С.20-64.

42. Мороз И. Г. Профилактика бесплодия коров / И. Г. Мороз, Л. Н. Ли-товченко, В. Г. Иваненко, А. Г. Санин, Л. А. Гнедова // Ветеринария. 1983.3. С. 48-49.

43. Муруев А. П. Персистентное желтое тело яичников: Автореф. дисс. канд. вет. наук / А. П. Муруев. М. / 1985.- 16 с.

44. Нежданов А. Г. Послеродовая инволюция половых органов у коров / А. Г. Нежданов // Ветеринария. 1983. 2. С. 48 51.

45. Нежданов А. Г. Фетоплацентарная недостаточность и ее профилактика у коров / А. Г. Нежданов / К. Г. Душкаева // Ветеринария, 1999. №7. С. 6-И.

46. Нежданов А. Г. Физиологические основы профилактики симптоматического бесплодия коров: Автореф. дис. док. вет. наук. / А. Г. Нежданов. Воронеж / 1987. С.45

47. Нежданов A.A. Акушерско-гинекологические болезни коров (диагностика и лечение) / А. А. Нежданов, В. П. Иноземцев // Ветеринария. 1996. 6. С. 9- 15

48. Никитин В. Я. Функциональная связь между яичникам и слизистой оболочкой матки коров / В. Я. Никитин, Э. Н. Грига // Диагностика, лечение и профилактика заболевание с.х животных / Науч.тр. Ставропольского СХИ. Ставрополь, 1975. С.25 34.

49. Осетров А. А. Бесплодие, восстановление и стимуляция функции коров и телок: Автореф. дис. д-ра вет. наук./ А. А. Осетров Харьков/ 1984.-22 с.

50. Осетров О. А. Клинико-патологичны процессы в органах размножения бесплодных коров у величих специализированных господарствах / О. А. Осетров, К. И. Жадовень // Вестник с.-г. науки. Киев, 1974. 6. С. 87 90.

51. Панасенко Ф. Т. К этиологии симптоматического бесплодия / Ф. Т. Панасенко//Ветеринария. 1964. 6. С.89-91.

52. Полянцев Н. И. Акушерско-гинекологическая диспансеризация на молочных фермах / Н. И. Полянцев, А. Н. Синявин М., 1989. - 176 с.

53. Полянцев Н. И. Воспроизводство стада в скотоводстве и свиноводстве / Н. И. Полянцев, Б. А. Калашник. М., 1991. 144 с.

54. Полянцев Н. И. Гипоплазия желтого тела у коров как причина бесплодия и эмбриональных потерь / Н. И. Полянцев, JI. Н. Лисичникова // Пробл.оптимизации воспроизводства стада и повышения сохранности приплода. Персиановка, 1993(1994). С. 3-8.

55. Полянцев Н. И. Практические советы по борьбе с яловостью коров. / Н. И. Полянцев. М., 1986. - 174 с.

56. Пономарева Т. Е. Некоротые особенности гормональной функции желтого тела у коров: Автореф. дисс. канд. вет. наук. / Т. Е. Пономарева. Ленинград / 1981. 24 с.

57. Порфирьев И. А. Физиолого-биологическое обоснование профилактики алиментарного бесплодия и нормализация воспроизводительной функции у высокопродуктивных молочных коров: Автореф. дисс. д-ра биол. наук./И. А. Порфирьев. Ростов / 1996. — 32с.

58. Прочуханов P.A. Принципы количественной гистохимии ферментов / Р. А. Прочуханов //Введение в количественную гистохимию ферментов. М., 1978. С. 3 7.

59. Равкин И.А. Некоторые методы математической обработки гистоэн-зимологических данных//Введение в количественную гистохимию ферментов. М., 1978. С. 184-187.

60. Рапопорт С. Медицинская биохимия. М., 1966. 256 с.

61. Рубцова J1. Ф. Клинико-морфологические изменения у коров при фолликулярных кистах яичника: Автореф. дисс. канд. вет. наук. / JI. Ф. Рубцова. Ленинград / 1973. 21 с.

62. Рябов Н. И. Лечение задержания последа и гинекологических заболеваний у коров / Н. И. Рябов, Л. А. Громова, Л. Д. Журавлева // Акту-ал. пробл. вет. медицины. Ульяновск, 1994. - С. 44-48.

