Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Патоморфологические изменения эндокринных органов высокопродуктивных коров при дисфункциях яичников

Мустафин Равиль Хасанович

ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ЭНДОКРИННЫХ ОРГАНОВ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ ПРИ ДИСФУНКЦИЯХ ЯИЧНИКОВ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

- 3 дек 2009

Уфа - 2009

003486438

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Научный консультант:

доктор ветеринарных наук, профессор Сковородни Евгений Николаевич

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Иванов Александр Ильич, кандидат ветеринарных наук Буканов Азамат Мухтарович

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет»

Защита состоится «21» декабря 2009 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.02 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет». 450001, г. Уфа, ул. 50-летия Октября, 34, корп. 4.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет»

Автореферат размещен на официальном сайте ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» лтет/Ьзаи.га 18 ноября 2009 года

Автореферат разослан 20 ноября 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета, док гор ветеринарных наук, профессор

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Для эффективного ведения животноводства большое значение имеет высокий уровень воспроизводства животных, без чего нельзя обеспечить потребность крупных комплексов необходимым поголовьем (В.И. Фисинин, 2003; Н.М. Хилькевич, С.Н. Хилькевич, 2003; В.А. Середин, Р.Т. Кадыкоев, 2007; A.M. Чомаев, О.С. Митяшова, 2009; A. Peters, P. Ball, 2004). В регионы России ввезены тысячи племенных телок из-за рубежа, в частности в Республику Башкортостан более 7 тыс. В ближайшие годы будет импортировано еще 170 тыс. племенных животных. Их необходимо использовать не столько для получения товарного молока, а главным образом для получения высокопродуктивного потомства (В.И. Фисинин и др., 2008). Но низкий уровень воспроизводства не позволяет вести целенаправленную селекционно-племенную работу. Фактически за последние 15 лет в РФ получали около 75 телят на 100 коров (А.Н. Варнавский, 2006). Это приносит огромный экономический ущерб, превышающий потери, возникающие от всех заразных и незаразных болезней вместе взятых. Этот ущерб значительно увеличивается при содержании импортного высокопродуктивного скота (И.А. Порфирьев, 2006; A.M. Каримов, 2007; И. Калюжный, Н. Баринов, 2008; М.С. Lud, 2001).

Бесплодие коров и телок обуславливается многими причинами, среди которых ведущую роль играют: физиологически необоснованное кормление, нарушения условий содержания, техники искусственного осеменения, а также болезни гениталий и других органов (А.И. Варганов, 1988; A.M. Белобороденко, 1990; М.В. Косенко, 1991; И.А. Порфирьев, 1996; Н.И. Полянцев, 1999; М.А. Багманов, 2001; A.B. Андреева, 2003; Э.Н. Грига, 2003; А.Г. Нежданов, 2003; Ю.И. Костыркин, 2006; E.H. Сковородин и др., 2006; A.B. Жаров, E.H. Сково-родин, 2007; М.П. Ряпосова и др., 2007; H.H. Гавриленко, 2009; А.Н. Коваль, С.Г. Коваль, 2009; В.Я. Никитин и др., 2009; S. Chourewar et al., 2002; T.R. Overton, M.P. Waldron, 2004).

По мнению многих авторов, наиболее распространенной причиной симптоматического бесплодия коров являются функциональные расстройства яичников (А.Ю. Тарасевич, 1936; И.А. Бочаров, 1948; Г.А. Кононов, 1966; И.И. Родин, 1973; С.П. Беляков, 1972; В.А. Акатов и др., 1974; Г.А. Черемисинов, 1975; Г.В. Зверева и С.П. Хомин, 1976; B.C. Шипилов, 1977; И.Ф. Заянчковский, 1982; Н.И. Полянцев, Л.Н. Лисичникова, 1993; К.Д. Валюшкин, 1999; E.H. Сковородин, 1999; В.Ф. Дегай, 2000; М. Сануси, 2002; С.П. Еремин, 2004; В.В. Землянкин, 2004; А.Р. Шарипов, 2004; С.С. Боголюк, 2005; А.Г. Нежданов и др., 2007; А.Г. Нежданов и др., 2008; O.A. Бабань, 2009). Вместе с тем до сих пор мало работ, посвященных функционально-морфологическому анализу кле-точно-тканевого субстрата, с применением современных гистохимических и морфометричеекмх методик, позволяющих наряду с современными биохимическими и радиоиммунологическими методами осуществить объективную оценку репродуктивной системы. Поэтому изучение этиологии, патогенеза, патомор-фологии и разработка на этой основе эффективных приемов лечения и профилактики дисфункций яичников у продуктивных животных имеет большое зна-

чение в организации современного животноводства с интенсивным использованием коров и телок для воспроизводства.

Цель и задачи исследования. Целью нашего исследования было изучить патоморфологические изменения органов размножения и некоторых желез внутренней секреции при гипофункции, персистентном желтом теле и фолликулярных кистах яичников у высокопродуктивных коров.

Задачи исследования.

1. Изучить распространение заболеваний яичников у импортных коров и выявить клинико-морфологические формы их течения.

2. Выявить патологоанатомические, гистологические, гистохимические, гистоэнзиматические и ультраструктурные изменения в ова-риальных железах бесплодных коров с дисфункциями яичников.

3. Определить патологоанатомические, гистологические и гистохимические изменения в яйцепроводах, матке, дистальной части адено-гипофиза, щитовидной железе и надпочечниках бесплодных коров с дисфункциями яичников.

Наша работа является разделом комплексных исследований, проводимых на кафедре анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии под руководством профессора E.H. Сковородина.

Научная новизна. Получены новые данные о распространении дисфункций яичников у импортных коров, клиническом их проявлении и основных этиологических факторах. Используя комплекс морфологических, гистохимических, гистоэнзимологических, электронно-микроскопических и морфометри-ческих методов изучены гистологические особенности овариальных желез при гипофункции яичников, дано подробное описание цито- и гистохимии тканей яичников бесплодных коров по показателям нуклеопротеидов, гликогена, гли-копротеидов, различных групп гликозаминогликанов и липидов, оксидоредук-таз и гидролаз, что позволяет судить об уровнях и характере обменных процессов в клетках и тканях органа при различном состоянии репродуктивной функции и морфогенезе дисфункций яичников у бесплодных коров. С помощью изучения гистологических, гистохимических и морфометрических показателей оценена роль дистальной части аденогипофиза, щитовидной железы, надпочечников, матки и яйцепроводов в патогенезе дисфункций яичников.

Практическая значимость и реализация результатов исследований. Предложены новые методические подходы для изучения яичников, гипофиза, щитовидных желез, надпочечников и диагностики их заболеваний, позволяющие осуществить комплексную оценку морфофункционального состояния органа при акушерско-гинекологической диспансеризации с выборочным исследованием патологического материала от бесплодных коров с дисфункциями яичников. Установленные гистологические, гистохимические и морфометриче-ские показатели изменений органов размножения и некоторых желез внутренней секреции при гипофункции яичников, персистентном желтом теле, фолликулярных кистах яичника у коров в комплексе с клиническими, биохимическими исследованиями являются основой объективной оценки морфофункционального состояния репродуктивной системы при разработке способов диагно-

стики, лечения и профилактики дисфункций яичников у коров. Результаты исследования могут быть использованы при написании монографий, учебных пособий и соответствующих разделов руководств по патологической анатомии, ветеринарному акушерству и гинекологии.

Материалы диссертации включены: в «Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике болезней матки крупного рогатого скота», рассмотренные и рекомендованные для внедрения Научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства Республики Башкортостан (протокол №1 от 17.09.2009 г.), в учебное пособие «Диагностика, лечение и профилактика болезней яичников крупного рогатого скота» (Сковородин E.H., Мустафин Р.Х., 2009).

Апробация работы. Основные положения диссертации рассмотрены на расширенном заседании кафедры анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (протокол №2 от 22 октября 2009 г.). Фрагменты работы доложены и обсуждены на международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (Воронеж, 2005), VI Всероссийской научно-практической конференции «Агропромышленный комплекс и актуальные проблемы экономики регионов» (Майкоп, 2005), III международной межвузовской научно-практической конференции «Аграрная наука - сельскому хозяйству» (Самара, 2006), международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006), Всероссийской научно-практической конференции «Перспективы агропромышленного производства регионов России в условиях реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Уфа, 2006), международной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Д.А. Жданова (Москва, 2008), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Интеграция аграрной науки и производства» (Уфа, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Современные достижения ветеринарной медицины и биологии - в сельскохозяйственное производство» (Уфа, 2009), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы и пути развития животноводства» (Уфа, 2009), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Научное обеспечение устойчивого функционирования и развития АПК» (Уфа, 2009), международной научно-практической конференции «Образование. Инновации. Экология» (Уфа, 2009).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 статей, в том числе одна статья в издании, рекомендованном ВАК РФ.

CipyKTypa и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 158 страницах машинописного текста и включает разделы: общая характеристика работы, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы, приложение. Работа содержит 76 макро- и микрофотографий, электронно-

грамм, графиков. Список литературы включает 259 источников, в том числе 87 зарубежных.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Распространение заболеваний яичников у импортных коров и клини-ко-морфологические формы их течения.

