Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.07) на тему:Фармакотерапия коров при мастите с использованием комплексного препарата уберцид

На правах рукописи

ТРОШИН АЛЕКСЕЙ НИКОЛАЕВИЧ

ФАРМАКОТЕРАПИЯ КОРОВ ПРИ МАСТИТЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА

УБЕРЦИД

)

16.00.07 - Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

16.00.04 - Ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Краснодар 2003

Работа выполнена на кафедре ветеринарного акушерства и хирургии Кубанского государственного аграрного университета, в Краснодарском научно-исследовательском ветеринарном институте, клинические опыты и производственные испытания - в животноводческих хозяйствах Краснодарского края.

V

Научные руководители:

Заслуженный деятель науки Кубани, доктор ветеринарных наук, профессор Ильинский ЕЛЗ.,

Заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Шипицын А.Г.

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Турченко А.Н., доктор ветеринарных наук, профессор Париков В. А.

Ведущая организация: Воронежский государственный

аграрный университет им. К. Д. Глинки

Защита диссертации состоится 2003 г. в « » часов

на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 в Кубанском государственном аграрном университете (350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета.

Автореферат разослан

« » ^

2003 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, профессор

2оо? -А

Iffjf

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность темы. В патологии коров одно из центральных мест занимают неспецифические маститы, сдерживающие темпы увеличения производства молока и наносящие хозяйствам огромные убытки, обусловленные снижением молочной продуктивности больных животных, снижением качества и технологических свойств молочной продукции, преждевременной выбраковкой потерявших племенную ценность коров, опасностью использования молока из пораженных четвертей вымени для пищевых целей людям и при кормлении телят.

Несмотря на очевидные научные достижения в изучении физиологии и патологии молочной железы у животных, которые нашли отражение в работах А.П. Студенцова (1949 - 2000), Г.В. Зверевой (1964 - 1983), Д.Д. Логвинова (1971,1979), А.Г. Шипицына (1981), В.И. Мутовина (1974, 1983), В.А. Парикова (1970 - 2001), Н.М. Хилькевича (1967 - 1994), В.Я. Никитина (1970 - 1994), М.Г. Миролюбова (1979 - 1991), А.И, Ивашуры (1972 - 1998), Е.В. Ильинского (1977 - 1999), В.И. Слободяника (1982 - 2000), А.Н.Турченко, Ю.И. Попов (2001) H.S. Heidrich, W. Renk (1963), W. Lesser (1989) и других отечественных и зарубежных ветеринарных акушеров, в последние годы наблюдается определенная тенденция роста удельного веса мастита в стадах крупного рогатого скота, которая связана с неблагоприятным влиянием ряда объективных и субъективных факторов.

Проводимые профилактические мероприятия не всегда достигают желаемой цел^, что обусловлено, с одной стороны, бессистемностью и некомплексностью осуществления, и, с другой стороны, их несовершенством на почве недостаточно полной изученности этиопатогенеза воспаления молочной железы у коров. В связи с этим, в практике ветспециалистов возрастает роль лечебной работы. К сожалению, последняя далеко не во всех случаях оказывается достаточно эффективной, что, в определенной мере, связано с нерациональным применением лечебных приемов и значительным распространением в окружающей среде штаммов возбудителей неспецифических маститов, устойчивых к антимикробным веществам (антибиотикам, сульфаниламидам, нитрофуранам,). Содержащиеся в используемых противомастит-ных препаратах и отличающихся лишь антимикробным действием, эти лекарственные средства, приводят к дополнительномураздражению тканей вымени при введении их внутрицистернально. С учетом изложенного, очевидна необходимость усовершенствования лечебных мероприятий при неспецифических маститах у коров. Это и определило цель и задачи нашей научной работы.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось повышение эффективности лечебных мероприятий при мастите у коров на основе уточнения его этиопатогенеза и Р«работкр^Щ^2й®0®ЯЗЧгитного пРе~

БИБЛИОТЕКА

Cf

О» *»«

парата комплексного лечебного действия, предназначенного для накожного применения и не содержащего антибиотики, сульфаниламиды и нитрофура-ны.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

а) изучить в динамике распространение мастита в стадах коров хозяйств Краснодарского края, определить наносимые им убытки;

б) уточнить особенности этиологии и некоторые аспекты патогенеза мастита у коров в общественном животноводстве Кубани, а также основные направления профилактики этого заболевания;

в) разработать новый эффективный, экологически безвредный фито-химиотерапевтический противомаститный препарат, не содержащий антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны, для его применения путем накожных аппликаций;

г) дать экспериментальную (фармако-токсикологическую) оценку специфического действия и безвредности разработанного нового противо-маститного препарата, определить рациональную схему его применения;

д) в сравнительном аспекте установить терапевтическую эффективность нового противомаститного препарата при скрытом и клинически выраженном воспалении вымени у коров.

Исследования выполнены в соответствии с планом научно-исследовательских работ Кубанского госагроуниверситета по заданию 31.10 (№ госрегистрации 01910049842).

Научная новизна. При проведении научных исследований выяснена степень распространения мастита в стадах коров хозяйств Краснодарского края с учетом экологических условий региона и особенностей технологии ведения молочного скотоводства. Установлены непосредственные, способствующие и предрасполагающие этиологические факторы мастита у коров, что позволило определить и конкретизировать основные направления профилактических мероприятий. Уточнена роль условно патогенной микрофлоры, общей неспецифической резистентности организма и локального иммунитета вымени в этиопатогенезе и проявлении неспецифического воспаления молочной железы. Полученные данные послужили теоретической основой усовершенствования лечебных мероприятий при этом заболевании. В соавторстве с Е.В. Ильинским, М.Р. Кираносян разработан новый фито-химиотерапевтический противомаститный препарат уберцид для накожных аппликаций, не содержащий антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны, впервые дана ему соответствующая экспериментальная и клиническая оценка. В Госкомизобретений РФ подана заявка на предполагаемое изобретение в форме нового лекарственного средства, получено положительное решение.

Практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований по утрчнению этиопатогенеза мастита у коров послужили предпосыл-

> (тл

кой усовершенствования лечебно-профилактических мероприятий, повышения их эффективности при этом заболевании. Предложенный новый фито-химиотерапевтический противомаститный препарат уберцид, обладающий комплексным терапевтическим действием, при его накожных аппликациях обеспечивает сравнительно высокую результативность лечебной работы при скрытом (субклиническом) и клинически выраженном мастите у коров. Применение этого препарата для санации вымени во время сухостоя в значительной мере способствует профилактированию воспаления молочной железы в послеродовом периоде.

Апробация работы и реализация результатов исследований. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на научных конференциях факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета (1998 - 2001 гг.), Международной научно-производственной и учебно-методической конференции, посвященной 30-летию образования кафедры акушерства Ставропольской госсельхозакадемии (Ставрополь, 1998), Международной научно-производственной конференции, посвященной 30-летию ВНИВИПФиТ (Воронеж, 2000), Научной конференции, посвященной 55-летию Краснодарской НИВС (Краснодар, 2001), Международной научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора И. А. Бочарова (Санкт-Петербург, 2001), научно-производственных совещаниях-семинарах ветеринарных специалистов Краснодарского края в 1999 - 2001 гг.

Практические рекомендации по итогам проведенных исследований с положительными результатами внедрены в ветеринарную практику 4-х хозяйств Кубани. Материалы диссертации используются в учебном процессе на факультетах ветеринарной медицины и зооинженерном КубГАУ при изучении курса «Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных».

Публикации. Основные результаты исследований, включенные в диссертацию, опубликованы в 7 научных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 147 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, изложения материала и методов исследований, результатов проведенных исследований с их обсуждением, выводов и практических предложений, библиографического указателя, включающего 180 источников, в том числе 46 иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована 25 таблицами.

Основные положения, выносимые на защиту. 1. Результаты изучения, уточнения некоторых аспектов этиопатогенеза мастита у коров в условиях Краснодарского края, послужившие основой усовершенствования профилактических мероприятий и разработки нового противомаститного препарата.