63. Садирова У. А. Динамика роста органов половой системы телок в зависимости от различной степени двигательной активности / У. А. Садирова, И. В. Хрусталева // Морфология. 1993. 105. С. 9 10.

64. Самбуров Н. В. Прогестагенная активность желтого тела при формировании беременности у коров / Н. В. Самбуров, М. И. Прокофьев // Зоотехния. 1999. N 2. С. 26-28.

65. Свиридов Б. Е. Закономерности роста фолликулов и созревания ооци-тов в яичниках коров и при культивировании in vitro: Автореф. дис. д-ра биол. наук / Б. Е. Свиридов. С.-Петербург / 1991.-35с.

66. Семиволос А. М. Восстановление плодовитости у телок при гипофункции яичников: Автореф. дисс. канд. вет. наук /А. М. Семиволос. Ставрополь / 1985. 20 с.

67. Сергеев Н. И. Внутрияичниковые процессы регулирования полового цикла / Н. И. Сергеев, Н. И. Смыслова //Сельское хозяйство за рубежом. 1982. 5. С. 58-62.

68. Середин В. А. О желтом теле, его персистентности и оплодотворяе-мости // В. А. Середин // Вестник ветеринарии. 1998. №9. С. 72 87.

69. Сковородин Е. Н. Возрастная морфология органов размножения самок крупного рогатого скота / Е. Н. Сковородин, А. А. Менькова.-Брянск, 2002. 208 с.

70. Сковородин Е. Н. Научно-практические рекомендации по улучшению воспроизводства крупного рогатого скота /Е. Н. Сковородин, В. Г. Денисов, Н. С. Кудряшов. Саранск, 2000. - 55 с.

71. Сковородин Е. Н. Функциональная морфология яичников крупного рогатого скота в онтогенезе: Автореф. дис. д-ра вет. наук. / Е. Н. Сковородин Иваново/ 1999. — 24 с

72. Слободский В. Д. Диагностика, лечение и профилактика гипофункции яичников у коров / В. Д. Слободский // Совершенствование системы ветеринарных мероприятий в промышленном скотоводстве / Донской СХИ. Персиановка, 1982. С.7-11.

73. Смирнова В. В. Морфологические изменения в органах размножения коров при симптоматическом бесплодии / В. В. Смирнова, П. Н. Смирнов // Незаразные болезни животных Сибирск. НИВИ. Омск, 1979. С. 97-101.

74. Солсбери Г. У. Теория и практика искусственного осеменения коров в США / Г. У. Солсбери, Н. Л. Ван-Демарк. М., 1966. 68 с.

75. Студенцов А. П. Ветеринарное акушерство и гинекология / А. П. Студенцов, В. С. Шипилов, Л. Г. Субботина, О. Н. Преображенский. М.,- 1986.-480 с.

76. Стулова О. П. О структурных изменениях яичников при некоторых формах бесплодия коров / О. П. Стулова, Н. П. Суханов, Г. И. Миня-ев, М. К. Боярский // Пути повышения продуктивности с.-х. животных. Куйбышев, 1972. С. 145 - 147.

77. Сысоев А. А. Физиология размножения сельскохозяйственных животных/А. А. Сысоев. М., 1978. 156 с.

78. Тарасевич А. Ю. Бесплодие сельскохозяйственных животных / А. Ю. Тарасевич. М., 1936. 316 с.

79. Техвер 10. Т. Гистология мочеполовых органов и молочной железы домашних животных /10. Т. Техвер / Тарту, 1968. ч. 2. С. 140 305.

80. Тюпич М. М. Экспериментальное изменение состояния яичников у коров / М. М. Тюпич, Н. Г. Коновалов // Гормоны в животноводст-ве/ВИЖ. Дубровицы, 1967. 9. С. 18 22.

81. Устинов А. П. Состояние яичников у коров в разные сроки стельности / А. П. Устинов // Тр.МВА. М., 1970. 54. С. 3 5.

82. Хватов Б. П. Строение и физиологические изменения половой системы самок домашних животных / Б. П. Хватов. Симферополь, 1955. 176 с.