2. Патологоанатомические, гистологические, гистохимические, гистоэн-зиматические и ультраструктурные изменения в овариальных железах бесплодных коров при гипофункции, персистентном желтом теле и фолликулярных кистах яичников.

3. Патологоанатомические, гистологические и гистохимические изменения в яйцепроводах, матке, дистальной части аденогипофиза, щитовидной железе и надпочечниках бесплодных коров при гипофункции, персистентном желтом теле и фолликулярных кистах яичников.

2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнена на кафедре анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии, в ОАО «Зубово», в МУСХП «Совхоз Шемяк», ООО «Агрофирма им. А. Цюрупы» Уфимского района, ГУСП «Тавакан» Кугарчинского района, КФХ «Артемида» Кармаскалинского района, ООО «Агрофирма Бай-рамгул» Учапинского района Республики Башкортостан, Уфимском мясоконсервном комбинате в период с 2004 по 2009 гг.

В хозяйствах исследовали воспроизводительную функцию коров с анализом причин бесплодия и распространения патологии половых органов. На основании этих данных отбирали животных для патоморфологического исследования. На Уфимском мясоконсервном комбинате проводили патологоанатоми-ческий осмотр туш и органов этих коров с последующим гистологическим и гистохимическим изучением полученного материала.

Яичники осматривали, отмечая их величину, наличие фолликулов и желтых тел. Яйцепроводы разрезали остроконечными ножницами и из средней части брали неразрезанный участок. Вскрывали полость матки и для морфологического исследования вырезали кусочки на уровне верхнего свода каудальной части рогов матки. Кусочки органов фиксировали в жидком азоте, жидкости Карнуа и 10% нейтральном формалине. Гипофиз извлекали целиком, отпрепарировали соединительнотканные структуры, разрезали на две половины. Одну фиксировали в жидкости Ценкера, а другую - в жидкости Буэна. Щитовидную железу препарировали, осматривали и кусочки из центральных участков долей фиксировали в жидкости Карнуа и 10% нейтральном формалине. Надпочечники разрезали с помощью пластинчатого аппарата и части органа помещали в эти же фиксаторы.

Материал из фиксирующих жидкостей обезвоживали и заливали в парафин по общепринятой методике (Г.А. Меркулов, 1969). С помощью роторного микротома получали срезы толщиной 5-6 мкм и после депарафинации окрашивали их гематоксилином и эозином (Г.А. Меркулов, 1969), паноптическим методом по А. РаррепЬет (1912). Коллагеновые волокна выявляли по ван Гизону,

по Маллори, аргирофильные импрсгнировали серебром по Бильшовскому в модификации Фута (Г.А. Меркулов, 1969). Дезоксирибонуклеопротеиды (ДНП) и рибонуютеопротеиды (РНП) по L. Einarson (1951), по J. Brächet (1953), по R.U. Felgen а. Н. Rossenbec (1924), гликоген и нейтральные гликозаминогликаны -по A.J1. Шабадашу (1949), кислые гликозаминогликаны - по H.F. Steedman (1950). Из материала,- фиксированного формалином, готовили срезы на замораживающем микротоме и окрашивали их Суданом III по Дадди и Суданом черным В по Лизону (А.И. Кононский, 1976). Кроме того, гипофиз окрашивали па-раальдегидфуксином оранжем Ж по S.N. Halmi в модификации А.П. Дыбана (1959), проводили ШИК-реакцию по J.F.A. McManus (1946), использовали модифицированный метод окраски с альциановым синим-ШИК-оранжем Ж (pH = 0,2).

Из пластинок яичников, фиксированных в жидком азоте в криостате, получали срезы толщиной 5-7 мкм и в них по прописям Э. Пирса (1962) и Р. Лил-ли (1969) выявляли активность дегидрогеназ сукцината (СДГ), лактата (ЛДГ), никотинамидадендинуклеотида восстановленного (НАДНзДГ), никотинамида-дениндинуклеотидфосфата восстановленного (НАДФН2ДГ). Активность щелочной фосфатазы выявляли в криостатных срезах по методу Гомори (Э. Пирс, 1962), а кислой фосфатазы - методом одновременного сочетания по Берстону (1962) и модификации 3. Лойда и др., 1982.

Активность оксидоредуктаз оценивали в клетках фолликулярного эпителия гранулезного слоя, в клетках внутренней и наружной тек, в клетках лютей-новых образований по В.В. Семеновой-Тян-Шанской и Л.А. Сайковой (1977) с использованием микроскопа с окуляром 7 и объективом 90. Для этого в тубус микроскопа вставляли измерительный окуляр с сеткой, содержащей 256 квадратов (8x8 мм), и с ценой делений квадрата 0,5x0,5 мм. Сетку накладывали в различных местах выше перечисленных структур и подсчитывали количества зерен диформазана - продукта гистохимической реакции нитросинего тетразо-лия с соответствующим ферментом. Активность гидролитических ферментов в структурах оценивали по 4-балльной системе.

Электронную микроскопию проводили по общепринятой методике. Ультратонкие срезы получали на ультратоме LKB-8800A (Швеция) и просматривали на электронном микроскопе JEM-100CXII при увеличениях 6000-27000.

В корковом веществе яичников ближе к белочной оболочке подсчитывали число клеток соединительной ткани в стандартном поле зрения и число тучных клеток относительно общего числа клеток соединительной ткани.

В дистальной части аденогипофиза подсчитывали относительные объемы, которые занимают хромофобы, ацидофилы, базофилы и строма железы. Для волюметрии щитовидной железы применяли метод точечного счета и под-• считывали удельные объемы коллоида, фолликулярного эпителия и стромы органа. Определяли индексы активности и склерозирования (В.Л. Быков, 1979). Ядерно-плазматическое отношение рассчитывали для клеток пучковой зоны коркового слоя надпочечников по площади ядер и цитоплазмы (К. Ташкэ, 1980). Полученную количественную информацию обрабатывали на персональном компьютере с использованием ¿-критерия Стьюдента.

Результаты исследований протоколировали и документировали таблицами и фотографиями с макро- и микропрепаратов. Микрофотографирование проводили цифровой фотокамерой ЭДсоп Соо1Р1х 4500.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Анализ воспроизводительной функции коров и распространение болезней яичников

Эффективность скотоводства во многом зависит от воспроизводства стада. Получение 70-80 телят на 100 коров не позволяет обновлять поголовье на 2530% и создает затруднения в селекционной работе в хозяйствах. В целом по Российской Федерации получают не более 70-75 телят на 100 коров. В Республике Башкортостан за последние 6 лет получали от 66 до 79 телят на 100 коров.

Это объясняется главным образом физиологически необоснованными системами кормления и содержания маточного поголовья. Неполноценное по энергетическому уровню кормление, несбалансированное по основным элементам питание, перегрузка рациона зерновыми кормами при недостаточности сена и практически полном исключении корнеплодов, длительное стойловое содержание коров, практикующееся во многих хозяйствах, ведет к глубоким нарушениям обмена веществ и негативно влияет на репродуктивную функцию коров.

В регионе у 33,5 % импортных коров отмечаются отклонения от состояния здоровья, 6 % этих животных пало и 4 % вынужденно убито. Отмечены высокие показатели заболеваемости телят. При диспансеризации у значительной части животных диагностировали гипотонию преджелудков, эластичность хвостовых позвонков, рассасывание 13-го ребра, ацидоз (в 70 % случаев декомпен-сированный), кетоз, миокардоз, болезни конечностей.

Широко распространены болезни органов размножения. Результаты исследований поголовья крупного рогатого скота ряда хозяйств РБ свидетельствуют о том, что эта патология выявляется у 20 % коров и телок. При этом болезни яичников регистрируются у 31 % бесплодных импортных коров. Чаще всего встречается гипофункция яичников (20,2 %). В некоторых хозяйствах это заболевание, на фоне патологии органов дыхания, сердечно-сосудистой системы, нарушений обмена веществ и болезней конечностей, достигает 73 %. Клинически эта патология проявляется длительной анафродизией, атрофией матки и яичников. Фолликулярные кисты яичников и персистентное желтое тело диагностировали у 7,8 % и 3,1 % бесплодных коров соответственно.

Клиническая картина подтверждались результатами патолого-анатомического исследования органов размножения бесплодных животных. У животных с клиническим диагнозом гипофункция яичников после убоя овари-альные железы были небольшого размера. Их длина колебалась от 3 до 4,5 см, ширина от 1,5 до 2,5 см, высота от 1,5 до 2,5 см, а объем варьировал от 9 до 28 см3.

Форма их была округлой, овальной, удлиненной, плоской, бобовидной.

Свободный край округлый, а брыжеечный - заостренный с хорошо выраженной брыжейкой яичника. Консистенция плотная, поверхность гладкая или с небольшими до 8 мм полупросвечивающими пузырьками и с наличием маленьких, чаще удлиненных, желтых и красных пятен.