2. Материалы разработки нового противомаститного препарата Уберцид для накожных аппликаций и его экспериментально-клинической оценки при воспалении вымени у коров.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась в соответствии с планом научных исследований КГАУ в 1997 - 2000 гг на кафедре ветеринарного акушерства и хирургии, в Краснодарском НИВИ (НИВС), а также в ветлаборатории и хозяйствах Ти-машевского района, хозяйствах других районов Краснодарского края. Клинические опыты осуществлялись на коровах черно-пестрой и айширской пород с продуктивностью от 2,5 - 3 до 5 - 6 тыс. кг молока за лактацию, зимний рацион которых включал сено, сенаж, силос, корнеплоды, солому и комбикорм. Основу летнего рациона составляли зеленые корма и концентраты при круглогодовом стойловом содержании. Доение машинное, двукратное. При постановке экспериментов использовали лабораторных животных - белых мышей, крыс, морских свинок и кроликов.

Удельный вес мастита в стадах коров, соотношение клинически выраженных форм и скрытого мастита, степень влияния на возникновение заболевания различных факторов, а также наносимый экономический ущерб за счет недополучения молока изучали на основании анализа отчетных данных, соответствующей ветеринарной документации, материалов акушерско-гинекологической диспансеризации крупного рогатого скота.

Диагностику маститов, определение характера их проявления осуществляли по результатам клинических исследований коров, проводимых по общепринятой методике (А.П. Студенцов и др., 1986, 2000) и лабораторных исследований секрета вымени - реакцией с 5%-ным раствором димастина, пробой отстаивания, подсчетом соматических клеток в счетной камере с сеткой Горяева по Н.М. Хилькевичу (1968). Микробиологические - путем посева на питательные среды с подсчетом количества выросших микробных колоний и идентификацией выделенных бактерий и грибов по культуральным, биохимическим, морфологическим, тинкториальным, гемолитическим и патогенным свойствам.

При изучении этиопатогенеза мастита у коров и влияния на организм животных испытуемого противомаститного препарата проводили исследования: а) клинические по общепринятой методике; б) гематологические (определением в крови содержания гемоглобина - эритрогемометром, количества эритроцитов и лейкоцитов - в счетной камере с сеткой Горяева, характера лейкограммы - микроскопированием мазков, окрашенных по Романовскому-Гимза); в) биохимических (определением содержания в сыворотке крови общего белка - рефрактометрически, белковых фракций - электрофорезом на бумаге, общего кальция - комплексометрическим способом по Д.Т. Волкову,

(1970), фосфора неорганического - с ванадий-молибденовым реактивом, каротина и ретинола - спектрометрически по Боссею в модификации A.A. Анисовой (1969), глюкозы - в цельной крови по цветной реакции с ортотолуиди-ном, щелочного резерва - диффузным методом по И.П. Кондрахину (1976); г) иммунологические - для установления уровня общей неспецифической естественной резистентности организма (путем определения бактерицидности крови по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) и фагоцитарной активности * лейкоцитов крови по B.C. Гостеву (1950), а также локального иммунитета

вымени (определением фагоцитарной активности лейкоцитов молока по Н.К. Оксамитному (1979) и лизоцимной активности молока по В.Н. Мутовину iJ (1974), используя в качетсве тест-микробов золотистый стафилококк и ки-

шечную палочку. Титр спермиоантитела в сыворотке крови устанавливали по методу, предложенному К. Братановым и В. Диковым (1959).

Новый противомаститный препарат уберцид, предназначенный для накожных аппликаций, разработан с учетом данных о физико-химических и биологических свойствах, совместимости компонентов, используемых при синтезировании готового продукта и результатов пробных испытаний в различных сочетаниях.

В результате лабораторных исследований дана оценка физико-химических свойств препарата по внешнему виду, запаху, цвету, консистенции, вкусу, плотности, pH, температуре плавления, содержанию основных активно действующих веществ (АДВ) в соответствии с имеющимися рекомендациями.

В соответствии с требованиями Ветфармбиосовета РФ разработанному противомаститному препарату уберцид дана экспериментальная (фар-мако-токсикологическая) оценка, которая включала определение его специфичности действия и безвредности.

Специфичность действия уберцида устанавливали путем изучения: а) антимикробной (антибактериальной, фунгистатической и фунгицидной) активности - методами диффузии и серийных разведений с использованием элективных питательных сред; б) противовоспалительного влияния - на лабораторных животных, у которых вызывали экспериментально воспалительный процесс в коже и подкожной клетчатке по методикам, описанным Ж.И. Абрамовым (1954); в) влияния на регенеративные процессы у лабораторных животных с экспериментально воспроизведенными кожно-мышечными ра> нами (по JI.3. Пономаревой-Астраханцевой, 1954); г) воздействия накожных аппликаций препарата на защитные свойства вымени путем выявления изменений фагоцитарной активности лейкоцитов молока и лизоцимной активности молока.

О стабильности уберцида в процессе хранения при разных режимах в течение 3-х лет судили по изменениям внешнего вида, содержания основных АДВ, антимикробной активности и других свойств. Суждение о фармакоки-

нетике уберцида при его однократном нанесении на кожу четверти вымени стало возможным в результате определения основных АДВ в молоке в разные сроки после аппликации препарата в разных дозах.

Безвредность препарата определяли по его местному раздражающему действию при нанесении на конъюнктиву глаза кролика (по развитию гиперемии) и кожу вымени коров (по увеличению количества лейкоцитов в молоке), аплергизирующему влиянию после многократных применений, а также в опытах по установлению острой токсичности препарата при его пе- '

роральном и подкожном введении лабораторным животным и опытах по выявлению хронической токсичности препарата при накожном применении лабораторным животным и коровам с изучением общего токсического дейст- 1

вия, гонадотоксического, эмбриотоксического, тератогенного, мутогенного влияния в соответствии с рекомендациями Ветфармбиосовета РФ. Клиническую оценку терапевтической эффективности уберцида при его накожных аппликациях в оптимальных дозах проводили в сравнении с базовыми противомаститными препаратами, применяемыми внутрицистернально, на коровах со скрытым и клинически выраженным маститом, которых по принципу пар-аналогов разделяли в опытные и контрольные группы.

Основными критериями оценки эффективности лечения служили: исчезновение признаков воспаления во всех пораженных четвертях вымени с восстановлением молочной продуктивности коров и качества молока, сроков выздоровления. До и после завершения курса лечения выборочно у леченных животных проводили гематологические, биохимические, иммунологические, микробиологические исследования, изучали физико-химические свойства молока.

В специальной серии опытов изучали эффективность фармакопро-филактики мастита у коров в послеродовом периоде путем использования для санации вымени во время сухостоя уберцида и других противомаститных препаратов.

Определение экономического ущерба, наносимого маститом у коров, а также установление экономической эффективности лечения больных коров проводили по методике, предложенной Главного ветеринарного упровления СССР (1981) и кафедрой акушерства Казанского ветеринарного института. Цифровой материал подвергли биометрической обработке по методике, описанной И.А. Ойвиным (1960) и Е.К. Меркурьевой (1964).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Распространение воспаления вымени у коров в хозяйствах Краснодарского края, наносимый маститом экономический ущерб.

По данным ветеринарной статистики, заболеваемость коров маститом в хозяйствах Краснодарского края до 1986 г не превышала 9 - 13%, в последующие же годы отмечена тенденция роста удельного веса воспаления вымени в молочном скотоводстве региона. Так, в 1993 - 2000 гг. мастит обнаруживался у 19 - 23% коров при заметном снижении поголовья последних. В отдельных хозяйствах заболеваемость коров маститом достигала 50%. По нашему мнению, указанная тенденция объясняется влиянием ряда факторов, в том числе, переводом молочного скотоводства на индустриальную основу с круглогодовым стойловым содержанием, ухудшением экологических, социально-экономических условий. Соотношение клинически выраженных форм и скрытого (субклинического) мастита у коров варьирует в пределах 1:3-8, что свидетельствует о явном преобладании последнего.

Согласно результатам наблюдений, проведенным в 4-х хозяйствах, из 1656 коров с острым воспалением вымени были диагностированы следующие формы клинически выраженного мастита: серозный - у 19,8% животных, серозно-катаральный - у 27,1%, катаральный - у 20,6%, фибринозный - у 13,7%, гнойный - у 6,4%, геморрагический - у 12,4% животных.