83. Хватов Б. П. Строение и физиологические изменения половой системы самок домашних животных / Б. П. Хватов. Симферополь, 1955. 176 с.

84. Хонина Г. А. Морфология и гистохимия яичников крупного рогатого скота в онтогенезе: Автореф. канд. вет. наук. /Г. А. Хонина Омск, 1984. 18 с.

85. Хэммонд Дж. Плодовитость сельскохозяйственных животных / Дж. Хэммонд //С. х. за рубеж. Сер. Жи-во. 1965. 4. С. 34 36.

86. Цедендорж Л. Гипофункция яичников у коров и телок: Дис. канд.вет. наук/Л. Цедендорж. Л., 1982. 141 с.

87. Черемисинов Г. А. Закономерности генеративной функции яичников и гормональные методы повышения плодовитости животных / Г. А. Черемисинов // Вестник с.х. наук. 1984. 6. С. 102-114.

88. Шакис П. Ю. Симптоматическое бесплодие коров и телок как последствие заболеваний органов пищеварения: Автореф. дис. канд. вет. Наук / П. Ю. Шакис. Львов/ 1987. - 16 с.

89. Шарипов А. Р. Строение персистентных желтых тел яичников коров / А. Р. Шарипов // Морфология. 2004. Т 126. С. 140.

90. Шипилов В. С. Диагностика овариальных кист у коров /В. С. Шипи-лов, Г. П. Дюльгер // Вест. с.-х. науки. 1990. 5. С. 79-85.

91. Шипилов В. С. Физиологические основы профилактики бесплодия коров / В. С. Шипилов М., 1977. - 336 с.

92. Школина Г. В. К вопросу гистохимической характеристики фолликулярных кист яичников коров / Г. В. Школина // Ветеринария. Киев,1983. 58. С. 67-69.

93. Шутов А. Н. Преимущества ранней гинекологической диспансеризации коров после родов. / А. Н. Шутов, Р. Г. Давлетбаев, Г. И. Ивановская // Нарушения обмена веществ и дерматиты животных. — Уфа, 1990.-С. 43-45.

94. Эктов В. А. Влияние уровня питания на постэмбриональный рост некоторых систем и внутренних органов крупного рогатого скота / В. А. Эктов//Журнал общей биологии. 1951. 6. С.469-478.

95. Эрнст Л. К. Атрезия фолликулов и овоцитов в яичнике коров / JI. К. Эрнст, Р. И. Балтян, А. В. Перебора, В. В. Каганская // Доклады ВАСХНИЛ. 1983. 5. С. 26 28.

96. Эрнст Л. К. Рост и развитие ооцитов и фолликулов в яичнике коров / Л. К. Эрнст, В. Г. Бехтина, Л. Д. Галиева, А. К. Голубев, Б. Е. Свиридов//Вестн. с.-х. науки. 1980. 6. С.103-108.

97. Ярушин А. Д. Профилактика болезней органов размножения у коров / А. Д. Ярушин // Ветеринария. 1992. - №3. - С. 41 - 43.

98. Al-Dahash S. Anatomical features of cyst ovaries in cattle found during an abottoir survey / S. Al-Dahash, J. David // Vet. Rec. 1977. 101. 16. P. 320-324.

99. Al-Dahash S. Histochemistry of cystic ovaties found during an abattoir survey / S. Al-Dahash, J. David //Vet. Rec. 1977. 101. 18. P. 361-363.

100. Al-Dahash S. Histologic examination of ovaries and from cows with cystic ovaries/ S. Al-Dahash, J. David // Vet. Rec. 1977. 101. P. 342-347.

101. Alila H.W. Origin of different cell types in the bovine corpus luteum as characterized by specific monoclonal antibodies / H. W. Alila, W.Hansel // Biol. Repr. 1984. 31. P. 1015-1025

102. Amoroso E. C. Ovarian activity during gestation, ovum transport and implantation // E. C. Amoroso, C. A. Fin // The ovari. N.Y., 1962. P. 462466.

103. Bamberg E. Untersuchungen uber Sterilitatsursachen beim Rind / E. Bamberg // Foerderungsdienst, 1986. Bd 34. - № 1. - S. 17-20.