На разрезе обнаруживали фолликулы, чаще с хорошо выраженной оболочкой, выделяющиеся на поверхности своей белизной или несколько спавшиеся с желтизной выстилающего слоя. При подсчете количества телец желтого и красного цвета на поверхности разреза находили от одного до четырех таких образований. Яйцепроводы были без видимых изменений. В матке у 30 % коров диагностировали хронический катаральный эндометрит. У части животных отмечали наличие небольших кист в центральной части аденогипофиза и в щитовидной железе. Надпочечники некоторых коров в корковом слое содержали радиально расположенные массы цвета охры, выделяющиеся на темном фоне коры. У 50 % животных с диагнозом гипофункция яичников в печени наблюдали хорошо выраженные признаки белково-жировой дистрофии и гемоди-намических изменений.

При персистентном желтом теле яичника, которое диагностировали на основании двукратного ректального исследования через 2-3 недели, при после-убойной диагностике в яичнике находили желтое тело, выступающее над поверхностью в виде грибовидного возвышения. При надавливании это образование с трудом отделяется от ткани яичника. На разрезе ткань плотная, ярко-желтого цвета, суховатая, дольчатость слабо выражена. Иногда в желтом теле обнаруживали полость, заполненную желтой жидкостью. Яичник обычно содержал фолликулы до 1 см в диаметре. Иногда желтые тела разной степени развития находили в обоих яичниках. У некоторых бесплодных коров желтое тело располагалось в паренхиме яичника и практически не выделялось на поверхности. У 13 % коров с персистентным желтым телом в матке диагностировали эндометрит. Дистрофические изменения в печени обнаруживали редко.

Для коров с фолликулярными кистами яичника характерно то, что у 60 % животных фолликулярные кисты сопровождались воспалительными процессами в матке и яйцепроводах. У 50% животных фолликулярные кисты находили в правом яичнике, у 20 % фолликулярные кисты обнаруживали в обоих яичниках, 30 % коров - только в левом яичнике. У всех коров обнаруживали в яичниках более 2 фолликулярных кист, а максимальное число не превышало 3.

Кроме кист, которые имели преимущественно тонкую стенку, в яичниках обнаруживали у части животных мелкие формирующиеся фолликулы, размером не превышающие 4 мм, и мелкие лютеиновые структуры размером не больше 5 мм. Крупных желтых тел и третичных фолликулов не находили, что свидетельствовало об отсутствии овуляторной функции органа.

Таким образом, патология яичников является одной из причин сим птоматического бесплодия коров и телок. В' то же время ряд кардинальных вопросов патоморфологии болезней овариальных желез остаются изученным недостаточно.

3.2 Функциональная морфология яичников крупного рогатого скота при дисфункциях яичников

При дисфункциях овариальных желез поверхностный эпителий формирует структуры типа вдавлений, крипт, каналов, папиллом, что является следствием неадекватного уровня гормонов в организме.

У коров при гипофункции яичников отмечаются выраженные фибропла-стические процессы в соединительной ткани и в сосудистой сети с атрофией гормонально-активных структур. Фиброзные изменения развиты в разной степени. Характерно, что артериолосклеротические изменения проявляются уже тогда, когда фиброз белочной оболочки и коркового вещества еще не выражен. В далеко зашедших случаях наблюдали гиалиноз. Средняя оболочка истончается и артериолы превращаются в плотные трубки с резко суженным или полностью закрытым просветом.

В яичниках с персистентным желтым телом архитектоника соединительной ткани близка к таковой в овариальных железах коров на стадии уравновешивания полового цикла. Гистохимические тесты и активность окислительно-восстановительных ферментов свидетельствуют о снижении обменных процессов в строме органа.

У коров с фолликулярными кистами яичников корковое вещество истончено, плотность расположения неполостных фолликулов очень низкая. Стенки кровеносных сосудов коркового вещества в состоянии геалинового перерождения. Мозговое вещество представлено толстыми коллагеновыми волокнами, идущими в виде разнонаправленных пучков. Крупные сосуды мозгового вещества без выраженных изменений.

В доступных нам литературных источниках лишь констатируется наличие тучных клеток (тканевых базофилов) в яичниках крупного рогатого скота (Волкова, 1983; Хонина, 1984; СиррБ й а1., 1959; Ыакашига & а1., 1987). Гранулированные формы тучных клеток мы выявляли в области связки и ворот яичника, в мозговом веществе по ходу кровеносных сосудов. По расположению можно выделить два типа тканевых базофилов. Периваскулярные - располагающиеся строго в виде однослойной цепочки сразу за мышечным слоем кровеносных сосудов. Стромальные - лежащие между мышечными волокнами соединительной ткани в белочной оболочке, в корковом и мозговом веществе, в наружной теке и сети яичника. Видимой связи с крупными кровеносными сосудами они не имели. По уровню дифференциации и степени накопления цито-плазмачических гранул можно выделить следующие формы тучных клеток. Недифференцированные клетки - округлые небольшого размера. Они содержали светлое эксцентрично расположенное ядро, содержащее 2-3 ядрышка. Количество гранул и их величина небольшая. Последние скапливались в одном из полюсов клетки. Слабо дифференцированные клетки - округлые средних раз-

меров с эксцентрично расположенным ядром. Ядерно-цитоплазматическое отношение небольшое, количество гранул значительное, они имели разную величину и располагались по периферии клетки. Дифференцированные гранулированные формы тучных клеток характеризовались крупными размерами, овальной или отростчатой формой. Ядро располагалось в центре, оно темное, цитоплазма содержала множество крупных темных гранул. Дифференцированные слабо гранулированные клетки характеризовались небольшим количеством ци-топлазматических гранул и диффузно окрашенным альциановым синим межклеточным веществом вокруг них. При дисфункциях яичника констатировали увеличение гранулированных форм тучных клеток. Это, видимо существенно изменяет микроциркуляторное русло, кровообращение и трофику тканей.

Одной из обязательных структур овариальных желез является сеть яичника. Открытая еще в 1870 году, у крупного рогатого скота она изучена недостаточно. Характерно всеобщее пренебрежение к этой структуре, обнаруживаемой в каждом яичнике при продольном разрезе, как к нормальному и активно функционирующему на протяжении всей жизни железистому образованию. В то же время ряд авторов приписывают сети явно отсутствующие у нее функции.

По нашим данным, для эпителия этой структуры характерна апокриновая секреция эозинофильного вещества. Гистологические и гистохимические свойства эпителия внутрияичниковой части очень близки фолликулярному эпителию неполостных фолликулов, что наводит на мысль об общности их происхождения. Важная роль сети яичника в фолликулогенезе подтверждается и другими авторами (Byskov, Lintern-Moore, 1973; Byskov, 1974, 1975; Merchant, 1975; Zamboni et al., 1979; Wartenberg, 1982). Эпителий соединяющей части по своей морфологии и реакции на изменения гормонального гомеостаза напоминает покровный эпителий, что особенно ярко проявляется при патологических состояниях яичника. Отведение ведущей роли этой структуре в развитии некоторых дисфункций яичника (Брейтерман, 1981, 1982, 1983, 1986) не подтверждается полученными нами данными.

При электронно-микроскопическом исследовании неполостных фолликулов коров установили ультраструктуру ооцитов. Их ядра характеризуются конденсированным гетерохроматином, ядрышками, не имеющими ретикулярной конфигурации, относительно ровной оболочкой. Объем ооплазмы значительный, органеллы характеризуются высоким уровнем дифференциации. Имеются специализированные мембранные контакты с фолликулярными ¿летками, являющиеся структурной основой биохимической и электрической связи. Наличие этих структур обуславливает координацию ответа фолликула на гормональную стимуляцию (Merk et al., 1972, 1974; Albertini, Anderson, 1974). Изучение оофолликулярных контактов убедило нас в том, что они имеют разную

п

функциональную окраску. Это проявляется в качественных показателях контактирующих поверхностей, в специфике и трансформациях самих контактных поверхностей.

В течение всей жизни животных подавляющее большинство половых клеток гибнут. В единичных исследованиях, посвященных анализу динамики этого процесса в яичниках плодов млекопитающих, выделяли несколько «волн дегенерации» (Волкова, 1983; Ingram, 1962; Gyraya, 1977). Однако описания морфологических проявлений элиминации генеративных, элементов противоречивы.

Элиминация неполостных фолликулов начинается с изменений, возникающих в ооците. Они характеризуются дисфункцией ферментативных процессов, изменениями мембран ооцита, появлением в ооплазме образований структур типа миелиноподобных образований. Гранулеза при этом исчезает более медленно, а ее место занимает соединительная ткань (без образования рубца). Также описывают этот процесс О.В.Волкова (1983), D.L.Ingram (1962), B.J.Weir, I.W.Rowlands (1977), M.F. Hay, R.M.Moor (1978), G.S.Greenwald (1978).

Атрезия овариальных фолликулов без полости при гипофункции яичников протекает так же, как и у здоровых животных, но характерна его массовость и более раннее наступление некротических изменений ооцита. Фолликулярный эпителий может при этом персистировать после полного исчезновения половой клетки.