Выявлена следующая закономерность: чаще (у 83% коров) в воспалительный процесс вовлекаются 1 - 2 четверти вымени, реже (у 17% коров) -3-4 четверти. Причем, обращает на себя внимание преимущественное поражение задних четвертей вымени (у 64,4 % коров).

Наблюдениями установлено, что в послеродовом периоде мастит проявлялся у 40,8% коров из общего числа заболевших животных, у 38,2% коров - в течение лактации после завершения послеродового периода, а у 21,0% коров - во время запуска и сухостоя.

Об убытках, наносимых маститом у коров, можно судить по следующим данным. Согласно отчетным материалам, ежегодно в хозяйствах Кубани в связи с необратимыми изменениями в вымени на почве хронического мастита выбраковывается 5500 - 6000 коров. Более 2% произведенного молока в хозяйствах, неблагополучных по маститу у коров, выбраковывается из-за снижения его качества и технологических свойств. В хозяйствах, в которых удельный вес мастита у коров достигает 25 - 50%, заболеваемость новорожденных телят острым расстройством пищеварения с явлениями диареи на 26,8% превышает заболеваемость телят в хозяйствах с удельным весом мастита у коров не более 5 - 12%. Наибольший экономический ущерб мастит наносит в связи с недополучением большого количества молока на почве значительного снижения молочной продуктивности коров, переболевших

воспалением вымени. Так, по данным учета молочной продуктивности в четырех хозяйствах Краснодарского края в течение одного года, удой коров, переболевших маститом, на 416 кг или 12,4% оказался ниже, чем у коров, не болевших маститом.

При дополнительных исследованиях установлено, что переболевание коров скрытым маститом обусловливает снижение их молочной продуктивности за лактацию на 11,5%, а клинически выраженным маститом - на 24,9% (в среднем на 18,2%).

При численности стада коров в хозяйствах Краснодарского края от 600 до 1500 животных (в среднем 1050) с молочной продуктивностью 3400 -4000 кг молока (в среднем 3700 кг), удельном весе мастита в среднем 19%, снижении молочной продуктивности у коров, переболевших маститом, за лактацию в среднем на 12 - 18% и реализационной цене 1 кг молока 5 рублей, убыток от недополучения молочной продукции в хозяйстве за год не менее 550000 руб.

3.2. Материалы к характеристике некоторых особенностей этиопатогенеза мастита у коров.

По нашим наблюдениям, подтверждающим литературные данные, основными этиологическими факторами, способствующими возникновению мастита у коров, являются нарушения технологии и режима их запуска (особенно высокопродуктивных животных при их ускоренном запуске без ограничения дачи молокогонных кормов и сокращения числа доений), машинного доения (недодаивание задних, более продуктивных четвертей, доение уже освобожденных от молока передних четвертей, перебои вакуума и частоты пульсаций в доильных аппаратах), механические травмы вымени, несоблюдение правил гигиены доения, антисанитарные условия содержания животных, неблагоприятные воздействия физических (термических) факторов в зимнее время (переохлаждение) и летом (перегревание).

Под влиянием перечисленных способствующих этиологических факторов происходит раздражение, травмирование и энзогенное (галактогенным и лимфогенным путем) инфицирование тканей вымени, что является непосредственной причиной воспаления молочной железы. Последнее характеризуется нарушением гемодинамики в молочной железе, деструктивными изменениями в паренхиме и интерстиции, болевыми явлениями, парабиозом нервных элементов, ослаблением лактоционной функции, качественными изменениями молока. Это подтверждено клиническими и патолого-морфологическими исследованиями.

Судя по материалам проведенных микробиологических исследований секрета из воспаленных четвертей вымени больных маститом коров, в 96% случаях в начале развития воспалительного процесса выявлен его ин-

фекционный характер. При последующих исследованиях микробы из пораженного вымени выделялись во 100 % случаев: стрептококки, стафилококки, кишечная палочка, грибы и другие микроорганизмы, причем в 89 % случаев в виде монокультур. У 73,4 % выделенных микробных культур отмечена устойчивость ко многим антибиотикам, сульфаниламидам. Установлено, что у 22 % выявленных больных маститом коров воспалению вымени предшествовал эндометрит (из вымени и из матки при этом выделена идентическая микрофлора), что позволяет предположить в этих случаях гематогенный путь инфицирования тканей молочной железы.

При этом патогенные свойства у возбудителей мастита отмечены при клинически выраженном мастите почти в 2 раза чаще, чем при скрытом мастите.

Как показали иммунологические исследования, существенную отрицательную роль в возникновении и проявлении мастита у коров играет снижение общей неспецифической резистентности организма и локального иммунитета вымени. Об этом свидетельствуют более низкие показатели у больных маститом, в сравнении со здоровыми коровами: бактерицидности крови - на 2,9 - 12,2 %, фагоцитарной активности лейкоцитов крови - на 6,1 - 19,3 %, лизоцимной активности молока - на 50,6 - 100%, фагоцитарной активности лейкоцитов молока - на 10,4 - 32,4% (Р<0,05). Соответственно, у больных коров, в сравнении со здоровыми, отмечены менее низкие показатели содержания в крови гемоглобина и эритроцитов, но возрастание количества лейкоцитов.

При изучении факторов, обусловливающих снижение показателей естественной резистентности организма и локального иммунитета вымени у коров, способствующих возникновению мастита, мы установили, что к их числу относятся: возрастной фактор (преклонный возраст), высокий уровень молочной продуктивности, сезонные изменения условий кормления и климата (максимальная заболеваемость коров маститом наблюдается в феврале-апреле, минимальная - в сентябре-октябре).

Констатируя отрицательное влияние фенотипических факторов на уровень общей резистентности организма и локального иммунитета вымени, и, следовательно, на предрасположенность коров к маститу, мы не исключаем существенное значение генетических факторов.

Отмечено, что при развитии мастита во время послеродового периода срок от отела до оплодотворения увеличивается с 35 - 45 до 50 - 70 дней, при этом в сыворотке крови обнаруживается возрастание титра спермиоагг-лютининов с 1:32 — 128 до 1:256 - 1024.

С учетом изложенного можно сделать следующее заключение. Во-первых, наряду с общеизвестными рекомендованными мероприятиями по профилактике мастита у коров, по нашему мнению, существенное значение имеют: а) изоляция больных маститом коров с дезинфекцией стойл; б) опти-

мизация условий кормления и содержания коров в зимне-ранневесений период, недопущение избыточной инсоляции, перегревания их летом; в) повышение профессионального мастерства малоопытных операторов машинного доения, так как именно они чаще допускают погрешности в технологии и режиме запуска и доения; г) усовершенствование селекционно-племенной работы в молочном скотоводстве с исключением из воспроизводительного цикла коров, предрасположенных к маститу. Во-вторых, в связи с многогранностью этиопатогенеза мастита у коров лечение последних должно быть комплексным (этиотропно-патогенетическим и симптоматическим). Поэтому вполне оправдана разработка противомаститных препаратов комплексного лечебного действия. Причем, так как внутрицистернальное введение лечебных средств вызывает дополнительное раздражение тканей вымени, можно согласиться с мнением А.И. Ивашуры (1991) о преимуществах накожного применения противомаститных препаратов, приготовленных на соответствующей основе.

С учетом значительного распространения в природе микробов, устойчивых ко многим широко используемым антимикробным веществам, желательно, чтобы противомаститные препараты не содержали антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны.

3.3. Разработка нового противомаститного препарата, изучение его физико-химических свойств и стабильности.

Приняв во внимание упомянутые выше предпосылки, мы приступили к синтезированию нового противомаститного препарата для накожных аппликаций, обладающего комплексным лечебным действием. В результате серии поисковых исследований был разработан новый комплексный фито-химиотерапевтический противомаститный препарат уберцид, включающий в определенных пропорциях 2 антимикробных вещества, анестетик, иммуностимулятор, вытяжки двух лекарственных растений, комбинированную основу.