104. Battista P. F. Serotonin-induced stimulation of progesterone production by cow luteal cells in vitro / P. F. Battista, W. A. Condon // Journal of Repr. and Fertil. 1986. 76. P. 231-238.

105. Belibasakis N. G. Diary cows management problems associated with reproduction / N. G. Belibasakis // Bull. Hellen. Veter. Med. Soc. 1990. -Vol. 41.-№3.-P. 178-191.

106. Bellin M. E. Chemical chracteristics of follicular glycosaminoglycans / M. E. Bellin, R. L. Ax // Regulation of ovarian and testicular function. N.Y., 1987. P. 731 -735.

107. Bellin M. E. Chondroitin sulfate: an indicator of atresia in bovine follicles / M. E. Bellin, R. L. Ax // Endocrinology. 1984. 114. P.428-434.

108. Bove S. Macrophage migration inhibitory factor in the bovine corpus lut-eym / S. Bove, M. Petroff, M. Nishibori, J. Pate // Biology of reproduction. 2000. 62. P. 879-885.

109. Brannstorm M. Involvement of leukocytes and cytokines in the ovulatory process and corpys luteum function / M. Brannstorm, R. Norman // Hum Reporod. 1993. 8. P. 1762 1775.

110. Byskov A. G. Follicular atresia / A. G. Byskov // The vertebrate ovary. N.Y., 1978. P. 533 -562.

111. Byskov A. G. Regulation of meiosis in mammals / A. G. Byskov //Ann. Biol. Anim. Biochim. Biophys. 1979. v. 19. P. 1251 1262.

112. Byskov A.G. Primordial germ cells and regulation of meiosis / A. G. Byskov // Reproduction in mammals. V. 1. Germ cells and fertilization / Eds C. Austin, R. Short. Cambridge, 1982. P. 1-17.

113. Chegini N. Morphological and biochemical characterization of small and large bovine luteal cells during pregnancy/ N. Chegini, N. Ramani, C. Rao // Molec. Cell Endocrin. 1984. 37. P. 89 102.

114. Corner B. On the origin of the corpus luteum of the cow from both granulosa and theca interna / B. Corner //Am. J. Anat. 1921. 26. P. 124 127.

115. Correale E. Ipofecondita e sterilita nei bovini e bufalini / E. Correale, P. Amoroso, N. Landi // Inform. Sootecn. 1988. Vol. 35. - № 12. - P. 119 -125.

116. Corrias A. La lunga strada della fertilita / A. Corrias // Inform. Zootecn. 1988.-An. 35.-№ 10.-P. 80-83.

117. Donaldson L. E. Histological study of bovine corpora lutea / L. E. Donaldson, W. Hansel //J. Dairy Sei. 1965. 48. P. 7-10.

118. Dufour J. J. Distribution of ovarian follicular populations in the dairy cow within 35 days after parturition /J. J. Dufour, G. L. Roy // J. Reprod. Fert. 1985.73. l.P. 229-235.

119. Dwivedi J. N. Studies on the pathology of female reproductive organs of indian buffalo / J. N. Dwivedi, C. M. Singh // Indian J. Anim. Health. 1971. 10. 1. P.27-36.

120. Eckstein P. Endocrine activies of the ovary / P. Eckstein // The ovary. N. Y., 1977. P. 275-307.

121. El-Sanaf. Incidence of infertility with special reference to anoestrum at Heria-Razana Village in Shtkia province / El-Sanaf, A. S. Shalaby // Zaga-zig Vet. J. 1977. P. 69-77.

122. Elwisby A. B. A preliminary study of the genital organs of indigenes cows in Uganda / A. B. Elwisby // Beitrage zur tropischen Landwirtschaft und Veterinärmedizin. 1976. 14. 1. S. 95-107.

123. Erickson B. H. Development and radio-response of the prenatal bovine ovary/B. H. Erickson //J. Reprod. Fertil. 1966. 10. P. 97-105.

124. Erickson B. H. Development and senescence of the postnatal bovine ovary /B. H. Erickson //J. Anim. Sei. 1966. 25. P. 800-805.

125. Erickson B. H. Ovarian characteristics and reproductive performance of the Aded cow / B. H. Erickson, R. A. Reynolds, R. L. Mutphrea // Biol, of Repr. 1976. 15. P. 555 -560.