На основании гистологических и гистохимических критериев мы считаем, что исчезновение полости антральных фолликулов у крупного рогатого скота может идти двумя путями: по типу облитерации и по типу лютеинизации. Морфогенез их существенно различается. Сущность облитерации в заполнении полости соединительнотканными элементами. При лютеинизации антрум исчезает, в результате гиперплазии внутренней теки и гранулезы. При описании этих процессов мы выделяли определенные стадии их развития, что не отрицает наличия промежуточных состояний между этими стадиями.

В решении проблем причинности большое значение имеет вопрос о первичности изменений. По нашим данным, в примордиальных и первичных фолликулах самые первые изменения появляются в ооците, а затем уже в фолликулярном эпителии и базальной мембране. Ни в одном из лютеинизированных полостных фолликулов мы не находили ооцита, даже при приготовлении серийных срезов. Это позволяет предположить, что лютеинизация насгупает в результате гибели ооцита.

При облитерации ооциты находили на всех стадиях заполнения полости. Это свидетельствует о хорошей защите генетических фондов организма. Только неполноценные клетки гибнут еще на ранних стадиях развития. Наши ре-

зультаты подтверждают данные О.В.Волковой (1983), D.L.Ingram (1962), M.F. Hay, R.M. Moor (1978). Согласно взглядам других исследователей - «ооцит руководит судьбой фолликула». Первоначальные изменения в пузырьках появляются некробиотическими процессами в ооцитах, и только после омертвения последних развиваются изменения в фолликулярных клетках (Боль, 1938; Войтке-вич, 1976; Авакаянц, 1972).

Количественная оценка активности окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов, .электронно-микроскопическое исследование позволяют нам утверждать, что первичные изменения выявляются в фолликулярном эпителии и внутренней теке. На первом этапе они проявляются изменением мембран митохондрий и лизосом, нарушениями ферментных систем. Это согласуется с фактом, что по сравнению с другими животными именно у млекопитающих метаболическая активность фолликулярного эпителия и теки играет основную роль, поскольку синтетическая активность в самом ооците очень низкая. В связи с этим всякое нарушение двух систем, ооцита и его окружения, может стать причиной атретического процесса.

При дисфункциях яичников атретический процесс характеризуется большей выраженностью дистрофических, некротических и склеротических процессов. Уже на ранних стадиях облитерации наступают некротические изменения клеток гранулезы. Во внутренней теке и стенках сосудов выявляются фук-синофильные волокна. Накопление кислых гликозаминогликанов свидетельствует о начальных стадиях фибриллогенеза коллагена (Шехтер, 1990). Это приводит к тому, что не происходит быстрого и полноценного заполнения полости, а могут образовываться большие участки гиалиновой ткани.

Морфология и функция лютеиновых структур яичника крупного рогатого скота остается предметом дискуссии (Грига, 1998; Середин, 1998; Gasse, 1983; Mbassa, 1989; Kastelic et al., 1990). По нашим данным, эти образования представлены не только желтыми телами, но и лютеинизированными фолликулами, кистами, атретическими телами. Лютеинизация распространена при снижении роста полостных фолликулов. Это, видимо, обусловлено изменением уровня и соотношения основных гонадотропных гормонов гипофиза (ФСГ и ЛГ).

Что касается желтых тел, то их морфологию нельзя рассматривать однозначно. По нашим данным, наряду с однотипностью строения, желтые тела беременности, полового цикла, персистентные, кистозные имеют выраженные различия структуры и эндокринной активности. Это тем более очевидно, что они подвержены заметным изменениям и быстрым инволюционным процессам.

Мы выделяем два типа персистгнтных желтых тел, которые оказывают тормозящее влияние на развитие овуляции. Механизмы этого воздействия разные, т.к. они обладают неодинаковой эндокринной активностью. Данные о наличии двух морфологических разновидностей персистентных желтых тел яич-

ников коров, отличающихся степенью атрофии лютеиновых клеток и фиброза стромы, подтверждаются результатами радиоиммунологических исследований уровня прогестерона при этом заболевании. Папьпаторно диагностируемы пер-систентные желтые тела яичников у 44 % коров гормонально неактивны, но в тоже время они препятствуют росту фолликулов и овуляции (Муруев, 1985). При этом необходимо учитывать, что желтые тела синтезируют не только прогестерон, но, по меньшей мере, еще два полипептидных гормона - релаксин и окситоцин. Возможно, последний является локальным регулятором функции яичника (Hunter, 1980).

3.3 Морфология дистальной части аденогипофиза коров при дисфункциях яичников

У коров на стадии уравновешивания полового цикла, у животных с пер-систентным желтым телом яичника и фолликулярными кистами основной объем занимают хромофобы: 65 %, 68 %, 69 % соответственно. Число базофилов больше у коров на стадии уравновешивания полового цикла и с фолликулярными кистами (20 % и 21 %), а меньше у коров с персистентным желтым телом - 14 % (разница достоверна при Р<0,05).

У коров с гипофункцией яичников уменьшается количество так называемых хромофобов (39 %), что можно объяснить грануляцией функционально неактивных клеток. Количество ацидофилов по отношению к базофилам больше (38 %), выше также относительный объем стромы органа по отношению к паренхиме. Зональность распределения различных клеточных типов в аденогипо-физе коров с гипофункцией яичников сохранена, но четко не выражена. Характерно, что у коров с гипофункцией яичников значительно чаще можно обнаружить в центральной зоне гипофиза крупные псевдофолликулы заполненные по-лихроматофильным коллоидом.

Цитологическое исследование дистальной части аденогипофиза коров с гипофункцией яичников по сравнению с коровами на стадии уравновешивания полового цикла свидетельствует о низкой активности СТГ-клеток. Они хорошо гранулированы, содержали небольшое пикнотичное ядро и небольшое ядрышко. ЛТГ-клетки проявляли признаки низкой активности. Они несколько уменьшались, гранулы их становились более грубыми, ядро содержало больше гете-рохроматина. Изменение гонадотропоцитов, также как и у ЛТГ-клеток, характеризовалось появлением признаков низкой функциональной, даже более ярко по сравнению с ЛТГ-клетками. ТТГ- и АКТГ-клетки мало изменялись у животных с гипофункцией яичников по сравнению с коровами на стадии уравновешивания полового цикла. Хотя они проявляли отдельные признаки низкой секреторной активности.

Таким образом, дистальная часть аденогипофиза у циклирующих и бесплодных коров имеет свои особенности. Ацидофилы, базофилы и хромофобы животных с желтыми телами полового цикла в яичниках и с фолликулярными кистами находятся в активных стадиях секреторного процесс а, что и обеспечивает высокий уровень метаболизма и гормонов у этих коров.

При гипофункции яичников морфофункциональная активность дисталь-ной части аденогипофиза снижается. Для животных с гипофункцией яичников типично снижение активности базофилрв и заметное увеличение популяции ацидофилов, которые в то же время малоактивны. При этом соматотропоциты (СТГ-клетки), пролактиноциты (ЛТГ-клетки) и гонадотропоциты (ГТГ-клетки) проявляют морфологические признаки низкой функциональной активности. Это объясняет отсутствие роста фолликулов и анафродизию. Образование крупных полостей в центральной зоне также свидетельствует о нарушении эндокринной функции гипофиза. У животных с персистентным желтым телом снижена гонадотропная функция и появляются дистрофические изменения и апоптоз в железистой ткани.

3.4 Морфология щитовидной железы коров при дисфункциях яичников

Морфометрические показатели щитовидных желез коров при различном состоянии репродуктивной системы (относительные объемы коллоида и эпителия) свидетельствуют, что наиболее активными являются железы животных с желтыми телами полового цикла и коровы с фолликулярными кистами (высокий индекс активности и самый большой индекс склерозирования). Морфометрические показатели желез при гипофункции яичников и персистентном желтом теле близки друг к другу. Но у коров с гипофункцией овариальных желез индекс склерозирования наименьший, и хотя объем коллоида при этом состоянии яичников несколько меньший, а эпителия чуть больший, развитие соединительной ткани снижает морфологические возможности обеспечения функции железы.

У коров с желтыми телами полового цикла в центральных участках долей щитовидных желез преобладают фолликулы среднего размера. Фолликулярный эпителий кубический или цилиндрический. Апикальные концы клеток вакуоли-зированы. Ядра тироцитов крупные. ДНП в них имеют структуру небольших глыбок, расположенных по периферии кариоплазмы. Рибонуклеопротеиды в цитоплазме тироцитов равномерно расположены и количество их умеренное. Гликоген содержится только в отдельных клетках. В коллоиде выражены вакуоли резорбции. В общем, он оксифильный и проявляет интенсивную ШИК-реакцию. В более крупных пузырьках в центре коллоид базофштьный. Соеди-

нительная ткань умеренно развита. Тучных клеток не много.