Готовая лекарственная форма препарата - мазь темно-серого цвета с зеленоватым оттенком и со специфическим запахом. Температура плавления 40 - 42°С, рН = 5,0; удельная масса в расплавленном состоянии - 0,975 -1,008. Специфичность препарата по содержанию основных активно действующих веществ (АДВ) подтверждена соответствующим химическим анализом.

Стабильность препарата определяли согласно «Временной инструкции по проведению работ с целью установления сроков годности лекарственных средств на основе метода ускоренного старения» (ТУ 42-2-82 Минздрав и Медпром СССР) при разных режимах хранения: на свету и в темноте, температурах в пределах 0-5, 10-20 и 22-30°С. При эгом установили, что препа-

рат уберцид в полной мере сохраняет свои первоначальные свойства в течение не менее 1 года, если он хранится без доступа света (в темноте, посуде из темного стекла) и температурном режиме в пределах 0-20°С.

3.4. Экспериментальная (фармако-токсикологическая) оценка нового противомаститного препарата уберцид.

Экспериментальная оценка противомаститного препарата уберцид включала изучение его специфичности действия и безвредности.

3.4.1. Материалы исследований по определению специфической активности препарата уберцид.

Предполагая создание препарата комплексного лечебного действия его экспериментальная оценка включала изучение ряда показателей.

Антимикробная активность. Ее определяли по отношению к стрептококкам (5 шт.), стафилококкам (8 шт.), кишечной палочке (3 шт.), протею (3 шт.), синегнойной палочке (3 шт.), грибам из рода Кандида (4 шт.), аспер-гиллам (3 шт.), выделенным от коров, больных маститом.

Методом диффузии препарата в агар установлено следующее. Использованные в качестве тест-микробов бактерии проявили достаточно хорошую чувствительность к препарату уберцид: зона задержки роста микробов варьировала в пределах 20 - 25 мм. Грибы из рода Кандида оказались высокочувствительными к препарату: ЗЗР микробов достигала 26 мм; грибы аспергиллы проявили сравнительно слабую чувствительность к Уберциду: ЗЗР - немногим больше 15 мм.

Методом серийных разведений препарата выявлены следующие показатели. Бактериостатическое действие препарата уберцид проявляется при его разведении в пределах от 1:1024 до 1:256, т.е. МБсК = 0,5 - 2,0 мг/мл, а бактерицидное действие - в разведении от 1:512 до 1:128, т.е. МБцК =1,0-4 мг/мл. Фунгистатическое действие препарат проявляет в разведении от 1:2048 до 1:128, т.е. МФсК = 0,25 - 4,0 мг/мл, а фунгицидное - в разведении от 1:512 до 1:32, т.е. МФцК =1,0-15,6 мг/мл.

В зависимости от концентрации препарата его бактерицидное действие проявляется при экспозиции 0-60 мин, а фунгицидное - 15 - 90 мин. Характерным является то, что после 25 пассажей бактерий и грибов на средах, содержащих суббактериостатическую и субфунгистатическую концентрацию препарата их первоначальная чувствительность не изменилась.

Следовательно, препарат уберцид проявляет достаточно выраженную антимикробную активность по отношению к основным возбудителям мастита, лекарственная устойчивость к нему у микробов, по нашим наблюдениям, не формируется.

Противовоспалительное действие препарата изучали в опытах на лабораторных животных (кроликах, морских свинках), разделенных в опытные и контрольные группы, у которых, согласно имеющимся рекомендациям, путем воздействия химических агентов (ксилола, раствора кальция хлорида) или термического фактора (высокой температуры) вызывали воспаление кожи и подкожной клетчатки. На пораженные участки у животных опытных групп наносили уберцид, а контрольных групп - мастисан-А или оставляли их без лечения. При последующем наблюдении было установлено следующее. Если у животных контрольных групп развивался воспалительный процесс разной степени тяжести, то у животных опытных групп удавалось предотвратить развитие воспалительного процесса или воспалительная реакция проявлялась сравнительно умеренно и довольно быстро исчезала. Это позволяет констатировать выраженное противовоспалительное влияние уберцида.

Влияние уберцида на регенеративные процессы изучали в сравнительном аспекте на модели экспериментально воспроизведенных инфицированных кожно-мышечных ран у белых крыс. На поврежденный участок животных опытной группы наносили препарат уберцид, у животных двух контрольных групп на раневую поверхность наносили основу указанного препарата или лечение не проводили. В процессе последующего наблюдения установлено, что под влиянием уберцида заживление экспериментальных ран произошло на 6 - 9 дней раньше, чем у животных контрольных групп. Благоприятное влияние уберцида на течение регенеративных процессов подтверждено анализом результатов микроскопии окрашенных мазков-отпечатков раневой поверхности.

Антипарабиотическое действие уберцида и его влияние на защитные свойства вымени. По нашим наблюдениям, накожные аппликации Уберцида в оптимальных дозах в области воспаленных четвертей вымени обусловливают заметное ослабление и исчезновение болевой реакции, что, несомненно, ведет к снятию парабиотического состояния нервных компонентов молочной железы и нормализации в ней трофических процессов. Следствием этого является активизация защитных свойств органа. Свидетельством активизирующего влияния нового противомаститного препарата на уровень локального иммунитета вымени у коров является возрастание лизоцимной активности молока - на 12,7 - 78%, фагоцитарной активности лейкоцитов молока - на 5,6 - 84,8% (Р<0,01).

Фармакодинамика и фармакокинетика препарата уберцид. Как показали исследования, после проникновения препарата, благодаря его основе, с поверхности кожи в толщу тканей вымени происходит отщепление его активно действующих веществ (АДВ), каждый из которых оказывает соответственно антимикробное, противовоспалительное, обезболивающее и антипарабиотическое, стимулирующее регенеративные процессы и локальный иммунитет в вымени, действие.

В серии специальных исследований на трех группах коров установлено, что после однократной аппликации уберцида в дозах 10-15, 25-30 и 4050 г на одну долю вымени, в молоке из нее компоненты препарата обнаруживаются в течение 24-48 ч, достигая максимума к 6-му часу после применения. В частности, если при дозе препарата 10 - 15 г на четверть в молоке последней в указанный срок обнаруживается в среднем 0,12 мг/мл антимикробных веществ, то при дозах 25 - 30 и 40 - 50 г - соответственно 0,38 и 0,44 мг/мл. Учтя, что в переводе на содержащиеся в препарате антимикробные веществ их МБцК в среднем равна 0,07 мг/мл, а МФцК - 0,24 мг/мл, дозы 25-50 г на четверть вымени следует считать оптимальными. К 12 -24-му часу после нанесения препарата количество АДВ снижается, но все же их содержание в вымени сохраняется на достаточном уровне. В связи с этим повторные ап-пликациии уберцида следует повторять через 12 - 24 ч. Спустя 48 ч в молоке могут содержаться лишь следы безвредных АДВ, поэтому его можно использовать для выпаивания телятам; для пищевых целей молоко целесообразно использовать по истечении 72 ч. Во все сроки исследований в крови АДВ препарата не обнаруживались.

3.4.2. Материалы исследований по определению безвредности препарата уберцид.

Определение раздражающего и аллергизирующего действия препарата уберцид. По нашим наблюдениям, препарат уберцид проявляет сравнительно слабое кратковременное (от 2 - 3 до 6 - 12 ч) местное раздражающее действие. После нанесения препарата на конъюнктиву глаза кроликов отмечается ее легкая гиперемия (покраснение) и незначительная отечность. Спустя указанные сроки эти явления исчезают без отрицательных последствий. После накожной аппликации препарата в области четверти молочной железы коров в молоке этой доли на 18% возрастает количество соматических клеток (лейкоцитов), которое в последующем возвращается к исходному уровню.

У группы белых крыс-самцов после 7-дневных накожных аппликаций уберцида, призванных вызвать сенсибилизацию организма, разрешающее нанесение на кожу того же препарата спустя 14 дней не вызывало развитие воспалительной реакции ни у одного животного. Это позволяет исключить аллергизирующее действие уберцида.

Определение острой и хронической токсичности препарата уберцид. Исследование острой токсичности препарата уберцид осуществляли в двух сериях опытов на белых мышах и крысах, которых разделяли в равные опытные и контрольные (интактные) группы.