126. Fairchild D. L. Modulation of bovine luteal cell synthetic capati by inter-feron-gamma / D. L. Fairchild, J. L. Pate // Biol. Reprod. 1991. 44. P. 357

127. Fairchild B. D. Tumor necrosis factor-a alters bovine luteal cell synthetic capati and viability / B. D. Fairchild, J. L. Pate // Endocrinology. 1992. 130. P. 854-860.

128. Fielden E. D. The anoestrus syndrome in New Zealand dairy cattle / E. D. Fielden, K. L. Macmillan, J. D. Watson //N. Z. Vet. J. 1973. 21. P. 77-81.

129. Fraenkel A. Uber Corpus luteus Cysten / A. Fraenkel // Arch. Gyak. 1899. 57. S. 12-16.

130. Gasse H. Follikel-Lutein-Zyste und Corpus luteum periodicum des Rindes im Vergleich. Inaugural. Diss. . d. vet. med. / H. Gasse Hanover / 1983. 93 s.

131. Gomercic H. Histochemical observations in the bovine mesonephros / H. Gomercic // Rad. Jugosl. Akad. Znan. Umjetn. Zagreb, 1975. 371. S. 217224.

132. Görlach A. Zur Fruchbarkeit beim Rind aus der Sicht eines Sterilitatstier-arztes /A. Görlach // Prakt. Tierarzt. 1988. Jg. 69. - №9. - S.68-69.

133. Gougeon A. Histological evidence of alternating ovulation in women / A. Gougeon, B. Lefewre //J. Reprod. Fert. 1984. 70. 1. P. 7-13.

134. Guraya S. S. Recent advances in the morphology histochemistry and biochemistry of the developing mammalian ovary / S. S. Guraya // Intern. Rev. Cytol. 4. -N.Y., 1977. P. 49-132.

135. Guraya S.S. Morphological and histochemical observations on the buffalo ovaries during anoestrus / S. S. Guraya // Indian J. Anim. Sei. 1979. 49. 6. P. 423-432.

136. Hammond J. The physiology of reproduction in the cow / J. Hammond. London, 1927. 127 p.

137. Hansel W. Control of steroidogenesis in small and large bovine luteal cells / W. Hansel, H. Alila, J. Dowd, Z. Yang //Austr. J. Biol. Sei. 1987. 40. P. 331-347.

138. Hansel W. New concepts of the control of corpus luteum function / W.

139. Hansel, J. Dowd //J. Reprod. Fert. 1986. 2. P. 755 768.

140. Harishon G. Biochemikal parameters in varios sections of bovine corpora lutea graviditasis during the cours of pregnancy / G. Harishon, M. Kret-schmer, E. Grunert // J. Vet. Med. A. 1989.36. P. 200 208.

141. Harrison R. S. Structure of the mammalian ovary / R. S. Harrison, B. Weir // The ovary. N. Y., London, 1977. P. 113-184.

142. Harrison R. S. The structure of the ovary mammals / R. S. Harrison // The ovary. N.Y., London, 1962. P. 143-188.

143. Hay M. F. Changes in the Graafin follicle population during the follicular phase of the oestrous cycle / M. F. Hay, R. M. Moor // Control of ovulation. London, 1978. P. 177-196.

144. Hirt G. Pathogistologische Veränderungen in ovarium und uterus in der hypophyse und nebenniere unfruchtbarer rinder / G. Hirt /A. Szeky // Acta Vet. Acad. Scient. Hugaricae. 1954. 4. S. 301-333.

145. Huber C. Untersuchungen über zusammenhahge zwischen postpartalen stoffwechselst rungen und fertilitatbeim, deutschen braunvieh. Inang. Diss. / C. Huber/Gieben, 1982. 237 s.

146. Hunter R. Physiology and technology of reproduction in female domestic animals /R. Hunter. London, 1980. 320 p.

147. Ingram D. L. Atresia / D. L. Ingram // The ovary. N.Y., 1962. P. 247-273.

148. Ireland 1.1. Accuracy of predicting stages of bovine estrous cycle by gross appearance of the corpus luteum / I. I. Ireland, R. Murphy, P. Ison // J. Dairy. Sei. 1980. 63. l.P. 155 160.