У коров с гипофункцией яичников в щитовидных железах преобладают крупные фолликулы. Эпителий кубический или плоский. В некоторых фолликулах выражена полярность (с одной стороны эпителий плоский, а с другой кубический). Ядра тироцитов гиперхромные, в состоянии пикноза, а некоторые сильно уплощенные. Выражена десквамация эпителия, клетки, находящиеся в просвете фолликула, с признаками некротических изменений. Коллоид гомогенный, с выраженными эозинофильными свойствами, без вакуолей резорбции. Наблюдали очень крупные, кистовидно измененные фолликулы, образованные в результате слияния нескольких пузырьков, а также выход коллоида в окружающую ткань. Часть пузырьков неправильной формы, сдавленные грубово-локнистой соединительной тканью. В отдельных участках отмечали кровоизлияния в строму органа. Сосуды с утолщенными стенками фиброзно изменены. Количество гранулированных форм тучных клеток увеличено.

У коров с персистентным желтым телом преобладают крупные фолликулы. Тиреоидный эпителий кубический или плоский. Ядра клеток гиперхромные, пикнотичные. Часть клеток десквамирована и свободно располагается в полости фолликулов. Коллоид гомогенный, без вакуолей, но характерна неравномерность его окрашивания в крупных и более мелких пузырьках. В некоторых участках коллоид изливается в окружающую ткань. Для животных этой группы формирование фиброзной ткани в интерстиции не характерно, но часто наблюдали венозную гиперемию и кровоизлияния.

У коров с фолликулярными кистами яичников в щитовидных железах преобладают мелкие фолликулы. Эпителий кубический или цилиндрический. В фолликулах полярность (с одной стороны эпителий плоский, а с другой кубический) не выражена. Ядра тироцитов гипохромные. Коллоид гомогенный, с выраженными эозинофильными свойствами, без вакуолей резорбции. Количество гранулированных форм тучных клеток умеренное.

3.5 Морфология надпочечников коров при дисфункциях яичников

Вариации функционального состояния клеток отражаются ядерно-плазматическим отношением. Результаты вычисления этого показателя свидетельствуют о том, что клетки пучковой зоны коры находятся в разных фазах секреторной активности (разница достоверна при Р<0,05). Наибольшим этот показатель был у коров с желтыми телами полового цикла в яичнике, а -наименьшим у животных с гипофункцией яичников. ¡--

У животных с желтыми телами полового цикла капсула органа хорошо развита, и от нее в паренхиму отходят пучки волокон соединительной ткани. Клетки клубочковой зоны округлые, средней величины. Ядра крупные с сетча-

той структурой хроматина. В клубочковой зоне жировых веществ, окрашивающихся Суданом черным В, содержится много, а нейтральных жиров очень мало. Пучковая зона хорошо выражена. Она в четыре раза больше клубочковой и в два раза больше сетчатой. Состоят пучки из крупных полигональных клеток с округлым светлым ядром. Фосфолипиды в виде мелких капель относительно равномерно распределены по зоне. Нейтральных жиров очень мало. В сетчатой зоне преобладают небольшие клетки с темными ядрами, угловатой формы. В мозговом веществе наибольшую часть объема занимают А-клетки, располагающиеся вокруг широких венозных синусов. Ядро их везикулярное, эксцентрично расположенное. Н-клетки полигональные и располагаются в виде скоплений, разделенных прослойками соединительной ткани. Существенной разницы в содержании нуклеопротеидов в А- и Н-клетках мы не находили. РНП в цитоплазме А-клеток имеют строго перинуклеарную локализацию.

У коров с гипофункцией яичников слоистость капсулы хорошо выражена. Наружный ее слой построен из грубых коллагеновых волокон, а внутренний -из рыхлой соединительной ткани, богатой малодифференцированными клетками. Клубочковая зона небольшая. Много нейтральных жиров в виде крупных капель. Клубочки образованы угловатыми клетками с темными ядрами и эози-нофильной цитоплазмой с низким уровнем РНП. Пучковая зона уменьшена и ее граница с клубочковой зоной хорошо выражена Клетки сильно вакуолизирова-ны содержат гиперхромные, пикнотизированные и крупные, округлые, с зернами хроматина, равномерно распределенными по кариоплазме ядра. Много нейтральных жиров. Некоторые пучки атрофированы. В сетчатой зоне клетки располагаются плотно и сосуды сдавлены. Цитоплазма клеток вакуолизированна, много пикнотичных ядер. Нейтральных жиров среднее количество. В мозговом слое выражена дегрануляция и дискомплексация А- и Н-клеток. У некоторых животных наблюдали очаговую инфильтрацию мозгового слоя лимфоцитами.

У животных с гипофункцией яичников отмечали реакцию стромы желез. Относительное количество соединительной ткани заметно повышалось, и при окраске по ван Гизону выявляли фуксинофильные волокна. В тяжах соединительной ткани увеличивалось количество гликогена и тучных клеток. Последние гранулированы. У некоторых животных наблюдали отложения амилоида в корковом веществе надпочечников. Это приводило к атрофии паренхиматозных элементов этих участков.

У коров с персистентным желтым телом отмечали, что дистрофические, атрофические и некротические процессы в корковом и мозговом веществе над-по гечников выражены слабее, чем при гипофункции яичников. Но, как и в щитовидных железах этих коров, характерно наличие венозной гиперемии, наличие инфильтратов. Отличительным признаком является небольшое количество нейтральных жиров и присутствие липохромов в клетках коры.

У животных с фолликулярными кистами яичника клетки клубочковой зоны округлые, несколько увеличены. Цитоплазма темная, зернистая или сетчатая. Ядра средней величины с сетчатой структурой хроматина. В клубочковой зоне жировых веществ, окрашивающихся Суданом черным В, содержится умеренное количество. Нейтральных жиров мало. Пучковая зона хорошо развита. Она в три раза больше клубочковой и в полтора раза больше сетчатой. Состоят пучки из крупных полигональных клеток с округлым светлым ядром. Цитоплазма зернистая, с высоким содержанием рибонуклеопротеидов. Нейтральных жиров мало, а фосфолипиды равномерно расположены в цитоплазме эндокри-ноцитов в виде мелких капель. В сетчатой зоне преобладают мелкие клетки с темными ядрами, угловатой формы. Встречаются и хорошо сохранившиеся клетки с небольшим содержанием жировых веществ в цитоплазме. В мозговом слое 70 % объема занимают А-клетки, располагающиеся вокруг широких венозных синусов. Ядро их везикулярное, эксцентрично расположенное. Н-клетки полигональные и располагаются в виде скоплений, разделенных прослойками соединительной ткани.

ВЫВОДЫ

1. Одной из причин бесплодия являются болезни органов размножения, которые выявляются у 20 % коров. Из акушерско-гинекологических заболеваний наиболее распространены дисфункции яичников в сочетании с патологией матки, которые регистрируются у 31% импортных высокопродуктивных коров. Гипофункция яичников у этих животных может носить массовый характер, и на фоне патологии органов дыхания, сердечно-сосудистой системы, нарушений обмена веществ и болезней конечностей достигает 73 %, проявляясь длительной анафродизией, атрофией матки и яичников.

2. У бесплодных высокопродуктивных коров в яичниках при их гипофункции отмечали более интенсивную атрезию всех типов фолликулов, фибро-пластические процессы в соединительной ткани и в сосудистой сети с атрофией гормональноактивных структур, что сопровождается снижением эндокринной и генеративной функции яичников.

3. У коров персистентные желтые тела по своим гистологическим, гистохимическим и гистоэнзимологическим признакам отличаются от желтых тел полового цикла. Они характеризуются атрофией и жировой дистрофией лютео-цитов, нарастанием фиброзных изменений соединительной ткани и гиалиноза сосудов. Важную роль в этих процессах играет снижение активности окисли-тельно-воч ;тановительных и гидролитических ферментов, кс орое особенно ярко выражено в персистентном желтом теле в состоянии инволюции.

4. У длительно бесплодных коров в яичниках с фолликулярными кистами отмечали отсутствие гистохимических признаков секреторной активности оболочек кистозно измененных фолликулов. Вследствие крупных размеров эти

, образования приводят к нарушениям гемодинамики органа, фиброзным и атро-

фическим изменениям стромы органа, гиалинозу сосудов. Продолжающийся рост фолликулов и их последующая лютеинизация ведет к накоплению значительного объема гормонально активной лютеиновой ткани, что необходимо учитывать при разработке способов диагностики и лечения этой патологии.

5. У коров с дисфункциями яичников отмечается нарушение функциональной системы гипофиз - щитовидная железа - надпочечники. Для животных с гипофункцией яичников типично снижение активности базофилов и заметное увеличение популяции ацидофилов. При этом соматотропоциты (СТГ-клетки), пролактиноциты (ЛТГ-клетки) и гонадотропоциты (ГТГ-клетки) проявляют морфологические признаки низкой функциональной активности. Это объясняет отсутствие роста фолликулов и анафродизию. Образование крупных полостей в центральной зоне и фибропластические изменения в соединительной ткани, также свидетельствуют о нарушении гонадотропной функции гипофиза. В щитовидной железе выражен гипотериоз, атрофия и коллоидная дистрофия железистого эпителия с кистовидным превращением отдельных фолликулов, гиали-нозом и склерозом фиброзно измененной стромы. В надпочечниках снижается морфофункциональная активность клеток железистой ткани всех слоев органа, выражены атрофические и дистрофические изменения в них.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

При выяснении этиологии и патогенеза болезней органов размножения крупного рогатого скота, оценки действия терапевтических средств на репродуктивную систему необходимо проводить выборочное патолого-анатомическое и патогистологическое исследование биопсийного и послеубой-ного материала от бесплодных коров.