В первой серии опыта животным опытной группы перорально однократно вводили в возможно максимальной дозе (10 г/кг массы) расплавленный препарат. При последующем наблюдении в первые 3 - 12 ч у части жи-

вотных этой группы обнаруживали слабо выраженное угнетение, разжижение фекалий, гибели животных не было. По истечении двух недель подопытных животных убивали декапитацией, на вскрытии патологоморфологиче-ских изменений во внутренних органах не выявили.

Во второй серии опытов животным 6 опытных групп однократно подкожно инъецировали расплавленный уберцид в дозах соответственно 5, 10, 15, 20, 25 и 30 г/кг массы. При последующих наблюдениях обращали внимание на общее состояние подопытных животных, учитывали их гибель. В результате проведенных исследований была установлена ЛД5о препарата -22,2 г/кг массы животного, которая в 44,4 выше максимальной терапевтической дозы уберцида.

Исследования хронической токсичности препарата Уберцид проведены в 3 сериях опытов с использованием белых мышей и крыс, а также коров и телят.

В двух сериях опытов с пероральным (самкам и самцам лабораторных животных) или накожным (самкам лабораторных животных) применением препарата уберцид начиная за 10 -15 дней до спаривания и заканчивая после отсаживания приплода установили, что у самок как опытных, так и контрольных .(интактных) групп обнаруживались одинаковые показатели оплодотворяемости, многоплодия, функциональной активности яичников, внутриутробного и постнатального развития приплода, рождения мертвых плодов; ни в одном случае уродов, с аномалиями мышат и крысят не выявлено. Полученные данные позволяют исключить гонадо- и эмбриотоксическое, а также тератогенное действие препарата уберцид. После выращивания и спаривания полученного приплода, в том числе с применением родственного разведения получено нормальное потомство, что свидетельствует об отсутствии мутагенного влияния препарата.

В третьей серии опытов 3-м здоровым лактирующим коровам опытной группы в течение месяца на кожу вымени ежедневно наносили с легким втиранием по 120 - 180 г препарата уберцид. Три интактные коровы составляли контрольную группу. В опытный период молоко от коров обеих групп использовали для выпаивания телятам. Наряду с этим изучали влияние накожных аппликаций уберцида на организм коров с катаральным маститом. В процессе последующих наблюдений установлено отсутствие неблагоприятного влияния препарата уберцид на общее состояние, нервную, сердечнососудистую системы, гематологический, биохимический, иммунобиологический статус, функцию печени и почек.

У больных маститом коров под влиянием препарата уберцид улучшалось общее состояние, исчезали признаки воспаления вымени с восстановлением его лактационной функции, происходила нормализация гематологического, биохимического, иммунобиологического статуса у леченых животных.

Выпаивание молока от коров в период применения у них препарата уберцид телятам, а также лабораторным животным не вызывало у последних неблагоприятных последствий.

Все изложенное позволяет сделать заключение о том, что препарат уберцид можно отнести к лечебным средствам с весьма слабыми токсическими свойствами.

3.5. Клиническая оценка терапевтической эффективности препарата уберцид, применяемого путем накожных аппликаций, при мастите у коров.

Исследования по определению в сравнительном аспекте терапевтической эффективности препарата уберцид, применяемого путем накожных аппликаций в дозах 20 - 50 г (в зависимости от массы вымени) на каждую пораженную четверть вымени, при мастите у коров осуществили в 3-х сериях научно-производственных опытов.

В первой серии опытов,'проведенной в ЗАО «Искра» Тимашевского района , изучалась эффективность уберцида в сравнении с противомастит-ным препаратом мастисан-Е при скрытом (субклиническом) воспалении вымени у 40-ка лактирующих коров. Коровам контрольной группы мастисан-Е вводили в пораженные доли внутрицистернально ежедневно после вечернего доения в дозе 10 мл. Коровам опытной группы уберцид применяли путем его накожных аппликаций с легким втиранием ежедневно после вечернего доения.

Таблица 1

Терапевтическая эффективность уберцида и мастисана-Е __при скрытом мастите у коров. _

Под- « а о 4 ч о ч Излечено Суточный удой

вергнуто лечению Срок

Группы коров к-во коров к-во долей вымени « С- § I 3 ж и§ к-во коров, % к-во долей вымени, % молока после лечения, (кг) выздоровления, дни

1 -я контрольная (мастисан-Е в/цистернально) 20 34 7,4± 0,3 16 (80,0) 29 (85,3) 9,3 ±0,2 6,5 (5-9)

2-я опытная (уберцид на-кожно) 20 34 7,9± 0,4 19 (95,0) 32 (94,1) 10,4+0, 5 3,8 (3-6)

Р <0,05 <0,05 ¿0,05

Как явствует из материалов таблицы 1, в опытной группе в сравнении с контрольной, излечено на 15% больше коров (на 8,8% больше четвертей вымени), при более коротком (в среднем на 2,7 дня) сроке выздоровления. Причем, если у коров контрольной группы после выздоровления суточный удой с восстановлением качества молока возрос на 25,6 %, то в опытной соответственно на 31,6 %, т.е. на 6 % больше.

Производственные испытания препарата уберцид в агрофирме «Россия» и племзаводе им. В.И. Чапаева Динского района подтвердили его высокую терапевтическую эффективность при скрытом мастите у коров: она составила 85,7% и 100% соответственно, в то время как при применении масти-сана-А или мастисана-Е внутрицистернально этот показатель оказался в пределах 64,3 - 80,0%.

Во второй серии опытов, проведенной в ЗАО «Искра», выясняли терапевтическую эффективность накожных аппликаций уберцида в сравнении с внутрицистернальными введениями мастисана-Е при клинически выраженных формах мастита (серозном, серозно-катаральном, катаральном, фибринозном, геморрагическом, гнойно-катаральном) с острым течением у лакти-рующих 45 больных коров.

У коров контрольной группы лечение осуществляли путем ежедневных (после утреннего и вечернего доения) внутрицистернальных введений в пораженные доли по 10 мл мастисана Е в сочетании с новокаиновой блокадой нервов вымени по Д.Д. Логвинову, добавляя к раствору новокаина в тяжелых случаях заболевания пенициллин и стрептомицин в рекомендуемых лечебных дозах, также применяли окситоцин. У коров двух опытных групп осуществляли ежедневно, после утреннего и вечернего доения, накожные аппликации уберцида, которые у одной из групп сочетали с новокаиновой блокадой нервов вымени по Д.Д. Логвинову. Во всех случаях больных животных переводили на ручное доение, ограничивали водопой и дачу молокогонных кормов, при серозном, катаральном мастите применяли массаж вымени.

Судя по материалам таблицы 2, терапевтическая эффективность накожных аппликаций уберцида, в сравнении с внутрицистернальными введениями мастисана-Е, на 13,3-20% выше при более коротком (в среднем на 2,5 -3 дня) сроке выздоровления с восстановлением молочной продуктивности и качества молока.

При производственных испытаниях уберцида, используемого для накожных аппликаций у коров с клинически выраженными формами мастита в ТОЗ «Родина» Усть - Лабинского и племзаводе им. В.И. Чапаева Динского районов, его терапевтическая эффективность оказалась в пределах 80-100%, в то время как при применении мастисанов в сочетании с новокаиновой блокадой нервов вымени она не превышала 60 - 70%.

Таблица 2

Терапевтическая эффективность уберцида и мастисана-Е при клинически выраженных формах мастита у коров.

Группы коров Подвергнуто лечению Излечено Срок выздоровления, дни Суточный удой молока, кг

Коров, % четвертей вымени, % до лечения после лечения

<а О о. о * четвертей вымени

1-я - контрольная (мастисан-Е в/ц + новокаиновая блокада) 15 23 10 (66,7) 16 (70,0) 7,5 (6-9) 5,8+0,3 6,9±0,4

2-я - опытная (уберцид накож-но) 15 24 12 (80,0) 21 (87,5) 5 (4-6) 6,1 ±0,5 8,0±0,2

3-я - опытная (уберцид накож-но + новокаиновая блокада) 15 24 13 (86,7) 22 (91,2) 4,5 (4-5) 6,2+0,4 8,4+0,3

Р <0,01 <0,05 ¿0,05

В третьей серии опытов на животных опытной группы, в конце запуска у которых выявлены признаки скрытого или клинически выраженного мастита изучали эффективность санации вымени путем накожньгх аппликаций уберцида (ежедневно в течение 5 дней по 30 - 45 г) во время сухостоя с целью фармакопрофилактики мастита у коров в послеродовом периоде. Одной из двух контрольных групп для санации вымени ежедневно в течение 7 суток внутрицистернально вводили по 10 мл мастисана-Е. Во второй контрольной группе лечение коров не проводили.