149. Ireland 1.1. Follikulär development during four stades of the estrous cycle of beef catties /1.1. Ireland, P. Ison, R. Murphy // J. Anim.Sci. 1979. 49. 5. P. 1261 -1269.

150. Jabb K. Pathology of domestic animals / K. Jabb, P. Kennedy, N. Palmer. N. Y., 1985. v. 3.527 p.

151. Kajaysri J. In-vitro-Untersuchungen zur Beziehung von sonomorpholo-gischen, makro- und mikroskopischen sowie endokrinologischen Befundenam bovinen Corpus luteum. Inaug.-Diss. Hannover, 1998. 136 s.

152. Kastelic J. P. Ultrasonic morphology of corpora lutea and central luteal cavities during the estrous cycle and early pregnancy in heifers / J. P. Kastelic, R. A. Pierson, O. J. Ginther // Theriogenology. 1990. 34. 3. P. 487-498.

153. Kayanja F. B. The ovary of the giraffe / F. B. Kayanja, L. H. Blankenship //J. Reprod. Fert. 1973. 34. P.305-313.

154. Kohsaka T. Ultrastructure of bovine corpus luteum of pregnant cow / T. Kohsaka, S. Niimura, K. Ishida // Japan J. Anim. Reprod. 1982. 28/2. P. 109-111.

155. Koos R.D., The large and small cells of the bovine corpus luteum: ultrastructural and functional differences / R. D. Koos, W. Hansel // Dynamics of ovarian function. N.Y., 1981. P. 197-203.

156. Ledwitz-Rigby F. Ovarian inhibitors and stimulation and luteinization/ F. Ledwitz-Rigby / B. W. Rigby // Intragonadal regulation of reproduction. N.Y., 1981. P. 97-131.

157. Mauleon P. Ovarian development in young mammals / P. Mauleon // Control of ovulation. Butterworths, 1978. P. 141-158.

158. Mbassa G. K. Studies on the ovarian development in zebu cattle (Bos in-dicus) / G. K. Mbassa //Anat. Histol. Embriol. 1989. 18. P. 143-149.

159. Mcleod B. J. Incidence of ovarian disfunction in post partum dairy cows and the effectiveness of its clinical diagnosis and treatment / B. J. Mcleod/ M.E.Williams //Vet. Ree. 1991. 128. 6. P. 121-126.

160. McNutt G. W. The corpus luteum of pregnancy in domestic cow and brief discussion of cystic changes / G. W. McNutt // J. Amer. Vet. 1927. 72. P. 286 293.

161. Mohanty B. N. Note on patho-anatomical features of the genital organs of chronic repeat breeding heifers and cows / B. N. Mohanty, N. S. Parihar, S. N. Luktuke // Indian J. Anim. Sei. 1980. 50. 2. P. 204-205.

162. Morikawa H. Histamine concentration and its effect on ovarian contráctility in human / H. Morikawa / A. Okamura, A. Tanenaka, K. Morimoto, T. Nishimura//Intern, j. of fertility. 1981. 26. P. 283-286.

163. Morrow D. A. Nutrition and fertility / D. A. Morrow // Mod. Vet. Pract. 1980. 62. P. 499-503.

164. Murphy B. D. Models of luteinization / B. Murphy // Biology of reproduction. 2000. 63. P. 2-11.

165. Nothnick W.B. Interleukin-ip is a potent stimulator of prostaglandin synthesis in bovine luteal cells / W.B. Nothnick, J.L. Pate // Biol.Reprod. 1990. 43. P. 898-903.

166. Parry D. M. Ultrastructural and cytochemical study of the bovine corpus luteum / D. M. Parry, D. L.Willcox, G. D. Thorburn // J. Repr. Fert. 1980. 60. P. 349-357.

167. Pate J. L. Cellular components involved in luteolysis / J. L. Pate // J. anim. Sc. 1994. Vol. 72. N 7. P. 1884-1890.

168. Pedersen T. Follicle kinetics in the ovary of the cyclic mouse / T. Pedersen // Acta endocrinol. 1972. 64. P. 309-323.

169. Pedersen T. Proposal for a classification of oocytes and follicles in the mouse ovary / T. Pedersen, H. Peters // J. repr. fertil. 1968. 17 P. 555-557.