У коров с гипофункцией яичников при гистологическом исследовании органов размножения и желез внутренней секреции следует учитывать: 1) преобладание атрофических процессов в железистой ткани яичников на всех стадиях развития фолликулов; 2) наличие выраженных фибропластических изменений в соединительной ткани с фиброзом, гиалинозом и склерозом стромы и сосудов; 3) морфофункциональные изменения желез внутренней секреции с развитием их гипофункции.

В лабораторной практике при морфологическом исследовании яичников наиболее рационально использовать приготовление серийных срезов из поперечных пластинок всего органа. Пластинки можно фиксировать и использовать в дальнейшем для стереометрического анализа.

Для комплексной оценки состояния основных структур органа необходимо определять в срезах объем коркового и мозгового вещества, подсчитывать относительное количество фолликулов с учетом их морфофут.ционального состояния, гистологической, гистохимической, гистоэнзимологической характеристикой покровного эпителия, стромы, сосудов и желтых тел.

Материалы проведенных исследований включены: в «Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике болезней матки крупного рогатого скота», рассмотренные и рекомендованные для внедрения Научно-техническим

советом Министерства сельского хозяйства Республики Башкортостан (протокол №1 от 17.09.2009 г.), в учебное пособие «Диагностика, лечение и профилактика болезней яичников крупного рогатого скота» (Уфа, 2009).

СПИСОК РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Мустафин, Р.Х. Функциональная морфология желез внутренней секреции телок / Р.Х. Мустафин, E.H. Сковородин // Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных: Материалы Международной научно-практической конференции. Воронеж, ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии, 2005. С. 130-135.

2. Мустафин, Р.Х. Показатели оценки воспроизводства скота / Р.Х. Мустафин, E.H. Сковородин // Агропромышленный комплекс и актуальные проблемы экономики регионов: Материалы VI Всероссийской научно-практической конференции. Майкоп, 2005. С. 171-172.

3. Мустафин, Р.Х. Микроморфология желез внутренней секреции коров / Р.Х. Мустафин, E.H. Сковородин // Современные проблемы интенсификации производства в АПК: Сборник научных трудов ВГНКИ. М.: ВГНКИ, 2005. С. 213-215.

4. Мустафин, Р.Х. Практические рекомендации по ликвидации бесплодия коров / Р.Х. Мустафин, E.H. Сковородин // Аграрная наука - сельскому хозяйству. Изв. Самар. гос. с.-х. акад. 2006. Вып. 2. С. 23-25.

5. Мустафин, Р.Х. Патоморфологическая характеристика дисфункций яичников коров / Р.Х. Мустафин, E.H. Сковородин // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных: Материалы Международной научно-производственной конференции. Воронеж, ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии, 2006. С. 124-127.

6. Мустафин, Р.Х. Борьба с бесплодием коров - важнейший вопрос скотоводства / Р.Х. Мустафин // Перспективы агропромышленного производства регионов России в условиях реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК»: Материалы Всероссийской научно-практической конференции. Уфа, 2006. С. 82-85.

7. Мустафин, Р.Х. Морфология яичников коров при их дисфункциях / Р.Х. Мустафин, E.H. Сковородин // Морфология. 2008. №4. С. 84-85.

Лицензия РБ на издательскую деятельность № 0261 от 10 апреля i j98. Подписано в печать 14.05.2009 года. Формат 60*84 1/16. Бумага типографская. Гарнитура Тайме. Усл. печ. л.'/, i6 сл. изд. л.-^^Ти-раж 100 экз. Заказ Мф^СИздательство Башкирского государственного аграрного университета. Типография Башкирского государственного аграрного университета. Адрес издательства и типографии: 450001, г. Уфа, ул. 50 летОктября, 34

Актуальность темы. Для эффективного ведения животноводства большое значение имеет высокий уровень воспроизводства животных, без чего нельзя обеспечить потребность крупных комплексов необходимым поголовьем (В .И. Фисинин, 2003; Н.М. Хилькевич, С.Н. Хилькевич, 2003; В .А. Середин, Р.Т. Кадыкоев, 2007; A.M. Чомаев, О.С. Митяшова, 2009; А. Peters, P. Ball, 2004). В регионы России ввезены тысячи племенных телок из-за рубежа, в частности в Республику Башкортостан более 7 тыс. В ближайшие годы будет импортировано еще 170 тыс. племенных животных. Их необходимо использовать не столько для получения товарного молока, а главным образом для получения высокопродуктивного потомства (В.И. Фисинин и др., 2008). Но низкий уровень воспроизводства не позволяет вести целенаправленную селекционно-племенную работу.

Фактически за последние 15 лет в РФ получали около 75 телят на 100 коров (А.Н. Варнавский, 2006). Это приносит огромный экономический ' ущерб, превышающий потери, возникающие от всех заразных и незаразных болезней вместе взятых. Этот ущерб значительно увеличивается при содержании импортного высокопродуктивного скота (И.А. Порфирьев, 2006; A.M. Каримов, 2007; И. Калюжный, Н. Баринов, 2008; М.С. Luci, 2001).

Бесплодие коров и телок обуславливается многими причинами, среди которых ведущую роль играют: физиологически необоснованное кормление, нарушения условий содержания, техники, искусственного осеменения, а также болезни гениталий и других органов (А.И. Варганов, 1988; A.M. Белобороденко, 1990; М.В. Косенко, 1991; И.А. Порфирьев, 1996; Н.И. Полянцев, 1999; М.А. Багманов, 2001; А.В. Андреева, 2003; Э.Н. Грига, 2003; А.Г. Нежданов, 2003; Ю.И. Костыркин, 2006; Е.Н. Сковородин и др., 2006; А.В. Жаров, Е.Н. Сковородин, 2007; М.П. Ряпосова и др., 2007; Н.Н. Гавриленко, 2009; А.Н. Коваль, С.Г. Коваль, 2009; В.Я. Никитин и др., 2009; S. Chourewar et al., 2002; T.R. Overton, M.P. Waldron, 2004). 3

По мнению многих авторов, наиболее распространенной причиной симптоматического бесплодия коров являются функциональные расстройства яичников (А.Ю. Тарасевич, 1936; И.А. Бочаров, 1948; Г.А. Кононов, 1966; И.И. Родин, 1973; С.П. Беляков, 1972; В.А. Акатов и др., 1974; Г.А. Черемисинов, 1975; Г.В. Зверева и С.П. Хомин, 1976; B.C. Шипилов, 1977; И.Ф. Заянчковский, 1982; Н.И. Полянцев, JI.H. Лисичникова, 1993; К.Д. Валюшкин, 1999; Е.Н. Сковородин, 1999; В.Ф. Дегай, 2000; М. Сануси, 2002; СЛ. Еремин, 2004; В.В. Землянкин, 2004; А.Р. Шарипов, 2004; С.С. Боголюк, 2005; А.Г. Нежданов и др., 2007; А.Г. Нежданов и др., 2008; О.А. Бабань, 2009). Вместе с тем до сих пор мало работ, посвященных функционально-морфологическому анализу клеточно-тканевого субстрата, с применением современных гистохимических и морфометрических методик, позволяющих наряду с современными биохимическими и радиоиммунологическими методами осуществить объективную оценку репродуктивной системы. Поэтому изучение этиологии, патогенеза, патоморфологии и разработка на этой основе эффективных приемов лечения И' профилактики дисфункций яичников у продуктивных животных имеет большое значение в организации современного животноводства с интенсивным использованием коров и телок для воспроизводства.

Цель и задачи исследования. Целью нашего исследования было изучить патоморфологические изменения органов размножения и некоторых желез'внутренней секреции при гипофункции, персистентном желтом теле и фолликулярных кистах яичников у высокопродуктивных коров.

Задачи исследования.

Г. • Изучить распространение* заболеваний яичников у импортных . коров и выявить клинико-морфологические формы их течения.

2. Выявить патологоанатомические, гистологические, гистохимические, гистоэнзиматические и ультраструктурные изменения в овариальных железах бесплодных коров с дисфункциями яичников.

3. Определить патологоанатомические, гистологические и гистохимические изменения в яйцепроводах, матке, дистальной части аденогипофиза, щитовидной железе и надпочечниках бесплодных коров с дисфункциями яичников.

Наша работа является разделом комплексных исследований, проводимых на кафедре анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии под руководством профессора Е.Н. Сковородина.