Как показали наблюдения, результаты которых отражены в таблице 3, санация вымени во время сухостоя путем накожных аппликаций уберцида позволяет у большинства коров (в 88,0% случаев) предупредить проявление мастита у этих животных в послеродовом периоде, что на 82,0% больше, чем без санации вымени (Р<0,01). Причем, эффективность фармакопрофилактики мастита после родов путем накожных аппликаций уберцида у сухостойных коров на 19% (Р<0,05) выше, чем при использовании для этой цели внутри-цистернальных введений мастисана-Е.

Таблица 3

Эффективность санации вымени коров во время сухостоя

Группы коров Кол-во коров (пораженных четвертей вымени) Количество коров и четвертей выме ками мастита в послеродовом пе ни с призна-риоде. % Кол-во коров без признаков мастита в ПРП, %

всего животных в том числе пораженных четвертей вымени

скрытым маститом клинически выраженным маститом

1-я контрольная (без лечения) 16 (22) 15 (94%) 5 (31%) 10 (63%) 20 (91%) 1 (6%)

2-я контрольная (мастисан-Е) 16(26) 5 (31%) 2 (13%) 3 (18%) 8(31%) 11 (69%)

3-я опытная (уберцвд) 16(28) 2 (12%) 1 (6%) 1 (6%) 3(11%) 14 (88%)

Окупаемость лечебных мероприятий с использованием накожных аппликаций противомаститного препарата уберцвд 1:8 - 12 руб.

4. ВЫВОДЫ

1. В стадах коров хозяйств Краснодарского края выявлена тенденция роста удельного веса мастита с 9 - 13% в 1983 - 1990 гг до 19 - 23% в 1993 -2000 гг (при соотношении клинически выраженного и субклинического воспаления вымени 1:3 - 7), что, в значительной мере связано с внедрением в молочное скотоводство индустриальной технологии и круглогодового стойлового содержания животных, а также ослаблением профилактических мероприятий. Значительное распространение мастита обусловило ощутимый экономический ущерб за счет недополучения большого количества молока на почве снижения на 11 - 25% молочной продуктивности за лактацию у переболевших коров, ухудшения его качества и технологических свойств, а также вследствие роста заболеваемости новорожденных телят и преждевременной выбраковки животных с необратимыми структурными изменениями в вымени, потерявших племенную ценность.

2. В условиях Кубани возникновение мастита в лактационный период отмечено у 79%, во время сухостоя - у 21% коров вследствие нарушений технологии и режима их запуска, антисанитарных условий содержания и не

соблюдения правил гигиены доения, с поражением 1 - 2 (преимущественно задних) четвертей вымени у 83% и 3 - 4 четвертей - у 17% животных. Обнаружено следующее соотношение клинически выраженных форм мастита у коров: серозный - 19,8%, серозно-катаральный - 27,1%, катаральный -20,6%, фибринозный - 13,7%, гнойный (гнойно-катаральный) - 6,4%, геморрагический -12,4% случаев.

3. Непосредственными причинами мастита у коров являются раздражения, механические микро- и макротравмы, а также экзо- или эндогенное (галактогенное, лимфогенное, гематогенное) инфицирование тканей вымени условно патогенной микрофлорой (стрепто- и стафилококками, кишечной палочкой, синегнойной палочкой, протеем, грибами и другими возбудителями в различных ассоциациях); в 96% случаев мастит у коров имеет инфекционный характер; 73% выделенных микробных культур отличаются лекарственной устойчивостью ко многим антибиотикам, сульфаниламидам и нитро-фурановым препаратам.

Способствующей причиной возникновения мастита у коров является снижение неспецифической резистентности организма и локального иммунитета вымени, обусловленное,, в значительной мере такими фенотипическими факторами, как преклонный возраст (свыше 8 лет), высокая молочная продуктивность (более 4000 кг молока за лактацию), неблагоприятные алиментарно-климатические влияния в зимне-ранневесенний период и в разгар лета.

Возникновение и характер проявления мастита у коров варьируют в зависимости как от силы и продолжительности воздействия этиологических факторов, так и от уровня иммунобиологической реактивности организма.

4. По данным клинико-морфологических исследований, основными компонентами патогенеза мастита у коров являются нарушения гемодинамики с явлениями экссудации и эмиграции форменных элементов крови, болевая реакция с парабиозом нервных элементов, ухудшение трофических процессов с деструктивными изменениями в тканях вымени и дисфункцией органа. Многогранность этиопатогенеза мастита определяет необходимость комплексности лечения больных коров при этом заболевании.

5. С учетом особенности этиопатогенеза неспецифического воспаления вымени у коров и целесообразности предотвращения дополнительного раздражения тканей молочной железы, разработан новый противомаститный химио-терапевтический препарат в форме мази для накожных аппликаций, не содержащий антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны - уберцид, срок годности которого при хранении без доступа света и оптимальном температурном режиме (от 0 до +20 С) не менее 1 года.

6. Благодаря содержанию двух антимикробных веществ, анестетика, иммуностимулятора, вытяжек двух лекарственных растений, препарат уберцид проявляет комплексное этиотропно-патогенетическое действие: бакте-рио- и фунгицидное, противовоспалительное, обезболивающее и антипара-

биотическое, стимулирующее регенеративные процессы и локальный иммунитет вымени, а также выделение секрета из его альвеол и выводных протоков.

Препарат уберцид оказывает слабое кратковременное местное раздражающее влияние, не обладает аллергизирующим свойством, малотоксичен - его ЛД50 в 55 раз больше максимальной терапевтической дозы; при длительном накожном применении в лечебных дозах не оказывает общее токсическое, гонадо- и эмбриотоксическое, тератогенное и мутагенное действие. У возбудителей мастита не отмечено формирование лекарственной устойчивости к препарату.

7. При накожных аппликациях препарата уберцид в зоне поражения вымени (25 - 50 г на каждую четверть) благодаря комбинированной основе активно действующие вещества проникают в толщу тканей молочной железы, максимальная концентрация которых обеспечивается в течение 12 часов с последующим снижением их в достаточных пределах к 24-му часу. Спустя 48 часов после применения препарата в молоке обнаруживаются лишь следы АДВ, а к 72-му часу они в вымени отсутствуют.

8. Терапевтическая эффективность препарата уберцид, применяемого путем его накожных аппликаций:

а) при скрытом (субклиническом) мастите у коров вырьирует в пределах 86-100%, что на 15 - 20% выше, чем после внутрицистернальных введений традиционных противомаститных препаратов, и с более коротким (на 2-3 дня) сроком выздоровления;

б) при клинически выраженных формах неспецифического мастита (серозном, серозно-катаральном, катаральном, гнойно-катаральном, фибринозном, геморрагическом) она ниже 80%, но на 13 - 30% выше, чем после внутрицистернальных введений ранее предложенных противомаститных средств (мастисан-А и Е) с более коротким (на 1 - 4 дня) сроке выздоровления. Улучшение клинического состояния леченных уберцидом больных маститом коров сопровождается нормализацией гематологического и иммунобиологического статуса ко времени выздоровления.

9. Применение препарата уберцид путем накожных аппликаций при мастите у сухостойных коров позволяет в 88% случаев предупредить воспаление вымени в послеродовом периоде, что на 19% больше, чем после применения для санации вымени внутрицистернальных введений мастисана-Е.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. При неспецифическом воспалении вымени у коров с лечебной целью осуществлять ежедневные накожные аппликации препарата уберцид по 25 - 50г на каждую пораженную четверть в зависимости от ее размера с интервалами 12 часов при клинически выраженном и 24 часа - скрытом масти-

те. Использование уберцида не исключает применение других лечебных приемов (ограничение дачи воды, молокогонных кормов, массажа, тепловых процедур, новокаиновой блокады и других, в зависимости от необходимости). Через 48 часов после завершения курса лечения молоко от выздоровевших коров можно использовать для кормления телят, а спустя 72 часа - для пищевых целей людям.