170. Pederson C. H. Infertility and disease surveillance using a milk recording scheme in the Sahiwal district of Pakistan / C. H. Pederson // Trop. Anim. Health. Product. 1989. Vol. 21. - № 4. - P. 263 - 272.

171. Peluso J. J. Surface ultrastructural changes in granulosa cells of atretic follicles / J. J. Peluso, R. W. Steger, E. S. Hafez // Biol, of reprod. 1977. 16. 5. P. 600 604.

172. Peukert-Adam I. The ladge lureal cells of luteinized follicular cysts and corpora lutea periodica in cow. A cytometric study / I. Peukert-Adam, R. Schwarz, A. Boos, H. Gasse, E. Schwarz // J. Vet. Med. A. 1987. 34. P. 602 608.

173. Petroff M.G. Txpression of cytokine messenger ribonucleic acids in the bovine corpus luteum / M. G. Petroff, B. K. Petroff, J. L. Pate // Endocrinology. 1999. 140. P. 1018 1021.

174. Priedkalns J. Female reproductive system / J. Priedkalns // Textbook of vet/histology. Philadelphia, 1981. P. 309-336.

175. Qurrk S. Sucellular location of Progesterone in the bovine corpus luteum / S. Qurrk, D. Willcox, D. Parry, G. Thorburn // Biology of reproduction. 1979. 20/5. P. 1133- 1145.

176. Rao C. Dissimilarity of corpora lutea within the same ovaries or those from right and left ovaries of pigs during the estrous cycle / C. Rao, L. Edgerton //J. Repr. Fert. 1984. 70. 1. P.61 -66.

177. Rao C. Studies on the incidence of infertility in crossbred cattle in Hassan district of Karnataka / C. Rao, G. B., S. Seshadri // Ind/ J/ of Anim. Repr. 1983. 4. P. 66-69.

178. Reddy V. S .C. Role of reproductive health in improving the reproductive efficiency in cows / V. S. C. Reddy // Indian Diaryman. 1990. Vol.42. -N3.-P. 135-141.

179. Russel J. Grobe des corpus luteum und postpartum / J. Russel // Can. J. anim. Sci. 1972. 52./4. P. 645 658.

180. Sakai T. Studies on the development of the embryonic ovary in swine, cattle and horse //Jap. j. vet. res. 1955. 3(4). P. 183-198.

181. Saxena V. B. Why cow do not become pregnant / V. B. Saxena // Ind. Farmers' Dig. 1986.-Vol. 19.-№4.-P. 17-18, 40.

182. Schmidt G. Characterization of histamine receptors mediating contraction and relaxation of the ovarian follicle wall / G. Schmidt, P. Kannisto, Ch. Owman, B. Walles // Internat. j. fertil. 1987. 32. P. 399-406

183. Schwartz N. B. Dynamics of ovarian function / N. B. Schwartz / M. Hun-zicker-Dunn. N.Y., 1981. 87 p.

184. Shea J. D. Cellular composition of the cyclic corpus luteum of the cow / J. D. Shea, R. J. Rodgers, M. J. Occhio // J. Repr. Fert. 1989. 85. P. 483-487.

185. Singh C. S. Studies on the incidence of infertility in cows/ C. S. Singh, S. K. Singh. B. Singh//Ind. Vet. J. 1981.58. 11. P. 909-912.

186. Singh O. Histoenzymic studies on phosphatases and esterases in the corpus luteum of Indian buffalo / O. Singh, K. S. Roy // Indian J. of Anim. Sciences. 1999. 69/2. P. 100-102.

187. Smith M. F. Mechanisms associated with corpus luteum development / M. F. Smith, E.W. Mclntush, G. W. Smith // J. Anim. Sci. 1994. 72. P. 1857 -1872/

188. Steffan J. Resultats d'une enquete epidemiologique: Influence de facteurs affectant la fertelite et la fecondite des vaches laitieres / J. Steffan // Bull. Techn. Insem. Artif. № 43. P. 12-19.