Научная новизна. Получены новые данные о распространении дисфункций яичников у импортных коров, клиническом их проявлении и основных этиологических факторах. Используя комплекс морфологических, гистохимических, гистоэнзимологических, электронно-микроскопических и морфометрических методов изучены гистологические особенности овариальных желез при гипофункции яичников, дано подробное описание цито- и гистохимии тканей яичников бесплодных коров по показателям нуклеопротеидов, гликогена, гликопротеидов, различных-, групп гликозаминогликанов иг липидов, оксидоредуктаз и гидролаз, что позволяет судить, об уровнях и характере" обменных процессов в клетках и тканях органа при различном состоянии репродуктивной функции и морфогенезе дисфункций яичников у бесплодных коров. О помощью- изучения гистологических, гистохимических и морфометрических: показателей оценена роль дистальной части аденогипофиза, щитовидной железы, надпочечников, матки и яйцепроводов в патогенезе дисфункций яичников.

Практическая значимость и реализациям результатов исследований. Предложены, новые методические подходы для изучения яичников, гипофиза, щитовидных, желез, надпочечников й: диагностики их заболеваний, позволяющие. -осуществить, комплексную оценку морфофункционального состояния^ органа при' акушерско-гинёкологической диспансеризации с выборочным исследованием патологического; материала от : бесплодных коров с дисфункциями яичников. . Установленные гистологические, гистохимические и морфометрические '.показатели изменений органов размножения и некоторых желез внутренней секреции при гипофункции яичников, персистентном желтом теле, фолликулярных кистах яичника у коров в комплексе с клиническими, биохимическими исследованиями являются основой объективной оценки морфофункционального состояния репродуктивной системы при разработке способов диагностики, лечения и профилактики дисфункций яичников у коров. Результаты исследования могут быть использованы при написании монографий, учебных пособий и соответствующих разделов руководств по патологической анатомии, ветеринарному акушерству и гинекологии.

Материалы диссертации включены: в «Рекомендации по диагностике, лечению и профилактике болезней матки крупного рогатого скота», рассмотренные и рекомендованные для внедрения научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства Республики Башкортостан (протокол №1 от 17.09.2009 г.), в учебное пособие «Диагностика, лечение и профилактика болезней яичников крупного рогатого скота» (Сковородин Е.Н., Мустафин Р.Х., 2009).

Апробация работы. Основные положения* диссертации рассмотрены на расширенном заседании кафедры анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (протокол №2 от 22 октября 2009 г.). Фрагменты работы доложены и обсуждены на международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (Воронеж, 2005), VI Всероссийской научно-практической конференции «Агропромышленный комплекс и - актуальные проблемы, экономики регионов» (Майкоп, 2005), III международной межвузовской научно-практической конференции «Аграрная наука -сельскому хозяйству» (Самара, 2006), международной- научно-производственной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006), Всероссийской научно-практической конференции «Перспективы агропромышленного производства регионов России в условиях реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Уфа, 2006), международной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения Д.А. Жданова (Москва, 2008), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Интеграция аграрной науки и производства» (Уфа, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Современные достижения ветеринарной медицины и биологии — в сельскохозяйственное производство» (Уфа, 2009), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы и пути развития животноводства» (Уфа, 2009), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Научное обеспечение устойчивого функционирования и развития АПК» (Уфа, 2009), международной научно-практической конференции «Образование. Инновации. Экология» (Уфа, 2009).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 статей, в том числе одна статья в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Распространение заболеваний яичников у импортных коров и клинико-морфологические формы их течения.

2. Патологоанатомические, гистологические, гистохимические, гистоэнзиматические и ультраструктурные изменения в овариальных железах бесплодных коров при гипофункции, персистентном желтом теле и фолликулярных кистах яичников.

3. Патологоанатомические, гистологические и гистохимические изменения в яйцепроводах, матке, дистальной части аденогипофиза, щитовидной железе и надпочечниках бесплодных коров при гипофункции, персистентном желтом теле и фолликулярных кистах яичников.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

выводы

1. Одной из причин бесплодия являются болезни органов размножения, которые выявляются у 20 % коров. Из акушерско-гинекологических заболеваний наиболее распространены дисфункции яичников в сочетании с патологией матки, которые регистрируются у 31% импортных высокопродуктивных коров. Гипофункция яичников у этих животных может носить массовый характер, и на фоне патологии органов дыхания, сердечнососудистой системы, нарушений обмена веществ и болезней конечностей достигает 73 %, проявляясь длительной анафродизией, атрофией матки и яичников.

2. У бесплодных высокопродуктивных коров в яичниках при их гипофункции отмечали более интенсивную атрезию всех типов фолликулов, фибропластические процессы в соединительной ткани и в сосудистой сети с атрофией гормональноактивных структур, что сопровождается снижением эндокринной и генеративной функции яичников.

3. У коров персистентные желтые тела по своим гистологическим, гистохимическим и гистоэнзимологическим признакам отличаются от желтых тел полового цикла. Они характеризуются атрофией и жировой дистрофией лютеоцитов, нарастанием фиброзных изменений соединительной ткани и гиалиноза сосудов. Важную роль в этих процессах играет снижение активности окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов, которое особенно ярко выражено в персистентном желтом теле в состоянии инволюции.

4. У длительно бесплодных коров в яичниках с фолликулярными кистами отмечали отсутствие гистохимических, признаков секреторной* активности оболочек кистозно измененных фолликулов: Вследствие крупных размеров эти образования» приводят к нарушениям гемодинамики органа, фиброзным и атрофическим изменениям стромы органа, гиалинозу сосудов. Продолжающийся рост фолликулов и их последующая'лютеинизация ведет к

135 накоплению значительного объема гормонально активной лютеиновой ткани, что необходимо учитывать при разработке способов диагностики и лечения этой патологии.

5. У коров с дисфункциями яичников отмечается нарушение функциональной системы гипофиз - щитовидная железа — надпочечники. Для животных с гипофункцией яичников типично снижение активности базофилов и заметное увеличение популяции ацидофилов. При этом соматотропоциты (СТГ-клетки), пролактиноциты (ЛТГ-клетки) и гонадотропоциты (ГТГ-клетки) проявляют морфологические признаки низкой функциональной активности. Это объясняет отсутствие роста фолликулов и анафродизию. Образование крупных полостей в центральной зоне и фибропластические изменения в соединительной ткани, также свидетельствуют о нарушении гонадотропной функции гипофиза. В щитовидной железе выражен гипотериоз, атрофия и коллоидная дистрофия железистого эпителия с кистовидным превращением отдельных фолликулов, гиалинозом и склерозом фиброзно измененной стромы. В надпочечниках снижается морфофункциональная активность клеток железистой ткани всех слоев органа, выражены атрофические и дистрофические изменения в них.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

При выяснении этиологии и патогенеза болезней органов размножения крупного рогатого скота, оценки действия терапевтических средств на репродуктивную систему необходимо проводить выборочное патолого-анатомическое и патогисто логическое исследование биопсийного и послеубойного материала от бесплодных коров.

У коров с гипофункцией яичников при гистологическом исследовании органов размножения и желез внутренней секреции следует учитывать: 1) преобладание атрофических процессов в железистой ткани яичников на всех стадиях развития фолликулов; 2) наличие выраженных фибропластических изменений в соединительной ткани с фиброзом, гиалинозом и склерозом стромы и сосудов; 3) морфофункциональные изменения желез внутренней секреции с развитием их гипофункции.

В лабораторной практике при морфологическом исследовании яичников наиболее рационально использовать приготовление серийных срезов из поперечных пластинок всегог органа. Пластинки можно фиксировать и использовать в дальнейшем для стереометрического анализа.

Для комплексной оценки состояния основных структур органа необходимо определять в срезах объем коркового и мозгового вещества, подсчитывать относительное количество фолликулов с учетом их морфофункционального состояния, гистологической, гистохимической, гистоэнзимологической характеристикой покровного эпителия, стромы, сосудов и желтых тел.

Материалы проведенных исследований включены: в «Рекомендации по диагностике, лечению- и профилактике болезней матки крупного рогатого скота», рассмотренные и рекомендованные для внедрения Научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства Республики Башкортостан (протокол №1 от 17.09.2009 г.), в учебное пособие «Диагностика, лечение и профилактика болезней яичников крупного рогатого скота» (Уфа, 2009).

1.4 Заключение

История изучения органов размножения животных имеет давнюю историю. Предположение о том, что «все живущее возникает из яйца» было высказано Гарве-ем еще в 1651 году. Российский академик Карл Максимович Бэр в 1827 году опубликовал работу об открытии яйца в яичнике суки. Ему первому удалось обнаружить яйцеклетки у других млекопитающих и человека. Уже в 1888 году в первом русском руководстве «Основания к изучению микроскопической анатомии человека и животных» профессор В.Н. Великий приводит более пятидесяти работ, посвященных строению яичника, а в 1896 году W. Nagel цитирует в своем обзоре более тысячи исследований в этой области. В дальнейшем число публикаций увеличивается в геометрической прогрессии. В настоящее время эти изыскания обобщаются в многотомном руководстве "The Ovary" (www.altavista.com). Отечественные разработки в этой области тоже многочисленны. Это связано с непосредственными запросами практики воспроизводства человека и животных.