2. У коров с признаками неспецифического мастита после запуска проводить фармакопрофилактику воспаления вымени в послеродовом периоде путем ежедневных аппликаций препарата уберцид (25 - 50 г) в зоне поражения один раз в сутки в течение 5 дней сухостойного периода.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Трошин А.Н., Кулакова А.Л., Королев А.М., Ильинский Е.В. Этиопа-тогенез мастита у коров и клиническая оценка новых противомаститных препаратов и лечебных приемов // Профилактика и лечение болезней с.-х. животных. Труды КГАУ, Краснодар, 1999, с. 48-53.

2. Трошин А.Н., Ильинский Е.В. Усовершенствование лечения при мастите у коров. // Материалы Международной конференции, посвященной 30-летию ВНИВИПФиТ. Воронеж, 2000, с. 322 - 323.

3. Трошин А.Н., Сердюк О.В., Пушенко Е.А. Результаты экспериментально-клинической оценки нового противомаститного препарата // Труды КГАУ. Научные достижения молодежи Кубани. Краснодар, 2001, с 39 - 40.

4. Трошин А.Н. Терапевтическая и экономическая эффективность нового противомаститного препарата // Материалы научно-практической конференции, посвященной 55-летию Краснодарской НИВС. Краснодар, 2001, с.

127 - 128.

5. Трошин А.Н. Фитохимиопрофилактика в системе оздоровительных мероприятий при мастите коров // Материалы научно-практической конференции, посвященной 55-летию Краснодарской НИВС. Краснодар, 2001, с.

128 - 129.

6. Трошин А.Н. Изучение раздражающего действия нового противомаститного препарата уберцид // Материалы Международной научно-практической конференции. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. Воронеж, 2002, с. 669 - 670.

7. Трошин А.Н. Лечебно-профилактические свойства противомаститного препарата уберцид // Материалы Международной научно-практической конференции. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. Воронеж, 2002, с. 670 - 671.

Лицензия ИД 02334 14.07.2000.

Подписано в печать 27.0U.2003 г. Формат 60 х 84

Бумага офсетная Офсетная печать

Печл. 1 Заказ №42 Тираж 100

Отпечатано в типографии КубГАУ, 350044, Краснодар, Калинина, 13

i

4

«

*

«

»

i i

!

! f

/

I

V

{

¡

! !

(

F

It »

\ 99 1 S

1.1. Актуальность темы.

Развитие животноводства в значительной мере сдерживается возникновением различных болезней сельскохозяйственных животных, в числе которых значительный удельный вес имеют маститы у коров. Распространение в стадах коров воспаления вымени является существенным тормозом увеличения производства молока и молочных продуктов, снижающим рентабельность молочного скотоводства, обусловливающим ощутимый экономический ущерб хозяйствам.

У животных, больных маститами, снижаются удои, а после переболе-вания некоторые из них вообще утрачивают способность продуцировать молоко вследствие атрофии одной или нескольких долей вымени.

Причиняемый этой болезнью экономический ущерб слагается из прямых и косвенных убытков. Основными из них являются: снижение молочной продуктивности, увеличение качества молока и молочных продуктов, увеличение количества бесплодных коров и расходы на организацию, и проведение противомаститных мероприятий.

Наибольшую эпидемиологическую опасность представляет субклинический мастит, встречающийся в несколько раз чаще, чем клинически выраженный. Диагностические исследования коров на субклинический мастит в хозяйствах, как правило, не проводятся, и поэтому молоко от больных животных попадает в общее молоко. Такое молоко теряет питательные и технологические свойства.

Особую опасность представляют содержащиеся в молоке возбудители мастита - различные микроорганизмы и их токсины, которые могут явиться причиной расстройства желудочно-кишечного тракта, токсикоинфекций и других заболеваний, как у животных, так и у людей.

Другая проблема, связанная с маститом, - наличие ингибирующих веществ в молоке во время и после лечения больных животных. Основная доля из этих веществ приходится на антибиотики, сульфаниламиды и нитрофура-ны, которые содержатся в комплексных противомаститных препаратах и широко применяются в ветеринарной практике. Их наличие в молоке приводит к развитию у потребителей аллергии, анафилаксии, отравлений, а в молочной промышленности - к нарушению технологических процессов при производстве молочнокислых продуктов и сыров.

Для получения экологически чистого молока необходимо проводить комплексные мероприятия по недопущению заболевания коров маститами и рациональному лечению больных животных экологически чистыми препаратами.

Несмотря на значительное число применяемых в настоящее время лечебно-профилактических средств, они из-за многих отрицательных свойств в полной мере не удовлетворяют запросы практической ветеринарии. Поэтому разработка высокоэффективных, дешевых и технологичных в применении лекарственных средств, предназначенных для лечения и профилактики воспаления вымени, является одной из важнейших задач ветеринарной науки и практики.

В связи с изложенным несомненный интерес представляет предложенный сотрудниками кафедры ветеринарного акушерства и хирургии КГАУ (Е.В.Ильинским, А.Н.Трошиным, М.Р.Киракосян) новый противомаститный фито-химиотерапевтический препарат для накожных аппликаций - уберцид, не содержащий антибиотики, сульфаниламиды, вещества фуранового ряда. Возникла необходимость его комплексной оценки.

1.2. Цель и задачи исследований. Основная цель настоящего исследования состоит в том, чтобы на основе дополнительного изучения этиопато-генеза воспаления молочной железы у коров, усовершенствовать лечебнопрофилактические мероприятия для повышения их эффективности при мастите.

Приняв во внимание состояние изученности проблемы борьбы с маститами коров, к решению были поставлены следующие основные задачи:

1. изучить в динамике распространение субклинического (скрытого) и клинически выраженного мастита у коров в хозяйствах Краснодарского края, определить наносимые им убытки;

2. уточнить особенности этиологии и некоторые аспекты патогенеза мастита у коров в общественном животноводстве Кубани, а также основные направления профилактики этого заболевания;

3. разработать новый эффективный, экологически безвредный фито-химиотерапевтический противомаститный препарат, не содержащий антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны, для его применения путём накожных аппликаций;

4. дать экспериментальную оценку лечебного действия и безвредности разработанного нового противомаститного препарата, определить рациональную схему его применения;

5. в сравнительном аспекте установить терапевтическую эффективность применения нового противомаститного препарата при скрытом и клинически выраженном воспалении вымени у коров.

Исследования выполнены в соответствии с планом научно-исследовательских работ Кубанского госагроуниверситета по заданию 31.10. (№ госрегистрации 01910049842.)

1.3. Научная новизна. При проведении научных исследований выяснена степень распространения мастита в стадах коров хозяйств Краснодарского края с учётом его экологических условий региона и особенностей технологии ведения молочного скотоводства в регионе. Установлены непосредственные, способствующие и предраспологающие этиологические факторы мастита у коров, что позволило определить основные направления профилактических мероприятий. Уточнена роль условно патогенной микрофлоры, общей неспецифической резистентнности организма и локального иммунитета вымени в этиопатогенезе и проявлении неспецифического воспаления молочной железы. Полученные данные послужили теоретической основой усовершенствования лечебных мероприятий при этом заболевании. Разработан новый фито-химиотерапевтический противомаститный препарат убер-цид для накожных аппликаций, впервые дана ему соответствующая экспериментальная и клиническая оценка.

В Госкомизобретений РФ подана заявка-на предполагаемое изобретение в форме нового лекарственного средства, получено положительное решение.

1.4. Практическая значимость работы.

Результаты проведенных исследований по уточнению этиопатогенеза мастита у коров послужили предпосылкой усовершенствования лечебных и профилактических мероприятий при этом заболевании. Предложен новый эффективный фито-химиотерапевтический противомаститный препарат комплексного терапевтического действия, который при его накожных аппликациях обеспечивает сравнительно высокую результативность лечебной работы при скрытом (субклиническом) и клинически выраженных формах мастита у коров. Применение препарата для санации вымени во время сухостоя в значительной мере способствует профилактированию воспаления молочной железы в послеродовом периоде.