189. Taveggia T. Problemi di infecondita / T. Taveggia // Bianco Nero. 1989. -An. 28.-№ 12.-P. 35-36.

190. Townson D. H. Regulation of prostaglandin synthesis by interleukin-ip in cultured bovineluteal cells / D. H. Townson, J. L. Pate // Biol. Reprod. 1994.51. P. 480-485.

191. Tsai S.-J. Prostaglandin F2 alpha regulates distinct physiological changes in early and mid-cycle bovine corpora lutea / S.-J.Tsai, M. C. Wiltbank // Biol. Reprod. 1998. Vol. 58. N 2. P. 346 352.

192. Van Bleukom. The cellular basis of mammalian reproduction / Van Bleu-kom, J. P. Motta. Baltimor, 1979. 252 p

193. Vaughan L. A histological study of corpora lutea from superovulated beef heifers / Vaughan L., Fitzpatrick E., Boland M. and Roche, J. // Animal reproduction science. 1996. P. 1-14.

194. Veum C. A. Negative energy balans / C. A. Veum // Modern Vet. Practice. 1984. 65.2. P. 154.

195. Wallach E. E. Investigation of mammalian ovulation with an vitro perfused rabbit ovary preparation / E. E. Wallach, K. H. Wright, Y. Hamada //Amer. j. obstetr. gynecol. 1978. 132. P. 728-738.

196. Weber A. F. Prevalence of atretic corpora lutea in ovaries of bovine fetuses /A. F. Weber, V. S. Cox, R. E. Shope, T. F. Fletcher, D. M. Lee // Am. J. Vet. Res. 1993. 54. 7. P. 1047 1050.

197. Weber D. M. Functional differences between small and large luteal cells of the latepregnant vs. non-pregnant cow / D. M. Weber, P. A. Fields, L. J. Romrell, S. Tumwatsorn, B. A. Ball, M. Drost, M. Fields // Biol. Repr. 1987. 37. P. 685-697.

198. Weir B. J. Ovulation and atresia / B. J. Weir, W. Rowlands // The ovary. N. Y., 1977. P. 265-284.

199. Wenzel J. The mammalian rete ovarii: a literature review / J. Wenzel / S. Odendhal //The Cornell vet. 1985.75. 3. P. 411-425.

200. Wiltbank M. C. Cell types and hormonal mechanisms associated with mid-cycle corpus luteum function / M. C. Wiltbank // J. anim.Sc, 1994. Vol. 72. N7. P. 1873-1883.

201. Zamboni L. The role of the mesonefros in the development of mammalian ovari // Endocrine physiopathology of the ovary / L. Zamboni, S. Upadhyay, J. Bezard / Eds R. Torrini, G. Reeves, R. Pineda. Amsterdam, 1980. P. 3-42.

202. Zayed A. E. Morphological and functional observations on the cyclic corpus luteum in Egyptian buffaloes (Bus bubalis) /A. E. Zayed, G. A. Mega-hed // Assiut veter. med. J., 1999. 40/80. 1999. P. 1 16.

203. Zemjanic R. Anestrus in cattle // Current therapy in the riogenology: diagnosis, treatment and prevention of reproductive disseases in animals / R. Zemjanic. Philadelphia, London, Toronto/ 1980. P. 193-199.

204. Zhao Y. Macrophages are the major source of tumor necrosis factor alpha in the porcine corpus luteum / Y. Zhao, J. Burbach, K. Roby, P. Terranova // Biol. Reprod. 1998. Vol. 59. N 6. P. 1385-1391.

205. Zieba D. Aktualne poglady na funkcje cialka zoltego / D. Zieba // Med. weter., 1996. R. 52. N 4. S. 216-218.

206. Эта работа выполнена в Башкирском государственном аграрном университете на кафедре акушерства, патанатомии и хирургии, в лаборатории морфологии, гистохимии и электронной микроскопии Всероссийского центра глазной и пластической хирургии «Ал-лопоант».

207. Приношу благодарность руководству и сотрудникам этих учреждений за содействие при выполнении работы.

208. Глубокую благодарность приношу доктору ветеринарных наук, профессору Сковородину Евгению Николаевичу за многочисленные советы и пособия, которыми я пользовался в течение всего периода обучения.

209. Глубокую благодарность приношу кандидату биологических наук Мусиной Ляле Ахияровне за помощь при освоении методов электронномикроскопического исследования.