Проанализировав литературу, посвященную нормальной и патологической морфологии яичников крупного рогатого скота, мы убедились, что дисфункции яичников наиболее распространенная причина симптоматического бесплодия (Г.А. Черемисинов, 1975; B.C. Шипилов, 1977; Н.И. Полянцев, JI.H: Лисичникова, 1993; Е.Н. Сковородин, 1999; С.П. Еремин, 2004; А.Г. Нежданов и др., 2008; О.А. Бабань, 2009). Вместе с тем, работ, посвященных анализу клеточного-тканевого субстрата органов размножения и эндокринных желез, выполненных с использованием современных функционально морфологических методов, недостаточно, они противоречивы и не позволяют дать объективную оценку репродуктивной системы при этой патологии.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материал и методы исследований

Работа выполнена на кафедре анатомии, патологической анатомии, акушерства и хирургии, в ОАО «Зубово», в МУСХП «Совхоз Шемяк», ООО «Агрофирма им. А. Цюрупы» Уфимского района, ГУСП «Тавакан» Кугарчинского района, КФХ «Артемида» Кармаскалинского района, ООО «Агрофирма Байрамгул» Учалинского района Республики Башкортостан, Уфимском мясоконсервном комбинате в период с 2004 по 2009 гг.

В хозяйствах исследовали воспроизводительную функцию коров (1531 животное) с. анализом, причин бесплодия и распространения патологии половых органов. На основании этих данных отбирали животных для патоморфологического исследования (35 коров). На Уфимском мясоконсервном комбинате проводили патологоанатомический осмотр туш и органов этих коров с последующим гистологическим и гистохимическим^йзучениемшолученного материшта. .

Яичники осматривали, отмечая их величину, наличие фолликулов ;и желтых тел. Яйцепроводы разрезали остроконечными;ножницами и из средней части брали неразрезанный:, участок. Вскрывали полость- матки и. для* морфологического исследования'вырезали кусочки на уровне верхнего свода каудальной части рогов матки. Кусочки органов фиксировали в жидком азоте, жидкости Карнуа и 10% нейтральном , формалине. Гипофиз извлекали целиком, - отпрепарировали соединительнотканные структуры, разрезали на две половины. Одну фиксировали в жидкости: Ценкера, а другую — в жидкости Буэна. Щитовидную железу препарировали, осматривали: и кусочки из центральных участков долей фиксировали в жидкости Карнуа и 10% нейтральном формалине. . Надпочечники разрезали с помощью пластинчатого аппарата' и части органа помещали в эти же фиксаторы.:

Материал из фиксирующих жидкостей обезвоживали и заливали в парафин по общепринятой методике (Г.А. Меркулов, 1969). С помощью роторного

40; микротома получали срезы толщиной 5-6 мкм и после депарафинации окрашивали их гематоксилином и эозином (Г.А. Меркулов, 1969), паноптическим методом по А. Pappenheim (1912). Коллагеновые волокна выявляли по ван Гизону, по Маллори, аргирофильные импрегнировали серебром по Билыновскому в модификации Фута (Г.А. Меркулов, 1969). Дезоксирибонуклеопротеиды (ДНП) и рибонуклеопротеиды (РНП) по L. Einarson (1951), по J. Brachet (1953), по R.U. Felgen а. Н. Rossenbec (1924), гликоген и нейтральные гликозаминогликаны - по A.JI. Шабадашу (1949), кислые гликозаминогликаны - по H.F. Steedman (1950). Из материала, фиксированного формалином, готовили срезы на замораживающем микротоме и окрашивали их Суданом Ш по Дадци и Суданом черным В по Лизону (А.И. Кононский, 1976). Кроме того, гипофиз окрашивали параальдегидфуксином оранжем Ж по S.N. Halmi в модификации А.П. Дыбана (1959), проводили ШИК-реакцию по J.F.A. McManus (1946), использовали модифицированный метод окраски с альциановым синим-ШИК-оранжем Ж (рН = 0,2).

Из пластинок яичников, фиксированных в жидком азоте в криостате, получали срезы толщиной 5-7 мкм и в них по прописям Э. Пирса (1962) и Р. Лилли (1969) выявляли активность дегидрогеназ сукцината (СДГ), лактата (ЛДГ), никотин-амидадендинуклеотида восстановленного (НАДН2ДГ), никотин-амидадениндинуклеотидфосфата восстановленного (НАДФН2ДГ). Активность щелочной фосфатазы выявляли в криостатных срезах по методу Гомори (Э. Пирс, 1962), а кислой фосфатазы - методом одновременного сочетания по Берстону (1962) и модификации 3. Лойда и др., (1982).

Активность оксидоредукгаз оценивали в клетках фолликулярного эпителия гранулезного слоя, в клетках внутренней и наружной тек, в клетках лютеиновых образований по В.В. Семеновой-Тян-Шанской и Л.А. Сайковой (1977) с использованием микроскопа с окуляром 7 и объективом 90. Для этого в тубус микроскопа вставляли измерительный окуляр с сеткой, содержащей 256 квадратов

8x8 мм), и с ценой делений квадрата 0,5x0,5" мм. Сетку накладывали в различных местах выше перечисленных структур и подсчитывали количества зерен

41 диформазана - продукта гистохимической реакции нитросинего тетразолия с соответствующим ферментом. Активность гидролитических ферментов в структурах оценивали по 4-балльной системе.

Электронную микроскопию проводили по общепринятой методике. Ультратонкие срезы получали на ультратоме LKB-8800A (Швеция) и просматривали на электронном микроскопе JEM-100CXH при увеличениях 600027000.

В корковом веществе яичников ближе к белочной оболочке подсчитывали число клеток соединительной ткани в стандартном поле зрения и число тучных клеток относительно общего числа клеток соединительной ткани.

В дистальной части аденогипофиза подсчитывали относительные объемы, которые занимают хромофобы, ацидофилы, базофилы и строма железы. Для волюметрии щитовидной железы применяли метод точечного счета и подсчитывали удельные объемы коллоида, фолликулярного эпителия и стромы органа. Определяли индексы активности и склерозирования (В.Л. Быков, 1979). Ядерно-плазматическое отношение рассчитывали для клеток пучковой зоны коркового слоя надпочечников по площади ядер и цитоплазмы (К. Ташкэ, 1980). Полученную количественную информацию обрабатывали на персональном компьютере с использованием /-критерия Стъюдента.

Результаты исследований протоколировали и документировали таблицами и фотографиями с макро- и микропрепаратов. Микрофотографирование проводили цифровой фотокамерой Nicon CoolPix 4500.

2.2 Результаты собственных исследований

2.2.1 Результаты клинико-гинекологического исследования высокопродуктивных коров зарубежной селекции

В регионы России ввезены тысячи племенных телок из-за рубежа, в частности в Республику Башкортостан импортировано более 7 тыс. животных. В ближайшие годы будет импортировано еще 170 тыс. гол племенного скота. Этих животных необходимо использовать не столько для получения товарного молока, а главным образом для получения высокопродуктивного потомства. Но низкий уровень воспроизводства не позволяет вести целенаправленную селекционно-племенную работу. Следовательно, постепенно, как это уже было в истории России неоднократно, мы можем потерять генетический потенциал завезенных животных. Кроме того, от уровня воспроизводства стада во многом зависит увеличение производства молока, повышение эффективности скотоводства.

Научный и практический опыт подтверждает тот факт, что при условии выполнения общих и специальных зооветеринарных мероприятий, включающих в се-бяфаздельное содержание животных с разным физиологическим состоянием, контроль полноценного кормления, профилактику и своевременное лечение гинекологических заболеваний, существует реальная возможность регулярно через каждые 10,5 месяцев получать от каждой коровы теленка. При этом воспроизводительная способность коров, не снижается и от них можно иметь 10-12 телят за время эксплуатации. Биологические возможности крупного рогатого скота позволяют получить от 100 коров 110-120 телят. При искусственном осеменении этот показатель достигает 90-100 телят, а при трансплантации эмбрионов—до 150 телят.

Фактически, за последние 15 лет, в РФ получали около 75 телят на 100 коров. В Республике Башкортостан этот показатель несколько выше и достигает 79%. Таким; образом, каждая- четвертая корова не дает в течение года теленка, а следовательно становится убыточной, не покрывая материальных затрат на содержание. Это приносит огромный экономический ущерб, превышающий потери, возникающие от всех заразных и незаразных болезней вместе взятых. Этот ущерб значительно увеличивается при разведении импортного высокопродуктивного скота. Выяс

43 нить причины бесплодия, сохранить воспроизводительную способность и продуктивность животных, получить здоровый, жизнеспособный приплод от импортного скота чрезвычайно важно.

В Уфимском районе, где мы проводили свои исследования, в 2006 году зарегистрировано, среди крупного рогатого скота, установлено 5759 больных животных. Среди них болезни органов размножения регистрировали у 256 коров (4,%% от числа больных). В 2007 году эти показатели достигали 4191 369 (8,8%), а в 2008 году - 5621 и 400 (7,1%) соответственно (таблица 1).