1.5. Апробация работы и реализация результатов исследований. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на научных конференциях факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета (1998, 1999,2000, 2001 гг.), Международной научно-производственной и учебно-методической конференции, посвященной 30-летию образования кафедры акушерства Ставропольской госсельхозакадемии (1998), Международной конференции, посвященно 30-летию В НИ

ВИПФиТ (Воронеж, 2000г), Международной научной конференции, посвященной 55-летию Краснодарской НИВС (Краснодар, 2001 г), научно-производственных семинарах-совещаниях ветеринарных специалистов 3-х районов Краснодарского края (1999,2000,2001 гг.).

Практические рекомендации внедрены в ветеринарную практику 5-и хозяйств Кубани. Материалы диссертации используются в учебном процессе на факультетах зооинженерном и ветеринарной медицины Кубанского аграрного университета.

1.6. Публикации. Основные результаты-исследований, включённые в диссертацию, опубликованы в 7 научных работах.

На защиту выносятся следующие основные положения диссертации:

- результаты уточнения некоторых аспектов этиопатогенеза мастита коров в условиях Краснодарского края, послужившие основой усовершенствования профилактических мероприятий и разработки нового противомас-титного препарата;

- материалы разработки нового противомаститного препарата уберци-да для накожных аппликаций и его экспериментально-клинической оценки при воспалении вымени у коров.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

5. ВЫВОДЫ

1. В стадах коров хозяйств Краснодарского края выявлена тенденция ция роста удельного веса мастита с 9-13 % в 1983-1990гг до 19-23 % в 1993 -2000гг (при соотношении клинически выраженного и субклинического воспаления вымени 1:3-7), что в значительной мере связано с внедрением в молочное скотоводство индустриальной технологии и круглогодового стойлового содержания животных, а также ослаблением профилактических мероприятий. Значительное распространение мастита обусловило ощутимый экономический ущерб за счет недополучения большого количества молока на почве снижения на 11-25% молочной продуктивности за лактацию у переболевших коров, ухудшения его качества и технологических свойств, а также вследствие роста заболеваемости новорожденных телят и преждевременной выбраковки животных с необратимыми структурными изменениями в вымени, потерявших племенную ценность.

2. В условиях Кубани возникновение мастита в лактационный период отмечено у 79%, во время сухостоя - у 21% коров вследствие нарушений технологии и режима их запуска, антисанитарных условий содержания и несоблюдения правил гигиены доения, с поражением 1 - 2 (преимущественно задних) четвертей вымени у 83% и 3- 4 четвертей - у 17% животных. Обнаружено следующее соотношение клинически выраженных форм мастита у коров: серозный — 19,8%, серозно-катаральный - 27,1%, катаральный -20,6%, фибринозный - 13,7%, гнойный (гнойно-катаральный) — 6,4%, геморрагический - 12,4% случаев.

3. Непосредственными причинами мастита у коров являются раздражения, механические микро-и макротравмы, а также экзо-или эндогенные (галактогенное, лимфогенное, гематогенное) инфицирование тканей вымени условно патогенной микрофлорой (стрепто-и стафилококками, кишечной палочкой, синегнойной палочкой, протеем, грибами и другими микроорганизмами в различных ассоциациях); в 96% случаев мастит у коров имеет инфекционный характер; 73% выделенных микробных культур отличаются лекарственной устойчивостью ко многим антибиотикам, сульфаниламидам и нит-рофурановым препаратам.

Способствующей причиной возникновению мастита у коров является снижение неспецифической резистентности организма и локального иммунитета вымени, обусловленное в значительной мере такими фенотипиче-скими факторами, как преклонный возраст (свыше 8 лет), высокая молочная продуктивность (более 4000кг молока за лактацию), неблагоприятные алиментарно-климатические влияния в зимне-ранневесенний период и в разгар лета.

Возникновенеие и характер проявления мастита у коров варьируют в зависимости как от силы и продолжительности воздействия этиологических факторов, так и от уровня иммунобиологической реактивности организма.

4.По данным клинико-морфологических исследований, основными компонентами патогенеза мастита у коров являются нарушения гемодинамики с явлениями экссудации и эмиграции форменных элементов крови, болевая реакция с парабиозом нервных элементов, ухудшение трофических процессов с деструктивными изменениями в тканях вымени и дисфункцией органа. Многогранность этиопатогенеза мастита определяет необходимость комплексности лечения больных коров при этом заболевании.

5.С учетом особенностей этиопатогенеза неспецифического воспаления вымени у крров и целесообразность предотвращения дополнительного раздражения тканей молочной железы, разработан новый противомаститный химио-терапевтический препарат в форме мази для накожных аппликаций, не содержащий антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны - «Уберцид»; срок годности которого при хранении без доступа света и оптимальном температурном режиме (от 0 до +20 С) не менее 1 года.

6.Благодаря содержанию двух антимикробных веществ, анестетика, иммуностимулятора, вытяжек двух лекарственных растений, препарат уберцид проявляет комплесное этиотропно-патогенетическое действие: бакте-рио-и фунгицидное, противовоспалительное, обезболивающее и антипаро-биотическое, стимулирующее регенеративные процессы и локальный иммунитет вымени, а также выделение секрета из его альвеол и выводных протоков.

Препарат уберцид оказывает слабое кратковременное местное раздражающее влияние, не обладает аллергизирующим свойством, малотоксичен -его ЛД50 в 55 раз больше максимальной терапевтической дозы. При длительном накожном применении в лечебных дозах-не оказывает общее токсическое, гонадо- и эмбриотоксическое, тератогенное и мутагенное действие. У возбудителей мастита не отмечено формирование лекарственной устойчивости к препарату.

7.При накожных аппликациях препарата уберцид в зоне поражения вымени (25-50г на каждую четверть) благодаря комбинированной основе активно действующие вещества проникают в толщу тканей молочной железы, максимальная концентрация которых обеспечивается в течение 12 часов с последующим снижением их в достаточных пределах к 24-му часу. Спустя 48 часов после применения препарата в молоке обнаруживаются лишь следы АДВ, а к 72-му часу они в вымени отсутствуют.

8.Терапевтическая эффективность препарата уберцид, применяемого путем его накожных аппликаций: а) при скрытом (субклиническом) мастите у коров варьирует в пределах 86-100%,что на 15-20% выше, чем после внутрицистернальных введений традиционных противомаститных препаратов, и с более коротким (на 2-Здня) сроком выздоровления; б) при клинически выраженных формах неспецифического мастита (серозном, серозно-катаральном, катаральном, гнойно-катаральном, фибринозном, геморрагическом) она ниже 80%, но на 13-30% выше, чем после внутрицистернальных введений ранее предложенных противомаститных средств (мастисан-А и Е) с более коротким (на 1-4 дня) сроке выздоровления. Улучшение клинического состояния леченных уберцидом больных маститом коров сопровождается нормализацией гематологического и иммунобиологического статуса ко времени выздоровления.

9.Применение препарата уберцид путем накожных аппликаций при мастите у сухостойных коров позволяет в 88% случаев предупредить воспаление вымени в послеродовом периоде, что на 19% больше, чем после применения для санации вымени внутрицистернальных введений мастисана-Е.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При неспецифическом воспалении вымени у коров с лечебной целью осуществлять ежедневные накожные аппликации препарата уберцид по 2550г на каждую пораженную четверть в зависимости от ее размера с интервалами 12 часов при клинически выраженном и 24ч - скрытом мастите. Использование уберцида не исключает применение других лечебных приемов (ограничение дачи воды и молокогонных кормов, массажа, тепловых процедур, новокаиновой блокады и других в зависимости от необходимости). Через 48 часов после завершения курса лечения молоко от выздоровевших коров можно использовать для кормления телят, а спустя 72 часа — для пищевых целей людям.

2. У коров с признаками неспецифического мастита после запуска проводить фармакопрофилактику воспаления вымени в послеродовом периоде путем ежедневных аппликаций препарата уберцид (25-50г) в зоне поражения один раз в сутки в течение 5 дней сухостойного периода.